BR112021011383A2

BR112021011383A2 - Ingrediente alimentar que contém ácido graxo poliinsaturado com palatabilidade melhorada e método para fabricar o mesmo

Info

Publication number: BR112021011383A2
Application number: BR112021011383-5A
Authority: BR
Inventors: Tanya Francis Macgillivray; Jennifer Yvonne May; Michael L. Stefanski; Nasrin Tabayehnejad; Jonathan Wesley WILSON; Stephanie Lanoue Kassner
Original assignee: Dsm Ip Assets B.V.; Evonik Operations Gmbh
Priority date: 2018-12-14
Filing date: 2019-12-13
Publication date: 2021-08-31
Also published as: AU2019395263A1; EA202191667A1; US20220049182A1; EP3893666A1; MX2021006920A; CL2021001502A1; CA3120295A1; CN113543653A; WO2020123965A1; KR20210102952A; EP3893666A4; JP2022510828A

Abstract

ingrediente alimentar que contém ácido graxo poli-insaturado com palatabilidade melhorada e método para fabricar o mesmo. é revelado no presente documento um óleo de pufa refinado com uma palatabilidade melhorada em comparação com o mesmo óleo de pufa sem refinamento. também é revelada uma composição alimentar para um animal de companhia ou um alimento para consumo humano em que a dita composição alimentar compreende o óleo de pufa refinado acima e, então, com palatabilidade melhorada. é adicionalmente revelado no presente documento um método para fabricar o óleo de pufa refinado mencionado acima em que o dito método compreende a etapa de desodorização.

Description

“INGREDIENTE ALIMENTAR QUE CONTÉM ÁCIDO GRAXO POLI- INSATURADO COM PALATABILIDADE MELHORADA E MÉTODO PARA FABRICAR O MESMO” CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] A presente invenção se refere a um alimento para animais de estimação e um alimento humano de palatabilidade aprimorada enquanto tal alimento contém ácidos graxos poli- insaturados. A presente invenção se refere a um método para fabricar o ingrediente alimentar acima.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0002] Os fabricantes de alimento para animais têm um incentivo comercial para produzir alimentos que satisfazem os três critérios a seguir: alto valor nutricional, alta palatabilidade e baixo custo de produção.

[0003] O valor nutricional dos ácidos graxos poli- insaturados (PUFAs), como os ácidos graxos de ômega-3, são bem conhecidos na técnica. Os PUFAs são moléculas biologicamente importantes que afetam a fisiologia celular devido à sua presença na membrana celular, regulam a produção da expressão gênica de compostos biologicamente ativos e servem como substratos biossintéticos. Por exemplo, ácido docosa-hexaenoico (“DHA”) é responsável por aproximadamente 15 %-20 % dos lipídios no cérebro do animal e 30 %-60 % dos lipídios na retina. Devido ao fato de que os ácidos graxos de ômega-3 não podem ser sintetizados de novo por animais terrestres, esses ácidos graxos devem ser obtidos de fontes nutricionais.

[0004] Os ácidos graxos poli-insaturados são sintetizados por micróbios, como microalgas e fungos. O peixe adquire ácidos graxos poli-insaturados ao se alimentar desses micróbios. Comercialmente, os ácidos graxos poli-insaturados são obtidos por extração de peixes, bem como pela colheita de microalgas ou fungos através da fermentação e extração. Muitos produtos químicos são usados no processo de extração do óleo de PUFA a fim de agilizar o processo de extração por meio de reações químicas. Os subprodutos voláteis são gerados durante essa reação. Muitos subprodutos voláteis, como produtos de oxidação de lipídios e produtos da reação de Maillard, são produzidos no processo de extração.

[0005] Quando o óleo de PUFA é inicialmente extraído de peixes ou microalgas sem qualquer refinamento adicional, chama-se de óleo bruto. O óleo bruto tem cheiro e sabor desagradáveis e, portanto, não é bem recebido e até rejeitado por seres humanos e animais.

[0006] Ao projetar alimentos para seres humanos e animais de companhia, como cães e gatos, o suprimento de uma grande quantidade de nutrientes é uma meta importante. No entanto, se o ser humano ou animal se recusar a comer o alimento porque o considera desagradável, tal alimento não terá valor para o dito ser humano ou animal. O produto alimentar também não terá valor para o fabricante de tal alimento visto que não há mercado para o mesmo. Assim, há uma forte motivação para produzir um ingrediente alimentar contendo PUFA que seja palatável.

[0007] O óleo bruto precisa ser purificado antes de ser preparado para o consumo humano. Em geral, o processo de purificação envolve as etapas de refinamento, branqueamento, winterização e desodorização. O refinamento envolve a remoção de ácidos graxos livres, fosfolipídios, material solúvel em óleo, metal traço e moléculas solúveis em água. O branqueamento remove pigmentos, produtos de oxidação secundária, metais traço, vitaminas, poluentes ambientais e outros componentes polares. Winterização é o nome dado ao processo de remoção de sedimentos que irão aparecer em óleos a baixa temperatura. A desodorização se refere à remoção de componentes voláteis, produtos de oxidação secundária, ácidos graxos livres, mono e diglicerídeos, aldeídos, cetonas, hidrocarbonetos clorados, pigmentos e poluentes orgânicos persistentes. O processo acima também é conhecido como processo de RBWD pela letra inicial das quatro etapas.

[0008] É dispendioso a execução de todas as quatro etapas de refinamento, branqueamento, winterização e desodorização em um processo de RBWD devido ao custo de equipamento, energia, mão de obra e tempo envolvidos. Além disso, até 55 %-60 % do óleo de PUFA podem ser perdidos quando um processo de RBWD completo é executado. Assim, embora o odor e o sabor desagradáveis de um óleo de PUFA bruto possam ser removidos por um processo de RBWD completo, o custo de fabricação de tal óleo é alto. Assim, o mesmo só é comumente executado para fabricar óleo de PUFA purificado para consumo humano. Isso torna economicamente desafiador fabricar e vender alimentos para animais de estimação que sejam palatáveis e, ainda assim, que contenham uma quantidade nutricionalmente significativa de PUFAs.

[0009] Assim, há a necessidade de um óleo de PUFA de alto valor nutricional e alta palatabilidade e, ao mesmo tempo, produzido a baixo custo.

[0010] Historicamente, os esforços feitos para produzir um ingrediente alimentar contendo PUFA de baixo custo, mas ainda com um nível razoável de palatabilidade, têm se concentrado na criação de melhoradores de palatabilidade. Por exemplo, o Pedido de Patente n° US 12/442.828 revela um melhorador de palatabilidade à base de biorrefeição de algas que foi reivindicado para ser capaz de aprimorar a textura e o sabor do alimento para animais de estimação. O Pedido de Patente n° US 15/038545 revela um método de preparação de um melhorador de palatabilidade incluindo-se fontes de gordura e agentes comestíveis apropriados no alimento. No entanto, provou-se que a fabricação de um melhorador de palatabilidade separado e a mistura do mesmo no alimento eram caras. Além disso, às vezes, o melhorador de palatabilidade impacta ou compromete adversamente a qualidade nutricional ou outras características do alimento para animais de estimação subjacente. Dessa forma, ainda há uma necessidade de se encontrar uma abordagem inovadora para solucionar esse problema. O objetivo dessa invenção consiste em encontrar um método para fabricar um óleo de PUFA que seja de alta palatabilidade, mas de baixo custo de produção.

BREVE SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0011] A presente invenção se refere a um método para melhorar a palatabilidade de um óleo de ácidos graxos poli- insaturados (PUFA) para um animal de companhia, em que o dito método compreende as etapas de: a) obter um óleo de PUFA bruto; b) opcionalmente, realizar degomagem ou refinamento pelo uso de um evaporador de trajetória curta (SPE), ou tanto degomagem quanto refinamento pelo uso de um SPE do dito óleo de PUFA da etapa a); e c) desodorizar o óleo de PUFA da etapa b); em que o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) não é menor que 85 % da quantidade do óleo bruto iniciado na etapa a), em que a dita palatabilidade é medida pelo teste de preferência de alimento para animais, e em que a pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA obtido após a etapa c) é pelo menos 10 pontos percentuais maior que o óleo bruto iniciado na etapa a).

[0012] Em uma modalidade, o rendimento do óleo de PUFA não é menor que 90 % do óleo bruto iniciado na etapa a). Em uma modalidade, o teste de preferência acima de alimento para animais é um teste de dois recipientes. Em outras modalidades, a pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA obtido após a etapa c) é pelo menos 20, pelo menos 30, pelo menos 40, ou pelo menos 45 pontos percentuais maior que o óleo bruto iniciado na etapa a).

[0013] Em algumas modalidades, a etapa de desodorização c) é conduzida usando-se um desodorizador VTA ou um desodorizador DeSmet.

[0014] Em algumas modalidades, o óleo de PUFA é derivado de peixe, microrganismo ou plantas. Em uma modalidade, os microrganismos são algas. Em outra modalidade, as algas são Schizochytrium, Aurantiochytrium ou Thraustochytrium.

[0015] Em algumas modalidades, o óleo de PUFA compreende um ou mais compostos de DHA, EPA, ARA e DPA.

[0016] A presente invenção se refere também a um óleo de ácido graxo poli-insaturado (PUFA), em que o dito óleo de PUFA compreende menos que 10 ppb de um ou mais compostos de reação de Maillard e mais que 1,5 ppb de um ou mais produtos de oxidação de lipídios, quando qualificados como heptanoato de etila.

[0017] Em algumas modalidades, o óleo de PUFA compreende menos que 1 ppb, menos que 0,5 ppb ou menos que 0,3 ppb de compostos de reação de Maillard quando qualificados como heptanoato de etila.

[0018] Em uma modalidade, a quantidade de compostos de reação de Maillard no dito óleo de PUFA é indetectável quando qualificado como heptanoato de etila.

[0019] Em uma modalidade, os compostos de reação de Maillard são selecionados a partir de um grupo que consiste em: trimetilpirazina, 2-etil-3,5-dimetilpirazina, 2-etil- 3,6-dimetilpirazina, tetrametilpirazina, 2-hidroxi-3-metil- 2-ciclopenten-1-ona, metil-1H-pirrol-2-carboxaldeído e indol. Em outra modalidade, os produtos de oxidação de lipídios são selecionados a partir de um grupo que consiste em: 1-penten-3-ona, 4-heptenal e 2,6-nonadienal.

[0020] A presente invenção também se refere a uma composição alimentar para animais de companhia que compreende um óleo de PUFA que é produzido pelo método descrito acima. A presente invenção também se refere a uma composição alimentar para um animal de companhia, em que a dita composição alimentar compreende o óleo de PUFA que compreende menos que 10 ppb de um ou mais compostos de reação de Maillard e mais que 1,5 ppb de um ou mais produtos de oxidação de lipídios, quando qualificados como heptanoato de etila.

[0021] Em algumas modalidades, o animal de companhia mencionado acima é um cão ou um gato.

[0022] Em algumas modalidades, a composição alimentar mencionada acima é um alimento para cães, um alimento para gatos, um petisco para cães ou um petisco para gatos. Em uma modalidade, a composição alimentar é um suplemento nutricional.

[0023] A presente invenção também se refere a uma composição alimentar para consumo humano que compreende um óleo de PUFA que é produzido pelo método descrito acima. A presente invenção também se refere a uma composição alimentar para consumo humano, em que a dita composição alimentar compreende o óleo de PUFA que compreende menos que 10 ppb de um ou mais compostos de reação de Maillard e mais que 1,5 ppb de um ou mais produtos de oxidação de lipídios, quando qualificados como heptanoato de etila.

[0024] A presente invenção se refere adicionalmente a um método para aumentar o rendimento de um óleo de ácidos graxos poli-insaturados (PUFA) em relação a um óleo de controle que é o mesmo óleo, mas foi refinado, branqueado, winterizado e desodorizado (óleo de RBWD), em que o dito método compreende as etapas de: a) obter um óleo de PUFA bruto; b) opcionalmente, realizar a degomagem do dito óleo de PUFA ou refinamento usando-se um evaporador de trajetória curta (SPE) do dito óleo de PUFA, ou tanto realizar a degomagem quanto refinamento usando-se um SPE do dito óleo de PUFA da etapa a); e c) desodorizar o óleo de PUFA da etapa b); em que o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) é mais que 5 pontos percentuais maior que o rendimento do óleo de RBWD.

[0025] Em algumas modalidades, o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) é mais que 10 ou mais que 20 pontos percentuais maior que o rendimento do óleo de RBWD.

[0026] Em algumas modalidades, a diferença entre as pontuações de palatabilidade do óleo de PUFA após a etapa c) e do óleo de RBWD é menor que 10 % em um teste de preferência de alimento para animais em que um óleo de amostra de controle comum é usado. Em outra modalidade, o óleo de PUFA após a etapa c) tem uma pontuação de palatabilidade maior que o óleo de RBWD em um teste de preferência animal em que um óleo de amostra de controle comum é usado. Em uma modalidade, o teste de preferência de alimento para animais é um teste de dois recipientes.

[0027] Em uma modalidade, a etapa de desodorização c) é conduzida usando-se um desodorizador de VTA ou um desodorizador DeSmet.

[0028] Em algumas modalidades, o óleo de PUFA é derivado de peixe, microrganismo ou plantas. Em uma modalidade, os microrganismos são algas. Em outra modalidade, as algas são Schizochytrium, Aurantiochytrium ou Thraustochytrium.

[0029] Em algumas modalidades, o óleo de PUFA compreende um ou mais compostos de DHA, EPA, ARA e DPA.

BREVE SUMÁRIO DOS DESENHOS

[0030] A Fig. 1 é um gráfico que mostra o resultado sensorial humano de amostras de óleo de PUFA de algas, em que a pontuação de aroma dos óleos de algas desodorizados e não desodorizados e a pontuação de palatabilidade dos mesmos óleos são mostradas.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0031] Os recursos e vantagens da invenção podem ser mais prontamente entendidos por aquele técnico no assunto mediante a leitura da seguinte descrição detalhada. Deve ser observado que certas características da invenção que são, para fins de clareza, descritas acima e abaixo no contexto de modalidades separadas, também podem ser combinadas de modo a formar subcombinações das mesmas.

[0032] As modalidades identificadas no presente documento como exemplificativas são destinadas a serem ilustrativas e não limitativas.

[0033] Um objetivo da presente invenção consiste em fornecer um óleo de PUFA que é palatável para consumo humano e/ou de animais de estimação e, ao mesmo tempo, precisa de tratamento mínimo e, então, pode ser produzido em baixo custo.

[0034] Outro objetivo da presente invenção consiste em desenvolver um método para produzir um óleo de PUFA palatável de modo mais eficaz que um método usando as etapas de processamento convencionais de refinamento, branqueamento, winterização e desodorização.

[0035] Outro objetivo da presente invenção consiste em identificar um grupo de compostos ou um composto individual que é a causa principal de mau cheiro e sabor para animais de estimação, e a remoção do qual do óleo de PUFA bruto aprimoraria significativamente a palatabilidade do óleo de PUFA.

[0036] Os objetivos acima são realizados de acordo com a presente invenção.

[0037] O óleo de PUFA microbiano bruto e óleo de peixe bruto são ricos em ácidos graxos poli-insaturados, especialmente ácidos graxos poli-insaturados de ômega-3, como DHA e EPA. É amplamente reconhecido que ácidos graxos poli-insaturados de ômega-3, especialmente DHA e EPA, são nutrientes essenciais para os animais. Os mamíferos, como seres humanos e animais de estimação, têm que obter ácidos graxos poli-insaturados de ômega-3 de fontes externas devido ao fato de que não podem sintetizar tais nutrientes internamente. No entanto, o óleo de PUFA microbiano bruto não processado e óleo de peixe bruto têm odor e sabor desagradáveis fortes que precisam ser removidos antes de se tornaram adequados para o consumo humano e de animais de estimação. Tradicionalmente, o processo de refinamento é complexo e envolve pelo menos quatro etapas que incluem refinamento, branqueamento, winterização e desodorização e, então, é muito dispendioso e tem baixo rendimento. Isso torna economicamente desafiador produzir alimento para animais de estimação que contenha PUFAs suficientes e, ao mesmo tempo, permaneça com preços competitivos. Como resultado, poucos animais de estimação têm acesso a uma dieta rica em nutrientes benéficos, como PUFAs.

[0038] É surpreendentemente constatado nessa invenção que dentre as quatro etapas de processamento de óleo de refinamento, branqueamento, winterização e desodorização, a desodorização é a etapa mais eficaz na melhora da palatabilidade do óleo de PUFA para um animal de companhia. Constatou-se adicionalmente que ao adicionar uma etapa de degomagem ou uma etapa de refinamento, a palatabilidade do óleo de PUFA é adicionalmente aumentada sem muita perda de rendimento na produção de óleo. Assim, um óleo de PUFA palatável pode ser produzido em um baixo custo pelo tratamento de óleo de PUFA bruto com uma etapa de desodorização e opcionalmente uma etapa de degomagem adicional ou uma etapa de refinamento adicional ou ambas.

[0039] A mudança de palatabilidade é medida por um teste de preferência de alimento para animais. O teste de preferência de alimento para animais usado nessa invenção é um teste de dois recipientes. O teste de dois recipientes (ou teste versus ou estímulo pareado) compara quanto de dois alimentos, apresentados simultaneamente, é ingerido em um período de tempo definido. Esse é um teste comum usado em painéis de especialistas para estudos de avaliação de palatabilidade de cães e gatos. Na presente invenção, duas amostras de alimento para animais de estimação, cada uma contendo um diferente óleo de PUFA, são comparadas entre si. O primeiro alimento contém um óleo de PUFA de controle. O segundo alimento contém um óleo de PUFA de testagem. O óleo de PUFA de controle pode ser quaisquer amostras de óleo de PUFA, um óleo bruto ou um óleo processado. Um óleo de PUFA de controle comumente usado nessa invenção é um óleo de peixe comercialmente disponível que foi tratado por etapas de refinamento, branqueamento e desodorização. Em outra modalidade, o óleo de PUFA de controle é um óleo de peixe comercialmente disponível que foi tratado por etapas de refinamento, branqueamento, winterização e desodorização. Em uma modalidade, o óleo de PUFA de testagem é um óleo de PUFA de amostra cuja palatabilidade é medida em relação ao óleo de PUFA de controle. Tal óleo de PUFA de testagem pode ser um óleo de algas bruto não processado, ou um óleo de algas que foi processado por uma ou mais etapas de degomagem, evaporação de trajetória curta, refinamento, branqueamento, winterização e desodorização.

[0040] A palatabilidade de um óleo de PUFA de testagem é considerada como sendo aprimorada em relação ao outro óleo de PUFA com o qual é pareado em um teste de dois recipientes quando a pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA de testagem é acima de 50 %. Isso significa que o óleo de PUFA de testagem é preferencial pelo animal experimental com mais de 50 % de chance que o óleo de PUFA de controle. O teste de dois recipientes e seu método de pontuação são descritos em detalhes no Exemplo 2 desse pedido. O teste de dois recipientes é um tipo de teste de preferência de alimento para animais, e fornece uma medição quantitativa da preferência de alimento por um animal. A soma da pontuação de palatabilidade das duas amostras que são comparadas é sempre 100 %. Por exemplo, se a pontuação de palatabilidade de um óleo de PUFA de testagem for 56 %, a pontuação de palatabilidade do outro óleo de PUFA é 44 %.

[0041] Quando vários óleos de PUFA de testagem diferentes forem medidos em relação ao mesmo óleo de PUFA, que, nesse caso, é chamado de óleo de PUFA de controle ou simplesmente óleo de controle, as preferências relativas entre as amostras de óleo de PUFA de testagem podem ser observadas. Por exemplo, se a pontuação de palatabilidade de amostras de óleo de PUFA de testagem A, B e C for 56 %, 64 % e 74 %, respectivamente e todas em um óleo de controle, pode-se concluir que a amostra C é a mais palatável entre as três amostras. Nesse caso, a identidade do óleo de controle torna-se irrelevante. Esse método é usado nessa invenção para avaliar o efeito de diferentes etapas de processamento no aprimoramento de palatabilidade.

[0042] A palatabilidade de um primeiro óleo de PUFA de testagem é considerada como sendo significativamente aprimorada em relação a um segundo óleo de PUFA de testagem quando a pontuação de palatabilidade do primeiro óleo de PUFA de testagem é 20 pontos percentuais ou mais que o segundo óleo de PUFA. Por exemplo, se a pontuação de palatabilidade de um óleo de PUFA de testagem que foi refinado, branqueado e winterizado for 46 %, e outro óleo de PUFA de testagem que foi refinado, branqueado, winterizado e desodorizado for 74 %, a palatabilidade do óleo de PUFA de testagem é considerada como sendo significativamente aprimorada pela etapa de desodorização adicional devido ao fato de que o aumento da pontuação de palatabilidade é 38 %.

[0043] O rendimento de óleo de PUFA é definido como o percentual de óleo de PUFA que permanece após uma ou várias etapas de processamento em relação à quantidade no início do processo. Devido ao fato que cada uma das etapas de processamento removerá alguma quantidade do óleo junto com as impurezas que foram projetadas para remover, é geralmente esperado que o rendimento do óleo de PUFA diminuirá à medida que mais etapas de processamento são adicionadas ao processo de purificação.

[0044] É surpreendente nessa invenção constatar que a etapa de desodorização é muito mais eficaz na melhora da palatabilidade de um óleo de PUFA em relação a um animal de companhia que qualquer um dentre as etapas de refinamento, branqueamento, winterização ou até mesmo as três etapas combinadas. É adicionalmente surpreendente constatar que adicionando-se uma etapa de degomagem ou uma etapa de refinamento ou ambas as etapas, um alto rendimento de 90 % ou mais do óleo bruto é obtido após essas etapas de processamento. O óleo resultante tem uma palatabilidade aumentada de pelo menos 45 pontos percentuais maior que a pontuação de palatabilidade do óleo bruto. Uma amostra de óleo de controle comum é usada na medição da pontuação de palatabilidade do óleo processado e do óleo bruto.

[0045] Em uma modalidade, a presente invenção se refere a um método para melhorar a palatabilidade de um óleo de ácidos graxos poli-insaturados (PUFA) em relação a um animal de companhia, em que o dito método compreende as etapas de:

a) obter um óleo de PUFA bruto; b) opcionalmente, l ou refinar, ou tanto realizar degomagem quanto refinamento do dito óleo de PUFA da etapa a); c) desodorizar o óleo de PUFA da etapa b); em que o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) não é menor que 85 % da quantidade do óleo bruto iniciado na etapa a), em que a dita palatabilidade é medida pelo teste de preferência de alimento para animais, e em que a pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA obtido após a etapa c) é pelo menos 10 pontos percentuais ou mais que o óleo de PUFA obtido após a etapa c). Em outra modalidade, o rendimento do óleo de PUFA não é menor que 80 %, não menor que 81 %, não menor que 82 %, não menor que 83 %, não menor que 84 %, não menor que 85 %, não menor que 86 %, não menor que 87 %, não menor que 88 %, não menor que 89 %, não menor que 90 %, não menor que 91 %, não menor que 92 %, não menor que 93 %, não menor que 94 %, ou não menor que 95 % quando comparado à quantidade de óleo de PUFA obtido após a etapa c) com a quantidade do óleo bruto iniciado na etapa a). Em outra modalidade, o rendimento do óleo de PUFA é entre 85 % e 99 %, entre 85 % e 95 %, entre 87 % e 93 %, entre 90 % e 95 %, e entre 92 % e 95 %, quando comparado à quantidade de óleo de PUFA obtido após a etapa c) com a quantidade do óleo bruto iniciado na etapa a).

[0046] Em outra modalidade, o aumento da pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA no nível acima do rendimento é pelo menos 10 pontos percentuais maior, pelo menos 15 pontos percentuais maior, pelo menos 25 pontos percentuais maior, pelo menos 30 pontos percentuais maior, pelo menos 35 pontos percentuais maior, pelo menos 40 pontos percentuais maior, pelo menos 45 pontos percentuais maior, pelo menos 50 pontos percentuais maior, pelo menos 55 pontos percentuais maior, pelo menos 60 pontos percentuais maior, ou pelo menos 65 pontos percentuais maior que a pontuação de palatabilidade do óleo bruto antes do processamento. Em outra modalidade, o aumento da pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA no nível acima do rendimento é entre 20 % e 65 %, entre 30 % e 65 %, entre 40 % e 65 %, entre 20 % e 65 %, entre 30 % e 50 %, entre 40 % e 50 %, entre 30 % e 60 %, entre 40 % e 60 %, entre 20 % e 30 %, entre 10 % e 20 %, ou entre 30 % e 40 % pontos percentuais maior que a pontuação de palatabilidade do óleo bruto antes do processamento.

[0047] Também é surpreendente nessa invenção constatar que substituindo-se as etapas de processamento convencionais de refinamento, branqueamento e winterização (óleo de RBWD) com uma etapa de degomagem ou uma etapa de evaporação de trajetória curta ou ambas as etapas enquanto retém a etapa de desodorização, o rendimento do óleo resultante é mais que 20 pontos percentuais maior que o óleo de RBDW. O óleo resultante também tem uma palatabilidade aumentada de pelo menos 10 pontos percentuais maior que a pontuação de palatabilidade do óleo de RBWD. Uma amostra de óleo de controle comum é usada na medição da pontuação de palatabilidade do óleo desodorizado e do óleo de RBWD.

[0048] Em uma modalidade, a invenção se refere a um método para aumentar o rendimento de um óleo de ácidos graxos poli- insaturados (PUFA) em relação a um óleo de controle que é o mesmo óleo que foi refinado, branqueado, winterizado e desodorizado (óleo de RBWD), em que o dito método compreende as etapas de: a) obter um óleo de PUFA bruto; b) opcionalmente, realizar a degomagem ou refinamento, ou tanto realizar a degomagem quanto refinamento do dito óleo de PUFA; c) desodorizar o óleo de PUFA da etapa b); em que o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) é maior que 30 pontos percentuais maior que o rendimento do óleo de RBWD.

O rendimento do óleo de RBWD é calculado visto que a razão em porcentagem entre a quantidade de óleo que permanece após o óleo bruto na etapa a) ser processado por etapas de refinamento, branqueamento, winterização e desodorização e a quantidade do óleo bruto na etapa a). Em outras modalidades, o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) é mais que 25 pontos percentuais maior, mais que 20 pontos percentuais maior, mais que 19 pontos percentuais maior, mais que 18 pontos percentuais maior, mais que 15 pontos percentuais maior, mais que 13 pontos percentuais maior, ou mais que 10 pontos percentuais, mais que 5 pontos percentuais maior que o rendimento do óleo de RBWD.

Em uma modalidade, as pontuações de palatabilidade do óleo acima após a etapa c) e do óleo de controle são iguais.

Em uma modalidade, as pontuações de palatabilidade do óleo acima e do óleo de controle têm uma diferença de não mais que 10 %. Em outra modalidade, a diferença de pontuação de palatabilidade é não mais que 9 %, não mais que 8 %, não mais que 7 %, não mais que 6 %, não mais que 5 %, não mais que 4 %, não mais que 3 %, não mais que 2 % ou não mais que 1 %. Em outra modalidade, a diferença de pontuação de palatabilidade é entre 1 % e 10 %, entre 2 % a 10 %, entre 3 % e 10 %, entre 4 % e 10 %, entre 5 % e 10 %, entre 6 % e 10 %, entre 7 % e 10 %, e entre 4 % e 7 %. Em outra modalidade, o óleo de PUFA após a etapa c) tem uma pontuação de palatabilidade maior que o óleo de RBWD em um teste de preferência animal em que um óleo de amostra de controle comum é usado. Em outra modalidade, o óleo de PUFA após a etapa c) tem entre 1 e 10, entre 5 e 10 ou entre 7 a 10 pontos percentuais maior de pontuação de palatabilidade que o óleo de RBWD em um teste de preferência animal em que um óleo de amostra de controle comum é usado. Em outra modalidade, o óleo de PUFA após a etapa c) tem uma pontuação de palatabilidade maior entre 1 % e 10 %, entre 2 % a 10 %, entre 3 % e 10 %, entre 4 % e 10 %, entre 5 % e 10 %, entre 6 % e 10 %, entre 7 % e 10 %, e entre 4 % e 7 % que aquela do óleo de RBWD.

[0049] Em uma modalidade, os objetivos acima são realizados por um método de melhora da palatabilidade de um óleo de PUFA que compreende a etapa de tratamento do dito óleo com um desodorizador. Em uma modalidade preferencial, o desodorizador é um desodorizador de VTA. Em outra modalidade preferencial, o desodorizador é um desodorizador DeSmet. Em outra modalidade, o método acima adicionalmente compreende uma etapa de degomagem e/ou uma etapa de evaporação de trajetória curta. Ainda em uma outra modalidade preferencial, o método não compreende qualquer etapa de refinamento, branqueamento ou winterização e, então, aumenta significativamente o rendimento do óleo de PUFA no processo e reduz o custo de produção. A etapa de degomagem e a etapa de SPE causa pouca perda de rendimento de óleo. As etapas de refinamento, branqueamento e winterização causam perda de rendimento significativa.

[0050] Sem se ater à teoria, hipotetiza-se que o desodorizante remove os compostos de reação de Maillard e, portanto, ajuda a remover o odor (ou odores) e sabor (ou sabores) do óleo PUFA e aprimorar sua palatabilidade. Também se hipotetiza que a degomagem remove materiais do óleo de PUFA, como fosfolipídios e outros compostos e qualquer coisa que possa obstruir o desodorizante na etapa de desodorização subsequente. Também se hipotetiza que a etapa de evaporação de trajetória curta (SPE) remove os ácidos graxos livres do óleo de PUFA e, então, evita a oxidação do óleo de PUFA resultante. Na presente invenção, as etapas de realizar a degomagem e refinamento são opcionais devido ao fato de que a aplicação dessas etapas dependerá da qualidade do óleo bruto que está sendo processado. Se o óleo de PUFA bruto de partida contiver poucos ácidos graxos livres, a etapa de refinamento pode ser omitida. Similarmente, se o óleo bruto de partida contiver poucos fosfolipídios ou outras impurezas e, portanto, é improvável que o óleo obstrua o desodorizante, a etapa de desgomagem também pode ser omitida.

[0051] Sabe-se que os voláteis produzidos durante o processo de extração do óleo de PUFA de sua fonte, seja de algas ou de peixe, geralmente causam odor (ou odores) e sabor (ou sabores) desagradáveis. Os exemplos de voláteis causadores de odores desagradáveis incluem, porém sem limitação, produtos de oxidação de lipídios, como 1-penten- 3-ona, 4-heptenal, 2,6-nonadienal e compostos de reação de Maillard, como trimetilpirazina, 2-etil-3,5-dimetilpirazina, 2-etil-3,6-dimetilpirazina, tetrametilpirazina, 2-hidroxi- 3-metil-2-ciclopenten-1-ona, tetil-1H-pirrol-2- carboxaldeído e indol. Surpreendentemente, constatou-se nessa invenção que a remoção de produtos de reação de Maillard, mas não produtos de oxidação de lipídios, podem melhorar significativamente a palatabilidade de óleo de PUFA. Constatou-se que os desodorizantes são muito eficazes na remoção de produtos de reação de Maillard de óleos de PUFA brutos e, então, melhoram a palatabilidade desses óleos.

[0052] Em uma modalidade, um óleo de PUFA bruto é tratado para remover todos ou substancialmente todos compostos de reação de Maillard em que o óleo resultante tem uma pontuação de palatabilidade significativamente maior que o óleo de PUFA bruto. Em uma modalidade, os compostos de reação de Maillard acima foram reduzidos à seguinte lista: trimetilpirazina, 2-etil-3,5-dimetilpirazina, 2-etil-3,6- dimetilpirazina, tetrametilpirazina, 2-hidroxi-3-metil-2- ciclopenten-1-ona, metil-1H-pirrol-2-carboxaldeído e indol. Verificou-se na presente invenção que a remoção dos sete compostos acima de um óleo de algas bruto ou um óleo de peixe bruto pode aumentar significativamente a palatabilidade de tal óleo para animais de companhia. Constatou-se ainda na presente invenção que o nível de produtos de oxidação de lipídios no óleo de PUFA não impacta significativamente a palatabilidade de o óleo. Exemplos dos produtos de oxidação de lipídios incluem, porém sem limitação: 1-penten-3-ona, 4- heptenal e 2,6-nonadienal.

[0053] Em uma modalidade, a palatabilidade de óleo de PUFA é significativamente aprimorada removendo-se compostos de reação de Maillard do óleo de PUFA bruto em um nível não detectável. Em uma modalidade, o método para detectar os compostos de reação de Maillard e produtos de oxidação de lipídios é um método de análise de SPME-GCMS. Em outra modalidade, a palatabilidade de óleo de PUFA para seres humanos e animais domésticos é significativamente aprimorada reduzindo-se o nível de compostos de reação de Maillard no óleo de PUFA para menos que 10 ppb de compostos de reação de

Maillard quando qualificados como heptanoato de etila.

Em outra modalidade, a palatabilidade de óleo de PUFA para seres humanos e animais de estimação é significativamente aprimorada reduzindo-se o nível de compostos de reação de Maillard no óleo de PUFA a menos que 10 ppb de compostos de reação de Maillard quando qualificados como heptanoato de etila, enquanto os produtos de oxidação de lipídios no óleo de PUFA estão em um nível de mais que 1,5 ppb quando qualificados como heptanoato de etila.

Em outra modalidade, a palatabilidade de óleo de PUFA para seres humanos e animais de estimação é significativamente aprimorada reduzindo-se o nível de compostos de reação de Maillard no óleo bruto para menos que 1 ppb de compostos de reação de Maillard quando qualificados como heptanoato de etila.

Em outra modalidade, a palatabilidade de óleo de PUFA para seres humanos e animais de estimação é significativamente aprimorada reduzindo-se o nível de compostos de reação de Maillard no óleo bruto para menos que 0,5 ppb de compostos de reação de Maillard quando qualificados como heptanoato de etila.

Em outra modalidade, a palatabilidade de óleo de PUFA para seres humanos e animais de estimação é significativamente aprimorada reduzindo-se o nível de compostos de reação de Maillard no óleo bruto para menos que 0,3 ppb de compostos de reação de Maillard quando qualificados como heptanoato de etila.

Em outras modalidades, a palatabilidade de óleo de PUFA para seres humanos e animais de estimação é significativamente aprimorada reduzindo-se o nível de compostos de reação de Maillard no óleo bruto para menos que 500, menos que 200, menos que 100, menos que 50, menos que 20, menos que 5, menos que 2, menos que 0,2, menos que 0,1 ppb quando qualificados como heptanoato de etila.

Em outras modalidades, a palatabilidade de óleo de PUFA para seres humanos e animais de estimação é significativamente aprimorada reduzindo-se o nível de compostos de reação de Maillard no óleo bruto para entre 500 e 0,1 ppb, entre 200 e 0,1, entre 200 e 0,1, entre 100 e 0,1, entre 50 e 0,1, entre 10 e 0,1, entre 2 e 0,1, entre 1 e 0,1, e entre 20 e 1, e entre 10 e 1 quando qualificados como heptanoato de etila.

[0054] O valor numérico do nível de compostos de reação de Maillard e produtos de oxidação de lipídios que é referido nesse pedido (na unidade de ppb) é a quantidade total de compostos de reação de Maillard e produtos de oxidação de lipídios detectados no óleo de PUFA, salvo se especificamente referido como o nível de um composto de reação de Maillard individual e produto de oxidação de lipídios.

[0055] Em outra modalidade, a palatabilidade de óleo de PUFA para um ser humano ou um animal de estimação é significativamente aprimorada reduzindo-se o nível de compostos de reação de Maillard no óleo de PUFA para menos que 10 ppb de compostos de reação de Maillard, enquanto o óleo de PUFA compreende mais que 1,5 ppb de um ou mais produtos de oxidação de lipídios, quando qualificados como heptanoato de etila. Em uma modalidade, os produtos de oxidação de lipídios são selecionados a partir de um grupo que consiste em: 1-penten-3-ona, 4-heptenal e 2,6-nonadienal. Em outras modalidades, os produtos de oxidação de lipídios no óleo de PUFA está em um nível de mais que 1 ppb, mais que 2 ppb, mais que 3 ppb, mais que 4 ppb, ou mais que 5 ppb, mais que 20 ppb, mais que 50 ppb, ou mais que 100 ppb, quando qualificados como heptanoato de etila. Em outras modalidades,

os produtos de oxidação de lipídios no óleo de PUFA está em um nível de entre 100 e 1 ppb, entre 50 e 1 ppb, entre 20 e 1 ppb, e entre 15 e 1 ppb, quando qualificados como heptanoato de etila. Em outras modalidades, o nível de compostos de reação de Maillard no óleo bruto é menor que 500, menos que 200, menos que 100, menos que 50, menos que 20, menos que 5, menos que 2, menos que 0,2, menos que 0,1 ppb quando qualificados como heptanoato de etila.

[0056] Em outra modalidade, a palatabilidade de óleo de PUFA é significativamente aprimorada removendo-se não apenas os compostos de reação de Maillard do óleo de PUFA bruto para um nível baixo ou não detectável, mas também todos ou substancialmente todos os ácidos graxos livres. Em outra modalidade, a palatabilidade de óleo de PUFA é significativamente aprimorada removendo-se não apenas compostos de reação de Maillard do óleo de PUFA bruto para um nível baixo ou não detectável, mas também todos ou substancialmente todos fosfolipídios e cátions. Em outra modalidade, um óleo bruto é tratado para remover todos ou substancialmente todos de compostos de reação de Maillard, ácidos graxos livres, fosfolipídios e cátion. Em uma modalidade, os ácidos graxos livres são removidos do óleo de PUFA para um nível de menos que 0,1 % em peso do óleo. Em algumas modalidades, o nível de compostos de reação de Maillard no óleo bruto é menor que 500, menor que 200, menor que 100, menor que 50, menor que 20, menor que 5, menor que 2, menor que 0,2, menor que 0,1 ppb quando qualificados como heptanoato de etila. Em uma modalidade, os ácidos graxos livres são removidos do óleo de PUFA para um nível entre 1 % e 0,01 % em peso do óleo. Em outra modalidade, os ácidos graxos livres são removidos do óleo de PUFA para um nível de menos que 0,01 % em peso do óleo. Em uma modalidade, os fosfolipídios são removidos do óleo de PUFA para um nível de menos que 0,1 % em peso do óleo. Em uma modalidade, os fosfolipídios são removidos do óleo de PUFA para um nível entre 1 % e 0,01 % em peso do óleo. Em outra modalidade, os fosfolipídios são removidos do óleo de PUFA para um nível de menos que 0,01 % em peso do óleo. Em uma modalidade, os cátions são removidos do óleo de PUFA para um nível de menos que 0,1 % em peso do óleo. Em outra modalidade, os cátions são removidos do óleo de PUFA para um nível de menos que 0,01 % em peso do óleo. Em uma modalidade, os cátions são removidos do óleo de PUFA para um nível entre 1 % e 0,01 % em peso do óleo.

[0057] Também é revelado no presente documento um método para melhorar a palatabilidade de um óleo de PUFA em que o óleo de PUFA é tratado por um desodorizador. Em uma modalidade, o desodorizador é um desodorizador DeSmet. Em outra modalidade, o desodorizador é um desodorizador de VTA. Ainda em outra modalidade, o desodorizador pode ser qualquer tipo de equipamento que pode remover de modo eficaz os compostos de reação de Maillard. Ainda em outra modalidade, o desodorizador pode ser qualquer tipo de equipamento que pode remover de modo eficaz uma lista de compostos de reação de Maillard que compreende: trimetilpirazina, 2-etil-3,5- dimetilpirazina, 2-etil-3,6-dimetilpirazina, tetrametilpirazina, 2-hidroxi-3-metil-2-ciclopenten-1-ona, metil-1H-pirrol-2-carboxaldeído e indol. Também é revelado no presente documento um método para melhorar a palatabilidade de um óleo de PUFA em que o óleo de PUFA é tratado por um evaporador de trajetória curta. É adicionalmente revelado no presente documento um método para melhorar a palatabilidade de um óleo de PUFA em que o óleo de PUFA é tratado por um processo de degomagem.

[0058] Em geral, um alimento para animais de estimação que contém PUFA é feita pela mistura dos ingredientes de alimento para animais de estimação com óleo de PUFA ou pó de PUFA. Similarmente, um alimento que contém PUFA para consumo humano é feito pela mistura de ingrediente alimentar humano e óleo de PUFA ou pó de PUFA. A presente invenção fornece um alimento para animais de estimação de palatabilidade melhorada misturando-se ingredientes de alimento para animais de estimação e o óleo de PUFA desodorizado que é descrito acima. A invenção também fornece um alimento humano de palatabilidade melhorada misturando-se ingredientes de alimento humano e o óleo de PUFA desodorizado que é descrito acima. A invenção também fornece uma composição de suplemento nutricional humano de palatabilidade melhorada misturando- se ingredientes de suplemento nutricional humano e o óleo de PUFA desodorizado que é descrito acima.

[0059] O óleo de PUFA descrito no presente documento se refere a um óleo que compreende PUFAs. Em uma modalidade, o óleo de PUFA descrito no presente documento se refere a um óleo que compreende quantidade significativa de PUFAs. Em algumas modalidades, óleo compreende pelo menos 10 %, pelo menos 20 %, pelo menos 30 %, pelo menos 40 %, pelo menos 5 %, pelo menos 60 %, pelo menos 70 %, ou pelo menos 80 % em peso de PUFAs. A fonte de tais PUFAs no óleo de PUFA pode se originar de peixes ou micróbios. Em algumas modalidades, os micróbios são algas, bactérias, fungos, leveduras, protista.

Se uma quantidade significativa de PUFAs for derivada de micróbio, refere-se como óleo microbiano. Se uma quantidade significativa de PUFAs for derivada de microalgas, refere- se como óleo de algas. Se uma quantidade significativa de PUFAs for derivada de peixe, refere-se como óleo de peixe.

[0060] Os ácidos graxos poli-insaturados (PUFAs) são classificados com base na posição da primeira ligação dupla a partir da terminação metila do ácido graxo; os ácidos graxos de ômega-3 (n-3) contêm uma primeira ligação dupla no terceiro carbono, ao passo que os ácidos graxos de ômega-6 (n-6) contêm uma primeira ligação dupla no sexto carbono. Por exemplo, o ácido docosa-hexaenoico (DHA) é um ácido graxo poli-insaturado de ômega-3 de cadeia longa (LC-PUFA) com um comprimento de cadeia de 22 carbonos e 6 ligações duplas, geralmente denominados como “22:6n-3”. Em uma modalidade, o AGPI é selecionado a partir de um ácido graxo de ômega-3, um ácido graxo de ômega-6 e misturas dos mesmos. Em uma outra modalidade, o PUFA é selecionado a partir de LC-PUFAs. Ainda em uma modalidade adicional, o PUFA é selecionado a partir de ácido docosa-hexaenoico (DHA), ácido eicosapentaenoico (EPA), ácido docosapentaenoico (DPA), ácido araquidônico (ARA), ácido gama-linolênico (GLA), ácido di-homo-gama- linolênico (DGLA), ácido estearidônico (SDA) e misturas dos mesmos. Em outra modalidade, o PUFA é selecionado a partir de DHA, EPA, DPA, ARA e misturas dos mesmos. Em uma modalidade adicional, o PUFA é DHA. Ainda em uma modalidade adicional, o PUFA é EPA. Ainda em uma modalidade adicional, o PUFA é ARA.

[0061] Os PUFAs podem estar na forma de um ácido graxo livre, sal, éster de ácido graxo (por exemplo, metil ou etil éster), monoacilglicerol (MAG), diacilglicerol (DAG), triacilglicerol (TAG) e/ou fosfolipídio (PL).

[0062] Os ácidos graxos livres são ácidos graxos poli- insaturados que foram perdidos da estrutura principal de triacilglicerídio ou se separaram das moléculas de óleo. Espera-se que a redução de ácidos graxos livres no óleo de PUFA reduza a oxidação a longo prazo e, assim, prolongue a vida de prateleira do óleo de PUFA.

[0063] O óleo de PUFA microbiano bruto é normalmente extraído das células microbianas. Como usado no presente documento, uma "célula" se refere a um biomaterial contendo óleo, como biomaterial derivado de microrganismos oleaginosos. Em uma modalidade, o óleo microbiano bruto se refere a um óleo bruto extraído da biomassa do microrganismo sem processamento adicional. O óleo microbiano bruto é normalmente tratado antes de ser usado no alimento para animais de estimação ou alimento humano.

[0064] Como usado no presente documento, uma "célula microbiana" ou "microrganismo" se refere a organismos, como algas, bactérias, fungos, leveduras, protistas e combinações dos mesmos, por exemplo, organismos unicelulares. Em algumas modalidades, uma célula microbiana é uma célula eucariótica. Uma célula microbiana inclui, porém sem limitação, algas douradas (ou seja, microrganismos do reino Stramenopiles); algas verdes; diatomáceas; dinoflagelados (por exemplo, microrganismos da ordem Dinophyceae incluindo membros do gênero Crypthecodiniumcomo, como, por exemplo, Crypthecodinium cohnii ou C. cohnii); microalgas da ordem Thraustochytriales; leveduras (Ascomycetes ou Basidiomycetes); e fungos dos gêneros Mucor, Mortierella,

incluindo, porém sem limitação, Mortierella alpina e Mortierella sect, schmuckeri, e Pythium, incluindo, porém sem limitação, Pythium insidiosum.

[0065] Em uma modalidade, as células microbianas são do gênero Mortierella, gênero Crypthecodinium ou ordem Thraustochytriales. Ainda em uma modalidade adicional, as células microbianas são de Crypthecodinium cohnii. Ainda em uma outra modalidade adicional, as células microbianas são selecionadas a partir de Crypthecodinium cohnii, Mortierella alpina, gênero Aurantiochytrium, gênero Thraustochytrium, gênero Schizochytrium e misturas dos mesmos.

[0066] O óleo de peixe bruto é normalmente extraído do peixe sem processamento adicional. Em uma modalidade, tal peixe pode ser sardinha, anchova, cavala e/ou atum. O óleo de peixe bruto é normalmente tratado antes de ser usado em alimento para animais de estimação ou alimento humano.

[0067] O óleo vegetal é normalmente extraído das sementes de plantas. Os exemplos de plantas produtoras de óleo incluem canola, soja, girassol, linhaça e camelina. Em algumas modalidades, as plantas referidas nessa invenção são plantas que são geneticamente modificadas para produzir o óleo de PUFA.

[0068] Como usado no presente documento, um “animal de companhia” se refere a animais domesticados ou criados em casa, cujas necessidades físicas, emocionais, comportamentais e sociais podem ser prontamente satisfeitas como companheiros em casa ou em um relacionamento diário próximo com humanos. Exemplos de animais de companhia são cães, gatos, porquinhos-da-índia, coelhos, ratos, camundongos ou cavalos. É usado intercambiavelmente com o termo “animal de estimação” neste pedido.

[0069] Um “óleo de PUFA tratado” ou um “óleo de PUFA processado” ou simplesmente um “óleo tratado” ou um “óleo processado” como usado neste pedido se refere a um óleo de PUFA que foi processado a partir de um óleo de PUFA bruto. Em uma modalidade, tal tratamento inclui uma ou mais etapas dentre refinamento, branqueamento, winterização, desodorização, degomagem ou evaporação de trajetória curta. Em uma modalidade, tal tratamento inclui apenas a etapa de desodorização.

[0070] O óleo de PUFA tratado da presente invenção pode ser misturado a um produto de alimento para animais de estimação base, como um alimento para animais ou para animais de estimação seca. A composição de alimento para animais de estimação da presente invenção inclui várias composições aditivas de sabor úmido, oleoso, em pó ou granular. Em uma modalidade, o óleo de PUFA tratado pode ser incorporado no alimento para animais de estimação como parte do processo de fabricação.

[0071] No presente método, os produtos de alimento para animais de estimação que compreendem óleo de PUFA tratado dos micróbios ou peixe.

[0072] A presente invenção se refere a uma composição de produto alimentar para um animal não humano ou ser humano, que compreende qualquer um dos óleos microbianos da invenção. Em algumas modalidades, o produto alimentar é um aditivo para o alimento animal não humano ou alimento humano. Em algumas modalidades, o produto alimentar é um suplemento nutricional. Em algumas modalidades, o produto alimentar é um alimento animal. Em algumas modalidades, a ração animal é um alimento para animais de estimação.

EXEMPLOS Exemplo 1 Amostras de Óleo de PUFA e Métodos de Processamento

[0073] Um óleo de algas bruto usado nessa invenção foi extraído da biomassa da cepa Schizochytrium ATCC PTA-10208 sem processamento adicional. Diferentes bateladas desse tipo de óleo de algas bruto foram produzidas e usadas nessa invenção. Processos de Purificação

[0074] O óleo de algas bruto acima foi processado por uma ou mais das etapas de purificação descritas acima. Refino

[0075] Nessa etapa de refinamento, um óleo (ou óleos) de PUFA de algas bruto foi aquecido a 50-55 °C sob nitrogênio. Em seguida, cerca de 2 % de ácido fosfórico foram adicionados e, então, misturados por 15 minutos. Com base na quantidade de ácidos graxos livres brutos (FFA bruto) no óleo de algas bruto, a quantidade de 50 % de solução cáustica e água mole para a fabricação de uma solução cáustica/H2O foi calculada usando a fórmula abaixo. O fator cáustico em excesso foi aumentado para compensar a neutralização do ácido fosfórico.

[0076] 50 % de Cáustico = [(0,142 x FFA Bruto) +3,7] x óleo de PUFA de algas bruto em peso (kg) / 50

[0077] H2O = 0,05 X peso de óleo de PUFA de algas bruto (kg)

[0078] A solução cáustica/H2O foi adicionada a mistura de óleo de algas/ácido fosfórico e foi auxiliada por 30 minutos. 2,5 % de Solução de Salmoura e 2,5 % de H2O foram adicionados. A solução resultante foi, então, aquecida a 80-85 °C e, então,

centrifugada. O óleo resultante foi isolado, e foi testado quanto à palatabilidade ou adicionalmente processado por etapas adicionais. Branqueamento

[0079] Sob nitrogênio, o óleo de PUFA de algas da etapa de processamento anterior, como a etapa de refinamento, foi aquecido a 50-55 °C. 0,25-1,4 % de sabões à base de Trisyl® (feitos por WR Grace Co. U.S.A.) foram adicionados à solução aquecida e a solução foi retida por 15 min. Um tipo de F- 72FF a 2 % de argila de branqueamento foi adicionado sob vácuo. O óleo foi aquecido a 90-95 °C e uma vez que o óleo alcança o ponto definido, foi retido por 60 min. Após a retenção, óleo restante foi filtrado a 91-95 °C usando um filtro de folha vertical (VLF). O óleo resultante foi isolado, e foi testado quanto à palatabilidade ou adicionalmente processado por etapas adicionais. Winterização

[0080] O óleo de PUFA de algas da etapa de processamento anterior, como a etapa de branqueamento, foi aquecido a 60 °C se abaixo de 45 °C. O óleo é, então, resfriado a 19 °C ou 7 °C, e foi retido àquela temperatura por 4 horas. Em seguida, Celpure® a 1 % foi adicionado (auxiliar de filtro da Imerys Filtration Minerals Inc. U.S.A.) e o óleo foi misturado por 15 minutos. O filtro usado nessa etapa é uma prensa de filtro de membrana. O óleo resultante foi isolado, e foi testado quanto à palatabilidade ou adicionalmente processado por etapas adicionais. Degomagem

[0081] Sob nitrogênio, o óleo de PUFA de algas da etapa de processamento anterior foi aquecido a 90-95 °C. Ácido cítrico a 3 % (50 % de solução) e H2O a 10 % foram adicionados e misturados por 4 horas. Após a retenção, o tempo é concluído, a solução de óleo foi decantada por mais 4 horas. O óleo foi lavado com água com 10 % de peso de peso de óleo degomado. Misturar por 4 horas e decantar por 4 horas. Secar o óleo sob vácuo e nitrogênio a 50-60 °C até que a umidade seja <0,5 %. O filtro usado nessa etapa é uma prensa de filtro de membrana. O óleo resultante foi isolado, e foi testado quanto à palatabilidade ou adicionalmente processado por etapas adicionais. Evaporação de Trajetória Curta

[0082] A evaporação de trajetória curta ou SPE é um tipo específico de refinamento. A mesma foi conduzida em um evaporador de trajetória curta comercialmente disponível adquirido junto a LCI Corporation, U.S.A.

[0083] Nesse evaporador de trajetória curta, a montagem de gaiola de rotor circunda um condensador interno e gira em velocidades moderadas. A ração foi alimentada através de um bocal no topo da unidade e é espalhada em uma película fina na superfície interna do invólucro através de pás de rotor.

[0084] A construção do tipo gaiola e localização do condensador interno criam uma trajetória de fluxo a vapor curta ou “trajetória curta”. A pressão de operação foi definida para 10 Pa (0,1 mbar) quando comparada. O aquecimento das temperaturas médias foi definido a 240 °C. A taxa de fluxo foi 13 l/hora.

[0085] O destilado e o concentrado líquido restante são drenados por saídas separadas no fundo da unidade. O óleo resultante foi isolado, e foi testado quanto à palatabilidade ou adicionalmente processado por etapas adicionais.

Desodorização

[0086] A desodorização foi realizada em um desodorizador de VTA ou em um desodorizador DeSmet em uma condição contínua ou uma condição de batelada como mostrado na Tabela 1 abaixo. Tabela 1 Parâmetros Operacionais Desodorizador Taxa de Taxa de Temperatura Pressão Alimentação Vapor Desodorizador de 100 Pa (1 180 10 kg/Hr 8,3 ml/min VTA mbar) Desodorizador 400 Pa (4 205 7 kg/hr 3,5 ml/min Continuo DeSmet mbar) Desodorizador de 400 Pa (4 170-190 NA ml/min Batelada DeSmet mbar)

[0087] O desodorizador de VTA foi feito por VTA Verfahrenstechnische Anlagen GmbH & Co. KG, Alemanha. O desodorizador DeSmet foi feito por Desmet Ballestra Group, Bélgica. O processo de desodorização foi executado sob condição específica pelos fabricantes.

[0088] O óleo resultante foi coletado do desodorizador e foi testado quanto à palatabilidade. Exemplo 2 Teste de Animal de Palatabilidade de Ração para Animais de Estimação

[0089] Os animais de estimação, como cães a gatos domesticados, têm diferentes exigências nutricionais e são sensíveis a vários condutores de palatabilidade. O teste de preferência de alimento para animais usado no presente documento é projetado para identificar a preferência de alimento que contém PUFA pelos animais testados.

[0090] Na testagem de preferência, os animais podem escolher entre duas dietas diferentes apresentadas simultaneamente. Isso é também chamado de teste de dois recipientes. Nesse teste de dois recipientes, compara-se a quantidade de duas alimentos, apresentadas simultaneamente, consumidas em um período de tempo definido. Esse é o teste mais comum usado em painéis de especialistas para estudos de avaliação de palatabilidade de cães e gatos. Compara-se dois produtos e estabelece uma preferência com base na diferença de quantidades consumidas. Em tais testes, dois recipientes idênticos foram entregues simultaneamente ao animal testado, cada recipiente contendo um dos dois produtos a serem testados (A ou B). O animal tem acesso livre aos recipientes por um período de tempo pré-definido. A quantidade disponível em cada recipiente é mais que suficiente para abranger as exigências energéticas. No final do tempo de alimentação ou quando um recipiente é acabado, os recipientes são retirados e pesados novamente para medir a quantidade consumida.

[0091] Um total de 30 cães foi inscrito em cada teste de dois recipientes conduzido nessa invenção. Cada teste durou dois dias. No teste, duas dietas, Dieta A e Dieta B, foram preparadas. A Dieta A é um alimento para animais de estimação da marca Kibble misturada com uma amostra de óleo de PUFA de testagem. A Dieta B é o mesmo alimento para animais de estimação da marca Kibble misturada com uma amostra de óleo de PUFA de controle. O alimento para animais de estimação da marca Kibble pode ser um alimento para cães ou um alimento para gatos, dependendo de qual tipo de animal que o teste foi realizado. No teste, o consumo diário médio de cada dieta A e B de cada cão ou gato foi medido. A quantidade de Dieta

A e Dieta B consumida por cada um dos 30 cães durante o período de dois dias foi medida. As razões de ingestão individuais entre Dieta A e Dieta B para cada um dos 30 cães foram calculadas. A média das 30 razões de ingestão individuais para cada uma dentre Dieta A e B foi calculada e usada como indicador da superioridade de palatabilidade de uma das duas dietas.

[0092] Os mesmos testes de dois recipientes foram conduzidos em gatos seguindo os mesmos protocolos como descrito acima. A média das razões de ingestão de gato individuais para cada uma dentre a dieta A e B foi calculada e usada como indicador da superioridade de palatabilidade de uma das duas dietas. Exemplo 3

[0093] A fim de identificar o impacto de cada uma das etapas no processo de purificação de óleo de PUFA, as amostras de óleo de algas processadas por uma ou mais das etapas dentre refinamento, branqueamento, winterização e desodorização descritas no Exemplo 1 foram coletadas. A palatabilidade dessas amostras de óleo foi medida usando o protocolo de testagem descrito no Exemplo 2. As amostras de testagem incluem um óleo de algas bruto não processado como descrito no Exemplo 1, e os óleos que foram refinados e/ou branqueados e/ou winterizados.

[0094] Uma amostra de óleo de peixe comercial foi adquirida a partir do produtor de alimento para animais de estimação e foi etiquetada com “óleo de peixe de RC”. Esse óleo foi refinado, branqueado e desodorizado por seu fabricante antes de ter sido adquirido.

[0095] O “óleo de peixe de RC” foi usado como um óleo de controle, e foi comparado com as amostras de óleo de testagem descritas acima. Os resultados de teste são resumidos na Tabela 2. Tabela 2 Alimento Óleo de Desodorizado Base e óleo Algas Refino Branqueado Winterizado por VTA de controle Bruto Processo Pontuação de Palatabilidade 22,9 (% de Ingestão) Processo Pontuação de Palatabilidade 26,8 (% de Ingestão) Alimento Processo para cães e Pontuação de Óleo de Palatabilidade 31,8 peixe de RC (% de Ingestão) Processo Pontuação de Palatabilidade 46,4 (% de Ingestão) Processo Pontuação de Palatabilidade 74 (% de Ingestão)

[0096] Os dados na Tabela 2 mostram que quando um óleo de algas bruto não processado foi refinado, branqueado e winterizado, mas ainda não desodorizado, o aprimoramento em relação à palatabilidade do óleo é incremental, por exemplo, a partir de uma razão de ingestão de 22,9 % para um óleo de algas bruto (quando comparado à óleo de peixe de RC de amostra de óleo de controle), para 26,8 % após o refinamento, para 31,8 % após tanto refinamento quanto branqueamento, e para 46,4 % após refinamento, branqueamento e winterização.

A óleo de peixe de RC de amostra de óleo de controle ainda é preferencial pelos cães no teste em relação à amostra de teste que foi triplamente processada pelas etapas de refinamento, branqueamento e preparação para o inverno. No entanto, quando uma etapa adicional de desodorização foi realizada, a pontuação de palatabilidade do óleo é aumentada 27,6 pontos percentuais de 46,4 % a 74 %. Esse aumento é maior que todas as três etapas de refinamento, branqueamento e winterização combinadas, que é 23,5 pontos percentuais. Isso mostra que a etapa de desodorização é mais eficaz que as etapas de refinamento, branqueamento e winterização no aprimoramento da palatabilidade de óleo de PUFA de algas. Exemplo 4

[0097] No seguinte experimento, a perda de rendimento por cada uma das etapas de processamento foi examinada e a combinação ideal de etapas de processamento foi identificada.

[0098] O rendimento de um óleo de PUFA de algas bruto foi examinado após uma ou mais etapas de processamento de refinamento, branqueamento, winterização e desodorização terem sido adicionadas ao processo de purificação. Além disso, o rendimento do óleo após passar por duas outras etapas de processamento, - etapa de degomagem e etapa de evaporação de trajetória curta (SPE), também foi examinado. As pontuações de palatabilidade dos óleos processados acima foram medidas e comparadas. O processamento de óleo foi conduzido com base nos métodos como descrito no Exemplo 1. O teste de palatabilidade foi conduzido como descrito no Exemplo 2, usando o óleo de peixe de RC como óleo de controle. O óleo de algas bruto usado nesse exemplo é um óleo de algas bruto não processado como descrito no Exemplo 1. Os resultados de teste são resumidos na Tabela 3. Tabela 3 Nome de Óleo de Algas de Óleo de Experimento Testagem e Etapas de % de % de Controle n° Processamento Rendimento Palatabilidade 1 Óleo de Algas Bruto NA 24,8 Refinado + Branqueado + Winterizado a 11 °C + 2 Desodorizado de modo Contínuo por DeSmet 74,5 63,6 Refinado + Branqueado + 3 Desodorizado de modo Contínuo por DeSmet 83,9 56,8 Óleo de Refinado + Desodorizado de Peixe de 4 modo Contínuo por DeSmet 90,7 61,4

RC 5 Refinado + VTA 90,8 71,9 6 SPE 94,6 56,5 SPE + Desodorizado de modo 7 Contínuo por DeSmet 90,1 78,6 SPE + Desodorizado por 8 Batelada por DeSmet 94,3 62,4 Degomado, SPE + Desodorizado 9 de modo Contínuo por DeSmet 92,2 73,2 10 Degomado, SPE + VTA 92,0 60,1

[0099] Os resultados de teste mostraram que quando as etapas de processamento de óleo comuns, como refinamento, branqueamento e winterização, foram empregadas na purificação de um óleo de algas bruto, até 25,5 % do óleo de algas bruto original foi perdido pelo processo (Experimento n° 1). Se uma ou mais das etapas de processamento forem removidas, como a etapa de winterização, o rendimento de óleo foi aprimorado, mas a palatabilidade de óleo piorou (Experimento n° 2). No entanto, se todas as três etapas de refinamento, branqueamento e winterização forem substituídas por uma etapa de degomagem e/ou uma etapa de SPE, enquanto retêm a etapa de desodorização, um rendimento acima de 90 %

foi alcançado enquanto uma pontuação de palatabilidade que é similar a ou maior que a do óleo de RBWD foi preservada (Experimentos nº 7-10). Surpreendentemente, constatou-se que um óleo degomado, SPE e desodorizado tem um rendimento de 92,2 % (Experimento n° 9), que tem cerca de 24 % de aumento em relação ao rendimento de 74,5 % do óleo de RBWD (Experimento n° 1). A palatabilidade desse óleo é 73,2 % (Experimento n° 9), que é mais que 9 % maior que a pontuação de palatabilidade de 63,6 % do óleo de RBWD (Experimento n° 1). Exemplo 5 Análise de SPME-GCMS de Voláteis em amostras de óleo de PUFA

[0100] Para identificar e quantificar esses compostos que foram removidos das amostras de óleo de PUFA de algas pelo processo de desodorização e, assim, supostamente causaram o aprimoramento da palatabilidade, uma análise de SPME-GCMS foi conduzida usando heptanoato de etila como um padrão interno. Como resultado, as concentrações aproximadas em partes por bilhão (ppb) para voláteis específicos que estão relacionados ao odor em óleo de PUFA de algas ou óleo de PUFA de peixe foram identificadas.

[0101] Uma lista de dez voláteis que são comumente detectados em óleo de PUFA de peixe bruto e óleo de PUFA de algas bruto é descrita na Tabela 4. Os produtos de oxidação de lipídios, como 1-penten-3-ona, 4-heptenal e 2,6- nonadienal, são comumente encontrados em óleos de peixe brutos e geram sabor desagradável. Os produtos de reação de Maillard na Tabela 4 são comumente encontrados em óleo de algas extraído aquoso e geram sabor desagradável. A fim de quantificar a quantidade de nove produtos de oxidação de lipídios e produtos de reação de Maillard nas amostras de óleo de PUFA, uma décima primeira amostra de heptanoato de etila foi adicionada como um padrão interno na lista de voláteis alvo. Tabela 4 Composto Volátil Fonte de Reação Íon de quantificação (m/z) 1-penten-3-ona produto de oxidação de lipídios 84 4-heptenal produto de oxidação de lipídios 84 2,6-nonadienal produto de oxidação de lipídios 70 Trimetilpirazina Produto de reação de Maillard 122 2-etil-3,5-dimetilpirazina Produto de reação de Maillard 135 2-etil-3,6-dimetilpirazina Produto de reação de Maillard 135 Tetrametilpirazina Produto de reação de Maillard 136 2-hidroxi-3-metil-2- Produto de reação de Maillard 112 ciclopenten-1-ona Metil-1H-pirrol-2-carboxaldeído Produto de reação de Maillard 109 Indol Produto de reação de Maillard 90 Heptanoato de etila Padrão interno (adicionado) 88

[0102] Dez amostras de óleo de PUFA de algas e peixe óleo de PUFA, bruto ou refinado, foram analisadas para dez voláteis da Tabela 4. Cada uma das dez amostras de óleo de PUFA foi testada em duplicata. Para cada replicação, 3 g de óleo foram usados em um frasco headspace de 20 ml juntamente com 0,05 g de uma solução padrão interna de 123 ppb de heptanoato de etila em migliol. As amostras foram vortexadas até misturar completamente e a concentração padrão interna final foi cerca de 2 ppb em cada amostra de óleo. A amostra e os pesos padrão internos foram registrados com precisão para cada replicação. Uma fibra de SPME manual de "fase tripla" de 2 cm (PDMS (polidimetilsiloxano)/carboxeno/DVB (Divinil benzeno)) foi exposta no frasco por 30 minutos a 75 °C após um equilíbrio de 2 minutos. O instrumento e o método usados foram o aparelho GCO, mas apenas os dados espectrais de massa foram registrados. Os voláteis que foram medidos estão listados na Tabela 4.

[0103] As áreas de pico de íons, amostras registradas e pesos padrão internos, e a concentração do padrão interno foram usados para calcular a concentração aproximada para cada volátil de interesse (consulte a Equação 1). Isso assume uma resposta equivalente ao padrão interno de heptanoato de etila. Portanto, essas concentrações aproximadas são relatadas como ppb (partes por bilhão) como heptanoato de etila.

[0104] Equação 1: Conc (ppb) de volátil = volátil de área de pico de íon / área de pico de íon é * conc IS em amostra Onde a área de pico de íon IS = área de pico para 88 íons m/z de heptanoato de etila E volátil de área de pico de íons = área de pico para íon selecionado para cada volátil de interesse (listado na Tabela 1) e conc IS em amostra = conc IS de pico (123 ppb) * peso de pico IS / (peso de amostra + peso de pico IS)

[0105] As concentrações médias em ppb (como heptanoato de etila) para cada volátil e cada amostra são listadas na Tabela 5 abaixo, juntamente com dados de palatabilidade se conhecido. Alguns picos foram medidos até 0,1 ppb, enquanto outros foram detectados, mas não puderam ser quantificados de forma confiável em níveis ainda mais baixos, portanto, são relatados como <0,1 ppb. Picos abaixo do limite de detecção (0,01 ppb, como heptanoato de etila) foram marcados como não detectados (nd).

[0106] A amostra “Amostra de óleo de algas 1 bruto” se refere a um óleo de algas bruto não processado extraído da cepa Schizochytrium ATCC PTA-10208.

[0107] A amostra “Amostra de óleo de algas 1 RBWD deo VTA” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “Amostra de óleo de algas 1 bruto” ter sido refinada, branqueada, winterizada e desodorizada por um desodorizador de VTA.

[0108] A amostra “Amostra de óleo de algas 1 RBWD deo demet” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “Amostra de óleo de algas 2 bruto” ter sido refinada, branqueada, winterizada e desodorizada por um desodorizador DeSmet.

[0109] A amostra “Amostra de óleo de algas 1 BWD deo demet” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “Amostra de óleo de algas 1 bruto” ter sido branqueada, winterizada e desodorizada por um desodorizador DeSmet.

[0110] A amostra “Amostra de óleo de algas 2 BWD deo demet” se refere ao óleo resultante após uma segunda amostra de um óleo de algas bruto não processado extraído da cepa Schizochytrium ATCC PTA-10208 ter sido branqueada, winterizada e desodorizada por um desodorizador DeSmet.

[0111] Um óleo de peixe de RC foi usado como a amostra de óleo de controle para as 5 amostras de óleo de algas acima nos testes de preferência de alimento de dois recipientes.

[0112] Uma amostra de óleo de peixe comercial foi adquirida junto a Ocean Nutrition Corp. e foi identificada como “Amostra de óleo de peixe 3”. Esse óleo foi refinado, branqueado e desodorizado. Esse óleo foi usado como a amostra de óleo de controle para “amostra de óleo de peixe 3 RBWD” no teste de preferência de alimento de dois recipientes.

[0113] A amostra “Amostra de óleo de peixe 3 RBWD” se refere ao óleo resultante após a “amostra de óleo de peixe 3” ter sido refinada, branqueada, winterizada e desodorizada por um desodorizador DeSmet.

[0114] A amostra “Amostra de óleo de algas 4 bruto” se refere a uma quarta amostra de um óleo de algas bruto não processado extraído da cepa Schizochytrium ATCC PTA-10208.

[0115] A amostra “Amostra de óleo de algas 4 RBWD deo demet” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “Amostra de óleo de algas 4 bruto” ter sido refinada, branqueada, winterizada e desodorizada por um desodorizador DeSmet.

[0116] As amostras de óleo de algas bruto 1, 2 e 4 são de bateladas separadas de óleo de algas bruto extraído da cepa Schizochytrium ATCC PTA-10208.

[0117] Como mostrado na Tabela 5, os óleos brutos são distintivamente diferentes de seus óleos desodorizados correspondentes, tanto para óleos de peixe quanto para óleos de algas. A desodorização resulta em alguma diminuição na concentração aproximada de todos os voláteis em comparação com seu estado bruto. Os óleos de algas brutos, como mostrado em óleo de algas de “Amostra de óleo de algas 1 bruto” e óleo de algas de “Amostra de óleo de algas 4 bruto”, têm concentrações muito maiores dos produtos de reação de Maillard que suas contrapartes desodorizadas, como óleo de algas de “Amostra de óleo de algas 2 BWD deo desmet”, e óleo de algas de “Amostra de óleo de algas 4 RBWD deo desmet”, respectivamente. A concentração das pirazinas é particularmente alta onde as concentrações atingem centenas a milhares de ppb (como heptanoato de etila). Nos óleos desodorizados, essas pirazinas não são detectadas ou detectadas em <0,3 ppb (como heptanoato de etila). Os outros produtos da reação de Maillard também estão em concentrações significativamente mais altas nos óleos brutos de algas (na faixa de 10 a 100 ppb), embora não sejam detectados na maioria dos óleos desodorizados.

[0118] Os óleos de algas desodorizados mostram picos muito menores para a maioria dos compostos em comparação com os óleos de algas brutos, com muitos dos produtos da reação de Maillard não mais detectados após a desodorização. Dentro das amostras de óleo de algas desodorizadas, o uso de desodorização VTA (“amostra de óleo de algas 1 RBWD deo VTA”) mostra ainda mais aprimoramentos com menos picos de produto da reação de Maillard detectados e níveis mais baixos de alguns produtos de oxidação lipídica em comparação com a desodorização Desmet (“Amostra de óleo de algas 1 RBWD deo desmet”). Com base nesses dados, à medida que menos voláteis alvo são detectados, a classificação de palatabilidade tende a aprimorar (aumentar).

[0119] Os produtos de oxidação lipídica foram detectados em concentrações mais baixas nos óleos desodorizados em comparação com os óleos brutos, mas a faixa de concentração geral dos produtos de oxidação lipídica foi relativamente baixa (faixa de <0,3 ppb a cerca de 20 ppb) e a maioria não foi totalmente removida por desodorização. A área do pico dos voláteis mencionados acima para cada amostra foi medida nas condições descritas acima.

[0120] O impacto de odor de cada volátil depende não apenas de sua concentração, mas também do limite de odor que varia para cada composto. Portanto, para julgar o aprimoramento do odor, deve-se considerar as mudanças no tamanho de pico relativo para cada composto e como isso se relaciona com os resultados de palatabilidade. A partir desses dados, foi observado que a desodorização tem um efeito drástico na redução da concentração relativamente alta de Produtos de Reação de Maillard por fatores de 100-1000 até níveis quase imperceptíveis, correspondendo a um efeito mais drástico nos resultados de palatabilidade. As amostras desodorizadas mostram que reduções adicionais nos produtos de reação de Maillard demonstraram um aprimoramento correspondente no resultado de palatabilidade, mesmo quando níveis similares dos produtos de oxidação de lipídios estão presentes (isto é, comparando amostra “Amostra de óleo de algas 1 RBWD deo desmet” à amostra “Amostra de óleo de algas 1 RBWD deo VTA” ou comparando a amostra “Amostra de óleo de algas 1 BWD deo desmet” à amostra “Amostra de óleo de algas 2 BWD deo desmet”).

[0121] A amostra “Amostra de óleo de peixe 3” é o controle para “Amostra de óleo de peixe 3 RBWD”. Ambas as amostras de óleo de peixe foram desodorizadas e, então, foram diminuídas em produtos de reação de Maillard. No entanto, a amostra “Amostra de óleo de peixe 3 RBWD” foi desodorizada usando um desodorizador de VTA e, então, teve concentração ainda menor de produtos de reação de Maillard. A amostra “Amostra de óleo de peixe 3 RBWD” mostrou uma pontuação de palatabilidade aprimorada em relação a uma “Amostra de óleo de peixe 3” já desodorizado quando um desodorizador de VTA foi usado.

[0122] A amostra “Amostra de óleo de algas 4 bruto” é o controle para “Amostra de óleo de algas 4 bruto” no teste de dois recipientes. “Amostra de óleo de algas 4 bruto” é outra batelada de óleo de algas bruto que mais uma vez mostrou que era rico em produtos de reação de Maillard.

Após o óleo de algas bruto ser processado com etapas de refinamento, branqueamento, winterização e desodorização, apresenta baixo teor de produtos de reação de Maillard e, então, aprimora a palatabilidade em relação à amostra de controle.

Exemplo 6 Avaliação Sensorial Humana de Amostra de Óleo de PUFA de Algas Refinado

[0123] A fim de identificar a percepção sensorial humana de óleos de PUFA de algas que foram desodorizados ou não desodorizados, perfis sensoriais descritivos de tais óleos foram obtidos e medidos.

[0124] O “1099 bruto” é um óleo de algas bruto não processado que foi extraído da cepa Schizochytrium ATCC PTA-

10208. Foi usado como o óleo de partida para refinamento, branqueamento, filtragem a frio e desodorização. “Óleo de peixe de RC” como mencionado no Exemplo 3 foi usado para o óleo de controle no teste de palatabilidade de dois recipientes.

[0125] A amostra de “1099 refinado” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “1099 bruto” ter sido refinada, mas não branqueada, winterizada ou desodorizada.

[0126] A amostra de “1099 branqueado” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “1099 bruto” ter sido branqueada, mas não refinada, winterizada ou desodorizada.

[0127] A amostra de “1099A filtrado a frio” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “1099 bruto” ter sido filtrada a frio 7 oC, mas não refinada, branqueada, winterizada ou desodorizada.

[0128] A amostra de “1099B filtrado a frio” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “1099 bruto” ter sido filtrada a frio 19 oC, mas não refinada, branqueada, winterizada ou desodorizada.

[0129] A amostra de “1099A Deod” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “1099 bruto” ter sido desodorizada por um desodorizador de VTA e refinada, branqueada e winterizada a 7 oC.

[0130] A amostra de “1099B Deod” se refere ao óleo resultante após a amostra de óleo de algas bruto “1099 bruto” ter sido desodorizada por um desodorizador de VTA e refinada, branqueada e winterizada a 19 oC.

[0131] Várias propriedades sensoriais humanas foram examinadas e medidas, incluindo os sabores desagradáveis de: queimado, complexo de peixe, complexo verde, proteína da carne, pútrido, produto químico/Solvente, maltado/granulado, complexo de ovo, gambá, cacau e oxidado. Os testes de palatabilidade correspondentes em cada uma das cinco amostras de óleo acima também foram conduzidos, com “óleo de peixe de RC” como a dieta de referência.

[0132] O resultado do experimento é mostrado na Figura 1.

[0133] O óleo de algas desodorizado mostra a última intensidade de sabor desagradável. Em comparação, todos os óleos de algas não desodorizados se mostraram pelo menos cinco vezes ou ainda mais intensidade de sabor desagradável. Tal diferença se correlaciona inversamente com as pontuações de palatabilidade de óleo de algas desodorizado e óleos de algas que não foram desodorizados. Em outras palavras, o óleo desodorizado tem alta pontuação de palatabilidade e tem baixa intensidade de sabor desagradável que os óleos de algas que não foram desodorizados. Todos os óleos de algas que não foram desodorizados têm baixa pontuação de palatabilidade e alta intensidade de sabor desagradável.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Método para melhorar a palatabilidade de um óleo de ácidos graxos poli-insaturados (PUFA) para um animal de companhia, sendo o dito método caracterizado por compreender as etapas de: a) obter um óleo de PUFA bruto; b) opcionalmente, realizar a degomagem ou refinamento usando-se um evaporador de trajetória curta (SPE), ou tanto realizar a degomagem quanto refinamento usando um SPE do dito óleo de PUFA da etapa a); e c) desodorizar o óleo de PUFA da etapa b); em que o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) não é menor que 85 % da quantidade do óleo bruto iniciado na etapa a), em que a dita palatabilidade é medida pelo teste de preferência de alimento para animais, e em que a pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA obtido após a etapa c) é pelo menos 10 pontos percentuais maior que o óleo bruto iniciado na etapa a).

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o rendimento do óleo de PUFA não é menor que 90 % do óleo bruto iniciado na etapa a).

3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o dito teste de preferência de alimento para animais é um teste de dois recipientes.

4. Método, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA obtido após a etapa c) é pelo menos 20 pontos percentuais maior que o óleo bruto iniciado na etapa a).

5. Método, de acordo com a reivindicação 3,

caracterizado pelo fato de que a pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA obtido após a etapa c) é pelo menos 30 pontos percentuais maior que o óleo bruto iniciado na etapa a).

6. Método, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA obtido após a etapa c) é pelo menos 40 pontos percentuais maior que o óleo bruto iniciado na etapa a).

7. Método, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que a pontuação de palatabilidade do óleo de PUFA obtido após a etapa c) é pelo menos 45 pontos percentuais maior que o óleo bruto iniciado na etapa a).

8. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que a dita etapa de desodorização c) é conduzida usando-se um desodorizador de VTA.

9. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que a dita etapa de desodorização c) é conduzida usando-se um desodorizador DeSmet.

10. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que o óleo de PUFA é derivado de peixe.

11. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que o óleo de PUFA é derivado de microrganismos.

12. Método, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que os microrganismos são algas.

13. Método, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que as algas são Schizochytrium, Aurantiochytrium ou Thraustochytrium.

14. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, caracterizado pelo fato de que o óleo de PUFA é derivado de plantas.

15. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizado pelo fato de que o óleo de PUFA compreende um ou mais compostos de DHA, EPA, ARA e DPA.

16. Óleo de ácido graxo poli-insaturado (PUFA), sendo o dito óleo de PUFA caracterizado por compreender menos que 10 ppb de um ou mais compostos de reação de Maillard e mais que 1,5 ppb de um ou mais produtos de oxidação de lipídios, quando qualificados como heptanoato de etila.

17. Óleo de PUFA, de acordo com a reivindicação 16, sendo o dito óleo de PUFA caracterizado por compreender menos que 1 ppb de compostos de reação de Maillard quando qualificados como heptanoato de etila.

18. Óleo de PUFA, de acordo com a reivindicação 17, sendo o dito óleo de PUFA caracterizado por compreender menos que 0,5 ppb de compostos de reação de Maillard quando qualificados como heptanoato de etila.

19. Óleo de PUFA, de acordo com a reivindicação 18, sendo o dito óleo de PUFA caracterizado por compreender menos que 0,3 ppb de compostos de reação de Maillard quando qualificados como heptanoato de etila.

20. Óleo de PUFA, de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que a quantidade de compostos de reação de Maillard no dito óleo de PUFA é indetectável quando qualificados como heptanoato de etila.

21. Óleo de PUFA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 a 20, caracterizado pelo fato de que os ditos compostos de reação de Maillard são selecionados a partir de um grupo que consiste em: trimetilpirazina, 2- etil-3,5-dimetilpirazina, 2-etil-3,6-dimetilpirazina, tetrametilpirazina, 2-hidroxi-3-metil-2-ciclopenten-1-ona, metil-1H-pirrol-2-carboxaldeído e indol.

22. Óleo de PUFA, de acordo com qualquer uma das reivindicações 15 a 21, caracterizado pelo fato de que os ditos produtos de oxidação de lipídios são selecionados a partir de um grupo que consiste em: 1-penten-3-ona, 4- heptenal e 2,6-nonadienal.

23. Composição alimentar para um animal de companhia, sendo a dita composição alimentar caracterizada por compreender um óleo de PUFA que é produzido pelo método conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 15.

24. Composição alimentar para um animal de companhia, sendo a dita composição alimentar caracterizada por compreender o óleo de PUFA conforme definido em qualquer uma das reivindicações 16 a 22.

25. Composição alimentar, de acordo com a reivindicação 23 ou 24, caracterizada pelo fato de que o animal de companhia é um cão.

26. Composição alimentar, de acordo com a reivindicação 23 ou 24, caracterizada pelo fato de que o animal de companhia é um gato.

27. Composição alimentar, de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 a 26, sendo a composição alimentar caracterizada por ser um alimento para cães ou um alimento para gatos.

28. Composição alimentar, de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 a 26, sendo a composição alimentar caracterizada por ser um petisco para cães ou um petisco para gatos.

29. Composição alimentar, de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 a 26, sendo a composição alimentar caracterizada por ser um suplemento nutricional.

30. Composição alimentar para consumo humano, sendo a dita composição alimentar caracterizada por compreender um óleo de PUFA que é processado pelo método conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 15.

31. Composição alimentar para consumo humano, sendo a dita composição alimentar caracterizada por compreender o óleo de PUFA conforme definido em qualquer uma das reivindicações 16 a 22.

32. Método para aumentar o rendimento de um óleo de ácidos graxos poli-insaturados (PUFA) em relação a um óleo de controle que é o mesmo óleo, mas foi refinado, branqueado, winterizado e desodorizado (óleo de RBWD), sendo o dito método caracterizado por compreender as etapas de: a) obter um óleo de PUFA bruto; b) opcionalmente, realizar a degomagem do dito óleo de PUFA ou refinamento usando-se um evaporador de trajetória curta (SPE) do dito óleo de PUFA, ou tanto realizar a degomagem quanto refinamento usando-se um SPE do dito óleo de PUFA da etapa a); e c) desodorizar o óleo de PUFA da etapa b); em que o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) é mais que 5 pontos percentuais maior que o rendimento do óleo de RBWD.

33. Método, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) é mais que 10 pontos percentuais maior que o rendimento do óleo de RBWD.

34. Método, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o rendimento do óleo de PUFA após a etapa c) é mais que 20 pontos percentuais maior que o rendimento do óleo de RBWD.

35. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 a 34, caracterizado pelo fato de que a diferença entre as pontuações de palatabilidade do óleo de PUFA após a etapa c) e o óleo de RBWD é menor que 10 % em um teste de preferência de alimento para animais em que um óleo de amostra de controle comum é usado.

36. Método, de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que o óleo de PUFA após a etapa c) tem uma pontuação de palatabilidade maior que o óleo de RBWD em um teste de preferência animal em que um óleo de amostra de controle comum é usado.

37. Método, de acordo com a reivindicação 35 ou 36, caracterizado pelo fato de que o dito teste de preferência de alimento para animais é um teste de dois recipientes.

38. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 a 37, caracterizado pelo fato de que a dita etapa de desodorização c) é conduzida usando-se um desodorizador de VTA.

39. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 a 37, caracterizado pelo fato de que a dita etapa de desodorização c) é conduzida usando-se um desodorizador DeSmet.

40. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 a 39, caracterizado pelo fato de que o óleo de PUFA é derivado de peixe.

41. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 a 39, caracterizado pelo fato de que o óleo de PUFA é derivado de microrganismos.

42. Método, de acordo com a reivindicação 41, caracterizado pelo fato de que os microrganismos são algas.

43. Método, de acordo com a reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que as algas são Schizochytrium, Aurantiochytrium ou Thraustochytrium.

44. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 a 39, caracterizado pelo fato de que o óleo de PUFA é derivado de plantas.