BRPI0616196A2 - uso de inibidores do permutador na+/h+, subtipo 5 (nhes) para melhorar a retenÇço de memària - Google Patents

Abstract

USO DE INIBIDORES DO PERMUTADOR NA^ +^/H^ +^, SUBTIPO 5 (NHE5) PARA MELHORAR A RETENÇçO DE MEMàRIA. A presente invenção refere-se ao uso de inibidores do permutador Na^ +^/H^ +^, subtipo 5 (NHE5), para produção de um medicamento para tratar doenças neurodegenerativas, distúrbios de memória e doenças de demência, bem como para melhorar de retenção de memória.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "USO DE INI-BIDORES DO PERMUTADOR NA+/H+, SUBTIPO 5 (NHE5) PARA ME-LHORAR A RETENÇÃO DE MEMÓRIA".

A presente invenção refere-se ao uso de inibidores do permuta-dor Na7H+, subtipo 5 (NHE5) para a produção de um medicamento para otratamento de distúrbios neurodegenerativos, enfraquecimentos de memóriae distúrbios de demência, e para melhorar a memória.

O termo demência refere-se a um declínio na capacidade inte-lectual. É entendido significar em particular o decréscimo de memória e ca-pacidade de pensar. Demência no idoso ou demência senil refere-se a umdeclínio intelectual adquirido, progressivo em pessoas de idade avançadaque é atribuível às anomalias estruturais e/ou metabólicas no sistema centralnervoso. Aproximadamente 7% da população com mais de 65 anos de idadesofrem de demência de severidade variável. As causas de demência variam:a doença de Alzheimer é a forma mais comum, sendo responsável por até50%, seguida por demências vasculares tais como demência por múltiplosinfartos, e combinações destas duas formas. Causas muito raras são muta-ções tau, doenças de priônio, distúrbios de expansão de poliglutamina taiscomo Coréia de Huntingon e ataxias espinocerebelares, e Parkinsonismo.Também conhecidas além dessas são demências secundárias e/ou associ-adas com infecções (por exemplo, com HIV), traumas cerebrais, tumorescerebrais ou intoxicações (por exemplo, com álcool).

O conceito de consolidação de memória é baseado na capaci-dade de novas memórias estabilizarem-se durante o curso de tempo e dessemodo tornarem-se menos sensíveis à interferência por nova informação edisfunções do cérebro. É possível com o auxílio do modelo celular predomi-nante de potenciação a longo prazo (LTP) investigar mecanismos e aspectosessenciais de consolidação e formação de memória (Neuroscientist. 9: 463-474. 2003; Brain Res Brain Res Rev. 45: 30-37, 2004; Physiol Rev. 84: 87-136,2004).

Uma das regiões mais importantes do cérebro em que a infor-mação é armazenada e processada é a formação do hipocampo. Há muitotempo sabe-se que certos padrões de estimulação elétrica (tetanização) nohipocampo induzem à alterações na eficiência sináptica (Bliss e Lomo,J Physiol. 232: 331-356, 1973) que são agora referidos como 'potenciação alongo prazo 1 ou 'LTP', e que foram subseqüentemente confirmadas em ou-tras áreas do cérebro em uma ampla variedade de mamíferos, tanto in vitroquanto in vivo. LTP é atualmente considerada como um importante compo-nente do mecanismo neuronal subjacente ao aprendizado e memória. Sabe-se também que uma fraca LTP correlaciona-se com a memória a curta pra-zo, e uma forte LTP com memória a longo prazo (J Neurosci. 20: 7631-7639,2000; Proc Natl Acad Sci USA. 97: 8116-8121, 2000).

O hipocampo desempenha um papel central em processos deaprendizado episódico, espacial e declarativo e de memória, ele é essencialpara orientação espacial e recordação de estruturas espaciais e desempe-nha um papel importante no controle de funções autonômicas e vegetativas(McEwen 1999, Stress and hippocampal plasticity, Annual Review de Neu-roscience 22: 105-122). Em distúrbios de demência de seres humanos exis-tem usualmente processos de enfraquecimento de aprendizado e memóriaem que o hipocampo está envolvido. Experimentos animais em outros mamí-feros têm mostrado resultados similares.

Desse modo, foi possível mostrar que camundongos velhos têmdeficits em memória espacial e na LTP em comparação com camundongosjovens, e que substâncias que melhoraram a LTP simultaneamente reduzi-ram os déficits de memória (Bach e outros, 1999, Defeitos relacionados coma idade em memória espacial estão correlacionados com defeitos na fasetardia de potenciação a longo prazo do hipocampo in vitro e são atenuadospor fármacos que realçam a trilha de sinalização de cAMP. Proc Natl AcadSci USA. 27; 96:5280-5; Fujii & Sumikawa 2001, exposição à nicotina agu-da e crônica revertem o declínio relacionados com a idade na indução depotenciação a longo prazo no hipocampo do rato. Brain Res. 894:347-53,Clayton e outros, 2002, um déficit de NR2B do hipocampo pode imitar asalterações relacionadas com a idade em potenciação a longo prazo e apren-dizado espacial no rato Fischer 344. J Neurosci.22:3628-37).Foi possível mostrar in vivo e in vitro em animais transgênicos epor administração de peptídeos beta-amilóides que os peptídeos afetam ad-versamente LTP ou interferem com a manutenção desta (Ye & Qiao 1999,ação supressiva produzida por fragmento de peptídeo beta-amilóide 31-35em potenciação a longo prazo em hipocampo de rato é independente do re-ceptor de aspartato N-metil-D: ela é compensada por (-)huperzine A. Neu-rosci Lett. 275:187-90. Rowan e outros, 2003, Plasticidade sinática em mo-delos de animal de doença de Alzheimer precoce. Philos Trans R Soc LondB Biol Sei. 358: 821-8, Gureviciene e outros, 2004, Indução normal, porémdeclínio acelerado de LTP em camundongos transgênicos APP + PS1. Neu-robiol Disl 5:188-95). Foi possível corrigir o enfraquecimento da LTP e dasfunções da memória por inibidores com rolipram e colinesterase como aque-les também empregados na terapia de Alzheimer humano (Gong e outro,2004, Melhoras persistentes em funções sinápticas e cognitivas em um mo-delo de camundongo de Alzheimer após tratamento com rolipram. J Clin In-vest. 114:1624-34.)

Desse modo, deve-se esperar que substâncias que melhoram aLTP terá também um efeito benéfico em distúrbios associados com enfra-quecimentos cognitivos e demência.

Foi surpreendentemente descoberto que inibidores de NHE5celular realçam LTP. Um efeito de melhora de memória do inibidor em dis-túrbios de demência tal como Alzheimer e formas semelhantes ao Alzheimeré, portanto, é esperado. O uso de um inibidor de NHE5 tem a vantagem so-bre os ingredientes ativos empregados até hoje para estes distúrbios, talcomo inibidores de acetilcolinesterase, cujos efeitos sistêmicos espera-seque sejam leves ou ausentes, porque NHE5 é expresso apenas em neurô-nios e é desse modo, específicos do cérebro (Am. J. Physiol. Cell. Physiol.281: C1146-C1157, 2001).

Inibidores de NHE5 são, portanto, adequados para o tratamentode distúrbios neurodegenerativos, enfraquecimentos de memória e distúrbiosde demência tal como demência no idoso, Alzheimer, demências vascularestais como, por exemplo, demência por múltiplos infartos, combinações deDistúrbios de Alzheimer e cerebrovasculares, mutações tau, doenças de pri-ônio, distúrbios de expansão de poliglutamina tais como, por exemplo, Co-réia de Huntingon e ataxias espinocerebelares, e Parkinsonismo, e para me-lhorar a memória. Inibidores de NHE5 são também adequados para o trata-mento de demências secundárias seguidas e/ou associadas com infecçõestal como, por exemplo, com HIV, traumas cerebrais, tumores cerebrais ouintoxicações tal como, por exemplo, com álcool.

Particularmente adequados para o tratamento de distúrbios neu-rodegenerativos, enfraquecimentos de memória e distúrbios de demência, epara melhorar a memória, são os seguintes inibidores NHE5 da Fórmula I

<formula>formula see original document page 5</formula>

em que os significados são:R1, R2, R3 e R4

independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, Br, I, CN,NO2 ou RH-(CmH2m)-An-;

m zero, 1, 2, 3 ou 4;

η zero ou 1;

R11 hidrogênio, metila ou CpF2p+-|;

A oxigênio, NH, N(CH3) ou S(O)q;

ρ 1,2 ou 3;

q zero, 1 ou 2;

R5 hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de C ou ciclo-alquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;

R6 hidrogênio, OH, F, CF3, alquila tendo 1, 2, 3 ou 4 áto-mos de C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;R7 e R8

independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, Br, CN,CO2R12, NR13R14 ou R16-(CmmH2mm)-Enn-;R12 hidrogênio, alquila tendo 1,2, 3 ou 4 átomos de C oucicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;R13 e R14

Independentemente um do outro hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3ou 4 átomos de C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;ou

R13 e R14

formam com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ligados umanel de 4, 5, 6 ou 7 membros em que um grupo CH2 pode ser substituídopor NR15, S ou oxigênio;

R15 hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3 ou 4 áto-

mos de C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;mm zero, 1, 2, 3 ou 4;

nn zero ou 1;

R16 hidrogênio, metila ou CppF2pp+i;

E oxigênio ou S(O)qq; pp 1, 2 ou 3;

qq zero, 1 ou 2;

e os sais farmaceuticamente aceitáveis e trifluoroacetatos des-tes.

A preferência é dada em uma modalidade aos compostos daFórmula I em que os significados sãoR1, R2, R3 e R4

independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, Br, CN ouRIi-(CmH2m)-An-;

m zero ou 1;

η zero ou 1;

R11 hidrogênio, metila ou CpF2p+i;

A oxigênio, NCH3 0u S(O)q;

ρ 1 OU 2;

q zero, 1 ou 2;

R5 hidrogênio, metila, etila ou ciclopropila;

R6 hidrogênio ou metila;R7 e R8

independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, CN1 CO2RI2,NR13R14 ou R16-(CmmH2mm)-Enn-;

R12 hidrogênio, metila ou etila;

R13 e R14

independentemente um do outro hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3ou 4 átomos de C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C; ou

R13 e R14

formam com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ligados umanel de 5, 6 ou 7 membros em que um grupo CH2 pode ser substituído porNR15, S ou oxigênio;

R15 hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3 ou 4 átomos de C oucicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;

mm zero, 1 ou 2;

nn zero ou 1;

R16 hidrogênio, metila ou CppF2pp+i;

E oxigênio ou S(0)qq;

pp 1 ou 2;

qq zero, 1 ou 2;

e os sais farmaceuticamente aceitáveis e trifluoroacetatos destes.A particular preferência é dada a compostos da Fórmula I emque os significados são

R1 e R3

hidrogênio;

R2 e R4

independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, NH2, NHCH3ou N(CH3)2;

R5 hidrogênio, metila, etila ou ciclopropila;

R6 hidrogênio ou metila;

R7 e R8

hidrogênio;e sais farmaceuticamente aceitáveis e trifluoroacetatos destes.Preferência específica é dada à N-diaminometileno-4-(6,8-dicloro-2-metil-1,2,3,4-tetraidroisoquinolin-4-il)benzenossulfonamida e seussais farmaceuticamente aceitáveis e trifluoroacetatos destes.

A preferência é dada em uma modalidade aos compostos da

Fórmula I em que os radicais R1, R2, R3 e R4 são descritos independente-mente um do outro por hidrogênio, F, Cl, Br, CN ou R11-(CmH^m)-An-. emque m e η são independentemente um do outro zero ou 1, R11 é hidrogênio,metila ou CpF2p+i, e A é oxigênio, NCH3 ou S(O)q, em que ρ é 1 ou 2 e q ézero, 1 ou 2; a particular preferência é dada a compostos da Fórmula I emque R1 e R3 são hidrogênio, e R2 e R4 são independentemente um do outrohidrogênio, F, Cl, NH2, NHCH3 ou N(CH3)2, por exemplo, Cl. A preferência

é dada em uma modalidade aos compostos da Fórmula I em que R2 e R4não são hidrogênio.

A preferência é dada em uma outra modalidade aos compostosda Fórmula I em que R5 é descritos por hidrogênio, metila, etila ou ciclopro-pila, por exemplo, metila.

A preferência é dada em uma outra modalidade aos compostosda Fórmula I em que R6 é descritos por hidrogênio ou metila.

A preferência é dada em uma outra modalidade aos compostosda Fórmula I em que os radicais R7 e R8 são descritos independentementeum do outro por hidrogênio, F, Cl, CN, CO2RI2, NR13R14 ou R16-

(cmmH2mm)-Enn-> em cIue R12 é hidrogênio, metila ou etila, R13 e R14 são

independentemente um do outro hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3 ou 4 áto-

mos de C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C, R13 e R14 formamjuntamente com o átomo de nitrogênio aos quais eles são ligados um anelde 5, 6 ou 7 membros em que um grupo CH2 pode ser substituído por NR15,

S ou oxigênio, e em que R15 é hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3 ou 4 átomosde C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C, e em que mm é zero, 1ou 2, nn é zero ou 1, e R16 é hidrogênio, metila ou CppF2pp+i, em que E éoxigênio ou S(O)qq, em que pp é 1 ou 2 e qq é zero, 1 ou 2; a particular pre-ferência é dada aos compostos da Fórmula I em que R7 e R8 são hidrogê-nio.

Se os compostos da Fórmula I contiverem um ou mais centrosde assimetria, estes podem independentemente um do outro ter tanto a con-figuração S quanto a R. Os compostos podem ser na forma de isômeros óti-cos, de diastereômeros, de racematos ou de misturas em todas proporçõesdestes.

A presente invenção inclui todas as formas tautoméricas doscompostos da Fórmula I.

A presente invenção também inclui derivados dos compostos daFórmula I, por exemplo, solvatos tais como hidratos e aduções de álcool,ésteres, fármacos e outros derivados fisiologicamente aceitáveis dos com-postos da Fórmula I, e metabólitos ativos dos compostos da Fórmula I. Ainvenção inclui igualmente todas as modificações de cristal dos compostosda Fórmula I.

Radicais de alquila podem ser de cadeia linear ou ramificada.

Isto também aplica-se se eles tiverem substituintes ou ocorrerem comosubstituintes de outros radicais, por exemplo, em radicais de fluoroalquila ouradicais de alcóxi. Exemplos de radicais de alquila são metila, etila, n-propila,isopropila (= 1-metiletila), n-butila, isobutila (= 2-metilpropila), sec-butila(= 1-metilpropila), terc-butila (= 1,1-dimetiletila), n-pentila, isopentila, terc-pentila, neopentila e hexila. Radicais de alquila preferidos são metila, etila, n-propila, isopropila e n-butila. Um ou mais, por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8,9, 10, 11, 12, 13 ou 14, átomos de hidrogênio em radicais de alquila podemser substituídos por átomos de flúor. Exemplos de tais radicais de fluoroal-quila são trifluorometila, 2,2,2-trifluoroetila, pentafluoroetila, heptafluoroiso-propila. Radicais de alquila substituídos podem ser substituídos em quais-quer posições.

Radicais de alquileno tais como, por exemplo, CmH2m, Cm.mH2mm ou podem ser de cadeia linear ou ramificada. Isto tambémaplica-se se eles tiverem substituintes ou ocorrerem como substituintes deoutros radicais, por exemplo, em radicais de fluoroalquileno tais como, porexemplo, em CpF2p e CppF2pp. Exemplos de radicais de alquileno são me-tileno, etileno, 1-metilmetileno, propileno, 1-metiletileno, butileno, 1-propil-metileno, 1-etil-1-metilmetileno, 1,2-dimetiletileno, 1,1-dimetilmetileno,1-etiletileno, 1-metilpropileno, 2-metilpropileno, pentileno, 1-butilmetileno, 1-propiletileno, 1 -metil-2-etiletiteno, 1,2-dimetilpropileno, 1,3-dimetilpropileno,2,2-dimetilpropileno, hexileno e 1-metilpentileno. Um ou mais, por exemplo,1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 12, átomos de hidrogênio em radicais dealquileno podem ser substituídos por átomos de flúor. Radicais de alquilenosubstituídos podem ser substituídos em quaisquer posições. Um ou maisgrupos CH2 nos radicais de alquileno podem ser substituído por oxigênio, S,NH, N-alquila ou N-cicloalquila.

Exemplos de radicais de cicloalquila são ciclopropila, ciclobutila,ciclopentila ou cicloexila. Um ou mais, por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9,10, 11 ou 12, átomos de hidrogênio em radicais de cicloalquila podem sersubstituídos por átomos de flúor. Radicais substituídos de cicloalquila podemser substituídos em quaisquer posições. Radicais de cicloalquila podemtambém ser em forma ramificada, como alquilcicloalquila ou cicloalquilalqui-la, por exemplo, metilcicloexila ou cicloexilmetila.

Exemplos de anéis derivados de NR13R14, em que R13 e R14formam com o átomo de hidrogênio ao qual eles são ligados um anel de 4, 5,6 ou 7 membros em que um grupo CH2 pode ser substituído por NR15, S ouoxigênio, são morfolina, pirrolidina, piperidina, piperazina e N-metilpiperazina.

Se uma variável ocorrer mais do que uma vez como componen-te, as definições da variável são independentes de um a outro para cadaocorrência.

Se os compostos da Fórmula I compreendem um ou mais gru-pos acídicos ou básicos ou um ou mais heterociclos básicos, os sais fisiolo-gicamente ou toxicologicamente aceitáveis também pertencem à invenção,especialmente os sais farmaceuticamente utilizáveis. Desse modo, os com-postos da Fórmula I podem ser desprotonados e um grupo acídico e seremusados, por exemplo, como sais de metal de álcali, preferivelmente sais desódio ou potássio, ou como sais de amônio, por exemplo, como sais comamônia ou aminas orgânicas ou aminoácidos. Visto que os compostos daFórmula I sempre compreendem pelo menos um grupo básico, eles podemtambém ser preparados na forma de seus sais de adição farmaceuticamentetolerados, por exemplo, com os seguintes ácidos: a partir de ácidos inorgâni-cos tal como ácido clorídrico, ácido sulfúrico ou ácido fosfórico ou de ácidosorgânicos tal como ácido acético, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido láctico,ácido malônico, ácido metanossulfônico, ácido fumárico. Sais de adição deácido adequados neste contexto são sais de todos os ácidos farmaceutica-mente aceitáveis, por exemplo, haletos, em particular cloridratos, lactatos,sulfatos, citratos, tartaratos, acetatos, fosfatos, metilsulfonatos, p-toluenossulfonatos, adipatos, fumaratos, gliconatos, glitamatos, glicerolfosfa-tos, maleatos e pamoatos (este grupo também corresponde aos ânions fisio-Iogicamente aceitáveis); porém também trifluoroacetatos.

Os compostos da Fórmula I descritos aqui podem ser prepara-dos por clorossulfonação de compostos da Fórmula Vlll por processos co-nhecidos pelo versado com reação subseqüente com guanidina por proces-sos conhecidos pelo versado (como descrito, por exemplo, em SyntheticCommunications, 33(7), 1073; 2003).

H2N

Oj? V NH*S~N

O intermediário da Fórmula Xll obtido após a clorossulfonaçãonão é necessário para ser isolado, porém pode ser reagido diretamente tam-bém com guanidina.

oj? />"N

Os compostos de partida da Fórmula Vlll podem ser preparadoscomo segue:

É possível reduzir o grupo carbonila em compostos da FórmulaVI, por exemplo, com boroidreto de sódio, e ciclização catalisada por baseou ácido subseqüênte dos álcools resultantes da Fórmula Vll (cf. Tetrahe-dron Lett, 1989, 30, 5837; Org. Prep. Proced. Int. 1995, 27, 513) para prepa-rar tetraidroisoquinolinas da Fórmula Vllla por processos conhecidos peloversado, em que R1 a R8 têm o significado acima mencionado.

<formula>formula see original document page 12</formula>

Compostos ramificados por alquila da Fórmula I em que R6 nãoé hidrogênio podem ser preparados alquilando os ésteres difenilacéticos cor-respondentes da Fórmula IX na posição alfa com R6 por métodos conheci-dos. Os compostos da Fórmula X podem ser convertidos por processos pa-drão até as amidas correspondentes da Fórmula Xl que são convertidas nareação análoga de Pictet-Spengler nas tetraidroisoquinolinas desejadas daFórmula Vlllb (cf. Tetrahedron 1987, 43, 439; Chem. Pharm. Buli. 1985, 33,340), em que R1 a R8 são como definidos acima , e LG correspondem a umgrupo de partida convencional para alquilações, tais como, por exemplo,brometo, cloreto, tosilato ou mesilato.<formula>formula see original document page 13</formula>

Os compostos da Fórmula Vl empregados acima são preferivel-mente preparados de benzilaminas da Fórmula IV de uma maneira conheci-da pelo versado e dos compostos de alfa-bromoacetofenona substituído poramino apropriados da Fórmula V, em que R1 a R8 são como definidos acima

<formula>formula see original document page 13</formula>

Os compostos alfa-bromoacetofenona da Fórmula V podem serobtidos em processos conhecidos da literatura dos percursores de acetofe-nona correspondentes por brominação.

Os percursores de benzilamina da Fórmula IV podem, se nãoobteníveis por aquisição, ser sintetizados por processos padrão conhecidospelo versado dos haletos de benzila correspondentes, por exemplo, brome-tos ou cloretos de benzila, da Fórmula Ill e das aminas correspondentes R5-NH2,

em que R1 a R5 são como definidos acima , e X é F, Cl, Br ou I,em particular Cl ou Br.<formula>formula see original document page 14</formula>

Alternativamente, compostos da Fórmula IV podem também serobtidos por aminação redutiva de um aldeído da Fórmula Illa por processospadrão conhecidos pelo versado,

em que R1 a R5 são como definidos acima.

<formula>formula see original document page 14</formula>

Os compostos das Fórmulas Ill e llla, IX e R6-LG e R5-NH2 po-dem ser obtidos por aquisição ou podem ser preparados por, ou em analogiaaos processos descritos na literatura e conhecidos pelo versado.

A preparação e, se desejado, a purificação dos produtos e/ouintermediários ocorre por métodos convencionais tais como extração, croma-tografia ou cristalização e secagens convencionais.

A invenção refere-se ao uso dos compostos da Fórmula I e ossais farmaceuticamente aceitáveis destes para a produção de um medica-mento para o tratamento de distúrbios neurodegenerativos, enfraquecimentode memória e distúrbios de demência tal como demência no idoso, Alzhei-mer, demências vasculares tais como, por exemplo, demência por múltiplosinfartos, combinações de Alzheimer e distúrbios cerebrovasculares, muta-ções tau, doenças de priônio, distúrbios de expansão de poliglutamina taiscomo, por exemplo, coréia de Huntingon e ataxias cerebelares, e Parkinso-nismo, e para melhorar a memória. Inibidores de NHE5 são também ade-quados para o tratamento de demências secundárias seguidas e/ou associ-adas com infecções tal como, por exemplo, com HIV, traumas cerebrais, tu-mores cerebrais ou intoxicações tal como, por exemplo, com álcool.

A invenção também refere-se a medicamentos para uso humanoou veterinário compreendendo uma quantidade eficaz de um composto daFórmula I e/ou de um sal farmaceuticamente aceitável deste, bem como me-dicamentos para uso humano ou veterinário compreendendo uma quantida-de eficaz de um composto da Fórmula I e/ou de um sal farmaceuticamenteaceitável deste sozinho ou em combinação com um ou mais outros medica-mentos ou ingredientes ativos farmacológicos.

Medicamentos que compreendem um composto da Fórmula I ouseus sais farmaceuticamente aceitáveis podem, por exemplo, ser adminis-trados oralmente, parenteralmente, intramuscularmente, intravenosamente,retalmente, nasalmente, por inalação, subcutaneamente ou por uma formade dosagem transcutaneamente adequada, e a administração depende damanifestação particular do distúrbio. Os compostos da Fórmula I podem,além disso, ser usados sozinhos ou juntamente com excipientes farmacêuti-cos, em particular tanto em medicamento veterinário quanto humano. Osmedicamentos compreendem ingredientes ativos da Fórmula I e/ou seussais farmaceuticamente aceitáveis geralmente em um quantidade a partir de0,01 mg a 1 g por unidade de dose.

O versado é familiar com base em seu conhecimento de peritocom os quais excipientes são adequados para a formulação farmacêuticadesejada. Além de solventes, formadores de géis, bases de supositório, ex-cipientes de comprimido, e outros veículos de ingrediente ativo, é possívelusar, por exemplo, antioxidantes, dispersantes, emulsificantes, antiespuman-tes, flavorizantes de mascaramento, conservantes, solubilizantes ou coloran-tes.

Para uma forma para uso oral, os compostos ativos são mistura-dos com os aditivos adequados para este objetivo, tais como veículos, esta-bilizadores ou diluentes inertes, e convertidos por métodos convencionaisem formas de dosagem adequadas tais como comprimidos, comprimidosrevestidos, cápsulas de duas partes, soluções aquosas, alcólicas ou oleo-sas. Exemplos de veículos inertes que podem ser usados são goma-arábica,magnésia, carbonato de magnésio, fosfato de potássio, lactose, glicose ouamido, especialmente amido de milho. A preparação pode tomar lugar juntocomo grânulos secos ou úmidos. Exemplos de solventes ou veículos oleososadequados são óleos vegetáveis ou animais, tal como óleo de girassol ouóleo de fígado de peixe.

Para administração subcutânea, percutânea, ou intravenosa, oscompostos ativos usados são convertidos se desejado com as substânciashabituais para este objetivo, tais como solubilizantes, emulsificantes ou ou-tros excipientes, em solução, suspensão ou emulsão. Exemplos de solven-tes adequados são: água, solução salina fisiológica ou álcools, por exemplo,etanol, propanol, glicerol, bem como soluções de açúcar tais como soluçõesde glicose ou manitol, ou então uma mistura dos vários solventes mencionados.

Adequado como formulação farmacêutica para administração naforma de aerossóis ou sprays são, por exemplo, soluções, suspensões ouemulsões do ingrediente ativo da Fórmula I em um solvente farmaceutica-mente aceitável tal como, em particular, etanol ou água, ou uma mistura detais solventes. A formulação pode se requerida, também compreender outrosexcipientes farmacêuticos tais como tensoativos, emulsificantes e estabiliza-dores, e um gás propelente. Uma tal preparação normalmente compreendeingrediente ativo em uma concentração de cerca de 0,1 a 10, em particularde cerca de 0,3 a 3% por peso.

A dosagem do ingrediente ativo da Fórmula I a ser administrada,e a freqüência de administração, depende da potência e duração de açãodos compostos usados; adicionalmente também da natureza e gravidade dadoença a ser tratada, e do sexo, idade, peso e resposta individual do mamí-fero a ser tratado.

Em média, a dose diária de um composto da Fórmula I para umpaciente pesando cerca de 75 kg é pelo menos 0,001 mg/kg, preferivelmente0.1 mg/kg, a no máximo 30 mg/kg, preferivelmente 1 mg/kg, de peso corpo-ral, mesmo doses maiores podem também ser necessárias em situaçõesagudas, por exemplo, imediatamente após sofrer estados apnéicos em altaaltitude. Até 300 mg/kg por dia pode ser necessário especialmente em usoi.v., por exemplo, para um paciente de infarto em uma unidade de cuidadointensivo. A dose diária pode ser dividida em uma ou mais, por exemplo, até4, doses simples.

DESCRIÇÕES EXPERIMENTAIS E EXEMPLOSLISTA DE ABREVIAÇÕES USADAS:

AMPA canais acoplados a receptore que podem ser ativadospor a-amino-3-hidróxi-5-metilisoxazol-4-propionato

CA 1 CA = corno de Ammon (Ammon's horrí), região CA 1 no

hipocampo

EA acetato de etilaEPSP potencial pós-sináptico excitatório

ES+ spray de elétrons

HEP n-heptano

Cone. NH3 solução de NH3 aquosa saturada

LTP potenciação a longo prazoLTP1 LTP primitiva (fase de LTP)

MeOH metanol

P.F ponto de fusãoEM espectrometria de massa

NMDA canal acoplado a receptor que pode ser ativado porN-metil-D-aspartato

TA temperatura ambiente

STP potenciação a curto prazo (fase de LTP)THF tetraidrof uranoEXEMPLO 1: N-DIAMINOMETILENO-4-(6.8-DICLORO-2-METIL-1.2.3.4-TETRAIDROISOQUINOLIN-4-IL)BENZENOSSULFONAMIDA. DICLORI-DRATO

<formula>formula see original document page 17</formula>

0,36 g de guanidina é suspenso em 30 ml de THF anidroso sobargônio, e 0,40 g de cloreto de 4-(6,8-dicloro-2-metil-1,2,3,4-tetraidroisoquinolin-4-il)benzenossulfonila (W02003048129) é adicionado. Amistura foi agitada em TA durante 24 horas e em seguida o THF foi destila-do. 10 ml de água foram adicionados ao resíduo, e o precipitado foi filtrado.Ele foi lavado com 10 ml de água e secado a vácuo. O sólido foi em seguidasuspenso em 10 ml de EA, e 10 ml de uma solução saturada de HCI em éterde dietila foram adicionados. Os constituintes voláteis foram removidos avácuo, e o resíduo foi suspenso em 10 ml de EA e agitado em TA durante5 horas. O precipitado foi em seguida filtrado e secado a vácuo. 0,45 g foiobtido, ponto de fusão 140°C (decomposição).Rf (EA/HEP/CH2Cl2/MeOH/ NH3 conc.= 10:5:5:5:1) = 0,30

EM (ES+): 412DADOS FARMACOLÓGICOS:DESCRIÇÃO DE TESTE DE NHE5:

Neste teste, a recuperação no pH intracelular (pHj) de células LAP1,que estavelmente expressam os subtipos diferentes do permutador de sódio-próton (NHE), após uma acidificação foi determinada. Estas séries de recu-peração mesmo sob condições livres de bicarbonato no caso de funciona-mento de NHE. Para esta finalidade, o pHj foi determinado com BCECF decor fluorescente de pH-positivo (Sondas moleculares, Eugene, OR, Estados

Unidos da América; o precursor BCECF-AM é usado). As células foram pri-meiro incubadas com BCECF (5 μΜ BCECF-AM) em tampão de NH4CI(tampão de NH4CI: 115 mM colina Cl1 20 mM de NH4CI, 5 mM de KCI, 1 mMde CaCI2, 1 mM de MgCI2, 20 mM de Hepes, 5 mM de glicose; um pH de7,4 é estabelecido com 1 M de KOH). A acidificação intracelular foi induzidalavando as células incubadas em tampão de NH4CI com tampão livre deNH4CI (133,8 mM de cloreto de colina, 4,7 mM de KCI, 1,25 mM de CaCI2,1,25 mM de MgCI2, 0,97 mM de K2HPO4, 0,23 mM de KH2PO4, 5 mM deHepes, 5 mM de glicose; um pH de 7,4 é estabelecido com 1 M de KOH).

Após a operação de lavagem, 90 μΙ do tampão livre de NH4CI foram deixa-dos sobre as células. A recuperação do pH foi iniciada pela adição de 90 μΙde Na+- contendo tampão (133,8 mM de NaCI, 4,7 mM KCI, 1,25 mM CaCI2,1,25 mM MgCI2, 0,97 mM Na2HPO4, 0,23 mM NaH2PO4, 10 mM de Hepes,5 mM de glicose; um pH de 7,4 é estabelecido com 1 M de NaOH) no ins-trumento analítico (FLIPR, "Leitora de Placa de Imagem Fluorométrica ",Dispositivos Moleculares, Sunnyvale, Ca., Estados Unidos da América). Afluorescência de BCECF foi determinada em um comprimento de onda deexcitação de 498 nm e o filtro 1 de emissão de FLIPR (lacuna de faixa de510 to 570 nm). As mudanças subseqüentes em fluorescência foram regis-tradas durante dois minutos em NHE5 como uma medida da recuperação dopH. Para o cálculo do potencial inibidor de NHE das substâncias de teste, ascélulas foram testadas primeiro em tampões em que a recuperação total do

pH, ou nenhuma de modo algum ocorre. Para recuperação total do pH(100%), as células foram incubadas em Na+-Contendo tampão (veja acima),e tampão livre de Na+- para a determinação do valor 0% (veja acima). Assubstâncias a serem testadas foram feitas em tampão contendo Na+. A re-cuperação no pH intracelular em cada concentração testada de uma subs-tância foi mostrada em porcentagem da recuperação máxima. Das porcen-tagens da recuperação do pH, o valor de IC50 da substância particular dossubtipos de NHE individuais foi calculada por meio do programa XLFit (idbs,

<table>table see original document page 19</column></row><table>

Descrição de teste: experimentos a longo prazo em seções dehipocampo (in vitro)

MÉTODO EXPERIMENTAL

A LTP na região CA 1 é a LTP que foi melhor caracterizada invitro. A estrutura de estratificação e consumo desta região permite avalia-ções potenciais produzidas durante diversas horas in vitro. Nos estudos deNHE, um tétano fraco que foi baseado no ritmo teta e que induz a LTP pre-coce retornar ao valor inicial dentro de três horas foi usado (Journal de Neu-roscience, 18(16), 6071(1998); Eur J Pharmacol. 502: 99-104, 2004). Foirecentemente confirmado que um número crescente de treinos de explosãoteta induz um LTP de magnitude e persistência de crescente (J Neurophysi-ol. 88:249-255, 2002), isto é, que um único estímulo fraco induz uma LTPinsaturada, não o tipo saturado maximamente obtenível de LTP. Tanto amagnitude (Behnisch, Reymann e outro, Neurosci. Lett. 1998, 253(2): 91-94)quanto a persistência (por exemplo, Neuropeptides 26: 421-427, 1994) destaLTP podem ser melhoradas ou adversamente afetadas por substâncias. ALTP precoce que é gerada em investigações, é igualmente insaturada. Édesse modo possível, verificar uma melhora induzida pela substância ou de-terioração na LTP precoce. A LTP precoce investigada é composta do com-ponente STP, que é conhecido persistir durante cerca de 30 minutos (Nature335: 820-824, 1988), e o componente de LTP 1, que usualmente persistenas primeiras 1 a 2 horas após a indução da LTP (Learn Mem. 3: 1-24, 1996).

O curto registro (30 - 60 minutos) dos valores iniciais antes dotétano permite efeitos precoces da substância a ser investigada em trans-missão sináptica não estimulada normal a ser investigada. Visto que as si-napses excitatórias principais são glutamatérgicas (J Clin Neurophysiol. 9:252-263, 1992), isto é, a EPSP de campo monossináptico é determinadamuito substancialmente por AMPA e apenas em uma extenção considera-velmente menor por receptores de NMDA, um efeito sobre transmissão glu-tamatérgica é desse modo simultaneamente indiretamente testado.MÉTODO: EXPERIMENTOS A LONGO PRAZO SOBRE SECCÕES DE HI-POCAMPO (IN VITRO)

Tipo de animais:

Idade: 7 a 8 semanas

Linhagem: Wistar (Shoe Wist, Shoe)

Sexo: masculino

Criador: Harlan Winkelmann GmbH, luz artificial (6 a 18:00 h) eritmo diário

PREPARAÇÃO:

Atordoante: golpe sobre a base do pescoço com barra de ferroSacrifício: decapitação

Exposição de cérebro: crânio aberto por corte dorsal a ventral aolongo da sutura sagital do crânio.

Exposição do hipocampo: o cérebro foi incisado entre os hemis-férios e, partindo com o hemisfério direito, o hipocampo foi extraído usandoum implemento grosseiro.

A preparação das secções: o hipocampo exposto foi transferidopara um bloco de resfriamento com papel de filtro úmido, e o excesso deumidade foi tirado com a ajuda de outro papel filtro. Este hipocampo fixadoao bloco de resfriamento, desse maneira foi colocado no cortador e giradohorizontalmente até o hipocampo ficar em um ângulo apropriado à lâmina decorte.

Ângulo de corte: a fim de manter a estrutura laminar do hipo-campo foi necessário cortar o hipocampo em um ângulo de cerca de70 graus com relação à lâmina de corte (cutelo).

Secção: o hipocampo foi fatiado em intervalos de 400 μιτι. Asseções foram tiradas da lâmina com o auxílio de uma escova cuidadosamen-te umedecida, muito macia (cabelo marta) e transferidas para dentro de umvaso de vidro com solução nutriente resfriada gaseificada com 95% 02/5%

CO2. A duração total da preparação não durou mais do que 5 minutos.ARMAZENAGEM DAS SECCÕES:

Secção imersa: as seções descansam sob um nível de líquidode 1-3 mm em uma câmera de temperatura controlada (33°C). A taxa defluxo foi de 2,5 ml/min. A pré-gaseificação ocorreu sob uma pressão ligeira-mente elevada (cerca de 1 atm) e por meio de uma microagulha na pré-câmara. A câmara de secção foi conectada à pré-câmara a fim de que fosse

possível manter uma minicirculação. A minicirculação foi regulada pelo fluxode 95% de 02/5% de CO2 por meio da microagulha.

Adaptação de Secção: as secções de hipocampo recentementepreparadas foram adaptadas na câmara de secção a 33°C durante pelo me-nos 1 hora.

DETERMINAÇÃO DO NÍVEL DE ESTÍMULO DE TESTE:

Nível de estímulo: fEPSP: 30% do EPSP máximoMEDIÇÃO DOS POTENCIAIS FOCAIS

Estimulação: um eletrodo de estimulação monopolar consistindoem aço inoxidável Iaqueado e um gerador de estímulo bifásico de correnteconstante (WPI A 365) foram usados para estimulação focai de colateraisSchaffer (voltagem: 1-5V, amplitude de pulso de uma polaridade 0,1 EM,pulso total 0,2 EM).

Medição: eletrodos de vidro (vidro de borossilicato com filamen-to, 1-5MOhm, diâmetro: 1,5 mm, diâmetro de ponta: 3-20 pm) que foramcarregados com solução nutriente normal, foram usados para registrar ospotenciais pós-sinápticos excitatórios (fEPSP) do extrato radiato. Os poten-ciais de campo foram avaliados versus um eletrodo de referência de prataclorado localizado na borda da câmera de secção usando um amplificadorde voltagem CC. Os potenciais de campo foram filtrados por meio de umfiltro de baixa passagem (5 kHz).

Determinação dos potenciais de campo: o declínio dos fEPSPs(declínio fEPSP) foi determinado para a análise estatística dos experimen-tos. O registro, análise e controle do experimento ocorreu com o auxílio deum programa de software (PWIN) que foi desenvolvido no departamento deneurofisiologia. A formação dos declínios de fEPSP médios e os pontos dotempo respectivos e construção dos diagramas ocorreram com o auxílio dosoftware Excel, com registro de dados automáticos por uma macro apropriada.

MEIO NUTRIENTE (SOL UCAO DE RINGER):

<table>table see original document page 22</column></row><table>

Exemplo 1 foi dissolvido em DEMO e diluído com solução deRinger para a concentração final para os experimentos (concentração final0,01% de DEMO).RESUMO DOS EXPERIMENTOS:

Nos experimentos de controle, a transmissão sinática de refe-rência foi inicialmente registrada durante 60 a 120 minutos. Subseqüente-mente, dois pulsos duplos foram administrados quatro vezes em um interva-lo de 200 EM, com um intervalo de interpulso de 10 EM para os pulsos du-plos e uma amplitude de 0,2 EM para os pulsos individuais (tétano fraco). Apenetração resultante dos EPSPs foi registrada durante pelo menos60 minutos.

Nos experimentos para testar o efeito do inibidor de NHE5, areferência foi novamente registrada inicialmente durante 60 a 120 minutos. Oinibidor de NHE5 (10 μΜ) foi estimulado em 20 minutos antes da estimula-ção. Dois pulsos duplos foram administrados quatro vezes em um intervalode 200 EM como nos experimentos de controle, com um intervalo de inter-pulso de 10 EM para os pulsos duplos e uma amplitude de 0,2 EM para ospulsos individuais. A substância foi lavada 20 minutos após estímulo, e apotenciação do EPSP foi registrada durante pelo menos 60 minutos.

RESULTADO:

O composto de exemplo 1 não teve nenhum efeito intrínsecosobre transmissão sinática na concentração usada.

A potenciação após administração do exemplo 1 foi ainda sob137% da referência 80 minutos após o estímulo, ao passo que a potenciaçãosob condições de controle quase retornou ao nível de referência, em 113%da referência. Isto mostra claramente que mesmo 10 μΜ do composto deexemplo 1 melhora a manutenção da LTP fraca.

Claims (10)

1. Uso de um composto da Fórmula I<formula>formula see original document page 24</formula>em que os significados são:R1, R2, R3 e R4independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, Br, I, CN,NO2 ou RH-(CmH2m)-An-;m zero, 1, 2, 3 ou 4;η zero ou 1;R11 hidrogênio, metila ou CpF2p+1;A oxigênio, NH, N(CH3) ou S(O)q;ρ 1,2 ou 3;q zero, 1 ou 2;R5 hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de C ou ciclo-alquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;R6 hidrogênio, OH, F, CF3, alquila tendo 1, 2, 3 ou 4 áto-mos de C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;R7e R8independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, Br, CN,CO2RI2, NR13R14 ou R16-(CmmH2mm)-Enrr;R12 hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3 ou 4 átomos de C oucicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;R13 e R14independentemente um do outro hidrogênio, alquila tendo 1,2,3ou 4 átomos de C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;ouR13 e R14formam com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ligados umanel de 4, 5, 6 ou 7 membros em que um grupo CH2 pode ser substituídopor NR15, S ou oxigênio;Rl 5 hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3 ou 4 átomos de Cou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;mm zero, 1, 2, 3 ou 4;nn zero ou 1;R16 hidrogênio, metila ou CppF2pp+i;E oxigênio ou S(O)qq;PP 1,2 ou 3;qq zero, 1 ou 2;e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos;para a produção de um medicamento para o tratamento de dis-túrbios neurodegenerativos, enfraquecimentos de memória e distúrbios dedemência, e para melhorar a memória.

2. Uso de acordo com a reivindicação 1, em que compostos daFórmula I são usados em que os significados sãoR1, R2, R3 e R4independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, Br, CN ouRH-(CmH2m)-An-;m zero ou 1;η zero ou 1;R11 hidrogênio, metila ou CpF2p+-|;Aoxigênio, NCH3 ou S(O)q;ρ 1 ou 2;q zero, 1 ou 2;R5 hidrogênio, metila, etila ou ciclopropila;R6 hidrogênio ou metila;R7e R8independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, CN, CO2RI2,NR13R14 ou R16-(CmmH2mm)-Enn-;R12 hidrogênio, metila ou etila;R13 e R14independentemente um do outro hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3ou 4 átomos de C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;ouR13 e R14forma com o átomo de nitrogênio ao qual eles são ligados umanel de 5, 6 ou 7 membros em que um grupo CH2 pode ser substituído porNR15, S ou oxigênio;R15 hidrogênio, alquila tendo 1, 2, 3 ou 4átomos de C ou cicloalquila tendo 3, 4, 5 ou 6 átomos de C;mm zero, 1 ou 2;nn zero ou 1;R16 hidrogênio, metila ou CppF2pp+-];E oxigênio ou S(0)qq;PP 1 ou 2;qq zero, 1 ou 2;e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

3. Uso de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que compostosda Fórmula I são usados em que os significados sãoR1 e R3hidrogênio;R2 e R4independentemente um do outro hidrogênio, F, Cl, NH2, NHCH3ou N(CH3)2;R5 hidrogênio, metila, etila ou ciclopropila;R6 hidrogênio ou metila;R7e R8hidrogênio;e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

4. Uso de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 3, emque N-diaminometileno-4-(6,8-dicloro-2-metil-1,2,3,4-tetraidroisoquinolin-4-il)benzenossulfonamida ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo éusado.

5. Uso de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 4,para a produção de um medicamento para o tratamento de distúrbios dedemência.

6. Uso de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 5,para a produção de um medicamento para o tratamento de demência no i-doso.

7. Uso de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 4,para a produção de um medicamento para o tratamento de Alzheimer, de-mências vasculares, combinações de distúrbios de Alzheimer e cerebrovas-culares, mutações tau, distúrbios de priônio, distúrbios de expansão de poli-glutamina e Parkinsonismo.

8. Uso de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 4,para a produção de um medicamento para o tratamento de Alzheimer, de-mência por múltiplos infartos, combinações de distúrbios de Alzheimer e ce-rebrovasculares, mutações tau, distúrbios de priônio, coréia de Huntington,ataxias espinocerebelares, e Parkinsonismo.

9. Uso de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 4,para a produção de um medicamento para o tratamento de demências se-cundárias seguidas e/ou associadas com infecções, traumas cerebrais, tu-mores cerebrais ou intoxicações.

10. Uso de acordo com uma ou mais das reivindicações 1 a 4para produção de um medicamento para melhorar a memória.