BR112021012661A2

BR112021012661A2 - Métodos e composições para o tratamento de doenças de pele e cabelo

Info

Publication number: BR112021012661A2
Application number: BR112021012661-9A
Authority: BR
Inventors: Timothy Alexander MOSELEY; Kenneth Allen Pettine
Original assignee: Direct Biologics Llc
Priority date: 2018-12-26
Filing date: 2019-12-26
Publication date: 2021-09-08
Also published as: MX2021007885A; AU2019416339A1; JP2022516607A; US20220079990A1; SG11202106836UA; EP3902605A4; WO2020139975A1; IL284377A; ZA202104737B; CA3124949A1; EP3902605A1; JOP20210170A1; KR20210121039A

Abstract

métodos e composições para o tratamento de doenças de pele e cabelo. são divulgadas composições de fator de crescimento de células-tronco mesenquimais de tratamento e métodos de seu uso para tratar doenças de pele, cabelos grisalhos, calvície e disfunção erétil, bem como seu uso em cosméticos específicos para cor da pele / étnicos e tratamentos de pele. em alguns aspectos, o tratamento direciona snps específicos para a cor do cabelo, cor da pele, tipo de pele, tipo de cabelo, raça, etnia e / ou resposta à testosterona.

Description

“MÉTODOS E COMPOSIÇÕES PARA O TRATAMENTO DE DOENÇAS DE PELE E CABELO” FUNDAMENTOS

[0001] Os humanos compartilham 99,9% da mesma genética, o que significa que as diferenças entre os humanos estão contidas apenas em 0,1% da genética de um indivíduo. As pequenas diferenças estão contidas em polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs). Estima-se que 6 a 20 desses SNPs sejam responsáveis por todas as diferenças observadas na cor da pele, olhos e cabelo, bem como na calvície. Assim, a epiderme e a derme da pele são anatomicamente, fisiologicamente e biologicamente diferentes, dependendo da cor da pele e da etnia, e são responsáveis por algumas pessoas desenvolverem cabelos grisalhos muito cedo e outros nunca ficarem grisalhos. Da mesma forma, a calvície de padrão masculino é hereditária e parece estar ligada a uma reação anormal do folículo piloso a um subproduto da testosterona. Essas pequenas diferenças estão contidas em polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs). Estudos recentes descobriram que perfis SNP muito específicos podem predizer com precisão quem desenvolverá queda de cabelo e quem não. Isso é verdade para homens e mulheres. A perda de cabelo pode começar já na adolescência e afeta dois terços dos homens aos 35 anos e cerca de 85% dos homens aos 50 anos. Este também é um problema comum nas mulheres. Da mesma forma, SNPs específicos foram identificados na disfunção erétil.

[0002] Atualmente, existem poucos, se houver, produtos para a pele que sejam específicos para uma cor de pele ou etnia específica, bem como poucos ou nenhum produto para o cabelo que seja responsável por fatores genéticos responsáveis por cabelos grisalhos ou calvície. Da mesma forma, não existem produtos que abordem as bases genéticas associadas à disfunção erétil. Assim, produtos convencionais para a pele e cabelo e tratamentos para disfunção erétil não abordam adequadamente as diferenças biológicas encontradas na derme de cada cor de pele ou cabelo.

[0003] Portanto, o que é necessário são novos tratamentos dermatológicos e cosméticos, e métodos de fazer tal tratamento, e métodos de tratamento, que são específicos para a cor da pele, cor do cabelo, calvície, disfunção erétil e país ou etnia específica de uma pessoa, o tratamento compreendendo SNPs direcionados de uma cor de pele específica, cor de cabelo específica, calvície e / ou disfunção erétil encontrada no DNA de uma célula-tronco mesenquimal (MSC), queratinócito ou melanócito de um doador representativo.

SUMÁRIO

[0004] São divulgados métodos e composições relacionadas a composições de fator de crescimento de células-tronco mesenquimais e métodos de seu uso para tratar doenças de pele, cabelos grisalhos, calvície e disfunção erétil, bem como seu uso em cosméticos específicos para cor da pele / étnicos e tratamentos de pele.

[0005] Em um aspecto, são divulgados aqui métodos para criar composição de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir e / ou reverter um cabelo (tal como, por exemplo, cabelos grisalhos, calvície (incluindo, mas não se limitando a calvície causada por calvície de padrão masculino, alopecia androgenética, alopecia areata, alopecia cicatricial, eflúvio telógeno e / ou calvície feminina), e / ou descoloração da pele ou distúrbio (como, por exemplo, vitiligo, melasma, nevo de morango e / ou rosácea) e / ou disfunção erétil, o método compreendendo: identificar as características do corpo (como, por exemplo, cor da pele, tipo da pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor de cabelo) de um usuário final; obter células mesenquimais da pele (MSCs) de um doador-alvo com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como o usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca terá um problema de cabelo ou pele e / ou disfunção erétil e pode ser específico de gênero, raça e etnia; preparar uma preparação em pó de MSC, queratinócito e fator de crescimento de melanócito a partir das MSCs obtidas, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas em condições severas de cicatrização de feridas; e adicionar a preparação em pó a uma base; em que a composição de tratamento compreende um membro selecionado do grupo que consiste em uma composição tópica e uma composição injetável. Em um aspecto, a composição de tratamento corrige a descoloração da pele, estimula a ativação dos folículos capilares para promover o crescimento do cabelo, estimula a produção de pigmentação do cabelo ou promove a função erétil adequada. Em um aspecto, o SNP compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL-23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF-BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM). Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

[0006] Também são divulgadas aqui composições de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir ou reverter um distúrbio do cabelo, distúrbio da pele e / ou disfunção erétil, a composição compreendendo: uma base de composição; e uma preparação em pó de células-tronco mesenquimais (MSC), queratinócitos e / ou fator de crescimento de melanócitos derivada de um doador com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como um usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca terá o distúrbio do cabelo, distúrbio da pele e / ou disfunção erétil e pode ser específico de gênero, raça e etnia, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições de cultura hiperóxica normais e células cultivadas em condições de cicatrização de feridas severas.

[0007] Em um aspecto, o SNP das composições de tratamento compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B

(PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL- 23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF-BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM). Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

[0008] Também são divulgados aqui métodos de tratamento de um distúrbio de pele, disfunção erétil ou um distúrbio do cabelo em um sujeito, compreendendo administrar ao sujeito qualquer uma das composições de tratamento de qualquer aspecto anterior.

[0009] Em um aspecto, são divulgadas aqui composições de tratamento de qualquer aspecto anterior, em que o distúrbio capilar compreende calvície (tal como, por exemplo, calvície compreende calvície de padrão masculino , alopecia androgenética, alopecia areata, alopecia cicatricial, eflúvio telógeno e / ou calvície de padrão feminino) ou cabelos grisalhos.

[0010] Também são divulgados aqui métodos para criar uma composição de tratamento de pele para uma cor de pele, raça, tipo ou etnia específica, o método compreendendo: identificar a cor da pele, tipo, raça e etnia de um usuário final; obter células mesenquimais da pele (MSCs) de um doador direcionado com a mesma cor de pele, tipo, raça e etnia do usuário final com base no painel de polimorfismo de nucleotídeo único apropriado do doador; preparar uma preparação de pó de MSC, queratinócito e fator de crescimento de melanócito a partir das MSCs obtidas, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas sob condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas sob condições severas de cicatrização de feridas; e adicionar a preparação em pó a uma base cosmética.

[0011] Em um aspecto, são divulgadas aqui composições de tratamento de pele para uma cor de pele, raça, tipo ou etnia específica, a composição compreendendo:

uma base de composição; e uma preparação em pó de célula-tronco mesenquimal (MSC), queratinócito e / ou fator de crescimento de melanócito derivada de um doador com a mesma cor de pele, tipo de raça e etnia de um usuário final, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas sob condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas sob condições severas de cicatrização de feridas.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0012] Os desenhos anexos, que são incorporados e constituem uma parte deste relatório descritivo, ilustram várias modalidades e, juntamente com a descrição, ilustram as composições e métodos divulgados.

[0013] A Figura 1 mostra o efeito das composições de MSC divulgadas nas rugas.

[0014] As Figuras 2A, 2B, 2C, 2D e 2E mostram o efeito da injeção das composições de MSC divulgadas na calvície. A Figura 2A mostra a capacidade de uma injeção compreendendo exossomos de MSC e plasma rico em plaquetas (razão de 1:4) de estimular o crescimento de cabelo em um sujeito com calvície de padrão masculino 6 semanas após o tratamento. A Figura 2B mostra o efeito de uma diluição 1:4 das composições de MSC divulgadas em solução salina para tratar a alopecia androgenética um mês após o tratamento. 0,1mL foi administrado para cada injeção com aproximadamente 1 cm de distância. A Figura 2C mostra o efeito da composição de MSC em uma diluição 1:1 em solução salina na calvície de padrão masculino 1 semana após o tratamento. Para este tratamento, 0,1mL foi injetado na área afetada a aproximadamente 0,5cm de distância. A Figura 2D mostra o efeito da composição de MSC na calvície de padrão masculino 6 semanas após o tratamento. A Figura 2E mostra a composição de MSC em uma diluição de 1:5 em solução salina na calvície de padrão masculino 2 semanas após o tratamento. Para este tratamento, 0,1mL foi injetado na área afetada a aproximadamente 0,5cm de distância.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[0015] Antes dos presentes compostos, composições, artigos, dispositivos e/ou métodos serem divulgados e descritos, será entendido que eles não estão limitados a métodos sintéticos específicos ou métodos biotecnológicos recombinantes específicos, a menos que especificado de outro modo, ou a reagentes particulares, a menos que especificado de outra forma, como tal pode, é claro, variar. Também deve ser entendido que a terminologia usada neste documento tem o propósito de descrever modalidades particulares apenas e não se destina a ser limitante. Definições

[0016] Como utilizado neste relatório descritivo e nas reivindicações anexas, as formas singulares "um", "uma" e "o(a)" incluem os referentes plurais, a menos que o contexto indique claramente o contrário. Assim, por exemplo, a referência a "um carreador farmacêutico" inclui misturas de dois ou mais carreadores deste tipo e semelhantes.

[0017] As faixas podem ser expressas neste documento como de "cerca de" um valor específico e/ou a "cerca de" outro valor específico. Quando tal faixa é expressa, uma outra modalidade inclui de um valor particular e/ou até outro valor particular. Da mesma forma, quando os valores são expressos como aproximações, pelo uso do antecedente “cerca de”, será entendido que o valor particular forma uma outra modalidade. Deverá ser compreendido ainda que os pontos de extremidade de cada uma das faixas são significativos tanto em relação ao outro ponto de extremidade quanto independentemente do outro ponto de extremidade. Compreende-se também que há inúmeros valores divulgados neste documento, e que cada valor também é divulgado neste documento como "cerca de" aquele determinado valor além do valor em si. Por exemplo, se o valor "10" é divulgado, então "cerca de 10" é também divulgado. Também é compreendido que quando um valor é divulgado "menor que ou igual ao" valor, "maior que ou igual ao valor" e possíveis faixas entre os valores também são divulgados, como apropriadamente compreendido pelo técnico versado. Por exemplo, se o valor "10" é divulgado, o "menor que ou igual a 10", bem como "maior que ou igual a 10" é também divulgado. Também compreende-se que por todo o pedido dados são fornecidos em diferentes formatos e que esses dados representam pontos de extremidade e pontos de partida e intervalos para qualquer combinação de pontos de dados. Por exemplo, se um determinado ponto de dados

"10" e um determinado ponto de dados "15" são divulgados, compreende-se que maior que, maior que ou igual a, menor que, menor que ou igual a, e igual a 10 e 15 são considerados divulgados, bem como entre 10 e 15. Também compreende-se que cada unidade entre duas unidades específicas também são divulgadas. Por exemplo, se 10 e 15 são divulgados, então 11, 12, 13 e 14 são também divulgados.

[0018] O termo "sujeito" é definido neste documento para incluir animais, como mamíferos, incluindo, mas não se limitando a, primatas (por exemplo, humanos), vacas, cavalos, porcos, ovelhas, cabras, cães, gatos, coelhos, ratos, camundongos e semelhantes. Em algumas modalidades, o sujeito é um humano.

[0019] "Administração" a um sujeito inclui qualquer via de introdução ou distribuição a um sujeito de um agente. A administração pode ser realizada por qualquer via adequada, incluindo oral, tópica, intravenosa, subcutânea, transcutânea, transdérmica, intramuscular, intra-articular, parenteral, intra-arteríola, intradérmica, intraventricular, intracraniana, intraperitoneal, intralesional, intranasal, retal, vaginal, por inalação, através de um reservatório implantado, parenteral (por exemplo, subcutânea, intravenosa, intramuscular, intra-articular, intra-sinovial, intraesternal, intratecal, intraperitoneal, intra-hepática, intralesional e intracraniana ou técnicas de infusão) e semelhantes. "Administração concomitante", "administração em combinação", "administração simultânea" ou "administrado simultaneamente" como utilizado neste documento, significa que os compostos são administrados no mesmo ponto no tempo ou essencialmente imediatamente após um ao outro. No último caso, os dois compostos são administrados em momentos suficientemente próximos para que os resultados observados sejam indistinguíveis dos obtidos quando os compostos são administrados ao mesmo tempo. "Administração sistêmica" refere-se à introdução ou distribuição a um sujeito de um agente por meio de uma rota que introduz ou distribui o agente a áreas extensas do corpo do sujeito (por exemplo, mais de 50% do corpo), por exemplo, através da entrada no sistema circulatório ou sistemas linfáticos. Em contraste, "administração local" refere-se à introdução ou distribuição a um sujeito de um agente por meio de uma via que introduz ou distribui o agente na área ou área imediatamente adjacente ao ponto de administração e não introduz o agente sistemicamente em uma quantidade terapeuticamente significativa. Por exemplo, os agentes administrados localmente são facilmente detectáveis na vizinhança local do ponto de administração, mas são indetectáveis ou detectáveis em quantidades insignificantes nas partes distais do corpo do sujeito. A administração inclui a autoadministração e a administração por outro.

[0020] "Biocompatível" geralmente se refere a um material e quaisquer metabólitos ou produtos de degradação do mesmo que geralmente não são tóxicos para o receptor e não causam efeitos adversos significativos ao sujeito.

[0021] "Compreendendo" pretende significar que as composições, métodos, etc. incluem os elementos recitados, mas não excluem outros. "Consistindo essencialmente em'' quando usado para definir composições e métodos, deve significar incluindo os elementos recitados, mas excluindo outros elementos de qualquer significado essencial para a combinação. Assim, uma composição consistindo essencialmente nos elementos como aqui definidos não excluiria vestígios de contaminantes do método de isolamento e purificação e transportadores farmaceuticamente aceitáveis, tais como solução salina tamponada com fosfato, conservantes e semelhantes. "Consistindo em'' deve significar a exclusão de mais do que elementos vestigiais de outros ingredientes e etapas substanciais do método para administrar as composições desta invenção. As modalidades definidas por cada um desses termos de transição estão dentro do escopo desta invenção.

[0022] Um “controle” é um sujeito ou amostra alternativo usado em um experimento para fins de comparação. Um controle pode ser "positivo" ou "negativo".

[0023] "Liberação controlada" ou "liberação sustentada" refere-se à liberação de um agente a partir de uma determinada forma de dosagem de forma controlada, a fim de atingir o perfil farmacocinético desejado in vivo. Um aspecto da distribuição do agente de "liberação controlada" é a capacidade de manipular a formulação e / ou forma de dosagem a fim de estabelecer a cinética desejada de liberação do agente.

[0024] "Quantidade eficaz" de um agente refere-se a uma quantidade suficiente de um agente para fornecer um efeito desejado. A quantidade de agente que é "eficaz" variará de sujeito para sujeito, dependendo de muitos fatores, como a idade e a condição geral do sujeito, o agente ou agentes em particular e semelhantes. Assim, nem sempre é possível especificar uma "quantidade eficaz" quantificada. No entanto, uma "quantidade eficaz" apropriada em qualquer caso do sujeito pode ser determinada por um versado na técnica usando experimentação de rotina. Além disso, como utilizado neste documento, e a menos que especificamente indicado de outra forma, uma "quantidade eficaz" de um agente também pode se referir a uma quantidade que cobre tanto as quantidades terapeuticamente eficazes quanto as quantidades profilaticamente eficazes. Uma "quantidade eficaz" de um agente necessária para atingir um efeito terapêutico pode variar de acordo com fatores como idade, sexo e peso do sujeito. Os regimes de dosagem podem ser ajustados para proporcionar a resposta terapêutica ideal. Por exemplo, várias doses divididas podem ser administradas diariamente ou a dose pode ser reduzida proporcionalmente conforme indicado pelas exigências da situação terapêutica.

[0025] Uma "diminuição" pode referir-se a qualquer mudança que resulte em uma expressão genética, produção de proteína, quantidade de um sintoma, doença, composição, condição ou atividade menores. Também se entende que uma substância diminui a produção genética de um gene quando a produção genética do produto genético com a substância é menor em relação à produção do produto genético sem a substância. Além disso, por exemplo, uma diminuição pode ser uma mudança nos sintomas de um distúrbio de forma que os sintomas sejam menores do que os observados anteriormente. Uma diminuição pode ser qualquer diminuição individual, mediana ou média em uma condição, sintoma, atividade ou composição em uma quantidade estatisticamente significativa. Assim, a diminuição pode ser 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70 , 75, 80, 85, 90, 95 ou 100% de diminuição, desde que a diminuição seja estatisticamente significativa.

[0026] "Inibir", "inibindo" e "inibição" significa diminuir uma atividade, resposta, condição, doença ou outro parâmetro biológico. Isso pode incluir, mas não se limita à completa ablação da atividade, resposta, condição ou doença. Isso também pode incluir, por exemplo, uma redução de 10% na atividade, resposta, condição ou doença em comparação com o nível nativo ou de controle. Assim, a redução pode ser de 10,

20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100% ou qualquer quantidade de redução entre os níveis nativos ou de controle.

[0027] Os termos "prevenir", "prevenindo", "prevenção" e variações gramaticais dos mesmos, conforme usados neste documento, referem-se a um método de retardar parcial ou completamente ou impedir o início ou recorrência de uma doença e / ou um ou mais de seus sintomas associados ou impedindo um sujeito de adquirir ou readquirir uma doença ou reduzir o risco de um sujeito de adquirir ou readquirir uma doença ou um ou mais de seus sintomas concomitantes.

[0028] O componente "farmaceuticamente aceitável" pode se referir a um componente que não é biologicamente ou de outra forma indesejável, ou seja, o componente pode ser incorporado em uma formulação farmacêutica da invenção e administrado a um sujeito conforme descrito neste documento, sem causar efeitos biológicos indesejáveis significativos ou interagir em uma forma prejudicial com qualquer um dos outros componentes da formulação na qual está contido. Quando usado em referência à administração a um ser humano, o termo geralmente implica que o componente atendeu aos padrões exigidos de testes toxicológicos e de fabricação ou que está incluído no Guia de Ingredientes Inativos preparado pela U.S. Food and Drug Administration.

[0029] "Transportador farmaceuticamente aceitável" (às vezes referido como um "transportador") significa um transportador ou excipiente que é útil na preparação de uma composição farmacêutica ou terapêutica que é geralmente segura e não tóxica e inclui um transportador que é aceitável para uso veterinário e / ou uso farmacêutico ou terapêutico humano. Os termos "transportador" ou "transportador farmaceuticamente aceitável" podem incluir, mas não estão limitados a, solução salina tamponada com fosfato, água, emulsões (como uma emulsão de óleo / água ou água / óleo) e / ou vários tipos de agentes umectantes. Como utilizado neste documento, o termo "transportador" abrange, mas não está limitado a, qualquer excipiente, diluente, enchimento, sal, tampão, estabilizador, solubilizante, lipídeo, estabilizador ou outro material bem conhecido na técnica para uso em formulações farmacêuticas e conforme descrito mais adiante neste documento.

[0030] "Farmacologicamente ativo" (ou simplesmente "ativo"), como em um derivado ou análogo "farmacologicamente ativo", pode se referir a um derivado ou análogo (por exemplo, um sal, éster, amida, conjugado, metabólito, isômero, fragmento, etc.) tendo o mesmo tipo de atividade farmacológica que o composto original e aproximadamente equivalente em grau.

[0031] "Agente terapêutico" refere-se a qualquer composição que tenha um efeito biológico benéfico. Os efeitos biológicos benéficos incluem efeitos terapêuticos, por exemplo, tratamento de um distúrbio ou outra condição fisiológica indesejável, e efeitos profiláticos, por exemplo, prevenção de um distúrbio ou outra condição fisiológica indesejável (por exemplo, um câncer não imunogênico). Os termos também abrangem derivados farmaceuticamente aceitáveis, farmacologicamente ativos de agentes benéficos especificamente mencionados neste documento, incluindo, mas não se limitando a, sais, ésteres, amidas, pró-agentes, metabólitos ativos, isômeros, fragmentos, análogos e semelhantes. Quando os termos "agente terapêutico" são usados, então, ou quando um agente particular é especificamente identificado, deve ser entendido que o termo inclui o agente per se, bem como sais farmaceuticamente aceitáveis, farmacologicamente ativos, ésteres, amidas, pró-agentes, conjugados, metabólitos ativos, isômeros, fragmentos, análogos, etc.

[0032] "Polímero" refere-se a um composto orgânico de peso molecular relativamente alto, natural ou sintético, cuja estrutura pode ser representada por uma pequena unidade repetida, o monômero. Exemplos não limitativos de polímeros incluem polietileno, borracha, celulose. Os polímeros sintéticos são normalmente formados por polimerização por adição ou condensação de monômeros. O termo "copolímero" refere-se a um polímero formado a partir de duas ou mais unidades de repetição diferentes (resíduos de monômero). A título de exemplo e sem limitação, um copolímero pode ser um copolímero alternativo, um copolímero aleatório, um copolímero em bloco ou um copolímero de enxerto. Também é contemplado que, em certos aspectos, vários segmentos de bloco de um copolímero em bloco podem eles próprios compreender copolímeros. O termo "polímero" abrange todas as formas de polímeros, incluindo, mas não se limitando a, polímeros naturais, polímeros sintéticos,

homopolímeros, heteropolímeros ou copolímeros, polímeros de adição, etc.

[0033] "Quantidade terapeuticamente eficaz" ou "dose terapeuticamente eficaz" de uma composição (por exemplo, uma composição compreendendo um agente) refere-se a uma quantidade que é eficaz para atingir um resultado terapêutico desejado. Em algumas modalidades, um resultado terapêutico desejado é o controle da diabetes tipo I. Em algumas modalidades, um resultado terapêutico desejado é o controle da obesidade. Quantidades terapeuticamente eficazes de um determinado agente terapêutico irão tipicamente variar em relação a fatores como o tipo e gravidade do distúrbio ou doença a ser tratada e a idade, sexo e peso do sujeito. O termo também pode se referir a uma quantidade de um agente terapêutico, ou uma taxa de distribuição de um agente terapêutico (por exemplo, quantidade ao longo do tempo), eficaz para facilitar um efeito terapêutico desejado, como o alívio da dor (ou seja, nocicepção). O efeito terapêutico desejado exato irá variar de acordo com a condição a ser tratada, a tolerância do sujeito, o agente e / ou a formulação do agente a ser administrado (por exemplo, a potência do agente terapêutico, a concentração do agente na formulação, e semelhantes), e uma variedade de outros fatores que são apreciados por aqueles versados na técnica. Em alguns casos, uma resposta biológica ou médica desejada é alcançada após a administração de múltiplas dosagens da composição ao sujeito ao longo de um período de dias, semanas ou anos.

[0034] Neste relatório descritivo e nas reivindicações a seguir, será feita referência a um número de termos, que serão definidos para ter os seguintes significados:

[0035] "Opcional" ou "opcionalmente" significa que o evento ou circunstância descrito posteriormente pode ou pode não ocorrer, e que a descrição inclui instâncias em que ocorre o referido acontecimento ou circunstância e instâncias onde isso não acontece.

[0036] Em todo este pedido, é feita referência a várias publicações. As divulgações dessas publicações em suas totalidades estão, por meio deste, incorporadas por referência neste pedido a fim de descrever mais completamente o estado da técnica ao qual este pertence. As referências divulgadas são também individual e especificamente incorporadas por referência neste documento para o material contido nelas que é discutido no período em que a referência é invocada. Composições

[0037] São divulgados componentes a serem utilizados para preparar as composições divulgadas, bem como as composições a serem utilizadas no âmbito dos métodos aqui divulgados. Estes e outros materiais são divulgados neste documento, e compreende-se que quando combinações, subconjuntos, interações, grupos, etc. destes materiais são divulgados que, enquanto referência específica das várias combinações individuais e coletivas e permutação desses compostos não pode ser explicitamente divulgada, cada uma é especificamente contemplada e descrita neste documento. Por exemplo, se uma determinada composição de tratamento (como uma composição que compreende fatores de crescimento, exossomos ou proteínas deriva de MSC) for divulgada e discutida e uma série de modificações que podem ser feitas em uma série de moléculas, incluindo a composição de tratamento (como uma composição que compreende fatores de crescimento, exossomos ou proteínas derivadas de MSC) são discutidos, é especificamente contemplada toda e qualquer combinação e permutação da composição de tratamento (tal como uma composição que compreende fatores de crescimento, exossomos ou proteínas derivadas de MSC) e as modificações que são possíveis, a menos que seja especificamente indicado o contrário. Assim, se uma classe de moléculas A, B, e C é divulgada, bem como uma classe de moléculas D, E, e F e um exemplo de uma combinação das moléculas, A-D é divulgada, então, mesmo se cada um não for recitado individualmente, cada um é individualmente e coletivamente combinações contempladas de significado, A-E, A-F, B-D, B-E, B-F, C-D, C-E e C-F são considerados divulgados. Da mesma forma, qualquer subconjunto ou combinação destes, também é divulgado. Assim, por exemplo, o subgrupo de A-E, B-F, e C-E seria considerado divulgado. Este conceito aplica-se a todos os pedidos, incluindo, mas não se limitando a, etapas nos métodos de fazer e usar as composições divulgadas. Assim, se houver uma variedade de etapas adicionais que podem ser realizadas entende-se que cada uma destas etapas adicionais pode ser realizada com qualquer modalidade específica ou combinação de modalidades dos métodos divulgados.

[0038] Em um aspecto, são divulgadas aqui composições de tratamento específicas para as características corporais de um sujeito (tais como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) para tratar, inibir, reduzir, prevenir e / ou reverter a calvície, cabelos grisalhos, disfunção erétil e / ou distúrbios da pele. Conforme divulgado neste documento, a composição de tratamento pode compreender fatores de crescimento concentrados, exossomos, proteínas extracelulares, proteoglicanos, citocinas, quimiocinas, proteínas e peptídeos derivados de MSCs ou células semelhantes a fibroblastos semelhantes, queratinócitos ou melanócitos, em que as células podem ser obtidas da medula óssea, fração vascular do estroma adiposo (gordura) (SVF), osso ou outras fontes de tecido antes ou depois da expansão celular. Em algum aspecto, a composição de tratamento pode compreender ainda fatores de células-tronco (SCF).

[0039] Em modalidades, a composição de tratamento pode compreender uma base e uma preparação de pó de fator de crescimento de MSC, queratinócito e / ou melanócito, em que a preparação de MSC (MSC/K/M/Prep) pode incluir pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas sob condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas sob condições severas de cicatrização de feridas. As condições de cultura hiperóxicas podem ser definidas como cerca de 21%, em que cerca de 21% pode ser 21% ± 5%, oxigênio com suplementos de soro e oxigênio, enquanto as condições de cicatrização de feridas podem ser definidas como cerca de 1 a cerca de 5% de oxigênio na presença de citocinas, fatores angiogênicos e / ou glicose reduzida.

[0040] O MSC/K/M/ Prep pode compreender meio condicionado ou lisado de MSCs expandidos de cultura de células, queratinócitos ou melanócitos. Em algumas modalidades, a composição pode compreender ainda de cerca de 0,01 a cerca de 10% em peso de um meio livre de células condicionado pelo crescimento de células MSC/K/M/PREP ou linhagem, em que as células são cultivadas em condições de cultura hiperóxicas normais ou sob condições de cicatrização de feridas.

[0041] O meio condicionado MSC/K/M/PREP, lisados e produtos derivados ou combinações dos mesmos, opcionalmente com outros ingredientes ativos, podem ser dissolvidos, misturados ou suspensos em uma mistura de álcoois de lanolina emulsificantes, ceras e óleos ou uma mistura de petrolatum ou óleo mineral, um composto de amônio quaternário, um álcool graxo e um emoliente de éster graxo ou loções que são substancialmente semelhantes em composição.

[0042] A base da composição da presente divulgação pode ser qualquer base adequada ou desejada, como uma loção, um creme, um pigmento, um soro, um óleo, um gel, um hidrogel, um pó, uma base, uma máscara facial, um produto para cuidar dos lábios, um produto para cuidar dos cabelos, um produto para cuidar dos cabelos, um limpador de pele, um esfoliante, uma pomada ou semelhante. Alternativamente, a base pode compreender um material adequado para injeção diretamente na derme.

[0043] Em modalidades, a base pode compreender uma loção compreendendo uma mistura de álcoois de lanolina emulsificantes, ceras e óleos ou uma mistura de vaselina ou óleo mineral, um composto de amônio quaternário, um álcool graxo e um emoliente de éster graxo. Alternativamente, a base pode compreender um creme compreendendo uma mistura de álcoois de lanolina emulsificantes, água, vaselina, glicerina, palmitato de isoestearil, butileno glicol, estearato de gliceril ou uma mistura dos mesmos.

[0044] Em algumas modalidades, a base cosmética pode ser um transportador que pode conter, por exemplo, cerca de 1 a cerca de 20% em peso de um umectante, cerca de 0,1 a cerca de 10% em peso de um espessante e água. Alternativamente, o transportador pode compreender cerca de 70 a cerca de 99% em peso de um tensoativo e cerca de 0 a cerca de 20% em peso de uma gordura. O transportador pode, alternativamente, compreender cerca de 80 a 99,9% de um espessante; cerca de 5 a cerca de 15% de um tensoativo, cerca de 2 a cerca de 15% de um umectante, cerca de 0 a cerca de 80% de um óleo, quantidades muito pequenas (<2%) de conservante, agente corante e / ou perfume e água se desejado.

[0045] Em modalidades, a composição pode compreender ainda um intensificador de penetração para melhorar a penetração epidérmica da substância bioativa. Intensificadores de penetração adequados podem incluir dimetil sulfóxido (DMSO),

compostos do tipo DMSO, compostos etanólicos, ésteres do ácido piroglutâmico e semelhantes. A composição também pode incluir um filtro solar, agentes anti-acne, agentes anticelulite e outros componentes adicionais.

[0046] A composição pode ser esterilizada por filtro ou concentrada. Além disso, a composição pode ser isenta de produtos animais não humanos ou pode ser derivada de fontes animais.

[0047] Embora a composição seja descrita acima como incluindo MSCs, o uso de outras células semelhantes a fibroblastos é considerado. O produto pode conter queratinócitos ou melanócitos. As MSCs podem ser derivadas de fontes múltiplas, como estroma de medula óssea, tecido adiposo, sangue, derme, periósteo, osso e outros tecidos. Em modalidades, as MSCs podem ser derivadas do paciente ao qual a composição será aplicada (autóloga) ou derivada de outro indivíduo (alogênico). As MSCs/K/M/PREP podem ser expandidas em cultura para coletar o meio condicionado ou para aumentar a quantidade de células para o lisado ou usadas recentemente antes da incorporação na composição da presente divulgação.

[0048] A produção da composição de tratamento da presente divulgação pode incluir primeiro identificar as características do cabelo do consumidor alvo, obter MSC de um indivíduo com características semelhantes de cabelo e usar MSC de origem para criar um tratamento tópico e injetável a ser aplicado ao couro cabeludo ou derme em áreas afetadas pela miniaturização, em que o tratamento estimulará os folículos capilares para a produção de crescimento capilar.

[0049] Como tal, a composição de tratamento final pode ser personalizada para o usuário final com base nas características do cabelo. Para usar a composição de tratamento de cabelo e couro cabeludo da presente divulgação, um usuário pode simplesmente aplicar a composição topicamente ao couro cabeludo. Alternativamente, a composição pode ser injetada diretamente na derme em áreas afetadas pela miniaturização. A administração pode ser de tão pouco quanto 0,1mL a até 100mL, conforme apropriado para a indicação dada. Por exemplo, a dose administrada pode ser 0,1, 0,2, 0,25, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,75, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 6, 7, 8,

9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95 ou 100 mL em administração única total ou alíquota em múltiplas injeções. Por exemplo, um único volume de 1 mL pode ser disperso em injeções de 0,1 mL. Quando múltiplas injeções são dadas, o volume de cada injeção pode ser 0,1, 0,2, 0,25, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,75, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 6, 7, 8, 9, 10mL. As injeções podem ser feitas como um único local de injeção ou em 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900 ou 1000 injeções separadas. Onde múltiplas injeções são usadas em uma área afetada, a distância entre a injeção pode ser 0,1, 0,2, 0,25, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,75, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5 , 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 6, 7, 8, 9 ou 10 cm de distância. Embora desejado, é entendido e contemplado neste documento que uma única administração de tratamento pode não ser suficiente para atingir os resultados terapêuticos desejados. Consequentemente, a administração pode ocorrer em um único momento ou 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 910, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900 ou 1000 tempos separados durante a vida do hospedeiro ou a duração do tratamento. Quando várias administrações são feitas, a administração pode ocorrer uma vez a cada 6, 12, 18, 24, 36, 48, 60, 72 horas, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 35, 36, 42, 49, 56, 58, 59, 60, 61, 62 dias, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16 semanas, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 18, 24 meses, 3, 4, 5, 6 , 7, 8, 9 ou 10 anos.

[0050] É entendido e aqui contemplado que os fatores de crescimento concentrados, exossomos, proteínas extracelulares, proteoglicanos, citocinas, quimiocinas, proteínas e peptídeos derivados de MSCs ou células semelhantes a fibroblastos semelhantes, queratinócitos ou melanócitos usados nas composições de tratamento divulgadas podem ser diluídos para atingir uma dose administrada. Os diluentes podem ser qualquer substância adequada, incluindo, mas não se limitando a solução salina ou qualquer transportador ou excipiente de base farmacêutica divulgado neste documento. A diluição dos fatores de crescimento, exossomos, proteínas extracelulares, proteoglicanos, citocinas, quimiocinas, proteínas e peptídeos derivados de MSCs ou semelhantes: células semelhantes a fibroblastos 1, queratinócitos ou melanócitos pode ser 10:1, 9:1, 8:1, 7:1, 6:1, 5:1, 4:1, 3:1, 2:1, 1:1, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 1:10, 1:15, 1:20, 1:25, 1:30, 1:35, 1:40, 1:45, 1:50 ou 1:100. Cor da pele

[0051] Atualmente, existem poucos, se houver, produtos para a pele que sejam específicos para uma cor de pele ou etnia específica. Assim, os produtos para a pele convencionais não abordam adequadamente as diferenças biológicas encontradas na derme de cada cor de pele ou raça específica.

[0052] Como observado acima, a base pode compreender uma loção compreendendo uma mistura de álcoois de lanolina emulsificantes, ceras e óleos ou uma mistura de vaselina ou óleo mineral, um composto de amônio quaternário, um álcool graxo e um emoliente de éster graxo. Alternativamente, a base pode compreender um creme compreendendo uma mistura de álcoois de lanolina emulsificantes, água, vaselina, glicerina, palmitato de isoestearil, butileno glicol, estearato de gliceril ou uma mistura dos mesmos.

[0053] Em ainda uma outra modalidade, a composição da presente divulgação pode compreender um tratamento para cílios e, assim, a base cosmética pode compreender uma mistura de óleos minerais, óleo de linhaça, rícino, eucalipto, lanolina, cera de abelha ou uma mistura dos mesmos.

[0054] Em alguns aspectos, a base pode ser uma base cosmética e compreender quaisquer ingredientes conhecidos tipicamente encontrados nos campos cosmético e cosmecêutico, tais como óleos, ceras ou outras substâncias graxas padrão, ou agentes gelificantes convencionais e / ou espessantes; emulsionantes; agentes hidratantes; emolientes; protetores solares; agentes ativos hidrofílicos ou lipofílicos, tais como ceramidas; agentes para combater os radicais livres; bactericidas; agentes sequestrantes; conservantes; agentes basificantes ou acidificantes; fragrâncias;

tensoativos; enchimentos; produtos naturais ou extratos de produtos naturais, como aloe vera ou extrato de chá verde; vitaminas; ou materiais de coloração. As quantidades dos ingredientes na base cosmética podem ser dependentes do efeito desejado.

[0055] A composição cosmética da presente divulgação pode fornecer rejuvenescimento do tecido da pele, aumento e tecido da pele melhorado ou restaurado. A composição também pode ser usada no tratamento de queimaduras ou outras feridas como um intensificador de cicatrização de feridas. Em modalidades, a composição também pode ser usada para tratar disfunção erétil e atrofia vaginal. Algumas modalidades não requerem o uso de preenchimentos dérmicos e transportadores comumente usados, tais como ácido hialurônico e semelhantes. No entanto, esses ingredientes podem ser incluídos. Além disso, as modalidades da composição podem não exigir a inclusão de um fator de crescimento, como insulina, fatores de crescimento semelhantes à insulina, hormônios da tireoide, fatores de crescimento de fibroblastos, estrogênio, ácido retinoico e semelhantes. A composição também pode não exigir a inclusão de adipócitos.

[0056] A composição cosmética da presente divulgação pode ser aplicada topicamente na pele. qualquer área da pele pode ser tratada, como rosto, pescoço, mãos ou qualquer outra parte desejada do corpo. Em algumas modalidades, a composição da presente divulgação pode ser pré-carregada em uma bandagem ou outro curativo, que pode ser aplicado à pele.

[0057] Como mencionado acima, a produção da composição de tratamento de pele da presente divulgação pode incluir primeiro identificar o tipo de pele, cor, raça ou etnia desejada e obter MSCs de um doador direcionado com o mesmo tipo de pele, cor, raça e etnia. Como tal, a composição final do tratamento da pele pode ser personalizada para o usuário final, com base no tipo de pele, cor, raça e etnia.

[0058] Por exemplo, rugas na pele podem ser tratadas por injeção das composições aqui divulgadas no local das rugas, como mostrado na Figura 1. Lá, a composição que compreende o MSC foi diluída a uma razão de 1:10 em solução salina (1mL de composição para 9mL de solução salina) e 0,5mL foi injetado em cada ruga. Em 10 dias, o paciente já apresentava melhora.

[0059] Por conseguinte, são divulgados aqui métodos para criar composição de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir e / ou reverter uma descoloração ou distúrbio da pele (como, por exemplo, vitiligo, melasma, nevo de morango e / ou rosácea) o método compreendendo: o método compreendendo: identificar as características do corpo (como, por exemplo, cor da pele, tipo da pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor de cabelo) de um usuário final; obter células mesenquimais da pele (MSCs) de um doador-alvo com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como o usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca experimentará a doença ou descoloração da pele e pode ser específico de gênero, raça e etnia; preparar uma preparação em pó de MSC, queratinócito e fator de crescimento de melanócito a partir das MSCs obtidas, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas em condições severas de cicatrização de feridas; e adicionar a preparação em pó a uma base; em que a composição de tratamento compreende um membro selecionado do grupo que consiste em uma composição tópica e uma composição injetável.

[0060] Também são divulgadas aqui composições de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir ou reverter um distúrbio ou descoloração da pele (tal como, por exemplo, vitiligo, melasma, nevo de morango e / ou rosácea), a composição compreendendo: uma base de composição; e uma preparação em pó de células- tronco mesenquimais (MSC), queratinócitos e / ou fator de crescimento de melanócitos derivada de um doador com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como um usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca terá o distúrbio da pele e pode ser específico de gênero, raça e etnia, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições de cultura hiperóxica normais e células cultivadas em condições de cicatrização de feridas severas.

[0061] Também são divulgados aqui métodos de tratamento de um distúrbio de pele em um sujeito, compreendendo administrar ao sujeito qualquer uma das composições de tratamento aqui divulgadas.

[0062] Também são divulgados aqui métodos para criar uma composição de tratamento de pele para uma cor de pele, raça, tipo ou etnia específica, o método compreendendo: identificar as características do corpo (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor de cabelo) de um usuário final; obter células mesenquimais da pele (MSCs) de um doador direcionado com as mesmas características corporais do usuário final com base no painel de polimorfismo de nucleotídeo único apropriado do doador; preparar uma preparação de pó de MSC, queratinócito e fator de crescimento de melanócito a partir das MSCs obtidas, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas sob condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas sob condições severas de cicatrização de feridas; e adicionar a preparação em pó a uma base cosmética.

[0063] Em um aspecto, são divulgadas aqui composições de tratamento de pele para uma cor de pele, raça, tipo ou etnia específica, a composição compreendendo: uma base de composição; e uma preparação em pó de célula-tronco mesenquimal (MSC), queratinócito e / ou fator de crescimento de melanócito derivada de um doador com a mesma cor de pele, tipo de raça e etnia de um usuário final, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas sob condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas sob condições severas de cicatrização de feridas.

[0064] Em um aspecto, o SNP das composições de tratamento compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL-

23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF-BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM). Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C). Cabelos Grisalhos

[0065] A expressão do fator de células-tronco (SCF) na matriz do cabelo identifica os antecedentes imediatos das células estruturais da haste do cabelo, e o fator de transcrição KROX20 marca uma sub-linhagem de células epiteliais que se diferenciam em relação às células progenitoras da haste do cabelo. O fator de células-tronco (SCF, também conhecido como ligando KIT ou fator de aço) é um fator de crescimento que regula vários eventos homeostáticos fisiológicos, incluindo a manutenção de células- tronco hematopoiéticas, mastócitos e melanócitos. O papel crítico do SCF e seu receptor, KIT, para a pigmentação do cabelo foi apoiado pela ausência de pigmento do cabelo em vários animais privados de SCF e KIT. É evidente que os melanócitos são as células-alvo relevantes neste tipo de hipopigmentação, uma vez que são as células produtoras de melanina, bem como a célula predominante que expressa o KIT no folículo piloso (HF). As fontes de SCF que suportam a atividade melanocítica no HF parecem ser fibroblastos dérmicos.

[0066] KROX20 (também conhecido como EGR2) é um fator de transcrição em dedo de zinco expresso em subpopulações de células do folículo piloso (HF). No entanto, o papel das células que expressam KROX20 no desenvolvimento de HF não é conhecido. Foi relatado que o fator de transcrição KROX20 identifica uma sub- linhagem de células epiteliais de HF para a diferenciação da haste do cabelo durante a morfogênese de HF. As observações mostram que os fibroblastos dérmicos são uma fonte necessária de SCF para a manutenção de melanócitos na matriz do cabelo para produzir pigmentação capilar, conforme evidenciado pela perda completa de pigmento quando o SCF é deletado nas células da linhagem KROX20.

[0067] Estudos demonstraram que a depleção de SCF nas células progenitoras da haste do cabelo resulta na perda da pigmentação do cabelo. Além disso, os melanócitos são as células produtoras de melanina especializadas, bem como as células que expressam KIT predominantes no HF. Portanto, os melanócitos medeiam a sinalização de SCF para a pigmentação do cabelo, e o SCF é necessário para a atividade melanocítica e a pigmentação do cabelo. Este achado demonstra que a perda de SCF nas células progenitoras da haste do cabelo influencia apenas os melanócitos, destacando a matriz de HF superior como um nicho crítico onde a sinalização SCF / KIT não autônoma da célula regula a pigmentação do cabelo. Ele também aponta para o papel crítico do SCF epitelial folicular no controle do destino dos melanócitos em sua maturação final, sem afetar sua diferenciação e migração anteriores. A produção de SCF em fibroblastos e queratinócitos parece regular a geração de pigmentação do cabelo pelos melanócitos.

[0068] Os fibroblastos secretam vários fatores melanogênicos, como fator de células-tronco (SCF), fator de crescimento de hepatócitos (HGF), fator de crescimento de queratinócitos (KGF), hormônio liberador de corticotrofina (CRH), endotelina-I (ET- I), interferon-y ( IFN-y) e interleucina-I (IL-I). Os melanócitos são ativados por meio de múltiplos fatores parácrinos secretados de células adjacentes, como queratinócitos e fibroblastos. Os fatores parácrinos se ligam aos receptores específicos expressos nos melanócitos e, em seguida, aceleram as transduções de sinal para iniciar a produção de melanina

[0069] Embora as conexões acima com a pigmentação do cabelo sejam conhecidas, atualmente não existe um produto para prevenir ou tratar cabelos grisalhos em nível celular. Em vez disso, o cabelo grisalho é convencionalmente tratado tingindo-se o cabelo grisalho para combinar com a cor de cabelo desejada.

[0070] Por conseguinte, são divulgados aqui métodos para criar uma composição de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir e / ou reverter um cabelo grisalho, o método compreendendo: o método compreendendo: identificar as características do corpo (como, por exemplo, cor da pele, tipo da pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor de cabelo) de um usuário final; obter células mesenquimais da pele (MSCs) de um doador-alvo com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como o usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca experimentará cabelos grisalhos e pode ser específico de gênero, raça e etnia; preparar uma preparação em pó de MSC, queratinócito e fator de crescimento de melanócito a partir das MSCs obtidas, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas em condições severas de cicatrização de feridas; e adicionar a preparação em pó a uma base; em que a composição de tratamento compreende um membro selecionado do grupo que consiste em uma composição tópica e uma composição injetável. Em um aspecto, a composição de tratamento corrige a pigmentação do cabelo e / ou estimula a produção de pigmentação do cabelo. Em um aspecto, o SNP dos métodos para criar uma composição de tratamento compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL- 18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP ) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL- 23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF-BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM). Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

[0071] Também são divulgadas aqui composições de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir ou reverter cabelos grisalhos, a composição compreendendo: uma base de composição; e uma preparação em pó de células-tronco mesenquimais (MSC), queratinócitos e / ou fator de crescimento de melanócitos derivada de um doador com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como um usuário final,

mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca terá cabelos grisalhos e pode ser específico de gênero, raça e etnia, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições de cultura hiperóxica normais e células cultivadas em condições de cicatrização de feridas severas.

[0072] Em um aspecto, o SNP das composições de tratamento compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL- 23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF-BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM). Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

[0073] Também são divulgados aqui métodos de tratamento de cabelos grisalhos em um sujeito, compreendendo administrar ao sujeito qualquer uma das composições de tratamento aqui divulgadas. Calvície

[0074] O cabelo é feito de uma proteína chamada queratina. O cabelo fica em um folículo piloso e na base do folículo estão as células-tronco, chamadas células-tronco epiteliais foliculares, que estimularam a produção de novos cabelos. A cabeça média tem mais de 100.000 folículos capilares e cada um dos ciclos do folículo produz cabelo e depois descansa. O ciclo de produção e repouso do cabelo é normal e resulta em ter sempre a cabeça cheia.

[0075] A calvície ocorre porque cada vez mais os folículos capilares estão em repouso ou encolhem até nunca mais produzirem novos cabelos. Por causa da genética, os homens destinados a ser calvos têm folículos capilares excessivamente sensíveis às ações da di-hidrotestosterona (DHT), que é um subproduto da testosterona. A DHT se liga aos folículos capilares e faz com que eles encolham. Cada vez mais os folículos capilares encolhem até deixarem de produzir cabelo, o que faz com que as áreas desenvolvam queda de cabelo e eventual calvície. Este processo é denominado miniaturização.

[0076] Atualmente, apenas dois medicamentos são aprovados pela FDA para tratar a queda de cabelo - minoxidil e finasterida. O minoxidil está disponível como um tópico de venda livre, mas a maioria dos especialistas concorda que o minoxidil é uma droga eficaz relativamente marginal na luta contra a queda de cabelo e tem efeito zero no processo de miniaturização. Assim, seus benefícios são temporários. A finasterida atua inibindo a testosterona que se torna DHT, mas seus efeitos colaterais incluem disfunção erétil e distúrbios da libido e ejaculação. Demonstrou-se que a terapia a laser de baixa intensidade estimula o crescimento do cabelo, tanto em homens quanto em mulheres, mas não tem efeito na miniaturização.

[0077] O transplante de cabelo é outro método para o tratamento da calvície e envolve a colheita de folículos da parte de trás da cabeça que são resistentes à DHT e o transplante deles para áreas calvas. Porém, isso não estimula um novo crescimento, pois o paciente ainda tem a mesma quantidade de cabelo, apenas é redistribuído de forma mais uniforme ao redor do couro cabeludo. O que é necessário é uma composição e método para prevenir e tratar a calvície, em que o método e a composição promovam a estimulação das células-tronco epiteliais foliculares e células-tronco mesenquimais no folículo para resultar em folículos ativados para produzir cabelo e prevenir a miniaturização.

[0078] Algumas modalidades da presente divulgação incluem um método para a produção de uma composição para prevenir e tratar a calvície, compreendendo preparar uma concentração de exossomos e secretomos de células-tronco mesenquimais (MSC) de um doador direcionado com características de cabelo SNP específicas que indicam que o doador nunca experimentará queda de cabelo. O doador pode ser específico de gênero. O método pode incluir identificar o doador alvo pelas características do SNP do cabelo, cultivar MSCs do doador alvo para criar um meio de cultura sob condições de cultura hiperóxica normais ou condições hipóxicas de cicatrização de feridas severas; criar um pó a partir do meio de cultura; e combinar o pó com um creme ou base de loção, podendo o produto final ser aplicado na derme em áreas afetadas pela miniaturização. A aplicação pode ser tópica ou injetável e pode estimular a ativação dos folículos capilares para promover o crescimento do cabelo, particularmente em áreas afetadas pela miniaturização ou por injeção direta na derme.

[0079] Quando injetado no couro cabeludo das áreas afetadas de indivíduos com calvície de padrão masculino ou alopecia androgenética, o crescimento do cabelo com sucesso foi observado em apenas 2 semanas após o tratamento (ver figuras 2A-2E).

[0080] Uma avaliação proteômica de suspensões de exossomo geradas usando métodos e parâmetros aqui descritos foi realizada para caracterizar as composições moleculares que contribuem para a eficácia clinicamente relevante da invenção descrita. As avaliações proteômicas utilizaram arranjos de anticorpos disponíveis comercialmente, fabricadas por RayBio Tech, Norcross, GA, EUA). As medições de concentração foram feitas de 230 proteínas diferentes conhecidas por serem secretadas, transportadas ou presentes na superfície externa das membranas celulares (dentro do microambiente extracelular). As proteínas medidas presentes em concentrações fisiologicamente relevantes em amostras de teste duplicadas e que foram consideradas relevantes para a restauração e colorização do cabelo estão listadas na Tabela 1. Uma concentração fisiologicamente relevante foi considerada uma concentração média de ≥ 1pg / mL. Pesquisas bibliográficas de proteínas com concentrações médias superiores a 50 ug / mL foram realizadas para identificar moléculas candidatas mais prováveis para apoiar um efeito clínico. A lista na Tabela 1 não deve ser considerada uma lista abrangente ou exaustiva de proteínas individuais encontradas na invenção que são relevantes para efeitos eficazes. Tabela 1. Levantamento do teor de proteínas da invenção. Amostra de Amostra de % de identidade de Concentração suspensão de suspensão de proteína média [pg/mL] exossomo 1 exossomo 2

[pg/mL] [pg/mL] IL-18 50033,50 29801,41 70265,59 PDGF Rb 10178,43 10036,71 10320,16 IGFBP-4 5840,14 3878,93 7801,34 TIMP-2 1708,44 2121,46 1295,42 TIMP-1 684,26 734,23 634,29 IL-23 372,10 393,96 350,24 Activina A 454,81 378,14 531,48 ICAM-2 193,61 365,61 21,60 XEDAR 226,68 317,96 135,40 OPN 254,12 252,85 255,38 TNF RI 126,27 136,16 116,37 Folistatina 95,93 129,93 61,93

[0081] As proteínas são organizadas da concentração média mais alta para a mais baixa. As proteínas expressas em concentrações maiores do que o valor arbitrário de 50 ng / mL foram pesquisadas na literatura médica usando o mecanismo de busca PubMed para identificar estudos que fornecem evidências dos efeitos potenciais desta invenção. As proteínas da invenção com suporte na literatura científica para desempenhar um papel na regeneração do folículo capilar são listadas e descritas abaixo

[0082] IL18 foi a proteína mais concentrada presente nas amostras de suspensão de exossomo. Sua função primária envolve a regulação da resposta imune inata dentro da pele, especificamente, estimulando a produção de interferon gama e ativando o assassino natural dérmico e as células T TH1. O excesso de IL18 está associado ao início de doenças autoimunes. A pesquisa da literatura fornece evidências de um papel no crescimento do cabelo. Dois polimorfismos de nucleotídeo único (SNPs) encontrados na sequência do gene IL18 estão associados ao desenvolvimento da doença autoimune específica do órgão, alopecia areata (AA). Dois SNPs específicos, polimorfismos rs1946518 (−607C> A) e rs187238 (−137G> C)

estão associados à doença de alopecia areata. Celik et al concluíram que os SNPs rs187238 e rs1946518 IL-18 podem ser a causa da suscetibilidade ao AA.1 IL18 pode desempenhar um papel nas interações irregulares observadas entre mastócitos perifoliculares e células CD8+. Essas interações podem interromper o ciclo normal de crescimento do cabelo dentro dos folículos. Pela análise histológica, a IL18 e seu receptor são encontrados nos queratinócitos da pele e nas células da bainha externa dos folículos capilares. Dois possíveis efeitos da ação de IL18 para iniciar o crescimento de cabelo observados quando a invenção é aplicada à derme é que a sequência de IL18 deste doador não possui as sequências associadas à doença e altera os níveis de sinalização de IL18 para um nível de não doença. Alternativamente, existem evidências de isoformas de IL18, incluindo uma forma predominante no soro que pode funcionar como um inibidor autócrino. A forma de IL18 nesta invenção pode ser uma isoforma inibidora que reduz a sinalização de IL18 e restaura uma resposta imune inata apropriada a um nível apropriado.

[0083] Foi demonstrado que a indução da fase anágena usando meios condicionados de populações de adiposoe hipóxica derivou populações de células estromais / tronco mesenquimais O receptor B de PDGF foi uma das principais proteínas detectadas e. PDGF pode estimular a proliferação das papilas dérmicas através do receptor PDGF. A introdução exossômica do receptor B de PDGF nas membranas das células da papila dérmica telogênica pode permitir a sinalização via PDGF que inicia o crescimento do cabelo anagênico. Variantes genéticas de PDGFR- B estão associadas à queda de cabelo na síndrome de Penttinen.

[0084] Fatores de crescimento de insulina são agonistas para o crescimento do cabelo. As proteínas de ligação a IGF regulam as atividades de IGF ligando-se a IGF. A ligação aos vários IGF-BPs pode modificar a atividade do IGF e fornecer especificidade adicional da atividade do IGF. IGF-BP4, junto com IGF-BP3 e IGF-BP5 são expressos em papilas dérmicas do folículo piloso inumano e servem para regular a atividade de IGF dentro do folículo piloso.

[0085] O crescimento normal do cabelo é cíclico. Cada folículo piloso sofre remodelação extracelular ao longo de cada ciclo. TIMP-1 e TIMP-2 desempenham papéis críticos na regulação da atividade proteolítica de colagenases e outras proteases envolvidas na remodelação da matriz extracelular dentro e ao redor do folículo piloso. TIMPs adicionais fornecidos pela invenção podem restaurar o equilíbrio aos níveis de proteases alteradas por estados de doença inflamatória associados à alopecia.

[0086] A interleucina vinte e três é encontrada nos folículos pilosos em um nível mais alto durante a Alopecia Areata; no entanto, sua função exata dentro dos folículos pilosos ainda é desconhecida. Como outras citocinas, a IL23 pode ter múltiplas funções dependendo da isoforma e dos receptores expressos por diferentes tipos de células. IL23 adicional fornecido pela invenção pode fornecer um sinal inibitório autócrino que ajuda a diminuir a condição inflamatória resultando na supressão do crescimento do cabelo

[0087] As ativinas são membros da via de sinalização do TGF-B e são críticas para a formação inicial dos folículos capilares durante o desenvolvimento, e desempenham um papel fundamental nas interações epidérmicas / mesenquimais necessárias durante a organogênese capilar. Posteriormente, em combinação com a folistatina, a ativina é um importante regulador do ciclo capilar.

[0088] ICAMs funcionam para conectar e criar uma barreira entre as células. O folículo piloso é um micro-órgão imunologicamente privilegiado. ICAMs estabelecem barreiras físicas que estabelecem esse ambiente de privilégio imunológico. Na alopecia areata, o ambiente imunológico privilegiado é interrompido, permitindo o desenvolvimento de uma resposta autoimune a antígenos dentro dos melanócitos que fornecem cor ao cabelo. Ao fornecer ICAM-2, a invenção pode permitir o restabelecimento do microambiente imune privilegiado

[0089] A osteopontina é expressa pelas células da bainha do folículo piloso externo. A osteopontina é clivada proteoliticamente in vivo para gerar moléculas de sinalização de peptídeos que regulam a produção de FGF-7 pelos queratinócitos da bainha externa da raiz. O peptídeo derivado da osteopontina parece inibir a síntese de FGF-7, que por sua vez retarda o crescimento do cabelo. A osteopontina, portanto, pode ser um importante regulador do ciclo de crescimento do cabelo.

[0090] EDAR e XEDAR ligam os membros da família da ectodisplasina Eda A1 e Eda A2. O XEDAR ativa a via de sinalização do NFKB e está associado à sinalização durante a morfogênese do folículo piloso. Estudos de nocaute do gene murino dessa via de sinalização levam à malformação dos folículos capilares.

[0091] Durante a regeneração do folículo piloso após a cicatrização dérmica, a presença de sinalização de macrófagos é crítica para iniciar a formação de um novo folículo piloso. As células Lgr5 + são as primeiras células-tronco ativadas durante a transição telógeno-anágena no ciclo capilar. Os macrófagos são mostrados para ativar essas células para proliferar via sinalização de TNF. A introdução de TNFR-1 através da absorção da invenção em células Lgr5+ no bulbo do folículo piloso pode aumentar a sensibilidade dessas células para responder aos sinais de TNF e iniciar a formação do folículo piloso.

[0092] Coletivamente, os dados de caracterização de proteínas fornecidos para a invenção demonstram a viabilidade de que os elementos proteicos proeminentes possam funcionar para reiniciar os folículos capilares dormentes por meio de vários modos de ação que incluem, mas não se limitam a, modificação ou resolução de doenças inibitórias e estados de inflamação, ativação da derme, melanócitos e proliferação de células de queratinócitos e indução de diferenciação de células foliculares e produção de matriz extracelular.

[0093] Por conseguinte, são divulgados aqui métodos para criar composição de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir e / ou reverter a calvície (incluindo, mas não se limitando a calvície causada por calvície de padrão masculino, alopecia androgenética, alopecia areata, alopecia cicatricial, eflúvio telógeno e / ou calvície feminina) o método compreendendo: identificar as características do corpo (como, por exemplo, cor da pele, tipo da pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor de cabelo) de um usuário final; obter células mesenquimais da pele (MSCs) de um doador-alvo com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como o usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca experimentará calvície e pode ser específico de gênero, raça e etnia; preparar uma preparação em pó de MSC, queratinócito e fator de crescimento de melanócito a partir das MSCs obtidas, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas em condições severas de cicatrização de feridas; e adicionar a preparação em pó a uma base; em que a composição de tratamento compreende um membro selecionado do grupo que consiste em uma composição tópica e uma composição injetável. Em um aspecto, a composição de tratamento estimula a ativação dos folículos capilares para promover o crescimento do cabelo. Em um aspecto, o SNP dos métodos para criar uma composição de tratamento compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP ) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL-23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF- BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM). Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

[0094] Também são divulgadas aqui composições de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir ou reverter uma calvície (incluindo, mas não se limitando à calvície causada por calvície de padrão masculino, alopecia androgenética, alopecia areata, alopecia cicatricial, eflúvio telógeno e / ou calvície feminina), a composição compreendendo: uma base de composição; e uma preparação em pó de células- tronco mesenquimais (MSC), queratinócitos e / ou fator de crescimento de melanócitos derivada de um doador com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como um usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca será calvo e pode ser específico de gênero, raça e etnia, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições de cultura hiperóxica normais e células cultivadas em condições de cicatrização de feridas severas.

[0095] Em um aspecto, o SNP das composições de tratamento compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL- 23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF-BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM). Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

[0096] Também são divulgados aqui métodos de tratamento de calvície (incluindo, mas não se limitando a calvície causada por calvície de padrão masculino, alopecia androgenética, alopecia areata, alopecia cicatricial, eflúvio telógeno e / ou calvície de padrão feminino) em um sujeito que compreende administrar ao sujeito qualquer uma das composições de tratamento aqui divulgadas. Impotência Sexual

[0097] Uma avaliação proteômica de suspensões de exossomo geradas usando métodos e parâmetros aqui descritos foi realizada para caracterizar as composições moleculares que contribuem para a eficácia clinicamente relevante da invenção descrita. As avaliações proteômicas utilizaram arranjos de anticorpos disponíveis comercialmente, fabricadas por RayBio Tech, Norcross, GA, EUA). As medições de concentração foram feitas de 230 proteínas diferentes conhecidas por serem secretadas, transportadas ou presentes na superfície externa das membranas celulares (dentro do microambiente extracelular). As proteínas medidas presentes em concentrações fisiologicamente relevantes em amostras de teste duplicadas e que foram apoiadas na literatura científica como potencialmente eficazes para o tratamento da disfunção erétil estão listadas na Tabela 2. Uma concentração fisiologicamente relevante foi considerada uma concentração média de ≥ 1pg / mL. Pesquisas bibliográficas de proteínas com concentrações médias superiores a 50 ug / mL foram realizadas para identificar moléculas candidatas mais prováveis para apoiar um efeito clínico. Tabela 2. Levantamento do teor de proteínas da invenção. Amostra de Amostra de suspensão de suspensão de % de identidade de Concentração exossomo 1 exossomo 2 proteína média [pg/mL] [pg/mL] [pg/mL] IL-18 50033,50 29801,41 70265,59 PDGF Rb 10178,43 10036,71 10320,16 TIMP-1 684,26 734,23 634,29 PAI-1 400,41 434,72 366,10 OPN 254,12 252,85 255,38 Insulina 177,33 164,70 189,95 TNF RI 126,27 136,16 116,37 NRG1-b1 44,46 86,66 2,26 uPAR 32,41 61,69 3,14 ALCAM 54,35 48,73 59,96

[0098] As proteínas são organizadas da concentração média mais alta para a mais baixa. As proteínas expressas em concentrações maiores do que o valor arbitrário de 50 ng / mL foram pesquisadas na literatura médica usando o mecanismo de busca PubMed para identificar estudos que fornecem evidências dos efeitos potenciais desta invenção. A fonte em negrito indica que a evidência da literatura para a relevância da proteína em uma ou mais das indicações clínicas listadas foi estabelecida.

[0099] ]O teor de proteína dentro desta invenção com capacidade para afetar positivamente a formação e função vascular, a inervação e função somática ou autônoma ou a fisiologia da célula do músculo liso pode ter efeitos benéficos para a disfunção erétil. A literatura de pesquisa apoia os efeitos potenciais de vários componentes proteicos desta invenção para melhorar ou resolver elementos da fisiopatologia da disfunção erétil.

[0100] IL18 foi a proteína mais concentrada presente nas amostras de suspensão de exossomo. Sua função primária envolve a regulação da resposta imune inata dentro da pele, especificamente, estimulando a produção de interferon gama e ativando o assassino natural dérmico e as células T TH1. O excesso de IL18 está associado ao início de doenças autoimunes. Níveis elevados de IL-18 foram observados em uma população de homens obesos com disfunção erétil. Existem evidências de isoformas de IL18, incluindo uma forma predominante no soro que pode funcionar como um inibidor autócrino. A forma de IL18 nesta invenção pode ser uma isoforma inibidora que reduz a sinalização pró-inflamatória de IL18 e modula as respostas imunes a um nível apropriado. Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

[0101] O plasma rico em plaquetas tem sido usado para tratar ED. A sinalização do receptor do fator de crescimento derivado de plaquetas (PDGF) (PDGFR) demonstrou ser importante na regulação da diferenciação e contratilidade das células musculares lisas do corpo cavernoso e na regulação da remodelação do tecido conjuntivo. A integração do PDGFR-B nas membranas celulares CCSMC pode aumentar a sensibilidade ou a taxa de resposta aos sinais PDGF que melhoram a função das células do músculo liso peniano.

[0102] Uma causa comum de disfunção erétil é o acúmulo de tecido fibrótico colágeno no pênis. Os inibidores teciduais de metaloprotease (TIMP)-1 (TIMP-1) e TIMP-2 desempenham papéis críticos na regulação da atividade proteolítica de colagenases e outras proteases. TIMP-1 de células-tronco mesenquimais foi mostrado para restaurar a função de ereção em um modelo de rato de disfunção erétil.

[0103] As junções mioendoteliais são importantes para estabelecer a compartimentação anatômica necessária para permitir a ereção peniana. Em um modelo de camundongo nocaute do PAI-1 (Inibidor do Ativador de Plasminogênio - 1)

de disfunção erétil, o PAI-1 recombinante restaurou o número de junções mioendoteliais no tecido corporal e também induziu uma diminuição significativa no tempo até as pressões corporais máximas. As junções mioendoteliais foram identificadas de forma semelhante no tecido corporal humano. Estes resultados sugerem um papel crítico para as junções mioendoteliais na fisiopatologia erétil e terapias como esta invenção podem restaurar os números das junções mioendoteliais no tecido corporal e fornecer uma nova terapia para a disfunção erétil.

[0104] A osteopontina (OPN) está comumente associada à formação da matriz óssea; entretanto, desde sua caracterização inicial no osso, a osteopontina demonstrou ter funcionalidade adicional em outros tipos de células. Por exemplo, é mostrado ter atividade anti-apoptose em tipos de células, como progenitores de oligodendrócitos. Em um modelo de nervo esmagado cavernoso de ED em ratos, foi observada uma quantidade aumentada de osteopontina. Nesse cenário, a osteopontina pode estar participando da regulação da apoptose das células geradoras de mielina próximas ao nervo e desempenhar um papel na economia de células e possibilitando o reparo mais rápido do tecido danificado.

[0105] O TNF funciona para regular o crescimento e a morte celular em vários tipos de tecidos diferentes, o TNFR-1 (receptor do fator de necrose tumoral -1) é tipicamente descrito como iniciador da sinalização apoptótica quando é para o TNF- alfa como um homodímero; no entanto, os receptores do TNF podem interagir com outros membros da superfamília de proteínas do receptor do TNF e podem se tornar moléculas chamariz que infrarregula a atividade do TNF. Nessa capacidade, o TNFR- 1 pode funcionar como um inibidor da sinalização inflamatória crônica envolvida com algumas formas de etiologia da disfunção erétil.

[0106] Foi demonstrado que outras moléculas da família da neuregulina (GGF2, por exemplo) têm um efeito neuro-protetor na lesão do nervo relacionada à prostectomia que leva à disfunção erétil. NRG1-B1 (Neuregulina-1 B1) da mesma forma pode apoiar o crescimento de neurônios e a restauração de nervos danificados resultante de lesão aguda relacionada ao início da disfunção erétil, uma vez que em modelos de rato de dor neuropática é mostrado que altera a função neuronal e reduz significativamente a dor.

[0107] Os neurônios liberam uPAR (Receptor do Ativador de Plasminogênio do tipo Uroquinase) durante a fase de recuperação de uma lesão isquêmica, e astrócitos, botões axonais e espinhas dendríticas recrutam uPAR para sua membrana plasmática. A ligação do uPA ao uPAR promove o reparo das sinapses danificadas por uma lesão isquêmica. A captação de receptores de uPA nos neurônios receptores pode aumentar a conectividade sináptica dos circuitos neuronais parassimpáticos e simpáticos que apresentam mau funcionamento em algumas formas de disfunção erétil.

[0108] O ALCAM desempenha um papel na fisiologia das células imunológicas, endoteliais e neuronais. Foi demonstrado que é importante manter a barreira hematoencefálica, bem como desempenhar um papel na extensão do axônio do neurônio do gânglio da raiz dorsal e no crescimento celular. O ALCAM foi identificado por um estudo como o gene mais próximo de dois SNPs diferentes associados à disfunção erétil relacionada ao diabetes tipo I. ALCAM da invenção pode servir para fornecer sinais para células endoteliais e neuronais ou modificar o estado imunológico do tecido peniano na disfunção erétil que resulta na restauração da integridade do tecido e neuro-conectividade.

[0109] Coletivamente, os dados de caracterização de proteínas fornecidos para a invenção demonstram a viabilidade de que os elementos proteicos proeminentes possam funcionar para iniciar o reparo ou diminuir os eventos de sinalização negativa que resultam em disfunção erétil. As proteínas desta invenção podem atuar diretamente nos neurônios e células musculares lisas envolvidas na regulação da pressão vascular, e entrada e saída de fluido, bem como indiretamente abordando condições de doença externas que afetam a anatomia e fisiologia do pênis.

[0110] Por conseguinte, são divulgados aqui métodos para criar uma composição de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir e / ou reverter disfunção erétil, o método compreendendo: o método compreendendo: identificar as características do corpo (como, por exemplo, cor da pele, tipo da pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor de cabelo) de um usuário final; obter células mesenquimais da pele (MSCs) de um doador-alvo com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como o usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca experimentará disfunção erétil e pode ser específico de gênero, raça e etnia; preparar uma preparação em pó de MSC, queratinócito e fator de crescimento de melanócito a partir das MSCs obtidas, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas em condições severas de cicatrização de feridas; e adicionar a preparação em pó a uma base; em que a composição de tratamento compreende um membro selecionado do grupo que consiste em uma composição tópica e uma composição injetável. Em um aspecto, a composição de tratamento promove a função erétil adequada.

[0111] Também são divulgadas aqui composições de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir ou reverter disfunção erétil, a composição compreendendo: uma base de composição; e uma preparação em pó de células-tronco mesenquimais (MSC), queratinócitos e / ou fator de crescimento de melanócitos derivada de um doador com as mesmas características corporais (como, por exemplo, cor da pele, tipo de pele, etnia, raça, tipo de cabelo e / ou cor do cabelo) como um usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca terá disfunção erétil e pode ser específico de gênero, raça e etnia, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições de cultura hiperóxica normais e células cultivadas em condições de cicatrização de feridas severas. Em um aspecto, o SNP dos métodos para criar uma composição de tratamento divulgada aqui compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL-23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina

(OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF- BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM). Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

[0112] Em um aspecto, o SNP das composições de tratamento compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL- 23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF-BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM). Em um aspecto, o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

[0113] Também são divulgados aqui métodos de tratamento de disfunção erétil em um sujeito, compreendendo administrar ao sujeito qualquer uma das composições de tratamento aqui divulgadas. Células-tronco mesenquimais

[0114] Conforme observado ao longo, as composições de tratamento divulgadas neste documento podem utilizar exossomos e / ou fatores de crescimento derivados de células-tronco mesenquimais (MSCs). Embora as MSCs autógenas e alogênicas existentes contidas no concentrado de medula óssea ou fração vascular do estroma derivado do tecido adiposo (SVF) ou vários produtos pós-natais do cordão umbilical, placenta ou âmnio, culturas de MSC expandidas estão sendo usadas atualmente para tratar feridas, patologia ortopédica e patologia da coluna; os tratamentos existentes não contêm grandes quantidades de secretomas de MSC (incluindo, mas não se limitando a fatores de crescimento, citocinas, quimiocinas, exossomos, vesículas extracelulares e / ou extratos). Além disso, apesar das evidências na técnica de que os tratamentos que compreendem células-tronco (incluindo tratamentos injetáveis) podem ajudar a prevenir o envelhecimento e tratar cicatrizes, pigmentação irregular, produtos para a pele existentes, como cremes, loções, soros, maquiagem e semelhantes, incluindo ingredientes que potencialmente ajudam a tratar e fortalecer a pele, outros produtos tópicos não penetram na epiderme e, mais importante, não incluem MSCs humanas ou fatores de crescimento e proteínas derivados de MSC. Na verdade, antes da presente divulgação, não foi desenvolvido um produto de fator de crescimento de MSC ativo que pode ser usado para essas aplicações. Assim, em um aspecto, são divulgadas aqui composições de secretoma de MSC (incluindo, mas não se limitando a fator de crescimento de MSC, exossomo de MSC, extratos de MSC e / ou vesículas extracelulares compreendendo composições) para uso no tratamento de feridas, distúrbios ortopédicos, lesões ortopédicas, oftalmologia, lesão medular ou distúrbios da coluna vertebral, as referidas composições de tratamento compreendendo (i) um fator de crescimento aditivo em pó compreendendo uma preparação derivada de células-tronco mesenquimais (MSC) e (ii) um transportador farmaceuticamente aceitável

[0115] Como observado acima, as MSC são células multipotentes que têm a capacidade de se diferenciar em uma infinidade de tipos de células, incluindo miócitos, condrócitos, adipócitos e osteoblastos. Normalmente, essas células podem ser encontradas na placenta, sangue do cordão umbilical, tecido adiposo, medula óssea ou líquido amniótico, incluindo tecido perivascular. Como utilizado neste documento, "MSC" refere-se a células diferenciadas não terminais, incluindo, mas não se limitando a células-tronco multipotenciais, células estromais multipotenciais, células vasculares estromais, pericitos, células perivasculares, células estromais, células pluripotentes, células multipotentes, células semelhantes a fibroblastos derivadas de tecido adiposo, fração vascular estromal derivada de adiposo, MSC derivada de tecido adiposo, células semelhantes a fibroblastos derivadas de medula óssea, fração vascular estromal derivada de medula óssea, MSC derivada de medula óssea, células semelhantes a fibroblastos derivadas de tecido, células-tronco adultas, células estromais adultas, queratinócitos e / ou melanócitos.

[0116] Há muito se reconhece que as MSC, além de seu potencial de diferenciação, têm habilidades imunomodulatórias que resultam na expressão de muitas citocinas e fatores de crescimento diferentes. Como utilizado neste documento, uma "preparação de MSC" ou "composição de secretoma de MSC" refere-se a uma composição que compreende fatores de crescimento de MSC, exossomos de MSC, vesículas extracelulares ou extratos acelulares de MSCs ou lisados de MSC obtidos de MSCs humanas, células semelhantes a fibroblastos, e MSCs de animais não humanos incluindo, mas não se limitando a MSCs de cavalos, vacas, porcos, ovelhas, primatas não humanos, cães, gatos, coelhos, ratos e camundongos. Em modalidades, as MSCs podem ser derivadas do paciente ao qual a composição será aplicada (autóloga) ou derivada de outro indivíduo (alogênico). As MSCs podem ser expandidas em cultura para coletar o meio condicionado ou para aumentar a quantidade de células para o lisado ou usadas recentemente antes da incorporação na composição da presente divulgação.

[0117] As composições de secretoma de MSC (incluindo, mas não se limitando a fator de crescimento de MSC, exossomo de MSC, extratos de MSC e / ou vesículas extracelulares compreendendo composições) podem compreender cerca de 0,00001 a cerca de 20% em peso, tal como de cerca de 0,01 a cerca de 10% em peso, de um extrato de célula-tronco mesenquimal (MSC), exossomo MSC ou preparação de fator de crescimento MSC. A preparação de MSC pode compreender meio condicionado de MSC ou lisado de MSC de MSCs expandidas de cultura de células. Em algumas modalidades, a composição pode compreender ainda de cerca de 0,01 a cerca de 10% em peso de um meio livre de células condicionado pelo crescimento de MSCs ou células de linhagem MSC, em que as células são cultivadas em condições normais de cultura hiperóxica ou em condições artificiais de cicatrização de feridas.

[0118] Conforme divulgado neste documento, as MSCs utilizadas para produzir os aditivos de MSC divulgadas (incluindo a composição do secretoma do fator de crescimento, tanto congelados quanto em pó) podem ser estimuladas seletivamente para produzir fatores de crescimento MSC, secretomas, citocinas, quimiocinas,

proteínas de células-tronco mesenquimais, peptídeos, glicosaminoglicanos, matriz extracelular (ECM), proteoglicanos, secretomas e exossomos. Como utilizado neste documento, os fatores de crescimento de MSC incluem, mas não estão limitados a prostaglandina E2 (PGE2), fator de crescimento transformador 1 (TGF- 1), fator de crescimento de hepatócitos (HGF), fator-1 derivado de células estromais (SDF-1), óxido nítrico, indoleamina 2,3-dioxigenase, interleucina-4 (IL-4), IL-6, interleucina-10 (IL-10),antagonista do receptor de IL-1 e receptor de TNF- solúvel, fatores de crescimento semelhantes à insulina, fatores de crescimento de fibroblastos (FGF) 1- 23 (especialmente, FGF1 e FGF2), proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs) 1-15, fator de crescimento epidérmico (EGF), fator de crescimento transformador- (TGF- ) proteína estimuladora de macrófagos (MSP), fator de crescimento derivado de plaquetas (PLGF), fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), fator estimulador de colônias de macrófagos (M-CSF), insulina, fator estimulador de colônias de granulócitos (G-CSF), fator estimulador de colônias de granulócitos macrófagos (GM- CSF), bem como hormônios, incluindo estrogênio e hormônios da tireoide.

[0119] Em um aspecto, a preparação de MSC (tal como, por exemplo, uma composição de secretoma de MSC) compreende fatores de crescimento de MSC, exossomos de MSC e / ou extratos celulares de MSCs ou lisados de MSC obtidos a partir de MSCs cultivados sob condições de cultivo hiperóxico padrão (por exemplo, 21% de oxigênio) ou MSCs cultivadas em condições artificiais de cicatrização de feridas (como, por exemplo, 0,1% a cerca de 5% de oxigênio na presença de citocinas inflamatórias, fatores angiogênicos e glicose reduzida).

[0120] Conforme divulgado neste documento, as condições de cicatrização de feridas artificiais simulam as condições de crescimento em feridas reais, onde há uma redução no fornecimento de nutrientes e redução da remoção de resíduos que geralmente é causada por uma interrupção na circulação sanguínea local. Isso cria um ambiente hostil para as células até que novos vasos sanguíneos sejam criados e a circulação sanguínea seja restaurada. Consequentemente, as condições de cicatrização de feridas artificiais usadas para cultivar MSCs podem incluir uma ou mais das seguintes condições de crescimento: redução da disponibilidade de glicose,

redução da tensão de oxigênio, redução do pH e aumento da temperatura.

[0121] Em um aspecto, a disponibilidade de glicose pode ser reduzida em relação ao controle normal. Os meios de cultura modificados para reduzir a glicose, mas não danificar as células, podem estar entre 0 e 50% de redução na glicose, mais preferencialmente entre cerca de 5% e 40% de redução na glicose. Por exemplo, as condições de cultura de cicatrização de feridas artificiais de MSC podem compreender reduzir a glicose de cerca de 1, 2, 3, 4, 5, 6,7, 8 9, 10, 11, 12,13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 40, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49 ou 50%, como uma redução de glicose de cerca de 5% a cerca de 15%, de cerca de 10% a cerca de 20%, de cerca de 15% a cerca de 25%, de cerca de 20 % a cerca de 30%, ou de cerca de 25% a cerca de 35%.

[0122] Em um aspecto, a tensão de oxigênio pode ser reduzida a níveis de oxigênio a condições de hipóxia. O oxigênio atmosférico normal é de aproximadamente 21% e qualquer redução é considerada hipóxica. Assim, em um aspecto, as MSCs podem ser cultivadas em entre 0,0% e 20,9% de oxigênio, de cerca de 0,1% a cerca de 0,5% de oxigênio, de cerca de 0,1% a cerca de 2,0%, de cerca de 0,1% a cerca de 5,0% de oxigênio, de cerca de 0,5% a 5,0%, de cerca de 1,0% a cerca de 10% de oxigênio, cerca de 5,0% a cerca de 10,0% de oxigênio; e de cerca de 10,0% a cerca de 15,0% em condições de cicatrização artificial de feridas. De preferência, durante condições de cultura de cura de ferida de MSC, a tensão de oxigênio está entre cerca de 0,5% e 20,5% de oxigênio, tal como, por exemplo, 0, 0,05, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1,0, 1,1 , 1,2, 1,3,1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,7, 1,9, 2,0, 2,1, 2,2, 2,3, 2,4, 2,5, 2,6, 2,7, 2,8, 2,9, 3,0, 3,1, 3,2, 3,3, 3,4, 3,5, 3,6 , 3,7, 3,8, 3,9, 4,0, 4,1, 4,2, 4,3, 4,4, 4,5, 4,6, 4,7, 4,8, 4,9, 5,0, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9, 7,0, 7,1, 7,2, 7,3, 7,4, 7,5, 7,6, 7,7, 7,8, 7,9, 8,0, 8,1, 8,2, 8,3, 8,4, 8,5, 8,6 , 8,7, 8,8, 8,9, 9,0, 9,1, 9,2, 9,3, 9,4, 9,5, 9,6, 9,7, 9,8, 9,9, 10, 10,5, 11, 11,5, 12, 12,5, 13, 13,5, 14, 14,5, 15, 15,5, 16, 16,5, 17, 17,5, 18, 18,5, 19, 19,5, 20 ou 20,5% de oxigênio.

[0123] O pH também pode ser reduzido em condições de cicatrização artificial de feridas. O pH fisiológico é mantido com muita rigidez e geralmente está muito próximo de um pH neutro = 7,2 ± 0,2 (7,0 - 7,4). No entanto, em uma ferida, o ambiente acídico pode ter um pH = 6,2 ± 0,2 (isto é, um pH de 6,0 a cerca de 6,4). Assim, sob condições de cultura de cicatrização de feridas artificiais, o pH pode ser de cerca de 6,0 a cerca de 7,4, por exemplo, de 6,0 a cerca de 6,4, de cerca de 6,2 a cerca de 6,4, de cerca de 6,2 a cerca de 6,6, de cerca de 6,4 a cerca de 6,6, de cerca de 6,4 a cerca de 6,8, ou de cerca de 6,6 a cerca de 7,0, tal como 6,0, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, 6,5, 6,6, 6,7, 6,8, 6,9, 7,0, 7,1, 7,2, 7,3 ou 7,4.

[0124] Sob condições de cultura de cicatrização artificial de feridas, a temperatura do ambiente de cultura pode ser aumentada para simular aumentos de temperatura no local de uma ferida. A temperatura da homeostase fisiológica é mantida a 37°C (98,6°F). Um ligeiro aumento ou diminuição pode causar alterações significativas no metabolismo celular. Aumentar a temperatura acima de 37°C para qualquer temperatura até cerca de 40°C (104°F) pode criar um ambiente “febril”. Assim, no aspecto, as condições de cultura de cicatrização de feridas artificiais para as MSCs podem compreender de cerca de 35°C a cerca de 39°C, de cerca de 35°C a cerca de 36°C, de cerca de 36°C a cerca de 37°C, de cerca de 37°C a cerca de 38°C, de cerca de 38°C a cerca de 39°C, de cerca de 39°C a cerca de 40°C. Em um aspecto, a temperatura da cultura de cicatrização artificial de feridas pode ser 35,0, 35,1, 35,2, 35,3, 36,4, 35,5, 35,6, 35,7, 35,8, 35,9, 36,0, 36,1, 36,2, 36,3, 36,4, 36,5, 36,6, 36,7, 36,8, 36,9, 37,0,.37,1, 37,2, 37,3, 37,4, 37,5, 37,6, 37,7, 37,8, 37,9, 38,0, 38,1, 38,2, 38,3, 38,4, 38,5, 38,6, 38,7, 38,8, 38,9, 39,0, 39,1, 39,2, 39,3, 39,4, 39,5, 39,6, 39,7, 39,8, 39,9 ou 40,0°C.

[0125] Em um aspecto, as composições de secretoma de MSC (incluindo, mas não se limitando a fator de crescimento de MSC, exossomo de MSC, extratos de MSC e / ou vesículas extracelulares compreendendo composições) podem compreender ainda um revestimento protetor (tal como, por exemplo, um oligossacarídeo crioprotetor e uma solução de proteína) para reduzir a degradação dos fatores de crescimento. É entendido e aqui contemplado que o revestimento protetor pode ser engenheirado como um polímero. "Polímero" refere-se a um composto orgânico de peso molecular relativamente alto, natural ou sintético, cuja estrutura pode ser representada por uma pequena unidade repetida, o monômero. Exemplos não limitativos de polímeros incluem polietileno, borracha, celulose. Os polímeros sintéticos são normalmente formados por polimerização por adição ou condensação de monômeros. O termo "copolímero" refere-se a um polímero formado a partir de duas ou mais unidades de repetição diferentes (resíduos de monômero). A título de exemplo e sem limitação, um copolímero pode ser um copolímero alternativo, um copolímero aleatório, um copolímero em bloco ou um copolímero de enxerto. Também é contemplado que, em certos aspectos, vários segmentos de bloco de um copolímero em bloco podem eles próprios compreender copolímeros. O termo "polímero" abrange todas as formas de polímeros, incluindo, mas não se limitando a, polímeros naturais, polímeros sintéticos, homopolímeros, heteropolímeros ou copolímeros, polímeros de adição, etc. Em um aspecto, a matriz de gel pode compreender copolímeros, copolímeros de bloco, copolímeros de dibloco e / ou copolímeros de tribloco.

[0126] Em um aspecto, o revestimento protetor pode compreender um polímero biocompatível. Em um aspecto, o polímero biocompatível pode ser reticulado. Esses polímeros também podem servir para liberar lentamente o agente de escurecimento adiposo e / ou agente modulador de gordura no tecido. Como utilizado neste documento, os polímeros biocompatíveis incluem, mas não se limitam a polissacarídeos; polipeptídeos hidrofílicos; poli (aminoácidos), como ácido poli-L- glutâmico (PGS), ácido gama-poliglutâmico, ácido poli-L-aspártico, poli-L-serina ou poli-L-lisina; polialquilenoglicóis e óxidos de polialquileno, tais como polietilenoglicol (PEG), polipropilenoglicol (PPG) e poli (óxido de etileno) (PEO); poli(poliol oxietilado); poli (álcool olefínico); polivinilpirrolidona); poli (hidroxialquilmetacrilamida); poli(hidroxialquilmetacrilato); polissacarídeos); poli(hidroxiácidos); poli(álcool vinílico), poli-hidroxiácidos, tais como poli(ácido lático), poli(ácido glicólico) e poli (ácido lático- ácidos coglicólicos); poli-hidroxialcanoatos, tal como poli3-hidroxibutirato ou poli4- hidroxibutirato; policaprolactonas; poli(ortoésteres); polianidridos; poli(fosfazenos); poli(lactídeo-co-caprolactonas); policarbonatos, tais como policarbonatos de tirosina; poliamidas (incluindo poliamidas sintéticas e naturais), polipeptídeos e poli(aminoácidos); poliesteramidas; poliésteres; poli(dioxanonas); poli(alquilenos alquilados); poliéteres hidrofóbicos; poliuretanos; poliéterésteres; poliacetais; policianoacrilatos; poliacrilatos; polimetilmetacrilatos; polissiloxanos; copolímeros de poli(oxietileno)/poli(oxipropileno); policetais; polifosfatos; poli-hidroxivaleratos; oxalatos de polialquileno; succinatos de polialquileno; poli(ácidos maleicos), bem como copolímeros dos mesmos. Polímeros biocompatíveis também podem incluir poliamidas, policarbonatos, polialquilenos, polialquilenoglicóis, óxidos de polialquileno, tereftalatos de polialquileno, álcoois polivinílicos (PVA), metacrilato PVA (m-PVA), éteres polivinílicos, ésteres de polivinil, haletos de polivinil, polivinilpirrolidona, poliglicolídeos, polissiloxanos, poliuretanos e copolímeros dos mesmos, alquil celulose, hidroxialquil celuloses, éteres de celulose, ésteres de celulose, nitro celuloses, polímeros de ésteres acrílicos e metacrílicos, metil celulose, etil celulose, metil celulose, hidroxipropil celulose, hidroxi-propil metil celulose, hidroxibutil metil celulose, acetato de celulose, propionato de celulose, butirato de acetato de celulose, ftalato de acetato de celulose, carboxiletil celulose, triacetato de celulose, sal de sódio de sulfato de celulose, poli (metacrilato de metil), poli (metacrilato de etil), poli (metacrilato de butil), poli (metacrilato de isobutil), poli (metacrilato de hexil), poli(isodecilmetacrilato), poli (lauril metacrilato), poli (fenil metacrilato), poli (metil acrilato), poli (isopropil acrilato), poli (isobutil acrilato), poli (octadecil acrilato), polietileno, polipropileno, poli (etileno glicol), poli (óxido de etileno), poli (tereftalato de etileno), poli (álcoois vinílicos), poli (vinil acetato, poli cloreto de vinil poliestireno e polivinilpirrolidona, derivados dos mesmos, copolímeros lineares e ramificados e copolímeros em bloco dos mesmos, e misturas dos mesmos. Polímeros biodegradáveis exemplificativos incluem poliésteres, poli(ortoésteres), poli(etileno aminas), poli(caprolactonas), poli(hidroxibutiratos), poli(hidroxivaleratos), polianidridos, poli(ácidos acrílicos), poliglicolídeos, poli (uretanos), policarbonatos, ésteres de polifosfato, polifospliazenos, derivados dos mesmos, copolímeros lineares e ramificados e copolímeros em bloco dos mesmos, e misturas dos mesmos.

[0127] Em algumas modalidades, o revestimento protetor compreende a construção de carboidratos de monossacarídeos, bem como polímeros de carboidratos, como dissacarídeos ou polissacarídeos, incluindo, mas não se limitando a poli ou dissacarídeos não redutores, bem como qualquer combinação dos mesmos. Exemplos de carboidratos que podem ser usados no revestimento protetor compreendem Glicose, Aldoses (D-Allose, D-Altrose, D-Manose, etc.), Glicopiranose, Penta-hidroxi-hexanal, α-D-Glicopiranosil-D-glicose, α-D- Glicopiranosil-di-hidratado, Polímero de unidades β-D-Glicopiranosil, β-D-Frutofuranosil α-D-glicopiranosídeo (anidro / di-hidratado), β-D-Galactopiranosil-D-glicose, α-D-Glicopiranosil-α-D- glicopiranosídeo (anidro / di-hidratado), Galactose, Pentoses (Ribose, xilose, lixose), Dextrose, Dodecacarbono monodeca-hidratado, Frutose, Sacarose, Lactose, Maltose, Trealose, Agarose, D-galactosil-β- (1-4) -anidro-L-galactosil, Celulose, Polímero de unidades β-D-Glicopiranosil e Amido, bem como, Álcoois poli-hídricos, Poliálcoois, Alditóis, Eritritol, Glicitóis, Glicerol, Xilitol e Sorbitol.

[0128] Em algumas modalidades, o revestimento protetor contém poliésteres ou polianidridos biocompatíveis e / ou biodegradáveis, como poli (ácido lático), poli (ácido glicólico) e poli (ácido lático-co-glicólico). As partículas podem conter um mais dos seguintes poliésteres: homopolímeros incluindo unidades de ácido glicólico, aqui referidas como "PGA", e unidades de ácido lático, tais como poli-L-ácido lático, poli- D-ácido lático, poli-D,L-ácido lático, poli-L-lactídeo, poli-D-lactídeo e poli-D,L-lactídeo 5 aqui referidos coletivamente como "PLA", e unidades de caprolactona, tais como poli(e-caprolactona), coletivamente referidas como aqui como "PCL"; e copolímeros incluindo unidades de ácido lático e ácido glicólico, tais como várias formas de poli(ácido lático-co-ácido glicólico) e poli(lactídeo-co-glicolídeo) caracterizados pela razão de ácido láctico:ácido glicólico, coletivamente referidos aqui como "PLGA"; e poliacrilatos e derivados dos mesmos. Polímeros exemplificativos também incluem copolímeros de polietileno glicol (PEG) e os poliésteres acima mencionados, tais como várias formas de copolímeros PLGA-PEG ou PLA-PEG, coletivamente referidos aqui como "polímeros PEGuilados". Em certas modalidades, a região PEG pode ser associada covalentemente ao polímero para produzir "polímeros PEGuilados" por um ligante clivável. Em um aspecto, o polímero compreende pelo menos 60, 65, 70, 75, 80, 85, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98 ou 99 por cento de grupos pendentes de acetal.

[0129] Os copolímeros tribloco divulgados neste documento compreendem um polímero de núcleo, tal como, por exemplo, polietileno glicol (PEG), acetato de polivinil, álcool polivinílico, polivinil pirrolidona (PVP), óxido de polietileno (PEO), poli(vinil pirrolidona-co-acetato de vinil), polimetacrilatos, éteres alquílicos de polioxietileno, óleos de rícino de polioxietileno, policaprolactama, ácido polilático, ácido poliglicólico, ácido poli(lático-glicólico), ácido poli(lático-co-glicólico) (PLGA), derivados de celulose, tais como hidroximetilcelulose, hidroxipropilcelulose e semelhantes.

[0130] Exemplos de copolímeros dibloco que podem ser usados nos revestimentos de proteção aqui divulgados compreendem um polímero, tal como, por exemplo, polietileno glicol (PEG), acetato de polivinil, álcool polivinílico (PVA), polivinil pirrolidona (PVP), óxido de polietileno (PEO), poli(vinilpirrolidona-co-acetato de vinil), polimetacrilatos, éteres alquílicos de polioxietileno, óleos de rícino polioxietileno, policaprolactama, ácido polilático, ácido poliglicólico, ácido poli(láctico-glicólico), ácido poli(co-glicólico lático) (PLGA).

[0131] Em um aspecto, o revestimento protetor contém (isto é, as composições encapsuladas, as encapsuladas podem compreender ainda lecitina ou lecitina hidrolisada como um transportador ou como material de encapsulamento. Como utilizado neste documento, os revestimentos de lecitina e / ou lecitina hidrolisada incluem revestimentos compreendendo fosfatidil colina, fosfatidil inositol, fosfatidil etanolamina, fosfatidilserina e ácido fosfatídico. As fontes de lecitina podem ser fontes naturais ou animais.

[0132] Em um aspecto, qualquer um dos polímeros, monossacarídeos, dissacarídeos ou polissacarídeos usados para formar o revestimento protetor formado pela colocação do aditivo MSC em uma solução encapsulante pode estar em uma concentração apropriada para formar o revestimento protetor. Por exemplo, polímeros, monossacarídeos, dissacarídeos ou polissacarídeos podem estar em qualquer concentração entre 0,01 mM e concentração de 10,0 M, por exemplo, de cerca de 0,01 M a cerca de 0,1 M, de cerca de 0,1 mM a cerca de 1,0 M, de cerca de 1,0 M a cerca de 10,0 milhões. Concentrações exemplificativas incluem 0,01, 0,02,

0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,4, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 2, 3, 4, 5, 6 , 7, 8, 9, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 225, 250 , 275, 300, 325, 350, 375, 400, 450, 500, 600, 700, 800, 900mM, 1, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,6, 1,7, 1,8, 1,9, 2, 3, 4 , 5, 6, 7, 8, 9, 10M.

[0133] Como mostrado nas Figuras 1 e 2, os exossomas e vesículas extracelulares nas composições de secretoma de MSC divulgadas foram produzidas.

[0134] Em um aspecto, é entendido e aqui contemplado que uma maneira de tratar uma ferida é através da administração das composições de secretoma de MSC (incluindo, mas não se limitando a fator de crescimento de MSC, exossomo de MSC, extratos de MSC e / ou vesículas extracelulares compreendendo composições) por via subcutânea, por via intramuscular, intravenosa, tópica (como, por exemplo, através do uso de pomadas, cremes e / ou pomadas), mas também por impregnação de stents, esponjas, matrizes, andaimes, bandagens, curativos, suturas, enxertos, fitas cirúrgicas, adesivos cirúrgicos e / ou grampos com as composições de secretoma de MSC. Assim, em um aspecto, são divulgados aqui stents medicamentosos, andaimes, esponjas, matrizes, bandagens adesivas, curativos para feridas, enxertos, fitas cirúrgicas, suturas, pomadas, cremes ou adesivos para feridas compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz da composição de secretoma de MSC. As composições de secretoma de MSC (incluindo, mas não se limitando a fator de crescimento de MSC, exossomo de MSC, extratos de MSC e / ou vesículas extracelulares compreendendo composições), como observado acima, podem ser administradas topicamente e aplicadas no rosto, pescoço, mãos ou qualquer outra parte desejada do corpo. Quando aplicada a uma bandagem adesiva, curativo para feridas, enxertos, fita cirúrgica, sutura, andaime, matriz, esponja ou stent, a composição do secretoma do MSC pode ser aplicada como um pó.

[0135] Em um aspecto, as composições de secretoma de MSC (incluindo, mas não se limitando a fator de crescimento de MSC, exossomo de MSC, extratos de MSC e / ou vesículas extracelulares compreendendo composições) divulgadas neste documento podem compreender quaisquer ingredientes conhecidos tipicamente encontrados nos campos de cicatrização de feridas, tais como óleos, ceras ou outras substâncias graxas padrão, ou agentes gelificantes convencionais e / ou espessantes; emulsificantes; agentes hidratantes; emolientes; protetores solares; agentes ativos hidrofílicos ou lipofílicos, tais como ceramidas; agentes para combater os radicais livres; bactericidas; agentes sequestrantes; conservantes; agentes basificantes ou acidificantes; fragrâncias; tensoativos; enchimentos; produtos naturais ou extratos de produtos naturais, como aloe vera ou extrato de chá verde; vitaminas; ou materiais de coloração. Outros ingredientes que podem ser combinados com o pó podem incluir um antioxidante, que pode ser selecionado de uma variedade de antioxidantes. Antioxidantes adequados incluem vitaminas, tais como Vitamina C (L-Ascorbato, Ascorbato-2 Fosfato sal de magnésio, Ascorbil Palmitato, Tetra-hexildecil Ascorbato), Vitamina E (Tocotrienol), Vitamina A (retinol, retinal, ácido retinoico, provitamina A carotenoides, tais como beta-caroteno), N-acetil glucosamina ou outros derivados de glucosamina. Outros ingredientes podem incluir pelo menos um ácido graxo essencial, como ácidos graxos poli-insaturados Ω-3, Ω-6 e Ω-9, como ácido linoleico (LA), ácido gama-linoleico (GLA), ácido alfa-linoleico (ALA), ácido di-homo-y-linolênico (DGLA), ácido araquidônico (ARA) e outros. Os ácidos graxos podem ser derivados de várias fontes, incluindo óleo de prímula, óleo de groselha preta, óleo de borragem ou sementes de cártamo modificadas com GLA. Outros ingredientes podem incluir uma matriz de fibrina rica em plaquetas, pelo menos um ingrediente para apoiar a produção de ECM e a produção de ácido hialurônico, como N-acetil glicosamina ou outros derivados de glicosamina, ácido hialurônico de peso molecular ultrabaixo (ULMW), sulfato de condroitina, ou sulfato de queratina.

[0136] É entendido e aqui contemplado que as composições de secretoma de MSC divulgadas neste documento podem fornecer rejuvenescimento, aumento e tecido cutâneo melhorado ou restaurado para a cicatrização de feridas. A composição também pode ser usada como injetável no tratamento de artrite articular e discos espinhais degenerados. Além disso, as modalidades da composição podem não exigir a inclusão de fatores de crescimento adicionais, como insulina, fatores de crescimento semelhantes à insulina, hormônios da tireoide, fatores de crescimento de fibroblastos, estrogênio, ácido retinoico e semelhantes. Em algum aspecto, as composições de fator de crescimento de células-tronco divulgadas podem compreender ingredientes ativos adicionais, incluindo, mas não se limitando a antibióticos, agentes anti-acne, lipossomas, antioxidantes, matrizes de fibrina ricas em plaquetas, analgésicos, anti- inflamatórios, bem como, fatores de crescimento adicionais, tais como insulina, fatores de crescimento semelhantes à insulina, hormônios da tireoide, fatores de crescimento de fibroblastos, estrogênio, ácido retinoico e semelhantes. Tais ingredientes ativos adicionais podem ser misturados com o fator de crescimento de células-tronco e composições de vesículas extracelulares divulgadas neste documento, bem como meio condicionado de MSC, lisatos de MSC e produtos derivados de MSC e, em seguida, descongelados ou dissolvidos, misturados ou suspensos em uma mistura de álcoois de lanolina emulsificantes, ceras e óleos ou uma mistura de vaselina ou óleo mineral, um composto de amônio quaternário, um álcool graxo e um emoliente de éster graxo ou loções que são substancialmente semelhantes em composição. Transportadores farmacêuticos / Distribuição de produtos farmacêuticos

[0137] Conforme descrito acima, as composições também podem ser administradas in vivo em um transportador farmaceuticamente aceitável. Por “farmaceuticamente aceitável” entende-se um material que não é biologicamente ou de outro modo indesejável, isto é, o material pode ser administrado a um sujeito juntamente com o ácido nucleico ou vetor, sem causar nenhum efeito biológico indesejável ou interagir de uma maneira prejudicial com qualquer dos outros componentes da composição farmacêutica em que está contido. O transportador seria naturalmente selecionado para minimizar qualquer degradação do ingrediente ativo e minimizar quaisquer efeitos secundários adversos no sujeito, como seria bem conhecido pelos versados na técnica.

[0138] As composições podem ser administradas por via oral, parenteral (por exemplo, por via intravenosa), por injeção intramuscular, por injeção intraperitoneal, transdérmica, extracorpórea, tópica ou semelhantes, incluindo administração intranasal tópica ou administração por inalante. Como utilizado neste documento, "administração intranasal tópica" significa distribuição das composições no nariz e nas passagens nasais através de uma ou ambas as narinas e pode compreender distribuir por um mecanismo de pulverização ou mecanismo de gotícula, ou através de aerossolização do ácido nucleico ou vetor. A administração das composições por inalante pode ser feita através do nariz ou da boca por meio de um mecanismo de pulverização ou gota. A distribuição também pode ser feita diretamente em qualquer área do sistema respiratório (por exemplo, pulmões) por meio de intubação. A quantidade exata das composições necessárias variará de sujeito para sujeito, dependendo da espécie, idade, peso e condição geral do indivíduo, gravidade do distúrbio alérgico a ser tratado, do ácido nucleico ou vetor específico usado, seu modo de administração e semelhante. Assim, não é possível especificar uma quantidade exata para cada composição. Entretanto, uma quantidade apropriada pode ser determinada por um versado na técnica usando apenas experimentação de rotina, de acordo com os ensinamentos deste documento.

[0139] A administração parenteral da composição, se usada, é, de modo geral, caracterizada por injeção. Os injetáveis podem ser preparados em formas convencionais, seja como soluções líquidas ou suspensões, formas sólidas adequadas para solução ou suspensão em líquido antes da injeção ou como emulsões. Uma abordagem mais recente revisada para a administração parenteral envolve o uso de um sistema de liberação lenta ou liberação sustentada, de modo que uma dosagem constante seja mantida. Ver, por exemplo, Patente U.S. 3.610.795, que é aqui incorporada por referência.

[0140] Os materiais podem estar em solução, suspensão (por exemplo, incorporados em micropartículas, lipossomas ou células). Estes podem ser direcionados para um tipo celular particular através de anticorpos, receptores ou ligantes do receptor. As seguintes referências são exemplos da utilização desta tecnologia para direcionar proteínas específicas para o tecido tumoral (Senter, et al., Bioconjugate Chem., 2:447-451, (1991); Bagshawe, K.D., Br. J. Cancer, 60:275-281, (1989); Bagshawe, et al., Br. J. Cancer, 58:700-703, (1988); Senter, et al., Bioconjugate Chem., 4:3-9, (1993); Battelli, et al., Cancer Immunol. Immunother., 35:421-425, (1992); Pietersz and McKenzie, Immunolog. Reviews, 129:57-80, (1992); and Roffler, et al., Biochem. Pharmacol, 42:2062-2065, (1991)). Veículos, tais como lipossomas conjugados com anticorpo “oculto” e outros (incluindo direcionamento de fármacos mediado por lipídeos para carcinoma colônico), direcionamento de DNA direcionado ao receptor através de ligantes específicos de células, direcionamento de tumor direcionado por linfócitos e direcionamento retroviral terapêutico altamente específico de células de glioma murino in vivo. As seguintes referências são exemplos da utilização desta tecnologia para direcionar proteínas específicas para o tecido tumoral (Hughes et al., Cancer Research, 49:6214-6220, (1989); and Litzinger and Huang, Biochimica et Biophysica Acta, 1104:179-187, (1992)). Em geral, os receptores estão envolvidos em caminhos de endocitose, sejam constitutivos ou induzidos por ligantes. Estes receptores agrupam-se em poços revestidos de clatrina, entram na célula via vesículas revestidas de clatrina, passam através de um endossomo acidificado no qual os receptores são separados e então reciclam para a superfície celular, ficam armazenados intracelularmente ou são degradados nos lisossomos. Os caminhos de internalização servem uma variedade de funções, tais como absorção de nutrientes, remoção de proteínas ativadas, eliminação de macromoléculas, entrada oportunista de vírus e toxinas, dissociação e degradação do ligando e regulação no nível do receptor. Muitos receptores seguem mais de um caminho intracelular, dependendo do tipo de célula, concentração do receptor, tipo de ligante, valência do ligante e concentração do ligante. Os mecanismos moleculares e celulares da endocitose mediada por receptores foram revistos (Brown and Greene, DNA and Cell Biology 10:6, 399-409 (1991)). Transportadores Farmacêuticos Aceitáveis

[0141] As composições, incluindo anticorpos, podem ser utilizadas terapeuticamente em combinação com um transportador farmaceuticamente aceitável.

[0142] Os transportadores adequados e as suas formulações são descritos em Remington: The Science and Practice of Pharmacy (19th ed.) ed. A.R. Gennaro, Mack Publishing Company, Easton, PA 1995. Tipicamente, uma quantidade apropriada de um sal farmaceuticamente aceitável é utilizada na formulação para tornar a formulação isotônica. Exemplos do transportador farmaceuticamente aceitável incluem, entre outros, solução salina, solução de Ringer e solução de dextrose. O pH da solução é preferencialmente de cerca de 5 a cerca de 8 e mais preferivelmente de cerca de 7 a cerca de 7,5. Outros transportadores incluem preparações de liberação sustentada, tais como matrizes semipermeáveis de polímeros hidrofóbicos sólidos contendo o anticorpo, matrizes essas que estão na forma de artigos moldados, por exemplo, filmes, lipossomas ou micropartículas. Será evidente para os versados na técnica que certos carreadores podem ser mais preferíveis dependendo, por exemplo, da via de administração e da concentração da composição a ser administrada.

[0143] Os transportadores farmacêuticos são conhecidos pelos versados na técnica. Estes, mais tipicamente, seriam transportadores padrão para administração de drogas a humanos, incluindo soluções como água estéril, solução salina e soluções tamponadas em pH fisiológico. As composições podem ser administradas intramuscular ou subcutaneamente. Outros compostos serão administrados de acordo com procedimentos padrão utilizados pelos versados na técnica.

[0144] As composições farmacêuticas podem incluir transportadores, espessantes, diluentes, tampões, conservantes, agentes tensoativos e semelhantes, além da molécula de escolha. Composições farmacêuticas também podem incluir um ou mais ingredientes ativos, tais como agentes antimicrobianos, agentes anti- inflamatórios, anestésicos e semelhantes.

[0145] A composição farmacêutica pode ser administrada de várias maneiras, dependendo se o tratamento local ou sistêmico é desejado e da área a ser tratada. A administração pode ser por via tópica (incluindo por via oftálmica, vaginal, retal, intranasal), oralmente, por inalação ou parenteralmente, por exemplo, por gotejamento intravenoso, injeção subcutânea, intraperitoneal ou intramuscular. Os anticorpos divulgados podem ser administrados por via intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, subcutânea, intracavitária ou transdérmica.

[0146] As preparações para administração parenteral incluem soluções, suspensões e emulsões aquosas ou não aquosas estéreis. Exemplos de solventes não aquosos são propileno glicol, polietileno glicol, óleos vegetais como óleo de oliva e ésteres orgânicos injetáveis como oleato de etil. Os transportadores aquosos incluem água, soluções alcoólicas / aquosas, emulsões ou suspensões, incluindo solução salina e meio tamponado. Os veículos parenterais incluem solução de cloreto de sódio, dextrose de Ringer, dextrose e cloreto de sódio, Ringer lactado ou óleos fixos. Os veículos intravenosos incluem reabastecedores de fluidos e nutrientes, reabastecedores de eletrólitos (como os baseados em dextrose de Ringer) e semelhantes. Os conservantes e outros aditivos também podem estar presentes, tais como, por exemplo, antimicrobianos, antioxidantes, agentes quelantes e gases inertes e semelhantes.

[0147] Formulações para administração tópica podem incluir unguentos, loções, cremes, géis, gotas, supositórios, aspersões, líquidos e pós. Os transportadores, bases aquosas, em pó ou oleosas, espessantes e semelhantes farmacêuticos convencionais podem ser necessários ou desejáveis.

[0148] As composições para administração oral incluem pós ou grânulos, suspensões ou soluções em água ou meio não aquoso, cápsulas, sachês ou comprimidos. Espessantes, aromatizantes, diluentes, emulsionantes, auxiliares de dispersão ou aglutinantes podem ser desejáveis.

[0149] Algumas das composições podem potencialmente ser administradas como um sal de adição de ácido ou base farmaceuticamente aceitável, formado por reação com ácidos inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido perclórico, ácido nítrico, ácido tiociânico, ácido sulfúrico e ácido fosfórico e ácidos orgânicos, tais como ácido fórmico, ácido acético, ácido propílico, ácido glicólico, ácido lático, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido málico, ácido succínico, ácido maleico e ácido fumárico ou por reação com uma base inorgânica, tais como hidróxido de sódio, hidróxido de amônio, hidróxido de potássio e bases orgânicas, tais como mono-, di-, trialquil e arilaminas e etanolaminas substituídas. Usos Terapêuticos

[0150] Dosagens eficazes e programação para administração das composições podem ser determinadas empiricamente, e fazer tais determinações está na habilidade na técnica. As faixas de dosagem para a administração das composições são as grandes o suficiente para produzir o efeito desejado no qual os distúrbios dos sintomas do distúrbio são afetados. A dosagem não deve ser tão grande que cause efeitos colaterais adversos, como reações cruzadas indesejadas, reações anafiláticas e semelhantes. Geralmente, a dosagem varia com a idade, condição, sexo e extensão da doença no paciente, via de administração ou se outros medicamentos estão incluídos no regime e pode ser determinada por um versado na técnica. A dosagem pode ser ajustada pelo médico do indivíduo na eventualidade de qualquer contraindicação. A dosagem pode variar e pode ser administrada em uma ou mais administrações de dose diária, por um ou vários dias. Orientação sobre dosagens apropriadas para dadas classes de produtos farmacêuticos pode ser encontrada na literatura. Por exemplo, a orientação na seleção de doses apropriadas para anticorpos pode ser encontrada na literatura sobre usos terapêuticos de anticorpos, por exemplo, Handbook of Monoclonal Antibodies, Ferrone et al., eds., Noges Publications, Park Ridge, N.J., (1985) ch. 22 and pp. 303-357; Smith et al., Antibodies in Human Diagnosis and Therapy, Haber et al., eds., Raven Press, New York (1977) pp. 365-

389. Uma dosagem diária típica do anticorpo usado sozinho pode variar de cerca de 1 μg/kg a até 100 mg/kg de peso corporal ou mais por dia, dependendo dos fatores mencionados acima.

[0151] Os exemplos anteriores são apresentados de modo a proporcionar aos versados na técnica uma divulgação completa e descrição de como os compostos, composições, artigos, dispositivos e/ou métodos aqui reivindicados são feitos e avaliados, e se destinam a ser puramente exemplificativos e não se destinam a limitar a divulgação. Têm sido feitos esforços para assegurar a precisão em relação aos números (por exemplo, quantidades, temperatura, etc), mas alguns erros e desvios devem ser considerados. Salvo indicação em contrário, as partes são partes por peso, a temperatura está em qC ou está à temperatura ambiente, e a pressão está em ou perto da atmosférica. Referências

[0152] Alam M, Bertolini M, Gherardini J, Keren A, Ponce L, Chéret J, Alenfall J, Dunér P, Nilsson AH, Gilhar A, Paus R. An osteopontin-derived peptide inhibits human hair growth at least in part by decreasing fibroblast growth factor-7 production in outer root sheath keratinocytes. Br J Dermatol. 2019

[0153] Aversa A, Basciani S, Visca P, Arizzi M, Gnessi L, Frajese G, Fabbri A. Platelet-derived growth factor (PDGF) and PDGF receptors in rat corpus cavernosum: changes in expression after transient in vivo hypoxia. J Endocrinol. 2001 Aug;170(2):395-402.

[0154] Batch JA, Mercuri FA, Werther GA. Identification and localization of insulin- like growth factor-binding protein (IGFBP) messenger RNAs in human hair follicle dermal papilla. J Invest Dermatol. 1996 Mar;106(3):471-5.

[0155] Bertolini M, Zilio F, Rossi A, et al. Abnormal interactions between perifollicular mast cells and CD8+ T-cells may contribute to the pathogenesis of alopecia areata. PLoS ONE. 2014;9:e94260.

[0156] Boraschi D, Dinarello CA. IL-18 in autoimmunity: review. Eur Cytokine Netw. 2006;17:224Ǧ 252. Fouad NA, Baraka EA, Hassan WA. Interleukin-18 gene polymorphisms in systemic lupus erythematosus: relation to disease status. Egypt J Immunol. 2014;21:1Ǧ 12.

[0157] Botchkarev VA, Fessing MY. Edar signaling in the control of hair follicle development. J Investig Dermatol Symp Proc. 2005 Dec;10(3):247-51.

[0158] Burnett AL, Sezen SF, Hoke A, Caggiano AO, Iaci J, Lagoda G, Musicki B, Bella AJ. GGF2 is neuroprotective in a rat model of cavernous nerve injury-induced erectile dysfunction. J Sex Med. 2015 Apr;12(4):897-905.

[0159] C Mazaheri N, Peymani M, Galehdari H, Ghaedi K, Ghoochani A, Kiani- Esfahani A, Nasr-Esfahani MH. Ameliorating Effect of Osteopontin on H(2)O(2)- Induced Apoptosis of Human Oligodendrocyte Progenitor Cells. Cell Mol Neurobiol. 2018 May;38(4):891-899.

[0160] Carneiro FS, Webb RC, Tostes RC. Emerging role for TNF-α in erectile dysfunction. J Sex Med. 2010 Dec;7(12):3823-34.

[0161] Celik SD, Ates O. Genetic analysis of interleukin 18 gene polymorphisms in alopecia areata. J Clin Lab Anal. 2018 Jun;32(5):e22386.

[0162] Chen CC, Murray PJ, Jiang TX, Plikus MV, Chang YT, Lee OK, Widelitz RB, Chuong CM. Regenerative hair waves in aging mice and extra-follicular modulators follistatin, dkk1, and sfrp4. J Invest Dermatol. 2014 Aug;134(8):2086-2096.

[0163] CHUN HOU, YONG MIAO, XUE WANG, CHAOYUE CHEN, BOJIE LIN, ZHIQI HU Expression of matrix metalloproteinases and tissue inhibitor of matrix metalloproteinases in the hair cycle Exp Ther Med. 2016 Jul; 12(1): 231–237. Published online 2016 May 9.

[0164] Epifanova MV, Chalyi ME, Krasnov AO. [Investigation of mechanisms of action of growth factors of autologous platelet-rich plasma used to treat erectile dysfunction]. Urologiia. 2017 Sep;(4):46-48. Russian.

[0165] Gilhar A. Collapse of immune privilege in alopecia areata: coincidental or substantial? J Invest Dermatol. 2010 Nov;130(11):2535-7.

[0166] Giugliano F, Esposito K, Di Palo C, Ciotola M, Giugliano G, Marfella R, D'Armiento M, Giugliano D. Erectile dysfunction associates with endothelial dysfunction and raised proinflammatory cytokine levels in obese men. J Endocrinol Invest. 2004 Jul-Aug;27(7):665-9.

[0167] Hotaling JM, Waggott DR, Goldberg J, Jarvik G, Paterson AD, Cleary PA, Lachin J, Sarma A, Wessells H; DCCT/EDIC Research Group. Pilot genome-wide association search identifies potential loci for risk of erectile dysfunction in type 1 diabetes using the DCCT/EDIC study cohort. J Urol. 2012 Aug;188(2):514-20.

[0168] Johnston JJ, Sanchez-Contreras MY, Keppler-Noreuil KM, Sapp J, Crenshaw M,Finch NA, Cormier-Daire V, Rademakers R, Sybert VP, Biesecker LG. A Point Mutation in PDGFRB Causes Autosomal-Dominant Penttinen Syndrome. Am J Hum Genet. 2015 Sep 3;97(3):465-74.

[0169] Kavoussi PK, Heberlein K, Straub AC, Lowe GJ, Oliver JL, Smith RP, Steers WD, Annex BH, Isakson BE, Lysiak JJ. Recombinant PAI-1 therapy restores myoendothelial junctions and erectile function in PAI-1-deficient mice. Andrologia. 2015 Dec;47(10):1147-52.

[0170] Kawabe TT, Rea TJ, Flenniken AM, Williams BR, Groppi VE, Buhl AE. Localization of TIMP in cycling mouse hair. Development. 1991 Apr;111(4):877-9

[0171] Kim SK, Park HJ, Chung JH, et al. Association between interleukin 18 polymorphisms and alopecia areata in Koreans. J Interferon Cytokine Res.

2014;34:349Ǧ 353.

[0172] Kim SK, Park HJ, Chung JH, et al. Association between interleukin 18 polymorphisms and alopecia areata in Koreans. J Interferon Cytokine Res. 2014;34:349Ǧ 353.

[0173] Koizumi H, Sato-Matsumura KC, Nakamura H, Shida K, Kikkawa S, Matsumoto M, Toyoshima K, Seya T. Distribution of IL-18 and IL-18 receptor in human skin: various forms of IL-18 are produced in keratinocytes. Arch Dermatol Res. 2001 Jul;293(7):325-33. PubMed PMID: 11550805.

[0174] Lécuyer MA, Saint-Laurent O, Bourbonnière L, Larouche S, Larochelle C, Michel L, Charabati M, Abadier M, Zandee S, Haghayegh Jahromi N, Gowing E, Pittet C, Lyck R, Engelhardt B, Prat A. Dual role of ALCAM in neuroinflammation and blood- brain barrier homeostasis. Proc Natl Acad Sci U S A. 2017 Jan 24;114(4):E524-E533.

[0175] McDowall M, Edwards NM, Jahoda CA, Hynd PI. The role of activins and follistatins in skin and hair follicle development and function. Cytokine Growth Factor Rev. 2008 Oct Dec;19(5-6):415-26.

[0176] Park BS, Kim WS, Choi JS, Kim HK, Won JH, Ohkubo F, Fukuoka H. Hair growth stimulated by conditioned medium of adipose-derived stem cells is enhanced by hypoxia: evidence of increased growth factor secretion. Biomed Res. 2010 Feb;31(1):27-34

[0177] Qian SQ, Qin F, Zhang S, Yang Y, Wei Q, Wang R, Yuan JH. Vacuum therapy prevents corporeal veno-occlusive dysfunction and penile shrinkage in a cavernosal nerve injured rat model. Asian J Androl. 2019 Jun 25.

[0178] Sivalingam SP, Yoon KH, Koh DR, Fong KY. Single-nucleotide polymorphisms of the interleukin-18 gene promoter region in rheumatoid arthritis patients: protective effect of AA genotype. Tissue Antigens. 2003;62:498Ǧ 504.

[0179] Suárez-Fariñas M, Ungar B, Noda S, Shroff A, Mansouri Y, Fuentes- Duculan J, Czernik A, Zheng X, Estrada YD, Xu H, Peng X, Shemer A, Krueger JG, Lebwohl MG, Guttman-Yassky E. Alopecia areata profiling shows TH1, TH2, and IL- 23 cytokine activation without parallel TH17/TH22 skewing. J Allergy Clin Immunol. 2015 Nov;136(5):1277-87.

[0180] Thelen K, Jaehrling S, Spatz JP, Pollerberg GE. Depending on its nano spacing,ALCAM promotes cell attachment and axon growth. PLoS One. 2012;7(12):e40493.

[0181] Vanamee ÉS, Faustman DL. Structural principles of tumor necrosis factor superfamily signaling. Sci Signal. 2018 Jan 2;11(511).

[0182] Wang G, Dai D, Chen X, Yuan L, Zhang A, Lu Y, Zhang P. Upregulation of neuregulin-1 reverses signs of neuropathic pain in rats. Int J Clin Exp Pathol. 2014 Aug 15;7(9):5916-21.

[0183] Wang X, Chen H, Tian R, Zhang Y, Drutskaya MS, Wang C, Ge J, Fan Z, Kong D, Wang X, Cai T, Zhou Y, Wang J, Wang J, Wang S, Qin Z, Jia H, Wu Y, Liu J, Nedospasov SA, Tredget EE, Lin M, Liu J, Jiang Y, Wu Y. Macrophages induce AKT/β- catenin-dependent Lgr5(+) stem cell activation and hair follicle regeneration through TNF. Nat Commun. 2017 Mar 27;8:14091.

[0184] Yan JF, Huang WJ, Zhao JF, Fu HY, Zhang GY, Huang XJ, Lv BD. The platelet-derived growth factor receptor/STAT3 signaling pathway regulates the phenotypic transition of corpus cavernosum smooth muscle in rats. PLoS One. 2017 Feb 28;12(2):e0172191.

[0185] Yepes M. Urokinase-type plasminogen activator is a modulator of synaptic plasticity in the central nervous system: implications for neurorepair in the ischemic brain. Neural Regen Res. 2020 Apr;15(4):620-624.

[0186] Zhou F, Hui Y, Xu Y, Lei H, Yang B, Guan R, Gao Z, Xin Z, Hou J. Effects of adipose-derived stem cells plus insulin on erectile function in streptozotocin-induced diabetic rats. Int Urol Nephrol. 2016 May;48(5):657-69.

[0187] Zhou J, Ling J, Wang Y, Shang J, Ping F. Cross-talk between interferon- gamma and interleukin-18 in melanogenesis. J Photochem Photobiol B. 2016. Oct;163:133-43.

[0188] Zhou J, Shang J, Song J, Ping F. Interleukin-18 augments growth ability of primary human melanocytes by PTEN inactivation through the AKT/NF-κB pathway. Int J Biochem Cell Biol. 2013;45:308Ǧ 331.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método para criar uma composição de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir ou reverter um problema de cabelo ou pele ou tratar a disfunção erétil, o método caracterizado pelo fato de que compreende: identificar o cabelo, cor da pele, tipo de pele, raça, etnia de um usuário final; obter células mesenquimais da pele (MSCs) de um doador-alvo com o mesmo tipo de cabelo, cor e / ou etnia ou não suscetível à disfunção erétil que o usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca terá distúrbio do cabelo, distúrbio da pele ou disfunção erétil e pode ser específico de gênero, raça e etnia; preparar uma preparação de pó de MSC, queratinócito e fator de crescimento de melanócito a partir das MSCs obtidas, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas sob condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas sob cicatrização severa de feridas condições; e adicionar a preparação em pó a uma base, em que a composição de tratamento compreende um membro selecionado do grupo que consiste em uma composição tópica e uma composição injetável.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o cabelo ou distúrbio de pele compreende cabelos grisalhos, calvície ou descoloração da pele.

3. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que a descoloração da pele resulta de vitiligo, melasma, nevo de morango ou rosácea.

4. Método, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a composição de tratamento corrige a descoloração da pele.

5. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que a calvície compreende calvície de padrão masculino, alopecia androgenética, alopecia areata, alopecia cicatricial, eflúvio telógeno ou calvície de padrão feminino.

6. Método, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que a composição de tratamento estimula a ativação dos folículos capilares para promover o crescimento do cabelo.

7. Método, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que a composição de tratamento estimula a produção de pigmentação do cabelo.

8. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o SNP compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL-23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM-2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF-BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM).

9. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o SNP compreende o IL-18 SNP rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C).

10. Composição de tratamento para tratar, inibir, reduzir, prevenir ou reverter um problema de cabelo ou pele, a composição, caracterizada pelo fato de que compreende: uma base de composição; e uma preparação em pó de células-tronco mesenquimais (MSC), queratinócitos, e / ou fator de crescimento de melanócitos derivada de um doador com o mesmo tipo de cabelo, cor de cabelo, tipo de cabelo e / ou cor de cabelo de um usuário final, mas com um perfil de polimorfismo de nucleotídeo único (SNP) que indica que o doador nunca terá o distúrbio do cabelo e / ou distúrbio da pele e pode ser específico de gênero, raça e etnia, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas em condições de cultura hiperóxica normais e células cultivadas em condições de cicatrização de feridas severas.

11. Método, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o SNP compreende um ou mais SNPs presentes em um ou mais genes que codificam Interleucina 18 (IL-18), receptor de Fator de Crescimento Derivado de Plaquetas (PDGF) (PDGFR) B (PDGFR-B), Inibidores de Tecido de Metaloprotease (TIMP) 1 (TIMP-1), TIMP-2, IL-23, Activina A, molécula de adesão intracelular (ICAM- 2), Inibidor do Ativador de Plasminogênio (PAI-1), Osteopontina (OPN), Insulina, proteína quatro de ligação ao fator de crescimento de insulina (IGF-BP4), receptor de Fator de Necrose Tumoral (TNF) (TNF-R), Neuregulina-1 B1 (NRG1-B1), Receptor de Ativador de Plasminogênio tipo Uroquinase (uPAR), receptor de Ectodisplasina A2 (XEDAR), folistatina e / ou molécula de adesão de células leucocitárias ativadas (ALCAM).

12. Composição de tratamento, de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que o SNP compreende o SNP IL-18 rs1946518 (−607C>A) e / ou rs187238 (−137G>C)

13. Composição de tratamento, de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que o distúrbio capilar compreende calvície ou cabelos grisalhos.

14. Composição de tratamento, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que a calvície compreende calvície de padrão masculino, alopecia androgenética, alopecia areata, alopecia cicatricial, eflúvio telógeno ou calvície de padrão feminino.

15. Método de tratamento de um distúrbio capilar, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um sujeito qualquer uma das composições de tratamento como definidas em qualquer uma das reivindicações 10-14.

16. Composição de tratamento, de acordo com a reivindicação 10, caracterizada pelo fato de que o distúrbio de pele compreende descoloração da pele que resulta de vitiligo, melasma, nevo de morango ou rosácea.

17. Método de tratamento de um distúrbio de pele, caracterizado pelo fato de que compreende administrar a um sujeito qualquer uma das composições de tratamento como definidas em qualquer uma das reivindicações 10-12 ou 16.

18. Método para criar uma composição de tratamento de pele para uma cor de pele, raça, tipo ou etnia específica, o método caracterizado pelo fato de que compreende: identificar a cor da pele, tipo, raça e etnia de um usuário final; obter células mesenquimais da pele (MSCs) de um doador direcionado com a mesma cor de pele, tipo, raça e etnia do usuário final com base no painel de polimorfismo de nucleotídeo único apropriado do doador; preparar uma preparação de pó de MSC, queratinócito e fator de crescimento de melanócito a partir das MSCs obtidas, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas sob condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas sob cicatrização severa de feridas condições; e adicionar a preparação em pó a uma base cosmética,

19. Composição de tratamento de pele para uma cor de pele, raça, tipo ou etnia específica, a composição caracterizada pelo fato de que compreende: uma base de composição; e uma preparação em pó de célula-tronco mesenquimal (MSC), queratinócito e / ou fator de crescimento de melanócito derivada de um doador com a mesma cor de pele, tipo de raça e etnia de um usuário final, em que a preparação de MSC compreende pelo menos um membro selecionado do grupo que consiste em células ou meio condicionado de células cultivadas sob condições normais de cultura hiperóxica e células cultivadas sob condições severas de cicatrização de feridas.