Procédé de préparation de stéroïdes La présente invention a pour objet un procédé de préparation de stéroïdes de formule
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dans laquelle les positions 1, 2 et 6, 7 sont saturées ou non, R est un atome d'hydrogène, R' est un groupe P-hydroxy, ou R et R' forment ensemble un groupe céto, X et X' sont chacun un atome d'hy drogène, d'halogène, un groupe hydroxy ou alcoxy inférieur, au moins l'un des X étant un atome d'hy drogène, Y et Y' sont chacun un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle, Z est un atome d'hydrogène,
un atome d'halogène ou un groupe hydroxy, P et Q sont chacun un atome d'hydrogène, un radical al coyle inférieur, un radical aromatique monocyclique, un radical alcoyle inférieur substitué par un reste aromatique monocyclique, un radical hétérocyclique monocyclique, ou un radical alcoyle inférieur substi tué par un reste hétérocyclique monocyclique, ou P et Q forment ensemble un radical alcoylène.
Le procédé selon l'invention est caractérisé en ce que l'on fait réagir un stéroïde correspondant de formule
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avec un composé formeur d'acétal ou de cétal et comprenant le radical
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de préférence avec un aldéhyde ou une cétone de formule
EMI0001.0022
On effectue la réaction de préférence en traitant une suspension ou une solution du stéroïde dans l'al déhyde ou la cétone (ou dans un solvant organique lorsque l'aldéhyde ou la cétone sont solides en pré sence d'un catalyseur acide (par exemple l'acide per chlorique,
l'acide p-toluène sulfonique, l'acide chlor hydrique, etc.), après quoi on neutralise l'acide et on sépare l'acétal, le cétal ou le dérivé alcoylidèné formé.
Parmi les stéroïdes de départ appropriés, on peut mentionner les composés suivants : 16a-hydroxyhy- drocortisone, 16a-hydroxycortisone, 16a-hydroxy- prednisolone, 9a -halo -16a-hydroxyhydrocortisone (par exemple 9a-fluoro-16a-hydroxyhydrocortisone), 9a-halo-16a-hydroxycortisone, 9a-halo-16a-hydroxy- prednisolone (par exemple 9a-fluoro-16a-hydroxy- prednisolone), 9a-halo-16a-hydroxyprednisone,
12a- halo- 16a-hydroxyhydrocortisone (par exemple 12a- fluoro-16a-hydroxyhydrocortisone), 12a-halo-16a- hydroxycortisone (par exemple 12a-chloro-16a-hy- droxycortisone), 12a-halo-16a-hydroxyprednisolone, 12a-halo-16a-hydroxyprednisone, 6a-méthyl-16a-hy- droxyhydrocortisone, 6a-méthyl-16a-hydroxycorti- sone,
6a-méthyl-16a-hydroxyprednisolone, 6a-mé- thyl-16a-hydroxyprednisone, 2a-méthyl-16a-hydroxy- hydrocortisone, 2a-méthyl-16a-hydroxycortisone, 9a- halo - 6(x - méthyl - 16a - hydroxyhydrocortisone (par exemple 9a-fluoro-6a-méthyl-16a-hydroxyhydrocorti- sone),
9a-halo-6a-méthyl-16a-hydroxyprednisolone par exemple 9a-fluoro-6a-méthyl-16a-hydroxypredni- solone), 16ca-hydroxy-6-déhydroprednisolone, 9a- halo-16a-hydroxy-6-déhydroprednisolone, 11(3,16a, 17a-trihydroxyprogestérone, 11-céto-16a,17a-dihy- droxyprogestérone, 11(3,16a,17a-trihydroxy-1-déhy- droprogestérone, 11-céto-16a,17a-dihydroxy-1-déhy- droprogestérone,
9a-halo-11(3,16a,17a-trihydroxypro- gestérone (par exemple 9a-fluoro-11(3,16a,17a-tri- hydroxyprogestérone), 9a -halo -11(3,16a,17a - trihy- droxy-1-déhydroprogestérone (par exemple 9a-fluoro- 11(3,16a,17a-trihydroxy-1-déhydroprogestérone, 12a- halo-11(3,16a,17a-trihydroxyprogestérone (par exem ple 12a-fluoro-110,16a,17a-trihydroxyprogestérone), 12a-halo-11(3,16a,
17a-trihydroxy-1-déhydroprogesté- rone (par exemple 12a-fluoro-11(3,16a,17(x-trihy- droxy-1-déhydroprogestérone), 21-halo-11(3,16a,17a- trihydroxyprogestérone (par exemple 21-fluoro-11(3, 16a,17a-trihydroxyprogestérone), 21-halo-11(3,16a, 17a-trihydroxy-1-déhydroprogestérone, 9a,21-dihalo- 11(0,16a,17a-trihydroxyprogestérone (par exemple 9a,21-ditluoro-1 1(3,16a,17(x-trihydroxyprogestérone),
et 9a,21-dihalo-6a-méthyl-11(3,16a,17a-trihydroxy-1- déhydroprogestérone.
Les stéroïdes de départ préférés sont ceux dans lesquels la position 1, 2 est saturée ou à double liaison, R est un atome d'hydrogène, R' est un groupe P-hydroxy ou R et R' forment ensemble un groupe céto, X et X' sont chacun un atome d'hydrogène, de chlore ou de fluor, au moins l'un des X étant un atome d'hydrogène, Y et Y' sont des atomes d'hy drogène, et Z' est un atome d'hydrogène ou un groupe hydroxy.
Au cas où le stéroïde de départ est un composé nouveau, il peut être préparé à partir du dérivé 16-désoxy correspondant, en soumettant ce dernier à l'action oxygénante d'un micro-organisme tel que <I>Streptomyces</I> roseochromogenus, conformément au procédé décrit dans le brevet des U.S.A. No 285541<B>0</B>.
Les aldéhydes et cétones de départ appropriés comprennent des aldéhydes tels que le formaldéhyde (le paraldéhyde), le trioxyméthylène, le propanal et l'hexanal, des di(alcoyle inférieur) cétones, dont l'acé tone, la diéthyle cétone, la dibutyle cétone, la méthyl- éthyle cétone, et la méthylisobutyle cétone, et des cycloalcanones telles que la cyclopentanone,
la cyclo- hexanone, la subérone et la cyclodécanone, des aldé hydes aromatiques monocycliques tels que le benzal- déhyde, des halobenzaldéhydes (par exemple le p- chlorobenzaldéhyde), des (alcoxy inférieur) benzal- déhydes (par exemple l'o-anisaldéhyde), des di(alcoxy inférieur)
benzaldéhydes (par exemple le vératral- déhyde), des hydroxybenzaldéhydes (par exemple l'aldéhyde salicylique), des dihydroxybenzaldéhydes (par exemple le résorcylaldéhyde), des benzaldéhydes substitués par un reste alcoyle inférieur (par exemple le m-tolualdéhyde et le p-éthylbenzaldéhyde), des di(alcoyle inférieur) benzaldéhydes (par exemple l'o,p-diméthylbenzaldéhyde),
des nitrobenzaldébydes, des acylamidobenzaldéhydes (par exemple le N-acétyl- anthranilaldéhyde), et des cyanobenzaldéhydes ;
des alcanals inférieurs aromatiques monocycliques, tels que le phénylacétaldéhyde, l'a-phénylpropionaldéhyde, le P-phénylpropionaldéhyde, le y-phénylbutyraldéhyde, et leurs dérivés substitués dans le noyau aromatique par un ou plusieurs atomes d'halogènes, restes alcoxy inférieur, hydroxy-alcoyle inférieur, nitro, acylamido et cyano ;
des aldéhydes hétérocycliques monocycli ques, tels que les picolinaldéhyde, le furfural, les thiophènes carbonals, et leurs dérivés obtenus par substitution d'un ou plusieurs atomes d'halogène, radicaux alcoxy inférieurs, hydroxy, alcoyle inférieur, nitro et cyano ; et les alcanals inférieurs hétérocycli ques monocycliques ;
les cétones aromatiques mono cycliques, telles que l'acétophénone, la propiophé- none, la butyrophénone, la valérophénone, l'isocapro- phénone, des halophényl-alcoyle inférieur cétones (par exemple la p-chloroacétophénone), des (alcoxy inférieur) phényl-alcoyle inférieur cétones (par exem ple la p-anisylméthylcétone), des di(alcoxy inférieur)
phényl-alcoyle inférieur cétones, des hydroxyphényl- alcoyle inférieur cétones, des dihydroxyphényl-alcoyle inférieur cétones (par exemple la resacétophénone), des (alcoyle inférieur) phényl-alcoyle inférieur céto nes (par exemple la méthyl-p-toluyle cétone), des di-alcoyle inférieur) phényl-alcoyle inférieur cétones (par exemple l'o,p-xylyl-méthyle cétone),
des nitro- phényl-alcoyle inférieur cétones (par exemple la p- nitroacétophénone), des acylamidophényl-alcoyle infé rieur cétones (par exemple les acétylanilines), et des cyanophényl-alcoyle inférieur cétones ; la benzophé- none et ses dérivés mono- et di-substitués par des radicaux halo, alcoxy inférieur, hydroxy, alcoyle infé rieur, nitro, acylamido et cyano ;
des alcanones infé rieures aromatiques monocycliques, telles que la 1-phényl-3-butanone et la 1-phényl-4-pentanone, et leurs dérivés substitués dans le noyau aromatique ; des cétones hétérocycliques monocycliques, telles que le 2-acétylfuranne, le 2-benzoylfuranne et leRTI ID="0002.0212" WI="13" HE="4" LX="1825" LY="2463"> 2-acétyl- thiophène ; et des alcanones. inférieures hétérocycli- ques monocycliques.
Si l'on désire un 21-ester, le 21-hydroxy-stéroïde correspondant peut être acylé de la manière habi tuelle. Ainsi, pour préparer les dérivés 21-acyloxy préférés, dans lesquels le radical acyle est celui d'un acide carboxylique hydrocarboné de moins de 10 atomes de carbone, on peut utiliser comme réactif soit l'halogénure, soit l'anhydride de:
un acide alca- noïque inférieur (par exemple les acides acétique, propionique et butyrique tertiaire), un acide aryl- carboxylique monocyclique (par exemple les acides benzoïque et toluique), un acide arylalcanoïque infé rieur monocyclique (par exemple les acides phéna- cétique et P-phénylpropionique), un acide alcénoïque inférieur, un acide cycloalcane carboxylique,
ou un acide cycloalcène carboxylique.
Tous les composés obtenus par mise en oeuvre du procédé selon l'invention sont des substances phy siologiquement actives, douées d'activité glycocorti- coïde et antiinflammatoire, et peuvent donc être uti lisés en lieu et place de glycocorticoïdes connus, comme l'hydrocortisone et la cortisone, dans le trai tement de l'arthrite rhumatoïde. A cet effet, on peut les administrer de la même manière que l'hydrocor tisone, par exemple, en ajustant les doses en fonction de l'activité relative du stéroïde particulier.
Dans les exemples ci-dessous, toutes les tempé ratures sont données en degrés centigrades. <I>Exemple 1</I> 16a-17a-isopropylidène triamcinolone (16a,17a-isopropylidène-9(i.fluoro-Al:4 pregnadiène-11p,16a,17a,21-tétrol- 3,20-dione) On ajoute 0,05 ml d'acide perchlorique à 72% à une suspension de 500 mg de triamcinolone dans 75 ml d'acétone et on agite le mélange à température ordinaire pendant 3 heures. Pendant ce temps, les cristaux se dissolvent progressivement.
On neutralise la solution limpide avec du bicarbonate dilué et on chasse l'acétone sous vide. On filtre la suspension cristalline résultante et on lave les cristaux à l'eau. La substance séchée (environ 523 mg) fond à environ 275-278.
Une recristallisation dans de l'alcool à 95 % donne l'acétonide pur de propriétés suivantes P.F. environ 288-290o ; [a]D -I-1090 (c = 0,75 dans CHC13) ; @mvY. 237,5 @ (E = 16,000) ; INmuiol 2,94 ; 5,83 ; 5,99 ; 6,17 ; 6,21 Analyse Calculé d'après C24H3lO6F (434,49) C=66,34; H=7,19.
Trouvé: C = 65,95 ; H = 7,43.
Ce composé possède environ 20 fois l'activité de l'acétate de cortisone dans l'épreuve du glycogène hépatique chez le rat et environ 30 fois l'activité du cortisol dans l'épreuve antiinflammatoire du tampon de coton. <I>Exemple 2</I> A une suspension de 500 mg de triamcinolone dans 75 ml d'acétone, on ajoute 0,05 ml d'acide chlor hydrique concentré et on agite le mélange à tempéra ture ordinaire pendant 6 heures.
On le traite ensuite comme décrit à l'exemple 1 et on obtient l'acétonide de triamcinolone pur, fondant à environ 283-2850. <I>Exemple 3</I> On agite une suspension contenant 100 mg de triamcinolone et 50 mg d'acide p-toluène sulfonique dans 15 ml d'acétone, pendant 21 heures à tempéra ture ordinaire. On traite la solution limpide de la ma nière décrite dans l'exemple 1 et on obtient l'acéto- vide pur, de mêmes propriétés.
Le 21-acétate de 16a,17a-isopropylidène triamci- nolone peut être préparé de la manière suivante On laisse reposer à température ordinaire pendant 18 heures une solution de 50 mg d'acétonide de tri- amcinolone dans 1 ml de pyridine et 1 ml d'anhy dride acétique.
Après avoir chassé les réactifs sous vide, on obtient un résidu cristallin qui, après recris- tallisation dans un mélange acétone-hexane, donne l'acétate pur de propriétés suivantes : P.F. environ 2660 ; [ ]23 -I- 920 (c = 0,59 dans CHC13) ; lmâX. 238 @. (E = 16,000) @Nu,ol 3,01 ; 5,71 ; 5,79 ; 6,01- Max.
6,04 ; 6,21-6,24 #t. Analyse Calculé d'après C2oH33o7F (476,52) C = 65,52 ; H = 6,98. Trouvé : C = 65,49 ; H = 6,81. <I>Exemple 4</I> 16a,17a-(2'-butylidène) triamcinolone A une suspension de 100 mg de triamcinolone dans 15 ml de méthyléthyle cétone, on ajoute 0,
05 ml d'acide perchlorique à 72 % et on agite le mélange à température ordinaire pendant 2 heures. On neutra lise la solution résultante avec une solution de bicar bonate de sodium et, après addition d'eau, on évapore la méthyléthyle cétone sous vide. On filtre les cristaux résultants, on les lave à l'eau et on sèche sous vide.
Une recristallisation dans un mélange acétone-hexane donne le dérivé isobutylidénique pur de propriétés sui vantes : P.F. environ 255-260o ; [(x]23 -I- 920 (c = 0,39 dans CHC13) ; it.m@j l 2,96 ; 5,85 ; 6,04 ; 6,20 t@. Analyse Calculé d'après C25H330sF (448,52): C = 66,94; H = 7,42. Trouvé<B>:</B> C = 67,01 ; H = 7,41.
<I>Exemple 5</I> 16a,17a-(4'-méthyl-2'-pentylidène) triamcinolone A une suspension de 100 mg de triamcinolone dans 15 ml de méthylisobutyle cétone, on ajoute 0,05 ml d'acide perchlorique à 72 0/0. On agite le mé lange à température ordinaire pendant 6 heures et on extrait la solution résultante avec de la solution diluée de bicarbonate de sodium, on lave à l'eau, on sèche la phase organique sur du sulfate de sodium et on éva pore le solvant sous vide.
Une recristallisation des cris taux obtenus dans de l'acétone-hexane donne le dérivé isohexylidénique pur de propriétés suivantes : P.F. en viron 246-2500; [a]D T 81,50 (c = 0,40 dans CHC13) ; @Nuj0l 290 ; 5,83 ; 6,02 ; 6,20 @,.
myx. Analyse Calculé d'après C,H370oF (476,56) C = 68,04 ; H = 7,83. Trouvé: C =<B>68,52;</B> H = 7,93. <I>Exemple 6</I> 16a,17a-cyclohexylidène triamcinolone Une suspension de 200 mg de triamcinolone dans 15 ml de cyclohexanone redistillée est traitée pendant 2 heures comme décrit dans l'exemple 5.
Le dérivé cyclohexylidénique résultant a les propriétés suivantes, après recristallisation dans de l'acétone-hexane : P.F. (après séchage à 110o sous vide) 278-2810 ; [a]D -i- 900 (c = 1,01 dans CHC13) ; I,uol 2,87 ; 3,02 ;
5,85 ; 6,02 ; 6,19 ; 6,24 ; 11,20 <I>Exemple 7</I> 16a,17a-(3'-pentylidène) triamcinolone Une suspension de 200 mg de triamcinolone dans 30 ml de diéthyle cétone est traitée pendant 4 heures comme décrit à l'exemple 5.
Le dérivé isopentylidéni- que résultant a les propriétés suivantes : P.F. environ 265-286- ; [a]D -f- 910 (c = 0,69 dans CHC13) ; I.m#iol 3,02 ; 5,84 ; 6,01 ; 6,l8 ; 6,24 ;
11,18 <I>Exemple 8</I> 16a,17a-éthylidène triamcinolone A une suspension de 200 mg de triamcinolone dans 15 ml de paraldéhyde fraîchement distillé, on ajoute 0,05 ml d'acide perchlorique à 72 Vo et on agite le mélange pendant 3 1/s heures à température ordi naire. On extrait la solution résultante avec du bicar bonate dilué et de l'eau, on sèche et on chasse sous vide le paraldéhyde en excès.
Le produit résiduel est la 16,17-éthylidène_tdamcinolone.
Par substitution de la 9a-fluoro-01,4-pregnadiène- 16a,17a,21-triol-3,11,20 trione à la triamcinolone dans les préparations des exemples 1 à 8, on obtient les dérivés 11-céto correspondants.
<I>Exemple 9</I> 16a,17a-isopropylidène 9a-fluoro-A4 pregnène-11p,16a,17ca,21-tétrol-3,20- dione On agite à température ordinaire pendant 18 heu res une suspension de 200 mg de 9a-fluoro-A4-pre- gnène-11a,16a,17a,21-tétrol-3,20 dione dans- 30 ml d'acétone, avec 100 mg d'acide p-toluène sulfonique monohydraté. On neutralise la solution limpide avec de la solution de bicarbonate de sodium et on évapore l'acétone sous vide.
On filtre les cristaux résultants et on les sèche sous vide. Une recristallisation dans de l'acétone-hexane donne le dérivé isopropylidénique pur de propriétés suivantes : P.F. environ 270-2730 ; [a]23 -I- 137o (c = 0,45 dans CHCl3) ; #m@# l 2,90 ; 5,78 ; 5,82 ; 6,01 ; 6,15 Analyse Calculé d'après Cz4H330oF (436,50) C = 66,03 ; H = 7,62.
Trouvé<B>:</B> C = 66,03 ; H = 7,92. - Par réaction de la 9a-fluoro-A4 pregnène-16a,17a, 21-trio1,3,11,20-trione avec de l'acétone, on obtient le dérivé 11-céto correspondant.
<I>Exemple 10</I> 16a,17a-cyclohexylidène 16a- hydroxyhydrocortisone A une suspension de 100 mg de 16a-hydroxyhy- drocortisone dans 15 ml de cyclohexane, on ajoute 0,05 ml d'acide perchlorique à 72 0/0. On traite le mélange comme décrit à l'exemple 5 et on obtient le dérivé cyclohexylidénique de la 16a-hydroxyhydro- cortisone.
Par substitution de la 16(x-hydroxycortisone à la 16a-hydroxyhydrocortisone dans la préparation de l'exemple 10, on obtient le dérivé 16a,17a-cyclohexyl- idénique de la 16a-hydroxycortisone.
<I>Exemple 11</I> 16a,17a-isopropylidène 16a-hydroxy- prednisolone <I>a) Préparation de la</I> 16a-hydroxyprednisolone On laisse fermenter de la prednisolone avec <I>Streptomyces</I> roseochromogenus (Waksman No 3689) en procédant comme décrit dans l'exemple 11 du brevet des U.S.A.
No 2855410, en remplaçant la progestérone par de la pred- nisolone (01,4-pregnadiène-11(3,17(x,21-triol- 3,20-dione). On extrait du bouillon filtré la 16a-hydroxyprednisolone résultante au moyen de méthylisobutyle cétone et on la sépare de ce solvant par concentration et filtration du pro duit cristallin résultant.
<I>b) Préparation de la</I> 16a,17a-isopropylidène 16a-hy- droxyprednisolone Par traitement de la 16a-hydroxyprednisolone avec de l'acétone en présence d'acide perchlorique conformément à la méthode décrite dans l'exemple 1, on obtient la 16a,17a-isopropyl- idène 16a-hydroxyprednisolone.
<I>Exemple 12</I> 16a,17a-(3'-pentylidène) 12a-chloro-16a- hydroxycortisone L'hydroxylation microbiologique de la 12a-chloro- cortisone au moyen de<I>Streptomyces</I> roseochromo- genus (Waksman No 3689), comme décrit à l'exemple 11 du brevet des U.S.A.
mentionné, donne la 16a-hy- droxy-12a-chlorocortisone. Le traitement de ce com posé avec de la diéthyle cétone, comme décrit dans l'exemple 7, fournit le dérivé 3' pentylidénique de la 16a-hydroxy-12a-chlorocortisone.
<I>Exemple 13</I> 16a,17a-isopropylidène 16a-hydroxy-12a- fluorohydrocortisone L'hydroxylation microbiologique de la 12a-fluoro- hydrocortisone au moyen de<I>Streptomyces roseochro-</I> mogenus (Waksman No 3689), comme décrit à l'exem ple 11 du brevet des U.S.A.
mentionné, donne la 16a- hydroxy-12a-fluorohydrocortisone. Le traitement de ce composé avec de l'acétone en présence d'acide per chlorique comme décrit à l'exemple 1 donne le dérivé 16a,17a-isopropylidénique.
<I>Exemple 14</I> 16 ,17 -isopropylidène 12a-fluoro-16a- hydroxyprednisolone L'hydroxylation microbiologique de la 12a-hydro- oxyprednisolone au moyen de<I>Streptomyces</I> roseochro- mogenus (Waksman No 3689), comme décrit à l'exem ple 11 du brevet des U.S.A.
mentionné, donne la 12a- fluoro-16a-hydroxyprednisolone. Par traitement de ce composé avec de l'acétone en présence d'acide per chlorique, comme décrit à l'exemple 1, on obtient le dérivé 16a,17a-isopropylidénique.
<I>Exemple 15</I> 16a,17a-isopropylidène 12(x-fluoro-A4- pregnène-11[3,16a,17a-triol-3,20-dione <I>a) Préparation de la</I> 12a-fluoro-11[3,16a-dihydroxy- progestérone L'hydroxylation microbiologique de la 12a-fluoro- 11 P-hydroxyprogestérone au moyen de<I>Strepto-</I> <I>myces</I> roseochromogenus (Waksman No 3689) comme décrit à l'exemple 11 du brevet des U.S.A.
mentionné, donne la 12a-fluoro-11ri, 16a-dihydroxyprogestérone, de propriétés sui vantes<B>:</B> P.F. environ 218-219 ; [a] D -f- 1640 (c = 0,50 dans CHC13) ; lmâY. 240 @. (a = 16,000) ; @Nu\ol 2,98 ; 5,86 ; 6,03 ; 6,20 @,. Analyse Calculé d'après Cz1H2304F (364,44) ; C = 69,21 ; H = 8,02. Trouvé<B>:</B> C = 68,97 ; H = 7,85.
<I>b) Préparation de la</I> 12a-fluoro-04,16-pregnadiène- 11(3-ol-3,20-dione On fait bouillir à reflux pendant 2 heures une sus pension de 400 mg de 12a-fluoro-11(3,16u-di- hydroxyprogestérone et 1,2 g de tert-butylate d'aluminium dans 120 ml de toluène anhydre.
On lave le mélange réactionnel refroidi avec de l'acide chlorhydrique dilué, de l'eau, du bi carbonate, puis à nouveau avec de l'eau, jus qu'à neutralité. On sèche la phase organique sur du sulfate de sodium et on chasse le solvant sous vide.
La masse cristalline résiduelle donne, après recristallisation dans de l'acé tone-hexane, la 12a-fluoro-D4,1c-pregnadiène- 11 p-ol-3,20-dione pure de propriétés suivan tes: P.F. environ 215-217 ; [ ]D -I- <B>2090</B> (c = 0,56 dans CHC13) ; l.aic#. 238 tl (a = 24,700) ; Iyulol Max. 2,94 ;
5,94 ; 6,05 ; 6,16 ; 6,30 u. Analyse Calculé d'après C211-12703F (346,43) C=72,80; H=7,86. Trouvé<B>:</B> C =. 72,56 ; H = 7,80. <I>c) Préparation de la</I> 12a-f luoro-A4-pregnène-11(3, 16a,17(x-triol-3,20-dione A une solution de 77 mg du diène obtenu comme décrit dans la partie b) et 0,1 ml de pyridine dans 5 ml de benzène, on ajoute 65 mg de tétroxyde d'osmium.
On laisse reposer le mé lange dans l'obscurité pendant 18 heures, du rant lesquelles un produit cristallin brun préci pite. Pour décomposer l'ester osmique, on ajoute au mélange 7 ml d'eau, 4,6 ml de mé thanol, 700 mg de sulfite de sodium et 700 mg de bicarbonate de potassium et on agite la sus pension résultante pendant 4 heures à tempé rature ordinaire.
Après dilution avec 20 ml de chloroforme, on filtre le mélange à travers une matière à base de silice, par exemple de la Célite , et on lave le précipité à fond avec du chloroforme. On sépare les couches, on lave la phase chloroformique avec de l'eau, on sèche sur du sulfate de sodium et on évapore à sec sous vide.
On recristallise le résidu cris- tallin. dans de l'acétone-hexane, ce qui laisse le triol pur de propriétés suivantes : P.F. environ 220-222 ; [(1]2 3+1020 (c=0,38 dans CHC13) ; ,ale\. 240 #, (a=16,200) ; ? mu1Xl 2,90 ; 5,83 6,02 ; 6,19 @@.
Analyse Calculé d'après C211-12905F (380,44) C = 66,29 ; H = 7,68.
Trouvé: C = 66,28 ; H = 7,67.
<I>d) Préparation de la</I> 16a,17-isopropylidène-12a- f luoro-A4-pregnène-Il (3,16a,17a-triol-3,20-dione On laisse reposer à température ordinaire pendant 18 heures une solution de 30 mg de 12a- fluoro -A4-pregnène-11(3,16a,17a-triol-3,20-di- one et 0,05 ml d'acide chlorhydrique concentré dans 10 ml d'acétone.
On traite le mélange résultant de la manière décrite dans l'exemple 1, et on obtient l'acétonide qui, après recristal- lisation dans de l'alcool à 95 I/o, présente les propriétés suivantes : P.F. environ 228-230o ; [a]D -f- 138o (c = 0,40 dans CHC13) ; I,naiol 3,01;5,83;6,02;6,17t1.
En procédant à la même série de réactions sur la 9a-fluoro-11(3-hydroxyprogestérone, on peut préparer le dérivé 16a,17a-isopropylidé- nique de la 9a-fluoro-A4-pregnène-11[3,16a, 17a-triol-3,20-dione.
<I>Exemple 16</I> 16a,17a-isopropylidène-6a-méthyl-16a- hydroxyprednisolone L'hydroxylation microbiologique de la 6a-méthyl- prednisolone au moyen de<I>Streptomyces roseochromo-</I> genus (Waksman No 3689), comme décrit à l'exemple 11 du brevet des U.S.A.
mentionné, donne le dérivé 16a-hydroxy. Par réaction de ce dernier avec de l'acé tone, comme décrit à l'exemple 1, on obtient le dérivé isopropylidénique de la 6a-méthyl-16a-hydroxypred- nisolone.
<I>Exemple 17</I> 16a,17a-isopropylidène 9a-fluoro-6a-méthyl- 16a-hydroxyprednisolone Le traitement de la 9a-fluoro-6a-méthyl-16a-hy- droxyprednisolone avec de l'acétone et de l'acide per chlorique, comme décrit à l'exemple 1, donne le dérivé isopropylidénique de ce composé.
On peut préparer de la même manière le dérivé isopropylidénique de la 9a-fluoro-6a-méthylhydrocor- tisone.
<I>Exemple 18</I> Dérivé de l'acétophénone et de la triamcinolone A une suspension de 4 g de triamcinolone dans 100 ml d'acétophénone- fraîchement redistillée, on ajoute 1,0 ml d'acide perchlorique à 72 % et on agite le mélange à température ordinaire pendant 2 heures,
durant lesquelles toute la triamcinolone se dissout. On neutralise la solution par addition de 8 ml de NaOH 1,1 N et d'une quantité suffisante de bicarbonate aqueux pour la rendre neutre. On ajoute ensuite de l'eau et du chloroforme et on concentre la couche chloroforme-acétophénone sous grand vide.
On recris- tallise le résidu dans de l'acétone-hexane et on lave bien les cristaux à l'hexane pour enlever l'acétophé- none qui y adhère.
Un échantillon analytique pré sente les propriétés suivantes : P.F. environ 281-2830 (déc.) ; [a]D -I- 230 (c = 0,98 dans CHC13) ; @ma;01 2,91 ; 5,80 ; 6,02 ; 6,16 ; 6,23 ; 13,06 ; 14,29 Analyse Calculé d'après CZ9I-13506F (498,57) C = 69,93 ; H = 7,07.
Trouvé<B>:</B> C = 69,91 ; H = 7,04. <I>Exemple 19</I> Dérivé de la p-nitroacétophénone et de la triamcinolone A une suspension de 200 mg de triamcinolone dans un mélange de 7 ml de dioxane et 4 g de p-nitro- acétophénone, on ajoute 0,05 ml d'acide perchlorique à 72 % et on agite le mélange à température ordinaire pendant 3:1/2 heures.
On neutralise ensuite le mélange avec de la solution de bicarbonate de sodium diluée et on chasse le dioxane et l'excès de p-nitroacétophénone par entraînement à la vapeur d'eau sous vide. On extrait la suspension aqueuse résiduelle avec du chlo roforme, on lave la couche chloroformique à l'eau, on sèche sur du sulfate de sodium et on chasse le solvant sous vide. On purifie le dérivé qui reste comme résidu par recristallisation dans de l'acétone-hexâne.
Le dérivé acétophénonique du 21-acétate de triam- cinolone peut être préparé de la manière suivante On laisse reposer à température ordinaire pendant 18 heures une solution de 50 mg du dérivé acétophé- nonique de la triamcinolone dans 1 ml de pyridine et 1 ml d'anhydride acétique. L'élimination des réactifs sous vide laisse un résidu cristallin qui,
après recristal- lisation dans de l'acétone-hexane, donne l'acétate pur.
Le remplacement de la triamcinolone par la 9a- fluoro-Al,4-pregnadiène-16a,17a,21- triol - 3,11,20 -tri- one dans les préparations des exemples 18 à 20, donne les dérivés 11-céto correspondants.
<I>Exemple 20</I> Dérivé acétophénonique de la 9a-fluoro- A4-pregnène-11(3,16a,17a,21-tétrol-3,20-dione On agite à température ordinaire une suspension de 200 mg de 9a-fluoro-A4-pregnène-11(3,16a,17a,21- tétrol-3,20-dione dans 30 ml d'acétophénone avec 100 mg d'acide p-toluène sulfonique monohydraté, pendant 18 heures. On neutralise la solution limpide avec de la solution de bicarbonate de sodium et on évapore l'acétone sous vide.
On filtre les cristaux ré sultants et on les sèche sous vide. Une recristallisation dans de l'acétone-hexane donne le dérivé acétophéno- nique pur.
La réaction de la 9a-fluoro-A4-pregnène-16a,17a, 21-triol-3,11,20-trione avec de l'acétophénone donne le dérivé 11-céto correspondant.
<I>Exemple 21</I> Dérivé de la 16a-hydroxyhydrocortisone et du benzaldéhyde A une suspension de 100 mg de 16a-hydroxyhy- drocortisone dans 15 ml de benzaldéhyde, on ajoute 0,05 ml d'acide perchlorique à 72 %. On traite le mélange comme décrit dans l'exemple 18 et on obtient le dérivé de la 16a-hydroxyhydrocortisone et du benz- aldéhyde.
Par substitution de la 16a-hydroxycortisone à la 16(i-hydroxyhydrocortisone dans la préparation de l'exemple 21, on obtient le dérivé de la 16a-hydroxy- cortisone et du benzaldéhyde.
<I>Exemple 22</I> Dérivé de la 16a-hydroxyprednisolone et du furfural <I>a) Préparation de la I</I> da-hydroxyprednisolone On fait fermenter de la prednisolone avec<I>Strepto-</I> <I>myces</I> roseochromogenus (Waksman No 3689) en procédant comme décrit à l'exemple 11 du brevet des U.S.A. mentionné, en substituant la prednisolone à la progestérone.
On extrait la 16a-hydroxyprednisolone résultante du bouillon filtré au moyen de méthylisobutyle cétone et on la sépare de ce solvant par con- centration et filtration du produit cristallin. résultant.
<I>b) Préparation du dérivé de la</I> 16a-hydroxy- prednisolone <I>et du</I> f urf ural Le traitement de la 16a-hydroxyprednisolone avec du furfural et en présence d'acide perchlori que, conformément à la méthode décrite à l'exemple 18,
conduit à la formation du dérivé de la 16a-hydroxyprednisolone et du furfural. <I>Exemple 23</I> Dérivé de la 12a-chloro-16a-hydroxycortisone et de la benzophénone L'hydroxylation microbiologique de la 12a-chloro- cortisone au moyen de<I>Streptomyces</I> roseochromoge- nus (Waksman No 3689), comme décrit à l'exemple 11 du brevet des U.S.A. mentionné, donne la 16a hydroxy-12a-chlorocortisone.
Le traitement de ce composé avec de la benzophénone, de la manière décrite à l'exemple 18, donne le dérivé de la 12a chloro-16a-hydroxycortisone et de la benzophénone. <I>Exemple 24</I> Dérivé de la 16a-hydroxy-12a-fluorohydro- cortisone et de l'acétophénone L'hydroxylation microbiologique de la 12a-fluoro- hydrocortisone au moyen de<I>Streptomyces</I> roseochro- mogenus (Waksman N 3689), comme décrit à l'exemple 11 du brevet des U.S.A.
mentionné, donne la 16a-hydroxy-12a-fluorohydrocortisone. Le traite ment de ce composé avec de l'acétophénone en pré sence d'acide perchlorique, de la manière décrite à l'exemple 18, donne le dérivé acétophénonique.
<I>Exemple 25</I> Dérivé de la 12a-fluoro-16a-hydroxyprednisolone et du 2-acétylfuranne L'hydroxylation microbiologique de la 12a-hydro- oxyprednisolone au moyen de<I>Streptomyces</I> roseo- chromogenus (Waksman No 3689), comme décrit à l'exemple 11 du brevet des U.S.A.
mentionné, donne la 12a-fluoro-16a hydroxyprednisolone. Le traitement de ce composé avec du 2-acétylfuranne en présence d'acide perchlorique, comme décrit à l'exemple 18, donne le dérivé 2-acétylfurannique.
<I>Exemple 26</I> Dérivé de la 12a-flubro-04-pregnène-11(3, 16(x,17a-triol-3,20-trione et de la p-nitro- acétophénone <I>a) Préparation de la</I> 12a-fluoro-11(3,16a-dihydroxy- progestérone L'hydroxylation microbiologique de la 12cc-fluoro- 11(3-hydroxyprogestérone au moyen de<I>Strepto-</I> <I>myces</I> roseochromogenus (Waksman No 3689), comme décrit à l'exemple 11 du brevet des U.S.A.
mentionné, donne la 12a-fluoro-11(3, 16a-dihydroxyprogestérone de propriétés sui vantes: P.F. environ 218-219o ; [a]D -1-164o (c = 0,50 dans CHC13) ; l < mex. 240u (E _ 16,000) ; i,m@#ul 2,98 ; 5,86 ; 6,03 ; 6,20 @.. Analyse Calculé d'après C21H2904F, (364,44) ; C = 69,21 ; H = 8,02. Trouvé: C = 68,97 ; H = 7,85.
<I>b) Préparation de la</I> 12a-fluoro-A4,I6-pregnadiène- 11(3-ol-3,20-dione On fait bouillir à reflux pendant 2 heures une sus pension de 400 mg de 16a-hydroxy-12a- fluoro-11(3-hydroxyprogestérone et 1,2g de tert-butylate d'aluminium dans 120 ml de to luène anhydre. On lave le mélange réaction nel refroidi avec de l'acide chlorhydrique di lué, de l'eau, du bicarbonate et encore de l'eau, jusqu'à neutralité. On sèche la phase organique sur du sulfate de sodium et on chasse le solvant sous vide.
La masse cristal line résiduâlle, après recristallisation dans de l'acétone-hexane, donne la 12a-fluoro-A4,16_ pregnadiène-11(3-ol-3,20-dione pure de pro priétés suivantes: P.F. environ 215-2170; [a]D + 2090 (c = 0,56 dans CHC13) ; @mcX. 238 @, ; (E = 24,700) ; I, mu#ol 2,94 ;
5,94 ; 6,05 ; 6,16 ; 6,30 w.
Analyse Calculé (Taprès C21H2703F (346,43) C =<B>72,80;</B> H = 7,86.
Trouvé: C =<B>72,56;</B> H = 7,80.
<I>c) Préparation de la</I> 12a-f luoro-04-pregnène-11(3, 16a,17a-triol-3,20-dione A une solution de 77 mg du diène formé dans la partie b) et 0,1 ml de pyridine dans 5 ml de benzène, on ajoute 65 mg de tétroxyde d'os mium. On laisse reposer le mélange à l'obscu rité pendant 18 heures, durant lesquelles un produit cristallin brun précipite.
Pour décom poser l'ester osmique, on ajoute au mélange 7 ml d'eau, 4,6 ml de méthanol, 700 mg de sulfite de sodium et 700 mg de bicarbonate de potassium et on agite la suspension résultante pendant 4 heures à température ordinaire. Après avoir dilué avec 20 ml de chloroforme, on filtre le mélange à travers de la Celite et on lave soigneusement le précipité avec du chloroforme. On sépare les couches, on lave la couche chloroformique à l'eau, on la sèche sur du sulfate de sodium et on l'évapore à sec sous vide.
On recristallise le résidu cristallin dans de l'acétone-hexane et on obtient le triol pur de propriétés suivantes : P.F. envi ron 220-222c,; [a]D -I- 1020 (c = 0,38 dans CHCl3) ; Jale. 240 @, (E = 16,200) ; 7# mâj#l <B>2,90;</B> 5,83 ; 6,02 6 ; ,19 E@.
Analyse Calculé d'après C211]2905F (380,44) ; C = 66,29 ; H = 7,68.
Trouvé<B>:</B> C = 66,28 ; H = 7,67. <I>d) Préparation du dérivé de la</I> 12a-fluoro-A4-pre- gnène-11(3,16a,17a-triol-3,20-dione <I>et de la</I> p- nitroacétophénone On laisse reposer à température ordinaire pendant 18 heures une solution de 30 mg de 12a-fluo- ro-04-pregnène-11(3,16a,17a-triol- 3,20 -dione et 0,
05 ml d'acide chlorhydrique concentré dans 5 ml de dioxane et 100 mg de p-nitro- acétophénone. On traite le mélange résultant comme décrit à l'exemple 19 et on obtient le dérivé p-nitroacétophénonique.
En soumettant la 9a-fluoro-llp-hydroxy- progestérone à la même suite de réactions, on peut préparer le dérivé de la 9a-fluoro-A4-pre- gnène-11(3,16a,17a-triol-3,20-dione et de la p-nitroacétophénone.
<I>Exemple 27<B> & </B></I> Dérivé de la 6a-méthyl-16a-hydroxy- prednisolone et de l'acétophénone L'hydroxylation microbiologique de la 6a-méthyl- prednisolone au moyen de<I>Streptomyces</I> roseochromo- genus (Waksman No 3689), comme décrit à l'exemple 11 du brevet des U.S.A.
mentionné, donne le dérivé 16a-hydroxylé. Par réaction de ce dernier avec de l'acétophénone, comme décrit à l'exemple 18, on ob tient le dérivé de la 6a-méthyl-16a-hydroxypredniso- lone et de l'acétophénone.
<I>Exemple 28</I> Dérivé de la 9a-fluoro-6a-méthyl-16a-hydroxy- prednisolone et de l'acétophénone Par traitement de la 9a-fluoro-6a-méthyl-16a- hydroxyprednisolone avec de l'acétophénone et de l'acide perchlorique comme décrit à l'exemple 18, on obtient le dérivé acétophénonique de ce composé.
On peut préparer de la même manière le dérivé acétophénonique de la 9a fluoro-6a-méthyl-16a-hy- droxyhydrocortisone.
Process for the preparation of steroids The present invention relates to a process for the preparation of steroids of formula
EMI0001.0003
in which positions 1, 2 and 6, 7 are saturated or not, R is a hydrogen atom, R 'is a P-hydroxy group, or R and R' together form a keto group, X and X 'are each a hydrogen atom, a halogen atom, a hydroxy or a lower alkoxy group, at least one of X being a hydrogen atom, Y and Y 'are each a hydrogen atom or a methyl group, Z is a hydrogen atom,
a halogen atom or a hydroxy group, P and Q are each a hydrogen atom, a lower alkyl radical, a monocyclic aromatic radical, a lower alkyl radical substituted by a monocyclic aromatic radical, a monocyclic heterocyclic radical, or a lower alkyl radical substituted by a monocyclic heterocyclic residue, or P and Q together form an alkylene radical.
The process according to the invention is characterized in that a corresponding steroid of formula
EMI0001.0017
with an acetal or ketal-forming compound and comprising the radical
EMI0001.0020
preferably with an aldehyde or a ketone of formula
EMI0001.0022
The reaction is preferably carried out by treating a suspension or solution of the steroid in aldehyde or ketone (or in an organic solvent when the aldehyde or ketone is solid in the presence of an acid catalyst (eg. per chloric acid,
p-toluene sulfonic acid, hydrochloric acid, etc.), after which the acid is neutralized and the acetal, ketal or alkylidene derivative formed is separated.
Among the suitable starting steroids, the following compounds may be mentioned: 16a-hydroxyhyrocortisone, 16a-hydroxycortisone, 16a-hydroxy-prednisolone, 9a -halo -16a-hydroxyhydrocortisone (eg 9a-fluoro-16a-hydroxyhydrocortisone), 9a -halo-16a-hydroxycortisone, 9a-halo-16a-hydroxy-prednisolone (for example 9a-fluoro-16a-hydroxy-prednisolone), 9a-halo-16a-hydroxyprednisone,
12a-halo-16a-hydroxyhydrocortisone (eg 12a-fluoro-16a-hydroxyhydrocortisone), 12a-halo-16a- hydroxycortisone (eg 12a-chloro-16a-hy-droxycortisone), 12a-halo-16a-hydroxyprednisolone, 12a- halo-16a-hydroxyprednisone, 6a-methyl-16a-hy- droxyhydrocortisone, 6a-methyl-16a-hydroxycortisone,
6a-methyl-16a-hydroxyprednisolone, 6a-methyl-16a-hydroxyprednisone, 2a-methyl-16a-hydroxy-hydrocortisone, 2a-methyl-16a-hydroxycortisone, 9a-halo - 6 (x - methyl - 16a - hydroxyhydrocortisone ( for example 9a-fluoro-6a-methyl-16a-hydroxyhydrocortisone),
9a-halo-6a-methyl-16a-hydroxyprednisolone e.g. 9a-fluoro-6a-methyl-16a-hydroxyprednisolone), 16ca-hydroxy-6-dehydroprednisolone, 9a-halo-16a-hydroxy-6-dehydroprednisolone, 11 ( 3,16a, 17a-trihydroxyprogesterone, 11-keto-16a, 17a-dihy- droxyprogesterone, 11 (3,16a, 17a-trihydroxy-1-dehy-droprogesterone, 11-keto-16a, 17a-dihydroxy-1-dehy- droprogesterone,
9a-halo-11 (3,16a, 17a-trihydroxyprogesterone (e.g. 9a-fluoro-11 (3,16a, 17a-tri-hydroxyprogesterone), 9a -halo -11 (3,16a, 17a - trihy- droxy -1-dehydroprogesterone (eg 9a-fluoro- 11 (3,16a, 17a-trihydroxy-1-dehydroprogesterone, 12a- halo-11 (3,16a, 17a-trihydroxyprogesterone (eg 12a-fluoro-110,16a, 17a-trihydroxyprogesterone), 12a-halo-11 (3,16a,
17a-trihydroxy-1-dehydroprogesterone (e.g. 12a-fluoro-11 (3,16a, 17 (x-trihy-droxy-1-dehydroprogesterone), 21-halo-11 (3,16a, 17a-trihydroxyprogesterone (for example 21-fluoro-11 (3, 16a, 17a-trihydroxyprogesterone), 21-halo-11 (3,16a, 17a-trihydroxy-1-dehydroprogesterone, 9a, 21-dihalo- 11 (0.16a, 17a-trihydroxyprogesterone ( for example 9a, 21-ditluoro-1 1 (3,16a, 17 (x-trihydroxyprogesterone),
and 9a, 21-dihalo-6a-methyl-11 (3,16a, 17a-trihydroxy-1-dehydroprogesterone.
The preferred starting steroids are those in which the 1, 2 position is saturated or double bonded, R is hydrogen, R 'is P-hydroxy or R and R' together form a keto group, X and X 'are each a hydrogen, chlorine or fluorine atom, at least one of X being a hydrogen atom, Y and Y' are hydrogen atoms, and Z 'is a hydrogen atom, and Z' is a hydrogen atom. hydrogen or a hydroxy group.
In the event that the starting steroid is a new compound, it can be prepared from the corresponding 16-deoxy derivative, by subjecting the latter to the oxygenating action of a microorganism such as <I> Streptomyces </I> roseochromogenus, according to the method described in US Patent No. 285,541 <B> 0 </B>.
Suitable starting aldehydes and ketones include aldehydes such as formaldehyde (paraldehyde), trioxymethylene, propanal and hexanal, di (lower alkyl) ketones, including acetone, diethyl ketone, dibutyl ketone , methyl ethyl ketone, and methyl isobutyl ketone, and cycloalkanones such as cyclopentanone,
cyclohexanone, suberone and cyclodecanone, monocyclic aromatic aldehydes such as benzaldehyde, halobenzaldehydes (eg p-chlorobenzaldehyde), (lower alkoxy) benzaldehyde (eg o-anisaldehyde ), di (lower alkoxy)
benzaldehydes (for example veratraldehyde), hydroxybenzaldehydes (for example salicylic aldehyde), dihydroxybenzaldehydes (for example resorcylaldehyde), benzaldehydes substituted with a lower alkyl residue (for example m-tolualdehyde and p-ethylaldehyde ), di (lower alkyl) benzaldehydes (for example o, p-dimethylbenzaldehyde),
nitrobenzaldehydes, acylamidobenzaldehydes (eg, N-acetylanthranilaldehyde), and cyanobenzaldehydes;
monocyclic aromatic lower alkanals, such as phenylacetaldehyde, α-phenylpropionaldehyde, P-phenylpropionaldehyde, γ-phenylbutyraldehyde, and their derivatives substituted in the aromatic ring by one or more halogen atoms, lower alkoxy residues, hydroxy- lower alkyl, nitro, acylamido and cyano;
monocyclic heterocyclic aldehydes, such as picolinaldehyde, furfural, thiophene carbonals, and their derivatives obtained by substitution of one or more halogen atoms, lower alkoxy radicals, hydroxy, lower alkyl, nitro and cyano; and monocyclic heterocyclic lower alkanals;
mono-cyclic aromatic ketones, such as acetophenone, propiophenone, butyrophenone, valerophenone, isocaprophenone, halophenyl-lower alkyl ketones (eg p-chloroacetophenone), (lower alkoxy) phenyl -lower alkyl ketones (eg p-anisylmethyl ketone), di (lower alkoxy)
phenyl lower alkyl ketones, hydroxyphenyl lower alkyl ketones, dihydroxyphenyl lower alkyl ketones (eg resacetophenone), (lower alkyl) phenyl lower alkyl keto (eg methyl p-toluyl ketone), di-lower alkyl) phenyl-lower alkyl ketones (e.g. o, p-xylyl-methyl ketone),
nitrophenyl lower alkyl ketones (eg p-nitroacetophenone), acylamidophenyl lower alkyl ketones (eg acetylanilines), and cyanophenyl lower alkyl ketones; benzophenone and its mono- and di-substituted derivatives with halo, lower alkoxy, hydroxy, lower alkyl, nitro, acylamido and cyano radicals;
monocyclic aromatic lower alkanones, such as 1-phenyl-3-butanone and 1-phenyl-4-pentanone, and their derivatives substituted in the aromatic ring; monocyclic heterocyclic ketones, such as 2-acetylfuran, 2-benzoylfuran and RTI ID = "0002.0212" WI = "13" HE = "4" LX = "1825" LY = "2463"> 2-acetylthiophene; and alkanones. lower monocyclic heterocyclic.
If a 21-ester is desired, the corresponding 21-hydroxy-steroid can be acylated in the usual manner. Thus, to prepare the preferred 21-acyloxy derivatives, in which the acyl radical is that of a hydrocarbon carboxylic acid of less than 10 carbon atoms, it is possible to use as reagent either the halide or the anhydride of:
lower alkanoic acid (eg acetic, propionic and tertiary butyric acids), monocyclic arylcarboxylic acid (eg benzoic and toluic acids), lower monocyclic arylalkanoic acid (eg phenaketic and P-phenylpropionic), lower alkenoic acid, cycloalkane carboxylic acid,
or a cycloalkene carboxylic acid.
All the compounds obtained by carrying out the process according to the invention are physiologically active substances, endowed with glycocorticoid and anti-inflammatory activity, and can therefore be used instead of known glycocorticoids, such as hydrocortisone and cortisone, in the treatment of rheumatoid arthritis. For this purpose, they can be administered in the same manner as hydrocortisone, for example, adjusting the doses according to the relative activity of the particular steroid.
In the examples below, all temperatures are given in degrees centigrade. <I> Example 1 </I> 16a-17a-isopropylidene triamcinolone (16a, 17a-isopropylidene-9 (i.fluoro-Al: 4 pregnadiene-11p, 16a, 17a, 21-tetrol-3,20-dione) On 0.05 ml of 72% perchloric acid is added to a suspension of 500 mg of triamcinolone in 75 ml of acetone and the mixture is stirred at room temperature for 3 hours During this time, the crystals gradually dissolve.
The clear solution is neutralized with dilute bicarbonate and the acetone removed in vacuo. The resulting crystalline suspension is filtered and the crystals washed with water. The dried substance (about 523 mg) melts at about 275-278.
Recrystallization from 95% alcohol gives pure acetonide of the following properties m.p. about 288-290o; [a] D -I-1090 (c = 0.75 in CHCl3); @mvY. 237.5 @ (E = 16,000); INmuiol 2.94; 5.83; 5.99; 6.17; 6.21 Analysis Calculated from C24H3106F (434.49) C = 66.34; H, 7.19.
Found: C = 65.95; H = 7.43.
This compound has approximately 20 times the activity of cortisone acetate in the rat liver glycogen test and approximately 30 times the activity of cortisol in the cotton swab anti-inflammatory test. <I> Example 2 </I> To a suspension of 500 mg of triamcinolone in 75 ml of acetone, 0.05 ml of concentrated hydrochloric acid is added and the mixture is stirred at room temperature for 6 hours.
It is then worked up as described in Example 1 to obtain pure triamcinolone acetonide, m.p. about 283-2850. <I> Example 3 </I> A suspension containing 100 mg of triamcinolone and 50 mg of p-toluenesulfonic acid in 15 ml of acetone is stirred for 21 hours at room temperature. The clear solution is treated in the manner described in Example 1 and pure acetovacuum is obtained, with the same properties.
16a, 17a-isopropylidene triamcinolone 21-acetate can be prepared in the following manner. A solution of 50 mg of tri-amcinolone acetonide in 1 ml of pyridine and 1 ml of 'anhy drid acetic.
After having removed the reagents in vacuo, a crystalline residue is obtained which, after recrystallization from an acetone-hexane mixture, gives the pure acetate with the following properties: m.p. about 2660; [] 23 -I- 920 (c = 0.59 in CHCl3); lmâX. 238 @. (E = 16,000) @ Nu, ol 3.01; 5.71; 5.79; 6.01- Max.
6.04; 6.21-6.24 #t. Analysis Calculated from C20H33o7F (476.52) C = 65.52; H, 6.98. Found: C = 65.49; H, 6.81. <I> Example 4 </I> 16a, 17a- (2'-butylidene) triamcinolone To a suspension of 100 mg of triamcinolone in 15 ml of methyl ethyl ketone, 0,
05 ml of 72% perchloric acid and the mixture was stirred at room temperature for 2 hours. The resulting solution is neutralized with sodium bicarbonate solution and, after addition of water, the methyl ethyl ketone is evaporated in vacuo. The resulting crystals are filtered, washed with water and dried in vacuo.
Recrystallization from an acetone-hexane mixture gives the pure isobutylidene derivative with the following properties: m.p. about 255-260o; [(x] 23 -I- 920 (c = 0.39 in CHCl3); it.m@jl 2.96; 5.85; 6.04; 6.20 t @. Analysis Calculated from C25H330sF (448 , 52): C = 66.94; H = 7.42 Found <B>: </B> C = 67.01; H = 7.41.
<I> Example 5 </I> 16a, 17a- (4'-methyl-2'-pentylidene) triamcinolone To a suspension of 100 mg of triamcinolone in 15 ml of methyl isobutyl ketone, 0.05 ml of perchloric acid is added at 72 0/0. The mixture is stirred at room temperature for 6 hours and the resulting solution is extracted with dilute sodium bicarbonate solution, washed with water, the organic phase is dried over sodium sulfate and the solvent evaporated. under vacuum.
Recrystallization of the crystals obtained from acetone-hexane gives the pure isohexylidene derivative with the following properties: m.p. about 246-2500; [a] D T 81.50 (c = 0.40 in CHCl3); @ Nuj01 290; 5.83; 6.02; 6.20 @ ,.
myx. Analysis Calculated from C, H370oF (476.56) C = 68.04; H, 7.83. Found: C = <B> 68.52; </B> H = 7.93. <I> Example 6 </I> 16a, 17a-cyclohexylidene triamcinolone A suspension of 200 mg of triamcinolone in 15 ml of redistilled cyclohexanone is treated for 2 hours as described in Example 5.
The resulting cyclohexylidene derivative has the following properties, after recrystallization from acetone-hexane: m.p. (after drying at 110o under vacuum) 278-2810; [a] D -i- 900 (c = 1.01 in CHCl3); I, uol 2.87; 3.02;
5.85; 6.02; 6.19; 6.24; 11,20 <I> Example 7 </I> 16a, 17a- (3'-pentylidene) triamcinolone A suspension of 200 mg of triamcinolone in 30 ml of diethyl ketone is treated for 4 hours as described in Example 5.
The resulting isopentylidene derivative has the following properties: m.p. about 265-286-; [a] D -f-910 (c = 0.69 in CHCl3); I.m # iol 3.02; 5.84; 6.01; 6.18; 6.24;
11,18 <I> Example 8 </I> 16a, 17a-ethylidene triamcinolone To a suspension of 200 mg of triamcinolone in 15 ml of freshly distilled paraldehyde, 0.05 ml of 72 Vo perchloric acid is added and the mixture is stirred. mixing for 3 1 / s hours at room temperature. The resulting solution was extracted with dilute bicar bonate and water, dried, and excess paraldehyde removed in vacuo.
The residual product is 16,17-ethylidene_tdamcinolone.
By substitution of 9α-fluoro-01,4-pregnadiene-16a, 17a, 21-triol-3,11,20 trione for triamcinolone in the preparations of Examples 1 to 8, the corresponding 11-keto derivatives are obtained.
<I> Example 9 </I> 16a, 17a-isopropylidene 9a-fluoro-A4 pregnene-11p, 16a, 17ca, 21-tetrol-3,20-dione A suspension of 200 mg is stirred at room temperature for 18 hours. of 9a-fluoro-A4-pre-gnene-11a, 16a, 17a, 21-tetrol-3,20 dione in 30 ml of acetone, with 100 mg of p-toluenesulphonic acid monohydrate. The clear solution is neutralized with sodium bicarbonate solution and the acetone is evaporated off in vacuo.
The resulting crystals are filtered and dried in vacuo. Recrystallization from acetone-hexane gives the pure isopropylidene derivative of the following properties: m.p. about 270-2730; [a] 23 -I-137o (c = 0.45 in CHCl3); # m @ # l 2.90; 5.78; 5.82; 6.01; 6.15 Analysis Calculated from Cz4H330oF (436.50) C = 66.03; H, 7.62.
Found <B>: </B> C = 66.03; H, 7.92. - By reaction of 9α-fluoro-A4 pregnene-16a, 17a, 21-trio1,3,11,20-trione with acetone, the corresponding 11-keto derivative is obtained.
<I> Example 10 </I> 16a, 17a-cyclohexylidene 16a-hydroxyhydrocortisone To a suspension of 100 mg of 16a-hydroxyhyrocortisone in 15 ml of cyclohexane, 0.05 ml of 72% perchloric acid is added. . The mixture is treated as described in Example 5 and the cyclohexylidene derivative of 16α-hydroxyhydro-cortisone is obtained.
By substitution of 16 (x-hydroxycortisone for 16α-hydroxyhydrocortisone in the preparation of Example 10, the 16a, 17a-cyclohexylidene derivative of 16a-hydroxycortisone is obtained.
<I> Example 11 </I> 16a, 17a-isopropylidene 16a-hydroxy-prednisolone <I> a) Preparation of </I> 16a-hydroxyprednisolone Prednisolone is allowed to ferment with <I> Streptomyces </I> roseochromogenus (Waksman No. 3689) by proceeding as described in Example 11 of the US patent
No. 2855410, replacing progesterone with prednisolone (01,4-pregnadiene-11 (3,17 (x, 21-triol-3,20-dione). The resulting 16α-hydroxyprednisolone is extracted from the filtered broth with medium of methyl isobutyl ketone and separated from this solvent by concentration and filtration of the resulting crystalline product.
<I> b) Preparation of </I> 16a, 17a-isopropylidene 16a-hy- droxyprednisolone By treatment of 16a-hydroxyprednisolone with acetone in the presence of perchloric acid according to the method described in Example 1 , one obtains 16a, 17a-isopropyl-idene 16a-hydroxyprednisolone.
<I> Example 12 </I> 16a, 17a- (3'-pentylidene) 12a-chloro-16a- hydroxycortisone The microbiological hydroxylation of 12a-chlorocortisone by means of <I> Streptomyces </I> roseochromo- genus (Waksman No. 3689), as described in Example 11 of the US patent
mentioned, gives 16a-hydroxy-12a-chlorocortisone. Treatment of this compound with diethyl ketone, as described in Example 7, provides the 3 'pentylidene derivative of 16α-hydroxy-12a-chlorocortisone.
<I> Example 13 </I> 16a, 17a-isopropylidene 16a-hydroxy-12a- fluorohydrocortisone The microbiological hydroxylation of 12a-fluorohydrohydrocortisone by means of <I> Streptomyces roseochro- </I> mogenus (Waksman No 3689 ), as described in Example 11 of the US patent
mentioned, gives 16a-hydroxy-12a-fluorohydrocortisone. The treatment of this compound with acetone in the presence of per chloric acid as described in example 1 gives the derivative 16a, 17a-isopropylidene.
<I> Example 14 </I> 16, 17 -isopropylidene 12a-fluoro-16a-hydroxyprednisolone The microbiological hydroxylation of 12a-hydro-oxyprednisolone using <I> Streptomyces </I> roseochromogenus (Waksman No 3689 ), as described in Example 11 of the US patent
mentioned, gives 12a-fluoro-16a-hydroxyprednisolone. By treatment of this compound with acetone in the presence of per chloric acid, as described in Example 1, the 16a, 17a-isopropylidene derivative is obtained.
<I> Example 15 </I> 16a, 17a-isopropylidene 12 (x-fluoro-A4-pregnene-11 [3,16a, 17a-triol-3,20-dione <I> a) Preparation of </ I > 12a-fluoro-11 [3,16a-dihydroxy-progesterone The microbiological hydroxylation of 12a-fluoro- 11 P-hydroxyprogesterone by means of <I> Strepto- </I> <I> myces </I> roseochromogenus ( Waksman No. 3689) as described in Example 11 of the US patent
mentioned, gives 12a-fluoro-11ri, 16a-dihydroxyprogesterone, of the following properties <B>: </B> m.p. about 218-219; [a] D -f-1640 (c = 0.50 in CHCl3); lmâY. 240 @. (a = 16,000); @Nu \ ol 2.98; 5.86; 6.03; 6.20 @ ,. Analysis Calculated from Cz1H2304F (364.44); C, 69.21; H, 8.02. Found <B>: </B> C = 68.97; H, 7.85.
<I> b) Preparation of </I> 12a-fluoro-04,16-pregnadiene-11 (3-ol-3,20-dione A suspension of 400 mg of 12a- is boiled under reflux for 2 hours. fluoro-11 (3,16u-di-hydroxyprogesterone and 1.2 g of aluminum tert-butoxide in 120 ml of anhydrous toluene.
The cooled reaction mixture is washed with dilute hydrochloric acid, water, bi-carbonate, then again with water, until neutral. The organic phase is dried over sodium sulfate and the solvent is removed in vacuo.
The residual crystalline mass gives, after recrystallization from acetone-hexane, pure 12α-fluoro-D4,1c-pregnadiene-11 p-ol-3,20-dione with the following properties: m.p. about 215-217; [] D -I- <B> 2090 </B> (c = 0.56 in CHCl3); l.aic #. 238 tl (a = 24,700); Iyulol Max. 2.94;
5.94; 6.05; 6.16; 6.30 u. Analysis Calculated from C211-12703F (346.43) C = 72.80; H, 7.86. Found <B>: </B> C =. 72.56; H, 7.80. <I> c) Preparation of </I> 12a-fluoro-A4-pregnene-11 (3, 16a, 17 (x-triol-3,20-dione A solution of 77 mg of the diene obtained as described in part b) and 0.1 ml of pyridine in 5 ml of benzene, 65 mg of osmium tetroxide are added.
The mixture is left to stand in the dark for 18 hours, during which time a brown crystalline product precipitates. To decompose the osmic ester, 7 ml of water, 4.6 ml of methanol, 700 mg of sodium sulphite and 700 mg of potassium bicarbonate are added to the mixture and the resulting suspension is stirred for 4 hours at room temperature. ordinary erasure.
After dilution with 20 ml of chloroform, the mixture is filtered through a silica material, eg Celite, and the precipitate is washed thoroughly with chloroform. The layers are separated, the chloroform phase is washed with water, dried over sodium sulfate and evaporated to dryness in vacuo.
The crystalline residue is recrystallized. in acetone-hexane leaving the pure triol of the following properties: m.p. about 220-222; [(1] 2 3 + 1020 (c = 0.38 in CHCl3) ;, ale \. 240 #, (a = 16.200);? Mu1Xl 2.90; 5.83 6.02; 6.19 @@.
Analysis Calculated from C211-12905F (380.44) C = 66.29; H, 7.68.
Found: C, 66.28; H, 7.67.
<I> d) Preparation of </I> 16a, 17-isopropylidene-12a-fluoro-A4-pregnene-II (3,16a, 17a-triol-3,20-dione Allowed to stand at room temperature for 18 hours a solution of 30 mg of 12a-fluoro -A4-pregnene-11 (3,16a, 17a-triol-3,20-di-one and 0.05 ml of concentrated hydrochloric acid in 10 ml of acetone.
The resulting mixture is worked up as described in Example 1, and acetonide is obtained which, after recrystallization from 95 I / o alcohol, exhibits the following properties: m.p. about 228-230o; [a] D -f-138o (c = 0.40 in CHCl3); I, naiol 3.01; 5.83; 6.02; 6.17t1.
By carrying out the same series of reactions on 9a-fluoro-11 (3-hydroxyprogesterone, the 16a, 17a-isopropylidine derivative of 9a-fluoro-A4-pregnene-11 can be prepared [3,16a, 17a- triol-3,20-dione.
<I> Example 16 </I> 16a, 17a-isopropylidene-6a-methyl-16a-hydroxyprednisolone Microbiological hydroxylation of 6a-methyl-prednisolone using <I> Streptomyces roseochromo- </I> genus (Waksman No. 3689), as described in Example 11 of the US patent
mentioned, gives the 16α-hydroxy derivative. By reacting the latter with acetone, as described in Example 1, the isopropylidene derivative of 6a-methyl-16a-hydroxyprednisolone is obtained.
<I> Example 17 </I> 16a, 17a-isopropylidene 9a-fluoro-6a-methyl-16a-hydroxyprednisolone The treatment of 9a-fluoro-6a-methyl-16a-hy-droxyprednisolone with acetone and l per chloric acid, as described in Example 1, gives the isopropylidene derivative of this compound.
The isopropylidene derivative of 9α-fluoro-6a-methylhydrocortisone can be prepared in the same manner.
<I> Example 18 </I> Derivative of acetophenone and triamcinolone To a suspension of 4 g of triamcinolone in 100 ml of freshly redistilled acetophenone, 1.0 ml of 72% perchloric acid is added and the mixture is stirred at ordinary temperature for 2 hours,
during which all of the triamcinolone dissolves. The solution is neutralized by adding 8 ml of 1.1N NaOH and a sufficient quantity of aqueous bicarbonate to make it neutral. Water and chloroform are then added and the chloroform-acetophenone layer is concentrated in a high vacuum.
The residue is recrystallized from acetone-hexane and the crystals washed well with hexane to remove the acetophenone adhering to it.
An analytical sample exhibits the following properties: m.p. about 281-2830 (dec.); [a] D -I-230 (c = 0.98 in CHCl3); @ma; 01 2.91; 5.80; 6.02; 6.16; 6.23; 13.06; 14.29 Analysis Calculated from CZ9I-13506F (498.57) C = 69.93; H, 7.07.
Found <B>: </B> C = 69.91; H, 7.04. <I> Example 19 </I> Derivative of p-nitroacetophenone and of triamcinolone To a suspension of 200 mg of triamcinolone in a mixture of 7 ml of dioxane and 4 g of p-nitroacetophenone, 0.05 is added ml of 72% perchloric acid and the mixture is stirred at room temperature for 3: 1/2 hours.
The mixture is then neutralized with dilute sodium bicarbonate solution and the dioxane and excess p-nitroacetophenone removed by steam stripping under vacuum. The residual aqueous suspension is extracted with chloroform, the chloroform layer is washed with water, dried over sodium sulfate and the solvent removed in vacuo. The derivative which remains as a residue is purified by recrystallization from acetone-hexane.
The acetophenonic derivative of triamcinolone 21-acetate can be prepared as follows. A solution of 50 mg of the acetophenonic derivative of triamcinolone in 1 ml of pyridine and 1 ml of triamcinolone is allowed to stand at room temperature for 18 hours. acetic anhydride. Removal of reagents in vacuo leaves a crystalline residue which,
after recrystallization from acetone-hexane gives the pure acetate.
Replacement of triamcinolone by 9a-fluoro-Al, 4-pregnadiene-16a, 17a, 21-triol - 3,11,20-tri-one in the preparations of Examples 18 to 20, gives the corresponding 11-keto derivatives .
<I> Example 20 </I> Acetophenonic derivative of 9a-fluoro- A4-pregnene-11 (3,16a, 17a, 21-tetrol-3,20-dione A suspension of 200 mg of 9a is stirred at room temperature -fluoro-A4-pregnene-11 (3,16a, 17a, 21-tetrol-3,20-dione in 30 ml of acetophenone with 100 mg of p-toluenesulfonic acid monohydrate, for 18 hours. The solution is neutralized. clear with sodium bicarbonate solution and the acetone evaporated in vacuo.
The resulting crystals are filtered off and dried in vacuo. Recrystallization from acetone-hexane gives the pure acetophenone derivative.
Reaction of 9α-fluoro-A4-pregnene-16a, 17a, 21-triol-3,11,20-trione with acetophenone gives the corresponding 11-keto derivative.
<I> Example 21 </I> Derivative of 16a-hydroxyhydrocortisone and Benzaldehyde To a suspension of 100 mg of 16a-hydroxyhydrocortisone in 15 ml of benzaldehyde, 0.05 ml of 72% perchloric acid is added. The mixture is worked up as described in Example 18 and the derivative of 16α-hydroxyhydrocortisone and benzaldehyde is obtained.
By substituting 16α-hydroxycortisone for 16 (i-hydroxyhydrocortisone in the preparation of Example 21, the derivative of 16α-hydroxy-cortisone and benzaldehyde is obtained.
<I> Example 22 </I> Derivative of 16α-hydroxyprednisolone and furfural <I> a) Preparation of I </I> da-hydroxyprednisolone Prednisolone is fermented with <I> Strepto- </I> <I> myces </I> roseochromogenus (Waksman No. 3689) by proceeding as described in Example 11 of the mentioned US patent, substituting prednisolone for progesterone.
The resulting 16α-hydroxyprednisolone is extracted from the filtered broth with methyl isobutyl ketone and separated from this solvent by concentration and filtration of the crystalline product. resulting.
<I> b) Preparation of the derivative of </I> 16a-hydroxy-prednisolone <I> and of </I> f urf ural The treatment of 16a-hydroxyprednisolone with furfural and in the presence of perchloric acid, in accordance with the method described in Example 18,
leads to the formation of the derivative of 16α-hydroxyprednisolone and furfural. <I> Example 23 </I> Derivative of 12a-chloro-16a-hydroxycortisone and benzophenone Microbiological hydroxylation of 12a-chlorocortisone by means of <I> Streptomyces </I> roseochromogenus (Waksman No. 3689), as described in Example 11 of the mentioned US patent, gives 16a-hydroxy-12a-chlorocortisone.
Treatment of this compound with benzophenone, as described in Example 18, gives the derivative of 12a chloro-16a-hydroxycortisone and benzophenone. <I> Example 24 </I> Derivative of 16a-hydroxy-12a-fluorohydro-cortisone and acetophenone The microbiological hydroxylation of 12a-fluorohydro-hydrocortisone by means of <I> Streptomyces </I> roseochro- mogenus (Waksman N 3689), as described in Example 11 of the US patent
mentioned, gives 16α-hydroxy-12a-fluorohydrocortisone. Treatment of this compound with acetophenone in the presence of perchloric acid, as described in Example 18, gives the acetophenonic derivative.
<I> Example 25 </I> Derivative of 12a-fluoro-16a-hydroxyprednisolone and 2-acetylfuran Microbiological hydroxylation of 12a-hydro-oxyprednisolone by means of <I> Streptomyces </I> roseochromogenus ( Waksman No. 3689), as described in Example 11 of the US patent
mentioned, gives 12α-fluoro-16a hydroxyprednisolone. Treatment of this compound with 2-acetylfuran in the presence of perchloric acid, as described in Example 18, gives the 2-acetylfuran derivative.
<I> Example 26 </I> Derivative of 12a-flubro-04-pregnene-11 (3, 16 (x, 17a-triol-3,20-trione and p-nitro-acetophenone <I> a) Preparation of </I> 12a-fluoro-11 (3,16a-dihydroxy- progesterone The microbiological hydroxylation of 12cc-fluoro- 11 (3-hydroxyprogesterone by means of <I> Strepto- </I> <I> myces </I> roseochromogenus (Waksman No. 3689), as described in Example 11 of the US patent
mentioned, gives 12a-fluoro-11 (3, 16a-dihydroxyprogesterone with the following properties: mp about 218-219o; [a] D -1-164o (c = 0.50 in CHCl3); l <mex. 240u ( E _ 16,000); i, m @ # ul 2.98; 5.86; 6.03; 6.20 @ .. Analysis Calculated from C21H2904F, (364.44); C = 69.21; H = 8.02 Found: C = 68.97, H = 7.85.
<I> b) Preparation of </I> 12a-fluoro-A4, I6-pregnadiene-11 (3-ol-3,20-dione A suspension of 400 mg of 16a- is boiled under reflux for 2 hours. hydroxy-12a- fluoro-11 (3-hydroxyprogesterone and 1.2 g of aluminum tert-butoxide in 120 ml of anhydrous toluene. The cooled reaction mixture is washed with dilute hydrochloric acid, water. , bicarbonate and more water until neutral The organic phase is dried over sodium sulfate and the solvent is removed in vacuo.
The residual crystal mass, after recrystallization from acetone-hexane, gives pure 12α-fluoro-A4,16-pregnadiene-11 (3-ol-3,20-dione of the following properties: mp about 215-2170; [a] D + 2090 (c = 0.56 in CHCl3); @mcX.238 @,; (E = 24.700); I, mu # ol 2.94;
5.94; 6.05; 6.16; 6.30 w.
Analysis Calculated (After C21H2703F (346.43) C = <B> 72.80; </B> H = 7.86.
Found: C = <B> 72.56; </B> H = 7.80.
<I> c) Preparation of </I> 12a-fluoro-04-pregnene-11 (3, 16a, 17a-triol-3,20-dione A in a solution of 77 mg of the diene formed in part b) and 0.1 ml of pyridine in 5 ml of benzene, 65 mg of bone tetroxide are added. The mixture is left to stand in the dark for 18 hours, during which time a brown crystalline product precipitates.
To decompose the osmic ester, 7 ml of water, 4.6 ml of methanol, 700 mg of sodium sulfite and 700 mg of potassium bicarbonate are added to the mixture, and the resulting suspension is stirred for 4 hours at room temperature. . After diluting with 20 ml of chloroform, the mixture is filtered through Celite and the precipitate is washed thoroughly with chloroform. The layers are separated, the chloroform layer is washed with water, dried over sodium sulfate and evaporated to dryness in vacuo.
The crystalline residue is recrystallized from acetone-hexane and the pure triol is obtained with the following properties: m.p. about 220-222c; [a] D -I-1020 (c = 0.38 in CHCl3); Jale. 240 @, (E = 16,200); 7 # maj # l <B> 2.90; </B> 5.83; 6.02 6; , 19 E @.
Analysis Calculated from C211] 2905F (380.44); C, 66.29; H, 7.68.
Found <B>: </B> C = 66.28; H, 7.67. <I> d) Preparation of derivative of </I> 12a-fluoro-A4-pre-gnene-11 (3,16a, 17a-triol-3,20-dione <I> and </I> p - Nitroacetophenone A solution of 30 mg of 12a-fluoro-04-pregnene-11 (3,16a, 17a-triol-3,20 -dione and 0, is allowed to stand at room temperature for 18 hours,
05 ml of concentrated hydrochloric acid in 5 ml of dioxane and 100 mg of p-nitroacetophenone. The resulting mixture is treated as described in Example 19 and the p-nitroacetophenonic derivative is obtained.
By subjecting 9a-fluoro-llp-hydroxy-progesterone to the same series of reactions, the 9a-fluoro-A4-pregnene-11 derivative (3,16a, 17a-triol-3,20-) can be prepared. dione and p-nitroacetophenone.
<I> Example 27 <B> & </B> </I> Derivative of 6a-methyl-16a-hydroxy-prednisolone and acetophenone Microbiological hydroxylation of 6a-methyl-prednisolone by means of <I > Streptomyces </I> roseochromogenus (Waksman No 3689), as described in Example 11 of the US patent
mentioned, gives the 16α-hydroxy derivative. By reaction of the latter with acetophenone, as described in Example 18, the derivative of 6a-methyl-16a-hydroxyprednisolone and acetophenone is obtained.
<I> Example 28 </I> Derivative of 9a-fluoro-6a-methyl-16a-hydroxy-prednisolone and acetophenone By treatment of 9a-fluoro-6a-methyl-16a-hydroxyprednisolone with acetophenone and perchloric acid as described in Example 18, the acetophenonic derivative of this compound is obtained.
The acetophenonic derivative of 9a fluoro-6a-methyl-16a-hydroxyhydrocortisone can be prepared in the same manner.