BRPI0721157A2

BRPI0721157A2 - Agente radioativo para geração de imagens de diagnóstico

Info

Publication number: BRPI0721157A2
Application number: BRPI0721157-0A
Authority: BR
Inventors: Daisaku Nakamura; Akio Hayashi; Toshiyuki Shinmura; Soichi Nakamura; Shinji Tokunaga; Emi Kaneko; Masahito Toyama
Original assignee: Nihon Mediphysics Co Ltd
Priority date: 2006-12-21
Filing date: 2007-11-20
Publication date: 2014-04-01
Also published as: RU2445120C2; KR101497406B1; ES2663696T3; RU2009128055A; US20100028258A1; EP2106808A1; CN101563107B; EP2106808A4; JPWO2008075522A1; PL2106808T3; CN101563107A; JP5159636B2; TW200826964A; EP2106808B1; KR20090094081A; US8790620B2; KR101579796B1; HK1134901A1; NO343137B1; AU2007335633A1

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “AGENTE RADIOATIVO PARA GERAÇÃO DE IMAGENS DE DIAGNÓSTICO”.

CAMPO TÉCNICO

A presente invenção se refere a uma composição de um composto de aminoácido marcado com flúor radioativo. Mais especificamente, a presente invenção se refere a uma composição de um composto de aminoácido marcado com flúor radioativo útil na detecção de tumores pela tomografia de emissão de pósitrons (PET).

ESTADO DA TÉCNICA

O agente de imagem de diagnóstico radioativo é um fármaco administrado diretamente ao corpo humano, e é uma composição farmacêutica contendo um composto marcado com um radioisótopo específico como ingrediente eficaz. O agente de imagem de diagnóstico radioativo possibilita o diagnóstico pela administração de um agente ao paciente e pela detecção de uma radiação emitida pelo composto, seguido da geração de imagem baseada nas informações obtidas da radiação. O método de diagnóstico assim realizado é chamado de exame de medicina nuclear, sendo eficaz no diagnóstico de diversas doenças, inclusive cardiopatias e câncer. Além disso, o exame de medicina nuclear caracteriza-se não somente pela sua alta especificidade e sensibilidade a doenças, mas também pela vantagem de fornecer informações quanto à funcionalidade de lesões, comparado a outras técnicas de exame. Dentre os compostos que vêm sendo pesquisados e desenvolvidos como tais agentes de imagem de diagnóstico radioativos está o ácido l-amino-3-

I Q

[ FJfluorciclobutanocarboxílico (daqui em diante chamado de

[18FJ-FACBC). Sabe-se que o [1SF]-FACBC é absorvido em uma

célula via um transportador de aminoácidos. Sendo assim, espera- 18

se que o [ FJ-FACBC seja desenvolvido como um agente de diagnóstico tumoral, pois é em grande parte absorvido nas células tumorais, que são altamente proliferativas e ativas na síntese io protéica.

Nos agentes de imagem de diagnóstico radioativos, geralmente ocorre o problema de que tais compostos se decompõem pela auto-radiação durante a administração dos agentes, provocando uma diminuição na pureza radioquímica 15 devido à chamada radiólise. Particularmente, nos agentes PET para detecção de nuclídeos de pósitrons, tal como 18F, a radiólise geralmente se toma mais problemática, pois a meia-vida dos nuclídeos usados nela é mais curta do que a dos nuclídeos usados nos agentes SPECT para detecção de nuclídeos emissores de raio 20 gama, tal como 99mTc, e, dessa forma, a radioatividade quando da distribuição deve ser definida maior do que para os agentes SPECT, com isso tomando maior sua energia de radiação resultante.

Para fármacos em geral, recomenda-se, na diretriz do ICH, que se as impurezas em um agente excederem 1,0%, as impurezas sejam submetidas à determinação de estrutura quando a dosagem diária máxima de um componente eficaz dela for tão baixa quanto não mais do que 1 mg (Documento I). Na maioria dos casos, a quantidade física de impurezas advindas da

radiólise que pode ser considerada como sendo um aspecto da

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decomposição de um agente é tão baixa quanto cerca de 10 mol, mesmo se passar de 1,0%. Uma vez que a quantidade de produção de impurezas, tais como matérias radioativas decompostas, é minúscula, a determinação das impurezas pela análise NMR é difícil, ainda que apenas a determinação do peso molecular e a ío suposição de seus fragmentos possam ser feitas por espectrometria de massa, que é excelente quanto à sensibilidade de detecção. Além disso, é extremamente difícil realizar a verificação quanto a se as impurezas afetam ou não a eficácia, tal como a acumulação tumoral do agente.

Portanto, as impurezas no agente de imagem de

diagnóstico radioativo devem ser mantidas no menor nível possível, sendo preferível que a radiólise, que pode provocar a produção de impurezas, também seja inibida o máximo possível.

Vários métodos para inibir a radiólise foram

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examinados focando-se na aplicação de [ F]-fluordeoxiglicose (daqui em diante chamada de [18FJ-FDG).

O documento de Publicação Internacional Ns W003/090789 revela um método para reduzir a radiólise da [18FJ- FDG pela adição de um tampão baseado em ácido fraco a uma solução de [18FJ-FDG e uma injeção preparada pelo método (Documento de Patente 1). Além disso, o documento de Publicação Internacional N- W004/043497 revela a adição de

1 R

etanol a uma solução de [ F]-FDG para obter uma composição de

1 δ

injeção, que pode ser reduzida na radiólise de [ FJ-FDG para melhorar a estabilidade (Documento de Patente 2).

A Patente Japonesa em Trâmite (Kokai) N-

H10-147542 revela uma técnica utilizando um composto orgânico de elevada aceitabilidade fisiológica, tais como monossacarídeos, dissacarídeos, ácidos orgânicos e sais ou ésteres dos mesmos, como um agente de proteção contra radiação (Documento de ío Patente 3). Nesta publicação, o composto orgânico de elevada aceitabilidade fisiológica e particularmente eficaz como agente protetor contra radiação é definido como tendo uma taxa de reação constante com radicais OH, radicais H ou elétrons hidratados na faixa de 1 x IO8 a 5 x IO10 mofV1.

O documento de Publicação Internacional N-

W004/056725 revela um método de síntese em fase sólida para detectores marcados com 18F incluindo [18FJ-FACBC (Documento de Patente 4). Nesse documento, é sugerido que a radiólise de detectores marcados com 18F seja reduzida pela adição de ácido ascórbico a uma composição de injeção.

Documento I: ICH HARMONISED TRIPARTTITE GUIDELINE, IMPURITIES IN NEW DRUG PRODUCTS Q3B (R2) (página 7) (URL: http://www.pmda.go.Íp/ich/q/q3br2 06 7 3e.pdf)

Documento de Patente 1: documento de

Publicação Internacional No. W003/090789 Documento de Patente 2: documento de Publicação Internacional No. W004/043497

Documento de Patente 3: Patente JP em Trâmite (Kokai) No. H10-147542 Documento de Patente 4: documento de

Publicação Internacional No. W004/056725

REVELAÇÃO DA INVENÇÃO PROBLEMAS A SEREM RESOLVIDOS PELA INVENÇÃO Como descrito acima, o documento de

Publicação Internacional N° W003/090789 e o documento de Publicação Internacional N-. W004/043497 No entanto, esses documentos só revelam técnicas para reduzir a radiólise apenas da

1 S

[ FJ-FDG, mas não revelam nenhuma técnica para reduzir a

radiólise de uma série de compostos de aminoácidos marcados

com flúor radioativo, tal como [18FJ-FACBC.

Além isso, um aspecto técnico da invenção

revelada no documento de Publicação Internacional N°

W003/090789 consiste em adicionar um tampão, ou seja,

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aumentar a estabilidade radioquímica da [ FJ-FDG a um pH com ação tamponante, e é indicado, como Exemplos Comparativos,

1 R

que a estabilidade radioquímica da [ FJ-FDG não aumenta com NaCl, que não possui ação tamponante. [0011]

A Patente Japonesa em Trâmite (Kokai) N- H10-147542 revela uma técnica que utiliza um composto orgânico com alta aceitabilidade fisiológica como agente protetor contra radiação para radiofármacos. No entanto, não está claro qual composto é selecionado como o composto orgânico com alta aceitabilidade fisiológica ou quanto do composto é adicionado a fim de evitar a radiólise da série de compostos de aminoácidos marcados com flúor radioativo, tal como [18FJ-FACBC.

0 documento de Publicação Internacional Ns W004/056725 propõe que a adição de ácido ascórbico em uma

composição de injeção é capaz de reduzir a radiólise de detectores

1 8

marcados com F. No entanto, ele não contém nenhuma io revelação concreta do uso de ácido ascórbico como aditivo para [18FJ-FACBC. Além disso, não é revelada a condição em que ele deve ser usado.

A presente invenção foi idealizada em vista das circunstâncias acima, e tem por objetivo oferecer uma composição compreendendo um composto de aminoácidos marcado com flúor radioativo, que possa ser reduzido na radiólise.

MEIOS PARA SOLUCIONAR O PROBLEMA

Como resultado de pesquisas meticulosas, os

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inventores descobriram que a radiólise do [ FJ-FACBC é reduzida de forma dependente do pH. Particularmente, verificou- se que, quando o valor do pH não é maior do que 5,9, sua estabilidade é mantida mesmo se não existirem aditivos farmacêuticos ou tampões que previnam a radiólise.

Portanto, verificou-se que a diminuição da

pureza radioquímica do agente de imagem diagnóstico radioativo pode ser reduzida mantendo o pH do agente final em 2,0-5,9, consumando assim a presente invenção.

De acordo com um aspecto da presente invenção, é proporcionado um agente de imagem de diagnóstico radioativo que compreende uma solução contendo um composto radioativo representado pela seguinte fórmula (1) como componente eficaz:

v COOH

{i >

em que a solução tem um valor de pH de 2,0 a io 5,9. Em uma concretização preferida do agente de imagem de diagnóstico radioativo de acordo com a presente invenção, a solução acima pode ter um valor de pH de 2,0 a 4,9.

O agente de imagem de diagnóstico radioativo de acordo com a presente invenção pode ser um ao qual um 15 aditivo farmacêutico também é adicionado. Como aditivos farmacêuticos, vários compostos que são geralmente aceitos como compostos aditivos podem ser usados, inclusive um regulador de pH e um auxiliar de dissolução, bem como um açúcar, um álcool de açúcar, uma lactona de açúcar, entre outros. De preferência, 20 pode-se usar um álcool de açúcar.

Como o álcool de açúcar, pode-se usar um ou mais compostos selecionados dentre o grupo que consiste de eritritol, xilitol, sorbitol e manitol. Sua quantidade de adição não se restringe, contanto que pode adicionalmente reduzir a radiólise, mas, de preferência, não é menor do que 0,5 μιηοΙ/inL, mais preferencialmente, não menos do que 1,0 μιηοΙ/mL, ainda mais preferencialmente não menos do que 5,0 μιηοΙ/mL, e particularmente preferível, não menos do que 10,0 μιηοΙ/mL. O 5 limite superior da quantidade de adição precisa ser uma quantidade aceitável para aditivos farmacêuticos; por exemplo, o limite superior como uma dose diária total é de 200 mg para xilitol, 1,5 g para sorbitol e 1,2 g para manitol.

No agente de imagem de diagnóstico radioativo 10 de acordo com a presente invenção, a concentração radioativa não está particularmente restrita, contanto que uma quantidade suficiente de radioatividade possa ser assegurada quando usada. Mais especificamente, a concentração radioativa em uso é, de preferência, 25 a 125 MBq/mL, e mais preferencialmente, 25 a 15 100 MBq/mL.

No presente relatório, compostos aceitáveis como aditivos farmacêuticos significam compostos que são aprovados como aditivos farmacêuticos na Farmacopéia Japonesa, na Farmacopéia dos Estados Unidos, na Farmacopéia Européia, e 20 assim por diante. Além disso, álcool de açúcar significa uma forma reduzida de um açúcar, e lactona de açúcar significa um composto de éster cíclico que é derivado pela condensação por desidratação intramolecular de um açúcar.

EFEITO DA INVENÇÃO De acordo com a presente invenção, um valor de pH de uma solução contendo um composto de aminoácido marcado com flúor radioativo é regulado para 2,0-5,9, e, dessa forma, obtém-se uma composição de um composto de aminoácido marcado com flúor radioativo que é reduzida na radiólise.

MELHOR MODO PARA REALIZAÇÃO DA

INVENÇÃO

Daqui em diante, as concretizações mais preferíveis para a composição do composto de aminoácido marcado com flúor radioativo de acordo com a presente invenção serão descritas.

O agente de imagem de diagnóstico radioativo

de acordo com a presente invenção é produzido em 4 etapas: uma

etapa de conferir o flúor radioativo a um precursor (etapa 1); uma

etapa de realizar a desproteção do composto ao qual o flúor

radioativo foi conferido (etapa 2); uma etapa de realizar a

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purificação de uma solução contendo anti-[ FJ-FACBC após a desproteção (etapa 3); e uma etapa de processar a solução anti-

I R

[ FJ-FACBC purificada em uma preparação (etapa 4).

O flúor radioativo pode ser obtido por um

método conhecido, por exemplo, um método no qual água

1 R

enriquecida com H2 O é utilizada como alvo e exposta ao

bombardeio com prótons. Neste caso, o flúor radioativo existe na

18

água enriquecida com H2 O como alvo. A água enriquecida com

I S

H2 O contendo flúor radioativo é deixada passar, por exemplo, através de uma coluna de troca aniônica de modo que o flúor radioativo seja adsorvido e coletado na coluna, com isso sendo

I O

separado da água enriquecida com H2 O. Após isso, deixa-se passar uma solução de carbonato de potássio através da coluna para eluir o flúor radioativo, e o eluato é suplementado com um catalisador de transferência de fase e evaporado à secura, ativando assim o flúor radioativo.

Na etapa 1, o flúor radioativo seco é dissolvido em acetonitrilo, e o cis-l-(N-terc-butoxicarbonil)amino-3- [(trifluormetil)sulfoniloxi]-ciclobutanocarboxilato de etila, como 10 precursor, é adicionado à solução de acetonitrilo para deixá-los reagir sob aquecimento. Como resultado, o flúor radioativo é adicionado ao precursor, por meio do que trans-l-(N-terc- butoxicarbonil)amino-3-[18F]fluorciclobutanocarboxilato de etila é sintetizado.

Na etapa 2, o trans-l-(N-terc-

1 8

butoxicarbonil)amino-3-[ FJfluorciclobutanocarboxilato de etila obtido na etapa 1 é desprotegido para produzir uma solução contendo anti-[18F]-FACBC como produto alvo. Nessa etapa, a condição de desproteção é de preferÊncia ácida. Por exemplo, pode-se adicionar ácido clorídrico a uma solução contendo trans-

1 R

1 -(N-terc-butoxicarbonil)amino-3-[ F]fluorciclobutano carboxilato de etila para efetuar a desproteção. A quantidade de ácido a ser adicionada não precisa ser restrita, contanto que a quantidade possa oferecer uma condição ácida suficiente para a desproteção. Na etapa 3, a purificação da solução contendo

18

anti-[ F]-FACBC que é obtida na etapa 2 é realizada. O processo de purificação a ser utilizado inclui vários processos, tal como um processo de extração de líquido-líquido e um processo de 5 separação em coluna. Por exemplo, pode-se usar um processo em que a solução de reação é injetada na HPLC para obter uma fração contendo anti-[18F]-FACBC. A solução anti-[18F]-FACBC pode ser obtida nessa etapa.

O agente de imagem de diagnóstico radioativo

ío de acordo com a presente invenção pode ser obtido submetendo a

solução anti[18F]-FACBC obtida na etapa 3 a várias operações

necessárias para produzir uma preparação, incluindo uma

operação de vaporização dos solventes orgânicos, uma operação

de adição de aditivos farmacêuticos, uma operação de ajuste do

pH, uma operação de ajuste da concentração radioativa, e uma

operação de esterilização por meio de um autoclave, filtração ou

similar. Nessa etapa, é preferível que o valor do pH seja

controlado na faixa de 2,0 a 5,9. Para esse fim, é preferível que o

valor do pH seja previamente controlado na faixa de 2,0 a 5,9 na

etapa 3. Além disso, e possível que o pH seja controlado na faixa

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de 2,0 a 5,9 imediatamente após a solução anti-[ F] -FACBC ser obtida. Por meio dessa etapa 4, é possível obter um agente de imagem de diagnóstico radioativo que contém o anti-[18F]- FACBC como ingrediente eficaz, que pode ser ajustado para o pH da solução na faixa de 2,0 a 5,9. Ao mesmo tempo, o agente de imagem de diagnóstico radioativo de acordo com a presente invenção deve ter uma radioatividade que permite a geração de imagens PET quando utilizado, e, dessa forma, a concentração radioativa no 5 momento de produção é ajustada para satisfazer a essa radioatividade. Por exemplo, caso ele possua uma radioatividade de 1,4 GBq em cerca de 2 mL imediatamente após a produção, ele terá uma radioatividade de 50-225 MBq quando for utilizado, permitindo assim uma imagem PET suficiente para adultos, ío EXEMPLO

Daqui em diante, a presente invenção é descrita abaixo em mais detalhes por meio de Exemplos. Entretanto, esses Exemplosjamais limitariam o escopo da presente invenção.

Exemplos 1-16. Exemplos Comparativos 1-5: Relação entre opHea diminuição da pureza radioquímica

Deixou-se H218O contendo íon flúor [18F] passar através de uma coluna de resina de troca aniônica para adsorver e

1 R

coletar o íon [ Fjflúor na coluna. Em seguida, a coluna foi lavada

18

cm água, e uma mistura contendo íon [ Fjflúor, uma solução de carbonato de potássio e um catalisador de transferência de fase foi obtida de acordo com o método convencional (por exemplo, um

A

método descrito nas referEncias (Radioisotopes, 50, (2001) , p.205-227; Radioisotopes, 50, (2001) , p.228-256 ; "Production and quality control of radioactive agents for PET - Handbook of synthesis and clinicai use-(2nd edition)", edited by PET Chemistry Workshop). A mistura obtida foi aquecida em um recipiente de reação para evaporar a água à secura, e foi submetida à destilação azeotrópica com adição de acetonitrilo, e uma solução de cis-1 -(N-terc-butoxicarbonil)amino-3-

[(trifluormetil)sulfoniloxi]-ciclobutano carboxilato de etila foi adicionada a ela. A solução obtida foi aquecida sob agitação de modo a não evaporar o acetonitrilo, deixando assim a reação de substituição nucleofílica prosseguir para obter o composto marcado com [18F]flúor. ío Após o recipiente de reação ter sido resfriado a

cerca de 40 0C, adicionou-se água para injeção à solução de reação para diluição, e a mistura foi passada através de uma coluna de gel de sílica de fase inversa para coletar o composto marcado com [18F]flúor. Essa coluna foi lavada e jateada com um 15 fluxo de gás hélio, e então uma solução de hidróxido de sódio 4 μιηοΙ/L foi preeenchida na coluna, seguido do fechamento da saída da coluna. Passados 3 minutos, a saída da coluna foi aberta, e uma solução de álcali foi avaliada a partir da coluna e coletada em um frasco. Essa operação foi repetida duas vezes, e lavada 20 com água, e então os banhos foram combinados com a solução de álcali coletada da maneira descrita acima.

Em seguida, adicionou-se, à solução coletada da maneira descrita acima, ácido clorídrico, aquecendo-a a cerca de 60°C para efetuar a reação de desproteção. A mistura foi então passada através de uma coluna de resina de retardação iônica, uma coluna de alumina e uma coluna de resina de fase inversa, nesta ordem, para realizar a purificação e obter uma solução

estoque de anti-[18F]-FACBC. O valor de pH da solução estoque

18

do anti-[ F]-FACBC foi ajustada para cerca de 3,5 colocando previamente uma solução de ácido clorídrico no recipiente que recebeu a solução estoque de anti-[lsF]-FACBC.

A radioatividade da solução estoque de anti-

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[ F]-FACBC obtida foi medida, e então a solução estoque foi diluída com uma solução salina fisiológica de modo a ter uma concentração radioativa de cerca de 510 MBq/mL no momento 10 em que o experimento foi iniciado (0 hora na Tabela 2). 2,23 mL dessa solução foram divididos em alíquotas em um frasco de 5 mL de volume, e uma quantidade predeterminada de uma solução predeterminada indicada na Tabela 1 foi adicionada à ela, para obter uma solução de amostra. A concentração radioativa das 15 soluções de amostra imediatamente após a preparação foi de 653- 686 MBq/mL.

Tabela I: A solução adicionada a cada solução

de amostra e seu pH após o ajuste

Solução adicionada pH após o ajuste (quantidade de adição) Exemplo 1 500 mmol/L HCl (40 jjL) 2,00 Exemplo 2 500 mmol/L HCl (40 μι), 2,05 solução salina fisiológica (40 pL) Exemplo 3 100 mmol/L HCl (50 jiL) 2,66 Exemplo 4 Solução salina fisiológica 3,41 (80 nL) Exemplo 5 Solução salina fisiológica 3,46 (50 nL) Exemplo 6 11 mmol/L NaOH (70 3,97 μΕ), solução salina fisiológica (10 μΕ) Exemplo 7 10 mmol/L NaOH (70 μΕ) 4,04 Exemplo 8 12 mmol/L NaOH (70 4,55 μΕ), solução salina fisiológica (10 μΕ) Exemplo 9 11 mmol/L NaOH (70 μΕ) 4,58 Exemplo 10 12 mmol/L NaOH (70 μΕ) 4,88 Exemplo 11 17 mmol/L NaOH (60 5,03 μΕ), solução salina fisiológica (20 μΕ) Exemplo 12 13 mmol/L NaOH (70 μΕ) 5,11 Exemplo 13 15 mmol/L NaOH (70 5,46 μΕ), solução salina fisiológica (10 μΕ) Exemplo 14 14,3 mmol/L NaOH (60 5,54 μΕ) Exemplo 15 17 mmol/L NaOH (70 5,90 μΕ), solução salina fisiológica (10 μΕ) Exemplo 16 14 mmol/L NaOH (70 μΕ) 5,94 Exemplo 18,5 mmol/L NaOH (60 6,28 Comparativo 1 μΕ), solução salina fisiológica (20 μΕ) Exemplo 14,1 mmol/L NaOH (70 6,31 Comparativo 2 μί) Exemplo 16 mmol/L NaOH (80 6,57 Comparativo 3 μΕ), solução salina fisiológica (10 μΕ) Exemplo 15 mmol/L NaOH (70 μΕ) 6,83 Comparativo 4 Exemplo 17 mmol/L NaOH (80 7,70 Comparativo 5 μΕ), solução salina fisiológica (0 μΕ) A solução de amostra foi estocada em uma câmara termostática elétrica ajustada a 25°C, a análise TLC foi realizada sob as seguintes condições no momento do início do experimento (0 hora) e 8,5 horas após o início do experimento, e 5 um valor de pureza radioquímica foi calculado de acordo com a seguinte equação (I). As medições da pureza radioquímica foram repetidas três vezes para cada solução de amostra.

Condições da análise TLC:

Fase móvel: acetonitrilo/água/ácido acético

ío 100% = 4/1/1

placa TLC: Gel de Sílica 6OF254 (nome comercial, espessura da membrana: 0,25 mm, produzido pela Merck & Co., Inc.)

Comprimento Móvel: 10 cm dispositivo de varredura TLC: Rita Star

(fabricado pela Raytest)

Número de análises: Três vezes

Radioatividade do pico [isFJFACBC

Pureza radioquímica (%) = - x 100

Radioatividade total na placa TLC

Os resultados são apresentados na Tabela 2 e na

Fig. 1.

Tabela 2: Alterações da pureza radioquímica e

18

diminuição da pureza radioquímica da solução de anti-[ F]-

FACBC em pH diferente

PH Pureza radioquímica (%) Diminuição * (%) 0 hora 8,5 horas 8.5 horas Exemplo 1 2,00 99,41 99,44 0,03 Exemplo 2 2,05 99,59 99,42 -0,17 Exemplo 3 2,66 99,38 99,33 -0,05 Exemplo 4 3,41 99,51 99,21 -0,30 Exemplo 5 3,46 99,39 99,26 -0,13 Exemplo 6 3,97 99,48 99,02 -0,46 Exemplo 7 4,04 99,38 99,11 -0,27 Exemplo 8 4,55 99,56 99,01 -0,55 Exemplo 9 4,58 99,35 98,98 -0,37 Exemplo 10 4,88 99,44 99,07 -0,37 Exemplo 11 5,03 99,46 98,89 -0,57 Exemplo 12 5,11 99,51 98,93 -0,58 Exemplo 13 5,46 99,52 99,06 -0,46 Exemplo 14 5,54 99,49 99,03 -0,46 Exemplo 15 5,90 99,51 98,86 -0,65 Exemplo 16 5,94 99,45 98,93 -0,52 Exemplo 6,28 99,53 98,81 -0,72 Comparativo 1 Exemplo 6,31 99,37 98,80 -0,57 Comparativo 2 Exemplo 6,57 99,43 98,67 -0,76 Comparativo 3 Exemplo 6,83 99,32 98,35 -0,97 Comparativo 4 Exemplo 7,70 99,37 97,31 -2,06 Comparativo 5 * Diminuição (%) = (pureza radioquímica após

8,5 horas) - (pureza radioquímica após 0 hora) Referindo-se à relação entre o pH e a diminuição da pureza radioquímica, observou-se uma diminuição relativamente branda da pureza radioquímica com o aumento de pH de 2,00 para 5,94. O gradiente baseado na aproximação linear 5 foi calculado, e como resultado, o gradiente foi de 0,145 na faixa de pH de 2,00 a 4,88, e foi de -0,010 na faixa de pH de ,03 a 5,94.

Por outro lado, quando o valor do pH não foi menor do que 6,28, ocorreu uma diminuição acentuada da pureza radioquímica com o aumento do pH. O gradiente baseado na ío aproximação linear foi calculado, e como resultado, foi de -1.000. Esse valor foi cerca e 6,7 vezes o valor na faixa de pH de 2,00 a 4,88, e cerca de 100 vezes o valor na faixa de pH de 5,03 a 5,94. A partir disso, foi indicado que quando o valor de pH não é menor do que 6,28, ocorre uma diminuição drástica da pureza 15 radioquímica comparado à faixa de pH de 2,00 a 5,94.

Exemplos 17 a 28: Relação entre a concentração de manitol e a pureza radioquímica a valores de pH de 3.44 e 4.78

Uma solução estoque de anti-[18F]-FACBC foi

18

preparada da mesma forma que no Exemplo 1 usando H2 O

contendo íon [18F]flúor. Em seguida, à solução estoque de anti- 1 fi

[ F]-FACBC preparada, adicionou-se um ácido clorídrico e uma solução salina fisiológica de modo a ter uma concentração radioativa de cerca de 500 MBq/mL e um valor de pH de cerca de 4,8 no momento em que o experimento foi iniciado (0 hora na 25 Tabela 4). 2,23 mL da solução obtida foram divididos em alíquotas em um frasco de 5 mL de volume, e uma solução de manitol ou um ácido clorídrico à concentração apresentada na Tabela 3 foi adicionada em uma quantidade apresentada na Tabela 3 para obter uma solução de amostra. A concentração radioativa das soluções de amostra imediatamente após a preparação foi de 553-565 MBq/mL.

Tabela 3: Quantidade de adição de solução de

manitol em cada solução de amostra

PH Solução adicionada (quantidade de Concentraçã adição) o de manitol após o ajuste (μιηοΙ/mL) Exemplo 3,44 0,83 mg/mL Solução de manitol 0,1 17 (50 uL) 40 mmol/L HCl (20 μΕ) Exemplo 3,44 4,17 mg/mL Solução de manitol 0,5 18 (50 uL) 40 mmol/L HCl (20 \úJ) Exemplo 3,44 8,34 mg/mL Solução de manitol 1,0 19 (50 uL) 40 mmol/L HCl (20 μΕ) Exemplo 3,44 41,72 mg/mL Solução de manitol 5,0 20 (50 uL) 40 mmol/L HCl (20 μΕ) Exemplo 3,44 83,43 mg/mL Solução de manitol 10,0 21 (50 uL) 40 mmol/L HCl (20 jiL) Exemplo 3,44 166,87 mg/mL Solução de manitol 20,0 22 (50 pL) 40 mmol/L HCl (20 μΕ) Exemplo 4,78 0,83 mg/mL Solução de manitol 0,1 23 (50 μΕ) Exemplo 4,78 4,17 mg/mL Solução de manitol 0,5 24 (50 uL) Exemplo 4,78 8,34 mg/mL Solução de manitol 1,0 25 (50 μΕ) Exemplo 4,78 41,72 mg/mL Solução de manitol 5,0 26 (50 μΕ) Exemplo 4,78 83,43 mg/mL Solução de manitol 10,0 27 (50 uL) Exemplo

28

4,78

166,87 mg/mL Solução de manitol _(50 μΕ)_

20,0

A solução de amostra foi estocada em uma câmara termostática elétrica ajustada a 25°C, e o valor da pureza radioquímica foi calculado da mesma forma que no Exemplo 1 e no momento do início do experimento (0 hora) e 8,5 horas após o 5 início do experimento. As medições da pureza radioquímica foram repetidas três vezes para cada solução de amostra.

Os resultados são apresentados na Tabela 4 e na Fig. 2. Em todos os Exemplos, aos valores de pH de 3,44 e 4,78, a diminuição da pureza radioquímica foi reduzida drasticamente 10 com aumento na concentração de manitol, e o efeito de redução foi saturado a uma concentração de manitol de não menos que 5,0 μηιοΙ/ιηΕ.

Além disso, a diminuição da pureza radioquímica foi mais inibida em ambas as concentrações de manitol ao valor de pH de 3,44 do que de 4,78.

Com base nos resultados acima, foi confirmado que o valor de pH da solução contribui para a estabilidade radioquímica. Além disso, foi demonstrado que a radiólise pode ser adicionalmente reduzida pela adição de um manitol.

Tabela 4: Alteração da pureza radioquímica e

I o

diminuição da pureza radioquímica da solução de anti-[ F]- FACBC na presença de manitol

PH Concentraçã Pureza radioquímica Diminuição o de Manitol (%) * (%) (μιηοΙ/mL) 0 hora 8,5 horas 8,5 horas Exemplo 3,44 0,1 99,38 99,10 -0,28 17 Exemplo 3,44 0,5 99,46 99,22 -0,24 18 Exemplo 3,44 1,0 99,39 99,25 -0,14 19 Exemplo 3,44 5,0 99,47 99,42 -0,05 Exemplo 3,44 10,0 99,42 99,33 -0,09 21 Exemplo 3,44 20,0 99,47 99,41 -0,06 22 Exemplo 4,78 0,1 99,39 98,93 -0,46 23 Exemplo 4,78 0,5 99,47 99,09 -0,38 24 Exemplo 4,78 1,0 99,38 99,14 -0,24 Exemplo 4,78 5,0 99,45 99,30 -0,15 26 Exemplo 4,78 10,0 99,41 99,26 -0,15 27 Exemplo 4,78 20,0 99,46 99,27 -0,19 28 * Diminuição (%) = (pureza radioquímica após

8,5 horas) - (pureza radioquímica após 0 hora)

Exemplos 29-31. Exemplos Comparativos 6-8: Relação entre a diminuição da pureza radioquímica e a concentração radioativa

Uma solução estoque de anti-[18F]-FACBC foi

18

preparada da mesma forma que no Exemplo 1 usando H2 O

1 R

contendo íon [ Fjflúor. A radioatividade da solução estoque de anti-[lsF]-FACBC obtida foi medida, e diluída e ajustada de modo a ter uma concentração radioativa de 507 MBq/mL e uma concentração de manitol de 10 μιηοΙ/mL (daqui em diante, chamada de solução padrão para preparação de amostra nesses Exemplos e Exemplos Comparativos). 2,23 mL da solução padrão 5 obtida para preparação da amostra foram divididos em alíquota em um frasco de 5 mL de volume, e um ácido clorídrico foi adicionado a ela de modo que o valor de pH fosse ajustado para 3. 94 . A partir desse frasco, uma solução foi fracionada em uma quantidade apresentada na Tabela 5, e uma solução salina 10 fisiológica foi adicionada respectivamente para produzir uma solução de amostra de 1 mL de volume.

Tabela 5: Condições de diluição em cada

amostra

pH antes Quantidade Taxa de Concentração da fracionada mL diluição radioativa após a diluição diluição* MBq/mL Exemplo 3,94 1 1 (sem 573 29 diluição) Exemplo 0,5 2 292 30 Exemplo 0,1 10 61 31 *A concentração radioativa após a diluição foi

calculada com base na radioatividade medida cerca de 10 minutos antes do início do experimento.

Separadamente, 2,23 mL da solução padrão preparada acima para preparação da amostra foram divididos em alíquotas em um frasco de 5 mL de volume, e uma solução de hidróxido de sódio foi adicionada para ajustar o valor do pH para 7,91. A partir desse frasco, uma solução foi fracionada em uma quantidade apresentada na Tabela 6, e uma solução salina fisiológica foi adicionada respectivamente para produzir uma 5 solução de amostra de 1 mL de volume para uso nos Exemplos Comparativos 6 a 8.

Tabela 6: Condições de diluição em cada

amostra

pH antes Quantidade Taxa de Concentração da fracionada mL diluição radioativa após a diluição diluição* MBq/mL Exemplo 7,91 1 1 (sem 586 Comparativo diluição) 6 Exemplo 0,5 2 296 Comparativo 7 Exemplo 0,1 10 62 Comparativo 8 *A concentração radioativa após a diluição foi

io calculada com base na radioatividade medida cerca de 10 minutos antes do início do experimento.

A solução de amostra foi estocada em uma câmara termostática elétrica ajustada a 25°C, e o valor da pureza radioquímica foi calculado da mesma forma que no Exemplo 1 e 15 no momento do início do experimento (0 hora) e 8,5 horas após o início do experimento. As medições da pureza radioquímica foram repetidas três vezes para cada solução de amostra. Os resultados são apresentados nas Tabelas 7 e 8. Nos exemplos 29 a 31, dificilmente era observada diminuição da pureza radioquímica, seja qual fosse a concentração radioativa. Por outro lado, em ambos os Exemplos Comparativos 6 a 8, foi 5 observada diminuição ao longo do tempo da pureza radioquímica, e foi indicado que a pureza radioquímica tendia a diminuir com o aumento da concentração radioativa (Tabela 8).

Com base nos resultados acima, ao valor de pH de 3,94, foi confirmado que a diminuição da pureza radioquímica foi reduzida significativamente a uma concentração radioativa de até 600 MBq/mL.

Além disso, a diminuição da pureza radioquímica foi acentuada com o aumento da concentração radioativa ao valor de pH de 7,91, e, dessa forma, foi indicado que a diminuição ao longo do tempo da pureza radioquímica de

I R

anti-[ FJ-FACBC não foi provocada pela decomposição do anti- [18FJ-FACBC devido à falta de estabilidade química contra o pH,

I O

mas sim pela decomposição do anti-[ FJ-FACBC devido à radiólise por radiação.

Tabela 7: Relação entre a pureza radioquímica e

a concentração radioativa nas amostras derivadas ao pH 3,94.

Concentração radioativa Pureza radioquímica (%) 0 hora 6,5 horas diminuição Exemplo 573 99,64 99,59 0,05 29 Exemplo 292 99,60 99,56 0,04 30 Exemplo 61 99,55 99,59 -0,04 31 *A concentração radioativa após a diluição foi

calculada e medida cerca de 10 minutos antes do início do experimento.

Tabela 8: Relação entre a pureza radioquímica e a concentração radioativa nas amostras derivadas ao pH 7,91.

Concentração radioativa Pureza radioquímica (%) 0 hora 6,5 horas diminuição Exemplo 586 99,24 97,57 1,67 Comparati vo 6 Exemplo 296 99,33 98,01 1,32 Comparati vo 7 Exemplo 62 99,44 98,83 0,61 Comparati vo 8 *A concentração radioativa após a diluição foi

Exemplos 32 a 33: Relação entre a adição de manitol e a diminuição da pureza radioquímica

I Q_

Uma solução estoque de anti-[ F]-FACBC foi preparada da mesma forma que no Exemplo 1. A solução estoque

1 R

preparada de anti-[ FJ-FACBC foi diluída com um ácido clorídrico e uma solução salina fisiológica de modo a ter uma concentração radioativa de 568,1 MBq/mL no momento predeterminado em que o experimento foi iniciado (0 hora na Tabela 9) (pH 3,98). Essa solução foi dividida em alíquotas em 5 uma quantidade de 2,23 mL como uma solução de amostra (Exemplo 32). Separadamente, a solução ajustada para 507 MBq/mL foi dividida em alíquotas em uma quantidade de 2,23 mL, e uma solução de manitol foi adicionada a ela para preparar uma solução ajustada para ter uma concentração de manitol de 10 10 mol/mL para uso no experimento (Exemplo 33).

A solução de amostra foi estocada em uma câmara termostática elétrica ajustada para 25°C, a análise TLC foi realizada no momento do início do experimento (0 hora), 2,5 horas depois, 4,5 horas depois, 6,5 horas depois e 8,5 horas depois 15 da mesma maneira que no Exemplo 1, e o valor da impureza radioquímica foi calculado de acordo com a seguinte equação (2). A medição da impureza radioquímica foi repetida três vezes para cada solução de amostra.

, , Radioatividade da impureza radioquímica m

Impureza radioquímica (%) =-----χ 100 (2)

Radioatividade total naplaca TLC

Os resultados são apresentados na Tabela 9. Na

solução de amostra que não foi misturada com manitol (Exemplo 32), a impureza radioquímica foi reduzida a 1% ou menos em todos os momentos em virtude do efeito do ajuste do pH. No entanto, a tendência de aumento ao longo do tempo foi indicada no ponto de tempo até 6,5 horas após o início do experimento. Por outro lado, na solução de amostra que foi combinada com manitol (Exemplo 33), não foi observado aumento da pureza radioquímica no decorrer do tempo.

Com base nos resultados acima, foi indicado que a combinação de manitol permite inibir ainda mais o aumento da pureza radioquímica pela radiólise. A partir disso, foi confirmado que o efeito da estabilização da pureza radioquímica foi mais intensificado pela adição de manitol.

Tabela 9: Alteração da impureza radioativa no io decorrer do tempo

Impureza radioquímica (%) 0 hora 2,5 horas 4,5 6,5 horas 8,5 horas horas Exemplo 0,52 0,73 0,90 0,98 0,95 32 Exemplo 0,50 0,52 0,48 0,56 0,49 33 APLICABILIDADE INDUSTRIAL

A presente invenção é capaz de reduzir a radiólise de compostos de aminoácidos marcados com flúor radioativo úteis como agentes PET, sendo útil no segmento de radiofármacos.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

A Fig. 1 é um gráfico que mostra uma relação entre o pH e a diminuição da pureza radioquímica.

A Fig. 2 é um gráfico que mostra uma relação entre a concentração de manitol e a diminuição da pureza radioquímica.

Claims

1. Agente radioativo para geração de imagens de diagnóstico, compreendendo uma solução de um composto de aminoácido marcado com flúor radioativo representado pela seguinte fórmula (1): <formula>formula see original document page 29</formula> caracterizado pelo fato de que a solução tem um valor de pH de 2,0 a 5,9.

2. Agente radioativo para geração de imagens de diagnóstico, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a solução tem um valor de pH de 2,0 a 4,9.

3. Agente radioativo para geração de imagens de diagnóstico, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado por adicionalmente compreender um aditivo farmacêutico.

4. Agente radioativo para geração de imagens de diagnóstico, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que o aditivo farmacêutico é pelo menos um selecionado dentre o grupo que consiste de um álcool de açúcar, um açúcar e uma lactona de açúcar.

5. Agente radioativo para geração de imagens de diagnóstico, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que o aditivo farmacêutico é um álcool de açúcar.

6. Agente radioativo para geração de imagens de diagnóstico, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o álcool de açúcar é pelo menos um selecionado dentre o grupo que consiste de eritritol, xilitol, sorbitol e manitol.

7. Agente radioativo para geração de imagens de diagnóstico, de acordo com a reivindicação 5 ou 6, caracterizado pelo fato de que o álcool de açúcar está contido em uma quantidade não menor do que 0,5 μιηοΙ/mL e não maior do que a quantidade máxima aceitável para aditivos farmacêuticos.