Gegenstand der Erfindung ist die Herstellung neuer therapeutisch wirksamer Derivate der 7-Amino-cephalosporan- säure der Formel I
EMI1.1
worin R, für einen niederen Alkyl- und R2 für Wasserstoff oder einen niederen A]koxycarbonylrest stehen, und worin R3 eine freie oder durch eine Carbonsäure veresterte Hydroxylgruppe, in der Estersauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können oder eine gegebenenfalls N-substituierte Carbamoyl oxygruppe, in der Sauerstoffatome durch Schwefel ersetzt sein könnten. oder eine quaternäre Aminogruppe und R4 eine Hydroxylgruppe und ihrer Salze.
Eine veresterte Hydroxvlgruppe R. in der Sauerstoffatome durch Schwefel ersetzt sein können leitet sich von einer Carkonsäure ab und ist vorzugsweise die Acetoxygruppe oder eine z.B. durch Niederalkyl-, Niederalkoxy- oder Niederalkyl mercaptoreste. Halogenatome oder die Nitrogruppe substituierte mono- oder dicyclische Arylcarbonyloxy- oder thiocarbonyloy-. Arylcarbonylmercapto oder -thiocarbonyl- mercaptogruppe, insbesondere die Benzoylmercaptogruppe.
Als weitere Beispiele für R3 sind zu nennen: a) eine Carbamoyloxygruppe der Formel -O-CO-NH-RD worin R5 ein aliphatischer, aromatischer, araliphatischer oder heterocyclischer Rest, besonders ein unsubstituierter oder substituierter. vorzugsweise durch eine oder mehrere Niederalkoxygruppen oder Halogenatome substituierter. gerader oder verzweigter Niederalkylrest, wie der Methyl- Aethyl-, vor allem aber der ss-Chloräthylrest, ist; oder h) eine Thiocarbamoylmercaptogruppe der Formel
EMI1.2
worin R; die oben angegebene Bedeutung hat und R6 für Wasserstoff oder R5 steht: oder c) eine quaternäre Aminogruppe, in der das quaternäre Stickstoffatom z.B. Teil eines aromatischen Ringes, wie eines
Chinolin-.
Isochinolin- oder Pyrimidinringes. insbesondere aber eines unsubstituierten oder substituierten Pyridinringes z.B.
der Formel
EMI1.3
worin R7 für Wasserstoff oder eine oder mehrere Niederalkyl-.
Niederalkoxycarbonyl-, Carbainoyl- oder Carhoxylgruppes oder ein oder mehrere Halogenatome steht.
Die Salze der neuen Verbindüngen sind Metalisalze, vor allem solche von therapeutisch anwendbaren Alkali- oder Erdalkalimetallen, wie Natrium, Kalium. Ammonium, Calcium, oder Salze mit organischen Basen, z.B. Triäthylamin. N-Aethylpiperidin. Dibenzyläthylendiamin, Procain. Ist die Gruppe R3 basisch. so können sich innere Salze bilden.
Die neuen Verbindungen weisen eine besonders gute antibakterielle Wirkung auf. Sie sind sowohl gegenüber grampositiven sie vor allem auch gegenüber gram-negativen Bakterien wirksam, z.B. gegen Staphylocoecus aureus penicillinresistent. Escherichia coli, Klebsiella pneumonie Salmonella typhosa und Bacterium proteus, wie sich auch im Tier'ersuch, z.B. an Mäusen, zeigt. Sie können daher zur Bekämpfung von Infektionen. die durch solche Mikro- Organismen hervorgerufen werden. verwendet werden, ferner als Futtermittelzusätze. zur Konservierung von Nahrungsmitteln oder als Desinfektionsmittel.
Besonders wertvoll sind Verbindungen, in denen der Acylrest in 7-Stellung ein Di methoxycadionyi-. ein Nlono-methoxycarbonyl-, ein Mono aethoxvcarbon5 I-acetyl-rest und R3 eine Acetoxygruppe. eine ss-Chloräthylcarbamoyl- oder eine unsubstituierte oder, wie oben angegehen. substituierte Pyndiniogruppe ist.
Die neuen Verbindungen werden erhalten. wenn man eine Verbindung der Formel II
EMI1.4
worin R3 und R4 die für Formel I genannte Bedeutung haben, am 7-Aminostickstoff mit die Ciruppe 111
EMI1.5
worin R1 und R2 die für Formel I genannte Bedeutung haben, abgeladenen Mitteln acyliert. In erhaltenen Verbindungen, in denen R3 für eine durch eine Carbonsäure veresterte Hydroxylgruppe, in der Sauerstoffatome durch Schwefelatome ersetzt sein können, steht, kann diese Gruppe durch eine Nsubstituierte Carbamoylgruppe, in der Sauerstoffatome durch Schwefel ersetzt sein können, oder eine quaternäre Aminogruppe ersetzt werden.
Die erhaltenen Verbindungen mit freier Carboxylgruppe in 4-Stellung können in ihre Metall-, wie Alkali- oder Erdalkalimetallsalze, oder Salze mit Ammoniak oder organischen Basen übergeführt werden, oder es können aus erhaltenen Salzen die freien Carbonsäuren oder gegebenenfalls inneren Salze gebildet werden.
Die Acylierung wird beispielsweise mittels eines Säure halogenids, z.B. Säurechlorids, oder eines gemischten Anhydrids, z.B. eines solchen mit monoveresterter Kohlensäure oder mit Pivalinsäure oder Trichloressigsäure oder mit der freien Säure selbst in Gegenwart eines Kondensationsmittels, wie eines Carbodiimids, z.B. Dicyclohexylcarbodiimids.
vorgenommen.
Vorzugsweise verwendet man solche Ausgangsstoffe, die zu den erwähnten besonders wirksamen Endprodukten führen.
Die als Ausgangsstoffe verwendeten Cephalosporinderivate sind bekannt oder können nach an sich bekannten Verfahren hergestellt werden.
Die Verbindung der Formel II, in der R3 eine Hydroxylgruppe ist, kann vorteilhaft nach dem Verfahren des Schweizer Patentes Nr. 475 284, die Verbindung der Formel II, in der R3 eine heterocyclische Base, besonders Pyridin, ist, nach dem Verfahren der belgischen Patenten 650 444 und 650 445 erhalten werden.
Der Ersatz der Acetoxygruppe durch eine Carbamoyloxygruppe ist im belgischen Patent 654 039, der Ersatz durch eine Thiocarbamoylmercaptogruppe im belgischen Patent 637 547 beschrieben. Der Austausch der Acetoxygruppe gegen die weiteren oben genannten Substituenten kann nach dem Verfahren des britischen Patentes 912 541 und des belgischen Patentes 617 687 erfolgen.
Die neuen Verbindungen könnten als Heilmittel, z.B. in
Form pharmazeutischer Präparate. Verwendung finden. Diese enthalten die Verbindungen in Mischung mit einem für die enterale, topicale oder parenterale Applikation geeigneten pharmazeutischen organischen oder anorganischen, festen oder flüssigen Trägermaterial.
In den folgenden Beispielen sind die Temperaturen in
Celsiusgraden angegeben.
Beispiel I
Man kondensiert mit Hilfe eines Aceton-Trockeneis-Bades in einem mit Rührer versehenen 3()0 ml Sulfierkolben ca. 20 g (0,2 Mol) Phosgen. Dann werden unter Stickstoffatmosphäre und Rühren bei 10017,0 g ((1,11 Mol) festes Malonsäure dimethylester-mononatrium zugegeben und 2 Stunde bei -10" reagieren gelassen. Man liisst das überschüssige Phosgen bei
Raumtemperatur abdampfen und löst den Rückstand nach kurzem Evakuieren in 50 ml Methylenchlorid.
Bei -10 wird hierauf eine Lösung von 27.2 g (0,1 I Mol) 7-Aminocephalospo ransäure und28 ml ((),2 Mol) Triäthylamin in 100 ml
Methylenchlorid zugetropft und ' Stunde bei -10 gerührt. Das
Gemisch wird auf 380 ml 10-prozentige, wässrige Kaliumdi hydrogenphosphatlösung gerührt, wobei sich ein pH von 5.2 einstellt. Die Methylenchloridschicht wird abgetrennt und die wässrige Phase wird noch zweimal mit Methylenchlorid nachge waschen, mit konzentrierter Salzsäure auf pH 2,0 angesäuert und nach Sättigen mit Kochsalz mit Essigester extrahiert.
Trocknen dieses Auszugs mit Natriumsulfat und Eindampfen im Vakuum gibt 28, 58 g Rohprodukt. Es wird in 150 ml Methanol gelöst, mit 26 ml einer 3-normalen Lösung von a-
Aethylcapronsäure-Natriumsalz in Methanol versetzt und 3
Stunden bei ¯300 kristallisieren gelassen. Filtration gibt 2.85 g kristallines Nebenprodukt das antibakteriell wirksam ist und im
Dünnschichtchromatogramm an Silicagel folgende RrWerte zeigt: System I (n-Butanol-Eisessig-Wasser 75:7,5:21): Rf =
0,09, System II (n-Butanol-Pyridin- Eisessig-Wasser 38:24:8:30): R, = 0,49.
Aus der Mutterlauge kristallisieren beim Versetzen mit Aether 22,19 g 7- (Di- [methoxycarbo nyl]- acetamino) -cephalosporansäure-Natriumsalz der Formel
EMI2.1
Die Substanz ist nach Dünnschichtchromatogramm einheitlich; System I: Rf = 0,33, System II: Rf = 0,63.
Beispiel 2
Eine Lösung von 530 mg Malonsäuremonoäthylester (4 m Mol) und 0,28 ml Triäthylamin (2 m Mol) in 1 ml absolutem Methylenchlorid wird bei 150 mit 0,23 ml Trichloressigsäurechlorid (2 m Mol) in 1 ml absolutem Methylenchlorid versetzt und anschliessend 20 Minuten bei der gleichen Temperatur reagieren gelassen.
Dann wird eine kalte Lösung von 272 mg 7-Aminocephalosporansäure (1 m Mol) und 0,28 ml Triäthylamin (2 m Mol) in 1 ml absolutem Methylenchlorid zugegeben und 30 Minuten bei -15"gerührt.
Man rührt das Reaktionsgemisch zu 2 ml 10C, > -igem wässerigen Natriumdihydrogenphosphat-Puffer, der mit 10q igem wässerigen Dinatriumhydrogenphosphat-Puffer auf pH 6,5 eingestellt worden war, wobei der pH auf 3.S fällt.
Man stellt mit 4 n. Natronlauge auf pH 5,5 und trennt die organische Phase ab, man trocknet das Methylenchlorid über Natriumsulfat und dampft es ein. Der Eindampfrückstand enthält das Natriumsalz der Aethoxycarbonyi-acetaminocephalosporansäure der Formel
EMI3.1
das durch Umfillen aus Aceton und Kristallisation aus Essigester gereinigt wird.
Die neue Verbindung ist wie folgt charakterisiert: gut löslich in Wasser, Formamid, Methanol: schwer löslich in Benzol.
Aether: UV-Spektrum (in MeOH) #max = 203 m (# = 9000).
235 m (# = 5800) und 264 m (# = 6000).
IR-Spektrum (Nujol) 2,87: 3.03: 3,06; 3.25 (Schulter); 5,60; 5,74; 5.91; 6,20; 6.45; 7,01; 7.35; 7,45; 7,55; 7,75; 8,02; 8,21; 8,33; 8,48; 8,57; 8,95; 9,44; 9,70; 9,80; 10,02; 10,30;
10,45; 11,15; 11.62; 11,95; 12,36; 12,65; 13,06; 13,45 ; Im Dünnschichtchromatogramm auf Silicagel.
Im System n-Butanol/Pyridin/Essigsäure/ Wasser (42 Vol.
Teile: 24 Vol.Teile: 4 Vol.Teile: 30 Vol.Teile) angefärbt mit Jod-Dampf oder nach Reindel-Hoppe (Natur 188310-11 (1960)) ist der Rí-Wert = 0,32.
Im System Essigesterin-Butanol / Pyridin/Essigsäure/Was ser(42)Vol.Teile: 21 Vol.Teile: 21 Vol.Teile: 6 Vol.Teile: 10 Vo.Teile) wie oben angefärbt. ist der RrWert = 0,35.
Im System n-But.tnol/Pyridin/ Essigsäure/Wasser (34 Vol.Teile: 24 Vol.Teile: 12 Vol.Teile: 30 Vol.Teile) wie oben angefärbt, ist der RrWert = 0,52.
Beispiel 3
Eine Lösung von 4,72 g Malonsäuremonomethylester (40 m Mol) und 2,8 ml Triäthylamin (20 m Mol) in 10 ml absolutem Methylenchlorid wird bei -15 mit 2,3 ml Trichloressigsäureanhydrid (20 mMol) in 10 ml absolutem Methylenchlorid versetzt und anschliessend bei der gleichen Temperatur reagieren gelassen. Dann wird eine kalte Lösung von 2,72 g (10 m Mol) 7-Amino-cephalosporansäure (10 mMol) und 2,8 ml Triäthylamin (20 mMol) in 10 ml absolutem Methylenchlorid zugegeben und 30 Minuten hei-15 gerührt.
Man rührt das Reaktionsgemisch zu 20 ml 10 < cigem wässrigen Kaliumdihydrogenphosphatpuffer, der mit 10',tcigem wässrigem Dikaliumhydrogenphosphatpuffer auf pH = 6,5 eingestellt worden war, wobei das pH auf 2,8 fällt.
Das Methylenchlorid wird am Vakuum bei 30"abgedampft und die zurückbleibende wässrige Phase wird bei 0 zuerst mit 100 ml Essigester überschichtet. dann mit 4-n. Salzsäure auf pH = 2 gebracht. Nach Abtrennen der Phasen wird die wässrige Schicht noch 2 mal mit je 50 ml Essigester nachgewaschen und die vereinigten organischen Schichten werden nach Trocknen mit Natriumsulfat im Vakuum eingeengt.
Der ölige Eindampfrückstand wird in 20 ml Essigester gelöst und durch eine Säule (d = 34 mm, h = 120 mm) von 50 Kieselgel filtriert. Die Säule wird mit 300 ml Essigester nachgewaschen und der Essigester im Vakuum abgedampft. Die Methoxycarbonyl-acetylamino- cephalosporansäure der Formel
EMI3.2
kristallisiert aus und wird aus Methylenchlorid umkristallisiert.
U.V.-Spektrum (in Feinsprit) Ärnax 203 mit (e = 11400) und
261 mit (e = 8 300).
Im Dünnschichtchromatogramm auf Silikagel im System n Butanol-Pyridin-Eisessig-Wasser (42:24:4:30), angefärbt mit Jod-Dampf, ist der Rf-Wert = 0,24, im System Essigester-n Butanol-Pyridin-Eisessig-Wasser (42:21:21:6:10) 0,42, im System n-Butanol-Pyridin- Eisessig-Wasser (34:24:12:30) 0,46.
PATENTANSPRUCH 1
Verfahren zur Herstellung neuer Derivate der 7-Aminocephalosporansäure, dadurch gekennzeichnet, dass man Verbindungen der Formel
EMI3.3
**WARNUNG** Ende DESC Feld konnte Anfang CLMS uberlappen**.
The invention relates to the preparation of new therapeutically effective derivatives of 7-amino-cephalosporanic acid of the formula I
EMI1.1
in which R 1 is a lower alkyl and R 2 is hydrogen or a lower A] koxycarbonyl radical, and in which R 3 is a free hydroxyl group or hydroxyl group esterified by a carboxylic acid, in which ester oxygen atoms can be replaced by sulfur atoms, or an optionally N-substituted carbamoyl oxy group, in the oxygen atoms could be replaced by sulfur. or a quaternary amino group and R4 a hydroxyl group and its salts.
An esterified hydroxyl group R. in which oxygen atoms can be replaced by sulfur is derived from a carconic acid and is preferably the acetoxy group or a e.g. by lower alkyl, lower alkoxy or lower alkyl mercapto radicals. Halogen atoms or the nitro group substituted mono- or dicyclic arylcarbonyloxy- or thiocarbonyloy-. Arylcarbonyl mercapto or thiocarbonyl mercapto group, especially the benzoyl mercapto group.
Further examples of R3 are: a) a carbamoyloxy group of the formula -O-CO-NH-RD where R5 is an aliphatic, aromatic, araliphatic or heterocyclic radical, especially an unsubstituted or substituted one. preferably substituted by one or more lower alkoxy groups or halogen atoms. straight or branched lower alkyl radical, such as methyl-ethyl, but especially β-chloroethyl radical; or h) a thiocarbamoyl mercapto group of the formula
EMI1.2
wherein R; has the meaning given above and R6 is hydrogen or R5: or c) a quaternary amino group in which the quaternary nitrogen atom is e.g. Part of an aromatic ring, like one
Quinoline-.
Isoquinoline or pyrimidine ring. but in particular an unsubstituted or substituted pyridine ring e.g.
the formula
EMI1.3
wherein R7 is hydrogen or one or more lower alkyl.
Lower alkoxycarbonyl, carbainoyl or carhoxyl group or one or more halogen atoms.
The salts of the new compounds are metal salts, especially those of therapeutically applicable alkali or alkaline earth metals, such as sodium and potassium. Ammonium, calcium, or salts with organic bases, e.g. Triethylamine. N-ethylpiperidine. Dibenzylethylenediamine, procaine. The group R3 is basic. so internal salts can form.
The new compounds have a particularly good antibacterial effect. They are effective both against gram-positive and especially against gram-negative bacteria, e.g. resistant to Staphylocoecus aureus penicillin. Escherichia coli, Klebsiella pneumonie Salmonella typhosa and Bacterium proteus, as also found in Tier'ersuch, e.g. on mice, shows. You can therefore fight infections. caused by such micro-organisms. can also be used as feed additives. for the preservation of food or as a disinfectant.
Compounds in which the acyl radical in the 7-position is a Di methoxycadionyi- are particularly valuable. a Nlono-methoxycarbonyl-, a Mono-ethoxvcarbon5 I-acetyl radical and R3 an acetoxy group. an s-chloroethylcarbamoyl or an unsubstituted or, as above, approach. substituted pyndinio group.
The new connections are preserved. if you have a compound of formula II
EMI1.4
in which R3 and R4 have the meaning given for formula I, on the 7-amino nitrogen with the Ciruppe 111
EMI1.5
wherein R1 and R2 are as defined for formula I, acylated discharged agents. In compounds obtained in which R3 represents a hydroxyl group esterified by a carboxylic acid in which oxygen atoms can be replaced by sulfur atoms, this group can be replaced by an N-substituted carbamoyl group in which oxygen atoms can be replaced by sulfur, or a quaternary amino group.
The compounds obtained with a free carboxyl group in the 4-position can be converted into their metal salts, such as alkali or alkaline earth metal salts, or salts with ammonia or organic bases, or the free carboxylic acids or optionally internal salts can be formed from the salts obtained.
The acylation is carried out, for example, by means of an acid halide, e.g. Acid chloride, or a mixed anhydride, e.g. one with monoesterified carbonic acid or with pivalic acid or trichloroacetic acid or with the free acid itself in the presence of a condensing agent such as a carbodiimide, e.g. Dicyclohexylcarbodiimides.
performed.
It is preferable to use those starting materials which lead to the particularly effective end products mentioned.
The cephalosporin derivatives used as starting materials are known or can be prepared by processes known per se.
The compound of formula II in which R3 is a hydroxyl group can advantageously be prepared by the process of Swiss patent no. 475 284, the compound of formula II in which R3 is a heterocyclic base, especially pyridine, according to the process of Belgian patents 650 444 and 650 445 can be obtained.
The replacement of the acetoxy group by a carbamoyloxy group is described in Belgian patent 654 039, the replacement by a thiocarbamoyl mercapto group in Belgian patent 637 547. The acetoxy group can be exchanged for the other substituents mentioned above according to the method of British patent 912 541 and Belgian patent 617 687.
The new compounds could be used as therapeutic agents, e.g. in
Form of pharmaceutical preparations. Find use. These contain the compounds in a mixture with a pharmaceutical, organic or inorganic, solid or liquid carrier material suitable for enteral, topical or parenteral administration.
In the following examples the temperatures are in
Degrees Celsius.
Example I.
Approx. 20 g (0.2 mol) of phosgene are condensed with the aid of an acetone-dry ice bath in a 3 () 0 ml sulfonation flask equipped with a stirrer. Then under a nitrogen atmosphere and stirring at 10017.0 g ((1.11 mol) of solid dimethylester monosodium malonic acid are added and the mixture is allowed to react for 2 hours at -10 ". The excess phosgene is allowed to add
Evaporate room temperature and, after brief evacuation, dissolve the residue in 50 ml of methylene chloride.
At -10 a solution of 27.2 g (0.1 l mol) 7-Aminocephalospo ransäure und28 ml ((), 2 mol) triethylamine in 100 ml
Methylene chloride was added dropwise and the mixture was stirred at -10 hours. The
The mixture is stirred to 380 ml of 10 percent aqueous potassium dihydrogen phosphate solution, a pH of 5.2 being established. The methylene chloride layer is separated off and the aqueous phase is washed twice more with methylene chloride, acidified to pH 2.0 with concentrated hydrochloric acid and, after saturation with sodium chloride, extracted with ethyl acetate.
Drying this extract with sodium sulfate and evaporation in vacuo gives 28.58 g of crude product. It is dissolved in 150 ml of methanol, with 26 ml of a 3 normal solution of a-
Ethylcaproic acid sodium salt in methanol and 3
Allowed to crystallize for hours at ¯300. Filtration gives 2.85 g of crystalline by-product which is antibacterial and im
Thin-layer chromatogram on silica gel shows the following Rr values: System I (n-butanol-glacial acetic acid-water 75: 7.5: 21): Rf =
0.09, system II (n-butanol-pyridine-glacial acetic acid-water 38: 24: 8:30): R, = 0.49.
When ether is added to the mother liquor, 22.19 g of 7- (di- [methoxycarbonyl] acetamino) -cephalosporanic acid sodium salt of the formula crystallize out
EMI2.1
The substance is uniform according to the thin-layer chromatogram; System I: Rf = 0.33, System II: Rf = 0.63.
Example 2
A solution of 530 mg of malonic acid monoethyl ester (4 mol) and 0.28 ml of triethylamine (2 mol) in 1 ml of absolute methylene chloride is mixed with 0.23 ml of trichloroacetic acid chloride (2 mol) in 1 ml of absolute methylene chloride at 150 and then 20 Reacted minutes at the same temperature.
A cold solution of 272 mg of 7-aminocephalosporanic acid (1 mol) and 0.28 ml of triethylamine (2 mol) in 1 ml of absolute methylene chloride is then added and the mixture is stirred at -15 "for 30 minutes.
The reaction mixture is stirred into 2 ml of 10C,> aqueous sodium dihydrogen phosphate buffer, which had been adjusted to pH 6.5 with 10q. Aqueous disodium hydrogen phosphate buffer, the pH dropping to 3.S.
It is adjusted to pH 5.5 with 4N sodium hydroxide solution and the organic phase is separated off, the methylene chloride is dried over sodium sulfate and evaporated. The evaporation residue contains the sodium salt of Aethoxycarbonyi-acetaminocephalosporanic acid of the formula
EMI3.1
which is purified by refilling from acetone and crystallization from ethyl acetate.
The new compound is characterized as follows: readily soluble in water, formamide, methanol: hardly soluble in benzene.
Ether: UV spectrum (in MeOH) #max = 203 m (# = 9000).
235 m (# = 5800) and 264 m (# = 6000).
IR spectrum (Nujol) 2.87: 3.03: 3.06; 3.25 (shoulder); 5.60; 5.74; 5.91; 6.20; 6.45; 7.01; 7.35; 7.45; 7.55; 7.75; 8.02; 8.21; 8.33; 8.48; 8.57; 8.95; 9.44; 9.70; 9.80; 10.02; 10.30;
10.45; 11.15; 11.62; 11.95; 12.36; 12.65; 13.06; 13.45; In the thin layer chromatogram on silica gel.
In the n-butanol / pyridine / acetic acid / water system (42 vol.
Parts: 24 parts by volume: 4 parts by volume: 30 parts by volume) colored with iodine vapor or according to Reindel-Hoppe (Natur 188310-11 (1960)) the Rí value = 0.32.
In the system ethyl acetate-butanol / pyridine / acetic acid / water (42) parts by volume: 21 parts by volume: 21 parts by volume: 6 parts by volume: 10 parts by volume) colored as above. the Rr value = 0.35.
In the n-but.tnol / pyridine / acetic acid / water system (34 parts by volume: 24 parts by volume: 12 parts by volume: 30 parts by volume) colored as above, the Rr value = 0.52.
Example 3
A solution of 4.72 g of monomethyl malonate (40 mol) and 2.8 ml of triethylamine (20 mol) in 10 ml of absolute methylene chloride is mixed with 2.3 ml of trichloroacetic anhydride (20 mmol) in 10 ml of absolute methylene chloride at -15 then allowed to react at the same temperature. Then a cold solution of 2.72 g (10 mol) of 7-amino-cephalosporanic acid (10 mmol) and 2.8 ml of triethylamine (20 mmol) in 10 ml of absolute methylene chloride is added and the mixture is stirred for 30 minutes.
The reaction mixture is stirred into 20 ml of 10% aqueous potassium dihydrogen phosphate buffer which has been adjusted to pH 6.5 with 10% aqueous dipotassium hydrogen phosphate buffer, the pH dropping to 2.8.
The methylene chloride is evaporated off in vacuo at 30 "and the remaining aqueous phase is first covered with 100 ml of ethyl acetate at 0. Then brought to pH = 2 with 4N hydrochloric acid. After the phases have been separated off, the aqueous layer is washed twice with 50 ml of ethyl acetate are rewashed and the combined organic layers are concentrated in vacuo after drying with sodium sulfate.
The oily evaporation residue is dissolved in 20 ml of ethyl acetate and filtered through a column (d = 34 mm, h = 120 mm) of 50 silica gel. The column is washed with 300 ml of ethyl acetate and the ethyl acetate is evaporated off in vacuo. The methoxycarbonyl-acetylaminocephalosporanic acid of the formula
EMI3.2
crystallizes out and is recrystallized from methylene chloride.
U.V. spectrum (in fine spirit) Ärnax 203 with (e = 11400) and
261 with (e = 8,300).
In the thin-layer chromatogram on silica gel in the system n butanol-pyridine-glacial acetic acid-water (42: 24: 4: 30), colored with iodine vapor, the Rf value = 0.24, in the system ethyl acetate-n butanol-pyridine-glacial acetic acid -Water (42: 21: 21: 6: 10) 0.42, in the system n-butanol-pyridine-glacial acetic acid-water (34: 24: 12: 30) 0.46.
PATENT CLAIM 1
Process for the preparation of new derivatives of 7-aminocephalosporanic acid, characterized in that compounds of the formula
EMI3.3
** WARNING ** End of DESC field could overlap beginning of CLMS **.