CN101095800A - 一种用于治疗口腔溃疡的贴片的研制 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种以飞龙掌血、龙血竭、蜂胶、冰片为原料制备的用于治疗口腔溃疡的贴片，本发明还涉及该贴片的制备方法。
Description
技术领域
本项发明涉及一种由飞龙掌血、龙血竭、蜂胶和冰片制成的复方药物制剂在医药领域中的应用。
背景技术
口腔溃疡是指口腔黏膜局限性溃疡损害，是口腔黏膜病中最常见的一种病，发病率高且极易复发，普通感冒、消化不良、精神紧张、郁闷均能引发此病。该病好发于口腔黏膜角化程度较差的部位，其病因目前尚未得到充分证实。据认为，与微生物感染、精神神经因素、消化系统疾病、内分泌功能紊乱、遗传、维生素和微量元素缺乏等有关。近年来，口腔溃疡常选用的药物有消炎药物(甲硝唑、替硝唑等)、皮质激素类药物(强的松、地塞米松等)、局部止痛药(达克罗宁、丁卡因等)和促进溃疡愈合的药物(维生素E、鱼肝油等)，但由于本病病因复杂，发病机理不清楚，虽然有多种治疗方法，但迄今为止，还没有特效治疗药物。
治疗口腔溃疡的传统的给药载体多为普通口服制剂(如甲硝唑片)，其给药的弊病主要是给药剂量大、疗程长，常伴有不良反应发生，局部血药浓度低，药物生物利用度差；或者为局部喷雾、冲洗、含片、含漱消毒药物，这些方法的缺隐是未考虑口腔环境的特殊性，药物容易流失，维持时间不长，致使药物疗效发挥不理想；凝胶剂(如羟丙基纤维素)，凝胶剂多通过形成粘附性封闭薄膜、覆盖溃疡面达到治疗的目的，因此需要涂敷于患处后待其形成薄膜，故常含有乙醇等成分，对溃疡面有较强的刺激作用，用药也不方便。
本发明设计为双层片剂，一面为含有药物的粘贴层，另一面为无药物的不粘层，延缓药物在口腔内的溶解，减轻药物的苦味，防止药物的双层粘附造成的不适感，同时增加药物在溃疡部位的作用时间，从而提高局部药物的疗效。
发明内容
飞龙掌血(Toddalia asiatica Lam.)是芸香科植物飞龙掌血属植物飞龙掌血的根或根皮，为贵州苗族用药，据报道，该药的主要成分为生物碱类(白屈菜红碱、二氢白屈菜红碱等)、三萜酸类、香豆素类(茴芹香豆素、异茴芹香豆素等)和飞龙掌血素等，具有显著的抗炎、止血、止痛作用。
血竭为传统名贵中药，有“活血之圣药”的美誉。历史上血竭主要来源是生长于非洲的龙舌兰科、龙血树属植物分泌的树脂，称为“非洲血竭”或“麒麟竭”。70年代后，我国医药学工作者在云南、广西和海南发现了与“非洲血竭”植物资源相近的剑叶龙血树，从而研制出国产血竭。1990年广西药学工作者将国产血竭开发成我国的中药一类新药，命名为“广西血竭”。1999年“广西血竭”的新药试行标准转为正式标准，定名为“龙血竭”。龙血竭主要含有黄酮类、皂苷类、茋类、酚类、有机酸类、酯类和挥发油等成分，具有抗炎、镇痛、活血、止血、抗细菌、真菌、改变血液流变学等药理作用。
蜂胶是蜜蜂从植物的新生枝条、叶、芽或树皮等组织上采集的树脂状分泌物，附在后足飞回蜂巢，巢中的其他蜜蜂接过此脂，继续咬嚼，混入蜂蜡和唾液分泌物中的酶而成的一种粘胶物质。蜜蜂用蜂胶加固巢脾，填补蜂巢缝隙与孔洞，密封已被螫死而不能清除出巢外的敌害防止其腐败。蜂胶的成分比较复杂，已鉴定出300多种化合物，其中黄酮类化合物71个，芳香酸与芳香酸脂类化合物95个，氨基酸25个，醛与酮类化合物17个，脂肪酸与脂肪酸酯50个，萜类化合物19个，甾体化合物6个，糖类化合物9个，烃类化合物25个，醇、酚类和其他化合物24个。还有多种维生素和30多种常量和微量元素等。蜂胶是植物药用成分的高度浓缩物，它所含的药用成分之多，浓度之高是药用植物无法相比的。因而具有多种药理作用，已引起众多国内外学者的重视和关注，并成功地在临床上应用于多种疾病的防治，被誉为“天然药物”。研究表明，蜂胶具有显著的免疫增强作用、抗菌、抗病毒作用和局部麻醉作用等功效。
冰片为通窍、散火、去翳明目、消肿止痛之药。药理研究表明，冰片具有促进人体对药物的吸收作用(包括促进药物的透皮吸收、促进药物透过血脑屏障、提高血药浓度等作用)，此外，冰片还具有抗菌、抗炎、镇痛作用。
目前市面上治疗口腔溃疡的制剂载体如膜剂、散剂等多数存在着药物作用时间短，局部药物浓度低等不足，为此我们拟将本品制成双层贴片，提取飞龙掌血中的活性成分，并与龙血竭、蜂胶、冰片微粉化后制成固体分散体，以提高其溶出和释放。
一、飞龙掌血提取物的制备
根据相关文献及药理试验初试结果，制订出飞龙掌血的提取工艺：采用水或醇/水混合溶媒溶媒提取(优选乙醇，醇浓度可以选择介于20～95％)，提取方法优选热回流，提取次数为2～4次，每次30～90min；合并醇/水提取液，浓缩蒸干得到提取物。
二、原料的微粉化处理
物料经微粉化处理后，可以极大的提高其比表面积，增加与溶媒的接触面积，从而提高其溶出速度。
采用目前较常用的方法(如高速气流粉碎机、气流涡旋微粉机、气流微粉磨以及球磨机等)，将飞龙掌血提取物、龙血竭、蜂胶、冰片混匀后加入粉碎机中粉碎1～2小时，通过120目～200目筛，得到微粉化原料。
在原料微粒化过程当中，加入适量的微粉硅胶能改善物料的分散性和流动性，此外，加入适量的表面活性剂(羟甲基纤维素钠、聚乙烯醇、聚维酮、十二烷基硫酸钠、果胶酸钠等)，有助于降低颗粒间的静电作用，减少颗粒聚集，并提高制剂的溶出、释放。
三、固体分散体的制备
固体分散体是指药物以微粒、微晶或分子状态等均匀分散于某一固体载体物质中的体系。将药物制成固体分散体后可以增加一些难溶性药物的溶解度和溶出速率。
采用常规的方法(表面分散法、熔融溶剂法、溶剂法等)制备固体分散体，载体有聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧乙烯、波洛沙姆、聚氧乙烯40硬脂酸酯等。将上述微粉化原料与载体加入适量的乙醇中，研磨，使分散均匀后，喷雾干燥，即得。
四、口腔粘贴片处方筛选和制备工艺
分别以吸水性和腐蚀度、生物黏附性能、释放度为考察指标，对本品的处方进行筛选。
本品为口腔粘贴片，在口腔环境中的吸水性和腐蚀度是其重要的性能指标，因此我们参考文献(Journal of Pharmarceutical Sciences，2004，93(12)：2927～2935)的试验方法对本品的吸水性和腐蚀度进行考察。取缓冲液(精密称取8.88g NaH2PO4·H2O和12.71g Na2HPO4，用去离子水稀释并溶解制成1000ml，调节pH至6.5)6ml置于20ml西林瓶中，取本品1片粘贴于一个瓶底，平行24份。将西林瓶置于37℃恒温水浴的振荡器中(75rpm)，分别于1、2、3、4、5、6、7、8小时各取三瓶，用滤纸将片表面吸干，称重，然后将片置于60℃干燥24小时，取出，称重。分别以吸水重、干燥剩余重为纵坐标，时间为横坐标作吸水和腐蚀曲线。
黏附时间：以与口腔粘膜相似的材料测定本品的黏附时间，测定方法参照文献方法(Journal Of Pharmaceutical Sciences.2004，93：2927～2935)。
释放度：将片贴于20ml西林瓶底部，加入4ml模拟唾液(磷酸盐缓冲液)，将西林瓶置于37℃恒温水浴的振荡器中(75rpm)，分别于0.5、1、2、3、4、5、6、7、8小时取出缓冲液并用4ml新缓冲液替换，测定被替换液中飞龙掌血素，龙血素A、B，白杨素，高良姜素的含量。
制剂处方：
黏附层处方：
飞龙掌 10g 蜂胶 15g
龙血竭 20g 冰片 2g
十二烷基硫酸钠 1g 聚乙二醇 50g
糊精 60g 卡波普 40g
硬脂酸镁 1g
制成 1000片
保护层处方：
丙烯酸树脂 4.8g 邻苯二甲酸二辛酯 1.2g
二氧化肽 1.2g 黄色素0.8g
制成 1000片
制法：取处方中的飞龙掌血药材，用75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并醇提液，减压浓缩至干，加入处方中的蜂胶、血竭、冰片及十二烷基硫酸钠，混合均匀，用气流粉碎机粉碎并通过200目筛，将之与聚乙二醇加入95％乙醇500ml中，研磨均匀，喷雾干燥，得固体分散体。取上述固体分散体用20ml 95％乙醇研磨后，加入到过100目的糊精中，充分混合均匀，制粒，然后烘干整粒，加入卡波普与硬脂酸镁，充分混合均匀，10mm冲头压片，每片重约200mg。将丙稀酸树脂用95％乙醇95ml溶解后，加入处方量得邻苯二甲酸二辛酯、二氧化肽、黄色素研磨均匀，用喷膜机均匀喷于药片表面，经干燥后，形成了片剂的保护层，即得。
按照上述处方制得的口腔粘贴片各项质量指标如下：
吸水性与腐蚀度：
吸水曲线见图1
腐蚀曲线见图2
结果表明，本品置于磷酸盐缓冲液中时，迅速吸水溶涨，并在5小时时达到最重，随后片渐渐溶蚀出小颗粒，片重逐渐下降，直至8小时基本溶蚀完全。
黏附时间：56分钟
释放度：
口腔粘贴片各指标成分释放度随时间变化表
| 时间(h) | 释放度 | ||||||||
| 0.5 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | |
| 飞龙掌血素 | 11.5％ | 23.0％ | 40.7％ | 50.4％ | 61.3％ | 76.8％ | 85.1％ | 97.2％ | 97.0％ |
| 龙血素A | 9.8％ | 23.5％ | 41.1％ | 50.3％ | 60.2％ | 77.1％ | 88.3％ | 94.6％ | 95.1％ |
| 龙血素B | 10.7％ | 22.4％ | 40.5％ | 52.4％ | 64.8％ | 79.7％ | 89.9％ | 99.6％ | 99.7％ |
| 白杨素 | 9.9％ | 18.2％ | 34.5％ | 48.1％ | 57.2％ | 67.3％ | 75.8％ | 83.4％ | 85.4％ |
| 高良姜素 | 9.3％ | 17.6％ | 33.8％ | 46.6％ | 55.9％ | 65.4％ | 74.1％ | 81.1％ | 83.3％ |
释放曲线见图3
结果表明，本品在模拟口腔环境中能平稳释放，到7小时时释放度达到90％以上。
五、口腔粘贴片疗效评价
1、对免疫法所致家兔口腔溃疡模型的治疗作用
模型建立：取家兔50只，应用家兔的口腔粘膜、心脏、肝脏组织及提取的口腔粘膜蛋白质分别作为抗原，通过免疫注射的方法，诱导家兔产生口腔粘膜病损(临床口腔医学杂志，2004，20(1)：53～54)。随机分为5组，每组10只，即：
(1)口腔粘贴片组：给予由上述制备工艺制得的口腔粘贴片。
(2)口腔膜剂组：给予由相同处方量的飞龙掌血等原料，以相同方法制成固体分散体后，制成口腔膜剂。
(3)阳性对照组I：给予醋酸地塞米松贴片
(4)阳性对照组II：给予甲硝唑贴片
(5)模型组：给予空白辅料制成的贴片(不含任何药物)。
连续给药5天，给药前及每次给药后次日观察溃疡面积的大小(mm2)。
对免疫法所致家兔口腔溃疡面积的影响
| 组别 | 溃疡面积(mm2) | |||||
| 0天 | 1天 | 2天 | 3天 | 4天 | 5天 | |
| 模型组 | 29.2±3.0 | 26.3±2.5 | 22.4±2.1 | 18.3±2.7 | 16.7±2.1 | 14.6±2.2 |
| 醋酸地塞米松贴片组 | 29.4±3.2 | 20.1±2.1* | 14.7±2.6* | 9.2±2.5* | 5.3±1.4** | 3.6±1.3** |
| 甲硝唑贴片组 | 29.8±3.2 | 24.6±2.4 | 19.9±2.3 | 15.7±3.0 | 14.2±2.0 | 11.6±1.8 |
| 口腔粘贴片组 | 30.2±2.9 | 18.4±2.0** | 10.3±1.9** | 5.3±1.7** | 2.0±0.5** | 0.8±0.3** |
| 口腔膜剂组 | 29.1±2.8 | 21.1±2.4* | 15.6±1.5* | 11.4±2.9* | 9.4±1.2** | 7.7±1.0** |
注：*P＜0.05，**P＜0.01与模型组比较
结果表明，本品制成的口腔粘贴片对上述口腔溃疡模型具有显著的治疗效果，优于该处方制成的膜剂，这可能与本品的在创面较长的作用时间有关；本品制成的贴片疗效优于醋酸地塞米松的治疗效果。
2、对醋酸所致的豚鼠口腔溃疡的治疗作用
模型建立：取健康豚鼠50只，分别自豚鼠面颊部左侧进针至面颊粘膜下，注射10％醋酸0.05ml/只，造成口腔溃疡模型(山东中医杂志，2003，22(9)：563～565)，24小时后随机分组为5组，每组10只，即：
(1)口腔粘贴片组：给予由上述制备工艺制得的口腔粘贴片。
(2)口腔膜剂组：给予由相同处方量的飞龙掌血等原料，以相同方法制成固体分散体后，制成口腔膜剂。
(3)阳性对照组I：给予醋酸地塞米松贴片
(4)阳性对照组II：给予甲硝唑贴片
(5)模型组：给予空白辅料制成的贴片(不含任何药物)。
连续给药5天，给药前及每次给药后次日观察溃疡面积的大小(mm2)。
对醋酸所致的豚鼠口腔溃疡面积的影响
| 组别 | 溃疡面积(mm2) | |||||
| 0天 | 1天 | 2天 | 3天 | 4天 | 5天 | |
| 模型组 | 34.2±4.2 | 33.3±3.9 | 25.2±3.3 | 20.4±3.6 | 19.3±3.2 | 15.5±2.9 |
| 醋酸地塞米松贴片组 | 33.9±3.8 | 22.1±3.4* | 17.9±3.1** | 10.9±2.1** | 5.6±1.1** | 4.0±0.9** |
| 甲硝唑贴片组 | 33.8±3.2 | 27.6±3.5 | 24.6±3.5 | 18.7±2.7 | 14.9±1.4 | 14.2±1.6 |
| 口腔粘贴片组 | 34.2±4.1 | 22.7±3.6* | 14.9±2.9** | 7.6±1.3** | 4.4±0.8** | 3.0±0.4** |
| 口腔膜剂组 | 34.1±3.7 | 22.6±3.8* | 16.5±3.2** | 14.6±2.0* | 10.2±1.1** | 8.3±1.2* |
注：*P＜0.05，**P＜0.01与模型组比较
结果表明，本品制成的口腔粘贴片可明显减少醋酸所致豚鼠口腔溃疡面积，促进溃疡面的愈合，其疗效优于该处方制成的膜剂组，与醋酸地塞米松组治疗效果相当。
具体实施方式
实施实例一：
制备飞龙掌血等药材制成的口腔粘贴片，每片重200mg，配方如下：
飞龙掌血 10mg 蜂胶 15mg
龙血竭 20mg 冰片 2mg
十二烷基硫酸钠 1mg 聚乙二醇 50mg
糊精 60mg 卡波普 40mg
硬脂酸镁 1mg
丙烯酸树脂 4.8mg 邻苯二甲酸二辛酯 1.2mg
二氧化肽 1.2mg 黄色素 0.8mg
制法：取处方中的飞龙掌血药材，用75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并醇提液，减压浓缩至干，加入处方中的蜂胶、血竭、冰片及十二烷基硫酸钠，混合均匀，用气流粉碎机粉碎并通过200目筛，将之与聚乙二醇加入95％乙醇中，研磨均匀，喷雾干燥，得固体分散体。取上述固体分散体用适量95％乙醇研磨后，加入到过100目的糊精中，充分混合均匀，制粒，然后烘干整粒，加入卡波普与硬脂酸镁，充分混合均匀，10mm冲头压片，即得。
将丙稀酸树脂用95％乙醇溶解后，加入处方量得邻苯二甲酸二辛酯、二氧化肽、黄色素研磨均匀，用喷膜机均匀喷于药片表面，经干燥后，形成片剂的保护层。
实施实例二：
制备飞龙掌血等药材制成的口腔粘贴片，每片重200mg，配方如下：
飞龙掌血 15mg 蜂胶 17mg
龙血竭 10mg 冰片 5mg
羧甲基纤维素钠 1mg 聚乙烯吡咯烷酮 50mg
糊精 60mg 卡波普 40mg
微粉硅胶 2mg
丙烯酸树脂 4.8mg 邻苯二甲酸二辛酯 1.2mg
二氧化肽 1.2mg 黄色素 0.8mg
制法：取处方中的飞龙掌血药材，用75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并醇提液，减压浓缩至干，加入处方中的蜂胶、血竭、冰片及羧甲基纤维素钠和1/2量的微粉硅胶，混合均匀，用气流粉碎机粉碎并通过200目筛，将之与聚乙二醇加入95％乙醇中，研磨均匀，喷雾干燥，得固体分散体。取上述固体分散体用适量95％乙醇研磨后，加入到过100目的糊精中，充分混合均匀，制粒，然后烘干整粒，加入卡波普与微粉硅胶，充分混合均匀，10mm冲头压片，即得。
将丙稀酸树脂用95％乙醇溶解后，加入处方量得邻苯二甲酸二辛酯、二氧化肽、黄色素研磨均匀，用喷膜机均匀喷于药片表面，经干燥后，形成片剂的保护层。
实施实例三：
制备飞龙掌血等药材制成的口腔膜剂，
飞龙掌血 10mg 蜂胶 15mg
龙血竭 20mg 冰片 2mg
十二烷基硫酸钠 1mg 羧甲基纤维素 100mg
聚乙烯醇 50mg
取处方中的飞龙掌血药材，用75％乙醇回流提取2次，每次1小时，合并醇提液，减压浓缩至干，加入处方中的蜂胶、血竭、冰片及十二烷基硫酸钠，混合均匀，用气流粉碎机粉碎并通过200目筛，将之与聚乙二醇加入95％乙醇中，研磨均匀，喷雾干燥，得固体分散体。取上述固体分散体，与羧甲基纤维素、聚乙烯醇，加入75％乙醇适量，研磨均匀，用铺板器铺制成口腔溃疡药膜，即得。
Claims (7)
1、一种用于治疗口腔溃疡的贴片，该片剂分为两层，含药的黏附层和惰性材料制成的保护层，其特征是：主要由飞龙掌血、龙血竭、蜂胶和冰片组成，并至少含有一种药学上可以接受的成形剂。
2、根据权利要求1所述的贴片，其特征在于：其中原料药的重量份组成：飞龙掌血1～5份、龙血竭1～5份、蜂胶1～5份、冰片0.5～2份。
3、根据权利要求1所述的贴片，其特征在于：含药的黏附层的成形剂包括：微晶纤维素、淀粉、糊精、甘露醇、乳糖、羟甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、卡波普、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、天然胶、聚丙稀酸、聚甲基丙烯酸、十二烷基硫酸钠、羧甲基纤维素钠、微粉硅胶、硬脂酸镁中的一种或几种。
4、根据权利要求1所述的贴片，其特征在于：惰性材料层由乙基纤维素、醋酸纤维素、聚丙稀树脂、邻苯二甲酸二辛酯、二氧化肽、色素中的一种或几种组成。
5、根据权利要求1所述的贴片，其特征在于：原料药或者原料药经提取制成的浸膏采用下述任一种方法进行处理：
(1)取原料药或其提取物，适当方法进行微粒化处理。
(2)取原料药或其提取物与适宜载体材料制成固体分散体，载体材料优选聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧乙烯、波洛沙姆、聚氧乙烯40硬脂酸酯中的一种或几种。
6、根据权利要求1所述的贴片的制备方法，其特征在于：将原料药用一定的溶剂提取成浸膏或直接粉碎后，加入成形剂，混匀，压片，再将含有惰性材料层组分的溶液喷涂于药片表面。
7、一种含有飞龙掌血、龙血竭、蜂胶和冰片的中药口腔粘贴片在口腔溃疡防治中的应用。
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