BRPI0618824A2

BRPI0618824A2 - agente terapêutico acelerador de recuperação dérmica contendo grelina e derivados desta ou substáncias que atuam sobre ghs-r1a como ingrediente ativo

Info

Publication number: BRPI0618824A2
Application number: BRPI0618824-9A
Authority: BR
Inventors: Noboru Murakami; Yujiro Hayashi; Keiko Nakahara; Kenji Kangawa
Original assignee: Univ Miyazaki; Asubio Pharma Co Ltd; Japan Government
Priority date: 2005-11-21
Filing date: 2006-11-21
Publication date: 2011-09-13
Also published as: RU2008125169A; CA2630006A1; AU2006316100A1; KR20080075530A; WO2007058359A1; EP1967208A4; AU2006316100B2; EP1967208A1; US20090181888A1; RU2420306C2; CN101312745A; JPWO2007058359A1

Abstract

AGENTE TERAPêUTICO ACELERADOR DE RECUPERAçãO DéRMICA CONTENDO GRELINA E DERIVADOS DESTA OU SUBSTáNCIAS QUE ATUAM SOBRE GHS-R1a COMO INGREDIENTE ATIVO. A presente invenção provê um novo agente terapêutico para lesões dérmicas e um acelerador de regeneração dérmica. O agente terapêutico para lesões dérmicas e o acelerador de regeneração dérmica contêm uma substância que atua sobre o receptor de secretagogo de hormónio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como ingrediente ativo.

Description

AGENTE TERAPÊUTICO ACELERADOR DE RECUPERAÇÃO DÉRMICA CONTENDO GRELINA E DERIVADOS DESTA OU SUBSTÂNCIAS QUE ATUAM SOBRE GHS-Rla COMO INGREDIENTE ATIVO

CAMPO TÉCNICO

A presente invenção refere-se à atividade proliferativa celular dérmica de uma substância que atua em um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento (GHS- R) . Mais especificamente, a presente invenção refere-se a um agente terapêutico ou composição terapêutica para lesões dérmicas, a um acelerador de regeneração dérmica e a um método para cultura de uma célula dérmica no tratamento de lesões dérmicas, onde a substância é utilizada como um ingrediente ativo.

ANTECEDENTES DA TÉCNICA

É evidente, sem se olhar para trás na longa história do transplante de pele, que a pele é um tecido cuja terapia de transplante tem sido praticada deste dos tempos mais distantes. Além disto, olhando-se adiante para estudo futuro sobre transplante e regeneração, que a pele é considerada como sendo o tecido que permite o acesso mais fácil e cujo processo de desenvolvimento/regeneração tem sido completamente observado, pelos estudos de desenvolvimento dérmico, estudos de regeneração utilizando cabelo, e assim em diante. Adicionalmente, o transplante e regeneração de pele é uma área de estudo que pode ser diretamente aplicada a várias doenças da pele, tais como, lesões por queimadura, epidermólise bolhosa hereditária e alopecia padrão masculina, e espera-se que represente um papel importante em lesões dérmicas (ver o página na Internet do Programa de Excelência do Centro para o Século 21 da Kyoto University "Establishment of International COE for Integration of Transplantation Therapy and Regenerative Medicine" - Study on Skin Transplantation and Regeneration, http://www.kuhp.kyoto-u.ac.jp/~coe/memberl5.html) .

A pele cultivada necessária para transplante de pele difere dependendo da doença, da extensão da lesão e da área de transplante. Embora o transplante de somente uma epiderme cultivada seja apropriado no caso de lesões por queimadura moderadas ou leves, pele cultivada incorporando uma camada dérmica é necessária para um paciente sofrendo de dano dérmico de espessura total. É desejado se desenvolver pele cultivada que funcione como bandagem e potencialmente libere uma substância fisiologicamente ativa para o propósito de tratar ulcerações dérmicas renitentes (ver Takamura: Bio Venture, 1:58 (2001)).

Atualmente, existem dois tipos de folhas de pele cultivada utilizados para transplante de pele: um é queratinócito epidérmico normal de acordo com um método desenvolvido por Green et al. (ver Rheinwald e Green: Cell, 6:331 (1975)); e o outro é um tecido equivalente de pele desenvolvido por Bell et al. (ver Bell et al.: Science, 211: 1052 (1981)). Green et al. utilizaram células 3T3 como células de suporte para suprimir a diferenciação de queratinócito epidérmico, e obtiveram sucesso na proliferação suficiente. De acordo com o método, o queratinócito epidérmico é multiplicado durante o cultivo para formar uma estrutura semelhante a folha, e a estrutura celular cultivada similar à estrutura viva mostrou-se como sendo clinicamente útil como um substituto do tecido dérmico. Utilizando um material tal como colágeno, Bell et al. preliminarmente prepararam uma parte correspondente à derme, e cultivaram um queratinócito epidérmico sobre esta.

Neste método, foi essencial a utilização de um material que contribui para a incorporação tridimensional das células para a formação do tecido artificial, e um gel de colágeno foi um material apropriado para este propósito (ver Hata: Jikken Igaku Número Extra, 19: 2121 (2001)).

Uma vez preparada a armação para as células, o que se necessita a seguir é uma substância que promova a proliferação e diferenciação celular (ver Ueda: Bio Venture, 1: 32 (2001)). Aqueles que são cautelosos a cerca da aplicação clinica de IGF, TGF-β, FGF, ou semelhantes, insistem que isto pode provocar anomalias na diferenciação e no desenvolvimento de células em outras partes do corpo humano. Por esta razão, é desejável que se

descubra/desenvolva uma substância altamente segura com esta atividade.

Na terapia por transplante ou medicina regenerativa de pele lesionada, a aplicação futura de uma célula dérmica fetal é também desejável tendo em vista que uma célula dérmica fetal cultivada transplantada para uma região lesionada se diferencia e prolifera em pele normal, isto é, apresenta uma capacidade de recuperação dérmica (ver Hohfeld et al.: Lancet, 366: 788-790 (2005)). Entretanto, uma vez que a velocidade de proliferação da célula dérmica fetal é lenta, o desenvolvimento de uma tecnologia que promova a proliferação é desejado.

A grelina é um hormônio que foi encontrado no estômago em 1999. É um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos composta de 28 resíduos e apresentando uma estrutura química extremamente rara na qual um terceiro aminoácido do terminal N na seqüência é acilado com um ácido graxo (ver Kojima et al.: Nature, 402, 656-660 (1999), e ver WO 01/07475). A grelina atua sobre o receptor de secretagogo do hormônio de crescimento Ia (GHS- Rla, ver Haward et al.: Science 273: 974-977 (1996)), e é descrita como um hormônio cerebro-gastrintestinal endógeno que promove a secreção de um hormônio de crescimento (GH) da pituitária (ver Kojima et al.: Nature, 402, 656-660 (1999)). Estudos recentes revelaram que a grelina aumenta o apetite, que a administração subcutânea de grelina aumenta o peso corporal e a gordura corporal, e que a grelina apresenta atividades tais como a de aumentar a função cardíaca (ver Wren et al.: Endocrinology 141: 4325- 4328 (2000), Nakazato et al.: Nature 409: 194-198 (2001), Shintani et al.: Diabetes 50: 227-232 (2001), Lely et al.: Endocr. Rev. 25: 426-457 (2004), e Korbonits et al.: Front Neuroendocrino. 25: 27-68 (2004)).

Uma vez que a grelina apresenta atividade de promoção de secreção de GH e atividade de estímulo do apetite, espera-se que a grelina, por esta razão, adicionalmente extraia efetivamente a atividade de queima de gordura para converter gordura em energia, e o efeito de fortalecimento muscular através da atividade anabólica que o GH expressa (ver Akamizu e Kangawa: Saishin Igaku, 60: 1569-1573 (2005)).

Grelina foi isolada pela primeira vez de um rato, e purificada como um GHS endógeno atuando sobre GHS-Rla. Desde então, seqüências de aminoácidos de grelina apresentando uma estrutura primária semelhante foram encontradas em vários vertebrados outros que não ratos, tais como humanos, camundongos, suínos, frangos, enguias, bovinos, eqüinos, ovinos, rã touro, truta e cães.

Humano

: GSS ( n-octanoil ) FLSPEHQRVQQRKESKKPPAKLQPR (SEQ ID NO: 1) : GSS { n-octanoil ) FLSPEHQRVQRKESKKPPAKLQPR (SEQ ID NO: 2)

Rato

: GSS ( n-octanoil )FLSPEHQKAQQRKESKKPPAKLQPR (SEQ ID NO: 3) : GSS ( n-octanoil )FLSPEHQKAQRKESKKPPAKLQPR. (SEQ ID NO: 4)

Camundongo

: GSS ( n-octanoil ) FLSPEHQKVQQRKESKKPAAKLKPR (SEQ ID NO: 5)

Suíno

: GSS ( n-octanoil ) FLSPEHQKLQRKEAKKKKPGRLKPR (SEQ ID NO: 6)

Bovino

: GSS ( n-octanoil) FLSPEHQKLQRKEAKKPSGRLKPR (SEQ ID NO: 7)

Ovino

: GSS ( n-octanoil) FLSPEHQKLQRKEPKKPSGRLKPR (SEQ ID NO: 8)

Cães

: GSS ( n-octanoil) FLSPEHQKLQQRKESKKPPAKLQPR (SEQ ID NO: 9)

Enguia

: GSS { n-octanoil) FLSPSQRPQGKDKKPPRV NH2 (SEQ ID NO: 10)

Truta

: GSS { n-octanoil ) FLSPSQKPQVRQCKCPPRV-NH2 (SEQ ID NO: 11)

: GSS ( n-octanoil) FLSPSQKPQCKGKPPRV- NH2 (SEQ ID NO: 12)

Frango

: GSS (n-octanoil ) FLSPTYKNIQQQKGTRKPTAR (SEQ ID NO: 13)

: GSS (n-octanoil) FLSPTYKNIQQQKDTRKPTAR (SEQ ID NO: 14)

: GSS (n-octanoil) FLSPTYKNIQQQKDTRKPTARLH (SEQ ID NO: 15) <table>table see original document page 7</column></row><table>

(Na representação acima, um resíduo de aminoácido é representado pela simbologia de letra única).

0 peptídeo acima apresenta uma estrutura específica, onde o grupo hidroxila da cadeia lateral de um resíduo de serina (S) ou de um resíduo treonina (T) na terceira posição é acilado com um ácido graxo tal como o ácido octanóico, ácido decanóico e assim em diante. Exceto para grelina, nunca houve o caso de se isolar um peptídeo fisiologicamente ativo apresentando uma estrutura de modificação hidrofóbica.

As substâncias que atuam sobre GHS-Rla, de acordo com a presente invenção, incluem um peptídeo que libera hormônio de crescimento 2 (GHRP-2) (D-Ala-D-pNal-Ala-Trp-D- Phe-Lys-NH2) e GHRP-6(His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2) (Muccioli, G. et al.: J. Endocrino., 157, pp.99-106 (1998)) e derivados deste, em adição aos compostos peptídicos acima. Além disto, compostos de baixo peso molecular tais como L-692,429 (MK-0751); L-163,191 (MK-0677) (Patchett et al.: Proc. Natl. Acad. Sci., USA, 92, pg. 7001-7005 (1995); ipamorelin (NN161); tabmorelin (NN703); e CP-724, 391 (Ankerson Μ. et al. : Drug Discovery Today, 4. pg. 497-506) podem ser utilizados.

Até onde é do conhecimento dos inventores, nenhum relatório foi até o momento encontrado relacionado com a expressão de GHS-R1a em células dérmicas e com a proliferação de células dérmicas pela atividade de substâncias que atuam sobre GHS-Rla, incluindo grelina, nas células dérmicas.

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

PROBLEMA A SER SOLUCIONADO PELA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a um agente terapêutico para lesões dérmicas, um acelerador de regeneração dérmica e a um método para o cultivo de célula dérmica no tratamento de lesão dérmica pela utilização de uma substância apresentando atividade de proliferação de célula dérmica.

MEIOS PARA A SOLUÇÃO DO PROBLEMA

Os presentes inventores observaram que a administração de uma substância que atua sobre GHS-Rla, a um animal fêmea em gestação acelera o crescimento do feto, e que a substância administrada é liberada para o feto, bem como para o fluido amniótico. Considerando-se a função e papel da substância que atua sobre GHS-R1a no fluido amniótico, é esperado que a substância apresente uma atividade de proliferação de célula dérmica.

Os presentes inventores estudaram como a substância que atua sobre GHS-R1a age nas células dérmicas do feto, e observaram que GHS-R1a existe nas células dérmicas, que a substância que atua sobre GHS-Rla age na célula dérmica no sentido a aumentar o cálcio intracelular, e que a substância expressava atividade de proliferação de célula dérmica.

Isto é, a presente invenção refere-se a um acelerador de regeneração dérmica no tratamento de lesões dérmicas, a um acelerador de formação para uma folha de célula dérmica cultivada obtida pelo cultivo de uma célula dérmica, e a um acelerador da recuperação de pele e a um agente terapêutico para o transplante da pele cultivada, contendo uma substância que atua sobre GHS-Rla como ingrediente ativo.

A presente invenção refere-se também a um método de tratamento de lesão dérmica, a um método para acelerar a formação de folha de célula dérmica cultivada obtida pelo cultivo de uma célula dérmica, e a um método para acelerar a recuperação dérmica pelo transplante da pele cultivada, bem como a um método para o tratamento das doenças acima pela aceleração da recuperação, compreendendo a administração de uma substância que atua sobre GHS-Rla.

Além disto, a presente invenção refere-se ao uso de uma substância que atua sobre GHS-Rla para um acelerador de regeneração dérmica em um tratamento de lesão dérmica, um acelerador para a formação de uma folha de célula dérmica cultivada obtida pelo cultivo de uma célula dérmica, a à produção de um acelerador de recuperação dérmica e a um agente terapêutico para transplante da pele cultivada.

Com base na descrição acima, a presente invenção refere-se especificamente às seguintes matérias.

(1) Uma agente terapêutico para lesões dérmicas, compreendendo uma substância que atua sobre um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta, como ingrediente ativo.

(2) 0 agente terapêutico de acordo com (1), em que a substância é um peptideo selecionado do grupo consistindo em um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual um ácido graxo é introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um ou vários dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.

(3) 0 agente terapêutico de acordo com (2), em que a substância é um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

(4) 0 agente terapêutico de acordo com (3), em que a substância é um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila acilado na cadeia lateral com um grupo n- octanoil.

(5) 0 agente terapêutico de acordo com qualquer um de (1) a (4), contendo o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por unidade de formulação.

(6) Um acelerador de regeneração dérmica, compreendendo uma substância que atua sobre o receptor de secretagogo de hormônio de crescimento, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta, como um ingrediente ativo.

(7) O acelerador de acordo com (6), em que a substância é um peptideo selecionado do grupo consistindo em um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado, no qual um ácido graxo é introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um ou vários dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.

(8) O acelerador de acordo com (7), em que a substância é um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

(9) O acelerador de acordo com (8), em que a substância é um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila da cadeia lateral acilado com um grupo n- octanoil.

(10) 0 acelerador de acordo com qualquer um de (6) a (9), contendo o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por unidade de formulação.

(11) Um método para acelerar a proliferação de uma célula dérmica cultivada, utilizando uma substância que atua sobre o receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como um ingrediente ativo.

(12) Método de acordo com (11), em que a substância é um peptideo selecionado do grupo consistindo em um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual é introduzido um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um ou mais dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.

(13) 0 método de acordo com (12), em que a substância é um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

(14) O método de acordo com (13), em que a substância é um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila na cadeia lateral acilado com um grupo n- octanoil.

(15) O método de acordo com qualquer um de (11) a (14), em que a proliferação da célula dérmica cultivada é realizada em um meio contendo o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,0000001 mg/ml a 0,1 mg/ml.

(16) Um método de tratamento de lesões dérmicas compreendendo a administração de uma substância que atua sobre o receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como um ingrediente ativo a um mamífero requerendo tratamento de lesões dérmicas.

(17) O método de acordo com (16), em que a substância é um peptídeo selecionado do grupo consistindo em um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual é introduzido um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um ou mais dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.

(18) O método de acordo com (17), em que a substância é um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

(19) O método de acordo com (18), em que a substância é um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila na cadeia lateral acilado com um grupo n- octanoil.

(20) O método de acordo com qualquer um de (16) a (19), em que o ingrediente ativo é administrado em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por administração.

(21) Um método para acelerar a regeneração dérmica, compreendendo a administração de uma substância que atua sobre o receptor de secretagogo do hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como um ingrediente ativo a um mamífero requerendo aceleração de regeneração dérmica.

(22) O método de acordo com (21), em que a substância é um peptideo selecionado do grupo consistindo em um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual é introduzido um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um ou mais dos 5o ao 28° aminoácidos

do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.

(23) O método de acordo com (22), em que a substância é um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

(24) O método de acordo com (23), em que a substância é um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila na cadeia lateral acilado com um grupo n- octanoil.

(25) O método de acordo com qualquer um de (21) a (24), em que o ingrediente ativo é administrado em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por administração.

(26) Uso de uma substância que atua sobre o receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta para a produção de uma composição farmacêutica para o tratamento de lesões dérmicas. (27) Uso de acordo com (26), em que a substância é um peptídeo selecionado do grupo consistindo em um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual é introduzido um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um ou mais dos 5° ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.

(28) Uso de acordo com (27), em que a substância é um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

(29) Uso de acordo com (28), em que a substância é um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3 a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila na cadeia lateral acilado com um grupo n- octanoil.

(30) Uso de acordo com qualquer um de (26) a (29), em que a composição farmacêutica para o tratamento de lesões dérmicas contém o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por unidade de formulação.

(31) Uso de uma substância que atua sobre o receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como um ingrediente ativo para a produção de uma composição farmacêutica para acelerar a regeneração dérmica.

(32) Uso de acordo com (31), em que a substância é um peptideo selecionado do grupo consistindo em um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela

SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual é introduzido um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um ou mais dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável desta.

(33) Uso de acordo com (32), em que a substância é um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

(34) Uso de acordo com (33), em que a substância é um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila na cadeia lateral acilado com um grupo n- octanoil.

(35) Uso de acordo com qualquer um de (31) a (34), em que a composição farmacêutica para acelerar a regeneração dérmica contém o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por unidade de formulação.

EFEITO VANTAJOSO DA INVENÇÃO

A presente invenção revela que uma substância que atua sobre um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento apresenta atividade de proliferação de célula dérmica. Por esta razão, a invenção possibilita a aplicação imediata de células dérmicas cultivadas em tratamento pela adição da substância que atua sobre o receptor de secretagogo de hormônio de crescimento, de forma a acelerar a proliferação celular em células dérmicas em cultivo. Isto é, um fornecimento mais rápido de uma folha de pele artificial obtida de células dérmicas cultivadas a um paciente é tornado possível no processo de tratamento de recuperação dérmica no qual uma célula dérmica é cultivada para preparar uma pele artificial na forma de folha e, com isso, uma superfície dérmica lesionada é coberta. Além disto, se torna possível uma aceleração da cura por transplante de células dérmicas diretamente para o local de uma laceração ou ferimento após a administração da substância que atua sobre o receptor de secretagogo de hormônio de crescimento no local do transplante. BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

A Fig. 1 é uma vista mostrando a expressão de mRNA de GHS-Rla em uma célula dérmica fetal.

A Fig. 2 é uma vista mostrando a atividade da grelina para aumentar o cálcio intracelular em uma célula dérmica fetal cultivada única.

A Fig. 3 é uma vista mostrando a atividade da grelina para acelerar a absorção de [3H]-timidina em um célula dérmica fetal.

A Fig. 4 é uma vista mostrando a atividade da grelina e GHRP6 para acelerar a proliferação de célula dérmica fetal.

MELHOR MODO DE REALIZAÇÃO DA INVENÇÃO 0 medicamento da presente invenção pode ser utilizado como tal para mamíferos (organismos individuais) incluindo humanos. Exemplos das substâncias utilizadas na presente invenção incluem um secretagogo de hormônio de crescimento (GHS), o qual é um ligante atuando sobre o receptor de secretagogo de hormônio de crescimento (GHS-R). Tal como o GHS, compostos peptídicos conhecidos e compostos de baixo peso molecular (tais como grelina GHRP6, MK-0677 e ipamorelina) podem ser utilizados, e a grelina, que é um composto peptídico, pode ser utilizada.

Como a grelina, conforme descrito acima, adicionalmente à grelina derivada de humano, grelina derivada de rato, camundongo, suíno, bovino e outros animais, e derivados destas, podem ser utilizadas.

Preferivelmente, para um organismo individual, grelina derivada do mesmo organismo individual é utilizada. Por exemplo, grelina derivada de humano é preferivelmente utilizada para um corpo humano. A grelina derivada de humano é um peptideo compreendendo 28 aminoácidos, e um grupo hidroxila da cadeia lateral de um resíduo de serina na terceira posição do terminal amino é acilado com um ácido graxo (grupo n-octanoil) (SEQ ID No.: 1). Como derivado de grelina, por exemplo, um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos na qual um ou vários aminoácidos são substituídos, adicionados e/ou deletados nos 5o a 28° resíduos de aminoácido do terminal amino de uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, e apresentando uma atividade de aumento da concentração de íon cálcio intracelular por ligação a um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento (GHS-R), pode ser utilizado. É desejável que a homologia da seqüência de aminoácidos dos derivados seja de 70%, preferivelmente 80%, mais preferivelmente 90%, ainda mais preferivelmente 95%, o mais preferido sendo 97%, em comparação com a seqüência de aminoácido natural. Estas condições são as mesmas no derivado de grelina de outros animais (SEQ ID No. : 2 a SEQ ID No.: 22) .

A grelina e os derivados da presente invenção podem ser preparados por um método convencional. Por exemplo, podem ser isolados de materiais brutos naturais, ou produzidos por tecnologia de DNA recombinante e/ou síntese química. Quando é necessária modificação (acilação) em um resíduo de aminoácido, a reação de modificação pode ser aplicada de acordo com meios conhecidos. Por exemplo, no método de produção utilizando tecnologia de DNA recombinante, a grelina de acordo com a presente invenção e derivados desta podem ser obtidos por cultivo de uma célula hospedeira transformada por um vetor de expressão contendo o DNA que codifica um peptideo de acordo com a presente invenção e então por coleta do peptideo desejado da cultura. Pela seleção da célula hospedeira, um composto, um peptideo desejado modificado (acilado) na célula, pode ser obtido. Quando o peptideo não é modificado (acilado), a reação de modificação tal como acilação pode ser aplicada de acordo com meios conhecidos se desejado.

Exemplos do vetor que incorpora um gene incluem vetores de E. coli (tais como pBR322, pUC18 e pUCl9), vetores de Bacillus subtilis (tais como pUBUO, pTP5 e pC194), vetores de levedura (tais como YEp, YRp e YIp), e vetores de célula animal (tais como retrovirus e vaccinia virus). Quaisquer outros vetores podem ser utilizados, desde que retenham de maneira estável o gene desejado na célula hospedeira. Como método para a incorporação do gene desejado em plasmídeo, ou introdução na célula hospedeira, um método descrito em "Molecular Cloning" (Sambrook et al., 1989) pode ser utilizado, por exemplo.

De maneira a possibilitar que o gene do peptideo seja expresso no plasmideo, um promotor é conectado a jusante do gene de tal forma que este funcione.

O promotor utilizado no presente pedido pode ser qualquer promotor, desde que seja apropriado para a célula hospedeira utilizada para a expressão do gene desejado. Por exemplo, quando a célula hospedeira a ser transformada é do gênero Escherichia, um promotor lac, promotor trp, promotor lpp, promotor λΡΙ,, promotor recA ou semelhantes, pode ser utilizado; quando a célula hospedeira é do gênero Bacillusf um promotor SPOl promotor SP02 ou semelhantes, pode ser utilizado; quando a célula hospedeira é uma levedura, um promotor GAP, promotor PH05, promotor ADH ou semelhante, pode ser utilizado; e quando a célula hospedeira é uma célula animal, um promotor derivado de SV40, promotor derivado de retrovirus, ou semelhantes, pode ser utilizado.

A célula hospedeira é transformada utilizando-se os vetores obtidos acima contendo o gene desejado. A célula hospedeira a ser utilizada pode ser bactéria (tal como do gênero Escherichia e do gênero Bacillus), leveduras (tais como do gênero Saccharomyces, gênero Pichia e gênero Candida), e células animais (tais como célula CHO e célula COS). Um meio liquido é apropriado como meio de cultura, e o meio particularmente preferido contém fontes de carbono e de nitrogênio que são necessárias para o crescimento de uma célula transformada a ser cultivada. Vitaminas,

secretagogo de crescimento, soro, ou semelhantes podem ser adicionados se desejado.

De maneira a preparar um peptideo modificado (acilado) com ácido graxo de maneira direta, a célula hospedeira a ser utilizada é preferivelmente uma célula apresentando atividade de processamento de protease de clivagem do polipeptideo precursor do peptideo em uma posição apropriada e apresentando uma atividade de acilação de um resíduo de serina no peptideo. A célula hospedeira apresentando esta atividade de processamento de protease e atividade de acilação de serina pode ser selecionada transformando-se a célula hospedeira com um vetor de expressão contendo cDNA que codifica para o peptideo precursor após o que é confirmado se a célula transformada produz ou não um peptideo modificado com ácido graxo apresentando uma atividade de aumento de cálcio ou atividade de promoção da secreção de hormônio.

Após a cultura, o peptideo de acordo com a presente invenção é separado da cultura e purificado por um método convencional. Por exemplo, a extração da substância desejada das formas bacterianas ou células cultivadas é realizada coletando-se as formas bacterianas ou células após a cultura, as suspendendo em uma solução tampão contendo um modificador de proteína (tal como hidrocloreto de guanidina), rompendo as formas bacterianas ou células com ultra-som ou semelhante, e as centrifugando. De maneira a purificar a substância desejada a partir do fluido sobrenadante, vários métodos de separação e purificação, tais como permeação em gel, ultrafiltração, diálise, SDS-PAGE e várias técnicas de cromatografia, podem ser empregados em combinação apropriada de acordo com o peso molecular, solubilidade, carga elétrica (ponto isoelétrico) e afinidade da substância desejada.

A substância que atua sobre GHS-Rla (tal como grelina) e os derivados desta, de acordo com a presente invenção, pode ser quimicamente sintetizada por um método convencional. Por exemplo, a substância pode ser preparada por condensação de aminoácido com grupos protetores por um método de fase líquida e/ou um método de fase sólida, estendendo a cadeia peptídica, removendo-se todos os grupos protetores com ácido, e purificando-se o produto bruto resultante pelo método de purificação acima. Utilizando-se uma enzima de acilação ou uma aciltransferase, pode ser realizada uma acilação seletiva de uma cadeia lateral em uma posição desejada do aminoácido.

A propósito do método de produção de peptideo, vários métodos são já conhecidos. 0 peptideo de acordo com a presente invenção pode ser também facilmente preparado por um método conhecido, por exemplo, um método de síntese de peptideo clássico ou um método em fase sólida.

Pode ser utilizado um método de produção compreendendo tanto tecnologia do DNA recombinante quanto síntese química: por exemplo, fragmentos contendo um resíduo de aminoácido modificado é preparado por síntese química, outros fragmentos sem qualquer resíduo de aminoácido modificado são preparados por tecnologia de DNA recombinante, e os respectivos fragmentos são fundidos posteriormente (ver WO 01/07475).

Como sais da substância que atua sobre GHS-Rla (tal como grelina) e seus derivados utilizados na presente invenção, sais farmaceuticamente aceitáveis são preferidos. Exemplos destes incluem um sal de uma base inorgânica, um sal de uma base orgânica, um sal de um ácido inorgânico, um sal de um ácido orgânico, um sal de aminoácido básico e um sal de aminoácido ácido.

Exemplos preferidos dos sais de uma base inorgânica incluem sais de metal alcalino como um sal de sódio e um sal de potássio; sais de metal alcalino terroso tais como um sal de cálcio e um sal de magnésio; um sal de alumínio; um sal de amônio; e outros.

Exemplos preferidos dos sais de uma base orgânica incluem trimetilamina, trietilamina, piridina, picolina, etanolamina, dietanolamina, trietanolamina, diciclohexil- amina, Ν,N'-dibenziletilenodiamina, e outros.

Exemplos preferidos de sais de ácido inorgânico incluem sais de ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, e outros.

Exemplos de sais de ácido orgânico incluem sais de ácido fórmico, ácido acético, ácido trifluoracético, ácido fumárico, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido maleico, ácido cítrico, ácido succínico, ácido málico, ácido metanosulfônico, ácido benzenosulfônico, ácido p- toluenosulfônico, e outros.

Exemplos preferidos dos sais de aminoácido básico incluem sais de arginina, lisina, ornitina, e outros, enquanto que exemplos preferidos dos sais de aminoácido ácido incluem sais de ácido aspártico, ácido glutâmico, e outros.

Entre os sais acima, um sal de sódio e um sal de potássio são os mais preferidos.

No que diz respeito à atividade fisiológica da grelina, é possível se selecionar derivados utilizando-se a atividade de ligante para o receptor GHS-Rla (GHS-R) e/ou a atividade fisiológica descrita acima, como um indicador. Como método de determinação para a concentração de íon cálcio intracelular, pode ser utilizado um método conhecido. Por exemplo, FLIPR ("Fluorometric Imaging Plate Reader" - leitora de placa de imagem fluorimétrica - da Molecular Devices Co., Ltd.) utilizando-se a flutuação da intensidade de fluorescência de Fluo-4 AM (da Molecular Probe Co., Ltd.) resultante da flutuação da concentração de íon cálcio, pode ser utilizado. Da mesma forma, de maneira a confirmar se o peptídeo apresentando atividade aumentada de cálcio apresenta ou não atividade de secretagogo de hormônio de crescimento in vitro ou in vivo, pode ser utilizado um método conhecido. Por exemplo, a atividade in vitro pode ser medida pela adição do peptideo a uma célula pituitária que secreta um hormônio de crescimento e tem expressão de GHS-R confirmada e pela determinação do hormônio de crescimento secretado em um meio de cultura de células por intermédio de um ensaio radio-imunológico utilizando um anticorpo anti-hormônio de crescimento. De maneira a confirmar a atividade aumentada de secreção de hormônio de crescimento in vivo, o peptideo com atividade aumentada de cálcio é injetado em uma veia periférica de um animal, e então é determinada a concentração do hormônio de crescimento no soro. No que diz respeito aos derivados de grelina e ao método de preparação desta, faz-se referência aqui, por exemplo, ao J. Med. Chem., 43, pgs. 4370-4376, 2000.

Observou-se que a substância que atua sobre GHS-Rla de acordo com a presente invenção (tal como grelina) apresenta uma atividade de proliferação de célula dérmica e marcadamente aumenta o número de células dérmicas fetais em particular.

Isto é, a substância que atua sobre GHS-Rla de acordo com a presente invenção (tal como grelina) pode ser utilizada como ingrediente ativo de um acelerador de regeneração dérmica no tratamento de lesão dérmica (tal como ferida, abrasão ou queimadura), com um acelerador de formação de uma folha de célula dérmica cultivada obtida pelo cultivo de uma célula dérmica (tal como célula de epiderme, cório e pele), e de um acelerador de recuperação de pele e um agente terapêutico no transplante de pele cultivada em lesão por queimadura, ulceração dérmica renitente, epidermólise bolhosa hereditária, úlcera de decúbito, cicatriz de obesidade, marca de nascença, doença dérmica alérgica grave e alopecia.

Além disto, a administração da substância que atua sobre GHS-Rla de acordo com a presente invenção (tal como grelina) a um organismo individual é utilizada no método para tratamento de lesão dérmica (tal como ferida, abrasão ou queimadura), o método para um acelerador de formação de uma folha de célula dérmica cultivada obtida pelo cultivo de uma célula dérmica (tal como célula de epiderme, cório e pele), o método para acelerador de recuperação de pele no transplante de pele cultivada em lesão por queimadura, ulceração dérmica renitente, epidermólise bolhosa hereditária, úlcera de decúbito, cicatriz de obesidade, marca de nascença, doença dérmica alérgica grave e alopecia, e o método para o tratamento das doenças mencionadas acima pela aceleração da recuperação.

Além disto, a administração da substância que atua sobre GHS-Rla de acordo com a presente invenção (tal como grelina) é utilizada para a produção de um acelerador de regeneração dérmica no tratamento de lesão dérmica (tal como ferida, abrasão ou queimadura), com um acelerador de formação de uma folha de célula dérmica cultivada obtida pelo cultivo de uma célula dérmica (tal como célula de epiderme, cório e pele), e de um acelerador de recuperação de pele e um agente terapêutico no transplante de pele cultivada em lesão por queimadura, ulceração dérmica renitente, epidermólise bolhosa hereditária, úlcera de decúbito, cicatriz de obesidade, marca de nascença, doença dérmica alérgica grave e alopecia.

O fármaco da presente invenção que contém a substância que atua sobre GHS-Rla de acordo com a presente invenção (tal como grelina) ou o sal farmaceuticamente aceitável desta, pode ser utilizado para organismos individuais (tais como um humano, camundongo, rato, coelho, cão, felino, bovino, eqüino, suino e primata), por sua mistura com um veiculo, excipiente, extensor ou semelhante farmaceuticamente aceitável.

O fármaco da presente invenção é preferivelmente administrado em dose única ou múltipla de uma quantidade predeterminada por via parenteral tal como injeção intravenosa, hipodérmica e intramuscular, a um indivíduo sendo submetido a tratamento de regeneração dérmica. Quando o indivíduo é um humano adulto particularmente sob tratamento domiciliar a rota preferida é transnasal, transpulmonar ou com supositório.

Na presente invenção, a dosagem do fármaco não é particularmente limitada, e pode ser apropriadamente selecionada dependendo do uso pretendido, da idade, peso corporal e tipo do indivíduo, sintoma, condição nutricional e fármacos concomitantes do indivíduo a receber a administração. Quando o fármaco é administrado em dose única ou múltipla a um humano adulto, a quantidade da substância que atua sobre GHS-Rla (tal como grelina) como ingrediente ativo é preferivelmente de 0,001 mg a 100 mg, mais preferivelmente de 0,01 mg a 10 mg.

É preferido se administrar a dosagem acima uma ou várias vezes ao dia por um período de 1 a 24 semanas, mais preferivelmente de 1 a 12 semanas.

Exemplos de veículo farmaceuticamente aceitável incluem diversas substâncias veículo orgânicas ou inorgânicas que são comumente utilizadas como materiais para formulação de fármacos. Tal veículo é misturado com um excipiente, lubrificante, ligante ou desintegrante para uma formulação sólida; e um solvente, agente solubilizante, agente de suspensão, agente de tonicidade, agente tampão e agente suavizante para uma formulação líquida.

Podem ser utilizados aditivos de formulação tais como anti-sépticos, antioxidantes, corantes e adoçantes, se desej ado.

Exemplos preferidos do excipiente incluem lactose, sacarose, D-manitol, amido, celulose cristalina, ácido salicílico anidro leve e outros.

Exemplos preferidos do lubrificante incluem estearato de magnésio, estearato de cálcio, talco, sílica coloidal e outros.

Exemplos preferidos do ligante incluem celulose cristalina, sacarose, D-manitol, dextrina, hidroxipropil celulose, polivinil pirrolidona e outros.

Exemplos preferidos do desintegrante incluem amido, carboximetil celulose, carboximetil celulose cálcica, croscarmelose sódica, carboximetil amido sódico e outros.

Exemplos preferidos de solvente incluem um solvente de injeção, álcool, propilenoglicol, macrogol, óleo de gergelim, óleo de milho e outros.

Exemplos preferidos do agente solubilizante incluem polietilenoglicol, propilenoglicol, D-manitol, benzoato de benzila, etanol, triaminometano, colesterol. trietanolamina, carbonato de sódio, citrato de sódio, e outros.

Exemplos preferidos do agente de suspensão incluem surfactantes tais como estearil trietanolamina, lauril- sulfato de sódio, ácido laurilaminopropiônico, lecitina, cloretos de benzalcônio, cloretos de benzetônio e monoestearato de glicerina; polímeros hidrofílicos tais como álcool polivinilico, polivinil pirrolidona, carboximetil celulose sódica, metilcelulose, hidroximetil celulose, hidroximetil celulose e hidroxipropil celulose; e outros.

Exemplos preferidos do agente de tonicidade incluem cloreto de sódio, glicerina, D-manitol, e outros.

Exemplos preferidos do agente tampão incluem um fosfato, acetato, carbonato, citrato e outros.

Um exemplo preferido do agente suavizante inclui álcool benzílico e outros.

Exemplos preferidos do anti-séptico incluem ésteres paraoxibenzoatos, clorobutanol, álcool benzílico, álcool fenetílico, ácido deshidroacético, ácido sórbico, e outros.

Exemplos preferidos do antioxidante incluem um sulfeto, ácido ascórbico e outros.

Uma forma preferida do fármaco da presente invenção é uma formulação adequada para administração parenteral. Exemplos da forma da formulação adequada para administração parenteral incluem uma solução injetável para administração intravenosa, intradérmica, hipodérmica ou intramuscular; um fluido intravenoso; supositório; absorvente percutâneo; adsorvente transmucosa e para inalação. Entre as formas, a foram de uma solução injetável é preferida, e particularmente quando o indivíduo é um humano adulto sob tratamento domiciliar, formas de um absorvente transmucosa, de inalação e supositórios são preferidas. Uma vez que estas formas de formulações são conhecidas dos especialistas na técnica, é possível para estes selecionar uma forma de formulação adequada para a rota de administração pretendida e formular um fármaco na forma de uma composição farmacêutica utilizando um ou mais aditivos utilizáveis na indústria farmacêutica, se desejado.

Por exemplo, um medicamento na forma de uma solução injetável ou fluido intravenoso é preparado e provido pela solubilização da substância que atua sobre GHS-Rla (tal como grelina) como ingrediente ativo, juntamente com um ou mais aditivos para uso na formulação, tais como uma solução tampão, solução de açúcar, agente de tonicidade, agente de ajuste de pH, agente suavizante e anti-séptico, em água destilada para injeção, submetendo a solução a filtração de desinfecção e colocando o filtrado em uma ampola ou frasco, ou liofilizando o filtrado obtido para se obter uma forma de dosagem liofilizada. Exemplos do aditivo incluem sacarídeos tais como glicose, manitol, xilitol e lactose; polímeros hidrofílicos tais como polietilenoglicol; álcoois tais como glicerol; aminoácidos tais como glicina; proteínas tais como albumina de soro; sais tais como NaCl e citrato de sódio; ácidos tais como ácido acético, ácido tartárico e ácido ascórbico; surfactantes tais como Tween 80; agentes redutores tais como sulfito de sódio; e outros. Estas formulações são utilizadas como soluções injetáveis ou fluidos intravenosos os dissolvendo em água destilada para injeção ou solução salina no momento da utilização. Agentes para administrações intranasais (administrações transnasais) tais como gotas nasais e spray intranasal são também preferidos para administração transmucosa, e um inalante ou semelhante é também preferido para administração transpulmonar.

É preferido que a quantidade do ingrediente ativo (tal como grelina) por unidade de formulação seja de 0,001 mg a 100 mg, pref erivelmente 0,01 mg a 10 mg, a qual é administrada uma ou várias vezes ao dia.

As células dérmicas isoladas são tratadas por incubação das células dérmicas isoladas em uma solução de cultura, depois pela adição de 0,1 nM a 1 . μΜ, pref erivelmente 1 nM a 100 nM, de uma substância que atua sobre GHS-Rla (tal como grelina) à solução incubada preparada por desinfecção por filtração ou desinfecção por autoclave. Isto é, é preferido se utilizar uma solução de cultura contendo de 0,0000001 mg/ml a 0,1 mg/ml da substância que atua sobre GHS-Rla para a proliferação da célula dérmica. Conforme mostrado no Exemplo 4, este tratamento acelera a proliferação da célula dérmica, a qual dificilmente se desenvolve sob condições normais.

Exemplos

Doravante a presente invenção será descrita especificamente por meio de Exemplos.

(Exemplo 1) Expressão de mRNA de GHS-Rla em feto de rato.

RNA total foi extraído de tecido de pele de um feto de rato Wistar nos 14°, 15° ou 19° dias de gestação, utilizando-se o reagente Total RNA Trizol (Life Technologies, Inc., Gaithersburug, MD), de acordo com o método descrito em Nakahara et al.: Biochem. Biophys. Res. Commun. 303: 751-755 (2003). Utilizando-se os reagentes de pré-amplificação Superscript 3 (Life Technologies, Inc., Bethesda, MD) , foi sintetizado um cDNA de fita única a partir de 2 μg do RNA total por transcrição reversa do iniciador randômico. 0 cDNA resultante foi amplificado pelo método PCR, utilizando-se uma iniciador senso e um iniciador anti-senso específicos para GHS-Rla (utilizando- se o sistema enzimático BD Advantage TM 2 PCR (BD Science, CA)), e então submetido a eletroforese utilizando-se gel de agarose a 2%. GAPDH, o qual foi expresso de maneira estável nas células, foi utilizado como mRNA de controle. No que diz respeito aos iniciadores específicos para GHS- R1a, 5'-GATACCTCTTTTCCAAGTCCTTCGAGCC-3' (SEQ ID No.: 22) foi utilizada como iniciador senso, enquanto que a 5'- TTGAACACTGCCACCCGGTACTTCT-3' (SEQ ID No.: 23) foi utilizada como iniciador anti-senso (nucleotídeos 842-869 e 1001-1025 acessíveis pelo n° AB001982, GenBank). No que diz respeito aos iniciadores específicos para GAPDH, 5'- CGGCAAGTTCAACGGCACA-3' (SEQ ID No.: 24) foi utilizada como o iniciador senso, enquanto que 5'-AGACGCCAGTAGACTCCACGACA- 3' (SEQ ID No.: 25) foi utilizada como iniciador anti-senso (nucleotídeos 1002-1020 e 1125-1147 acessíveis pelo n° AF106860, GenBank).

Os resultados são mostrados na Fig. 1.

A Fig. 1 mostra que mRNA de GHS-Rla foi expresso na pele do feto de rato nos 14°, 15° e 19° dias de gestação. 0 nível de expressão de mRNA de GHS-Rla foi particularmente alto na pele fetal nos 14° e 15° dias de gestação. (Exemplo 2) Atividade aumentada de cálcio intracelular de grelina em célula dérmica de feto cultivada.

Um rato Wistar no 17° dia de gestação foi submetido a laparotomia sob anestesia para a extração do feto. Um pequeno pedaço da pele foi coletado do feto, tratado com colagenase em solução de Hank fria, digerido com papaina, e separado mecanicamente por pipetagem. Isto produziu uma dispersão liquida das células dérmicas fetais. Foi obtida uma célula única a partir da dispersão liquida, foi adicionada grelina, e foi realizada imageologia de cálcio. Para a imageologia de cálcio, foi utilizado um dispositivo de imageologia de cálcio (IMACS, Hamamatsu Photonics). Isto é, a razão de emissão a um comprimento de onda de 510 nm foi mensurada quando a excitação foi realizada com luz 340 nm/380 nm. Foi utilizado Fura-2 como agente de imageologia de cálcio. Foi utilizada grelina derivada de um rato (SEQ ID No.: 3) (a mesma nos Exemplos a seguir).

Os resultados são mostrados na Fig. 2. Na Fig. 2, I, II e III são os pontos nos quais foi tomada uma fotografia, no entanto as fotografias foram omitidas no presente relatório. A curva em linha cheia mostra uma célula que respondeu a grelina, enquanto que a curva em linha pontilhada mostra uma outra célula que respondeu a desacilgrelina. Grelina e desacilgrelina foram adicionadas a células diferentes, respectivamente.

Quando grelina (1 χ IO"6 Μ) agiu sobre uma célula dérmica de um feto de rato, foi observado um aumento do cálcio na célula dérmica fetal única. Foi demonstrado que a grelina agiu sobre uma célula dérmica fetal apresentando GHS-Rla e cálcio aumentado na célula dérmica do feto de rato.

(Exemplo 3) Atividade de aceleração da absorção de timidina da grelina em célula dérmica fetal cultivada.

As células dérmicas de um feto de rato foram coletadas de um rato Wistar no 17° dia de gestação, e foi obtida uma dispersão liquida destas da mesma maneira que no Exemplo 2. As células dispersas foram suspensas em um meio MCDB153HAA (F-Peptide Co., Ltd., Yamagata, Japão) contendo soro bovino fetal a 2%, penicilina (100 U/ml), estreptomicina (100 μg/ml) e fator de crescimento epidérmico EGF (5 ng/ml), e semeadas em uma placa multi- poço de 48 poços revestida com polietilenoimina, em uma quantidade de 5 χ IO5 células/poço. Foram adicionadas grelina (0,5, 5 e 50 pmol/ml (nM))) e [3H]-timidina (2 μCi/ml), então se incubou por 24 horas ou 48 horas. Uma solução de cultura sem grelina foi preparada como controle. Após o término da incubação, as células foram coletadas e foi determinada a radioatividade.

Os resultados são mostrados na Fig. 3 (triângulo preto: 50 pmol/ml, quadrado preto: 5 pmol/ml, circulo negro: 0,5 pmol/ml, circulo branco: controle).

A Fig. 3 mostra que a absorção de [3H]-timidina na célula aumentou quando a grelina agiu sobre uma célula dérmica fetal cultivada e que, por esta razão, a grelina apresenta uma atividade que permite a proliferação de uma célula dérmica fetal.

(Exemplo 4) Atividade de aceleração da proliferação celular de grelina e GHRP6 em célula dérmica fetal cultivada. As células dérmicas fetais foram coletadas de um rato Wistar no 17° dia de gestação, e foi obtida uma dispersão liquida destas da mesma maneira que no Exemplo 2. As células dispersas com grelina (0,05 a 500 pmol/ml (nM)) ou GHRP6 (0,05 a 50 pmol/ml (nM) ) foram suspensas em um meio MCDB153HAA (F-Peptide Co., Ltd., Yamagata, Japão) contendo soro fetal bovino a 2%, penicilina (100 U/ml), estreptomicina (100 μg/ml) e fator de crescimento epidérmico EGF (5 ng/mL), e semeadas em uma placa multi- poço de 96 poços revestida com polietilenoimina, em uma quantidade de 3 χ IO4 células/poço. Um meio sem grelina ou GHRP6 foi utilizado como controle. Foi adicionada 5-bromo- 2'-desoxiuridina (BrdU) (10 μΜ), e incubou-se por 24 horas. Após o término da cultura, a quantidade de BrdU absorvida na célula dérmica fetal foi determinada utilizando-se o kit de proliferação ELISA (Roche Diagnostic GmbH. Manheim, Alemanha) para se considerar a atividade de crescimento de célula dérmica.

Os resultados são mostrados na Fig. 4.

A Fig. 4, mostra que a absorção de BrdU aumentou significativamente quando grelina ou GHRP6 agiram sobre uma célula dérmica fetal cultivada e que, por esta razão, a grelina ou GHRP6 apresentam uma atividade que permite a proliferação de uma célula dérmica fetal.

O agente terapêutico para lesões dérmicas, acelerador de regeneração dérmica, método de aceleração de crescimento de uma célula dérmica cultivada, e método de aceleração da regeneração dérmica da presente invenção podem ser aplicados nos campos farmacêutico e médico. LISTAGEM DE SEQÜÊNCIAS

<110> University of Miyazaki

National Cardiovascular Center, President Daiichi Asubio Pharma.CoLtd.

<120> Agente terapêutico acelerador de recuperação dérmica contendo grelina e derivados desta ou substâncias que atuam sobre GHS-Rla como ingrediente ativo.

<130> D05F2172

<160> 25

<210> 1

<211> 28

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) . . (28)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos humanos do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<400> 1

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Gln Arg 1 5 10 15

Lys Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg

20 25

<210> 2

<211> 27

<212> PRT

<213> Homo sapiens

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) .. (27)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos

humanos (27 aminoácidos) do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento <400> 2

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Arg Val Gln Arg Lys 1 5 10 15

Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg

20 25

<210> 3

<211> 28

<212> PRT

<213> Rattus norvegicus

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) .. (28)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de rato do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<400> 3

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala Gln Gln Arg 1 5 10 15

Lys Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg

20 25

<210> 4

<211> 27

<212> PRT

<213> Rattus norvegicus

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1)..(27)

<400> 4

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala Gln Arg Lys 1 5 10 15

Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg

20 25

<210> 5

<211> 28

<212> PRT

<213> Mus musculus <220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) .. (28)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de camundongo do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<400> 5

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Ala Gln Gln Arg 15 10 15

Lys Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg

20 25

<210> 6

<211> 28

<212> PRT

<213> Sus scrofa

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1)..(28)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de suino do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<4 00> 6

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Val Gln Gln Arg 15 10 15

Lys Glu Ser Lys Lys Pro Ala Ala Lys Leu Lys Pro Arg

20 25

<210> 7

<211> 27

<212> PRT

<213> Bos taurus

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1)..(27)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de bovino (27 aminoácidos) do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<400> 7

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Leu Gln Arg Lys 15 10 15

Glu Ala Lys Lys Pro Ser Gly Arg Leu Lys Pro Arg

20 25 <210> 8 <211> 27 <212> PRT <213> Ovis aries

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) . . (27) <223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de ovino (27 aminoácidos) do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<400> 8

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Leu Gln Arg Lys 15 10 15

Glu Pro Lys Lys Pro Ser Gly Arg Leu Lys Pro Arg

20 25

<210> 9

<211> 28

<212> PRT

<213> Canis familiaris

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1)..(28) <223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de cão do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<400> 9

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His Gln Lys Leu Gln Gln Arg 15 10 15

Lys Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Gln Pro Arg

20 25

<210> 10 <211> 21 <212> PRT

<213> Anguilla japonica <220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) .. (21)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de enguia do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento. Este peptideo é amidado no terminal C. <4 00> 10

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Ser Gln Arg Pro Gln Gly Lys Asp 15 10 15

Lys Lys Pro Pro Arg Val

20

<210> 11 <211> 23 <212> PRT

<213> Oncorhynchus mykiss <220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) .. (23)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptídeos endógenos de truta arco-íris (23 aminoácidos) do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento. Este peptídeo é amidado no terminal C.

<4 00> 11

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Ser Gln Lys Pro Gln Val Arg Gln 15 10 15

Gly Lys Gly Lys Pro Pro Arg Val

20

<210> 12 <211> 20 <212> PRT

<213> Oncorhynchus mykiss <220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) .. (20)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptídeos endógenos de truta arco-íris (20 aminoácidos) do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento. Este peptídeo é amidado no terminal C.

<400> 12

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Ser Gln Lys Pro Gln Gly Lys Gly 15 10 15

Lys Pro Pro Arg Val

20

<210> 13 <211> 24 <212> PRT <213> Gallus domesticus <220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) .. (24)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptídeos endógenos de frango do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<400> 13

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Thr Tyr Lys Asn Ile Gln Gln Gln 15 10 15

Lys Gly Thr Arg Lys Pro Thr Ala Arg

20

<210> 14 <211> 24 <212> PRT

<213> Gallus domesticus <220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) . . (24)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de frango do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<400> 14

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Thr Tyr Lys Asn Ile Gln Gln Gln 15 10 15

Lys Asp Thr Arg Lys Pro Thr Ala Arg

20

<210> 15

<211> 26

<212> PRT

<213> Gallus domesticus

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1)..(26)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de frango do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento <4 00> 15

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Thr Tyr Lys Asn Ile Gln Gln Gln 15 10 15

Lys Asp Thr Arg Lys Pro Thr Ala Arg Leu His

20 25

<210> 16

<211> 27

<212> PRT

<213> Rana

catesbeiana

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1)..(27)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de rã do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento

<4 00> 16

Gly Leu Thr Phe Leu Ser Pro Ala Asp Met Gln Lys Ile Ala Glu 15 10 15

Arg Gln Ser Gln Asn Lys Leu Arg His Gly Asn Met

20 25

<210> 17

<211> 28

<212> PRT

<213> Rana

catesbeiana

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1)..(28)

<400> 17

Gly Leu Thr Phe Leu Ser Pro Ala Asp Met Gln Lys Ile Ala Glu 15 10 15

Arg Gln Ser Gln Asn Lys Leu Arg His Gly Asn Met Asn

20 25

<210> 18

<211> 20

<212> PRT

<213> Tilapia nilotica <220>

<221> PEPTÍDEO

<222> (1) .. (20)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de tilápia do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento. Este peptideo é amidado no terminal C.

<400> 18

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro 1 5

Lys Ser Ser Arg Ile

20

Ser Gln Lys Pro Gln Asn Lys Val 10 15

<210> 19

<211> 22

<212> PRT

<213> Silurus asotus

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1) . . (22)

<400> 19

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro 1 5

Asp Arg Lys Pro Pro Arg Val

20

Thr Gln Lys Pro Gln Asn Arg Gly 10 15

<210> 20

<211> 23

<212> PRT

<213> Silurus asotus

<220>

<221> PEPTÍDEO <222> (1)..(23)

<223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de bagre do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento.

<400> 20

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Thr Gln Lys Pro Gln Asn Arg Gly 1 5 10 15

Asp Arg Lys Pro Pro Arg Val Gly

20 <210> 21 <211> 28 <212> PRT <213> Equus caballus

<220> <221> PEPTÍDEO <222> (1)..(28) <223> Seqüência de aminoácidos para peptideos endógenos de eqüino do receptor de secretagogo de hormônio de crescimento.

<400> 21

Gly Ser Ser Phe Leu Ser Pro Glu His His Lys Val Gln His Arg 1 5 10 15

Lys Glu Ser Lys Lys Pro Pro Ala Lys Leu Lys Pro Arg

20 25

<210> 22

<211> 28

<212> DNA

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Iniciador

<400> 22

gatacctctt ttccaagtcc ttcgagcc

28

<210> 23

<211> 25

<212> DNA

<213> Seqüência artificial

<220>

<223> Iniciador

<400> 23

ttgaacactg ccacccggta cttct

25

<210> 24

<211> 19

<212> DNA

<213> Seqüência

artificial <220>

<223> Iniciador <400> 24

cggcaagttc aacggcaca 19

<210> 25

<211> 23

<212> DNA

<213> Seqüência

<220>

<223> Iniciador

artificial

<400> 25

agacgccagt agactccacg aca

23

Claims

1. Agente terapêutico para lesões dérmicas caracterizado pelo fato de compreender uma substância que atua sobre um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como ingrediente ativo.

2. Agente terapêutico de acordo com a reivindicação -1, caracterizado pelo fato da substância ser um peptideo selecionado do grupo consistindo em (i) um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual um ácido graxo é introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e (ii) um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um ou vários dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

3. Agente terapêutico de acordo com a reivindicação -2, caracterizado pelo fato da substância ser um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

4. Agente terapêutico de acordo com a reivindicação -3, caracterizado pelo fato da substância ser um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila acilado na cadeia lateral com um grupo n-octanoil.

5. Agente terapêutico de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de conter o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por unidade de formulação.

6. Acelerador de regeneração dérmica caracterizado pelo fato de compreender uma substância que atua sobre um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como ingrediente ativo.

7. Acelerador de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato da substância ser um peptideo selecionado do grupo consistindo em (i) um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual um ácido graxo é introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e (ii) um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um ou vários dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

8. Acelerador de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato da substância ser um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

9. Acelerador de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato da substância ser um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila acilado na cadeia lateral com um grupo n-octanoil.

10. Acelerador de acordo com qualquer uma das reivindicações 6a 9, caracterizado pelo fato de conter o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por unidade de formulação.

11. Método para acelerar a proliferação de uma célula dérmica cultivada, caracterizado pelo fato de utilizar uma substância que atua sobre um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como ingrediente ativo.

12. Método de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato da substância ser um peptideo selecionado do grupo consistindo em (i) um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual um ácido graxo é introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e (ii) um peptideo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um ou vários dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

13. Método de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

14. Método de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila acilado na cadeia lateral com um grupo n-octanoil.

15. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 11 a 14, caracterizado pelo fato da proliferação da célula dérmica cultivada ser realizada em um meio contendo o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,0000001 mg/ml a 0,1 mg/ml.

16. Método de tratamento de lesões dérmicas, caracterizado pelo fato de compreender a administração de uma substância que atua sobre um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como ingrediente ativo, a um mamífero necessitando de tratamento de lesões dérmicas.

17. Método de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo selecionado do grupo consistindo em (i) um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual um ácido graxo é introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e (ii) um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um ou vários dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

18. Método de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

19. Método de acordo com a reivindicação 16, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila acilado na cadeia lateral com um grupo n-octanoil.

20. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 16 a 19, caracterizado pelo fato do ingrediente ativo ser administrado em uma quantidade de -0,001 mg a 100 mg.

21. Método para acelerar a regeneração dérmica, caracterizado pelo fato de compreender a administração de uma substância que atua sobre um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou um sal farmaceuticamente aceitável desta como ingrediente ativo, a um mamífero necessitando de aceleração de regeneração dérmica.

22. Método de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo selecionado do grupo consistindo em (i) um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual um ácido graxo é introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e (ii) um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um ou vários dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

23. Método de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

24. Método de acordo com a reivindicação 23, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila acilado na cadeia lateral com um grupo n-octanoil.

25. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 24, caracterizado pelo fato do ingrediente ativo ser administrado em uma quantidade de -0,001 mg a 100 mg.

26. Uso de uma substância que atua sobre um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou de uma sal farmaceuticamente aceitável desta, caracterizado pelo fato de ser como ingrediente ativo na produção de uma composição farmacêutica para o tratamento de lesões dérmicas.

27. Uso de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo selecionado do grupo consistindo em (i) um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual um ácido graxo é introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e (ii) um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um ou vários dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

28. Uso de acordo com a reivindicação 27, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

29. Uso de acordo com a reivindicação 28, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila acilado na cadeia lateral com um grupo n-octanoil.

30. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 26 a 29, caracterizado pelo fato da composição farmacêutica para o tratamento de lesões dérmícas conter o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por unidade de formulação.

31. Uso de uma substância que atua sobre um receptor de secretagogo de hormônio de crescimento ou de uma sal farmaceuticamente aceitável desta, caracterizado pelo fato de ser como ingrediente ativo na produção de uma composição farmacêutica para acelerar a regeneração dérmica.

32. Uso de acordo com a reivindicação 31, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo selecionado do grupo consistindo em (i) um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um terceiro resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado no qual um ácido graxo é introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido e (ii) um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um ou vários dos 5o ao 28° aminoácidos do terminal amino são deletados, substituídos e/ou adicionados, e o 3o resíduo de aminoácido do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido na cadeia lateral do resíduo de aminoácido, ou um sal farmaceuticamente aceitável deste.

33. Uso de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No.: 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino é um resíduo de aminoácido modificado contendo um ácido graxo introduzido no grupo hidroxila da cadeia lateral do resíduo de aminoácido.

34. Uso de acordo com a reivindicação 33, caracterizado pelo fato da substância ser um peptídeo apresentando uma seqüência de aminoácidos representada pela SEQ ID No. : 1, na qual um resíduo de serina na 3a posição do terminal amino contém um grupo hidroxila acilado na cadeia lateral com um grupo n-octanoil.

35. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações -31 a 34, caracterizado pelo fato da composição farmacêutica para acelerar a regeneração dérmica conter o ingrediente ativo em uma quantidade de 0,001 mg a 100 mg por unidade de formulação.