CA2176324A1

CA2176324A1 - Procede d'identification bacterienne et de determination de la sensibilite de bacteries a des antibiotiques et appareil et supports de mesure pour la mise en oeuvre de ce procede

Info

Publication number: CA2176324A1
Application number: CA002176324A
Authority: CA
Inventors: Jean Bajard
Original assignee: Jean Bajard; Pasteur Sanofi Diagnostics
Current assignee: Bio Rad Innovations SAS
Priority date: 1995-05-12
Filing date: 1996-05-10
Publication date: 1996-11-13
Also published as: US6107082A; US5863754A; JPH09117300A; AU726241B2; AU5221596A

Abstract

La présente invention concerne un procédé d'identification bactérienne et de détermination de la sensibilité de bactéries à des antibiotiques, ainsi qu'un appareil et des supports de mesure pour la mise en oeuvre de ce procédé. Procédé consistant à introduire manuellement, au moyen d'un outil de prélèvement et de transfert, un volume donné de colonie bactérienne dans un récipient primaire (101) à réaliser automatiquement la dispersion de cette colonie bactérienne au sein d'un liquide pour constituer un inoculum précalibré dans ledit récipient primaire (101), à effectuer également automatiquement des transferts totaux ou partiels de cet inoculum précalibré entre ledit récipient primaire (1) et un ou plusieurs supports de mesure (104, 105), lesdits transferts étant réalisés sans que l'inoculum précalibré soit mis en contact avec un élément autre que, d'une part, un outil de prélèvement et de transfert (101'; 101) et/ou le récipient primaire (101) et, d'autre part, son ou ses supports de mesure finaux (104, 105) et de telle manière que les quantités de bactéries transférées correspondent aux quantités requises pour les analyses à réaliser, à effectuer automatiquement la répartition de l'inoculum précalibré, éventuellement après l'avoir convenablement dilué pour aboutir à une calibration définitive, dans une ou plusieurs alvéoles (132, 137, 145) desdits supports de mesure (104, 105) contenant pour laplupart des réactifs appropriés et à faire des mesures sur le contenu desdites alvéoles (132, 137, 145) pendant ou à la fin d'une ou plusieurs incubations subies par l'inoculum dans lesdits supports de mesure (104, 105), les mesures relevées étant enregistrées par un moyen informatique (108) et traitées en vue de la caractérisation de la croissance des bactéries présentes dans l'inoculum, de leur identification et/ou de la détermination de leur sensibilité à différents antibiotiques.

Description

2~7~324 I
D E S C R I P T I O N
La prfsente invention conceme le domaine de la I~Pl~ iolo~;c et plus l~r Li-,.d;~ des analyses bd~liolog, notamment l'irlr-ntifir~ inn I de bactéries et la d~,l . de la resistance de bactéries à différents 1, ou ' ~, . et a pour objet 5un procédé d'i ' ' ~ ' et de '' de la sensibilité des bactéries à des ' La présente invention a pour but, en paTtant d'une colonie, nui d'un inoculum ou suspension l -' d'effectuer, d'une part, une (... de bactéries à partir d'un ensemble de caractères mesures par lû l.l...l..,..fl.;., ainsi que, d'autre part, des essais de croissance en présence d'un nombre optimum d' '$ pour constater par l,t"l .~T.'. ..~I, ;. Ieur action sur lesdites bactéries, en vue de l'obtention d~un A"~ ;l, ,~ . ,.".. . ,~
A cet effet, il est intéressant de rfealiser, lors d'un même essa;, un ma~imum de mesures avec des ,.,.1;1.;~ .c différents.
L'inoculum est une suspension de bactéries associée à un échantillon et à un patient. Sa ~l~ald~ l s'effectne 'Ir-mr-n~ par transfert dans une solution aqueuse d'une ou de plusieurs colonies cultivées dans un milieu de culture sous fomme d'un gel ou d'éléments préparés à partir d'urine ou d'une l-..'. . ,r.~
En effet, après détection de présence de bactéries par contrôle, par exemple de la variation du CO2 au-dessus d'une cultnre. de l'échantillon à analyser, il est procédé
à un repiquage de ce demier dans une deuxième culture sous fomme d'un gel, ce repiquage ayant pour effet un isolement d'un type spfcifique de bactéries au détriment des autres et pemmettant l'obtention d'une souche ' ' Cette souche est utilisfe ensuite pour réaliser l'inoculum par mise en suspension dans une solution aqueuse.
t~ ' ' ' t, les bactéries en suspension dans les inoculums présentent une virulence l~ réduite, due au traitement de préparation, ce qui entraîne des difficultés pour une ~ l;on rapide, les différentes mises en culture avec les réactifs se ~, ' I, I~,ld~ lL lentement.
On connaît ~rhlr-ll~~~ différents procédés et dispositifs pemmettant la rfealisation d'un ' ~ mettant en oeuvre en tant que support où
b'~'" ' ' les mesures, soit des récipients i , . individuels de réception deculture1,~1' ~ A-2091 133), soitdes recipients i , multiples `~ ~ 217~324 disposés sous forme d'alYéoles sur des plaques planes (~ -A-24~f9 891, EP-A-0 253 685, DE-A-25 21025 et US-A-3 942 899).
Ces procédés et dispositifs consistent "' ' ' à dépl_cer le ou les supports de mesure dev_nt une source de .~, lumineux, et à mesurer 5 dans une ou plusieurs directions l'intensité lumineuse du faisceau après qu'il ait traversé le ou les récipients et leur contenu.
L': ' du ou des récipients en solution b~t.,l est effectuée de manière connue, soit au moyen de pipcttes manuelles, soit au moyen d'un dispositif de pipetage - ~f ~ selon EP-A-0 522602, les différents ' , étant mis en place I " d~ns les différents rccipients avant leur , ' ,, Par ailleurs, Fl?-A-2 354 554 décrit un récipient ~
tubulaire permettant la dispersion -~ d'une culture 1,~' dans différents , pC.,'', Ces . p~ ,'', peuvent être munis chacun, ~"t.-l-~.l.. : à leur ' en culture ~ ' d'~ ' , disposés dans leur fond sous forme de réactif déshydraté.
On connaît également, par FR-A-2 280 895, un dispositif de ~.. adapté à une utilisation en n.'.~ flr .':; ou en ~ ",~;, se présentant sous forme d'un disque muni sur sa périphérie d'alvéoles de réception20 d'un réactif, sous forme solide et d'une solution ~ ' , la solution 1,~1' étant transférée à par~fir d'une chambre centrale vers les différentes alvéoles, par c. .1, ir, ,"";. .
Ces différents procédés et,dispositifs connus permetterlt, par séries de mesures distinctcs, au moyen de contenants distincts, d'effectuer des mesures25 en1' ~.~ etenI.rl,l,fl!.,..I,;~.
Cependant, ces dispositifs et procédés connus ne permettent pas d'effectuer Mri~ nn~nf et ~c~ . ces mesures sans i...41~ manuelle, ni avec une alim~ntafifm . des supporfs de mesure à par~ir d'un même contenant, tout en autorisant également la réalisation d'opérations 30 d'i~ i-.. et d'~ J;U~;lallllllC, même à partir d'un inoculum initial très peu concentré.
La présente invention a pour but de pallier ces ~ .ll~ en proposant un procédé et des moyens permett~nt des i.1...1;ri.~i.... et des d ' ~ , sans i..t~ iu.l manuelle sur les milieux.
A cet effet, elle a pour objet un procédé d' ' ~i~ L.
et de .'' de la sensibilité de bactéries à des ' , sous forme d'~ " , cis}actérisé en ce qu'il consiste à introduire " t, au 32~

-3 -moyen d'un outil de plCI~ et de transfert, un Yolume donné de colonie bc~ dans un récipient primaire, à réaliser ~. la dispersion de cette colonie 1. - ~f'.,;., au sein d'un liquide pour constituer un inoculum au moins précalibré dans ledit récipient primaire, à effectuer également 5 ~ des transferts totaux ou partiels de cet inoculum précalibré entre ledit récipient primaire et un ou plusieurs supports de mesure destinés à réaliser, t, soit l'ifl...,~ . soit l'~llib;u~, ou encore ces deux nf ml nf en une seule opération combinée, lesdits transferts étant réalisés sans que l'inoculum précalibré soit mis en contact avec un élément 10 autre que, d'une part, un outil de ~,IC.l~,.. et de transfert etJou le récipient primaire et, d'autre part, son ou ses supports finaux et de telle manière que les quantités de bactéries transférées c~ ' aux quantités requises pour les analyses à réaliser, à effectuer ~ . la répartition de l'inoculum précalibré, ~. 'I après l'avoir ~ dilué pour aboutir à une 15 calibration définitive, dans une ou plusieurs alvéoles desdits supports de mesure contenamt pour la plupa~t des réactifs appropriés, à réaliær, dans certains cas,ui pour l'~ a.~11..1f-, à l'intérieur d'un support de mesure, une opération dite de pré-croissance destinée à mettre les bactéries en état de se multiplier rAriflr.Tnf-nf avant de les soumettre à analyse et à faire des mesures sur 20 le contenu desdites alvéoles pendant ou à la fin d'une ou plusieurs subies par l'inoculum dans lesdits supports de mesure, les mesures relevées étant _a;~llc~ par un moyen informatique et traitées en vue de la . - ,- If.;~ ... de la croissance des bactéries présentes dans l'inoculum, de leur ' ~ et/ou de la '.~ de leur ænsibilité à différents ' L'invention a également pour objet des appareils et des supports de mesure, sous forme de c, ' ' pour la mise en oeuvre de ce procédé et de variantes de réalisation de ce dernier, qui seront dccrits en détail en regard des dessins énumérés ci-après.
L'invention sera mieux comprise, grâce à la description ci-après, qui se rapporte à des modes de réalisation préférés, donnés à titre d'exemples non limitatifs, et expliqués avec référence aux dessins sf~h~n~ . annexés, dans lesquels:
la figure I est une vue de dessus de l'intérieur d'un appareil pour la mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention, selon un premier mode de réalisation;
la figure 2 est une vue en élévation latérale et en coupe de l'appareil suivant la figure l;

~17~32~

la figure 3 est une vue en élévation latérale et en coupe d'un SUpport de mesure selon l'invention;
la figure 4 est une vue en p~.~liv~, et l = ~i 11....,~ -~ en coupe d'un support de mesure représenté à la figure 3;
la figure 5 est une vue de détail à une échelle différente d'une partie du support de mesure représenté à la figure 4;
la figure 6 est une vue simplifiée de dessus et par , ~Ic~i d'un support de mesure selon l'invention;
les figures 6A et 6B sont des vues de détail et en perspective, à une 6chelle différente, de deux parties distinctes du support de mesure représenté à la figure 6;
la figure 7 est une demi-vue en coupe I v. ' et en élévation latérale d'un support de mesure monté dans un poste de mesure et de la figure 8 est une vue partielle en coupe et en perspective d'un support de mesure monté dans un poste de mesure et de ~ irl.S~liull;
la figure 9 est une vue en p~ iV~ et ~ Li~ en coupe d'un couvercle formant la paroi supérieure d'un support de mesure représenté à la Flgure 3;
la figure 9A est une vue en détail, selon une autre perspective, d'une partie du couvercle représenté à la figure 9;
la figure 10 est une vue simplifiée en perspective d'un corps principal faisant partie du support de mesure représenté à la figure 3;
la figure 11 est une vue en 61évaaon latérale et en coupe d'un ensemble r6cipient primaire / outil de IJI~I~V~ III et de transfert;
la figure 12 est une vue en coupe d'um outil de IJII~ V. ' et de transfert;
les figures 13 et 14 sont des vues ,~ ,~liv. en élévation lat6rale et en perspective d'un outil de ~ ,v~ l et de transfert;
les figures 15A à ISJ montrent différentes phases de ", su,~iv~;, de la préparation d'un inoculum précalibré dans le récipient primaire et de son transfert au moins partiel dans un support de mesure;
la figure 16 est une vue en élévation et en coupe d'un appareil pour la mise en oeuvre d'une variante de réalisation du procédé conforme à rinvention;
la figure 17 est une vue en plan et en coupe, au niveau inférieur, de l'appareil suivant la figure 16;

` ~ 217~32~

la fiOure 18 est une vue analogue à celle de la figure 17 de l'appareil au rliYeau supérieur;
la fiOure 19 est une vue en p~ éclatée d'un récipient primaire sdon une variante de réalisation de l'invention, ~u~ ' à l'appareil de la S fiOure 16;
la figure 20 est une vue en perspective par le dessous du récipient primaire de la figure 19;
les figures 21 à 23 sont des vueS ' ' . en coupe ., . ~
le récipient primaire de la figure 19 pendant les étapes successives de préparation 10 de l'inoculum;
la fiOure 24 est une vue en perspective éclatée, L '-arrachée, d'un support de mesure pour 1" ' = destiné à être mis en oeuvre dans l'appareil des figures 16 à 18;
la figure 25 est une vue en coupe du support de mcsure de la figure IS 24 pour 1' ' ~ muni d'un récipient primaire associé;
la figure 26 est une vue analogue à celle de la figure 24 IG~l~c~
un support de mesure pour rlll;l.;.JS.. - destiné à être mis en oeuvre dans l'appareil des fiOures 16 à 18;
la fiOure 27 est une vue en perspective I " arrachée du support suivant la figure 26 avant inoculation;
la fiOure 28 est une vue analoOue à celle de la figure 25 .G~Ié,~
le support de mesure pour P"~ ' O en position de r~Spartition de l'inoculum dans les alvéoles, et ;.
Ia figure 29 est une vue en p.,l~u~li~ et en coupe d'une variante de réalisation du récipient primaire de la figure 19 pour le traitement d'un matériel bactérien de faible volume, sans calibration - 1 C~ r ~ à l'inYention, le procédé d'i.l .~ S:
et de il~t~ de la sensibilité de bactéries ~ des Pntihi-~ti~, , sous forme d~ ., consiste à introduire mPnllrll~ m~-nt, au moyen d'un outil 101' de Ul~ ' et de transfert, un volume donné de colonie b~b' dans un recipient primaire l; 101 à réaliser Pllt~ ' la dispersion de cette colonie ,i' au sein d'un liquide pour constituer un inoculum au moins précalibré
dans ledit rwipient primaire l; 101, à effectuer également _ . des transferOE totaux ou partiels de cet inoculum pr~Scalibré entre ledit récipient primaire 1; 101 et un ou plusieurs supporOE de mesure 4, S; 104, 105 destinés à
réaliser, I~UWIi~. t, soit 1' ' soit 1' 'i' ~ ou encore ces deux ~''' ' ' en une seule opération combinée, lesdiOE

-l 217632~

transferts étant réalisés sans que l'inoculum précalibré soit mis en contact avec un élément autre que, d'une part, un outil de ~ i et de transfert 101'; 1, 101 et/ou le récipient primaire l; 101 et, d'autre part, son ou ses supports de mesure finaux 4, 5; 104, 105 et de telle manière que les quantités de bactéries transférées S ~u~ J~ l aux quantités requises pour les analyses à réaliser, à effectuer la répartition de l'inoculum précalibré, C., " après l'avoir e ~. ' ' dilué pour aboutir à une calibration définitive, dans une ou plusieurs alvéoles 32, 37, 45; 132, 137, 145 desdits supports de mesure 4, 5; 104, 105 contenant pour la plupart des réactifs appropriés, à réaliser, dans certains cas, n~ ~ ' pour 1'- '~ à l'intérieur d'un support de mesure 4; 104 une opération dite de pré-croissance destinée à mettre les bactéries en état de se multiplier ., ' avant de les soumettre à analyse et à faire des mesures sur le contenu desdites alvéoles 32, 37, 45; 132, 137, 145 pendant ou à la fin dbne ou plusieurs ' - subies par l'inoculum dans lesdits supports de mesure 4, 5;
104, 105, les mesures relevées étant ~ LI~ par un moyen ' ~ , 8;
10~ et traitées en vue de la .~ t,~ i.... de la croissance des bactéries présentes dans l'inoculum, de leur j.l~ iri~ .. et/ou de la cl' de leur sensibilité
à différents ~ ,Li(l_cs.
Selon un premier mode de réalisatioD de l'invention, le LIICI~
20 d'un volume donné de colonie b~ ' - et les transferts des volumes d'inoculum précalibré dans les supports de mesure 104, 105 sont effectués au moyen d'un outil unique de ~ICI~.~. et de transfert 101' coopérant, par exemple par ~,...b ^ étanche, avec le récipient primaire 101, les volumes d'inoculum précalibré à transférer étant déterrninés à partir de mesures optiques de la 25 ---~ dudit inoculum, effectuées dans le récipient primaire 101, et calculés en fonction des quanLités de bactéries nécessaires.
Le ~ . et l'i- l.~ ' ~i dans le récipient primaire 101 d'un volume donné de colonie bactérienne sont effectués au moyen de l'outil 101' de pl~ lL et de transfert après sa mise en ~., ro,---,-~ -- en vue de prélever le volume souhaité (sélection d'un volume parmi deux volumes différents .' j ' ' ) et les transferts d'inoculum précalibré du récipient primaire 101 vers les supports de mesure 104, 105 sont réalisés par pipeLage de volumes d'moculum , ~. ., Le transfert de l'inoculum à l'intérieur des supports de mesure 104,105, noLarnment vers les alvéoles 132, 145, est contrôlé
ou activement par commande de l'ouverture ou du blocage ` ' 217632~

étanche de passages successifs conduisant L~lu~l~a~i~. verS lesdites alvéoles 132, 145.
Dans le cadre de la mise en oeuvre de supports de mesure servant à
la . ' ' des ' ~, ou à réaliser des ~' ' combinées S d'~ et d'i ' ~ la pré-croissance de l'inoculum calibré est réalisée par une première incubation, dite pré-incubation, pendant laquelle les bactéries présentes dans l'inoculum sont incubées sans etre mises en présence deréactifs et ce jusqu'à ce qu'un début de croissance bactérienne soit mesurable ou jusqu'à ce que la: 1,~1 ' atteigne un niveau prédéfini, cette pré-10 croissance étant suivie de la mise en contact de l'inoculum avec les réactifs etd'une incubation finale pendant laquelle leurs sont observées.
Cl ' ' à un mode de réalisation pratique avantageux de l'invention, la répartition de l'inoculum dans les alvéoles 32, 37, 45; 132, 137, 145 situées en périphérie des supports de mesure4,5; 104, 105 est réalisée par ' ' r ~ " , les mesures et les ùla.,l ~aliu.. ~ effectuées au rliveau desdites alvéoles 32, 37, 45; 132, 137, 145 étant effectuées par mise en rotation des supports de mesure 4, 5; 104, 105 autour de l'axe central de rU~lliOIl desdits supports.
De plus, il peut être prévu, ~ ................... f. -: à l'invention, que la mesure de la c~ l.. 1. A~ de l'inoculum bactérien et la d~i du début de croissance, pendant la pré-croissance dans un support de mesure 4; 104 d' ~ ...., sont réalisées par des mesures ~ effectuées sur une paltie aliquote de l'inoculum transférée à cet effet, par une première dans une alvéole ~,' ,' ' ~ spécifique 37; 137 dédiée à la 25 ~ de la croissance pendant la pré-incubation et ne cûntenant pas de réactifs, le reste d'inoculum restant bloqué pendant la pré-incubation dans une chambre , centrale 27; 127 dudit support 4; 104, avamt d'être transféré, après a~ IL de la pré-croissance dans les autres alvéoles p~Srirh~ri~ 32; 132 par une deuxième ~ iru~;~Liu.-, précédée d'une action 30 d',.,.l~ ..l ou de déblocage app~opriée ouvrant le passage pour le transfert du reste de l'inoculum vers lesdites autres alvéoles 32; 132 contenant des réactifs.
En vue d'éviter toute ~ ;.... de l'inoculum calibré ou non présent dans le support de mesure ~ Lil,io~, - 104, le passage de l'étape de pré-incubation à l'étape d'ill~.UbdLiUU est effectué sans rupture du de 35 I'intérieur du support rotatif de mesure concemé 104 par rapport à l'extérieur, ledit support restant clos et ledit passage étant réalisé par , d'une action sur un élément obturateur participant à la réalisation de ce c~ -`` ~ ~17632~

Selon un mode de rf~alisation ~.f,lé. -' de l'invention, les mesures pl.ùl " , sont réalisfes par i.~l,hf ~ fllh~ pour les supports de mesure 4;
104 servant à l'àlllibio~,.dll.. llci et par ,'' d'~ ou de densité
optique pour les supports de mesure 5; 105 servant à 1' ' ~ ou aux 5 ~1~ b , -, -~ ;. ."c combinées i~ 10 ` /all~ibicv 11 est également possible, par addition d'un marqueur fluorogène au rfactif, de r6aliser des mesures fl~ rirr f~ri~ -L'invention a également pour objet un support de mesure en forme dedisque, pouvant I être av. ~, ' mis en oeuvre dans le cadre du 10 proc6dé df,crit ci-dessus, mais qui peut également trouver une application plus g6nérale dans d'autres proc6dfs d'analyse ou d'i. l. ~ ;.... mettant en oeuvre des supports de mesure rotatifs et rfealisant des transferts contrôlf,s des substances à
analyser à l'intérieur desdits supports de mesure.
Comme le montrent les figures 3 à 15 des dessins annexés, le support de mesure 104, 105 comprend un corps principal rigide 126 délimitant, sous formede C---l ~ - lt` non 11 . une chambre centrale 127 et plusieurs alvéoles ~f i~l- ' i.l., s 132, 145 associf,s, chacune, à une niche de captage 146.
cullr~ ' à l'invention, le corps principal 126 présente une paroi supérieure 128 pourvue de plusieurs ensembles d'orifices de transfert traversants 129, 130, 131, 133 .'" ' rc~i~, dans la chambre centrale cylindrique 127, dans chaque niche de captage 146 affectée à chaque alvf,ole 132, 145 et dans chacune desdites alvéoles 132, 145 et recouverte, à
l'exception diune portion centrale entourant l'orifice de ullal~ ; 134 de laditechambre centrale 127 et de la zone des fenêtres de mesure des alvf,oles 132, 145, par une membrane flottante étanche affleurante 135 fix6e localement et hPrmfr:qr- nrlt~nPnt à proximité de la périphérie externe du support de mesure et autour de l'orifice de ul~b 134 de ladibe paroi sup6rieure 128 et pouvant être pressée contre la surface supérieure de ladibe paroi 128 pour forrner des zones de contact ~ v~ t,s étanches s'étendant entre ou recouvrant certains desdites ensembles d'orifices traversants 129, 130, 131, 133, n~r~ - au cours de la rotation dudit support de mesure.
On notera que, grâce à cetbe disposition, le transfert de lâ substance à
analyser ou à identifier, telle qu'un inoculum bactérien, injectf,e ' dans la chambre centrale 127, vers les alvf,oles de mesure 132, 145 situf,es en périphérie dudit support 104, 105, peut être rf~alisé lu.u~ . et de manière controlf~e en fonction des opérations successives à effectuer.

`` ~ 2176324 g Selon un mode de réalisation préférentiel de l'invention, la paroi supérieure 128 comporte, au niveau de sa face supérieure, des rainures ou des .~ ~ annulaires , 140,140' dans lesquel(le)s .i~bo-.-' les orifices traversants 129, 130, 131, 133 disposés selon des cercles ~ ,u~,~
espacés, la rainure intérieure 140 . ., une nervure 136 formant surface de contact annulaire et séparant les orifices de sortie 129 de la chambre centrale 127 et les orifices d'entrée 130 de la chambre ,. . armulaire 147 Cu~
les niches radiales de caphge 146, et les orifices de sortie 131 des niches de captage 146 ~'" ' au niveau de la face supérieure d'une ner~ure circulaire . . ou de structures ~.u.' distinctes 138, par exemple sous forme de dômes, disposée(s) dans la rainure extérieure 140', les extrémités supérieures de la nervure 136 et des structures 138 étant situées dans un plan ou des plans s'étendant l~gèrement en retrait du plan de collage de la membrane éhnche affleurante 135.
La pr6vision de points ou de zones d'appui de la membrane 135, u.' ~(e)s par rapport à la surface avoisinante des fonds de rainures annulaires 140, 140' ménagées dans la face supérieure de la paroi supérieure 128, mais s'arrêtant au moins légèrement en dessous du plan de collage de la membraneaffeurante 135, et conformés avec une face supérieure restreinte et délimités par rapport à ladite surface ~.Y. . permet d'obtenir une éhnchéité ~
et :mgrn~.n~lSP, de localiser ~ ' - les zones de contact éhnches et d'aboutir à
une résishnce accrue de ces dernières à la pression exercée par la subshnce ou l'inoculum lors de la rohtion des supports de mesures 104, 105, lesdites zones de conhct étant situées aux sommets d'élévation formant obshcles à la l,.u~ ;o centripète de la substance ou de l'inoculum.
En vue de faciliter les transferts et le vidage complet de la chambre centrale 127 et des niches de caphge 146, il peut être prévu que la chambre centrale 127 comporte une paroi latérale ~ r 139 au moins légèrement inclinée vers l'extérieur en direction de la paroi supérieure 128, les orifices de sortie 129 de la chambre 127 centrale et les orifices de sortie 131 des niches de captage et d'~.,;lé~uLilion 146 étant situés '' dans l'alignement des faces intemes des parois latérales 1,'. ;1~..'. ;.1 . ~ 139', 146' de ces dernières.
Afin de diriger I ~ I ' le flux de subshnce ou d'inoculum vers les orifices d'entrée au cours de la rohtion des supports de mesure 104, 105, lesdits orifices d'entrée 130 de la chambre . , 147, . Ies niches de captage et d'~' 1 s,l 146 ~ ' sur la face supérieure de la paroi supérieure 128 au pied d'un d~., ' 141 délimihnt ' ' ' et du côté

`` ~ ~1~6324 externe le .~..!;)...,~,....,.-1 annulaire 140 interne et les orifices d'entrée 133 des alvéoles de mesure 132, 145 'Cl ' et les orifices d'entrée 133 des alvéoles à
la base ou dans un flanc incliné 141' d'un d~l- ' circulaire l~ho~rh~n~ sur une surface u~" extérieure 142 pouvant former une zone de contact ou de 5 collage externe de la membrane flottante affleurante 135.
Cette dernière présente, par exemple, une structure composite 1U...lJlCi t, par exemple, une couche externe en papier (servant de support d'i~ ulc~ ll), une couche '' .. en aluminium et une couche inteme de colle Ih.~llllo' '' ' La fixation de la membrane 135 au niveau de ses zones de c.~ .. avec la paroi supérieure 128 peut alors être réalisée en appuyant ~ ladite membrane 135 sur ladite paroi 128 au niveau desdites zones et en induisant un courant de chauffage dans la couche en aluminium, qui aboutit à la fusion de la couche de colle interne.
La nervure 136 et les structures saillantes ou u~u6,~ t~,~ 138 présentent des hauteurs telles que leurs faces supérieures sont situées légèrement en dessous du plan de collage de la membrane 135, il en résulte que cette dernière n'adhérera pas à leur niveau lors de la fusion de la couche de colle Ih r '~ !e interne.
('r,nf~ ' ' àune autre c~", r . de l'invention, Iculc;~.~.lt~e . aux figures 3, 6, 6A et 10 des dessins annexés, le support de mesure 104, 105 peut comporter une alvéole de prt,-incubation 137 identique aux autres alvéoles ~u~ ;l/I.f.;.~ 132, 145, align~e ";Icul~. avec ces dernières et . avec une pré-chambre close 143 formée dans la chambre ~ A 147 renfermant les niches de captage et d','l, 'U~iliUII 146 et alimentée en inoculum à partir d'une niche de captage interne 144 située au niveau d'une portion de la paroi latérale ~ 139 de la chambre centrale 127, par 'i. ~t. .. ~f.l _ ~c d~un passage non obturable par les zones de contact étanches 136, 138, 142 pouvant être formées entre la membrane affleurante 135 et la paroi 30 supérieure 128.
De manière ~lv ~ , le passage d' ' - - de la pré-chambre 143, c-,.."., ; ~ librement avec la chambre de pré-incubation 137 et formant également trop-plein pour les niches de captage 146, est constitué par un conduit 157, débutant dans la partie supérieure de la portion de paroi latérale E~
139 délimitant la niche de captage interne 144, formé par ~o~l,f ~ . d'une rainure ménagée dans la partie supérieure d'un ,UII ' ~ saalant radial 158 de la paroi latérale p~ ,' ', 139 de la chambre centrale 127 et de la paroi _ ~

: ~ 2~7~3~g supérieure 128 et ,''L ' dans ou à l'entrée d'une rainure 14S à extension radiale centrirète, creusée dans la face supérieure de la paroi supérieure 128, formant un conduit étanche en ~ f..^~ avec la membrane (135) ~Ire de part et d'autre de ladite rainure 148, dont l'extrémité distale se termine auS niveau d'un orifice traversant 148' ~L, ' dans la ~ bl~; 143.
La ~1~1l~llll11.l~ 143 fait saillie dans la chambre ~ .
annulaire 147 d'une distance '' égale à la longueur des portions de paroi délimitant les niches de captage 146 et présente, au niveau de la partie surérieure de sa paroi parallèle à la paroi latérale 1~ l 139 de la chambre centrale 127, un orifice capillaire très fin 143' formant passage d'~.v.l~,udioll du trop plein durant la phase d~s, ' C~Li~iu-l.
Bien que les figures 6 et 10 notammerlt ne 1~:, ' qu'un nombre limité d'alvéoles 132, 145, il est bien ~,~ ' entendu que ces dernières sont disposées sur toute la périphérie des supports de mesure 104 et 105 et sont, par15 exemple, au nombre d'environ cinquante.
G~llr~,ll.l~"l.~,.ll à un mode de réalisation ~lérél, ' du support de mesure 104, 105, la paroi supérieure 128 peut consister en un couvercle rapporté, fixé par .. ~.1.. ^~.. 1 et collage ou soudure au niveau de la paroi p~' 1' ' A
externe du corps principal 126 et comportant des orifices ~ 149 et des rainures 5llrrrfi~ c radiales 149' assurant le retour d'air au cours des transferts de la substance à analyser injectée dans la chambre centrale 127 vers la périphérie dudit support 104, 105.
Une telle réalisation du ,support 104, 105 permet de fabriquer '.él ' ses trois ~, à savoir le corps principal 126, le couvercle 128 et la membrane 135, puis de les assembler de manière adaptée, le corps principal et le couvercle 128 étant obtenus, par exemple, par moulage par injectiond'unmatériaull,..,,..,1,l- l;.l...,1,1,,~ ~ ; ,, Dans le cas d'une mise en oeuvre de deux supports de mesure rotatifs 104, 105 de natures différentes, tels que des supports rotatifs 104 pour 30 all~;G~,.alllllIC et des supports rotatifs 105 pour l~ ;ri.~;.... ces derniers pourront présenter la même . .. ~ et se dirr~.c;..~;~., , par la nature des réactifs disposés dans leurs alvéoles de mesure respectives 132, 145 et par les , ' dont ils feront l'objet au cours de leur mise en oeuvre (prévision ou non d'une phase de ~
Une telle similarité de structure des supports de mesure 104, 105, destinés à des ,, ' différentes, facilite ' ' la ~ ' de leur f~llri~ n, aboutit à un prix de revient plus faible que pour des supports 17~324 dilf~ , facilite leur ~ f~n par l~appareil de traitement et d'analyse et permet de simplifie~ la c .~ ;. ,. . de ce dernier.
Comme le montrent r les figures 3 c~t 4 des dessins annexés, I'orifice de .,I.~L, 134 de la chambre centrale 127 est situé dans un ~ r~,.. ~ll.~,l.l 134' de la paroi supérieure 128 et est obturable au moyen d'un bouchon 150 dont la pa~tie supérieure est ' ' de niveau avec la face supérieure de la paroi supérieure 128.
Ainsi aucune partie ne dépassera du plan contenant la face supérieure de la paroi supérieure 128.
Le ~ 134' pourra être délimité I ' ' par des parois formant une structure cylindrique Ll~ . dirigé Yers l'orifice de . ' ~ 134 (figures 3 et 4).
En vue de la I ' et du stockage par ~smrilPm~-n~ des supports de mesure 104, 105, le fond de la chambre centrale 127 est entouré d'un15 manchon . I 151 de préhension et de ~ , saillant au niveau de la face inférieure du support 104, 105. De plus, lesdits supports pourront également comporter des nervures de .~ ;r~ , et de guidage au niveau de leurs alvéoles p~ jl,h~, i.l....~
En outre, afm de faciliter le réglage et le calage des dispositifs de mesures 1 ' , , les supports de mesures 104, 105 peuvent comporter, chacun, une ouverture traversante 152, ayant des dimensions identiques à celles d'une alvéole 132, 145, située en alignement circulaire avec ces dernières et qui est ménagée dans le corps principal 126,;et dans la paroi supérieure 128, ladite ouverture 152 étant ~.frf., " située adjacente à l'alvéole de pré-incubation 137, de manière à permettre un repérage aisé de cettc demière.
Enfin, la paroi supérieure 128 est munie, au dessus de chaque alvcole 132, 137, 145 et près dc son bord extérieur, d'une fenêtre de mesure, une fenêtre analogue étant prévue, darls chacune des portions de paroi du corps principal 126 constituant .~,~ti~. les fonds desdites alvéoles, en regard de chaque fenêtre de mesure précitée et au moins une zone rpn ' ' d'indexation, fommée sur la face exteme de la paroi l,f- ,I-I-f I~ r exteme du corps principal 126, étant associéc à chaque alvéole 132, 137, 145 avec un décalage angulaire fixe par rapport à cette demière.
Les zones .61; ' ' inclinées crécnt dcs repèrcs optiques décalés pour Ics djfférentcs alvéolcs dc rnesure 132, 137, 145, et pcrmettent unccntragc guidé des dispositifs dc mesures 1' ' I au niveau de chacune dcsditcs alvcoles.

`` ~ 217~324 .

Ainsi, les supports de mesure 104, 105 fu..."l, un corps fermé
CU..I~Jf ~ i ~ (corps principal 126 + paroi supérieure 128) percé en des i r ~ déterminés par des orifices 129, 130, 131, 133 de faible dimension et surmonté d'une membrane étanche souple affleurante 135, permettant par actionS contrôlée sur ladite membrane et dans le cadre du procédé décrit ~
- soit de conserver la substance à analyser au centre du support de mesure considéré, pendant une phase d'l~ . f~S ~ et le cas échéant, de pré-incubation, - soit de garder la substance à analyser dans la zone de la chambre , ~ annulaire 147 et des niches radiales de captage 146, en isolant celles-ci des alYéoles de mesure 132, 145, pendant la phase d'f i Si liLioll de la substance à analyser par f rntrifil~p~ cette dernière pouvant être réalisée pendant la durée nécessaire à l'obtention d'une ', ~1 LiLiull parfaite de la substance à analyser dans lesdites niches, moyenrlant une fonction de trop-plein assurée par la ~ ,A.lLlc 143 et l'alvé~le de pr~- ~f~n 137 par l'i ' " ~ c de l'orifice capillaire 143', - soit d'ouvrir le passage entre les niches radiales de captage 146 et les alvéoles de mesure 132, 145, de manière à réaliser le transfert de la substance à
analyser desdits niches vers lesdites alvéoles au cours d'une opération de 20 f..~1~;r~
L'invention a également pour objet un appareil pour la mise en oeuvre du procédé décrit ci-dessus, représenté aux figures I et 2 des dessins annexés, ledit appareil étant c ~ ", co~stitué par un premier module 102 de support et de stockage de suRorts de mesure 104, 105 frais, tels que décrits 25 L ' '' t, et de récipients primaires 101 coopérant chacun avec un outil de ulu., et de transfert 101' I;UIIC r ~ t, par un deuxième module 103 d'- ~ des supports 104 et 105, après injection de l'inoculum bactérien, par un troisième module 106 de ~ rl.L"~ -- et de mesures rf'~ l.'.."'~ ,.., et/ou f~ eVou n ~ f'l;~l-C parunouplusieursdispositifs107,107'de transfert desservant lesdits modules 102, 103 et 106 et par un moyen illrullll~LI~u~ 108 de contrôle et de commande des différentes étapes du procédé, et d'~ . d'.,llL~ LLclll~, de traitement, d'évaluation et/ou de restitution de domnées, les deuxième et troisième modules 103 et 106 étant disposés dans uneenceinte de 5. ' ' à l'invention, les rcScipients primaires 101 sont portés par IAn moyen support 109 en forme de couronne, s'étendant f_ ~~
autour et sous un moyen support 110 en forme de disque portant les supports de `` ~ 2~7632~

mesure 104, 105, les deux moyens supports 109, 110 étant montés aYec faculté de rotation autour d'un même axe, chaque récipient primaire 101 pouvant être amené,par simple rotation dudit moyen support 109 en forme de couronne, au niYeau d'unposte 111 de rr~qni~lllqfif n de l'outil 101' de L~ .t.,l...,llL et de transfert associé et 5 de mesure de densité optique du contenu dudit récipient primaire 101.
Comme le montrent notamment les figures 11 à 14 des dessins annexés, chaque récipient primaire 101 de réception d'un volume donné de f,olonie 1,~1' et de préparation d'un inocuium au moins précalibré se présente sous la forme d'un récipient cylindrique ouvert au niveau de sa partie supérieure, 10 laquelle est munie dbn rebord radial 112 pour le maintien dudit récipient primaire 101 dans un des logements, ul.~ r ' 109' ménagé(s) dans le support mobile 109 en forme de couronne.
L'outil de ~ lll et de transfert 101' peut ~v consister en une seringue dont le corps 113 comporte une partie avant de ,u.~ . et d'éjection effilée 113' et une partie arrière 113" de stockage et de préhension '' I,y' ' . . Iadite partie arrière 113" présentant au moins un d~l. ' radial extérieur 114 au niveau de son extrémité contiguë à
la paroi avant 113' en vue d'un ,...~ ^ partiel avec blocage dudit corps 113 dans le récipient primaire 101, I'extrémité libre avant de la partie avant 113' étant 20 alors située à faible distance du fond dudit récipient primaire 101.
La partie arrière 113" peut comporter des Aul.~l-...L.~.. .~ inférieurs 159 sous forme d'ailettes radiales, s'étendant depuis le d~lu~,l..,l~l~l~ 114 etpourvues chacune d'un chanfrein latéra! inférieur 159', f,es I ", aidant au centrage de l'ullll~ ^ de l'outil lûl' dans le récipient primaire 101 et au 25 blocage de son pf '~' ' radial dans f,e dernier.
Selon une c~ ,-- f.'.;~ . de l'invention, représentée également sur les figures 11 à 14 des dessins annexés, la seringue 101' comporte, au niveau deson extrémité avant, des moyens 118, 118' pour prélever, en volume, une quantitéréduite ou une quantité normale de colonie, ' , en fonction du ~ r,.~.. ~desonpiston115.
Le piston 115 de la seringue 101' est constitué par une tige d'r- ---- - effilée 116 dont la partie avant 116' coopèr-e avec la partie avant 113' du corps 113 et peut dépasser de l'ouverture de ,UIUI~,V~ ' et d'éjection 113"' de ladite partie avant 113' du corps 113 par son extrémité libre, lorsque le piston 115 est totalement enfoncé dans le corps 113, ladite tige d'r 116 présentant un dC~ ' ' radial 116" venarrt buter avec, ~ de _ _ _ _ , _ , _ , , _ _ _ , _ _ _ _ _ _ `. 217632~

forme sur le fond 117 du volume interne de la partie arrière cylindrique 113" ducorps 113, lorsque ledit piston 115 est; ` ~ enfoncé dans ledit corps 113.
Le fond du récipient primaire 101 peut présenter, comme le montre la figure 11 des dessins annexés, un ,, F~ ' central 160 pour la réception de S I'extrémité libre avant de la tige d'i 116 lorsqu'elle dépasse l'extrémjté
avantdelapartieavant 113'ducorps 113.
Afln de pouvoir obtenir dans le récipient primaire 101 un inoculum au moins précalibré par une ~.1f au moins grossière de la quantité
d'éléments de colonie ~ ' prélevée (~.CI~ l manuel ou micro-0 ~ . t), fonction notamment du type d'analyse envisagé, les extrémitéslibres des parties avant 113', 116' du corps 113 et de la tige d'ilr'i' 116 du piston 115 sont pourYus d'un .1~., ' ou d'un 11 C, 118, 118' formant des surfaces ou des volumes de p.~ . de quantités ~
différentes de colonie ~ ' I'extrémité libre de la partie avant 116' de la 15 tige 1'. 116 étant, ~ pour le ~ lorsque le piston 115 est ` 111~..1 enfoncé et l'extrémité libre de la partie avant 113' du corps 113 étant u~ . llr. Iorsque le piston 115 est au moins légèrement rétracté
dans ladite partie avant 113".
L'moculum précalibré est constitué par injection d'une quantité fixe 20 de liquide de dilution, liquide injecté par un moyen 120.
En vue de déterminer la 1.11 .. t~ i.... bactérienne de l'inoculum précalibré, chaque récipient primaire 101 comporte dans sa paroi latérale, à
proximité de son fond, deux fenêtres de~mesure 119, 119' en regard, adaptées pour la mesure de la densité optique du contenu dudit récipient primaire 101 au niveau du poste 111, ce dernier comportant également le moyen 120 d'injection de liquide de dilution dans ledit récipient primaire 101.
A cela s'ajoute que la quantité d'inoculum prélevée dims le récipient primaire 101 et injectée dans les supports de mesure 104, 105 d~li..~.lai.cs peut être aisément réglée, en calculant le volume à transférer compte tenu de la 30 ~O~ mesurée par densité optique, du fait de la mise en oeuvre d'un outil de ~ et de transfert 101' sous forme de seringue, manipulé ~ n~ par un moyen adapté au niveau du poste 111 r~ot~mm.~nt Ce moyen de ~ ' 121 de la seringue 101' peut, par 35 exemple, consister, comme le montrent les figures ISA à ISJ des dessins annexés en deux ensembles de mâchoires 121' et 121" , ~.llalll deux mâchoires externes 121' destinées à venir en prise rigide et bloquante avec un rebord radial . .. ... .. .... .......... ... ............. . . . _ _ -`` ~ 2~76324 128 au niveau de l'ouverture de la pa~tie a~rière 113" du corps 113 et deux mâchoires internes 121", disposées, . entre les deux mâchoires extemes 121', destinées à venir en prise rigide et bloquante avec un renflement 122' de la tige d'~ftif. ~ mfnt 116, la fermeture des deux ensemblcs de mâchoires S 121' et 121" étant réalisée c,l ~ ou, de manière préférentielle, ' ' par cu.- d'un manchon 121"' autour et le long des mâchoires externes 121', les mâchoires internes 121" pouvant coulisser par rapport aux mâchoires externes 121', notamment en position de fermeture, et au manchon 121"' et ce dernier pouvant prendre appui sur le support mobile 109 en forme de 10 couronne et sur le bord radial 112 de l'ouverture supérieu.e du récipient primaire 101 considéré, de manière à bloquer ce dernier en position dans son logement 109' lors du co~l de l'un ~ -' . des deux ensembles de mâchoires 121', 121".
La préparation d'un inoculum au moins précalibré dans un récipient 15 primaire 101 et son transfert au moins partiel et en quantité contrôlée dans un support de mesure I J4, IOS va à présent être décrit plus en détail en se référant aux figurcs ISA et ISJ des dessins annexés.
Tout d'abord, I'opérateur prélève, ll au moyen de l'outil 101' un volume déterminé de colonie ~ c,l ce volume étant défini par 20 réglage dudit outil 101' en déplaçant le piston I IS (~ans une position c~cr~ à un ci..r~ . total (~ de l'extrémite avant de la partie avant 116' de la tige d'~i 116 au rliveau de l'ouverture 113"' du corps 113) ou à une légère rétraction de ladite tige d'r- ' , En position rétractée du piston 115, I'outil 101' collccte une quantite de bactérics constituant un ,U.CIi,~ dit normal, alors qu'en position enfoncée du piston, I'outil 101' collecte un u~CI~,~, dit rcduit ou microy.C,I~,~. (environ 1/100 du précédent).
L'outil 101' portant une quantité déter~ninée de colonie ' ' est ensuite emboîté dans un récipient primaire 101 et l'ensemble ainsi formé estdisposé dans un logement 109' du moyen support 109.
En début de préparation de l'inoculum, I'outil de lulCI~ est saisi par le moyen de ...~ ,.... 121 (figures ISA à ISC), et est soulevé par rapport au récipient primaire 101 dans lequel on injecte une quantité déterminéede liquide de dilution.
Puis, I'outil 101' est rcembo~té dans le récipient primaire 101 et une 35 ' - ~gf-~ -- de l'inoculum est réalisf,e dans le recipient primairc 101 par des opérations ~u~i~ d'aspiration et d'éjection obtenus par . "
alternatif de l'ensemble de mâchoires interncs 121" (figures 15C, ISD et ISE).

``` 217~32~

Après a~ll` V~ L de cette opération, le ~écipient primaire 101 contient un inoculum précalibré.
L'outil 101' est ensuite extrait du récipient primaire 101 et une mesure de densité optique est effectuée pour déterminer la, nn S 1,= (~.;. .. ^ de l'inoculum précalibré ce qui permet de déterminer, par calcul, le volume d'inoculum à transférer dans les supports de mesure 104, 105 pour y amener la quantite de bactéries nécessaire aux analyses prévues (figures 15F et ISG).
Après une nouvelle phase éventuelle d'l ~D' ' '-, il est 10 procédé à un p~ ,.. de la quantité ainsi calculée d'inoculum précalibré dans le récipient primaire 101 au moyen de l'outil 101' (figure ISEI), ce dernier étant ensuite déplacé par le dispositif de I , ' 121 jusqu'à être positionné au-dessuS de ou r~ir-ll dans l'orif~ce de I v 134 d'un support de mesure 104, 105 dont le bouchon obturateur 150 a été ~ ' ' ' ' enlevé, ledit IS support 104, 105 étant maintenu par un dispositif de . ~ et de transfert 107 ~ D~ t, qui a extrait ledit support de mesure du moyen de support et de stockage 110.
Le contenu de l'outil 101' est alors injecté dans la chambre centrale 127 du support de mesure 104, IOS considéré, par r.,.,l;~-- ... ' adapté de 20 I'ensemble de machoires internes 121", aboutissant à un ~..f~,ll.,.,.l,~,.l~ total du piston 115 dans le corps 113 et donc à un vidage complet de ce dernier.
Avant remise en place du bouchon obturateur 150, il est procédé à
l'injection d'une quantité ~ .'' ; déterminée de liquide de dilution, de manière à obtenir, dans la chambre centrale 127, un inoculum I ' calibré
25 en fonction de l'~pli~,dlioll envisagée et ayant le volume requis.
L'ensemble récipient primaire 101 / outil de ~ ,., et de transfert 101' permet ainsi de réaliser les différentes opérations suivantes:
V~,III~,II~ d'une paltie de colonie bd~l ' , selon une quantité
bien ajustée (deux volumes de ~ dans un rapport d'environ 30 cent), - dispersion et !~.. nD,~ .. ' ' de cette colonie 1: 1.'-.; ..~. - dans un volume d'eau pour constituer un inocu~um précalibré, dont la b~t.' est supérieure à la souhaitée pour l'inoculum calibré, - mesure de la, de l'inoculum précalibré (nombre de bactéries par unité de volume), ` ~ 217~32~

- pipetage d'une partie de l'inoculum précalibré et transfert de cette dernière dans un support de mesure, I'inoculum transféré CUIIIAUI~ III le nombrevoulu de bactéries, le volume d'inoculum transféré étant c, , ' ' ' par additiond'eau dans la chambre centrale 127 du support de mesure 104, 105 considéré, pour5 aboutir à un inoculum calibré.
En Yue de la , ' des supports de mesure 104, 105 et, le cas échéant, de leur évacuation dans un contenant à déchets 160, ainsi que de celle dcs outils 101' et des récipients primaires 101, I'appareil selon l'invention comporte, d'une part, un premier dispositif de r~ ~ip~ tion et de transfert 107, desservant les supports 109 et 110 et se présentant sous la forme d'un bras . ' monté
avcc faculté de rotation et de . " sur un premier axe vertical 123 et """1"':' -- ' deux mâchoires de préhension pivotantes 124, 124' dont la première124 est munie d'un moyen de prise 125 d'un récipient primaire 101 et dont la seconde 124' présente une forme courbée ou un crochet destiné à venir en prise en deux endroits distincts d'un support de mesure 104, 105, de manière à maintenir ce dernier par soutien inférieur et par pincement en UOu~ Liul~ avec la première mâchoire de préhension 124 et, d'autre part, un second dispositif de ~ ~n et de transfert 107', desservant le module d'i..~ul,~io.l 103 et le module 104 de centrifugation et de mesure se présentant sous la forme d'un bras support monté
20 avec faculté de rotation et de, ' sur un sccond axe vertical 123' et ~U~IIAUOIL~I à son extrémité libre un organe de réception 125' coopérant aYcc ... de forme avec une paltie au moins de la face inférieure des supports de mesure 104, 105, les deux dispositifs; de , ' on et de transfert 107, 107' présentant une zone de ~,h~,~ ' de leurs espaces ou zones de manoeuvre I~,alu~li~ rf-c~ C au niveau de laquelle peut notamment s'effectuer le transfert des supports de mesure 104, 105 de l'un à l'autre.
En vue de la préhension d'un récipient primaire 101 par le moyen de prise 125 de la première mâchoire 124, I'ensemble emboîté seringue 101' /
récipient primaire 101 est d'abord soulevé par Ics ou une des paires de mâchoires 121, 121'.
Les supports de mesure 104, 105 chargés en inoculum calibré au niveau de leur chambre centrale 127 sont amenés par le second dispositif de , ' et de transfert 107' dans l'enceinte de .,. ~ renfermant Ics deuxième et troisième modules 103 et 106, à travers une ouverture obturable 161.Durant les phases opératoires suivantes, les supports de mesure 104, lû5 sont à plusieurs reprises transférés entre les modules 103 et 106 au moyen du ``. ~ 217~2~

dispositif 107', ce jusqu'à ce que les analyses soient achevées et les résultatsenregistrés par l'unité i..rl A 108.
Les supports de mesure 104, IOS peuvent ensuite, après; , ~( être évacués dans le contenant à déchets 160, en utilisant ~u~ . les deux S dispositifs de , ' et de transfert 107 et 107'.
CO.~ à une .~ de l'invention, IGAU~'' ' sur les figures 7 et 8 des dessins annexés, le troisième module 106 comporte plusieurs postes de travail 153, notamment de r,lesure et de " ,, I~U..AAJI~ chacun, en plus des différents moyens de mesure par ~,~' "' ' , par 1'~ ; eVou par n ' ~' ', d'une part, une embase support 154 en forme de disque, portée par l'extrémité supérieure dbn arbre vertical 154' entrafné en rotation et pouvant s'engager avec r~ OU avec maintien par friction radiale dans le manchon . ISI d'un support de mesure 104, IOS et, d'autre part, un dispositif pressenr supérieur ISS de forme :,. ' ' discoidale et entrafné en rotation autour de son axe de symétrie par friction sur le support 104, IOS disposé dans le poste de travail 153 considéré,chaque dispositif presseur ISS c-a , un ou plusieurs organes presseurs 156, 156', 156" de forme annulaire pouvant être déplacés, de manière réversible, d'une position haute dans laquelle lesdits organes presseurs ne sont pas en contact avec le support de mesure 104, IOS disposé sur l'embase support 154, vers plusieurs positions plus basses dans lesquelles les organes presseurs 156, 156', 156" sontmis ~u~i~. en appui sur la membrane flottante affleurante 135 selon un ordre ~-.éd~t~ 156", 156', 156, cette dernière prenant elle-même appui au niveau de zones de contact étanches, circulaires ou annulaires, , , ou disposées selon des ~ - q~, circulaires ou annulaires A . avec la paroi supérieure 128 du support de mesure 1~4, IOS considéré.
En fonction du type de poste de travail 153 considéré, le dispositif presseur ISS associé pourra comporter un nombre variable d'orgarles presseurs 156, 156', 156".
Ainsi dans les postes de mesure 153, I'organe presseur extérieur 156"
sera absent du dispositif presseur I SS associé.
La sélection d'une, de deux ou de trois zones d'appui au niveau de la membrane 135, est effectuée en réalisant un ~IS~r~ - vers le bas plus ou moins important du dispositif presseur ISS.
En effet, les organes presseurs extérieurs 156' et 156" consistent en des structures annulaires, , et ",~ ' du disque central forlnant l'organe presseur 156, tout en étant reliées à ce dernier par des moyens de ~ 21~6324 1 élastiques qui entraînent lesdits organes presseurs 156' et 156" en appui contre la membrane 135 lorsque l'organe presseur 155 est descendu.
Selon l'inYention, une variante de réalisation du procédé
5 d' ' '~ nn ba~l ' et de ,~f de la sensibilité de bactéries à des :m~ihin~iTl~-c. tel que décrit ci-dessus, peut consister à introduire ~ m, n~ aumoyen d'un outil de ,UIUL,~. ' et de transfert (non représenté) un volume donné
d'un inoculum bactérien initial dans un récipient primaire 1, à effectuer une calibration définitive dudit inoculum dans ledit récipient 10 primaire I en amenant sa, 1,~1' et son volume à des valeurs imposées, à effectuer également , des transferts totaux ou partiels de cet inoculum calibré entre ledit récipient primaire I et un ou plusieurs supports de mesure 4, 5 destinés à réaliser, .~ , soit l'i~ ;.... soit l'~l~ibio,, ou encore ces deux .'' ' ' en une seule 15 opération combinée, lesdits transferts étant réalisés sans que l'inoculum initial soit rrlis en contact avec un élément autre que son récipient initial et son ou ses récipients finaux et de manière à ce qu'à leur issue l'inoculum calibré reste confiné
à l'irltérieur desdits supports de mesure 4, 5 qui sont alors clos, à effectuer 1l la répa~tition de l'inoculum dans une ou plusieurs alvéoles 32, 20 45 desdits supports de mesure 4, 5 contenant pour la plupart des réactifs appropriés, à réaliser, dans certains cas, notalnment pour 1' ~ -O , à
l'intérieur d'un support de mesure 4, une opération dite de pré-croissance destinée à meUre les bactéries en état de se multiplier rapidement avant de les soumettre à
analyse et à faire des mesures pllUi '' ', sur le contenu desdites alvéoles 32, 25 45 pendant ou à la fin dbne ou de plusieurs ' nn~ subies par l'inoculum dans lesdits supports de mesure 4, 5, les mesures relevées étant ~ .O;~Il~ par un moyen illr~,.ll.a~ 8 et traitées en vue de la ~ f.. ;~ de la croissance des bactéries présentes dans l'inoculum, de leur ' ~ et/ou de la .1.~1.. -~;~.. de leur sensibilité à différents: ' ~
La .. 1.. 1;.. ~ ou densité de l'inoculum préparé "
présente une vâleur telle qu'elle soit suffisante, c'est-à-dire qu'elle dépasse une valeur minimale pouvant être facilement vérifiée par llmmme du métier. En effet,ce dernier réalisera une solution aqueuse dont il vérifiera la densité par simple de l'aspect de ladite solution, I'l,A~ ,e lui permettant de constater 35 que la densité ou est suffisante ou rlon. Une telle ~.,S,~ de l'inoculum est facilement accessible à Illomme du métier et est destinée à

. ~ 217~324 permettre un ajustement ou une calibration ultérieur à une valeur finale inférieure, par dilution.
Selon une première r~ rjC-iqlll de l'invention, la calibration de l'inoculum dans le récipient primaire I consiste à réaliser, à partir 5 d'un inoculum initial contenant une quantité de bactéries en excès par rapport aux besoins 1. ' excès vérifié par observation visuelle de la turbidité de l'inoculum initial, une injection d'eau de dilution dans ledit récipient primaire 1, de manière à créer un volume augmenté d'inoculum plus dilué, puis à éliminer une partie de l'inoculum ainsi dilué par aspiration jusqu'à obtention du volume final 10 d'inoculum calibré requis, ces OpéQtiOnS étant conduites et ~
répét&s sur la base de mesures optiques faites au travers du récipient primaire I
sur l'inoculum pour en déterminer la, jusqu'à obtenir à la fois la et le volume recherchés pour l'inoculum calibré.
Cu..f~ ' à un mode de réalisation ~ ' de l'invention, 15 le transfert de l'inoculum calibré entre le récipient primaire I et le ou les supports de mesure 4, 5 est effectué par n.... ~ ^r~ .. " de tout ou partie 11 du récipient primaire I contenant l'inoculum dans une cavité prévue à cet effet dans chaque support 4, 5, de manière à y transférer la quantité d'inoculum calibré voulue, contenue dans la partie emboît& dudit récipient primaire, cet ~
assurant l'isolement nécessaire au .. ri ......... ~ de l'inoculum dans l'ensemble formé par le support de mesure 4, 5 et le récipient primaire I ou la partie 11 du récipient primaire I emboîté dans ledit support 4, 5, ainsi que la fermeture de cet ensemble.
En r( . et sans , ' '' 25 par un opérateur du récipient primaire I et des supporLs 4 et~ou 5, tous ces éléments sont introduits au départ par l'opérateur dans un premier module de stockage et de préparation 2, dans lequel les supports 4 etlou 5 sont alimentés en inoculum, chacun par l'i~ d'au moins une chambre de réception prévue dans lesdits supports, à partir du récipient primaire I ou .I;Ia,t~ t au moyen de 30 ce dernier.
Après cette Al; . IAI,..,. des supports 4 et/ou 5, il est effectué une f~ui~ iu.l de l'inoculum dans les alvéoles de ces derniers par ' ~
puis lesdits supports 4 rotatifs et/ou 5 sont b~ansféré~ dans un deuxième module 3 d'ill~,ulJd~ ., dont ils sont ~fl ' I exb~aits pour ebre soumis dans le 35 module 6 à des mesures l ~l,I,flf ~f~ et/ou 1 . et~ou 'b, en vue de l'i ' ~ etJou de la réalisabon 1'~ ' O

: ~ ~176324 Dans le cadre de la mise en oeuYre de cette variante de réalisation du procédé selon l'invention, les opérations de l,lé~," de l'inoculum, de répartition de l'inoculum dans les alvéoles de mesures, de ~1~ du début de la ~lé~," , de transfert de l'inoculum après ~I.~YI de la 5 ~ et de mesures ~ sur les supports de mesures, sont effectuées d'une manière analogne à celle décrite ci-dessus en regard de la première variante de réalisation, leur mise en oeuvre pratique et les moyens, dispositifs et appareil utilisés étant toutefois différentes, comme va le montrer la description qui suit.
En vue d'éviter toute ~ de l'inoculum calibré ou non présent dans le support de mesure d' ~ ,, 4, le passage de l'étape de pré-incubation à l'étape d' est effectué sans rupture du, - de l'intérieur du support rotatif de mesure concerné 4 par rapport à l'extérieur, ledit support restant clos et ledit passage étant réalisé par une action, telle qu'unepouss&, sur un élément obturateur participant à la réalisation de ce, En outre, pour les cas où l'inoculum initial ne comporte pas ~ de matérid bactérien, il peut être prévu, selon une réalisation légèrement modiflée de la variante de réalisation du procédé décrite ci-dessus, d'omettre l'étape de calibration: , On introduit alors A ' un inoculum bactérien initial, mis en place 'I t, au moyen dbn outil de ~ et de transfert adapté, dans un récipient primaire 1', dans un support de mesure tel que mentionné
ci-dessus et destiné à réaliser soit un , ~ ~ , soit une analyse combinée simultanée d"' ~ et d'5...1;1. n~.~ ...., ladite 25 étant réalisée ou achevée de telle manière qu'à son issue le support de mesure soit fermé et isolé de l'extérieur.
Le récipient primaire 1' présentera une .. r,.. ~ extérieure et un C~ O~ IIGII~II~ identiques au récipient primaire I et comportera un contenant destockage et de ~L 1 de l'inoculum bactérien initial appelé IIl~IU~ ,LLG 73 30 permettant le transfert de son contenu dudit récipient primaire 1' dans le support de r~esure d'~ .. l ;l .;~ ~. ,, .. ou de ~L'~ i.. combinée destinataire.
Après cette .UIll de l'inoculum bactérien initial dans ledit support de mesure, le procédé consiste à répartir ~ t, comme décrit l"é~'' t, une partie aliquote de l'inoculum initial darls une ou plusieurs alvéoles 37, 45, ne contenant pas de réactifs, desdits supports de mesure 4, 5, puis à effectuer à l'interieur du support de mesure 4. 5 une pré-croissance de cet inoculum initial, comme indiqué 1 t, consistant à mettre les bactéries ~ 217~32~

de l'inoculum en état de se multiplier rapidement par une première incubation oupré-incubation lors de laquelle des mesures pllULO ' . visant à mesurer la .~1. ...,(,,.li.", de l'inoculum bactérien et à déterminer le début de croissance, sont réalisées au niveau de la ou des alvéoles 37, 45 contenant ladite première partie S aliquote de l'inoculum, à répa~tir ensuite ~ ~". par centrifugation le reste de l'inoculum dans les autres alvéoles 32, 45 contenant des réactifs, et àeffectuer des mesures 1' ' . sur l'inoculum au niveau desdites alvéoles 32, 45, tel que décrit ci-dessus, pendant une nouvelle phase d'incubation subie par l'inoculum dans lesdits supports de mesure 4, 5, les mesures relevées étant 10 : o ~s par un moyen ' . 8 et traitées en vue de la ~ ;.... de la croissance des bactéries présentes dans l'inoculum, de leur i~f~nfifi~ fion et/ou de la; ' de leur sensibilité à différents La variante de réalisation du procédé conforme à l'invention sera à
présent décrite de manière détaillée à propos d'un exemple de mise en oeuvre 15 pratique et en relation avec une description des matériels utilisés.
Un appareil pour la mise en oeuvre de la variante de réalisation du procédé est représenté p~us ~ iuul;`ll sur les figures 16 à 18 des dessins annexés, et est '-'l~lm nf constitué par un premier module 2 de réception, de stockage et de préparation de supports rotatifs de mesure 4 etlou 5 frais et usagés, 20 par un deuxième module 3 d'i des supports rotatifs 4 et/ou 5, par un troisième module 6 de mesures l.~,lllM~...f~ . etlou L' ' , , par un dispositif 7, 7' de transfert desservant les modules 2, 3 et 6 et par un moyen 8 de contrôle et de commande des différents étapes de procédé et d' . d'~ lo t, de traitement, d'~,~ ' etlou de restitution de données.
(~ r.v~ ~ à l'invention, le premier module 2 de réception, de stockage et de ~lé~a~ioil des supports rotatifs de mesure 4 etlou 5 frais et usagés comporte, en outre, au moins un moyen 59 de réception et de stockage de récipients primaires I contenant de l'inoculum rlon calibré et un dispositif de calibration 60,61 de l'inoculum dans lesdits récipients primaires I et de ,ulu~alaliull des supports rotatifs 4 eVou 5.
Selon une . ^ r- ~ de l'invention, chaque récipient primaire I
de réception de l'inoculum se présente ~ ~ (figures 19, 20) sous forme d'un récipient cylindrique muni sur son fond d'au moins un tube d'évent 9,d'une conduite d'C~u~ALiu~l de trop-plein 10 6~. " d'une conduite 10' de mise à un niveau inférieur du volume ~1' ' . d'un moyen de ,u.61~
d'une quantité p~l~ I'i ' . monté de manière séparable, par ~ ~17~2~

~.".. l.. ~ ou par f--~ ^' t, dans le fond du récipient I et excentré par rapport à l'axe dudit récipient 1, telle qu'une pipette 11, et d'un logemene transversal 12 en forme d'auge s'étendant entre les parois du récipient I qui est pourvu à chaque extrémité dudit logement 12 d'une fenêtre de mesure 13, ce 5 logement 12 étant muni, en outre, d'une partie surélevée 12' ~ , avec ledit logement 12, I'évent 9, la conduite de trop-plein 10, la conduite 10' de mise à
un niveau inférieur et le moyen de ~..,h,.. 11 étant fermés de manière étanche par un film arrachable 14, un couvercle de fermeture 15 coopérant par c~ ^ conique étanche avec la partie supérieure conique 16 dudit récipient 10 1.
Le logement transversal 12, et plus ~olLi~,ul;~ la partie surélevée 12' de ce dernier, est destiné à la préparation manuelle de l'inoculum en solution aqueuse à partir d'une solution de culture, ladite solution étant déposée dans le fond du logement 12, sur la partie surélevée 12', au moyen d'un organe de 15 ~ . servant ' ' à réaliser un premier mélange de la soluvion de culture avec l'eau rajoutée.
La partie supérieure conique 16 du récipient prirnaire I est pourvue d'au moins une encoche 17 de faible profondeur et de deux encoches 18 de ~ur~ ~ plus importante et de largeur différente, disposées en alignement entre-20 elles et à 90 par rapport à l'axe passant par la ou les encoches 17 de faibleprofondeur, cette ou ces encoches de faible profondeur 17 étant alignées dans l'axe du logement 12 du fond et les encoches IB de profondeur plus importante coopérant avec des pattes 19 de section; .,v..~ -r ~ ' prévues sur le couvercle de fermeture étanche 15 qui est pourvu, d'une part, sur sa face supérieure, d'une 25 surface 20 s'étendant dans l'axe des pattes 19 et, d'autre part, d'une paroi conique 21 de forme cnn~r-r~ ' à celle de la partie supérieure conique 16 du récipient I et reliant les pattes 19.
La surface 20, légèrement en retrait et qui s'étend entre les pattes 19, et donc entre les encoches 18 lorsque le couvercle de fermeture 15 est monté sur le 30 récipient primaire 1, est destinée à la réception d'un moyen d'identificavion codé 20', tel qu'une étiquette adhésive à code a barres.
L'encoche 17 de faible profondeur permet de réaliser un p~ précis du récipient primaire I dans le module 2, afin de permettre la lecture du moyen d" ' ~ Cette encoche 17 est destinée, par 35 ailleurs, à assurer une orientation correcte du récipient primaire I lors de la calibration . de l'inoculum, ainsi que pour 1': ~ ' ~ du support rotatif 4 pour la réalisation I'i O

`~ 2176~24 La pipette 11 formant le moyen de ~ .V. d'une quantité
. d'inoculum est montée de manière séparable par ~ ' ou par ~,I.. L ~ dans le fond du récipient I retourné de manière à présenter son couvercle 15 toumé vers le bas. Cette pipette 11 est pourvue, près de son S extrémité dépassant sous le fond du récipient 1, d'une collerette ou d'un manchon 11`, par laquelle elle est reliée avec le fond du récipient I au niveau de la traversée de ce fond, par exemple par une liaison étanche fragilisée ou par l ^ De manière connue, le fond ee les parois latérales, ainsi que le couvercle 15, du récipient primaire I sont réalisés par moulage en un matériau 10 ~ tl~ i4u~.. Ainsi, lors du ..,.I.~ . du récipient I et pendant sa , ' I'étanchéité au niveau de la pipette 11 rwte assurée, tandis que, après ., du récipient I fermé par le couYercle, lors de la prise de la pipette 11 et par une légère poussée sur celle-ci, elle est ~ '- du fond du récipient I et peut être transférée vers une utilisation après aspiration d'une quantité ~léd~
15 ~l'i ' Lw figures 21 à 23 ,~.,' 5.1~ les étapes ~u~,~w~i~w de préparation de l'inoculum et de vérification de sa densité minimale dans le récipient I, puis la fermeture étanche de ce dernier par le couvercle 15, le film arrachable 14 fermant 1~ ( les orifices extérieurs du tube d'évent 9, de la conduite d'~ ,udti~ 10 et de la pipette 11. Lors de l'i.. L., ' du récipient primaire I dans le premier module 2 de réception et de stockage ainsi que de calibration de l'inoculum, le récipient I est retourné de manière à présenter son fond tourrlé vers le haut et le fil~n 14 est arraché, afin de permettre la calibration de l'inoculum par ajustement éventuel de son volume etlou par 25 ~' du trop-plein, au moyen du dispositif 60, 61 de calibration de l'inoculum et de rffpq~,qfi- n des supports rotatifs 4 etlou 5.
Le support rotatif 4 pour dlllibhJ~ , représenté aux figures 26 à
28 des dwsins annexés, se présente ~v ~ sous forme d'un disque composite supérieur muni d'alvéolw ~ 32 de réception de l'inoculum 30 et de ~l~d~ ' , et wst caractérisé en ce qu'il est muni d'un corps cylindrique ~ i.l . de plus petit diamètre que le disque et lié audit disque, formant une chambre centrale 33, de réception de l'inoculum pour la ~liclrihll~inn par ~ nfil~,qfi~n ladite chambre 33 étant alimentée à travers un orifice 23 de la face surérieure du disque composite supérieur et étant entourée par un 35 manchon 35 de préhension et de ~ ;r~ ;.... de l'ensemble.
Le disque composite supérieur du support rotatif pour

4 wt constitué, d'une pa~t, par une partie de couvercle circulaire 22 . ~ 2176324 pourvue en son centre d'un orifice 23 et, d'autre part, par un plateau circulaire 31, dont la face supérieure tournée vers la face inférieure de la partie de couvercle 22 porte, en relief sur sa périphérie, les alvéoles 32 de réception de l'inoculum et de iulls: ~ 1 . ce plateau circulaire 31 étant relié à la chambre S n ~nrrnfn~l 33 ferrnée par un fond 34, la partie de couvercle 22 étant pourvue d'un rebord 22' s'étendant, I par-dessus une paroi circulaire 31' du plateau circulaire 31, délimitant les alvéoles en relief 32 vers l'extérieur, et fixé à
ladite paroi circulaire 31' par collage ou soudage.
Selon urle ~ f ~ de l'invention, le plateau circulaire 31 de la 10 partie inférieure de corps est pourw, entre les alvéoles en relief 32, d'au moins une alvéole de pré-incubation 37 reliée, par 1' '' c; d'un capillaire 38, à
une chambre: 1 27 ménagée sous le plateau circulaire 22 de la partie de couvercle, dans la chambre 1 33 du plateau circulaire 31 formant la partie inférieure du corps.
L'orifice 23, préw au centre de la partie de couvercle 22, est disposée dans un puits 25 s'étendant, . à l'intérieur de la chambre ~~ , 27 qui présente une coupelle mobile 28 pourwe d'un milieu de culture sec, ladite coupelle mobile 28 présentant une paroi de guidage étanche 29 délimitant avec ladite coupelle mobile 28 une cuvette, le puits 25 étant fermé par 20 un film étanche 26 recouvrant la partie supérieure du plateau circulaire de couvercle et délimitarlt ' ' le capillaire 38.
Le guidage étanche de la coupelle 28 au moyen de sa paroi 29 peut être obtenu par un montage glissant légèrement serré de ladite coupelle 28 et de sa paroi 29 dans la chambre ~,~ 1 27. La coupelle mobile 28 est destinée à la 25 préparation de la culture disposée sur son fond, cette préparation étant réalisée sous forme de solution aqueuse puis séchée, la paroi 29 assurant le logement de la solution aqueuse jusqu'à J ` ' ' complet.
Les alvéoles en relief 32 sont délimitées sur leur face tournée vers l'intérieur du support rotatif 4 par une paroi circulaire ~ 1 32' et sont 30 pourvues chacune, sur la face de ladite paroi ~-~ 1 32' opposée aux alvéoles 32, de chicanes verticales 32" .'' des moyens de captage de l'inoculum lors de la r on Le support rotatif 5 pour l'i~l liri. ~1io." représenté aux figures 24 et 25 des dessins annexés, se présente également ~ sous forme d'un 35 disque composite supérieur muni d'alvéoles i ' ~' ' 1 45 de réception de l'inoculum et de réactif de ,~i' - et est caractérisé en ce qu'il est murli d'un corps ~ 1 . de plus petit diamètre que le disque et lié

~17632~

audit disque, fommant un manchon ~,UIIC. ' ', 46 de réception du récipient primaire I en position retoumce, pour la distribution par ~ irl L,-~ de l'inoculum, ledit manchon 46 étant entouré par un manchon . 48 de préhension et de rivif~ifif~tif)n de l'ensemble.
Le manchon , 46 s'étend, au centre, sous la face inférieure du plateau cireulaire 44, est relié à cette demière et est muni à sonextrémité libre d'une partie de paroi conique 47, s'étendant illLI~l- audit manchon 46 et destinée à coopérer avee la paroi exteme de la partie supérieure conique 16 du récipient primaire 1.
Le disque eomposite supérieur du support rotatif pour I'ifl- ..I;.'i. ~1...,l S est constitué, d'une part, par une paftie de couvercle cireulaire 43 et, d'autre part, par une partie inférieure sous fomme d'un plateau cireulaire 44 pourvu, sur sa face supérieure toumée vers la face inférieure de la partie de couverele 43, en relief sur sa périphérie, d'alvéoles 45 de réception de l'inoculum IS et de réactifs de . ~ ;.. Ie couvercle 43 étant pourvu d'un rebord 43' s'étendant ~ . par-dessus la paroi cireulaire 44' du plateau cireulaire 44, délimitant les alvéoles en relief 45 vers l'extérieur, et fixé à ladite paroi cireulaire 44' par collage ou soudage.
Les alvéoles en relief 45 sont délimitées sur leur face toumée vers 20 I'intérieur du support rotatif S par une paroi cireulaire, ., 45' et sont pourvucs chacune, sur la face de ladite paroi f~~ l 45' opposée aux alvéolcs 45, de chicanes verLieales 45" '' des moyens de captage de l'inoculum lors de la . . ~t~ ;rl,L,'ti..., ~;' Les moyens de eaptage de l'inoculum, lors de la ff~ntrifil~tif)n 25 prévus, vus en sens radial, devant chaque alvéole 32, 45, I~J~li~,.,lll~,.ll des supports 4 et S, sont reliés chaeun avee l'interieur d'une alvéole cull~},u..d~l~ 32, 45 par l'i.lt~.l. ' ' d'un eapillaire 36, 49 et sont ouverts, par ailleurs, sur un espaee intérieur 30, 43", c, , avee la chambre 33 du plateau circulaire 31 fommant la partie inférieure de corps ou 30 avec l'espace de réeeption du réeipient primaire I dans le manchon q.lr 46 s'étendant sous la face inférieure du plateau eirculaire 44 forrnant la partie inférieure du disque composite, Ics alvéoles en relief 32, 45 étant relic~s, parailleurs, chacune par 1' '' . d'un eapillaire radial 39, 50 à un capillaire cireulaire 40, 51 '" ' t, par 1' '' _ d'un autre capillaire 41, 52, à
35 I'extérieur du plateau cireulaire 22 de couvercle ou de la partie de eouvercle eireulaire 43, I'alvéole de prc'- ' 37 prévue sur le support de mesure 4 pour: v étant reliée ." t, par un trou de passage ``` ~ 217~32~

.,u~.l r ' t, au capillaire circulaire 40. Ces différents capillaires sont délimités dans la partie supérieure du plateau circulaire 22 et du couvercle 43 par le film étanche 26 ou 52', les capillaires 41 et 52 , en leur extrémité la plus proche de l'axe central des disques 31 et 44 avec les chambres intérieures 27 et 43"

5 par des trous percés dans les plateaux circulaires 22 et 43.
Un film étanche de scellement 26, 52 peut se présenter r~f~nm.-.nf de manière connue, sous forme d'un film autocollant en deux matériaux, à savoir,par exemple, en aluminium et en p~l~' Jl~ ,. Ainsi, lors des ,- ~
successifs, par ~ .~. ;r, ~ . de l'alvéole de pré-incubation 37 et des alvéoles en relief 32, 45 au moyen des capillaires respectifs 38, 36 et 49, I'air contenu dans lesdites alvéoles peut s'échapper, en . , du ,' ~ à travers les capillaires 39, 50, 40, 51 et 52 vers les chambres 27 et 43".
Le plateau circulaire de couvercle 22 et le couvercle circulaire 43 sont munis, en outre, au dessus de chaque alvéole 32, 45 et près de son bord, d'une fenêtre de mesure 42, 53, une fenêtre analogue 43, 54 étant prévue sous la face inférieure du plateau circulaire 31, 44 formant la partie inférieure du corps ou du disque composite, en regard de chaque fenêtre de mesure 42, 53 et au moins une zone léll~A' d'illde~a~ioa 42', 53', formée sur la face exteme de la paroi Pf ;l ~ externe des supports 4, 5, étant associée à chaque alvéole 32, 45 avec 20 un décalage angulaire fixe par rapport à cette dernière.
Ainsi, lors des mesures, le passage de chaque alYéole devant le dispositif de mesure est I ' repéré au cours de la rotation du support rotatif 4 ou 5 grâce aux zones l..r ' ' ou miroirs d" ' et la mesure ~1l --r ' peut être effectuée de manière 1~ IIlUll;"~, Le récipient primaire 1' utilisé pour l'illtl~ ' , d'un inoculum bactérien initial dans un support de mesure pour ~l~i~J~ ou analyse combinée simultanée se présente ~,~. .t~.~,. t, comme le montre la figure 29 des dessins annexés, sous forme d'un réceptacle muni, d'une part, d'une pipette 11 identique à celle associée au récipient primaire I et, d'autre part, d'une I~ld~,lU~ 73 de transfert de la totalité du contenu du récipient 1', cette Illd.,lv~ ~ pouvant être détachée du récipient primaire 1', utilisée pour vider son contenu dans le support 4, puis replacée dans le récipient primaire 1', la pipette 11 étant ensuite détachée et utilisée pour obturer le support 4 en étantdéposée dans le puits 25. Dans un tel cæ, la solution est dil~ disposée dans la Il~ t~, 73 et non dans le récipient 1', la pipette 11 servant I , de bouchon d'c~; pour un support 4 pour ' 7,s ou Ct. ' ~' pour un rajout d'eau.

17~32~

Comme il ressort des figures ~rh-5~:. 21 à 23 des dessins annexés, I" ~ o-irm d'un support rotatif 4 pour ' " s'effectue par saisie, au moyen d'un organe préhenseur d'un dispositif 64 de pipetage et d'injection d'eau et de gaz de l'extrémité de la pipette 11 dépassant hors du fond du S récipient 1, puis par i~tludu~,liull de ladite pipette 11, après perforation du film étanche 26, dans le puits 25 s'étendant, . à l'intérieur de la chambre . 27, de manière à dégager l'accès à cette dernière.
L'inoculum peut aiors être déYersé dans la chambre ., . 27 et un apport d'eau ~ .lt l---; peut être effectué. Dans la chambre 27, I'inoculum se 10 mélange au milieu de culture sec destiné à alimenter sa croissance.
La pipene 11 est alors enfoncée à travets l'orifice 23 et le puits 25 et guidée dans ces derniers au moyen de son manchon ou collerette 11' jusqu'à
arriver en but& de la cûupelle mobile 28 pat son extrémité libre, de manière à
réaliser une ét_nchéité par rapport à l'extérieur. Après une agitation favorisamt 15 I'h~ ,t~ du contenu de la coupelle 28, une première ' ~ est alors effectuée de manière à amener une partie dudit contenu dans l'alvéole de pré-incubation 37, à travers le capillaire 38.
Dès que le début de croissance aura pu etre observé par mesure ~..'1.1..'1~...,~1.;.l--~ le support rotatif pour ' ~ 4 sera soumis à une 20 nouvelle ~...,.;r..~,;,~.. le fond mobile 28 de la chambre - - . 27 étant ~u..'~ .l ... .1 poussé au moyen de la pipette 11 de manière à libéter entre sa paroi 29 et celle de ladite chambre 27 des passages permettant le d~ de l'inoculum dans la chambre ~ 33. Le support rotatif 4 sera alors déplacé :~U~:>it. ' dans le module de mesure 6 et dans le deuxième module 3 25 ~ uub~Lu;~ en vue de la réaiisation des mesures ~q' "' ', et de .. . ..
L'i.lo.uL.~io.. du support rotatif S pour li.l...l;r;.-l;.... peut être effectuée illul' après l'i.~u~,ul~iu~ du support 4, par transfert du récipient primaire I sous un support S et ~ b ~ étanche dans ledit support 1. A cet effet, la partie de paroi conique interne 47 du manchon ~.. Jl r.. l.i l ~ 46 enserre la paroi extérieure de la partie supérieure conique 16 du récipient I etréalise l'étanchéité du montage.
Une ~ tlirb~ iùil du support rotatif S a alors pour effet d'amener l'inoculum contenu dans le récipient I vers l'espace délimité au-dessus de ce 35 récipient I sous la pa~tie de couvercle 43, à travers l'orifice réalisé par l'arrachage ou le retrait de la pipette 11 et de son manchon on collerene 11' et, de là, vers les aivéoles 45, à travers les capillaires 49, I'air en excès étant évacué à travers les _, , . ~

` ~ 217~324 capillaires 50 à 52. Après incubation avec les réactifs de ~ t~ o les mesures 1~ "~u- ~ sont alors effectuées.
Comme le montrent plus I ' `, les figures 16 à 18 des dessins annexés, le dispositif de calibration , est constitué, d'une part, S par une unité inférieure 60 comportant notamment un moyen de lecture du moyen d'il' ~ codé rapporté sur la rainure L~ . ' 20 du couvercle 15 des récipients primaires I et un moyen de mesure de densité optique de l'inoculum présent dans lesdits récipients I et, d'autre part, par une unité supérieure 61 CUI~l~Juli '; " " un dispositif de pipetage et d'injc,ction d'eau et d'atir.
Ce dernier dispositif peut être, d'une part, muni d'un organe préhenseur mobile au moins dans une direction verticale et d'un dispositif d'6v~u~iu.. du trop-plein et, d'autre part, relié à un moyen de pompage ou d'aspiration 62, à un ensemble 63 de vannes de commande des flux de liquides et d'air et à des récipients de liquides 64 et d'air.
L'organe de préhension du dispositif de pipetage pourra venir en prise étanche, avec CU.j..G,.;- ... de forme, sur l'extrémité extérieure libre de la pipette 11 d'un récipient 1, lorsque ce demier est disposé à un, , ' adéquat, appelé . ,,,I)l~r...,...,1 de travail.
Cet organe de préhension réalisera aussi l'injection d'eau lors de la 20 phase de calibration P~ de même que le ~ de la pipette l l par arrachage ou ~1.'bn^.t.. ll du fond du récipient primaire 1, le maintien de la pipette 11 dans une position escamotée avec rétention de l'inoculum et llud~ iul~ de ladite pipette dans le support rotatif 4 pour ' " avec injection de l'inoculum.
Ledit dispositif de pipetage pourra être relié ' ~. à un moyen d'aspiration et à un moyen d'injection contrôlée d'une quantité de fluide,r~ .. d'eau ou d'air, extraite de réservoirs UOII~
L'unité supérieure 61 pourra également comporter un embout mobile pour le I ' étanche d'un tuyau d'évacuation de trop-plein ou d'une pipette 30 relié à un moyen d'aspiration continue et à un réservoir de l~ .,.t,ledit embout mobile ou ladite pipette pouvant venir en prise sur l'extrémité libre extérieure de la conduite d'évacuation 10 du trop-plein et/ou de la conduite 10' de mise à niveau intégrée dans le fond du récipient primaire 1, lorsque ce dernier est positionné au niveau de l'; , ' de travail.
Comme le montrent également les figures 16 à 18 des dessins annexés, le moyen de réception et de stockage 59 consiste en au rnoins un disque65 pouvant être actionné en rotation de manière contrôlée et pourvu d'une pluralité

2~ 76~24 de rainures de stockage 66 disposées suivants des rayons dudit disque 65 et pouvant contenir chacune, soit ~" ~ t, soit au moyen d'un portoir ' " , une rangée alignée de récipients primaires I en position inversée et indexés en position amgulaire autour de leur axe de symétrie central, chacune 5 desdites rainures 66 pouvant être amenée ' v ' 'lrnlrn~ en regard de l'ouverture du dispositif de calibration , 60, 61, par simple rotation dudit disque 65 en vue de l'extraction de la rangée de récipients primaires I
concernée.
Les portoirs '" pourront .. v. '-~". - .. 1 consister 10 chacun en un réceptacle allongé profilé 60' pouvant contenir chacun ! ' " ' ' une pluralité de récipients primaires 1, sous forme d'un alignement de récipients primaires I en positions inversées, dont chacun est indexé en position angulaire autour de son axe de symétrie central et peut être positionnéi..div ' " à un, , ' de travail défini au niveau des unités 15 supérieure 61 et inférieure 60 constituant le dispositif de calibration et de ;r l .-Chaque récipient primaire I pourra ainsi être amenéindivi~l.rll et positionné ~- ` au niveau de 1'....-1~ de travail, par simple c u~ du réceptacle allongé profilé 60'.
En outre, le guidage radial des réceptacles allongés profilés 60', formant portoirs pour des ~ligr de récipients primaires 1, dans les rainures de stockage 66 du moyen 59, permettra de réaliser uDe agitation des contenus de l'ensemble desdits récipients primaires 1, en soumettant ~U~~ iV~~ chacun desdits ~'ig . disposés chacun dans un desdits portoirs 60', à un ~lvu~. alternatif en va-et-vient.
C~-'- - ' à une autre . '' ", de l'invention, les dispositifs de trmsfert desservant les différents modules 2, 3 et 6 ,-llu~ t, d'une part, un premier organe L~.~ulb. 7 assurant rl~t~rnrn~nt le transfert des supports rotatifs 4 et 5 entre les modules d' ' 3 et de mesure

6 et leur prise en charge en ~)IU~. du dispositif de calibration ~
60, 61, d'autre part, un second organe L. , t~,u. 1' assurant la prise en charge et le dépôt d'un support rotatif 4 ou 5 au niveau d'un magasin de stockage 67 rr --~r~- t, son transfert et son maintien dans le dispositif de calibration 6Q61 et son - ' à un . ,' déterrniné permettant sa prise en charge par le premier organe I , ~ 7.
Les ...~,uv. de transfert de supports rotatifs 4, 5 pouvant. bien ' t, également être réalisés en sens inverse, en vue du rangement des _ _ .

` ~ ~1 2~ 76324 supports 4, 5 usagés dont l'~ est achevée. Dans ce cas, chaque support 4, 5 usagé sera transmis par le premier organe lla~ u~t~ 7 au second organe (~ n~ 7' qui 1' ' vers le magasin de stockage 67 du premier module 2 où il sera déchargé et rangé à un ou plusieurs ~ prévus à cet 5 effet.
Comme le montrent également les figures 16 à 18 des dessins annexés, le magasin de stockage 67 est situé dans la partie supérieure du premier module 2 et consiste en un magasin circulaire pouvant être animé dbn IIIUUV. ' de rotation et, , une pluralité de piles de supports de 10 mesures 4, 5 frais et usagés au niveau de sa périphérie.
Chaque pile peut être amenée i..div;' " dans la zone de prehension de l'organe ~ 7', permettant à ce demier de soulever le support de mesure 4, 5 supérieur d'une pile pO~i~iU~Ill~ de manière adéquate, et de le transférer vers le dispositif de calibration , 60, 61 Bien entendu, ledit organe i ~ . 7' pourra également recevoir un support de mesure 4, 5 usagé, acheminé par le premier organe; ~ nl 7 à
l'endroit d'échange, et le déposer dans une pile ~,u~
r: ~C à I endroit adéquat desservi par ledit second organe II~ UI t~ 7'.
Selon un mode de réalisation préférentiel de ~'invention, I'organe de 20 1 , du second organe l,~ rt7' peut se présenter sous la forme d'une pince 68, ladite pince 68 pouvant notarlunent se positionner entre les unités inférieures 60 et supérieures 61 du dispositif de calibration '11l~ de telle manière que ie support de mesure 4 OUjjS porté par cette dernière soit disposé au niveau de 1' , ' de travail dudit dispositif de calibration -Le maintien des supports de mesure 4 et 5 par ladite pince 68 est réalisé par pincement au niveau de leur partie supérieure.
Le ~ .. ,.. " des supports 4, 5 au niveau de 1'~ - r' de travail du dispositif de calibration ~ Im~lil, 60, 61 permettra soit l'ill~L~
de la pipette 11 dans un support de mesure 4 pour, iihiogr~mm~ soit 30 I'~ IIJO~III~ d'un récipient primaire I dans un support de mesure S pour ifi~ n Les premier et second organes i I l~U~O 7 et 7' peuvent consister d~ _ ' v ' chacun en un bras support 70. I~ ' 70'. monté avec faculté de rotation et de translation verticale sur un axe 71, I~ ' 71', 35 solidaire du châssis de l'appareil.
Les ..o..~. du premier organe i , 7, dont l'axe peut être fixé sur le module de mesure 6 et dont l'organe de I ' ' peut consister _ _, _ . , . . , . _ .

`` ~ 217~32~

en un plan support, permettent un ~ ou un ~ d'un support de mesure 4 ou 5 à partir du ou vers le second organe; ~ ~.t~,_. 7', le module 3d'incubation et le module 6 de mesure.
Ce dernier peut comporter, au niveau de son ouverture d'accès, un 5 mécanisme échangeur transférant les supports de mesure 4, 5 entre un ~",1,~ de ~ U~ U6~ ... accessible par l'organe (,.."~ .t. . 7 et un (",1.1_...,~. de mesure, en .1~ ' _ deux supports de mesure 4, S
entre ces deux . , ' De manière ~ c,~ ~Ir, et en vue d' ~, I'efficience de 10 I'apprlreil, la durée nécessaire pour le .c~ d'un support 4 ou S après la phase de mesure et l'amenée d'un nouveau support 4 ou S au niveau du module 6 de mesure est environ identique à la durée de la phase de mesure.
En outre, les supports de mesure 4, S peuvent être centrés et guidés en rotation au niveau de 1' ,' de mesure du module 6 de mesure, IS 1', ^ en rotation desdits supports de mesure 4, S étant réalisé par 1" ' ' ~, d'un organe -'-^~P supérieur.
Afin de pouvoir effectuer une, r ~ ~' à vitesse élevée en vue d'une répartition rapide de l'inoculum dans les alvéoles l~r. ;l~i.. ~. i.l.. ~ des supports de mesure 4, S, le module 6 de mesure peut co~u~,u,l.~ un dispositif 72 de 20 c~ ru6rl~io~ ' distinct pouvant être desservi par le premier organe r ~ 7.
De manière ~ , les modules 3 et 6 sont situés dans une enceinte confinée et Ll._....o.C~.II~ à une i ~' favorable à l'i ' o, alors que le magasin de stockage 67 des supporls 4, 5 est à I , ' ~i ambiante 25 ou situé dans un espace ~, " refroidi.
L'enceinte confinée et r~l~,...,~,.é~,JI~ pourra comporter au niveau du lien d'échange entre le premier 7 et le second 7' organes rlcul~ une ouverture obturable, évPnt~.f ll--- de manière étanche, .,~",, 1'- par le moyen informatique 8 de comrnande et de contrôle.
L'appareil pour la mise en oeuvre du procédé conforme à l'invention est par conséquent composé par un nombre limité de parties ,u.,,,;i~uli~,s, dont les IIIUU~. ', n~: au niveau des moyens de transfert et du dispositif de calibration ~.t~ , sont ~xrlî simplifiés. En OUtre, la structure et I'F.~---...,., ~ interne spécifique dudit appareil permet d'aboutir à un 35 c..~,. b minimum pour une capacité de traitement donnée.
Bien entendu, I'invention n'est pas limitée aux modes de réalisation décrits et représentés aux dessins annexés. Des "- restent possibles, - ~ __ L

r du point de vue de la ~ l des diYers éléments ou par d'~ v ' techniques, sans sortir pour autant du domaine de protection de l'invention.

Claims

1. Procédé d'identification bactérienne et de détermination de la sensibilité de bactéries à des antibiotiques, sous forme d'antibiogramme, caractérisé en ce qu'il consiste à introduire manuellement, au moyen d'un outil de prélèvement un volume donné de colonie bactérienne dans un récipient primaire(1; 101), à réaliser automatiquement la dispersion de cette colonie bactérienne au sein d'un liquide pour constituer un inoculum au moins précalibrédans ledit récipient primaire (1; 101), à effectuer également automatiquement des transferts totaux ou partiels de cet inoculum précalibré entre ledit récipient primaire (1; 101) et un ou plusieurs supports de mesure (4, 5; 104, 105) destinés à réaliser, respectivement, soit l'identification soit l'antibiogramme ou encore ces deux déterminations simultanément en une seule opération combinée, lesdits transferts étant réalisés sans que l'inoculum précalibré soit mis en contact avec un élément autre que, d'une part, un outil de prélèvement et de transfert (101'; 1, 101) et/ou le récipient primaire (1; 101) et, d'autre part, son ou ses supports de mesure finaux (4, 5; 104, 105) et de telle manière que les quantités de bactéries transférées correspondent aux quantités requises pour les analyses à réaliser, àeffectuer automatiquement la répartition de l'inoculum précalibré, éventuellement après l'avoir convenablement dilué pour aboutir à une calibration définitive, dans une ou plusieurs alvéoles (32, 37, 45; 132, 137, 145) desdits supports de mesure(4, 5; 104, 105) contenant pour la plupart des réactifs appropriés, à réaliser, dans certains cas, notamment pour l'antibiogramme, à l'intérieur d'un support de mesure (4; 104), une opération dite de pré-croissance destinée à mettre les bactéries en état de se multiplier rapidement avant de les soumettre à analyse et à faire desmesures sur le contenu desdites alvéoles (32, 37, 45; 132, 137, 145) pendant ou à
la fin d'une ou plusieurs incubations subies par l'inoculum dans lesdits supports de mesure (4, 5; 104, 105), les mesures relevées étant enregistrées par un moyen informatique (8; 108) et traitées en vue de la caractérisation de la croissance des bactéries présentes dans l'inoculum, de leur identification et/ou de la détermination de leur sensibilité à différents antibiotiques.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le prélèvement d'un volume donné de colonie bactérienne et les transferts des volumes d'inoculum précalibré dans les supports de mesure (104, 105) sont effectués au moyen d'un outil unique de prélèvement et de transfert (101') coopérant avec le récipient primaire (101), les volumes d'inoculum précalibré à

transférer étant déterminés à partir de mesures optiques de la concentration bactérienne dudit inoculum, effectuées dans le récipient primaire (101), et calculés en fonction des quantités de bactéries nécessaires.

3. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 et 2, caractérisé en ce que le prélèvement et l'introduction dans le récipient primaire (101) d'un volume donné de colonie bactérienne sont effectués au moyen de l'outil de prélèvement et de transfert (101') après sa mise en conformation en vue de prélever le volume souhaité et les transferts d'inoculum précalibré du récipientprimaire (101) vers les supports de mesure (104,105) sont réalisés par pipetage de volumes d'inoculum prédéterminés.

4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisé en ce que le transfert de l'inoculum à l'intérieur des supports de mesure (104,105), notamment vers les alvéoles (132, 145), est contrôlé
dynamiquement par commande de l'ouverture ou du blocage étanche de passages successifs conduisant progressivement vers lesdites alvéoles (132, 145).

5. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il consiste à
introduire manuellement au moyen d'un outil de prélèvement et de transfert un volume donné d'inoculum bactérien initial dans un récipient primaire (1), à
effectuer automatiquement une calibration définitive dudit inoculum dans ledit récipient primaire (1) en amenant sa concentration et son volume à des valeurs imposées, à effectuer également automatiquement des transferts totaux oupartiels de cet inoculum calibré entre ledit récipient primaire (1) et un ou plusieurs supports de mesure (4, 5) destinés à réaliser, respectivement, soit l'identification, soit l'antibiogramme ou encore ces deux déterminations simultanément en une seule opération combinée, lesdits transferts étant réalisés sans que l'inoculum initial soit mis en contact avec un élément autre que son récipient initial et son ou ses récipients finaux et de manière à ce qu'à leur issue l'inoculum calibré reste confiné à l'intérieur desdits supports de mesure (4, 5) qui sont alors clos, à
effectuer automatiquement la répartition de l'inoculum dans une ou plusieurs alvéoles (32, 45) desdits supports de mesure (4, 5) contenant pour la plupart des réactifs appropriés, à réaliser, dans certains cas, notamment pour l'antibiogramme, à l'intérieur d'un support de mesure (4), une opération dite de pré-croissance destinée à mettre les bactéries en état de se multiplier rapidement avant de lessoumettre à analyse et à faire des mesures photométriques sur le contenu desdites alvéoles (32, 45) pendant ou à la fin d'une ou plusieurs incubations subies par l'inoculum dans lesdits supports de mesure (4, 5), les mesures relevées étant enregistrées par un moyen informatique (8) et traitées en vue de la caractérisation de la croissance des bactéries présentes dans l'inoculum, de leur identificationet/ou de la détermination de leur sensibilité à différents antibiotiques.

6. Procédé, selon la revendication 5, caractérisé en ce que la calibration automatique de l'inoculum dans le récipient primaire (1) consiste à
réaliser, à partir d'un inoculum initial contenant une quantité de bactéries en excès par rapport aux besoins réactionnels, excès vérifié par observation visuelle de la turbidité de l'inoculum initial, une injection d'eau de dilution dans ledit récipient primaire (1), de manière à créer un volume augmenté d'inoculum plus dilué, puis à
éliminer une partie de l'inoculum ainsi dilué par aspiration jusqu'à obtention du volume final d'inoculum calibré requis, ces opérations étant conduites et éventuellement répétées sur la base de mesures optiques faites au travers du récipient primaire (1) sur l'inoculum pour en déterminer la concentration, jusqu'à
obtenir à la fois la concentration et le volume recherchés pour l'inoculum calibré.

7. Procédé, selon l'une quelconque des revendications 5 et 6, caractérisé en ce que le transfert de l'inoculum calibré entre le récipient primaire (1) et le ou les supports de mesure (4, 5) est effectué par emboîtement de tout ou partie (11) du récipient primaire (1) contenant l'inoculum dans une cavité
prévue à cet effet dans chaque support (4, 5), de manière à y transférer la quantité
d'inoculum calibré voulue, contenue dans la partie emboîtée dudit récipient primaire, cet emboîtement assurant l'isolement nécessaire au confinement de l'inoculum dans l'ensemble formé par le support de mesure (4, 5) et le récipientprimaire (1) ou la partie (11) du récipient primaire (1) emboîté dans ledit support (4, 5), ainsi que la fermeture de cet ensemble.

8. Procédé, selon l'une quelconque des revendications 1 et 5, caractérisé en ce que la pré-croissance de l'inoculum calibré est réalisée, dans les supports de mesure servant à la détermination des antibiogrammes ou dans certains supports de mesure servant à réaliser des déterminations combinées d'antibiogramme et d'identification, par une première incubation, dite pré-incubation, pendant laquelle les bactéries présentes dans l'inoculum sont incubées sans être mises en présence de réactifs et ce jusqu'à ce qu'un début de croissance bactérienne soit mesurable ou jusqu'à ce que la concentration bactérienne atteigne un niveau prédéfini, cette pré-croissance étant suivie de la mise en contact de l'inoculum avec les réactifs et d'une incubation finale pendant laquelle leurs interactions sont observées.

9. Procédé, selon l'une quelconque des revendications 1 et 5, caractérisé en ce que la répartition de l'inoculum dans les alvéoles (32, 37, 45;
132, 137, 145) situées en périphérie des supports de mesure (4,5; 104, 105) est réalisée par centrifugation, les mesures et les observations effectuées au niveau desdites alvéoles (32, 37, 45; 132, 137, 145) étant effectuées par mise en rotation des supports de mesure (4,5; 104, 105) autour de l'axe central de centrifugationdesdits supports.

10. Procédé, selon l'une quelconque des revendications 1,5,8 et 9, caractérisé en ce que, pendant la pré-croissance dans un support de mesure (4;
104) d'antibiogramme, la mesure de la concentration de l'inoculum bactérien et la détermination du début de croissance sont réalisées par des mesures photométriques effectuées sur une partie aliquote de l'inoculum transférée à ceteffet, par une première centrifugation, dans une alvéole périphérique spécifique (37; 137), dédiée à la caractérisation de la croissance pendant la pré-incubation et ne contenant pas de réactifs, le reste d'inoculum restant bloqué
pendant la pré-incubation dans une chambre concentrique centrale (27; 127) duditsupport (4; 104), avant d'être transféré, après achèvement de la pré-croissance,dans les autres alvéoles périphériques (32; 132) par une deuxième centrifugation, précédée d'une action d'autorisation ou de déblocage appropriée ouvrant le passage pour le transfert du reste de l'inoculum vers lesdites autres alvéoles (32; 132)contenant des réactifs.

11. Procédé, selon l'une quelconque des revendications 1,5,9 et 10, caractérisé en ce que le passage de l'étape de pré-incubation à l'étape d'incubation est effectué sans rupture du confinement de l'intérieur du support rotatif de mesure concerné (4; 104) par rapport à l'extérieur, ledit support restant clos et leditpassage étant réalisé par une action, pour le support (4), ou une interruption d'action, pour le support (104), sur un élément obturateur participant à la réalisation de ce confinement.

12. Procédé, selon l'une quelconque des revendications 1 à 11, caractérisé en ce que les mesures sont réalisées par néphélémétrie pour les supports de mesure (4; 104) servant à l'antibiogramme et par photométrie ou détermination d'absorbance ou de densité optique pour les supports de mesure(5;
105) servant à l'identification ou aux déterminations combinées identification/antibiogramme, ou encore par fluorimétrie, après addition préalable d'un marqueur fluorogène au réactif.

13. Procédé d'identification bactérienne et de détermination de la sensibilité de bactéries à des antibiotiques, dans lequel on introduit automatiquement un inoculum bactérien initial dans un support de mesure selon l'une quelconque des revendications 5 et 8 à 12, destiné à réaliser soit un antibiogramme, soit une analyse combinée simultanée d'identification et d'antibiogrammes, ladite introduction étant réalisée ou achevée de telle manièrequ'à son issue le support de mesure soit fermé et isolé de l'extérieur, caractérisé en ce qu'il consiste à répartir automatiquement une partie aliquote de l'inoculum initial dans une ou plusieurs alvéoles (37, 45),ne contenant pas de réactifs, desdits supports de mesure (4, 5), selon l'une quelconque des revendications 9 et 10, à
effectuer à l'intérieur du support de mesure (4, 5) une pré-croissance de cet inoculum initial, selon l'une quelconque des revendications 8 et 10, consistant à
mettre les bactéries de l'inoculum en état de se multiplier rapidement par une première incubation ou pré-incubation lors de laquelle des mesures photométriques, selon l'une quelconque des revendications 10 et 12, sont réalisées au niveau de la ou des alvéoles (32, 45) contenant ladite première partie aliquote de l'inoculum, à répartir automatiquement de l'inoculum dans les autres alvéoles (32, 45) contenant des réactifs, selon la revendication 9, et à effectuer des mesures photométriques sur l'inoculum au niveau desdites alvéoles (32, 45), selon la revendication 12 pendant une nouvelle phase d'incubation subie par l'inoculumdans lesdits supports de mesure (4, 5), les mesures relevées étant enregistrées par un moyen informatique (8) et traitées en vue de la caractérisation de la croissance des bactéries présentes dans l'inoculum, de leur identification et/ou de la détermination de leur sensibilité à différents antibiotiques.

14. Support de mesure en forme de disque comprenant un corps principal rigide délimitant, sous forme de compartiments non communiquants, une chambre centrale et plusieurs alvéoles périphériques associées, chacune, à une niche de captage, caractérisé en ce que ledit corps principal (126) présente uneparoi supérieure (128) pourvue de plusieurs ensembles d'orifices de transfert traversants (129, 130, 131, 133) débouchant dans la chambre centrale cylindrique (127), dans chaque niche de captage (146) affectée à chaquealvéole (132, 145) et dans chacune desdites alvéoles (132, 145) et recouverte, àl'exception d'une portion centrale entourant l'orifice de chargement (134) de ladite chambre centrale (127) et de la zone des fenêtres de mesure des alvéoles (132, 145), par une membrane flottante étanche affleurante (135) fixée localement et hermétiquement notamment à sa périphérie externe et autour de l'orifice de chargement (134) et pouvant être pressée intimement contre la surface supérieurede ladite paroi supérieure (128) pour former des zones de contact temporaires étanches (136, 138, 142) s'étendant entre ou recouvrant certains desdits ensembles d'orifices traversants (129, 130, 131, 133), notamment au cours de la rotation dudit support de mesure.

15. Support de mesure selon la revendication 14, caractérisé en ce que la paroi supérieure (128) comporte, au niveau de sa face supérieure, des rainures ou des renfoncements annulaires concentriques (140, 140') dans lesquel(le)s débouchent les orifices traversants (129, 130, 131, 133) disposés selon des cercles concentriques espacés, la rainure intérieure (140) comprenant une nervure (136) formant surface de contact annulaire et séparant les orifices de sortie (129) de la chambre centrale (127) et les orifices d'entrée (130) de la chambre concentrique annulaire (147) comprenant les niches radiales de captage (146), etles orifices de sortie (131) des niches de captage (146) débouchant au niveau de la face supérieure d'une nervure circulaire concentrique ou de structures proéminentes distinctes (138), par exemple sous forme de dômes, disposée(s) dansla rainure extérieure (140'), les extrémités supérieures de la nervure (136) et des structures (138) étant situées dans un plan ou des plans s'étendant légèrement en retrait du plan de collage de la membrane étanche affleurante (135).

16. Support de mesure selon l'une quelconque des revendications 14 et 15, caractérisé en ce qu'il comporte une alvéole de pré-incubation (137) identique aux autres alvéoles périphériques (132, 145), alignée circulairement avec ces dernières et communiquant avec une pré-chambre close (143) formée dans la chambre concentrique (147) renfermant les niches de captage et d'équirépartition (146) et alimentée en inoculum à partir d'une niche de captageinterne (144) située au niveau d'une portion de la paroi latérale périphérique (139) de la chambre centrale (127), par l'intermédiaire d'un passage non obturable parles zones de contact étanches (136, 138, 142) pouvant être formées entre la membrane affleurante (135) et la paroi supérieure (128).

17. Support de mesure selon la revendication 16, caractérisé en ce que le passage d'alimentation de la pré-chambre (143), communiquant librement avec l'alvéole de pré-incubation (137) et formant également trop-plein pour les niches de captage (146), est constitué par un conduit (157), débutant dans la partie supérieure de la portion de paroi latérale périphérique (139) délimitant la niche de captage interne (144), formé par coopération d'une rainure ménagée dans la partie supérieure d'un prolongement saillant radial (158) de la paroi latérale périphérique (139) de la chambre centrale (127) et de la paroi supérieure (128) et débouchantdans ou à l'entrée d'une rainure (148) à extension radiale centripète, creusée dans la face supérieure de la paroi supérieure (128), formant conduit étanche en coopération avec la membrane (135) contrecollée de part et d'autre de ladite rainure (148) et dont l'extrémité distale se termine au niveau d'un orifice traversant (148') débouchant dans la préchambre (143).

18. Support de mesure selon l'une quelconque des revendications 14 à 17, caractérisé en ce que l'orifice de chargement (134) de la chambre centrale(127) est situé dans un renfoncement (134') de la paroi supérieure (128) et est obturable au moyen d'un bouchon (150) dont la partie supérieure est sensiblementde niveau avec la face supérieure de la paroi supérieure (128), en ce que le fond de la chambre centrale (127) est entouré d'un manchon concentrique (151) de préhension et de rigidification, saillant au niveau de la face inférieure du support (104, 105) et en ce qu'une ouverture traversante (152), ayant des dimensions identiques à celles d'une alvéole (132, 145) et située en alignement circulaire avec ces dernières, est ménagée dans le corps principal (126) et dans la paroi supérieure (128), ladite ouverture (152) étant préférentiellement située adjacente à l'alvéole de pré-incubation (137).

19. Support de mesure selon l'une quelconque des revendications 14 à 18, caractérisé en ce que la paroi supérieure (128) est munie, au dessus de chaque alvéole (132, 137, 145) et près de son bord extérieur, d'une fenêtre de mesure, une fenêtre analogue étant prévue, dans chacune des portions de paroi ducorps principal (126) constituant respectivement les fonds desdites alvéoles, enregard de chaque fenêtre de mesure précitée et au moins une zone réfléchissante d'indexation, formée sur la face externe de la paroi périphérique externe du corps principal (126), étant associée à chaque alvéole (132, 137, 145) avec un décalage angulaire fixe par rapport à cette dernière.

20. Appareil pour la mise en oeuvre du procédé selon l'une quelconque des revendication 1 à 12 essentiellement constitué par un premier module (102) de support et de stockage de supports de mesure (104, 105) frais, selon l'une quelconque des revendications 14 à 19, et de récipients primaires (101) coopérant chacun avec un outil de prélèvement et de transfert (101') correspondant, par un deuxième module (103) d'incubation des supports (104 et 105), après injection de l'inoculum bactérien, par un troisième module (106) de centrifugation et de mesures néphélémétriques et/ou photométriques et/ou fluorimétriques, par un ou plusieurs dispositifs (107, 107') de transfert et de manipulation desservant lesdits modules (102, 103 et 106) et par un moyen informatique (108) de contrôle et de commande des différentes étapes du procédé,et d'acquisition, d'enregistrement, de traitement, d'évaluation et/ou de restitution de données, les deuxième et troisième modules (103) et (106) étant disposés dansune enceinte de confinement, appareil caractérisé en ce que les récipients primaires (101) sont portés par un moyen support (109) en forme de couronne, s'étendant concentriquement autour et sous un moyen support (110) en forme de disque portant les supports de mesure (104, 105) frais, les deux moyens supports (109, 110) étant montés avec faculté de rotation autour d'un même axe et en ce que chaque récipient primaire (101) peut être amené, par simple rotation dudit moyen support (109) en forme de couronne, au niveau d'un poste (111) de manipulation de l'outil de prélèvement et de transfert (101') associé et de mesure de densité optique du contenu dudit récipient primaire (101).

21. Appareil selon la revendication 20, caractérisé en ce que chaque récipient primaire (101) de réception d'un volume donnée de colonie bactérienne et de préparation d'un inoculum au moins précalibré se présente sous la forme d'un récipient cylindrique ouvert au niveau de sa partie supérieure, laquelle est munie d'un rebord radial (112) pour le maintien dudit récipient primaire (101) dans un des logements correspondants (109') ménagé(s) dans le support mobile (109) en forme de couronne et en ce que l'outil de prélèvement et de transfert (101') consiste en une seringue dont le corps (113) comporte une partie effilée avant de prélèvement et d'éjection (113') et une partie arrière (113") de stockage et de préhension sensiblement cylindrique, ladite partie arrière (113") présentant au moins un décrochement radial extérieur (114) au niveau de son extrémité contiguë à la partie avant (113') en vue d'un emboîtement partiel avec blocage dudit corps (113) dans le récipient primaire (101), l'extrémité libre avant de la partie avant (113') étant alors située à faible distance du fond dudit récipient primaire (101).

22. Appareil selon la revendication 21, caractérisé en ce que la seringue (101')comporte, au niveau de son extrémité avant, des moyens (118, 118') pour prélever, en volume, une quantité réduite ou une quantité normale de colonie bactérienne, en fonction du positionnement de son piston (115).

23. Appareil selon l'une quelconque des revendications 20 à 22, caractérisé en ce que chaque récipient primaire (101) comporte dans sa paroi latérale, à proximité de son fond, deux fenêtres de mesure (119, 199') en regard, adaptées pour la mesure de la densité optique du contenu dudit récipient primaire (101) au niveau du poste (111).

24. Appareil selon l'une quelconque des revendications 21 à 23, caractérisé en ce que le moyen de manipulation (121) de la seringue constituant l'outil de prélèvement (101'), au niveau du poste (111), consiste en deux ensembles de mâchoires (121' et 121")comprenant deux mâchoires externes (121') destinées à venir en prise rigide et bloquante avec un rebord radial (128) au niveau de l'ouverture de la partie arrière (113") du corps (113) et deux mâchoires internes (121"), disposées concentriquement entre les deux mâchoires externes (121'), destinées à venir en prise rigide et bloquante avec un renflement (122') de la tige d'actionnement (116), de la fermeture des deux ensembles de mâchoires (121', 121'') étant réalisée simultanément par coulissement d'un manchon (121''') autour et le long des mâchoires externes ( 121'), les mâchoires internes (121'') pouvant coulisser par rapport aux mâchoires externes (121'), notamment en position de fermeture, et au manchon (121'''') et ce dernier pouvant prendre appui sur le support mobile (109) en forme de couronne et sur le bord radial (112) de l'ouverture supérieure du récipient primaire (101) considéré, de manière à bloquer ce dernier en position dans son logement (109') lors du coulissement de l'un quelconque des deux ensembles de mâchoires (121', 121'').

25. Appareil selon l'une quelconque des revendications 20 à 24 caractérisé en cequ'il comporte, d'une part, un premier dispositif de manipulation et de transfert (107), desservant les supports (109 et 110) et se présentant sous la forme d'un bras manipulateur monté avec faculté de rotation et de coulissement sur un premier axe vertical (123) et comprenant deux mâchoires de préhension (124, 124') dont la première (124) est munie d'un moyen de prise (125) d'un récipient primaire (101) et dont la seconde (124') présente une forme courbée ou un crochet destiné à venir en prise en deux endroits distincts d'un support de mesure (104, 105), de manière à maintenir ce dernier par soutien inférieur et par pincement en coopération avec la première mâchoire de préhension (124) et, d'autre part, un second dispositif de manipulation et de transfert (107'), desservant le module d'incubation (103) et le module (106) de centrifugation et de mesure, se présentant sous la forme d'un bras support monté avec faculté de rotation et de coulissement sur un second axe vertical (123') et comportant à son extrémité libre un organe de réception (125') coopérant avec conjugaison de forme avec une partie au moins de la face inférieure des supports de mesure (104, 105), les deux dispositifs de manipulation et de transfert (107, 107') présentant une zone de chevauchement de leurs espaces ou zones de manoeuvre respectivement accessibles, au niveau de laquelle peut notamment s'effectuer le transfert des supports de mesure (104, 105) de l'un à l'autre.

26. Appareil selon l'une quelconque des revendications 20 à 25, caractérisé en ce que le troisième module (106) comporte plusieurs postes de travail (153), notamment de mesure et de centrifugation, comprennant chacun, en plus des différents moyens de mesure par néphélémétrie, par photométrie et/ou par fluorimétrie, d'une part, une embase support (154) en forme de disque, portée par l'extrémité supérieure d'un arbre vertical (154') entraîné
en rotation et pouvant s'engager avec enclenchement ou avec maintien par friction radiale dans le manchon concentrique (151) d'un support de mesure (104, 105) et, d'autre part, un dispositif presseur supérieur (155) de forme sensiblement discoïdale et entraîné en rotation autour de son axe de symétrie par friction sur le support de mesure (104, 105), ledit dispositif presseur (155) comprenant un ou plusieurs organes presseurs (156, 156', 156'') de forme annulaire et pouvant être déplacé, de manière réversible, d'une position haute dans laquelle lesdits organes presseurs ne sont pas en contact avec le support de mesure (104, 105) disposé sur l'embase support (154), vers plusieurs positions plus basses dans lesquelles ils sont successivement mis en appui sur la membrane flottante affleurante (135) selon un ordre prédéterminé (156", 156', 156), cette dernière prenant elle-même appui au niveau de zones de contact étanches, circulaires ou annulaires, concentriques, ou disposées selon des configurations circulaires ou annulaires concentriques, avec la paroi supérieure (128) du support de mesure (104, 105) considéré.

27. Appareil pour la mise en oeuvre du procédé, selon l'une quelconque des revendications 5 à 12 et 13, essentiellement constitué par un premier module (2) de réception et de stockage de supports de mesure (4 et/ou 5) frais et usagés, par un deuxième module (3) d'incubation des supports (4 et/ou 5), par un troisième module (6) de mesures néphélémétriques et/ou photométriques et/ou fluorimétriques, par un ou plusieurs dispositifs (7, 7') de transfert desservant les modules (2, 3 et 6) et par un moyen informatique (8) de contrôle et de commande des différents étapes de procédé, et d'acquisition, d'enregistrement, de traitement, d'évaluation et/ou de restitution de données, caractérisé en ce que le premier module (2) de réception et de stockage des supports de mesure (4 et/ou 5) frais et usagés comporte, en outre, au moins un moyen (59) de réception et de stockage de récipients primaires (1) contenant de l'inoculum bactérien initial et un dispositif de calibration (60, 61) de l'inoculum dans lesdits récipients primaires (1) et de préparation desdits supports de mesure (4 et/ou 5).

28. Appareil, selon la revendication 27, caractérisé en ce que le récipient primaire (1) de réception de l'inoculum se présente sous forme d'un récipient cylindrique muni sur son fond d'au moins un tube d'évent (9), d'une conduite d'évacuation de trop-plein (10) éventuellement d'une conduite (10') de mise à un niveau inférieur du volume d'inoculum, d'un moyen de prélèvement d'une quantité prédéterminée d'inoculum, monté de manière séparable, par arrachement ou par emboîtement, dans le fond du récipient (1) et excentré par rapport à l'axe dudit récipient (1), telle qu'une pipette (11), et d'un logement transversal (12) en forme d'auge s'étendant entre les parois du récipient (1), qui est pourvu à chaque extrémité
dudit logement (12) d'une fenêtre de mesure (13), ce logement (12) étant (12) muni, en outre, d'une partie surélevée (12') communiquant avec ledit logement (12), l'évent (9), la conduite de trop-plein (10), la conduite (10') de mise à un niveau inférieur et le moyen de prélèvement (11) étant fermés de manière étanche par un film arrachable (14), un couvercle de fermeture (15) coopérant par emboîtement conique étanche avec la partie supérieure conique (16) dudit récipient (1).

29. Appareil, selon la revendication 28, caractérisé en ce que la partie supérieure conique (16) du récipient primaire (1) est pourvue d'au moins une encoche (17) de faible profondeur et de deux encoches (18) de profondeur plus importante et de largeur différente, disposées en alignement entre elles et à 90°
par rapport à l'axe passant par la ou les encoches (17) de faible profondeur, cette ou ces encoches de faible profondeur (17) étant alignées dans l'axe du logement (12) du fond et les encoches (18) de profondeur plus importante coopérant avec des pattes (19) de section correspondante prévues sur le couvercle de fermeture étanche (15) qui est pourvu, d'une part, sur sa face supérieure, d'une surface (20) s'étendant dans l'axe des pattes (19) et, d'autre part, d'une paroi conique (21) de forme correspondante à celle de la partie supérieure conique (16) du récipient (1) et reliant les pattes (19).

30. Appareil, selon la revendication 27, mettant en oeuvre un support rotatif (4) pour antibiogramme, qui se présente sous forme d'un disque compositesupérieur muni d'alvéoles périphériques (32) de réception de l'inoculum et de préparations antibiotiques, caractérisé en ce que ledit support de mesure rotatif (4) est muni d'un corps cylindrique concentrique, de plus petit diamètre que le disque et lié audit disque, formant une chambre centrale (33), de réception de l'inoculum pour la distribution par centrifugation, ladite chambre (33) étant alimentée à
travers un orifice (23) de la face supérieure du disque composite supérieur et étant entourée par un manchon (35) de préhension et de rigidification de l'ensemble.

31. Appareil, selon l'une quelconque des revendications 27 et 30, caractérisé en ce que le disque composite supérieur du support rotatif pour antibiogramme (4) est constitué, d'une part, par une partie de couvercle circulaire (22) pourvue en son centre d'un orifice (23) et, d'autre part, par unplateau circulaire (31), dont la face supérieure tournée vers la face inférieure de la partie de couvercle (22) porte, en relief sur sa périphérie, les alvéoles (32) de réception de l'inoculum et de préparations antibiotiques, ce plateau circulaire (31) étant relié à la chambre concentrique (33) fermée par un fond (34), la partie decouvercle (22) étant pourvue d'un rebord (22') s'étendant concentriquement par-dessus une paroi circulaire (31') du plateau circulaire (31), délimitant les alvéoles en relief (32) vers l'extérieur, et fixé à ladite paroi circulaire (31') par collage ou soudage.

32. Appareil, selon la revendication 31, caractérisé en ce que le plateau circulaire (31) de la partie inférieure de corps est pourvu, entre les alvéoles en relief (32), d'au moins une alvéole de pré-incubation (37) reliée, par l'intermédiaire d'un capillaire (38), à une chambre concentrique (27) ménagée sous le plateau circulaire (22) de la partie de couvercle, dans la chambre concentrique (33) du plateau circulaire (31) formant la partie inférieure du corps.

33. Appareil, selon l'une quelconque des revendications 31 et 32, caractérisé en ce que l'orifice (23), prévu au centre de la partie de couvercle (22), est disposée dans un puits (25) s'étendant concentriquement à l'intérieur de lachambre concentrique (27) qui présente une coupelle mobile (28) pourvue d'un milieu de culture sec, ladite coupelle mobile (28) présentant une paroi de guidage étanche (29) délimitant avec ladite coupelle mobile (28) une cuvette, le puits (25) étant fermé par un film étanche (26) recouvrant la partie supérieure du plateau circulaire de couvercle et délimitant simultanément le capillaire (38).

34. Appareil, selon la revendication 27, mettant en oeuvre un support rotatif (5) pour l'identification, se présentant sous forme d'un disque composite supérieur muni d'alvéoles périphériques (45) de réception de l'inoculum et de réactif de caractérisation, caractérisé en ce que ledit support rotatif (5) pourl'identification est muni d'un corps cylindrique concentrique, de plus petit diamètre que le disque et lié audit disque, formant un manchon concentrique (46) de réception du récipient primaire (1) en position retournée, pour la distribution par centrifugation de l'inoculum, ce manchon concentrique (46) s'étendant, au centre, sous la face inférieure du plateau circulaire (44), étant relié à cette dernière et étant muni à son extrémité libre d'une partie de paroi conique (47), s'étendant intérieurement audit manchon (46) et destinée à coopérer avec la paroi externe de la partie supérieure conique (16) du récipient primaire (1) et étant entouré par un manchon concentrique (48) de préhension et de rigidification de l'ensemble.

35. Appareil, selon la revendication 34, caractérisé en ce que le disque composite supérieur du support rotatif pour l'identification (5) est constitué, d'une part, par une partie de couvercle circulaire (43) et, d'autre part, par une partie inférieure sous forme d'un plateau circulaire (44) pourvu, sur sa face supérieure tournée vers la face inférieure de la partie de couvercle (43), en relief sur sa périphérie, d'alvéoles (45) de réception de l'inoculum et de réactifs de caractérisation, le couvercle (43) étant pourvu d'un rebord (43') s'étendant concentriquement par-dessus la paroi circulaire (44') du plateau circulaire (44), délimitant les alvéoles en relief (45) vers l'extérieur, et fixé à ladite paroi circulaire (44') par collage ou soudage.

36. Appareil, selon l'une quelconque des revendications 31 à 35, caractérisé en ce que des moyens de captage de l'inoculum (45"), lors de la centrifugation, prévus, vus en sens radial, devant chaque alvéole (32, 45), respectivement des supports (4 et 5), sont reliés chacun avec l'intérieur d'une alvéole correspondante (32, 45) par l'intermédiaire d'un capillaire (36, 49) et sont ouverts, par ailleurs, sur un espace intérieur (30, 43"), communiquant avec la chambre concentrique (33) du plateau circulaire (31) formant la partie inférieure de corps ou avec l'espace de réception du récipient primaire (1) dans le manchonconcentrique (46) s'étendant sous la face inférieure du plateau circulaire (44) formant la partie inférieure du disque composite, les alvéoles en relief (32, 45) étant reliées, par ailleurs, chacune par l'intermédiaire d'un capillaire radial (39, 50) à un capillaire circulaire (40, 51) débouchant, par l'intermédiaire d'un autre capillaire (41, 52), à l'extérieur du plateau circulaire (22) de couvercle ou de la partie de couvercle circulaire (43), l'alvéole de pré-incubation (37) prévue sur le support de mesure (4) pour antibiogramme étant reliée directement, par un trou de passage correspondant, au capillaire circulaire (40), ces différents capillaires étant délimités dans la partie supérieure du plateau circulaire (22) et du couvercle (43) par le film étanche (26 ou 52'), les capillaires (41 et 52) communiquant en leurextrémité la plus proche de l'axe central des disques (31 et 44) avec les chambres intérieures (27 et 43") par des trous percés dans les plateaux circulaires (22 et 43).

37. Appareil, selon l'une quelconque des revendications 31 à 33, 35 et 36, caractérisé en ce que le plateau circulaire de couvercle (22) et le couvercle circulaire (43) sont munis, en outre, au-dessus de chaque alvéole (32, 45) et près de son bord, d'une fenêtre de mesure (42, 53), une fenêtre analogue (43, 54) étant prévue sous la face inférieure du plateau circulaire (31, 44) formant la partie inférieure du corps ou du disque composite, en regard de chaque fenêtre de mesure (42, 53) et au moins une zone réfléchissante d'indexation (42', 53'), formée sur la face externe de la paroi périphérique externe des supports (4, 5), étant associée à
chaque alvéole (32, 45) avec un décalage angulaire fixe par rapport à cette dernière.

38. Appareil, selon la revendication 37, caractérisé en ce que, pour l'introduction automatique d'un inoculum bactérien initial dans un support de mesure pour antibiogramme ou analyse combinée simultanée, le récipient primaire(1') se présente sous forme d'un réceptacle muni, d'une part, d'une pipette (11)identique à celle associée au récipient primaire (1) et, d'autre part, d'une macropipette (73) de transfert de la totalité du contenu du récipient (1'), cette macropipette pouvant être détachée du récipient primaire (1'), utilisée pour vider son contenu dans le support (4), puis replacée dans le récipient primaire (1), la pipette (11) étant ensuite détachée et utilisée pour obturer le support (4) en étant déposée dans le puits (25).