CN100398522C

CN100398522C - 组织蛋白酶s的抑制剂

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Publication number: CN100398522C
Application number: CNB2004800234297A
Authority: CN
Inventors: H·刘; P·B·阿尔佩尔; D·S·卡拉纽斯凯
Original assignee: IRM LLC
Current assignee: IRM LLC
Priority date: 2003-08-20
Filing date: 2004-08-19
Publication date: 2008-07-02
Anticipated expiration: 2024-08-19
Also published as: CN1835927A

Abstract

本发明提供了用于选择性抑制组织蛋白酶S的化合物、组合物和方法。在一个优选的方面，在存在至少一种其它组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S。本发明还提供了通过选择性地抑制组织蛋白酶S治疗个体的疾病状态的方法。

Description

组织蛋白酶S的抑制剂

相关申请的交叉参考

本申请要求了于2003年8月20日提交的美国专利申请No.60/496,858的优先权，对于所有目的而言，将其教导引入本文作为参考。

背景技术

半胱氨酸蛋白酶代表一种可通过酶活性部位中半胱氨酸残基的亲核巯基催化肽键水解的酶类蛋白质。已经将哺乳动物的一些正常过程和疾病过程与半胱氨酸蛋白酶活性联系了起来，其包括但不限于：骨质疏松症、骨关节炎(Inui，T.O.Ishibashi等人，J Biol Chem 1997，272(13)，8109-12；Saftig，P.E.Hunziker等人，Adv Exp Med Biol 2000+ADs 2000，477，293-303；Saftig，P.E.Hunziker等人，Proc Natl Acad Sci USA 1998，95(23)，13453-8)、牙周病、佩吉特病、动脉粥样硬化(Jormsjo，S.D.M.Wuttge等人，Am J Pathol 2002 161(3)，939-45)、多发性硬化(Beck，H.G.Schwarz等人，Eur J Immunol 2001，31(12)，3726-36)、类风湿性关节炎(Nakagawa，T.Y.W.H.Brissette等人，Immunity 1999，10(2)，207-17；Hou，W.S.Z.Li等人，Am J Pathol 2001，159(6)，2167-77)、幼年型糖尿病、狼疮、哮喘(Cimerman，N.P.M.Brguljan等人，Pflugers Arch 2001，442(6增刊1)，R204-6)、组织排斥、阿尔茨海默病(Lemere，C.A.J.S.Munger等人，Am JPathol 1995，146(4)，848-60)、帕金森病(Liu，Y.L.Fallon等人，Cell 2002，111(2)，209-18)、神经元变性、休克(Jaeschke，H.M.A.Fisher等人，JImmunol 1998，160(7)，3480-6)、癌症(Fernandez，P.L.X.Farre等人，Int JCancer 2001，95(1)，51-5)、疟疾(Malhotra，P.P.V.Dasaradhi等人，MolMicrobiol 2002，45(5)，1245-54)、查加斯病(Eakin，A.E.A.A.Mills等人，JBiol Chem 1992，267(11)，7411-20)、利什曼病、血吸虫病和非洲锥虫病(Caffrey，C.R.S.Scory等人，Curr Drug Targets 2000，1(2)，155-62；Lalmanach，G.A.Boulange等人，Biol Chem 2002，383(5)，739-49)。

组织蛋白酶是属于酶分类EC 3.4.22的半胱氨酸蛋白酶的一个亚类(Barrett，A.J.N.D.Rawlings等人，Handbook of proteolytic enzymes.伦敦，Academic Press)。组织蛋白酶在溶酶体的、核内体的和细胞外的蛋白质降解中发挥主要作用，并且因此与许多疾病过程有关。例如，已经推测组织蛋白酶B[EC 3.4.22.1]在肿瘤转移中发挥作用(Berquin，I.M.和B.F.Sloane Adv Exp Med Biol 1996，389，281-94)。

组织蛋白酶S[EC 3.4.22.27]主要在专门的抗原呈递细胞如巨噬细胞和树突细胞中表达。已经表明适当的MHC II类抗原呈递需要组织蛋白酶S(Shi，G.P.J.A.Villadangos等人，Immunity 1999，10(2)197-206)。因为其在MHC II类抗原呈递中的必要作用，组织蛋白酶S已经被与炎症、关节炎和动脉粥样硬化相关联起来。组织蛋白酶K[EC 3.4.22.38]在偶联了组织蛋白酶K降解I型胶原的能力的破骨细胞中的选择性表达表明其在正常和致病性骨重建中发挥作用(Bromme，D.K.Okamoto等人，J Biol Chem1996，271(4)，2126-32)。在本领域中，需要可选择性地抑制特定半胱氨酸蛋白酶以治疗哺乳动物的一些致病性病症的化合物和方法。本发明满足了这种需求和其它一些需求。

发明概述

本发明提供了用于选择性地抑制组织蛋白酶S的化合物、组合物和方法。本发明的化合物在存在其它组织蛋白酶同工酶的情况下对组织蛋白酶S具有选择性。在一个优选的实施方案中，本发明的化合物在存在组织蛋白酶K、L、B或其组合的情况下对组织蛋白酶S具有选择性。本发明还提供了通过在存在其它组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S来对个体的疾病状态进行治疗的方法。在一个优选的方面，在存在组织蛋白酶K、L、B或其组合的情况下组织蛋白酶S被选择性地抑制。

一方面，本发明提供了式I的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

A选自-CH₂-、-O-CH₂-、-NR⁹CH₂-、-CH₂CH₂-和键；

R¹选自被0-3个R^1a取代的C₆-C₁₀芳基；含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员单环的或8-至10-员二环的杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R^1a所取代；和含有1至2个各自独立地选自N、O和S的杂原子的C₃-C₈杂环，其中所述的杂环被0-2个R^1a所取代；

各个R^1a独立地选自F、Cl、Br、CN、NO₂、OH、乙酰基、C(＝O)OR¹⁰、C(＝O)NR¹⁰R¹¹、S(＝O)₂NR¹⁰R¹¹；C₃-C₇环烷基；-SCH₃、-S(＝O)CH₃、-S(＝O)₂CH₃、NR¹²R¹³、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₃全氟代烷基、C₁-C₃全氟代烷氧基、C₁-C₆烷基、被0-3个R¹⁴取代的苯基、含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R¹⁴所取代、含有1至2个各自独立地选自N、O和S的杂原子的C₃-C₈杂环，其中所述的杂环被0-2个R¹⁴所取代并且是饱和的或部分不饱和的；

R²选自被0-2个R^2a取代的C₁-C₆烷基，其中所述的C₁-C₆烷基可以任选地含有选自-O-、-S-、-S(＝O)-和-S(＝O)₂-的杂原子；被0-1个R^2a取代的C₂-C₆链烯基；被0-1个R^2a取代的C₃-C₆炔基；被0-2个R^2b取代的C₃-C₇环烷基；被0-2个R^2b取代的C₇-C₁₁二环烷基；被0-3个R¹⁴取代的苯基；含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R¹⁴所取代；

各个R^2a独立地选自被0-3个R¹⁴取代的C₆-C₁₀芳基；全氟代苯基；被0-2个R^2b取代的C₃-C₈环烷基；被0-2个R^2b取代的C₇-C₁₁二环烷基；和含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员单环的或8-至10-员二环的杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R¹⁴所取代；

各个R^2b独立地选自H、OH、F、Cl、C₁-C₆烷基、C₁-C₆烷氧基、CF₃和OCF₃；

R³选自H和C₁-C₆烷基；

R⁴选自H；C(＝O)OR¹⁵；C(＝O)NR¹⁶R¹⁷；被0-2个R¹⁴取代的苯基；含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员杂芳基，其中所述的杂芳基被0-2个R¹⁴所取代；C₃-C₇环烷基；被0-2个R²⁰取代的C₁-C₆烷基，其中所述的C₁-C₆烷基可以任选地含有选自-O-、-S-、-S(＝O)-、-S(＝O)₂-和-NR¹⁶-的杂原子；

R⁵、R⁶、R⁷和R⁸各自独立地选自H和C₁-C₆烷基；

或者，R⁴和R⁶一起形成C₅-C₇环烷基；

各个R⁹独立地选自H和C₁-C₄烷基；

R¹⁰和R¹¹各自独立地选自H和C₁-C₄烷基；

或者，位于同一个氮上的R¹⁰和R¹¹一起形成含有1-2个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至7-员杂环；

各个R¹²独立地选自H、C₁-C₄烷基、(C₁-C₄烷基)-C(＝O)-和(C₁-C₄烷基)-S(＝O)₂-；

各个R¹³独立地选自H和C₁-C₄烷基；

或者，位于同一个氮上的R¹²和R¹³一起形成含有1-2个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至7-员杂环；

各个R¹⁴独立地选自H、OH、F、Cl、Br、CN、NO₂、COOR¹⁰、C(＝O)NR¹⁰R¹¹、S(＝O)₂NR¹⁰R¹¹、乙酰基、-SCH₃、-S(＝O)CH₃、-S(＝O)₂CH₃、NR¹²R¹³、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₃全氟代烷基、C₁-C₃全氟代烷氧基和C₁-C₆烷基；

各个R¹⁵独立地选自H、C₃-C₇环烷基、被0-1个R¹⁸取代的C₁-C₄烷基和被0-3个R¹⁴取代的苯基；

各个R¹⁶独立地选自H、C₃-C₈环烷基、被0-3个R¹⁴取代的苯基和被0-1个R¹⁸取代的C₁-C₆烷基；

各个R¹⁷独立地选自H和C₁-C₄烷基；

或者，位于同一个N原子上的R¹⁶和R¹⁷一起形成含有1-2个各自独立地选自N、O和S的杂原子的C₅-C₇杂环；

各个R¹⁸独立地选自H；C₃-C₇环烷基；被0-3个R¹⁴取代的苯基；和含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员杂芳基，其中所述的5-至6-员杂芳基被0-3个R¹⁴所取代；

Ar选自被0-3个R¹⁹取代的苯基和被0-3个R¹⁹取代的含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员杂芳基；

各个R¹⁹独立地选自H、F、Cl、Br、CN、OR²¹、SCH₃、S(＝O)CH₃、S(＝O)₂CH₃、S(＝O)₂NR¹⁰R¹¹、NR¹²R¹³、乙酰基、C(＝O)NR¹⁰R¹¹、CO₂R¹⁰、C(＝NH)NH₂、C₁-C₆烷基、CF₃；和含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6员杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R¹⁴所取代；

或者，R¹⁹和R⁸一起形成含有1-2个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至7-员杂环，其中所述的5至7员杂环与Ar邻位稠合并且其中所述的5-至7-员杂环可以任选地被0-2个R²²所取代；

各个R²⁰独立地选自H；OH；F；Cl；CN；NO₂；C(＝O)OR¹⁵；C(＝O)NR¹⁶R¹⁷；NR¹²R¹³；C₁-C₃全氟代烷氧基；C₁-C₃全氟代烷基；C₁-C₄烷氧基；C₂-C₄链烯基；C₂-C₄炔基；被0-3个R¹⁴取代的苯基；含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R¹⁴所取代；含有1至2个各自独立地选自N、O和S的杂原子的C₃-C₈杂环，其中所述的杂环被0-2个R¹⁴所取代并且是饱和的或部分不饱和的；和C₃-C₈环烷基；

各个R²¹独立地选自H；CF₃；CHF₂；C₁-C₆烷基；C₃-C₈环烷基；被0-3个R¹⁴取代的苯基；含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员杂芳基，其中所述的5-至6-员杂芳基被0-3个R¹⁴所取代；和被1个R¹⁸取代的CH₂；且

各个R²²独立地选自C₁-C₄烷基、F、Cl和C₁-C₄烷氧基、CF₃和OCF₃，或者两个R²²可以组合形成C₃-C₆环烷基。

第二方面，本发明提供了一种包含上述式I化合物和可药用赋形剂的药物组合物。

第三方面，本发明提供了一种在需要其的哺乳动物中选择性地抑制组织蛋白酶S活性的方法，其包括给所述的哺乳动物施用治疗有效量的上述式I化合物或其可药用的盐或前体药物。

当阅读下文的详细描述和附图时，这些方面和其它方面、实施方案和目的将变得更加显而易见。

附图简要说明

图1描述了MHC II抗原呈递。

发明详述

I.定义

除非另外说明，否则本文所用的所有科技术语一般具有与本发明所属领域普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。一般而言，本文所用的命名法以及有机和分析化学的实验室操作均是本领域众所周知的并且常用的。

正如在本公开物中所用的那样，除非在使用该术语的上下文中进行了特别调整，否则以下缩写和术语具有所定义的含义：

Ac 乙酰基

Bn 苄基

Boc 叔-丁氧基羰基

Cbz或Z 苄氧基羰基

DCC N，N′-二环己基碳二亚胺

DCM 二氯甲烷

DIC N，N′-二异丙基碳二亚胺

DIBAL 氢化二异丁基铝

DIEA或DIPEA 二异丙基乙基胺

DMAP 4-(二甲基氨基)吡啶

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

EDC或EDCI 1-乙基-3-(二甲基氨基丙基)-碳二亚胺

Fmoc 9-芴基甲氧基羰基

HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-

四甲基脲鎓六氟磷酸盐

HOBt 1-羟基苯并三唑

KHMDS 六甲基二硅烷基氨基钾

LAH 氢化铝锂

LDA 二异丙基氨基锂

LHMDS 六甲基二硅烷基氨基锂

m-CPBA 间-氯过苯甲酸

MW 微波

NaHMDS 六甲基二硅烷基氨基钠

PG 保护基团

PTSA 对-甲苯磺酸

Py 吡啶

RT或rt 室温

TEA 三乙胺

Tf 三氟甲磺酰基

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

Tol 对-甲苯基

上下文中分别与有机基团或化合物连接的术语“低级”定义的是可以是支链或无支链的具有至多7个且包括7个、优选至多4个且包括4个和(作为无支链的形式)一个或两个碳原子的化合物或基团。

上下文中分别与有机基团或化合物连接的术语“全氟代”定义的是具有至少两个可利用的被氟取代的氢的化合物或基团。例如，全氟代苯基指的是1，2，3，4，5-五氟苯基，全氟代甲烷指的是1，1，1-三氟甲基，全氟代甲氧基指的是1，1，1-三氟甲氧基。

烷基是支链的或无支链的，并且含有1至7个碳原子，优选地含有1-4个碳原子。烷基表示例如甲基、乙基、丙基、丁基、异丙基或异丁基。

链烯基表示2至7个碳原子、优选2-4个碳原子的直链或支链的链烯基，例如乙烯基、丙烯基、异丙烯基、丁烯基、异丁烯基或丁二烯基。

炔基表示2至7个碳原子、优选2-4个碳原子的直链或支链的炔基，例如乙炔基、丙炔基、异丙炔基、丁炔基或异丁炔基。

烷基、链烯基或炔基可以被至多3个取代基取代，所述取代基选自烷氧基、芳基、杂环基、羟基、卤素、氰基、任选地被取代的氨基、任选地被取代的氨基-氧基或三氟甲基。

亚烷基表示1至7个碳原子的直链或支链的亚烷基，即1至7个碳原子的二价烃基；例如为式-(CH₂)_n的二价基团的直链亚烷基，其中n是1、2、3、4、5、6或7。亚烷基优选地表示1至4个碳原子的直链亚烷基，例如亚甲基、亚乙基、亚丙基或亚丁基链，或被C₁-C₃-烷基(优选甲基)单取代或在相同或不同的碳原子上被C₁-C₃-烷基(优选甲基)二取代的亚甲基、亚乙基、亚丙基或亚丁基链，碳原子的总数至多为7且包括7。

烷氧基(或烷基氧基)优选地含有1-7个碳原子，更优选地含有1-6个碳原子，表示例如乙氧基、丙氧基、异丙氧基、异丁氧基，优选甲氧基。烷氧基包括环烷氧基和环烷基-烷氧基。

卤素(卤代)优选地表示氯或氟，但是也可以是溴或碘。

芳基表示单环、二环或三环的芳基，例如苯基或被1、2或3个选自烷基、烷氧基、芳基、羟基、卤素、氰基、氨基、氨基-烷基、三氟甲基、亚烷基二氧基和氧基-C₂-C₃-亚烷基所单-、二-或三-取代的苯基；它们均可以任选地进一步被取代，例如如上所定义的那样被取代；或1-或2-萘基；或1-或2-菲基。亚烷基二氧基是连接到苯基的两个相邻碳原子上的二价取代基，例如亚甲基二氧基或亚乙基二氧基。氧基-C₂-C₃-亚烷基也是连接到苯基的两个相邻碳原子上的二价取代基，例如氧基亚乙基或氧基亚丙基。氧基-C₂-C₃-亚烷基-苯基是2，3-二氢苯并呋喃-5-基。

优选的芳基是萘基、苯基或被烷氧基、苯基、卤素、烷基或三氟甲基单-或二取代的苯基，尤其是苯基或被烷氧基、卤素或三氟甲基单-或二取代的苯基，并且特别是苯基。

作为R的被取代的苯基的实例有例如4-氯苯-1-基、3，4-二氯苯-1-基、4-甲氧基苯-1-基、4-甲基苯-1-基、4-氨基甲基苯-1-基、4-甲氧基乙基氨基甲基苯-1-基、4-羟基乙基氨基甲基苯-1-基、4-羟基乙基-(甲基)-氨基甲基苯-1-基、3-氨基甲基苯-1-基、4-N-乙酰基氨基甲基苯-1-基、4-氨基苯-1-基、3-氨基苯-1-基、2-氨基苯-1-基、4-苯基-苯-1-基、4-(咪唑-1-基)-苯-基、4-(咪唑-1-基甲基)-苯-1-基、4-(吗啉-1-基)-苯-1-基、4-(吗啉-1-基甲基)-苯-1-基、4-(2-甲氧基乙基氨基甲基)-苯-1-基和4-(吡咯烷-1-基甲基)-苯-1-基、(4-噻吩基)-苯-1-基、4-(3-噻吩基)-苯-1-基、4-(4-甲基哌嗪-1-基)-苯-1-基和4-(哌啶基)-苯基和4-(吡啶基)-苯基，其任选地在杂环部分被取代。

苄基表示苯基-CH₂-基团。被取代的苄基意指其中苯环被一个或多个环系统取代基取代的苄基。代表性的苄基包括4-溴苄基、4-甲氧基苄基、2，4-二甲氧基苄基等。

杂芳基表示单环或二环的杂芳基，例如吡啶基、吲哚基、吲唑基、喹喔啉基、喹啉基、异喹啉基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、苯并吡喃基、苯并噻喃基、呋喃基、吡咯基、噻唑基、苯并噻唑基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基或被取代、尤其是被例如烷基、硝基或卤素单-或二-取代的任何其它基团。吡啶基表示2-、3-或4-吡啶基，有利地是2-或3-吡啶基。噻吩基表示2-或3-噻吩基。喹啉基优选表示2-、3-或4-喹啉基。异喹啉基优选表示1-、3-或4-异喹啉基。苯并吡喃基、苯并噻喃基分别优选表示3-苯并吡喃基或3-苯并噻喃基。噻唑基优选表示2-或4-噻唑基，并且最优选的是4-噻唑基。三唑基优选地是1-、2-或5-(1，2，4-三唑基)。四唑基优选地是5-四唑基。

杂芳基优选地是吡啶基、吲哚基、喹啉基、吡咯基、噻唑基、异噁唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、咪唑基、噻吩基、呋喃基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、异喹啉基、苯并噻吩基、噁唑基、吲唑基或被取代、尤其是被单-或二-取代的这些基团中的任何一种。

联芳基可以优选地是例如联苯基，即2、3或4-联苯基，优选地是4-联苯基，其各自任选地被例如烷基、烷氧基、卤素、三氟甲基或氰基所取代，或者杂环-碳环联芳基，优选地是例如噻吩基苯基、吡咯基苯基和吡唑基苯基。

环烷基表示任选地被烷基取代的含有3至10个环碳的饱和环状烃，并且有利地是任选地被烷基取代的环戊基、环己基、环庚基或环辛基。

氨基可以任选地被例如1或2个烷基所取代。

碳环表示具有5至7个环成员的饱和或部分不饱和的环状烃，其中1至2个环成员可以任选地被以下基团之一所替代：-O-、-S-、-S(＝O)-、-S(＝O)₂-和-NR-，其中R是本发明的基团。

杂环基表示含有一个或多个、优选1或2个选自O、N或S的杂原子和3至10个、优选5至8个环原子的饱和环状烃；例如四氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡咯基、哌啶基、哌嗪基或吗啉代；它们均可以任选地被取代，例如如上文关于芳基所述的那样被取代。

本发明的酸性化合物的可药用盐是与碱形成的盐，即阳离子盐如碱金属盐和碱土金属盐，如钠盐、锂盐、钾盐、钙盐、镁盐、以及铵盐，如铵盐、三甲基-铵盐、二乙基铵盐和三-(羟基甲基)-甲基-铵盐。

类似地，如果碱性基团如吡啶基构成结构的一部分，则酸加成盐如无机酸、有机羧酸和有机磺酸、例如盐酸、甲磺酸、马来酸的酸加成盐也是可能的。

“治疗”指的是缓解或减轻疾病和/或其伴随症状的方法。

“抑制”和“抑制剂”指的是阻止特定作用或功能的化合物或方法。

“抑制常数”，K_i，是酶-抑制剂复合物的解离常数，或者抑制剂对酶的结合亲合力的倒数。对于经典的抑制而言，K_i的值远远大于酶浓度并且可以通过在多个抑制剂浓度下监测竞争性底物的反应速率来测量K_i。然后，用以下的非线性回归方程对抑制速率进行拟合：

v_{i} / v_{o} = \frac{K_{m} + [S]}{K_{m} (1 + [I] / K_{i}) + [S]}

其中v_o是不存在抑制剂的情况下底物处理的初始速率，v_i是在抑制剂浓度[I]下底物处理的初始速率，K_m是稳态米氏常数(Fersht，A.Structure and Mechanism in Protein Science.纽约，W.H.Freeman and Company，1999)，且[S]是竞争底物的浓度。

关于上述经典抑制所作出的假设是游离抑制剂浓度等于总抑制剂浓度。对于具有大约等于酶浓度[E]的K_i’s的抑制剂而言，游离抑制剂浓度等于总抑制剂浓度的假设不再是正确的，可以用所述方法(Kuzmic，P.K.C.Elrod等人，Anal Biochem 2000，286(1)45-50)测定表观抑制常数K_i ^app必须用另一个替代方程进行拟合：

v_{i} / v_{o} = \frac{[E] - [I] - {K_{i}}^{app} + SQRT ({([E] - [I] - {K_{i}}^{app})}^{2} + 4 [E] {K_{i}}^{app})}{2 [E]} .

可以用以下关系式由竞争抑制剂的表观抑制常数K_i ^app来确定抑制常数K_i：

K_{i} = \frac{{K_{i}}^{app}}{1 + [S] / K_{m}} .

其中任何两个相邻的环具有两个(例如仅有两个)共有的相邻原子的多环系统被称为“邻位稠合”。该类环系统具有n个共同的侧面和2n个共同的原子。

“治疗有效量”指的是足以预防所治疗的疾患或病症的一种或多种症状的发生或在一定程度上可缓解所治疗疾患或病症的一种或多种症状的所施用的化合物量。

本文所用的“组合物”旨在包括包含特定量的特定成分的产品以及可以由特定量的特定成分的组合直接或间接产生的任何产品。“可药用的”意指所述的载体、稀释剂或赋形剂必须与制剂中的其它成分相容并且对其接受者无害。

“个体”指的是动物如哺乳动物，包括但不限于灵长目动物(例如人)、牛、绵羊、山羊、马、犬、猫、兔、大鼠、小鼠等。在某些方面，所述的个体是人。

II.总论

组织蛋白酶S是一种已经被与哺乳动物的一些正常过程和疾病过程相关联的半胱氨酸蛋白酶。具体而言，由于组织蛋白酶S在MHC II类抗原呈递中发挥作用，其已经被与炎症、关节炎和动脉粥样硬化直接相关联。在一个优选的方面，本发明提供了抑制组织蛋白酶S活性的化合物。本发明还提供了通过抑制组织蛋白酶S的活性而在哺乳动物中治疗一些疾病状态的方法。在一个更优选的方面，本发明的化合物在存在至少一种组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S。

III.化合物

A.化合物的制备

在以下流程图中，对一些制备本发明化合物的方法进行了举例说明。本领域技术人员将意识到这些方法是代表性的方法，决非囊括了制备本发明化合物的所有方法。流程图1-4中基团的定义如式I中所述。

在某些方面，本发明所提供的制备所述化合物的一种途径如流程图1所示。

流程图1

a)MeReO₃，H₂O₂，3-氰基吡啶，CH₂Cl₂；

b)杂环R¹H，K₂CO₃，DMF，160℃，微波，6分钟；或纯脂族胺，微波辐射

c)氯甲酸4-硝基苯酯，吡啶，加热或氯甲酸4-硝基苯酯，DMAP，DMF，加热；

d)NH₂-CR⁴R⁵CH₂NR⁸Ar，DMF，DIEA。

在该反应中，用甲基三氧代铼法(Sharpless，K.B.等人，一种简单有效的对末端烯烃进行环氧化的方法.Chem.Commun.1997，1565；Sharpless，K.B.等人，用H₂O₂水溶液和催化的甲基三氧代铼/吡啶进行的高效的烯烃环氧化作用：吡啶-介导的配体加速作用，J.Am.Chem.Soc.1997，119，6189)将末端烯烃氧化成相应的外消旋的末端环氧化物1A。然后，将该中间体(对于某些R²取代基而言其是可商购获得的)开环成1B。如果R¹H是含NH的杂环，则用粉状碳酸钾在DMF中并且用微波辐射来完成该反应。如果R¹H是脂族胺，则在纯胺中用微波辐射来完成该反应。然后，将1B的羟基官能化成具有离去基团(LG)的混合碳酸酯1C。这一步是用碳酸4-硝基苯酯在吡啶或含有作为碱的DMAP的DMF中进行的。如果不能耐受这些条件，则用光气在CH₂Cl₂中来完成转化。也可以使用其它离去基团(LG)：制备其中LG表示Cl的化合物1C的方法是本领域中已知的，也可以用本领域技术人员可知的其它方法代替。最后，使该混合的碳酸酯1C与胺NH₂-CR⁴R⁵CH₂NR⁸Ar在DMF中反应，用DIEA作为碱，得到所需的氨基甲酸酯1D。

获得本发明中所述的化合物的另一种途径如流程图2所示。

流程图2

a)ArSO₂Cl，吡啶，CH₂Cl₂；

b)杂环R¹H，K₂CO₃，DMF，160℃，微波，6分钟或胺，纯净的，160℃，微波，6分钟；

c)氯甲酸4-硝基苯酯，吡啶，加热或氯甲酸4-硝基苯酯，DMAP，DMF，加热或光气，CH₂Cl₂，RT；

d)NH₂-CR⁴R⁵CH₂NR⁸Ar，DMF，DIEA

用二醇(可以通过末端烯烃的二羟基化或适宜乳酸的还原来获得)作为原料，将伯羟基选择性地磺酰化，得到2A。然后，用例如杂环阴离子或有机胺将末端碳官能化，得到2B。然后，用氯甲酸硝基苯酯或光气将该仲醇活化形成氨基甲酸酯，得到2C。如上所述，也可以通过已知方法产生其它反应性酰化剂如氯甲酸酯(2C，其中LG＝Cl)。然后，使该中间体与胺反应，得到所需的2D。关于光学纯的二醇的制备和衍生化，参见Sharpless，K.B.等人，催化不对称二羟基化Chem.Rev.1994，94，2483；Sharpless，K.B.等人，Catalytic Asymmetric Synthesis，Ojima，I.(编辑)；Wiley-VCH，2002；第2版，第357-398页。

本发明中所用的芳基氨基乙基胺3A(流程图3)可以如E.Altman等人，J.Med Chem.2002，45，2352-54和本文所引用的参考文献中所述的那样通过用芳族胺对噁唑烷-2-酮进行脱羧开环来制备。

流程图3

本发明所用的二胺的另一种合成途径如流程图4所示。

流程图4

a)[BH₃·THF，THF 0℃]或[(i)TEA，氯甲酸异丁酯，THF，0℃；(ii)NaBH₄，H₂O，0℃至RT]；

b)(i)Dess-Martin过碘烷(periodinane)，DCM；(ii)NHR⁸Ar，NaCNBH₃，AcOH，MeOH；

c)除去PG。

N-保护的氨基酸可以用BH₃法或相应混合酸酐的NaBH₄还原[参见R.C.Larock，A guide to functional group preparations第548-552页，Wiley-VCH，1989]来进行还原，得到4A(流程图4)。然后，可以将该醇氧化成醛并用胺对所得的醛进行还原氨基化，得到4B。然后，可以用PG的适宜试剂如对于Boc而言使用TFA将该中间体去保护。

本发明所用的二氢吲哚的合成方法在文献中有大量描述并且这些方法对于本领域技术人员而言是众所周知的。在以下参考文献中阐述了通常的方法，但是并不限于这些方法。参见：(a)G.W.Gribble等人，Synthesis 1977，859；(b)A.Smith等人，Chem.Commun.1965，427；(c)G.W.Gribble等人，J.Am.Chem.Soc.1974，96，7812；(d)J.G.Berger Synthesis 1974，508；(e)L.J.Dolby等人，J.Heterocycl. Chem.1966，3，124；(f) W.A.Remers等人，J.Org.Chem.1971，36，79；(g)S.O′Brien等人，J.Chem.Soc.1960，4609；(h)Y.Kikugawa等人，Synthesis 1978，477。

B.优选的化合物

一方面，本发明提供了式I的化合物：

或其可药用的盐或前体药物，其中：

A选自-CH₂-、-O-CH₂-、-NR⁹CH₂-、-CH₂CH₂-和键；

R³选自H和C₁-C₆烷基；

R⁵、R⁶、R⁷和R⁸各自独立地选自H和C₁-C₆烷基；

或者，R⁴和R⁶一起形成C₅-C₇环烷基；

各个R⁹独立地选自H和C₁-C₄烷基；

R¹⁰和R¹¹各自独立地选自H和C₁-C₄烷基；

各个R¹³独立地选自H和C₁-C₄烷基；

各个R¹⁷独立地选自H和C₁-C₄烷基；

本发明的化合物是组织蛋白酶S抑制剂。在特别优选的方面，该组织蛋白酶S抑制剂对组织蛋白酶K、L、B或其组合无抑制作用。

在一个优选的方面，本发明提供了式Ia的化合物：

其中R³是H。

在某些方面，尤其优选这样的式Ia化合物，其中：

R²选自被0-1个R^2a取代的C₁-C₆烷基、被0-2个R^2b取代的C₃-C₇环烷基、被0-2个R^2b取代的C₇-C₁₁二环烷基和被0-3个R¹⁴取代的苯基；且各个R^2a独立地选自被0-3个R¹⁴取代的C₆-C₁₀芳基、被0-2个R^2b取代的C₃-C₈环烷基和被0-2个R^2b取代的C₇-C₁₁二环烷基。

在某些其它方面，还优选这样的式Ia化合物，其中：

R²选自C₁-C₆烷基和被1个R^2a取代的C₁-C₄烷基；且

R^2a选自被0-2个R^2b取代的C₃-C₇环烷基和被0-2个R^2b取代的C₇-C₁₁二环烷基。

另一方面，优选这样的式Ia化合物，其中：

R¹选自含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员单环的或8-至10-员二环的杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R^1a所取代；和含有1至2个各自独立地选自N、O和S的杂原子的C₃-C₈杂环，其中所述的杂环被0-2个R^1a所取代。

R¹优选地是含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员单环的或8-至10-员二环的杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R^1a所取代。该结构式的适宜的R¹基团包括以下基团：

-1吡唑基 2-苯并噻唑基 1-咪唑基

1-苯并咪唑基 2-苯并噁唑基 1-噁二唑基

。

在一个方面，R¹取代基包括但不限于吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吡唑基、咪唑基、1，3，4-噁二唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基和苯并噁唑基，其各自被0-3个R^1a所取代。

在某些其它方面，还优选这样的式Ia化合物，其中：

R⁴选自H；C₃-C₇环烷基；被0-1个R²⁰取代的C₁-C₆烷基，其中所述的C₁-C₆烷基可以任选地含有选自-O-、-S-、-S(＝O)₂-的杂原子；

各个R²⁰独立地选自H；OH；C(＝O)OR¹⁵；C(＝O)NR¹⁶R¹⁷；NR¹²R¹³；被0-3个R¹⁴取代的苯基；含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R¹⁴所取代；含有1至2个各自独立地选自N、O和S的杂原子的C₃-C₈杂环，其中所述的杂环被0-2个R¹⁴所取代并且是饱和的或部分不饱和的；和C₃-C₈环烷基；且

或者，R¹⁹和R⁸一起形成含有1个氮的5-至7-员杂环，其中所述的5至7员杂环与Ar邻位稠合；其中所述的5-至7-员杂环可以任选地被0-2个R²²所取代。

在另外的其它方面，还优选这样的化合物，其中：

R¹选自吗啉基、吡唑基、咪唑基、1，3，4-噁二唑基、苯并咪唑基、苯并噻唑基和苯并噁唑基，其被0-3个R^1a取代；

R²选自C₁-C₆烷基和被1个R^2a取代的C₁-C₂烷基；

R^2a选自被0-2个R^2b取代的C₃-C₇环烷基；

R⁴选自H；C₃-C₅环烷基；被0-1个R²⁰取代的C₁-C₆烷基，其中所述的C₁-C₆烷基可以任选地含有选自-O-、-S-、-S(＝O)₂-的杂原子；且各个R²⁰独立地选自H、OH、C(＝O)OR¹⁵、C(＝O)NR¹⁶R¹⁷、NR¹²R¹³和被0-3个R¹⁴取代的苯基。

在另一个优选的方面，本发明提供了式Ib的化合物：

其中：

各个R^1a独立地选自F、Cl、Br、C₁-C₆烷氧基、C₁-C₃全氟代烷基、C₁-C₃全氟代烷氧基、C₁-C₆烷基；

R⁴选自H、CH₂CO₂R¹⁵、C₁-C₆烷基、环丙基、苄氧基甲基、苄基、苯乙基、甲磺酰基甲基、甲磺酰基乙基和(C₁-C₄烷基)-OH；

各个R¹⁵独立地选自H和C₁-C₄烷基。

在另一个优选的方面，本发明提供了式Ic的化合物：

优选的式I化合物列于下：

1.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(R)-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯；

2.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯；

3.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-2，2-二甲基-丙酯；

4.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基-3，3-二甲基)-丁酯；

5.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸3，3-二甲基-(S)-1-吗啉-4-基甲基-丁酯；

6.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸2-(苯并咪唑-1-基)-1-(S)-环戊基甲基-乙酯；

7.[2-(4-二氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(3-三氟甲基-吡唑-1-基)-乙酯；

8.[2-(4-二氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯；和

9.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯；

10.[2-(4-三氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯；

11.[2-(5-氟-3，3-二甲基-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基-3，3-二甲基)丁酯；

12.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯。

本发明的化合物可以以游离形式形式被获得，或者以盐形式被获得，条件是存在成盐基团，或者以酯的形式被获得，条件是存在成酯基团。

可以用可药用的碱、例如水性碱金属氢氧化物将具有酸性基团的本发明的化合物转化成盐，有利地是在存在醚性或醇性溶剂、如低级链烷醇的情况下进行转化。所得的盐可以被转化为游离化合物，例如通过用酸处理进行转化。这些盐或其它盐可以用于纯化所获得的化合物。通过与适宜的胺、例如二乙胺等进行反应可获得铵盐。

在某些方面，可以将本发明的具有碱性基团的化合物转化成酸加成盐，尤其是可药用的盐。例如可以用以下酸形成这些盐：无机酸，如矿物酸，例如硫酸、磷酸或氢卤酸，或者有机羧酸，如(C₁-C₄)链烷烃羧酸，其例如是未取代的或者被卤素所取代，例如乙酸，如饱和或不饱和的二元羧酸，例如草酸、琥珀酸、马来酸或富马酸，如羟基羧酸，例如乙醇酸、乳酸、苹果酸、酒石酸或柠檬酸，如氨基酸，例如天门冬氨酸或谷氨酸，或有机磺酸，如(C₁-C₄)-烷基磺酸(例如甲磺酸)或未取代的或被取代的(例如被卤素取代)的芳基磺酸。优选的是与盐酸、甲磺酸和马来酸形成的盐。

由于游离化合物和其盐或酯形式的化合物之间的密切关系，所以当在本文中涉及一种化合物时，也同时意指其相应的盐或酯，条件是在所述情况下这是可能的或适宜的。

包括它们的盐在内的化合物也可以以其水合物形式被获得，或者包含用于对其进行结晶的其它溶剂。

本发明的包含游离羟基的化合物还可以以可药用的、生理学可裂解的酯的形式存在，并且该类形式也包括在本发明的范围内。该类可药用的酯优选地是前体药物酯衍生物，其在生理学条件下可以通过溶剂解或裂解被转化成相应的本发明的包含游离羟基的化合物。适宜的可药用的前体药物酯是那些衍生自羧酸、碳酸单酯或氨基甲酸的酯，优选衍生自任选地被取代的低级链烷酸或芳基羧酸的酯。

正如对本领域技术人员而言显而易见的那样，本发明的某些化合物具有不对称碳原子(光学中心)或双键；外消旋物、非对映体、对映体、几何异构体和各异构体均包括在本发明的范围内。

本发明提供了选择性地抑制组织蛋白酶S的化合物。在某些优选的方面，本发明提供了在存在组织蛋白酶同工酶如组织蛋白酶A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、O、P、Q、R、V、W和X的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的化合物。在一个更优选的方面，本发明提供了在存在组织蛋白酶K、L、B或其组合的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的化合物。

可用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患的本发明的化合物优选具有小于10μM的组织蛋白酶S抑制常数。更优选地，可用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患的本发明的化合物具有小于1.0μM的组织蛋白酶S抑制常数。最优选地，可用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患的本发明的化合物具有小于0.1μM的组织蛋白酶S抑制常数。

在一个优选的方面，在存在组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的本发明的化合物具有比其组织蛋白酶S抑制常数高至少10倍的组织蛋白酶同工酶抑制常数。在一个更优选的方面，在存在组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的本发明的化合物具有比其组织蛋白酶S抑制常数高至少100倍的组织蛋白酶同工酶抑制常数。在一个最优选的方面，在存在组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的本发明的化合物具有比其组织蛋白酶S抑制常数高至少1000倍的组织蛋白酶同工酶抑制常数。

IV.组合物

本发明的药物组合物是那些适于经肠如口服或直肠、透皮、局部和胃肠外施用于包括人在内的哺乳动物从而抑制组织蛋白酶S活性和用于治疗疾病的药物组合物，其中所述的疾病是组织蛋白酶S依赖性病症，特别是慢性神经性疼痛(参见，WO 03/020287)、阿尔茨海默病和某些自身免疫性病症，包括但不限于幼年型糖尿病、多发性硬化、寻常性天疱疮、格雷夫斯病、重症肌无力、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和桥本甲状腺炎；变态反应性疾病，包括但不限于哮喘；和异体移植物免疫反应，包括但不限于器官移植物或组织移植物的排斥反应。

更具体而言，所述药物组合物包含抑制组织蛋白酶S有效量的本发明的化合物。

本发明的药理学活性化合物可用于制备药物组合物，所述药物组合物包含有效量的所述化合物以及与之联用或与之混合的适于经肠或胃肠外应用的赋形剂或载体。

优选的是片剂和明胶胶囊剂，其包含活性成分以及a)稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纤维素和/或甘氨酸；b)润滑剂，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、其镁盐或钙盐和/或聚乙二醇；对于片剂而言，还包含c)粘合剂，例如硅酸镁铝、淀粉糊、明胶、西黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠和/或聚乙烯吡咯烷酮；如果需要，还可包含d)崩解剂，例如淀粉、琼脂、海藻酸或其钠盐或泡腾混合物；和/或e)吸收剂、着色剂、矫味剂和甜味剂。可注射的组合物优选地是等张的水性溶液或混悬液，栓剂优选是由脂肪乳液或混悬液制得的。所述组合物可以被灭菌和/或含有辅剂，如防腐剂、稳定剂、湿润剂或乳化剂、促溶剂(solutionpromoter)、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂。此外，其还可以含有其它有治疗价值的物质。所述组合物是分别按照常规的混合、制粒或包衣方法制备的，并且含有约0.1-75％，优选约1-50％的活性成分。

可以用本领域中已知的方法对片剂包薄膜衣或包肠溶衣。

用于透皮应用的适宜制剂包含有效量的本发明的化合物和载体。优选的载体包括用于帮助通过接受主体皮肤的可吸收的药理学可接受的溶剂。例如，透皮装置是绷带形式，所述绷带形式包含背衬层、含有所述化合物并任选地含有载体的贮库、任选地用于在延长的一段时间中以控制的和预定的速率将化合物递送至接受主体的皮肤的控速屏障和用于将该装置固定在皮肤上的手段。也可以使用骨架型透皮制剂。

用于局部应用例如应用于皮肤和眼的适宜制剂优选地是本领域中众所周知的水溶液、软膏剂、乳膏剂或凝胶剂。该类制剂可含有增溶剂、稳定剂、增加张力的物质、缓冲剂和防腐剂。

所述药物制剂含有单独的或于另外的治疗剂组合的抑制组织蛋白酶S有效量的上文所定义的本发明的化合物。

在与另外的活性成分联用时，本发明的化合物可以与其它活性成分同时施用、在其之前施用或在其之后施用，它们被通过相同或不同的施用途径独立地进行施用或者在相同的药物制剂中一起进行施用。

所施用的活性化合物的剂量取决于温血动物(哺乳动物)的种类、体重、年龄和个体情况以及施用形式。用于口服施用于约50至70kg的哺乳动物的单位剂量可以含有约5至500mg活性成分。

一方面，本发明的药物组合物提供上文所定义的式I化合物或其可药用的盐或前体药物以及可药用的赋形剂。

在一个优选的方面，本发明的药物组合物提供上文所定义的式Ia化合物。

在一个优选的方面，本发明的药物组合物提供上文所定义的式Ib的化合物。

在某些方面，本发明提供了包含本发明的化合物和可药用赋形剂的组合物，其在存在其它组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S。在一个更优选的方面，本发明提供了在存在组织蛋白酶K、L、B或其组合的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的组合物。

在本发明的另一个方面，可用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患的本发明的组合物优选地具有小于10μM的组织蛋白酶S抑制常数。更优选地，可用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患的本发明的组合物具有小于1.0μM的组织蛋白酶S抑制常数。最优选地，可用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患的本发明的组合物具有小于0.1μM的组织蛋白酶S抑制常数。

在一个优选的方面，本发明的组合物利用的组合物在存在组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S，具有比其组织蛋白酶S抑制常数高至少10倍的组织蛋白酶同工酶抑制常数。在一个更优选的方面，在存在组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的本发明的化合物具有比其组织蛋白酶S抑制常数高至少100倍的组织蛋白酶同工酶抑制常数。在一个最优选的方面，在存在组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的本发明的化合物具有比其组织蛋白酶S抑制常数高至少1000倍的组织蛋白酶同工酶抑制常数。

V.方法

由于本发明的化合物作为组织蛋白酶S抑制剂的活性，它们特别是可在哺乳动物中用作治疗和预防与组织蛋白酶S水平升高有关的疾病和医学情况的物质。例如，本发明的化合物可用于治疗阿尔茨海默病和某些自身免疫性病症，包括但不限于幼年型糖尿病、多发性硬化、寻常性天疱疮、格雷夫斯病、重症肌无力、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎和桥本甲状腺炎；变态反应性疾病，包括但不限于哮喘；和异体移植物免疫反应，包括但不限于器官移植物或组织移植物的排斥反应。

用本领域中公知的和本文所述的体外和体内药理学试验对其有益作用进行了评价。

上述性质可以有利地使用哺乳动物例如大鼠、小鼠、犬、兔、猴或离体器官和组织以及天然的或通过例如重组技术制备的哺乳动物酶制剂在体外和体内试验中证明。本发明的化合物可以以溶液形式、例如优选地以水性溶液或混悬液形式体外应用和经肠或胃肠外、优选口服途径体内应用，例如以混悬液或水溶液的形式或者以固体胶囊制剂的形式体内应用。体外应用的剂量可以为约10^-5摩尔至10^-9摩尔浓度。根据施用途径的不同，体内应用的剂量可以为约0.1至100mg/kg。

本发明的化合物用于治疗类风湿性关节炎的抗关节炎功效可以用模型如之前所述的(R.E.Esser等人，J.Rheumatology 1993，20，1176)大鼠佐剂性关节炎模型或与该模型类似的模型来确定。本发明的化合物用于治疗骨关节炎的功效可以用模型例如之前所述的(Colombo等人，Arth.Rheum.1993，26，875-886)兔部分外侧半月板切除术模型或与该模型类似的模型来确定。所述化合物在模型中的功效可以如之前所述的那样(O′Byrne等人，Inflamm.Res.1995，44，S177-S118)用组织学评分法进行定量。

本发明还涉及在哺乳动物中使用本发明的化合物和它们可药用的盐或其药物组合物用于抑制组织蛋白酶S和用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患、如本文所述的组织蛋白酶S依赖性疾患、例如炎症、类风湿性关节炎和骨关节炎的方法。

在一个优选的方面，本发明涉及在哺乳动物中治疗类风湿性关节炎、骨关节炎和炎症(以及上述其它疾病)的方法，其包括给需要其的哺乳动物施用相应有效量的本发明的化合物。

在一个优选的方面，本发明的方法提供上文所定义的式I的化合物。

在一个优选的方面，本发明的方法提供上文所定义的式Ia的化合物。

在另一个优选的方面，本发明的方法提供上文所定义的式Ib的化合物。

本发明的可用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患的方法优选地使用具有小于10μM组织蛋白酶S抑制常数的化合物。更优选地，本发明的可用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患的方法使用具有小于1.0μM组织蛋白酶S抑制常数的化合物。最优选地，本发明的可用于治疗组织蛋白酶S依赖性疾患的方法使用具有小于0.1μM组织蛋白酶S抑制常数的化合物。

此外，本发明还涉及在哺乳动物中选择性地抑制组织蛋白酶S活性的方法，其包括给需要其的哺乳动物施用抑制组织蛋白酶S有效量的本发明的化合物。在一个优选的方面，本发明的方法使用在存在组织蛋白酶同工酶如组织蛋白酶A、B、C、D、E、F、G、H、K、L、M、O、P、Q、R、V、W和X的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的化合物。在一个更优选的方面，本发明的方法使用在存在组织蛋白酶K、L、B或其组合的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的化合物。

在一个优选的方面，本发明的方法使用在存在组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的化合物，具有比其组织蛋白酶S抑制常数高至少10倍的组织蛋白酶同工酶抑制常数。在一个更优选的方面，在存在组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的本发明的化合物具有比其组织蛋白酶S抑制常数高至少100倍的组织蛋白酶同工酶抑制常数。在一个最优选的方面，在存在组织蛋白酶同工酶的情况下选择性地抑制组织蛋白酶S的本发明的化合物具有比其组织蛋白酶S抑制常数高至少1000倍的组织蛋白酶同工酶抑制常数。

VI.实施例

A.一般操作

除非另外说明，否则在使用之前将玻璃器皿风干，在干燥时不需要采取特殊的措施。说明为无水的所有溶剂均是从生产商处购得的并且是以其获得时的形式被使用的。所有其它购得的试剂均是以收到时的形式被使用的。除非另外说明，否则所有反应均在正氮气压下进行。硅胶色谱是使用预填充柱和可进行线性溶剂梯度洗脱和自动级分收集的仪器来进行的。¹HNMR光谱数据如下进行报告：以δ刻度为基础的化学位移(使用残留的质子(protio)溶剂作为内标)，多重性(s＝单峰，d＝双峰，t＝三重峰，q＝四重峰，m＝多重峰)，积分和以赫兹为单位的偶联常数。¹³C光谱是以APT实验形式进行记录的并且以ppm为单位进行报告，用残余溶剂作为内标。¹H和¹³C NMR光谱数据是在Brucker 400MHz NMR光谱仪上进行记录的。微波协助的反应是在得自Personal Chemistry，瑞典的EmrysOptimizer上进行的。

参比例1.(S)-2-(4-甲氧基-苯基氨基)-1-甲基乙基胺的合成

步骤A：(S)-2-(叔-丁氧基羰基氨基)-丙醛的制备

在具有磁力搅拌棒的100mL圆底(r.b.)烧瓶中，将(S)-(-)-2-(叔-丁氧基羰基氨基)-1-丙醇(523mg，2.98mmol，1.0当量)溶解于45mL二氯甲烷中。向该澄清的均匀溶液中一次性加入Dess-Martin过碘烷(1.523g，3.591mmol，1.2当量)并将该浑浊的白色反应混合物在室温下搅拌2小时。用薄层色谱对该反应进行监测直至其反应完全。将反应混合物用100mL乙酸乙酯稀释。向反应混合物中加入亚硫酸氢钠溶液(2M，20mL)并将有机层分离出来。将水层用3×30mL EtOAc洗涤。将合并的有机层用50mL 1M NaOH、然后用饱和NaCl(30mL)洗涤并用MgSO₄干燥。过滤，旋转蒸发，得到黄色油状物形式的所需产物(475mg，收率为92％，Rf＝0.63，1∶1的己烷/乙酸乙酯)。

步骤B：[2-(4-甲氧基-苯基氨基)-(1S)-甲基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯的制备

在0℃下，于具有磁力搅拌棒的100mL圆底烧瓶中，将(S)-2-(叔-丁氧基羰基氨基)-丙醛(473mg，2.74mmol)和对-甲氧基苯胺(1.031g，8.371mmol，3.0当量)溶解于45mL MeOH中。任选地，可以通过注射器向其中加入乙酸(469μL，8.21mmol，3.0当量)以促进反应。向该进行着搅拌的深色溶液中加入氰基硼氢化钠(326mg，5.82mmol，1.89当量)。观察到产生气体和溶液颜色消失。历经30分钟在搅拌下使该反应缓慢温热至室温并用LC/MS对反应进行监测。在反应完全时，将混合物用1M NaOH淬灭并用3×50mL乙酸乙酯萃取。将所得的有机物用50mL饱和NaHCO₃、40mL饱和NaCl洗涤，用MgSO₄干燥。蒸发乙酸乙酯，得到728mg棕色油状物。用自动ISCO色谱法进行纯化，得到澄清油状物形式的[2-(4-甲氧基-苯基氨基)-(1S)-甲基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(583mg，2.079mmol，收率为76％)。HPLC-MS：C₁₅H₂₄N₂O₃(M+H⁺)的计算值281.2，实测值281.5。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ1.21(d，6H，J＝6.6Hz)，1.47(s，9H)，3.05(dd，1H，J＝12.2，7.3Hz)，3.13(dd，1H，J＝12.2，4.6Hz)，3.76(s，3H)，3.93(宽s，1H)，4.62(宽s，1H)，6.60(d，2H，J＝6.8Hz)，6.80(2H，d，J＝6.8Hz)。

步骤C：在室温下，将[2-(4-甲氧基-苯基氨基)-(1S)-甲基-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(383mg，1.37mmol)加入到位于具有磁力搅拌棒的25mL圆底烧瓶中的10mL三氟乙酸溶液(10 v/v％二氯甲烷溶液)中。5分钟后，该反应的颜色变成深紫色/黑色。将该反应在室温下进行搅拌，直至通过HPLC/MS判断该反应进行完全。通过蒸发除去溶剂，得到棕色油状物形式的2-(4-甲氧基-苯基氨基)-(1S)-甲基-乙基-铵；三氟乙酸盐(394mg，1.34mmol，收率为98％)，将其直接用于下一个反应。HPLC-MS：C₁₀H₁₆N₂O(M+H⁺)的计算值181.1，实测值181.5。

参比例2.(R)-3-苄氧基-N¹-(4-甲氧基-苯基)-丙烷-1，2-二胺

步骤A：将N-Boc-OBn-丝氨酸(750mg，2.54mmol)、对-甲氧基苯胺(344mg，2.79mmol)和HOBt(377mg，2.79mmol)放入到一个50mL圆底烧瓶中并用CH₂Cl₂(6mL)进行处理。然后，将该反应用EDCI(535mg，2.79mmol)处理并搅拌2小时。然后，用乙酸乙酯对该反应进行稀释并用水萃取两次，用1M HCl萃取两次，用1M NaOH萃取两次。然后，将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂，得到450mg(44％)白色固体：¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ1.49(s，9H)，3.63-3.72(m，1H)，3.81(s，3H)，4.00-4.08(m，1H)，4.47-4.50(m，1H)，4.55-4.70(m，2H)，5.45-5.60(m，1H)，6.87(d，2H，J＝8.8)，7.30-7.41(m，7H)，8.20-8.33(m，1H)；HPLC-MS：C₂₂H₂₈N₂O₅(M+H⁺)的计算值401.2，实测值401.4。

步骤B：将得自步骤A的产物(400mg，1.00mmol)加入到冰冷却的硼烷在THF中的溶液(1M)中。除去冷却浴并将反应搅拌24小时，这时用5％NaHSO₄淬灭过量的试剂。将反应用乙酸乙酯稀释并用1M NaOH萃取两次。将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。所得的残余物含有失去了Boc基团的物质和一些仍然具有Boc基团的物质(通过HPLC-MS证明)。将该油状物用MeOH(2mL)和4M HCl(2mL)处理并搅拌3小时。然后，除去溶剂并将反应在乙酸乙酯和1M NaOH之间进行分配。将水相再用乙酸乙酯萃取两次，将合并的有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。

参比例3.(S)-N1-(4-三氟甲氧基-苯基)-丙烷-1，2-二胺的合成

步骤A：(S)-2-(苄基羰基氨基)-丙醛

将(S)-2-(苄基羰基氨基)-丙醇(5.00g，23.9mmol)溶解于CH₂Cl₂(200mL)中并用Dess-Martin过碘烷(12.26g，1.1当量)处理。将该混合物搅拌2小时，然后用硫代硫酸钠淬灭，在真空下除去溶剂。然后，将残余物在氢氧化钠(1M，500mL)和乙酸乙酯(500mL)之间进行分离。将有机物用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并在真空下蒸发，得到一种澄清的油状物，将其不经进一步纯化直接用于下一步。

步骤B：[1-(S)-甲基-2-(4-三氟甲氧基-苯基氨基)-乙基]-氨基甲酸苄酯

将(S)-2-(苄基羰基氨基)-丙醛溶解于甲醇(300mL)中。向其中加入乙酸(4mL，2.9当量)，用4-三氟甲氧基苯胺(9.6mL，3当量)对该混合物进行处理并将其搅拌15分钟，然后，在有一些泡腾的情况下向其中加入氰基硼氢化钠(4.36g，2.9当量)。将该混合物搅拌3小时，然后在真空下除去溶剂。然后将其在盐酸(1M，500mL×2)和乙酸乙酯(500mL)之间进行分离。将有机物用碳酸氢钠(500mL)、盐水(500mL)洗涤，干燥(MgSO₄)并在真空下蒸发，得到一种澄清的油状物，用硅胶色谱对其进行纯化，用0-100％乙酸乙酯/己烷进行梯度洗脱。

步骤C：(S)-N1-(4-三氟甲氧基-苯基)-丙烷-1，2-二胺

将[1-(S)-甲基-2-(4-三氟甲氧基-苯基氨基)-乙基]-氨基甲酸苄酯(23.9mmol)溶解于乙醇(200mL)中，然后将其置于氮气下。向其中加入10％披钯炭(0.5g)并将该混合物在氢气(大气压)下搅拌过夜。当反应完全时，将混合物用硅藻土过滤。将硅藻土用乙醇(5×50mL)洗涤，然后真空蒸发，得到棕色油状物(4.03g，17.21mmol，3步的收率为72％)。

参比例4.2，2-二甲基-5-氟二氢吲哚的合成

步骤A：用cryocool仪器将N-Boc-4-氟苯胺(9.02g，42.7mmol)在THF(112mL)中的溶液冷却至-60℃。通过滴加1.7M t-BuLi的戊烷溶液(63mL，106.7mmol)对该溶液进行处理。在消耗掉第一当量碱后，形成黄色溶液。使该反应温热至-20℃并将其在该温度下搅拌2.5小时。然后，通过滴加甲代烯丙基溴(5.67g，42.7mmol)在THF(35mL)中的溶液对该反应进行处理并将其在-20℃下再搅拌1.5小时。然后，通过加入水将反应淬灭。在达到室温后，将反应用乙酸乙酯处理并用水和盐水萃取，用MgSO₄干燥并过滤。然后除去溶剂并将残余物在硅胶上纯化，用0-25％乙酸乙酯的己烷溶液进行梯度洗脱，得到11.3g(收率为80％)白色固体形式的[4-氟-2-(2-甲基-烯丙基)-苯基]-氨基甲酸叔丁酯；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ1.50(s，9H)，1.72(s，3H)，3.28(s，2H)，4.71(s，1H)，4.92(s，1H)，6.32-6.50(m，1H)，6.86(dd，1H，J₁＝3.0，J₂＝9.1)，6.93(ddd，1H，J₁＝3.0，J₂＝8.5，J₃＝11.5)，7.65-7.82(m，1H)；HPLC-MS：C₁₅H₂₀FNO₂(M+H⁺-tBu)的计算值210.1，实测值210.3。

步骤B：将[4-氟-2-(2-甲基-烯丙基)-苯基]-氨基甲酸叔丁酯的样品(1.10g，4.14mmol)用茴香醚(5mL)、二氯甲烷(5mL)和三氟乙酸(5mL)处理并将其搅拌4小时。除去溶剂并用甲磺酸(3mL)将该反应转移到微波反应小瓶中。将反应加热至170℃达10分钟。将反应冷却至室温并将其淬灭到过量的进行着搅拌的1M NaOH中。将水相用乙酸乙酯萃取两次，将合并的有机物用MgSO₄干燥并过滤。将所得的油状物在硅胶上纯化，用0-70％叔丁基乙基醚和己烷进行梯度洗脱，得到450mg(收率为66％)的2，2-二甲基-5-氟二氢吲哚；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ1.08(s，6H)，2.58(s，2H)，6.24(dd，1H，J₁＝4.4，J₂＝8.4)，6.43-6.48(m，1H)，6.53-6.56(m，1H)；HPLC-MS：C₁₀H₁₂FN(M+H⁺)的计算值166.1，实测值166.4。

参比例5.3，3-二甲基-5-氟二氢吲哚的合成

根据S.Coulton等人，WO9925709中所述的方法来进行合成，对其进行了以下调整。将N-(4-氟-苯基)-N-(2-甲基-烯丙基)-乙酰胺(5g，24.12mmol)加入到含有三氯化铝(7g，52.4mmol)的微波管中。将该管盖上盖并在微波下加热至150℃达20分钟。用水和乙酸乙酯对该浆液进行后处理，将有机层用饱和碳酸氢钠溶液洗涤3次进行萃取并将有机层用硫酸镁干燥。然后，将溶液过滤并旋转蒸发，以定量收率得到纯的1-(5-氟-3，3-二甲基-2，3-二氢-吲哚-1-基)-乙酮。通过将全部5g产物混悬于20mL 6M HCl中并在微波中加热至200℃达10分钟将其转化成游离二氢吲哚。冷却后，所得的5-氟-3，3-二甲基-2，3-二氢-1H-吲哚以定量收率以盐酸盐形式析出结晶。该物质与之前所报道的化合物完全相同。

参比例6.(S)-[1-环丙基-2-(5-氟-3，3-二甲基-2，3-二氢-吲哚-1-基)-乙基]-氨基甲酸苄酯的合成

步骤A：(S)-环丙基甘氨酸是根据经调整的D.J.Bayston等人，US6191306中所报道的方法制备的。将(R)-苯乙基-(S)-环丙基甘氨酸(16.8g，76.7mmol)的样品用THF(200mL)、水(100mL)和10％Pd/C(4.76g)处理。向该进行着搅拌的混合物中加入甲酸(17mL)并将该反应搅拌过夜。然后，通过用硅藻土垫过滤除去催化剂并通过旋转蒸发除去溶剂。将该物质与甲醇一起共蒸发数次并在真空下干燥，得到4.75g(收率为54％)固体形式的所需物质，将其不经进一步纯化直接使用。

将以上步骤所得的物质(4.75g，41mmol)溶解于130mL 1N NaOH中并在剧烈搅拌下用氯甲酸苄酯(5.92g，49.5mmol)处理。将该反应搅拌过夜，然后用二氯甲烷萃取两次。弃去有机物，将水相用浓HCl酸化并用二氯甲烷萃取三次。将合并的有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂，得到7.38g(收率为72％)白色固体形式的(S)-苄氧基羰基氨基-环丙基-乙酸。

步骤B：将(S)-苄氧基羰基氨基-环丙基-乙酸(3.2g，12.8mmol)在THF(20mL)中的溶液在冰/水浴中进行冷却并用1M BH₃在THF中的溶液(16.7mL，16.7mmol)处理。将该反应搅拌4小时，然后用1M HCl处理，直至停止鼓泡。将反应搅拌过夜，通过旋转蒸发除去有机溶剂。将残余物用乙酸乙酯处理并将其转移到分液漏斗中。弃去水相并将有机物用1MNaOH洗涤两次，用MgSO₄干燥并除去溶剂。将残余物在硅胶上纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行梯度洗脱，得到1.5g(收率为50％)白色固体形式的(S)-(1-环丙基-2-羟基-乙基)-氨基甲酸苄酯；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.26-0.37(m，1H)，0.34-0.44(m，1H)，0.47-0.61(m，2H)，0.83-0.94(m，1H)，2.95-3.04(m，1H)，3.70(dd，1H，J₁＝5.8，J₂＝11.1)，3.79-3.88(m，1H)，5.00-5.12(m，1H)，5.10(s，2H)，7.29-7.31(m，5H)；HPLC-MS：C₁₃H₁₇NO₃(M+H⁺)的计算值236.1，实测值236.3。

步骤C：用与参比例3相似的方式以67％的收率制得(S)-[1-环丙基-2-(5-氟-3，3-二甲基-2，3-二氢-吲哚-1-基)-乙基]-氨基甲酸苄酯，不同的是用得自前述步骤的醇和1当量3，3-二甲基-5-氟二氢吲哚(WO 9925709)作为偶联伴侣；HPLC-MS：C₂₃H₂₇FN₂O₂(M+H⁺)的计算值383.2，实测值383.4。

参比例7.5-氟-3，3-螺环丙基-二氢吲哚的合成

步骤A：将5-氟靛红(5g，30.2mmol)在DMF(60mL)中的溶液在冰/水浴中进行冷却并通过分批加入氢化钠(1.44g，60.6mmol)进行处理。在加入最后一份后将反应搅拌15分钟，然后用对-甲氧基苄基氯(5.32g，45.3mmol)处理并将其搅拌1小时。然后，通过缓慢加入过量的甲醇将反应淬灭。在停止鼓泡后，将反应倾倒到水(100mL)中并用乙酸乙酯萃取两次。将有机物合并，用MgSO₄干燥并除去溶剂。将残余物通过硅胶色谱纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行梯度洗脱，得到7.1g(82％)5-氟-1-(4-甲氧基-苄基)-1H-吲哚-2，3-二酮；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ3.79(s，3H)，4.86(s，2H)，6.75(dd，1H，J₁＝3.6，J₂＝8.6)，6.84-6.90(m，2H)，7.19(ddd，1H，J₁＝J₂＝8.6，J₃＝3.6)，7.22-7.27(m，1H)，7.26-7.31(m，2H)；HPLC-MS：C₁₆H₁₂FNO₃(M+H⁺)的计算值286.1，实测值286.3。

步骤B：将5-氟-1-(4-甲氧基-苄基)-1H-吲哚-2，3二酮(7.1g，24.9mmol)在水合肼(35mL)和乙醇(15mL)中的溶液回流过夜，用水稀释并用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机物用Na₂SO₄干燥，过滤并浓缩。将残余物通过硅胶色谱纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行梯度洗脱，得到6.1g(90％)5-氟-1-(4-甲氧基-苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ3.59(s，2H)，3.77(s，3H)，4.83(s，2H)，6.63(dd，1H，J₁＝4.2，J₂＝8.6)，6.82-6.91(m，3H)，6.96-7.01(m，1H)，7.19-7.23(m，1H)，7.27-7.31(m，1H)；HPLC-MS：C₁₆H₁₄FNO₂(M+H⁺)的计算值272.1，实测值272.3。

步骤C：将5-氟-1-(4-甲氧基-苄基)-1，3-二氢-吲哚-2-酮(6.12g，22.6mmol)在DMF(65mL)中的溶液在冰/水浴中进行冷却并通过分批加入二溴乙烷(6.35g，33.8mmol)、然后分批加入氢化钠(1.09g，45mmol)对其进行处理。在0℃下搅拌1小时后，将反应冷却至-78℃并用过量甲醇处理。在停止鼓泡后，将反应倾倒到水(100mL)中并用乙酸乙酯萃取两次。将有机物合并，用Na₂SO₄干燥并除去溶剂。将残余物通过硅胶色谱纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行梯度洗脱，得到4.1g(61％)5-氟-1-(4-甲氧基-苄基)-螺环丙基羟吲哚；¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ 1.54(dd，2H，J₁＝4.0，J₂＝7.8)，1.83(dd，2H，J₁＝4.3，J₂＝8.1)，3.77(s，3H)，4.91(s，2H)，6.57(dd，1H，J₁＝2.5，J₂＝8.0)，6.69(dd，1H，J₁＝4.2，J₂＝8.5)，6.81(dd，1H，J₁＝2.5，J₂＝9.3)，6.83-6.87(m，2H)，7.22-7.25(m，H)；HPLC-MS：C₁₈H₁₆FNO₂(M+H⁺)的计算值298.1，实测值298.3。

步骤D：将5-氟-1-(4-甲氧基-苄基)-螺环丙基羟吲哚(3.38g，11.4mmol)在TFA(20mL)中的溶液在60℃下搅拌过夜。然后，除去溶剂，将反应用乙酸乙酯稀释并用饱和NaHCO₃水溶液洗涤至洗液为中性。然后，将有机相用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥并除去溶剂。将残余物通过硅胶色谱纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行梯度洗脱，得到1.94g(96％)5-氟-螺环丙基羟吲哚；¹H NMR(MeOD，400MHz)δ1.76-1.86(m，4H)，6.91-6.94(m，1H)，7.07-7.11(m，2H)；HPLC-MS：C₁₀H₈FNO(M+H⁺)的计算值178.2，实测值178.3。

步骤E：将5-氟-螺环丙基羟吲哚的样品(172mg，97μmol)在冰/水浴中进行冷却并用1.0M LAH溶液(1.94mL，1.9mmol)进行处理。将该反应在室温下搅拌15分钟，然后在50℃下搅拌3小时，最后用冰/水浴冷却回去。将该反应用1M NaOH(1.9mL)、然后用水(1.9mL)处理。将反应用硅藻土过滤并用MgSO₄干燥。过滤后，除去溶剂并将5-氟-螺环丙基二氢吲哚粗品物质不经纯化直接使用。

此外，在(1)Jackson，A.H.等人，Tetrahedron(1968)，24(1)，403-13；(2)Jansen，A.B.A.等人，Tetrahedron(1965)，21(6)，1327-31；(3)Bermudez，J.等人，J.Med.Chem.(1990)，33(7)，1929-32；(4)Nishio，T.等人，Helv.Chim.Acta(1990)，73(6)，1719-23；(5)Nishio，T.等人，J.Chem.Soc.PerkinTrans 1(1991)，(1)，141-3；(6)Kucerovy，A.等人，Synth.Commun.(1992)，22(5)，729-33；(7)Kato，M.等人，Chem.Pharm.Bull.(1995)，43(8)，1351-7中还对其它3，3-螺-环烷基二氢吲哚的合成进行了描述。

参比例8.2，2，5-三氟二氢吲哚的合成

步骤A：在惰性气氛下，历经15分钟将在干燥DMF中的溶液形式的

5-氟-1H-吲哚-2，3二酮(956mg，5.79mmol，1当量)滴加到进行着搅拌的氢化钠(278mg，11.6mmol，2当量)在干燥DMF中的浆液中，进行足够的压力释放以适应H₂气体放出。将所得的混合物搅拌1小时并通过注射器向该反应中加入对-甲氧基苄基氯。然后，将该溶液搅拌约2小时并通过加入水、然后萃取到乙酸乙酯中对其进行后处理。将有机层用水洗涤两次，然后用MgSO₄干燥。用柱色谱进行纯化，用乙酸乙酯/己烷洗脱，得到红色固体形式的5-氟-1-(4-甲氧基-苄基)-1H-吲哚-2，3-二酮(1.3g，收率为80％)。¹H NMR(CDCl₃)δ(ppm)：7.3-7.24(m，3H)，7.20(td，J＝8.7，2.7Hz，1H)，6.9-6.86(m，2H)，6.76(dd，J＝8.6，3.6Hz，1H)，3.81(s，2H)，3.78(s，3H)。LC/MS＝286.1(M+1)。

步骤B：将得自步骤A的产物(200mg，0.701mmol，1当量)溶解于10mL干燥DCM中并将其置于惰性气氛下。通过注射器向其中加入DAST(339mg，2.103mmol，3当量)并将反应搅拌过夜。通过加入饱和碳酸氢钠水溶液对反应进行后处理，将有机层用MgSO₄干燥，过滤，旋转蒸发至干。将所得的粗品物质通过快速色谱纯化，用乙酸乙酯/己烷作为溶剂系统。¹HNMR(CDCl₃)δ(ppm)：7.3-7.28(m，1H)，7.22(d，J＝8.7Hz，2H)，7.09(td，J＝8.7，1.3Hz，1H)，6.87(d，J＝8.7Hz，2H)，6.73(m，1H)，4.83(s，2H)，3.79(s，3H)。LC/MS＝308.1(M+1)。

步骤C：将得自步骤B的产物(1.178g，3.83mmol，1当量)溶解于75mL干燥THF中并将其置于惰性气氛下。在-78℃下，在正N₂压下向其中加入固体形式的LiAlH₄(291mg，7.66mmol，2当量)。将反应在该温度下搅拌30分钟，然后使其历经6小时温热至室温。通过滴加水、然后加入4当量KOH水溶液对该反应进行后处理。将该浆液用500mL水稀释并用2×200mL乙酸乙酯萃取。将有机层合并，用MgSO₄干燥，过滤并旋转蒸发至干。将所得的粗品物质通过快速色谱纯化，用乙酸乙酯/己烷作为溶剂系统，得到320mg纯物质(28％)。¹H NMR(CD₃OD)δ(ppm)：7.21(d，J＝8.8Hz，2H)，7.06(dd，J＝8.2，1.3Hz，1H)，6.89(m，1H)，6.84(d，J＝8.7Hz，2H)，6.77(dd，J＝8.6，4.3Hz，1H)，4.83(s，2H)，3.73(s，3H)，3.12(s，2H)。LC/MS＝294.1(M+1)。

步骤D：将得自步骤C的产物(50mg，0.1704mmol，1当量)用1mL TFA吸收。将该溶液置于微波管中，密封，加热至175℃达5分钟。将所得的黑色溶液用饱和碳酸氢钠中和并用2×50mL乙酸乙酯萃取。将有机层用MgSO₄干燥，过滤并旋转蒸发至干。将所得的固体溶解于50∶50的DMSO/MeOH混合物中并通过制备HPLC纯化。得到23.8mg白色固体(81％)。¹H NMR(DMSO D₆)δ(ppm)：10.41(s，1H)，7.13(dd，J＝8.6，2.4Hz，1H)，7.01(td，J＝8.6，2.7Hz，1H)，6.8(dd，J＝8.5，4.5Hz，1H)，3.5(s，2H)。

实施例1.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(R)-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯；

实施例2.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯。

步骤A：1，2-环氧-4，4-二甲基戊烷的制备。将4，4-二甲基-1-戊烯(8.05g，82mmol)在CH₂Cl₂(45mL)中的溶液用甲基三氧代铼(methyltrioxorhenium)(0.10g，0.41mmol)处理，将其放入水浴中并开始搅拌。将反应混合物用3-氰基吡啶(853mg)处理并搅拌至该物质溶解。然后，历经约30分钟向其中滴加31％过氧化氢水溶液(11.7mL，107mmol)，同时将温度保持在20至25℃。将反应搅拌过夜。然后，将烧瓶的内含物转移到分液漏斗中。向一个独立的烧瓶中加入15mg MnO₂并装上一根搅拌棒并用冰浴冷却。将有机层缓慢倾倒到该烧瓶中，使得有充分的时间以使过氧化氢被淬灭。搅拌15分钟后，加入硫酸钠(～20g)并再继续搅拌15分钟。然后，将该溶液转移到100mL梨形烧瓶中。通过Vigreaux柱在大气压下蒸馏除去CH₂Cl₂。开始蒸馏后，取下Vigreaux并用规则的短径蒸馏头代替。将烧瓶加热至120℃并施加轻度的真空以进行转移，得到7.7g(82％)无色液体形式的产物：¹HNMR(CDCl₃，400MHz)δ0.94(s，9H)，1.31(dd，1H，J₁＝5.4，J₂＝14.0)，1.38(dd，1H，J₁＝6.4，J₂＝14.0)，2.35(dd，1H，J₁＝2.8，J₂＝5.1)，2.67-2.71(m，1H)，2.86-2.93(m，1H)。

步骤B：1-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-4，4-二甲基-戊-2-醇的合成：向一个大的(2-5mL)微波反应器烧瓶中加入5，6-二氯苯并咪唑(700mg，3.74mmol)、得自步骤A的环氧乙烷(600mg，3.37mmol)、无水K₂CO₃粉末(517mg，3.74mmol)和DMF(2mL)。然后，将反应混合物加热至160℃达5分钟。然后，将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水萃取一次，用1M NaOH萃取两次。将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将残余物在硅胶上纯化，用乙酸乙酯作为洗脱剂，得到475mg(42％)无色固体形式的产物：¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.99(s，9H)，1.39(dd，1H，J₁＝2.4，J₂＝14.4)，1.48(dd，1H，J₁＝8.4，J₂＝14.4)，3.63-3.71(m，1H)，3.90(dd，1H，J₁＝8.9，J₂＝14.4)，4.00(dd，1H，J₁＝2.8，J₂＝14.4)，4.03-4.12(m，1H)，7.40(s，1H)，7.42(s，1H)，7.74(s，1H)；HPLC-MS：C₁₄H₁₈Cl₂N₂O(M+H⁺)的计算值301.1，实测值301.3。

步骤C：碳酸1-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯4-硝基苯酯的合成。将得自步骤B的产物(445mg，1.48mmol)溶解于吡啶(4mL)和CH₂Cl₂(2mL)中并用氯甲酸4-硝基苯酯(328mg，1.62mmol)处理。将反应容器密封并加热至80℃过夜。冷却至室温后，将反应用乙酸乙酯稀释，用水萃取两次，用1M HCl水溶液萃取3次，用水萃取一次，用饱和NaCl水溶液萃取一次。然后，将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将残余物用乙醚处理，加热至回流并将其放到冰箱中在-10℃下过夜。收集所得的固体，用冷乙醚洗涤并将其干燥，得到531mg(77％)略微有色的固体形式的产物：¹H NMR(DMSO，400MHz)δ1.01(s，9H)，1.66-1.79(m，2H)，4.62(dd，1H，J₁＝8.2，J₂＝14.9)，4.70(dd，1H，J₁＝3.4，J₂＝14.9)，5.23-5.32(m，1H)，7.11-7.17(m，2H)，8.03(s，1H)，8.21(s，1H)，8.28-8.33(m，2H)，8.51(s，1H)；HPLC-MS：C₂₁H₂₂Cl₂N₄O₂(M+H⁺)的计算值466.1，实测值466.3。

步骤D：向烧瓶中加入(R)-[1-苄氧基甲基-2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-乙基]-氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.50mmol，根据参比例2制得)和10％Pd/C(10mg)。用MeOH(3.5mL)和4M HCl的二噁烷溶液(0.5mL)对该物质进行处理。通过用氢气向该溶液中鼓泡将反应中的气氛转变为氢气并且在搅拌着的反应上方保持氢气膨胀压(balloon pressure)1小时。将气氛转变回氮气并将反应搅拌过夜。通过用MeOH通过硅藻土过滤除去催化剂并除去溶剂，得到氨基醇粗品，将其不经进一步纯化直接使用。HPLC-MS：C₁₁H₁₅FN₂O(M+H⁺)的计算值211.1，实测值211.4。

向含有该氨基醇的烧瓶中加入得自步骤C的碳酸酯(232mg，0.50mmol)、DMF(4mL)和DIEA(374μL，2.0mmol)。将反应搅拌过夜，用乙酸乙酯稀释，用1M NaOH水溶液萃取三次，用水萃取一次。将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将所得的物质溶解于热乙酸乙酯中并将其在-10℃下在冰箱中保存2天。收集所得的固体并用冷乙酸乙酯洗涤，得到80mg(30％)实施例1的标题化合物，其在TLC上的展开速度比其它非对映体快。¹H NMR(DMSO，400MHz)δ0.87(s，9H)，1.44(dd，1H，J₁＝9.3，J₂＝14.7)，1.46-1.53(m，1H)，2.62(dd，1H，J₁＝6.6，J₂＝13.7)，2.79-2.93(m，3H)，3.08-3.18(m，1H)，3.23(dd，1H，J₁＝8.7，J₂＝16.2)，3.38-3.49(m，1H)，4.25(dd，1H，J₁＝7.6，J₂＝14.5)，4.35(dd，1H，J₁＝3.9，J₂＝14.6)，4.64-4.72(m，1H)，5.09-5.17(m，1H)，6.30(dd，1H，J₁＝4.3，J₂＝8.6)，6.70-6.78(m，1H)，6.86(dd，1H，J₁＝2.6，J₂＝8.6)，6.93(d，1H，J＝8.5)，7.83(s，1H)，7.97(s，1H)，8.24(s，1H)；HPLC-MS：C₂₆H₃₁Cl₂FN₄O₃(M+H⁺)的计算值537.2，实测值537.4。

将滤液浓缩并在硅胶上纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行梯度洗脱，得到50mg(19％)实施例2的标题化合物。¹H NMR(DMSO，400MHz)δ0.80(s，9H)，1.37(dd，1H，J₁＝9.9，J₂＝14.5)，1.45-1.51(m，1H)，2.76-2.83(m，1H)，2.94(dd，1H，J₁＝8.4，J₂＝13.7)，3.06(dd，1H，J₁＝4.5，J₂＝13.8)，3.16-3.26(m，3H)，3.47-3.57(m，1H)，4.28(dd，1H，J₁＝7.0，J₂＝14.7)，4.40(dd，1H，J₁＝3.9，J₂＝14.6)，4.66-4.76(m，1H)，5.04-5.12(m，1H)，6.35(dd，1H，J₁＝4.3，J₂＝8.6)，6.69-6.76(m，1H)，6.84(dd，1H，J₁＝2.5，J₂＝8.6)，6.96(d，1H，J＝8.8)，7.92(s，1H)，7.96(s，1H)，8.26(s，1H)；HPLC-MS：C₂₆H₃₁Cl₂FN₄O₃(M+H⁺)的计算值537.2，实测值537.4。

实施例3.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-2，2-二甲基-丙酯

步骤A：1-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-3，3-二甲基-丁-2-醇的制备。向一个大的(2-5mL)微波反应器烧瓶中加入5，6-二氯苯并咪唑(571mg，3.1mmol)、1，2-环氧-3，3-二甲基丁烷(307mg，3.1mmol)、无水碳酸钾粉末(424mg，3.1mmol)和DMF(1.5mL)。然后，将该反应在微波反应器中于160℃下加热6分钟。然后，将反应用乙酸乙酯稀释并用水萃取三次。将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将残余物用CH₂Cl₂结晶，得到653mg(73％)白色固体形式的产物：¹H NMR(DMSO，400MHz)δ1.06(s，9H)，3.47(dd，1H，J₁＝2.0，J₂＝10.4)，4.08(dd，1H，J₁＝10.5，J₂＝14.4)，4.47(dd，1H，J₁＝2.0，J₂＝14.4)，7.75(s，1H)，7.79(s，1H)，8.23(s，1H)；HPLC-MS：C₂₁H₂₂Cl₂N₄O₂(M+H⁺)的计算值287.1，实测值287.3。

步骤B：碳酸1-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-2，2-二甲基-丙酯4-硝基-苯酯。将得自步骤A的产物(100mg，0.35mmol)在二氯乙烷(3mL)中的溶液用DMAP(90mg，0.74mmol)和氯甲酸4-硝基苯酯(90mg，0.45mmol)处理。将该反应加热至80℃过夜。将反应冷却至室温，用乙酸乙酯稀释并用1MHCl水溶液、然后用饱和NaCl水溶液萃取。将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将残余物在硅胶上纯化，用0至100％乙酸乙酯的己烷溶液进行线性梯度洗脱，得到111mg(70％)白色固体形式的产物：¹H NMR(MeOD，400MHz)δ1.18(s，9H)，4.56(dd，1H，J₁＝10.9，J₂＝15.1)，4.76(dd，1H，J₁＝2.3，J₂＝15.1)，4.94(dd，1H，J₁＝2.3，J₂＝10.8)，6.85-6.92(m，2H)，7.84(s，1H)，7.87(s，1H)，8.15-8.21(m，2H)，8.38(s，1H)；HPLC-MS：C₂₀H₁₉Cl₂N₃O₅(M+H⁺)的计算值452.1，实测值452.2。

步骤C：该转化是用与实施例1的方式相似的方式进行的，以66％的收率得到两种对映体混合物形式的实施例3的标题化合物。¹H NMR(MeOD，400MHz)δ1.03(s，4.5H)，1.10(s，4.5H)，2.25(dd，0.5H，J₁＝5.3，J₂＝13.6)，2.72-2.88(m，2.5H)，2.92-3.12(m，1.5H)，3.15-3.36(m，2H)，3.49-3.56(m，2H)，4.30(dd，0.5H，J₁＝8.1，J₂＝10.8)，4.34(dd，0.5H，J₁＝8.0，J₂＝10.7)，4.55-4.63(m，1H)，4.79(dd，0.5H，J₁＝2.3，J₂＝10.7)，4.90(dd，0.5H，J₁＝2.5，J₂＝10.9)，6.25(dd，0.5H，J₁＝4.3，J₂＝8.5)，6.38(dd，0.5H，J₁＝4.2，J₂＝8.5)，6.61-6.70(m，1H)，6.72-6.79(m，1H)，7.63(s，0.5H)，7.77(s，0.5H)，7.78(s，1H)，8.20(s，0.5H)，8.23(s，0.5H)；HPLC-MS：C₂₅H₂₉Cl₂FN₄O₃(M+H⁺)的计算值523.2，实测值523.4。

实施例4.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基-3，3-二甲基)-丁酯

步骤A：将(S)-2-羟基-4，4-二甲基戊酸(2.13g，14.6mmol)溶解于四氢呋喃(50mL)中并冷却至冰浴温度。历经～3分钟通过注射器向其中加入1MBH₃在THF中的溶液(29.2mL，29.2mmol)。在完全加入后，除去冷却浴并将反应混合物在室温下搅拌4小时。向其中加入1M NaOH溶液(100mL)并将反应搅拌过夜。将反应转移到分液漏斗中并将水层用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将所得的油状物通过硅胶色谱纯化，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行洗脱，得到1.63g(85％)油状物形式的二醇。将该物质全部(12.4mmol)溶解于CH₂Cl₂中，用吡啶(1.96g，24.6mmol)处理并将其冷却至冰浴温度。然后，将该混合物用对-甲苯磺酰氯(2.60g，13.6mmol)处理并搅拌过夜，同时使温度升至环境温度。然后，将反应装料到分液漏斗中并用CH₂Cl₂萃取3次。将合并的有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将所得的油状物仔细地在硅胶上纯化，用0至100％乙酸乙酯的己烷溶液梯度洗脱，得到1.5g(42％)(S)-甲苯-4-磺酸2-羟基-4，4-二甲基-苯酯；HPLC-MS：C₁₄H₂₂O₄S(M+H⁺)的计算值286.1，实测值286.4。

步骤B：将得自步骤A的(S)-甲苯-4-磺酸2-羟基-4，4-二甲基-苯酯(355mg，1.24mmol)、K₂CO₃(429mg，3.10mmol)、苯并咪唑(191mg，1.61mmol)和DMF(2mL)加入到一个大的微波反应器容器中。将该容器蜷曲关闭并在微波反应器中于160℃下加热6分钟。将该反应用乙酸乙酯稀释并用1M NaOH水溶液萃取三次。将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂，得到270mg粗产物，将其不经进一步纯化直接使用。

步骤C：碳酸(S)-1-(苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯4-硝基-苯酯的制备。将得自最后一步的物质溶解于吡啶(4mL)和氯甲酸4-硝基苯酯(325mg，1.61mmol)中。将该反应加热至60℃达2.5小时，在40℃下加热过夜。通过旋转蒸发除去溶剂并将该反应在乙酸乙酯和水之间进行分配。将有机物用水萃取2次并用MgSO₄干燥。除去溶剂，将所得的油状物在硅胶上进行色谱处理，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行线性梯度洗脱，得到135mg(27％)固体形式的标题化合物；HPLC-MS：C₂₁H₂₃N₃O₅(M+H⁺)的计算值398.2，实测值398.4。

步骤D：该转化是用与实施例1的方式相似的方式进行的，以85％的收率得到了实施例4的标题化合物：¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.84(s，9H)，1.08(d，1H，J＝8.6)，1.35-1.43(m，1H)，1.53(dd，1H，J₁＝9.1，J₂＝14.5)，2.80-2.91(m，3H)，2.97(dd，1H，J₁＝7.0，J₂＝13.4)，3.23(dd，1H，J₁＝8.5，J₂＝17.3)，3.36(dd，1H，J₁＝8.4，J₂＝16.9)，3.68-3.78(m，1H)，4.42(dd，1H，J₁＝6.7，J₂＝14.3)，6.27(dd，1H，J₁＝4.1，J₂＝8.5)，6.60-6.68(m，1H)，6.69-6.77(m，1H)，7.45-7.54(m，3H)，7.56-7.62(m，1H)，7.92-7.99(m，1H)，9.58(s，1H)；HPLC-MS：C₂₆H₃₃FN₄O₂(M+H⁺)的计算值453.3，实测值453.5。

实施例5.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸3，3-二甲基-(S)-1-吗啉-4-基甲基-丁酯

步骤A：(S)-4，4-二甲基-1-吗啉-4-基-戊-2-醇的制备。将得自实施例4，步骤A的(S)-甲苯-4-磺酸2-羟基-4，4-二甲基-苯酯(700mg，2.4mmol)加入到一个大的微波反应器小瓶中并用吗啉(3mL)处理。将该小瓶蜷曲关闭并加热至160℃达6分钟。然后除去溶剂。将所得的油状物溶解于乙酸乙酯中并用1M HCl水溶液萃取3次。弃去有机物并用固体NaOH使水层呈碱性，用乙酸乙酯萃取3次。将有机物合并，用MgSO₄干燥并除去溶剂，得到330mg(67％)该物质，其无需进一步纯化即可使用：HPLC-MS：C₁₁H₂₃NO₂(M+H⁺)的计算值202.2，实测值202.5。

步骤B：向一个火焰干燥的25mL圆底烧瓶中装入三光气(28mg，95μmol)和二氯甲烷(1mL)。将该烧瓶冷却至-78℃并向其中滴加得自步骤A的(S)-4，4-二甲基-1-吗啉-4-基-戊-2-醇(71.5mg，0.36mmol)在二氯甲烷(1mL)中的溶液。在完全加入后，用冰/水浴代替冷却浴并将反应搅拌15分钟。向其中加入(S)-2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-甲基-乙基胺(100mg，0.24mmol，根据参比例1制得)在二氯甲烷(1mL)中的溶液，然后加入过量的二异丙基乙基胺并除去冷却浴。将该反应搅拌1.5小时并通过加入1MNaOH水溶液和用二氯甲烷对水层萃取3次进行后处理。将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将所得的油状物通过硅胶色谱纯化，用0-10％MeOH的二氯甲烷溶液进行线性梯度洗脱，得到8.1mg(8.1％)油状物形式的所需物质：¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.83(s，9H)，1.18(d，1H，J＝6.6)，1.30-1.46(m，2H)，1.48-1.62(m，1H)，2.15(dd，1H，J₁＝5.9，J₂＝12.4)，2.31-2.42(m，3H)，2.43-2.52(m，2H)，2.86(dd，2H，J₁＝J₂＝8.1)，2.83-2.90(m，1H)，2.97(dd，1H，J₁＝6.3，J₂＝13.6)，3.26(dd，1H，J₁＝8.6，J₂＝17.1)，3.36(dd，1H，J₁＝8.2，J₂＝16.4)，3.54-3.61(m，4H)，3.81-3.90(m，1H)，4.56-4.63(m，1H)，4.90-4.99(m，1H)，6.28(dd，1H，J₁＝4.2，J₂＝8.5)，6.62-6.68(m，1H)，6.71-6.75(m，1H)；HPLC-MS：C₂₃H₂₆FN₃O₃(M+H⁺)的计算值422.3，实测值422.6。

实施例6.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸2-(苯并咪唑-1-基)-1-(S)-环戊基甲基-乙酯

步骤A：(S)-2，4，6-三异丙基-苯磺酸3-环戊基-2-羟基-丙酯的制备。向烧瓶中加入t-BuOH(250mL)、水(250mL)、(DHQ)₂PYR(440mg，0.50mmol)、K₃Fe(CN)₆(49.5g，0.15mol)、K₂CO₃(21g，0.15mol)和K₂OsO₄·2H₂O(70mg，0.19mmol)并搅拌至大部分盐溶解。然后将烧瓶冷却至4℃并加入烯丙基环戊烷(5g，45mmol)。将反应在4℃下搅拌过夜并通过加入Na₂SO₃(50g)将其淬灭。在室温下搅拌1.5小时后，在真空下除去挥发性物质。将所得的物质在乙酸乙酯和水之间进行分配。将水层用乙酸乙酯再萃取两次，将合并的有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将所得的油状物在硅胶上进行色谱处理，用80％乙酸乙酯的己烷溶液进行洗脱，得到4.81g(74％二醇)。将该物质的样品(1.21g，8.4mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)中并用吡啶(1.44g，18mmol)处理。然后，将该反应冷却至冰浴温度并用2，4，6-三异丙基苯磺酰氯(2.83g，9.3mmol)处理。使该反应缓慢升温至室温并搅拌3天。向其中加入1M HCl水溶液并将该反应用二氯甲烷萃取两次。将合并的有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将残余物用硅胶色谱纯化，得到1.75g(51％)白色粉末。通过溶解于温热的己烷中并将其冷却至-4℃过夜使该物质结晶。质量回收率为75％：¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.92-1.08(m，2H)，1.15(dd，1H，J₁＝5.5，J₂＝6.8)，1.17-1.22(m，18H)，1.27-1.36(m，2H)，1.40-1.57(m，5H)，1.64-1.76(m，2H)，1.78-1.90(m，1H)，2.80-2.90(m，1H)，3.82-3.89(m，2H)，3.97-4.10(m，3H)，7.13(s，2H)；HPLC-MS：C₂₃H₃₈O₄S(M+H⁺)的计算值411.3，实测值411.4。

步骤B：碳酸2-(苯并咪唑-1-基)-1-(S)-环戊基甲基-乙酯4-硝基-苯酯是用与实施例4，步骤B和C的方式相似的方式制备的。总收率为9％：HPLC-MS：C₂₂H₂₃N₃O₅(M+H⁺)的计算值410.2，实测值410.3。

步骤C：将步骤B的产物(28mg，68μmol)和(S)-2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-甲基-乙基胺(29mg，69μmol，根据参比例1制得)溶解于DMF(1mL)中并用DIEA(30mg，0.23mmol)处理。将该反应混合物加热至60℃达3天，这时，偶联基本进行完全，但是HPLC-MS表明二氢吲哚部分被氧化成了吲哚。将该反应用乙酸乙酯稀释并用水萃取3次。将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将残余物溶解于AcOH(0.5mL)中并用NaCNBH₃(3mg，48μmol)处理。1小时后，将该反应用乙酸乙酯稀释并用1M NaOH水溶液萃取两次。将有机物用MgSO₄干燥并除去溶剂。将残余物在硅胶上纯化，用50-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行线性梯度洗脱，得到10mg(31％)油状物形式的标题化合物：¹H NMR(MeOD，400MHz)δ0.96(d，3H，J＝6.7)，1.03-1.16(m，3H)，1.37-1.47(m，3H)，1.49-1.83(m，9H)，2.77(dd，1H，J₁＝5.4，J₂＝13.6)，2.78-2.88(m，3H)，2.94(dd，1H，J₁＝8.1，J₂＝13.6)，3.17(dd，1H，J₁＝8.7，J₂＝17.4)，3.37-3.46(m，1H)，3.55-3.64(m，1H)，4.42(dd，1H，J₁＝8.9，J₂＝14.7)，4.61(dd，1H，J₁＝3.1，J₂＝14.7)，5.09-5.18(m，1H)，6.34(dd，1H，J₁＝4.2，J₂＝8.5)，6.60-6.67(m，1H)，6.69-6.75(m，1H)，7.52-7.59(m，2H)，7.78-7.88(m，2H)，8.77(s，1H)；HPLC-MS：C₂₇H₃₃FN₄O₂(M+H⁺)的计算值465.3，实测值465.4。

实施例7.[2-(4-二氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(3-三氟甲基-吡唑-1-基)-乙酯

标题化合物是用与实施例6的方式相似的方式制备的。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.93-1.20(m，5H)，1.36-1.60(m，6H)，1.60-1.82(m，3H)，2.90-3.10(m，2H)，4.15-4.37(m，2H)，4.47-4.62(m，1H)，4.99-5.06(m，0.5H)，5.13-5.21(m，0.5H)，6.29(dd，1H，J₁＝J₂＝74.9)，6.42-6.51(m，3H)，6.84-6.92(m，2H)，7.35-7.46(m，1H)；HPLC-MS：C₂₃H₂₉F₅N₄O₃(M+H⁺)的计算值505.2，实测值505.4。

实施例8.[2-(4-二氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯

步骤A：(S)-1-环戊基-3-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-丙烷-2-醇的制备。向两个大的(2-5mL)微波反应器管中加入(S)-2，4，6-三异丙基-苯磺酸3-环戊基-2-羟基-丙酯(实施例6，步骤A，1.88g，4.6mmol)、5，6-二氯苯并咪唑(859mg，4.6mmol)、K₂CO₃(1.27g，9.2mmol)和DMF(4mL)。然后，将这些管加热至160℃达6分钟。将该反应在乙酸乙酯和水之间进行分配。将水层共计用乙酸乙酯萃取2次并将合并的有机物用MgSO₄干燥。除去溶剂，将所得的油状物在硅胶上进行色谱处理，用0-100％乙酸乙酯的己烷溶液进行线性梯度洗脱，得到566mg(40％)固体形式的标题化合物：HPLC-MS：C₁₅H₁₈Cl₂N₂O(M+H⁺)的计算值313.1，实测值313.2。

步骤B：用与实施例1的方式相似的方式以18％的收率制得了碳酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯4-硝基-苯酯。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ1.03-1.21(m，2H)，1.47-1.66(m，5H)，1.76-1.95(m，4H)，4.26(dd，1H，J₁＝7.8，J₂＝15.2)，4.34(dd，1H，J₁＝3.7，J＝15.2)，5.04-5.12(m，1H)，7.06-7.11(m，2H)，7.52(s，1H)，7.85(s，1H)，7.89(s，1H)，8.14-8.19(m，2H)；HPLC-MS：C₂₂H₂₁Cl₂N₃(M+H⁺)的计算值478.1，实测值478.2。

步骤C：用与实施例1的方式相似的方式制备了实施例8的标题化合物，以39％的收率得到该产物。¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.92-1.10(m，2H)，1.08(d，1H，J＝6.7)，1.37-1.58(m，6H)，1.61-1.82(m，3H)，2.90-3.10(m，2H)，3.70-3.82(m，1H)，4.08(dd，1H，J₁＝6.3，J₂＝15.0)，4.25(dd，1H，J₁＝3.6，J₂＝14.9)，4.72(d，1H，J＝8.1)，4.99-5.07(m，1H)，6.29(dd，1H，J₁＝J₂＝74.8)，6.44-6.50(m，2H)，6.84-6.89(m，2H)，7.45(s，1H)，7.76(s，1H)，7.79(s，1H)；HPLC-MS：C₂₆H₃₀Cl₂F₂N₄O₃(M+H⁺)的计算值555.2，实测值555.3。

实施例9.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯

用与实施例1的方式相似的方式以69％的收率将碳酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯4-硝基-苯酯(实施例8，步骤C)转化成了标题化合物：¹H NMR(CDCl₃，400MHz)δ0.90-1.07(m，2H)，1.08(d，1H，J＝6.6)，1.32-1.57(m，6H)，1.58-1.78(m，3H)，2.79-2.98(m，4H)，3.21(dd，1H，J₁＝8.5，J₂＝17.1)，3.30-3.79(m，1H)，3.71-3.81(m，1H)，4.02-4.11(m，1H)，4.23(dd，1H，J₁＝3.8，J₂＝15.0)，4.85(d，1H，J＝7.8)，4.96-5.04(m，1H)，6.23(dd，1H，J₁＝3.9，J₂＝8.3)，6.58-6.66(m，1H)，6.68-6.73(m，1H)，7.45(s，1H)，7.74-7.79(m，2H)；HPLC-MS：C₂₇H₃₁Cl₂FN₄O₂(M+H⁺)的计算值533.2，实测值533.3。

实施例10.[2-(4-三氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯

HPLC-MS：C₂₆H₂₉Cl₂FN₄O₃(M+H⁺)的计算值573.2，实测值573.1。

实施例11.[2-(5-氟-3，3-二甲基-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基-3，3-二甲基)-丁酯

HPLC-MS：C₂₈H₃₇FN₄O₂(M+H⁺)的计算值481.3，实测值481.3。

实施例12.[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯

¹H NMR(CD₃OD，400MHz)δ 0.82(s，9H)，1.42-1.56(m，2H)，2.78-2.88(m，2H)，2.96-3.04(m，2H)，3.21(dd，1H，J₁＝8.7Hz，J₂＝17.3Hz)，3.34-3.42(m，3H)，3.62-3.70(m，1H)，4.29(dd，1H，J₁＝7.1Hz，J₂＝14.6Hz)，5.20-5.28(m，1H)，6.38(dd，1H，J₁＝4.2Hz，J₂＝8.6Hz)，6.60-6.67(m，1H)，7.23-7.28(m，1H)，7.28-7.34(m，1H)，7.58-7.64(m，2H)，8.11(s，1H)；HPLC-MS：C₂₆H₃₃FN₄O₃(M+H⁺)的计算值469.3，实测值469.5。

B.组织蛋白酶抑制活性试验

组织蛋白酶S

通过对荧光肽底物的组合库进行筛选确定了组织蛋白酶S的最佳底物-乙酰基-组氨酸-脯氨酸-缬氨酸-赖氨酸-氨基氨基甲酰基香豆素(Harris，J.L.B.J.Backes等人，Proc Natl Acad Sci USA 2000，97(14)，7754-9)。以30μl的总反应体积在384孔微量滴定板中进行了动力学测量。将终浓度为0.3-3nM(活性部位)的组织蛋白酶S与十二种不同浓度的化合物一起在含有100mM NaAc(pH5.5)、1mM EDTA、100mM NaCl、0.01％卞泽-35的缓冲液中于室温下孵育20分钟。不存在抑制剂情况下的对照反应一式24份地进行。通过加入底物-乙酰基-组氨酸-脯氨酸-缬氨酸-赖氨酸-氨基氨基甲酰基香豆素至50μM的终浓度引发反应。通过在380nm的激发波长和450nm的发射波长下对荧光的增加进行监测来测量底物的水解速率，所述荧光是底物中的苯胺键被酶裂解而产生的。由酶进行曲线确定化合物的表观抑制常数(Kuzmic，P.K.C.Elrod等人，Anal Biochem 2000，286(1)，45-50)，然后用其来计算竞争抑制剂的抑制常数。

组织蛋白酶K

通过对荧光肽底物的组合库进行筛选确定了组织蛋白酶K的最佳底物-乙酰基-赖氨酸-组氨酸-脯氨酸-赖氨酸-氨基氨基甲酰基香豆素(Harris，J.L.B.J.Backes等人，Proc Natl Acad Sci USA 2000，97(14)，7754-9)。以30μl的总反应体积在384孔微量滴定板中进行了动力学测量。将终浓度为3.5nM(活性部位)的组织蛋白酶K与十二种不同浓度的化合物一起在含有100mM NaAc(pH5.5)、1mM EDTA、100mM NaCl、0.01％卞泽-35的缓冲液中于室温下孵育20分钟。不存在抑制剂情况下的对照反应一式24份地进行。通过加入底物-乙酰基-赖氨酸-组氨酸-脯氨酸-赖氨酸-氨基氨基甲酰基香豆素至40μM的终浓度引发反应。通过在380nm的激发波长和450nm的发射波长下对荧光的增加进行监测来测量底物的水解速率，所述荧光是底物中的苯胺键被酶裂解而产生的。由酶进行曲线确定化合物的表观抑制常数(Kuzmic，P.K.C.Elrod等人，Anal Biochem 2000，286(1)，45-50)，然后用其来计算竞争抑制剂的抑制常数。

组织蛋白酶L

通过对荧光肽底物的组合库进行筛选确定了组织蛋白酶L的最佳底物-乙酰基-组氨酸-赖氨酸-苯丙氨酸-赖氨酸-氨基氨基甲酰基香豆素(Harris，J.L.B.J.Backes等人，Proc Natl Acad Sci USA 2000，97(14)，7754-9)。以30μl的总反应体积在384孔微量滴定板中进行了动力学测量。将终浓度为0.1nM(活性部位)的组织蛋白酶L与十二种不同浓度的化合物一起在含有100mM NaAc(pH5.5)、1mM EDTA、100mM NaCl、0.01％卞泽-35的缓冲液中于室温下孵育20分钟。不存在抑制剂情况下的对照反应一式24份地进行。通过加入底物-乙酰基-组氨酸-赖氨酸-苯丙氨酸-赖氨酸-氨基氨基甲酰基香豆素至20μM的终浓度引发反应。通过在380nm的激发波长和450nm的发射波长下对荧光的增加进行监测来测量底物的水解速率，所述荧光是底物中的苯胺键被酶裂解而产生的。由酶进行曲线确定化合物的表观抑制常数(Kuzmic，P.K.C.Elrod等人，Anal Biochem2000，286(1)，45-50)，然后用其来计算竞争抑制剂的抑制常数。

组织蛋白酶B

通过对荧光肽底物的组合库进行筛选确定了组织蛋白酶B的最佳底物-乙酰基-组氨酸-脯氨酸-缬氨酸-赖氨酸-氨基氨基甲酰基香豆素(Harris，J.L.B.J.Backes等人，Proc Natl Acad Sci USA 2000，97(14)，7754-9)。以30μl的总反应体积在384孔微量滴定板中进行了动力学测量。将终浓度为1.5nM(活性部位)的组织蛋白酶B与十二种不同浓度的化合物一起在含有100mM NaAc(pH5.5)、1mM EDTA、100mM NaCl、0.01％卞泽-35的缓冲液中于室温下孵育20分钟。不存在抑制剂情况下的对照反应一式24份地进行。通过加入底物-乙酰基-组氨酸-脯氨酸-缬氨酸-赖氨酸-氨基氨基甲酰基香豆素至10μM的终浓度引发反应。通过在380nm的激发波长和450nm的发射波长下对荧光的增加进行监测来测量底物的水解速率，所述荧光是底物中的苯胺键被酶裂解而产生的。由酶进行曲线确定化合物的表观抑制常数(Kuzmic，P.K.C.Elrod等人，Anal Biochem 2000，286(1)，45-50)，然后用其来计算竞争抑制剂的抑制常数。

本发明化合物的优选的组织蛋白酶S抑制常数小于10μM。本发明化合物的更优选的抑制常数小于1.0μM。本发明化合物的最优选的抑制常数小于0.1μM。

通过本发明化合物的组织蛋白酶同功酶抑制常数与相同化合物的组织蛋白酶S抑制常数的比测定了在存在组织蛋白酶同功酶的情况下对组织蛋白酶S的选择性。对组织蛋白酶S具有选择性的本发明的优选化合物的该比例大于10。对组织蛋白酶S具有选择性的本发明更优选的化合物的该比例大于100。对组织蛋白酶S具有选择性的本发明最优选的化合物的该比例大于1000。

表I：组织蛋白酶S抑制剂的试验数据

实施例	K<sub>i</sub>组织蛋白酶S<sup>a</sup>	与组织蛋白酶K相比对组织蛋白酶S的选择性<sup>b</sup>	与组织蛋白酶L相比对组织蛋白酶S的选择性<sup>b</sup>	与组织蛋白酶B相比对组织蛋白酶S的选择性<sup>b</sup>
实施例	K<sub>i</sub>组织蛋白酶S<sup>a</sup>	与组织蛋白酶K相比对组织蛋白酶S的选择性<sup>b</sup>	与组织蛋白酶L相比对组织蛋白酶S的选择性<sup>b</sup>	与组织蛋白酶B相比对组织蛋白酶S的选择性<sup>b</sup>	1	+	-	+	+
2	+++	++	+	+++	1	+	-	+	+
2	+++	++	+	+++	3	+++	+	-	+
4	+++	+	++	+++	3	+++	+	-	+
4	+++	+	++	+++	5	++	-	++	++
6	+++	+	++	+++	5	++	-	++	++
6	+++	+	++	+++	7	++	+	++	++
8	++	+	++	+++	7	++	+	++	++
8	++	+	++	+++	9	+++	+	+	+++
10	+++	+	+	+++	9	+++	+	+	+++
10	+++	+	+	+++	11	+++	-	++	+++
12	+++	-	++	+++	11	+++	-	++	+++

^a式I化合物的组织蛋白酶S抑制常数：+，＜10μM；++，＜1.0μM；+++，＜0.1μM。

^b与其它组织蛋白酶相比式I化合物对组织蛋白酶S的选择性：-，＜10；+，＞10；++，＞100；+++，＞1000。

尽管为了更清楚地进行理解已经通过举例说明和实施例的方式对上述的本发明进行了一定程度的详细描述，但是显而易见的是可以在所附权利要求的范围那进行某些变化和调整。此外，将本文所提供的各参考文献全部引入作为参考，其程度就好象各参考文献被各个引入作为参考一样。

Claims

1.具有式(I)的化合物：

或其可药用的盐，其中：

A是-CH₂-；

R¹是含有1至4个各自独立地选自N、O和S的杂原子的5-至6-员单环的或8-至10-员二环的杂芳基，其中所述的杂芳基被0-3个R^1a所取代；

各个R^1a独立地选自F、Cl、Br或C₁-C₃全氟代烷基；

R²是被0-2个R^2a取代的C₁-C₆烷基；

各个R^2a独立地是C₃-C₈环烷基；

R³是H；

R⁴是被0-2个R²⁰取代的C₁-C₆烷基；

R⁵、R⁶、R⁷和R⁸各自独立地是H；

Ar是被0-3个R¹⁹取代的苯基；

各个R¹⁹独立地选自F、Cl、Br或OR²¹；

或者，R¹⁹和R⁸一起形成含有N的5-员杂环，其中所述的5员杂环与Ar单边稠合并且其中所述的5员杂环可以任选地被0-2个R²²所取代；

各个R²⁰独立地是OH；

R²¹是CF₃或CHF₂；且

各个R²²独立地是C₁-C₄烷基。

2.根据权利要求1所述的化合物，其中R²是叔丁基甲基或环戊基甲基。

3.根据权利要求1所述的化合物，其中R⁴是CH₂OH或甲基。

4.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹⁹是氟、二氟甲氧基或三氟甲氧基。

5.根据权利要求1所述的化合物，其中：

R¹选自吗啉-4-基、吡唑-1-基或苯并咪唑-1-基，其中所述的吡唑-1-基和苯并咪唑-1-基被0-3个R^1a取代。

6.根据权利要求1所述的化合物，其具有式Ib：

其中R^1a是Cl。

7.根据权利要求6所述的化合物，其中所述的化合物具有式Ic：

8.根据权利要求1所述的化合物，其中R¹是被R^1a取代的吡唑-1-基，且R^1a是三氟甲基。

9.根据权利要求1所述的化合物，其中所述的化合物选自：

[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(R)-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯；

[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯；

[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基甲基)-2，2-二甲基-丙酯；

[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基-3，3-二甲基)-丁酯；

[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸3，3-二甲基-(S)-1-吗啉-4-基甲基-丁酯；

[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸2-(苯并咪唑-1-基)-1-(S)-环戊基甲基-乙酯；

[2-(4-二氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(3-三氟甲基-吡唑-1-基)-乙酯；

[2-(4-二氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯；和

[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯；

[2-(4-三氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯；

[2-(5-氟-3，3-二甲基-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基-3，3-二甲基)丁酯；

[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(R)-羟基甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基)-3，3-二甲基-丁酯。

10.药物组合物，所述组合物包含权利要求1的化合物和赋形剂。

11.药物组合物，所述组合物包含权利要求9的化合物和赋形剂。

12.权利要求1的化合物在制备用于抑制组织蛋白酶S活性的药物中的用途。

13.根据权利要求12所述的用途，其中所述式I化合物的组织蛋白酶S抑制常数小于10μM。

14.根据权利要求12所述的用途，其中所述式I化合物的组织蛋白酶S抑制常数小于1.0μM。

15.根据权利要求12所述的用途，其中所述式I化合物的组织蛋白酶S抑制常数小于0.1μM。

16.根据权利要求12所述的用途，其中组织蛋白酶S在存在至少一种其它组织蛋白酶的情况下被选择性地抑制。

17.根据权利要求16所述的用途，其中所述式I化合物对所述的至少一种其它组织蛋白酶的抑制常数比所述式I化合物的组织蛋白酶S抑制常数大至少10倍。

18.根据权利要求17所述的用途，其中所述式I化合物对所述的至少一种其它组织蛋白酶的抑制常数比所述式I化合物的组织蛋白酶S抑制常数大至少100倍。

19.根据权利要求12所述的用途，其中所述的化合物是

[2-(5-氟-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸3，3-二甲基-(S)-1-吗啉-4-基甲基-丁酯；

[2-(4-二氟甲氧基-苯基氨基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-环戊基甲基-2-(5，6-二氯-苯并咪唑-1-基)-乙酯；

[2-(5-氟-3，3-二甲基-2，3-二氢-吲哚-1-基)-1-(S)-甲基-乙基]氨基甲酸1-(S)-(苯并咪唑-1-基甲基-3，3-二甲基)丁酯；或

20.权利要求1的化合物在制备用于治疗神经性疼痛的药物中的用途。

21.权利要求1的化合物在制备用于治疗组织蛋白酶S介导的疾病的药物中的用途，所述组织蛋白酶S介导的疾病选自阿尔茨海默病、多发性硬化、类风湿性关节炎、哮喘或器官移植物或组织移植物的排斥反应。