CN101044864A - 利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法 - Google Patents
利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN101044864A CN101044864A CN 200710061668 CN200710061668A CN101044864A CN 101044864 A CN101044864 A CN 101044864A CN 200710061668 CN200710061668 CN 200710061668 CN 200710061668 A CN200710061668 A CN 200710061668A CN 101044864 A CN101044864 A CN 101044864A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- gram
- trichoderma
- powder
- liquid
- wettable powder
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Cultivation Of Plants (AREA)
Abstract
一种利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，属农用微生物杀菌剂技术领域，用于解决提高制备效率和产品性能的问题。其技术方案是，它以玉米秸杆粉为原料经原料加工、液体发酵、固体发酵、可湿性粉剂的制备等步骤制成，其中，在固体发酵时添加柿叶提取物促使木霉菌生物量大幅提高，并将固体发酵物添加WLNPK、D500、润湿剂、填料等直接粉碎，省去了了固体发酵物木霉分生孢子收集的繁复工序。本发明提高了利用玉米秸秆制备木霉菌的生产效率，使该项技术更便于推广应用。本发明对人畜和生态环境无害，无残留，不产生抗药性，生产成本低于化学农药多菌灵，速克灵等，还可以变废为宝，具有很好的经济效益和社会效益。
Description
技术领域
本发明涉及一种农用生物杀菌剂，特别是利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，属农用微生物杀菌剂技术领域。
背景技术
在一个农业生产大国内，每年收获农作物后的秸杆可高达上亿吨，这是一项可回收利用的珍贵资源。中国专利200510012912.1公开过一种以玉米秸秆为原料生产木霉生物杀菌剂的制备方法，该方法改变制备木霉杀菌剂需要使用玉米粉、糖蜜、麦麸等价格较贵的原料的状况，利用秸杆等廉价原料制备木霉杀菌剂，既可以变废为宝解决秸杆利用问题，又可以使用低价环保的木霉杀菌剂防治病害，收到了较好的社会效益和经济效益。但是这种方法存有下列不足之处：1.在固体发酵阶段木霉分生孢子的产孢量较低，2.固体发酵物木霉分生孢子收集的工序繁复，上述问题制约了木霉素高效生产，也影响到该方法的广泛推广，故有待于进一步改进。
发明内容
本发明用于解决上述已有技术之缺陷而提供一种利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，该方法可以大幅度增加固体发酵时木霉分生孢子生成量，该方法还省去了木霉分生孢子收集的繁复工序。
本发明所称问题是通过以下技术方案解决的：
一种利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，其特别之处是，它以玉米秸杆粉为原料按照如下步骤制备：
a.原料加工：选择无霉变玉米秸秆，粉碎成20目粉状备用；
b.液体发酵：培养基成分：麸皮0.5-0.8克，(NH4)2SO4 0.2-0.4克，KH2PO4 0.1-0.3克，CaCO3 0.1-0.3克，葡萄糖1-3克，以上述物质配制液体发酵培养基100毫升，调整液体的PH值为5.5-6，高压灭菌30-40分钟，待物料冷却后接入筛选好的拮抗性木霉菌种，于26-28℃振荡培养36-48小时，停止培养备用；
c.固体发酵：取粉碎好的玉米秸秆粉8-10克，(NH4)2SO4 0.12-0.14克，MgSO4 0.002-0.004克，KH2PO4 0.004-0.006克，柿叶提取物0.004-0.005克，其中，柿叶提取物先用5毫升酒精溶解，把上述物质加200毫升水溶解，再放入玉米秸秆粉，搅拌均匀，盖好瓶塞，高压灭菌30-40分钟，待物料冷却后接入步骤b的1-2毫升液体培养液，搅拌均匀，放于28℃的恒温培养箱中，保持湿度65～85％进行固体培养96小时，培养好的固体发酵物料在不高于40℃环境中干燥后备用；
d.可湿性粉剂的制备：把风干好的固体发酵物40-50克，WLNPK2-3克，D5001-2克，润湿剂3-4克，填料(硅藻土)40-50克用气流粉碎机粉碎至325目，再用混合设备充分混合均匀，即制备木霉菌可湿性粉剂。
上述利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，所述柿叶提取物的提取工艺如下：把干燥无霉变的柿子叶15-20克放入1000毫升两口瓶中，一口连接冷凝器回收酒精，一口接温度计，加入30％的酒精液700-800毫升，使液面超过物料，然后加热到70-80℃提取2-3小时，倒出提取过的柿叶，把提取液过滤，然后用蒸发器蒸发，回收酒精，再把蒸发剩余物料放入干燥箱，在100-110℃烘成干粉备用。
上述利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，所述拮抗性木霉菌种为绿色木霉，并经紫外光照射诱变选育。
本发明使用廉价的玉米秸秆粉为原料，替代目前使用的淀粉等类原料，采用液-固两相发酵工艺，制备生物杀菌剂。与现有技术相比具有如下创新之处：1.添加少量的柿叶提取物，可促使木霉菌生物量大幅提高，使固体发酵物的木霉分生孢子产量提高5倍；2.省去了固体发酵物木霉分生孢子收集的繁复工序，该方法把固体发酵物直接粉碎，把没有利用的纤维素粉碎后作为可湿性粉剂的填料，既降低成本，又可以作为喷施药液中的木霉孢子萌发和生长的营养物质，提高药剂的防治效果，提高了制备木霉菌的生产效率。本发明对人畜和生态环境无害，无残留，不产生抗药性。采用玉米秸秆粉为主要原料，生产成本低于化学农药多菌灵，速克灵等。本发明还可以消耗大量玉米秸秆，不仅避免因焚烧玉米秸秆造成的大气污染，还可以变废为宝，具有很好的经济效益和社会效益，是发展高效，绿色，生态农业理想的生物农药。
具体实施方式
本发明在木霉菌固体发酵时，添加少量柿叶提取物，该物质为类磺酮物质，可促使木霉菌生物量大幅提高，试验表明，添加柿叶提取物后，固体发酵的木霉分生孢子产量提高近5倍，因而大幅提高了物料利用率和生产效益。此外，现有技术中固体发酵物木霉分生孢子收集的工序繁复，不便于操作，本发明把固体发酵物直接粉碎，将没有利用的纤维素粉碎后既可作为可湿性粉剂的填料，降低惰性填料的使用量，降低成本；又可以作为喷施药液中的木霉孢子萌发和生长的营养物质，提高药剂的防治效果。但由于固体发酵物中除了木霉分生孢子外，大部分是没有被利用的纤维素粉，需用分散剂使其在配制药液时均匀分散在水中。本发明采用南京某科技有限公司生产的WLNPK和D500两种产品作为复合分散剂，分散效果较好。
以下提供几个具体实施例：
实施例1.
a.原料加工：选择无霉变玉米秸秆，粉碎成20目粉状备用；
b.液体发酵：培养基成分：麸皮0.5克，(NH4)2SO4 0.2克，KH2PO4 0.2克，CaCO3 0.1克，葡萄糖2克，以上述物质配制液体发酵培养基100毫升，调整液体的PH值为5.5，高压灭菌35分钟，待物料冷却后接入筛选好的拮抗性木霉菌种，于28℃振荡培养36小时，停止培养备用；
c.固体发酵：取粉碎好的玉米秸秆粉8克，(NH4)2SO4 0.12克，MgSO4 0.002克，KH2PO40.004克，柿叶提取物0.004克，其中，柿叶提取物先用5毫升酒精溶解，把上述物质加200毫升水溶解，再放入玉米秸秆粉，搅拌均匀，盖好瓶塞，高压灭菌35分钟，待物料冷却后接入步骤b的1.5毫升液体培养液，搅拌均匀，放于30℃的恒温培养箱中，保持湿度65％进行固体培养96小时。培养好的固体发酵物料在不高于40℃环境中干燥后备用；
d.可湿性粉剂的制备：把风干好的固体发酵物40克，WLNPK 2克，D500 1克，润湿剂3克，填料(硅藻土)40克用气流粉碎机粉碎至325目，再用混合设备充分混合均匀，即制备木霉菌可湿性粉剂。
柿叶提取物的提取工艺如下：把干燥无霉变的柿子叶15克放入1000毫升两口瓶中，一口连接冷凝器回收酒精，一口接温度计，加入30％的酒精液700毫升，使液面超过物料，然后加热到70℃提取3小时，倒出提取过的柿叶，把提取液过滤，然后用蒸发器蒸发，回收酒精。再把蒸发剩余物料放入干燥箱，在105℃左右烘成干粉备用。
实施例2.
a.原料加工：选择无霉变玉米秸秆，粉碎成20目粉状备用；
b.液体发酵：培养基成分：麸皮0.8克，(NH4)2SO4 0.2克，KH2PO4 0.3克，CaCO3 0.3克，葡萄糖3克，以上述物质配制液体发酵培养基100毫升，调整液体的PH值为6，高压灭菌40分钟，待物料冷却后接入筛选好的拮抗性木霉菌种，于26℃振荡培养45小时，停止培养备用；
c.固体发酵：取粉碎好的玉米秸秆粉9克，(NH4)2SO4 0.13克，MgSO4 0.003克，KH2PO40.006克，柿叶提取物0.005克，其中，柿叶提取物先用5毫升酒精溶解，把上述物质加200毫升水溶解，再放入玉米秸秆粉，搅拌均匀，盖好瓶塞，高压灭菌40分钟，待物料冷却后接入步骤b的2毫升液体培养液，搅拌均匀，放于30℃的恒温培养箱中，保持湿度75％进行固体培养96小时。培养好的固体发酵物料在不高于40℃环境中干燥后备用；
d.可湿性粉剂的制备：把风干好的固体发酵物50克，WLNPK 3克，D500 2克，润湿剂3.5克，填料(硅藻土)50克用气流粉碎机粉碎至325目，再用混合设备充分混合均匀，即制备木霉菌可湿性粉剂。
柿叶提取物的提取工艺如下：把干燥无霉变的柿子叶18克放入1000毫升两口瓶中，一口连接冷凝器回收酒精，一口接温度计，加入30％的酒精液750毫升，使液面超过物料，然后加热到80℃提取2小时，倒出提取过的柿叶，把提取液过滤，然后用蒸发器蒸发，回收酒精。再把蒸发剩余物料放入干燥箱，在100℃左右烘成干粉备用。
实施例3.
a.原料加工：选择无霉变玉米秸秆，粉碎成20目粉状备用；
b.液体发酵：培养基成分：麸皮0.7克，(NH4)2SO4 0.3克，KH2PO4 0.1克，CaCO3 0.2克，葡萄糖1克，以上述物质配制液体发酵培养基100毫升，调整液体的PH值为6，高压灭菌30分钟，待物料冷却后接入筛选好的拮抗性木霉菌种，于27℃振荡培养48小时，停止培养备用；
c.固体发酵：取粉碎好的玉米秸秆粉10克，(NH4)2SO4 0.14克，MgSO4 0.004克，KH2PO40.0045克，柿叶提取物0.0045克，其中，柿叶提取物先用5毫升酒精溶解，把上述物质加200毫升水溶解，再放入玉米秸秆粉，搅拌均匀，盖好瓶塞，高压灭菌30分钟，待物料冷却后接入步骤b的1毫升液体培养液，搅拌均匀，放于30℃的恒温培养箱中，保持湿度80％进行固体培养96小时。培养好的固体发酵物料在不高于40℃环境中干燥后备用；
d.可湿性粉剂的制备：把风干好的固体发酵物45克，WLNPK 2.5克，D500 1.5克，润湿剂4克，填料(硅藻土)45克用气流粉碎机粉碎至325目，再用混合设备充分混合均匀，即制备木霉菌可湿性粉剂。
柿叶提取物的提取工艺如下：把干燥无霉变的柿子叶20克放入1000毫升两口瓶中，一口连接冷凝器回收酒精，一口接温度计，加入30％的酒精液800毫升，使液面超过物料，然后加热到75℃提取2.5小时，倒出提取过的柿叶，把提取液过滤，然后用蒸发器蒸发，回收酒精。再把蒸发剩余物料放入干燥箱，在110℃左右烘成干粉备用。
本发明中所用拮抗性木霉菌种为绿色木霉，并经紫外光照射诱变选育。所谓紫外光照射诱变选育，是指按如下工艺进行的选育：先制备PDA(土豆200克，葡萄糖20克，琼脂18克，水1000ml)培养基平板，把拮抗性木霉菌种接种在平板上，在25℃恒温培养5天产生绿色木霉分生孢子。加灭菌水10毫升洗脱孢子，制成浓度为106/ml个孢子的悬浮液。取PDA平板，每板吸取0.1毫升悬浮液，均匀涂在平板表面，放在恒温培养箱中在25℃恒温培养一天，然后在蔽光条件下，30瓦紫外灯，距离灯管30cm处照射80分钟。然后用黑纸包好，放在4℃培养箱中低温培养12小时。再放入25℃恒温培养黑暗。3天后选取生长快速的菌株，接入PDA培养基纯化培养，作为下次紫外诱变的菌种。直到选出拮抗性好，能很好分解纤维素的木霉菌株。
本发明对农作物及经济作物的真菌性土传病害如：灰霉病、白粉病、枯萎病、霜霉病等有很好的防治效果(60-80％)。可以在病害发生初期稀释800倍液喷施，也可以灌根使用。每亩地用量300克。除了可以有效地防治农作物叶面病害外，还可以明显促进植物生长，增加农作物产量10％。
Claims (3)
1.一种利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，其特征在于：它以玉米秸杆粉为原料并按照如下步骤制备：
a.原料加工：选择无霉变玉米秸秆，粉碎成20目粉状；
b.液体发酵：培养基成分：麸皮0.5-0.8克，(NH4)2SO4 0.2-0.4克，KH2PO4 0.1-0.3克，CaCO3 0.1-0.3克，葡萄糖1-3克，以上述物质配制液体发酵培养基100毫升，调整液体的PH值为5.5-6，高压灭菌30-40分钟，待物料冷却后接入筛选好的拮抗性木霉菌种，于26-28℃振荡培养36-48小时，停止培养备用；
c.固体发酵：取粉碎好的玉米秸秆粉8-10克，(NH4)2SO4 0.12-0.14克，MgSO4 0.002-0.004克，KH2PO4 0.004-0.006克，柿叶提取物0.004-0.005克，其中，柿叶提取物先用5毫升酒精溶解，把上述物质加200毫升水溶解，再放入玉米秸秆粉，搅拌均匀，高压灭菌30-40分钟，待物料冷却后接入步骤b的1-2毫升液体培养液，搅拌均匀，放于28℃的恒温培养箱中，保持湿度65～80％进行固体培养96小时，培养好的固体发酵物料在不高于40℃环境中干燥后备用；
d.可湿性粉剂的制备：把风干好的固体发酵物40-50克，WLNPK2-3克，D500 1-2克，润湿剂3-4克，填料硅藻土40-50克用气流粉碎机粉碎至325目，再用混合设备充分混合均匀，即制备木霉菌可湿性粉剂。
2.根据权利要求1所述的利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，其特征在于：所述柿叶物按如下工艺提取：把干燥无霉变的柿子叶15-20克放入1000毫升两口瓶中，加入30％的酒精液700-800毫升，使液面超过物料，然后加热到70-80℃提取2-3小时，把提取液过滤，然后用蒸发器蒸发，回收酒精，再把蒸发剩余物料放入干燥箱，在100-110℃烘成干粉备用。
3.根据权利要求1或2所述的利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法，其特征在于：所述拮抗性木霉菌种为绿色木霉，并经紫外光照射诱变选育。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200710061668 CN101044864A (zh) | 2007-04-06 | 2007-04-06 | 利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN 200710061668 CN101044864A (zh) | 2007-04-06 | 2007-04-06 | 利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN101044864A true CN101044864A (zh) | 2007-10-03 |
Family
ID=38770039
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN 200710061668 Pending CN101044864A (zh) | 2007-04-06 | 2007-04-06 | 利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN101044864A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101926325A (zh) * | 2010-08-19 | 2010-12-29 | 北京科威拜沃生物技术有限公司 | 木霉菌可湿性粉剂及其制备方法 |
| CN102524306A (zh) * | 2011-11-21 | 2012-07-04 | 滨州职业学院 | 一种木霉菌剂的制备方法 |
| CN102580996A (zh) * | 2012-01-16 | 2012-07-18 | 扬州工业职业技术学院 | 一种玉米秸秆制备土壤复合生物修复剂的制备方法及其在改良土壤土质中的应用 |
| CN103408335A (zh) * | 2013-08-13 | 2013-11-27 | 广西壮族自治区农业科学院葡萄与葡萄酒研究所 | 微生物法对葡萄栽培产生的农业废弃物无害化处理技术 |
| CN106635827A (zh) * | 2016-11-07 | 2017-05-10 | 青海省农林科学院 | 一种多孢木霉菌菌株hz‑31及其在生物除草中的应用 |
| CN110591921A (zh) * | 2018-12-19 | 2019-12-20 | 扬州工业职业技术学院 | 一种木霉菌液体发酵的厚垣孢子及其制备方法 |
-
2007
- 2007-04-06 CN CN 200710061668 patent/CN101044864A/zh active Pending
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101926325A (zh) * | 2010-08-19 | 2010-12-29 | 北京科威拜沃生物技术有限公司 | 木霉菌可湿性粉剂及其制备方法 |
| CN102524306A (zh) * | 2011-11-21 | 2012-07-04 | 滨州职业学院 | 一种木霉菌剂的制备方法 |
| CN102580996A (zh) * | 2012-01-16 | 2012-07-18 | 扬州工业职业技术学院 | 一种玉米秸秆制备土壤复合生物修复剂的制备方法及其在改良土壤土质中的应用 |
| CN102580996B (zh) * | 2012-01-16 | 2013-09-11 | 扬州工业职业技术学院 | 一种玉米秸秆制备土壤复合生物修复剂的制备方法及其在改良土壤土质中的应用 |
| CN103408335A (zh) * | 2013-08-13 | 2013-11-27 | 广西壮族自治区农业科学院葡萄与葡萄酒研究所 | 微生物法对葡萄栽培产生的农业废弃物无害化处理技术 |
| CN106635827A (zh) * | 2016-11-07 | 2017-05-10 | 青海省农林科学院 | 一种多孢木霉菌菌株hz‑31及其在生物除草中的应用 |
| CN110591921A (zh) * | 2018-12-19 | 2019-12-20 | 扬州工业职业技术学院 | 一种木霉菌液体发酵的厚垣孢子及其制备方法 |
| CN110591921B (zh) * | 2018-12-19 | 2023-12-05 | 扬州工业职业技术学院 | 一种木霉菌液体发酵的厚垣孢子及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104450530B (zh) | 一株棘孢木霉菌株、菌剂及其在有机垃圾处理中的应用 | |
| CN103864510A (zh) | 一种缓释复合药肥 | |
| CN106631248A (zh) | 一种高含菌量生物有机肥生产工艺 | |
| CN102701805A (zh) | 利用植物秸秆好氧发酵生产的有机肥料及其方法 | |
| CN103242066A (zh) | 酒糟有机肥及其制备方法 | |
| CN101044864A (zh) | 利用玉米秸秆制备木霉菌可湿性粉剂的方法 | |
| CN105399473A (zh) | 一种生物有机肥及其制备方法 | |
| CN102071148A (zh) | 一株拟康宁木霉smf2菌株及其应用 | |
| CN102010238B (zh) | 生物有机药肥及其制造方法 | |
| CN103160441B (zh) | 一种草酸青霉菌发酵液的制备工艺及其在农业中的应用 | |
| CN102199051A (zh) | 畜禽粪便资源化生产木霉菌微生物肥料 | |
| CN107445672A (zh) | 一种轻质环保型水稻育秧基质肥及其生产工艺 | |
| CN104099281A (zh) | 一种环保复合微生物菌剂 | |
| CN105315067A (zh) | 一种有机肥料及其制备方法 | |
| CN104099282B (zh) | 环保秸秆降解剂 | |
| CN110357693A (zh) | 一种高粱专用酒糟-秸秆型生物有机肥及其生产方法 | |
| CN106616005A (zh) | 一种利用糖厂滤泥生产鱼饲料的方法 | |
| CN1771809A (zh) | 玉米秸秆木霉生物杀菌剂的制备方法 | |
| CN105237280A (zh) | 一种微生物问题土壤生态修复制剂及其制备方法和应用 | |
| CN106397043A (zh) | 一种液体复合微生物肥及其制备方法 | |
| CN102911905A (zh) | 一种微生物肥料菌剂的制作方法 | |
| CN105254347A (zh) | 一种有机肥的生产方法 | |
| CN104177168B (zh) | 一种利用抗病毒颗粒药渣制备的有机肥及其制备方法 | |
| CN110117562A (zh) | 一种高效腐熟作物秸秆的微生物菌剂 | |
| CN1685835A (zh) | 一种微生物植物生长调节剂及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20071003 |