CN101077078A - 一种板栗菌根制剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种板栗菌根制剂，它是由须腹菌属(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)共同培养制得的菌根制剂。它可增强板栗根系对肥水的吸收能力，扩大吸收面积，还可分解土壤中难以分解的养分，土壤干旱时，苗木萎蔫推迟，增强抗旱力；同时，菌根还能分泌激素和有机酸，增进根系的生理活性。
Description
技术领域
本发明涉及一种板栗菌根制剂及其制备方法。
背景技术
板栗是我国的特色果树之一，是出口创汇的传统产品。板栗生长分布在土壤瘠薄的山地。干旱和营养不足是限制板栗生产的主要因素。
如在燕山山区和太行山区，栽植板栗是开发荒山，保持水土的有效途径。然而这些山区自然条件相对较差：土层干旱瘠薄。而板栗幼苗对肥水的吸收能力较差，愈伤能力也较弱，生产上一般用2年生以上大苗栽植，育苗周期长，成本高。
发明内容
本发明需要解决的技术问题就在于克服现有板栗生产技术中的缺陷，提供一种板栗菌根制剂及其制备方法，本发明板栗菌根制剂可增强板栗根系对肥水的吸收能力，扩大吸收面积，还可分解土壤中难以分解的养分，土壤干旱时，苗木萎蔫推迟，增强抗旱力；同时，菌根还能分泌激素和有机酸，增进根系的生理活性。
为解决上述问题，本发明采用如下技术方案：
本发明一种板栗菌根制剂，它是由须腹菌属(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)共同培养制得的菌剂制剂。
本发明所述制剂可以为液体菌剂或固体菌剂。
本发明同时提供了一种制备所述的板栗菌根制剂的方法，它包括菌种的选择、菌种的培养和制剂的制备步骤。
本发明所述菌种的选择为选择分离自怀柔渤海板栗林、与板栗共生的外生菌根真菌须腹菌属(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletusedulis)。
本发明所述菌种培养的具体步骤为：
1)菌种活化：从菌种须腹菌属(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)上挑取少量菌丝接到PDA平板培养基上进行活化，活化条件：25℃，暗培养3-5天，菌丝生长到培养皿直径的1/2-1/3时即可；其中PDA培养基为：马铃薯150-250g、葡萄糖15-25g、琼脂15-20g、蒸馏水1000ml；
2)液体发酵培养：从平板培养基挑取少量已活化的菌丝，接种到液体培养瓶中，培养基为PDA或ODA，培养条件：温度25℃，pH5左右，振荡培养5-7天，菌丝生长成为菌丝球；
其中，PDA液体培养基为：马铃薯150-250g、葡萄糖15-25g、琼脂15-20g、蒸馏水1000ml；
ODA液体培养基为：甘蓝80-120g、1-5％的葡萄糖、0.05％的维生素B1、蒸馏水1000ml。
本发明所述制剂的制备为将所述制剂制备成液体菌剂或固体菌剂。所述液体菌剂的制备为将液体发酵培养的菌丝球与菌液均浆，制成液体悬浮液。所述固体菌剂的制备为将液体发酵培养的菌丝球与菌液均浆后，加3倍重量灭菌的草炭或蛭石混匀得固体菌剂。
板栗和本发明菌根制剂共生可以促进植株生长，提高抗旱性，增加树体营养水平，提高树体抗病性。
本发明板栗菌根制剂可增强根系对肥水的吸收能力，扩大吸收面积，还可分解土壤中难以分解的养分，当土壤含水量达到萎蔫系数时，菌根还能吸水，促进栗根生长；同时，菌根还能分泌激素和有机酸，增进根系的生理活性。
本发明板栗菌根制剂的应用有两种途径：浸种和浸根。
浸种：用于播种育苗或直播造林。把菌根制剂和粘着剂放入水中，菌根制剂与水的比例为1∶50，搅拌均匀，然后将种子倒入其中搅拌，使种子表面均匀附着菌根制剂液，捞出即可播种。也可按1粒种0.5-1克菌根制剂的比例直播。
浸根：把板栗苗根放入稀释50倍的板栗菌根制剂液中浸根，使根系均匀附着菌根制剂液即可栽植。此法可用1年生苗木栽植，生长发育良好，大大缩短了育苗年限和成本。
本发明固体菌剂还可直接撒施在育苗床表面或播种沟底部；也可将液体菌根制剂或固体菌剂与种子按1∶5-10的比例混合均匀后播种；也可直接在容器袋内穴施，每株0.5～1.0ml液体菌剂；或移苗蘸根：1升液体菌根制剂+5Kg水+黄粘土成浆后蘸根。
本发明板栗菌根制剂含有与板栗有良好共生关系的高效菌，应用本发明菌根制剂可提高苗木生长量30％以上。提高苗木抗旱性。干旱处理后萎蔫发生迟0.5-2天，且萎蔫系数小。提高干旱山地苗木定植成活率，并缩短缓苗时间。扩大根系吸收面积，提高根系吸收能力，分泌有机酸等，活化土壤中难溶性养分。增加植株对N、P、K及微量元素的吸收量。提高树体营养水平。菌根真菌分泌抗生素类物质，抵抗土传真菌病害发生。菌根接种技术成熟，易于操作，可显著提高板栗生长水平。
本发明所述须腹菌属可选择山西根须腹菌、红根须腹菌、黑根须腹菌或浅黄根须腹菌。
本发明所选的美味牛肝菌(Boletus edulis)是常见于松属和栎属林地上的一种大型食用菌，其基部地下菌丝体与树木共生形成菌根。属牛菌科(Boletaceae)牛肝菌属。学名Boletus edulis Bull.ex Fr.，别名白牛肝、大脚菇等。子实体单生或群生，多生于朝阳山坡林下，土壤为贫瘠的酸性砂壤。每年八、九月份，气温20℃以上，空气相对湿度80％左右时为盛产期。每100g干品含粗蛋白质30g、脂肪1g、碳水化合物60g和多种氨基酸。
美味牛肝菌初期球状或半球状，菌盖表面平滑、不粘，盖宽8-15cm，灰白色、淡褐色、黄褐色至栗褐色；菌肉厚，白色无特殊气味，味道平淡，受伤时不变色；柄近圆柱形，高3-23cm，直3-7cm，基部膨大，色较盖浅，外表具凸出的网纹；菌管白色至淡黄色，近柄处凹陷，管口小，每毫米2-3个；孢子淡黄色，近透明，长椭圆形，11-16×4-5μ，内含1-3个油滴。
具体实施方式
实施例1
1、菌种的选择：选择分离自怀柔渤海板栗林、与板栗共生的外生菌根真菌须腹菌属(Rhizopogon)的山西根须腹菌和美味牛肝菌(Boletus edulis)。
2、菌种培养：
1)菌种活化：用灭菌的接种针从斜面培养的菌种山西根须腹菌和美味牛肝菌上挑取少量菌丝接到PDA平板培养基上进行活化。活化条件：25℃，暗培养3天，菌丝生长到培养皿直径的1/3时即可。其中PDA培养基为：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g，蒸馏水1000ml。
2)液体发酵培养：用灭菌的接种针从平板培养基挑取少量已活化的菌丝，接种到液体培养瓶中，培养基为PDA或ODA。培养条件：温度25℃，pH 5左右，振荡培养5天，菌丝生长成为菌丝球为宜。
PDA液体培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂18g、蒸馏水1000ml
ODA液体培养基：甘蓝100g、3％的葡萄糖、0.05％的维生素B1、蒸馏水1000ml
3、制备成液体菌剂：将液体发酵培养的菌丝球与菌液均浆，制成液体悬浮液。
实施例2
1、菌种的选择：选择分离自怀柔渤海板栗林、与板栗共生的外生菌根真菌须腹菌属(Rhizopogon)的红根须腹菌和美味牛肝菌(Boletus edulis)。
2、菌种培养：
1)菌种活化：用灭菌的接种针从斜面培养的菌种红根须腹菌和美味牛肝菌上挑取少量菌丝接到PDA平板培养基上进行活化。活化条件：25℃，暗培养5天，菌丝生长到培养皿直径的1/2时即可。其中PDA培养基为：马铃薯150g、葡萄糖25g、琼脂20g、蒸馏水1000ml。
2)液体发酵培养：用灭菌的接种针从平板培养基挑取少量已活化的菌丝，接种到液体培养瓶中，培养基为PDA或ODA。培养条件：温度25℃，pH 5左右，振荡培养7天，菌丝生长成为菌丝球为宜。
其中，PDA液体培养基为：马铃薯150g、葡萄糖25g、琼脂20g、蒸馏水1000ml；
ODA液体培养基为：甘蓝80g、1％的葡萄糖、0.05％的维生素B1、蒸馏水1000ml。
3、制备成固体菌剂：将液体发酵培养的菌丝球与菌液均浆后，加3倍重量灭菌的草炭混匀得固体菌剂。
实施例3
1、菌种的选择：选择分离自怀柔渤海板栗林、与板栗共生的外生菌根真菌须腹菌属(Rhizopogon)的黑根须腹菌和美味牛肝菌(Boletus edulis)。
2、菌种培养：
1)菌种活化：用灭菌的接种针从斜面培养的菌种黑根须腹菌和美味牛肝菌上挑取少量菌丝接到PDA平板培养基上进行活化。活化条件：25℃，暗培养4天，菌丝生长到培养皿直径的1/3时即可。其中PDA培养基为：马铃薯250g、葡萄糖15g、琼脂15g、蒸馏水1000ml。
2)液体发酵培养：用灭菌的接种针从平板培养基挑取少量已活化的菌丝，接种到液体培养瓶中，培养基为PDA或ODA。培养条件：
温度25℃，pH 5左右，振荡培养6天，菌丝生长成为菌丝球为宜。
其中，PDA液体培养基为：马铃薯250g、葡萄糖15g、琼脂15g、蒸馏水1000ml；
ODA液体培养基为：甘蓝120g、5％的葡萄糖、0.05％的维生素B1、蒸馏水1000ml。
3、制备成固体菌剂：将液体发酵培养的菌丝球与菌液均浆后，加3倍重量灭菌的蛭石混匀得固体菌剂。
实施例4
浸种：用于播种育苗或直播造林。把实施例1-3制备的任一板栗菌根制剂和粘着剂放入水中，菌根制剂与水的比例为1∶50，搅拌均匀，然后将种子倒入其中搅拌，使种子表面均匀附着菌根制剂液，捞出即可播种。也可按1粒种0.5-1克菌根制剂的比例直播。
实施例5
浸根：板栗苗根放入稀释50倍的实施例1-3制备的任一板栗菌根制剂液中浸根，使根系均匀附着菌根制剂液即可栽植。此法可用1年生苗木栽植，生长发育良好，大大缩短了育苗年限和成本。
实施例6试验例
应用本发明实施例1-3制备的板栗菌根制剂的板栗，根的生物量与对照组相比增加26％，茎叶生物量增加30％以上。
表1接种本发明实施例1-3制备的菌根制剂对板栗生物量的影响
| 接种处理 | 根 | 茎 | 叶 |
| 对照接种 | 4.996.29接种后增加26％ | 6.076.60接种后增加8.7％ | 5.516.94接种后增加25％ |
本发明板栗菌根制剂能够促进根系对磷元素的吸收，本发明板栗菌根制剂对促进磷吸收的贡献率达39.3-53.7％。
表2外生菌根对板栗吸收P的影响
| 施P水平(ppm) | 接种处理 | 根茎叶吸P总量mg/pot | 菌丝贡献率(％) |
| 050100 | 对照接种对照接种对照接种 | 13.9830.1818.0336.1334.9441.28 | 053.7050.1039.3 |
菌丝贡献率(％)＝{(菌根植物吸P量-非菌根植物吸P量)/菌根植物吸P量}×100％
对照组为未施加菌根制剂的非菌根组。
本发明板栗菌根制剂能够提高苗木抗旱性。干旱处理后萎蔫发生迟0.5-2天，且萎蔫系数小。
利用聚乙二醇脱水处理板栗菌根苗和非菌根苗，8小时后对照出现暂时萎蔫，相对含水量为76.4％，在非菌根苗出现暂时萎蔫12小时后菌根苗才出现暂时萎蔫，且接种菌根的叶片相对含水量下降较为平缓，萎蔫时相对含水量较低，为72.0％，萎蔫系数小。
本发明板栗菌根制剂能够提高干旱地苗木定植成活率，并缩短缓苗时间。
本发明不局限于上述最佳实施方式，任何人在本发明的启示下得出的其他任何与本发明相同或相近似的产品，均落在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1、一种板栗菌根制剂，其特征在于它是由须腹菌属(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)共同培养制得的菌根制剂。
2、如权利要求1所述的板栗菌根制剂，其特征在于所述制剂为液体菌剂或固体菌剂。
3、一种制备如权利要求1所述的板栗菌根制剂的方法，其特征在于它包括菌种的选择、菌种的培养和制剂的制备步骤。
4、如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述菌种的选择为选择分离自怀柔渤海板栗林、与板栗共生的外生菌根真菌须腹菌属(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)。
5、如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述菌种培养的具体步骤为：
1)菌种活化：从菌种须腹菌属(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletusedulis)上挑取少量菌丝接到PDA平板培养基上进行活化，活化条件：25℃，暗培养3-5天，菌丝生长到培养皿直径的1/2-1/3时即可；其中PDA培养基为：马铃薯150-250g、葡萄糖15-25g、琼脂15-20g、蒸馏水1000ml；
2)液体发酵培养：从平板培养基挑取少量已活化的菌丝，接种到液体培养瓶中，培养基为PDA或ODA，培养条件：温度25℃，pH5左右，振荡培养5-7天，菌丝生长成为菌丝球；
其中，PDA液体培养基为：马铃薯150-250g、葡萄糖15-25g、琼脂15-20g蒸馏水1000ml；
ODA液体培养基为：甘蓝80-120g、1-5％的葡萄糖、0.05％的维生素B1、蒸馏水1000ml。
6、如权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述制剂的制备为将所述制剂制备成液体菌剂或固体菌剂。
7、如权利要求6所述的制备方法，其特征在于：所述液体菌剂的制备为将液体发酵培养的菌丝球与菌液均浆，制成液体悬浮液。
8、如权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述固体菌剂的制备为将液体发酵培养的菌丝球与菌液均浆后，加3倍重量灭菌的草炭或蛭石混匀得固体菌剂。
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