CN101020659B

CN101020659B - 9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物及其合成方法和应用

Info

Publication number: CN101020659B
Application number: CN2007100270481A
Authority: CN
Inventors: 古练权; 唐煌; 黄志纾; 魏涌标; 宁方贤; 黄世亮
Original assignee: National Sun Yat Sen University
Current assignee: Sun Yat Sen University; National Sun Yat Sen University
Priority date: 2007-03-02
Filing date: 2007-03-02
Publication date: 2010-06-23
Anticipated expiration: 2027-03-02
Also published as: CN101020659A

Abstract

本发明涉及一种9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物及其合成方法以及其作为乙酰胆碱酯酶抑制剂药物的应用。实验证明，本发明的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物对乙酰胆碱酯酶具有很强的的抑制性能及很好的抑制选择性，其对乙酰胆碱酯酶的抑制能力比对丁酰胆碱酯酶的抑制活性高出1000多倍。表明该类化合物具有发展成为治疗阿尔茨海默病(Alzheimer Disease，AD)和脑血管痴呆等疾病药物的应用前景。所述衍生物的通式如下式所示，n、NR具有说明书中定义。

Description

9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物及其合成方法和应用

技术领域

本发明涉及一类9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物，其合成方法及其作为乙酰胆碱酯酶抑制剂药物，例如用于制备治疗阿尔茨海默病(Alzheimer Disease，AD)和脑血管痴呆等疾病药物方面的用途。

背景技术

乙酰胆碱酯酶(AChE)是生物神经传导中的一种关键性的酶，在胆碱能突触间，该酶降解乙酰胆碱，终止神经递质乙酰胆碱对突触后膜的兴奋作用，保证神经信号在生物体内的正常传递。胆碱酯酶依其催化底物的特异性分为乙酰胆碱酯酶(AChE)和丁酰胆碱酯酶(BuChE)。AChE被称为真性或特异性胆碱酯酶，是维持体内胆碱能神经冲动最重要的水解酶。BuChE被称为假性或非特异性胆碱酯酶，属于丝氨酸酯酶家族.主要分布于血清及肝脏中，肌肉和脑组织中也有少量存在。BuChE能与有机磷毒剂或杀虫剂结合，并能水解许多酯类、肽类及酰胺类化合物，参与某些药物的代谢过程，它还有促进细胞生长的作用。

老年性痴呆是60岁以上老年人常见病之一，以阿尔茨海默病(Alzheimer Disease，AD)和脑血管痴呆为主。目前尚无特异性的有效的治疗手段。研究证明，AD的主要临床症状是因类胆碱能的神经递质减少引起的。目前，对AD患者主要是通过药物来改善认知力、行为症状及维持日常生活，而乙酰胆碱酯酶抑制剂(AChEI)是目前治疗AD最常用的药物。AChEI可阻滞突触中ACh的水解，提高对胆碱能(毒覃碱和烟碱)受体的作用。也有间接证据表明，它可以通过改变APP的过程和增加神经元生长因子的产物来避免神经元的退化。同时，最新的研究发现，阿尔茨海默病患者突触中的丁酰胆碱酯酶活性并无明显增高。

因此，在未来对乙酰胆碱酯酶抑制剂药物的开发研究过程中，抑制的选择性和专一性将是开发人员关心的重点问题，这对增强药效，降低副作用起着至关重要的作用。

发明内容

本发明的目的之一是提供新的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物，发明目的之二是提供所述衍生物的可行的合成方法，另一发明目的是公开所述衍生物在制备抗乙酰胆碱酯酶活性药物方面的应用，所述衍生物对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶的抑制具有高度的选择性，具有作为治疗AD症和脑血管痴呆症等药物的可靠前景。

本发明的技术方案为：

本发明的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的通式为：

其中，式中的n＝1-5；

NR为：-NH(CH₂)₂N(CH₃)₂，-NH(CH₂)₂OH，-N⁺(CH₃)₃，-N⁺CH₃Et₂，

本发明的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物，可通过以下合成方法合成：

通过催化氢化或硫化钠还原9-硝基-1-氮杂苯并蒽酮得到9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮，利用氯代或溴代烷基酰氯酰化9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮得到相应的酰化产品，然后与相应的胺反应得到n＝1-3的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物；对于n＝4，5的所述衍生物，由于产率太低而无法从上述方法制得，因此采用末端胺基取代酰氯，直接与9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮反应，制得相应的衍生物。

通过体外乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶的抑制实验，证明了本发明的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物对乙酰胆碱酯酶具有很强的抑制活性，其AChE的抑制IC₅₀值达到纳摩尔水平(0.48-110nM)，可以作为乙酰胆碱酯酶抑制剂药物应用。

并且9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物具有高度的抑制选择性，其对乙酰胆碱酯酶的抑制活性比对丁酰胆碱酯酶的抑制活性高出45-1980倍。表明本发明所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物可用于制备治疗AD、脑血管痴呆、与类胆碱能的神经递质减少引起的相关疾病药物。

并且9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物可用于制备治疗青光眼、重症肌无力等疾病药物。

9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物作为药物的应用，可为注射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂等。

本发明的有益效果是可靠地提供了新的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物，同时提供了所述衍生物的合成方法，所述衍生物可用来生产对乙酰胆碱酯酶抑制剂药物，具有明显的抑制选择性和专一性，这对增强乙酰胆碱酯酶抑制剂药物的药效，降低药物副作用起着至关重要的作用。

具体实施方式

通过具体实施例对本发明作进一步描述：

实施例1：9-(2-氯乙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮1.0g(4mm)在10ml氯乙酰氯中回流3-4小时，冷却，过滤，用乙醚洗涤，滤出物用DMF-乙醇重结晶，得到黄色针状晶体(化合物1)1.1g(约85％产率)。¹H NMR(DMSO，300MHz)：δ4.35(s，2H)，7.98(d，1H，J＝5.6Hz)，8.01-8.09(m，2H)，8.41(d，1H，J＝8.2Hz)，8.51(d，1H，J＝2.2Hz)，8.54(d，1H，J＝7.2Hz)，8.73-8，78(m，2H)，10.76(s，1H-CONH)；ESI-MS m/z：324[M+H]⁺。

合成的化合物1的结构式如下：

实施例2：9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮1.0g(4mm)在10ml氯丙酰氯中回流3-4小时，冷却，过滤，用乙醚洗涤，滤出物用DMF-乙醇重结晶，得到黄色针状晶体(化合物2)1.0g(约74％产率)。¹H NMR(DMSO，300MHz)：δ2.92(t，2H，J＝6.2Hz)，3.93(t，2H，J＝6.2Hz)，7.98(d，1H，J＝5.6Hz)，8.01-8.11(m，2H)，8.42(d，1H，J＝8.2Hz)，8.54-8.56(m，2H)，8.73-8.78(m，2H)，10.55(s，1H-CONH)；ESI-MS m/z：338[M+H]⁺。

合成的化合物2结构式如下：

实施例3：9-(4-氯丁酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮1.0g(4mm)在10ml氯丁酰氯中回流2.5小时，冷却，过滤，用乙醚洗涤，滤出物用DMF-乙醇重结晶，得到黄色针状晶体(化合物3)1.0g(约74％产率)。¹H NMR(DMSO，300MHz)：δ2.09(m，2H)，2.58(t，2H，J＝7.3Hz)，3.74(t，2H，J＝6.5Hz)，7.98(d，1H，J＝5.6Hz)，8.01-8.10(m，2H)，8.41(d，1H，J＝8.1Hz)，8.54-8.56(m，2H)，8.72-8.78(m，2H)，10.46(s，1H-CONH)；ESI-MS m/z：352[M+H]⁺。

合成的化合物3结构式如下：

实施例4：9-(2-吡咯烷基乙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(2-氯乙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g在50ml乙醇中搅拌回流的情况下，慢慢滴加10ml含有1ml吡咯烷的乙醇溶液，滴加完毕继续搅拌回流3小时，冷却，过滤，滤出物用乙醚和水洗涤。土黄色的滤出物(粗产品)用DMF-乙醇重结晶，得到黄色针状结晶(化合物4)0.48g(约87％产率)。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ1.93(m，4H)，2.75(t，4H，J＝6.7Hz)，3.35(s，2H)，7.69(d，1H，J＝5.6Hz)，7.87(t，1H，J＝7.3Hz)，8.13(d，1H，J＝8.2Hz)，8.17(d，1H，J＝2.3Hz)，8.45(dd，1H，J₁＝8.7Hz and J₂＝2.3Hz)，8.62(d，1H，J＝7.2Hz)，8.73(d，1H，J＝5.6Hz)，8.84(d，1H，J＝8.8Hz)，9.50(s，1H-CONH)；ESI-MS m/z：358[M+H]⁺。

合成的化合物4结构式如下：

实施例5：9-(2-二甲胺基乙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(2-氯乙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g在50ml乙醇中搅拌回流的情况下，慢慢滴加10ml二甲胺的乙醇溶液，滴加完毕继续搅拌回流3小时，冷却，过滤，滤出物用乙醚和水洗涤。土黄色的滤出物(粗产品)用DMF-乙醇重结晶，得到黄色针状结晶(化合物5)，约80％产率。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ2.43(s，6H)，3.14(s，2H)，7.70(d，1H，J＝5.6Hz)，7.88(t，1H，J＝7.3Hz)，8.12(d，1H，J₁＝8.2Hz)，8.21(d，1H，J＝2.3Hz)，8.44(dd，1H，J₁＝2.3Hz andJ₂＝8.7Hz)，8.65(d，1H，J＝7.2Hz)，8.74(d，1H，J＝5.6Hz)，8.87(d，1H，J＝7.3Hz)，9.50(s，1H-CONH)；ESI-MS m/z：332[M+H]⁺。

合成的化合物5结构式如下：

实施例6：9-(3-哌啶丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1ml哌啶按照化合物4的合成方法，得到化合物6为橙黄色固体，产率约75％。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ1.75(m，2H)，1.80(m，4H)，2.56-2.60(m，6H)，2.73(t，2H，J＝6.2Hz)，7.68(d，1H，J＝5.6Hz)，7.87(t，1H，J＝7.3Hz)，8.12(d，1H，J＝8.2Hz)，8.18(d，1H，J＝2.3Hz)，8.35(dd，1H，J₁＝8.7Hz and J₂＝2.3Hz)，8.62(d，1H，J＝7.2Hz)，8.72(d，1H，J＝5.6Hz)，8.83(d，1H，J＝8.7Hz)，11.82(s，1H-CONH)；ESI-MS m/z：386[M+H]⁺。

合成的化合物6结构式如下：

实施例7：9-(3-二乙胺基丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1ml二乙胺按照化合物4的合成方法，得到化合物7为黄色固体，产率约78％。¹H NMR(DMSO，300MHz)：δ1.21(t，6H，J＝7.0Hz)，2.85(t，2H，J＝6.4Hz)，3.06-3.08(m，4H)，3.31(m，2H)，7.98(d，1H，J＝5.6Hz)，8.01-8.08(m，2H)，8.42(d，1H，J＝8.2Hz)，8.52-8.56(m，2H)，8.73-8.77(m，2H)，10.69(s，1H-CONH)；ESI-MS m/z：374[M+H]⁺。

合成的化合物7的结构式如下：

实施例8：9-(3-吡咯烷基丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1ml吡咯烷按照化合物4的合成方法，得到化合物8为橙黄色固体，产率约88％。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ1.98(m，4H)，2.61(t，2H，J＝5.9Hz)，2.75(t，4H，J＝5.9Hz)，2.92(t，2H，J＝5.9Hz)，7.68(d，1H，J＝5.6Hz)，7.87(t，1H，J＝7.6Hz)，8.09-8.14(m，2H)，8.30(dd，1H，J₁＝2.3Hz and J₂＝8.7Hz)，8.62(d，1H，J＝8.0Hz)，8.72(d，1H，J＝5.6Hz)，8.80(d，1H，J＝8.7)，11.71(s，1H，-CONH)；ESI-MS m/z：372[M+H]⁺。

合成的化合物8的结构式如下：

实施例9：9-(3-二甲胺基丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和10ml二甲胺醇溶液按照化合物4的合成方法，得到化合物9为黄色固体，产率约70％。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ2.44(s，6H)，2.57(t，2H，J＝5.5Hz)，2.70(t，2H，J＝5.5Hz)，7.66(d，1H，J＝5.6Hz)，7.85(t，1H，J＝7.3Hz)，8.08-8.11(m，2H)，8.36(dd，1H，J₁＝2.3Hz andJ₂＝8.7Hz)，8.59(d，1H，J＝7.2Hz)，8.70(d，1H，J＝5.6Hz)，8.80(d，1H，J＝8.7)，11.43(s，1H，-CONH)；ESI-MS m/z：346[M+H]⁺。

合成的化合物9的结构式如下：

实施例10：9-(3-(2-二甲胺基)-乙胺基)丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1ml N-二甲基乙二胺按照化合物4的合成方法，得到化合物10为棕黄色固体，产率约70％。¹H NMR(DMSO，300MHz)：δ2.16(s，6H)，2.36(t，2H，J＝6.2Hz)，2.57(t，2H，J＝6.4Hz)，2.67(t，2H，J＝6.2Hz)，2.90(t，2H，J＝6.4Hz)，7.97(d，1H，J＝5.6Hz)，8.00-8.11(m，2H)，8.41(d，1H，J＝8.2Hz)，8.53-8.55(m，2H)，8.73(d，1H，J＝8.8Hz)，8.76(d，1H，J＝5.6Hz)；ESI-MS m/z：389[M+H]⁺。

合成的化合物10的结构式如下：

实施例11：9-(3-(2-羟基乙胺基)丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1ml乙醇胺按照化合物4的合成方法，得到化合物11为黄色固体，产率约90％。¹H NMR(DMSO，300MHz)：δ2.56(t，2H，J＝6.4Hz)，2.62(t，2H，J＝5.6Hz)，2.87(t，2H，J＝6.4Hz)，3.48(t，2H，J＝5.6Hz)，7.94(d，1H，J＝5.6Hz)，7.98-8.07(m，2H)，8.38(d，1H，J＝8.2Hz)，8.50-8.53(m，2H)，8.68(d，1H，J＝8.2Hz)，8.73(d，1H，J＝5.6Hz)；ESI-MS m/z：362[M+H]⁺。

合成的化合物11的结构式如下：

实施例12：9-(4-吡咯烷基丁酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(4-氯丁酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1ml吡咯烷按照化合物4的合成方法，得到化合物12为棕黄色固体，产率约20％。¹H NMR(DMSO，300MHz)：δ1.82(m，2H)，1.95(m，4H)，2.52(t，2H，J＝7.3Hz)，3.08(t，2H，J＝7.2Hz)，3.19(t，4H，J＝8.2Hz)，7.95(d，1H，J＝5.6Hz)，7.99-8.04(m，2H)，8.39(d，1H，j＝8.3Hz)，8.50-8.53(m，2H)，8.69(d，1H，J＝8.7Hz)，8.71(d，1H，J＝5.6Hz)，10.46(s，1H，-CONH)；ESI-MS m/z：386[M+H]⁺。

合成的化合物12的结构式如下：

实施例13：9-(4-二甲胺基丁酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(4-氯丁酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和10ml二甲胺乙醇溶液按照化合物4的合成方法，得到化合物13为黄色固体，产率约15％。¹H NMR(CDCl₃，300MHz)：δ1.96(m，2H)，2.46(s，6H)，2.59(t，2H，J＝5.9)，2.64(t，2H，J＝6.2Hz)，7.71(d，1H，J＝5.6Hz)，7.90(d，1H，J＝7.5)，8.14-8.18(m，2H)，8.40(dd，1H，J₁＝2.3Hz and J₂＝8.7Hz)，8.64(d，1H，J＝7.2Hz)，8.75(d，1H，J＝5.6Hz)，8.85(d，1H，J＝8.7Hz)，10.81(s，1H，-CONH)；ESI-MS m/z：360[M+H]⁺。

合成的化合物13的结构式如下：

实施例14：化合物4-9和12-13的N-甲基化季铵盐产物即化物14-21的合成

将化合物4-9和12-130.2g分别溶于5-10ml氯仿，各加入1ml碘甲烷，室温搅拌24小时，得到黄色沉淀，过滤，滤出物用氯仿洗涤，干燥，得到相应的铵盐14-21。

化合物14：ESI-MS m/z：372[M]⁺

化合物14结构式如下：

化合物15：ESI-MS m/z：346[M]⁺

化合物15结构式如下：

化合物16：ESI-MS m/z：400[M]⁺

化合物16结构式如下：

化合物17：ESI-MS m/z：388[M]⁺

化合物17结构式如下：

化合物18：ESI-MS m/z：386[M]⁺

化合物18结构式如下：

化合物19：ESI-MS m/z：360[M]⁺

化合物19结构式如下：

化合物20：ESI-MS m/z：400[M]⁺

化合物20结构式如下：

化合物21：ESI-MS m/z：374[M]⁺

化合物21结构式如下：

实施例15：9-【2-(4-(1-吲满酮-2-亚甲基)哌啶基)乙酰胺基】-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(2-氯乙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1g 4-(1-吲满酮-2-亚甲基)哌啶按照化合物4的合成方法，得到化合物22为橙黄色固体，产率约72％。ESI-MS m/z：517[M+H]⁺。

合成的化合物22结构式如下：

实施例16：9-(2-它克林)乙酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(2-氯乙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1g它克林按照化合物4的合成方法，得到化合物23为橙红色固体，产率约55％。ESI-MS m/z：485[M+H]⁺。

合成的化合物23结构式如下：

实施例17：9-(2-邻苯二甲酰亚胺基)乙酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(2-氯乙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1g邻苯二甲酰亚胺按照化合物4的合成方法，得到化合物24为橙红色固体，产率约78％。ESI-MS m/z：434[M+H]⁺。

合成的化合物24结构式如下：

实施例18：9-(2-苯甲酰胺基)乙酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(2-氯乙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1g苯甲酰胺按照化合物4的合成方法，得到化合物25为橙红色固体，产率约48％。ESI-MS m/z：408[M+H]⁺。

合成的化合物25结构式如下：

实施例19：9-【3-(4-(1-吲满酮-2-亚甲基)哌啶基)丙酰胺基】-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1g 4-(1-吲满酮-2-亚甲基)哌啶按照化合物4的合成方法，得到化合物26为橙色固体，产率约66％。ESI-MS m/z：531[M+H]⁺。

合成的化合物26结构式如下：

实施例20：9-(3-它克林)丙酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1g它克林按照化合物4的合成方法，得到化合物27为橙红色固体，产率约55％。ESI-MS m/z：499[M+H]⁺。

合成的化合物27结构式如下：

实施例21：9-(3-邻苯二甲酰亚胺基)丙酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1g邻苯二甲酰亚胺按照化合物4的合成方法，得到化合物28为橙红色固体，产率约73％。ESI-MS m/z：448[M+H]⁺。

合成的化合物28结构式如下：

实施例22：9-(3-苯甲酰胺基)丙酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-(3-氯丙酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮(2)0.5g(1.5mmol)和NaI 0.15g和1g苯甲酰胺按照化合物4的合成方法，得到化合物29为橙红色固体，产率约44％。ESI-MS m/z：422[M+H]⁺。

合成的化合物29结构式如下：

实施例23：9-(5-二甲胺基戊酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮0.5g(2mm)与2g 5-二甲胺基戊酰氯在50ml无水二氯甲烷中，室温下搅拌6小时，反应混合液用水洗涤，干燥，减压蒸发。残渣经过硅胶柱层析(洗脱剂：甲醇/氯仿＝5/100)得到化合物30为橙黄色固体，产率约57％。ESI-MS m/z：374[M+H]⁺。

合成的化合物30结构式如下：

实施例24：9-(6-二甲胺基己酰胺基)-1-氮杂苯并蒽酮的合成

9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮0.5g(2mm)与2g 6-二甲胺基己酰氯在50ml无水二氯甲烷中，室温下搅拌8小时，反应混合液用水洗涤，干燥，减压蒸发。残渣经过硅胶柱层析(洗脱剂：甲醇/氯仿＝5/100)得到化合物31为棕黄色固体，产率约39％。ESI-MS m/z：388[M+H]⁺。

合成的化合物31结构式如下：

实施例25：9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物体外乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性的测定

应用Ellman(Biochemical Pharmacology 1961，7，88-95.)的方法测试化合物对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制的IC₅₀值。所有测试都是在岛津UV-2450型紫外可见分光光度计上，在37℃条件下测定。数据分析软件使用Origin软件进行数据处理，使用Galanthamine作为对照品。

1.抑制剂原始储备液的配制：化合物15-20配成500μM的水溶液。化合物11，12配成40mM的DMSO溶液。

2.酶储备液的配制：乙酰胆碱酯酶(从电鳗中提取)和丁酰胆碱酯酶(从马的血浆中提取)从Sigma公司购买。乙酰胆碱酯酶储备液的浓度为0.1mg/ml，丁酰胆碱酯酶的浓度为2mg/ml水溶液。

3.底物储备液的配制：乙酰巯基胆碱(乙酰胆碱酯酶的底物)和丁酰巯基胆碱(丁酰胆碱酯酶的底物)从Sigma公司购买。其中乙酰巯基胆碱溶液和丁酰巯基胆碱溶液的浓度都为2mg/ml的磷酸钾(pH 8.0)缓冲水溶液。

4.显色剂储备液的配置：显色剂DTNB从Sigma公司购买，配成4mg/ml的磷酸钾(pH 8.0)缓冲水溶液。

5.测试：每次测试的体积都为1ml的磷酸钾(pH 8.0)缓冲溶液。其中包含酶储备液10μl、底物储备液50μl、显色剂储备液50μl和相应的抑制剂，最后由缓冲溶液补齐至1ml的体积。测试时，先将酶，显色剂和抑制剂在37℃保温15分钟，最后加入底物，活性是在检测溶液在412nm处在一分钟的间隔中的吸光度的变化。

6.结果判断：以没有加入抑制剂时测得的吸光度变化(斜率)为100个活力单位(A_control)，相对酶活力＝(加入抑制剂的吸光度变化(斜率)/没有加入抑制剂时的吸光度变化)×100。当相对酶活力达到50时的抑制剂浓度，即为抑制剂的IC₅₀值。

表1.化合物10，11和14-21对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶抑制活性的IC₅₀值和抑制的选择性

a对乙酰胆碱酯酶的选择性＝IC₅₀(丁酰胆碱酯酶)/IC₅₀(乙酰胆碱酯酶)。

结论：从表1发现所有9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物对乙酰胆碱酯酶的抑制IC₅₀值都在纳摩尔水平，而对丁酰胆碱酯酶的抑制IC₅₀都在微摩尔水平。化合物16在所有测试的化合物中具有最高的对乙酰胆碱酯酶的抑制活性(IC₅₀＝0.48nM)；具有最高选择性的是化合物17和化合物18。

Claims

1.一种9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物，其特征是该衍生物的通式为式(I)所示：

其中，式中的n＝1～5；

NR代表-NH(CH₂)₂N(CH₃)₂、-NH(CH₂)₂OH、

2.一种如权利要求1所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的合成方法，其特征是该方法包括以下步骤：还原9-硝基-1-氮杂苯并蒽酮得到9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮，酰化9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮得到相应的酰化产物，酰化产物与相应的胺反应得到9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物，所述衍生物具有式(I)所示结构通式，其中n＝1～3。

3.根据权利要求2所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的合成方法，其特征是利用氯代烷基酰氯酰化9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮得到相应的酰化产物。

4.根据权利要求2所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的合成方法，其特征是利用溴代烷基酰氯酰化9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮得到相应的酰化产物。

5.一种如权利要求1所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的合成方法，其特征是还原9-硝基-1-氮杂苯并蒽酮得到9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮，采用末端胺基直接与9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮反应，制得相应的衍生物，所述衍生物具有式(I)所示结构通式，其中n＝4～5。

6.根据权利要求2或5所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的合成方法，其特征是通过催化氢化方法还原9-硝基-1-氮杂苯并蒽酮得到9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮。

7.根据权利要求2或5所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的合成方法，其特征是通过使用硫化钠还原9-硝基-1-氮杂苯并蒽酮得到9-氨基-1-氮杂苯并蒽酮。

8.一种如权利要求1所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的应用，其特征是应用于制备乙酰胆碱酯酶抑制剂药物。

9.根据权利要求8所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的应用，其特征是应用于制备治疗阿尔茨海默病、脑血管痴呆、青光眼或重症肌无力疾病药物。

10.根据权利要求8或9所述的9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物的应用，其特征是所述药物为注射剂、片剂、丸剂、胶囊、悬浮剂或乳剂。

11.一种9-胺基烷酰胺基-1-氮杂苯并蒽酮衍生物，其特征是该衍生物的结构式为：