BRPI0516805A - processo para a produção de uma proteìna heteróloga utilizando células hospedeiras de uma espécie de levedura - Google Patents

Abstract

Processo para a produção de uma proteína heteróloga utilizando células hospedeiras de uma espécie de levedura. O presente invento refere-se à preparação de uma proteína heteróloga (I) que compreende a preparação de células hospedeiras de uma espécie de levedura que, além da seqüência de ADN, endógena, homóloga própria, codificadora de pelo menos uma primeira calnexina, compreende também uma seqüência de ADN recombinante codificadora (I), e uma seqüência de ADN recombinante adicional codificadora de pelo menos uma segunda calnexina, levando-se a seguir, as células hospedeiras a expressar (I) e segregar a proteína heteróloga e separando a proteína heteróloga segregada. A preparação de uma proteína: (a) preparação de células hospedeiras de uma espécie de levedura que, além das seqüências de DNA endógenas, homólogas, próprias codifica uma primeira calnexina, também compreende pelo menos uma seqüência adicional de AND recombinante codificadora da proteína, e pelo menos uma seqüência adicional de AND recombinante que codifica pelo menos uma Segunda calnexina, e em que a proteína é uma proteína segregável heteróloga; (b) lever as células hospedeiras a expressar a proteína heteróloga usando a seqüência codificadora da proteína e a segregar calnexina usando a seqüência codificadora da segunda calnexina; (c) lever as células hospedeiras a segregar uma proteína heteróloga; e (d) isolar a proteína heteróloga segregada.