BRPI0611730A2 - derivados dos ácidos cinámico, fenil-propiólico e fenil-propanóico, úteis como agentes antitumorais - Google Patents

Abstract

DERIVADOS DOS áCIDOS CINáMICO, FENIL-PROPIóLICO E FENIL-PROPANóICO, úTEIS COMO AGENTES ANTITUMORAIS. A presente refere-se a derivados dos ácidos cinâmico e fenilpropiónico da Fórmula (1), que têm atividade antitumoral e quimiossensibilizadora. A invenção descreve também composições farmacêuticas que contêm os compostos supramencionados, para o tratamento de tumores.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "DERIVADOSDOS ÁCIDOS CINÂMICO, FENIL-PROPIÓLICO E FENIL-PROPANÓICO,ÚTEIS COMO AGENTES ANTITUMORAIS".

CAMPO TÉCNICO DA INVENÇÃO

A presente invenção refere-se a derivados dos ácidos cinâmico,fenil-propiólico e fenil-propanóico, que têm atividade antitumoral.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

A terapia de tumores está sendo atualmente realizada por inter-venção cirúrgica, tratamento com radiação e quimioterapia. As desvantagensdesta última devem-se principalmente à toxicidade dos fármacos citotóxicos,que usualmente não se limita às células cancerosas, e à resistência adquiri-da das células cancerosas a alguns dos fármacos mais amplamente utiliza-dos, o que reduz a eficácia de longo prazo da terapia.

A eliminação do tumor primário por cirurgia não é sempre possí-vel e em qualquer caso não previne que a maioria dos tumores metastáticos,tal como câncer de mama e melanoma, invadam outros órgãos-alvo.

Tornou-se evidente que a terapia de tumores metastáticos im-provavelmente leve à cura completa do paciente; portanto, o tratamento comfármacos citotóxicos é agora tido como um método paliativo e prolongadorda vida ao invés de um método curativo. Um tratamento crônico com umfármaco que tem baixa toxicidade seria preferível, desde que assestado parao controle da progressão da doença.

Durante os últimos anos, o desenvolvimento de fármacos paracâncer se deslocou de quimioterápicos citotóxicos convencionais para umaabordagem mais assestada baseada em mecanismos na direção da metacomum de detenção do crescimento dos tumores. O rápido progresso naspesquisas com cromatina e o entendimento do controle epigenético forneceuuma série de alvos potenciais para intervenção em câncer. As histona desa-cetilases (HDACs) foram largamente implicadas no crescimento e controletranscricional, e a inibição da atividade de HDACs usando moléculas peque-nas causa apoptose em células tumorosas. Os inibidores de histona desace-tilases são agora reconhecidos como indutores potentes da detenção docrescimento, diferenciação ou morte celular apoptótica em uma série de cé-lulas transformadas em cultura e em animais portadores de tumores (Marks,P.A., Curr. Opion. Oncol. 13(6):477-83 (novembro de 2001); Marks, P., Nat.Rev. Câncer 1(3): 194-202 (dezembro de 2001)).

Por outro lado, como já previsto, outro aspecto muito importantee sutilmente percebido da terapia oncológica é o início da resistência aosfármacos usados pelas células tumorosas tratadas. As células que desen-volvem resistência a um fármaco são freqüentemente capazes de resistiraos efeitos de muitos outros fármacos antitumorais, mesmo se eles não se-jam quimicamente relacionados ou atuem com mecanismos de ação diferen-tes. Este tipo de resistência é denominado resistência a múltiplos fármacos(MDR) (Annu. Rev. Med. 42:277-286 (1991); Drugs ofthe Future 22:653-660(1997)).

Inúmeros tumores, tais como do córtex adrenal, cólon, rins e je-juno, e carcinoma hepático, manifestam resistência a fármacos logo no iníciodo tratamento com fármacos antitumorais (Barrows, L.R., Anti-neoplastic andImmnoactive Drugs 75:1236-1262 (1995)).

Em outros casos, as células tumorosas adquirem resistência deuma maneira similar àquela da resistência bacteriana a antibióticos. Este tipode resistência baseia-se em mudanças genéticas que ocorrem nas célulastumorosas durante o tratamento; estas mudanças permitem que as células-filhas proliferem em um meio no qual o agente antitumoral está presente.

Qualquer que seja a causa da resistência, ela leva à ineficáciado tratamento antineoplásico de longo prazo.

Inúmeros estudos sugerem que uma forma comum de resistên-cia a fármacos em tumores humanos deriva da presença da glicoproteína P(.Ann. Med. Interna 14(3): 145-53 (março de 1997); Acta Seient. Venez.51(1):45-52 (2000)). Esta glicoproteína atua como uma bomba de membranadependente de energia que expele o fármaco antitumoral do interior da célu-Ia, reduzindo assim a concentração celular do fármaco.

Os quimiossensibilizadores são compostos que geram mudan-ças nas células tumorosas ou no corpo e favorecem um aumento na eficáciaterapêutica dos agentes antitumorais usados.

Os quimiossensibilizadores reconhecidamente capazes de mo-dular a função da glicoproteína P incluem bloqueadores de canais de cálcio(verapamil), inibidores de calmodulina (trifluoroperazina), alcalóides indólicos(reserpina), agentes lisomotrópicos (cloroquina), esteróides, (progesterona),análogos de triparanol (tamoxifeno), detergentes (cremofor EL), e antibióti-cos peptídicos cíclicos (ciclosporinas) ("Câncer, Principies & Practice of On-cology, 1993; 4â edição, J.B. Lippincott Co., Filadélfia, PA, EUA, 2661-2664).

DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO

Descobriu-se que uma classe de derivados dos ácidos cinâmico,fenil-propiólico e fenil-propanóico possui os requisitos essenciais para a ati-vidade antitumoral, antimetastática e quimiossensibiizadora.

Portanto, o objeto principal de presente invenção são os com-postos da Fórmula (I) abaixo, que são agentes úteis como agentes antitumo-rais, antimetastáticos e quimiossensibilizadores.

A invenção refere-se a compostos da Fórmula (I):

<formula>formula see original document page 4</formula>

[FORMULA I]

em que:

η é O ou 1;

- quando η é O, "A" é um grupo monovalente e é selecionado dogrupo que consiste em OH, NH-OG, o grupo

<formula>formula see original document page 4</formula>

onde GeG' são iguais ou diferentes e são H, glicosila ou acetila;

- quando η é 1, A é um grupo bivalente selecionado no grupoque consiste em NH-S-, S-NH e CH2-S-S-CH2;

Y é um grupo selecionado entre HC=CH1 FC=CF1 FC=CH1CH=CF1 CH2-CH2 e C=C;

R é o grupo:

<formula>formula see original document page 5</formula>

onde X é O ou NH;

R é o grupo:

Z é selecionado no grupo que consiste em:

- H

- (C6-Ci2) arila ou (Ce-Ci2) arila substituída com nitro, halogênio,alcóxi(CrC4)-carbonila, hidroxila ou amino;

- (Ci-C4) alquila, (C2-C4) alquenila, (C2-C4) alquinila;

- (C6-C12) aril -(CH2)n-, onde a arila é substituída com nitro, halo-gênio, (CrC4) alcóxi carbonila, hidroxila ou amino; onde n' = 0-3;

- (C6-Ci2) aril -CO1 onde a arila é substituída com nitro, halogê-nio, (CrC4) alcóxi carbonila, hidroxila ou amino; e

- (C3-C6) heterociclil alquila (CrC4)1 onde pelo menos um dosCH2 do heterociclo é substituído por O, S ou NH;

R1 é selecionado do grupo que consiste em:

- H

- NH2;

- (CrC4) alquila, (C2-C4) alquenila, (C2-C4) alquinila;

- NH-(C2-C4) alquinila;

-NO2;

- (C2-C4) alquinila;- halogênio;

- (C6-Ci2) arila;

- (C6-C12) aril - (C2-C4) alquinileno; e

- (C3-C6) heterociclil -(C2-C4) alquinileno, onde pelo menos umdos CH2 do heterociclo é substituído por O, S ou NH;

ou:

R e R1, tomados em conjunto com o grupo aromático, formamum grupo policíclico que tem a seguinte fórmula:

<formula>formula see original document page 6</formula>

R2 é selecionado do grupo que consiste em:

- H

- (C6-Ci2) arila ou (C6-Ci2) arila substituída com nitro, halogênio,(CrC4) alcóxi carbonila, hidroxila ou amino;

- (CrC4) alquila, (C2-C4) alquenila, (C2-C4) alquinila;

- (C6-C12) aril -(CH2)n-, onde a arila é substituída com nitro, halo-gênio, (C1-C4) alcóxi carbonila, hidroxila ou amino; onde n" = 0-3;

- (C6-C12) aril -CO, onde a arila é substituída com nitro, halogê-nio, (C1-C4) alcóxi carbonila, hidroxila ou amino; e

- (C3-C6) heterociclil - (C1-C3) alquileno, onde pelo menos umdos CH2 do heterociclo é substituído por O, S ou NH;

R3 é selecionado do grupo que consiste em:

-H;

- (C1-C4) alquila, (C2-C4) alquenila;

- (C1-C4) alquil -NH;

- (C1-C4)- alquil-(C3C6) heterociclileno, onde pelo menos um dosCH2 do heterociclo é substituído por O, S ou NH;

- (C6-C12) arila; e- (C3-C6) heteroarila, onde pelo menos um dos CH do heterocicloé substituído por O, S ou NH;

R4 é selecionado do grupo que consiste em:

-H;

- (C1-C4) alquila;

- (C6-C12) arila;

- (C6-Ci2) aril -(C2-C4) alquinileno;

- (C2-C4)alcanoíla; e

- (C6-Ci2) aril -CO;

R5 é selecionado do grupo que consiste em:

-H;

- (CrC4) alquila Iinearou ramificada;

- (C2-C4) alquenila linear ou ramificada; e

- OR6, onde R6 é H, (CrC4) alquila, mesila, tosila, (CrC4) alca-noíla.

A presente invenção compreende também tautômeros, isôme-ros geométricos, formas opticamente ativas tais como enantiômeros, diaste-reoisômeros e racematos, bem como os sais farmaceuticamente aceitáveisdos compostos da Fórmula (I).

Os sais farmaceuticamente aceitáveis preferidos da Fórmula (I)são sais de adição de ácidos formados com ácidos farmaceuticamente acei-táveis, tais como os sais cloridrato, bromidrato, sulfato ou bissulfato, fosfatoou hidrogênio fosfato, acetato, benzoato, succinato, fumarato, maleato, Iacta-to, citrato, tartarato, gliconato, metanossulfonato, benzenossulfonato e para-toluenossulfoanto.

Dentro do âmbito da presente invenção, os exemplos de grupos(CrC4) alquila linear ou ramificada incluem metila, etila, propila, e butila, eseus isômeros possíveis, tais como, por exemplo, isopropila, isobutila, e terc-butila.

Os exemplos do grupo (C2-C4) alquenila linear ou ramificada sãometilideno, etilideno, vinila, alila, propargila, e butileno, onde a ligação duplacarbono-carbono pode estar situada nas várias posições possíveis da cadeiaalquileno, que pode ser também ramificada no contexto da isomeria permitida.

Os exemplos de grupos (C6-C12) arila ou (C6-C12) aril -(C-1-C4)alquila são fenila, 1- ou 2-natila, antracenila, benzila, 2-fenil-etila, 1-fenil-etila,3-fenil-propila, 2-antracenil-propila, 1-antracenil-propila, naftil-metila, 2-naftil-etila, 1-naftil-etila, 3-naftil-propila, 2-naftil-propila, 1-naftil-propila.

Como aqui utilizado, o termo " (C3-C6) heterociclo " ou " (Cs-C6)heterociclila " refere-se a um anel não-aromático monovalente com três aseis membros, contendo uma ou mais substituições heteroatômicas selecio-nadas independentemente entre S, O ou N, e tendo zero a cinco graus deinsaturação. Os exemplos de "heterociclos", como aqui utilizados, incluem,porém sem limitações, tetraidrofurila, piranila, 1,4-dioxanila, 1,3-diaxanila,piperidinila, pirrolidinila, tetraidrotiopiranila, tetraidrotiofenila, e similares.

Como aqui utilizado, o termo " (C3-C6) heterociclileno " refere-sea um anel heterocíclico não-aromático bivalente com três a seis membros,contendo um ou mais heteroátomos selecionados independentemente entreS, O ou N, e tendo zero a cinco graus de insaturação. Os exemplos de "he-terociclilenos", como aqui utilizados, incluem, porém sem limitações, tetrai-drofuran-2,5-diila, piran-2,4-diila, 1,4-dioxano-2,3-diila, 1,3-dioxano-2,4-diila,piperidino-2,4-diila, piperidino-1,4-diila, pirrolidino-1,3-diila, e similares.

O termo "halogênio" significa flúor, cloro, bromo e iodo.

Os exemplos de resíduos glicosila são 6-D-galactosila e D-glicosila.

De acordo com modalidades independentemente preferidas dainvenção, A é OH ou NH-OG, onde G é Η; Y é o grupo HC=CH; R1, R3, R4 eR5 são H; e R2 é selecionado do grupo que consiste em H; C6-Cn arila; C6-C11 aril -(CH2)n, onde a arila é substituída com nitro, halogênio, CrC4alcóxicarbonila; C6-Cn aril -CO, C2-C4 heterociclo -alquila, onde pelo menos umdos CH2 do heterociclo é substituído por NH; e η é 2.

Os compostos da Fórmula (I) específicos podem existir comoisômeros eis (Z-) ou trans (E-) em relação à posição de R3. Todos essescompostos estão incluídos na presente invenção.Além disso, dependendo do significado do grupo Y, os compos-tos da presente invenção podem existir como diastereoisômeros (eis outrans, E ou Z) ou misturas deles. Todos esses compostos estão incluídos napresente invenção.

Os seguintes compostos são alguns dos compostos mais prefe-ridos de acordo com a invenção:

(2E)-N-hidróxi-3-(4-{[(alilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrilamida(ST2984);

(2E)-N-hidróxi-3-{4-[(fenóxi-imino)-metil]—fenil}-acrilamida(ST2985);

(2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida (ST2987);

(2E)-N-hidróxi-3-{4-[(hidróxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida(ST2983);

(2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(pentaflúor-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida (ST2986);

(2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(4-metóxi-carbonil-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida (ST3049);

(2E)-N-hidróxi-3-{4-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (ST3050);

(2E)-3-(4-{[(benzilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrilamida (ST2840);

(2E)-N-hidróxi-3-(4-{[(4-cloro-benzoil)-hidrazono]-metil}-fenil)-acrilamida (ST2888);

(2E)-N-(2-amino-fenil)-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida (ST3070);

(2E)-N-hidróxi-3-(1 H-indol-5-il)-acrilamida (ST2880);

ácido (2E)-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrílico(ST3075);

ácido (2E)-3-(4-{[(benzilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrílico (ST3076);cloridrato de (2E)-N-hidróxi-3-{3-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (ST3576);

N-hidróxi-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-propanamida (ST3330);

N-hidróxi-3-{4-[(E)-{[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil]-fenil}-prop-2-inamida (ST3618);

Cloridrato de (2E)-N-(2-amino-fenil)-3-{4-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (ST3573); e

(2E)-N-mercapto-3-{4-[(4-nitro-benzilóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (ST3605).

Os resultados experimentais (relatados na seção intitulada "E-xemplos") indicam que os compostos da Fórmula (I)1 isoladamente e tam-bém em combinação com outros fármacos antitumorais conhecidos, são a-gentes úteis para o tratamento de tumores.

Um outro objeto da invenção aqui descrita são compostos coma Fórmula genérica (I) e seu uso no campo médico.

Um outro objeto da invenção aqui descrita é uma composiçãofarmacêutica que contém como ingrediente ativo um composto da Fórmula(I) e pelo menos um excipiente e/ou diluente farmaceuticamente aceitável.

Um outro objeto da invenção aqui descrita são compostos com aFórmula genérica (I) e um processo para sua preparação.

Outro objeto da invenção aqui descrita é uma composição far-macêutica quei contém como ingrediente ativo um composto da Fórmula (I),para o tratamento de uma patologia tumorosa, onde o tumor é selecionadodo grupo que consiste em sarcoma, carcinoma, carcinóide, tumor ósseo,tumor neuroendócrino, leucemia linfóide, leucemia promielocítica aguda, leu-cemia mielóide, leucemia monocítica, leucemia megacarioblástica, e doençade Hodgkin.

Um outro objeto da invenção aqui descrita é uma composiçãofarmacêutica que contém, como ingrediente ativo, um composto da Fórmula(I), para o tratamento de uma patologia tumorosa, na qual o tumor demons-trou resistência a fármacos aos antibióticos anteriores usados para seu tra-tamento, onde o dito composto da Fórmula (I) exerce um efeito quimiossen-sibilizador sobre o dito tumor resistente a fármacos.

Um outro objeto da invenção aqui descrita é uma composiçãofarmacêutica que contém, como ingrediente ativo, um composto da Fórmula(I), em combinação com um ou mais outros agentes antítumoraís, onde ocomposto antitumoral é selecionado no grupo que consiste em agentes al-quilantes, inibidores de topoisomerase, agente antitubulina, compostos inter-caladores, antimetabólitos, produtos naturais tais como alcalóides de vinca,epipodofilotoxinas, antibióticos, enzimas, taxanos, e compostos citodiferen-ciadores.

Dentre os agentes antitumorais citodiferenciadores, o preferido éácido all-trans-retinóico.

Outro objeto da presente invenção é um processo para prepararqualquer uma das composições farmacêuticas mencionadas acima, compre-endendo misturar o(s) composto(s) da Fórmula (I) com excipientes e/ou dilu-entes apropriados.

Um outro objeto da invenção aqui descrita é o uso de um com-posto da Fórmula (I) para a preparação de um medicamento para o trata-mento de uma patologia tumorosa.

Um outro objeto da invenção aqui descrita é o uso de um com-posto da Fórmula (I) para a preparação de um medicamento para o trata-mento de uma patologia tumorosa na qual o tumor demonstrou resistênciaaos fármacos antitumorais anteriores usados no seu tratamento, onde o ditocomposto da Fórmula (I) exerce um efeito quimiossensibilizador sobre o ditotumor resistente a fármacos.

Um outro objeto da invenção aqui descrita é o uso de um com-posto da Fórmula (I), em combinação com um ou mais agentes antitumoraisconhecidos, para a preparação de um medicamento para o tratamento depatologias tumorosas.

Um outro objeto da invenção aqui descrita é o uso de um com-posto da Fórmula (I), em combinação com ácido all-trans-retinóico, para apreparação de um medicamento para o tratamento de leucemia promielocíti-ca aguda.

Outro objeto da invenção é um método par tratar um mamíferoque sofre de uma patologia tumorosa, compreendendo administrar umaquantidade terapeuticamente eficaz do(s) composto(s) da Fórmula (I).

O termo "quantidade terapeuticamente eficaz" é uma quantidadeeficaz para atingir o resultado medicamente desejável no indivíduo tratado.As composições farmacêuticas podem conter carreadores farmaceuticamen-te aceitáveis apropriados, veículos biologicamente compatíveis apropriadospara administração a um animal (por exemplo, solução salina fisiológica), eeventualmente, auxiliares (tais como excipientes, estabilizadores ou diluen-tes) que facilitam o processamento dos compostos ativos em preparaçõesque podem ser usadas em produtos farmacêuticos.

As composições farmacêuticas podem ser formuladas de qual-quer maneira aceitável para atender às necessidades do modo de adminis-tração. O uso de biomateriais e outros polímeros para distribuição de fárma-cos, bem como as diferentes técnicas e modelos para validar um modo es-pecífico de administração, estão descritos na literatura.

- Modificações dos compostos da invenção para melhorar a pene-tração na barreira hematoencefálica também seriam úteis.

Qualquer modo de administração aceito pode ser usado e de-terminado pelos versados nessas técnicas. Por exemplo, a administraçãopode ser por várias vias parenterais, tais como as vias subcutânea, intrave-nosa, intradérmica, intramuscular, intraperitoneal, intranasal, transdérmica,oral ou bucal.

A administração parenteral pode ser por injeção maciça ou porperfusão gradual no decorrer do tempo. As preparações para administraçãoparenteral incluem soluções, suspensões e emulsões aquosas ou não-aquosas estéreis, que podem conter agentes auxiliares conhecidos nessastécnicas, e podem ser preparadas de acordo com métodos rotineiros. Alémdisso, pode ser administrada uma suspensão dos compostos ativos comosuspensões oleosas para injeção. Os solventes ou veículos Iipofílicos apro-priados incluem óleos graxos, como por exemplo, óleo de gergelim, ésteresde ácidos graxos sintéticos, como por exemplo, oleato de etila ou triglicerí-deos.

A suspensões aquosas para injeção podem conter substânciasque aumentam a viscosidade da suspensão, tais como, por exemplo, carbó-xi-metil-celulose, sorbitol e/ou dextrano. Opcionalmente, a suspensão podeconter também estabilizadores.

As composições farmacêuticas incluem soluções apropriadaspara administração por injeção, e contêm cerca de 0,01 a 99 por cento, depreferência cerca de 20 a 75 por cento de composto ativo junto com o exci-piente. As composições que podem ser administradas por via retal incluemsupositórios.

Deve-se entender que a dosagem administrada dependerá daidade, sexo, saúde e peso do recebedor, tipo de tratamento concomitante,caso haja, freqüência do tratamento, e da natureza do efeito desejado. Adosagem pode ser individualizada para o paciente individual, como é do co-nhecimento nessas técnicas. A dose total necessária para cada tratamentopode ser administrada por múltiplas doses ou em uma única dose. A compo-sição farmacêutica da presente invenção pode ser administrada isoladamen-te ou em conjunto com outros produtos terapêuticos direcionados para acondição, ou direcionados para outros sintomas da condição. Usualmente,uma dosagem diária do ingrediente ativo compreende entre 0,01 e 100mg/kg de peso corporal.

Os compostos da presente invenção podem ser administradosao paciente por via intravenosa em um carreador farmaceuticamente aceitá-vel, tal como solução salina fisiológica.

Métodos usuais para distribuição intracelular de peptídeos po-dem ser usados, por exemplo, distribuição por intermédio de lipossomas.

Esses métodos são bem conhecidos pelos versados nessas técnicas. Asformulações desta invenção são úteis para administração parenteral, tal co-mo intravenosa, subcutânea, intramuscular e intraperitoneal.

Como é do conhecimento nas técnicas médicas, as dosagenspara qualquer paciente dependem de muitos fatores, incluindo porte, áreasuperficial do corpo, sexo e idade do paciente, composto específico a seradministrado, tempo e via de administração, saúde geral do paciente, e ou-tros fármacos que estão sendo administrados concomitantemente.Todas as referências aqui citadas são aqui inteiramente incorpo-radas como referência, incluindo todos os dados, tabelas, figuras e textosapresentados nas referências citadas.

Adicionalmente, o teor inteiro das referências citadas também éinteiramente incorporado como referência. As referências a métodos, etapas,etapas de métodos convencionais, métodos conhecidos ou métodos con-vencionais, não são de forma alguma uma admissão de que qualquer aspec-to, descrição ou modalidade da presente invenção está descrita, enunciadaou sugerida nas técnicas relevantes.

Uma vez entendidas as características dos métodos e produtosdescritos no presente pedido de patente, a necessidade e o tipo de etapasadicionais podem ser facilmente deduzidas revisando as técnicas anteriores,bem como as figuras e exemplos não-limitativos que se seguem, que des-crevem os detalhes básicos e algumas aplicações da invenção.

Os compostos da Fórmula (I) podem ser preparados a partir dematérias-primas facilmente disponíveis, usando os métodos e procedimentosgenéricos que se seguem. Deve-se avaliar que, quando as condições expe-rimentais típicas ou preferidas (isto é, temperaturas e tempos de reação,mois dos reagentes, solventes, etc.) são fornecidas, condições experimen-tais diferentes também podem ser usadas, a menos que diferentemente as-sinalado. As condições ótimas das reações podem variar com os reagentesou solventes específicos, mas tais condições podem ser determinadas pelosversados nessas técnicas por procedimentos de otimização rotineiros.

Um processo para preparar os compostos da presente invençãocompreende reagir um derivado do ácido 4-formil-cinâmico ou do ácido 3-(4-fornil-fenil)-propanóico com um derivado de hidroxilamina.

Os compostos da presente invenção podem ser preparados, porexemplo, de acordo com os esquemas genéricos que se seguem.

ESQUEMA GENÉRICO I

<formula>formula see original document page 14</formula>Etapa 1

Dissolve-se o composto A, isto é, ácido 4-formil-cinâmico ou áci-do 4-formil-cinâmico substituído com R1 (Y = CH=CH1 R3= H), ácido 3-(4-formil-fenil)-prop-2-inóico ou ácido 3-(4-formil-fenil)-prop-2-inóico substituídocom R1 (Y = C=C1 R3 = H), ácido 3-(4-formil-fenil)-propanóico ou ácido 3-(4-formil-íenil)-propanóico substituído com R1 (Y = CH2-CH2, R3 = H), em sol-ventes orgânicos, isto é, DMF1 DMA, DMSO, junto com B, isto é, hidroxilami-nas (X = O) ou seus sais de cloridrato ou hidrazinas (X = NH) substituídas. Amistura é mantida sob agitação em temperaturas na faixa entre 20 0C e 700C. Os compostos "C" são obtidos como produtos brutos.

Etapa 2

A Etapa 2 pode ser conduzida como descrito em um dos seguin-tes trabalhos:

Bauer, L.; Exner, O., Angew. Chem. Int. Edit. 13:376 (1974);Remiszewski, S.W.; Sambucetti, L.C.; Atadja, P.; Bair, K.W.;Cornell, W.D.; Green, M.A.; Howell, K.L.; Jung, M.; Kwon, P.; Trogani, N.;Walker, H., J. Med. Chem. 45:753 (2002);

Mai1 A.; Massa, S.; Ragno, R.; Cerbara, I.; Jesacher, F.; Loidl,P.; Brosch, G., J. Med. Chem. 46:512 (2003);Giacomelli, G.; Porcheddu, A.; Salaris, M., Org. Lett. 5:2715(2003);

Sakamoto, T.; Kikugawa, Y.; J. Org. Chem. 59:929 (2000);

Barta, T.E. et ai., Bioorg. Med. Chem. Lett. 10:2815 (2000).

Particularmente, a Etapa 2 é conduzida em solventes orgânicos,isto é, DMF, DMA, DMSO, misturando os compostos C com um agente con-densador (isto é, cloridrato de EDC, HATU, PyBOP, HOBt) e uma base, talcomo DIEA ou TEA. As espécies com nitrogênio nucleofílico, tais como hi-droxilamina ou o-fenilenodiamina, são adicionadas à mistura sob agitaçãoem temperaturas na faixa entre 20 0C e 60 0C. Os compostos D são purifica-dos por cristalização ou por métodos cromatográficos.

No caso em que R e R1, tomados em conjunto com o grupo a-romático, formam um grupo policíclico, os compostos da presente invençãopodem ser preparados de acordo com o seguinte Esquema II:

ESQUEMA GENÉRICO Il

<formula>formula see original document page 16</formula>

Condições Genéricas do Esquema Il

A reação é conduzida em solventes orgânicos, isto é, DCM1DMF1 DMA1 DMSO ou misturas deles, misturando os compostos E (Y =CH=CH ou C=C ou CH2-CH2) com um agente condensador (isto é, EDC,HATU, PyBOP, HOBt) e uma base tal como DBU1 DIEA, TEA. As espéciescom nitrogênio nucleofílico, tais como hidroxilamina ou o-fenilenodiamina,são adicionadas à mistura sob agitação em temperaturas na faixa entre 200C e 60 0C. Os compostos F são purificados por cristalização em CH2CI2 oupor métodos cromatográficos.

Os exemplos que se seguem ilustram ainda mais a invençãosem limitar seu âmbito.

ESQUEMA GENÉRICO Ill

<formula>formula see original document page 16</formula>

Condições Genéricas do Esquema Ill

Etapa 1

A Etapa 1 é conduzida dissolvendo 4-halo-benzaldeído, isto é, 4-iodo-benzaldeído, em solventes orgânicos, isto é, EtOH1 MeOH, i-PrOH, jun-to com NH2OH. A mistura é mantida sob agitação em temperaturas na faixaentre 20 0C e 70 0C. O composto obtido como um produto bruto foi adiciona-do a um solvente orgânico, isto é, DCM, DMF1 DMA, DMSO ou em misturacom NCS, para obter o cloreto de hidroximinoíla desejado.

Etapa 2

A Etapa 2 é a conversão in situ do cloreto de hidroximinoíla noóxido nitrílico correspondente, que foi conduzida em solventes orgânicos,isto é, CH2CI2, e uma base tal como DBU, DIEA ou TEA, e em seguida, umacicloadição com derivados de alila Z-CH=CH-R2, como o dipolarófilo, quegerou a isoxazolina racêmica.

Etapa 3

Na Etapa 3, os compostos G (Y = CH=CH, C=C ou CH2CH2),isto é, o ácido 4-(isoxazolina racêmica)-cinâmico foi conseguido por hidrólisebásica (NaOH, KOH, Ca(OH)2) de derivados éster em solventes orgânicos,isto é, EtOH, MeOH, i-PrOH, obtidos pela reação de acrilatos propícios efenil-isoxazolina halogenada por intermédio de catálise com Pd apropriada,na presença de uma base propícia, tal como DBU, DIEA, TEA, em solventesorgânicos, isto é, THF, DMF, DMA, DMSO, ou misturas deles.

Etapa 4

Na Etapa 4, a reação é conduzida em solventes orgânicos, istoé, DCM, DMFf DMA, DMSO, ou misturas deles, misturando os compostos G(Y = CH=CH, C=C ou CH2-CH2) com um agente condensador (isto é, EDC,HATU, PyBOP, HOBt) e uma base tal como DBU, DIEA, TEA. As espéciescom nitrogênio nucleofílico, tais como hidroxilamina ou o-fenilenodiamina,são adicionadas à mistura sob agitação em temperaturas na faixa entre 200C e 60 0C. Os compostos H são purificados por cristalização em CH2CH2 oupor métodos cromatográficos.

ESQUEMA GENÉRICO IV<formula>formula see original document page 18</formula>

Condições Genéricas do Esquema IV

Etapa 1

A Etapa 1 é conduzida dissolvendo 4-halo-benzaldeído, isto é, 4-iodo-benzaldeído, em solventes orgânicos, isto é, EtOH1 MeOH, i-PrOH, jun-to com NH2OH. A mistura é mantida sob agitação em temperaturas na faixaentre 20 0C e 70 0C. O composto obtido como um produto bruto foi adiciona-do a um solvente orgânico, isto é, DCM1 DMF, DMA, DMSO ou em misturacom NCS, para obter o cloreto de hidroximinoíla desejado.

Etapa 2

A Etapa 2 é a conversão in situ do cloreto de hidroximinoíla noóxido nitrílico correspondente, que foi conduzida em solventes orgânicos,isto é, CH2CI2, e uma base tal como DBU, DIEA ou TEA, e em seguida, umacicloadição com derivados de propargila Z-C-C-R2, como o dipolarófilo, quegerou a isoxazolina racêmica.

Etapa 3

Na Etapa 3, os compostos I (Y = CH=CH1 C=C ou CH2-CH2), istoé, o ácido 4-(isoxazolina racêmica)-cinâmico foi conseguido por hidrólise bá-sica (NaOH1 KOH, Ca(OH)2) de derivados éster em solventes orgânicos, istoé, EtOH, MeOH, i-PrOH, obtidos pela reação de acrilatos propícios e fenil-isoxazolina halogenada por intermédio de catálise com Pd apropriada, napresença de uma base propícia, tal como DBU, DIEA, TEA, em solventesorgânicos, isto é, THF, DMF, DMA, DMSO1 ou misturas deles.

Etapa 4

Na Etapa 4, a reação é conduzida em solventes orgânicos, istoé, DCM, DMF1 DMA, DMSO, ou misturas deles, misturando os compostos I(Y = CH=CH1 C=C ou CH2-CH2) com um agente condensador (isto é, EDC1HATU, PyBOP1 HOBt) e uma base tal como DBU1 DIEA1 TEA. As espéciescom nitrogênio nucleofílico, tais como hidroxilamina ou o-fenilenodiamina,são adicionadas à mistura sob agitação em temperaturas na faixa entre 20oC e 60 0C. Os compostos L (Y = CH=CH1 C=C ou CH2-CH2l A = CONHOH)são purificados por cristalização em CH2CI2 ou por métodos cromatográficos.

Os exemplos que se seguem ilustram ainda mais a invençãosem limitar seu âmbito.

EXEMPLOS

Exemplo 1

Preparação de (2E)-N-hidróxi-3-(4-{[(alilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrilamida (ST2984)

Etapa 1

Uma solução de ácido trans-4-formil-cinâmico A (Y = CH=CH, R1= H1 R3 = H; 0,346 g, 1,96 mmol) e cloridrato de O-alil-hidroxilamina B (0,258g, 2,37 mmols) em 2 ml_ de DMF foi aquecida até 50 0C por 5 h. Depois, asolução foi diluída com AcOEt e lavada com água. A camada orgânica foisecada com Na2SO4 e depois concentrada sob pressão reduzida, para dar0,421 g do intermediário C1 ácido (2E)-3-(4-{[(benzilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrílico (93% de rendimento).

MS (ESI) m/z: [M-1]" = 230,3

Etapa 2

Em um frasco, o intermediário C obtido na Etapa 1 (0,123 g, 0,53mmol) foi dissolvido em 1,5 mL de DMF junto com HATU (0,222 g, 0,58mmol) e DIEA (185 μΙ_, 1,06 mmol). Depois de 0,5 h, uma solução de hidroxi-lamina como sal de cloridrato (0,055 g, 0,80 mmol) e DIEA (139 μΙ_, 0,80mmol) em 1,5 mL de DMF foi adicionada. A mistura foi agitada à temperaturaambiente por 24 h e depois diluída com uma solução de HCI (pH = 3,5). Oprecipitado foi recuperado por filtração e depois cristalizado em CH2CI2, paradar 0,088 g de D (ST2984, 40% de rendimento).

MS (ESI) m/z: [M-1 Γ = 245,0[Μ+23]+ = 269,0

1H-RMN (200 MHz1 DMSOd6) δ (ppm): 4,55-4,75 (d, J = 5 Hz12H, CH2), 5,20-5,40 (dd, Jtrans = 17,6 Hz, Jcis = 10,6 Hz, 2xCH), 5,9-6,1 (m,1H, CH), 6,4-6,6 (d, J = 15,8 Hz, 1H, CH), 7,4-7,6 (d, J = 15,4 Hz, 1H, CH),7,6 (bs, 4H, 4xCHar), 8,2 (s, 1H, CH), 9,1 (bs, 1H, NH), 10,8 (bs, 1H, OH).

13C-RMN (50 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 75,3, 118,6, 120,7, 128,1,128,7, 133,5, 135,1, 137,0, 138,3, 149,3, 163,3.

Exemplo 2

Preparação de (2E)-N-hidróxi-3-{4-[(fenóxi-imino)-metil]—fenil}-acrilamida (ST2985)

Etapa 1

O intermediário C, ácido (2E)-3-(4-{[(benzilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrílico, para a síntese de ST2985, foi obtido (0,520 g, 99% de rendi-mento) como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, partindo de ácido trans-4-formil-cinâmico A (0,342 g, 1,94 mmol) e B, cloridrato de Ofenil-hidroxilamina(0,339 g, 2,33 mmols).

MS (ESI) m/z: [M-1]" = 266,4

Etapa 2

O composto ST2985 foi obtido (0,100 g, 48% de rendimento)como descrito na Etapa 2 do Exemplo 1, partindo do intermediário "C" (0,201g, 0,75 mmol).

MS(ESI) m/z: [M-1]· = 281,1[M+23]+ = 305,0

1H-RMN (200 MHz, DMSO-de) δ (ppm): 6,5-6,7 (d, J = 15,7 Hz,1H, CH), 7,0-7,1 (t, J = 6,9 Hz, 1H, CHar), 7,2-7,3 (d, J = 8,0 Hz, 2H, 2xCHar),7,3-7,4 (t, J = 7,3 Hz, 2H, 2xCHar), 7,4-7,6 (d, J = 16,1 Hz, 1H, CH), 7,6-7,7(d, J = 7,7Hz, 2H, 2xCHar), 7,8-7,9 (d, J = 7,7 Hz, 2H, 2xCHar), 8,7 (s, 1H,CH), 9,1 (bs, 1 Η, NH), 10,8 (bs, 1H, OH).

13C-RMN (50 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 115,0, 121,3, 123,2,128,8, 128,9, 130,3, 132,6, 137,9, 138,2, 152,8, 159,6, 163,2.

Exemplo 3

Preparação de (2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida (ST2987)

Etapa 1

O intermediário C, ácido (2E)-3-[4-({[(4-nitrobenzi)óxi]imino}-metil)fenil]acrílico (ST3075), para a síntese de ST2987, foi obtido (0,610 g,94% de rendimento) como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, partindo deácido trans-4-formil-cinâmico A (0,348 g, 1,97 mmol) e B, cloridrato de 0-(4-nitro-benzil)-hidroxilamina (0,485 g, 2,37 mmols).

MS(ESI) m/z: [M-1]" = 325,3

1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 5,34 (s, 2H, CH2), 6,5-

6,7 (d, J = 15,7 Hz, 1H, CH), 7,5-7,8 (m, 7H, 6xCHar, CH), 8,2-8,3 (d, J = 8,4Hz, 2H, 2xCHar), 8,41 (s, 1H, CH), 12,4 (bs, 1H, OH).

13C-RMN (50 MHz, DMSOd6) δ (ppm): 75,0, 121,0, 124,3, 128,1,129,4, 129,5, 133,8, 136,7, 143,7, 146,5, 147,7, 150,3, 168,2.

Etapa 2

O composto ST2987 foi obtido (0,120 g, 44% de rendimento)como descrito na Etapa 2 do Exemplo 1, partindo do intermediário C (0,262g, 0,80 mmol).

MS (ESI) m/z: [M-1]· = 340,2

[M+23]+ = 364,4

1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 5,34 (s, 2H, CH2), 6,4-6,6 (d, J = 15,6 Hz, 1H, CH), 7,4-7,6 (d, J = 15,8 Hz, 1H, CH), 7,62 (bs, 4H,4xCHar), 7,6-7,7 (d, J = 8,4 Hz, 2H, 2xCHar), 8,2-8,3 (d, J = 8,4 Hz, 2H,2xCHar), 8,41 (s, 1H, CH), 9,09 (bs, 1H, NH), 10,80 (bs, 1H, OH).

13C-RMN (50 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 74,9, 120,9, 124,3, 128,2,128,7, 129,5, 133,1, 137,3, 138,2, 146,5, 147,8, 150,4, 163,2.

Exemplo 4

Preparação de (2E)-N-hidróxi-3-{4-[(hidróxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (ST2983)

Etapa 1

O intermediário C, ácido (2E)-3-{4- [(hidróxi-imino)metil]fenil} a-crílico, para a síntese de ST2983, foi obtido (0,355 g, 93% de rendimento)como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, partindo de ácido trans-4-formil-cinâmico A (0,352 g, 2,00 mmols) e B, cloridrato de hidroxilamina (0,167 g,2,40 mmols).

MS (ESI) m/z: [M-1]" = 190,2

Etapa 2

O composto ST2983 foi obtido (0,060 g, 40% de rendimento)como descrito na Etapa 2 do Exemplo 1, partindo do intermediário C (0,075g, 0,39 mmol), exceto pela elaboração e purificação: a mistura de reação foiconcentrada sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por RP-HPLC preparatória (coluna Lichrosorb RP18 25 χ 2,5 mm de diâmetro inter-no, eluente H20/CH3CN = 50/50 + CH3COONH4 50 mM, vazão 10 mL/min).

MS (ESI) m/z: [Μ-1Γ = 205,3

[M+23]+ = 229,2

1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 6,4-6,6 (d, J = 15,8 Hz,1H, CH), 7,4-7,6 (d, J = 15,8 Hz, 1H, CH), 7,61 (bs, 4H, 4xCHar), 8,15 (s, 1H,CH), 9,09 (bs, 1 Η, NH), 10,79 (bs, 1 Η, OH), 11,37 (bs, 1 Η, OH).

Exemplo 5

Preparação de (2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(pentaflúor-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida (ST2986)

Etapa 1

O £ intermediário C, ácido (2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(pentaflúor-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrílico, para a síntese de ST2986, foi obtido(0,710 g, 97% de rendimento) como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, par-tindo de ácido trans-4-formil-cinâmico A (0,346 g, 1,96 mmol) e "B", cloridra-to de 0-(2,3,4,5,6-pentaflúor-benzil)-hidroxilamina (0,588 g, 2,35 mmols).

MS(ESI) m/z: [M-1]· = 370,1

Etapa 2

O composto ST2986 foi obtido (0,060 g, 50% de rendimento)como descrito na Etapa 2 do Exemplo 1, partindo do intermediário C (0,115g, 0,31 mmol).

MS (ESI) m/z: [M-1]· = 385,1

[M+23]+ = 409,0

1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 5,27 (s, 2H, CHar), 6,4-6,6 (d, J = 15,7 Hz, 1H, CH), 7,4-7,6 (d, J = 15,7 Hz1 1H, CH), 7,60 (bs, 4H,4xCHar), 8,90 (s, 1H, CH), 9,08 (bs, 1H, NH), 10,80 (bs, 1H, OH).

19F-RMN (188 MHz1 DMSO-d6) δ (ppm): -138,3 (d, J = 23,0 Hz), -149,2 (t, J = 21,3 Hz), -158,1 (t, J = 22,0 Hz).

Exemplo 6

Preparação de (2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(4-metóxi-carbonil-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida (ST3049)

Etapa 1

O intermediário C, ácido (2E)-3-{4-[({[(4-metóxi-carbonil-benzil)óxi}-imino)-metil]-fenil}-acrílico, para a síntese de ST3049, foi obtido(0,300 g, 80% de rendimento) como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, par-tindo de ácido trans-4-formil-cinâmico A (0,197 g, 1,12 mmol) e B, cloridratode 0-(4-metóxi-carbonil-benzil)-hidroxilamina (0,292 g, 1,34 mmol).

MS(ESI) m/z: [M-1 ]" = 338,2

Etapa 2

O composto ST3049 foi obtido (75 mg, 58% de rendimento) co-mo descrito na Etapa 2 do Exemplo 1, partindo do intermediário C (0,124 g,0,36 mmol).

MS (ESI) m/z: [M-1]· = 353,2

1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 385 (s, 3H, CH3), 5,28 (s,2H, CH2), 6,5-6,7 (d, J = 15,8 Hz, 1H, CH), 7,5-7,7 (m, 5H, 4xCHar + CH),7,7-7,8 (d, J = 8,0 Hz1 2H,2xCHar), 7,9-8,0 (d, J = 8,1 Hz, 2H, 2xCHar), 8,38(s, 1H, CH), 9,10 (bs, 1H, NH), 10,78 (bs, 1H, OH).

13C-RMN (50 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 52,8, 75,5, 120,9, 128,2,128,7, 128,8, 129,7, 130,0, 133,2, 137,2, 138,2, 144,0, 150,0, 163,2, 166,8.

Exemplo 7

Preparação de (2E)-N-hidróxi-3-{4-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (ST3050)

Etapa 1

O intermediário C, ácido (2E)-3-(4-{(E)-[(2-morfolin-4-il-etóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrílico, para a síntese de ST3050, foi obtido (0,140 g,91% de rendimento) como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, partindo deácido trans-4-formil-cinâmico A (0,089 g, 0,50 mmol) e B, cloridrato de 2-(2-morfolin-4-il)-0-etil-hidroxilamina (0,081 g, 0,55 mmol).

MS (ESI) m/z: [M+1]+ = 305,2

Etapa 2

O composto ST3050 foi obtido (45 mg, 30% de rendimento) co-mo descrito na Etapa 2 do Exemplo 1, partindo do intermediário C (0,140 g,0,46 mmol); a mistura reativa foi elaborada e purificada como descrito noExemplo 4.

O composto ST3050 como cloridrato foi obtido (1,241 mg, 98%de rendimento) depois da hidrólise ácida (HCI em solução em THF) da (2E)-3-{4-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-N-tritilóxi-acrilamida obtida(2,000 g, 3,56 mmols, 67% de rendimento) pela reação do intermediário C(1,800 g, 5,29 mmols) com cloro-formiato de etila (607 μΙ_, 6,35 mmols) eTEA (959 μΙ_, 6,88 mmols) em 5 mL de THF anidro (de acordo com o proce-dimento descrito em Mai1 A., Pezzi, R., et ai, J. Med. Chem. 48:3344 (2005);e em Mai, A., Pezzi, R., et ai, J. Med. Chem. 46:4826 (2003)).

MS (ESI) m/z: [M+1]+ = 320,3

1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 2,4-2,5 (t, J = 4,4 Hz1 4H,2xCH2), 2,6-2,7 (t, J = 5,9 Hz, 2H, CH2), 3,5-3,6 (t,J = 4,4 Hz, 4H, 2xCH2),20 4,2-4,3 (t, J = 5,9 Hz, 2H, CH2), 6,4-6,6 (d, J = 15,8 Hz, 1H, CH), 7,4-7,6 (d, J= 16,1 Hz, 1H, CH), 7,62 (bs, 4H, 4xCHar), 8,27 (s, 1H, CH), 9,09 (bs, 1H,NH), 10,79 (bs, 1H, OH).

13C-RMN (50 MHz, DMSO-de) δ (ppm): 54,4, 57,7, 66,9, 72,2,120,8, 128,1, 128,7, 133,6, 137,0, 138,3, 149,0, 163,2.

Exemplo 8

Preparação de (2E)-3-(4-{[(benzilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrilamida (ST2840)

Etapa 1

O intermediário C, ácido (2E)-3-(4-{[(benzilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrílico(ST3076), para a síntese de ST2840, foi obtido (0,54 g, 98% derendimento) como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, partindo de ácidotrans-4-formil-cinâmico A (0,348 g, 1,97 mmol) e B, cloridrato de O-benzil-hidroxilamina (0,3782 g, 2,36 mmols).

MS (ESI) m/z: [M-1]" = 280,3

1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 5,19 (s, 2H, CH2-O), 6,58(d, 1H, CH=C, J = 16,1 Hz), 7,3-7,46 (m, 5H, 5xCHar), 7,59 (d, 1H, CH=C1 J =15,7), 7,64 (d, 2H, 4xCHar), 7,74 (d, 2H, 2xCHar), 8,34 (s, 1H, CH=N).

13C-RMN (50 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 76,4, 121,0, 128,0, 128,6,129,0, 129,1, 129,4, 134,1, 136,4, 138,2, 143,7, 149,5, 168,2.

Etapa 2

O composto ST2840 foi obtido (0,080 g, 75% de rendimento)como descrito na Etapa 2 do Exemplo 1, partindo do intermediário C (0,100g, 0,36 mmol).

MS (ESI) m/z: [M-1]· = 295,2[M+23]+ = 319,1

1H-RMN (200 MHz1 DMSO-d6) δ (ppm): 5,18 (s, 2H, CH2-O), 6,50(d, J = 15,78 Hz, 1H, CH=C), 7,30-7,50 (m, 6H, 5xCHar + CH=C), 7,61 (m,4H, 4xCHar), 8,32 (s, 1H, CH=N).

13C-RMN (75,5 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 76,3, 120,8, 128,1,128,6, 128,6, 128,9, 129,0, 133,4, 137,0, 138,1, 138,2, 149,5, 163,1.

Exemplo 9

Preparação de (2E)-N-hidróxi-3-(4-{[(4-cloro-benzoil)-hidrazono]-metil}-fenil)-acrilamida (ST2888)

Etapa 1

O intermediário C, ácido (2E)-3-(4-{[(4-cloro-benzoil)-hidrazono]-metil}-fenil)-acrílico, para a síntese de ST2888, foi obtido (0,255 g, 78% derendimento) como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, partindo de ácidotrans-4-formil-cinâmico A (0,176 g, 1,00 mmol) e B, hidrazida do ácido 4-cloro-benzóico (0,170 g, 1,00 mmol) em 2 ml_ de EtOH sob refluxo com 5%v/v de HCI (37%). Depois de 5 h de agitação, a reação foi resfriada até atemperatura ambiente, filtrada, e o sólido foi lavado com EtOH.

MS (ESI) m/z: [M-1 ]" = 327,2

Etapa 2

O composto ST2888 foi obtido (0,110 g, 53% de rendimento)como descrito na Etapa 2 do Exemplo 1, partindo do intermediário C (0,200g, 0,61 mmol).

MS (ESI) m/z: [M-1]" = 342,1

[M+23]+ = 366,3

1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 6,51 (d, J = 15,9 Hz, 1H,CH=C), 7,46 (d, J = 15,8 Hz, 1H, CH=C), 7,61 (t, 4H, 4xCHar), 7,75 (d, 2H,2xCHar), 7,92 (d, 2H, 2xCHar), 8,43 (s, 1H, CH=N), 11,95 (s, 1H, NH).

13C-RMN (50 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 120,8, 128,3, 128,6,129,3, 130,3, 132,8, 135,8, 137,2, 137,3, 138,2, 148,1, 162,9, 163,5.

Exemplo 10

Preparação de (2E)-N-(2-amino-fenil)-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida (ST3070)

Etapa 1

A síntese do intermediário C, ácido (2E)-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrílico, foi descrita na Etapa 1 do Exemplo 3.

Etapa 2

O composto ST3070 foi obtido (0,12 g, 60% de rendimento) dis-solvendo o intermediário C (0,158 g, 0,48 mmol), PyBOP (0,276 g, 0,53mmol), DIEA (252 μΙ_, 1,45 mmol) em 3 mL de DMF, e esta solução foi adi-cionada lentamente a uma solução de o-fenilenodiamina (0,261 g, 2,42mmols) em 0,5 mL de DMF. Quando a reação terminou, a DMF foi destiladasob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado por cromatografia ins-tantânea em sílica-gel (eluente: CH2CI2/dioxano = 95:5).

MS (ESI) m/z: [M+1]+ = 417,1

1H-RMN (200 MHz, DMSOd6) δ (ppm): 4,98 (bs, 2H, NH2), 5,36(s, 2H, CH2), 6,5-6,6 (t, J = 7,3 Hz, 1H, CHar), 6,7-6,8 (d, J = 7,6 Hz, 1H,CHar), 6,9-7,0 (m, 2H, CH, CHar), 7,3-7,4 (d, 1H, J = 7,7 Hz, CHar), 7,5-7,7 (d,J = 15,8 Hz, 1H, CH), 7,67 (m, 6H, 6xCHar), 8,2-8,3 (d, J = 8,2 Hz, 2H,2xCHar), 8,43 (s, 1H, CH), 9,43 (bs, 1H, NH).

13C-RMN (50 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 67,1, 74,9, 116,7, 117,0,124,1, 124,3, 125,5, 126,6, 128,3, 129,5, 133,3, 137,3, 139,4, 142,4, 146,6,147,7, 150,4, 164,0.Exemplo 11

Preparação de (2E)-N-hidróxi-3-(1H-indol-5-il)-acrilamida (ST2880)

Para a preparação deste composto, seguiu-se o Esquema Gené-rico Il (vide também Kato, K.; Ohkawa, S., Terão, S., Terashita, A.I., Nishi-kawa, K.J., Med. Chem. 28:287 (1985); e Pindur, U., Pfeuffer, L., Monatsch.Chem. 120:157 (1989)).

Etapa 1

Uma solução de 1H-indol-5-carbaldeído (0,217 g, 1,5 mmol) e(trifenil-fosforanilideno)-acetato de metila (0,535 g, 1,6 mmol) em DCM (4mL) foi agitada em um frasco sob refluxo durante a noite inteira, e depois osolvente foi removido sob pressão reduzida. A purificação por cromatografiaem coluna de sílica-gel, com uma mistura de DCM/hecano 8:2 como um sis-tema eluente, deu 0,291 g de (2E)-3-(1H-indol-5-il)-acrilato de metila (97%de rendimento).

MS (ESI) m/z: [M-1]" = 200,2

[M+23]+ = 224,2

1H-RMN (200 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 6,46 (d, 1H, CH=C, J =15,8 Hz), 6,62 (m, 1H, CHar), 7,26 (m, 1H, CHar), 7,43 (m, 2H, CHar), 7,83-7,93 (m, 2H, CHar + CH=C), 8,41 (s, 1 Η, NH).

13C-RMN (50 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 51,63, 103,61, 111,68,114,73, 121,70, 122,50, 125,41, 126,64, 128,27, 137,14, 146,84, 168,24.

Etapa 2

Adicionou-se LiOH sólido (532 mg, 12,7 mmols) a uma soluçãodo intermediário (2E)-3-(1H-indol-5-il)-acrilato de metila da Etapa 1 (255 mg,1,27 mmol) em Me0H/H20 5:1 (10 mL), e a mistura reativa foi agitada àtemperatura ambiente durante a noite inteira. A solução foi acidificada (pH~1) com HCI 1 N e depois extraída com acetato de etila. A camada orgânicafoi lavada 3 vezes com água, e depois secada com sulfato de sódio, filtradae evaporada sob pressão reduzida, para dar 0,24 g do intermediário E, ácido(2E)-3-(1 H-indol-5-il)-acrílico (94% de rendimento).

MS (ESI) m/z: [M-1]· = 186,0[Μ+23]+ = 210,1

Etapa 3

Em um frasco, cloridrato de hidroxilamina (0,379 g, 5,45 mmols)e DBU (830 mg, 5,45 mmols) foram dissolvidos em DMF (0,5 ml_), e a solu-ção resultante foi adicionada a uma suspensão do intermediário E (0,507 g,2,726 mmols), HATU (1,04 g, 2,726 mmols) e DIEA (1,19 mL, 6,81 mmol emDMF (2 mL). Quando a reação terminou, a mistura foi concentrada sob pres-são reduzida, e o resíduo foi purificado por RP-HPLC preparatória (colunaLichrosorb RP-18, 7 μιη; eluentes: H20/CH3CN 60:40; vazão = 10 mL/min),para dar o produto F (ST2880) (0,165 g, 30% de rendimento).

MS (ESI) m/z: [M-H]" = 200,9

[M+23]+ = 224,9

1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 6,35 (d, 1H, CH=C1 J =15,7 Hz), 6,46 (br, 1H, CHar), 7,28-7,44 (m, 3H, CHar), 7,53 (d, 1H, CH=C, J =15,7 Hz), 7,72 (s, 1H, CHar), 11,25 (s, 1H, NH).

13C-RMN (75,5 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 102,52, 112,66, 115,93,120,68, 121,67, 126,61, 127,09, 128,58, 137,33, 141,02, 164,27.

Exemplo 12

Preparação de Cloridrato de (2E)-N-hidróxi-3-{3-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (ST3576)

Etapa 1

O intermediário C, ácido (2E)-3-(3-{(E)-[(2-morfolin-4-il-etóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrílico, para a síntese de ST3576, foi obtido (1,232 g,98% de rendimento) como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, partindo deácido trans-3-formil-cinâmico A (Y = CH=CH, R1 = H, R3 = H, 0,650 g, 3,69mmols) e B cloridrato de 2-(2-morfolin-4-il-0-etil-hidroxilamina (0,808 g, 3,69mmols).

MS (ESI) m/z: [M+1]' = 305,1

O ácido trans-3-formil-cinâmico A (0,699 g, 3,97 mmols, 92% derendimento) foi obtido anteriormente por hidrólise básica (excesso de NaOHem EtOH/água = 1:1) de (2E)-3-(3-formil-fenil)-acrilato de metila obtido pelareação de 3-iodo-benzaldeído (1,000 g, 4,31 mmols) com acrilato de metila(775 μL, 8,62 mmols), NaHCO3 (0,905 g, 10,75 mmols), nBu4NCI (1,200 g,4,31 mmols) e Pd(OAc)2 (0,019 g, 0,09 mmol) em DMF (6 mL).

Etapa 2

O composto ST3576 foi obtido (0,931 mg, 98% de rendimento)depois da hidrólise ácida de (2E)-3-{3-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-N-tritilóxi-acrilamida obtida (1,500 g, 2,67 mmols, 65% de rendimento)pela reação do intermediário C (1,400 g, 4,12 mmols) com cloroformiato deetila (472 μΙ_, 4,94 mmols) e TEA (746 μΙ_, 5,35 mmols) em 5 mL de THF a-nidro (de acordo com o procedimento descrito em Mai, A., Pezzi, R., et ai, J.Med. Chem. 48:3344 (2005); e em Mai, A., Pezzi, R., et ai, J. Med. Chem.46:4826 (2003).

MS (ESI) m/z: [M+1]" = 320,1[M-1]" = 318,1

1H-RMN (300 MHz, δ ): 3,30-3,22 (m, 2H, CH2), 3,54-3,64 (m,4H, 2xCH2), 3,85 (t, J = 11,4 Hz, 2H, CH2), 4,03-4,10 (m, 2H, CH2), 4,54-4,90(m, 2H, CH2), 6,40-6,60 (d, J = 15,6 Hz, 1H, CH=C), 7,40-7,50 (t, J = 7,5 Hz,1H, CHar), 7,50-7,70 (m, 4H, 3xCHar + CH=C), 7,79 (s, 1H, CHar), 8,27 (s, 1H,CH=N).

13C-RMN (75,5 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 52,6, 56,2, 63,7, 67,6,118,3, 126,6, 128,2, 129,0, 129,3, 132,6, 135,7, 139,6, 150,6, 164,7.

Exemplo 13

Preparação de N-hidróxi-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-propanamida (ST3330)

Etapa 1

O intermediário C, ácido 3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-propanóico, para a síntese de ST3330, foi obtido (0,230 g, 78% de ren-dimento) como descrito na Etapa 1 do Exemplo 1, partindo de ácido 3-(4-formil-fenil)-propanóico A (Y = CH2-CH2, R1 = H, R3 = H; 0,160 g, 0,90 mmol)e B, cloridrato de 0-(4-nitro-benzil)-hidroxilamina (0,202 g, 0,99 mmol).

MS (ESI) m/z: [M+23]- = 351,1

O ácido 3-(4-formil-fenil)-propanóico A (Y = CH2-CH2, R1 = H, R3= H; 0,160 g, 0,90 mmol) foi obtido depois de hidrólise básica (excesso deLiOH em solução de água/THF 1/1) de 3-(4-formil-fenil)-propanoato de etilacomo produto bruto obtido pela reação de 4-bromo-benzaldeído (0,160 mg,0,86 mmol) com acroleína-dietil-acetal (396 μL, 2,60 mmols), na presença deBu3N (412 μL, 1,73 mmol), Bu4NCI (0,240 g, 0,86 mmol) e Pd(OAc)2 (0,006g, 0,03 mmol) em DMF a 90 0C durante a noite inteira (de acordo com o pro-cedimento descrito em Battistuzzi, G., Cacchi, S., Fabrizi, G., Bernini, R.,Synlett. 8:1133 (2003).

Etapa 2

O composto ST3330 foi obtido (0,030 g, 95% de rendimento)depois da hidrólise ácida de 3-{4-[(4-nitro-benzolóxi-imino)-metil]-fenil}-N-tritilóxi-propionamida obtida (0054 g, 0,09 mmol, 60% de rendimento) pelareação do intermediário C, ácido 3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenilj-propanóico (0,050 g, 0,15 mmol), com HATU (0,064 g, 0,17 mmol),TEA (43 μL, 0,31 mmol) e o-tritil-hidroxilamina (0,048 g, 0,17 mmol) em DMFà temperatura ambiente.

MS (ESI) m/z: [M+23]+ = 366,2

[M-1]" = 342,2

1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 2,23 (t, J = 7,6 Hz, 2H,CH2), 2,80 (t, J = 7,6 Hz, 2H, CH2), 5,29 (s, 2H, CH2), 7,20-7,24 (d, J = 7,94Hz, 2H, 2xCHfr), 7,47-7,50 (d, J = 8,1 Hz, 2H, 2xCHar), 7,62-7,66 (d, J = 8,7Hz, 2H, 2xCHar)8,20-8,24(d,j=8,8Hz,2H,2xCHar), 8,32 (s, 1H, CH), 8,70 (bs,1Η, NH), 10,30 (bs, 1H, OH).

13C-RMN (75,5 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 168,7, 150,6, 147,6,146,6, 144,2, 130,1, 129,4, 129,3, 127,7, 124,2, 74,6, 34,2, 31,4.

Exemplo 14

Preparação de Cloridrato de (2E)-N-(2-amino-fenil)-3-{4-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (ST3573)

Etapa 1

A síntese do intermediário C, ácido (2E)-3-(4-{(E)-[(2-morfolin-4-il-etóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrílico, foi descrita na Etapa 1 do Exemplo 7.

Etapa 2

A (2E)-N-(2-amino-fenil)-3-{4-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida obtida (0,740 g, 57% de rendimento) foi obtida pela reaçãodo intermediário "C" (1,000 g, 3,28 mmols), HATU (1,370 g, 3,61 mmols),TEA (550 μL, 3,90 mmols) em 9 mL de CH2CI2; esta solução foi adicionadalentamente a uma solução de o-fenilenodiamina (0,370 g, 3,45 mmols) em 1mL de CH2CI2. Quando a reação terminou, o CH2CI2 foi destilado sob pres-são reduzida, e o produto bruto foi purificado por cromatografia instantâ-neaem sílica-gel (eluente: CH2CI2/CH3OH/n-hexano/TEA = 67/2/29/2).

MS (ESI) m/z: [M+1]+ = 394,9

1H-RMN (500 MHz, DMSOd6 ,δ) (ppm): 2,48 (m, 4H, 2xCH2),2,64 (t, J = 5,8 Hz, 2H, CH2), 3,58 (t, J = 5,0 Hz, 4H, 2xCH2), 4,26 (t, J = 5,7Hz, 2H, CH2), 4,92 (bs, 2H, NH2), 6,5-6,6 (t, J = 8,1 Hz, 1H, CHar), 6,7-6,8 (d,J = 7,6 Hz, 1H, CHar), 6,9-7,0 (d, J = 15,7 Hz, 1H, CH), 6,9-7,0 (t, J = 8,1 Hz,1H, CHar), 7,3-7,4 (d, 1H, J = 7,7 Hz, CHar), 7,5-7,6(d,J=15,4Hz,1 H,CH)7,6-7,7 (m, 4H, 4xCHar), 8,29 (s, 1H, CH), 9,41 (s, 1H, NH).

13C-RMN (126 MHz, DMSO-d6) δ ): 54,3, 57,6, 66,9, 72,2, 116,7,117,0, 124,0, 124,2, 125,4, 126,5, 128,1, 128,8, 133,7, 137,0, 139,5, 142,3,149,0, 164,0.

O composto ST3573 foi obtido (0,660 g, 1,69 mmol, 90% de ren-dimento) depois da acidificação com HCI 4,0 M em dioxano de (2E)-N-(2-amino-fenil)-3-{4-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (0,740 g,1,88 mmol).

Exemplo 15

Preparação de (2E)-N-mercapto-3-{4-[(4-nitro-benzilóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida (ST3605)

Etapa 1

A síntese do intermediário C, ácido (2E)-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrílico (ST3075) foi descrita na Etapa 1 doExemplo 3.

Etapa 2

O composto (2E)-3-{4-[(4-nitro-benzilóxi-imino)-metil]-fenil}-N-tritil-sulfanil-acrilamida foi obtido (0,050 g, 0,08 mmol, 26% de rendimento)pela reação do intermediário C, ácido (2E)-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrílico (ST3075, 0,100 g, 0,31 mmol), com SOCI2 (34 μΙ_, 0,46mmol), DIEA (236 μΐ_, 1,38 mmol) e trifenil-metanossulfenamida (0,098 g,0,14 mmol) em DCM anidro à temperatura ambiente.

MS (ESI) m/z: [M+1]+ = 600,7

[M+23]+ = 622,1

[2M+1]+ = 1.199,4

1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 5,32 (s, 2H, CH2), 6,50-6,60 (d, J = 16,0 Hz, 1H, CH=C), 7,20-7,40 (m, 18H, 17xCHar + CH=C), 7,55-7,65 (d, J = 7,7 Hz1 2H, 2xCHar), 7,60-7,70 (d, J = 8,7 Hz, 2H, 2xCHar), 8,20-8,30 (d, J = 8,7 Hz1 2H, 2xCHar), 8,38 (s, 1H1 CHar), 8,96 (s, 1 Η, NH).

13C-RMN (75,5 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 57,8, 74,9, 124,2,127,8, 128,1, 128,6, 128,9, 129,2, 129,4, 130,2, 133,4, 136,8, 140,5, 143,6,146,5,147,7,150,3,154,4.

O composto ST3605 foi obtido (0,006 g, 20% de rendimento)depois da desproteção não-otimizada de (2E)-3-{4-[(4-nitro-benzilóxi-imino)-metil]-fenil}-N-tritil-sulfanil-acrilamida.

MS (ESI) m/z: [M-1]" = 356,2

Exemplo 16

Preparação de N-hidróxi-3-{4-[(E)-{[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil]-fenil}-prop-2-inamida (ST3618)

A síntese de ST3618 pode ser realizada de acordo com o Es-quema Genérico I, pela preparação do intermediário C correspondente, áci-do 3-[4-({[4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil]-fenil]propiólico, partindo do ácido p-formil-fenil-propiólico A. Este intermediário pode ser obtido pela reação de 4-iodo-benzaldeído com ácido propiólico, na presença de um catalisador dePd. Por causa dos baixos rendimentos, entretanto, e por causa da formaçãosubseqüente do grupo hidroxamato partindo do éster metílico, é melhor sin-tetizar diretamente o 3-(4-formil-fenil)-propiolato de metila como intermediá-rio (de acordo com o procedimento descrito em Eckert, T. e lpaktschi, R., emSynth. Comm. 28:327 (1998).

Etapa 1

O 3-[4-({[4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil]-fenil}-propiolato de meti-Ia para a síntese de ST3618 foi obtido (0,325 g, 96% de rendimento) comodescrito na Etapa 1 do Exemplo 1, partindo de 3-(4-formil-fenil)-propiolato demetila (0,180 g, 1,00 mmol) e B cloridrato de 0-(4-nitro-benzil)-hidroxilamina(0,202 g, 1,0 mmol).

O 3-(4-formil-fenil)-propiolato de metila (0,460 g, 2,43 mmols,80% de rendimento) foi obtido pela reação de 4-iodo-benzaldeído (0,700 mg,3,02 mmols) com propiolato de metila (1,013 g, 12,06 mmols) na presençade K2CO3 (0,846 g, 6,04 mmols), Cul (0,022 g, 0,12 mmol e Pd(PPh3)2CI2(0,042 g, 0,06 mmol) em THF a 65 0C. Depois de 12 h, o THF foi evaporadosob vácuo, e o resíduo foi extraído com Et20/H20. O produto bruto foi purifi-cado por cromatografia em coluna de sílica-gel.

Etapa 2

O composto ST3618 foi obtido (0,007 g, 60% de rendimento)depois da hidrólise ácida de 3-{4-[(4-nitro-benzilóxi-imino)-metil]-fenil}-N-tetraidropiranil-propiolamida obtida (0,150 g, 0,44 mmol, 35% de rendimento)pela reação de 3-[4-({[4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil]-fenil}-propiolato de me-tila (0,150 g, 0,44 mmol) com bis-(trimetil-silil)-sodamida 1,0 M em THF (1,0mL, 0,44 mmol) e O-tetraidropiranil-hidroxilamina (0,052 g, 0,44 mmol) emTHF a-78 0C por 2 h.

MS (ESI) m/z: [M+1]+ = 340,0

[M-1]" = 338,1

1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ (ppm): 5,35 (s, 2H, CH2), 7,58-7,60 (d, J = 8,5 Hz, 2H, 2xCHar), 7,64-7,69 (m, 4H, 4xCHar), 8,24-8,27 (d, J =8,5 Hz, 2H, 2xCHar), 8,29 (s, 1H, CH).

13C-RMN (125,7 MHz, CD3OD) δ (ppm): 152,0, 149,0, 147,8,

145,9, 134,1, 132,6, 128,6, 127,2, 123,4, 121,6 86,0, 81,3, 74,9.

Lista de Abreviaturas:

AcCN acetonitrila

AcOEt acetato de etila

DBU 1,8-diazabiciclo[5.4.0]-undec-7-eno

DCC diciclo-hexil-carbodiimida

DCM dicloro-metanoDIEA Ν,Ν,Ν-diisopropil-etil-amina

DMAP 4-dimetil-amino-piridina

DMF dimetil-formamida

DMSO sulfóxido de dimetila

HOBt hidróxi-benzotriazol

MeOH metanol

NMM N-metil-morfolina

RP-HPLC HPLC em fase reversa

TEA trietil-amina

TFA ácido triflúor-acético

THF tetraidrofurano

Resultados Biológicos

Estudos de Toxicidade

Para testar os efeitos dos compostos sobre o crescimento celu-lar, foram usadas células NB4 de leucemia promielocítica humana, célulasdo carcinoma de células não-pequenas NCI-H460 e células HCT-116 docarcinoma de cólon humano. As células cancerosas NB4 e NCI-H460 foramdesenvolvidas em RPMI 1640, contendo 10% de soro fetal bovino (GIBCO),enquanto que as células tumorosas HCT-116 foram desenvolvidas em Meiode McCoy 5A,ícontendo 10% de soro fetal bovino (GIBCO).

As células tumorosas foram semeadas em placas de cultura detecidos com 96 cavidades (Corning) até aproximadamente 10% de confluên-cia, e foram deixadas fixar e recuperar por pelo menos 24 h. Concentraçõesvariadas dos fármacos foram então adicionadas a cada cavidade, para cal-cular seu valor de Cl50 (a concentração que inibe a sobrevivência de 50%das células). As placas foram incubadas por 24 h a 37 0C. No final do trata-mento, para as células tumorosas NB4 em suspensão, o procedimento foirealizado da seguinte maneira: o meio de cultura foi removido por centrifuga-ção das placas a 1.600 χ g por 10 min, e o sobrenadante foi removido. 250μl de PBS foram adicionados, e depois as placas foram centrifugadas a1.600 χ g por 10 min, e o sobrenadante foi removido. 200 μL/cavidade domeio de cultura RPMI 1640, contendo 10% de FCS, foram adicionados, e asplacas foram centrifugadas a 37 0C por outras 48 h. As placas foram centrí-fugas novamente a 1.600 χ g por 10 min, o meio de cultura foi removido, e200 μΙ_ de PBS e 50 μ!_ de TCA a 80% gelado foram adicionados. As placasforam incubadas sobre gelo por pelo menos 1 h. O TCA foi removido, as pla-cas foram lavadas 3 vezes por imersão em água destilada e secadas sobrepapel e a 40 0C por 5 min. Depois, 200 μΙ_ de sulforodamina B a 0,4% emácido acético a 1% foram adicionados. As placas foram incubadas à tempe-ratura ambiente por outros 30 min. A sulforodamina B foi removida, as pla-cas foram lavadas por imersão em ácido acético a 1% por 3 vezes, e depoiselas foram secadas sobre papel e a 40 0C por 5 min. Depois, 200 μι. de Tris10 nM foram adicionados, as placas foram mantidas sob agitação por 20min. A sobrevivência das células foi determinada como densidade óptica porum espectrofluorímetro Multiskan a 540 nm. Para as células tumorosas emadesão (NCI-H460 e HCT-116), o procedimento foi como mencionado aci-ma, exceto que no final do tratamento, as placas foram lavadas por remoçãodo sobrenadante e adição de PBS 3 vezes sem centrifugação. Além disso,no último dia do ensaio, o sobrenadante foi removido sem centrifugação.

A quantidade de células exterminadas foi calculada como dimi-nuição percentual na ligação de suforonamina B, em comparação com asculturas de controle. Os valores de CI5o (a concentração que inibe a sobrevi-vência de 50% das células) foram calculados com o programa "ALLFIT". NaTabela 1, a citotoxicidade avaliada sobre as células tumorosas NB4 indicouque alguns compostos (ST2840, ST2986, ST2987, ST3049, ST2888) eramos mais potentes, pois os valores de Cl50 ficaram na faixa entre 0,6 e 0,8 μΜ.

As moléculas ST2984, ST3050, ST2880, ST3330, ST3576, e em seguida,ST2985 e ST2983 foram ligeiramente menos eficazes (valores de CI5o nafaixa entre 1,4 e 2,9 μΜ). Com relação ao efeito sobre a sobrevivência decélulas tumorosas NCI-H460, todos os compostos foram menos potentes doque sobre as células tumorosas NB4 (CI5o na faixa entre 1,6 e 7,7 μΜ). Nes-te caso, as moléculas que apresentaram um feito citotóxico menor foramST2985, ST2983, ST3330, ST3576 e ST 2880. Sobre HCT-116, a citotoxici-dade dos compostos mencionados acima foi comparável (Cl50 = 1,2-4,0 μΜ).Com relação a ST3070, ST3075, e ST3076, ST3573, os compostos revela-ram uma ação inibitória menor sobre a sobrevivência das células, porque aCl50 calculada sobre NB4, NCI-H460 e HCT-116 ficou na faixa entre 8,9 μΜe 20 μΜ.

Tabela 1

<table>table see original document page 36</column></row><table>

Claims (23)

1. Composto que tem a seguinte fórmula I<formula>formula see original document page 37</formula>[FÓRMULA I]em que:η é 0 ou 1;- quando η é 0, A é um grupo monovalente e é selecionado dogrupo que consiste em OH1 NH-OG, o grupo<formula>formula see original document page 37</formula>onde GeG' são iguais ou diferentes e são H, glicosila ou acetila;- quando η é 1, A é um grupo bivalente selecionado no grupoque consiste em NH-S-, S-NH e CH2-S-S-CH2;Y é um grupo selecionado entre HC=CH1 FC=CF1 FC=CH,CH=CF, CH2-CH2 e C=C;R é o grupo:<formula>formula see original document page 37</formula>onde X é O ou NH;R é o grupo:<formula>formula see original document page 37</formula>Z é selecionado do grupo que consiste em:- H- (C6-Ci2) arila ou (Ce-C12) arila substituída com nitro, halogênio,(C1-C4) alcóxi carbonila, hidroxila ou amino;- (C1-C4) alquila, (C2-C4) alquenila, (C2-C4) alquinila;- (C6-Ci2) aril -(CH2)n', onde a arila é substituída com nitro, halo-gênio, (CrC4) alcóxi carbonila, hidroxila ou amino; onde n' = 0-3;- (C6-C12) aril -CO, onde a arila é substituída com nitro, halogê-nio, (C1-C4) alcóxi carbonila, hidroxila, amino; e- (C3-C6) heterociclil - (C1-C4) alquila, onde pelo menos um dosCH2 do heterociclo é substituído por O, S ou NH;R1 é selecionado do grupo que consiste em:- H- NH2;- (C1-C4) alquila, (C2-C4) alquenila, (C2-C4) alquinila- NH-(C2-C4) alquinila;-NO2;- (C2-C4) alquinila;- halogênio;- (C6-C12) arila;- (C6-C12) aril -(C2-C4) alquinileno; e- (C3-C6) heterociclil - (C2-C4) alquinileno, onde pelo menos umdos CH2 do heterociclo é substituído por O, S ou NH;ou:R e R1, tomados em conjunto com o grupo aromático, formamum grupo policíclico que tem a seguinte fórmula: <formula>formula see original document page 38</formula>R2 é selecionado do grupo que consiste em:-H;- (C6-C12) arila ou (C6-C12) arila substituída com nitro, halogênio,(C1-C4) alcóxi carbonila, hidroxila ou amino;- (CrC4) alquila, (C2-C4) alquenila, (C2-C4) alquinila;- (C6-Ci2) aril -(CH2)n", onde a arila é substituída com nitro, halo-gênio, (CrC4) alcóxi carbonila, hidroxila ou amino; onde n" = 0-3;- (C6-Ci2) aril -CO, onde a arila é substituída com nitro, halogê-nio, (C1-C4) alcóxi carbonila, hidroxila, amino; e- (C3-C6) heterociclil - (CrC3) alquileno, onde pelo menos umdos CH2 do heterociclo é substituído por O, S ou NH;R3 é selecionado do grupo que consiste em:-H;- (C1-C4) alquila, (C2-C4) alquenila;- (C1-C4) alquil-NH;- (C1-C4)- alquil -(C3-C6)-heterociclileno, onde pelo menos umdos CH2 do heterociclo é substituído por O, S ou NH;- (C6-C12) arila; e- (C3-C6) heteroarila, onde pelo menos um dos CH do heterocicloé substituído por O, S ou NH;R4 é selecionado do grupo que consiste em:-H;- (C1-C4) alquila;- (C6-C12) arila;- (C6-C12) aril -(C1-C4) alquinileno;- (C2-C4) alcanoíla; e- (C6-C12) aril -CO;R5 é selecionado do grupo que consiste em:-H;- (C1-C4) alquila linear ou ramificada;- (C2-C4) alquenila linear ou ramificada; e- OR6, onde R6 é H, (Ci-C4) alquila, mesila, tosila, (C1-C4) alca-noíla.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, em que Y é OHou NHOG1 onde G é H.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, em que Y é ogrupo HC=CH.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, em que R1, R3,R4 e R5 são H.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, em que R2 éselecionado do grupo que consiste em H; (C6-Ci2) arila; (C6-Ci2) aril -(CH2)n,onde a arila é substituída com nitro, halogênio, (CrC4) alcóxi carbonila; (C6-Ci2) aril -CO, (C3-C6) heterociclil - Ci-C3 alquileno, onde pelo menos um dosCH2 do heterociclo é substituído por NH.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, onde η é 2.

7. Composto da Fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1,que é selecionado do grupo que consiste em:(2E)-N-hidróxi-3-(4-{[(alilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrilamida;(2E)-N-hidróxi-3-{4-[(fenóxi-imino)-metil]—fenil}-acrilamida;(2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida;(2E)-N-hidróxi-3-{4-[(hidróxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida;(2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(pentaflúor-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida;(2E)-N-hidróxi-3-[4-({[(4-metóxi-carbonil-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida;(2E)-N-hidróxi-3-{4-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida;(2E)-3-(4-{[(benzilóxi)-imino]-metil}-fenil)-N-hidroxiacrilamida;(2E)-N-hidróxi-3-(4-{[(4-cloro-benzoil)-hidrazono]-metil}-fenil)-acrilamida;(2E)-N-(2-amino-fenil)-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrilamida;(2E)-N-hidróxi-3-(1 H-indol-5-il)-acrilamida;ácido (2E)-3-[4-((E)-{[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-acrílico;ácido (2E)-3-(4-{[(benzilóxi)-imino]-metil}-fenil)-acrílico;cloridrato de (2E)-N-hidróxi-3-{3-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida;N-hidróxi-3-[4-({[(4-nitro-benzil)óxi]-imino}-metil)-fenil]-propanamida;Cloridrato de (2E)-N-(2-amino-fenil)-3-{4-[(2-morfolin-4-il-etóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida; e(2E)-N-mercapto-344-[(4-nitro-benzilóxi-imino)-metil]-fenil}-acrilamida.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1a 19, como um medicamento.

9. Processo para preparar os compostos como definido emqualquer uma das reivindicações 1 a 7, compreendendo reagir um derivadodo ácido 4-formil-cinâmico ou do ácido 3-(4-formil-fenil)-propanóico com umderivado de hidroxilamina.

10. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações 1 a 7, para a preparação de um medicamento com atividadeantitumoral.

11. Uso de um composto como definido em qualquer uma dasreivindicações 1 a 7, para a preparação de um medicamento para o trata-mento de uma patologia tumorosa, onde o tumor apresentou resistência afármacos anteriores usados para seu tratamento, onde o dito composto daFórmula (I) exerce um efeito quimiossensibilizador sobre o dito tumor resis-tente a fármacos.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 10 ou 11, onde o tumoré selecionado do grupo que consiste em sarcoma, carcinoma, carcinóide,tumor ósseo, tumor neuroendócrino, leucemia linfóide, leucemia promielocí-tica aguda, leucemia mielóide, leucemia monocítica, leucemia megacariocíti-ca, e doença de Hodgkin.

13. Uso, de acordo com a reivindicação 10 ou 11, onde o com-posto da Fórmula (I) é combinado com um ou mais agentes antitumorais co-nhecidos.

14. Uso1 de acordo com a reivindicação 13, onde o agente anti-tumoral conhecido é ácido all-trans-retinóico.

15. Composição farmacêutica que contém como ingrediente ati-vo um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, epelo menos um excipiente e/ou diluente farmaceuticamente aceitáveis.

16. Composição, de acordo com a reivindicação 15, para o tra-tamento de patologias tumorosas.

17. Composição, de acordo com a reivindicação 15, para o tra-tamento de uma patologia tumorosa na qual o tumor demonstrou resistênciaa fármacos antitumorais usados para seu tratamento, onde o dito compostoda Fórmula (I) exerce uma ação quimiossensibilizadora sobre o dito tumorresistente a fármacos.

18. Composição, de acordo com a reivindicação 16 ou 17, ondea patologia tumorosa é selecionada do grupo que consiste em sarcoma, car-cinoma, carcinóide, tumor ósseo, tumor neuroendócrino, leucemia linfóide,leucemia promielocítica aguda, leucemia mielóide, leucemia monocítica, leu-cemia megacariocítica, e doença de Hodgkin.

19. Composição, de acordo com a reivindicação 16 ou 17, ondeo composto da Fórmula (I) é administrado em combinação com um ou maisagentes antitumorais conhecidos.

20. Composição, de acordo com a reivindicação 19, onde o a-gente antitumoral conhecido é selecionado no grupo que consiste em agen-tes alquilantes, inibidores de topoisomerase, agentes antitubulina, compos-tos intercaladores, antimetabólitos, produtos naturais tais como alcalóides devinca, epipodofilotoxinas, antibióticos, enzimas, taxanos, e compostos citodi-ferenciadores.

21. Composição, de acordo com a reivindicação 20, onde ocomposto antitumoral citodiferenciador é ácido all-trans-retinóico.

22. Processo para preparar qualquer uma das composições deacordo com as reivindicações 15 a 21, compreendendo misturar o(s) com-posto(s) de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7 com excipi-ente(s) e/ou diluente(s) apropriado(s)

23. Método para tratar um mamífero que sofre de uma doençade acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 12, compreendendoadministrar uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de acordocom qualquer uma das reivindicações 1 a 7.