Verfahren zur Herstellung von Penicillinderivaten
Die vorliegende Erfindung betrifft ein Verfahrenf zur Herstellung neuer synthetischer Penicillinderivate, die wertvolle antibakterielle Agenzien darstellen. Sie können als Zusätze zu tierischem Futter, als Agenzien zur Behandlung von Mastitis bei Hornvieh und als therapeutische Präparate zur Behandlung insbeson- dere durch Gram-positive Bakterien verursachte Infektionen bei Federvieh, SÏugetieren und beim Mens schen Verwendung finden.
Antibakterielle Agenzien, wie das Benzylpenicillin, haben sich als hochwirksam in der Therapie von Infektionen, welche durch Gram-positive Bakterien verursacht worden sind, erwiesen. Jedoch zeigen derartige Substanzen den schwerwiegenden Nachteil, dass sie in wässrigen Säuren instabilf sind, was sich bei oraler Verabreichung auswirkt. Ferner erweisen sie sich als unwirksam gegen ber manchen Bakterien, welche Penicillinase produzieren. Viele der erfindungsgemäss hergestellten Verbindungen weisen ausser ihrer krÏftigen antibakteriellen Wirksamkeit Wider standlsfähigkeit gegen die Zerstörung durch Säuren oder durch Pen, icilliinase auf oder sind wirksam gegen benzylpenicillinresistente Bakberienstämme.
Die erfindungsgemäss hergestellten Substanzen weisen die allgemeine Formel
EMI1.1
auf, worin n eine ganze Zahl von 1 bis 20 ist und Rl, R2 und R3 gleich oder verschieden sind und je ein Wasserstoff-, Chlor-, Brom-, Jod oder Fluoratom oder eine Trifluormethyl-, Nitro-, Amino-, niedrigere Alkyl-, niedrigere Alkylamino-, niedrigere Dialtkyl- amino-, niedrigere Alkoxy-, niedlrigere Alkanoyl amino-, Sulfamyl-, Al'lyl-, Allyloxy-, Benzyl-, Cyclopentyl-oder Cyclohexyllgruppe darstellen.
Das erfindungsgemässe Verfahren richtet sich auch auf die Herstellung nichtboxischer Salze von SÏuren der allgemeinen Formel (I). Nichttoxische Salze dieser Art sind z. B. die Salze des Natrums, Kaliums, Calciums und Aluminiums, die Ammoniumsalze, die substituierten Ammoniumsalze, z. B. Salze solcher nichttoxischer Amine, wie der Trialkylamine, einschlie¯lich TriÏthylamin, Procain, Dibenzylamin, N-Benzyl-¯-phenethylamin, l-Ephtenamin, N, N'-DibenzylÏthylendiamin, Dehydroabietylamin, N, N'-bis- Dehydroabietaiäthylendiamm und anderer Amine, wie sie bisher zur Bildung von Salzen mit Benzylpenicillin Verwendung gefunden haben.
Der im vorstehenden verwendete Ausdruck ¸niedrigere¯, z. B. in Zusammenhang mit Alkylgruppen, soll derartige geradket- tige oder verzweigte aliphatische Kohlenwasserstoffradiale umschreiben, welche 1 bis 6 Kohlenstoff- atome aufweisen, wie z. B. Methyl-, Athyl-, Propyl-, Isopropyl-, Butyl-, Isobutyl-und t-Butylradlikale. Das Analoge gilt, wo der Ausdruck niedrigers' zur Be- schreibung einer anderen Gruppe, z. B. einer niedrigen Alkoxygruppe verwendet wurde.
Das erfindungsgemässe Herstellungsverfahren ricitet sich unter anderem vorzugsweise auf Säuren der allgemeinen Formeln :
EMI2.1
worin Rj, R2 und Rs die obengenannte Bedeutung aufweisen und x Null oder eine ganze Zahl von 1 bis 5 bedeutet.
Das Herstellungsverfahren gemäss vorliegender Erfindung ist dadurch gekennzeichnet, dass 6-Amino penicillansäure oder eines ihrer Neutralsalze mit einem Acylierungsmittel der allgemeinen Formel
EMI2.2
worin Z ein bei der Acylierung primärer Aminogruppen austretender Rest ist, umgesetzt wird Als Acylierungsmittel solcher Art k¯nnen vomehmlidb Säure- halogenide, insbesondere die Säurechoride oder Säurebromide, ferner die Säureanhydridle oder die Mischanhydride mit anderen Carbonsäuren ei'nschliesslich Monoestern solcher Carbonsäuren'und insbesondere niedrigere aliphatische Ester der Kohlensäure Verwendung finden.
Als Acylierungsmitteli geeignete Säurechloride, SÏurebromide und Säureanhydride können aus den entsprechenden Säuren mit den Techniken, wie diese in der Literatur für Phenylessigsäure und Hippursäure bekannt sind, hergestellt werden. In denjenigen Fäl- len, wo diese Säuren oder Homologe davon nicht beschrieben worden sind, können sie aus dem geeignet substituierten Benzoylchlorid und der geeigneten AmihoalkansäurenachderSehotten-Baumann- Reaktion oder nach den Methoden, wie sie f r die Herstellung der Hippursäure beschrieben worden sind, hergestellt werden.
Wird das erfindungsgemϯe Verfahren unter Verwendung von Mischanhydriden durchgeführt, so k¯nnen diese hergestellt werden durch Umsetzung einer SÏure, der allgemeinen Formel
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mit einem Alkylester der Chlorkohlensäure in Gegenwart eines tertiären Kohlenwasserstoff-oder aliphati- schen Amins, wie des Triäthylamins in einem wasserfreien inerten und vorzugsweise mit Wasser mischbaren Lösungsmittel, wie p-Dioxan und gegebenenfalls in Gegenwart einer kleinen Menge reinen trockenen Acetons, wobei während ungefähr 30 Minuten in der KÏlte, z. B. bei etwa 4 C, gearbeitet wird.
Zu einer derart herges'te21ten L¯sung des Mischanhydrids kann hierauf eine abgekühlte L¯sung von 6-Amino penicillansäure und ein tertiäres Amin, z. B. TTiL äthylamin, in einem Lösungsmittel, wie z. B. Wasser, hinzugegeben werden. Die Reaktionsmenge kann an schliessendwährendungefährlStundegerührtwer- den, wobei das substituierte Ammoniumsalz des, gewünschten Produktes entsteht. Hiernach wird die Mischung mit Vorteil bei alkalischem pH-Werb mit einem mit Wasser nicht mischlbaren Lösungsmittel, wie z. B. Ather, extrahiert, um nicht umgesetzte Aus gangsprodukte zu entfernen.
Das Produkt in der wϯrigen Phase kann hiernach in die freie Säureform übergeführt werden, vorzugsweise in der Kälte unter einer Deckschicht von Äther durch Zugabe einer verd nnten Mineralsäure, z. B. 5 NH2SO4 bei einem pH Wert von 2. Hiernach kann die freie SÏure mit einem mit Wasser nicht mischbaren neutralen, organischen Lösungsmittel, wie z. B. mit Ather, extrahiert werden, wonach der Extrakt mit Wasser in der Kälte rasch gewaschen und getrocknet werden kann. Das im ätherischen Exbrakt enthaltene Reaktionsprodukt, das in Form der freien SÏure vorliegt, kann anschlie- ssend in jedes gewünschte Metall oder Aminsalz durch Behandlung mit der geeigneten Base, z. B. mit einem freien, Amin, wie Procain, oder mit einer L¯sung von Kalium-2-äthylhexanoat in trockenem n-Butanol übergeführt werden.
Derartige Salze sind normale- weise unlöslich in Lösungsmitteln wie Ather und können in reiner Form durch blosses Filtrieren abgetrennt werden.
Eine andere Arbeitsweise zur Herstellung ätheri- scher Lösungen der Säureform der erfindungsgemϯ herstellbaren Verbindung besteht in der Herstellung einer wässrigen L¯sung von 6-Aminopenicillansäufe und von Natriumbikarbonat, Zugabe des SäurecMo- rids und kräftigem Schutteln bei Zimmertemperatur, z. B. wÏhrend 20 bis 60 Minuten. Die Mischung kann anschliessend mit ¯ther extrahiert werden, um nicht umgesetzte oder hydrolysierte Ausgangsprodukte zu entfernen. Hiernach wird die Lösung zum pH-Wert 2 angesäuert und die freie Säureform des Produktes mit Ather extrahiert. Der ätherische Extrakt wird getrock- net, z.
B. mit wasserfreiem Natriumsulfat, und das Trocknungsmittel entfernt, wonach eine trockene ätherischeLösungzurückbleibt, aus welcher das Produkt sich leicht isolieren lässt, vorzugsweise in Form eines ätberunlöslicben Sallzes, wie des Kaliumsalzes.
Diese Arbeitsweise wird mit Vorteil angewandt, wenn das Säurechlorid mit einem primären Amin schneller reagiert als es dies mit Wasser tut, was sich durch einen einfachen Versuch leicht feststellen) lässt. Bei dieser Arbeitsweise kann das Säurechlorid ersetzt werden, durch äquimolekulare Mengem des entspre- chend en Säurebromids oder SäureanhydrMs.
Da einige der erfindungsgemϯ hergestellten anti biotischen Substanzen, verhältnismässig insbabile Verbindungen sind, welche leicht chemischen Änderungen unterliegen, die mit einem Verlust an antibiotischer Aktivität verbunden sind, ist es wünschbar, ihre Herstellung unter genügend milden Reaktionsbedingungen, durchzuf hren, dass ihre Zersetzung unterbleibt. Die einzuhaltenden Reaktionsbedingungen sind naturgemäss weitgehend abhängig von der Reaktions- bereitschaft der angewandten chemischen Reagen- zien.
In den meisten Fällen ist ein Kompromiss zu schliessen zwischen der Anwendung sehr milder Be dingungen, während einer längeren Reaktionsdauer oder der Verwendung kräftigerer Bedingungen während kürzerer Zeit mit der Möglichkeit der Zersetzung eines Anteils an antibiotischer Substanz.
Die f r die Herstellung von Abkömmlingen der 6-AminopenicillansÏure einzuhaltenden Temperaturen sollten im allgemeinen 30 Cnichtüberschreiten.
In manchen FÏllen ist Zimmertemperatur geeignet.
Die Einhaltung stark saurer oder alkalischer Reaktionsbedingungen beim erfindungsgemϯen Verfahren konnte vermieden werden. Es hat sich als vorteilhaft erwiesen, das Verfahren im pH-Bereich zwischen 6 und 9 durchzuführen, was s in üblicher Weise durch Verwendung eines Puffers, z. B. einer L¯sung von Natriumbikarbonat oder eines Natriumphosphatpuf- fers, erreicht werden kann. Ausser der Verwendung wässriger Medien einschliesslich filtrierter Fermentationsbr hen oder wässriger Lösungen rober 6-Aminopenicillansäure kann Gebrauch von organischen Lö sungsmitteln gemacht werden, z. B. von Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Chloroform, Aceton, Methyl-isobutyl-keton und Dioxan.
Häufig ist es sehr vorteilhaft zu einer wässrigen L¯sung von 6-Amino peniciillansäure eine Lösung des Acylierungsmittels in einem inerten, Lösungsmittel, vorzugsweise m einem inertes) Lösungsmittel, das mit Wasser mischbar ist, die mit Aceton oderDimethylformamid hinzuzugeben'.
Kräftiges Rühren ist naturgemϯ dann von Vorteil, wenn mehr ats eine Phase zugegen ist, z. B. feste und flüssige oder zwei flüssige Phasen.
Nach Durchführung der Reaktion kann das Reaktionsprodukt nach den bei Benzylpenicillin und Phens oxymethylpenicillin bekannt gewordeemen Techniken aufgearbeitet werden. So kann das Produkt mit Di ÏthylÏther oder n-Butanol bei saurem pH-Wert ex trahiertunddann durch Lyophilisation oder durch Umwandlung in ein L¯sungsmittel unliösliches Salz wie durch Neutralisation mit einer ntbutanoDischen Lö- sung von Kalium-2-Ïthylhexanoat gewonnen werden.
Das Produkb kann auch aus wässriger L¯sung als wasserunlösliches Salz eines Amins ausgefällt oder daraus direkt durch Lyophilisation vorzugsweise in Form eines Natrium-oderKaliumsalzesgewonnen! werden. Falls das Tnäfhylaminsalz gebildet wurde, kann das Produkt in die freie Säureform und hiernach in jede andere Salzform bergef hrt werden, in der Art und Weise, wie dies bei Benzylpenicillin und anderen Penicillineni bekannt ist. So führt die Behand lung einer solchen Triäthylammverbindung in Wasser mit NatriumhydToxyd zum Natriumsalz, wonach das Triäthylamin durch Extrakbion, z. B. mit Toluol, abgetrennt werden kann.
Behandlung des Natriumsalzes mit starker wässriger SÏure wandelt es in die freie Säureform um, welche ihrerseits in andere Amimsaltze, z. B. Salize des Procains durch Reaktion mit der ent- sprechenden Aminobase übergeführt werden kann.
Derart hergestellte Salze lassen sich durch Lyophilisation isolieren oder, sofern sie unlösMch sind, durch blosses Filtrieren abscheiden. Eine Arbeitsweise zur Isolierung des Produktes als kristallines Kaliumsalz bestehtimExtrahieren des Produktes aus saurer wäss- riger L¯sung, z. B. beim pH-Werb 2 mit DiÏthylÏther, Trocknen des Athers und Zugabe von wenigstens einem ¯quivalent einer L¯sung von Kalium-2-Ïthyl hexanoat in trockenem Butanol. Es entsteht das Ka liumsalz, welches ausfällt, gewöhnlich in kristalliner Form und durch Filtrieren oder Dekantieren gewon nen werden kann.
Beispiel 1
Herstellung des Kaliumsalzes der 6-(?-Benzoyl aminocapronamido) penicillansäure
0, 13 Mol = 30, 7 g M-BenzoyIaminocapronsäure werden in einer Mischung von 60 ml trockenem Aceton und 290 ml trockenem Dioxan gelösb. Zu dieser L¯sung werden unter Rühren und KüMung 18, 4 ml =
13, 2 g = 0, 13 Mol trockenes Triäthylamin hinzu- gef gt.
Die erhaltene kalte L¯sung (etwa-2 C) wird hiernach langsam mit 17, 1 ml = 0, 13 Mol = 17, 8 g Isobutylchlorformiat tropfenweise im Verlauf von 10 Minuten versetzt, wobei die Reaktionstemperatur unter 5 C wahrend der ganzen Dauer der Zugabe gehalten wird. Die erhaltene Mischung wird bei un gefähr 0¯C wÏhrend einer halben Stunde ger hrt.
Zu diesem Acyllierungsgemisch wird rasch eine Lösung von 0, 13 Mol = 28, 2 g 6-AminopenicilIansäure in 39 ml Wasser und 18, 4 ml Triäthylamin (0, 131 Mol) hinzugefügt,wobeidieTemperaturbeiungefähr5 C gehalten wird. Die erhaltene L¯sun wird in der KÏlte zwischen 0 und-8 C während ungefähr 15 Minuten kräftig gerührt, wobei sich heftig Kohlendioxyd entwickelt. Anschliessend wird während einer Periode von ungefähr 15 Minuten weiterger hrt.
Hiernach wird das Reakbionsgemisoh mit 52 ml Eiswasser, welches 9, 4 g Natriumbikarbonat enthält, verdünnt und das erhaltene Gemisch, nachdem die Gasentwicklung aufgehört hat, zweimal mit 400-ml-Partionen. kalten Äthers extrahiert, um nicht umgesetzte Ausgangsprodukte zu entfernen. Die ¯therextrakte werden verworfen. Die wässrige Schicht wird ab- getrennt, gekühlt, bersohichtet mit 600 ml kaltem Methylisobutyl-keton und auf den pH-Wert von weni- ger als 2 mit 75 ml 6n Schwefelsäure angesäuert.
Die wässrige saure Mischung, in welcher das Produkt enthalten ist, wird hiernach zweimal mit 600-ml-Por tionen, kalten Methyl-isobutyl-ketonsextrahiert. Die vereinigten Extrakte werden mit 2 Portionen von 75 ml kaltem Wasser gewaschen, über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, filtriert und mit 75 ml einer 40 % igen L¯sung von Kalium-2-äthylhexanoat (0, 134 Mol) in n-Butanol behandelt, worauf das Kaliumsalz der 6-(Benzoylaminocapronamido)-penicillansÏure ein gelbes (il bildet. Das Methyl-isobutyl-keton wird vom 51 dekantiert und das 01 hiernach mit trockenem ¯ther gewaschen, wonach der Waschäter dekantiert wird.
Das Produkt wird mit Aceton berschichtet, und nach Stehenlassen, während ungefähr 1 Stunde fäqlt es aus. Es wird abfiltriert, mit Äther gewaschen, bei Zimmertemperatur im Vakuum über Phosphor- pentoxyd getrocknet und ! als wasserlösliche feste Substanz gewonnenb welche 47, 4 g wiegt.
Sie schmilzt bei 190 bis 194¯C unter einer geringen Zersetzung und Verfärbung (gelb) bei ungefähr 160 C. Sie enthält die @ ¯-Lactam-Struktur, nachweisbar durch Infrarotanalyse und inhibiert Staph. aureus Smith bei einer Konzentration von 0, 1 mcg/ml. Die Heilungsdosis an MÏusen CD bei intramuskulärer Injektion liegt bei 3, 0 mcg/kg.
Beispiel 2
Herstellung des Kaliumsalzes der 6- (3, 4, 5
Trimethoxyhippuramido)-penicillansÏure
0, 044 Mol = 6, 7 g 3, 4, 5-TrimethoxyhippursÏure werden, in 75 ml trockenem Dioxan gel¯st. Zur Lösung werden unter Rühren und Kühlung 7, 0 ml trokkenes Triäthylamin = 0, 05 Mol hinzugegeben. Die erhaltenekalteLösungvonetwa10 Cwirdhiernach tropfenweise im Zeitraum von ungefähr 15 Minutent mit 6, 8 ml = 0, 05 Mol Isobutylchlorformiat verset, wobei die Temperatur des Reaktionsgemisches unterhalb 5 C gehalten wird. Die erhaltene Mischung wird bei ungefähr 0 Cwährendl Stunde gerührt.
Zum derart hergestellten Acylierungsgemisch wird eine Lösung von 0, 0463 Mol=10,0 g 6-Aminopenicillansäure in 35 ml Wasser und 7, 0 ml = 0, 05 Moll Triäthyl- amin rasch hinzugegeben, wobei die Temperatur bei ungefähr 5 C gehalten wird. Die erhaltene Losung wird anschQiessend während einer Periode von ungefÏhr einer Stunde Stunde der Kälte zwischen 0 und -8 C kräftig gerührt. Hierauf wird das Reaktions- gemisch mit Eiswasser verdünnt und die resultierende Mischung, nachdem die Gasentwicklung aufgehört hat, zweimal mit Ather extrahiert, um nicht umgesetz- tes Ausgangsmaterial zu entfernen.
Die ätherischen Extrakte werden verworfen. Die wässrige Schicht wird abgetrennt, gekühlt und mit 6n Schwefelsäure auf den pH-Wert 2 angesäuert. Die wässrige saure Mischung, in welcher das Verfahrensprodukt enthal- ten ist, wird zweimal mit kaltem tem MethylLisobutyl- keton extrahiert. Die vereinigten Extrakte werden mit 2 Portionen kalten Wassers gewaschen, ber wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet,filtriertundmit 24 m ! l einer 40% igent Lösung von Kalium-2-äthylhexanoat in n-Butanol behandelt.
Die L¯sung wird auf einen Drittel ihres Volumens eingeengt durch VerdampfendesMethyl-isobutyl-ketonsund hiernach mit einer Petroleumdestillat-Fraktion vom Siedebereich 60 bis 68 C (Skellysolve B), wonach das Kaliumsalz der 6- (3, 4, 5-Trimethoxyhippuramido)penicillansäure als gelbe, feste Substanz ausfällt. Es wird abfiltriert, mit ¯ther gewaschen, bei Zimmertemperatur im Vakuum ber Phosphorpentoxyd getrocknet. Es stellt ein wasserlösliches, wei¯es, kristallines Salz im Gewicht von 8, 0 g dar. Sein Schmelz- punkt liegt bei 90 bis 95 C unter Zersetzung. Es enthÏlt die-Lactam-St'ruktur,nachweisbardurchInfra- rotanalyse und inhibiert Staph. aureus Smith bei einer Konzentration von 1, 6 mcg/ml.
Beispiel 3
0, 01 Mol HippursÏure, 0, 011 Mol Triäthylamin und 0, 01 Mol Isobutylchlorformiat werden in 20 ml reinem, trockenem Dioxan und 2 ml Aceton während ungefähr 30 Minuten bei ungefähr 4 C gerührt. Zu dieser L¯sung wird eine abgek hlte L¯sung von 0, 01 Mol 6-Aminopenicillansäure und 0, 01 Mol Triäthyl- amin in 20 ml Wasser hinzugegeben und das Gemenge während ungefähr 1 Stunde in der Kälte gerührt. Nach Zugabe von 1, 0 g NH2SO4 in 30 ml kaltem Wasser wird die L¯sung zweimal mit 75-ml-Por- tionen Ather extrahiert. Die ätherischen Extrakte werden verworfen.
Die wässrige L¯sung wird in einem Eisbad abgekühlt und gerührt, mit 75 ml Ather über- schichtet und ihr pH-Wert mit 5 NH2SO4 auf 2 eingestellt. Der Ather wird abgetrennt und die wässrige L¯sung erneut mit 75 ml Ather extrahiert. Die vereinigten, Ïtherischen Extrakte, welche die 6- (Hippur amido)-pe'n. icillansäure enthalten, werden rasch über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und filtriert.
Zugabe von 6 ml trockenem n-Butanol, enthaltend 0, 373 g/ml Kalium-2-äthylhexanoat, gefolgt durch weitere Zugabe von trockenem Äther, fÏllt das Ka liumsalz des Produktes aus. Nach dem Verreiben mit Ather wird dieses Kaliumsalz im Vakuum über Phos phorpentoxyd getrocknet und stellt hiernacht ein was serlösliches Pulver dar, welches das Wachstum von Staph. aureus Smith bei einer Konzentration von 0, 001 Gew. % hemmt.
Beispiel 4
0, 01 Mol α-BenzoylaminoisovaleriansÏure, 0,001 Mol Triäthylamin und 0, 001 Mol Isobutylchlorfor- miat werden in 20 ml reinem, trockenem Dioxan und 2 ml trockenem Aceton während ungefähr 30 Minu ten bei ungefähr 4 C gerührt. Zu dieser L¯sung wird eine abgekühlte Lösung von 0, 01 Mol 6-Aminopeni cillansäure und 0, 01 Mol Triäthylamin in 20 ml Was- ser hinzugegeben und das Gemisch in der Kälte während ungefähr 1 Stunde gerührt. Nach der Zugabe von 1, 0 g NaHCO3 in 30 ml kaltem Wasser wird die L¯sung zweimal mit 75-ml-Portlionen Ather extrahiert.
Die ätherischen Extrakte werden verworfen@ Die wässrige Lösung wird abgekühlt und in einem Eisbad gerührt, hierbei übeTschichtet mit 75 ml Äther und ihr pH Wert mit 5 NH2SO4 auf 2 eingestellt. Der Äther wird abgetrennt und die wässrige L¯sung erneut mit 75 ml Ather extrahiert. Die vereinigten ätherischen Ex trakte, enthaltend die 6-(α-Benzoylaminoisovaler- amino)-penicillansäure, werden rasch ber wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Zugabe von 6 ml trockenem n-Butanol, entaltend 0, 373 g/ml Kalium-2-äthylbexanoat, gefolgt durch weitere Zu gambe von trockenem ÄtherführtzurAusfällüngdes Kaliumsalzes.
Nach dem Verreiben mit ¯ther wird dieses Kaliumsalz im Vakuum über Phosphorpent- oxyd getrocknet und stellt ein wasserlösliches Pulver dar, welches das Wachstum von Staph. aureus Smith bei einer Konzentration von 0, 001 Gew. % hemmt.
Beispiel 5
0, 01 Mol α-BenzoylaminocapronsÏure, 0, 011 Mol Triäthylamin und 0, 01 Mol Isobutylchlorformiat werden ! in 20 ml trockenem Dioxan und 2 ml trockenem Aceton während ungefähr 30 Minuten bei ungefähr 4 C gerührt. Zu dieser L¯sung wird eine abgekühlte Lösung von 0, 01 Mol 6-Aminopenicillansäure und 0, 01 Mol Triäthylamin in 20 ml Wasser hinzugegeben und das Gemenge in der KÏlte wÏhrend ungefähr 1 Stunde gerührt. Nach Zugabe von 1, 0 g NaHCO3 in 30 ml kaltem Wasser wird die L¯sung zweimal mit 75-ml-PoTtionen ¯ther extrahiert. Die Ïtherischen Extrakte werden verworfen,.
Die wässrige L¯sung wird in einem Eisbad abgekühlt, gerührt, berschichtet mit 75 ml Äther und ihr pH-Wert mit 5 NH2S04 auf 2 eingestellt. Der ¯ther wird abgetrennt und die wässrige L¯sung erneut mit 75 ml Äther extrahiert. Die vereinigten Ather- extrakte enthalten die G- ( -Benzoytlaminocapron- amido)-penicillansÏure. Sie werden rasch ber wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Zugabe von 6 ml trockenem n-Butanol, enthaltend 0, 373 g/ ml Kalium-2-Ïthylhexanoat, gefolgt durch weitere Zugabe von trockenem Äther, fällt das Kaliumsalz aus.
Nach Verreiben mit Ather wird das Kaliumsalz im Vakuum über Phosphorpentoxyd getrocknet und stellt ein wasserlösliches Pulver dar, welches das Wachstum von Staph. aureus Smith bei einer Konzen- tration von 0, 001 Gew. % hemmt.
Beispiel 6 0,01Molo!-(2,5-DicblbrbenzoyIamino)-isocapron- saure, 0, 001 Mol Triäthylamin und 0, 01 Mol Iso- butylchlorformiat werden in 20 ml trockenem reinem Dioxan und 2 ml trockenem Aceton während ungefähr 30 Minuten bei ungefähr 4 C gerührt. Zu dieser L¯sung wirdeineab- gekühlte Lösung von 0, 01 Mol 6-Aminopenicinan- sÏure und 0, 01 Mol TriÏthylamin in 20 ml Wasser hinzugegeben und das Gemisch in dar Kälte ungefähr 1 Stunde lang ger hrt. Nach Zugabe von 1, 0 g Na triumbikarbonat in 30 ml kaltem Wasser wird die L¯sung zweimal'mit 75-ml-Portionen, Äther extrahiert. Die ätherischen Extrakte werden verworfen.
Die wässrige L¯sung wird abgek hlt in einem Eisbad ger hrt, berschichtet mit 75 ml ¯ther und ihr pH- Wert auf 2 mit 5n Schwefelsäure eingestellt. Der Ather wird abgetrennt und die wässrige L¯sung erneut mit 75 ml Ather extrahiert. Die vereinigtem ätherischen Extrakte, enthaltend die 6- [a- (2, 5-Dichlorbenzoylamino) - isocapronamido] -penicillansÏure werden rasch über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und filtriert. Zugabe von 6 ml trockenem n-Butanol, enthaltend 0, 373 g/ml KaHum-2-äthyl- hexanoat, gefolgt durch weitere Zugabe von trockenem Äther, f hren zur Ausfällung des Kaliumsalzes.
Nach dem Verreiben, mit her wird dieses Kaliumsalz im Vakuum ber Phosphorpentoxyd getrocknet und, stellt ein wasserl¯sliches Pulver dar, welches das Wachstum von Staph. aureus Smith bei einer Konzentration von 0, 001 Gew. % hemmt.
Beispiel 7
Wird in der Ai-beitsweise, wie sie vorstehend in Beispiel 1 beschrieben ist, die (u-BenzoyIaminocapron- sÏure ersetzt durch 0, 13 Mol : ¯-BenzoylaminopropionsÏure, a-Benzoylaminobuttersäure, ?-BenzoylaminovalerinsÏure, (M-BenzoyIaminocaprylsäure, ?-BenzoylaminolaurinsÏure, α-BenzoylaminostearinsÏure,
3, 4, 5-TrichlorohippursÏure,
4-ÄthyIhippursäure,
4-Bromhippursäure, a-Jodhippursäure, ?-(2,5-Dihydroxybenzoylamino)-capronsÏure, ¯-(2-Benzylbenzoylamino)-propionsÏure, α
-(4-Sulfamylbenzoylamino)-buttersÏure,
2-TrifluormethylhippursÏure, ?-(4-Dimethylaminobenzoylamino)-laurinsÏure, cu-(4-ÄthyMminobenzoyMmmo)-vaIeriansäure,
2-Acetamidohippursäure, (u-(4-Fluorbenzoylammo)-capronsäure, co- (4-Nitrobenzoylamino)-stearinsäure,
4-Aminohippursäure,
5-All'yloxyhippursäure, & )-(4-AE.yIt)enzoy!amino)-capronsäu're, a- (4-Cyclopentylbenzoylamino)-propionsäure,
4-Cyclobexylhippursäùre, a-BenzoyIammopropionsäure und α
-Benzoylamino-¯-Ïthyl-¯-methylpropionsÏure, so erhält man die entsprechlendlen Verbmdüngen
6-(¯-Benzoylaminopropionamido)-penicillansÏure,
6-(a-Benzoylaminobutyramido)-penicillansäure,
6-(o-Benzoylaminovaleramido)-penicillansäure,
6-(?-Benzoylaminocaprylamido)-penicillansÏure,
6- (?-Benzoylaminolauramido)-penicillansÏure, 6-(G-Benzoylaminostearamido)penicinaiisäure,
6-(3,4,5-Trichlorhippuramido)-penicillansÏure,
6-(4-¯thylhippuramido)-penicillansÏure,
6-(4-Bromhippuramido)-penicillansÏure,
6- (2-Jodihippuramid'o)-peniciHaiisäure,
6-[?-(2,5-Dehydroxybenzoylamino) capronamido]-penicillansÏure, 6-[jss-(2-BenzyH)enzoy!fammo)-propion!amido]- penicillansÏure,
6-[α
-(4-Sulfamylbenzoylamino)-butyramido] peniciTlansäure,
6-(2-Trifluormethylhippuramido)-penicillansÏure,
6-[?-(4-Dimethylaminobenzoylamino) lauramido]-penicillansÏure, 6- [ (o- (4-Athylaminobenzoylamino)-valtramido]- penicillansäure, 6-(2-Acetamidohippuramido)-penici!lansäure,
6-[?-(4-Fluorbenzoylamino)-caproamido] penicillansÏure,
6- [cv- (4-Nit, robenzoylamino)-stearamido]- penicill'ansäure,
6-(4-Aminohippuramido)-penicillansÏure,
6-(5-Allyloxyhippuramido)-penicillansÏure,
6-[?-(4-Allylbenzoylamino)-propionamido] penicNansäure, 6-[α-(4-Cyclopentylbenzoylamino)- propionamido]-penicillansÏure,
6-(4-CycIohexy!hippuramido)-penicil!ansäure,
6-(a-Benzoylaminopropionamido)- penicillansäure und 6-(α
-Benzoylamino-¯-Ïthyl-¯-methylpropion- amido)-penicillansÏure.
Allie diese Säuren wurden in Form kristaNiner Verbin dungen isoliert und enthielten dlie ss-Lactam-Struktur, nachweisbar mit Infrarot-Analyse. Sie inhibierten Staph. aureus Smith bei Konzentrationen von 0, 001 Gewichtsprozent.
Process for the preparation of penicillin derivatives
The present invention relates to a method for the preparation of new synthetic penicillin derivatives which are valuable antibacterial agents. They can be used as additives to animal feed, as agents for the treatment of mastitis in horned cattle and as therapeutic preparations for the treatment in particular of infections caused by Gram-positive bacteria in poultry, mammals and humans.
Antibacterial agents such as benzylpenicillin have proven to be highly effective in the therapy of infections caused by Gram-positive bacteria. However, such substances have a serious disadvantage that they are unstable in aqueous acids, which is reflected in the oral administration. They also prove to be ineffective against some bacteria that produce penicillinase. In addition to their strong antibacterial activity, many of the compounds prepared according to the invention are resistant to destruction by acids or by penicillinase or are effective against bacterial strains resistant to benzylpenicillin.
The substances prepared according to the invention have the general formula
EMI1.1
where n is an integer from 1 to 20 and Rl, R2 and R3 are identical or different and each represent a hydrogen, chlorine, bromine, iodine or fluorine atom or a trifluoromethyl, nitro, amino, lower alkyl -, lower alkylamino, lower dialkylamino, lower alkoxy, lower alkanoylamino, sulfamyl, al'lyl, allyloxy, benzyl, cyclopentyl or cyclohexyl group.
The process according to the invention is also aimed at the preparation of non-boxic salts of acids of the general formula (I). Non-toxic salts of this type are e.g. B. the salts of sodium, potassium, calcium and aluminum, the ammonium salts, the substituted ammonium salts, e.g. B. Salts of such non-toxic amines, such as the trialkylamines, including triethylamine, procaine, dibenzylamine, N-benzyl-¯-phenethylamine, l-ephtenamine, N, N'-dibenzylÏthylenediamine, dehydroabietylamine, N, N'-bis-dehydroabiethylenediamine and other amines, as they have been used so far for the formation of salts with benzylpenicillin.
The expression "lower" used in the foregoing, e.g. B. in connection with alkyl groups, should describe such straight-chain or branched aliphatic hydrocarbon radicals which have 1 to 6 carbon atoms, such as. B. methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl and t-butyl radicals. The same applies where the term lower 'is used to describe another group, e.g. B. a lower alkoxy group was used.
The manufacturing process according to the invention is based, inter alia, preferably on acids of the general formulas:
EMI2.1
where Rj, R2 and Rs have the abovementioned meaning and x is zero or an integer from 1 to 5.
The production process according to the present invention is characterized in that 6-amino penicillanic acid or one of its neutral salts with an acylating agent of the general formula
EMI2.2
in which Z is a radical leaving the acylation of primary amino groups, is reacted. Acylating agents of this type can include acid halides, in particular acid chlorides or acid bromides, also acid anhydrides or mixed anhydrides with other carboxylic acids, including monoesters of such carboxylic acids and in particular find lower aliphatic esters of carbonic acid use.
Acid chlorides, acid bromides and acid anhydrides suitable as acylating agents can be prepared from the corresponding acids using the techniques known in the literature for phenylacetic acid and hippuric acid. In those cases where these acids or their homologues have not been described, they can be prepared from the appropriately substituted benzoyl chloride and the appropriate amihoalkanoic acids by the Sehotten-Baumann reaction or by the methods as described for the preparation of hippuric acid .
If the process according to the invention is carried out using mixed anhydrides, these can be prepared by reacting an acid of the general formula
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with an alkyl ester of chlorocarbonic acid in the presence of a tertiary hydrocarbon or aliphatic amine such as triethylamine in an anhydrous, inert and preferably water-miscible solvent such as p-dioxane and optionally in the presence of a small amount of pure dry acetone, with about 30 Minutes in the cold, e.g. B. at about 4 C, is worked.
A cooled solution of 6-amino penicillanic acid and a tertiary amine, for example an amine, can then be added to a solution of the mixed anhydride prepared in this way. B. TTiL ethylamine, in a solvent such as. B. water, are added. The amount of reaction can then be stirred for about an hour, the substituted ammonium salt of the desired product being formed. Thereafter, the mixture is advantageously with an alkaline pH advertising with a water-immiscible solvent, such as. B. Ather, extracted to remove unreacted from output products.
The product in the aqueous phase can then be converted into the free acid form, preferably in the cold under a cover layer of ether by adding a dilute mineral acid, e.g. B. 5 NH2SO4 at a pH value of 2. Thereafter, the free acid can be mixed with a water-immiscible, neutral, organic solvent, such as. B. with ether, after which the extract can be quickly washed with water in the cold and dried. The reaction product contained in the ethereal extract, which is in the form of the free acid, can then be converted into any desired metal or amine salt by treatment with the appropriate base, e.g. B. with a free amine, such as procaine, or with a solution of potassium 2-ethylhexanoate in dry n-butanol.
Such salts are normally insoluble in solvents such as ethers and can be separated off in their pure form by simple filtration.
Another procedure for preparing ethereal solutions of the acid form of the compound that can be prepared according to the invention consists in preparing an aqueous solution of 6-aminopenicillane and sodium bicarbonate, adding the acid moride and shaking vigorously at room temperature, e.g. B. for 20 to 60 minutes. The mixture can then be extracted with ether in order to remove unreacted or hydrolyzed starting materials. The solution is then acidified to pH 2 and the free acid form of the product is extracted with ether. The essential extract is dried, e.g.
With anhydrous sodium sulfate, and the drying agent is removed, leaving a dry ethereal solution from which the product can be easily isolated, preferably in the form of an ether-insoluble salt such as the potassium salt.
This procedure is used to advantage when the acid chloride reacts faster with a primary amine than it does with water, which can easily be determined by a simple experiment. In this procedure, the acid chloride can be replaced by an equimolecular amount of the corresponding acid bromide or acid anhydride.
Since some of the anti-biotic substances produced according to the invention are relatively unstable compounds which are easily subject to chemical changes which are associated with a loss of antibiotic activity, it is desirable to carry out their production under sufficiently mild reaction conditions that their decomposition does not occur. The reaction conditions to be observed are of course largely dependent on the readiness of the chemical reagents used to react.
In most cases a compromise has to be made between the use of very mild conditions for a longer reaction time or the use of stronger conditions for a shorter time with the possibility of decomposition of a proportion of the antibiotic substance.
The temperatures to be maintained for the production of derivatives of 6-aminopenicillanic acid should generally not exceed 30 ° C.
In some cases room temperature is suitable.
Compliance with strongly acidic or alkaline reaction conditions in the process according to the invention could be avoided. It has proven advantageous to carry out the method in the pH range between 6 and 9, which s in the usual way by using a buffer, e.g. B. a solution of sodium bicarbonate or a sodium phosphate buffer can be achieved. In addition to the use of aqueous media including filtered fermentation broths or aqueous solutions of 6-aminopenicillanic acid, organic solvents can be used, e.g. B. of dimethylformamide, dimethylacetamide, chloroform, acetone, methyl isobutyl ketone and dioxane.
It is often very advantageous to add a solution of the acylating agent in an inert solvent, preferably m an inert solvent that is miscible with water, to an aqueous solution of 6-amino penicillanic acid, that with acetone or dimethylformamide.
Vigorous stirring is of course an advantage when more than one phase is present, e.g. B. solid and liquid or two liquid phases.
After the reaction has been carried out, the reaction product can be worked up by the techniques which have become known for benzylpenicillin and phensoxymethylpenicillin. The product can be extracted with diethyl ether or n-butanol at an acidic pH value and then obtained by lyophilization or by conversion into a solvent-insoluble salt, such as by neutralization with a n-butanodic solution of potassium 2-ethylhexanoate.
The product can also be precipitated from aqueous solution as the water-insoluble salt of an amine or obtained therefrom directly by lyophilization, preferably in the form of a sodium or potassium salt! will. If the methylamine salt has been formed, the product can be converted into the free acid form and then into any other salt form in the manner known for benzylpenicillin and other penicillins. So the treatment of such a triethyl amine compound in water with sodium hydroxide leads to the sodium salt, after which the triethylamine by Extrakbion, z. B. with toluene, can be separated.
Treatment of the sodium salt with strong aqueous acid converts it into the free acid form, which in turn converts into other amine salts, e.g. B. Salize des procaine can be converted by reaction with the appropriate amino base.
Salts prepared in this way can be isolated by lyophilization or, if they are insoluble, separated by simple filtration. One way of isolating the product as a crystalline potassium salt consists of extracting the product from acidic aqueous solution, e.g. B. in pH advertising 2 with diethyl ether, drying the ether and adding at least one equivalent of a solution of potassium 2-ethyl hexanoate in dry butanol. The potassium salt is formed, which precipitates, usually in crystalline form and can be obtained by filtering or decanting.
example 1
Production of the potassium salt of 6 - (? - Benzoyl aminocapronamido) penicillanic acid
0.13 mol = 30.7 g of M-BenzoyIaminocaproäure are gelösb in a mixture of 60 ml of dry acetone and 290 ml of dry dioxane. Add 18.4 ml = to this solution while stirring and cooling
13.2 g = 0.13 mol of dry triethylamine added.
The resulting cold solution (about -2 C) is then slowly mixed with 17.1 ml = 0.13 mol = 17.8 g of isobutyl chloroformate dropwise over the course of 10 minutes, the reaction temperature being below 5 C for the entire duration of the Addition is held. The resulting mixture is stirred for half an hour at around 0¯C.
To this acylation mixture, a solution of 0.13 mol = 28.2 g of 6-aminopenicilian acid in 39 ml of water and 18.4 ml of triethylamine (0.131 mol) is quickly added, keeping the temperature at about 5 ° C. The resulting L¯sun is vigorously stirred in the cold between 0 and -8 C for about 15 minutes, during which carbon dioxide is vigorously evolved. Then continue stirring for a period of about 15 minutes.
The reaction mixture is then diluted with 52 ml of ice water which contains 9.4 g of sodium bicarbonate and the resulting mixture, after the evolution of gas has ceased, twice with 400 ml portions. cold ether extracted to remove unreacted raw materials. The ether extracts are discarded. The aqueous layer is separated off, cooled, covered with 600 ml of cold methyl isobutyl ketone and acidified to a pH of less than 2 with 75 ml of 6N sulfuric acid.
The aqueous acidic mixture in which the product is contained is then extracted twice with 600 ml portions of cold methyl isobutyl ketone. The combined extracts are washed with 2 portions of 75 ml of cold water, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and treated with 75 ml of a 40% strength solution of potassium 2-ethylhexanoate (0.134 mol) in n-butanol, whereupon the potassium salt of 6- (benzoylaminocapronamido) -penicillanic acid forms a yellow (il. The methyl isobutyl ketone is decanted from the 51 and the oil is then washed with dry ether, after which the washing agent is decanted.
The product is coated with acetone and after standing for about 1 hour it precipitates. It is filtered off, washed with ether, dried over phosphorus pentoxide in vacuo at room temperature and! obtained as a water-soluble solid substance which weighs 47.4 g.
It melts at 190 to 194¯C with slight decomposition and discoloration (yellow) at around 160 C. It contains the @ ¯-lactam structure, detectable by infrared analysis and inhibits Staph. aureus Smith at a concentration of 0.1 mcg / ml. The healing dose on MÏusen CD with intramuscular injection is 3.0 mcg / kg.
Example 2
Preparation of the potassium salt of the 6- (3, 4, 5
Trimethoxyhippuramido) penicillic acid
0.044 mol = 6.7 g of 3,4,5-trimethoxyhippuric acid are dissolved in 75 ml of dry dioxane. 7.0 ml of dry triethylamine = 0.05 mol are added to the solution with stirring and cooling. The resulting cold solution of about 10 C is then added dropwise over a period of about 15 minutes with 6.8 ml = 0.05 mol of isobutyl chloroformate, the temperature of the reaction mixture being kept below 5 C. The resulting mixture is stirred at about 0 C for 1 hour.
A solution of 0.0463 mol = 10.0 g of 6-aminopenicillanic acid in 35 ml of water and 7.0 ml = 0.05 mol of triethylamine is quickly added to the acylation mixture prepared in this way, the temperature being kept at about 5 ° C. The resulting solution is then vigorously stirred for a period of about one hour in the cold between 0 and -8 ° C. The reaction mixture is then diluted with ice water and, after the evolution of gas has ceased, the resulting mixture is extracted twice with ether in order to remove unreacted starting material.
The essential extracts are discarded. The aqueous layer is separated, cooled and acidified to pH 2 with 6N sulfuric acid. The aqueous acidic mixture in which the process product is contained is extracted twice with cold methyl isobutyl ketone. The combined extracts are washed with 2 portions of cold water, dried over anhydrous sodium sulfate, filtered and diluted with 24 ml! l treated a 40% solution of potassium 2-ethylhexanoate in n-butanol.
The solution is concentrated to a third of its volume by evaporating the methyl isobutyl ketone and then with a petroleum distillate fraction boiling from 60 to 68 C (Skellysolve B), after which the potassium salt of 6- (3, 4, 5-trimethoxyhippuramido) penicillanic acid precipitates as a yellow, solid substance. It is filtered off, washed with ether and dried over phosphorus pentoxide in vacuo at room temperature. It is a water-soluble, white, crystalline salt weighing 8.0 g. Its melting point is 90 to 95 C with decomposition. It contains the lactam structure, verifiable by infrared analysis, and inhibits staph. aureus Smith at a concentration of 1.6 mcg / ml.
Example 3
0.01 mole of hippuric acid, 0.011 mole of triethylamine and 0.01 mole of isobutyl chloroformate are stirred in 20 ml of pure, dry dioxane and 2 ml of acetone for about 30 minutes at about 4 ° C. A cooled solution of 0.01 mol of 6-aminopenicillanic acid and 0.01 mol of triethylamine in 20 ml of water is added to this solution and the mixture is stirred in the cold for about 1 hour. After adding 1.0 g of NH2SO4 in 30 ml of cold water, the solution is extracted twice with 75 ml portions of ether. The essential extracts are discarded.
The aqueous solution is cooled and stirred in an ice bath, covered with 75 ml of ether and its pH value is adjusted to 2 with 5 NH2SO4. The ether is separated off and the aqueous solution is extracted again with 75 ml of ether. The combined, essential extracts that make up the 6- (Hippur amido) -pe'n. icillanic acid are quickly dried over anhydrous sodium sulfate and filtered.
Addition of 6 ml of dry n-butanol containing 0.373 g / ml of potassium 2-ethylhexanoate, followed by further addition of dry ether, precipitates the potassium salt of the product. After trituration with ether, this potassium salt is dried in vacuo over Phos phorpentoxyd and is then a what water-soluble powder, which the growth of Staph. aureus Smith at a concentration of 0.001% by weight.
Example 4
0.01 mol of α-benzoylaminoisovaleric acid, 0.001 mol of triethylamine and 0.001 mol of isobutyl chloroformate are stirred in 20 ml of pure, dry dioxane and 2 ml of dry acetone for about 30 minutes at about 4 ° C. A cooled solution of 0.01 mol of 6-aminopenicillanic acid and 0.01 mol of triethylamine in 20 ml of water is added to this solution and the mixture is stirred in the cold for about 1 hour. After adding 1.0 g of NaHCO3 in 30 ml of cold water, the solution is extracted twice with 75 ml portions of ether.
The ethereal extracts are discarded. The aqueous solution is cooled and stirred in an ice bath, covered with 75 ml of ether and its pH adjusted to 2 with 5 NH2SO4. The ether is separated off and the aqueous solution is extracted again with 75 ml of ether. The combined ethereal extracts containing the 6 - (α-benzoylaminoisovaler-amino) -penicillanic acid are quickly dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. Addition of 6 ml of dry n-butanol containing 0.373 g / ml of potassium 2-ethylbexanoate, followed by further addition of dry ether leads to the precipitation of the potassium salt.
After triturating with ¯ther, this potassium salt is dried in vacuo over phosphorus pentoxide and is a water-soluble powder that encourages the growth of Staph. aureus Smith at a concentration of 0.001% by weight.
Example 5
0.01 moles of α-benzoylaminocaproic acid, 0.011 moles of triethylamine and 0.01 moles of isobutyl chloroformate! stirred in 20 ml of dry dioxane and 2 ml of dry acetone for about 30 minutes at about 4 ° C. A cooled solution of 0.01 mol of 6-aminopenicillanic acid and 0.01 mol of triethylamine in 20 ml of water is added to this solution and the mixture is stirred in the cold for about 1 hour. After adding 1.0 g of NaHCO3 in 30 ml of cold water, the solution is extracted twice with 75 ml of PoTionen ¯ther. The essential extracts are discarded.
The aqueous solution is cooled in an ice bath, stirred, covered with a layer of 75 ml of ether, and its pH value is adjusted to 2 with 5 NH2S04. The ether is separated off and the aqueous solution is extracted again with 75 ml of ether. The combined ether extracts contain G- (-Benzoytlaminocapro-amido) -penicillic acid. They are quickly dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. Addition of 6 ml of dry n-butanol containing 0.373 g / ml of potassium 2-ethylhexanoate, followed by further addition of dry ether, precipitates the potassium salt.
After trituration with ether, the potassium salt is dried in vacuo over phosphorus pentoxide and is a water-soluble powder which supports the growth of Staph. aureus Smith inhibits at a concentration of 0.001% by weight.
Example 6 0.01 mol! - (2,5-DicblbrbenzoyIamino) -isocaproic acid, 0.001 mol of triethylamine and 0.01 mol of isobutyl chloroformate are dissolved in 20 ml of dry pure dioxane and 2 ml of dry acetone for about 30 minutes at about 4 C stirred. A cooled solution of 0.01 mol of 6-aminopenicinanic acid and 0.01 mol of triethylamine in 20 ml of water is added to this solution and the mixture is stirred in the cold for about 1 hour. After adding 1.0 g of sodium bicarbonate in 30 ml of cold water, the solution is extracted twice with 75 ml portions of ether. The essential extracts are discarded.
The aqueous solution is cooled and stirred in an ice bath, covered with 75 ml of ether and its pH is adjusted to 2 with 5N sulfuric acid. The ether is separated off and the aqueous solution is extracted again with 75 ml of ether. The combined ethereal extracts containing the 6- [a- (2, 5-dichlorobenzoylamino) - isocapronamido] penicillic acid are quickly dried over anhydrous sodium sulfate and filtered. Addition of 6 ml of dry n-butanol containing 0.373 g / ml of potassium 2-ethyl hexanoate, followed by further addition of dry ether, leads to the precipitation of the potassium salt.
After the trituration, this potassium salt is dried in a vacuum over phosphorus pentoxide and is a water-soluble powder, which promotes the growth of Staph. aureus Smith at a concentration of 0.001% by weight.
Example 7
If, in the manner described above in Example 1, the (u-BenzoyIaminocaproic acid is replaced by 0.13 mol: ¯-Benzoylaminopropionic acid, α-Benzoylaminobutyric acid,? -Benzoylaminovaleric acid, (M-BenzoyIaminocaprylic acid,? -Benzoylaminolauric acid , α-benzoylaminostearic acid,
3, 4, 5-trichlorohippuric acid,
4-Ethyl Hippuric Acid,
4-bromohippuric acid, α-iodohippuric acid,? - (2,5-dihydroxybenzoylamino) -caproic acid, ¯- (2-benzylbenzoylamino) -propionic acid,?
- (4-sulfamylbenzoylamino) butyric acid,
2-trifluoromethylhippuric acid,? - (4-dimethylaminobenzoylamino) -lauric acid, cu- (4-ÄthyMminobenzoyMmmo) -valeric acid,
2-acetamidohippuric acid, (u- (4-fluorobenzoylammo) -caproic acid, co- (4-nitrobenzoylamino) -stearic acid,
4-aminohippuric acid,
5-all'yloxyhippuric acid, &) - (4-AE.yIt) enzoy! Amino) -caproic acid, a- (4-cyclopentylbenzoylamino) -propionic acid,
4-cyclobexylhippuric acid, α-benzoyiammopropionic acid and?
-Benzoylamino-¯-Ïthyl-¯-methylpropionic acid, you get the corresponding compound fertilizers
6- (¯-Benzoylaminopropionamido) -penicillanic acid,
6- (a-Benzoylaminobutyramido) penicillanic acid,
6- (o-Benzoylaminovaleramido) -penicillanic acid,
6 - (? - Benzoylaminocaprylamido) -penicillanic acid,
6- (? -Benzoylaminolauramido) -penicillansÏure, 6- (G-Benzoylaminostearamido) penicinaic acid,
6- (3,4,5-Trichlorhippuramido) -penicillans ,ure,
6- (4-¯thylhippuramido) -penicillic acid,
6- (4-bromohippuramido) penicillic acid,
6- (2-iodihippuramid'o) -penicihaic acid,
6 - [? - (2,5-Dehydroxybenzoylamino) capronamido] penicillic acid, 6- [jss- (2-BenzyH) enzoy! Fammo) -propion! Amido] - penicillic acid,
6 - [?
- (4-Sulfamylbenzoylamino) -butyramido] penicitlanic acid,
6- (2-trifluoromethylhippuramido) penicillic acid,
6 - [? - (4-Dimethylaminobenzoylamino) lauramido] penicillanic acid, 6- [(o- (4-Athylaminobenzoylamino) valtramido] penicillanic acid, 6- (2-acetamidohippuramido) penicillanic acid,
6 - [? - (4-fluorobenzoylamino) -caproamido] penicillic acid,
6- [cv- (4-nit, robenzoylamino) -stearamido] - penicillanic acid,
6- (4-Aminohippuramido) penicillic acid,
6- (5-allyloxyhippuramido) penicillic acid,
6 - [? - (4-Allylbenzoylamino) -propionamido] penicNanoic acid, 6 - [α- (4-Cyclopentylbenzoylamino) -propionamido] -penicillanic acid,
6- (4-CycIohexy! Hippuramido) -penicilic acid,
6- (a-Benzoylaminopropionamido) - penicillanic acid and 6 - (?
-Benzoylamino-¯-Ïthyl-¯-methylpropionamido) penicillic acid.
All these acids were isolated in the form of crystalline compounds and contained the lactam structure, which was detectable by infrared analysis. They inhibited Staph. aureus Smith at concentrations of 0.001 percent by weight.