CN100408642C - 扁藻胞内活性物质的集成提取方法 - Google Patents

扁藻胞内活性物质的集成提取方法 Download PDF

Info

Publication number
CN100408642C
CN100408642C CNB2006100465004A CN200610046500A CN100408642C CN 100408642 C CN100408642 C CN 100408642C CN B2006100465004 A CNB2006100465004 A CN B2006100465004A CN 200610046500 A CN200610046500 A CN 200610046500A CN 100408642 C CN100408642 C CN 100408642C
Authority
CN
China
Prior art keywords
flat
algae
level
clear liquid
alga
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CNB2006100465004A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1844259A (zh
Inventor
杨海波
刘艳
于媛
赵莲华
吕玉瑶
王晓红
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Dalian University
Original Assignee
Dalian University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Dalian University filed Critical Dalian University
Priority to CNB2006100465004A priority Critical patent/CN100408642C/zh
Publication of CN1844259A publication Critical patent/CN1844259A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN100408642C publication Critical patent/CN100408642C/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Fertilizers (AREA)

Abstract

本发明属于生物化工领域，涉及扁藻胞内活性物质的集成提取方法，是利用乙酸己酯提取扁藻细胞中的色素、用饱和(NH4)2SO4溶液沉淀蛋白质、并用无水乙醇沉淀扁藻糖蛋白。扁藻糖蛋白呈淡乳白色粉末，易溶于水，不溶于有机溶剂，对体外培养的QGY-7701肝癌细胞、红白血病K562细胞的抑制率为60-75%；对纯系小鼠BL/C57体内黑色素瘤的抑制率为34%，并可促使小鼠的生长。所提取的副产物蛋白质和色素可用于食品添加剂和化妆品，藻泥用于农作物生长的促进剂和肥料。

Description

扁藻胞内活性物质的集成提取方法
技术领域
本发明属于生物化工领域，涉及扁藻胞内活性物质的集成提取。
背景技术
海洋微藻因其不同于陆地的生长环境而具有许多特异的生物活性物质，目前，许多国家和地区对其进行了有关培养、营养价值分析及开发利用研究，从中生产出了大量用途广泛的产品，如食品添加剂、保健食品、杀虫剂、植物生长调节剂以及抗菌、抗病毒和抗癌物质。在从微藻提取各种物质的过程中，一般只注重目标产物的提取和纯化，而对微藻中其它的活性物质往往因为提取工艺不适合而被破坏，或当作废物被忽略，这大大地浪费了宝贵的生物资源；而有些提取过程比较繁琐、耗时，增加了能源消耗，提高了产品的成本。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种从新鲜的海洋亚心型扁藻细胞中提取活性物质的集成提取方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是提供一种扁藻胞内活性物质的集成提取方法，是以新鲜的海洋亚心型扁藻为原料，经浸提、萃取、凝析、离心分离和干燥过程提取制得色素、粗蛋白和扁藻糖蛋白；包括如下步骤：
A、将用海水培养至平衡期后的扁藻培养液于3000-3500rpm离心3-5分钟，得原藻泥；
B、将原藻泥分别用1倍体积的去离子水反复清洗3遍，得清洗液和一级藻泥；
C、将一级藻泥循环冻融3次后，再分别与去离子水按1∶4和1∶2的体积比例搅拌混匀，离心2次，收集上清液得一级清液和二级藻泥；
D、一级清液中加入饱和(NH4)2SO4溶液得蛋白质沉淀和二级清液；蛋白质沉淀用去离子水复溶后，透析去除(NH4)2SO4，溶液减压干燥得蛋白质；
E、合并步骤B、D中的清洗液和二级清液，按1∶1的体积比例加入乙酸乙酯，萃取色素，分离得有机层和三级清液，将有机层减压干燥，得副产物色素；
F、将步骤E三级清液与步骤C二级藻泥混合均匀，在60-80℃加热2小时后离心，得四级清液和沉淀，沉淀作为副产物用于农作物生长的促进剂和肥料；
G、将四级清液加热浓缩至原体积的1/4，冷却至室温，再加入无水乙醇于4℃过夜使沉淀老化，离心分别获取乙醇浓度为0-50％和50-75％的两种级分的扁藻粗糖蛋白；剩余的上清液按步骤E提取色素；
H、两种粗糖蛋白沉淀重新溶于去离子水后，再用无水乙醇重沉淀1次，洗2次，最后用丙酮冲洗2次，通过水浴加热、干燥，得淡乳白色粉末，即为扁藻糖蛋白。
用乙醇浓度为0-50％级分的扁藻粗糖蛋白提纯得到的扁藻糖蛋白，呈淡乳白色粉末，易溶于水，不溶于有机溶剂，对体外培养的QGY-7701肝癌细胞、红白血病K562细胞的抑制率为60-75％；对纯系小鼠BL/C57体内黑色素瘤的抑制率为34％，并可促使小鼠的生长。所提取的副产物蛋白质和色素可用于食品添加剂和化妆品，藻泥用于农作物生长的促进剂和肥料。
本制备工艺充分利用海洋扁藻资源，特别是利用用作海珍品幼体培养的优良饵料亚心型扁藻(Platymonas subcordiformis))，在提取扁藻糖蛋白的过程中结合其他副产物的特点，同时提取了蛋白质、色素，而剩下的藻泥用于农作物生长的促进剂和肥料。工艺简洁，提高了原料的利用率，降低了能源消耗，缩短了生产过程，降低了生产成本。
具体实施方式
下面的实施例可以帮助本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1
A、将用海水培养至平衡期后的扁藻培养液于3000-3500rpm离心3-5分钟，得原藻泥；
B、将原藻泥分别用1倍体积的去离子水反复清洗3遍，得清洗液和一级藻泥；
C、将一级藻泥循环冻融3次后，再分别与去离子水按1∶4和1∶2的体积比例搅拌混匀，离心2次，收集上清液得一级清液和二级藻泥；
D、一级清液中加入饱和(NH4)2SO4溶液得粗蛋白质沉淀和二级清液；粗蛋白质沉淀用去离子水复溶后，透析去除(NH4)2SO4，溶液减压干燥得蛋白质；
E、合并步骤B、D中的清洗液和二级清液，按1∶1的体积比例加入乙酸乙酯，萃取色素，分离得有机层和三级清液，将有机层减压干燥，得副产物色素；
F、将步骤E三级清液与步骤C二级藻泥混合均匀，在60-80℃加热2小时后离心，得四级清液和沉淀，沉淀作为副产物用于农作物生长的促进剂和肥料；
G、将四级清液加热浓缩至原体积的1/4，冷却至室温，再加入无水乙醇于4℃过夜使沉淀老化，离心分别获取乙醇浓度为0-50％和50-75％的两种级分的扁藻粗糖蛋白；剩余的上清液按步骤E提取色素；
H、两种扁藻粗糖蛋白沉淀重新溶于去离子水后，按1∶1的体积比例再用无水乙醇重沉淀1次，洗2次，最后用丙酮冲洗2次，通过水浴加热、干燥，得淡乳白色粉末，即为扁藻糖蛋白。

Claims (1)

1. 一种扁藻胞内活性物质的集成提取方法，其特征是以新鲜的海洋亚心型扁藻为原料，经浸提、萃取、凝析、离心分离和干燥过程制得色素、粗蛋白和扁藻糖蛋白；包括如下步骤：
A、将用海水培养至平衡期后的扁藻培养液于3000-3500rpm离心3-5分钟，得原藻泥；
B、将原藻泥分别用1倍体积的去离子水反复清洗3遍，得清洗液和一级藻泥；
C、将一级藻泥循环冻融3次后，再分别与去离子水按1∶4和1∶2的体积比例搅拌混匀，离心2次，收集上清液得一级清液和二级藻泥；
D、一级清液中加入饱和(NH4)2SO4溶液得粗蛋白质沉淀和二级清液；粗蛋白质沉淀用去离子水复溶后，透析去除(NH4)2SO4，溶液减压干燥得蛋白质；
E、合并步骤B、D中的清洗液和二级清液，按1∶1的体积比例加入乙酸乙酯，萃取色素，分离得有机层和三级清液，将有机层减压干燥，得副产物色素；
F、将步骤E三级清液与步骤C二级藻泥混合均匀，在60-80℃加热2小时后离心，得四级清液和沉淀，沉淀作为副产物用于农作物生长的促进剂和肥料；
G、将四级清液加热浓缩至原体积的1/4，冷却至室温，再加入无水乙醇于4℃过夜使沉淀老化，离心分别获取乙醇浓度为0-50％和50-75％的两种级分的扁藻粗糖蛋白；剩余的上清液按步骤E提取色素；
H、两种粗糖蛋白沉淀重新溶于去离子水后，再用无水乙醇重沉淀1次，洗2次，最后用丙酮冲洗2次，通过水浴加热、干燥，得淡乳白色粉末，即为扁藻糖蛋白。
CNB2006100465004A 2006-04-29 2006-04-29 扁藻胞内活性物质的集成提取方法 Expired - Fee Related CN100408642C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2006100465004A CN100408642C (zh) 2006-04-29 2006-04-29 扁藻胞内活性物质的集成提取方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CNB2006100465004A CN100408642C (zh) 2006-04-29 2006-04-29 扁藻胞内活性物质的集成提取方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1844259A CN1844259A (zh) 2006-10-11
CN100408642C true CN100408642C (zh) 2008-08-06

Family

ID=37063227

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB2006100465004A Expired - Fee Related CN100408642C (zh) 2006-04-29 2006-04-29 扁藻胞内活性物质的集成提取方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN100408642C (zh)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102323261B (zh) * 2011-08-01 2012-12-05 大连大学 一种海洋微藻细胞内淀粉含量的测定方法
CN105535954A (zh) * 2016-01-29 2016-05-04 程龙 一种用于防治流感、禽流感、上呼吸道感染的疫苗
CN105709206A (zh) * 2016-01-29 2016-06-29 程潜 一种用于治疗脂肪肝、肝炎、肝硬化的药物
CN105617355A (zh) 2016-01-29 2016-06-01 徐宝贞 一种用于治疗心脑血管疾病的药物
CN110627863B (zh) * 2019-10-09 2021-07-06 广东丸美生物技术股份有限公司 蛋白多糖提取方法、提取物及其应用和化妆品

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1072248C (zh) * 1997-09-04 2001-10-03 中国科学院武汉植物研究所 螺旋藻藻渣在食品添加剂中的应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1072248C (zh) * 1997-09-04 2001-10-03 中国科学院武汉植物研究所 螺旋藻藻渣在食品添加剂中的应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
螺旋藻多糖的提取分离纯化及结构初步研究. 李亚清等.海洋环境科学，第23卷第2期. 2004
螺旋藻多糖的提取分离纯化及结构初步研究. 李亚清等.海洋环境科学，第23卷第2期. 2004 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN1844259A (zh) 2006-10-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101352249B (zh) 一种全面利用含油微藻的生产方法
Vonshak Recent advances in microalgal biotechnology
CN105075994A (zh) 一种蚯蚓的养殖方法
CN100408642C (zh) 扁藻胞内活性物质的集成提取方法
CN104293874B (zh) 一种制备游离虾青素的方法
CN105755088A (zh) 诱导雨生红球藻生产虾青素的方法
Soni et al. Food supplements formulated with Spirulina
CN103815195B (zh) 用于主养克氏原螯虾套养河蟹的饵料生物床的发酵物料的制作及使用方法
CN105061089A (zh) 一种梧桐种苗的培植土肥及其制备方法
CN101406203A (zh) 植物生长调节剂及其生产方法
ES2329750B1 (es) Procedimiento para obtener un producto fertilizante a partir de los residuos de la fabricacion de la cerveza.
CN104230541A (zh) 一种高粱秸秆为原料的黑木耳培养基及其制备方法
CN104151093A (zh) 一种多元速效肥料及其制备方法
CN105175168A (zh) 一种以油茶果壳为主要原料制备生物有机肥料的方法
Selvendran Large scale algal biomass (Spirulina) production in India
CN104072298B (zh) 生物鱼肥及其制备方法
CN106718817A (zh) 一种礁膜合子的大量附着和培养方法
CN103141520A (zh) 一种复酞核酸水稻秧苗调控剂及其施用方法
CN105077214A (zh) 一种富硒姬松茸的制备方法
CN107500979A (zh) 一种小麦专用农家肥的制作方法
CN103508779A (zh) 一种有机硒营养液及其制备方法与应用
CN105076135A (zh) 一种壳寡糖用于促进小麦光合作用及生长的调节剂
CN104496599A (zh) 一种有机禾肥及其生产方法
CN110089623A (zh) 栅藻及其作为饵料/饵料添加剂的应用
RO133390A0 (ro) Procedeu de obţinere a mierii îmbogăţite în polifenoli şi compoziţie rezultată din acesta

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
C17 Cessation of patent right
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20080806