CN100455571C - 青藤碱盐化合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了新的青藤碱盐化合物、合成方法及其用途。该类盐是由青藤碱和酸类化合物反应所得，其中的酸类化合物包括：(1)脂肪族羧酸及取代脂肪族羧酸，芳香族羧酸及取代芳香族羧酸，杂环取代基羧酸；(2)脂肪族磺酸及芳香族磺酸；(3)氨基酸盐酸盐，(4)萜类、甾类有机酸以及核苷酸。药效学试验表明，这些青藤碱盐化合物毒性比盐酸青藤碱盐要小，服用更安全稳定。
Description
技术领域
本发明涉及药物化合物，特别涉及青藤碱盐化合物及其制备方法，属化学合成制药技术领域。
背景技术
青藤碱是从青风藤植物中提取的最有效的治疗风湿和类风湿性关节炎疾病的生物碱类药物，具有显著的镇痛、镇静、抗炎、免疫抑制、降血压等作用。它能作用于中枢神经系统和内分泌系统，通过双向调节，改善免疫和抗炎机制，消除体内致病因素，修复组织损伤。现在广泛应用的青藤碱盐药物主要是以盐酸青藤碱为原料药，制成各种类型的片剂、胶囊、注射液等。在用药过程中发现有极少数患者出现一定程度的不良反应，如肌块红肿、瘙痒等。本发明旨在研发出比盐酸青藤碱性能更优良的非盐酸青藤碱盐。
发明内容
本发明目的在于提供青藤碱和酸类化合物反应所产生的青藤碱盐化合物；本发明另一目的还在于提供上述各类化合物的制备方法；本发明目的还在于提供上述各类化合物的用途。
本发明青藤碱盐化合物为青藤碱和酸类化合物反应所产生的青藤碱盐化合物；所述酸类化合物包括：(1)脂肪族羧酸及取代脂肪族羧酸，芳香族羧酸及取代芳香族羧酸，杂环取代基羧酸；(2)脂肪族磺酸及芳香族磺酸；(3)氨基酸盐酸盐；(4)萜类、甾类有机酸以及核苷酸。
本发明的青藤碱盐化合物具有如下结构：
1.一类脂肪族羧酸及取代脂肪族羧酸、芳香族羧酸及取代芳香族羧酸、杂环取代基羧酸的青藤碱盐化合物，其结构式如下：
其中m＝1-4，[A]-为酸根，酸A的结构通式为：
其中n＝0-40，R1、R2、R3为氢、烃基、不饱和烃基、苯基、芳烃基、稠环芳烃基以及取代的苯基、芳烃基、稠环芳烃基，F、Cl、Br、I、OH、OCH3、OC2H5、OC3H6、NO2、CN、CF3、COOR、COOH、RCO或ArCO。
(2)
其中R1、R2、R3、R4、R5为氢、烃基、不饱和烃基、苯基、芳烃基、稠环芳烃基以及取代的苯基、芳烃基、稠环芳烃基，F、Cl、Br、I、OH、OCH3、OC2H5、OC3H6、NO2、CN、CF3、COOR、COOH、RCO或ArCO。
其中R1、R2、R3、R4、R5为氢、烃基、不饱和烃基、苯基、芳烃基、稠环芳烃基以及取代的苯基、芳烃基、稠环芳烃基，F、Cl、Br、I、OH、OCH3、OC2H5、OC3H6、NO2、CN、CF3、COOR、COOH、RCO或ArCO。
2.一类脂肪族磺酸及芳香族磺酸的青藤碱盐化合物，其结构式如下：
其中m＝1，[B]-为酸根，酸B的结构通式为：
其中n＝0-20，R1、R2、R3为氢、烃基、不饱和烃基、苯基、芳烃基、稠环芳烃基以及取代的苯基、芳烃基、稠环芳烃基，F、Cl、Br、I、OH、OCH3、OC2H5、OC3H6、NO2、CN、CF3、COOR、COOH、RCO或ArCO。
其中R1、R2、R3、R4、R5为氢、烃基、不饱和烃基、苯基、芳烃基、稠环芳烃基以及取代的苯基、芳烃基、稠环芳烃基，F、Cl、Br、I、OH、OCH3、OC2H5、OC3H6、NO2、CN、CF3、COOR、COOH、RCO或ArCO。
3.一类氨基酸的青藤碱盐化合物，其结构式如下：
其中m＝1-2，氨基酸为20种天然氨基酸，R为：
H，CH3，(CH3)2CH，(CH3)2CHCH2，(C2H5)(CH3)CH，HOCH2，(HO)(CH3)CH，HSCH2，CH3SCH2CH2，H2NCH2(CH2)3，HOOCCH2，HOOCCH2CH2，C6H5CH2 
4.一类萜类、甾类有机酸以及核苷酸青藤碱盐化合物，其结构式如下：
其中m＝1-2，X为萜类、甾体类有机酸，如：松香酸、甘草酸、甘草次酸、胆酸等，核苷酸包括腺嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、黄嘌呤核苷酸、胞嘧啶核苷酸、尿嘧啶核苷酸、胸腺嘧啶脱氧核苷酸、腺嘌呤脱氧核苷酸、胞嘧啶脱氧核苷酸或尿嘧啶脱氧核苷酸。
值得强调的是，本发明还研究了苹果酸青藤碱盐和丙酮酸青藤碱盐的结构表征：
苹果酸青藤碱盐：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：8.48(s，2×1H)，6.73-6.71(d，2×1H)，6.53-6.51(d，2×1H)，5.70(s，2×1H)，4.18-4.14(d，2×1H)，4.03-4.00(m，1H)，3.71(s，2×3H)，3.71-3.41(m，2×2H)，3.37(s，2×2H)，3.31(s，1H)，2.97(s，2×3H)，2.90(s，2×1H)，2.84-2.78(m，2H)，2.62-2.33(m，8H)，2.05-1.99(m，2×2H)，1.81-1.75(m，2×2H)，IRVmax(KBr)/cm-1：3394，3033，2960，2854，1690，1598，1481，1449，1279，1238，1202，1147，1088，1051，1003，962，885，811，742，665.MS EIm/z：330(M*+)，Anal.Calcd for(C19H24NO4)2 +.C4H4O5 2- C 63.62，H 6.61，N 3.53；found C 63.21，H 6.05，N 3.37.
丙酮酸青藤碱盐：1H NMR(DMSO-d6，400MHz)δ：8.64(s，1H)，6.79-6.77(d，1H)，6.57-6.55(d，1H)，5.72(s，1H)，4.19-4.15(d，1H)，3.72(s，3H)，3.68(brs，1H)，3.38(s，3H)，3.19-2.94(m，4H)，2.67(s，3H)，2.53-2.49(m，2H)，2.18(s，3H)，2.23(s，1H)，1.95-1.82(m，2H).IR Vmax(KBr)/cm-1：3260，3029，2953，2841，1697，1625，1480，1435，1390，1276，1159，1054，1008，883，823，803，738，610。MS EI m/z：330(M*+)，Anal.Calcd for C22H27NO7 C 63.29，H 6.52，N 3.35；found C 62.51，H 6.77，N 3.83.
丙酮酸青藤碱盐的X-射线衍射：
立方晶系 空间点群：P2(1)2(1)2(1)
本发明所述的各类有机酸青藤碱盐化合物的合成方法如下：在水或有机溶剂中，室温-回流条件下，青藤碱与上述的各类有机酸反应0.5～2小时，所得的反应物溶液经过过滤，蒸发浓缩，晶体析出等过程，即得；青藤碱与上述的各类有机酸的物质的量的比为：1.1∶1.0，所用的有机溶剂为甲醇、乙醇、丙醇、丁醇、异丙醇、叔丁醇、二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、乙酸乙酯、乙醚、四氢呋喃、1，4-二氧六烷、苯、甲苯、丙酮、乙氰、二甲亚砜或N，N-二甲基甲酰胺。本发明的合成反应方法简单，反应条件温和，容易操作，适宜工业化生产。
尤其地，本发明还提供了如下12种青藤碱盐化合物及其制备方法：
1.乙酰水杨酸青藤碱盐
准确称取10mmoL重结晶过的乙酰水杨酸晶体1.80克，加30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，乙酰水杨酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液放在旋转蒸发仪上56℃蒸发，一段时间后，有部分晶体析出，升高温度到72℃减压蒸发，析出绝大部分晶体，将晶体过滤收集，以少量95％的乙醇洗涤晶体2～3次，干燥，得化合物晶体5.26克(理论产量的97％)。产物熔点：143～147℃。
2.甲磺酸青藤碱盐的制备
称取含20mmoL含量为99％的甲磺酸，加入30毫升水；再加入青藤碱6.91克；室温搅拌半小时，甲磺酸与青藤碱反应，固体溶解变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液75℃减压蒸发，至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体8.78克。产物熔点：276～278℃。
3.苹果酸青藤碱盐的制备
称取5mmoL苹果酸晶体0.67克，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，苹果酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有部分晶体析出时，升高温度到80℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.18克。产物熔点：141～145℃。
4.柠檬酸青藤碱盐的制备
称取5mmoL柠檬酸酸晶体1.05克，加入30毫升水；再加入15.1mmoL青藤碱5.43克；室温搅拌半小时，柠檬酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有部分晶体析出时，升高温度到85℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体6.26克。产物熔点：157～159℃。
5.酒石酸青藤碱盐的制备
称取5mmoL酒石酸晶体0.75克，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，酒石酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有部分晶体析出时，升高温度到80℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.13克。产物熔点：164～166℃。
6.乳酸青藤碱盐的制备
称取含10mmoL含量为95％的乳酸液体，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；在室温搅拌半小时，乳酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有晶体析出时，升高温度到75℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.33克。产物熔点：109～112℃。
7.丙酮酸青藤碱盐的制备
称取含10mmoL含量为95％的丙酮酸液体，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，丙酮酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，一段时间后，有晶体析出，升高温度到85℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.30克。产物熔点：133-136℃。
8.半胱氨酸青藤碱盐的制备
称取10mmoL半胱氨酸盐酸盐1.58克，加入30毫升水溶解；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，半胱氨酸盐酸盐与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有部分晶体析出时，升高温度到80℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.82克。产物熔点：259～263℃。
9.胱氨酸青藤碱盐的制备
称取5mmoL胱氨酸盐酸盐1.57克，加入25毫升甲醇溶解；再称取10.1mmoL青藤碱3.62克，溶解在25毫升甲醇中；将两种溶液混合，胱氨酸盐酸盐与青藤碱反应，立刻有白色沉淀产生，回流条件下搅拌反应1小时；将反应混合物过滤；过滤所得溶液34℃减压蒸发，至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.32克。产物熔点：239～241℃。
10.色氨酸青藤碱盐的制备
称取10mmoL色氨酸盐酸盐2.40克，加入25毫升甲醇溶解；再称取10.1mmoL青藤碱3.62克，溶解在25毫升甲醇中；将两种溶液混合，色氨酸盐酸盐与青藤碱反应，立刻有白色沉淀产生，回流条件下搅拌反应1小时；将反应混合物过滤；过滤所得溶液34℃减压蒸发至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体5.14克。产物熔点：210～213℃。
11.精氨酸青藤碱盐的制备
称取10mmoL精氨酸盐酸盐2.10克，加入25毫升甲醇溶解；再称取10.1mmoL青藤碱3.62克，溶解在25毫升甲醇中；将两种溶液混合，精氨酸盐酸盐与青藤碱反应，立刻有白色沉淀产生，回流条件下搅拌反应1小时；将反应混合物过滤；过滤所得溶液34℃减压蒸发至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.67克。产物熔点：253～256℃。
12.酪氨酸青藤碱盐的制备
称取10mmoL酪氨酸盐酸盐2.18克，加入25毫升甲醇溶解；再称取10.1mmoL青藤碱3.62克，溶解在25毫升甲醇中；将两种溶液混合，酪氨酸盐酸盐与青藤碱反应，立刻有白色沉淀产生，回流条件下搅拌反应1小时；将反应混合物过滤；过滤所得溶液34℃减压蒸发至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体3.89克。产物熔点：273～276℃。
药效学试验表明，本发明所述的各类有机酸青藤碱盐化合物有确切的药理作用，均具有抗炎、镇痛作用、免疫调节等作用；而且在水溶性、有机溶剂溶解性以及脂溶性方面比盐酸青藤碱盐要好，尤其是在毒性小方面表现更突出，毒性实验结果表明本发明所述的有机酸青藤碱盐均比盐酸青藤碱盐毒性显著减少，服用更安全稳定。
下述实验例用于进一步说明但不限于本发明。
实验例1 毒性实验
1、盐酸青藤碱及其6种不同化合物的急性毒性实验研究
对照样品为盐酸青藤碱，其它受实验样品为：1号-萘普生青藤碱盐，2号-甲磺酸青藤碱盐，3号-乙酰水杨酸青藤碱盐，4号-半胱氨酸青藤碱盐，5号-苹果酸青藤碱盐，6-丙酮酸青藤碱盐，实验动物为专用实验小白鼠。
1.1小白鼠腔注射的急性毒性
表1 盐酸青藤碱给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
盐酸青藤碱的LD50为550.6156mg/kg，其95％的可信限区间为463.592-653.974mg/kg
表2 1号样品给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
1号样品的LD50为2167.9150mg/kg，其95％的可信限区间为866.070-5426.64mg/kg
表3 2号样品给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
2号样品LD50为589.7230mg/kg，其95％的可信限区间为517.318-672.261mg/kg
表4 3号样品给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
3号样品的LD50为702.3449mg/kg，其95％的可信限区间为615.013-802.076mg/kg
表5 4号样品给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
4号样品的LD50为1166.5829mg/kg，其95％的可信限区间816.755-1666.24mg/kg
表6 5号样品给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
5号样品的LD50为935.2115mg/kg，其95％的可信限区间821.378-1064.82mg/kg
表7 6号样品给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
6号样品的LD50为864.6911mg/kg，其95％的可信限区间为702.598-1064.17mg/kg
结果：以不同浓度的供试样品分别给小鼠一次腹腔注射，经生物计算机生物系统计算(BLISS法)的各样品小鼠一次性腹腔的LD50为分别为：盐酸青藤碱：550.6156mg/kg、1号：2167.9150mg/kg，2号：589.7230mg/kg，3号：702.3449mg/kg，4号：1166.5829mg/kg，5号：935.2115mg/kg，6号：864.6911mg/kg。各样品的LD50的排序分别为：青＜2号＜3号＜6号＜5号＜4号＜1号。
1.2盐酸青藤碱及其3种不同化合物的口服和腹腔注射急性毒性研究
以不同浓度盐酸青藤碱及其3种不同化合物溶液分别给小鼠腹腔注射及口服给药，(1号-萘普生青藤碱盐，2号-半胱氨酸青藤碱盐，3号-丙酮酸青藤碱盐)，求得青藤碱对小鼠一次口服给药及其他3种不同化合物分别对小鼠一次腹腔注射给药及口服给药的/LD50分别为：
盐酸青藤碱腹腔注射550.615mg/kg，口服755.252mg/kg；
1号：注射508.330mg/kg、口服1047.451mg/kg
2号：注射397.194mg/kg、口服714.054mg/kg
3号：注射702.345mg/kg、口服1121.661mg/k
实验材料：
1.药物 盐酸青藤碱及其3种不同化合物的供试品，临用时用生理盐水或蒸馏水配至所需浓度即可。以上均由湖南正清药业股份有限公司提供。
2.动物 小鼠购自湖南中医学院试验动物中心。体重18-22g，雌雄各半。
3.器材 25ml干燥消毒试剂瓶 分析天平(0.0001)
试验方法
1.预试 首先各受试药物的浓度均预配为500mg/20ml，动物禁食不禁水12h后称重。取18-22g小鼠，雌雄各半。试验时分别以腹腔注射或口服灌胃的方式给药，每次4只(雌雄各2只)，首次均按0.2ml/10g给药，然后按本次试验结果递减和(或)递增给药剂量直至找出100％、0％的致死量。
2.正式实验 动物禁食不禁水12h后称重。取18-22g小鼠，雌雄各半，按性别、体重分层随机分为5组，每组10只，按预试结果以最大给药量/给药体积的药液为最高浓度，按低比稀释法配制5个浓度的一系列药液。分别给5组动物腹腔注射或口服灌胃给药一次，另外1组均给生理盐水注射或蒸馏水灌胃作空白对照。给药后连续观察7天，记录各组动物的行为和死亡表现，以及各组的死亡数。
结果
给药后，所有的空白组动物进食及活动等均正常，未见异常表现，七天后全部正常存活。其中：
盐酸青藤碱：口服盐酸青藤碱水溶液的动物，给药后5-10分钟，低剂量组动物表现为安静少动，剂量较大时首先表现为少动匍匐，继而开始出现全身震颤、抽搐、竖耳、竖毛、最后痉挛而死。大剂量组动物死亡约在给药后5分钟时发生，约在1小时内全部死亡。其余各组部分动物在给药后3小时内陆续死亡，次观察时间后存活的动物逐渐恢复正常活动，再未出现死亡。死亡的动物经尸检，肉眼观察各主要脏器未见明显的异常。经生物计算机生物系统计算的小鼠一次性口服盐酸青藤碱的LD50为755.252mg/kg，其95％的可信限区间为661.824-861.868mg/kg；腹腔注射为LD50为550.6156mg/kg，其95％的可信限区间为463.592-653.974mg/kg。(见下表)
表8 盐酸青藤碱给小鼠一次性口服的急性毒性
盐酸青藤碱口服的LD50为755.252mg/kg，其95％的可信限区间为661.824-861.868mg/kg
表9 盐酸青藤碱给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
盐酸青藤碱腹腔注射的LD50为550.6156mg/kg，其95％的可信限区间为463.592-653.974mg/kg
1号样品：注射1号样品的生理盐水溶液的动物，给药后5-10分钟，低剂量组动物表现为安静少动，个别动物有轻微烦躁表现，剂量较大时表现为兴奋不安、跳跃、全身震颤、抽搐、翘尾、痉挛、后腿后蹬而死。大剂量组动物死亡约在给药后5分钟时发生，约在1.5小时内全部死亡。其余各组部分动物在给药后3小时内陆续死亡，次观察时间后存活的动物逐渐恢复正常活动，再未出现死亡。死亡的动物经尸检，肉眼观察各主要脏器未见明显的异常。1号样品水溶液的动物，口服灌胃给药后反应与注射后表现基本相似。经生物计算机生物系统计算的小鼠一次性腹腔注射1号样品的LD50为508.330mg/kg，其95％的可信限区间为470.580-549.108mg/kg；小鼠一次性口服1号样品的LD50为1047.451mg/kg，其95％的可信限区间为987.327-1111.236mg/kg(见下表)
表10 1号样品给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
1号样品注射的LD50为508.330mg/kg，其95％的可信限区间为470.580-549.108mg/kg
表11 1号样品给小鼠一次性口服的急性毒性
1号样品口服的LD50为1047.451mg/kg，其95％的可信限区间为987.327-1111.236mg/kg
2号样品：动物注射及口服给2号样品溶液，其表现与盐酸青藤碱及1号各剂量组相似，经生物计算机生物系统计算的小鼠一次性腹腔及口服各样品的LD50为分别为
表12 2号样品给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
2号样品注射的LD50为397.194mg/kg，其95％的可信限区间为374.459-421.308mg/kg
表13 2号样品给小鼠一次性口服的急性毒性
2号样品口服的LD50为714.054mg/kg，其95％的可信限区间为631.539-807.235mg/kg
3号样品：动物注射及口服给3号样品溶液，其表现与1号各剂量组相似，经生物计算机生物系统计算的小鼠一次性腹腔及口服各样品的LD50为分别为
表14 3号样品给小鼠一次性腹腔注射的急性毒性
3号样品的注射LD50为702.345mg/kg，其95％的可信限区间为615.013-802.076mg/kg
表15 3号样品给小鼠一次性口服的急性毒性
3号样品的口服LD50为1121.661mg/kg，其95％的可信限区间为773.537-1626.456mg/kg
实验例2 药效筛选实验
1、受试样品对核受体模型的初筛结果
核受体相关筛选模型的简要说明：
采用报告基因的方法，利用核受体活化后能激活它下游基因转录的原理设计了一种活细胞内筛选核受体激活剂的筛选模型。先构建了一个报告基因质粒，将核受体的DNA结合序列(NRE)插到荧光素酶基因的上游，使荧光素酶基因的表达受到核受体的调控。将该报告基因质粒与核受体同时转入一种细胞内，当细胞培养基中存在核受体激活剂的时候，核受体将被激活，激活后的受体能诱导荧光素酶基因的表达，而荧光素酶的产量可通过其发光底物检测到。这样，通过观察发光的强度可以得知化合物对核受体的激活强度。为了校正转染效率、细胞接种数量及化合物毒性等因素造成的试验误差，还同时共转染了GFP质粒作为内参，在实验结果分析时所有试验孔的发光值都用GFP值进行了校正。试验结果用相对激活倍数表示，溶剂对照的值为1，值越大激活能力越高。(QP-2-1盐酸青藤碱，QP-2-2丙酮酸青藤碱，QP-2-3苹果酸青藤碱盐)
实验结果：
GR
TNFa和IL-1分泌抑制
说明：
首先采用MTS方法分析了样品对模型细胞的细胞毒性，以便确定合适的浓度进行活性筛选。同时考虑到通常情况下植物提取物在低浓度时活性较弱，因此我们在初筛时选用了10ug/ml和50ug/ml两个浓度进行测试。从MTS结果看，所有样品的毒性范围都大于50ug/ml。
从筛选结果看，参与测试的样品对GR受体没有明显的激活作用，但在高浓度时，对单核细胞THP-1分泌TNFa和IL-1有一定的促进作用，其中QP-2-3的促进作用较明显。
2、样品对模型细胞的MTS测试
样品对模型细胞SMMC-7721的MTS结果
说明：
根据筛选模型的要求，选用模型细胞株对样品进行MTS试验筛选，观察这些样品是否抑制模型细胞的生长。MTS实验的结果分析以溶剂对照组正常生长的细胞值为1，无细胞培养液的值为0，样品值在0.8以上被认为基本不抑制细胞生长，样品值小于0.8被认为能抑制细胞的生长，并且值越小抑制程度越高。结果表明，所实验的样品均具有较低的细胞毒性，其中，丙酮酸酸青藤碱盐和苹果酸青藤碱盐的细胞毒性比盐酸青藤碱略小。
下述实施例均能实现上述效果。
具体实施方式
实施例1：乙酰水杨酸青藤碱盐的制备
准确称取10mmoL重结晶过的乙酰水杨酸晶体1.80克，加30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，乙酰水杨酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液放在旋转蒸发仪上56℃蒸发，一段时间后，有部分晶体析出，升高温度到72℃减压蒸发，析出绝大部分晶体，将晶体过滤收集，以少量95％的乙醇洗涤晶体2～3次，干燥，得化合物晶体5.26克(理论产量的97％)。产物熔点：143～147℃。
实施例2：甲磺酸青藤碱盐的制备
称取含20mmoL含量为99％的甲磺酸，加入30毫升水；再加入青藤碱6.91克；室温搅拌半小时，甲磺酸与青藤碱反应，固体溶解变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液75℃减压蒸发，至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体8.78克。产物熔点：276～278℃。
实施例3：苹果酸青藤碱盐的制备
称取5mmoL苹果酸晶体0.67克，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，苹果酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有部分晶体析出时，升高温度到80℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.18克。产物熔点：141～145℃。
实施例4：柠檬酸青藤碱盐的制备
称取5mmoL柠檬酸酸晶体1.05克，加入30毫升水；再加入15.1mmoL青藤碱5.43克；室温搅拌半小时，柠檬酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有部分晶体析出时，升高温度到85℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体6.26克。产物熔点：157～159℃。
实施例5：酒石酸青藤碱盐的制备
称取5mmoL酒石酸晶体0.75克，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，酒石酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有部分晶体析出时，升高温度到80℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.13克。产物熔点：164～166℃。
实施例6：乳酸青藤碱盐的制备
称取含10mmoL含量为95％的乳酸液体，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；在室温搅拌半小时，乳酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有晶体析出时，升高温度到75℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.33克。产物熔点：109～112℃。
实施例7：丙酮酸青藤碱盐的制备
称取含10mmoL含量为95％的丙酮酸液体，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，丙酮酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，一段时间后，有晶体析出，升高温度到85℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.30克。产物熔点：133-136℃。
实施例8：半胱氨酸青藤碱盐的制备
称取10mmoL半胱氨酸盐酸盐1.58克，加入30毫升水溶解；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，半胱氨酸盐酸盐与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有部分晶体析出时，升高温度到80℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.82克。产物熔点：259～263℃。
实施例9：胱氨酸青藤碱盐的制备
称取5mmoL胱氨酸盐酸盐1.57克，加入25毫升甲醇溶解；再称取10.1mmoL青藤碱3.62克，溶解在25毫升甲醇中；将两种溶液混合，胱氨酸盐酸盐与青藤碱反应，立刻有白色沉淀产生，回流条件下搅拌反应1小时；将反应混合物过滤；过滤所得溶液34℃减压蒸发，至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.32克。产物熔点：239～241℃。
实施例10：色氨酸青藤碱盐的制备
称取10mmoL色氨酸盐酸盐2.40克，加入25毫升甲醇溶解；再称取10.1mmoL青藤碱3.62克，溶解在25毫升甲醇中；将两种溶液混合，色氨酸盐酸盐与青藤碱反应，立刻有白色沉淀产生，回流条件下搅拌反应1小时；将反应混合物过滤；过滤所得溶液34℃减压蒸发至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体5.14克。产物熔点：210～213℃。
实施例11：精氨酸青藤碱盐的制备
称取10mmoL精氨酸盐酸盐2.10克，加入25毫升甲醇溶解；再称取10.1mmoL青藤碱3.62克，溶解在25毫升甲醇中；将两种溶液混合，精氨酸盐酸盐与青藤碱反应，立刻有白色沉淀产生，回流条件下搅拌反应1小时；将反应混合物过滤；过滤所得溶液34℃减压蒸发至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.67克。产物熔点：253～256℃。
实施例12：酪氨酸青藤碱盐的制备
称取10mmoL酪氨酸盐酸盐2.18克，加入25毫升甲醇溶解；再称取10.1mmoL青藤碱3.62克，溶解在25毫升甲醇中；将两种溶液混合，酪氨酸盐酸盐与青藤碱反应，立刻有白色沉淀产生，回流条件下搅拌反应1小时；将反应混合物过滤；过滤所得溶液34℃减压蒸发至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体3.89克。产物熔点：273～276℃。
Claims (8)
1、甲磺酸青藤碱盐，其结构式为：
2、乙酰水杨酸青藤碱盐，其结构式为：
3、苹果酸青藤碱盐，其结构式为：
4、丙酮酸青藤碱盐，其结构式为：
5、如权利要求1所述甲磺酸青藤碱盐的制备方法，其特征在于该方法为：
称取含20mmoL含量为99％的甲磺酸，加入30毫升水；再加入青藤碱6.91克；室温搅拌半小时，甲磺酸与青藤碱反应，固体溶解变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液75℃减压蒸发，至析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体8.78克。
6、如权利要求2所述乙酰水杨酸青藤碱盐的制备方法，其特征在于该方法为：
称取10mmoL重结晶过的乙酰水杨酸晶体1.80克，加30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，乙酰水杨酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液放在旋转蒸发仪上56℃蒸发，一段时间后，有部分晶体析出，升高温度到72℃减压蒸发，析出绝大部分晶体，将晶体过滤收集，以少量95％的乙醇洗涤晶体2～3次，干燥，得化合物晶体5.26克。
7、如权利要求3所述苹果酸青藤碱盐的制备方法，其特征在于该方法为：
称取5mmoL苹果酸晶体0.67克，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，苹果酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，至有部分晶体析出时，升高温度到80℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.18克。
8、如权利要求4所述丙酮酸青藤碱盐的制备方法，其特征在于该方法为：
称取含10mmoL含量为95％的丙酮酸液体，加入30毫升水；再加入10.1mmoL青藤碱3.62克；室温搅拌半小时，丙酮酸与青藤碱反应，变成溶液；将反应混合物过滤；过滤所得溶液56℃减压蒸发，一段时间后，有晶体析出，升高温度到85℃减压蒸发，析出绝大部分晶体；将晶体收集，干燥得化合物晶体4.30克。
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