CH650679A5

CH650679A5 - AGAINST DIABETES MELLITUS ACTIVE PHARMACEUTICAL AGENT.

Info

Publication number: CH650679A5
Application number: CH5010/82A
Authority: CH
Inventors: Ronald Eugene Chance; Bruce Hill Frank; John Allison Galloway
Original assignee: Lilly Co Eli
Priority date: 1981-08-27
Filing date: 1982-08-23
Publication date: 1985-08-15
Also published as: LU84359A1; CA1176158A; IT1153182B; IE54119B1; AU8759482A; DE3232034A1; BE894185A; MW3882A1; FR2513126A1; NL192192B; PH19361A; DZ452A1; ZA826159B; NL8203315A; SE8204873D0; SE8204873L; IE822064L; IL66611A0; NZ201682A; DE3232034C2

Description

Aufgabe der Erfindung ist nun die Bereitstellung eines pharmazeutischen Mittels, durch das sich die natürliche hormonale Homöostase in einem diabetischen Zustand besser angenähert erreichen und aufrechterhalten lässt als durch Verabreichung von Insulin allein. The object of the invention is now to provide a pharmaceutical agent by means of which the natural hormonal homeostasis in a diabetic state can be better approximated and maintained than by the administration of insulin alone.

Diese Aufgabe wird nun erfindungsgemäss gelöst durch ein pharmazeutisches Mittel aus einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger und einer Wirkstoffkombination, das dadurch gekennzeichnet ist, dass es als Wirkstoffkombination Human-Insulin und Human-C-Peptid in einem Molverhältnis von 1:4 bis 4:1 enthält. This object is now achieved according to the invention by a pharmaceutical composition comprising a pharmaceutically acceptable carrier and a combination of active substances, which is characterized in that it contains human insulin and human C-peptide in a molar ratio of 1: 4 to 4: 1 as the combination of active substances.

Die beiden wesentlichen Bestandteile des erfindungsge-mässen pharmazeutischen Mittels sind Human-Insulin und Human-C-Peptid. The two essential components of the pharmaceutical agent according to the invention are human insulin and human C peptide.

Human-Insulin ist über eine Reihe verschiedener Wege zugänglich, beispielsweise durch organische Synthese, Isolierung aus der Bauchspeicheldrüse von Menschen, Umwandlung von Human-Proinsulin, Umwandlung von isoliertem tierischem Insulin und seit neuem auch durch Rekombinations-DNA-Methodologie. Human insulin is accessible in a number of different ways, including organic synthesis, human pancreatic isolation, human proinsulin conversion, isolated animal insulin conversion, and more recently recombinant DNA methodology.

Unter Anwendung der Rekombinations-DNA-Metho-dologie lässt sich Human-Insulin bevorzugt durch getrennte Expression und Isolierung der A-Kette von Human-Insulin und der B-Kette von Human-Insulin und anschliessende geeignete Bildung der Disulfidbindung herstellen. Wahlweise kann das bei der Rekombinations-DNA-Expression erhaltene Produkt auch direkt Human-Proinsulin oder ein Vorläufer für Human-Proinsulin sein, der in Human-Proinsulin umgewandelt wird. Durch anschliessende enzymatische Spaltung des Proinsulins, beispielsweise mittels Trypsin oder Carboxypeptidase B gelangt man zu Human-Insulin. Using the recombination DNA method, human insulin can preferably be produced by separate expression and isolation of the A chain from human insulin and the B chain from human insulin and subsequent suitable formation of the disulfide bond. Optionally, the product obtained in recombinant DNA expression can also be human proinsulin directly or a precursor for human proinsulin that is converted to human proinsulin. Subsequent enzymatic cleavage of the proinsulin, for example using trypsin or carboxypeptidase B, leads to human insulin.

Human-Insulin lässt sich ferner auch aus Schweineinsulin herstellen. Human-Insulin unterscheidet sich von Schweineinsulin durch eine einzige Aminosäure, nämlich durch die an der endständigen Carboxylgruppe der B-Kette befindliche Aminosäure. Zu diesem Zweck ersetzt man die bei Schweineinsulin vorhandene B-30-Aminosäure, nämlich Alanin, durch Threonin. Im einzelnen wird hierzu auf US-PS 3 276 961 hingewiesen. Human insulin can also be produced from pig insulin. Human insulin differs from swine insulin by a single amino acid, namely the amino acid located on the terminal carboxyl group of the B chain. For this purpose, the B-30 amino acid present in porcine insulin, namely alanine, is replaced by threonine. In particular, reference is made to US Pat. No. 3,276,961.

Der andere aktive Bestandteil des erfindungsgemässen Mittels, nämlich das Human-C-Peptid, ist ein Teil eines Peptids,,das bei Human-Proinsulin vorhanden ist und über die die Ketten A und B des Insulins miteinander verbunden sind. Dieses Peptid, das auch als Verknüpfungspeptid bezeichnet wird, wird gewöhnlich während der Bildung von Human-Insulin aus Proinsulin entfernt. Das bei Human-Insulin vorhandene Verknüpfungspeptid hat die folgende Formel The other active component of the agent according to the invention, namely the human C peptide, is part of a peptide which is present in human proinsulin and by means of which the chains A and B of the insulin are linked to one another. This peptide, also known as the linking peptide, is usually removed from proinsulin during the formation of human insulin. The linking peptide present in human insulin has the following formula

Arg-Arg-Glu-Ala-Glu-Asp-Leu-Gln-Val-Gly-Gln-Val-Glu- Arg-Arg-Glu-Ala-Glu-Asp-Leu-Gln-Val-Gly-Gln-Val-Glu-

Leu-Gly-Gly-Gly-Pro-Gly-Ala-Gly-Ser-Leu-Gln-Pro-Leu- Leu-Gly-Gly-Gly-Pro-Gly-Ala-Gly-Ser-Leu-Gln-Pro-Leu-

Ala-Leu-Glu-Gly-Ser-Leu-Gln-Lys-Arg. Ala-Leu-Glu-Gly-Ser-Leu-Gln-Lys-Arg.

Das im erfindungsgemässen Mittel enthaltene Human-C-Peptid unterscheidet sich vom Verknüpfungspeptid durch das Fehlen von vier Aminosäuren, nämlich von zwei Aminosäuren an jedem Ende. Das Human-C-Peptid hat daher folgende Struktur The human C peptide contained in the agent according to the invention differs from the linking peptide by the lack of four amino acids, namely two amino acids at each end. The human C peptide therefore has the following structure

î î

10 10th

15 15

20 20th

25 25th

30 30th

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

3 3rd

650 679 650 679

Glu-Ala-Glu-Asp-Leu-Gln-Val-Gly-Gln-Val-Glu-Leu-Gly- Glu-Ala-Glu-Asp-Leu-Gln-Val-Gly-Gln-Val-Glu-Leu-Gly-

Gly-Gly-Pro-Gly-Ala-Gly-Ser-Leu-Gln-Pro-Leu-Ala-Leu- Gly-Gly-Pro-Gly-Ala-Gly-Ser-Leu-Gln-Pro-Leu-Ala-Leu-

Glu-Gly-Ser-Leu-Gln. Glu-Gly-Ser-Leu-Gln.

Das als Bestandteil beim erfindungsgemässen Mittel benötigte Human-C-Peptid kann durch chemische Synthese hergestellt werden, und hierzu wird beispielsweise auf Diabetes 27 (Suppl. 1), 149 bis 160 (1978) hingewiesen, oder es lässt sich auch aus Human-Proinsulin durch Spaltung bei der Bildung von Human-Insulin erzeugen. The human C peptide required as a constituent in the agent according to the invention can be produced by chemical synthesis, and for this purpose reference is made, for example, to Diabetes 27 (Suppl. 1), 149 to 160 (1978), or it can also be obtained from human proinsulin Create cleavage in the formation of human insulin.

Die wirksamen Bestandteile des erfindungsgemässen Mittels sind obigen Ausführungen zufolge daher über die verschiedensten Wege zugänglich, beispielsweise auch über Human-Proinsulin. Die Herstellung von Insulin unter Anwendung der Rekombinations-DNA-Methodologie erfordert die Bildung einer Sequenz einer DNA-Codierung für die Aminosäuresequenz von Human-Proinsulin, was sich entweder durch Isolierung, Konstruktion oder eine Kombination aus beidem erreichen lässt. Die Human-Proinsulin-DNA wird dann in Lesephase in einen geeigneten Clonierungs-und Expressionsträger eingesetzt. Der Träger dient zur Transformierung eines geeigneten Mikroorganismus, und der hierbei erhaltene transformierte Mikroorganismus wird dann Fermentationsbedingungen unterzogen, die (a) zur Bildung weiterer Kopien des proinsulingenhaltigen Vektors und (b) zur Expression von Proinsulin oder einem Proinsulinvorläufer führen. The active constituents of the agent according to the invention are therefore, according to the above statements, accessible in a variety of ways, for example also via human proinsulin. The production of insulin using the recombinant DNA methodology requires the formation of a sequence of DNA coding for the amino acid sequence of human proinsulin, which can be accomplished either by isolation, construction, or a combination of both. The human proinsulin DNA is then inserted into a suitable cloning and expression carrier in the reading phase. The carrier serves to transform a suitable microorganism, and the transformed microorganism obtained in this way is then subjected to fermentation conditions which (a) lead to the formation of further copies of the vector containing proinsulin and (b) to the expression of proinsulin or a proinsulin precursor.

Handelt es sich beim Expressionsprodukt um einen Proinsulinvorläufer, dann enthält ein solches Produkt im allgemeinen die Human-Proinsulinaminosäuresequenz, die an ihrer endständigen Aminogruppe an ein Bruchstück eines Proteins gebunden ist, das normalerweise bei der Gensequenz ausgedrückt wird, bei welcher das Proinsulin eingesetzt worden ist. Die Proinsulinaminosäuresequenz ist an das Proteinbruchstück über eine spezifisch spaltbare Stelle gebunden, bei der es sich normalerweise um Methionin handelt. Dieses Produkt wird gewöhnlich als verschmolzenes Genprodukt bezeichnet. When the expression product is a proinsulin precursor, such a product generally contains the human proinsulin amino acid sequence which is attached at its terminal amino group to a fragment of a protein which is normally expressed in the gene sequence in which the proinsulin has been used. The proinsulin amino acid sequence is linked to the protein fragment via a specifically cleavable site, which is usually methionine. This product is commonly referred to as a fused gene product.

Die erhaltene Proinsulinaminosäuresequenz wird vom verschmolzenen Genprodukt mittels Cyanogenbromid abgespalten, worauf man die Cysteinsulfhydrylreste der Proinsulinaminosäuresequenz durch übliche Umwandlung in die entsprechenden S-Sulfonate stabilisiert. The proinsulin amino acid sequence obtained is cleaved from the fused gene product by means of cyanogen bromide, whereupon the cysteine sulfhydryl residues of the proinsulin amino acid sequence are stabilized by customary conversion into the corresponding S-sulfonates.

Das erhaltene Proinsulin-S-sulfonat wird dann gereinigt, und im Anschluss daran überführt man das gereinigte Proinsulin-S-sulfonat in Proinsulin, indem man die drei erforderlichen Disulfidbindungen an den geeigneten Stellen bildet. The proinsulin-S-sulfonate obtained is then purified, and then the purified proinsulin-S-sulfonate is converted into proinsulin by forming the three required disulfide bonds at the appropriate sites.

Nach entsprechender Reinigung wird das Proinsulin en-zymatisch gespalten, und zwar gewöhnlich unter Verwendung von Trypsin und Carboxypeptidase B, wodurch Human-Insulin und Human-C-Peptid gebildet werden. After appropriate purification, the proinsulin is cleaved enzymatically, usually using trypsin and carboxypeptidase B, thereby producing human insulin and human C peptide.

Das erfindungsgemässe Mittel enthält Human-Insulin und Human-C-Peptid in einem Molverhältnis von 1:4 bis 4:1. Vorzugsweise beträgt das Molverhältnis von Humanin-sulin zu Human-C-Peptid 1:2 bis 2:1, und inbesondere 1:1 bis 2:1. The agent according to the invention contains human insulin and human C peptide in a molar ratio of 1: 4 to 4: 1. The molar ratio of human insulin to human C peptide is preferably 1: 2 to 2: 1, and in particular 1: 1 to 2: 1.

Das erfindungsgemässe Mittel zeichnet sich, wie bereits erwähnt, vor allem dadurch aus, dass sich mit ihm eine natürliche hormonale Homöostase besser erreichen lässt, so dass hierdurch die bekannten Komplikationen von Diabetes unterbunden, wesentlich vermindert oder verzögert werden können. Die zur Aufrechterhaltung einer natürlichen hormonalen Homöostase oder zur Erzielung eines Zustands, der der natürlichen hormonalen Homöostase beim Diabetiker stärker angenähert ist, erforderliche Menge an zu verabreichendem erfindungsgemässen Mittel ist natürlich abhängig von der Schwere des diabetischen Zustands. Die zu verabreichende Menge hängt u.a. auch vom jeweiligen Verabreichungsweg ab. Letztendlich ist die Menge an zu verabreichendem Mittel und die Häufigkeit einer solchen Verabreichung der Entscheidung des jeweiligen Arztes überlassen. Im allgemeinen wird jedoch ein Dosierungsbereich gewählt, der für etwa 0,02 bis etwa 5 Einheiten an Human-Insulin pro kg Körpergewicht und pro Tag sorgt und der vorzugsweise etwa 0,1 bis etwa 1 Einheiten an Human-Insulin pro kg Körpergewicht und pro Tag ergibt. As already mentioned, the agent according to the invention is characterized above all by the fact that it can be used to achieve natural hormonal homeostasis better, so that the known complications of diabetes can thereby be prevented, significantly reduced or delayed. The amount of agent to be administered according to the invention required to maintain a natural hormonal homeostasis or to achieve a state which is more closely approximated to the natural hormonal homeostasis in the diabetic is of course dependent on the severity of the diabetic state. The amount to be administered depends, among other things. also depending on the respective route of administration. Ultimately, the amount of agent to be administered and the frequency of such administration is up to the decision of the particular doctor. In general, however, a dosage range is selected which provides for about 0.02 to about 5 units of human insulin per kg body weight and per day, and preferably about 0.1 to about 1 unit of human insulin per kg body weight and per day results.

Das erfindungsgemässe Mittel wird vor allem parenteral verabreicht, beispielsweise subkutan, intramuskulär oder intravenös. Das Mittel enthält die Wirkstoffe, nämlich Human-Insulin und Human-C-Peptid, zusammen mit einem pharmazeutisch unbedenklichen Träger hierfür und gegebenenfalls auch noch zusammen mit anderen therapeutischen Bestandteilen. Die Gesamtmenge an im erfindungsgemässen Mittel vorhandenen Wirkstoffen macht gewöhnlich etwa 99,99 bis etwa 0,01 Gew.-% aus. Der vorhandene Träger muss mit den anderen Bestandteilen des Mittels verträglich sein und darf natürlich auch zu keiner Beeinträchtigung des Patienten führen. The agent according to the invention is administered primarily parenterally, for example subcutaneously, intramuscularly or intravenously. The agent contains the active ingredients, namely human insulin and human C peptide, together with a pharmaceutically acceptable carrier therefor and, if appropriate, also together with other therapeutic constituents. The total amount of active substances present in the agent according to the invention usually makes up about 99.99 to about 0.01% by weight. The existing carrier must be compatible with the other components of the agent and, of course, must not impair the patient.

Erfindungsgemässe Mittel, die sich für eine parenterale Verabreichung eignen, sind am besten sterile wässrige Lösungen und/oder Suspensionen der pharmazeutisch wirksamen Bestandteile, und diese Lösungen oder Suspensionen sind vorzugsweise mit dem Blut des Empfangers isotonisch gemacht, was sich im allgemeinen unter Verwendung von Natriumchlorid, Glycerin, Glucose, Mannit, Sorbit und ähnlicher bekannter Mittel erreichen lässt. Zusätzlich können die Mittel auch noch irgendeine Anzahl an Hilfsstoffen enthalten, wie Puffer, Konservierungsmittel, Dispergierungs-mittel, Mittel zur Förderung eines raschen Wirkungsbeginns, Mittel zur Förderung einer verlängerten Wirkungsdauer oder andere bekannte Mittel. Typische Konservierungsmittel sind beispielsweise Phenol, m-Kresol oder Me-thyl-p-hydröxybenzoat. Beispiele für typische Puffer sind Natriumphosphat, Natriumacetat oder Natriumeitrat. Agents according to the invention which are suitable for parenteral administration are best sterile aqueous solutions and / or suspensions of the pharmaceutically active constituents, and these solutions or suspensions are preferably made isotonic with the blood of the recipient, which is generally done using sodium chloride, Glycerin, glucose, mannitol, sorbitol and similar known agents can be achieved. In addition, the agents can also contain any number of auxiliaries, such as buffers, preservatives, dispersants, agents for promoting a rapid onset of action, agents for promoting an extended duration of action or other known agents. Typical preservatives are, for example, phenol, m-cresol or methyl-p-hydroxybenzoate. Examples of typical buffers are sodium phosphate, sodium acetate or sodium citrate.

Ferner können auch entsprechende Mittel zur geeigneten Einstellung des pH-Werts vorhanden sein, beispielsweise Säuren, wie Chlorwasserstoffsäure, oder Basen, wie Natriumhydroxid. Der pH-Wert entsprechender wässriger Mittel liegt im allgemeinen zwischen etwa 2 und 8, vorzugsweise etwa 6,8 und 8,0. Appropriate means for suitably adjusting the pH can also be present, for example acids such as hydrochloric acid or bases such as sodium hydroxide. The pH of corresponding aqueous agents is generally between about 2 and 8, preferably about 6.8 and 8.0.

Andere geeignete Zusätze sind beispielsweise zweiwertige Zinkionen, die falls überhaupt vorhanden, im allgemeinen in einer Menge von etwa 0,01 bis 0,5 mg/100 Einheiten Human-Insulin anwesend sind, oder Protaminsalze, beispielsweise in Form des Sulfats, die, falls überhaupt, im allgemeinen in einer Menge von etwa 0,1 bis 2 mg/100 Einheiten Human-Insulin vorliegen. Other suitable additives are, for example, divalent zinc ions, which are generally present in an amount of about 0.01 to 0.5 mg / 100 units of human insulin, if any, or protamine salts, for example in the form of the sulfate, which, if at all , generally in an amount of about 0.1 to 2 mg / 100 units of human insulin.

Die Erfindung wird im folgenden anhand von Beispielen weiter erläutert. The invention is explained in more detail below with the aid of examples.

Beispiel 1 example 1

Formulierung aus neutralem regulärem Human-Insulin und Human-C-Peptid (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:4,40 Insulineinheiten pro ml) Formulation of neutral regular human insulin and human C peptide (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 4.40 insulin units per ml)

Zur Herstellung von 10 ml dieser Formulierung vermischt man Mix to make 10 ml of this formulation

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 400 E Human zinc insulin (28 U / mg) 400 U

Human-C-Peptid 30 mg Human C peptide 30 mg

Phenol, destilliert 20 mg Phenol, 20 mg distilled

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Wasser und entweder 10%-ige Chlorwasserstoffsäure oder 10%-iges Natriumhydroxid in solcher Menge miteinander, dass sich eine Zusammensetzung mit einem Volumen von 10 ml und einem End-pH-Wert von 7,0 bis 7,8 ergibt. Water and either 10% hydrochloric acid or 10% sodium hydroxide together in such an amount that a composition with a volume of 10 ml and a final pH of 7.0 to 7.8 results.

5 5

10 10th

15 15

20 20th

25 25th

30 30th

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

650 679 650 679

4 4th

Beispiel 2 Example 2

Formulierung aus neutralem regulärem Human-Insulin und Human-C-Peptid (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:1,100 Insulineinheiten pro ml) Zur Herstellung von 10 ml dieser Formulierung vermischt man Formulation of neutral regular human insulin and human C peptide (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 1,100 insulin units per ml). Mix 10 ml of this formulation

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 1000 E Human zinc insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 19 mg Human C peptide 19 mg

Phenol, destilliert 20 mg Phenol, 20 mg distilled

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Beispiel 3 Example 3

Formulierung aus Protamin, Human-Zinkinsulin und Human-C-Peptid (Molverhältnis von Human-Insulin zu Hu-man-C-Peptid 1:1,40 Insulineinheiten pro ml). Formulation of protamine, human zinc insulin and human C peptide (molar ratio of human insulin to Hu man C peptide 1: 1.40 insulin units per ml).

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 400 E Human zinc insulin (28 U / mg) 400 U

Human-C-Peptid 8 mg Human C peptide 8 mg

Phenol, destilliert 25 mg Phenol, 25 mg distilled

Zinkoxid 0,78 mg Zinc oxide 0.78 mg

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Protaminsulfat 4,0 bis 6,0 mg Protamine sulfate 4.0 to 6.0 mg

Natriumphosphat, Kristalle 38 mg Sodium phosphate, crystals 38 mg

Wasser und entweder 10%-ige Chlorwasserstoffsäure oder 10%-iges Natriumhydroxid in solcher Menge miteinander, dass sich eine Zusammensetzung mit einem Volumen von 10 ml und einem End-pH-Wert von 7,1 bis 7,4 ergibt. Water and either 10% hydrochloric acid or 10% sodium hydroxide together in such an amount that a composition with a volume of 10 ml and a final pH of 7.1 to 7.4 results.

Beispiel 4 Example 4

Formulierung aus Protamin, Human-Zinkinsulin und Human-C-Peptid (Molverhältnis von Human-Insulin zu Hu-man-C-Peptid 2:1,100 Insulineinheiten pro ml) Formulation of protamine, human zinc insulin and human C peptide (molar ratio of human insulin to Hu man C peptide 2: 1,100 insulin units per ml)

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 1000 E Human zinc insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 9 mg Human C peptide 9 mg

Phenol, destilliert 25 mg Phenol, 25 mg distilled

Zinkoxid 2,0 mg Zinc oxide 2.0 mg

Glycerin 160 mg Protaminsulfat 10 bis 15 mg Glycerin 160 mg protamine sulfate 10 to 15 mg

Natriumphosphat, Kristalle 38 mg Sodium phosphate, crystals 38 mg

Beispiel 5 Example 5

Formulierung aus Isophanprotamin, Human-Zinkinsu-lin und Human-C-Peptid (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:1,40 Insulineinheiten pro ml) Zur Herstellung von 10 ml dieser Formulierung vermischt man Formulation of isophane protamine, human zinc insulin and human C peptide (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 1.40 insulin units per ml). Mix 10 ml of this formulation

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 400 E Human zinc insulin (28 U / mg) 400 U

Human-C-Peptid 8 mg m-Kresol, destilliert 16 mg Human C peptide 8 mg m-cresol, 16 mg distilled

Phenol, destilliert 6,5 mg Phenol, distilled 6.5 mg

Glycerin 160 mg Protaminsulfat 1,2 bis 2,4 mg Glycerin 160 mg protamine sulfate 1.2 to 2.4 mg

Natriumphosphat, Kristalle 38 mg Sodium phosphate, crystals 38 mg

Beispiel 6 Example 6

Formulierung aus Isophanprotamin, Human-Zinkinsu-lin und Human-C-Peptid (Molverhältnis von Human-Insu-lin zu Human-C-Peptid 4:1, 100 Insulineinheiten pro ml) Zur Herstellung von 10 ml dieser Formulierung vermischt man Formulation of isophane protamine, human zinc insulin and human C peptide (molar ratio of human insulin to human C peptide 4: 1, 100 insulin units per ml) To produce 10 ml of this formulation, mix

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 1000 E Human zinc insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 5 mg m-Kresol, destilliert 16 mg Human C peptide 5 mg m-cresol, distilled 16 mg

Phenol, destilliert 6,5 mg Phenol, distilled 6.5 mg

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

Protaminsulfat 3,0 bis 6,0 mg Protamine sulfate 3.0 to 6.0 mg

Natriumphosphat, Kristalle 38 mg Sodium phosphate, crystals 38 mg

Beispiel 7 Example 7

Zink-Humaninsulin-Suspension: Human-C-Peptid-Formulierung (Molverhältnis von Human-Insulin zu Hu-man-C-Peptid 1:2,40 Insulineinheiten pro ml) Zinc human insulin suspension: Human C peptide formulation (molar ratio of human insulin to Hu man C peptide 1: 2.40 insulin units per ml)

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 400 E Human zinc insulin (28 U / mg) 400 U

Human-C-Peptid 15 mg Human C peptide 15 mg

Natriumacetat, wasserfrei 16 mg Sodium acetate, anhydrous 16 mg

Natriumchlorid, Granulat 70 mg Sodium chloride, granules 70 mg

Methyl-p-hydroxybenzoat 10 mg Methyl p-hydroxybenzoate 10 mg

Zinkoxid 0,63 mg Zinc oxide 0.63 mg

Wasser und entweder 10%-ige Chlorwasserstoffsäure oder 10%-iges Natriumhydroxid in solcher Menge miteinander, dass sich eine Zusammensetzung mit einem Volumen von 10 ml und einem End-pH-Wert von 7,2 bis 7,5 ergibt. Water and either 10% hydrochloric acid or 10% sodium hydroxide together in such an amount that a composition with a volume of 10 ml and a final pH of 7.2 to 7.5 results.

Beispiel 8 Example 8

Zink-Humaninsulin-Suspension: Human-C-Peptid-Formulierung (Molverhältnis von Human-Insulin zu Hu-man-C-Peptid 1:1,100 Insulineinheiten pro 100 ml) Zur Herstellung von 10 ml dieser Formulierung vermischt man Zinc human insulin suspension: Human C peptide formulation (molar ratio of human insulin to Hu man C peptide 1: 1,100 insulin units per 100 ml) Mix to produce 10 ml of this formulation

Human-Zinkinsulin (28 E/mg) 1000 E Human zinc insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 19 mg Human C peptide 19 mg

Natriumacetat, wasserfrei 16 mg Sodium acetate, anhydrous 16 mg

Natriumchlorid, Granulat 70 mg Sodium chloride, granules 70 mg

Methyl-p-hydroxybenzoat 10 mg Methyl p-hydroxybenzoate 10 mg

Zinkoxid 1,6 mg Zinc oxide 1.6 mg

Beispiel 9 Example 9

Formulierung aus neutralem regulärem Human-Insulin und Human-C-Peptid (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:4,40 Insulineinheiten pro ml) Zur Herstellung von 10 ml dieser Formulierung vermischt man Formulation of neutral regular human insulin and human C peptide (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 4.40 insulin units per ml) To produce 10 ml of this formulation, mix

Human-Natriuminsulin (28 E/mg) 400 E Human sodium insulin (28 U / mg) 400 U

Human-C-Peptid 30 mg Human C peptide 30 mg

Phenol, destilliert 20 mg Phenol, 20 mg distilled

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

5 5

10 10th

15 15

20 20th

25 25th

30 30th

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

5 5

650 679 650 679

Beispiel 10 Example 10

Formulierung aus neutralem regulärem Human-Insulin und Human-C-Peptid (Molverhältnis von Human-Insulin zu Human-C-Peptid 1:1, 100 Insulineinheiten pro ml) Formulation of neutral regular human insulin and human C peptide (molar ratio of human insulin to human C peptide 1: 1, 100 insulin units per ml)

Human-Natriuminsulin (28 E/mg) 1000 E Human sodium insulin (28 U / mg) 1000 U

Human-C-Peptid 19 mg Human C peptide 19 mg

Phenol, destilliert 20 mg Phenol, 20 mg distilled

Glycerin 160 mg Glycerin 160 mg

5 5

10 10th

15 15

20 20th

25 25th

30 30th

35 35

40 40

45 45

50 50

55 55

60 60

65 65

S S

Claims

650 679

1: 1 to 2: 1.

1: 2 to 2: 1.

1. Pharmaceutical agent effective against diabetes mellitus consisting of a pharmaceutically acceptable carrier and a combination of active substances, characterized in that it contains human insulin and Hu-man-C peptide in a molar ratio of 1: 4 to 4: 1 as the combination of active substances.

2. Composition according to claim 1, characterized in that the molar ratio of human insulin to human C peptide

2nd

PATENT CLAIMS

3. Composition according to claim 1, characterized in that the molar ratio of human insulin to human C peptide

4. Composition according to claim 1, characterized in that it contains divalent zinc ions.

5. Composition according to claim 1, characterized in that it contains protamine salt.

Diabetes mellitus is a metabolic disorder which manifests itself in the fact that the body tissue can no longer oxidize carbohydrates to the normal extent. Its most important factor is a lack of insulin. For about 60 years, diabetics have been treated with certain amounts of insulin. The insulin required for this is isolated from the pancreas of animals, generally from cattle or pigs. Both bovine insulin and swine insulin differ in structure from insulin, which is produced by the human pancreas. Recently, recombinant DNA methodology has also made it possible to produce insulin that is identical to the insulin made by the human pancreas. The use of such an insulin enables the diabetic to imitate the natural system more closely than when using the other insulins.

Regardless of this, it has long been known that administering insulin to a diabetic alone is not sufficient to restore and / or maintain the normal metabolic state. While insulin clearly affects the metabolism of carbohydrates,

However, other disorders are associated with diabetes mellitus, which depend largely or entirely on the structure and function of the blood vessels. The deficiencies leading to these disorders can rarely be completely corrected by conventional treatment with insulin.

The vascular abnormalities associated with diabetes are often referred to as complications from diabetes. They generally consist of microangiopathic changes that damage the retina and kidney. Neuropathy is another complication of diabetes that may or may not be directly or indirectly related to the observed microangiopathic changes. Examples of specific manifestations of diabetes complications include (1) eye diseases including retinopathy, cataract formation, glaucoma and extraocular muscle paralysis, (2) oral diseases including gum infections, increased tooth decay, periodontal diseases and increased resorption of the alveolar node, (3) motor, sensory and autonomic neuropathy, (4) disease of large blood vessels, (5) microangiopathy,

(6) Diseases of the skin including Xanthoma diabeticorum, Necrobiosis lipoidica diabeticorum furunculosis, mycoses and itchy skin,

(7) Diseases of the kidneys including diabetic glomerulosclerosis, arteriolar nephrosclerosis and pyelonephritis and

(8) Problems during pregnancy, including the increase in education of large children, stillbirths, miscarriages, newborn deaths and congenital defects.

Some and possibly all diabetic complications are a result of the lack of insulin alone, so the body can no longer maintain its natural hormonal balance.