BRPI0714808A2 - mÉtodos e composiÇÕes para o tratamento e a prevenÇço de infecÇÕes - Google Patents

Abstract

PREPARAÇçO, PREPARAÇçO ANTIMICROBIANA NA FORMA DE UMA SOLUÇçO, PREPARAÇçO TàPICA, USO DE UM AGENTE ANTIBACTERIANO DE OXIDAÇçO E UM COMPOSTO HETEROCÍCLICO NA PRODUÇçO DE UMA PREPARAÇçO. A presente invenção refere-se a preparações que compreendem um agente antimicrobiano de oxidação tal como dióxido de cloro e um composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano da preparação do agente antimicrobiano de oxidação. A invenção tem uso particular como uma preparação para cuidado com o olho tal como um colírio para os olhos. A invenção ainda provê métodos para a redução da colonização bacteriana e para o tratamento da infecção.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "PREPARAÇÃO, PREPARAÇÃO ANTIMICROBIANA NA FORMA DE UMA SOLUÇÃO, PREPARAÇÃO TÓPICA, USO DE UM AGENTE ANTIBACTERIANO DE OXIDAÇÃO E UM COMPOSTO HETEROCÍCLICO NA PRODUÇÃO DE UMA PREPARAÇÃO". Antecedentes da Invenção

A presente invenção refere-se a uma condição conhecida como secura nos olhos causa uma irritação crônica no olho resultante da diminuição da produção de lágrima ou evaporação aumentada que resulta em uma perda de água da película Iacrimal e um aumento na osmolaridade da película lacrimal. Esse aumento na osmolaridade da película Iacrimal resulta em uma desidratação osmótica da superfície associada com uma diminuição na densidade das células em taça conjuntivais. Recentemente tem sido mostrado que pacientes com secura nos olhos têm colonização bacteriana aumentada das suas pálpebras, e que a bactéria encontrada nesses pacientes diminui a proliferação das células em taça conjuntivais na cultura do tecido (Graham et al Analysis of Bacterial Flora in Dry Eye1 Ocular Superfície, 3(1):S68, 2005). Pacientes com secura no olho são também conhecidos como sendo mais propensos a infecções oculares, especialmente no contexto do uso das lentes de contato (Lemp MA "O portador de lentes de contato dos olhos está correndo risco?", Cornea (United States), 1990, 9 Suppl 1 pS48-50; discussão S54).

Tampões pontuais é um tratamento freqüentemente usado para secura no olho. Eles fornecem alívio sintomático para os pacientes com secura no olho, reduzem a osmolaridade elevada da película lacrimal na doença e reduzem a coloração da superfície ocular. Um problema com tampões pontuais é que eles são freqüentemente colonizados por não comensais patogênicos, incluindo Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus, que podem causar sintomas e aumentar o risco de infecções oculares (Soukiasian SH Microbiology of Explanted Punctal Plugs, ARVO Annual Meeting, Program#/Poster# 4981/B305, April 29, 2004; Sugita J, Yokoi N, Fullwood NJ, et al. "The detection of bactéria and bacterial biofilms in punctal plug holes", Cornea (United States), maio de 2001, 20(4) p362-5).

Outra condição de significância clínica é a inflamação das pál- pebras e da superfície do olho. Esse distúrbio inflamatório, que freqüentemente resulta em sintomas de irritação do olho, é chamado de blefarite. Em um estudo envolvendo 332 pacientes com blefarite e 160 de controles normais, mostrou-se que os pacientes com blefarite têm maior quantidade de bactérias em suas pálpebras em comparação com os de controles normais. Essa descoberta se aplica a pacientes com ambas, anterior e posterior, blefarites (Groden LR, Murphy B, Rodnite J, et al. "Lid flora in blefarite", Cornea (United States), Jan 1991, 10(1) p50-3). O supercrescimento bacteriano tem tido hipóteses formuladas para contribuir para os sintomas de blefarite pela produção de Iipases e estearases bacterianas que hidrolisam a cera, e ésteres de esterol no "meibum", criando ácidos graxos livres que são irritantes para o tecido ocular e podem afetar a estabilidade da película Iacrimal (Ta CN, Shine WE1 McCuIIey JP1 et al. 'Effects of minocycline on the ocular flora of pacientes with acne rosacea or seborrheic blefarite', Cornea (United States), Aug 2003, 22(6) p545-8). Além disso, esses ácidos graxos podem promover a inflamção da pálpebra e da superfície ocular (Shine WE, McCuIIey JP, Pandya AG 'Minocycline effect on meibomian gland Iipids in meibomianitis pacientes', Exp Eye Res (England), Apr 2003, 76(4) p417-20).

A higiene dos olhos, incluindo a limpeza da pálpebra do olho, tem sido recomendada para todas essas condições ou circunstâncias pelos oftalmologistas. Muitos dos tratamentos disponíveis para as condições de secura no olho são formuladas como gotas ou unguentos. Entretanto, gotas e unguentos têm um tempo de validade limitado uma vez abertos como eles comumente se tornar infectados com crescimento microbiano.

O dióxido de cloro tem sido chamado de o biocida ideal. A despeito das muitas vantagens do dióxido de cloro, o uso comercial é limitado porque ele é um gás altamente reativo, instável que é solúvel em, e se decompõe na água. Veja, por exemplo, Patente U.S. N0 4,941 ,917. Dessa maneira, ele tem até agora sido necessário para gerar soluções de dióxido de cloro aquosas no sítio para uso imediato ou uso dentro de um tempo relativamente curto (tipicamente menos de uma hora). Devido a essas limitações, o dióxido de cloro não atendeu o seu potencial todo como um agente antimicrobiano. Similarmente, outros agentes antimicrobianos oxidantes tais como perborato de sódio têm sido subutilizados por causa de questões de estabilidade e eficácia.

Dessa maneira, existe uma necessidade de uma preparação que pode ser usada, por exemplo, em ou em torno do olho e é estável para períodos de tempo prolongados. Sumário da Invenção

A invenção do momento está baseada na descoberta de que as preparações para os cuidados com os olhos compreendem um agente antimicrobiano oxidante, como o dióxido de cloro e um composto heterocíclico, isto é, difilina, exibem efeitos benéficos. Por exemplo, as preparações que compreendem dióxido de cloro e difilina são úteis para o tratamento e prevenção de infecção microbiana e conservação de produtos oftálmicos. A adição de dióxido de cloro e um composto heterocíclico conservam a solução por períodos de tempo prolongados. Além do mais, essas preparações resistem ao crescimento microbiano antes e depois de serem usadas por um indivíduo.

Por conseguinte, em pelo menos um aspecto, a invenção do momento prove preparações para os cuidados com os olhos compreendendo dióxido de cloro e um composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano da preparação de dióxido de cloro. Os compostos heterocíclicos podem ser compostos bicíclicos tais como uma xantina. Compostos heterocíclicos exemplares incluem compostos bicíclicos tais como cafeína, teofilina, difilina, teobromina, xantina, xantinol, metilxantina, e aminofilina. Em uma modalidade preferida, o composto bicíclico é difilina. O dióxido de cloro nas preparações pode estar presente em

uma concentração de cerca de 25-125 ppm, cerca de 50-75 ppm, ou cerca de 60 ppm. O composto heterocíclico tal como difilina pode estar presente em 0,10-10%, 0,25-5% ou cerca de 1% a cerca de 3%.

As preparações da invenção incluem soluções, cremes, pastas, unguentos e géis. As preparações podem ser, por exemplo, preparações tópicas que são aplicadas no olho, pálpebra, cílios e margem do olho. Adicionalmente, as preparações são eficazes contra bactérias, fungos, e/ou levedura. As preparações da invenção podem ainda compreender um veículo farmaceuticamente aceitável.

Em uma modalidade exemplar, a preparação é uma solução. As soluções da invenção podem ter uma osmolaridade de 180 mOsm/Kg ou menos, ou 165 mOsm/Kg ou menos.

Uma preparação exemplar da invenção é uma preparação de cuidado com os olhos que tem uma osmolaridade de 165 mOsm/Kg ou menos e ua concentração de dióxido de cloro de cerca de 50- 75 ppm. Outra preparação exemplar da invenção compreende uma

solução compreendendo dióxido de cloro e difilina, em que o dióxido de cloro está presente em cerca de 55-75 ppm e a preparação tem uma osmolaridade total de 165 mOsm/Kg ou menos.

Ainda outra preparação exemplar da invenção compreende, um colírio para o olho que compreende dióxido de cloro e difilina, em que o dióxido de cloro está presente em cerca de 55-75 ppm e a preparação tem uma osmolaridade total de 165 mOsm/Kg ou menos.

A invenção do momento também provê métodos de usar as preparações descritas. Por exemplo, a invenção provê um método de prevenir ou tratar infecção microbiana em um sujeito aplicando as preparações descritas aqui a seguir para a área infectada em uma quantidade suficiente para prevenir ou tratar uma infecção microbiana em um sujeito. Infecções microbianas exemplares incluem infecções bacterianas, fungais e por levedura. A invenção também provê métodos de prevenir ou tratar uma

infecção da superfície ocular em um sujeito aplicando a preparação para uma superfície ocular em uma quantidade suficiente para prevenir ou tratar uma infecção da superfície ocular no sujeito. Uma infecção exemplar da superfície ocular inclui conjuntivite bacteriana. A invenção também provê um método para reduzir o risco de infecção em pacientes, incluindo pacientes de secura no olho que usam lentes de contato.

A invenção também provê métodos de reduzir o risco de

infecção do olho em um paciente com cirurgia ocular, aplicando as preparações descritas aqui a seguir em uma pálpebra ou superfície ocular antes do procedimento cirúrgico em uma quantidade suficiente para reduzir o risco de infecção no olho de um paciente cirúrgico. De acordo com este método, a preparação é aplicada diversas vezes durante um número de dias que antecedem a cirurgia.

A invenção também provê métodos de redução do risco de infecção do olho em um sujeito usando um tampão pontual aplicando a preparação descrita aqui a seguir para a superfície do olho, a margem da pálpebra, a pálpebra ou os tampões pontuais, ou em uma película Iacrimal em uma quantidade suficiente para reduzir o risco de infecção no olho do sujeito que usa tampões pontuais.

A invenção também provê métodos para tratar ou reduzir o risco de infecção em um sujeito aplicando a preparação tópica descrita aqui a seguir para a área que está infectada ou em risco de tornar-se infectada em uma quantidade suficiente para tratar ou reduzir o risco de infecção.

A invenção também provê métodos de redução da colonização ou de tratar uma infecção do tecido mucosal ou do tecido epitelial em um sujeito aplicando a preparação descrita aqui a seguir para o tecido mucosal ou para o tecido epitelial em uma quantidade suficiente para tratar a infecção no sujeito.

A invenção também provê um método de tratar a secura dos olhos em um sujeito, aplicando a preparação de cuidados dos olhos descrita aqui a seguir para o olho ou pálpebra em uma quantidade suficiente para tratar a secura do olho no sujeito.

A invenção também provê um método de aumentar a densidade das células em taça e a expressão da mucina da membrana epitelial mucosal em um sujeito, aplicando a preparação de cuidados dos olhos descrita aqui a seguir, para o olho em uma quantidade suficiente para aumentar a densidade das células em taça e a expressão da mucina da membrana epitelial mucosal. Esse aumento pode ser determinado usando rosa de Bengala ou outras técnicas de coloração vital. Na secura do olho, a superfície ocular tem menos coloração com uma aumento em densidade das células em taça conjuntivas e a expressão da mucina da membrana epitelial mucosal.

A invenção também provê métodos para esterilizar uma superfície botando a superfície em contato com a preparação descrita aqui a seguir, ou incorporando dentro da superfície a preparação descrita aqui a seguir, em uma quantidade suficiente para esterilizar a superfície. Superfícies exemplares incluem superfícies em um corpo, um instrumento médico ou um dispositivo médico. Um dispositivo médico exemplar inclui lentes de contato.

A invenção também provê kits para o tratamento ou prevenção de uma infecção microbiana, compreendendo a preparação descrita aqui a seguir e a instrução para uso. A invenção também provê kits para o tratamento de um distúrbio ocular compreendendo a preparação antimicrobiana descrita aqui a seguir e a instrução para uso. Os kits podem ainda compreender um aplicador. Descrição Detalhada da Invenção

No momento, existe uma necessidade de composições e métodos para prevenir o crescimento microbiano e tratar infecções microbianas. Em particular, existe uma necessidade de composições para prevenir o crescimento microbiano em produtos para uso nos olhos ou na área ao redor dos olhos. Em particular, existe a necessidade de composições que permaneçam livres de crescimento microbiano por períodos de tempo prolongados, isto é, composições que contenham um conservante que inibe o crescimento microbiano e que não irrita a área na qual é aplicado. Preferivelmente, as composições vão conter uma composição antimicrobiana que vai matar ou retardar o crescimento de micróbios (por exemplo, uma composição bactericida ou bacteriostática). Em certas modalidades, as composições são também úteis para tratar ou prevenir infecção da, por exemplo, pele. Em modalidades adicionais, as preparações da invenção são úteis para tratar ou prevenir infecção nas superfícies, dispositivos médicos e instrumentos médicos. Definições

A invenção será descrita com referência às definições a seguir que, por conveniência, são reunidas aqui.

O termo "limpar uma pálpebra" é usado aqui a seguir para descrever o ato de significativamente reduzir a quantidade de poeira, fragmentos ou bactérias de uma pálpebra.

O termo "secura dos olhos" é conhecido na técnica como uma condição de um sujeito que tem uma perda de água da película Iacrimal devido a uma diminuição na produção de lágrimas ou um aumento na evaporação da película lacrimal. A produção de lágrima pode diminuir a partir de uma doença da glândula lacrimal, incluindo, mas não limitado a, aquela que ocorre na síndrome de Sjogren, ou de qualquer coisa que diminui a sensação da córnea. Exemplos de condições que diminuem a sensação da córnea incluem, mas não estão limitados a, diabetes, uso de lentes de contato a longo prazo, e cirurgia da córnea, incluindo cirurgia do olho de LASIK. A evaporação da película lacrimal pode aumentar a partir de uma disfunção da glândula no meibum, que se manifesta pela estenose ou fechamento dos orifícios da glândula no meibum, ou na presença de grandes extensões de fissuras palpebrais. As causas da grande extensão de fissuras palpebrais incluem, mas não são limitadas a, variação biológica normal e doença ocular da tireóide. A secura dos olhos é muitas vezes uma doença relacionada à idade, e pode também ser causada por deficiência dietética de ácidos graxos ômega-3 essenciais. A secura dos olhos é associada com supercolonização bacteriana das pálpebras. O termo "pálpebra" como usado aqui a seguir, inclui a superfície

conjuntival tarsal, ambas as superfícies, interior e exterior, da pálpebra, a margem da pálpebra, as glândulas e ao redor das margens da pálpebra, os folículos pilosos da pálpebra, os cílios, e a pele periocular que circunda o olho.

O termo "distúrbio inflamatório da superfície do olho," como usado aqui a seguir, pretende incluir distúrbios associados com a inflamação da superfície do olho. Esses distúrbios incluem secura do olho, em que a inflamação da superfície ocular tem sido demonstrada como também ambas, blefarite anterior e posterior. Na blefarite anterior, a inflamação é centrada ao redor dos cílios. A blefarite posterior ou meibomite é associada com a inflamação da conjuntiva tarsal e bulbar, e complicada por hordéolos e chalazios, e leva à disfunção da glândula no meibum. Ambas as blefarites, anterior e posterior, são associadas com supercolonização bacteriana das pálpebras.

Modelos animais com secura do olho e distúrbio inflamatório da superfície do olho combinados têm produzido, e podem ser usados para testar a eficácia das preparações antimicrobianas providas aqui a seguir. Por exemplo, um modelo de coelho para meibomianite e disfunção da glândula no meibum foi desenvolvido. Nesse modelo animal, o fechamento do orifício da glândula no meibum resulta no desenvolvimento de inflamação ao redor das glândulas no meibum (isto é, meibomianite), inflamação nas pálpebras (blefarite), inflamação na conjuntiva (conjuntivite) e um aumento na osmolaridade da película Iacrimal e uma diminuição nos níveis de glicogênio corneal e células em forma de taça contendo muco conjuntival característicos da doença de secura na superfície dos olhos.

O termo "distúrbio da pálpebra" é definido como um distúrbio que resulta em inflamação dos cílios e/ou folículos dos cílios e/ou margens da pálpebra, ou inflamação das glândulas produtoras de lipídeo que estão localizadas na pálpebra, incluindo meibomianite e blefarite anterior. Distúrbios da pálpebra exemplares incluem, mas não são limitados àqueles causados por infecção bacteriana. O termo "distúrbio ocular" como usado aqui a seguir, inclui

distúrbios da superfície ocular superfície, distúrbios do globo ocular, distúrbios da pele periocular, e distúrbios da pálpebra. Distúrbios oculares exemplares incluem, mas não são limitados a, disfunções da película lacrimal, inflamação das margens da pálpebra devido à infecção bacteriana, infecções dentro do olho conhecidas como endoftalmite, e secura do olho.

O termo "tratamento" como usado aqui a seguir é definido como tratamento profilático (por exemplo, uso preventivo diário) ou tratamento terapêutico (por exemplo, um tratamento único ou um curso de tratamento) de um sujeito com ou em risco de distúrbio ocular, ou com uma condição de pele ou orelha, que são associadas com ou exacerbadas por infecções ou colonização bacteriana. O termo "preparação ou preparação antimicrobiana" como

usado aqui a seguir inclui composições que compreendem um composto antimicrobiano oxidante, por exemplo, dióxido de cloro, e um composto heterocíclico que estabiliza a preparação. A preparação da invenção pode ser uma solução, creme, pasta, unguento, gel ou similares. As preparações da invenção podem ser aplicadas a, por exemplo, pele, olho, ou pálpebra.

O termo "composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano da preparação do dióxido de cloro "destina-se a incluir os compostos heterocíclicos que, quando combinados com dióxido de cloro, proveem efeitos benéficos. Por exemplo, o composto heterocíclico pode aumentar a média de vida do dióxido de cloro na preparação, pode prover efeitos de tratamento benéficos, pode aumentar a eficácia da preparação etc. Em uma modalidade exemplar, o composto heterocíclico melhora o efeito bactericida do dióxido de cloro nas composições, dessa maneira prolongando o tempo que a composição está livre de crescimento microbiano. Compostos heterocíclicos exemplares são xantenos. Compostos heterocíclicos exemplares específicos incluem cafeína, teofilina, difilina, teobromina, xantina, xantinol, metilxantina, e aminofilina. Em uma modalidade preferida, o composto heterocíclico usado nas preparações da invenção é difilina.

Como usado aqui a seguir a linguagem "veículo

farmaceuticamente aceitável" é destinada a incluir qualquer e todos os solventes, agentes, e similares, compatíveis com a administração farmacêutica. O uso de tais meio e agentes para substâncias farmaceuticamente ativas é bem conhecido na técnica. Exceto na medida em que quaisquer meios convencionais ou agentes sejam incompatíveis com as preparações antimicrobianas descritas aqui a seguir, tais meios podem ser usados nas composições da invenção. Composições farmacêuticas apropriadas para aplicação tópica preferivelmente tomam a forma de uma gota, solução, unguento, creme, loção, pasta, gel, spray, aerossol, ou óleo. Veículos exemplares que podem ser usados incluem água, carboximetilcelulose, gelatina de petróleo, óleo mineral, lanolina, polietileno glicóis, alcoóis, e combinações de dois ou mais dos mesmos. Métodos e Composições

Saúde efetiva e limpeza de um olho dependem da capacidade de controlar o nível de micróbios. Por conseguinte, as composições que têm utilidade prolongada uma vez abertas, isto é, que resistem ao crescimento microbiano, são úteis para o tratamento dos olhos.

A presente invenção provê composições e métodos, que diminuem, por exemplo, significativamente diminuem, o número de micróbios presentes em ou ao redor, por exemplo, de um olho, ou em materiais usados em ou ao redor do olho. De acordo com isso, a invenção é dirigida para uma preparação

compreendendo uma concentração antibacteriana de dióxido de cloro e um composto heterocíclico que melhoram o efeito antibacteriano da preparação de dióxido de cloro. A preparação pode também conter um veículo ou água farmaceuticamente aceitável. A preparação pode ser usada como um conservante para materiais usados em conjunto com o olho tais como colírios, ou podem ser especificamente formuladas para o tratamento de um distúrbio particular, por exemplo, um distúrbio ocular selecionado como blefarite, secura nos olhos, conjuntivite infecciosa, uma infecção do ouvido, ou uma infecção da pele. A preparação pode também ser usada para esterilizar, por exemplo, instrumentos cirúrgicos, dispositivos médicos residentes, superfícies e similares. A preparação pode também ser incorporada na superfície de dispositivos médicos para liberação sustentada da preparação. A pessoa versada na técnica entenderá que a preparação da invenção pode ser preparada na forma de gotas, solução, pasta, creme, espuma, gel, unguento ou similares, ou incorporada aos veículos de liberação sustentada tais como polímeros, Iipossomas e microcápsulas de liberação sustentada.

Há diversos geradores comerciais para produzir o dióxido de cloro de cloreto/cloro. Geradores apropriados são descritos nas Patentes Norte Americanas Nos 4.247.531; 5.204.081; 6.468.479; e 6.645.457, cujas descrições são incorporadas aqui a seguir por referência. O dióxido de cloro pode ser produzido com alta eficiência

reduzindo o clorato de sódio em uma solução de ácido forte com um agente de redução apropriado (por exemplo, peróxido de hidrogênio, dióxido de enxofre, ou ácido clorídrico):

20103" + 20" + 4H+ 2CI02 + Cl2 + 2H20 Alternativamente, o dióxido de cloro pode ser feito por um dos

três métodos que usam clorito de sódio: O clorito de sódio - método de gás de cloro (2 NaCIO2 + Cl2 2 CIO2 + 2 NaCI); o clorito de sódio - método de hipoclorito (2 NaCIO2 + 2 HCI + NaOCI -> 2 CIO2 + 3 NaCI + H2O); ou o clorito de sódio - método de ácido clorídrico (5 NaCIO2 + 4 HCI 5 NaCI + 4 CIO2). Finalmente, o dióxido de cloro pode ser produzido por eletrólise de uma solução de clorito (NaCIO2 + H2O -» CIO2 + NaOH + 1/2 H2). As preparações da invenção compreendem entre cerca de 25-200 ppm de dióxido de cloro, cerca de 50-150 ppm de dióxido de cloro, cerca de 50-100 ppm de dióxido de cloro, ou cerca de 50-75 ppm de dióxido de cloro. Para tratamento de infecção, valores mais altos podem ser usados.

O composto heterocíclico tal como difilina pode estar presente em 0,10-10%, 0,25-5% ou cerca de 1% a cerca de 3%.

Em certas modalidades, a preparação antimicrobiana é uma solução aquosa contendo dióxido de cloro como descrito aqui a seguir. As soluções da invenção podem ter uma osmolaridade de, por exemplo, cerca de 180 mOsm/Kg, cerca de 175 mOsm/Kg ou menos, cerca de 170 mOsm/Kg, cerca de 165 mOsm/Kg ou menos, cerca de 160 mOsm/Kg ou menos, ou cerca de 155 mOsm/Kg ou menos.

Uma preparação exemplar da invenção é uma preparação que tem uma osmolaridade de 165 mOsm/Kg ou menos e uma concentração de dióxido de cloro de cerca de 50- 75 ppm.

As preparações podem ainda incluir tampões, solubilizadores,

agentes de aumento da viscosidade, conservantes, agentes anti- inflamatórios e sais.

Em uma modalidade preferida, a invenção provê um colírio compreendendo dióxido de cloro e composto heterocíclicos. O colírio inclui um equilíbrio de eletrólitos encontrados em um fluido Iacrimal natural requerido para manutenção, função e reparo da superfície ocular. Esses eletrólitos estão presentes em quantidades e proporções suficientes para manter ou restaurar as células em taça conjuntivas e glicogênio da córnea, dessa maneira mantendo a lubrificação mediada por muco- e o potencial para cura normal. Isso permite a aplicação tópica da preparação para superfícies oculares preferivelmente sem substancialmente reduzir a densidade das células em taça contendo muco conjuntival ou níveis de glicogênio da córnea. As células em taça formam uma camada crítica da película lacrimal, provendo a superfície do olho com lubrificação, e desempenhando um papel importante no sistema que retém matéria estranha que pode entrar no olho, e prontamente remove-a. O glicogênio da córnea é a fonte de energia para a etapa deslizante na cura do ferimento da córnea. Sua preservação é, portanto, importante na manutenção da saúde das superfícies oculares. As composições dos colírios da invenção incluem, em adição ao

dióxido de cloro e um composto heterocíclico, por exemplo, difilina, um equilíbrio de eletrólitos naturalmente encontrados no fluido da lágrima. Esses eletrólitos principalmente incluem grandes quantidades de sódio e cloreto, e menos quantidades de potássio e bicarbonato. A preparação pode também conter outros elementos de

ocorrência natural de fluido de lágrima, tais como proteínas, enzimas, lipídeos e metabólitos como descrito na Patente U.S. N0 4.911.933. Tipicamente, em uma preparação isotônica, o potássio está presente em uma concentração de cerca de 22,0 a 43,0 mM/1, o bicarbonato está presente em uma concentração de cerca de 29,0 a 50,0 mM/1, o sódio está presente em uma concentração de cerca de 130,0 a 140,0 mM/1, e o cloreto está presente em uma concentração de cerca de 1 18,0 a 136,5 mM/1, ou os componentes de eletrólitos podem estar diluídos para criar formulações hipotônicas em que as proporções entre as concentrações de eletrólitos permanecem inalteradas.

As composições de colírios podem ainda opcionalmente incluir cálcio, magnésio e fosfato. Em tais modalidades, em preparações isotônicas, o cálcio está preferivelmente presente em uma concentração de cerca de 0,5 a 2,0 mM/1, o magnésio está preferivelmente presente em uma concentração de cerca de 0,3 a 1,1 mM/1, e o fosfato está preferivelmente presente em uma concentração de cerca de 0,8 e 2,2 mM/1. Para formulações hipotônicas, os componentes de eletrólitos podem ser diluídos para criar formulações hipotônicas em que as variações entre as concentrações de eletrólitos permanecem não trocadas.

Da mesma forma, em uma modalidade particular, a invenção provê uma solução oftálmica demonstrada na Tabela 2 dos Exemplos. O pH da preparação oftálmica geralmente varia de cerca de 7,0

a 8,0, como medido, por exemplo, por um pH de Fisher Accumet Modelo 600. Entretanto, essa variação do pH não necessita ser rigidamente aderida, e pode ser desejável alterar o pH fora dessa variação, por exemplo, para melhorar a penetração do fármaco oftálmico através da superfície ocular. Em vista dos ensinamentos providos aqui a seguir, as pessoas versadas na técnica podem empregar outras variações de pH.

As composições da invenção para os cuidados dos olhos podem ser aplicadas na superfície ocular através de vários métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, a preparação pode ser aplicada topicamente para a superfície ocular como colírios ou unguentos. A preparação pode também ser aplicada usando um cálice para o de maneira que o olho seja banhado. A preparação pode também ser aplicada usando um dispositivo de infusão contínua ou quase contínua para irrigação e/ou umidificação da superfície ocular e/ou distribuição de fármaco. A preparação pode também ser aplicada pela liberação a partir de um veículo de liberação sustentada tal como um polímero, um Iipossoma ou uma microcápsula de liberação sustentada. A preparação pode também ser aplicada por dispositivos que atomizam soluções, como requerido, sobre a superfície do olho.

A invenção é ainda dirigida para métodos de usar as composições descritas acima para tratar um sujeito, por exemplo, um sujeito que tem ou está correndo o risco de ter uma infecção, por exemplo, uma infecção do olho ou da pele. O método compreende a etapa de aplicação da preparação antimicrobiana descrita aqui a seguir para o sítio da infecção, ou sítio em que a infecção é provável de ocorrer, ou o sítio a partir do qual uma infecção pode se originar, durante um tempo e sob condições eficazes para reduzir a quantidade de bactéria presente. Em uma modalidade específica, o tempo e as condições selecionadas resultam em pelo menos cerca de 1 Iog de redução em unidades formadoras de colônias das bactérias infecciosas depois, e um minuto de exposição à preparação antimicrobiana. Em outras modalidades, a aplicação da preparação antimicrobiana por um minuto resulta em um Iog de pelo menos cerca de 2, 3, 4 ou 5 de redução de unidades formadoras de colônias.

A invenção também provê métodos de tratar distúrbios oculares tais como blefarite, secura do olho, distúrbios inflamatórios do olho, conjuntivite infecciosa, e outros distúrbios oculares que resultam de ou são complicados por colonização ou infecção bacteriana do olho ou do tecido que circunda o olho, aplicando as preparações providas aqui a seguir para o olho e/ou tecido que circunda o olho de um sujeito.

A invenção também provê métodos de tratar a infecção da superfície ocular aplicando as preparações antimicrobianas providas aqui a seguir para o olho de um sujeito. Infecções exemplares que podem ser tratadas com as preparações antimicrobianas providas aqui a seguir incluem conjuntivite, por exemplo, conjuntivite infecciosa e úlceras da córnea.

A invenção também provê métodos de prevenir uma infecção do olho em um sujeito que tem uma cirurgia ou procedimento no olho. Esses métodos devem compreender aplicar a preparação antimicrobiana no olho durante vários dias que antecedem a cirurgia ou procedimento para reduzir ou eliminar o risco de desenvolver uma infecção durante a cirurgia ou procedimento. Procedimentos exemplares incluem cirurgia de catarata ou LASIK.

A invenção também provê métodos para manter contagens baixas das colônias bacterianas sobre tampões pontuais que foram colocados em pacientes para tratamento. Tampões pontuais exemplares incluem aqueles fabricados por Odyssey Medicai (Memphis, TN), e Eagle Vision (Memphis, TN).

A aplicação de preparações antimicrobianas, demonstradas aqui a seguir, pode ser através de qualquer um dos diversos métodos reconhecidos na técnica. Por exemplo, a aplicação pode ser por um aplicador, tal como Qtip ou compressa, por gotas de um conta-gotas ou vidro, ou usando um dedo ou dedos.

As preparações antimicrobianas da invenção podem ser aplicadas uma ou mais vezes por dia, e podem ser deixadas nos seus lugares tanto quanto seja necessário, dependendo da indicação pretendida. O número de dias que um sujeito aplica a preparação antimicrobiana, e a duração da aplicação, dependerá da previsão de tratamento, ou do local e gravidade da, e eficácia das preparações sobre uma dada infecção. Em certas modalidades, a preparação antimicrobiana pode ser aplicada por um período de 30 segundos, 45 segundos, 1 minuto, 2 minutos, 3 minutos, 4 minutos, 5 minutos, ou mais tempo. A preparação antimicrobiana pode ser aplicada a partir de um veículo de liberação sustentada tal como um polímero, um Iipossoma ou uma microcápsula de liberação sustentada. O médico com conhecimento comum será capaz de efetivamente prescrever um regime de tratamento que será eficaz para tratar ou prevenir uma infecção em um indivíduo.

Os métodos descritos acima podem ainda incluir uma etapa de enxaguar depois de um período de exposição recomendado. Essa etapa preferivelmente compreende um simples enxaguar com água. A preparação antimicrobiana pode ser enxaguada a partir da área para a qual ela foi aplicada com água abundante depois da aplicação, por exemplo, com a mão, um dedo ou qualquer compressa úmida ou pano apropriado para esse fim.

Em modalidades adicionais, a invenção provê desinfetar uma superfície. Superfícies exemplares incluem aquelas em instrumentos médicos, em instalações médicas, em dispositivos médicos, e aquelas em uma casa, por exemplo, em uma cozinha ou um banheiro. Aplicações Comerciais

Os métodos e as composições da invenção encontram numerosas aplicações comerciais que poderão beneficamente ser utilizadas de conformidade com os métodos e composições intensificando as aplicações antibacterianas. Dessa maneira, a invenção inclui um kit compreendendo as composições da invenção, por exemplo, um kit para o tratamento de uma infecção, por exemplo, uma infecção ocular, um distúrbio ocular e a higiene da pálpebra. Os kits, opcionalmente, incluem um aplicador. A preparação pode ser em forma de gotas, solução, pasta, creme, espuma, gel, ou unguento, ou os similares, quando incluídos nos kits da invenção.

O kit pode opcionalmente ser embalado com instruções para uso. O kit pode opcionalmente conter um dispersador ou aplicador, por exemplo, uma esponja, para aplicar as preparações antimicrobianas da invenção para a área infectada de um sujeito. Exemplos

Um estudo foi conduzido para avaliar a estabilidade de três formulações diferentes das preparações de cuidados com os olhos compreendendo dióxido de cloro. As formulações básicas foram preparadas ou com 0,005% de dióxido de cloro sozinho, ou 0,005% de dióxido de cloro e 2,5% de difilina. O estudo incorporou uma avaliação de cada formulação com e sem esterilização de autoclave no procedimento de fabricação.

A análise consistiu em ambos, o teste de USP Antimicrobial Effectiveness (eficácia preservativa) e o teste analítico durante um espaço de tempo de três meses, em três condições de armazenamento: 5°C, 25°C/60% de umidade (RH), e 40°C/75% de RH. O teste analítico para o conteúdo de dióxido de cloro, pH, e osmolaridade foi realizado a cada duas semanas durante três meses. A Eficácia Antimicrobiana foi avaliada em uma base mensal nas formulações que atenderam os critérios de aceitação para uma Categoria de artigo 1 no teste de Eficácia Antimicrobiana inicial.

O teste analítico das amostras de difilina/dióxido de cloro mostrou um desvio do pH para cima em ambas as formulações autoclavadas e não-autoclavadas.

O teste inicial da Eficácia Antimicrobiana indicou que ambas as amostras de difilina/dióxido de cloro, autoclavadas e não-autoclavadas, atenderam os critérios de USP na formulação inicial. Amostras da formulação de difilina/dióxido de cloro autoclavadas foram então testadas depois de quatro meses (todas as condições) e atenderam os critérios de USP para Eficácia Antimicrobiana.

Nas formulações de dióxido de cloro sem difilina, a concentração de dióxido de cloro não mostrou tendência para clarear. As amostras da formulação de dióxido de cloro sozinho não atenderam os critérios de aceitação para o teste de Eficácia Antimicrobiana durante o teste inicial e essa porção do estudo foi descontinuada.

Durante a execução do estudo inicial, um estudo confirmatório foi realizado para confirmar o passo dos resultados da Eficácia Antimicrobiana para a amostra de difilina/dióxido de cloro autoclavada. Em adição a essa amostra, uma formulação de dióxido de cloro autoclavada e uma fórmula baseada no exemplo 5, Patente US 6.024.954 (consistente com Refresh) foram preparadas. Todas as três foram testadas usando o teste de Eficácia Antimicrobiana da USP, com difilina/dióxido de cloro e a formulação baseada no exemplo 5, Patente US 6.024.954 (consistente com Refresh) passados através de 28 dias, e a amostra de dióxido de cloro sozinho novamente falhou no I0 dia. Introdução

As variações das formulações a seguir foram preparadas para

essa avaliação de estabilidade: Tabela I: Formulação de Dióxido de cloro

Produto Químico Percentual CMC 0,25% Cloreto de Sódio 0,22218% Cloreto de Potássio 0,07315 Cloreto de Magnésio, Hexaidrato 0,005% Fosfato de Sódio, Monobásico, Monoidrato 0,0056% Cloreto de Cálcio, Diidrato 0,00644% Ácido Bórico 0,12555% Borato de Sódio, Decaidrato 0,00008% Bicarbonato de Sódio 0,109887% Dióxido de Cloro 0,005%

Tabela 2: Formulação de Difilina/Dióxido de cloro

Produto Químico Percentual CMC 0,25% Cloreto de Sódio 0,11542% Cloreto de Potássio 0,038% Cloreto de Magnésio, Hexaidrato 0,0026% Fosfato de Sódio, Monobásico, Monoidrato 0,00291% Cloreto de Cálcio, Diidrato 0,0035% Ácido Bórico 0,06522% Borato de Sódio, Decaidrato 0,00004% Bicarbonato de Sódio 0,05708% Dióxido de Cloro 0,005% Difilina 2,5%

Cada fórmula foi preparada em duplicata, com uma fórmula preparada sem autoclave e a outra preparada com autoclave.

Quando cada formulação e teste analítico inicial foi concluída, as 10

15

amostras foram submetidas à microbiologia para o Teste de Eficácia Antimicrobiana inicial. Os organismos estimulados foram S. aureus, P. aeruginosa, E. coli, C. albicans, e A. niger.

O restante das soluções em massa foi derramado em vidros de polietileno de baixa densidade (LDPE) e colocado em câmaras de estabilidade apropriada. A formulação de difilina/dióxido de cloro autoclavada teve uma prova adicional realizada em aproximadamente quatro meses para correlacionar com o último teste de Eficácia Antimicrobiana.

Durante a execução do estudo inicial, um estudo confirmatório foi realizado para confirmar a etapa dos resultados da Eficácia Antimicrobiana para amostra de difilina/dióxido de cloro autoclavada. Em adição a essa amostra, uma formulação de dióxido de cloro autoclavada foi preparada como também uma fórmula baseada no exemplo 5, Patente US 6.024.954 (consistente com Refresh) foram preparadas (formulação na Tabela 3). Tabela 3: Formulação baseada no exemplo 5, Patente US 6.024.954

Produto Químico Percentual CMC 0,50% Cloreto de Sódio 0,62% Cloreto de Potássio 0,14% Cloreto de Magnésio, Hexaidrato 0,006% Cloreto de Cálcio, Diidrato 0,02% Ácido Bórico 0,20% Dióxido de Cloro 0,005%

As amostras de cada fórmula foram submetidas a teste para Eficácia Antimicrobiana de USP. Equipamento

325=/-2,5°C lncubador, VWR S/N 1000590

22,5±/-2,5°C lncubador, Forma S/N 32889120 Espectrofotômetro, Espectrônico 20DT, S/N 3DU9337006 Centrífuga, ID 34440967 pH Meter, ID 0157189 Osmômetro, ID T09390 Materiais

1. Staphylococcus aureus, ATCC 6538

2. Pseudomonas aeruginosa, A TCC 9027

3. Escheriehia coil, ATCC 8739

4. Candida albieans, A TCC 10231

5. Aspergillus niger, ATCC 16404

6. Ágar de Digerir Caseína de Soja, (SODA)

7. Ágar de Dextrose de Sabouraud, (SDA)

8. Caldo de Neutralizar D/E, (DEB)

9. Solução Volumétrica de 0,1N Tiossulfato de Sódio

10. Iodeto de Potássio

11. Solução Indicadora de Amido

12. 2,5N de Ácido Clorídrico Experimentos

Depois de compor as seis formulações, as amostras foram

submetidas ao teste da Eficácia Antimicrobiana USP inicial por USP e SOP- OOI 81. Todas as amostras de teste foram estimuladas com aproximadamente 1,0x10 a 1,0x1o6 cfu/mT, de S. aureus ATCC 6538, P. aeruginosa ATCC 9027, E. coli ATCC 8739, C. albieans. ATCC 10231 e A.

niger, ATCC 16404. Os organismos foram inoculados em um tubo de centrífuga de 50 mL contendo 10 mL de amostras de teste em Tempo=O. Um (1) mL foi aliquotado de cada tubo de centrífuga pelas 4 semanas seguintes. A redução do logo foi determinada pelo método de contagem de placas depois de 7, 14, 21 e 28 dias por diluição em DEB de 10"1 a 10"4 para

bactéria/levedo e 10"1 a 10" para mofo. As placas foram depois derramadas com o meio apropriado e incubadas. As placas bacterianas foram derramadas com SCDA e incubadas a 32,5±2,5°C. Placas e levedo/mofo foram derramadas com SDA e incubadas a 22,5±2,5°C. Os dados da eficácia antimicrobiana inicial foram revisados antes de qualquer teste

adicional para eficácia antimicrobiana fosse conduzido. Somente fórmulas que tinham preenchido os critérios de aceitação nos testes iniciais passaram além do teste inicial. Os critérios de aceitação de Eficácia Antimicrobiana da USP para a Categoria do item 1 são:

Bactérias- 7 dias - Não menos do que 1,0 de redução

de Iog a partir da contagem inicial 14 dias - Não menos do que 3,0 de redução

de Iog a partir da contagem inicial 21 dias - Nenhuma especificação 28 dias - Nenhum aumento da contagem a partir de 14 em 28 dias Levedo/Mofos - 7 e 14 dias - Nenhum aumento a partir da

contagem inicial

21 dias - Nenhuma especificação

28 dias - Nenhum aumento a partir da

contagem inicial

(Nenhum aumento é definido como NMT 0,5 log-io)

As amostras de cada formulação foram arrancadas de todas as condições de armazenamento a cada duas semanas e analisadas para dióxido de cloro, pH, e osmolaridade. Resultados

As provas analíticas das amostras de difilina/dióxido de cloro

mostraram um desvio do pH para cima em ambas as formulações de autoclave e não-autoclave, com as temperaturas mais altas demonstrando uma mudança de pH mais drástica (veja a Tabela 4). Não houve mudanças aparentes na osmolaridade em todas as amostras em todas as condições de armazenamento (Tabela 5). A concentração de dióxido de cloro nas amostras de difilina/dióxido de cloro mostrou nenhuma tendência clara (Tabela 6).

Para as provas de eficácia antimicrobianas, as formulações iniciais (ambas, autoclavadas e não-autoclavadas), atenderam os critérios de aceitação. Para o último (quarto mês) ponto no tempo, as amostras da formulação autoclavadas em todas as condições de armazenamento foram testadas para a eficácia antimicrobiana. As amostras da formulação autoclavada armazenadas a 5°C, 25°C%60%RH, e 40°C/75%RH todas atenderam os critérios de aceitação para Eficácia Antimicrobiana do USP depois de quatro meses (veja as Tabelas 7-11). Tabela 4: Resultados do pH

BCL273-128A (Difilina/Dióxido de Cloro - não- autoclavados) Armazena- mento Inicial 2 semanas 1 mês 1,5 mês 2 meses 2,5 meses 3 meses 4 meses 5°C 7,69 7,69 7,81 7,87 7,86 7,91 7,85 25°C/60%RH 8,00 8,09 8,15 8,16 8,24 8,20 40°C/75%RH 8,20 8,28 8,34 8,39 8,45 8,36 BCL273-128B (Difilina/Dióxido de Cloro autoclavados) 5°C 7,95 8,13 8,11 8,13 8,11 8,17 8,07 8,19 25°C/60%RH 8,18 8,21 8,24 8,25 8,30 8,20 8,36 40°C/75%RH 8,27 8,32 8,42 8,39 8,44 8,36 8,49

Tabela 5: Resultados da Osmolaridade (mOsm/lg) Formulação de Difilina/Dióxido de cloro

BCL273-128A (Difilina/Dióxido de Cloro - não- autoclavados) Armazena- mento Inicial 2 semanas 1 mês 1,5 mês 2 meses 2,5 meses 3 meses 4 meses 5°C 156 157 157 158 156 153 154 25°C/60%RH 156 154 156 153 152 153 40°C/75%RH 154 155 154 151 151 151 BCL273-128B (Difilina/Dióxido de Cloro autoclavados) 5°C 157 159 160 161 157 157 159 159 25°C/60%RH 157 158 159 156 156 159 158 40°C/75%RH 158 157 158 155 154 155 156 Tabela 6: Resultados de Dióxido de cloro Results (ppm) Formulação de Difilina/Dióxido de Cloro

BCL273-128A (Difilina/Dióxido de Cloro - não- autoclavados) Armazena- mento Inicial 2 semanas 1 mês 1,5 mês 2 meses 2,5 meses 3 meses 4 meses 5°C 59,14 62,52 62,52 59,14 60,83 59,14 59,14 25°C/60%RH 60,83 62,52 58,29 61,67 64,21 60,83 40°C/75%RH 61,67 63,36 59,14 60,83 57,45 59,98 BCL273-128B (Difilina/Dióxido de Cloro autoclavados) 5°C 59,98 62,52 59,14 60,83 62,52 62,52 67,58 65,05 25°C/60%RH 62,52 64,21 60,83 60,83 60,83 66,74 62,52 40°C/75%RH 62,52 65,90 60,83 61,67 61,67 59,14 60,83

Tabela 7: Eficácia Antimicrobiana

Difilina/Dióxido de cloro - não autoclavado, BCL273-128A, T= inicial

Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >4,94 Passa 14 >4,94 Passa 21 >4,94 N/A 28 >4,94 Passa P. aeruginosa 7 >5,07 Passa 14 >5,07 Passa 21 >5,07 N/A 28 >5,07 Passa E. coli 7 >4,96 Passa 14 >4,96 Passa 21 >4,96 N/A 28 >4,96 Passa C. albicans 7 1,06 Passa 14 1,04 Passa 21 2,74 N/A 28 3,58 Passa A. Niger 7 0,91 Passa 14 1,00 Passa 21 1,61 N/A 28 1,05 Passa Tabela 8: Eficácia Antimicrobiana

Difilina/Dióxido de cloro - autoclavado. BCL273-128B, T= inicial

Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >4,94 Passa 14 >4,94 Passa 21 >4,94 N/A 28 >4,94 Passa P. aeruginosa 7 4,47 Passa 14 >5,07 Passa 21 >5,07 N/A 28 >5,07 Passa E. coli 7 >4,96 Passa 14 >4,96 Passa 21 >4,96 N/A 28 >4,96 Passa C. albicans 7 0,34 Passa 14 1,04 Passa 21 1,23 N/A 28 1,97 Passa A. Niger 7 0,85 Passa 14 1,05 Passa 21 1,71 N/A 28 1,64 Passa Tabela 9: Antimicrobial Effectiveness

Difilina/Dióxido de cloro -autoclavado, BCL 273-128B. 40°C/75% RH Armazenagem, T= mês 4___

Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >5,07 Passa 14 >5,07 Passa 21 >5,07 N/A 28 >5,07 Passa P. aeruginosa 7 >5,06 Passa 14 >5,06 Passa 21 >5,06 N/A 28 >5,06 Passa E. coli 7 >5,09 Passa 14 >5,09 Passa 21 >5,09 N/A 28 >5,09 Passa C. albicans 7 0,04 Passa 14 1,80 Passa 21 2,00 N/A 28 2,29 Passa A. Niger 7 1,05 Passa 14 1,08 Passa 21 1,14 N/A 28 1,35 Passa Tabela 10: Eficácia Antimicrobiana

Difilina/Dióxido de cloro - autoclavado BCL 273-128B, 25°C/60% RH Armazenamento, T= mês 4 _ _

Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >5,07 Passa 14 >5,07 Passa 21 >5,07 N/A 28 >5,07 Passa P. aeruginosa 7 4,46 Passa 14 >5,06 Passa 21 >5,06 N/A 28 >5,06 Passa E. coli 7 >5,09 Passa 14 >5,09 Passa 21 >5,09 N/A 28 >5,09 Passa C. albicans 7 0,07 Passa 14 0,98 Passa 21 1,03 N/A 28 1,37 Passa A. Niger 7 0,94 Passa 14 0,94 Passa 21 1,12 N/A 28 1,20 Passa Tabela 11: Eficácia Antimicrobiana

Difilina/Dióxido de cloro - autoclavado BCL 273-128B, 5 0C Armazenamento, T= mês 4

Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >5,07 Passa 14 >5,07 Passa 21 >5,07 N/A 28 >5,07 Passa P. aeruginosa 7 3,81 Passa 14 >5,06 Passa 21 >5,06 N/A 28 >5,06 Passa E. coli 7 >5,09 Passa 14 >5,09 Passa 21 >5,09 N/A 28 >5,09 Passa C. albicans 7 0,32 Passa 14 0,94 Passa 21 0,95 N/A 28 1,24 Passa A. Niger 7 0,97 Passa 14 1,05 Passa 21 1,08 N/A 28 1,35 Passa

Durante os 3 meses de provas, o pH de ambos, autoclavados e não autoclavados aumentou em todas as condições (veja a Tabela 12). Não houve mudanças aparentes em osmolaridade para todas as amostras em todas as condições de armazenamento (Tabela 13). A concentração de dióxido de cloro não mostrou tendência de claro (veja Tabela 14). Essas amostras não atenderam as especificações para Eficácia Antimicrobiana de USP para a prova inicial (Tabelas 15 e 16). Tabela 12: Resultados do pH Formulação de Dióxido de cloro

BCL273-161C (Dióxido de Cloro - não-autoclavado) Armazena- mento Inicial 2 semanas 1 mês 1,5 mês 2 meses 2,5 meses 3 meses 5°C 7,77 7,95 8,00 8,13 8,04 7,80 8,14 25°C/60%RH 8,11 8,24 8,35 8,32 8,36 8,44 40°C/75%RH 8,35 8,49 8,59 8,56 8,57 8,68 55°C 8,55 8,68 8,78 8,73 8,69 8,84 BCL273-161D (Dióxido de Cloro autoclavado) 5°C 8,54 8,51 8,49 8,54 8,43 8,37 8,49 25°C/60%RH 8,53 8,54 8,58 8,50 8,45 8,50 40°C/75%RH 8,58 8,64 8,70 8,64 8,60 8,73 55°C 8,66 8,74 8,80 8,75 8,73 8,86 Tabela 13: Osmolaridade, Resultados (mOsm/kg) Formulação de Dióxido de cloro BCL273-161C (Dióxido de Cloro - não-autoclavado) Armazena- mento Inicial 2 semanas 1 mês 1,5 mês 2 meses 2,5 meses 3 meses 5°C 141 142 140 138 141 138 136 25°C/60%RH 141 136 136 138 136 134 40°C/75%RH 139 135 134 134 135 134 55°C 139 135 136 137 136 137 BCL273-161D (Dióxido de Cloro autoclavado) 5°C 144 146 143 143 144 145 142 25°C/60%RH 146 143 143 144 143 144 40°C/75%RH 146 142 142 143 142 141 55°C 145 143 141 145 150 148 Tabela 14: Resultados de Dióxido de cloro (ppm) Formulação de Dióxido de cloro

BCL273-1610 (Dióxido de Cloro - não-autoclavado) Armazena- mento Inicial 2 semanas 1 mês 1,5 mês 2 meses 2,5 meses 3 meses 5°C 59,14 59,14 60,53 59,14 59,14 60,83 60,83 25°C/60%RH 58,29 59,98 59,14 69,27 62,52 59,99 40°C/75%RH 59,14 60,83 61,67 65,90 62,52 57,45 55°C 59,14 60,83 64,21 65,90 62,52 59,29 BCL273-161D (Dióxido de Cloro autoclavado) 5°C 62,52 67,58 65,05 65,90 62,52 69,27 62,52 25°C/60%RH 59,98 63,36 63,36 71,81 62,52 65,05 40°C/75%RH 60,83 64,21 65,90 60,83 60,83 62,52 55°C 60,83 62,52 67,58 64,21 62,52 64,21

Tabela 15: Eficácia Antimicrobiana

Dióxido de cloro - não autoclavado, BCL 273-161 C,, T= inicial

Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >4,97 Passa 14 >4,97 Passa 21 Testagem descontinuada 28 P. aeruginosa 7 0,78 Falha 14 1,46 N/A 21 Testagem descontinuada 28 E. coli 7 2,07 Passa 14 3,16 Passa 21 Testagem descontinuada 28 C. albicans 7 0,99 Passa 14 1,94 Passa 21 Testagem descontinuada 28 A. Niger 7 1,81 Passa 14 2,26 Passa 21 Testagem descontinuada 28 Tabela 16: Eficácia Antimicrobiana

Dióxido de cloro - autoclavado, BC L273-161D,T= inicial Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >4,97 Passa 14 >4,97 Passa 21 Testagem descontinuada 28 P. aeruginosa 7 0,88 Falha 14 2,08 N/A 21 Testagem descontinuada 28 E. coli 7 1,53 Passa 14 2,76 Falha 21 Testagem descontinuada 28 C. albicans 7 0,97 Passa 14 2,09 Passa 21 Testagem descontinuada 28 A. Niger 7 1,85 Passa 14 2,95 Passa 21 Testagem descontinuada 28

Durante a execução do estudo inicial, um estudo confirmatório foi realizado para confirmar os resultados antimicrobianos que passaram para a amostra de difilina autoclavada/dióxido de cloro. Além desta amostra, uma formulação de dióxido de cloro autoclavada e uma formulação baseada no exemplo 5 da patente 6.024.954, consistentes com o produto Refresh comercializado por Allergan foram preparadas para os estudos confirmatórios. Todos os três foram analisados no teste de Eficácia Antimicrobiana USP, e os testes mais recentes foram confirmados com a difilina/dióxido de cloro e a formulação baseada no exemplo 5, patente US 6.024.954 (consistente com Refresh) passando através de 28 dias, e a amostra de dióxido de cloro sozinho falhando no dia 7 (vide tabelas 17-19). Tabela 17: Eficácia Antimicrobiana

Difilina/dióxido de cloro repetido - autoclavado, BCL285-040B, T - inicial

Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >4,99 Passa 14 >4,99 Passa 21 >4,99 N/A 28 >4,99 Passa P. aeruginosa 7 >5,14 Passa 14 >5,14 Passa 21 >5,14 N/A 28 >5,14 Passa E. coli 7 >4,77 Passa 14 >5,07 Passa 21 >5,07 N/A 28 >5,07 Passa C. albicans 7 0,17 Passa 14 0,76 Passa 21 0,99 N/A 28 1,87 Passa A. Niger 7 2,01 Passa 14 1,35 Passa 21 1,97 N/A 28 2,28 Passa Tabela 18: Eficácia Antimicrobiana

Dióxido de cloro repetido - autoclavado, BCL285-040A, T = inicial

Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >4,99 Passa 14 >4,99 Passa 21 >4,99 N/A 28 >4,99 Passa P. aeruginosa 7 0,92 Falha 14 2,20 N/A 21 1,35 N/A 28 -0,44 N/A E. coli 7 1,71 Passa 14 1,96 Falha 21 2,63 N/A 28 2,51 N/A C. albicans 7 0,97 Passa 14 1,72 Passa 21 4,13 N/A 28 >5,28 Passa A. Niger 7 2,18 Passa 14 2,89 Passa 21 3,18 N/A 28 3,51 Passa Tabela 19: Eficácia Antimicrobiana

Fórmula Baseada no Exemplo 5. Patente US 6.024.954 (consistente com Refresh).____

Organismo Dia Redução de Log Passa/Falha S. aureus 7 >4,99 Passa 14 >4,99 Passa 21 >4,99 N/A 28 >4,99 Passa P. aeruginosa 7 >5,14 Passa 14 >5,14 Passa 21 >5,14 N/A 28 >5,14 Passa E. coli 7 >5,07 Passa 14 >5,07 Passa 21 >5,07 N/A 28 >5,07 Passa C. albicans 7 >5,28 Passa 14 >5,28 Passa 21 >5,28 N/A 28 >5,28 Passa A. Niger 7 1,18 Passa 14 1,10 Passa 21 1,00 N/A 28 1,31 Passa

Conclusão

As amostras da formulação de difilina/dióxido de cloro

armazenadas a 5°C, 25°C/ 60% de RH e 40°C/75% de RH satisfazem os critérios para a eficácia antimicrobiana USP para um item da Categoria 1 após meses de armazenamento.

As amostras da formulação de dióxido de cloro apenas não satisfizeram os critérios de aceitação para uma testagem da eficácia antimicrobiana USP para um item da Categoria 1.

A testagem da eficácia antimicrobiana confirmatória não confirmou os resultados observados da testagem da eficácia antimicrobiana inicial para as formulações de difilina/dióxido de cloro e dióxido de cloro.

A formulação de difilina/dióxido de cloro novamente satisfez os

critérios de aceitação para a eficácia antimicrobiana USP para um item da categoria 1. A formulação de dióxido de cloro não satisfez os critérios de aceitação para a eficácia antimicrobiana USP para um item da categoria 1. Durante a mesma testagem, a formulação baseada no exemplo 5, patente US 6.024.954 (consistente com Refresh) também satisfez os critérios de aceitação para a eficácia antimicrobiana USP para um item da categoria 1. Incorporação por Referência

Os conteúdos de todas as referências, patentes, pedidos de patente pendentes e patentes publicadas citados ao longo deste pedido de patente são por meio deste expressamente incorporados por referência. Equivalentes

Aqueles versados na técnica irão reconhecer, ou ser capazes de verificar usando não mais do que a experimentação de rotina, muitos equivalentes para as modalidades específicas da invenção descrita aqui a seguir. Tais equivalentes devem ser abrangidos pelas reivindicações a seguir.

Claims (46)

1. Preparação, caracterizada pelo fato de que compreende um agente antibacteriano de oxidação e um composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano do agente de oxidação.

2. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o composto heterocíclico é um composto bicíclico.

3. Preparação de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que o composto heterocíclico é uma xantina.

4. Preparação de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que o composto bicíclico é selecionado do grupo que consiste em cafeína, teofilina, difilina, teobromina, xantina, xantinol, metilxantina, e aminofilina.

5. Preparação de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que o composto bicíclico é difilina.

6. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o dito agente antibacteriano de oxidação é dióxido de cloro.

7. Preparação de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que o dióxido de cloro está presente em uma concentração de cerca de 25 a 125 ppm.

8. Preparação de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o dióxido de cloro está presente em uma concentração de cerca de 50 a 75 ppm.

9. Preparação de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que te dióxido de cloro está presente em uma concentração de cerca de 60 ppm.

10. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a preparação está na forma de uma solução, creme, pasta, unguento, ou gel.

11. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a preparação está incorporada em um veículo de liberação sustentada.

12. Preparação de acordo com a reivindicação 11, caracterizada pelo fato de que o dito veículo de liberação sustentada é selecionado do grupo que consiste em um polímero de liberação sustentada, um Iipossoma e uma microcápsula.

13. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a preparação é uma solução.

14. Preparação de acordo com a reivindicação 13, caracterizada pelo fato de que a preparação tem uma osmolaridade de 180 mOsm/Kg ou menos.

15. Preparação de acordo com a reivindicação 14, caracterizada pelo fato de que a preparação tem uma osmolaridade de 165 mOsm/Kg ou menos.

16. Preparação de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que a preparação tem uma osmolaridade de 165 mOsm/Kg ou menos e em que o dióxido de cloro está presente em uma concentração de cerca de 50 a 75 ppm.

17. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a preparação é para a aplicação ao olho, pálpebra do olho, margem do olho, tampões ou uma lente de contato.

18. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a preparação é eficaz contra pelo menos um dos micróbios selecionados do grupo que consiste nas bactérias, nos fungos, e levedura.

19. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a preparação promove um aumento na densidade da célula caliciforme da conjuntiva no olho seco.

20. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a preparação promove um aumento na densidade da célula caliciforme da conjuntiva nos distúrbios inflamatórios da superfície do olho.

21. Preparação de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que ainda compreende um veículo farmaceuticamente aceitável.

22. Preparação antimicrobiana na forma de uma solução, caracterizada pelo fato de que compreende dióxido de cloro e difilina, em que o dióxido de cloro está presente em cerca de 55 a 75 ppm e a preparação antimicrobiana tem uma osmolaridade total de 165 mOsm/Kg ou menos.

23. Preparação tópica, caracterizada pelo fato de que compreende dióxido de cloro e difilina.

24. Preparação para o cuidado com os olhos, caracterizada pelo fato de que compreende dióxido de cloro e difilina, em que o dióxido de cloro está presente em cerca de 55 a 75 ppm.

25. Preparação para o cuidado com os olhos de acordo com a reivindicação 24, caracterizada pelo fato de que a preparação para o cuidado com os olhos é um colírio para os olhos na forma de uma solução.

26. Preparação para o cuidado com os olhos de acordo com a reivindicação 24, caracterizada pelo fato de que a preparação para o cuidado com os olhos está na forma de um gel.

27. Preparação, caracterizada pelo fato de que compreende um agente que gera cloreto e difilina.

28. Uso de um agente antibacteriano de oxidação e um composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano do agente de oxidação, caracterizado pelo fato de que é na produção de uma preparação como definida na reivindicação 1, para o tratamento de uma colonização ou infecção microbiana em um indivíduo.

29. Uso de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que a colonização ou infecção microbiana é uma colonização ou infecção bacteriana, fúngica ou por levedura.

30. Uso de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que a preparação está na forma de um colírio, solução, creme, pasta, unguento, ou gel.

31. Uso de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato de que a preparação está incorporada em um veículo de liberação sustentada.

32. Uso de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato de que o dito veículo de liberação sustentada é selecionado do grupo que consiste em um polímero de liberação sustentada, um Iipossoma e uma microcápsula.

33. Uso de um agente antibacteriano de oxidação e um composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano do agente de oxidação, caracterizado pelo fato de que é na produção de uma preparação, como definida na reivindicação 1, para o tratamento de uma colonização ou infecção da superfície ocular ou pálpebra do olho em um indivíduo.

34. Uso de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que a infecção é a conjuntivite.

35. Uso de acordo com a reivindicação 34, caracterizado pelo fato de que a conjuntivite é conjuntivite infecciosa.

36. Uso de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que a colonização ou infecção é de um tampão.

37. Uso de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que a colonização ou infecção está na conjunção como o olho seco.

38. Uso de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que a colonização ou infecção está na conjunção com um distúrbio inflamatório na superfície do olho.

39. Uso de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que a colonização ou infecção está na conjunção com um distúrbio da pálpebra do olho.

40. Uso de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato de que a superfície ocular está em contato com uma lente de contato.

41. Método para a redução do risco de colonização ou infecção na lente de contato, caracterizado pelo fato de que é pela aplicação da preparação como definida na reivindicação 1, à superfície da lente de contato antes da inserção da lente de contato no olho.

42. Uso de um agente antibacteriano de oxidação e um composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano do agente de oxidação, caracterizado pelo fato de que é na produção de uma preparação, como definida na reivindicação 1, para reduzir o risco de infecção no olho do paciente cirúrgico.

43. Uso de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que a preparação tópica é aplicada na pálpebra do olho ou superfície ocular múltiplas vezes ao longo de vários dias que antecedem a cirurgia.

44. Uso de um agente antibacteriano de oxidação e um composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano do agente de oxidação, caracterizado pelo fato de que é na produção de uma preparação, como definida na reivindicação 1, para o tratamento de uma colonização ou infecção do tecido da mucosa ou do tecido epitelial em um indivíduo.

45. Uso de um agente antibacteriano de oxidação e um composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano do agente de oxidação, caracterizado pelo fato de que é na produção de uma preparação, como definida na reivindicação 1, para o tratamento de olho seco em um indivíduo.

46. Uso de um agente antibacteriano de oxidação e um composto heterocíclico que melhora o efeito antibacteriano do agente de oxidação, caracterizado pelo fato de que é na produção de uma preparação, como definida na reivindicação 1, para o aumento da densidade da célula caliciforme da expressão da mucina da membrana epitelial da mucosa em um indivíduo.