CN101029330B - 铁细菌测试液及简易测试瓶 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种水和污泥沉积物中微生物的测试方法及其测试器具，特别是涉及一种水或其它物质中铁细菌的测试液及其测试瓶。本发明提供了一种铁细菌测定液，含有硫酸盐0.05～0.3％、氯化物0.01～0.1％、铁铵盐0.5～1.5％、磷酸盐0.03～0.1％、硝酸盐0.01～0.1％、蒸馏水97.9～99.4％。本发明还提供了相应的铁细菌简易测试瓶，包括封口的无色透明小瓶，其中装有铁细菌测试液，测试液在测试瓶中的高度H1和测试瓶等截面留空高度H2之比H1∶H2＝1∶0.3～0.8，测试瓶内部在测试前为无菌状态。本发明可用于水、污泥沉积物等物质中的铁细菌的定性、定量检测，携带、使用方便，测定简单快速、准确，保存时间长。
Description
技术领域
本发明涉及一种水和污泥沉积物中微生物的测试方法及其测试器具，特别是涉及一种水或其它物质中铁细菌的测试液及其测试瓶。
背景技术
铁细菌广泛存在于水中和各种供、排水管道中，其生长代谢和繁殖易引起金属材料的侵蚀，破坏性劣化、变质，导致管道和船舰外壳等产生腐蚀，造成严重的经济损失。
铁细菌的测定目前尚无国家标准方法，传统的测定方法为多管发酵法，其一般操作程序为：①采集水样→②无菌水制备→③器皿、试剂灭菌→④培养基制备→⑤稀释和接种水样→⑥细菌培养→⑦计数与报告，完成整个测试过程一般需要10天。多管发酵法不但操作程序繁琐、复杂，时间冗长，而且其对测试环境及操作人员的素质要求极高，从采样技术、实验室条件、仪器设备、器皿试剂质量、操作人员的技能，直至质量控制等全部监测过程及控制程序都有着严格的规定和要求。此外，繁杂的测试环节极易产生较大的误差，致使测试结果不准确。
发明内容
本发明的目的是提供一种水或其它物质中铁细菌的测试液及其简易测试瓶。
本发明解决技术问题所采用的技术方案是：
根据铁细菌代谢产物与特定试剂发生显色和化学沉淀反应的原理制备出高选择性液体培养基，封存于透明瓶中，并灭菌，从而制成可存储的简易铁细菌测试瓶。
本发明提供的铁细菌测试液，以重量百分比计，含有含有硫酸盐0.05～0.3％、氯化物0.01～0.1％、铁铵盐0.5～1.5％、磷酸盐0.03～0.1％、硝酸盐0.01～0.1％、蒸馏水97.9～99.4％。
本发明中所述硫酸盐可以为硫酸镁、硫酸铵中的一种或两种。
本发明中所述氯化物可以为氯化钙、氯化钾中的一种或两种。。
本发明中所述铁铵盐可以为柠檬酸铁铵盐。
本发明中所述磷酸盐可以为磷酸二氢钾、磷酸氢二钾中的一种或两种。
本发明中所述硝酸盐可以为硝酸钠、硝酸钾中的一种或两种。
一种铁细菌简易测试瓶，包括封口的无色透明小瓶及瓶中所装的铁细菌测试液，测试液在测试瓶中的高度H1和测试瓶等截面留空高度H2之比H1∶H2＝1∶0.3～0.8，所述测试瓶内部在测试前为无菌状态。
所述无色透明小瓶是以胶塞和铝皮盖封口的无色透明玻璃瓶。
所述铁细菌测试液含有硫酸盐0.05～0.3％、氯化物0.01～0.1％、铁铵盐0.5～1.5％、磷酸盐0.03～0.1％、硝酸盐0.01～0.1％、蒸馏水97.9～99.4％。
所述铁细菌测试液含有硫酸镁0.05～0.3％、氯化钙0.01～0.1％、柠檬酸铁铵0.5～1.5％、磷酸氢二钾0.03～0.1％、硝酸钠0.01～0.1％、蒸馏水97.9～99.4％。
本发明具有以下积极有益的效果：
(1)特制培养基测试液密封贮存于玻璃瓶中，并灭菌，贮存期较长，省去多管发酵法繁琐、复杂的操作步骤，检测时间仅需7天，大大缩短了测试时间，减轻了劳动强度。
(2)不需要传统方法所要求的无菌操作条件，使得生化检验可以在一般环境中进行，进而节省大量基础建设投资。
(3)铁细菌与测试液的特征反应是在无菌的细菌测试瓶中自动进行，可避免传统方法的多步骤操作过程中的沾污和干扰，检测结果准确可靠，且最低检出限符合国家水质标准要求。
(4)可应用于各种水质、污泥及沉积物中铁细菌的简易快速测试，非专业人员数分钟内即可学会操作。
附图说明
图1是一种铁细菌简易测试瓶的结构示意图。
具体实施方式
实施例一：参见图1，图中1为铝皮盖，2为胶塞，3等截面玻璃瓶腔，4为铁细菌测试液。H1为铁细菌测试液的高度，H2为测试瓶等截面留空高度。本实施例中测试瓶为15mL的无色透明口服液瓶，测试液的高度H1为6cm，留空高度H2为4cm。
上述测试液配方为：硫酸镁0.05％、氯化钙0.01％、柠檬酸铁铵0.5％、磷酸氢二钾0.03％、硝酸钠0.01％，蒸馏水97.9％。测试液配好后，按每瓶9.0mL封装于15mL的无色透明口服液瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用时用无菌注射器将吸取1.0mL水质样品，注入到测试瓶中，摇匀后放置于37℃干燥箱或水浴锅中24小时，根据瓶中液体的变化判断阴性或阳性反应(铁细菌瓶阳性反应时棕黄色褪去，有黑色或棕色沉淀生成)，此为定性分析；按此方法做2组或3组平行样，按逐级稀释法查MPN表，即可进行定量测试。污泥等其它固体样品则须用水溶解或浸提，处理成液体后再按上述方法进行测定。
实施例二：本实施例与实施例一基本相同，不同之处在于：测试瓶为8mL的无色透明西林瓶，测试液的高度H1为4.5cm，留空高度H2为3.5cm。
测试液配方为：硫酸镁0.3％、氯化钙0.1％、柠檬酸铁铵1.5％、磷酸氢二钾0.1％、硝酸钠0.1％，余量为蒸馏水。将上述试液配好后，按每瓶4.5mL封装于8mL的无色透明西林瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用时用无菌注射器将吸取0.5毫升水质样品，注入到测试瓶中，其它步骤与实施例一相同。
实施例三：本实施例与实施例一基本相同，不同之处在于：测试瓶为10mL的无色透明圆底玻璃瓶，测试液的高度H1为3.0cm，留空高度H2为0.9cm。
上述测试液配方为：硫酸镁0.1％、氯化钙0.02％、柠檬酸铁铵1.0％、磷酸氢二钾0.05％、硝酸钠0.05％，余量为蒸馏水。将上述试液配好后，按每瓶4.5毫升封装于10mL测试瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用方法与实施例二相同，不重述。
实施例四：本实施例与实施例一基本相同，不同之处在于：测试瓶为8.1mL的无色透明西林瓶，测试液的高度H1为3.0cm，留空高度H2为2.4cm。
上述测试液配方为：硫酸铵0.2％、氯化钙0.05％、柠檬酸铁铵0.8％、磷酸二氢钾0.06％、硝酸钠0.08％，余量为蒸馏水。将上述试液配好后，按照需要量罐装在上述测试瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用时采用绝迹稀释法，即用无菌注射器将待测定的水样(固体样品则须用水溶解或浸提，制成待测液后测定)逐级注入到测试瓶中，进行接种稀释后，置于培养箱培养，根据测试瓶阳性反应和稀释的倍数，计算出水样中细菌量总数。铁细菌瓶阳性反应时棕黄色褪去，有黑色或棕色沉淀生成
实施例五：本实施例与实施例一基本相同，不同之处在于：测试瓶为12.6mL的无色透明西林瓶，测试液的高度H1为5.0cm，留空高度H2为2.0cm。
上述测试液配方为：硫酸铵0.05％、氯化钾0.01％、柠檬酸铁铵0.5％、磷酸二氢钾0.03％、硝酸钾0.01％，余量为蒸馏水。将上述试液配好后，按照需要量罐装在上述测试瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用方法与实施例四相同。
实施例六：本实施例与实施例一基本相同，不同之处在于：测试瓶为6.5mL的无色透明西林瓶，测试液的高度H1为4.5cm，留空高度H2为1.6cm。
上述测试液配方为：硫酸铵0.3％、氯化钾0.1％、柠檬酸铁铵1.5％、磷酸二氢钾0.1％、硝酸钾0.1％，余量为蒸馏水。将上述试液配好后，按照需要量罐装在上述测试瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用方法与实施例四相同。
实施例七：本实施例与实施例一基本相同，不同之处在于：测试瓶为6mL的无色透明西林瓶，测试液的高度H1为5.0cm，留空高度H2为2.5cm。
上述测试液配方为：硫酸铵0.1％、氯化钾0.02％、柠檬酸铁铵1.0％、磷酸二氢钾0.05％、硝酸钾0.05％，余量为蒸馏水。将上述试液配好后，按照需要量罐装在上述测试瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用方法与实施例四相同。
实施例八：本实施例与实施例一基本相同，不同之处在于：测试瓶为5.0mL的无色透明西林瓶，测试液的高度H1为4.5cm，留空高度H2为2.0cm。
上述测试液配方为：硫酸镁0.2％、氯化钠0.05％、柠檬酸铁铵0.5％、磷酸氢二钾0.5％、磷酸二氢钾0.5％、硝酸钾0.05％，余量为蒸馏水。将上述试液配好后，按照需要量罐装在上述测试瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用方法与实施例四相同。
实施例九：本实施例与实施例一基本相同，不同之处在于：测试瓶为6.0mL的无色透明西林瓶，测试液的高度H1为5.0cm，留空高度H2为3.0cm。
上述测试液配方为：硫酸镁0.1％、硫酸铵0.2％、氯化钠0.05％、氯化钾0.05％、柠檬酸铁铵0.5％、磷酸氢二钾0.5％、磷酸二氢钾0.3％、硝酸钠0.05％、硝酸钾0.02％，余量为蒸馏水。将上述试液配好后，按照需要量罐装在上述测试瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用方法与实施例四相同。
实施例十：本实施例与实施例一基本相同，不同之处在于：测试瓶为6.0mL的无色透明西林瓶，测试液的高度H1为5.0cm，留空高度H2为2.0cm。
上述测试液配方为：硫酸镁0.3％、氯化钠0.03％、氯化钾0.05％、柠檬酸铁铵0.6％、磷酸氢二钾0.4％、磷酸二氢钾0.3％、硝酸钠0.05％，余量为蒸馏水。将上述试液配好后，按照需要量罐装在上述测试瓶中，高压灭菌15分钟即可。
使用方法与实施例四相同。
Claims (3)
1.一种铁细菌测试液，其特征是：以重量百分比计，含有硫酸镁0.05～0.3％、氯化钙0.01～0.1％、柠檬酸铁铵盐0.5～1.5％、磷酸氢二钾0.03～0.1％、硝酸钠0.01～0.1％、蒸馏水97.9～99.4％。
2.一种铁细菌简易测试瓶，包括封口的无色透明小瓶，其特征是：无色透明瓶中装有权利要求1所述铁细菌测试液，测试液在测试瓶中的高度H1和测试瓶等截面留空高度H2之比H1∶H2＝1∶0.3～0.8，所述测试瓶内部在测试使用前为无菌状态。
3.根据权利要求2所述的铁细菌简易测试瓶，其特征是：所述无色透明小瓶是以胶塞和铝皮盖封口的无色透明玻璃瓶。
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