Procédé de préparation d'acide ptéroy1glutamique. La présente invention se rapporte â un procédé de préparation d'une ptéridine substi tuée, soit d'acide ptéroylglutamique, composé bioloâiquenient actif.
Le procédé selon l'invention est caracté risé en ce qu'on fait réagir de la 2,4,5-tri- amino-6-hydroxypyrimidine, un acide mueo- halique ou un dérivé fonctionnel d'un tel acide et de l'acide p-aminobenzoylglutamique. On peut représenter la réaction, lorsqu'on utilise l'acide mueohalique lui-même, par l'équation globale suivante
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clans laquelle Y représente un halogène.
Le composé obtenu est un solide jaune à brun l-ougeâtre qui se dissout difficilement dans l'eau et, dans les solvants organiques. On peut l'utiliser pour stimuler la formation de l'hémoglobine et dans le traitement de l'agra nulocytose. La 2,4,5-triamirio-6-hy droxy pyrimidine est. un composé connu, qui peut exister sous une ou plusieurs formes tautomères.
Ces formes tautomères réagissent de manière analogue dans les mêmes réactions chimiques et peuvent être employées l'une pour l'autre, L'acide mucohalique préféré est l'acide mucobromique dont l'une des formes tauto- mères peut être dénommée acide u,fl-dibromo- fi-formylacry ligue. On peut également utiliser d'autres acides mucohaliques, par exemple l'acide mucochlorique, ou leurs dérivés fonc tionnels, notamment leurs esters méthylique, éthylique, propylique, butylique, etc.
On peut préparer l'acide p-aminobenzo#-1- glutamique en faisant réagir du chlorure de p-nitrobenzoyle avec de l'acide glutamique et en réduisant le groupe nitro en groupe amino.
La température opératoire peut varier considérablement de 0 jusqu'à 100 C ou même plus. De même, la réaction se produit dans de larges limites de pH et il ne semble pas exister de limites d'acidité ou d'alcalinité. Toutefois, les meilleurs résultats sont. obtenus avec un pH compris entre 3 et 5.
On peut effectuer la réaction en mélan geant en même temps les trois réactifs ou en faisant d'abord réagir l'acide mucohalique avec l'un des deux autres réactifs avant d'ajouter le troisième réactif au mélange réactionnel.
On utilise habituellement une solution ou une suspension des réactifs dans un solvant tel que l'eau, l'alcool éthylique, l'acétone, le benzène, le tétrachlorure de carbone, le chlo roforme, etc., ou des mélanges de ces solvants.
Le procédé selon la présente invention est décrit avec plus de détails dans les exmples suivants.
<I>Exemple 1:</I> On fait bouillir au reflux au bain-marie pendant 2 heures un mélange de<B>9,9</B> parties d'acide mucobromique, 15,4 parties d'acide p-aminobenzoylglutamique et 80 parties en poids d'alcool éthylique. A ce mélange on ajoute 5 parties de 2,4,5-triamino-6-hydroxy- pyrimidine et on fait. bouillir au reflux de nouveau pendant 1 heure. On ajoute 5,85 parties d'acétate de sodium et on poursuit. le reflux pendant encore deux heures. Le mé lange est enfin étendu au moyen d'un volume égal d'eau, rendu acide avec 1.0 parties d'acide chlorhydrique concentré, soumis au reflux pendant une heure et laissé au repos pendant la nuit.
On élimine l'alcool et les goudrons, puis on traite par du charbon de bois activé. Le produit est isolé en amenant la solution à un pH compris entre 3 et 5, et filtré. On le lave, à l'eau, à l'alcool, à l'éther et on sèche. Le produit obtenu, l'acide ptéroy lglutamique, présente une activité biologique qui se mani feste dans la stimulation de la croissance de Lactobacillus casei.
L'acide libre est facilement soluble dais les solutions aqueuses alcalines avec forma tion des sels correspondants. Il est également soluble dans les solutions aqueuses d'acides forts, son minimum de solubilité étant à. pH 3 environ.
Exemple ,?: On ajoute à une solution de<B>1,09</B> partie de 2,4,5-triamino-6-hydroxypyi iniidine clans 100 parties d'eau à la température ordinaire 2 parties d'acide mucobromique dissous dans l'éthanol. Le produit isolé et séché donne la courbe d'absorption dans l'ultra-violet earac- téristique de l'acide 2,4,5-triamino-6-hydroxy- py r imidylmucobromique.
On chauffe au reflux pendant 3 heures et demie un mélange dq 1,5 partie d'acide 2,4, 5-tri- amino - hy droxypyrimidylniucobromique, 1,0:5 partie d'acide p-aminobenzoylgliitamique, 20 parties d'éthanol et 2 parties de pyridine. Le produit est isolé et séché. Il stimule efficace ment la croissance de Lactobacillus casei: c'est le même produit que celui obtenu dans l'exemple 1.
Process for the preparation of pteroy1glutamic acid. The present invention relates to a process for the preparation of a substituted pteridine, or pteroylglutamic acid, a biologically active compound.
The process according to the invention is characterized in that 2,4,5-tri-amino-6-hydroxypyrimidine, a mueohalic acid or a functional derivative of such an acid is reacted with p-aminobenzoylglutamic acid. We can represent the reaction, when using the mueohalic acid itself, by the following global equation
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in which Y is halogen.
The compound obtained is a yellow to brownish-brown solid which dissolves with difficulty in water and in organic solvents. It can be used to stimulate the formation of hemoglobin and in the treatment of agra nulocytosis. 2,4,5-triamirio-6-hy droxy pyrimidine is. a known compound, which may exist in one or more tautomeric forms.
These tautomeric forms react analogously in the same chemical reactions and can be used interchangeably. The preferred mucohalic acid is mucobromic acid, one of the tautomeric forms of which can be referred to as u, fl acid. -dibromo- fi-formylacry league. It is also possible to use other mucohalic acids, for example mucochloric acid, or their functional derivatives, in particular their methyl, ethyl, propyl, butyl, etc. esters.
P-Aminobenzo # -1-glutamic acid can be prepared by reacting p-nitrobenzoyl chloride with glutamic acid and reducing the nitro group to an amino group.
The operating temperature can vary considerably from 0 to 100 C or even more. Likewise, the reaction occurs over wide pH limits and there does not appear to be any limits on acidity or alkalinity. However, the best results are. obtained with a pH between 3 and 5.
The reaction can be carried out by mixing all three reagents at the same time or by first reacting the mucohalic acid with one of the other two reagents before adding the third reagent to the reaction mixture.
Usually a solution or suspension of the reagents in a solvent such as water, ethyl alcohol, acetone, benzene, carbon tetrachloride, chloroform, etc., or mixtures of these solvents is used.
The process according to the present invention is described in more detail in the following examples.
<I> Example 1: </I> A mixture of <B> 9.9 </B> parts of mucobromic acid, 15.4 parts of p- acid is boiled under reflux in a water bath for 2 hours. aminobenzoylglutamic and 80 parts by weight of ethyl alcohol. To this mixture are added 5 parts of 2,4,5-triamino-6-hydroxy-pyrimidine and the mixture is carried out. boil at reflux again for 1 hour. Add 5.85 parts of sodium acetate and continue. reflux for a further two hours. The mixture is finally diluted with an equal volume of water, made acidic with 1.0 parts of concentrated hydrochloric acid, refluxed for one hour and left to stand overnight.
Alcohol and tars are removed, then treated with activated charcoal. The product is isolated by bringing the solution to a pH between 3 and 5, and filtered. It is washed with water, alcohol, ether and dried. The product obtained, pteroylglutamic acid, exhibits a biological activity which manifests itself in the stimulation of the growth of Lactobacillus casei.
The free acid is easily soluble in aqueous alkaline solutions with formation of the corresponding salts. It is also soluble in aqueous solutions of strong acids, its minimum solubility being at. pH 3 approximately.
Example,?: To a solution of <B> 1.09 </B> part of 2,4,5-triamino-6-hydroxypyi iniidine in 100 parts of water at room temperature is added 2 parts of mucobromic acid dissolved in ethanol. The isolated and dried product gives the characteristic ultraviolet absorption curve for 2,4,5-triamino-6-hydroxy-pyryimidylmucobromic acid.
A mixture of 1.5 parts of 2,4,5-tri-amino-hy droxypyrimidylniucobromic acid, 1.0: 5 part of p-aminobenzoylgliitamic acid, 20 parts of ethanol is refluxed for 3.5 hours. and 2 parts of pyridine. The product is isolated and dried. It effectively stimulates the growth of Lactobacillus casei: it is the same product as that obtained in Example 1.