BRPI0720588B1 - Derivados de pirazol-quinazolina substituídos, processo para sua preparação e seu uso como inibidores da quinase - Google Patents

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BRPI0720588B1
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methyl
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dihydro
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Italo Beria
Maria Gabriella Brasca
Ronald Ferguson
Helena Posteri
Barbara Valsasina
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Nerviano Medical Sciences S.R.L.
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Abstract

derivados de pirazol-quinazolina substituídos, processo para sua preparação e seu uso como inibidores da quinase a presente invenção se refere aos derivados de pirazol-quinazolina de fórmula ( i) ' como definido no relatório descritivo e sais farmaceuticamente aceitáveis destes, processos para a sua preparação e composições farmacêuticas compreendendo-os conforme, além do processo para a sua preparação e as composições farmacêuticas que os compreendendem. os compostos da invenção podem ser úteis nas terapias para o tratamento de doenças associadas à atividade desordenada da proteína quinase, tal como o câncer.

Description

DERIVADOS DE PIRAZOL-QUINAZOLINA SUBSTITUÍDOS, PROCESSO PARA SUA PREPARAÇÃO E SEU USO COMO INIBIDORES DA QUINASE A presente invenção se refere a certos compostos pirazol-quinazolina substituídos que modulam a atividade das proteínas quinases. Os compostos desta invenção são, portanto, útil no tratamento de doenças causadas por atividade desordenada da proteína quinase. A presente invenção também fornece métodos para a preparação destes compostos, composições farmacêuticas que os compreendem, e métodos de tratamento de doenças que utilizam estas composições farmacêuticas que compreendem esses compostos. O uso de inibidores mitóticos em terapia de câncer é uma estratégia clínica amplamente aceita para o tratamento de uma ampla gama de tumores humanos. Taxanos (paclitaxel e docetaxel) e os alcalóides da vinca (vincristina e vinblastina) trabalham por uma estabilização ou desestabilização dos microtúbulos com consequências catastróficas em células progridem através de mitoses. Eles são de primeira linha terapêutica para vários tipos de tumores e de segunda linha para câncer dos ovários, mama, pulmão, bexiga e esôfago refratários a cisplatina (Taxanos). No entanto, devido ao papel dos microtúbulos em processos tais como o movimento celular, fagocitose e transporte axonal, certas toxicidades, tal como neuropatia periférica é freqüentemente observada com estes agentes. A progressão através de mitoses é uma exigência de todas as células proliferativas e, consequentemente, terapias de cânceres que têm metas em mitose são geralmente aplicáveis a uma vasta gama de tipos de tumores. Várias proteínas quinases desempenham papéis fundamentais na orquestração do ciclo celular e alguns deles já estão sujeitos a tratamentos orientados no ajuste da oncologia incluindo CDK-2 e Aurora-A. A fidelidade de mitoses é de importância primordial e existem vários "pontos de checagem" em células normais para manter a integridade do cromossomo durante o ciclo celular. Estes pontos de checagem freqüentemente desaparecem durante a transformação oncogênica e isso permite que as células câncerosas tolerem a aneuploidia e instabilidade cromossômica. A inibição da mitose em células tumorais com "ponto de checagem comprometido" devem ter consequências catastróficas como células cancerígenas que tentar levar adiante uma mitose aberrante. A família quinase como pólo, compreendendo 4 serina/treonina quinases (Plk-1-4), estão predominantemente envolvidas na entrada, através de progressão e saída da mitose. Essas quinases são caracterizadas por terem um domínio quinase N-terminal e um único, domínio "Pólo-Box" C-terminal. Este domínio é responsável por orientar a quinase a várias estruturas mitóticas (centrossomas, cinetócoros, pólos do fuso, meio do corpo) e a regulação temporal e espacial Plks são importantes para a progressão normal através da mitose (revisto em van Vugt and Medema, Oncogene 2005, 24(17):2844- 59; Barr et al, Nat Rev Mol Cell Biol. 2004, 5(6):429-40,- Dai and Cogswell, Prog Cell Cycle Res. 2003, 5:327-34; Glover et al, Genes Dev. 1998, 12(24):3777-87). O elemento mais caracterizado da família PLk-1 e a sua atividade tem sido implicados em vários processos durante a mitose, incluindo a transição G2/M pela regulação da atividade Cdk-1 em múltiplas formas (activation of Cdc25c, nuclear translocation of cyclin B, inactivation of Myt-1 and Wee-1) (Inoue et al, EMBO J. 2005, 24(5): 1057-67; van Vugt et al, J Biol Chem. 2004, 9(35):36841-54,- Watanabe et al, Proc Natl Acad Sei USA. 2004, 101(13):4419-24 2004;
Nakajima et al, J Biol Chem. 2003, 278(28):25277-80,- Toyoshima-Morimoto et al, J Biol Chem. 2002, 277(50):48884- 8; Bartholomew et al, Mol Cell Biol, 2001 21(15):4 94 9-59,- Qian et al, Mol Biol Cell. 2001, 12(6):17 91-9,- Roshak et al, Cell Signal. 2000, 12(6):405-1 1); maturação e separação dos centrossomas; regulação da coesão do braço cromossomico em profase e separação da cromátide irmã na transição metáfase/anáfase; a ativação do Complexo de promoção da anáfase para iniciar a saída mitótica; citocinese. Plk-1 é sobre-expressos em várias células tumorais, incluindo mama, ovário, pulmão, cólon, cabeça, pescoço, esôfago e carcinomas endometriais e suas sobre-expressão geralmente se correlaciona com mau prognóstico. A perturbação da função Plk-1 por vários meios em células tumourais (siRNA e ablação antisense, proteínas dominantes negativas e imunodepleção) resulta em uma mitose aberrante seguida por catástrofe mitótica simultaneamente causando um "ponto de checagem mediado" detenção do ciclo celular em células normais. Assim, a atenuação farmacológica da função Plk-1 pode ter um benefício terapêutico no tratamento de vários cânceres.
RESUMO DA INVENÇÃO
Os derivados de pirimidina bicicla fundida para o tratamento de doenças são divulgados em hiperproliferativo WO 96/40042 em nome da Pfizer Inc.
Os derivados de pirimidina policicla fundida como inibidores da proteína quinase também são divulgadas em WO 98/58926 e WO 98/28281, ambas em nome de Celltech Therapeutics Ltd.
Os derivados compostos de pirazol tricíclicos fundidos conhecidos na arte como inibidores da proteína quinase são divulgados em WO 03/070236 e 03/070706, em nome da Pharmacia Italia SPA e Pharmacia Corp, respectivamente.
Os derivados pirazol-quinazolina possuindo atividade inibitória quinase foram também divulgados em WO 04/104007, em nome da própria depositante. Alguns compostos específicos do referido WO 04/104007 são excluídos da presente fórmula geral.
Apesar destes progressos, ainda há necessidade de agentes para a dita doença. Os presentes inventores já perceberam que os compostos de fórmula (I), abaixo descrita, são inibidores da quinase e são, portanto, úteis na terapia como agentes antitumorais, e não possuem em termos de toxicidade e efeitos colaterais, os referidos inconvenientes associados com as drogas antitumorais atualmente disponíveis.
Assim, um primeiro objetivo da presente invenção é fornecer um composto pirazol-quinazolina substituído representados pela fórmula (I): onde RI é uma arilamino orto-substituído; R2 é hidrogênio ou um grupo opcionalmente substituído selecionado de alquil Ci-C6 linear ou ramificado, alquenil C2-C6 linear ou ramificado, alquinil C2-C6 linear ou ramificado, cicloalquil C3-C6 e heterocíclico; R3 é CO-OR'ou CO-NR'R", em que R' e R" são, cada um, independentemente, hidrogênio ou um grupo opcionalmente substituído selecionado a partir de alquil C1-C6 linear ou ramificado, cicloalquil C3-C6 e heterocíclico, ou R' e R" tomados em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados, podem formar um grupo heterocíclico opcionalmente substituído contendo um heteroátomo adicional selecionado dentre N, 0 ou S, e isômeros, tautômeros, hidratos, solvatos, complexos, metabólitos, pró-drogas, veículo, N- óxidos e sais farmaceuticamente aceitável destes, desde que: etil-l-metil-8-(2-metoxi-fenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h]quinazolina-3-carboxilato e l-metil-8-(2-metoxifenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina- 3-carboxamida são excluídos, e isômeros, tautômeros, hidratos, solvatos, complexos, metabólitos, pró-drogas, veículo, N-óxidos e sais farmaceuticamente aceitável destes. A presente invenção também fornece métodos de sintetização dos compostos pirazol-quinazolina substituídos, representados pela fórmula (I), elaborado através de um processo constituído por transformações sintéticas padrões. A presente invenção também fornece um método para o tratamento de doenças causadas e/ou associadas com atividade da proteína quinase desregulada, nomeadamente família PLK, proteína quinase C em diferentes isoformas, Met, PAK-4, PAK-5, ZC-1, STLK-2, DDR-2, Aurora 1, Aurora 2, Bub-1, PLK, Chkl, Chk2, HER2, rafl, MEK1, MAPK, EGF-R, PDGF-R, FGF-R, IGF-R, VEGF-R, PI3K, quinase weel, Src, Abl, Akt, ILK, MK-2, IKK-2, Cdc7, Nek, família quinase CDK/ ciclina, mais particularmente PLK-1 e PLK-3 que compreende administrar a um mamífero na necessidade deste uma quantidade efetiva do composto pirazol-quinazolina substituído representados pela fórmula (I), conforme definido acima.
Um método preferido da presente invenção é para tratar uma doença causada e/ou associada com atividade da proteína quinase desregulada selecionada a partir do grupo que consiste de câncer, distúrbios proliferativos celulares, infecções virais, autoimunes e doenças neurodegenerativas.
Outro método preferido da presente invenção é para tratar certos tipos de câncer, incluindo mas não limitados a: carcinomas tais como da bexiga, mama, colo, rim, fígado, pulmão, incluindo câncer do pulmão de célula pequena, esôfago, vesícula biliar, ovário, pâncreas, estômago, nuca, tireóide, próstata e pele, incluindo carcinoma de célula escamoso, tumores hematopoéticos de linhagem linfóide, incluindo leucemia, leucemia linfócita aguda, leucemia linfoblastica aguda, linfoma da célula-B, linfoma da célula-T, linfoma de Hodgkin, linfoma não de Hodgkin, linfoma da célula do cabelo e linfoma de Burkett; tumores hematopoéticos de linhagem mieloide, incluindo leucemias mielogênicas agudas e crônicas, síndrome mielodisplástica e leucemia promielocítica; tumores de origem mesenquimal, incluindo fibrosarcoma e rabdomiosarcona; tumores do sistema nervoso central e periférico, incluindo astrocitoma e neuroblastoma, glioma e schwannomas; outros tumores, incluindo melanoma, seminoma, teratocarcinoma, osteosarcoma, xeroderma pigmentosum, ceratocantomas, câncer folicular da tireóide e sarcoma de Kaposi.
Outro método preferido da presente invenção é específico para o tratamento de distúrbios de proliferação celular, como, por exemplo, hiperplasia benigna da próstata, polipose adenomatose familiar, neurofibromatose, psoríase, proliferação da célula lisa vascular associada com ateroesclerose, fibrose pulmonar, artrite glomerulonefrite e estenose e restenose pós-cirúrgica.
Outro método preferido da presente invenção é para tratar infecções virais, em especial à prevenção do desenvolvimento de AIDS em indivíduos infectados pelo HIV.
Além disso, o método da presente invenção também fornece angiogênese tumoral e metástase inibição, bem como o tratamento e rejeição de órgãos transplantados, doença devido a enxerto versus hospedeiro. A presente invenção também proporciona uma composição farmacêutica compreendendo um ou mais compostos de fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável, e um excipiente, veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável. A presente invenção prevê ainda uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula (I), em combinação com tratamentos anticancerígenos conhecidos como, terapia de radiação ou regime de quimioterapia em combinação com agentes citostáticos ou citotóxicos, agentes tipo antibiótico, agentes alquilantes, agentes antimetabolitos, agentes hormonais, agentes imunológicos, agentes tipo interferon, inibidores da ciclooxigenase (e.g., inibidores de COX-2), inibidores de metalomatrixprotease, inibidores de telomerase, inibidores de tirosina quinase, agentes receptores de fator anti- crescimento, agentes anti-HER, agentes anti-EGFR, agentes anti-angiogêneses, inibidores de farnesil transferase, inibidores do caminho de transdução de sinal ras-raf, inibidores de ciclo celular, outros inibidores cdks, agentes de ligação tubulina, inibidores de topoisomerase I, inibidores de topoisomerase II, e similares.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO A memos que especificado em contrário, quando se refere aos compostos de fórmula (I), em si, bem como a qualquer composição farmacêutica, ou a qualquer tratamento terapêutico compreendendo-os, a presente invenção inclui todos os hidratos, solvatos, complexos, metabólitos, pró-drogas, veículos, N-óxidos e sais farmaceuticamente aceitável dos compostos da presente invenção.
Um metabólito de um composto da fórmula (I) é qualquer composto em que este mesmo composto de fórmula (I) é convertido in vivo, por exemplo mediante a administração a um mamífero em necessidade deste. Normalmente, sem contudo, representar um exemplo limitativo, após a administração de um composto da fórmula (I), este mesmo derivado pode ser convertido em uma variedade de compostos, por exemplo, incluindo derivados mais solúveis como derivados hidroxilados, que são facilmente excretados. Assim, dependendo da via metabólica, assim ocorrendo, qualquer destes derivados hidroxilados podem ser considerados como um metabólito dos compostos de fórmula (I) · As pró-drogas são quaisquer compostos ligados covalentemente, que ativa a liberação in vivo da droga mãe, de acordo com fórmula (I).
Os N-óxidos são compostos de fórmula (I) onde o nitrogênio e o oxigênio são presos através de uma ligação dativa. Se um centro quiral ou outra forma de um centro isomérico está presente em um composto da presente invenção, todas as formas de tal isômero ou isômeros, incluindo enantiômeros e diastereômeros, se destinam a ser cobertos por eles. Os compostos contendo um centro quiral podem ser utilizados como uma mistura racêmica, uma mistura enantiomericamente enriquecida, ou a mistura racêmica pode ser separada utilizando técnicas bem conhecidas e uma enantiômero individual pode ser usado isoladamente. Nos casos em que os compostos têm duplas ligações carbono-carbono insaturados, tanto os isômeros cis (Z) quanto trans (E) estão no âmbito da presente invenção.
Nos casos em que os compostos podem existir nas formas tautomericas, tais como tautômeros keto-enol, cada forma tautomerica é considerada como parte desta invenção se existir predominantemente em uma forma ou em equilíbrio.
Na presente descrição, salvo indicação contrária, com o termo "arilamino orto-substituídos", que representa Ri, pretendemos qualquer grupo aril ligado ao resto da molécula através da porção -(NH)-, o dito arilamino sendo substituído na posição orto, e também opcionalmente substituído em outras posições livres.
Com o termo "aril" pretendemos grupos carbocíclico ou heterocíclicos contendo 1 a 2 porções anéis, sejam fundidas ou ligadas umas às outras por uma única ligação, onde pelo menos um dos anéis é aromático, quando presentes, os anéis aromáticos heterocíclicos também referido como heterogrupo aril, compreendendo um anel de 5 a 6 elementos contendo de 1 a 3 heteroátomos selecionados dentre N, NH, O ou S.
Exemplos de grupos aril de acordo com a invenção são, por exemplo, fenil, bifenilo, a- ou β-naftil, dihidronaftil, tienil, benzotiofenil, furil, benzofuranil, pirrolil, imidazolil, pirazolil, tiazolil, isothiazolil, oxazolil, isoxazolil, piridil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, indolil, isoindolil, purinil, quinolil, isoquinolil, dihidroquinolinil, quinoxalinil, benzodioxolil, indanil, indenil, triazolil, e similares.
Com o termo "alquil Ci-Cô linear ou ramificado", então compreendida de alquil C1-C4, pretendemos qualquer dos grupos, como, por exemplo, metil, etil, n-propil, isopropil, n-butil, isobutil, terc-butil, sec-butil, n-pentil, n-hexil, e similares.
Com o termo "alquenil C2-C6 linear ou ramificado" pretendemos qualquer dos grupos, tal como, por exemplo, vinil, allil, 1-propenil, isopropenil, 1-butenil, 2-butenil, 3-butenil, 2-pentenil, 1-hexenil, e similares.
Com o termo "alquinil C2-C6 linear ou ramificado" pretendemos qualquer dos grupos, como, por exemplo, ethinil, 2-propinilbutil, 4-pentinil, e similares.
Com o termo "cicloalquil C3-C6" é nossa intenção é se referir a, salvo disposição em contrário, anéis monocíclicos de carbono de 3 a 6 elementos todo de elementos de carbono que pode conter uma ou mais ligações duplas, mas não tem um sistema n-electron.conjugado completamente. Exemplos de grupos cicloalquil, sem limitação, são ciclopropano, ciclobutano, ciclopentano, ciclopenteno, cicloexano, cicloexeno e ciclohexadieno.
Com o termo "heterocíclico" (também conhecido como "heterocicloalquil") pretendemos se referir a um anel carbocíclico de 3 a 7 elementos, saturados ou insaturados parcialmente quando um ou mais átomos de carbono são substituídos por heteroátomos, como nitrogênio, oxigênio e enxofre. Exemplos não limitativos do grupo heterocíclico são, por exemplo, pirane, pirrolidina, pirrolina, imidazolina, imidazolidina, pirazolidina, pirazolina, tiazolina, tiazolidina, dihidrofurano, tetrahidrofurano, 1,3-dioxolano, piperidina, piperazina, morfolina e similares.
De acordo com a presente invenção, e salvo disposição contrária, qualquer um dos grupos Rl, R2, R3, R' , e R" pode ser opcionalmente substituído, em qualquer de suas posições livres, por um ou mais grupos, por exemplo, grupos 1 a 6, independentemente selecionados de: halogênio, nitro, grupos oxo (= 0), ciano, alquil Ci-Cô, alquil polifluorinatado, alcóxi polifluorinatado, alquenil, alquinil, hidroxialquil, aril, arilalquil, heterocíclico, cicloalquil C3-C6, hidróxi, alcóxi, ariloxi, heterociclicoxi, metilenodioxi, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi,cicloalqueniloxi, heterociclicocarboniloxi, alquilidenoaminoxi, carboximetilcelulose, alcoxicarbonil, ariloxicarbonil, cicloalquiloxicarbonil, heterociclicoxi-carbonil, amino, ureído, alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, heterociclicoamino, formilamino, alquilcarbo-nilamino, arilcarbonilamino, heterociclico- carbonilamino, aminocarbonil, alquilaminocarbonil, dialquilaminocarbonil, arilaminocarbonil, heterociclico- aminocarbonil, alcoxicarbo-nilamino, hidroxiaminocarbonil, alcoximino, alquilsulfonil-amino, arilsulfonilamino, heterociclicosulfonilamino, formil, alquilcarbonil, arilcarbonil, cicloalquilcarbonil, heterociclicocarbonil, alquilsulfonil, arilsulfonil, aminossulfonil, alquilamino-sulfonil, dialquilaminosulfonil, arilaminosulfonil, heterociclicoaminosulfonil, ariltio, alquiltio, fosfonato e alquilfosfonato.
Por sua vez, quando for o caso, cada um dos referidos substituintes pode ainda ser substituídos por um ou mais dos qrupos acima referidos. A este respeito, com o termo halogênio pretendemos um átomo de flúor, cloro, bromo ou iodo átomo.
Com o termo ciano pretendemos um resíduo -CN.
Com o termo nitro pretendemos um qrupo -NO2.
Com o termo alquenil ou alquinil pretendemos qualquer qrupos alquil C2-C6 linear ou ramificado acima mencionado mais tendo uma ligação dupla ou tripla. Não se limitando a estes exemplos, os grupos alquenil ou alquinil da invenção são, por exemplo, vinil, allil, 1-propenil, isopropenil, 1-butenil, 2-butenil, 3-butenil, 2-pentenil, 1-hexenil, ethinil, 2-propinilbutil, 4-pentinil, e similares.
Com o termo alquila ou alcóxi polifluorinatado pretendemos qualquer dos grupos alcóxi ou alquil C1-C6 linear ou ramificado acima que são substituídos por mais átomo de flúor, como, por exemplo, trifluormetil, trifluoretil, 1,1,1,3,3,3-hexafluoropropil, trifluorometoxi e similares.
Com o termo alcóxi, ariloxi, heterocíclicooxi e derivados pretendemos qualquer um dos grupos heterocíclico, aril, alquil Ci-Cg acima, ou grupos ligados ao resto da molécula através de um átomo de oxigênio (-0-).
Face ao acima exposto, fica evidente para uma pessoa qualificada na arte que qualquer grupo cujo nome é um nome composto, como, por exemplo, arilamino tem de ser destinado como convencionalmente interpretado pelas partes de que provém, por exemplo, por um grupo amino que é também substituído por aril, onde aril é como acima definido.
Da mesma forma, qualquer um dos termos, tal como, por exemplo, alquiltio, alquilamino, dialquilamino, alcoxicarbonil, alcoxicarbonilamino, heterociclicocarbonil, heterociclicocarbonilamino, cicloalquiloxicarbonil e similares, incluindo grupos onde alquil, aril, alcóxi, as porções heterocíclicas e cicloalquil C3-C6, são como acima definidos.
Os sais farmaceuticamente aceitável dos compostos de fórmula (I) incluem os sais de adição ácidos com ácidos orgânicos ou inorgânicos, por exemplo, nítrico, clorídrico, bromídrico, sulfúrico, perclórico, fosfórico, acético, trifluoracético, propiônico, glicólico, lático, oxálico, malônico, málico, malêico, tartárico, cítrico, benzóico, cinâmico, mandélico, metanosulfônico, isetiônico e salicílico. Preferencialmente, o sal de adição ácido dos os compostos da invenção é selecionado entre sal cloridrato ou mesilato.
Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fórmula (I) também incluem os sais com bases orgânicas ou inorgânicas, por exemplo, metais alcalinos ou alcalino-terrosos, especialmente sódio, potássio, cálcio ou magnésio hidróxido de amônios, carbonatos e bicarbonatos, aminas cíclicas ou acícliças, preferencialmente metilamina, etilamina, dietilamina, trietilamina, piperidina e similares.
Uma classe preferida de compostos da fórmula (I) são os compostos em que: R3 é CO-CO-OH ou NR'R", em que R' e R” são como acima definidos.
Outra classe preferida dos compostos de fórmula (I) são os compostos onde: Rl é uma arilamino orto-substituído da fórmula: onde R'4 e R"4 e R' ' ' 4 são independentemente selecionados de um grupo que consiste de halogênio, nitro, ciano, alquil Ci-Cê, alquil polifluorinatado, alcóxi polifluorinatado, alquenil, alquinil, hidroxialquil, aril, arilalquil, heterocíclico, cicloalquil C3-C6, hidróxi, alcóxi, ariloxi, heterociclicoxi, metilenodioxi, alquilcarboniloxi, ariicarboniloxi, cicloalqueniloxi, heterociclicocarboniloxi, alquilidenoaminoxi, carboximetilcelulose, alcoxicarbonil, ariloxicarbonil, cicloalquiloxicarbonil, heterociclicoxicar-bonil, amino, ureído, alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, heterociclicoamino, formilamino, alquilcarbo-nilamino, arilcarbonilamino, heterociclicocarbonilamino, aminocarbo- nil, alquilaminocarbonil, dialquilaminocarbonil, arilamino- carbonil, heterociclicoaminocarbonil, alcóxicarbo-nilamino, hidroxiaminocarbonil, alcoximino, alquilsulfonil-amino, arilsulfonilamino, heterociclicosulfonilamino, formil, alquilcarbonil, arilcarbonil, cicloalquilcarbonil, heterociclicocarbonil, alquilsulfonil, arilsulfonil, aminossulfonil, alquilaminosulfonil, dialquilaminosulfonil, arilaminosulfonil, heterociclicoaminosulfonil, ariltio, alquiltio, fosfonato e alquilfosfonato.
Uma classe preferida adicional de compostos de fórmula (I) são os compostos onde: RI é um arilamino orto-substituído da fórmula: onde R'4 e R' ' 4 são como acima definidos e R2 é um alquil Ci-C6 ou alquenil C2-C6 linear ou ramificado opcionalmente substituído.
Uma classe preferida particular dos compostos de fórmula (I) são os compostos em que: R3 é CO-NR'R", onde R' e R" são como acima definidos.
Os compostos específicos preferidos de fórmula (I) são os compostos listados abaixo (para o significado dos códigos, consulte a seção exemplos): 1) l-Metil-8-(2-metilfenilamino)-4,5-dihidro-lH- pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A4B1C1Z); 2) l-Metil-8-(2-metilamino-fenilamino)-4,5-dihidro- ΙΗ-pirazol[4,3-]quinazolina-3-carboxamida (A27B1C1Z); 3) 8- (2-Acetil-fenilamino)-1-(2-flúor-etil)-4,5- dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A2B2C1Z); 4) 8-[2-Acetil-5-(4-metil-piperazina-l-il)-fenilamino]-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A39B1C1Z); 5) 8-[2-Acetil-5-(4-metil-piperazina-l-il)-fenilamino]-1-(2-flúor-etil)-4,5- dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A39B2C1Z); 6) 1 -Metil-8-(2-trifluorometoxi-fenilamino)-4,5- dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A45B1C1Z); 7) 1-Metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B1C1Z) ; 8) Etil 1-metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato (A51B1C2Z); 9) 1-Metil-8-[2-metóxi-5-(4-metil-piperazina-l-il)-fenilamino]-l-metil-4,5-dihidro-l-H-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A85B1C1Z); 10) 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino] -1- (2-flúor-etil)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B2C1Z); 11) 1-Metil-8-[4-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A48B1C1Z); 12) l-Metil-8-(2-trifluorometoxi-5-piperazina-l-il-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A97B1C1Z); 13) l-Metil-8-[2-metil-5-(4-metil-piperazina-l-il)- fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A98B1C1Z); 14) l-Metil-8-[5-(4-pirrolidin-l-il-piperidin-l-il)-2-trifluorometoxifenilamino]-4,5-dihidro-lH-lH-pirazol[4,3— h]quinazolina-3-carboxamida (A99B1C1Z); 15) l-metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-ácido carboxílico metilamida (A51B1C4Z); 16) l-metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-metoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxílico metilamida (A85B1C4Z); 17) l-metil-8-[2-metil-5-(4-metil-piperazina-l-carbonil)-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3— h]quinazolina-3-carboxamida (A87B1C1Z); 18) l-metil-8-[2-metil-4-(4-metil-piperazina-l-carbonil)-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h]quinazolina-3-carboxamida (A86B1C1Z); 19) l-metil-8-{2-trifluorometoxi-5-[(1-metil-piperidina-4-carbonil)-amino]-fenilamino}-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A82B1C1Z); 20) Etil l-metil-8-(2-trifluorometoxi-fenilamino) -4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (A45B1C2Z); 21) Potássio 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (A51B1C3Z); 22) Potássio 8-(2-trifluorometoxi-fenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (A45B8C3Z); 23) 1-(2-Hidroxi-etil)-8-(2-trifluorometoxi-fenilamino) -4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A45B5CIZ); 24) l-etil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifiuorome-toxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h]quinazolina-3 -carboxamida (A51B7C1Z) 25) l-metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorome-toxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h]quinazolina-3-ácido carboxílico(2,2,2-trifluoroetil)- amida (A51B1C7Z); 26) 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il) -2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH- pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B5C1Z); 27 ) 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi- fenilamino] -l-vinil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B10C1Z); 28) 1-(2-cloro-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B9C1Z); 29) 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino] -4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A51B8C1Z); 30) Potássio 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il) -2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (A51B5C3Z); 31) Etil 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il) -2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol [ 4,3-h]quinazolina-3-carboxilato(A51B5C2Z); 32) 1 1-metil-8-[5-(1-metil-l,2,3,6-tetrahidro- piridina-4-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A113B1C1Z); 33) 1-metil-8-[5-(l-metil-piperidina-4-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h]quinazolina-3-carboxamida (A114B1C1Z); 34) 8-(5-Bromo-2-trifluorometoxi-fenilamino)-1-metil- 4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A49B1C1Z), e 35) 8-(5-Bromo-2-trifluorometoxi-fenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A49B8C1Z).
Por referência a quaisquer dos compostos específicos de fórmula (I) da invenção, eventualmente sob a forma de um sal farmaceuticamente aceitável, consulte a seção experimentos e reivindicações. A presente invenção também fornece um processo para a preparação dos compostos de fórmula (I), conforme acima definido, no qual o processo compreender as seguintes etapas: etapa 1) reagir o composto da fórmula (II): com um derivado de hidrazina da fórmula (III) : onde R2 é, tal como definido na reivindicação 1, na presença de ácido acético para dar um composto da fórmula (IV) : onde R2 é como acima definido; opcionalmente alquilar um composto da fórmula (IV) onde R2 é hidrogênio com o compostos de fórmula (V): R2-Y (V) onde Y é um grupo de partida adequado, tal como mesil, tosil, halogênio, e R2 é como acima definido, mas não hidrogênio, para dar um composto da fórmula (IV) onde R2 é como acima definido, mas não hidrogênio; etapa 2) reagir o composto da fórmula (IV) com dimetilformamida-diterc-butilacetal ou dimetilformamida- diisopropilacetal para dar um composto da fórmula (VI) : onde R2 é como definido acima, e etapa 3) reagir o composto da fórmula (VI), de acordo com qualquer uma das etapas alternativas (etapa 3a) ou (etapa 3b): etapa 3a) com guanidina para dar um composto da fórmula (VII), onde R2 é, tal como acima definidos; converter o grupo amino do composto resultante da fórmula (VII) para iodo e, em seguida, reagir o resultante derivados-iodos da fórmula (VIII), com uma arilamina orto- substituídas de fórmula Rl-H (IX), onde Rl é conforme definido na reivindicação 1 para dar o composto da fórmula (I) onde RI e R2 são como acima definidos; etapa 3b) com um derivado de guanidina de fórmula (X) : R1-C(=NH)NH2 (X) em que Rl é como acima definidos, para dar um composto da fórmula (I): onde Rl e R2 são como definido acima, e opcionalmente convertendo-p em outros derivados de fórmula (I) e/ou em sais farmaceuticamente aceitável deste. A presente invenção fornece ainda um processo para preparar um composto da fórmula (I) conforme definido acima no qual o composto de fórmula (I) é preparado de acordo com o processo que compreende: etapa 4) converter o grupo etoxicarbonil dos compostos de fórmula (VIII), como definido na reivindicação 6, para um composto da fórmula (XIII) ou sal correspondente através de hidrólise ácida ou básica, converter o composto resultante da fórmula (XIII) ou o sal correspondente nos compostos de fórmula (XIV) através da reação sob as condições básicas e na presença de um agente de condensação adequado, com uma amina de fórmula R'R"-NH (XI) onde R' e R" são como definidos na reivindicação 1; reagir o composto da fórmula (XIV), com uma arilamina orto-substituida da fórmula Rl-H (IX), onde Rl é conforme definido na reivindicação 1, para obter um composto da fórmula (I): onde Rl, R2, R' e R" são como acima definidos e, opcionalmente convertendo-o em outros derivados de fórmula (I) e/ou em sais farmaceuticamente aceitável destes.
Tal como definido anteriormente, os compostos de fórmula (I), que são preparadas de acordo com o processo objeto da invenção, pode ser facilmente convertidos em outros compostos de fórmula (I) pelas operações de acordo com as condições sintéticas bem conhecidas, sendo os seguintes exemplos de conversões possíveis: a) converter um composto da fórmula (I) onde R3 é etoxicarbonil em um composto da fórmula (I) onde R3 é aminocarbonil pelo tratamento com hidróxido de amônio: b) converter um composto da fórmula (I) onde R3 é etoxicarbonil em um composto da fórmula (I) onde R3 é um grupo de CO-NR'R" pelo tratamento com uma amina da fórmula R'R"-NH (XI), onde R' e R" são como acima definidos: c) converter um composto da fórmula (I) onde R3 é etoxicarbonil em um composto da fórmula (I) onde R3 é um grupo CO-OH ou um sal correspondente através de hidrólise ácida ou básica: d) converter um composto da fórmula (I) onde R3 é CO-OH ou um sal correspondente em um composto da fórmula (I), onde R3 é um grupo 00-NR'R", através da reação com uma amina da fórmula R'R"-NH (XI), sob condições básicas, e na presença de um agente de condensação adequado, onde R' e R" são como acima definidos: e) converter um composto da fórmula (I) onde R2 é tritil em um composto da fórmula (I) onde R2 é hidrogênio, sob condições ácidas: f) converter um composto da fórmula (I) onde R2 é hidrogênio em um composto da fórmula (I) onde R2 é tal como acima definido, mas não hidrogênio, através da reação com um álcool de fórmula R2-OH (XII) onde R2 é como acima definido, mas não hidrogênio: g) converter um composto da fórmula (I) onde R2 é hidrogênio em um composto da fórmula (I) onde R2 é tal como definido acima, mas não hidrogênio, através da reação com um composto da fórmula R2-X (XV) onde R2 é como acima definido, mas não hidrogênio e X é halogênio: h) converter um composto da fórmula (I) onde R2 é um haloetil em um composto da fórmula (I) onde R2 é vinil: i) converter um composto da fórmula (I) em que Rl é um arilamino orto-substituido da fórmula: onde R'4, ou R"4 ou R' ' ' 4 é bromo, em um composto da fórmula (I) onde R'4, ou R"4 ou R' ' ’ 4 é um grupo -NR'R" pelo tratamento com uma amina da fórmula R'R"-NH (XI), onde R' e R" são conforme definidos acima. O referido processo, em qualquer uma das referidas variantes, é uma analogia ao processo que pode ser realizado de acordo com os métodos bem conhecidos na arte.
De acordo com a etapa (1) do processo, o composto de fórmula (II) é reagido com o derivado de hidrazina da fórmula (III) na presença de ácido acético, assim como um composto da fórmula (IV) é obtido. A reação é realizada preferencialmente à temperatura ambiente.
Opcionalmente, os compostos de fórmula (IV) onde R2 é hidrogênio, é reagido com um composto adequado da fórmula (V) , na presença de uma base como a trietilamina ou hidreto de sódio ou carbonato de césio, em um solvente adequado, por exemplo, diclorometano, tetrahidrofurano, dioxano ou dimetilformamida, a uma temperatura que varia entre a temperatura ambiente e 100°C, de modo a obter composto (IV) onde R2 é como acima definido, mas não hidrogênio.
De acordo com a etapa (2) do processo, o composto de fórmula (IV) é reagido com dimetilformamida-di-terc-butilacetal ou dimetilformamida-diisopropilacetal, na presença de um solvente adequado, como, por exemplo, dimetilformamida, de modo a obter os compostos de fórmula (VI) . Preferencialmente, a reação é realizada a uma temperatura que varia da temperatura ambiente a cerca de 80°C.
De acordo com a etapa (3) do processo, o composto de fórmula (VI) é reagido com guanidina ou sais de guanidina para obter um composto da fórmula (VII) através da formação do anel pirimidina. Os compostos de fórmula (I) onde Rl representa um grupo arilamino orto-substituído, podem ser obtidas pelos derivados-iodos correspondentes da fórmula (VIII), que, por sua vez, são preparados pelos compostos de fórmula (VII) correspondentes. A preparação dos derivados-iodos da fórmula (VIII), pode ser realizada em um solvente adequado, como tetrahidrofurano, éter etílico ou dimetoxietano, a uma temperatura que varia da temperatura ambiente a cerca de 80°C, e por um período de 2 até cerca de 48 horas. A posterior conversão dos derivados-iodos da fórmula (VIII) em compostos de fórmula (I) pode ser efetuada na presença de um arilamina orto-substituída de fórmula Rl-H (IX) em um solvente adequado, tais como dimetilformamida, dimetoxietano ou acetonitrilo e na presença de quantidades de catalisadores de acetato de paládio, (2,2'-bis (difenilfosfino)-1,1'-binanaftaleno (BINAP) e uma base, tal como carbonato de potássio, fosfato de potássio ou carbonato de césio, em uma temperatura que varia da temperatura ambiente a 110°C e por um tempo que varia de duas até cerca de 24 horas.
De acordo com a etapa (3b) do processo, o composto de fórmula (VI) é reagido com derivados de guanidina de fórmula (X), de modo a obter os compostos de fórmula (I) correspondentes através da formação do anel de pirimidina. Qualquer uma das reações acima é realizada de acordo com métodos convencionais. Como um exemplo, as reações com guanidina ou sais, como cloridrato, carbonato ou nitrato, ou com o derivado de guanidina de fórmula (X) , conforme estabelecido nas etapas (3a) ou (3b), são realizadas em dimetilformamida a uma temperatura que varia entre 80°C a temperatura de refluxo eventualmente na presença de carbonato de potássio.
De acordo com a etapa (4) do processo, os compostos de fórmula (VIII) podem ser convertidos em derivados de ácidos carboxílicos de fórmula (XIII) ou de sal correspondentes através das condições de hidrólise ácida ou básica, amplamente conhecida na arte.
Os compostos de fórmula (XIII) podem ser convertidos em derivados de carboxamido de fórmula (XIV) em que R' e R" são como acima definidos. A reação é realizada na presença de cloreto de amônio ou de uma amina primária ou secundária adequada de fórmula (XI), sob condições básicas, de preferência com N,N-diisopropil-N-etilamina ou trietilamina, em um solvente adequado, como diclorometano, dimetilformamida, tetrahidrofurano, ou dioxano, e na presença de um agente de condensação adequado, tais como N,N'-diciclohexilcarbodiimida (DCC), N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida cloridrato (EDCI) ou O-benzotriazol-l-il-N,N,N',N'-tetrametiluronio tetrafluorborato (TBTU); quantidades de catalizadores de (benzotriazol-l-iloxi) tripirrolidinofosfonio hexafluorofosfato (PyBOP) ou N-hidroxibenzotriazole pode ser igualmente necessário. A posterior conversão dos compostos de fórmula (XIV) para o composto da fórmula (I) pode ser realizada em um solvente adequado, tais como dimetilformamida, acetonitrila e dimetoxietano ou na presença de uma arilamina orto-substituída de fórmula Rl-H (IX), da quantidade de catalisador de acetato de paládio (2,2'-bis (difenilfosfino)-1,1'-binanaftaleno (BINAP) e uma base, tal como carbonato de potássio, fosfato de potássio ou carbonato de césio, a uma temperatura que varia da temperatura ambiente a 110°C e por um tempo que varia de 2 até cerca de 24 horas.
Como indicado anteriormente, o composto de fórmula (I) previamente preparado pode ser facilmente convertido em vários outros compostos de fórmula (I) da invenção. Como exemplo, os compostos de fórmula (I) tendo R3 como um grupo etoxicarbonil, ou mesmo um grupo alcoxicarbonil, podem ser convertidos em uma variedade de derivados, de acordo com métodos bem conhecidos na arte para converter grupos carboxiester (-COOR') em carboxamidas (-CONH2) , carboxamidas N-substituídas (-CONHR'), carboxamidas N'N- dissubstituídas (-CONR'R") e ácidos carboxílicos (-COOH), por exemplo, como definido na conversão (a), (b) e (c).
As condições operativas são aquelas amplamente conhecidas na arte e podem incluir, por exemplo, a conversão de um grupo carboxiester em um grupo carboxamida, a reação com amônia ou hidróxido de amônio, na presença de um solvente adequado, como um álcool menor, dimetilformamida ou suas misturas; preferência a reação é realizada com hidróxido de amônio em uma mistura metanol/dimetilformamida, a uma temperatura que varia de cerca de 50°C a cerca de 100°C.
Condições operativas análogas para a preparação de carboxamidas N-substituídas ou carboxamidas N, N- dissubstituídas onde uma amina primária ou secundária adequada é usada no lugar de amônia ou hidróxido de amônia. Alternativamente, grupos carboxiester podem ser convertidos em carboxamida ou carboxamidas N-substituídas ou carboxamidas N,N-dissubstituídas sob condições básicas, tais como lítio bis-trimetilsililamida 1 N em THF, usando o cloreto de amônia ou de uma amina primária ou secundária adequada, de preferência a reação é realizadas em tetrahidrofurano, a uma temperatura que varia entre 20°C ao refluxo.
Do mesmo modo, grupos carboxiester podem ser convertidos em derivados carboxílicos através das condições de hidrólise ácida ou básica, amplamente conhecidas na arte. De acordo com a conversão (d) do processo, compostos de fórmula (I) onde R3 é carboxílico (-COOH) podem ser convertidos em derivados de carboxamido (-CONR'R") em que R' e R” são como anteriormente indicado. A reação é realizada na presença de cloreto de amônia ou de uma amina primária ou secundária adequada da fórmula (XI), sob condições básicas, de preferência com N,N-diisopropil-N-etilamina ou trietilamina, em um solvente adequado, como diclorometano, dimetilformamida, tetrahidrofurano, ou dioxano, e na presença de um agente de condensação adequado, tais como N,N’- diciclohexilcarbodiimida (DCC), N-(3-dimetilaminopropil)- N'-etilcarbodiimida cloridrato (EDCI) ou O-benzotriazol-1- il-N,N,N',N'-tetrametiluronio tetrafluorborato (TBTU); quantidades de catalizadores de (benzotriazol-l-iloxi) tripirrolidinofosfonio hexafluorofosfato (PyBOP) ou N-hidroxibenzotriazole pode ser igualmente requerido.
De acordo com a conversão (e) , o grupo tritil dos compostos de fórmula (I) é removido sob condições ácidas, por exemplo, com ácido trifluoroacético e na presença de um solvente adequado, como diclorometano, de modo a dar origem aos compostos de fórmula (I) correspondentes onde R2 é hidrogênio.
De acordo com a conversão (f), do processo, os compostos de fórmula (I) onde R2 é hidrogênio são reagidos com um álcool de fórmula R2-0H (XII) onde R2 é como acima definido, mas não hidrogênio, na presença de di-fc- butilazadicarboxilato e trifenilfosfina ou trifenilfosfina suportado em resina, em um solvente adequado, como, por exemplo, tetrahidrofurano, de modo a obter o composto correspondente de fórmula (I).
De acordo com a conversão (g), do processo, os compostos de fórmula (I) onde R2 é hidrogênio são reagidos com um composto da fórmula R2-X (XV) onde R2 é como acima definido, mas não hidrogênio e X é halogênio de preferência cloro, bromo ou iodo, na presença de uma base como carbonato de césio em um solvente adequado, tais como, por exemplo, dimetilformamida, de modo a obter o composto correspondente de fórmula (I).
De acordo com a conversão (h) do processo, os compostos de fórmula (I) onde R2 é um haloetil, preferencialmente cloroetil, são tratados com uma base, de preferência DBU, a uma temperatura que varia entre 20°C a 80°C, de modo a obter o composto correspondente de fórmula (I) onde R2 é vinil.
De acordo com a conversão (i) do processo, a conversão de um composto da fórmula (I) em que RI é um arilamino orto-substituído tedo bromo em qualquer posição, em um composto da fórmula (I) em que Ri é um arilamino orto-substituído tendo em qualquer posição um grupo-NR'R", pode ser realizado de vários modos, de acordo com os métodos convencionais. Preferivelmente, este é transportado em um solvente adequado, como tetrahidrofurano ou dioxano pelo tratamento com uma amina da fórmula R'R"-NH (XI), e na presença de quantidades de catalisadores de tris (dibenzilideneacetona) dipaládio, 2-diciclohexilfosfino-2'- (N,N-dimetilamino)-bifenil e uma base como a LiN (TMS)2, a uma temperatura que varia da temperatura ambiente para o refluxo e por um tempo que varia de 1 a cerca de 24 horas.
Com o relatado acima, fica claro para um técnico no assunto que os compostos de fórmula (I) possuem um qrupo funcional que pode ser mais derivados para outro qrupo funcional, de acordo com a realização de métodos bem conhecidos na arte, assim, levando a outros compostos de fórmula (I), que são considerados como compreendidos dentro do âmbito da presente invenção.
De acordo com qualquer variante do processo de preparação dos compostos de fórmula (I), os materiais de partida e quaisquer outros reaqentes são conhecidos ou facilmente preparados de acordo com métodos conhecidos.
Como exemplo, enquanto o material de partida os compostos de fórmula (II) estão disponíveis comercialmente, os compostos de fórmula (II) podem ser preparados como descrito no referido WO 04/104007. Os compostos de fórmula (III), (V), (XII) e (XV) estão disponíveis comercialmente. Alguns compostos de fórmula (IX), (X) e (XI) estão disponíveis comercialmente, outros foram preparados, ver os exemplos a seguir 28 a 35 e 43 a 44.
Do acima exposto, é evidente para uma pessoa versada na arte que, quando da preparação dos compostos de fórmula (I), de acordo com qualquer uma das variantes do referido processo, grupos funcionais opcionais dentro do material de partida ou intermediários deles poderíam originar reações secundárias indesejáveis, que devem estar devidamente protegidas de acordo com técnicas convencionais. Do mesmo modo, a conversão destas últimas em compostos deprotegidos livres podem ser realizados de acordo com procedimentos conhecidos. Como será facilmente apreciado, se os compostos de fórmula (I), elaborado de acordo com o processo descrito acima são obtidos como mistura de isômeros, sua separação utilizando técnicas convencionais para isômeros individuais de fórmula (I), está dentro do âmbito de aplicação da presente invenção.
As técnicas convencionais para resolução de racemato incluir, por exemplo, cristalização particionada derivados do sal diastereoisomerico ou preparativo quiral HPLC.
Além disso, os compostos de fórmula (I) da invenção também podem ser preparados de acordo com técnicas de química combinatorial amplamente conhecidas na arte, por exemplo, ao realizar as referidas reações entre os vários intermediários de forma paralela e/ou serial e pelo trabalho sob as condições de síntese de fase sólida (SPS).
Para uma referência geral para a preparação dos compostos de fórmula (I) da invenção de acordo com técnicas de química combinatorial, consulte a seção experimental.
Veja a seção experimental para qualquer exemplo concreto sobre a preparação dos compostos de fórmula (I) da invenção e sua conversão em outros compostos de fórmula (I) · Assim, é mais um objetivo da presente invenção uma biblioteca de dois ou mais compostos de fórmula (I) Biblioteca de dois ou mais compostos de fórmula (I): onde: Rl é uma arilamino orto-substituídos; R2 é hidrogênio ou um grupo opcionalmente substituído selecionado de alquil Ci-Cô linear ou ramificado, alquenil C2-C6 linear ou ramificado, alquinil C2-C6 linear ou ramificado, cicloalquil C3-C6 e heterocíclico; R3 é CO-OR'ou CO-NR'R", em que R' e R" são, cada um, independentemente, hidrogênio ou um grupo opcionalmente substituído selecionado a partir de alquil C1-C6 linear ou ramificado, cicloalquil C3-C6 e heterocíclico, ou R' e R" tomados em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados, podem formar um grupo heterocíclico opcionalmente substituído contendo um heteroátomo adicional selecionado dentre N, 0 ou S, desde que: etil-l-metil-8-(2-metoxi-fenilamino)-4,5-dihidro-lH- pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato e l-metil-8-(2- metoxifenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida sejam excluídos; e isômeros, tautômeros, hidratos, solvatos, complexos, metabólitos, pró-drogas, veículo, N-óxidos e sais farmaceuticamente aceitável.
Outro objetivo da presente invenção é fornecer um intermediário de fórmula (X'): R1*-C(=NH)NH2 (X') ou de fómula (IX') Rl’-H (IXr) onde Rl é FARMACOLOGIA
Os compostos com a fórmula (I) são ativos como inibidores da proteína quinase e são, portanto, úteis, por exemplo, para restrinqir a proliferação desrequlada de células tumorais.
Em terapia, eles podem ser usados no tratamento de diversos tumores tais como, por exemplo, como os anteriormente definidos, bem como no tratamento de outras doenças proliferativa da célula, tais como, hiperplasia beniqna da próstata, polipose adenomatose familiar, neuro-fibromatose, psoríase, proliferação da célula lisa vascular associada com ateroesclerose, fibrose pulmonar, artrite qlomerulonefrite e estenose e restenose pós-cirúrqica. A atividade de inibição dos inibidores putativos da PLK-1 e e a potência dos compostos selecionados foi determinada através do ensaio descrito abaixo.
As formas curtas e abreviações utilizadas neste documento têm o sequinte siqnifiçado: Ci curie DMSO dimetilsulfóxido ID identidade KDa quilodalton microCi microCurie mg miligrama microg micrograma mL mililitro microL microliter M molar mM milimolar microM micromolar nM nanomolar Et etil Clonagem, expressão e purificação de domínio quinase PLK1 recombinante. 0 domínio quinase PLK1 (correspondentes aos resíduos 2-345 da seqüência completa, ver Swiss-Prot número de acesso P53350) foi PCR amplificado do gene PLK1 humanos completo comprados da imaGenes como clone IRATp970A078D.
Amplificação foi realizada utilizando o oligonucleótido direto: 5'GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTTATTCGAAAACCTGTATTTT CAGGGCCCTAGTGCTGCAGTGACTGCAGGGAAG3' [SEQ ID NO: 1] E o oligonucleótido reverso: 5'GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTTTCACTATTTATTGAGGACT GTGAGGGGCTT-3' [SEQ ID NO: 2].
Para fins clonagem, o oligonucleótidos incluídos sítios attB, a fim de obter um produto PCR adequado attB flanqueado para clonagem utilizando a tecnologia Gateway® (Invitrogen). Além disso, para fins de purificação, a sequência iniciadora direta incluindo um site de divagem TEV® (Amersham Biosciences). O produto resultante da PCR foi clonado no plasmídio pDONR221 e depois transferidos para o vetor de expressão baculovírus pVL1393 (Invitrogen) Gateway® modificado. Para fins de purificação e expressão, o marcador His foi adicionado no N-terminal para o domínio quinase PLK. A clonagem foi realizada de acordo com os protocolos descritos no manual Gateway®. 0 baculovírus foi gerado pelas transfecções das células de insetos Sf9 e com o vetor de expressão do DNA viral utilizando o kit de transfecção BaculoGold® (Pharmingen) . 0 sobrenadante viral foi recuperado após 5 dias e submetido a 3 ciclos de amplificação para aumentar o título viral. A Proteína recombinante foi produzida pelas transfecções de células de insetos High5. Após 48 horas de infecção as células foram recuperadas, pelotadas e congeladas a -80°C.
Para purificação da proteína recombinante, a pelota foi descongelada, ressuspensas em tampão lise (PBS, NaCl 150 mM, CHAPS 0,1%, DTT 20 mM, glicerol 10%, os inibidores da protease) e lisadas por sonicação. O lisado foi limpo por centrifugação e carregados em uma coluna de afinidade Nichel. Após extensa lavagem, a proteína recombinante foi clivada e eluída por incubação com protease TEV®.
Ensaio bioquímico para inibidores da Atividade quinase PLK-1 A atividade inibitória dos inibidores da quinase putativa e a potência dos compostos selecionados foram determinadas através de um ensaio de trans-fosforilação. O péptido específico ou substratos da proteína são trans-fosforiladas pela sua especificidade serino-treonina ou tirosina quinase, na presença de ATP rastreados com 33P-γ-ΑΤΡ, e na presença de seu próprio tampão ideal e cofactores.
No final da reação de fosforilação, mais de 98% ATP frio e ATP radioativos foram capturados por um excesso de resinas Dowex de troca iônica. A resina foi assentada no fundo dos poços de reação por gravidade. O sobrenadante, contendo substrato fosforilatado foi posteriormente retirado e transferido para uma placa de contagem, e então avaliado pela contagem β.
Condições de reagentes/ensaio i. Preparo da resina Dowex 500 g de resina úmida (SIGMA, resina Dowex preparada 1x8 200 a 400 mesh, 2,5 kg) foram pesados, e diluídos para 2L em 150 mM de formiato de sódio, pH 3,00. A resina repousou por várias horas e, em seguida, o sobrenadante foi descartado.
Após três lavagens como acima, ao longo de dois dias, a resina assentou, o sobrenadante foi descartado e dois volumes de 150 mM do tampão de formiato de sódio são adicionados por volume de sedimento. 0 pH é medido e, em seguida, deve ser em torno de 3,00. A resina é lavada é estabilizada por mais de uma semana, a resina estocada é mantida a 4°C antes do uso. ii. Quinase buffer (KB) O tampão quinase foi composto por 50 mM de HEPES pH 7,9 contendo 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 3 microM NaVO3, e 0,2 mg/ ml BSA, 10 mM β-glicerofosfato. iii Condições de ensaio O ensaio quinase foi executado com uma concentração enzima final PLK-1 de 3 nM, na presença de 40 microM ATP, 3 nM 33Ρ-γ-ΑΤΡ e 85 microM substrato alfa-caseína, SIGMA, # C-3240.
Ensaio Dowex robotizado 1) 3x mistura enzimáticas (feito em tampão quinase 3X), 5 microL/poço 2) 3x substrato e mistura ATP (feito em ddH2O) , juntamente com 33Ρ-γ-ΑΤΡ, 5_microL/poço 3) 3x compostos teste (diluído em ddHjO - 3% DMSO) -5 microL/poço Diluição do composto e o esquema de ensaio são relatados a seguir. i. A diluição dos compostos 10 mM soluções de estoque do composto de teste em 100% DMSO foram distribuídas em 96 poços de placas microtiter formato 12x8.
Para a % de estudos de inibição, as placas de diluição a 1 mM, 100 microM e 10 microM foram preparadas em 100% DMSO e, em seguida, diluída a 3X a concentração final desejada (30, 3 e 0,3 microM) em ddH2O, 3% DMSO. Um Multimek 96 (Beckman) foi utilizado para diluições e compostos pipetados em placas teste.
Para a determinação de IC50, os compostos são recebidos como 1 mm, 100% de soluções DMSO, plaqueada na primeira coluna de uma placa microplacas (Al ao Gl) , 100 microL.
Um Biomek 2000 (Beckman) é utilizado para a série de 1:3 diluições em água, 3% DMSO, da coluna de Al para Gl e para todos os sete compostos na placa. Em um padrão experimento, a maior concentração de todos os compostos é de 30 microM, então diluído na mistura do ensaio caindo a 10 microM. ii.Esquema de ensaio Placas de ensaio de fundo em V de 384 poços (placas teste) são preparadas com 5 microL do composto de diluição (3x) e, em seguida, colocado sobre uma PlateTrak 12 estação robotizada (Perkin Elmer, o robô tem 384-pontas pipetando para começar o ensaio mais 96 pontas para dispensar a resina), juntamente com um reservatório para a mistura da enzima (3x) e um para a mistura ATP (3X). No início, o robô aspira 5 microL da mistura ATP, deixa uma lacuna de ar na ponta (3 microL) e aspira 5 microL da mistura PLK1. As seguintes dispensas nas placas permitem que a reação quinase inicie após 3 ciclos da mistura, feita pelo próprio robô.
Neste ponto, a concentração correta é restaurada por todos os reagentes. 0 robô incuba as placas durante 60 minutos à temperatura ambiente e, em seguida, interrompe a reação pipetando 70 microL da suspensão da resina Dowex na mistura da reação.
Três ciclos de mistura são feitos imediatamente após a adição da resina.
Outro ciclo de mistura é realizado após todas as placas serem interrompidas, desta vez utilizando pontas normais: as placas então repousam durante cerca de uma hora, para maximizar a captura de ATP. Neste ponto, 20 microL do sobrenadante são transferidos para 384-Optiplates (Perkin-Elmer), com 70 microL de Microscint 40 (PerkinElmer) , após 5 min de agitação orbital as placas foram lidas em um contador de radioatividade Perkin-Elmer Top Count. iii. A análise dos dados Os dados são analisados por uma versão personalizada internamente da SW package "Assay Explorer", que fornece tanto % de inibição para ensaios primários como ajustes sigmoidal de curvas de dez diluições para a determinação IC50, para o segundo ensaio/hit confirmação de rotinas.
Ensaio bioquímico para inibidores da atividade quinase Aurora-2 O ensaio in vitro da inibição quinase foi realizado da mesma forma como descrito para enzima PLK-1. i. Tampão Quinase (KB) para Aurora-2 O tampão quinase foi composto por 50 mM HEPES, pH 7,0, 10 mM MgCÍ2, 1 mM DTT, 3 microM NaVO3, e 0,2 mg/ml BSA. ii. Condições de ensaio para Aurora-2 (concentração final) O ensaio da quinase foi executado com uma concentração de enzima de 2,5 nM, 10 microM ATP, 1 nM 33P-y-ATP, e repete 8 microM substrato, composto de 4 LRRWSLG.
Ensaio de inibição da atividade cdk2/Ciclina A
Reação quinase: 1,5 μΜ de substrato histona Hl, 25 μΜ ATP (0,2 microCi Ρ33γ-ΑΤΡ) , 30 ng de baculovírus co-expresso cdk2/Ciclina A, 10 μΜ inibidor com um volume final de 100 μΐ de tampão (TRIS HCl 10 mM pH 7,5, MgC12 10 mM, 7,5 mM DTT) foram adicionados a cada poço de uma placa de 96 poços de fundo em U. Após 10 min de incubação a 37° C, a reação foi interrompida por 20 microL de EDTA 120 mM.
Captura: 100 μΐ foram transferidos de cada poço para a placa MultiScreen, para permitir que o substrato se ligue ao filtro de fosfocelulose. As placas foram lavadas 3 vezes com 150 μΐ/poço de PBS isento de Ca++/Mg++ e filtradas pelo sistema de filtração MultiScreen.
Ensaior de proliferação celular in vitro As células cancerosas humanas do ovário A2780 e da mama MCF7 (1250 células/poço) foram semeadas em placas de 384 poços branca em meio completo (RPMI 1640 ou EMEM mais 10% de soro bovino fetal) e tratadas com compostos dissolvidos em DMSO 0,1%, após 24h semeadura. As células foram incubadas a 37 °C e 5% de C02 e após 72 horas as placas foram processadas utilizando teste CellTiter-Glo (Promega), seguindo as instruções do fabricante.
CellTiter Glo é um método homogêneo baseado sobre a quantificação do ATP presentes, um indicador de células ativas metaboliticamente. A ATP é quantificada por meio de um sistema baseado em luciferase e D-luciferin resultando na geração de luz. 0 sinal luminescente é proporcional ao número de células presentes na cultura.
Resumidamente 25 microL da solução reagente são adicionadas a cada poços e após 5 minutos as microplacas estão vermelhas por um luminômetro. O sinal luminescente é proporcional ao número de células presentes na cultura.
Face ao ensaio de inibição exposto, os compostos de fórmula (I) da invenção resultou possuir uma atividade inibitória PLK notável, tipicamente com IC5o inferior a 0,07 microM.
Ver, como exemplo, a tabela A a seguir que relata os dados experimentais de alguns compostos representante da invenção da fórmula (I) (para o significado dos códigos, consulte a seção Exemplos) sendo testados nos ensaios bioquímicos como inibitores PLK-1 e ensaio de proliferação celular A2780 (IC50 microM) em comparação com os compostos mais próximo da arte anterior, descrito no referido WO 04/104007, página 105, Tabela IX, composto B08-X00-M00 (C01)-D03.
Tabela A
Surpreendentemente, a atividade inibitória PLK-1 dos compostos da presente invenção se mostrou nitidamente superior à dos compostos de referência. Até agora, os novos compostos da invenção são inesperadamente dotados de uma atividade inibitória PLK-1 significativamente mais elevada do que os compostos, estruturalmente mais próximos, encontrados na arte do acima mencionado WO 04/104007 e são, portanto, particularmente vantajosos, na terapia contra doenças proliferativas associadas com um ciclo celular alterado dependente da atividade quinase.
Os compostos da presente invenção podem ser administrados tanto como agente único, ou, alternativamente, em combinação com tratamentos anticancerígenos conhecidos como a terapia por radioterapia ou regime de quimioterapia, em combinação com agentes citotóxicos e citostáticos, agentes tipo antibióticos, agentes alquilantes, agentes antimetabolito, agentes hormonais, agentes imunológicos, agentes tipo interferon, inibidores da ciclooxigenase (e.g., inibidores de COX-2), inibidores de metalomatrixprotease, inibidores de telomerase, inibidores de tirosina quinase, agentes receptores de fator anti-crescimento, agentes anti-HER, agentes anti-EGFR, agentes anti-angiogênese (por exemplo, inibidores da angiogênese), inibidores da farnesil transferase, inibidores do caminho de transdução de sinal ras-raf, inibidores de ciclo celular, outros inibidores cdks, agentes de união tubulina, inibidores de topoisomerase I, inibidores de topoisomerase II, e similares.
Se formulados como uma dose fixa, tais produtos combinados empregam os compostos da presente invenção dentro da faixa de dosagem descrita a seguir e os outros agentes ativos farmaceuticamente dentro da faixa de dosagem aprovada.
Os compostos de fórmula (I) podem ser usados de forma seqüencial com agentes anticancerígenos conhecidos quando uma combinação formulação é inadequada.
Os compostos de fórmula (I) da presente invenção, são adequados para administração a um mamífero, por exemplo, humanos, podem ser administrados pelas rotas habituais e o nível de dosagem depende da idade, peso e condições do paciente e rota de administração. Por exemplo, uma dosagem adequada adotada para administração oral de um composto com a fórmula (I) pode variar de cerca de 10 a cerca de 500 mg por dose, de 1 a 5 vezes por dia. Os compostos da invenção podem ser administrados em diversas formas de dosagem, e.g., oralmente, na forma de tabletes, cápsulas, tabletes revestidos com filmes ou açúcar, soluções líquidas ou suspensões; por via retal na forma de supositórios; por via parenteral, e.g., intramuscularmente, ou por injeção intravenosa e/ou intratecal e/ou intraespinal ou infusão. A presente invenção também inclui composições farmacêuticas compreendendo um composto da fórmula (I) ou um sal aceitável farmaceuticamente, em associação com um excipiente farmaceuticamente aceitável, que pode ser um veículo ou um diluente.
As composições farmacêuticas contendo os compostos da invenção são geralmente preparadas seguindo métodos convencionais e são administradas em uma forma farmacêutica adequada. Por exemplo, as formas orais sólidas podem conter, juntamente com o composto ativo, diluente, e.g., lactose, dextrose, sacarose, sucrose, celulose, amido de milho ou amido de batata; lubrificantes, e.g., sílica, talco, esteárico, estearato de cálcio ou magnésio, e/ou polietileno glicois; agentes aglutinantes, e.g., amidos, goma arábica, gelatina, metilcelulose, carboximetilcelulose ou polivinil pirrolidona; agentes desagregadores, e.g., amido, algínicos, alginatos ou amido glicolato de sódio; misturas efervescentes; corantes; adoçantes, agentes umectantes tais como lecitina, polisorbatos, laurilsulfatos; e, em geral, substâncias não tóxicas e farmacologicamente inativas usadas em formulações farmacêuticas. Estas preparações farmacêuticas podem ser manufaturadas de uma maneira conhecida, como por exemplo, por meio de mistura, granulação, formação de tabletes, revestindo com açúcar ou processos de revestimento com filmes.
As dispersões liquidas para administração oral podem ser, e.g., xaropes, emulsões e suspensões. Por exemplo, os xaropes podem conter como veiculo, sacarose ou sacarose com glicerina e/ou manitol e/ou sorbitol.
As suspensões e as emulsões podem conter como veiculo, por exemplo, uma goma natural, agar, alginato de sódio, pectina, metilcelulose, carboximetilcelulose ou polivinil álcool. As suspensões ou soluções para injeções intramusculares podem conter, juntamente com o composto ativo, um veiculo que seja farmaceuticamente aceitável, e.g., água esterilizada, óleo de oliva, etil oleato, glicois, e.g., propileno glicol, e, caso desejado, uma quantidade adequada de hidrocloreto de lidocaina.
As soluções para injeções intravenosas ou infusões podem conter como veiculo, por exemplo, água esterilizada ou de preferência elas podem ser na forma de soluções salinas isotônicas aquosas esterilizadas, ou elas podem conter como veículo um propileno glicol.
Os supositórios podem conter juntamente com o composto ativo um veículo farmaceuticamente aceitável, e.g., manteiga de cacau, polietileno glicol, um tensoativo éster graxo de polioxietileno sorbitan ou lecitina.
As soluções para injeções intravenosas ou infusões podem conter como veículo, por exemplo, água esterilizada ou de preferência elas podem ser na forma de soluções salinas isotônicas aquosas esterilizadas, ou elas podem conter como veículo um propileno glicol.
Os supositórios podem conter juntamente com o composto ativo um veículo farmaceuticamente aceitável, e.g., manteiga de cacau, polietileno glicol, um tensoativo éster graxo de polioxietileno sorbitan ou lecitina.
Com o objetivo de melhor ilustrar a presente invenção, sem representar qualquer limitação à mesma, os seguintes exemplos são agora dados.
EXEMPLOS A preparação sintética de alguns compostos de fórmula (I) da invenção é descrita nos exemplos a seguir. Todos os compostos foram convenientemente e inequivocamente identificados através de um sistema de codificação (ver a tabela IV a seguir), alguns deles foram listados e seguidamente enumerados e também de acordo com o seu nome químico, enquanto outros foram convenientemente e inequivocamente identificados através de um sistema de codificação, juntamente com o seu 1H-RMN dados ou HPLC/ dados de massa (ver tabelas V ao XX) . Cada códiqo, que identifica inequivocamente um único composto específico de fórmula (I), constituído por quatro unidades A-B-C-Z.
Um códiqo representa qualquer Rl substituinte, conforme a fórmula (I), a ser anexada ao resto da molécula para a posição 8; cada grupo A é representado através da fórmula química apropriada na tabela I a seguir, indicando também o seu ponto de fixação ao resto da molécula. 0 código B representa o grupo R2 sendo anexado ao restante da molécula através do átomo de nitrogênio pirazol, conforme a fórmula (I) . Cada grupo B é representado através da fórmula química apropriada na tabela II a seguir, indicando também o seu ponto de fixação ao resto da molécula. 0 código C representa o grupo R3 sendo anexado ao resto da molécula para a posição 3, conforme a fórmula (I). Cada grupo C é representado através de uma fórmula química apropriada na tabela III a seguir, indicando também seu ponto de fixação ao resto da molécula.
Cada grupo específico A, B e C é representado e numerado consecutivamente nas tabelas I, II e III, respectivamente.
Finalmente, o código Z se refere ao núcleo central da molécula (I). De tudo acima relatado, é evidente para uma pessoa versdada na arte que Z é substituído por Rl (código A) , R2 (Código B) , e R3 (código C) , conforme definido na fórmula (I), indicando também as posições dos outros substituintes.
Portanto, o sistema de codificação usado atualmente para alguns dos compostos de fórmula (I) podem ser brevemente resumidos da seguinte forma: Apenas como exemplo, que não se destinam a limitar o âmbito de aplicação da presente invenção, o composto A45B8C2Z (ver exemplo) representa o pirazol-quinazolina derivado da fórmula (I) onde o núcleo central é representada pela porção Z, Rl é o grupo de fórmula A45 da tabela I, R2 é o grupo de fórmula B8 da tabela II, R3 é um grupo de fórmula C2 da tabela III, tendo a fórmula: Os compostos da presente invenção, como preparados de acordo com os exemplos a seguir, também foram definidos por 1H NMR ou por dados analíticos HPLC/MS; os dados HPLC/MS foram coletados seguindo qualquer um dos métodos 1, 2, 3 e 4.
Método Analítico 1 HPLC/MS
O equipamento HPLC consistiu de um sistema UPLC
Waters Acquity™ equipado com um detector de PDA Waters 2996 e um espectrômetro de massa quadrúpulo simples modelo Micromass ZQ, equipado com uma fonte de íons eletrospray (ESI). Instrumento de controle, aquisição de dados e processamento de dados foram fornecidos pelo software Empower e MassLynx 4,0.
A HPCL foi realizada a 45°C em uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min utilizando um BEH C18 1,7 microm Waters Acquity UPLC (2,1 x 50 mm) coluna. A fase móvel A foi de 0,1% de ácido fórmico pH = 3,3 tampão com acetonitrila (98:2), e a fase móvel B foi H20/acetonitrila (5:95), o gradiente foi de 5 a 95% B em 2 minutos, em seguida, retido 95% B por 0,1 minutos. O volume da injeção foi de 2 microL. O espectrômetro de massa foi operado nos modos de íons positivos e negativos, a voltagem capilar foi ajustada em 3,5 KV (ES+) e 28 V (ES"), a temperatura da fonte era de 120°C; o cone foi de 14 V (ES+) e 2,8 kV (ES-); a varredura completa, a massa variando entre 100 a 800 amu foi ajustada.
Método Analítico 2 HPLC/MS O equipamento HPLC consistiu de um sistema HP Alliance Waters 2996 equipado com um detector de PDA Waters 2996 e um espectrômetro de massa quadrúpulo simples modelo Micromass ZQ, equipado com uma fonte de íons eletrospray (ESI). Instrumento de controle, aquisição de dados e processamento de dados foram fornecidos pelo software Empower e MassLynx 4,0. A HPCL foi realizada a 30 °C em uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min usando C18, 3 microm Phenomenex (4,6 x 50 mm) coluna. A fase móvel A foi acetato de amônio 5mM de tampão pH 5,2 com acetonitrila 95:5), e a fase Móvel B foi H20/acetonitrila (5:95) o gradiente foi de 10 a 90% B em 8 minutos e então subindo a 100% em 1 minuto. O volume de injeção 10 microL. 0 espectrômetro de massa foi operado nos modos de íons positivos e negativos, a voltagem capilar foi ajustada em 3,5 KV (ES+) e 28 V (ES"), a temperatura da fonte era de 120°C; o cone foi de 14 V (ES+) e 2,8 kV (ES" ) ; a varredura completa, a massa variando entre 100 a 800 amu foi ajustada.
Método Analítico 3 HPLC/MS 0 equipamento HPLC consistiu de um sistema UPLC Waters Acquity™ equipado com um detector de PDA Waters 2996 e um espectrômetro de massa quadrúpulo simples modelo Micromass ZQ, equipado com uma fonte de íons eletrospray (ESI). Instrumento de controle, aquisição de dados e processamento de dados foram fornecidos pelo software Empower e MassLynx 4,0. A HPCL foi realizada a 45°C em uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min utilizando um BEH C18 1,7 microm Waters Acquity UPLC (2,1 x 50 mm) coluna. A fase móvel A foi 0,05% de hidróxido de amônio pH = 10 tampão com acetonitrila (95:5), e a fase móvel B foi H20/acetonitrila (5:95), o gradiente foi de 5 a 95% B em 2 minutos, em seguida, retido 95% B por 0,1 minutos. O volume da injeção foi de 2 microL. O espectrômetro de massa foi operado nos modos de íons positivos e negativos, a voltagem capilar foi ajustada em 3,5 KV (ES+) e 28 V (ES”), a temperatura da fonte era de 120°C; o cone foi de 14 V (ES+) e 2,8 kV (ES”); a varredura completa, a massa variando entre 100 a 800 amu foi ajustada.
Método Analítico 4 HPLC/MS
O equipamento HPLC consistiu de um sistema UPLC
Waters 2790 equipado com um detector de PDA Waters 996 e um espectrômetro de massa quádruplo simples modelo Micromass ZQ, equipado com uma fonte de íons eletrospray (ESI). Instrumento de controle, aquisição de dados e processamento de dados foram fornecidos pelo software Empower e MassLynx 4,0. A HPCL foi realizada a 25°C em uma taxa de fluxo de 1 mL/min usando RP18 Waters x Terra (3,0 x 20 mm) coluna. A fase móvel A foi 0,05% de hidróxido de amônio pH = 10 tampão com acetonitrila (95:5), e a fase móvel B foi H20/acetonitrila (5:95), o gradiente foi de 10 a 90% B em 4 minutos, em seguida, retido 95% B por 1 minutos. O volume da injeção foi de 10 microL. O espectrômetro de massa foi operado nos modos de íons positivos e negativos, a voltagem capilar foi ajustada em 2,5 KV; a temperatura da fonte era de 120°C; o cone foi de 10 V; a varredura completa, a massa variando entre 100 a 800 amu foi ajustada. Vários compostos da invenção da fórmula (I), foram elaborados de acordo com os exemplos a seguir, e purificados pela HPLC preparativa.
As condições operatórias são definidas a seguir: Método Preparativo 1 HPLC/MS O equipamento HPLC consistiu de um sistema HPCL equipado com um detector de PDA Waters 996 e um espectrômetro de massa quádruplo simples modelo Micromass ZQ, equipado com uma fonte de íons eletrospray (ESI) .
Instrumento de controle, aquisição de dados e processamento de dados foram fornecidos pelo software Empower e MassLynx 4,0. A HPCL foi realizada a 25°C em uma taxa de fluxo de 20 mL/min usando RP18 Waters x Terra 10 microm (19 x 250 mm) coluna. A fase móvel A foi 0,05% de hidróxido de amônio pH = 10 tampão com acetonitrila (95:5), e a fase móvel B foi acetonitrila, o gradiente foi de 10 a 90% B em 15 minutos, em seguida, retido 90% B por 3 minutos. O volume da injeção foi de 10 microL. O espectrômetro de massa foi operado nos modos de íons positivos e negativos, a voltagem capilar foi ajustada em 2,5 KV; a temperatura da fonte era de 120°C; o cone foi de 10 V; a varredura completa, a massa variando entre 100 a 800 amu foi ajustada.
Método Preparativo 2 HPLC/MS C equipamento HPLC consistiu de um sistema HPCL equipado com um detector de PDA Waters 996 e um espectrômetro de massa quadrúpulo simples modelo Micromass ZQ, equipado com uma fonte de íons eletrospray (ESI) . Instrumento de controle, aquisição de dados e processamento de dados foram fornecidos pelo software Empower e MassLynx 4,0. A HPCL foi realizada a 25°C em uma taxa de fluxo de 20 mL/min usando RP18 Waters x Terra 10 microm (19 x 250 mm) coluna. A fase móvel A foi 0,1% de ácido triflúor-acético em água/acetonitrila (95:5), e a fase móvel B foi acetonitrila, o gradiente foi de 10 a 90% B em 15 minutos, em seguida, retido 90% B por 3 minutos. O volume da injeção foi de 10 microL. O espectrômetro de massa foi operado nos modos de íons positivos e negativos, a voltagem capilar foi ajustada em 2,5 KV; a temperatura da fonte era de 120°C; o cone foi de 10 V; a varredura completa, a massa variando entre 100 a 800 amu foi ajustada.
Exemplo 1 Etil 1-metil-7-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-lH-indazole-3- carboxilato 30 g (0,125 mol) de etil (3-etoxi-2-oxociclohex-3-en- 1-il) (oxo) acetato foram dissolvidos em 150 ml de ácido acético glacial e 6,5 mL de metilhidrazina (0,125 mol) foram adicionados. A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 6 horas. O solvente foi evaporado e, em seguida, o produto bruto foi novamente dissolvido na água, feito básico com 30% de NH4OH e extraído com diclorometano. A camada orgânica foi então seca sobre Na2SO4 e concentrada. O resíduo foi cristalizado a partir do éter dietílico para dar 19,2 g (68% de rendimento), do composto intitulado. TH NMR(400 MHz, DMSO-d5) δ 1,12 ppm (t, J=6,89 Hz, 3 H) 1,51 (t,<7=6,94 Hz, 3H) 2,06 a 2,58 (m, 4 H) 3,57 (m, 1 H) 3,86 (q,7=6,83 Hz, 2 H) 4,38 (q,7=6,94 Hz, 2 H) 6,09 (m, 1 H) .
De acordo com mesmo método, mas empregando o derivado de hidrazina substituído convenientemente, os seguintes compostos foram preparados: etil-1-(2-hidroxietil)-7-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-lH- indazole-3-carboxilato XH NMR(400 MHz, DMSO-dfJ) δ ppm 1,3 (t, 7=7,20 Hz, 3 H) 1,9-2,9 (3m, 6 H) 3,7 (m, 2 H) 4,3(q, 7=7,20 Hz, 2 H) 4,53 (t,7=5,85, 2 H) 4,77 (t, 7=5,73, OH); etil 1-(2-fluoroetil)-7-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-lH- indazole-3-carboxilato; et-i 1 1-ctil T-ojs.o-4,5, b, 7-tetrahidro-lH-indazole-3- carboxilato 1H NMR (400 MHz, DMSO-d5) δ ppm 1,32 (t, 7=7,13 Hz, 3 H) 1,38-1,42 (m, 3 H) 2,73 - 2,79 (m, 2 H) 2,90 - 2,96 (m, 2 H) 4,30 (q, 7=7,07 Hz, 2 H) 4,81 (q, 7=7,19 Hz, 2 H) 6,59 (bs, 2 H) 8,19 (s, 1 H); etil l-isopropil-7-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-lH- indazole-3-carboxilato.
Exemplo 2 Etil 7-oxo-l-tritil-4,5,6,7-tetrahidro-lH-indazole-3- carboxilato Etapa 1. Etil 7-oxo-l-tritil-4,5,6,7-tetrahidro-lH- indazole-3-carboxilato 10,0 g (42 mmol) de etil (3-etoxi-2-oxociclohex-3-en- 1-il) (oxo) acetato foram dissolvidos em 100 mL de etanol, 2,1 mL de hidrato de hidrazina foram adicionados e a solução agitada em refluxo para um dia. O solvente foi então evaporado e o resíduo foi novamente dissolvido com diclorometano. A camada orgânica foi lavada cem água, oeca sobre Na2SO4 e concentrada. O produto bruto foi triturado com éter etílico e filtrado para dar 6,0 g do composto (70% de rendimento). τΗ NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,28 (t,J=7,07 Hz, 3 H) 2,04 (m, 2 H) 2,51 (m, 2 H) 2,87 (t, J= 6,10 Hz, 2 H) 4,27 (q, <J=7,11 Hz, 2 H) 14,39 (s, 1 H).
Etapa 2 . Etil 7-oxo-l-tritil-4,5,6,7-tetrahidro-lH- indazole-3-carboxilato 2,08 g (10,0 mmol) de etil 7-oxo-l-tritil-4,5,6,7- tetrahidro-lH-indazole-3-carboxilato foram dissolvidos em 100 mL de diclorometano e 0,76 mL de trietilamina e 3,07 g (11,0 mmol) de trifenilmetil cloreto foram adicionados. A solução foi agitada à temperatura ambiente por 6 horas. Em seguida, a solução foi diluída ainda com diclorometano e lavada com água. A camada orgânica foi tratada com Na2SO4 anidro e evaporada até secar. O produto final foi obtido pela cristalização de éter dietílico (3,24 g, 72% de rendimento). ΧΗ NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 1,25 ppm (t,J=7,01 Hz, 3 H) 2,16 (m, 2 H) 2,48 (m, 2 H) 2,98 (t, J= 6,10 Hz, 2 H) 4,25 (q,»7=7,01 Hz, 2 H) 6,92-7,33 (2m, 15 H) .
Exemplo 3 Etil 6-[(dimetilamino)metileno]-l-metil-7-οχο- 4,5,6,7-tetrahidro-lH-indazole-3-carboxilato 16 g (72 mmol) de Etil l-metil-7-oxo-4,5,6,7- tetrahidro-lH-indazole-3-carboxilato foram dissolvidos em 100 ml de dimetilformamida e 32 ml de dimetilformamida ditertbutil acetal foram adicionados. A mistura foi agitada por 8 horas a 60°C. 0 solvente foi então evaporado sob vácuo e o produto cristalizado a partir de etanol para render o composto intitulado (17,96 g, 90% de rendimento). 3Η NMR (400 MHz, DMSO-df?) δ 1,31 ppm (t, 7=7,07 Hz, 3 H) 2,83 (m, 2 H) 2,92 (m, 2 H) 3,13 (s, 6 H) 4,14 (s, 3 H) 4,24 (q, J=1,07 Hz, 2 H) 7,49 e 7,52 (2 s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo método, os seguintes compostos foram preparados: etil-6-[(dimetilamino)metileno]-7-oxo-l-tritil- 4.5.6.7- tetrahidro-lH-indazole-3-carboxilato 3Η NMR(400 MHz, DMS0-d6) δ 1,30 ppm (t, 7=7,07 Hz, 3 H) 2,75 (m, 2 H) 2,91 (m, 2 H) 2,94 (s, 6 H) 4,21 (q, 7=7,07 Hz, 2 H) 6,90-7,30 (m, 15 H) 7,47 e 7,54 (2 s, 1 H); etil 6-[(dimetilamino)metileno]-1-(2-hidroxietil)-7- oxo-4,5,6,7-tetrahidro-lH-indazole-3-carboxilato XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,80 ppm (t,7= 6,34 Hz, 2 H) 2,88 (t,7= 6,21, 2 H) 3,70 (m, 2 H) 4,24 (q, 7=7,07 Hz, 3 H) 4,50 (0,7=5,97 hz, 2 H) 4,79 (bs, OH) 7,47 (bs, 1 H) ; etil 6-[(dimetilamino)metileno]-1-(2-fluoroetil)-7- oxo-4,5,6,7-tetrahidro-lH-indazole-3-carboxilato etil 6-[(dimetilamino)metileno]-l-etil-7-oxo-4,5,6,7- tetrahidro-lH-indazole-3-carboxilato etil 6-[(dimetilamino)metileno]-l-isopropil-7-oxo- 4.5.6.7- tetrahidro-lH-indazole-3-carboxilato.
Exemplo 4 Etil acrilato 8-amino-l-metil-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato Para uma solução de 16,62 g (60 mmol) de etil 6- [dimetilamino)metileno]-7-oxo-l-metil-4,5,6,7-tetrahidro- lH-indazole-3-carboxilato em 0,5 L de DMF, 27 g (150 mmol) de carbonato de guanidina foi adicionado. A mistura foi agitada durante a noite a 110°C. Após resfriamento a mistura foi colocada na água (2,5 L) e agitada durante 30 minutos. 0 precipitado foi filtrado, lavado com água e secada para render 26,83 g do composto intitulado (91%). XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 1,32 (t, 7=7,07 Hz, 3 H) 2,76 (m, 2 H) 2,9á (m, 2 H) 4,25 (q, 7=7,07 Hz, 2 H ) 4,30 (s, 3 H) 6,57 (bs, 2 H) 8,19 (m, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo método, os seguintes compostos foram preparados: etil-8-amino-l-tritil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 1,29 (t, 7=7,07 Hz, 3 H) 2,62 (m, 2 H) 2,98 (m, 2 H) 4,26 (q, 7=7,07 Hz, 2 H) 6,45 (bs, 2 H ) 7,06-7,45 (m, 15 H) 7,94 (s, 1 H); etil 8-amino-1-(2-hidroxietil)-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h]quinazolina-3-carboxilato XH NMR(400 MHz, DMSO-de) δ 1,32 ppm (t, 7=7,07 Hz, 3 H) 2,76 (t,7=7,68 Hz, 2 H) 2,94 (t,7=7,50 Hz, 2 H) 3,79 - 3,88 (m, 2 H) 4,30 (q, 7=7,07 Hz, 2 H) 4,80 (t,7=5,79 Hz, 1 H) 4,84 (t,7=5,97 Hz, 2 H) 6,55 (s, 2 H) 8,19 (s, 1 H) ; etil 8-amino-l-(2-fluoroetil)-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h]quinazolina-3-carboxilato etil 8-amino-l-etil-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxilato XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 1,32 ppm (t, 7=7,13 Hz, 3 H) 1,38-1,42 (m, 3 H) 2,73 - 2,79 (m, 2 H) 2,90 - 2,96 (m, 2 H) 4,30 (q,7=7,07 Hz, 2 H) 4,81 (q,7=7,19 Hz, 2 H) 6,59 (bs, 2 H) 8,19 (s, 1H); etil 8-amino-l-isopropil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h] quinazolina-3-arboxilato etil 8- (5-bromo-2-trifluormetoxi-fenilamino)-4,5- dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (A49B8C2Z) XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 1,34 ppm (t, 7=7,13 Hz, 3 H) 2,89 (m, 2 H) 2,99 (m, 2 H) 4,33 (q, 7=7,13 Hz, 2 H) 7,34 (m, 2 H) 8,31 (s, 1 H) 8,43 (m, 1 H) 8,70 (s, 1 H) 9,06 (s, 1 H) 14,28 (br. s., 1 H); etil 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenilamino] -4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxilato (A51B8C2Z) ΧΗ NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,32 ppm (t, J= 1,1 Hz, 3H) 2,25 (s, 3 H) 2,46 (m,4 H) 2,84 (m, 2 H) 2,98 (m, 2 H) 3,15 (m, 4 H) 4,19 (s, 3 H) 4,31 (q, 7=7,1 Hz, 2 H) 6,79 (m, 1 H) 7,20 (m, 1 H) 7,30 (m, 1 H) 8,38 (bs, 1 H) 8,94 (s, 1 H); etil 8-[2-metoxi-5-bromo-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (A118B1C2Z) ΧΗ NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 1,32 ppm (t, 7=7,07 Hz, 3H) 2,88 (d, 7=7,93 Hz, 2 H) 2,96 - 3,03 (m, 2 H) 3,88 (s, 3 H) 4,30 (q, 7=7,15 Hz, 2 H) 4,34 (s, 3 H) 7,03 (d, 7=8,78 Hz, 1 H) 7,19 (dd, 7=8,66, 2,44 Hz, 1 H) 8,26 (s, 1 H) 8,37 (d, 7=2,44 Hz, 1 H) 8,47 (s, 1 H).
Exemplo 5 Etil 8-iodo-l--metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato Em um poço sob agitação, a suspensão etil 8-amino-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (9,0 g, 33 mmol) em dimetoxietano (0,7 L) , sob N2, iodeto de césio (8,6 g, 33 mmol), iodo bisublimado (4,19 g, 16,5 mmol), iodeto de cobre (2,0 g, 10 mmol) e isopentil nitrito (6,62 mL, 49,5 mmol) foram adicionados na seqüência. A mistura de reação foi agitada vigorosamente por 3 horas a um temperatura de 65 a 70°C. Após o resfriamento em um banho de água gelada, o sólido foi filtrado. O filtrado foi diluído em diclorometano (2,0 L), lavado com 30% hidróxido de amônio (150 mL), tiossulfato de sódio (300 mL), em salmoura, secado sobre Na2SO4 anidro e concentrado para dar 5,69 g do composto (46% de rendimento). XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) , δ ppm 1,28 (t, 7=7,07 Hz, 3 H) 2,81-3,07 (2t, 7=8,90 Hz, 4 H) 4,24 (s, 3 H) 4,27 (q,7=7,07 Hz, 2 H) 8,5 (bs, 1 H) .
Ao trabalhar de acordo com este método, os seguintes compostos foram preparados: etil-iodo-8-l-tritil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 1,28 (t,7=7,07 Hz, 3 H) 2,77 (m, 2 H) 3,06 (m, 2 H) 4,28 (q, 7=7,07 Hz, 2 H) 7,06-7,28 (m, 15 H) 8,21 (s, 1 H); etil 8-iodo-l-(2-hidroxietil)-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxilato etil-iodo-8-1-(2-fluoroetil)-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxilato etil 8-iodo-l-etil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato ΧΗ NMR(400 MHz, DMSO-dé?) ppm δ 1,28-1,35 (m, 3 H) 1,42 (t,7=7,19 Hz, 3 H) 2,89 - 2,97 (m, 2 H) 2,99 - 3,05 (m, 2 H) 4,26 - 4,34 (m, 2 H) 4,69 (q,7=7 ,19 Hz, 2 H) 8,48 (s, 1 H) ; etil 8-iodo-l-isopropil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato.
Exemplo 6 Etil l-metil-8-(2-(t-butoxicarbonilaminofenilamino)- 4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-caxboxilato (A12B1C2Z) Acetato de paládio [Pd(OAc)2] (101 mg, 0,45 mmol), (±)-BINAP (280 mg, 0,45 mmol) e 65 mL de dimetilformamida foram colocados em um frasco de fundo redondo lavada com argônio. O frasco foi evacuado e preenchido com argônio. A mistura foi agitada sob argônio por 30 minutos, e adicionado a uma mistura de 2-(t- butoxicarbonilamino) anilina (2,6 g, 12,5 mmol), etil 8-iodo-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato (1,6 g, 4,16 mmol), e carbonato de potássio (5,74 g, 41,6 mmol) em dimetilformamida (50 mL). A mistura resultante foi agitada a 70°C por 6 horas sob argônio. Após o resfriamento à temperatura ambiente, a mistura de reação foi filtrada em um bloco de celite. 0 solvente foi concentrado, o sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: hexano/acetato de etil 60/40) para render 1,18 g (61% de rendimento) do composto. XH NMR(400 MHz, DMSO-dff) δ ppm 1,32 (t, 7=7,1 Hz, 3 H) 1,46 (s, 9 H) 2,84 (m, 4 H) 2,96 (m, 2 H) 4,20 (s, 3 H) 4,30 (q, 7=7,1 Hz, 2 H) 7,12 (m, 2 H) 7,51 (m, 1 H) 7,71 (m, 1 H) 8,38 (s, 1 H) 8,65 (s, 1 H) 8,60 (s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o método acima referido, os seguintes compostos foram preparados: Tabela V
Exemplo 7 Sal hidrocloridrato etil l-metil-8-(2- aminofenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina- 3-carboxilato (A7B1C2Z) 0,85 g (1,83 mmol) de etil l-metil-8-(2-(t-butoxicarbonilaminofenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3- h] quinazolina-3-carboxilato foram dissolvidos em 50 mL de diclorometano para a qual 30 mL de HCl 4N em dioxano foram adicionados. A solução foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas e o solvente removido sob vácuo. O resíduo foi cristalizado a partir de éter dietílico para dar 0,70 g do composto (96% de rendimento). XH NMR (4 00 MHz, DMSO-d(j) δ ppm (como base livre) 1,32 (t,7=7,1 Hz, 3 H) 2,82 (m, 4 H) 2,96 (m, 2 H) 4,19 (s, 3 H) 4,28 (q, 7=7,1 Hz, 2 H) 4,85 (bs, 2 H) 6,58 (m, 1 H) 6,76 (m, 1 H) 6,90 (m, 1 H) 7,32 (m, 1 H) 8,32 (s, 1 H) 8,52 (s, 1 H) .
Exemplo 8 Etil l-metil-8-[2-(3-metil-butrilamino)-fenilamino]- 4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (A35B1C2Z) Para uma solução de sal hidrocloridrato de etil 1- metil-8-(2-aminofenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato (0,25 g, 0,62 mmol) e DIPEA (0,44 mL, 2,56 mmol) em cloreto de metileno (25 mL), sob cloreto isovaleril nitrogênio (0,076 mL, 0,62 mmol) dissolvido em cloreto de metileno (1 mL) foi adicionado. Após 1 h de reação a mistura foi concentrada. A cromatografia flash em sílica gel (eluente: diclorometano/metanol 98:2) rendeu 140 mg do composto (44% de rendimento). XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 0,93 ppm (d, J= 6,6 Hz, 6 H) 1,32 (t,7=7,07 Hz, 3 H) 2,06 (m, 1 H) 2,24 (d, 7=7,2 Hz, 2 H) 2,84 (m, 2 H) 2,97 (m, 2 H) 4,18 (s, 3 H) 4,30 (g,7=7,12 Hz, 1 H) 7,21 (m, 1 H) 7,23 (m, 1 H) 7,43 (d, J 7,7 Hz, 1 H) 7,80 (d, 7=7,7 Hz, 1 H) 8,37 (s, 1 H) 8,47 (bs, 1 H) 9,68 (bs, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o método acima referido, após a preparação do cloreto de acilo do ácido carboxílico correspondente, os seguintes compostos foram preparados: Tabela VI
Exemplo 9 Etil 8-(2-(trifluormetoxifenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (A45B8C2Z) Etil-l-tritil-8-(2-(trifluormetoxifenilamino)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato de (140 mg, 0,21 mmol) em DCM (10 ml) foi tratado com ácido trifluoracético (1 mL). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora e do solvente removido sob vácuo. O resíduo foi novamente dissolvido em diclorometano e lavado com uma solução saturada de NaHCO3. A camada orgânica foi então seca sobre Na2SO4 e os solventes evaporados até secar. 0 sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: hexano/acetato de etila 60/40) para dar em rendimento quantitativo 88 mg do composto intitulado. 1H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,33 (t, 7=1 λ Hz, 3 H) 2,87 (m, 2 H) 2,99 (m,2 H) 4,32 (q, 7=7,1 Hz, 2 H) 7,17 (m, 1 H) 7,40 (m, 2 H) 8,20 (m, 1 H) 8,37 (s, 1 H) 8,70 (s, 1 H) .
Exemplo 10 8-{2-[((S)-pirrolidina-2-carbonil)-amino]-fenilamino}-1-metil-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A25B1C1Z) Etil 8-{2-[((S)-N-FMOC-pirrolidina-2-carbonil)- amino]- fenilamino}-1-metil-lH-pirazol[ 4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (200 mg, 0,29 mmol) foi suspenso em 20 mL de etanol e 20 mL de NH4OH 30% mistura. A mistura foi mantida a sob agitação por 12 h a 65°C em um frasco fechado. O solvente foi então evaporado até secar, o resíduo foi novamente dissolvido com diclorometano e lavado com água. A camada orgânica foi seca sobre Na2SO4 e evaporada. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: diclorometano/metanol 94/6) para render 60 mg (47% de rendimento) do composto. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,25 ppm (m, 1 H) 1,45 (m, 1 H) 1,61 (m, 1 H) 1,92 (m, 1 H) 2,21 (m, 1 H) 2,69 (m, 1 H) 2,80 (m, 2 H) 2,95 (m, 2 H) 3,64 (m, 1 H) 3,98 (s, 3 H) 7,12 (m, 1 H) 7,23 (m, 2 H) 7,33 (m, 1 H) 7,45 (m, 1 H) 8,02 (m, 1 H) 8,36 (s, 1H).
Ao trabalhar de acordo com este método, os seguintes compostos foram preparados: Tabela VII
Exemplo 11 l-metil-8-(2-trifluormetoxi-4-bromofenilamino]-4,5- dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A43B1C1Z) Etil l-metil-8-(2-trifluormetoxi-4-bromofenilamino]- 4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (330 mg, 0,64 mmol) foi suspenso em 10 mL de tetrahidrofurano. Cloreto de amônia (106 mg de 2,0 mmol) e LiN (TMS)2 1 N em THF (4,0 mL, 4,0 mmol) foram adicionados. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 0,5 h. O solvente foi então evaporado até secar, o resíduo suspenso em água filtrada para render 288 mg (93% de rendimento) do composto intitulado. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,81 (m, 2 H) 2,98 (m, 2 H) 4,19 (s, 3 H) 7,24 (bs, 1 H) 7,42 (bs, 1 H) 7,60 (m, 1 H) 7,62 (m, 1 H) 7,92 (m, 1 H) 8,39 (s, 1 H) 9,19 (s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com este método, os seguintes compostos foram preparados: Tabela VIII
Exemplo 12 Potássio 8-iodo-l-mefcil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato Etil 8-iodo-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxiiato (384 mg, 1 mmol) foi suspenso em etanol anidro (10 mL) e tratados com um 1,5 M da solução de hidróxido de potássio no etanol (6,6 mL, 10 mmol) à temperatura ambiente, durante a noite. O precipitado resultante foi coletado por filtração para dar o composto intitulado (323 mg, 82% de rendimento) como um sólido branco. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,79 (m, 2 H) 2,96 (m, 2 H) 4,10 (s, 3 H) 8,34 (s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o método acima referido os seguintes compostos foram preparados: Potássio 8-iodo-l-tritil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h] quinazolina-3-carboxilato XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,66 (m, 2 H) 3,04 (m, 2 H) 7,15-7,25 (m, 15 H) 8,10 (s, 1 H);
Potássio 8-amino-l-tritil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h] quinazolina-3-carboxilato XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,54 ppm (m, 2 H) 2,94 (m, 2 H) 4,99 (bs 2 H) 7,12-7,18 (m, 15 H) 8,57 (s, 1 H) Potássio 8-amino-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h] quinazolina-3-carboxilato XH NMR (400 MHz, DMSO-de) δ ppm 2,70 (m, 2 H) 2,94 (m, 2 H) 4,10 (s, 3 H) 4,98 (bs 2 H) 8,55 (s, 1 H).
Tabela IX
Exemplo 13 8-xodo-l-mefcxl-4,5-dxhxdro-lH-pxrazol[4,3-h] quxnazolxna-3-carboxamxda A suspensão de potássio 8-iodo-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (394 mg, 1,0 mmol) em dimetilformamida anidra (10 mL) foi tratada com cloridrato de N-etil-N',N'-iisopropilcarbodiimida (EDCI) (287 mg, 1,5 mmol) e com amônia com 1H-1,2,3-benzotriazol-1-ate (304 mg, 2 mmol) . A reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A reação foi diluida com água e o precipitado resultante foi coletado por filtração para render o composto intitulado (320 mg, 90% de rendimento). XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,99 (m, 4 H) 4,25 (s, 3 H) 7,31 (s, 1 H) 7,51 (s, 1 H) 8,47 (s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o método acima e usando amina adequada os seguintes compostos foram preparados: 8-amino-l-metil-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida 3H NMR(400 MHz, DMS0-d6) δ 2,68 e 2,90 ppm (2 m, 4 H) 4,28 (s, 3 H) 6,50 (bs, 2 H) 7,32 (bs, 2 H) 8,15 (s, 1 H) . 8-iodo-l-tritil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida 3H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 2,76 (m, 2 H) 3,08 (m, 2 H) 6,63 (s, 1 H) 7,08-7,30 (m, 15 H) 7,43 (s, 1 H) 8,21 (s, 1 H) . ácido carboxílico 8-iodo-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-xnetilaxnida XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,75 ppm (d, J= 4,63 Hz, 3 H) 2,90 (m, 2H) 3,03 (m, 2 H) 4,24 (s, 3 H) 6,14 (q, J= 4,63 Hz, 1 H) ) 8,47 (s, 1 H) .
Exemplo 14 8-iodo-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida 8-iodo-l-tritil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (291 mg, 0,5 mmol) em DCM (10 nulos) foi tratado com o ácido trifluoracético (0,5 mL). A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. DCM (40 mL) foi adicionado e a fase orgânica foi lavada com solução saturada de hidrogenocarbonato de sódio e, em seguida, com salmoura, seco sobre sulfato de sódio e concentrado. O sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM/EtOH 90/10) para render 143 mg do composto intitulado(84% de rendimento). XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,93 (m, 2 H) 3,04 (m, 2 H) 7,27 (s, 1 H) 7,58 (s, 1 H) 8,44 (s, 1 H) 14,25 (s, 1 H) .
Ao trabalhar de acordo com este método, os seguintes compostos foram preparados: Tabela XI
Exemplo 15 8-iodo-l-(2-fluoroetil)-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida Uma mistura de 8-iodo-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (104 mg, 0,3 mmol) em THF (3 mL) foi tratada com trifenilfosfina suportado em resina (0,4 g, 3 mmol/g, 1,2 mmol), di-t-butilazadicarboxilato (276 mg, 1,2 mmol), 2-fluoroetanol (70 microL, 1,2 mmol) por 1 h em temperatura ambiente. A resina foi filtrada e a solução foi concentrada. A cristalização de éter dietílico deu 74 mg do composto intitulado (62% de rendimento). XH NMR(400 MHz, DMSO-dS) δ 2,92 ppm (m, 2 H) 3,05 (m, 2 H) 4,86 (m, 1 H) 4,96 (m, 2 H) 5,05 (m, 1 H) 7,36 (s, 1 H) 7,55 (s, 1 H) 8,49 (s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o método acima e usando o álcool adequado, os seguintes compostos foram preparados: Tabela XII
Exemplo 16 8-[(2-acetilfenil)amino]-1-metil-4,5-dihidro-lH- pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A2B1C1Z) Acetato de paládio Pd(0Ac)2 (20 mg, 0,09 mmol), (+)-BINAP (55 mg, 0,09 mmol) e dimetilformamida (5 mL) foram colocados em um frasco de fundo redondo lavada com argônio. 0 frasco foi evacuado e preenchido com argônio. A mistura foi agitada sob argônio por 30 minutos, e adicionada a uma mistura de 2-acetilanilina (0,162 ml, 1,35 mmol), 8-iodo-l- metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (319 mg, 0,9 mmol), carbonato de potássio (1,24 g, 9 mmol) em dimetilformamida (10 mL) . A mistura resultante foi agitada a 80°C por 4 horas sob argônio. Após o resfriamento à temperatura ambiente, a mistura de reação foi filtrada em um bloco de celite. O solvente foi concentrado, o sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM/EtOH 90/10) para render 153 mg (47% de rendimento) do composto. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,69 ppm (s, 3 H) 2,87 (t,7=7,68 Hz, 2 H) 3,02 (t,7=7,68 Hz, 2 H) 4,36 (s, 3 H) 7,10 (ddd, 7=8,08, 7,10, 1,16 Hz, 1 H) 7,28 (s, 1 H) 7,51 (s, 1 H) 7,65 (ddd, 7=8,54, 7,19, 1,46 Hz, 1 H) 8,08 (dd, 7=7,99, 1,52 Hz, 1 H) 8,52 (s, 1 H) 8,75 (dd, 7=8,54, 0,98 Hz, 1 H) 11,61 (s, 1 H) Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento os seguintes compostos foram preparados: Tabela XIII
Três tabelas abaixo mostram os dados HPLC/Massa analíticos para alguns compostos representantes da invenção.
Tabela XIV
Exemplo 17 8-(2-trifluorometoxi-fenilamino)-1-(2-hidroxietil)- 4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A45B5C1Z) 0,085 g (0,15 mmol) de 8-(2-trifluormetoxi- fenilamino)-1-[2-(tetrahidro-pirano-2-iloxi)-etil]-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida foram dissolvidas em 10 mL de etanol e 28 mg de ácido p- toluenossulfônico (0,15 mmol) foram adicionados. A solução foi agitada à temperatura ambiente durante a noite e o solvente removido sob vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: acetato de etila/hexano 80/20) para render 59 mg (90% de rendimento) do composto intitulado. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,80 ppm (m, 2 H) 2,98 (m, 2 H) 3,67 (m, 2 H) 4,66 (m, 2 H) 7,22 (m, 1 H) 7,24 (bs, 1 H) 7,39 (m, 2 H) 7,43 (bs, 1 H) 7,87 (m, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 9,0 (s, 1 H) .
Ao trabalhar de acordo com o método acima referido os seguintes compostos foram preparados: 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B5C1Z) XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,24 ppm (s, 3 H) 2,46 (br. s., 4 H) 2,80 (t,7=7,62 Hz, 2 H) 2,98 (t,7=7,62 Hz, 2 H) 3,15 (br. s., 4 H) 3,64 (q, 7= 5,49 Hz, 2 H) 4,59 (t,7=5,79 Hz, 1 H ) 4,63 (t,7=5,37 Hz, 2 H) 6,79 (dd, 7=8,96, 2,99 Hz, 1 H) 7,19 - 7,24 (m, 1 H) 7,24 (br. s., 1 H) 7,25 (d, 7=2,93 Hz, 1 H) 7,43 (s, 1 H) 8,34 (s, 1 H) 8,85 (s, H).
Exemplo 18 8-[5-(4-etil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi- fenilamino]-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h]quinazolina-3-carboxamida (A94B1C1Z).
Tris (dibenzilideneacetona) dipaladio, Pd3(dba)3, (9,1 mg, 0,01 mmol), 2-diciclohexilfosfino-2'-(N,N-dimetilamino)-bifenil (7,8 mg, 0,02 mmol), 8—[2— trifluormetoxi-5-bromo-fenilamino]-l-metil-4,5-diidro-lH- pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (200 mg, 0,41 mmol) em THF (4,5 mL) foram colocados em um frasco de fundo redondo lavado com argônio. 0 frasco foi evacuado e preenchido com argônio. LiN (TMS)2 solução (1M em THF, 2,7 mL) e N-etilpiperazina (0,125 mL, 0,98 mmol) foram adicionados e a mistura de reação refluída durante 3 h. A mistura de reação foi então resfriada à temperatura ambiente e concentrada. 0 sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM/EtOH 90/10) para render 46 mg (52% de rendimento) do composto. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,02-1, 07 (m, 3 H) 2,32-2,64 (m, 6 H) 2,77 - 2,83 (m, 2 H) 2,97 (t,7=7,80 Hz, 2 H) 3,14 (bs, 4 H) 4,16 (s, 3 H) 6,76 (dd, 7=9,08, 2,99 Hz, 1 H) 7,17 - 7,22 (m, 1 H) 7,24 (bs, 1 H) 7,31 (d, 7=2,93 Hz, 1 H) 7,43 (br.s, 1 H) 8,35 (s, 1 H) 8,88 (s, 1 H) .
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento os seguintes compostos foram preparados: Tabela XV
Exemplo 19 8-(5-piperazina-l-il-2-trifluormetoxi-fenilamino)-1- metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A97B1C1Z) Para uma solução de 8-[ 5-( 4-t-butoxicarbonil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenilamino]-l-metil-4,5- dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (94 mg, 0,16 mmol) em dioxano (3 ml), 4M HCl em dioxano (0,89 ml, 3,42 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 3 h. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi diluído com Et2O e decantado, para render o composto final de sal cloridrato em rendimento quantitativo. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,80 ppm (t, 7=7,68 Hz, 2 H) 2,97 (t,7=7,44 Hz, 2 H) 3,19 - 3,43 (m, 8 H) 4,17 (s, 3 H) 6,83 (dd, 7=9, 02, 3,05 Hz, 1 H) 7,25 - 7,29 (m, 2 H) 7,38 (d, 7= 3,05 Hz, 1 H) 7,39 (bs, 1 H) 8,35 (s, 1 H ) 8,97 (bs, 2 H) 9, 02 (s, 1 H) .
Exemplo 2 0 8-(2-Trifluorometoxi-5-(4-metil-4-oxi-piperazina-l- il)-fenilamino)-l-metil-4,5-dihidro-lH-pixazol[4,3- h]quinazolina- 3-carboxamida (A102B1C1Z) Para uma solução de 8-(2-trifluormetoxi-5-(4-metil-piperazina-l-il ) -fenilamino)-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h]quinazolina- 3-carboxamida (50 mg, 0,1 mmol), em uma mistura (1:1) DCM/acetona (10 ml), 0,1 M 3,3-dimetil- dioxirana (2 ml, 0,2 mmol) foi adicionada. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia flash (DCM/MeOH/7N NH3 em metanol 9:1: 0,2), para render o composto final (16 mg, 30%) como um sólido branco. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,81 ppm (t, 7=7,68 Hz, 2 H) 2.98 (t,7=7,68 Hz, 2 H) 3,03 (d, 7=7,68 Hz, 2 H) 3,14 (s, 3 H) 3,44 - 3,53 (m, 6 H) 4,18 (s, 3 H) 6,83 (dd, 7=9,08, 2.99 Hz, 1 H) 7,23 (d, 7= 1,34 Hz, 1 H) 7,25 (bs, 1 H) 7,39 (d, 7= 3,05 Hz, 1 H) 7,43 (s, 1 H) 8,37 (s, 1 H) 8,94 (s, 1 H) .
Exemplo 21 8-(2-Trifluorometoxi-5-(4-metil-l,4-dioxibenzeno- piperazina-l-il)-fenilamino)-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A103B1C1Z) Para uma solução de 8-(2-trifluormetoxi-5-(4-metil-piperazina-l-il )-fenilamino)-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (50 mg, 0,1 mmol), em uma mistura (1:1) DCM/acetona (10 ml), 0,1 M 3,3-dimetil-dioxirana (5 ml, 0,5 mmol) foi adicionada. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 h. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi purificado por cromatografia flash (DCM/MeOH/7N NH3 em metanol 9:1: 0,2), para render o composto final (21 mg, 40%) como um sólido branco. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 4,24 ppm (s, 3 H) 7,54 (dd, 7=2,07, 1,46 Hz, 1 H) 7,84 (dd, 7= 3,78, 3,41 Hz, 1 H) 8,44 (s, 1 H) 8,94 (d, 7=2,56 Hz, 1 H) 9,29 (s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento foi elaborado o seguinte composto: 1-(2-hidroxi-etil)-8-(2-trifluormetoxi-5-(4-metil- 1,4-dioxibenzeno-piperazina-l-il)-fenilamino)-4,5-dihidro- lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A103B5C1Z). XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,82 (t, 7=7,62 Hz, 2 H) 2,97 (t,7=7,56 Hz, 2 H) 3,08 (t, 7=9,57 Hz, 4 H) 3,23 (s, 3 H) 3,68 (q, 7=6,38 Hz, 2 H) 4,25 (td, 7=11,67, 2,01 Hz, 2 H) 4,52-4,76 (m, 4 H) 6,53 (t, 7=5,30 Hz, 1 H) 7,25 (br. s., 1 H) 7,42 (br. s., 1 H) 7,56 (dq, 7=9,08, 1,40 Hz, 1 H) 7,78 (dd, 7=9,14, 2,80 Hz, 1 H) 8,44 (s, 1 H) 8,77 (d, 7=2,80 Hz, 1 H) 9,26 (s, 1 H).
Exemplo 22 8-(5-amino-2-trifluormetoxi-fenilamino)-l-metil-4,5- dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A46B1C1Z) Para uma suspensão de 8-(5-nitro-2-trifluormetoxi- fenilamino)-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4, 3-h] quinazolina-3-carboxamida (630 mg, 1,4 mmol) em metanol (6 mL) cloreto de amônio (240 mg, 4,3 mmol) em água (25 mL) e ferro (397 mg, 7,4 mmol) foram adicionados. A mistura foi aquecida sob refluxo durante 3 horas até a HPLC revelada desaparecer do material de partida. O solvente foi removido e o material bruto foi diluído com trifluroetanol. O ferro foi removido e o filtrado foi concentrado para render o composto final como uma luz marrom sólido em termos de rendimento quantitativo. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,80 ppm (t, 7=7,74 Hz, 2 H) 2,97 (t,7=7,56 Hz, 2 H) 4,20 (s, 3H) 5,31 (bs, 2 H) 6,34 (dd, 7=8,78 e 2,68 Hz, 1 H) 7,00 (dq, 7=8,79, 1,37 e 1,33 Hz, 1 H) 7,07 (d, 7=2,70 Hz, 1 H) 7,23 (bs, 1H) 7,44 (bs, 1H) 8,35 (s, 1H) 8,65 (s, 1 H).
Exemplo 23 8—{5—[(pirrolidina-2-carbonil)-amino]-2- trifluormetoxi-fenilamino}-l-metil-4,5-dihidro-lH- pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A50B1C1Z) Para uma suspensão de 8-(5-amino-2-trifluormetoxi-fenilamino)-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina- 3-carboxamida (146 mg, 0,4 mmol) em dimetilformamida anidra (5 mL) TBTU (190 g, 0,6 mmol) HOBT (81 mg, 0,6 mmol), e DIPEA (0,104 ml, 0,6 mmol) foram adicionados. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Então BOC-L-prolina (129 mg, 0,6 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada por mais 3 h. A mistura de reação foi diluida com água e o precipitado foi coletado, diluido com DCM (10 mL) e tratado com TFA (1 mL). A evaporação do solvente rendeu o composto intitulado como sal trifluoracetato (113 mg, 44% de rendimento).
Exemplo 24 Etapa 1. Acilação do sólido amina suportada com 8-iodo-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carbonil flúor.
Neste caso, a "resina" é amida Rink, 4—(2’,4'— dimetoxifenil-fmoc-aminometil) fenoxi (DVB 1% copoliestireno): 8,8 g (4,8 mmol) da referida resina foi vertida em 100 mL. Tubo de reação Argonaut Quest 205. A remoção do grupo de proteção Fmoc foi realizada pelo tratamento de resina com 60 mL de 20% em DMF piperidina por 5 minutos e seguido por um segundo tratamento durante 30 minutos em temperatura ambiente. A resina foi lavada com DMF (3 x 50 mL, 5 min.), metanol (3 x 50 mL, 5 min.) e finalmente com diclorometano (3 x 50 mL, 5 min).
Para 8,8 g (4,8 mmol) de resina desprotegida anteriormente, os seguintes pré-ativado ácido carboxílico flúor reagente foi adicionado. Em 50 mL de 1,4-dioxano, 2,78g (7,81 mmol, 1,6 equivalentes) de iodo-8-l-metil-4,5- dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato, 2,41 g (9,12 mmol, 1,9 equivalentes) de tetrametilfluoroformamidinium hexafluorofosfato e 1,59 mL (9,12 mmol, 1,9 equivalentes) de N,N-diisopropiletilamina foram dissolvidas. N,N-dimetilacetamida foi gotas para a solução até que todos os reagentes estavam em solução com sonicação. 0 sistema de reação foi agitado à temperatura ambiente por 30 minutos. Mais 1,59 mL (9,12 mmol, 1,9 equivalentes) de N,N-diisopropiletilamina foram adicionados à solução e todo o conteúdo foi colocado para a resina no sintetizador Quest 210. A resina foi mixada por 6 horas a 60 °C seguido por mais 12 horas em temperatura ambiente. A resina foi drenada do coquetel da acilação e lavada com 1,4-dioxano (3 x 50 mL, 5 min.) assim o procedimento de acilação foi repetido uma segunda vez usando o protocolo descrito anteriormente. Após a conclusão do segundo ciclo de acilação, a resina foi drenada novamente do coquetel de acilação e lavada com 1,4-dioxano (3 x 50 mL, 5 min.), DMF (3 x 50 mL, 5 min.) e, finalmente com DCM (3 x 50 mL, 5 min.) . A resina foi seca de DCM sob vácuo. A resina foi testada qualitativamente para a conclusão da reação de acilação utilizando o método de ensaio ninhidrina. 4-(2',4'-dimetoxifenil-fmoc-aminometil)fenoxi(copolositreno-1% DVB) Etapa 2. Aminação catalistica do sólido suportado 8-iodo-8-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida Usando um cassete sintetizador Trident Argounaut, 200 mg (0,11 mmol) da resina da etapa 1 acima, foram colocados em frascos separados. Para cada um dos frascos reatores lavados com argônio, finamente divididos em carbonato de potássio (0,15 g, 1,1 mmol), acetato de paládio [Pd(OAc)2] (2,5 mg, 0,011 mmol, 10%), (±)-BINAP (6,8 mg , 0,011 mmol, 10%) e a amina correspondente (0,22 mmol, 2 equivalentes) em (argon) dimetiacetamida desgaseifiçada (2 mL) foram adicionadas. A mistura resultante foi agitada a 60°C por 10 horas na estação sintetizadora de bibilioteca automatizada (ALS) Trident Argounaut. A estação ALS Trident Argounaut foi programada para agitar mecânica e continuamente a resina em 60°C enquanto um gás nitrogênio "aspersão" foi incorporado para resuspender rapidamente o carbonato de potássio solúvel. O gás de nitrogênio de aspersão foi incorporado por hora, por um periodo de 30, durante todo o ciclo de aquecimento por 16 horas. A resina foi drenada do coquetel sintetizado e lavada utilizando a estação de sintetização unidade térmica de agitação externa Trident Argounaut (EATU) com DMA (3 x 2 mL, 5 min.) . O ciclo de aminação catalítico acima foi repetido uma segunda vez usando o procedimento descrito anteriormente.
Após a conclusão do segundo ciclo de aminação, a resina foi drenada do coquetel sintetizado e lavada utilizando a estação de sintetização unidade térmica de agitação externa Trident Argounaut (EATU) com DMF (1x2 mL, 5 min.), com água (1x2 mL, 5 min.), com DMF/água (1:1) (3 x 2 mL, 5 min.), com DMF (3 x 2 mL, 5 min.), com metanol (3x2 mL, 5 min.) e com DCM (3x2 mL, 5 min.).
Etapa 3. Cliavagem do diferenoialmente substituído 8-amino-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida do sólido suporte Para cada frasco reator Trident Argonaut, 2 mL do coquetel de divagem da resina a seguir foram adicionados: diclorometano (100 mL), ácido trifluoracético (98 mL) e água (2 mL) . A resina, suspensa no coquetel de divagem, foi agitada por 2 horas à temperatura ambiente sobre a estação de sintetização unidade térmica de agitação externa Trident Argounaut (EATU). A solução contendo os produtos brutos foi recolhida em frascos separados. A resina foi tratada para um segundo ciclo do coquetel de divagem citado e três resinas adicionais lavadas com diclorometano (2 ml cada) também foram recolhidas pelos mesmos frascos correspondentes.
Ao trabalhar analogamente, os seguintes compostos foram preparados: Tabela XVI
Etapa 1. Acilação direta do sólido suportado metil ésteres metilicos 4-[(3-carbamoil-l-metil-4,5-dihidro-lH- pirazol[4,3-h]quinazolina-8-il) amino]-3-metilbenzoato Um protocolo de modificação da Weinreb amide acylation chemistry (Tetrahedron Lett. 1977, 48, 4171) foi aplicado na geração de carboxamidas desejadas diretamente dos compostos metil éster presos a um suporte sólido. Para um frasco reator de microondas Biotage/ Personal Chemestry, Smith Creator 0,5-2 mL foi colocado 200 mg (1,1 mmol) de resina seca preparada na etapa 2 (aminação catalítica) acima. 0 frasco foi purgado com gás argônio e reservado.
Para um gás argônio purgado, em um frasco contendo 2 mL de DCM seco foi colocado 0,045 g (0,44 mmol, 4 equivalentes) da amina apropriada seguido por 225 microL de uma solução de trimetilaluminio (2M em tolueno). O frasco foi agitado em um misturador vortex por 30 segundos e mantido em temperatura ambiente por 15 minutos, depois isto o conteúdo foi colocado no frasco do reator de microondas contendo a resina seca. O frasco foi colocado no sistema de microondas Smith Creator que estava programado para irradiar durante 10 minutos a 110°C com refrigeração simultânea. Após o término do ciclo de aquecimento e arrefecimento, a reação foi evaporada com metano/água (1:1) e lavada com DMF (3x2 mL, 5 min.), Com metanol (3x2 mL, 5 min.) e com DCM (3 x 2 mL, 5 min.).
Etapa 2. Clivagem dos compostos diferencialmente substituídos 8-[(5-carbamoil-2-metilfenil)amino]-1-metil- 4,5-dihidro-lff-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida do suporte sólido.
Para cada um dos frascos reatores de 2 mL do coquetel de divagem da resina foram adicionados: diclorometano (100 mL) , de ácido trif luoracético (98 mL) e água (2 mL) . A resina suspensa no coquetel de divagem foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente. A solução contendo o produto bruto foi recolhida em frascos separados. A resina foi tratada para um segundo ciclo do coquetel de divagem citado e três resinas adicionais lavadas com diclorometano (2 mL cada) também foram recolhidas os mesmos frascos correspondentes.
Tabela XVII
Etapa 1. Acilação direta do sólido suportado metil ésteres metilicos de 4-[(3-carbamoil-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-8-il) amino]-3- metilbenzoate Para cassete sintetizador Trident Argounaut de 4 mL, foram colocados 200 mg (0,11 mmol) da resina seca preparada na etapa 2 (aminação catalítica) acima. Os frascos foram purgado com gás argônio e 1 mL de THF seco foi adicionado a resina pré-inchada. Para a resina suspensa foram colocados 1,1 mL (1,1 mmol, 10 equivalente) de lítio bis (trimetilsilil) amida (1,0 M em THF), seguido por 0,058 g de cloreto de amônio (1,1 mol, 10 equivalente) . O cassete foi agitado durante 60 minutos em temperatura ambiente e depois o conteúdo do cassete foi drenado e lavado com DMF (3x2 mL, 5 min.), com metanol (3x2 mL, 5 min.) e com DCM (3x2 mL, 5 min.).
Etapa 2. Clivagem dos compostos diferenoialmente substituídos 8-[(5-carbamoil-2-metilfenil)amino]-1-metil- 4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida do suporte sólido.
Para cada um dos frascos reatores de 2 mL do coquetel de divagem da resina foram adicionados: diclorometano (100 mL) , de ácido trif luoracético (98 mL) e água (2 mL) . A resina suspensa no coquetel de divagem foi agitada por 2 horas em temperatura ambiente na estação de sintetização EATU Trident Argounaut. A solução contendo o produto bruto foi recolhida em frascos separados. A resina foi tratada para um segundo ciclo coquetel de divagem citado e três resinas adicionais lavadas com diclorometano (2 mL cada) também foram recolhidas os mesmos frascos correspondentes.
Tabela XVIII
Etapa 1. Mesilação dos sólidos suportados 8-{[5- (hidroximetil)-2-metilfenil] amino}-l-metil-4,5-dihidro-lff- pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxamida No caso de um grupo hidroximetil era para ser convertido para um grupo aminometil contendo uma variedade de substituintes, o cassete sintetizador Trident Argounaut de 4 mL, contendo 200 mg (0,11 mmol) da resina da etapa 2 (aminação catalítica) acima, foi utilizada. Para cada um dos frascos reatores foi adicionado cloreto metanosulfonil (0,085 mL, 1,1 mmol, 10 equivalente) e trietilamina (0,11 mL, 1,1 mmol, 10 equivalente) em diclorometano (2 mL) . A mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente por 2 horas na estação sintetizadora de bibilioteca automatizada (ALS) Trident Argounaut. Após o término do ciclo de reação, a resina foi drenada do coquetel sintetizado e lavada utilizando a estação de sintetização unidade térmica de agitação externa Trident Argounaut (EATU) DMF (3x2 mL, 5 min.), com metanol (3x2 mL, 5 min.), com DCM (3x2 mL, 5 min.) e com THF (3x2 mL, 5 min.).
Etapa 2. Deslocamento nucleofílico de sólidos mesilatos suportados de 8-{[5-(hidroximetil)-2- metilfenil] amino}-l-metil-4,5-dihidro-lff-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida Para compostos mesilatos preparados acima na etapa 1, foi acrescentado para amina apropriada (0,11 mL, 1,1 mmol, 10 equivalente) em 2 mL de THF. A mistura resultante foi agitada a 60°C por 5 horas na estação sintetizadora de bibilioteca automatizada (ALS) Trident Argounaut. Após o término do ciclo de reação, a resina foi drenada do coquetel sintetizado e lavada utilizando a estação de sintetização unidade térmica de agitação externa Trident Argounaut (EATU) DMF (3x2 mL, 5 min.), com metanol (3x2 mL, 5 min.), e com DCM (3x2 mL, 5 min.) Etapa 3. Clivagem dos compostos diferencialmente substituído 8-{[5-(aminometil)-2-metilfenil]amino}-1-metil- 4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida do suporte sólido Para cada frasco reator Trident Argonaut, 2 mL da resina após coquetel de clivagem foram adicionados: diclorometano (100 mL) , de ácido trifluoracético (98 mL) e água (2 mL). A resina suspensa no coquetel de divagem foi agitada por 2 horas à temperatura ambiente estação de sintetização unidade térmica de agitação externa Trident Argounaut (EATU). A solução contendo os produtos brutos foi recolhida em frascos separados. A resina foi tratada para um segundo ciclo do coquetel de divagem citado e três resinas adicionais lavadas com diclorometano (2 ml cada) também foram recolhidas pelos mesmos frascos correspondentes. A seguir são definidos os parâmetros analíticos HPLC/Massa para alguns compostos representativos: Tabela XIX
Exemplo 28 4-Amino-N-(l-metil-piperidina-4-il)-3-trifluormetoxi- benzamida Para uma suspensão de 4-amino-3-(trifluormetoxi) benzóico (900 mg, 4 mmol) em diclorometano (60 ml) TBTU (1,9 g, 6 mmol) e DIPEA (1,04 ml, 6 mmol) foram adicionados. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 30 minutos. Então l-metilpiperidin-4-amina (513 mg, 4,5 mmol) foi adicionada e a reação foi agitada por mais 3 h. A solução foi lavado com água e a fase orgânica foi seca sobre anidro Na2SO4. O bruto foi purificado por cromatografia flash (DCM/MeOH/NH3aq, 9:1:0,5), para render o composto intitulado (900 mg, 71%), como sólido alaranj ado. XH NMR (400 MHz, DMSO-dÉ?) δ 1,55 ppm (dq, 7= 3,90, 3,54 Hz, 2 H) 1,73 (d, 7= 14,51 Hz, 2 H) 1,92-2,03 (m, 2 H) 2,19 (bs, 3 H) 2,79 (d, 7= 10,73 Hz, 2 H) 3,69 (m, 1H) 5,89 (bs, 1 H) 6,78 (d, 7=8,54 Hz, 1 H) 7,61 (dd, 7= 1,95 Hz, 1 H) 7,64 (m, 1 H) 7,93 (d, 7=7,56 Hz, 1 H) .
Exemplo 2 9 Sal hidrocloreto 5-(4-Metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamina Etapa 1. N-(5-bromo-2-trifluormetoxi-fenil)-acetamida Para uma solução de 5-bromo-2-trifluormetoxi- fenilamina (5,12 g, 20 mmol) em EtOH (50 mL) foi adicionado a 0°C foi adicionada uma solução de ácido acético (4,7 mL, 50 mmol) em EtOH (10 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. 0 solvente foi evaporado a seco e o sólido foi triturado com éter dietil e filtrado para render 5,64 g (95% de rendimento) de N-(5- bromo-2-trifluormetoxi-fenil)-acetamida. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm: 2,11 (s, 3 H) 7,39 (m, 2 H) 8,21 (s, 1 H) 9,87 (s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento os seguintes compostos foram preparados: N-(4-Bromo-2-trifluormetoxi-fenil)-acetamida XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,09 ppm (s, 3 H) 7,57 (dd, 7=8,8 e 2,2 Hz, 1 H) 7,63 (m, 1 H) 7,90 (d, 7=8,8 Hz, 1 H) 9,80 (s, 1 H) N-(4-Bromo-2-metoxi-fenil)-acetamida XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,07 ppm (s, 3 H) 3,84 (s, 3 H) 7,07 (dd, 7=8,5e 2,2 Hz, 1 H) 7,20 (d, 7=2,2 Hz, 1 H) 7,89 (d, 7=8,5Hz, 1 H) 9,17 (s, 1 H) N-(2-acetil-4-bromo-fenil)-acetamida XH NMR (4 00 MHz, DMSO-de) δ 2,10 ppm (s, 3 H) 2,60 (s, 3 H) 7,75 (dd, 7=8,9 e 2,4 Hz, 1 H) 8,04 (d, 7=2,4 Hz, 1 H) 8,11 (d, 7=8,9 Hz, 1 H) 10,94 (s, 1 H).
Etapa 2. N-[2-trifluormetoxi-5-(4-metil-piperazina-l- il) -fenil]-acetamida Pd3(dba)3 (155 mg, 0,17 mmol), 2-diciclohexilfosfino- 2'-(N,N-dimetilamino)-bifenil (133 mg, 0,34 mmol), N-(5-bromo-2-trifluormetoxi-fenil)-acetamida (5,05 g, 17 mmol), foram colocados em um frasco de fundo redondo lavado com argônio. O frasco foi evacuado e preenchido com argônio. Ά solução Lin (TMS)2 (1M θ® THF, 37,6 mL) e N-metilpiperazina (2,3 mL, 20,5 mmol) foram adicionados e a mistura de reação refluída por 3 h. A mistura de reação foi então deixada resfriar à temperatura ambiente e concentrada. O sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM/EtOH 90/10) para render 4,78 g (88% de rendimento) de N-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenil]-acetamida. XH NMR(400 MHz, DMSO-df?) δ 2,06 ppm (s, 3 H) 2,22 (s, 3H) 2,45 (m, 4H) 3,11 (m, 4 H) 6,75 (dd, 7=9,15 e 3,05 Hz, 1H) 7,17 (dd, 7=9,15 e 1,46 Hz, 1 H) 7,41 (bs, 1H) 9,54 (s, 1H) .
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento os seguintes compostos foram preparados: N-[4-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi- fenil]-acetamida XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,01 ppm (s, 3 H) 2,31 (s, 3 H) 2,54 (m, 4 H) 3,18 (m, 4 H) 6,85 (bs, 1 H) 6,93 (dd, 7=8,90 e 2,68 Hz, 1 H) 7,51 (d, 7=8,90 Hz, 1 H) 9,43 ( s, 1H) N-[2-metoxi-4-(4-metil-piperazina-l-il)-fenil]- acetamida XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,01 ppm (s, 3 H) 2,26 (s, 3 H) 2,52 (m, 4 H) 3,12 (m, 4 H) 3,80 (s, 3 H) 6,42 (dd, 7=8,66 e 2,56 Hz, 1 H) 6,58 (d, 7=2,56 Hz, 1 H) 7,59 (d, 7=8,66, 1 H) 8,89 (s, 1 H).
Etapa 3. Sal trihidrocloreto 5-(4-metil-piperazina-l- il) -2-trifluormetoxi-fenilamina Uma solução de N-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenil]-acetamida (4,75 g, 15 mmol) em EtOH (100 mL) foi tratada com HCl 37% (35 mL) . Após 1 h sob refluxo a mistura foi concentrada e triturada com hexano a dar em rendimento quantitativo, 5,74 g de Sal trihidrocloreto 5-(4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamina XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,82 (d, 7= 4,76 Hz 3 H) 3,1 (m, 4 H) 3,48 (m,4 H) 6,24 (dd, 7=8,90 and 2,93 Hz, 1 H) 6,40 (d, 7=2,93 Hz, 1 H) 6,98 (dd, 7=8,90 and 1,34 Hz, 1 H) 10,31 (bs, 1 H) .
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento os seguintes compostos foram preparados: sal trihidrocloreto 4-(4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamina XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,83 ppm (d, 7= 4,02 Hz, 3 H) 3,01 (m, 4 H) 3,47 (m, 4 H) 6,90 (m, 2 H) 7,01 (m, 1 H) 10,44 (bs, 1 H); sal dihidrocloreto 2-metoxi-4-(4-metil-piperazina-l- il) -fenilamina XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2,83 ppm (bs, 3 H) 3,13 (m, 4 H) 3,47 (m, 4 H) 3,91 (s, 3 H) 6,62 (dd, 7=8,78 e 2,56 Hz, 1 H) 6,80 (d, 7=2,56 Hz, 1 H) 7,27 (d, 7=8,78 Hz, 1 H) 9,77 (bs, 3 H) 10,72 (bs, 1 H) sal hidrocloridrato 1-[2-Amino-5-(4-metil-piperazina- l-il) -fenil]-etanona XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,53 ppm (s, 3 H) 2,82 (bs, 3 H) 2,98 (m, 4 H) 3,61 (m, 4 H) 6,84 (d, 7=8,54 Hz, 1 H) 7,15 (dd, 7=8,54 e 2,56 Hz, 1H) 7,27 (d, 7= 2,56 Hz, 1 H) 10,40 (bs, 1 H).
Exemplo 30 1-[2-Amino-4-(4-metil-piperazina-l-il)-fenil]-etanona Etapa 1. 1-[2-Hidroxi-4-(4-metil-piperazina-l-il)- fenil]-etanona 1-(4-flúor-2-hidroxi-fenil)-etanona (4,5 g, 29,22 mmol) foi tratado com N-metilpiperazina (5 ml) a 130°C por 3 h para dar 1-[2-hidroxi-4-(4-metil-piperazina-l-il)-fenil]-etanona em rendimento quantitativo. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,20 ppm (s, 3 H) 2,39 (m, 4 H) 2,47 (s, 3 H) 3,35 (m, 4 H) 6,27 (d, 7=2,6 Hz, 1 H) 6,52 (dd, 7=9,15 e 2,6 Hz, 1 H) 7,66 (d,7=9,15 Hz, 1 H) 12,73 (s, 1 H) .
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento foi elaborado o seguinte composto: 5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-nitrobenzonitrila XH NMR (400 MHz, DMS0-d6) δ 2,23 ppm (s, 3 H) 2,43 (m, 4 H) 3,55 (m, 4 H) 7,28 (d, 7=9,63 e 2,93 Hz, 1 H) 7,56 (d, 7=2,93 Hz, 1 H) 8,18 (d, 7=9,63 Hz, 1 H).
Etapa____2 . 1-[2-Amino-4-(4-metil-piperazina-l-il)- fenil]-etanona Para uma solução de 1-[2-hidroxi-4-(4-metil- piperazina-l-il)-fenil]-etanona (5,22 g, 22,2 mmol) de DMA (50 mL) de NaOH (2,67 g, 66,6 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 h, após este tempo 11,1 g (66,7 mmol) de 2-bromo-2-metilpropanamida foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. 8,01 g (200 mmol) de NaOH foi adicionada e a mistura resultante foi agitada por 2 h a 100°C, então 50 mL de água foram adicionados e a mistura foi agitada por lha 100°C. Após o resfriamento à temperatura ambiente, a mistura foi concentrada e diluída com DCM e, em seguida, lavadas com água, seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM/EtOH 95/5) para render 1,51 g do composto (30% de rendimento). XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,22 ppm (s, 3 H) 2,37 (m, 4 H) 2,42 (s, 3 H) 3,23 (m, 4 H) 6,09 (d, 7=2,56 Hz, 1 H) 6,23 (dd, 7=9,15 e 2,56 Hz, 1 H) 7,08 (bs, 2 H) 7,53 (d, 7=9,15 Hz, 1H) .
Exemplo 31 2-metoxi-5-(4-metil-piperazina-l-il)-fenilamina Etapa 1. 1-(4-metoxi-3-nitro-fenil)-4-metil-piperazina Pd(OAc)2 (85 mg, 0,38 mmol), 2-diciclohexilfosfino- 2(N,N-dimetilamino)-bifenil (225 mg, 0,57 mmol), K3PO4 (2,26 g, 10,68 mmol), 4-bromo-l-metoxi-2-nitro-benzeno (1,77 g, 7,63 mmol) em THF (50 mL) foram colocados em um frasco de fundo redondo lavada com argônio. O frasco foi evacuado e preenchido com argônio. N-metilpiperazina (1,01 mL, 9,15 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi refluída por 72 h. A mistura de reação foi então resfriada à temperatura ambiente e concentrada. O sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM/EtOH 90/10) para render 1,05 g (55% de rendimento) do composto. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 2,22 ppm (s, 3 H) 2,4 5 (m, 4 H) 3,09 (m, 4 H) 3,83 (s, 3 H) 7,22 (d, 7=9,27 Hz, 1 H) 7,26 (dd, 7=9,27 e 2,93 Hz, 1 H) 7,35 (d, 7=2,93 Hz, 1 H) .
Etapa_____2 . 2-metoxi-5-(4-metil-piperazina-l-il)- fenilamina Uma solução de 1-(4-metoxi-3-nitro-fenil)-4-metil- piperazina (1,0 g, 4,0 mmol) em MeOH (100 nil), na presença de Pd/C 10% (150 mg) foi hidrogenada por 2 h a 35 psi. A mistura foi filtrada por celite e a solução foi concentrada para render 0,8 g (90% de rendimento) do composto. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,21 ppm (s, 3 H) 2,43 (m, 4 H) 2,94 (m, 4 H) 3,68 (s, 3 H) 4,55 (s, 2 H) 6,09 (dd, 7=8,66 e 2,80 Hz, 1 H) 6,30 (d, 7=2,80 Hz, 1 H) 6,64 (d, 7=8, 66 Hz, 1 H) .
Exemplo 32 1-[2-Amino-6-(4-metil-piperazina-l-il)-fenil]-etanona Etapa 1. 1-[2-(4-metil-piperazina-l-il)-6- nitro-fenil]-etanona.
Em um tubo quartzo cilíndrico foram colocados l—(2— cloro-6-nitro-fenil)-etanona (300 mg, 1,5 mmol) e N-metil-piperazina (12 ml, 180 mmol). A reação foi aquecida por 40 horas a 120°C. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em DCM. A solução foi lavada duas vezes com água e a fase orgânica foi seca sobre anidro Na2SO4. O bruto foi purificado por cromatografia flash (acetona/MeOH 75:25) rendendo o composto desejado (272 mg, 46% de rendimento), como um sólido amarelo.
Etapa 2 . 1-[2-Amino-6-(4-metil-piperazina-l-il)- fenil]-etanona.
Para uma solução de 1-[2-(4-metil-piperazina-l-il)-6-nitro-fenil]-etanona (270 mg, 1,02 mmol), em uma mistura (1:1: 1,5:2,5) do cicloexeno: THF: H2O: EtOH (12 ml), Pd/C
10% (328mg) e duas gotas de HCl 37% foram adicionados. A mistura foi aquecida durante 3 horas a 70°C. O Pd foi filtrado da reação e os solventes foram removidos do filtrado sob pressão reduzida. O bruto foi purificado por cromatografia flash (DCM/MeOH/7N NH3 em metanol 9:1:1), para render o composto final (225 mg, 95% de rendimento), como óleo alaranjado. Este foi tratado com HCl em dioxano, a fim de obter uma sólido mais gerivel.
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento foi elaborado o seguinte composto: 5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-amino-benzonitrilo XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,25 ppm (bs, 3 H) 2,95 (bs, 4 H) 5,49 (s, 2 H) 6,74 (d, 7=9,02 Hz, 1 H) 6,85 (d, 7=2,80 Hz, 1 H) 7,10 (dd, 7=9,08, 2,87 Hz, 1 H).
Exemplo 33 Sal hidrocloridrato 2-metil-5-(4-metil-piperazina-l- il) -fenilamina Etapa_______1. Metil-4- (4-metil-3-nitro-fenil) - piperazina.
Em um tubo de quartzo cilíndrico foram colocados 4-flúor-l-metil-2-nitro-benzeno (20,0 g, 129 mmol) e N-metil-piperazina (26 g, 258 mmol) . A reação foi aquecida por 48 horas a 200°C. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em DCM. A solução foi duas vezes lavada com água e a fase orgânica foi seca sobre anidro Na2SO4 e o solvente foi removido sob pressão reduzida. O composto final (14,65 g, 48% de rendimento) foi obtido como um óleo castanho.
Etapa_____2 . 2-metil-5-(4-metil-piperazina-l-il)- fenilamina.
Para uma solução de l-metil-4-(4-metil-3-nitro-fenil)-piperazina (9,0 g, 38,29 mmol) em etanol (100 mL) e cicloexeno (7 ml), Pd/C 10% (1,5 g) foi adicionado. A mistura foi aquecida a 80°C por 6 horas. O Pd foi filtrado da reação e os solventes foram removidos do filtrado sob pressão reduzida. O bruto foi diluído com DCM e tratado com HCl em dioxano; o precipitado foi coletado e lavado com éter dietílico para render o composto final como um sólido castanho em rendimentos quantitativos. XH NMR (4 00 MHz, DMSO-d6) δ 2,10 ppm (s, 3 H) 2,82 (s, 3 H) 2,91 - 3,01 (m, 2 H) 3,06 - 3,21 (m, 2 H) 3,49 (d, J= 14/02 Hz, 2 H) 3,66 (d, 7= 12,44 Hz, 2 H) 6,57 (bs, 1 H) 6,63 (bs, 1 H) 7,01 (d, 7=7,68 Hz, 1 H) 10/21 (bs, 1 H).
Exemplo 34 N-(5-Bromo-2-trxfluormetoxx-fenxl)-guanidina Para uma suspensão de 5-bromo-2-trifluormetoxi- fenilamina (5,0 g, 19,5 mmol) em EtOH (15 mL) , cianamida (1,64 g, 39 mmol) dissolvido em 5 mL de EtOH e 1 mL de H2O, e HCl 37% (3,25 mL) diluído em 10 mL foram adicionados EtOH queda sábio para a mistura sob agitação. A mistura foi refluída por 72 h. A mistura é resfriada à temperatura ambiente, é então concentrada e diluída com água; NaOH IN foi adicionado a valores de pH e extraídas várias vezes com acetato de etil, secas sobre sulfato de sódio e concentrada para permitir 5,2 g do composto (89% de rendimento). XH NMR(400 MHz, DMSO-d&) δ 5,40 ppm (s, 4 H) 6,98 (dd, 7=8,72, 2,38 Hz, 1 H) 7,05 (d, 7= 1.83 Hz, 1 H) 7,11 (m, 1 H) .
Exemplo 35 Ν-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi- fenil]-guanidina Etapa________1. 5- (4-metil-piperazina-l-il) -2- trifluormetoxi-fenilamina Tris (dibenzilideneacetona) dipaladio, Pd2(dba)3 (1,1 g, 1,2 mmol), 2-diciclohexilfosfino-2'-(N,N-dimetilamino)- bifenil (0,94 g, 2,4 mmol), 5-bromo-2-trifluormetoxi-fenilamina (30,7 g, 120 mmol) em THF (50 mL) foram colocados em um frasco de fundo redondo lavado com argônio. 0 frasco foi evacuado e preenchido com argônio. A solução Lin (TMS)2 (1M em THF, 288 mL) e N-metilpiperazina (26,7 mL, 194 mmol) foram adicionadas e a reação refluída por 1 h. A mistura da reação foi, então resfriada à temperatura ambiente e filtrada através de um bloco de celite. A fase orgânica foi concentrada, o resíduo dissolvido em DCM (200 ml) e lavado com água (1 x 100 ml) . As fases orgânicas foram secas sobre Na2SO4 anidro, o solvente evaporado sob vácuo e o sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em, sílica gel (eluente: DCM/EtOH 90/10) para render 21,1 g de 5- (4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenilamina (64% de rendimento), como um pó marrom claro. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,23 ppm (s, 3 H) 2,42-2,47 (m, 4 H) 3,02-3,08 (m, 4 H) 5,10 (s, 2 H) 6,16 (dd, 7=8,90, 2,93 Hz, 1 H) 6,33 (d, 7=2,93 Hz, 1 H) 6,90 (dd, 7=8,90, 1,46 Hz, 1H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento os seguintes compostos foram preparados: N-[2-Amino-4-(4-metil-piperazina-l-il)-fenil]- acetamida XH NMR(400 MHz, DMSO-dÉ?) δ 2,03 ppm (s, 3 H) 2,23 (s, 3 H) 2,42-2,47 (m, 4 H) 3,02-3,08 (m, 4 H) 5,10 (s, 2 H) 6,70 (dd, 7=8, 72, 2,74 Hz, 1 H) 7,22 (d, 7=9,02 Hz, 1 H) 7,34 (d, 7=2, 80 Hz, 1 H) ; 5-((S)-2-Benziloximetil-4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamina XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,87 ppm (s, 3 H) 4,46 -4,50 (m, 1 H) 4,52-4,56 (m, 1 H) 6,21 (dd, 7=9,02, 2,93 Hz, 1 H) 6,37 (d, 7= 3,05 Hz, 1 H) 6,93 - 6, 97 (m, 1 H) 7,22- 7,38 (m, 5 H) 10/19 (br. s., 1 H); 5-((R)-2-Benziloximetil-4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamina.
Etapa_______2 . N- [5- (4-metil-piperazina-l-il) -2- trifluormetoxi-fenil]-guanidina Para uma solução de 5-(4-metil-piperazina-l-il)-2- trif luormetoxi-f enilamina (275 mg, 1 mmol) em HCl 6N (1 mL), cianamida (336 mg, 8,0 mmol) foi adicionado e a reação foi agitada por lha 60°C. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente, diluir com água (3 mL) , extraída com DCM (10 mL) . NaOH 2N foi adicionado ao pH> 11. A fase aquosa foi extraída com Et2O (3 x 10 mL) , seca sobre sulfato de sódio e concentrada. O resíduo foi cristalizado a partir de éter dietílico para render o composto intitulado (240 mg, 76% de rendimento) como um sólido branco. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,21 (s, 3 H) 2,39 - 2,45 (m, 4 H) 3,05 - 3,11 (m, 4 H) 6,40 (br. s., 1 H) 6,45 (dd, 7=8,90, 3,05 Hz, 1 H) 6,99 (dd, 7=8,96, 1,16 Hz, 1H).
Exemplo 3 6 Etil 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l- il) -2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH- pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato (A51B5C2Z) Para uma solução de 2,66 g (8,34 mmol) de etil 6- [(dimetilamino)metileno]-7-oxo-l-(2-hidroxi-etil)-4,5,6,7- tetrahidro-lH-indazole-3 -carboxilato em 15 mL de DMF, 2,64 g (8,34 mmol) de N-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenil]-guanidina foi adicionado. A mistura foi agitada por 4 h a 110°C. Após resfriamento a mistura foi posta em água (100 ml) e agitada durante 30 minutos. O precipitado foi filtrado, lavado com água e seco para render 2,86 g do composto intitulado (61%). XH NMR(400 MHz, DMSO-d&) δ 1,31 ppm (t, 7=7,07 Hz, 3 H) 2,23 (s, 3 H) 2,43 - 2,48 (m, 4 H) 2,83 (t,7=7,68 Hz, 2 H) 2,94 - 3,00 (m, 2 H) 3,12-3,18 (m, 4 H) 3,55 - 3,64 (m, 2 H) 4,29 (q, 7=7,15 Hz, 2 H) 4,59 (t,7=5,67 Hz, 1 H) 4,65 (t,7=5,37 Hz, 2 H) 6,80 (dd, 7=9,15, 3,05 Hz, 1 H) 7,21 (s, 1 H) 7,21 - 7,24 (m, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 8,90 (s, 1 H).
Exemplo 37 Potássio 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il) -2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxilato (A51B5C3Z) Etil 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il) -2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato (1,7 g, 3,03 mmol) foi suspenso em etanol 96% (50 mL) e tratados com uma solução 1,5 M de hidróxido de potássio em etanol (8 mL, 12 mmol) à temperatura ambiente, durante a noite. 0 precipitado foi coletado por filtração para render o composto intitulado (1,54 g, 89% de rendimento) como um sólido branco. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) β ppm 2,22 (s, 3 H) 2,42-2,48 (m, 4 H) 2,72 (t,7=7,74 Hz, 2 H) 2,93 (t,7=7,62 Hz, 2 H) 3,12 - 3,17 (m, 4 H) 3,57 - 3, 63 (m, 2 H) 4,53 - 4,59 (m, 3 H) 6,76 (dd, 7=9,15, 3,05 Hz, 1 H) 7,20 (dd, 7=9,02, 1,34 Hz, 1H) 7,32 (d, 7=2,93 Hz, 1 H) 8,26 (s, 1 H) 8,65 (s, 1 H) .
Exemplo 38 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B5C1Z) A suspensão de potássio 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1 H-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxilato (1,54 g, 2,69 mmol) em anidro DMA (40 mL) foi tratada com cloridrato de N-etil-N',N'-iisopropilcarbodiimida (EDCI) (1,03 g, 5,38 mmol) e com amônia 1H-1,2,3-benzotriazol-l-ate (0,819 g, 5,38 mmol). A reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. A reação foi diluida com água e o precipitado resultante foi coletado por filtração para render o composto intitulado (1,32 g, 88% de rendimento). XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,24 ppm (s, 3 H) 2,46 (br. s., 4 H) 2,80 (t,7=7,62 Hz, 2 H) 2,98 (t,7=7,62 Hz, 2 H) 3,15 (br. s., 4H) 3,64 (q, 7= 5,49 Hz, 2H) 4,59 (t,7=5,79 Hz, 1H) 4,63 (t,7=5,37 Hz, 2H) 6,79 (dd, 7=8, 96, 2,99 Hz, 1H) 7,19 - 7,24 (m, 1H) 7,24 (br. s., 1H) 7,25 (d, 7=2,93 Hz, 1H) 7,43 (s, 1H) 8,34 (s, 1H) 8,85 (s, 1H).
Exemplo 39 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi- fenilamino] -4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A51B8C1Z) Tris (dibenzilideneacetona) dipaladio, Pd2(dba)3, (2,3 g, 2,5 mmol), 2-diciclohexilfosfino-2'-(N,N- dimetilamino)-bifenil (950 mg, 2,4 mmol), 8-[5-bromo-2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (14,8 g, 31,54 mmol) em THF (160 mL) foram colocadas em um frasco de fundo redondo lavada com argônio. 0 frasco foi evacuado e preenchido com argônio. A solução Lin (TMS)2 (1M em THF, 630 mL) e N-metilpiperazina (69 mL, 50,64 mmol) foram adicionadas e a mistura de reação refluída por 1 h. A mistura da reação foi, então, resfriada à temperatura ambiente e filtrada através de um bloco de celite. A fase orgânica foi concentrada. O sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM/MeOH 95/5) para render 9,2 g (60% de rendimento) do composto. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,22 ppm (s, 3 H) 2,45 - 2,48 (m, 4 H) 2,84 (t,7=7,62 Hz, 2 H) 3,00 (t,7=7,50 Hz, 2 H) 3,16 - 3,20 (m, 4 H) 6,71 (br. s., 1 H) 7,19 (dd, 7=9,02, 1,34 Hz, 1 H) 7,32 (br. s., 1 H) 7,49 (s br., 1H) 8,34 (br. s., 1 H) 8,36 (s, 1H).
Exemplo 4 0 1-(2-cloro-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B9C1Z) A suspensão de 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (488 mg, 1,0 mmol) e CS2CO3 (490 mg, 1,5 mmol) foi suspensa em DMF (1 mL) e tratada com 1- bromo-2-cloro-etano (0,1 mL, 1,2 mmol), à temperatura ambiente. Após 2 h a mistura de reação foi derramada na água e filtrada, lavada com água e seca para render o composto intitulado (529 mg, 96% de rendimento) como um sólido branco. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,22 (s, 3 H) 2,42-2,48 (m, 4 H) 2,81 (t,7=7,68 Hz, 2 H) 2,99 (t,7=7,80 Hz, 2 H) 3,12-3,18 (m, 4 H) 3,84 (t,7=5,91 Hz, 2 H) 4,87 (t,7=5,91 Hz, 2 H) 6,81 (dd, 7=9,08, 2,99 Hz, 1 H) 7,19 (d, 7=2,93 Hz, 1 H) 7,21 - 7,26 (m, 1 H) 7,29 - 7,33 (m, 1 H) 7,46 (s, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 8,92 (s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento os seguintes compostos foram preparados: Tabela XX
Exemplo 41 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi- fenilamino] -l-vinil-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3- h]quinazolina-3-carboxamida (A51B10C1Z) Uma mistura de 1-(2-cloro-etil)-8-[5-(4-metil- piperazina-l-il ) -2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (350 mg, 0,63 mmol) e dBu (3,5 mL) foi aquecida a 80°C por 1 h. Após o resfriamento a mistura de reação foi colocada na água e filtrada. O sólido bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM / MeOH 95/5) para render 234 mg (71% de rendimento) do composto. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,22 ppm (s, 3 H) 2,39 - 2,47 (m, 4 H) 2,83 (t,7=7,80 Hz, 2 H) 3,01 (t,7=7,74 Hz, 2 H) 3,12-3,20 (m, 4 H) 4,90 (d, 7=8,7 Hz, 1 H) 5,89 (d, 7= 15,4 Hz, 1 H) 6,81 (dd, 7=9,15, 2,93 Hz, 1 H) 7,18-7,32 (m, 2 H) 7,43 (s, 1 H) 7,66 (s, 1 H) 8,33 (dd, 7= 15,4, 8,7 Hz, 1 H) 8,39 (s, 1 H) 9,05 (s, 1 H).
Exemplo 42 Sal hidrocloridrato 1-(3-Amino-propil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il) -2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro- lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida, (A51B13C1Z) A suspensão de 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (100 mg, 0,2 mmol) e CS2CO3 (97,5 mg, 0,3 mmol) foi suspensa em DMF (0,5 mL) e tratada com (3-bromo-propil)-estér terc-butil do ácido carbâmico (71 mg, 0,3 mmol), à temperatura ambiente. Após 2 h, a mistura de reação foi colocada em água e filtrada, lavada com água e seca. O resíduo foi suspenso em dioxano (1 mL) e tratadas com HCl 4N em dioxano (0,1 mL) por 1 h. O precipitado foi filtrado e seco para render o composto intitulado (52 mg, 45% de rendimento) como um sólido branco. XH NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1,89 - 2,01 (m, 2 H) 2,63 - 2,72 (m, 2 H) 2,79 - 2,86 (m, 2 H) 2,84 (d, 7=4,63 Hz, 3H) 2,96 - 3,04 (m, 2H) 3,07 - 3,24 (m, 4H) 3,38 - 3,42 (m, 2H) 3,84 (d, 7=1,83 Hz I, 2 H) 4,71 (t, 7= 6,46 Hz, 2 H) 6,89 (dd, 7=9,21, 2,99 Hz, 1 H) 7,30 (dd, 7=8,96, 1,16 Hz, 1H) 7,33 - 7,37 (m, 2H) 7,46 (br. s., 1H) 7,92 (br. s., 3Η) 8,38 (s, 1H) 9,09 (s, 1H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento foi elaborado o seguinte composto: Sal hidrocloridrato 1-(3-amino-etil)-8-[5-(4-metil- piperazina-l-il) -2-trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida, (A51B12C1Z) XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,80 - 2,84 (m, 2 H) 2,86 (d, J= 4,76 Hz, 3 H) 2,97 - 3,03 (m, 2 H) 3,06 - 3,28 (m, 4 H) 3,81 (d, 7=0,61 Hz, 2 H) 4,90 - 4,96 (m, 2 H) 6,87 (dd, 7=9,08, 2,99 Hz, 2 H) 7,28-7,33 (m, 2 H) 7,38 (br. s., 2 H) 7,41 (d, 7=2,68 Hz, 1 H) 7,75 (br. s., 1 H) 8,19 (br. s., 3 H) 8,38 (s, 1 H) 9,17 (s, 1 H).
Exemplo 43 5-(l-metil-piperidina-4-il)-2-trifluormetoxi- fenilamina Etapa 1. 5-(l-metil-1,2,3,6-tetrahidro-piridin-4-il)- 2-trifluormetoxi-fenilamina 5-Bromo-2-trifluormetoxi-fenilamina (0,43 g, 1,68 mmol), carbonato de césio (1,65 g, 5,06 mmol), 1,1'-bis (difenilfosfino) ferrocenepaladio (ii) dicloreto, complexo com diclorometano (1:1) (0,08g, 0,1 mmol) em DMF seco (20 mL) foram colocados em um frasco de fundo redondo lavado com argônio. O frasco foi evacuado e preenchido com argônio. Uma solução de l-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan- 2-il)-l,2,3,6-tetrahidro-piridina (0,45 g, 2,01 mmol) em DMF seco (10 mL) foram adicionados à suspensão e à mistura de reação aquecida a 80°C por 3 horas. A mistura de reação foi então resfriada à temperatura ambiente, diluída em água (100 mL) e extraída com DCM (2 x 50 mL) e as fases orgânicas foram extraídas com a solução IN HCl (50 mL) . A fase aquosa foi basificada pela adição de bicarbonato de sódio e extraída com EtOAc (2 x 50 mL) . As fases orgânicas combinadas foram secas sob Na2SO4 anidro, o solvente removido sob pressão reduzida, e o sólido bruto purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM / MeOH 90/10) para render o intermediário como um sólido marrom claro (0,3 g, 65% de rendimento). XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,29 ppm (s, 3 H) 2,38-2,44 (m, 2 H) 2,58 (t,7=5,55 Hz, 2 H) 3,02 (d, 7=2,32 Hz, 2 H) 5,29 (s, 2 H) 6,03 (t, 7= 3,48 Hz, 1 H) 6,64 (dd, 7=8,54, 2,19 Hz, 1 H) 6,86 (d, 7=2,32 Hz, 1 H) 7,03 (dd , 7=8,54, 1,34 Hz, 1 H) .
Etapa_________2 . 5- (l-metil-piperidina-4-il) -2- trifluormetoxi-fenilamina Uma suspensão de 5-(1-metil-l,2,3,6-tetrahidro- piridin-4-il)-2-trifluormetoxi-fenilamina (0,3 g, 1,10 mmol), 10% Pd/C catalisador (100 mg) em EtOH (20 mL) foi hidrogenada por 6 horas a 40 psi em um aparelho Parr. A mistura foi filtrada em um bloco de celite, o solvente removido sob vácuo e o resíduo bruto foi purificado por cromatografia flash em sílica gel (eluente: DCM/MeOH/NH3 95/05/005) para render o composto intitulado como um sólido castanho claro (0,17 g, 56% de rendimento). XH NMR (4 00 MHz, DMSO-d6) δ 1,5 6 ppm (qd, J= 12,32, 3,54 Hz, 2 H) 1,68 (d, J= 1,80 Hz I, 2 H) 1,93 (t,7=1,20 Hz I, 2 H) 2,18 (s, 3 H) 2,30 (tt,7=12,00, 3, 66 Hz, 1 H) 2,84 (d, 7= 1,34 Hz I, 2 H) 5,22 (s, 2 H) 6,43 (dd, 7=8,41 , 2,07 Hz, 1 H) 6,67 (d, 7=2,19 Hz, 1 H) 6,98 (dq, 7=8,37, 1,50 Hz, 1 H).
Exemplo 44 5- ( (R) -2-Benziloximetil-4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamina Etapa 1. (R)-3-Benziloximetil-l-metil-piperazina-2,5- diona Para uma solução de cloridrato de sarcosina metiléster (2,8 g, 18,6 mmol) em DMF seco (43 mL), DIPEA (3 ml, 16,9 mmol) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 min. Então THF (160 mL) , EDDQ cloridrato (3,2 g, 16,9 mmol) e a BOC-D-serina (5,0 g, 16,9 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada à mesma temperatura durante 2 h. 0 solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em AcOEt. A solução foi lavada com água, em IN HCl e solução saturada de NaHCO3 a fase orgânica foi seco sobre Na2SO4 anidro. A concentração da solução deu 5 g (75% de rendimento), de um óleo incolor que foi diluído em DCM (325 mL) . TFA (325 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 2 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em MeOH (400 mL) . TEA (21,5 mL, 149 mmol) foi adicionado e a solução foi refluxada sob atmosfera N2 por 2 h. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em DCM. A solução foi lavada duas vezes com água e a fase orgânica foi seca sobre anidro Na2SO4. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o material bruto foi diluído com Et2O e decantado para render o composto final (1,93 g, 63% de rendimento) como um sólido branco. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,83 ppm (s, 3 H) 3,56 (dd, 7=9,63, 2,80 Hz, 1H) 3,77 - 3,83 (m, 2 H) 3,87 - 3, 92 (m, 1H) 3,95 (q,7=2,68 Hz, 1H) 4,45 - 4,53 (m, 2 H) 7,25 - 7,31 (m, 3 H) 7,33 - 7,38 (m, 2 H) 8,23 (br. s., 1H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento, mas utilizando BOC-L-serina os seguintes compostos foram preparados: (S)-3-Benziloximetil-l-metil-piperazina-2,5-diona.
Etapa 2. (S)-3-Benziloximetil-l-metil-piperazina Para uma solução de (R)-3-Benziloximetil-l-metil- piperazina-2,5-diona (1,93 g, 7,78 mmol) em THF (30 mL) , L1AIH4 1M em THF (15 mL, 15,5 mmol) foi adicionado em gotas durante 30 minutos e a solução foi refluxada sob atmosfera N2 durante 3 h. A reação foi resfriada a 0°C e diluída com água (100 mL) . Em seguida, 4 ml de uma solução aquosa de NaOH 15% solução foi adicionada. Após 1 h 100 mL de água foram adicionados e a reação agitada durante a noite. O
precipitado branco foi filtrado e lavado com DCM. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com Et2O e decantado. O bruto foi purificado por cromatografia flash (DCM/MeOH/7N NH3 em metanol, 90:9:1) para render o composto desejado (1,43 g, 83,5% de rendimento), como óleo amarelo. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 1,61 ppm (t,7= 10,12 Hz, 1 H) 1,85 (td, J= 10,82, 3,23 Hz, 1 H) 2,13 (s, 3 H) 2,57- 2,67 (m, 4 H) 2,83 - 2,89 (m, 1 H) 3,29 - 3,34 (m, 2 H) 4,47 (s, 2 H) 7,23 - 7,40 (m, 5 H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento, o seguinte composto foi preparado: (R)-3-Benziloximetil-l-metil-piperazina.
Exemplo 45 8- [5-( (S)-2-hidroximetil-4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamino]-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A117B1C1Z) Para uma solução de 8-[5-((S)-2-benziloximetil-4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluormetoxi-fenilamino]-1-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3- carboxamida (53 mg, 0,08 mmol) em DCM (1,7 mL) , sob uma atmosfera de N2, a -78°C 1M BC13 em DCM (0,17 mL) foi adicionado em gotas. Sob a adição completa, a solução foi agitada por 30 min a 0°C e em temperatura ambiente durante a noite. Em seguida, 2 mL de MeOH foram adicionados. O solvente foi removido sob pressão reduzida e o resíduo foi diluído com Et2O e decantado para dar o composto no rendimento desejado em termos quantitativos (46 mg), como um sólido castanho. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2,79 - 2,84 (m, 2 H) 2,87 (s, 3 H) 2,95 - 3,02 (m, 2 H) 4,17 (s, 3 H) 6,82 (dd, 7=9,15, 2,93 Hz, 1 Η) 7,25 - 7,29 (m, 1 Η) 7,32 (d, 7= 3,05 Hz, 1 H) 8,36 (s, 1 H) 9,00 (s, 1 H).
Ao trabalhar de acordo com o mesmo procedimento foi elaborado o seguinte composto: 8-[5-((R)-2-hidroximetil-4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamino]-l-metil-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A115B1C1Z) .
Exemplo 46 1-(2-hidroxi-etil)-8-[2-trifluormetoxi-5-(4-metil-4- oxi-piperazina-l-il)-fenilamino]-4,5-dihidro-lH- pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A102B5C1Z) Para uma solução de 400 mg (0,751 mmol) de l—(2 — hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluormetoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol [4,3-h] quinazolina-3-carboxamida, 17,4 mg (1,1 mmol) de 3-ácido clorobenzenocarboperoxoico foram adicionados e a mistura foi agitada à temperatura ambiente. Após 45 minutos de uma solução aquosa NaHCC>3 foi adicionada e a fase orgânica removida. A solução aquosa foi filtrada através de um filtro de vidro sinterizado, os sólidos lavados com água (20 mL) e finalmente purificada por cromatografia flash (eluente DCM/MeOH/NH3 80/20/02) para produzir 170 mg (41% de rendimento) do composto intitulado como um sólido castanho claro. XH NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 2,79 ppm (t, 7=7,68 Hz, 2 H) 2,97 (t,7=7,68 Hz, 2 H) 3,34 (t,7=11,50 Hz, 2 H) 3,50 (s, 3 H) 3,65 (t,7=5,42 Hz, 2 H) 3,69 (t,7=11,70 Hz, 2 H) 3,71 - 3,75 (m, 2 H) 3,77 (t,7=10/30 Hz, 2 H) 4,63 (t,7=5,42 Hz, 2 H) 6,88 (dd, 7=9,08, 2,99 Hz, 1 H) 7,24 (br. s., 1 H) 7,28 (dq, 7=9,02, 1,10 Hz, 1 H) 7,36 (d, 7=2,93 Hz, 1 H) 7,39 (m, 1 H) 8,34 (s, 1 H) 8,95 (s, 1 H).
REIVINDICAÇÕES

Claims (14)

1. Composto, CARACTERIZADO por ter a fórmula (I): onde Rl é um arilamino orto-substituídos de fórmula: onde R'4 e R"4 são independentemente selecionados de um grupo que consiste de halogênio, nitro, ciano, alquil Ci-Cê, alquil polifluorinatado, alcóxi polifluorinatado, alquenil, alquinil, hidróxi alquil, aril, arilalquil, heterocíclico, cicloalquil C3-C6, hidróxi, alcóxi, ariloxi, heterociclicoxi, alquilcarboniloxi, arilcarboniloxi, heterociclicocarboniloxi, carboxi, alcoxicarbonil, heterociclicoxicarbonil, amino, alquilamino, dialquilamino, arilamino, diarilamino, heterociclicoamino, formilamino, alquilcarbonilamino, arilcarbonilamino, heterociclicocarbonilamino, aminocarbonil, alquilaminocarbonil, dialquilaminocarbonil, arilaminocarbonil, heterociclicoaminocarbonil, alcóxicarbonilamino, hidroxiaminocarbonil, alcoximino, alquilsulfonil-amino, arilsulfonilamino, formil, alquilcarbonil, arilcarbonil, heterociclicocarbonil, alquilsulfonil, arilsulfonil, aminossulfonil, arilaminosulfonil, ariltio e alquiltio; R2 é hidrogênio, alquil Ci-Cg linear ou ramificado, opcionalmente substituído por halogênio, heterocicliloxi, hidroxi, aril, alcoxiaril, amino, alquilamino, dialquilamino ou alcoxi, ou é um alquenil C2-C6 linear ou ramificado; e R3 é CO-OR' ou CO-NR'R", em que R' e R" são, cada um, independentemente, hidrogênio, alquil Ci-Cg linear ou ramificado, opcionalmente substituído por halogênio ou alcoxiaril, ou R' e R" tomados em conjunto com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados, podem formar um grupo heterocíclico contendo opcionalmente um nitrogênio adicional e opcionalmente substituído por alquil; em que qualquer grupo alquil é um alquil Ci-Cg; qualquer grupo alcoxi é um alcoxi Ci-Cg; qualquer grupo alquenil é um alquenil C2-Cg; qualquer alquinil é um alquinil C2-Cg; qualquer aril é um grupo carbocíclico ou heterocíclico contendo de 1 a 2 porções do anel, fundidas ou ligadas entre si por ligações simples, em que pelo menos um dos anéis é aromático; se presente, qualquer anel heterocíclico aromático também conhecido como grupo heteroaril compreende um anel de 5 a 6 membros contendo de 1 a 3 heteroátomos selecionados dentre N, NH, O ou S; qualquer heterociclico é um anel carbocíclico de 3 a 7 membros, saturado ou parcialmente insaturado, em que um ou mais átomos de carbono são substituídos por heteroátomos como nitrogênio, oxigênio e enxofre, e qualquer cicloalquil é um anel monocíclico todo de carbono de 3 a 6 membros, que pode conter uma ou mais ligações duplas, mas não possui um sistema π-elétron completamente conjugado; e sais farmaceuticamente aceitáveis destes.
2. Composto da fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que: R3 é CO-OH ou CO-NR' -R" onde R' e R" são conforme definidos na reivindicação 1.
3. Composto da fórmula (I), de acordo com as reivindicações 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que: R2 é alquil C1-C6 linear ou ramificado, opcionalmente substituído por halogênio, heterocicliloxi, hidroxi, aril, alcoxiaril, amino, alquilamino, dialquilamino ou alcóxi, ou é um alquenil C2-C6 linear ou ramificado.
4. Composto da fórmula (I), de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 3, CARACTERIZADO pelo fato de que: R3 é CO-NR'R", em que R' e R" são conforme definidos na reivindicação 1.
5. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, CARACTERIZADO por ser selecionado do grupo que consiste de: 8-[2-acetil-5-(4-metil-piperazina-l-il)-fenilamino]-l-metil-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A39BlClZ); 8-[2-acetil-5-(4-metil-piperazina-l-il)-fenilamino]-l-(2-flúor-etil)-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolina- 3-carboxamida (A39B2ClZ); l-metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorome-toxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol [4,3-h]quinazolina- 3-carboxamida (A51BlClZ); Etil 1-metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2- trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato (A51B1C2Z); 1-metil-8-[2-metoxi-5-(4-metil-piperazina-1-il)-fenil-amino]-1-metil-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A85B1C1Z); 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-l-(2-flúor-etil)-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3- h]quinazolina-3-carboxamida (A51B2C1Z); l-metil-8-[4-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A48B1C1Z); l-metil-8-(2-trifluorometoxi-5-piperazina-l-il-fenilamino]-4,5-dihidro-lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A97BlClZ); l-metil-8-[2-metil-5-(4-metil-piperazina-l-il)-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolme-3- carboxamida (A98BlClZ); l-metil-8-[5-(4-pirrolidin-l-il-piperidina-l-il)-2-trifluorometoxi fenilamino]-4,5-dihidro-1H-1H-pirazol[4,3- h] quinazolina-3-carboxamida (A99B1C1Z); l-metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxílico metilamida (A51B1C4Z); l-metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-metoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxílico metilamida (A85B1C4Z); l-metil-8-[2-metil-5-(4-metil-piperazina-l-carbonil)- fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A87BlClZ); l-metil-8-[2-metil-4-(4-metil-piperazina-l-carbonil)-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A86B1C1Z); l-metil-8-{2-trifluorometoxi-5-[(l-metil-piperidina- 4-carbonil)-amino]-fenilamino}-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3- h] quinazolina-3-carboxamida (A82B1C1Z); Potássio 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorme-toxi-fenilamino]-l-metil-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxilato (A51BlC3Z); l-etil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorome- toxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolina-3 -carboxamida (A51B7C1Z); l-metil-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorome-toxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolina- 3-ácido carboxílico(2,2,2-trifluoroetil)-amida (A51BlC7Z); l-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B5C1Z); 8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-1-vinil-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B10ClZ); l-(2-cloro-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h] quinazolina-3-carboxamida (A51B9ClZ); 8-[5-(4-metil-piperazina-1-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino] -4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolina-3- carboxamida (A51B8ClZ); Potássio l-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il) -2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H- pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxilato (A51B5C3Z); Etil 1-(2-hidroxi-etil)-8-[5-(4-metil-piperazina-l-il) -2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol [4,3-h]quinazolina-3-carboxilato(A51B5C2Z); l-metil-8-[5-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidro-piridina-4- il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol [4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A113B1C1Z); l-metil-8-[5-(l-metil-piperidina-4-il)-2-trifluorometoxi-fenilamino]-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3- h]quinazolina-3-carboxamida (A114B1C1Z); 8 -(5-Bromo-2-trifluorometoxi-fenilamino)-l-metil-4,5-dihidro-1H-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A49B1C1Z), e 8 -(5-Bromo-2-trifluorometoxi-fenilamino)-4,5-dihidro- lH-pirazol[4,3-h]quinazolina-3-carboxamida (A49B8C1Z).
6. Processo para preparar um composto da fórmula (I), conforme definido na reivindicação 1, CARACTERIZADO por compreender as seguintes etapas: etapa 1) reagir o composto da fórmula (II): com um derivado de hidrazina da fórmula (III) : R2-.NHNH2 (111) onde R2 é, tal como definido na reivindicação 1, na presença de ácido acético para dar um composto da fórmula (IV) : onde R2 é como acima definido; opcionalmente alquilar um composto da fórmula (IV) onde R2 é hidrogênio com os compostos de fórmula (V): R2-Y (V) onde Y é um grupo de partida adequado, tal como mesil, tosil, halogênio, e R2 é como acima definido, mas não hidrogênio, para dar um composto da fórmula (IV) onde R2 é como acima definido, mas não hidrogênio; etapa 2) reagir o composto da fórmula (IV) com dimetilformamida-diterc-butilacetal ou dimetilformamida- diisopropilacetal para dar um composto da fórmula (VI) : onde R2 é como definido acima, e etapa 3) reagir o composto da fórmula (VI), de acordo com qualquer uma das etapas alternativas (etapa 3a) ou (etapa 3b): etapa 3a) com guanidina para dar um composto da fórmula (VII), onde R2 é, tal como acima definidos; converter o grupo amino do composto resultante da fórmula (VII) para iodo e, em seguida, reagir o resultante iodo-derivados da fórmula (VIII), com uma arilamina orto- substituídas de fórmula Rl-H (IX), onde Rl é conforme definido na reivindicação 1 para dar o composto da fórmula (I) : onde Rl e R2 são como acima definidos; etapa 3b) com um derivado de guanidina de fórmula (X) : Rl-C(=NH)NH2 (X) em que Rl é como acima definidos, para dar um composto da fórmula (I): onde Rl e R2 são como definidos acima, e opcionalmente convertendo-o em outros derivados de fórmula (I) e/ou em sais farmaceuticamente aceitável deste.
7. Processo para preparar um composto da fórmula (I), CARACTERIZADO por compreender uma etapa 4 que compreende: converter o grupo etoxicarbonil dos compostos de fórmula (VIII), conforme definidos na reivindicação 6, através de hidrólise ácida ou básica para produzir compostos de fórmula (XIII) ou um sal correspondente, converter o composto resultante da fórmula (XIII) ou o sal correspondente nos compostos de fórmula (XIV) através da reação sob as condições básicas e na presença de um agente de condensação adequado, com uma amina de fórmula R'R"-NH (XI) onde R' e R" são como definidos na reivindicação 1; reagir o composto da fórmula (XIV), com uma arilamina orto-substituída da fórmula Rl-H (IX), onde Rl é conforme definido na reivindicação 1, para obter um composto da fórmula (I): onde Rl, R2, R' e R" são como acima definidos e, opcionalmente convertendo-o em outros derivados de fórmula (I) e/ou em sais farmaceuticamente aceitável destes.
8. Processo para preparar um composto da fórmula (I) de acordo com as reivindicações 6 ou 7, CARACTERIZADO pelo fato de que a conversão opcional de um composto da fórmula (I) em outro composto da fórmula (I) , é realizada por uma ou mais das seguintes reações: a) converter um composto da fórmula (I) onde R3 é etoxicarbonil em um composto da fórmula (I) onde R3 é aminocarbonil pelo tratamento com hidróxido de amônio: b) converter um composto da fórmula (I) onde R3 é etoxicarbonil em um composto da fórmula (I) onde R3 é um grupo de CO-NR'R" pelo tratamento com uma amina da fórmula R'R"-NH (XI), onde R' e R" são como definidos na reivindicação 1: c) converter um composto da fórmula (I) onde R3 é etoxicarbonil em um composto da fórmula (I) onde R3 é um grupo CO-OH ou um sal correspondente através de hidrólise ácida ou básica: d) converter um composto da fórmula (I) onde R3 é CO-OH ou um sal correspondente em um composto da fórmula (I) onde R3 é um grupo CO-NR'R", através da reação com uma amina da fórmula R'R"-NH (XI), sob condições básicas, e na presença de um agente de condensação adequado, onde R' e R" são como acima definidos: e) converter um composto da fórmula (I) onde R2 é tritil em um composto da fórmula (I) onde R2 é hidrogênio, sob condições ácidas: f) converter um composto da fórmula (I) onde R2 é hidrogênio em um composto da fórmula (I) onde R2 é tal como definido na reivindicação 1, mas não hidrogênio, através da reação com um álcool de fórmula R2-0H (XII) onde R2 é como acima definido, mas não hidrogênio: g) converter um composto da fórmula (I) onde R2 é hidrogênio em um composto da fórmula (I) onde R2 é tal como definido na reivindicação 1, mas não hidrogênio, através da reação com um composto da fórmula R2-X (XV) onde R2 é como acima definido, mas não hidrogênio e X é halogênio: h) converter um composto da fórmula (I) onde R2 é um haloetil em um composto da fórmula (I) onde R2 é vinil: i) converter um composto da fórmula (I) em que Rl é um arilamino orto-substituído da fórmula: onde R'4 ou Rh4 é bromo, em um composto da fórmula (I) onde R*4 ou Rh4 é um grupo -NR'R" pelo tratamento com uma amina da fórmula R'R"-NH (XI), onde R' e R" são conforme definidos na reivindicação 1.
9. Composição farmacêutica, CARACTERIZADA pelo fato de compreender uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, conforme definido na reivindicação 1, e pelo menos um excipiente farmaceuticamente aceitável, veículo e/ou diluente.
10. Kit, CARACTERIZADO por compreender o composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, tal como definido na reivindicação 1, ou composições farmacêuticas deste, tais como definidas na reivindicação 9 e um ou mais agentes quimioterápicos, como uma preparação combinada para uso simultâneo, separado ou sequencial na terapia antineoplásica.
11. Composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, CARACTERIZADO pelo fato de ser útil como medicamento.
12. Composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 5, CARACTERIZADO pelo fato de ser útil em um método para o tratamento do câncer.
13. Uso de um composto da fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, conforme definido na reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de ser útil na fabricação de um medicamento com atividade antineoplásica.
14. Intermediário para preparação do composto conforme definido na reivindicação 1, CARACTERIZADO por ter fórmula (X'): ou fórmula (IX'): onde Rl' é
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