Procédé pour séparer, dans une solution, une ptéridine des impuretés qui l'accompagnent. Il est décrit et revendiqué, au brevet prin cipal, un procédé pour séparer, dans une solu- tion contenant une ptéridine correspondant à la formule générale: -
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où R est le reste d'un aminoacide ou d'un peptide, ladite ptéridine des impuretés qui l'accompagnent et notamment de ptéridines de formule autre que la formule ci-dessus.
Il a été découvert maintenant que ce même processus peut s'appliquer, avec tous les avan tages mentionnés au brevet principal, aux ptéridines renfermant le groupement
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dans lequel R est le reste d'un aminoacide. La présente invention a donc pour objet un procédé pour séparèr, dans une solution contenant une ptéridine présentant le groupe- ment: .
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dans lequel R_ est le reste d'un aminoacide, ladite ptéridine des impuretés qui l'accom- pagnent et notamment des ptéridines de for mule autre que la formule ci-dessus, ce pro-_ cédé étant caractérisé par le fait qu'on ajoute, à cette solution contenant une ptéridine ayant la formule générale ci-dessus, un sel soluble de zinc, de préférence Lui sel acide de zinc à une solution alcaline d'un mélange réactionnel cru, et règle le pH du liquide à une valeur comprise entre 10,5 et 11,2 et en ce qu'on sépare les matières précipitées constituées essentiellement desdites impuretés sous forme de combinaisons de zinc,
d'avec la solution qui contient la majeure partie de la ptéridine désirée sous forme d'un sel de zinc soluble, et régénère finalement cette ptéridine. La pré cipitation peut avoir lieu aussi bien dans une solution froide que chaude.
Pour la régénération, le pg de la solution débarrassée des impuretés peut ensuite être ré duit jüsqu'aiLx limites comprises entre 6,5 et 7 environ, en ajoutant des quantités supplé mentaires d'un sel acide de zinc ou par l'addi tion d'acide. Dans ces conditions, les sels de zinc des composés désirés ont une solubilité minimum et précipitent.
Ils sont recueillis et transformés en ptéridines libres. - Etant donné que la solubilité des sels de zinc des - ptéridines désirées n'augmente que faiblement ou pas du tout lorsqu'on élève la température, tandis que la solubilité des sels des autres ptéridines tend à augmenter, il est indiqué que la précipitation des sels de zinc. des ptéridines désirées s'effectue à une tempé rature élevée, de préférence entre 50 et 95 C environ.
Bien que les sels de zinc précipités aient une pureté sensiblement améliorée, il est ordi nairement désirable de répéter le processus jusqu'à l'élimination pratiquement totale des impuretés. A cet effet, on dissout par exemple les sels de zinc dans une solution aqueuse d'un alcali (hydrate de sodium, de calcium, de baryum ou autres) à un pH supérieur à 11,5. L'hydrate insoluble de zinc ainsi que d'autres substances insolubles peuvent être alors éliminées par filtration, puis 6n répète l'opération qu'on vient de décrire.
Lorsqu'on estime que la purification a été suffisamment poussée, en traitant le sel de zinc avec un acide pour abaisser le pH à une valeur inférieure à 5 et de préférence à 3, on obtient la précipitation de la ptéridine libre. Le produit peut être séparé de son eau-mère puis séché ou conditionné pour obtenir des produits pharmaceutiques de diffé rentes sortes. L'invention est décrite avec phis de détails dans les exemples qui suivent.
Exemple <I>1:</I> 30,8 parties de sulfate de 2,4,5-triamino-6- hydroxy-pyrimidine, 29,3 parties de chlorure de baryum dihydraté et 600 parties d'eau sont chauffées à 60 C pendant quelques minutes, puis refroidies à 40 C. On ajoute ensuite 13,3 parties d'acide p-aminobenzoylglutamique et on ajuste le pH à 3. En l'espace de 25 mi nutes, on ajoute 17,5 parties de butylchloral (2,2,3-trichlorobutanal) avec de la soude caus tique pour maintenir le pH à 3. Après avoir agité pendant une demi-heure encore, on re froidit, on filtre et on sèche le mélange.
Le rendement est de 49,1 parties et l'analyse chi mique donne 181/o de produit actif.
Le produit cru obtenu ci-dessus contenant l'acide 4-{ N-[1-(2-amino-4-hydroxypyrimido- [4, 5-b ] -pyrazyl) - 6-éthyl ] -amino ? -benzoylglut- amique est purifié comme indiqué ci-après. 3 parties (réelles) de la matière crue sont mélangées avec 6 parties de chaux dans 3000 parties d'eau . On chauffe à 60 C et enfin on filtre le mélange. On ajuste le pH du filtrat à 10,8 à l'aide de chlorure aqueux de zinc et on filtre de nouveau.
En ajoutant du chlorure de zinc jusqu'au pH de 6,8 à 80 -C, un sel de zinc de l'acide désiré précipite et on le filtre à chaud. On mélange ensuite le gâteau de sel de zinc avec, 3000 parties d'eau et de la soude caustique pour porter de pH à 12 en viron. La bouillie est ensuite ajustée de nou veau au pH de 6,8 à l'aide de chlorure de zinc, puis filtrée. On précipite une troisième fois le sel de zinc de la même faon. Le gâteau est ensuite mélangé avec 4,5 parties de chaux et 700 parties d'eau à 90 C, on filtre, on acidifie jusqu'au pH de 3, puis on refroidit et. on filtre.
Le gâteau est ensuite mélangé avec 6 parties de carbonate de magnésiiuu et 460 parties d'eau à 90 C. On ajoute 1,6 parties de char bon de bois et l'on filtre la bouillie avant de l'acidifier au pl-I de 3, puis on refroidit et on filtre. Le rendement est. de 1,81 parties et l'analyse chimique donne 791/o de produit actif.
Exemple <I>2:</I> Un mélange de 25,7 g de sulfate de 2,4,5- tr iamino-6-hydroxypyrimidine monohydraté, 24,4 g de chlorure de baryum dihydraté et 700 cm3 d'eau sont chauffés pendant 10 mi nutes à 60 C. Après avoir refroidi à 40 C, on ajoute 32,4 g de p-méthylaminobenzoyl- glutamate disodique, puis on règle le mélange à un pH de 3 à 4.
Simultanément et à 40 C, on ajoute des solutions de 21,6 g de 2,3-di- bromopropionaldéhyde dans de l'acide acéti que, de 12,5 g d'iode et 25 g d'iodure clé po tassium dans 100 cm3 d'eau, et enfin clé la soude caustique pour maintenir le pH à 3 à 4.
L'acide 4- [N- (2-amino-4-hydrobypyrimido- [4,5-b] pyrazyl-6-éthyl-N-méthylamino]-ben- zoylglutamique cru ainsi isolé possède une activité antagoniste par rapport à l'aide pté- roy1glutamique. La moitié de la matière crue, préparée de la façon indiquée ci-dessus, est chauffée avec 2 litres d'eau et 9 g de chaux pendant. 40 mi nutes.
Après avoir ajouté 25 g d'auxiliaire de filtration, filtré et lavé, on traite le filtrat avec 25 g supplémentaires d'auxiliaire de fil tration et une solution de chlorure de zinc à 101/o jusqu'au pH de 10,99 et l'on filtre. On chauffe le filtrat à 80 C et l'on- ajoute une solution de chlorure de zinc à 20 % pour obte- nir un pH de 6,9.
Après filtrage à l'aide de 25 g d'auxiliaire de filtration, on traite le gâteau avec 3 litres d'eau et de la. soude caus tique jusqu'au pH de 11 à 12 à 80 C pendant 10 minutes. A 80 C, on ajoute une solution de chlorure de zinc à 20 0% pour abaisser le pH à 6,9. On sépare par filtration un sel de zinc et on renouvelle six fois encore l'opéra tion de précipitation décrite. La pureté du produit s'améliore à chaque précipitation. Finalement, on acidifie jusqu'au pH de 3 pour régénérer l'acide.