CN101104610A - 4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其制备方法和医药用途 - Google Patents

4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其制备方法和医药用途 Download PDF

Info

Publication number
CN101104610A
CN101104610A CNA2006100990153A CN200610099015A CN101104610A CN 101104610 A CN101104610 A CN 101104610A CN A2006100990153 A CNA2006100990153 A CN A2006100990153A CN 200610099015 A CN200610099015 A CN 200610099015A CN 101104610 A CN101104610 A CN 101104610A
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
formula
methoxyl group
ketone
phenyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CNA2006100990153A
Other languages
English (en)
Other versions
CN100596298C (zh
Inventor
赵昱
丁红霞
吕伟
白骅
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang University ZJU
Original Assignee
Zhejiang University ZJU
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhejiang University ZJU filed Critical Zhejiang University ZJU
Priority to CN200610099015A priority Critical patent/CN100596298C/zh
Publication of CN101104610A publication Critical patent/CN101104610A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100596298C publication Critical patent/CN100596298C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种具有式(1)所示的4－脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物或者其可药用盐或溶剂化物，本发明还涉及式(1)化合物的制备方法及其药物组合物和医药用途。本发明的化合物具有较强的抑制肿瘤细胞生长活性，其中一些化合物对体外培养人体肿瘤细胞株的细胞毒活性均高于现有抗肿瘤一线用药依托泊苷，可预期作为抗肺癌、抗肝癌、抗子宫颈癌等癌症药物用途；本发明的化合物对KB细胞、PC－3细胞的细胞毒性近似或等同于依托泊苷，同时对CNE细胞也具有较强的细胞毒性，可预期作为抗口腔上皮癌、鼻咽癌、前列腺癌等抗肿瘤药物用途。

Description

4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其制备方法和医药用途
技术领域
本发明属于药物化学和药理学技术领域。具体而言，本发明涉及两个系列的4-脱氧异鬼臼毒素的衍生物和其制备方法以及针对这些衍生物对八种肿瘤细胞株如人前列腺癌细胞(PC-3)，鼻咽癌细胞(CNE)，口腔上皮癌细胞(KB)，人肺癌细胞(A549)，人肝癌细胞(BEL-7404)，人子宫颈癌细胞(Hela)，人原髓细胞白血病细胞(HL-60)和小鼠淋巴样瘤(P388D1)所进行的肿瘤细胞生长抑制活性筛选。这些衍生物被发现具有较强的抑制肿瘤细胞生长活性，可预期作为抗肿瘤药物用途。
背景技术
目前，由于工业发展带来的环境污染等问题，人类的生存环境质量不断下降，肿瘤疾病的发病率和致死率也不断上升。然而目前临床所用的细胞毒性抗肿瘤药物的选择性不高，导致对正常细胞的恶性杀伤，限制了该类药物的普遍使用性。因此，寻找和发现新的选择性高的细胞毒性抗肿瘤药物是世界范围内的研究热点。我们也致力于这类药物的研究。
鬼臼毒素(podophyllotoxion)是从盾叶鬼臼Podophyllum peltatum和西藏鬼臼P.emodi等植物中提取分离的一种具有抗肿瘤作用的活性成分。60年代，瑞士山道士公司先后半合成了鬼臼毒素的主体异构体4’-去甲表鬼臼毒素的β-D-葡萄糖衍生物，即依托泊苷(Etoposide，VP16)和特尼泊苷(Teniposide，VM26)。它们现已广泛应用于临床，主要用于治疗肺癌，睾丸癌，卡波西肉瘤等。它们的结构如式(A)所示：
Figure A20061009901500071
式(A)
其中，当R为α-羟基，R1为甲基时，表示为鬼臼毒素；当R1为氢原子，R为β-D-乙叉吡喃葡萄糖苷基或为β-甲叉吡葡糖苷基时分别表示为依托泊甙和替尼泊甙。
尽管上述的两个化合物已经用于临床，但仍存在骨髓抑制，水溶性差等问题而限制了其应用。因此为了克服上述缺点，寻找更为高效低毒的鬼臼毒素类抗肿瘤化合物，我们也对鬼臼毒素进行一些结构改造工作。我们发现人们对此类化合物的结构修饰主要集中在4位α-羟基和内酯环的修饰上，而对A，E环的改造进行的非常少，因此本发明提供了一些对A，E环进行修饰的鬼臼毒素衍生物。根据全世界尤其是中国的常发肿瘤疾病谱及肿瘤细胞的敏感性，我们选择了人前列腺癌细胞(PC-3)，鼻咽癌细胞(CNE)，口腔上皮癌细胞(KB)，人肺癌细胞(A549)，人肝癌细胞(BEL-7404)，人子宫颈癌细胞(Hela)，人原髓细胞白血病细胞(HL-60)和小鼠淋巴样瘤(P388D1)共八株肿瘤细胞作为体外细胞毒活性药理评价的指标，对合成出的所有化合物及中间体进行了细胞毒性筛选。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有抑制肿瘤细胞生长活性的4-脱氧异鬼臼毒素衍生物。具体而言，本发明提供了一种具有式(1)所示的化合物：
Figure A20061009901500081
式(1)
其中：
R1，R2，R3，R4，R5可以相同或不同，可分别为氢，甲氧基，苯环上取代或未取代的苄氧基，甲氧基甲氧基或含3-20个碳的饱和/不饱和的直链/支链的烷氧基团；其中R1，R2，R4，R5不能同时为羟基或者甲氧基；R1和R2，R4和R5不能同时为偕二甲氧基；当R1和R2为偕二甲氧基，R4为甲氧基时，R5不能为苄氧基，甲氧基或羟基；当R1和R2为偕二甲氧基，R4为羟基时，R5不能为甲氧基；当R1和R2为偕二甲氧基，R4为氢时，R5不能为苄氧基，甲氧基或苯基；当R4为甲氧基，R5为苄氧基时，R1，R2，R3不能同时为甲氧基；当R4和R5同为甲氧基时，R1，R2，R3中相邻二者不能为偕二甲氧基；当R1和R2同为甲氧基时，R4和R5不能为偕二甲氧基；当R1和R4同为甲氧基时，R2和R5不能同时为羟基或苄氧基。
本发明的另一目的是提供了式(1)化合物的制备方法；
本发明的另一目的是提供了关键性中间体式(III)化合物；
Figure A20061009901500091
式(III)
其中：R1，R2，R3可以相同或不同，可分别为羟基，甲氧基，苯环上取代或未取代的苄氧基，甲氧基甲氧基或含3-20个碳的饱和/不饱和的直链/支链的烷氧基团；R3也可以是氢原子；R4或R5中有一个为甲氧基，另一个为甲氧基甲氧基。
本发明的另一目的是提供了式(III)化合物的制备法；
本发明的又一目的是提供了式(1)和式(III)化合物用于制备防治肿瘤疾病药物的用途。
具体而言，本发明提供了一种式(1)所示的4-脱氧异鬼臼毒素衍生物：
Figure A20061009901500092
式(1)
其中：R1，R2，R3，R4，R5可以相同或不同，可分别为氢，甲氧基，苯环上取代或未取代的苄氧基，甲氧基甲氧基或含3-20个碳的饱和/不饱和的直链/支链的烷氧基团；其中R1，R2，R4，R5不能同时为羟基或者甲氧基；R1和R2，R4和R5不能同时为偕二甲氧基；当R1和R2为偕二甲氧基，R4为甲氧基时，R5不能为苄氧基，甲氧基或羟基；当R1和R2为偕二甲氧基，R4为羟基时，R5不能为甲氧基；当R1和R2为偕二甲氧基，R4为氢时，R5不能为苄氧基，甲氧基或苯基；当R4为甲氧基，R5为苄氧基时，R1，R2，R3不能同时为甲氧基；当R4和R5同为甲氧基时，R1，R2，R3中相邻二者不能为偕二甲氧基；当R1和R2同为甲氧基时，R4和R5不能为偕二甲氧基；当R1和R4同为甲氧基时，R2和R5不能同时为羟基或苄氧基。
当式(1)中的R4和R5，一个为甲氧基，另一个为取代或未取代的苄氧基苄氧基或含3-20个碳的饱和/不饱和的直链/支链的烷氧基团；如式(I-A)和式(I-B)所示，为本发明的第I类化合物：
Figure A20061009901500101
式(I-A)                                    式(I-B)
其中，R1，R2，R3的定义与式(1)中的相同，且当R4或R5为未取代的苄氧基时，R1，R2，R3不能同时为甲氧基，R1，R2也不能为羟基或苄氧基。
本发明优选的式(I-A)和式(I-B)化合物包括：
化合物I-A1：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-烯丙氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A2：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-苄氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A3：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-香叶氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A4：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-法尼氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A5：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-烯丙氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A6：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-异戊烯氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A7：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-香叶氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A8：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-法尼氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B1：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-香叶氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B2：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-法尼氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B3：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-烯丙氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B4：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-异戊烯氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B5：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-香叶氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B6：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-法尼氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮。
Figure A20061009901500111
当式(1)中的R4和R5一个为甲氧基，另一个为羟基，如式(II-A)和式(II-B)所示，为本发明的第II类化合物：
Figure A20061009901500121
式(II-A)                           式(II-B)
其中，R1，R2，R3的定义与式(1)中的相同，且R1，R2不能为羟基。
本发明优选的式(II-A)和式(II-B)化合物包括：
化合物II-A1：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物II-A2：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物II-B1：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-羟基4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物II-B2：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
Figure A20061009901500122
本发明提供了式(1)中4-脱氧异鬼臼毒素衍生物的制备方法，该合成路线的特征是：以4-取代丁内酯为原料在二异丙胺基锂存在下与取代苯甲醛发生α-羟基烷基化制得中间体(III)，中间体(III)是两个差向异构体(1∶1)的混合物，但可以不用把它们分离出来，在三氟醋酸条件下它们都能闭环同时脱去甲氧基甲基的保护基得到式(II-A)或式(II-B)化合物；化合物(II-A)和(II-B)在碱性加热条件下，分别与各种末端溴代烃反应而制得相应的化合物(I)。具体制备过程如下所示：
Figure A20061009901500131
其中，R1，R2，R3，R4，R5的定义与式(1)化合物的定义相同。
反应流程中，中间体式(III)所示的3-(α-羟基苄基)-4-苄基-4，5-二氢呋喃-2-酮化合物也具有生物活性，本发明优选式(III)化合物包括：
化合物III-1：(3S，4R)-3-(3-甲氧基甲氧基-4-甲氧基-α-羟基苄基)-4-(3，4-二甲氧基苄基)-二氢呋喃-2-酮；
化合物III-2：(3S，4R)-3-(3-甲氧基-4-甲氧基甲氧基-α-羟基苄基)-4-(3，4-二甲氧基苄基)-二氢呋喃-2-酮；
化合物III-3：(3S，4R)-3-(3-甲氧基甲氧基-4-甲氧基-α-羟基苄基)-4-(3，4，5-三甲氧基苄基)-二氢呋喃-2-酮；
化合物III-4：(3S，4R)-3-(3-甲氧基-4-甲氧基甲氧基-α-羟基苄基)-4-(3，4，5-三甲氧基苄基)-二氢呋喃-2-酮。
Figure A20061009901500141
具体实施方式
为了更好地理解本发明的实质，下面通过实施例来进一步说明本发明。实施例给出了代表性新化合物的合成及相关结构鉴定数据以及部分活性数据。必须说明，下述实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
实施例1：化合物III-4[(3S，4R)-3-(3-甲氧基-4-甲氧基甲氧基-α-羟基苄基)-4-(3，4，5-三甲氧基苄基)二氢呋喃-2-酮]的制备：
Figure A20061009901500142
在氮气保护下，将二异丙胺0.34毫升(2.4mmol)溶于干燥四氢呋喃(THF)20毫升中，冷却至-78℃，滴加入正丁基锂(1.6M在正己烷中)1.5毫升(2.4mmol)，再将溶有4-(3，4，5-三甲氧基苄基)-4，5-二氢呋喃-2-酮532毫克(2.0mmol)的THF溶液10毫升慢慢滴加入反应体系中，将溶有3-甲氧基-4-甲氧基甲氧基苯甲醛392毫克(2.0mmol)的THF溶液8毫升由慢慢滴加入反应瓶中，加毕，使其自然升温至室温，加入饱和氯化铵溶液(20毫升)，分出有机层，水层用乙酸乙酯萃取(15ml×3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥。过滤，蒸干溶剂后，以乙酸乙酯/石油醚(1/3)为洗脱剂用硅胶柱层析分离，得淡黄色透明胶状物850毫克，产率为92％，从1HNMR来判断此化合物两个差向异构体III-4a和III-4b的混合物，两者比例为1∶1。
III-4a化合物[C(7″)-αH]：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.25；1HNMR(400MHz，CDCl3)：δ2.30(dd，1H，J＝13.2，6.0Hz，H-7α)，2.39(dd，1H，J＝13.2，9.2Hz，H-7β)，2.70(dd，1H，J＝10.4，4.8Hz，H-3)，2.85(m，1H，H-4)，3.00(brs，1H，OH-7″β)，3.50(s，3H，OCH3)，3.80(s，9H，OCH3×3)，3.89(s，3H，OCH3)，4.05(brs，1H，H-5β)，4.32(t，1H，J＝8.0，8.0Hz，H-5α)，5.20(s，2H，OCH2O)，5.31(brs，1H，H-7″α)，6.08(s，2H，H-2’，6’)，6.81(d，1H，J＝8.4Hz，H-5″)，6.90(s，1H，H-2″)，7.09(d，1H，J＝8.4Hz，H-6″)；MS(ESI)m/e(相对丰度)：480[M+NH4]+(100)，485[M+Na]+(38)。
III-4b化合物[C(7″)-βH]：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.25；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.20(t，2H，J＝10.0，6.0Hz，H-7)，2.50(m，1H，H-4)，2.67(t，1H，J＝9.2，8.0Hz，H-3)，3.48(s，3H，OCH3)，3.80(s，9H，OCH3×3)，3.90(s，3H，OCH3)，3.95(t，1H，J＝9，2，8.4Hz，H-5β)，4.16(t，1H，J＝9.2，8.4Hz，H-5α)，4.86(d，1H，J＝7.2Hz，H-7″β)，5.20(s，2H，OCH20)，6.09(s，2H，H-2’，6’)，6.94(d，1H，J＝8.4Hz，H-5″)，7.02(s，1H，H-2″)，7.16(d，1H，J＝8.4Hz，H-6″)；MS(ESI)m/e(相对丰度)：480[M+NH4]+(100)，485[M+Na]+(38)。
根据实施例1相同的方法制备得到以下表一所示化合物：
Figure A20061009901500151
表一：
实施例号 NO. R1 R2 R3 R4 R5 ESIMS
2 III-1  OMe   OMe   H  OMOM   OMe  450[M+NH4]+
3 III-2  OMe   OMe   H  OMe   OMOM  450[M+NH4]+
4 III-3  OMe   OMe   OMe  OMOM   OMe  480[M+NH4]+
实施例2：
II-1a化合物[C(7″)-αH]：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.30；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.30-2.41(m，2H，H-7)，2.65(m，1H，Hz，H-3)，2.86(m，1H，H-4)，2.97(brs，1H，OH-7″β)，3.50(s，3H，OCH3)，3.69(s，3H，OCH3)，3.82(s，3H，OCH3)，3.87(s，3H，OCH3)，4.13(brs，1H，H-5β)，4.28(t，1H，J＝8.4，8.4Hz，H-5α)，5.22(s，2H，OCH20)，5.29(brs，1H，H-7″α)，6.36(d，1H，J＝1.6Hz，H-2’)，6.42(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz，H-6’)，6.65(d，1H，J＝8.0Hz，H-5’)，6.81(d，1H，J＝8.0Hz，H-5″)，6.90(d，1H，J＝2.0Hz，H-2″)，7.03(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz，H-6″)。
III-1b化合物[C(7″)-βH]：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.30；1HNMR(400MHz，CDCl3)：δ2.20(t，2H，J＝9.2，7.2Hz，H-7)，2.52(m，1H，H-4)，2.63(t，1H，J＝4.4，3.6Hz，H-3)，3.49(s，3H，OCH3)，3.69(s，3H，OCH3)，3.82(s，3H，OCH3)，3.87(s，3H，OCH3)，3.91(dd，1H，J＝5.2，2.8Hz，H-5β)，4.09(t，1H，J＝8.4，8.4Hz，H-5α)，4.81(d，1H，J＝8.0Hz，H-7″β)，5.26(s，2H，OCH2O)，6.38(d，1H，J＝2.0Hz，H-2’)，6.46(dd，1H，J＝8.0，2.0Hz，H-6’)，6.71(d，1H，J＝8.0Hz，H-5’)，6.88(d，1H，J＝8.4Hz，H-5″)，7.11(d，1H，J＝1.6Hz，H-2″)，7.25(dd，1H，J＝8.0，1.2Hz，H-6″)。
实施例3：
III-2a化合物[C(7″)-αH]：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.30；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.44(dd，1H，J＝14.4，8.8Hz，H-7α)，2.30(dd，1H，J＝10.4，7.2Hz，H-7β)，2.64(dd，1H，J＝12.4，3.6Hz，H-3)，2.82(m，1H，H-4)，3.03(brs，1H，OH-7″β)，3.48(s，3H，OCH3)，3.78(s，3H，OCH3)，3.80(s，3H，OCH3)，3.83(s，3H，OCH3)，4.07(brs，1H，H-5β)，4.31(t，1H，J＝8.4，8.0Hz，H-5α)，5.22(s，2H，OCH20)，5.28(d，1H，J＝5.6Hz，H-7″α)，6.36(d，1H，J＝8.0Hz，H-6’)，6.42(s，1H，H-2’)，6.65(d，1H，J＝8.0Hz，H-5’)，6.80(d，2H，J＝8.0Hz，H-2″，5″)，7.08(d，1H，J＝8.0Hz，H-6″)。
III-2b化合物[C(7″)-βH]：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.30；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.21(t，2H，J＝9.2，4.4Hz，H-7)，2.50(m，1H，H-4)，2.61(t，1H，J＝4.4，3.6Hz，H-3)，3.49(s，3H，OCH3)，3.80(s，3H，OCH3)，3.83(s，3H，OCH3)，3.89(s，3H，OCH3)，3.95(dd，1H，J＝11.2，9.2Hz，H-5β)，4.13(t，1H，J＝9.2，8.0Hz，H-5α)，4.84(d，1H，J＝8.0Hz，H-7″β)，5.21(s，2H，OCH2O)，6.38(d，1H，J＝8.0Hz，H-6’)，6.45(s，1H，H-2’)，6.70(d，1H，J＝8.0Hz，H-5’)，6.92(d，1H，J＝8.0Hz，H-5″)，7.00(s，1H，H-2″)，7.16(d，1H，J＝8.0Hz，H-6″)。
实施例4：
III-3a化合物[C(7″)-αH]：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.25；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.29(dd，1H，J＝14.0，7.2Hz，H-7α)，2.40(dd，1H，J＝13.6，8.4Hz，H-7β)，2.68(dd，1H，J＝6.8，3.2Hz，H-3)，2.84(m，1H，H-4)，3.10(brs，1H，OH-7″β)，3.48(s，3H，OCH3)，3.77(s，9H，OCH3×3)，3.85(s，3H，OCH3)，4.10(t，1H，J＝7.6，7.2Hz，H-5β)，4.33(t，1H，J＝8.8，8.0Hz，H-5α)，5.21(s，2H，OCH20)，5.31(brs，1H，H-7″α)，6.07(s，2H，H-2’，6’)，6.80(d，1H，J＝8.0Hz，H-5″)，6.89(s，1H，H-2″)，7.09(d，1H，J＝8.0Hz，H-6″)。
III-3b化合物[C(7″)-βH]：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.25；1HNMR(400MHz，CDCl3)：δ2.23(m，2H，H-7)，2.50(m，1H，H-4)，2.63(t，1H，J＝10.8，7.6Hz，H-3)，3.49(s，3H，OCH3)，3.79(s，9H，OCH3×3)，3.89(s，3H，OCH3)，3.96(t，1H，J＝8.0，6.4Hz，H-5β)，4.16(t，1H，J＝9.2，8.0Hz，H-5α)，4.86(d，1H，J＝8.0Hz，H-7″β)，5.22(s，2H，OCH20)，6.09(s，2H，H-2’，6’)，6.94(d，1H，J＝8.0Hz，H-5″)，7.02(s，1H，H-2″)，7.16(d，1H，J＝8.0Hz，H-6″)。
实施例5：化合物II-A2[(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮]的制备：
Figure A20061009901500171
将化合物(III-4)707毫克(1.53mmol)溶于25毫升干燥的二氯甲烷中，冰浴冷却至0℃，滴加溶有0.25毫升三氟乙酸的二氯甲烷溶液2毫升，加毕撤去冰浴，使其室温反应4-5小时，然后用饱和碳酸氢钠溶液洗涤有机相(15ml×2)，再用饱和氯化钠洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩后，以乙酸乙酯/石油醚(1/4)为洗脱剂用硅胶柱层析分离，得胶状物443毫克，产率为72％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.35；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.38(dd，1H，J＝13.2，10.4Hz，H-9a)，2.48(m，1H，H-3a)，2.90(d，2H，J＝8.4Hz，H-4)，3.13(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，3.86(s，3H，OCH3)，3.88(s，3H，OCH3)，3.93(dd，1H，J＝10.4，8.4Hz，H-3β)，4.29(d，1H，J＝10.0Hz，H-9)，4.45(dd，1H，J＝8.4，6.4Hz，H-3α)，6.46(s，1H，H-5)，6.50(dd，1H，J＝8.0，1.6Hz，H-6’)，6.76(d，1H，J＝8.0Hz，H-5’)，6.97(d，1H，J＝1.6Hz，H-2’)；MS(ESI)m/e(相对丰度)：400[M]+(3)，39[M-H]+(52)。
根据与实施例5相同的方法制备得到以下表二所示各化合物：
Figure A20061009901500181
表二：
实施例号 NO. R1 R2 R3 ESIMS
  6   II-A1   OMe   OMe   H   369[M-H]+
  7   II-B1   OMe   OMe   H   369[M-H]+
  8   II-B2   OMe   OMe   OMe   399[M-H]+
实施例6：II-A1化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.40；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.48(dd，1H，J＝13.6，11.2Hz，H-9a)，2.62(m，1H，H-3a)，2.93(t，1H，J＝14.0，10.8Hz，H-4β)，2.99(dd，1H，J＝11.6，4.2Hz，H-4α)，3.61(s，3H，OCH3)，3.85(s，3H，OCH3)，3.87(s，3H，OCH3)，3.99(dd，1H，J＝10.8，8.4Hz，H-3β)，4.09(d，1H，J＝11.2Hz，H-9)，4.52(dd，1H，J＝8.4，6.4Hz，H-3α)，5.57(s，1H，OH)，6.34(s，1H，H-8)，6.61(s，1H，H-8)，6.71(dd，1H，J＝8.0，1.6Hz，H-6’)，6.76(d，1H，J＝1.6Hz，H-2’)，6.85(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)。
实施例7：II-B1化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.40；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.51(dd，1H，J＝13.6，11.2Hz，H-9a)，2.60(m，1H，H-3a)，2.93(t，1H，J＝15.2，11.6Hz，H-4β)，2.98(dd，1H，J＝15.2，5.2Hz，H-4α)，3.61(s，3H，OCH3)，3.86(s，3H，OCH3)，3.89(s，3H，OCH3)，3.97(dd，1H，J＝10.4，8.4Hz，H-3β)，4.08(d，1H，J＝11.2Hz，H-9)，4.52(dd，1H，J＝8.8，6.4Hz，H-3α)，5.57(s，1H，OH)，6.33(s，1H，H-8)，6.60(s，1H，H-8)，6.66(d，1H，J＝1.2Hz，H-2’)，6.83(dd，2H，J＝8.0，1，2Hz，H-5’，6’)。
实施例8：II-B2化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.35；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.38(dd，1H，J＝13.6，10.4Hz，H-9a)，2.45(m，1H，H-3a)，2.90(d，2H，J＝6.4Hz，H-4)，3.13(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，3.84(s，3H，OCH3)，3.85(s，3H，OCH3)，3.90(dd，1H，J＝8.8，7.2Hz，H-3β)，4.27(d，1H，J＝9.6Hz，H-9)，4.45(dd，1H，J＝8.4，6.0Hz，H-3α)，6.46(s，1H，H-5)，6.61(d，1H，J＝0.8Hz，H-2’)，6.78(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)，6.91(dd，1H，J＝8.0，0.8Hz，H-6’)；13CNMR(100MHz，CDCl3)：δ175.9，152.6，152.4，145.1，144.8，141.2，139.5，131.2，125.6，120.6，113.3，110.1，107.2，70.7，60.4，59.3，55.8，50.9，41.3，39.9，33.6.
实施例9：化合物I-A5[(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-烯丙氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮]的制备：
将烯丙基溴0.1毫升(1.15mmol)溶于20毫升干燥丙酮中，加入碘化钠70毫克(0.5mmol)，搅拌10分钟后，加入化合物II-A2128毫克(0.32mmol)，然后加入氢氧化钠20毫克(0.5mmol)，碳酸钾250毫克(1.80mmol)，加热回流至TLC显示反应完全后，蒸除溶剂，将残余物溶于30毫升乙酸乙酯-水(1∶1)的混合液中，分出有机层，水层用乙酸乙酯萃取(10ml×2)，合并有机相，无水硫酸钠干燥，过滤浓缩后，粗产物用乙酸乙酯/石油醚(1/5)为洗脱剂用硅胶柱层析分离，得95毫克，产率为67.5％。
Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.50；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.37(dt，1H，J＝13.6，12.8，3.6Hz，H-9a)，2.45(m，1H，H-3a)，2.90(t，2H，J＝5.2，4.4Hz，H-4)，3.09(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，3.82(s，3H，OCH3)，3.86(s，3H，OCH3)，3.92(t，1H，J＝10.0，8.8Hz，H-3β)，4.29(d，1H，J＝10.0Hz，H-9)，4.46(dd，1H，J＝8.4，6.4Hz，H-3α)，4.55(dd，1H，J＝13.2，6.0Hz，H-7’)，5.23(dd，1H，J＝10.4，1.2Hz，H-9’)，5.33(dd，1H，J＝17.2，1.6Hz，H-9’)，6.04(ddd，1H，J＝22.8，10.4，5.6Hz，H-8’)，6.46(s，1H，H-5)，6.71(d，1H，J＝8.0Hz，H-6’)，6.76(d，1H，J＝8.0Hz，H-5’)，6.84(s，1H，H-2’)；MS(ESI)m/e(相对丰度)：458[M+NH4]+(100)。
根据与实施例9相同的方法制备得到以下表三所示各化合物：
表三
实施例号 NO.   R1 R2 R3   R4   R5 ESIMS
10 I-A1   OCH3 OCH3 H   /   烯丙氧基 428[M+NH4]+
11 I-A2   OCH3 OCH3 H   /   苄氧基 478[M+NH4]+
12 I-A3   OCH3 OCH3 H   /   香叶氧基 524[M+NH4]+
13 I-A4   OCH3 OCH3 H   /   法尼氧基 592[M+NH4]+
14 I-A6   OCH3 OCH3 OCH3   /   异戊烯氧基 486[M+NH4]+
15 I-A7   OCH3 OCH3 OCH3   /   香叶氧基 544[M+NH4]+
16 I-A8   OCH3 OCH3 OCH3   /   法尼氧基 622[M+NH4]+
17 I-B1   OCH3 OCH3 H   香叶氧基   / 524[M+NH4]+
18 I-B2   OCH3 OCH3 H   法尼氧基   / 592[M+NH4]+
19 I-B3   OCH3 OCH3 OCH3   烯丙氧基   / 458[M+NH4]+
20 I-B4   OCH3 OCH3 OCH3   异戊烯氧基   / 486[M+NH4]+
21 I-B5   OCH3 OCH3 OCH3   香叶氧基   / 544[M+NH4]+
22  I-B6 OCH3 OCH3 OCH3   法尼氧基   / 622[M+NH4]+
实施例10：I-A1化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.51(t，1H，J＝13.2，11.2Hz，H-9a)，2.61(m，1H，H-3a)，2.97(t，1H，J＝15.2，13.2Hz，H-4β)，3.00(dd，1H，J＝14.8，4.4Hz，H-4α)，3.60(s，3H，OCH3)，3.82(s，3H，OCH3)，3.87(s，3H，OCH3)，3.99(t，1H，J＝10.0，8.8Hz，H-3β)，4.11(d，1H，J＝11.2Hz，H-9)，4.53(t，1H，J＝8.0，6.8Hz，H-3α)，4.60(d，2H，J＝5.6Hz，H-7’)，5.28(d，1H，J＝10.4Hz，H-9’)，5.40(d，1H，J＝15.6Hz，H-9’)，6.10(ddd，1H，J＝23.2，11.2，5.6Hz，H-8’)，6.32(s，1H，H-8)，6.61(s，1H，H-5)，6.72(s，1H，H-2’)，6.75(d，1H，J＝8.0Hz，H-6’)，6.83(d，1H，J＝8.0Hz，H-5’)。
实施例11：I-A2化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.50；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.50(t，1H，J＝13.2，11.2Hz，H-9a)，2.63(m，1H，H-3a)，2.96(m，2H，H-4)，3.59(s，3H，OCH3)，3.83(s，3H，OCH3)，3.87(s，3H，OCH3)，3.99(t，1H，J＝9.6，9.6Hz，H-3β)，4.11(d，1H，J＝12.0Hz，H-9)，4.53(t，1H，J＝8.0，7.2Hz，H-3α)，5.14(s，2H，OCH2Ph)，6.30(s，1H，H-8)，6.60(s，1H，H-5)，6.71(m，2H，H-2’，6’)，6.84(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)，7.45-7.29(m，5H，OCH2Ph-H)。
实施例12：I-A3化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.60，1.67，1.72，(CH3×3)，2.08(m，4H，H-10’，11’)，2.51(t，1H，J＝13.2，11.6Hz，H-9a)，2.64(m，1H，H-3a)，2.99(m，2H，H-4)，3.60(s，3H，OCH3)，3.81(s，3H，OCH3)，3.87(s，3H，OCH3)，3.99(t，1H，J＝10.0，9.2Hz，H-3β)，4.12(d，1H，J＝10.8Hz，H-9)，4.55(t，1H，J＝7.6，7.2Hz，H-3α)，4.60(d，2H，J＝6.8Hz，H-7’)，5.09(t，1H，J＝6.4，6.0Hz，H-12’)，5.53(t，1H，J＝6.4，6.0Hz，H-8’)，6.33(s，1H，H-8)，6.61(s，1H，H-5)，6.70(d，1H，J＝0.8Hz，H-2’)，6.76(dd，1H，J＝7.2，0.8Hz，H-6’)，6.83(d，1H，J＝7.6Hz，H-5’)。
实施例13：I-A4化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.60，1.67，1.72，1.74(CH3×4)，2.06(m，8H，H-10’，11’，14’，15’)，2.48(t，1H，J＝13.2，11.6Hz，H-9a)，2.64(m，1H，H-3a)，2.94(m，2H，H-4)，3.70(s，3H，OCH3)，3.81(s，3H，OCH3)，3.86(s，3H，OCH3)，4.00(t，1H，J＝10.0，9.6Hz，H-3β)，4.12(d，1H，J＝10.8Hz，H-9)，4.53(t，1H，J＝8.0，7.6Hz，H-3α)，4.60(d，2H，J＝6.4Hz，H-7’)，5.10(t，2H，J＝6.4，6.0Hz，H-12’，16’)，5.54(t，1H，J＝6.4，6.0Hz，H-8’)，6.33(s，1H，H-8)，6.61(s，1H，H-5)，6.70(s，1H，H-2’)，6.76(d，1H，J＝8.0Hz，H-6’)，6.83(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)。
实施例14：I-A6化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.50；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.63，1.70(CH3×2)，2.37(dd，1H，J＝14.0，10.4Hz，H-9a)，2.44(m，1H，H-3a)，2.91(m，2H，H-4)，3.08(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，3.87(s，3H，OCH3)，3.88(s，3H，OCH3)，3.92(dt，1H，J＝10.8，10.0，2.0Hz，H-3β)，4.29(d，1H，J＝10.0Hz，H-9)，4.47(dd，1H，J＝8.4，6.4Hz，H-3α)，4.56(d，1H，J＝6.0Hz，H-7’)，5.43(t，1H，J＝6.8，5.2Hz，H-8’)，6.47(s，1H，H-5)，6.76(m，3H，H-2’，5’，6’)。
实施例15：I-A7化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1∶1)：0.50；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.58，1.66，1.69，(CH3×3)，2.05(m，4H，H-10’，11’)，2.40(t，1H，J＝14.0，10.0Hz，H-9a)，2.43(m，1H，H-3a)，2.91(d，2H，J＝6.4Hz，H-4)，3.08(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，3.84(s，3H，OCH3)，3.86(s，3H，OCH3)，3.95(t，1H，J＝10.0，8.8Hz，H-3β)，4.31(d，1H，J＝9.6Hz，H-9)，4.49(t，1H，J＝8.4，6.4Hz，H-3α)，4.57(d，2H，J＝6.4Hz，H-7’)，5.07(t，1H，J＝5.6，6.0Hz，H-12’)，5.48(t，1H，J＝6.4，6.0Hz，H-8’)，6.46(s，1H，H-5)，6.62(d，1H，J＝8.4Hz，H-6’)，6.76(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)，6.88(brs，1H，H-2’)。
实施例16：I-A8化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1∶1)：0.50；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.59，1.67，1.69，1.76(CH3×4)，2.04(m，8H，H-10’，11’，14’，15’)，2.41(t，1H，J＝10.0，9.6Hz，H-9a)，2.45(m，1H，H-3a)，2.91(d，2H，J＝8.4Hz，H-4)，3.08(s，3H，OCH3)，3.76(s，3H，OCH3)，3.83(s，3H，OCH3)，3.86(s，3H，OCH3)，3.96(t，1H，J＝11.2，9.2Hz，H-3β)，4.30(d，1H，J＝10.0Hz，H-9)，4.49(t，1H，J＝8.8，8.4Hz，H-3α)，4.56(d，2H，J＝8.4Hz，H-7’)，5.09(brs，2H，H-12’，H-16’)，5.49(t，1H，J＝6.4，6.0Hz，H-8’)，6.46(s，1H，H-5)，6.63(d，1H，J＝8.4Hz，H-6’)，6.76(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)，6.88(brs，1H，H-2’)。
实施例17：I-B1化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.59，1.63，1.67，(CH3×3)，2.04(m，4H，H-10’，11，)，2.49(t，1H，J＝13.2，11.6Hz，H-9a)，2.62(m，1H，H-3a)，2.92(t，1H，J＝14.4，12.0Hz，H-4β)，3.02(dd，1H，J＝14.8，4.8Hz，H-4α)，3.59(s，3H，OCH3)，3.86(s，6H，OCH3×2)，3.96(t，1H，J＝10.0，9.6Hz，H-3β)，4.10(d，1H，J＝11.2Hz，H-9)，4.53(m，3H，Hz，H-3α，7’)，5.07(t，1H，J＝6.4，6.0Hz，H-12’)，5.47(t，1H，J＝6.4，6.0Hz，H-8’)，6.32(s，1H，H-8)，6.61(s，1H，H-5)，6.67(s，1H，H-2’)，6.83(s，2H，H-5’，6’)。
实施例18：I-B2化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.59，1.63，1.67，1.71(CH3×4)，2.05(m，8H，H-10’，11’，14’，15’)，2.48(t，1H，J＝13.2，11.6Hz，H-9a)，2.63(m，1H，H-3a)，2.92(t，1H，J＝15.6，11.6Hz，H-4β)，3.00(dd，1H，J＝15.2，4.8Hz，H-4α)，3.59(s，3H，OCH3)，3.86(s，6H，OCH3×2)，3.96(t，1H，J＝11.6，9.2Hz，H-3β)，4.10(d，1H，J＝11.2Hz，H-9)，4.53(m，3H，Hz，H-3α，7’)，5.09(m，2H，H-12’，16’)，5.47(t，1H，J＝6.4，6.0Hz，H-8’)，6.32(s，1H，H-8)，6.61(s，1H，H-5)，6.68(s，1H，H-2’)，6.83(s，2H，H-5’，6’)。
实施例19：I-B3化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.50；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ2.37(dd 1H，J＝14.4，10.0Hz，H-9a)，2.43(m，1H，H-3a)，2.91(t，2H，J＝5.2，5.2Hz，H-4)，3.10(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，3.82(s，3H，OCH3)，3.86(s，3H，OCH3)，3.95(dd，1H，J＝10.4，8.8Hz，H-3β)，4.30(d，1H，J＝10.4Hz，H-9)，4.46(dd，1H，J＝8.0，6.4Hz，H-3α)，4.57(d，1H，J＝5.2Hz，H-7’)，5.23(dd，1H，J＝10.4，1.2Hz，H-9’)，5.33(dd，1H，J＝17.2，1.6Hz，H-9’)，6.06(ddd，1H，J＝22.4，10.8，5.6Hz，H-8’)，6.46(s，1H，H-5)，6.71(d，1H，J＝7.6Hz，H-6’)，6.76(d，1H，J＝8.0Hz，H-5’)，6.85(s，1H，H-2’)。
实施例20：I-B4化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.50；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.64，1.71(CH3×2)，2.39(dd，1H，J＝14.0，10.4Hz，H-9a)，2.45(m，1H，H-3a)，2.90(m，2H，H-4)，3.08(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，3.82(s，3H，OCH3)，3.87(s，3H，OCH3)，3.92(dt，1H，J＝10.4，10.4，1.6Hz，H-4β)，4.30(d，1H，J＝10.4Hz，H-9)，4.47(dd，1H，J＝8.4，6.4Hz，H-3α)，4.55(d，1H，J＝6.4Hz，H-7’)，5.42(t，1H，J＝7.2，6.4Hz，H-8’)，6.46(s，1H，H-5)，6.78(m，3H，H-2’，5’，6’)。
实施例21：I-B5化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.59，1.65，1.67，(CH3×3)，2.05(m，4H，H-10’，11’)，2.38(t，1H，J＝14.0，10.4Hz，H-9a)，2.45(m，1H，H-3a)，2.92(m，2H，H-4)，3.08(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，3.82(s，3H，OCH3)，3.86(s，3H，OCH3)，3.93(t，1H，J＝10.0，9.2Hz，H-3β)，4.30(d，1H，J＝10.8Hz，H-9)，4.47(t，1H，J＝8.4，6.4Hz，H-3α)，4.57(d，2H，J＝6.4Hz，H-7’)，5.07(t，1H，J＝7.8，6.4Hz，H-12’)，5.53(t，1H，J＝7.8，6.4Hz，H-8’)，6.46(s，1H，H-5)，6.78(m，3H，H-2’，5’，6’)。
实施例22：I-B6化合物：Rf(乙酸乙酯/石油醚：1/1)：0.55；1H NMR(400MHz，CDCl3)：δ1.64，1.66，1.67，1.71(CH3×4)，2.06(m，8H，H-10’，11’，14’，15’)，2.38(t，1H，J＝14.0，10.4Hz，H-9a)，2.44(m，1H，H-3a)，2.92(m，2H，H-4)，3.09(s，3H，OCH3)，3.73(s，3H，OCH3)，3.82(s，3H，OCH3)，3.86(s，3H，OCH3)，3.92(t，1H，J＝10.0，9.2Hz，H-3β)，4.30(d，1H，J＝10.0Hz，H-9)，4.46(t，1H，J＝8.4，6.4Hz，H-3α)，4.57(d，2H，J＝6.4Hz，H-7’)，5.10(t，2H，J＝7.6，6.0Hz，H-12’，16’)，5.47(t，1H，J＝6.8，6.0Hz，H-8’)，6.46(s，1H，H-5)，6.66-6.82(m，3H，H-2’，5’，6’)。
式(1)化合物具有重要的生物活性，体外对八株肿瘤细胞包括人前列腺癌细胞(PC-3)，鼻咽癌细胞(CNE)，(口腔上皮癌细胞株(KB)，人肺癌细胞(A549)，人肝癌细胞(BEL-7404)，人子宫颈癌细胞(Hela)，人原髓细胞白血病细胞(HL-60)和小鼠淋巴样瘤(P388D1)的细胞毒活性试验表明此类4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物(具体见实施例)对肿瘤细胞生长具有抑制作用，有可能发展成为新的防治肿瘤药物。
本发明的式(1)化合物或其可药用盐及其溶剂化物可以与药学上常用的辐料或载体结合，制备得到具有肿瘤细胞生长抑制活性从而可以用于防治肿瘤的药物组合物。上述各类药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物，包括采用现已公认的药剂学常识常规制备而得的各种缓释、控释剂型或纳米制剂。
本发明的式(1)化合物或其可药用盐及其溶剂化物可以与现已上市的抗肿瘤药物如铂类药物顺铂(DDP)、喜树碱类药物伊立替康(Irinatecan、CPT-11)、长春花碱类药物失碳长春花碱(Vinorebine，NVB诺维本)、脱氧胞昔类药物吉西他滨(Gemcitabine，Gemzar，健择)、足叶乙甙(Etoposide)、紫杉醇(Paclitaxel)等联合使用，制备得到具有肿瘤生长抑制活性的细胞毒性组合物，可用于治疗肿癌疾病。该类药物组合物可以采用注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂等剂型药物，包括采用现已公认的药剂学常识常规制备而得的各种缓释、控释剂型或纳米制剂。
为了更好地理解本发明的实质，下面分别用化合物对八种肿瘤细胞株生长的抑制作用的药理实验结果，说明其在制药领域中的用途。药理实施例给出了代表性化合物的部分活性数据。必须说明，本发明的药理实施例是用于说明本发明而不是对本发明的限制。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
药理实施例1：化合物I-B1对KB细胞的细胞毒活性
KB(口腔上皮癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法。细胞经过24小时的孵育后，分别将新配的化合物VIa的二甲亚砜溶液以浓度梯度加入到各孔中，使孔中I-B1化合物最终浓度分别为100μg/mL，33.3μg/mL，11.1μg/mL和3.7μg/mL。72小时后，加入10μL MTT(5mg/mL)的磷酸盐缓冲液，再继续在37℃培养4小时后，离心5分钟除去未转化的MTT，每孔中加入200μL二甲亚砜，以溶解还原的MTT晶体甲臜(formazan)，所形成的formazan用酶标仪在570nm波长下比色，细胞存活率由样品相对于对照品的比值计算。其中化合物I-B1对KB细胞半抑制浓度(IC50)由剂量效应曲线得到。
化合物I-B1的IC50为：3.76×10-6M；而作为对照的依托泊苷(Etoposide，VP16)对KB细胞的细胞毒活性IC50为：1.0×10-6M。
实验结论：KB细胞是测试化合物对肿瘤细胞的细胞毒性的有效工具和评价指际。本实验表明此类4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物，对KB细胞具有较强的细胞毒性，活性近似于现有上市药物依托泊苷，有可能发展成为新的具有广谱抗肿瘤作用的药物。
药理实施例2：化合物I-A2对PC-3细胞的细胞毒活性
PC-3(前列腺癌)细胞用F-12培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物I-A2的IC50为：9.48×10-5M；而作为对照的依托泊苷(Etoposide，VP16)对PC-3细胞的细胞毒活性IC50为：9.28×10-5M。
实验结论：本实验表明此类4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物对PC-3细胞具有较强的细胞毒性，活性等同于现有上市药物依托泊苷，有可能发展成为新的具有抗前列腺癌作用及治疗类似癌症的药物。
药理实施例3：化合物I-A2对CNE细胞的细胞毒活性
CNE(鼻咽癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。以每孔5×103细胞的浓度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物I-A2的IC50为：7.09×10-5M；而作为对照的依托泊苷(Etoposide，VP16)对CNE细胞的细胞毒活性IC50为：8.21×10-6M。
实验结论：本实验表明此类4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物对CNE细胞具有较强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗鼻咽癌作用及治疗类似癌症的药物。
药理实施例4：化合物II-A2对A549细胞的细胞毒活性
A549(人肺癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物II-A2的IC50为：1.45×10-5M；而作为对照的依托泊苷(Etoposide，VP16)对A549细胞的细胞毒活性IC50为：5.71×10-5M。
实验结论：本实验表明此类4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物对A549细胞具有较强的细胞毒性，活性高于现有上市药物依托泊苷，有可能发展成为新的具有抗肺癌作用及治疗类似癌症的药物。
药理实施例5：化合物I-B1对BEL-7404细胞的细胞毒活性
BEL-7404(人肝癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到96孔板中，在37℃含5％CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物I-B1对BEL-7404细胞的细胞毒活性的IC50为：5.63×10-5M；而作为对照的依托泊苷(Etoposide，VP16)对BEL-7404细胞的细胞毒活性IC50为：8.2×10-6M。
实验结论：本实验表明此类4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物对BEL-7404细胞具有较强的细胞毒性，活性高于现有上市药物依托泊苷，有可能发展成为新的具有抗肝癌作用及治疗类似癌症的药物。
药理实施例6：化合物II-B2对Hela细胞的细胞毒活性
Hela(人子宫颈癌)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％的胎牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL的链霉素。细胞以每孔5×103的浓度加入到％孔板中，在37℃含5％CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。
细胞存活率的测定用改良MTT法，具体方法如药理实施例1。
化合物II-B2的IC50为：5.15×10-5M；而作为对照的依托泊苷(Etoposide，VP16)对Hela细胞的细胞毒活性IC50为：7.0×10-6M。
实验结论：本实验表明此类4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物对Hela细胞具有较强的细胞毒性，有可能发展成为新的具有抗子宫颈癌作用及治疗类似癌症的药物。
药理实施例7：化合物I-A7对人原髓细胞白血病细胞(HL-60)的细胞毒活性
HL-60(人原髓细胞白血病细胞)细胞用RPMI 1640培养基培养，培养基中含10％小牛血清，100U/mL青霉素和100U/mL链霉素。细胞以每孔1×104个密度接种到96孔板中，在37℃，5％CO2潮湿空气的培养箱中培养24小时。细胞存活率的测定方法用改良MTT法。具体方法参见药理实施例1。其中化合物I-A7对HL-60细胞的半数抑制浓度(IC50)由剂量效应曲线得到。
化合物I-A7的IC50为：4.54×10-6M；而作为对照的依托泊苷(Etoposide，VP16)对Hela细胞的细胞毒活性IC50为：1.05×10-5M。
实验结论：本实验表明此类4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物对Hela细胞具有较强的细胞毒性，活性高于现有上市药物依托泊苷，有可能发展成为新的具有抗白血病作用及治疗类以血癌的药物。
药理实施例8：化合物I-A7对小鼠淋巴样瘤P388D1的细胞毒活性
P388D1(小鼠淋巴样瘤细胞)细胞培养及细胞存活率的测定方法用改良MTT法。具体方法参见药理实施例1。其中化合物I-A7对HL-60细胞的半数抑制浓度(IC50)由剂量效应曲线得到。化合物I-A7的IC50为：3.05×10-6M；而作为对照的依托泊苷(Etoposide，VP16)对Hela细胞的细胞毒活性IC50为：6.51×10-6M。
实验结论：本实表明此类4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其中间体系列化合物对P388D1细胞具有较强的细胞毒性，活性高于现有上市药物依托泊苷，有可能发展成为新的具有抗淋巴样瘤作用及治疗类似肿瘤的药物。
本发明化合物可以用于制成防治肿瘤疾病的药物组合物，这种组合物含有有效量的本发明化合物和可药用辅料；本发明化合物也可以与其他抗肿瘤药物联用，制成抗肿瘤药物组合物；本发明的药物组合物可以用常规的方法制备，可以制成例如片剂、胶囊剂、注射剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用搽剂和软膏剂等剂型，包括采用现已公认的药剂学常识常规制备而得的各种缓释、控释剂型或纳米制剂。

Claims (11)

1.一种具有式(1)所示的具有肿瘤细胞毒性的4-脱氧异鬼臼毒素衍生物：
Figure A2006100990150002C1
式(1)
其中：R1，R2，R3，R4，R5可以相同或不同，可分别为氢，甲氧基，苯环上取代或未取代的苄氧基，甲氧基甲氧基或含3-20个碳的饱和/不饱和的直链/支链的烷氧基团；其中R1，R2，R4，R5不能同时为羟基或者甲氧基；R1和R2，R4和R5不能同时为偕二甲氧基；当R1和R2为偕二甲氧基，R4为甲氧基时，R5不能为苄氧基，甲氧基或羟基；当R1和R2为偕二甲氧基，R4为羟基时，R5不能为甲氧基；当R1和R2为偕二甲氧基，R4为氢时，R5不能为苄氧基，甲氧基或苯基；当R4为甲氧基，R5为苄氧基时，R1，R2，R3不能同时为甲氧基；当R4和R5同为甲氧基时，R1，R2，R3中相邻者不能为偕二甲氧基；当R1和R2同为甲氧基时，R4和R5不能为偕二甲氧基；当R1和R4同为甲氧基时，R2和R5不能同时为羟基或苄氧基。
2.根据权利要求1的化合物，其中R4和R5，一个为甲氧基，另一个为取代或未取代的苄氧基或含3-20个碳的饱和/不饱和的直链/支链的烷氧基团，为下面的式(I-A)和式(I-B)化合物：
Figure A2006100990150002C2
式(I-A)    式(I-B)
其中，R1，R2，R3的定义与权利要求1中的相同，且当R4或R5为未取代的苄氧基时，R1，R2，R3不能同时为甲氧基，R1，R2也不能为羟基或苄氧基。
3.权据权利要求2的式(I-A)和式(I-B)化合物，它们是：
化合物I-A1：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-烯丙氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃1-酮；
化合物I-A2：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-苄氧基苯基)3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A3：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-香叶氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A4：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-法尼氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A5：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-烯丙氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A6：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-异戊烯氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A7：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-香叶氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-A8：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-法尼氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B1：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-香叶氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B2：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-法尼氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B3：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-烯丙氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B4：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-异戊烯氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B5：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-香叶氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物I-B6：(3aR，9aR，9S)-6，7，9-三甲氧基-9-(3-法尼氧基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮。
4.根据权利要求1的化合物，其中R4和R5一个为甲氧基，另一个为羟基，为下面的式(II-A)和式(II-B)化合物：
式(II-A)    式(II-B)
其中，R1，R2，R3的定义与权利要求1中的相同，且R1，R2不能为羟基。
5.根据权利要求4的式(II-A)和式(II-B)化合物，它们是：
化合物II-A1：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物II-A2：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-甲氧基-4-羟基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物II-B1：(3aR，9aR，9S)-6，7-二甲氧基-9-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮；
化合物II-B2：(3aR，9aR，9S)-6，7，8-三甲氧基-9-(3-羟基-4-甲氧基苯基)-3a，4，9，9a-四氢萘并[2，3-c]呋喃-1-酮。
6.根据权利要求2中的式(I-A)和式(I-B)化合物的制备方法，其中式(I-A)和式(I-B)化合物是由式(II-A)和式(II-B)化合物分别与各种长链末端卤代烃(R6X或者R4X)在碱性条件下反应得到的。
Figure A2006100990150004C2
式(II-A)    式(I-A)
Figure A2006100990150004C3
式(II-B)    式(I-B)
其中，R1，R2，R3，R4，R5的定义与权利要求2中的相同。
7.根据权利要求4中的式(II-A)和式(II-B)化合物的制备方法，其中式(II-A)和式(II-B)化合物是由中间体化合物式(III)制备得到：
Figure A2006100990150005C1
其中，R1，R2，R3的定义与权利要求4中的相同，R4和R5中有一个为甲氧基，另一个为甲氧基甲氧基。
8.根据权利要求7的式(III)化合物，它们是：
化合物III-1：(3S，4R)-3-(3-甲氧基甲氧基-4-甲氧基-α-羟基苄基)-4-(3，4-二甲氧基苄基)-二氢呋喃-2-酮；
化合物III-2：(3S，4R)-3-(3-甲氧基-4-甲氧基甲氧基-α-羟基苄基)-4-(3，4-二甲氧基苄基)-二氢呋喃-2-酮；
化合物III-3：(3S，4R)-3-(3-甲氧基甲氧基-4-甲氧基-α-羟基苄基)-4-(3，4，5-三甲氧基苄基)-二氢呋喃-2-酮；
化合物III-4：(3S，4R)-3-(3-甲氧基-4-甲氧基甲氧基-α-羟基苄基)-4-(3，4，5-三甲氧基苄基)二氢呋喃-2-酮。
9.根据权利要求8中的中间体式(III)中的化合物的制备方法；其中，式(III)化合物是由4-取代的丁内酯与取代的苯甲醛反应得到：
Figure A2006100990150005C2
其中，R1，R2，R3，R4，R5的定义与权利要求7中的相同。
10.根据权利要求1-5和8之一的化合物或者它们的可药用盐或它们的溶剂化物或上述物质的的混合物用于制备防治肿瘤病药物的用途。
11.一种用于防治肿瘤疾病的药物组合物，其含有治疗有效量的作为活性成分的根据权利要求1-5和8之一的化合物或者它们的可药用盐或它们的溶剂化物或上述物质的的混合物和可药用辅料，其可以是注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、滴丸剂、外用搽剂、软膏剂剂型药物。
CN200610099015A 2006-07-14 2006-07-14 4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其制备方法和医药用途 Expired - Fee Related CN100596298C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200610099015A CN100596298C (zh) 2006-07-14 2006-07-14 4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其制备方法和医药用途

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN200610099015A CN100596298C (zh) 2006-07-14 2006-07-14 4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其制备方法和医药用途

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN101104610A true CN101104610A (zh) 2008-01-16
CN100596298C CN100596298C (zh) 2010-03-31

Family

ID=38998713

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200610099015A Expired - Fee Related CN100596298C (zh) 2006-07-14 2006-07-14 4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其制备方法和医药用途

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN100596298C (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105001090A (zh) * 2015-07-01 2015-10-28 安徽万邦医药科技有限公司 一种4-乙酰氧基-3-（3,4-二甲氧基-苄基）-2-（4-羟基-3-甲氧基-苄基）-丁-2-烯酸甲酯的制备方法
CN112794832A (zh) * 2021-01-30 2021-05-14 河南中医药大学 一个从牛蒡叶中提取的具有抗炎活性的化合物nby-10及其制备方法与应用
CN112851612A (zh) * 2021-01-30 2021-05-28 河南中医药大学 一种从牛蒡叶中提取的具有降低胆固醇活性化合物及其制备方法与应用
CN112920148A (zh) * 2021-01-30 2021-06-08 河南中医药大学 一种从牛蒡叶中提取的具有抗炎活性的新化合物nby-16及其制备方法与应用

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105001090A (zh) * 2015-07-01 2015-10-28 安徽万邦医药科技有限公司 一种4-乙酰氧基-3-（3,4-二甲氧基-苄基）-2-（4-羟基-3-甲氧基-苄基）-丁-2-烯酸甲酯的制备方法
CN112794832A (zh) * 2021-01-30 2021-05-14 河南中医药大学 一个从牛蒡叶中提取的具有抗炎活性的化合物nby-10及其制备方法与应用
CN112851612A (zh) * 2021-01-30 2021-05-28 河南中医药大学 一种从牛蒡叶中提取的具有降低胆固醇活性化合物及其制备方法与应用
CN112920148A (zh) * 2021-01-30 2021-06-08 河南中医药大学 一种从牛蒡叶中提取的具有抗炎活性的新化合物nby-16及其制备方法与应用
CN112794832B (zh) * 2021-01-30 2022-06-24 河南中医药大学 一个从牛蒡叶中提取的具有抗炎活性的化合物nby-10及其制备方法与应用
CN112851612B (zh) * 2021-01-30 2023-11-10 河南中医药大学 一种从牛蒡叶中提取的具有降低胆固醇活性化合物及其制备方法与应用
CN112920148B (zh) * 2021-01-30 2023-11-14 河南中医药大学 一种从牛蒡叶中提取的具有抗炎活性的新化合物nby-16及其制备方法与应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN100596298C (zh) 2010-03-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0639186B1 (en) Taxol derivatives
Li et al. Neuroprotective compounds from the bulbs of Lycoris radiata
CN102089312A (zh) 作为蛋白酶体抑制剂的Salinosporamide衍生物
CN100596298C (zh) 4-脱氧异鬼臼毒素衍生物及其制备方法和医药用途
CA2337771A1 (en) Anhydride modified cantharidin analogues useful in the treatment of cancer
Pal et al. Benzoxazole alkaloids: occurrence, chemistry, and biology
CN111808117B (zh) 青蒿素-苯胺基喹唑啉类d类衍生物及其药物组合物和应用
US5132322A (en) Etoposide analogues
Zhou et al. Antitumor agents. 144. New. gamma.-lactone ring-modified arylamino etoposide analogs as inhibitors of human DNA topoisomerase II
EP0461141B1 (en) Etoposide analogues
AU618536B2 (en) Novel 3',4'-dinitrogen substituted epipodophyllotoxin glucoside derivatives
VanVliet et al. A high yield preparation of 2-fluoropodophyllotoxin
CN101092363B (zh) 芳基四氢萘类木脂素化合物及其制备方法和用途
CN114874170B (zh) 多花蒿内酯a-j及其药物组合物与其制备方法和应用
CN105646546A (zh) 酸敏感型的喜树碱-20位酯衍生物及其抗肿瘤应用
NZ224565A (en) Epipodophyllotoxin glucoside derivatives; use in antitumour medicaments
CN109369667B (zh) 2，3，6-三脱氧糖基去甲表鬼臼毒素化合物及其制备方法和用途
CN102653543A (zh) 3-取代型岩大戟内酯类化合物的制备方法、生物活性及应用
CN101050179B (zh) 2,3,4,5-四取代的苯丙烯类衍生物及其制备方法和用途
CN101230015B (zh) 含酰胺取代基的取代桂皮酸衍生物及其肿瘤细胞毒性
Tousif et al. Anti-urease secondary metabolites from Seriphidium quettense
CN100556908C (zh) 具抑制肿瘤细胞生长活性的艾里莫芬双内酯二聚体及用途
Kallinen et al. Synthesis of chiral unsaturated aminolactones using Pd-catalyzed allylic amination
CN101243092A (zh) 用作药剂的克锐普威灵及其合成衍生物
Wang et al. New spin labeled analogues of podophyllotoxin as potential antitumor agents

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20100331

Termination date: 20100714