BRPI0611369A2 - compostos de n-formil hidroxilamina - Google Patents

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Kathryn Rene Bracken
Simon Bushell
Karl Dean
Charles Francavilla
Kwangho Lee
Mohindra Seepersaud
Lei Shu
Arathia Sundaram
Zhengyu Yuan
Rakesh K Jain
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Novartis Ag
Vicuron Pharm Inc
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Abstract

COMPOSTOS DE N-FORMIL HIDROXILAMINA. A presente invencao refere-se aos novos compostos de N-formil hidroxilamina e seus derivados sao descritos. Estes compostos de N-formil hidroxilamina inibem peptidil deformilase (PDF), uma enzima presente em procariotas. Os compostos sao üteis como antimicrobianos e antibioticos. Os compostos da invencao exibem inibicao seletiva de peptidil defQrmilase versus outras metaloproteinases tais como MMPs. Métodos de preparacao e uso dos compostos também sao descritos.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOS-TOS DE N-FORMIL HIDROXILAMINA".
A presente invenção refere-se aos novos compostos de N-formilhidroxilamina, aos usos destes compostos em várias aplicações médicas,incluindo tratar distúrbios receptivos ao tratamento por inibidores de peptidildeformilase, tal como o tratamento de infecções bacterianas, e às composi-ções farmacêuticas compreendendo estes compostos.
O tratamento de infecção microbiana em organismos hospedei-ros requer um meio eficaz para matar o micróbio enquanto causando tãopouco dano ao hospedeiro quanto possível. Consequentemente, agentesque alvejam características únicas a um microorganismo que causa patolo-gia são desejáveis para o tratamento.
A peptídeo deformilase é uma metalopeptidase encontrada emorganismos procarióticos, tais como bactérias. A síntese de proteína em or-ganismos procarióticos começa com N-formil metionina (fMet). Depois doinício da síntese de proteína, o grupo formila é removido pela enzima peptí-deo deformilase (PDF); esta atividade é essencial para a maturação de pro-teínas.
As metaloproteinases são críticas para muitos aspectos do me-tabolismo normal. Distúrbios envolvendo metaloproteinases foram implica-dos em várias doenças tais como câncer, artrite, e doenças auto-imunes.Por causa da importância de MMPs em processos fisiológicos normais, seriapreferível desenvolver agentes que inibem PDF enquanto evitando a inibiçãosignificante de MMPs. Alternativamente, os inibidores de PDF que tambéminibem MMPs podem ser de uso onde os benefícios terapêuticos de inibirPDF sobrepujam o risco de efeitos colaterais da inibição de MMP.
A pesquisa em inibidores de PDF é muito menos extensiva doque aquela para inibidores de MMPs. Derivados de N-formil hidroxilaminasão descritos nos Pedidos de Patente Internacional WO 99/39704 e WO02/102790. Em vista da importância de identificar novos antibióticos paratratar bactérias resistentes aos antibióticos existentes, é desejável desenvol-ver novos inibidores de PDF para a avaliação e uso como agentes antibacte-rianos e antimicrobianos. A presente invenção satisfaz esta necessidade.
Em particular, a presente invenção fornece um derivado de N-formil hidroxilamina referido aqui coletivamente como "compostos da inven-ção"), um sal deste ou um pró-fármaco deste, por exemplo um composto dafórmula (I):
<formula>formula see original document page 3</formula>
em que Ri é hidrogênio, alquila, heteroalquila, heterocicloalquila, arila ouheteroarila;
R3 é hidrogênio, halogênio, ou alcóxi; eR4 é arila, ou heteroarila; ou
η é 0 a 3
um sal deste ou um pró-fármaco deste.
Em um aspecto, R4 é uma heteroarila da fórmula (II)
<formula>formula see original document page 3</formula>
em que cada um de R6, R7, Re e Rg independentemente é hidrogênio, alqui-la, alquila substituída, fenila, halogênio, hidróxi ou alcóxi,por exemplo em que
a.) R6 e Re são hidrogênio, Rg é hidrogênio ou alquila e R7 é al-quila, alquila substituída ou fenila;
b.) R6, R7 e R9 são hidrogênio e R6 é halogênio, alquila ou alquilasubstituída
c.) R7, R8 e R9 são hidrogênio e R6 é hidroxila.
Em um aspecto particularmente útil, a heteroarila é da fórmula<formula>formula see original document page 4</formula>
em que R6, R7 e Rg são como definidos acima para a fórmula (II) e Re é ha-logênio, por exemplo flúor.
Ainda em um outro aspecto, R4 é da fórmula (II.2)
<formula>formula see original document page 4</formula>
em que R6, R7 e R8 são como definidos acima para a fórmula (II) acimaAinda em um outro aspecto, R4 é da fórmula (II.3)
<formula>formula see original document page 4</formula>
em que Re, R7 e R8 são como definidos acima para a fórmula (II)Ainda em um outro aspecto, R4 é da fórmula (II.4)
<formula>formula see original document page 4</formula>
em que R6, R7 e R8 são como definidos acima para a fórmula (II)
Ainda em um outro aspecto, R4 é da fórmula (II .5)
<formula>formula see original document page 4</formula>
em que R6, R7 e R8 são como definidos acima para a fórmula (II)
A menos que de outro modo estabelecido, os termos seguintescomo usado no relatório descritivo têm o significado seguinte.
O termo "cicloalcano" ou cicloalquila" contém de 3 a 7 átomos decarbono no anel, e é, preferivelmente ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ecicloexila.
O termo "grupo alifático" refere-se aos grupos alifáticos satura-dos ou insaturados, tais como alquila, alquenila ou alquinila, cicloalquila oualquila substituída incluindo grupos de cadeia reta, cadeia ramificada e cícli-cos tendo de 1 a 10 átomos de carbono. O termo "alquila" ou "alq", quandoele ocorre, é um grupo alifático de cadeia reta ou ramificada saturado de 1 a10 átomos de carbono ou uma cicloalquila de 3 a 10 átomos de carbono,mais preferivelmente, grupos alquila são alquila CrC7, particularmente, al-quila C1-C4. Exemplos de "alquila" ou "alq" incluem, mas não são limitados a,metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila, f-butila, n-pentila, neopentila, n-hexila ou /7-heptila, ciclopropila e, especialmente, n-butila.
O termo "alquila substituída" refere-se a um grupo alquila que ésubstituído com um ou mais substituintes preferivelmente 1 a 3 substituintesincluindo, mas não limitado a substituintes, tais como halogênio, alcóxi infe-rior, hidróxi, mercapto, carbóxi, cicloalquila, arila, heteroarila, e semelhantes.
Exemplos de grupos alquila substituídas incluem, mas não são limitados a, -CF3, -CF2-CF3, hidroximetila, 1- ou 2-hidroxietila, metoximetila, 1- ou 2-etoxietila, carboximetila, 1- ou 2-carboxietila, e semelhantes.
O termo "arila" ou "Ar" refere-se a um grupo carbocíclico aromá-tico de 6 a 14 átomos de carbono tendo um anel único (incluindo, mas nãolimitado a, grupos, tais como fenila) ou anéis condensados múltiplos (incluin-do, mas não limitados a, grupos tais como naftila ou antrila), e é especial-mente fenila.
O termo "heteroarila" ou "HetAr" refere-se a um heterociclo aro-mático monocíclico ou um biciclo de 4 a 7 membros, que é composto de umheterociclo aromático monocíclico de 4 a 7 membros e um anel fundido embenzeno. A heteroarila tem pelo menos um heteroátomo, preferivelmentepelo menos dois heteroátomos incluindo, mas não limitados a, heteroáto-mos, tais como Ν, O e S, dentro do anel. Uma porção de heteroarila preferi-da é um heterociclo monocíclico de 6 membros, tendo 2, 3 ou 4 heteroáto-mos de nitrogênio no anel. Exemplos de grupos heteteroarila são piridinila,pirimidinila, pirazinila, piridazinila, N-óxido de piridazinila ou benzdioxolanila,triazina ou tetrazinas.
A arila ou heteroarila podem ser não substituídas ou substituídaspor um ou mais substituintes incluindo, mas não limitados a alquila C1.7, par-ticularmente alquila C-m tais como metila, hidróxi, alcóxi, acila, acilóxi, SCN,ciano, nitro, tioalcóxi, fenila, heteroalquilarila, alquilsulfonila, halogênio, eformila.
O termo "heteroalquila" refere-se a alquila Ci-8 saturado ou insa-turado como definido acima, e especialmente heteroalquila C1.4 que contémum ou mais heteroátomos, como parte das cadeias principais, ramificadas,ou cíclicas no grupo. Heteroátomos podem independentemente ser selecio-nados do grupo consistindo em -NR- onde R é hidrogênio ou alquila, -S-, -O-e -P-; preferivelmente -NR- onde R é hidrogênio ou alquila, e/ou -O-. Gru-pos heteroalquila podem ser ligados ao restante da molécula em um hetero-átomo (se uma valência estiver disponível) ou em um átomo de carbono.Exemplos de grupos, heteroalquila incluem, mas não são limitados a, grupostais como -O-CH3, -CH2-O-CH3, -CH2-CH2-O-CH3, -S-CH2-CH2-CH3, -CH2-CH(CH3)-S-CH3, e -CH2-CH2-NH-CH2-CH2-.
O grupo heteroalquila pode ser não substituído ou substituídocom um ou mais substituintes, preferivelmente um a três substituintes, inclu-indo mas não limitados a, alquila, halogênio, alcóxi, hidroxila, mercapto, car-bóxi, e especialmente fenila. 0(s) heteroátomo(s) assim como os átomos decarbono do grupo podem ser substituídos. 0(s) heteroátomo(s) também po-dem estar na forma oxidada.
O termo "alcóxi" como usado aqui refere-se a um alquila Cm0ligado a um átomo de oxigênio, ou preferivelmente alcóxi C1-7, mais preferi-velmente alcóxi C1-4. Exemplos de grupos alcóxi incluem, mas não são limi-tados a, grupos, tais como metóxi, etóxi, n-butóxi, terc-butóxi, e alilóxi.
O termo "halogênio" ou "halo" como usado aqui refere-se a cloro,bromo, flúor, iodo, e é especialmente flúor.
"Grupo de proteção" refere-se a um grupo químico que exibi ascaracterísticas seguintes: 1) reage seletivamente com a funcionalidade dese-jada em bom rendimento para fornecer um substrato protegido que é estávelàs reações protegidas para as quais a proteção é desejada; 2) é seletiva-mente removível do substrato protegido para produzir a funcionalidade dese-jada; e 3) é removível em bom rendimento por reagentes compatíveis como(s) outro(s) grupo(s) funcional(is) presente(s) ou gerado(s) em tais reaçõesprotegidas. Exemplos de grupos de proteção adequados podem ser encon-trados em Greene et ai, "Protective Grups in Organic Syntesis", 2- Ed., JohnWiley & Sons, Inc., New York (1991). Grupos de proteção amino preferidosincluem, mas não são limitados a, benziloxicarbonila (CBz), t-butil-oxicarbonila (Boc), t-butildimetilsilila (TBDMS), 9-fluorenilmetil-oxicarbonila(Fmoc), ou grupos de proteção fotolábeis adequados, tais como 6-nitroveratrilóxi carbonila (Nvoc)1 nitropiperonila, pirenilmetoxicarbonila, nitro-benzila, dimetil dimetóxi-benzila, 5-bromo-7-nitroindolinila, e semelhantes.Grupos de proteção hidróxi preferidos incluem Fmoc, TBDMS, grupos deproteção fotolábeis (tais como éter nitroveratril oximetílico (Nvom)), Mom(éter metóxi metílico), e Mem (éter metóxi etóxi metílico). Grupos de prote-ção particularmente preferidos incluem NPEOC (4-nitrofenetiloxicarbonila) eNPEOM (4-nitrofenetilóxi-metiloxicarbonila).
Será avaliado que os compostos da fórmula (I) podem existir naforma de isômeros ópticos, racematos ou diastereoisômeros. Por exemplo,um composto da fórmula (I) em que R3 pode estar na configuração R ou S.
Deve ser entendido que a presente invenção abrange todos enantiômeros esuas misturas. Considerações similares aplicam em relação aos materiais departida exibindo átomos de carbono assimétricos como mencionado.
Os compostos da invenção podem existir na forma de sais cris-talinos sólidos. Preferivelmente os sais cristalinos são sais metálicos, prefe-rivelmente de metais bivalentes, embora para alguns compostos seja possí-vel formar sólidos cristalinos usando-se contra-íons monovalentes, tais comoNa. O contra-íon é preferivelmenteJVIg, Ca ou Zn.Os compostos da invenção podem tipicamente estar na forma deum hidrato ou um solvato/hidrato misto. Tipicamente, o sal cristalino da in-venção contém cerca de 2 a 8 líquidos de hidratação, mais tipicamente cercade 2 a 6 líquidos de hidratação, e ainda mais tipicamente cerca de 2 a 4 Ii-quidos de hidratação. Assim, o sal cristalino da invenção tipicamente com-preende mais do que 2 % de água, mais tipicamente cerca de 4 a cerca de12 % de água e ainda mais tipicamente cerca de 8 a cerca de 9 % de água.Solvatos podem ser de um ou mais solventes orgânicos, tais como álcooisalquílicos inferiores, tais como metanol, etanol, isopropanol, butanol ou mis-tu ras destes.
Os compostos da invenção, por exemplo os compostos da fór-mula (I), podem existir na forma livre ou na forma de sal, por exemplo naforma de um sal farmaceuticamente aceitável. Um "sal farmaceuticamenteaceitável" de um composto significa um sal fisiológica e farmaceuticamenteaceitável que possui a atividade farmacológica desejada do composto pre-cursor e não comunica efeitos toxicológicos não desejados. Tais sais inclu-em:
(1) sais de adição de ácido, formados com ácidos inorgânicostais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico,ácido fosfórico, e semelhantes; ou formados com ácidos orgânicos, tais co-mo ácido acético, ácido propiônico, ácido hexanóico, ácido ciclopentanopro-piônico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malônico, ácidosuccínico, ácido málico, ácido maléico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácidocítrico, ácido benzóico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzóico, ácido cinâmico,ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido 1,2-etano-dissulfônico, ácido 2-hidroxietanossulfônico, ácido benzenossulfônico,ácido 4-clorobenzenossulfônico, ácido 2-naptalenossulfônico, ácido 4-toluenossulfônico, ácido canforassulfônico, ácido 3-fenilpropiônico, ácidotrimetilacético, ácido butilacético terciário, ácido Iauril sulfúrico, ácido glicôni-co, ácido glutâmico, ácido hidroxinaptóico, ácido salicílico, ácido esteárico,ácido mucônico, e semelhantes; ou
(2) sais formados quando um próton ácido presente no compos-to precursor é substituído por um íon metálico, por exemplo um íon de metalalcalino, um íon alcalino terroso, ou um íon de alumínio; ou coordena-se comuma base orgânica, tal como etanolamina, dietanolamina, trietanolamina,trometamina, N-metilglucamina, e semelhantes.
Um composto da invenção, por exemplo os compostos da fórmu-la (I), podem agir como um pró-fármaco. "Pró-fármaco" significa qualquercomposto que libera um medicamento precursor ativo de acordo com a fór-mula (I) in vivo quando tal pró-fármaco é administrado a um paciente mamí-fero. Pró-fármacos de um composto da fórmula (I) são preparados modifi-cando-se grupos funcionais presentes no composto da fórmula (I) em um talmodo que as modificações podem ser clivadas in vivo para liberar o compos-to precursor. Pró-fármacos incluem compostos da fórmula (I) em que umgrupo hidróxi, amino, ou sulfidrila é ligado a qualquer grupo que pode serclivado in vivo para regenerar o grupo hidroxila, amino, ou sulfidrila livre,respectivamente. Exemplos de pró-fármacos incluem, mas não são limitadosa ésteres (por exemplo, derivados de acetato, formiato, e benzoato), carba-matos (por exemplo, N, N-dimetilamino-carbonila) de grupos hidróxi funcio-nais em compostos da fórmula (I), e semelhantes.
Nos compostos da fórmula (I), as significâncias seguintes sãoindividualmente preferidas ou em qualquer sub-combinação:
1. R4 é uma heteroarila da fórmula de (11.1) em que Fta R7 e Rgsão hidrogênio e Re é flúor, R6, R7 e Rg são hidrogênio e R8 é metila ou tri-fluorometila; ou R6, R7 e R8 são hidrogênio e Rg é flúor; ou Re, R8 e Rg sãohidrogênio e R7 é etila ou metóxi; ou R7, R8 e Rg são hidrogênio e R8 é hidró-xi; ou R7 e R8 são hidrogênio, R6 é metóxi e Rg é metila; ou R4 é uma hete-roarila da fórmula (II.2) em que R6, R7 e R8 são hidrogênio, ou R4 é umaheteroarila da fórmula (II.3) em que R6, R7 e R8 são hidrogênio, ou R4 éuma heteroarila da fórmula (II.4) em que R6, R7 e R8 são hidrogênio ou R4é uma heteroarila da fórmula (II.5) em que R6, R7 e R8 são hidrogênio.
2. R1 é alquila, preferivelmente n-butila ou cicloalquila, preferi-velmente cicloalquila C3.7 tal como cicloexila, ciclopropila, ou ciclopentila
4. R3 é halogênio, preferivelmente flúor;Utilidade
Os compostos da presente invenção podem ser usados para otratamento ou prevenção de distúrbios infecciosos causados por uma varie-dade de organismos bacterianos ou procarióticos. Exemplos incluem, masnão são limitados a, bactérias aeróbicas e anaeróbicas Gram positivas eGram negativas, incluindo Staphylococci, por exemplo, S. aureus e S. epi-dermidisi Enterococci, por exemplo, E. faecalis e E. faeciurrr, Streptococci,por exemplo, S. pneumoniae·, Haemophilus, por exemplo, H. influenza; Mo-raxella, por exemplo, M. catarrhalis; e Escherichia, por exemplo, E. coli. Ou-tros exemplos incluem Mycobacteria, por exemplo, M. tuberculosis; micró-bios intercelulares, por exemplo, Chlamydia e Rickettsiae; e Mycoplasma,por exemplo, M. pneumoniae] e Pseudomonas, por exemplo, P. aeruginosa;H. pylori; e parasites, por exemplo, Plasmodium falciparum.
Os compostos da presente invenção preferivelmente têm melho-ra substancial em eficácia microbiológica contra bactérias Gram positivas ouGram negativas. Especificamente, os compostos da presente invenção têmmelhora significante em seu espectro microbiológico de atividade tendo-seinibição melhorada de bactérias Gram negativas e/ou Gram positivas, taiscomo H. influenza e S pneumonia. Por exemplo onde, em um exemplo, oíndice comparativo médio (ACI) é maior do que etapas de diluição 3 para ainibição melhorada de H. influenza e adicionalmente mostra um ACI de eta-pas de diluição 0,4 para a inibição melhorada de S. pneumonia. Em um outroexemplo, o ACI são etapas de diluição 3 para a inibição melhorada de S.pneumonia e adicionalmente mostra um ACI de etapas de diluição 1,2 para ainibição melhorada de H. influenza.
Os compostos da invenção também preferivelmente têm segu-rança, toxicidade e propriedades farmacocinéticas melhoradas, por exemplouma diminuição ou eliminação de eventos adversos potenciais em ser hu-mano em relação aos compostos da técnica anterior.
Em um aspecto, composições, para tratar ou prevenir distúrbiosinfecciosos são fornecidas, compreendendo um composto da invenção, umsal farmaceuticamente aceitável deste ou um pró-fármaco deste, como des-crito aqui em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável. Emuma outra forma de realização, tais composições incluem ainda um outroagente terapêutico.
Em um outro aspecto, é fornecido uma quantidade de dosagemde um composto da invenção, um sal farmaceuticamente aceitável deste ouum pró-fármaco deste, como descrito aqui em uma quantidade eficaz para otratamento, prevenção ou alívio de um distúrbio, tal como um distúrbio infec-cioso. Estes compostos ou derivados destes podem ser triados quanto à ati-vidade contra agentes microbianos diferentes e dosagens apropriadas po-dem ser determinadas usando métodos disponíveis na técnica.
Os compostos da invenção podem ser usados para tratar umpaciente para tratar, prevenir, ou reduzir a severidade de uma infecção. Pa-cientes incluem animais, plantas, produtos sangüíneos, culturas e superfí-cies tais como aquelas de equipamento médico ou pesquisa, tais como vi-dro, agulhas, equipamento cirúrgico e tubulação, e objetos intencionadospara implantação temporária ou permanente em um organismo. Animais pre-feridos incluem mamíferos, por exemplo, camundongos, ratos, gatos, ca-chorros, vacas, ovelha, porcos, cavalos, suínos, primatas, tais como maca-cos-reso, chimpanzés, gorilas, e o mais preferivelmente seres humanos. Tra-tar um paciente inclui, mas não é limitado a, prevenir, reduzir, ou eliminar ossintomas clínicos causados por uma infecção de um paciente por um micro-organismo; prevenir, reduzir, ou eliminar uma infecção de um paciente porum microorganismo; ou prevenir, reduzir, ou eliminar a contaminação de umpaciente por um microorganismo. O microorganismo envolvido é preferivel-mente um procariota, mais preferivelmente uma bactéria.
Em um aspecto, métodos de tratar ou prevenir um distúrbio infec-cioso em um paciente, tal como um ser humano ou outro paciente animal, quesão responsáveis para a inibição de peptidil deformilase são fornecidos, admi-nistrando-se ao paciente uma quantidade de inibição de peptidil deformilaseeficaz de um composto da invenção, um sal farmaceuticamente aceitável desteou um pró-fármaco deste. Em uma forma de realização, o composto ou seuderivado é administrado em uma forma farmaceuticamente aceitável opcio-nalmente em um veículo farmaceuticamente aceitável. O composto da inven-ção, sal farmaceuticamente aceitável deste ou pró-fármaco deste, podem seradministrados sozinhos ou em combinação com um outro agente terapêutico.Exemplos de tais agentes terapêuticos incluem, mas não são limitados a, β-lactama, quinolona, macrolida, glicopeptídeo e oxazolidinona. Como usadoaqui, um "distúrbio infeccioso" é qualquer distúrbio caracterizado pela presençade uma infecção microbiana, tal como a presença de bactérias. Tais distúrbiosinfecciosos incluem, por exemplo, infecções do sistema nervoso central, infec-ções do ouvido externo, infecções do ouvido médio, tais como otite média a-guda, infecções do seios cranianos, infecções dos olhos, infecções da cavida-de oral, tais como infecções dos dentes, gengivas e mucosa, infecções do tratorespiratório superior, infecções do trato respiratório inferior, infecções genituri-nárias, infecções gastrointestinais, infecções ginecológicas, septicemia, infec-ções do osso e articulação, infecções da pele e estrutura da pele, endocarditebacteriana, queimaduras, profilaxia antibacteriana de cirurgia, profilaxia anti-bacteriana em pacientes imunossuprimidos, tais como pacientes que recebemquimioterapia contra o câncer, ou pacientes com transplante de órgão e doen-ças crônicas causadas por organismos infecciosos, por exemplo, arteriosclero-se. Os compostos e composições compreendendo os compostos podem seradministrados por vias tais como tópica, local ou sistemicamente. Aplicaçãosistêmica inclui qualquer método de introduzir o composto nos tecidos do cor-po, por exemplo, administração intratecal, epidural, intramuscular, transdérmi-ca, intravenosa, intraperitoneal, subcutânea, sublingual, nasal, vaginal, retal, eoral. A dosagem específica de antimicrobiano a ser administrada, assim comoa duração do tratamento, podem ser ajustadas conforme necessário.
Em um outro aspecto da presente invenção, métodos são forne-cidos para inibir peptidil deformilase. Em uma forma de realização, o métodocompreende administrar a um paciente em necessidade deste uma quanti-dade de inibição de peptidil deformilase eficaz de um composto da fórmula(I), um sal farmaceuticamente aceitável deste ou um pró-fármaco deste. Ostermos "paciente" e "quantidade de inibição de peptidil deformilase eficaz"são como definidos acima.Ainda em um outro aspecto da invenção, também é fornecido ouso de um composto da fórmula (I) como definido acima, um sal farmaceuti-camente aceitável deste ou um pró-fármaco deste na preparação de um me-dicamento para o uso no tratamento de doenças mediadas por peptidil de-formilase.
Administração e Composição Farmacêutica
A presente invenção também fornece composições farmacêuti-cas que compreendem um composto de N-formil hidroxilamina bioativo, umsal farmaceuticamente aceitável deste, ou um pró-fármaco deste e um veícu-lo farmaceuticamente aceitável. As composições da invenção incluem aque-las em uma forma adaptada para o uso oral, tópico ou parenteral e podemser usadas para o tratamento de infecção bacteriana em um paciente, talcomo animais, preferivelmente, mamíferos, mais preferivelmente, seres hu-manos. As composições farmacêuticas podem incluir ainda um outro agenteterapêutico como descrito abaixo.
Os compostos antibióticos, também referidos aqui como com-postos antimicrobianos, de acordo com a invenção podem ser formuladospara administração em qualquer modo conveniente para o uso em ser hu-mano ou medicina veterinária, por analogia com outros antibióticos. Tais mé-todos são conhecidos na técnica (ver, por exemplo, Remington1S Pharma-ceutical Sciences, Easton, PA: Mack Publishing Co.) e não são descritos emdetalhe aqui.
A composição pode ser formulada para administração por qual-quer via conhecida na técnica, tal como subdérmica, inalação, oral, tópica ouparenteral. As composições podem estar em qualquer forma conhecida natécnica, incluindo mas não limitada a comprimidos, cápsulas, pastilhas, fu-sões rápidas (sem pastilhas), pós, grânulos, pastilhas expectorantes, cremesou preparações líquidas, tais como soluções ou suspensões parenterais o-rais ou estéreis. Os compostos também podem ser administrados em formu-lações lipossômicas, micelares ou microemulsão. Os compostos tambémpodem ser administrados como pró-fármacos, onde o pró-fármaco adminis-trado passa por biotransformação no mamífero tratado a uma forma que ébiologicamente ativa.
As formulações tópicas da presente invenção podem ser apre-sentadas como, por exemplo, ungüentos, cremes ou loções, soluções, po-madas, emulsões, emplastros, ungüentos oculares e gotas oculares ou paraouvidos, curativos impregnados, emplastros transdérmicos, pulverizações eaerossóis, e podem conter aditivos convencionais apropriados tais comoconservantes, solventes para auxiliar a penetração de medicamento e emo-lientes em ungüentos e cremes.
As formulações também podem conter veículos convencionaiscompatíveis, tais como bases de creme ou ungüento e etanol ou álcool oleí-Iico para loções. Tais veículos podem estar presentes, por exemplo, de cer-ca de 1 % até cerca de 99 % da formulação. Por exemplo, eles podem for-mar até cerca de 80 % da formulação.
Comprimidos e cápsulas para administração oral podem estar naforma de apresentação de dose unitária, e podem conter excipientes con-vencionais, tais como agentes de ligação, por exemplo, xarope, acácia, gela-tina, sorbitol, tragacanto, ou polivinilpirrolidona; enchedores, por exemplo,lactose, açúcar, amido de milho, fosfato de cálcio, sorbitol ou glicina; lubrifi-cantes de tabletagem, por exemplo, estearato de magnésio, talco, polietilenoglicol ou sílica; desintegrantes, por exemplo, amido de batata; ou agentesumectantes aceitáveis, tais como Iauril sulfato de sódio. Os comprimidos po-dem ser revestidos de acordo com métodos bem conhecidos na prática far-macêutica padrão.
Preparações líquidas orais podem estar na forma de, por exem-plo, suspensões oleosas ou aquosas, soluções, emulsões, xaropes ou elixi-res, ou podem estar presentes como um produto seco para reconstituiçãocom água ou um outro veículo adequado antes do uso. Tais preparaçõeslíquidas podem conter aditivos convencionais, tais como agentes de suspen-são, por exemplo, sorbitol, metil celulose, xarope de glicose, gelatina, hidro-xietil celulose, carboximetil celulose, gel de estearato de alumínio ou gordu-ras comestíveis hidrogenadas; agentes emulsificantes, por exemplo, lecitina,monooleato de sorbitano, ou acácia; veículos não aquosos (que podem in-cluir óleos comestíveis), por exemplo, óleo de amêndoa, ésteres oleosos,tais como glicerina, propileno glicol, ou álcool etílico; conservantes, por e-xemplo, p-hidroxibenzoato de metila ou propila ou ácido sórbico, e, se dese-jado, agentes flavorizantes ou corantes convencionais.
Para administração parenteral, formas de dosagem unitária flui-das são preparadas utilizando o composto e um veículo estéril, água sendopreferida. O composto, dependendo do veículo e concentração usados, podeser colocado em suspensão ou dissolvido no veículo ou outro solvente ade-quado. Na preparação de soluções, o composto pode ser dissolvido em á-gua para injeção e filtro esterilizado antes do enchimento em um frasco ouampola adequados e vedação. Vantajosamente, agentes tais como um con-servante anestésico local e agentes tamponantes podem ser dissolvidos noveículo. Para realçar a estabilidade, a composição pode ser congelada de-pois do enchimento no frasco e a água removida sob vácuo. O pó seco Iiofi-Iizado depois é selado no frasco e um frasco anexo de água para injeçãopode ser fornecido para reconstituir o líquido antes do uso. Suspensões pa-renterais são preparadas substancialmente na mesma maneira exceto que ocomposto é colocado em suspensão no veículo ao invés de ser dissolvido ea esterilização não pode ser realizada por filtração. O composto pode seresterilizado por exposição ao óxido de etileno antes de colocar em suspen-são no veículo estéril. Vantajosamente, um tensoativo ou agente umectanteé incluído na composição para facilitar a distribuição uniforme do composto.
As composições podem conter, por exemplo, de cerca de 0,1 %em peso a cerca de 99 % em peso, por exemplo, de cerca de 10 a 60 % empeso, do material ativo, dependendo do método de administração. Onde ascomposições compreendem unidades de dosagem, cada unidade conterá,por exemplo, de cerca de 1 a 1000 mg do ingrediente ativo. A dosagem co-mo utilizada para tratamento em ser humano adulto variará, por exemplo, decerca de 1 a 3000 mg por dia, por exemplo 1500 mg por dia dependendo davia e freqüência de administração. Uma tal dosagem corresponde a cerca de0,015 a 50 mg/kg por dia. Apropriadamente a dosagem é, por exemplo, decerca de 5 a 20 mg/kg por dia.Formulações farmacêuticas representativas contendo um com-posto da fórmula (I) são descritas abaixo.
A presente invenção também fornece um processo para prepa-rar um composto da invenção, por exemplo um composto da fórmula (I) pro-cesso este que compreende reagir um composto da fórmula (V)
<formula>formula see original document page 16</formula>
em que Ri e R2 são como definidos acima e Y é um grupo de proteção hi-dróxi, ou um derivado funcional deste, com um composto da fórmula (VI)
<formula>formula see original document page 16</formula>
em que R3 e R4 são como definidos acima, e η é igual a 1, e onde necessá-rio, converter os compostos resultantes obtidos na forma livre nas formas desal ou vice-versa.
Derivados funcionais dos compostos da fórmula (V) incluem porexemplo cloreto ácido, anidrido ácido ou um éster ativado.
As reações acima podem ser realizadas de acordo com métodosconhecidos na técnica ou como descritos nos Exemplos abaixo. A reaçãoconvenientemente pode ser realizada na presença de uma base e depois se-guida por hidrogenação, preferivelmente na presença de um catalisador dehidrogenação. Bases adequadas incluem por exemplo Base de Hunig (isto édiisopropiletilamina) e bases inorgânicas, tais como bicarbonato de sódio. Ocatalisador de hidrogenação, preferivelmente um catalisador de paládio, porexemplo paládio em carbono ou negro paládio, depois pode ser adicionado aoproduto resultante, por exemplo depois da concentração e agitado sob umaatmosfera de hidrogênio por exemplo durante cerca de 16 a cerca de 24 ho-ras. O catalisador de paládio pode ser adicionado preferivelmente de cerca de5 % em mol a cerca de 10 % em mol do produto concentrado.
Compostos da fórmula (V), usados como materiais de partida,podem ser preparados por exemplo reagindo-se um composto da fórmula (VII)
<formula>formula see original document page 17</formula>
em que R-i, R2, e Y são como definidos acima, por exemplo sob condiçõesbásicas suaves por exemplo como conhecido na técnica. Tipicamente, estareação pode ser realizada dissolvendo-se o composto da fórmula (VII) porexemplo em uma mistura de um solvente inerte, tal como THF1 DMF, tolue-no, dioxano ou CH2Cfe, e água, e adicionando peróxido de hidrogênio e de-pois uma solução aquosa da base em água à mistura esfriada. Exemplos debase incluem, por exemplo bicarbonato de sódio, hidróxido de lítio, hidróxidode sódio e semelhantes. A base pode ser usada preferivelmente em cercade 1,1 a cerca de 1,5 equivalentes para o composto da fórmula (VII).
Compostos da fórmula (VII) podem ser produzidos por exemploreagindo-se um composto da fórmula (VIII) em que R1, R2, e Y são comodefinidos acima, com ácido fórmico como conhecido na técnica. A reaçãotipicamente pode ser realizada, por exemplo a 0°C, adicionando-se uma so-lução de anidrido acético em ácido fórmico a uma solução de um compostoda fórmula (VIII) em ácido fórmico.<formula>formula see original document page 18</formula>
Compostos da fórmula (VIII) podem ser preparados por exemploreagindo-se um composto da fórmula (IX) em que Ri, R2, e Ysão como defi-nidos acima, com uma solução de ácido p-toluenossulfônico em um solventeorgânico inerte, e uma solução de Na2CO3, por exemplo 1 M, como conheci-do na técnica.
Compostos da fórmula (IX) podem ser preparados por exemploreagindo-se um composto da fórmula (X) em que Ri é como definido acima,com um composto protegido de hidróxi da fórmula (XI) em que Y é arila, al-quila, aralquila ou silila, como conhecido na técnica.
O composto da fórmula (X) pode ser produzido por exemplo rea-gindo-se um composto da fórmula (XII) com cloreto de pivaloíla, em que R4 écomo definido acima, como conhecido na técnica.
Na medida em que a produção de materiais de partida não éparticularmente descrita, os compostos são conhecidos ou podem ser prepa-rados analogamente aos métodos conhecidos na técnica ou como descritosnos Exemplos em seguida.
Todas as patentes, pedidos de patente e publicações citadosneste pedido são por meio deste incorporados por referência em sua totali-dade para todos os propósitos à mesma extensão como se cada patente,pedido de patente ou publicação individuais fossem deste modo individual-mente denotados.
As abreviações seguintes são usadas:
AcOH, HOAc = ácido acético
Ac2O = anidrido acético
BOC, Boc = t-butiloxicarbonila
DCM = diclorometano
DIEA = diisopropiletilamina
DMF = dimetilformamidaDMSO = dimetilsulfóxido
Et = etila
EtOAc = acetato de etila
Fmoc, FMOC = 9-fluorenilmetiloxicarbonila
HATU = hexafluorofosfato de O-íy-aza-benzotriazol-l-iO-N.N.IST.N'-tetrametilurônio
MCPBA = ácido meta-cloroperóxi-benzóico
Me = metila
MeOH = metanol
MMP = metaloproteinase matriz
NVOM = éter nitroveratriloximetílico
p-TSA = ácido p-toluenossulfônico
TA = temperatura ambiente
TFA = ácido trifluoroacético
tBu = t-butila
THF = tetraidrofurano
THP = 2-tetraidropiranila
TsOH ou p-TSA = ácido toluenossulfônico
Esquema Sintético Geral
Compostos desta invenção podem ser fabricados pelos métodosrepresentados nos esquemas de reação mostrados abaixo.
Os materiais de partida e reagentes usados na preparação destescompostos estão disponíveis de fornecedores comerciais, tais como AldrichChemical Co., (Milwaukee, Wisconsin, USA), Bachem (Torrance, Califórnia,USA), Emka-Chemie, ou Sigma (St. Louis, Missouri, USA) ou são preparadospor métodos conhecidos àqueles versados na técnica seguindo procedimen-tos apresentados em referências, tais como Fieser and Fieser's Reagents forOrganic Synthesis, Volumes 1 a 15 (John Wiley e Sons, 1991); Rodd1S Che-mistry of Carbon Compounds, Volumes 1 a 5 e Suplementos (Elsevier Scien-ce Publishers, 1989), Organic Reactions, Volumes 1 a 40 (John Wiley e Sons,1991), March1S Advanced Organic Chemistry, (John Wiley e Sons, A- Edição),e Larock1S Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc.,1989). Estes esquemas são meramente ilustrativos de alguns métodos pelosquais os compostos desta invenção podem ser sintetizados, e várias modifi-cações a estes esquemas podem ser feitas e serão sugeridas a uma pessoaversada na técnica tendo referido à esta divulgação.
Os materiais de partida e os intermediários da reação podem serisolados e purificados se desejado usando técnicas convencionais, incluindomas não limitadas à filtração, destilação, cristalização, cromatografia, e se-melhantes. Tais materiais podem ser caracterizados usando meios conven-cionais, incluindo constantes físicas e dados espectrais.
Preparação de Compostos da Fórmula (1)
Compostos da fórmula (I) podem ser preparados por métodosbem conhecidos na técnica da química orgânica. Procedimentos sintéticosrepresentativos para preparar compostos da presente invenção são ilustra-dos e descritos em detalhe abaixo. Por exemplo, compostos da fórmula (I)podem ser preparados como descrito nos Esquemas A a B abaixo.Procedimento Geral A: Síntese de amida do ácido 1-{2(R)-[(formilidroxiamino)-metil]-alcanoil}-pirrolidina-2(S)-carboxílico
<formula>formula see original document page 20</formula>
Etapa 1: Ácido 2-/7-butil acrílico (A-2)
A uma solução de ácido álquil malõnico A-1 (R = n-butila (107,4mmols) em etanol (200 ml) é adicionada piperidina (12,7 ml, 128,8 mmols,1,2 equiv.) e 37 % de formaldeído aquoso (40,0 ml, 536,9 mmols, 5 equiv.).A solução é aquecida a 80°C durante tempo este que um precipitado apare-ce, e depois redissolve gradualmente durante 1 hora. A mistura de reação éagitada a 80°C durante a noite, depois esfriada até a temperatura ambiente(ta). Os solventes são removidos sob pressão reduzida, e o resíduo é dissol-vido em acetato de etila, lavado sucessivamente com HCI 1 M e salmoura,seco em NaaSO4 anidro, e filtrado. O filtrado é concentrado para fornecer ocomposto do título A-2 como um óleo claro.
Etapa 2: 4-Benzil-3-(2-butil-acriloil)-oxazolidin-2-ona (A-3)
Ácido 2-n-butil acrílico (9,90 g, 77,2 mmol, e 1 equiv.) é dissolvi-do em THF seco (260 ml) e esfriado a -78°C sob uma manta de nitrogênio.Base de Hunig (17,5 ml, 100,4 mmols, 1,3 equiv.) e cloreto de pivaloila (9,5ml, 77,2 mmols, 1 equiv.) são adicionados em uma tal taxa que a temperatu-ra permaneceu abaixo de -60°C. A mistura é agitada a -78°C durante 30 mi-nutos, aquecida até a temperatura ambiente durante 2 horas, e finalmenteesfriada novamente a -78°C.
Em um frasco separado, (S)-(-)-4-benzil-2-oxazolidinona (13,49g, 77,24 mmols) é dissolvido em THF seco (150 ml) e esfriado a -78°C sobuma manta de nitrogênio. n-Butillítio (solução 2,5 M em hexanos, 30,9 ml,77,2 mmols, 1 equiv.) é adicionado lentamente a -78°C, e a mistura é agita-da durante 30 minutos na temperatura ambiente. O ânion resultante é trans-ferido lentamente por intermédio de uma cânula no vaso de reação original.
A mistura é deixada aquecer até a temperatura ambiente e é agitada durantea noite na temperatura ambiente. A reação é extinta com KHCO3 1 M, e ossolventes são removidos sob pressão reduzida. O resíduo é particionadoentre acetato de etila e água. A camada orgânica é lavada com salmoura,seca em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada para fornecer um óleo ama-relo que é purificado por cromatografia instantânea (hexano:acetato de etila=4:1) para produzir o composto do título A-3 como um sólido branco (15,0 g,52,2 mmol, 68 %).
Etapa 3: 4-Benzil-3-[2-(benziloxiamino-metil)-hexanoil]-oxazolidin-2-ona (saldo ácido p-toluenossulfônico)
Composto A-3 (8,25 g, 28,7 mmols) é misturado com O-benzilidroxilamina (7,07 g, 57,4 mmols, 2 equiv.) e agitado durante 40 horasna temperatura ambiente sob nitrogênio. A mistura é dissolvida em acetatode etila e ácido p-toluenossulfônico (21,84 g, 114,8 mmols, e 4 equiv.) é adi-cionado para precipitar O-benzilidroxilamina em excesso como um sólidobranco. O sólido branco é separado por filtração, e o filtrado é concentradopara fornecer um óleo amarelo bruto (análise de HPLC indicou um pequenotraço de material de partida). Carregando o óleo amarelo bruto com éter die-tílico em excesso e esfriando a O0C durante 30 minutos fornece um sólidoque é coletado por filtração e seco a vácuo para produzir o composto do títu-lo como um sólido cristalino branco (diastereômero único).
Etapa 4: 4-Benzil-3-[2-(benziloxiamino-metil)-hexanoil]-oxazolidin-2-ona (A-5)
A uma solução de sal de p-TSA (22,9 g, 39 3 mmols) dissolvidoem acetato de etila (400 ml), foi adicionado Na2CO3 1 M (200 ml, 5 equiv.) eagitada na temperatura ambiente durante 30 minutos. As camadas foramseparadas, e a camada aquosa extraída com acetato de etila. As camadasorgânicas combinadas foram secas em Na2S04 anidro, filtradas, e concen-tradas para fornecer o composto do título como um óleo opaco claro (15,8 g,38,6 mmols, 98 %).
Etapa 5: /N/-[2-(4-benzil-2-oxo-oxazolidina-3-carbonil)-hexil]-/V-benzilóxi- for-mamida (A-6)
Uma solução do composto A-5 (5,38 g, 13,1 mmols, 1 equiv.) emácido fórmico (7,4 ml, 196,6 mmols, 15 equiv.) é esfriada a 0°C sob umamanta de nitrogênio. Em um frasco separado, ácido fórmico (7,4 ml, 196,6mmols, 15 equiv.) é esfriado a 0°C sob uma manta de nitrogênio, e anidridoacético (2,47 ml, 26,2 mmols, 2 equiv.) é adicionado às gotas. A solução éagitada a 0°C durante 15 minutos. O anidrido misto resultante é transferidolentamente por intermédio de seringa no vaso de reação original. A mistura éagitada a 0°C durante 1 hora, depois na temperatura ambiente durante 3horas. A mistura é concentrada, absorvida em diclorometano, e lavada su-cessivamente com NaHCC>3 saturado e salmoura. A camada orgânica é secaem Na2S04 anidro, filtrada, e concentrada para fornecer um óleo opaco queé purificado por cromatografia instantânea (hexano:acetato de etila = 2:1 de-pois diclorometano:acetona = 9:1) para produzir o composto do título comoum óleo incolor.
Etapa 6: Ácido 2-[(benzilóxi-formil-amino)-metil]-hexanóico (A-7)
Composto A-6 (0,163 g, 0,372 mmol, 1 equiv.) é dissolvido emTHF (4,5 ml) e água (1,5 ml) e esfriado a 0°C. Peróxido de hidrogênio (30 %em água, 228 pL, 2,23 mmols, 6 equiv.) é adicionado às gotas seguido pelaadição lenta de uma solução de hidróxido de 11tio (0,019 g, 0,446 mmol, 1,2equiv.) em água (350 μΙ_). A mistura resultante é agitada a 0°C durante 1,5horas. A mistura de reação básica é extinta com resina Amberlite IR-120 (H+)ao pH 4 a 5 a 0°C. A resina é separada por filtração e enxaguada com aceta-to de etila. A mistura é concentrada para remover THF, e depois absorvidaem acetato de etila. A camada aquosa é separada, e a camada orgânicaseca em I^SO4 anidro, filtrada, e concentrada para fornecer um óleo opacoque foi purificado por cromatografia instantânea (diclorometano:acetona =4:1 depois acetona:metanol = 99:1) para produzir o composto do título A-7como um óleo incolor.
Etapa 7: Amida do ácido 1-{2-[(benzilóxi-formil-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidina-2-carboxílico
A uma solução do composto A-7 (0,190 g, 0,680 mmol, 1 equiv.)em dioxano seco (4 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio é adiciona-da sucessivamente Base de Hunig (391 pL, 2,24 mmols, 3,3 equiv.), aminaA-8 (0,748 mmol, 1,1 equiv.) e HATU (0,284 g, 0,748 mmol, 1,1 equiv.). Amistura resultante é agitada na temperatura ambiente durante 22 horas. Amistura é particionada entre acetato de etila e 10% de ácido cítrico. A cama-da orgânica é lavada com salmoura e NaHCOs saturado, seca em NaaSO4anidro, filtrada, e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia ins-tantânea (diclorometano:acetona = 3:1) para fornecer o composto do títulocomo um óleo incolor.
Etapa 2: Amida do ácido 1{2-[(formil-hidróxi-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidina-2-carboxílico (A-9)Pd-C (0,059 g, 0,1 equiv.) é adicionado a uma solução do com-posto acima (0,550 mmol, 1 equiv.) em uma solução de acetato de eti-la/etanol 1:1 (12 ml) sob uma manta de nitrogênio. A mistura é agitada sobatmosfera de hidrogênio durante 36 horas. O catalisador é removido por fil-tração através de uma almofada de Celite. O filtrado é concentrado, e o resí-duo foi purificado por TLC preparativa (diclorometanó:acetona = 2:1) parafornecer o composto do título como um sólido amorfo (0,121 g, 0,334 mmol,61%).
Procedimento Geral B: Síntese de éster de 1-{2(R)-[(formilidroxiamino)-metil]-alcanoil}-pirrolidina-2(S)-carboxilato
<formula>formula see original document page 24</formula>
Etapa 1: Éster do ácido 1-{2-[(benzilóxi-formil-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidina-2-carboxílico
A uma solução do composto A-7 (0,680 mmol, 1 equiv.) em dio-xano seco (4 ml) na temperatura ambiente sob nitrogênio é adicionada su-cessivamente Base de Hunig (391 μΙ_, 2,24 mmols, 3,3 equiv.), amina A-10(0,748 mmol, 1,1 equiv.) e HATU (0,284 g, 0,748 mmol, 1,1 equiv.). O pro-cessamento e purificação usuais fornecem o composto do título.
Etapa 2: Éster do ácido 1{2-[(formil-hidróxi-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidina-2-carboxílico (A-11)
Pd-C (0,059 g, 0,1 equiv.) é adicionado a uma solução do com-posto acima (0,550 mmol) em uma solução de acetato de etila/etanol 1:1 (12ml) sob uma manta de nitrogênio. A mistura é agitada sob atmosfera de hi-drogênio durante 36 horas. O catalisador é removido por filtração através deum almofada de Celite. O filtrado é concentrado, e o resíduo é purificado porTLC preparativa (diclorometano:acetona = 2:1) para fornecer o composto dotítulo.
Procedimento Geral C: Preparação de piridin-2-ilamida do ácido pirrolidina-2-S-carboxílico (A-8) (X = CH2, η = 1, Ri = 2-piridila)
Etapa 1: Éster benzílico do ácido 2-S-(piridin-2-ilcarbamoil)-pirrolidina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 25</formula>
Uma solução de Z-procloreto (5,0 g, 18,7 mmols, 1 equiv.) empiridina (40 ml) é esfriada a 0°C sob uma manta de nitrogênio. 2-Aminopiridina (5,27 g, 56,0 mmols, 3 equiv.) em piridina (10 ml) é adicionadaàs gotas. A mistura resultante é agitada na temperatura ambiente durante 4horas, depois concentrada. O óleo residual é dissolvido em acetato de etila elavado sucessivamente com água, 10 % de ácido cítrico, NaHCOs saturado,e salmoura. A camada orgânica é seca em Na2S04 anidro, filtrada, e con-centrada para fornecer o composto do título (4,21 g, 13,0 mmols, 69 %) co-mo um sólido opaco.
Etapa 2: Sal do ácido bromídrico da (piridin-2-il) amida do ácido pirrolidina-2-S-carboxílico
<formula>formula see original document page 25</formula>
Uma solução do composto acima (4,21 g, 13,0 mmols, 1 equiv.)em acético ácido (65 ml) na temperatura ambiente é tratada com HBr (5,7 M,33 % em ácido acético, 110 ml, 649 mmols, 50 equiv.), e a mistura é agitadana temperatura ambiente durante 2 horas. Carregando a mistura de reaçãocom éter dietílico em excesso e esfriando a 0°C durante 30 minutos forneceum sólido que é coletado por filtração e seco a vácuo para produzir o com-posto do título como um pó acastanhado.
Procedimento Geral D: (5-Metil-piridina-2-il)-amida do ácido 4-R-hidróxi-pirrolidina-2-S-carboxílico
<formula>formula see original document page 26</formula>
A ligação de O-terc butila protegeu prolina (1 mmol) com 5-picolina (1,5 mmol) em DMF (5 ml) sob HATU (1,3 mmol) e a condição deΝ,Ν-diisopropiletil amina (5 mmol) seguida pela remoção de O-terc butilacom TFA-dicloroetano (1:1) fornece o composto do título em 85 % de rendi-mento.
Procedimento Geral E: (5-Metil-piridina-2-il)-amida do ácido 4-S-flúor-pirrolidina-2-S-carboxílico
<formula>formula see original document page 26</formula>
O composto hidróxi acima (2 mmols) em metilenocloreto (20 ml)é tratado com trifluoreto de enxofre de Ν'Ν-dietilamino (DAST; 4 mmols) a -70°C. Depois, a mistura de reação é deixada agitar na temperatura ambientedurante 16 horas e lavada com solução de bicarbonato de sódio aq. fria, se-ca e concentrada sob pressão reduzida. Ela é purificada em cromatografiaem coluna em sílica-gel para fornecer derivado de N-protegido que em tra-tamento com HBr-AcOH fornece um composto de amino
Procedimento Geral F: Éster 2-metílico do éster 1-terc-butílico do ácido 4-S-hidróxi-pirrolidina-1,2-dicarboxílico
<formula>formula see original document page 26</formula>A uma solução do composto trans-4-hidróxi (ImmoI)1 trifenil fos-fino (1,5 mmol) e ácido benzóico (1,5 mmol) em THF (10 ml) é adicionadodicarboxilato de N,N-diisopropil-azo (1,5 mmol) em THF (5 ml) às gotas a0°C. Ele é deixado agitar na temperatura ambiente durante 16 horas. O sol-vente é removido sob pressão reduzida e o resíduo é dissolvido em éter. Eleé esfriado em gelo ao oxido de fosfino precipitado que é removido por filtra-ção e o filtrado é concentrado sob pressão reduzida. O material bruto é tra-tado com metóxido de sódio metanólico durante 2 horas a O0C para fornecero composto cis-hidróxi do título.
Procedimento Geral G: (5-Metil-piridina-2-il)-amida do ácido 4-R-flúor-pirrolidina-2-S-carboxílico
<formula>formula see original document page 27</formula>
A fluoração do cis-hidróxi acima fornece o derivado de trans-4-fluoro que em saponificação fornece o ácido correspondente. A amina é pre-parada a partir do éster terc-butílico do ácido 4-R-flúor-pirrolidina-1-carboxílico e 5-metil-piridin-2-ilamina sob condição de HATU para fornecerderivado de prolina amida que em tratamento com HCI 4 M em dioxano for-nece a amina desejada.
Exemplo 1: (5-flúor-1-óxi-piridin-2-il)-amida do ácido 1-[2-ciclopentilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 27</formula>O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 3-benzilóxi-formil-amino)-2-ciclopentilmetil-propiônico A-7 (R = ciclopentilmetila) e piridin-2-ilamida do ácido pirrolidina-2-carboxílico A-8 (X = CH2, η = 1, Ri =5-Fluoro 2-piridila).
Ácido 2-ciclopentilmetil-3-[formil·(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico
É preparado a partir do ácido ciclopentilmetil malônico comodescrito abaixo.
Bromometil-ciclopentano
<formula>formula see original document page 28</formula>
Uma solução de ciclopentano metanol (48,5 g, 484 mmols), Et3N(88,0 ml, 631 mmols), e THF anidro (1 L) é esfriada a 4°C, e agitada sob ni-trogênio. Cloreto de metanossulfonila (45,0 ml, 581 mmols) é adicionado len-tamente à solução de agitação, enquanto mantendo a 10°C. A mistura é agi-tada durante uma hora adicional a 10°C, e LiBr (300,0 g, 3454 mmols) é adi-cionado lentamente (exotérmica). A mistura de reação é agitada durante 16horas adicionais na temperatura ambiente. Água é adicionada para dissolvero sal, e a mistura é extraída com Et2O. As camadas de Et2O são combina-das, secas em Na2SO4, e são cuidadosamente concentradas (25°C a 100torr). O produto bruto é purificado por destilação à vácuo (35°C a 1 torr, ocomposto desejado é a primeira fração a ser coletada). Este fornece bro-mometil-ciclopentano (31,4 g, 40 % de rendimento) como um óleo incolor.
Ácido 2-ciclopentilmetil-malônico
<formula>formula see original document page 28</formula>
Uma solução de malonato de dietila (36,91 g, 230,4 mmols), me-tanol anidro (400 ml), e NaOMe (25 % em metanol, 49,79 g, 230,4 mmols) éagitada em refluxo durante um hora sob nitrogênio. Bromometil-ciclopentano(31,31 g, 192,0 mmols) é adicionado à mistura, e agitado durante 3 horasadicionais. Uma solução de NaOH (23,04 g, 576,0 mmols) em água (400 ml)é adicionada, e a mistura é agitada durante 1 hora adicional em refluxo. Amistura é esfriada, diluída com água, e extraída com éter. A camada de éteré descartada, e a camada aquosa é acidificada com HCI 1N ao pH = 1. Acamada aquosa é extraída com EtOAc. As camadas de EtOAc são combi-nadas, secas em Na2S04, e concentradas. Estas fornecem ácido 2-ciclopentilmetil-malônico (21,0 g, 59 % de rendimento) como um sólido branco.
Ácido 2-ciclopentilmetil-acrílico
<formula>formula see original document page 29</formula>
Uma mistura de ácido 2-ciclopentilmetil-malônico (24,90 g, 133,7mmols), piperidina (15,9 ml, 160,8 mmols), 37 % de formaldeído aquoso(51,0 ml, 647,2 mmols), e EtOH (250 ml) é agitada em refluxo durante 16horas. A reação é extinta com HCI 1N a um pH = 1, e a mistura é extraídacom EtOAc. As camadas de EtOAc são combinadas, secas em NagSO4, econcentradas. O produto bruto é purificado por cromatografia instantânea(SiO2, 10 % de acetona em DCM), que fornece ácido 2-ciclopentilmetil-acrílico (17,65 g, 86 % de rendimento) como um óleo.
4-Benzil-3-(2-ciclopentilmetil-acriloil)-oxazolidin-2-ona
<formula>formula see original document page 29</formula>
Ácido 2-ciclopentilmetil-acrílico (17,65 g, 114,5 mmols) é dissol-vido em THF anidro (200 ml) e esfriado a -78° C sob nitrogênio. N1N-Diisopropiletilamina (25,9 ml, 148,7 mmols) e cloreto de trimetilacetila (14,1ml, 114,5 mmols) são adicionados consecutivamente em uma tal taxa que atemperatura permaneceu abaixo de -60° C e que a evolução do gás é con-trolada. A mistura é agitada a -78° C durante 30 minutos, agitada na tempe-ratura ambiente durante 2 horas, e resfriada novamente abaixo de -78° C.
Em um frasco separado, (S)-(-)-4-benzil-2-oxazolidinona (20,30g, 114,6 mmols) é dissolvido em THF anidro (400 ml) e esfriado a -78° C sobnitrogênio. BuLi (2,5 M, 45,8 ml, 114,5 mmols) é adicionado lentamente a -78° C, e a mistura é agitada durante 30 minutos na temperatura ambiente. Oânion resultante é transferido lentamente por intermédio de uma cânula novaso de reação original. A mistura é deixada aquecer até a temperatura am-biente, e é agitada durante a noite na temperatura ambiente (16 horas). Amistura de reação é extinta com KHCO3 1 M, e é extraída com EtOAc. Ascamadas orgânicas são combinadas, lavadas com salmoura, secas emNa2SO4, e concentradas para fornecer um óleo amarelo. O produto bruto épurificado por cromatografia instantânea (SiO2, 20 % de EtOAc em hexano)para fornecer 4-benzil-3-(2-ciclopentilmetil-acriloil)-oxazolidin-2-ona (22,9 g,64 %) de como um óleo.
4-Benzil-3-[2-ciclopentilmetil-3-(tetraidro-piran-2-iloxiamino)-propionil]-oxazolidin-2-ona
<formula>formula see original document page 30</formula>
4-Benzil-3-(2-ciclopentilmetil-acriloil)-oxazolidin-2-ona (22,90 g,73,1 mmols) e 0-(tetraidro-2H-piran-2-il)-hidroxilamina (34,24 g, 292,3mmols) são combinados e agitados a 45° C durante 48 horas sob nitrogênio.O produto bruto é purificado por cromatografia instantânea (SiO2, 0 30 %de EtOAc em hexano), que fornece 4-benzil-3-[2-ciclopentilmetil-3-(tetraidro-piran-2-iloxiamino)-propionil]-oxazolidin-2-ona (21,65 g, 69 % de rendimento)como um óleo.
N-[3-(4-benzil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopentilmetil-3-oxo-propil]-/\/-(tetraidropiran-2-ilóxi)-formamida<formula>formula see original document page 31</formula>
Uma mistura de ácido fórmico (45,0 ml, 1193 mmols) e anidridoacético (90,0 ml, 952 mmols) é agitada a 50° C durante um hora sob nitrogê-nio. Um segundo frasco é carregado com 4-benzil-3-[2-ciclopentilmetil-3-(tetraidro-piran-2-iloxiamino)-propionil]-oxazolidin-2-ona (21,62g, 50,2mmols), Et3N (170,0 ml, 1220 mmols), e DCM anidro (450 ml). Esta segundamistura é esfriada a 4o C sob nitrogênio, e a solução ácida mista é adiciona-da lentamente ao segundo frasco, enquanto mantendo a 10° C. A misturacombinada é agitada durante 30 minutos a 10° C, extinta com solução satu-rada, lavada com NaHCO3 aquoso, e extraída com DCM. As camadas deDCM são combinadas, secas em Na2SO4, e concentradas. O produto bruto épurificado por cromatografia instantânea (SiO2, 50 % de EtOAc em hexano),que fornece A/-[3-(4-benzil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopentilmetil-3-oxo-propil]-A/-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-formamida (20,10 g, 87 % de rendimento)como um óleo.
Ácido 2-ciclopentilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico
<formula>formula see original document page 31</formula>
A/-[3-(4-benzil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopentilmetil-3-oxo-propil]-/\/-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-formamida (3,65g, 7,96 mmols), THF (125ml), e água (40 ml) são esfriados a 4o C. A esta mistura, é adicionado 30 %de H2O2 (5,2 ml, 50,90 mmols) e monoidrato de LiOH (0,40 g, 9,53 mmol),respectivamente. A mistura de reação é agitada durante 1,5 horas. A misturaé extinta lentamente com Na2SO3 0,5 M, enquanto mantendo a temperaturaabaixo de 15° C com um banho de gelo. A mistura extinta é agitada duranteuma adição de 30 minutos, concentrada a vácuo até o solvente de THF serremovido, e lavado com EtOAc. A mistura de reação básica é acidificadacom resina Amberlite IR-120 (H+) ao pH = 4,5. Salmoura é adicionada à so-lução ácida, e a mistura combinada é extraída com EtOAc. As camadas or-gânicas da solução ácida lavada são combinadas, secas em Na2SC>4, e con-centradas a vácuo. Esta fornece ácido 2-ciclopentilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico (1,20 g, 50 % de rendimento) como um óleo.
Ácido 3-(benzilóxi-formil-amino)-2-ciclopentilmetil-propiônico
<formula>formula see original document page 32</formula>
E preparado a partir do Acido 2-ciclopentilmetil-acrílico e O-benzil hidroxamina como descrito para a síntese do bloco de construção pro-tegido por O-THp correspondente.
4-Benzil-3-(3-benziloxiamino-2-ciclopentilmetil-propionil)-oxazolidin-2-ona
<formula>formula see original document page 32</formula>
N-[3-(4-benzil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopentilmetil-3-oxo-propil]-/\/-benzilóxi-formamida (composto A-G, onde: Ri = ciclopentilmetila, PGi =benzila).
Ácido 3-(benzilóxi-formil-amino)-2-ciclopentilmetil-propiônico
<formula>formula see original document page 32</formula>(5-flúor-1-óxi-piridin-2-il)-amida do ácido 1-[3-benzilóxi-formil-amino)-2-ciclopentilmetil-propionil]-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 33</formula>
Exemplo 2: (5-flúor-1-óxi-piridin-2-il)-amida do ácido 4-flúor-1-{2-[(formil-hidroxi-amino)-metil]-hexanol}-pirrolidina-2-carboxilico
<formula>formula see original document page 33</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-[(benzilóxi-formil-amino)-metil]-hexanóico A-7(R = n-butila) e piridin-2-ilamida do ácido pirrolidina-2-carboxílico A-8 (X =CHF η = 1, Ri = 5-Fluoro 2-piridila).
[2-Amino-5-flúor-piridin-2-il] amida do ácido 4-írans-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 33</formula>
A uma solução de DMF (15 ml) de Boc-L-Pro-4-F-OH (2,5 g,10,73 mmols, 1 equiv) Base de Hunig (Diisopropiletilamina, abrev. DIEA)(6,73 ml, 38,61 mmol, 3,6 eq) é adicionada e a mistura esfriada a 0°C. Ela éseguida pela adição de 2-Amino-5-fIuoro piridina (1,44 g, 12,87 mmols, 1,2equiv), e HATU (4,89 g, 12,87 mmols, 1,2 equiv) a 0°C. A mistura resultanteé agitada na temperatura ambiente durante 16 h. A mistura é particionadaentre acetato de etila em excesso e 10 % de ácido cítrico. A camada orgâni-ca é lavada com salmoura e NaHCO3 sat., seca em Na2SO4 anidro, filtrada,e concentrada. O resíduo é purificado por cromatografia em sílica-gel (Hexa-nos:Acetato de etila = 1:0a 7:3) para fornecer o composto do título como umxarope incolor (2,5 g, 71 %).
[2-Amino-5-flúor-piridin-2-il] amida do ácido 4-frans-flúor-pirrolidina-2-carboxílico (sal do ácido clorídrico)
<formula>formula see original document page 34</formula>
A Boc-prolina-4-flúor-piridina amida (1 g, 3,06 mmols, 1 equiv) étratada com HCI/dioxano 4N (30 ml, 120 mmols, 40 equiv) na temperaturaambiente e deixada agitar durante 16 h. A mistura é concentrada, e o resí-duo foi coevaporado com tolueno 2X, e concentrado para fornecer um sólidorosa purpurado (1 g).
(2-Amino-5-flúor-piridin-2-il) amida do ácido 1-{2-[(benzilóxi-formil-amino)-metil]-hexanoil}-4-/Aa/7s-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 34</formula>
A uma solução de DMF (10 ml) de sal de HCI frans-flúor-prolina-5-flúor-aminopiridina amida (644 mg, 2,15 mmols, 1,2 equiv), são adiciona-dos sucessivamente Base de Hunig (2 ml, 10,8 mmols, 5 equiv), VersiacidVRI 172 (500 mg, 1,79 mmol, 1 equiv), e HATU (818 mg, 2,15 mmols, 1,2equiv) a 0°C. A mistura resultante é agitada na temperatura ambiente duran-te 16 h. A mistura é particionada entre acetato de etila em excesso e 10 %de ácido cítrico. A camada orgânica é lavada com salmoura e NaHCO3 sat.,seca em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada. O composto é purificado porcromatografia em sílica-gel em DCM:Acetona (1:0 a 86:14) para fornecer ocomposto do título como um pó branco (630 mg, 72 %). ES-MS: calculadopara C25H3OF2N4O5 (504,53); encontrado: 505,4 [M+H]
(2-Amino-5-flúor-piridin-N-óxido-2-il) amida do ácido 1-{2-[(benzilóxi-formil-amino)-metil]-hexanoil}-4-írans-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 35</formula>
A uma solução de DCM do composto (1,25 g, 2,56 mmols, 1 eq),MCPBA (1,32 g, 7,68 mmols, 3 eq) foi adicionado com êxito a O0C e a rea-ção foi agitada durante 16 h. A mistura de reação é particionada entre NaH-C03 e a camada de DCM. A camada orgânica é seca em Na2S04 e con-centrada. O resíduo é purificado por cromatografia em sílica-gel usandoDCM:Acetona (1:0 a 9:1) para produzir o composto do título (1,2 g)
Exemplo 3: Pirazin-2-ilamida do ácido 1-{2-[(formil-hidróxi-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 35</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-[(benzilóxi-formil-amino)-metil]-hexanóico A-7(R = n-butila) e pirazin-2-amida do ácido pirrolidina-2-carboxílico A-8 (X =CH2, η = 1, R1 = 2-piazinila).
Exemplo 4: Piridazin-3-ilamida do ácido 1-{2-[(formil-hidróxi-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 36</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-{[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-metil}-hexanóico A-7 (R = n-butila) e piridazin-3-amida do ácido pirrolidina-2-carboxílico A-8 (X = CH2, η = 1, R-i = 3-piridazinila).
Etapa 1: Piridazin-3-ilamina
<formula>formula see original document page 36</formula>
A uma solução de 6-cloro-2-amino-piridiazina (4 g) e Na-OH(empoado, 1,4 g) em etanol (150 ml), 10 % de Pd/C (0,6 g) é adicionado.A mistura de reação é agitada sob Atmosfera de hidrogênio durante 16 h.Ela é filtrada através de celite e o solvente foi concentrado. O resíduo resul-tante é triturado com éter para fornecer o composto amino conhecido.
Etapa 2: Éster terc-butílico do ácido 2-(piridazin-3-ilcarbamoil)-pirrolidina-1-carboxílico
<formula>formula see original document page 36</formula>
A uma solução de Boc-Pro-OH (1 equiv) em DCM a 0°C, Rea-gente de Ghosez (1,1 equiv) é adicionado e a mistura de reação foi agitada aO0C durante 1 h. A esta, a amina (1,1 equiv) em piridina é adicionada e amistura de reação é agitada na temperatura ambiente durante 16 h. Ela de-pois é concentrada para remover todos os voláteis e redissolvida em DCMem excesso. A camada orgânica é lavada com 10 % de Ácido cítrico, Sal-moura e NaHCO3, seca em Na2S04 e concentrada. O resíduo resultante épurificado por cromatografia instantânea usando de 10 a 40 % de Acetato deetila em hexanos para fornecer o composto do título. HPLC: YMC-Pak ProC18, S-3 Dm, 120A, 50 χ 4,6 mm I.D. Coluna; eluente gradiente 0 % a 90 %de MeCN em 8,5 min, 1,5 ml/min; Tempo de retenção = 4,14 min.ES-MS: calculado para C14H20N4O3 (292); encontrado 293 [M+H].
Etapa 2: Piridazin-3-ilamida do ácido pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 37</formula>
HPLC: YMC-Pak Pro C18, S-3 Dm1 120A, 50 χ 4,6 mm I.D. Coluna; eluentegradiente 0 % a 90 % de MeCN em 8,5 min, 1,5 ml/min; Tempo de retenção= 2,398 min.
ES-MS: calculado para C9Hi2N4O (192,1); encontrado 193,2 [M+H],
Etapa 3 : Piridazin-3-ilamida do ácido 1-(2-{[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-metil}-hexanoil)-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 37</formula>
O composto do título é preparado sob condição de HATU comodescrito no procedimento geral A.
HPLC: YMC-Pak Pro C18, S-3 Dm, 120A, 50 χ 4,6 mm I.D. Coluna; eluentegradiente 20 % a 90 % de MeCN em 8,5 min, 1,5 ml/min; Tempo de retenção= 3,655 min.
ES-MS: calculado para C22H33N5O5 (447); encontrado 448 [M+H].
Exemplo 5: (5-flúor-1-óxi-piridin-2-il)-amida do ácido 1-[2-ciclopentilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 38</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclopentilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico e piridin-2-ilamida do ácido pirrolidina-2-carboxílico A-8 (X= CHF1 η = 1, R1 = 5-Fluoro 2-piridila).
(5-flúor-1-óxi-piridin-2-il)-amida do ácido 1-{2-ciclopentilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propionil}-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 38</formula>
Exemplo 6: Piridazin-3-ilamida do ácido 1-[2-ciclobutilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 38</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclobutilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico A-7 (R = ciclobutilmetila) e piridazin-2-amida do ácido pir-rolidina-2-carboxílico A-8 (X = CH2, η = 1, R1 = 3-piridazinila).
Exemplo 7: Pirazin-2-ilamida do ácido 1-[2-ciclobutilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 39</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclobutilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico A-7 (R = ciclobutilmetila) e pirazin-2-amida do ácido pirro-lidina-2-carboxílico A-8 (X = CH2, η = 1, Ri = 2-pirazinila).
Exemplo 8: Pirazin-2-iiamida do ácido 1-[2-ciclopentilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 39</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclopentilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico A-7 (R = ciclopentilmetila) e pirazin-2-amida do ácido pir-rolidina-2-carboxílico A-8 (X = CH2, η = 1, R1 = 2-pirazinila).
Exemplo 9: Pirazin-2-ilamida do ácido 4-flúor-1-{2-[(formil-hidróxi-amino)-metil]-hexanoil}-pirrolidina-2-carboxílico<formula>formula see original document page 40</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-[(benzilóxi-formil-amino)-metil]-hexanóico A-7(R = n-butila) e pirazin-2-amida do ácido pirrolidina-2-carboxílico A-8 (X =CHF, η = 1, R1 = 2-pirazinila).
Exemplo 10: Pirazin-2-ilamida do ácido 1-[2-ciclopentilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 40</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclopentilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propiônico A-7 (R = ciclopentil metila) e pirazin-2-amida do ácido pirrolidina-2-carboxílico A-8 (X = CHF, η = 1, R1 = 2-pirazinila).
Exemplo 11: Pirazin-2-ilamida do ácido 1-[2-ciclobutilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 40</formula>O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclobutilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico A-7 (R = ciclobutil metila) e pirazin-2-amida do ácido pirro-lidina-2-carboxílico A-8 (X = CHF, η = 1, R-i = 2-pirazinila).
Ácido 2-ciclobutilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico é preparado a partir do ácido 2-ciclobutilmetil malônico como descritopara a síntese do derivado de ciclopentilmetila correspondente no Exemplo 1.
Ácido 2-Ciclobutilmetil-malônico
<formula>formula see original document page 41</formula>
O composto do título é preparado a partir do (bromome-til)ciclobutano
Ácido 2-Ciclobutilmetil-acrílico
<formula>formula see original document page 41</formula>
4-Benzil-3-(2-ciclobutilmetil-acriloil)-oxazolidin-2-ona
<formula>formula see original document page 41</formula>
4-Benzil-3-[2-ciclobutilmetil-3-(tetraidro-piran-2-iloxiamino)-propionil]-oxazolidin-2-ona
<formula>formula see original document page 41</formula>/V-[3-(4-benzil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclobutilmetil-3-oxo-propil]-/V-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-formamida
<formula>formula see original document page 42</formula>
Ácido 2-ciclobutilmetil-3-[formil-(tetraidro^iran-2-ilóxi)-amino]-propiônico
<formula>formula see original document page 42</formula>
Pirazin-2-ilamida do ácido 1-{2-ciclobutilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propionil}-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 42</formula>
Exemplo 12: Pirimidin-4-ilamida do ácido 1-[2-ciclobutilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 42</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclobutilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico A-7 (R = ciclobutil metila) e pirimadin-4-amida do ácidopirrolidina-2-carboxílico A-8 (X = CHF, η = 1, R1 = 2-pirimidiniLa).Exemplo 13: Piridazin-3-ilamida do ácido 1-[2-ciclobutilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 43</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclobutilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico A-7 (R = ciclobutil metila) e piridazin-3-amida do ácido pir-rolidina-2-carboxílico A-8 (X = CHF1 η = 1, R1 = 3-piridazinila).4-flúor-2-(piridazin-3-ilcarbamoil)pirrolidina-1 -carboxilato de (2S,4R)-terc-butila
<formula>formula see original document page 43</formula>
A uma solução de Boc-Pro(F)-OH (5 g, 21,46 mmols, 1 equiv,)em DCM a 0°C, Reagente de Ghosez (3,1 ml, 23,61 mmols, 1,1 equiv) é adi-cionado e a mistura de reação foi agitada a O0C durante 1 h. A esta, a amina(2,65 g, 27,9 mmols, 1,3 equiv) em Piridina é adicionada a OcC e a misturade reação é agitada na temperatura ambiente durante 16 h. Ela depois éconcentrada para remover todos os voláteis e redissolvida em DCM em ex-cesso. A camada orgânica é lavada com 10 % de Ácido cítrico, NaCI(sat) eNaHCO3(Sat), seca em Na2S04 e concentrada. O resíduo resultante é purifi-cado por cromatografia instantânea usando de 10 a 15 % de Acetona emDiclorometano para fornecer o composto do título.(2S,4R)-4-flúor-N-(piridazin-3-il)pirrolidina-2-carboxamida<formula>formula see original document page 44</formula>
A amida Boc-protegida é tomada em HCI/Dioxano 4 M e a rea-ção é agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Os solventes são remo-vidos sob pressão reduzida e o resíduo é triturado com éter para fornecer oscompostos do título
(2S,4R)-1-((2R)-3-ciclobutil-2-((N-(tetraidro-2H-piran-2-ilóxi)formamido)metil)propanoil)-4-flúor-N-(piridazin-3-il)pirrolidina-2-carboxamida
<formula>formula see original document page 44</formula>
A uma solução de DMF fria (15 ml) da Versiacid, (500 mg, 1,77mmol, 1 equiv), DIEA (1,7 ml, 9,72 mmols, 5,5 equiv), Amina. Sal de HCI(550 mg, 1,943 mmol, 1,1 equiv) e HATU (739 mg, 1,943 mmol, 1,2 equiv)são adicionados. A mistura de reação resultante é agitada durante 16 h natemperatura ambiente. A mistura é particionada entre acetato de etila emexcesso e 10 % de ácido cítrico. A camada orgânica é lavada com NaCI sat.e NaHCO3 sat., seca em Na2SO4 anidro, filtrada, e concentrada. O resíduo épurificado por cromatografia em sílica-gel usando de 10 a 25 % de Acetonaem DCM para fornecer o composto do título (53 %).
Exemplo 14: (2-óxi-piridazin-3-il)-amida do ácido 1-[2-ciclobutilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 44</formula><formula>formula see original document page 45</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclobutilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico A-7 (R = ciclobutil metila) e piridazin-1-oxo-3-amida doácido pirrolidina-2-carboxílico A-8 (X = CHF1 η = 1, Ri = N-óxido de 3-piridazinila).
1-Óxido de 6-((2S,4R)-1-(terc-butoxicarbonil)-4-fluoropirrolidina-2-carboxamido)piridazina
<formula>formula see original document page 45</formula>
A uma solução de Boc-Pro(F)-OH (2,047 g, 8,154 mmols, 1 e-quiv,) em DCM a 0°C, Reagente de Ghosez (1,2 ml, 8,97 mmols, 1,1 equiv)é adicionado e a mistura de reação é agitada a O0C durante 1 h. A esta, aamina (1,27 g, 11,42 mmols, 1,4 equiv) em Piridina é adicionada a O0C e amistura de reação é agitada na temperatura ambiente durante 16 h. Ela de-pois é concentrada para remover todos os voláteis e o resíduo é dissolvidoem DCM em excesso. A camada orgânica é lavada com 10 % de Ácido cítri-co, NaCI (sat) e NaHCO3 (sat), seca em Na2SO4 e concentrada. O resíduoresultante é purificado por cromatografia instantânea usando de 2 a 15 % deAcetona em Diclorometano para fornecer o composto do título (61 %).
1 -Óxido de 6-((2S,4R)-4-fluoropirrolidina-2-carboxamido)piridazina<formula>formula see original document page 46</formula>
A amida Boc-protegida é tomada em HCI/Dioxano 4 M e a rea-ção é agitada ria temperatura ambiente durante 5 h. Todos os voláteis sãoremovidos e o resíduo é triturado com éter para fornecer os compostos dotítulo.
1- Óxido de 6-((2S,4R)-1-((2R)-3-ciclobutil-2-((N-(tetraidro-2H-piran-2 iló-xi)formamido)metil)propanoil)-4-fluoropirrolidina-2-carboxamido)-piridazina
<formula>formula see original document page 46</formula>
A uma solução de DMF fria (20 ml) da Versiacid, (571 mg, 2mmols, 1 equiv), DIEA (2,51 ml, 14,4 mmols, 6 equiv), Amina. Sal de HCI(718 mg, 2,4 mmols, 1,2 equiv) e HATU (913 mg, 2,4 mmols, 1,2 equiv) sãoadicionados. A mistura de reação resultante é agitada durante 16 h na tem-peratura ambiente. A mistura é particionada entre acetato de etila em exces-so e 10 % de ácido cítrico. A camada orgânica é lavado com NaCI sat. eNaHCC>3 sat., seca em Na2S04 anidro, filtrada, e concentrada. O resíduo épurificado por cromatografia em sílica-gel usando de 10 a 20 % de Acetonaem DCM e depois usando de 2 a 8 % de metanol em DCM para fornecer ocomposto do título (44 %). 1H RMN (DMSO-d6):
Exemplo 15: Piridazin-3-ilamida do ácido 1-[2-ciclopentilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 46</formula><formula>formula see original document page 47</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-Ciclopentilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propionílico A-7 (R = ciclopentil metila) e piridazin-2-amida doácido pirrolidina-2-carboxílico A-8 (X = CHF1 η = 1, R1 = 3-piridazinila).(2S,4R)-1-((2R)-3-ciclopentil-2-((N-(tetraidro-2H-piran-2-ilóxi)formamido)metil)propanoil)-4-flúor-N-(piridazin-3-il)pirrolidina-2-carboxamida
<formula>formula see original document page 47</formula>
Exemplo 16: (2-óxi-piridazin-3-il)-amida do ácido 1-[2-ciclopentilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)^ropionil]-4-frúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 47</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclopentilmetil-3-[formil-{tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propionílico A-7 (R = ciclopentil metila) e piridazin-2-amida do ácidopirrolidina-2-carboxílico A-8 (X = CHF, η = 1, R1 = N-óxido de 3-piridazinila).1-Óxido de 6-aminopiridazina
<formula>formula see original document page 48</formula>
A uma solução de 6-Aminopiridazina em acetona é adicionadauma solução de MCPBA (1 equiv.) em acetona em uma porção. A mistura dereação é deixada agitar na temperatura ambiente durante 1 hora. O solventeé removido e éter é adicionado ao resíduo. O sólido é filtrado e seco paraproduzir o composto do título. Este é usado como tal na etapa seguinte.quiv,) em DCM a 0°C, Reagente de Ghosez (1,2 ml, 8,97 mmols, 1,1 equiv)é adicionado e a mistura de reação é agitada a O0C durante 1 h. A esta, aamina (1,27 g, 11,42 mmols, 1,4 equiv) em Piridina é adicionada a O0C e amistura de reação é agitada na temperatura ambiente durante 16 h. Ela de-pois é concentrada para remover todos os voláteis e o resíduo é dissolvidoem DCM em excesso. A camada orgânica é lavada com 10 % de Ácido cítri-co, NaCI(sat) e NaHCO3(Sat), seca em Na2SO4 e concentrada. O resíduoresultante é purificado por cromatografia instantânea usando de 2 a 15 % deAcetona em Diclorometano para fornecer o composto do título (61 %).
1 -Óxido de 6-((2S,4R)-4-fluoropirrolidina-2-carboxamido)piridazina
<formula>formula see original document page 48</formula>
1 -Oxido de 6-((2S,4R)-1 -(terc-butoxicarbonil)-4-fluoropirrolidina-2-carboxamido)piridazina
<formula>formula see original document page 48</formula>A amida Boc-protegida foi tomada em HCI/Dioxano 4 M e a rea-ção foi agitada na temperatura ambiente durante 5 h. Todos os voláteis fo-ram removidos e o resíduo foi triturado com éter para fornecer os compostosdo título.
1 -Óxido de 6-((2S,4R)-1 -((2R)-3-ciclopentil-2-((N-(tetraidro-2H-piran-2-ilóxí)formamido)metil)propanoil)-4-fluoropirrolidina-2-carboxamido)piridazina
<formula>formula see original document page 49</formula>
Exemplo 17: Piridazin-3-ilamida do ácido 1-[2-cicloexilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propionil]-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 49</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-Cicloexilmetil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propionílico A-7 (R = cicloexil metila) e piridazin-3-amida do ácidopirrolidina-2-carboxílico A-8 (X = CHF, η = 1, R1 = 3-piridazinila).
O bloco de construção do ácido 2-Cicloexilmetil-3-(formil-hidróxi-amino)-propiônico é preparado a partir do ácido 2-cicloexilmetilmalônico co-mo descrito para a síntese do ácido cicloexilmetilmalônico correspondenteno Exemplo 1.
Ácido 2-cicloexilmetil-malônico<formula>formula see original document page 50</formula>
O composto do título é preparado a partir do (bromome-til)cicloexano.
Acido 2-cicloexilmetil-acrílico
<formula>formula see original document page 50</formula>
4-benzil-3-(2-cicloexilmetil-acriloil)-oxazolidin-2-ona
A-34c
4-benzil-3-[2-cicloexilmetil-3-(tetraidro-piran-2-iloxiamino)-propionil]-oxazolidin-2-ona).
α
Ό
A-34d
A/-[3-(4-benzil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-cicloexilmetil-3-oxo-propil]-/V-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-formamida<formula>formula see original document page 51</formula>
Exemplo 18: Pirazin-2-ilamida do ácido 1-{4-ciclopropil-2-[(formil-hidróxi-amino)-metil]-butiril}-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 51</formula>
O composto do título é preparado de acordo com o Procedimen-to Geral A a partir do ácido 2-ciclopropiletil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico A-7 (R = ciclopropil etila) e pirazin-2-amida do ácido pirro-lidina-2-carboxílico A-8 (X = CHF, η = 1, Ri = 2-pirazinila).
O bloco de construção do ácido 2-ciclopropiletil-3-(formil-hidróxi-amino)-propiônico é preparado a partir do ácido 2-ciclopropiletilmalônico co-mo descrito para a síntese do ácido ciclopéntilmetilmetil malônico corres-pondente no Exemplo 1.
(Bromoetil)ciclopropano
<formula>formula see original document page 51</formula>
O composto do título é preparado a partir do 2-ciclopropiletaanol.Ácido 2-ciclopropiletil-malônico<formula>formula see original document page 52</formula>
Ácido 2-ciclopropiletil-acrílico
<formula>formula see original document page 52</formula>
4-benzil-3-(2-ciclopropiletil-acriloil)-oxazolidin-2-ona
<formula>formula see original document page 52</formula>
4-benzil-3-[2-ciclopropiletil-3-(tetraidro-piran-2-iloxiamino)-propionil]-oxazolidin-2-ona
<formula>formula see original document page 52</formula>
N-[3-(4-benzil-2-oxo-oxazolidin-3-il)-2-ciclopropiletil-3-oxo-propil]-/\/-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-formamida
<formula>formula see original document page 52</formula>
Ácido 2-ciclopropiletil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propiônico<formula>formula see original document page 53</formula>
Pirazin-2-ilamida do ácido 1-{2-Ciclopropiletil-3-[formil-(tetraidro-piran-2-ilóxi)-amino]-propionil}-4-flúor-pirrolidina-2-carboxílico
<formula>formula see original document page 53</formula>
Exemplo 19: Inibição de Atividade de Peptídeo Deformilase
Um ensaio ligado de PDF/FDH (Lazennec et aí., Anal. Biochem.,Vol. 224, páginas 180 a 182 (1997)) é usado. Neste ensaio ligado, o formiatoliberado por PDF a partir do seu substrato fMAS é oxidado pela enzima deligação FDH, reduzindo uma molécula de NAD+ a NADH, que causa um au-mento na absorção em 340 nM. Todos os ensaios são realizados na tempe-ratura ambiente em um tampão de 50 mM de HEPES, pH 7,2, 10 mM deNaCI, 0,2 mg/ml de BSA1 em placas microtituladoras de 96 reservatórios desemi-área (Corning). A reação é iniciada adicionando-se uma mistura de 0,5Unidade/ml de FDH, 1 mM de NAD+, e fMAS na concentração desejada. Pa-ra determinar valores de IC5o (a concentração necessária para inibir 50 % deatividade da enzima), PDF é pré-incubado durante 10 minutos com concen-trações variadas do inibidor, e a reação de desformilação é iniciada pela adi-ção de mistura de reação contendo 4 mM de fMAS. A velocidade de reaçãoinicial, y, é medida como a taxa inicial de aumento de absorção em 340 nMusando um leitor de placa SpectraMax (Molecular Devices, Sunnyvale, CA).A concentração do inibidor [In] em que 50 % da atividade da enzima é inibi-da, IC5O, é calculada usando a fórmula seguinte:
y = yo/(1 + [InyiCso)
onde y0 é a velocidade de .reação na ausência de inibidor. Resolvendo estaequação para IC50 no [In] quando y = yJ2 produz IC5o- A IC5o é calculadacom base em um ajuste de regressão de quadrado mínimo não linear usan-do um pacote de software comercial (Deltapoint, Inc., Chicago, IL.).
Usando este ensaio, a IC5o de vários compostos é determinada.A IC50 para os vários compostos é determinada contra enzima deformilasecontendo níquel e zinco como o íon metálico. Os valores de IC50 dos com-postos preferidos da fórmula (I) determinados para a deformilase contendozinco variam de cerca de 0,001 μΜ a cerca de 0,2 μΜ. Os valores de IC5odos compostos preferidos da fórmula (I) determinados para a deformilasecontendo níquel variam de cerca de 0,005 μΜ a cerca de 3 μΜ.
Exemplo 20: Ensaio para Testar a Atividade Antimicrobiana
Concentrações inibitórias mínimas (MICs) são determinadas u-sando o método de microdiluição em placas de formato de 96 reservatórios.Compostos são colocados em suspensão em DMSO em 5 ou 10 mg/ml earmazenados a 4°C até serem usados. Eles são diluídos em Caldo Mueller-Hinton (MHB) ou Caldo Trypticase Soy (TSB) e usados para determinaçãode MIC. A faixa de concentrações testadas é de concentração final de 64 a0,0625 pg/ml usando um sistema de diluição de duas vezes.
O inóculo é preparado a partir de células cultivadas em ÁgarTrypticase Soy (TSA) e incubado durante a noite a 35°C, 5 a 10 colônias sãousadas para inocular os caldos MHB ou TSB, e a cultura é incubada durantea noite a 35°C. A cultura durante a noite é diluída 1:10, incubada durante 1hora a 35°C, diluída ao tamanho de inóculo apropriado e aplicada aos reser-vatórios contendo caldo e composto de teste. Tamanhos de inóculo são de 2χ 104 CFU/ml.
Placas são incubadas a 35°C durante 48 horas e MIC é registra-da depois de 18 horas de incubação quanto às bactérias. MIC é definidacomo a concentração mais baixa do composto que não produz nenhumcrescimento visível depois da incubação.
A concentração inibitória mínima para vários compostos preferi-dos da fórmula (I) varia de cerca de 0,25 μg/ml a cerca de 32 μg/ml contra H.influenza (quatro cepas), de cerca de 0,001 μg/ml a maior do que 8 μg/ml erelação ao S. aureus (quatro cepas), de cerca de 0,016 pg/ml a cerca de 16pg/ml contra S. pneumonia (quatro cepas), e de cerca de 0,008 pg/ml a cer-ca de 16 pg/ml contra M. catarrhalis. A enzima deformilase é obtida a partirde E. coli.
As seguintes são formulações farmacêuticas representativascontendo um composto da fórmula (I).
Exemplo 21: Formulação do Comprimido
<table>table see original document page 55</column></row><table>
Exemplo 22: Formulação da Cápsula
Os ingredientes seguintes são misturados intimamente e carre-gados em uma cápsula de gelatina de casca dura:
<table>table see original document page 55</column></row><table>
Exemplo 23: Formulação da Suspensão
Os ingredientes seguintes são misturados para formar uma sus-pensão para administração oral:
<table>table see original document page 55</column></row><table>Sorbitol (solução a 70 %) 13,00 g
Veegum K (Vanderbilt Co.) 1,0 g
Flavorizante 0,035 ml
Corantes 0,5 mg
Água destilada q.s. para 100 ml
Exemplo 24: Formulação Injetável
Os ingredientes seguintes são misturados para formar uma for-mulação injetável:
Ingrediente Quantidade
Composto desta invenção 0,2 a 20 mg
Solução tampão de acetato de sódio, 0,4 M 20 ml
HCI (1N) ou NaOH (1N) q.s. para pH adequado
Água (destilada, estéril) q.s. para 20 ml
Exemplo 25: Formulação do Supositório
Um supositório de peso total de 2,5 g é preparado misturando-seo composto da invenção com Witepsol® H-5 (triglicerídeos de ácido graxovegetal saturado; Riches-Nelson, Inc., New York), e tem a composição se-guinte:
Composto da invenção 500 mg
Witepsol® H-15
Equilíbrio

Claims (15)

1. Composto da fórmula (I) <formula>formula see original document page 57</formula> em que R1 é hidrogênio, alquila, heteroalquila, heterocicloalquila, arila ouheteroarila.;R3 é hidrogênio, halogênio, ou alcóxi;R4 é arila, ou heteroarila; ouη é 0 a 3 econtanto que R1 seja cicloalquila e/ou R4 seja um anel de heteroarila mono-cíclico, de 6 membros opcionalmente substituído tendo 2, 3 ou 4 heteroáto-mos de nitrogênio no anel em que um ou mais dos heteroátomos de nitrogê-nio no anel são opcionalmente oxidados ouum sal deste ou um pró-fármaco do mesmo.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R3 é se-lecionado de flúor, cloro ou iodo.
3. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é ci-cloalquila.
4. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é umheteroarila da fórmula (II) <formula>formula see original document page 57</formula> em que cada um de R6, R7, Rs e R9 independentemente é hidrogênio, alqui-la, alquila substituída, fenila, halogênio, hidroxila, alcóxi ou um sal do mesmoou um pró-fármaco do mesmo.
5. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é umheteroarila da fórmula (11.1) e<formula>formula see original document page 58</formula>em que R6, R7 e R8 são hidrogênio e R8 é flúor, um sal do mesmo ou umpró-fármaco deste.
6. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é umheteroarila da fórmula (II.2) e<formula>formula see original document page 58</formula>em que R6, R7 e R8 são hidrogênio, um sal do mesmo ou um pró-fármaco domesmo.
7. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é umheteroarila da fórmula (II.3) e<formula>formula see original document page 58</formula>em que R6, R7 e R8 são hidrogênio, um sal do mesmo ou um pró-fármacoaqui..
8. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é umheteroarila da fórmula (II.4) e<formula>formula see original document page 58</formula>em que R6, R7 e R8 são hidrogênio, um sal deste ou um pró-fármaco deste..
9. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R4 é umheteroarila da fórmula (11.5)em que Fta R7 e Re são hidrogênio, um sal do mesmo ou um pró-fármaco domesmo.
10. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 éselecionado de cicloexila, ciclopentila, ciclobutila ou ciclopropila.
11. Composto de acordo com a reivindicação 1, em que R1 é umn-butila.
12. Composto de acordo com a reivindicação 9, em que R4 éselecionado de 2-amino, N-óxido de 5-fluoropiridina, 2-pirazina, 3-piridazina,-3-pirimidina, 4-pirimidina ou N-óxido de 3-piridazina.
13. Composto de acordo com a reivindicação 10, em que R4 éselecionado de 2-amino, N-óxido de 5-fluoropiridina, 2-pirazina, 3-piridazina,-3-pirimidina, 4-pirimidina ou N-óxido de 3-piridazina.
14. Composto de acordo com a reivindicação 9, em que R3 éflúor.
15. Composto de acordo com a reivindicação 10, em que R3 éflúor.
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