BR112021002586A2 - formulações de dendrímero - Google Patents

formulações de dendrímero Download PDF

Info

Publication number
BR112021002586A2
BR112021002586A2 BR112021002586-3A BR112021002586A BR112021002586A2 BR 112021002586 A2 BR112021002586 A2 BR 112021002586A2 BR 112021002586 A BR112021002586 A BR 112021002586A BR 112021002586 A2 BR112021002586 A2 BR 112021002586A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
pharmaceutical composition
dendrimer
formula
composition according
pharmaceutically acceptable
Prior art date
Application number
BR112021002586-3A
Other languages
English (en)
Inventor
Paul Gellert
Kathryn Hill
Richard Storey
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of BR112021002586A2 publication Critical patent/BR112021002586A2/pt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/63—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide
    • A61K31/635—Compounds containing para-N-benzenesulfonyl-N-groups, e.g. sulfanilamide, p-nitrobenzenesulfonyl hydrazide having a heterocyclic ring, e.g. sulfadiazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/451—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. glutethimide, meperidine, loperamide, phencyclidine, piminodine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/595—Polyamides, e.g. nylon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
    • A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/20—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by singly bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D211/22—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by singly bound oxygen or sulphur atoms by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G69/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic amide link in the main chain of the macromolecule
    • C08G69/02—Polyamides derived from amino-carboxylic acids or from polyamines and polycarboxylic acids
    • C08G69/08—Polyamides derived from amino-carboxylic acids or from polyamines and polycarboxylic acids derived from amino-carboxylic acids
    • C08G69/10—Alpha-amino-carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G83/00—Macromolecular compounds not provided for in groups C08G2/00 - C08G81/00
    • C08G83/002—Dendritic macromolecules
    • C08G83/003—Dendrimers
    • C08G83/004—After treatment of dendrimers

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

FORMULAÇÕES DE DENDRÍMERO. A presente invenção refere-se a composições farmacêuticas que compreendem um composto liofilizado de fórmula (I): (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e métodos de uso das mesmas para o tratamento de câncer.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “FORMU- LAÇÕES DE DENDRÍMERO”. Pedidos Relacionados
[0001] Este pedido reivindica prioridade sob 35 U.S.C. 119(e) do Pedido Provisório dos EUA N.º 62/719,319 registrado em 17 de agosto, 2018, cujos conteúdos são deste modo incorporados a título de referên- cia na sua totalidade. Antecedentes
[0002] Bcl-2 e Bcl-XL são importantes membros anti-apoptóticos da família BCL-2 de proteínas e principais reguladores da sobrevivência celular (Chipuk JE et al., The BCL-2 family reunion, Mol.Cell 12 de fev de 2010;37(3):299-310). A translocação gênica, amplificação e/ou so- brexpressão de proteínas desses fatores críticos de sobrevivência foi observada em vários tipos de câncer e está amplamente implicada no desenvolvimento e progressão do câncer (Yip et al., Bcl-2 family pro- teins and cancer, Oncogene 2008 27, 6398-6406; e Beroukhim R. et al., The landscape of somatic copy-number alteration across human can- cers, Nature 18 de fev de 2010;463 (7283):899-905). Em muitas malig- nidades, BCL-2 e/ou BCL-XL também demonstraram mediar a resistên- cia ao fármaco e a recidiva e estão fortemente associados com um mau prognóstico (Robertson LE et al. Bcl-2 expression in chronic lymphocytic leukemia and its correlation with the induction of apoptosis and clinical outcome, Leukemia março de 1996;10(3):456-459; e Ilievska Poposka B. et al., Bcl-2 as a prognostic factor for survival in small-cell lung cancer, Makedonska Akademija na Naukite i Umetnostite Oddelenie Za Bio- loshki i Meditsinski Nauki Prilozi dez de 2008; 29(2):281-293).
[0003] Proteínas da família BCL2 anti-apoptóticas promovem a so- brevivência de células cancerígenas se ligando a proteínas pró-apoptó- ticas como BIM, PUMA, BAK e BAX e neutralizando suas atividades in- dutoras de morte celular (Chipuk JE et al., infra; e Yip et al, infra). Desse modo, ter BCL-2 e BCL-XL como alvo terapêutico isoladamente ou em combinação com outras terapias que influenciam o eixo da família BCL- 2 de proteínas, tais como quimioterápicos citotóxicos, inibidores de pro- teassoma ou inibidores de quinase é uma estratégia atraente que pode tratar o câncer e pode superar a resistência ao fármaco em muitos cân- ceres humanos (Delbridge, ARD et al., The BCL-2 protein family, BH3- mimetics and cancer therapy, Cell Death & Differentiation 2015 22, 1071-1080).
[0004] Além da potência celular, de modo a desenvolver um com- posto candidato em um produto farmacêutico adequadamente aceitável, o composto necessita de possuir e exibir uma série de propriedades adicionais. Essas incluem propriedades físico-químicas adequadas de modo a permitir a formulação em uma forma de dosagem adequada (por exemplo, solubilidade, estabilidade, manufaturabilidade), propriedades biofarmacêuticas adequadas (por exemplo, permeabilidade, solubili- dade, absorção, biodisponibilidade, estabilidade sob condições biológi- cas, comportamento farmacocinético e farmacodinâmico) e um perfil de segurança adequado para conferir um índice terapêutico aceitável. A identificação de compostos, por exemplo, inibidores de Bcl-2 e/ou Bcl- XL que exibam algumas ou todas essas propriedades é um desafio.
[0005] Inibidores de Bcl-2 e/ou Bcl-XL à base de N-acilsulfonamida particulares e métodos para fazer os mesmos são descritos na Patente dos E.U.A. Nº 9,018,381. A atividade e especificidade dos compostos que se ligam e inibem a função de Bcl-2 em uma célula foram também descritas na Patente dos E.U.A. Nº. 9,018,381 por meio de ensaios de ligação e ensaios celulares in vitro. No entanto, a administração desses inibidores de Bcl-2 e/ou Bcl-XL à base de N-acilsulfonamida provou ser difícil devido, por exemplo, à baixa solubilidade e aos efeitos secundá- rios relacionados com o alvo. Os requerentes desenvolveram dendríme- ros ligados a um certo inibidor de Bcl-2/XL (Composto A, cuja síntese é descrita na Patente US N.º 9,018,381) que podem superar os desafios de administração enfrentados pelos inibidores de Bcl não conjugados: (Composto A).
[0006] Os requerentes descobriram que a formulação de tais den- drímeros compreendendo o Composto A tem sido um desafio devido a problemas de estabilidade, como a clivagem do Composto A do dendrí- mero durante a formulação e armazenamento. Os requerentes desen- volveram, portanto, composições farmacêuticas e métodos de prepara- ção de tais composições farmacêuticas que minimizam as impurezas, incluindo a quantidade de Composto A clivado (livre). Sumário
[0007] São descritas no presente documento composições farma- cêuticas compreendendo dendrímeros liofilizados covalentemente liga- dos (por exemplo, conjugados ou ligados) a um inibidor de Bcl. Os den- drímeros conjugados exibem elevada solubilidade em comparação com o inibidor de Bcl não conjugado, e de dados pré-clínicos sugerem que os dendrímeros conjugados com o inibidor de Bcl têm o potencial para melhorar a tolerabilidade in vivo, o que pode melhorar o índice terapêu- tico e reduzir os efeitos colaterais. As composições farmacêuticas des- critas exibem boa solubilidade em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável, bem como impurezas mínimas geradas durante a formulação e armazenamento.
[0008] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (I)
(I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, especificada pelo fato de que: o Núcleo é
* indica ligação covalente a uma porção carbonila de (BU1); b é 2; BU são unidades de construção; BUx são unidades de construção de geração x, em que o número total de unidades de construção na geração x do dendrímero de fórmula (I) é igual a 2(x) e o número total de BU no dendrímero de fórmula (I) é igual a (2x-1)b; em que BU tem a seguinte estrutura:
# indica ligação covalente a uma porção amina do Núcleo ou uma porção amina de BU; + indica uma ligação covalente a uma porção carbonila de BU ou uma ligação covalente a W ou Z; W é independentemente (PM)c ou (H)e; Z é independentemente (L-AA)d ou (H)e; PM é PEG1800-2400; L-AA é um ligante covalentemente ligado a um agente ativo; em que L- AA é da fórmula:
em que A é –N(CH3) ou -S-; é o ponto de ligação a uma porção amina de BUx; desde que (c+d) ≤ (2x)b e d seja ≥ 1; e desde que se (c+d) < (2x)b, então quaisquer grupos W e Z rema- nescentes são (H)e, em que e é [(2x)b ]-(c+d). Em algumas modalidades, são descritas composições farmacêu- ticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (II):
(II), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, especificada pelo fato de que b é 2; O Núcleo é
* indica ligação covalente a uma porção carbonila de (BU1);
BU são unidades de construção e o número de BU é igual a 62; em que BU tem a seguinte estrutura:
# indica ligação covalente a uma porção amina do Núcleo ou uma porção amina de BU, e + indica uma ligação covalente a uma por- ção carbonila de BU ou uma ligação covalente a W ou Z; W é independentemente (PM)c ou (H)e; Z é independentemente (L-AA)d ou (H)e; PM é PEG1800-2400; L-AA é um ligante covalentemente ligado a um agente ativo; em que L- AA é da fórmula:
em que A é –N(CH3) ou -S-; indica ligação covalente a uma porção amina de BU5; desde que (c+d) seja ≤ 64 e d seja ≥ 1; e desde que se (c+d) < 64, então quaisquer grupos W e Z remanescen- tes são (H)e, em que e é 64-(c+d). Em algumas modalidades, são descritas composições farmacêu- ticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (III): D-Núcleo-D (III) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que
O Núcleo é Dé AP é um ponto de ligação a outra unidade de construção; W é independentemente (PM)c ou (H)e; Z é independentemente (L-AA)d ou (H)e; PM é PEG1800-2400; L-AA é um ligante covalentemente ligado a um agente ativo; em que L- AA é da fórmula: em que A é –N(CH3), -O-, -S- ou –CH2-; desde que se (c+d) < 64, então quaisquer grupos W e Z remanescen- tes são (H)e, em que e é 64-(c+d); e d é ≥ 1.
[0009] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula
(IV):
(IV), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Y é PEG1800-2400 ou H; Q é H ou L-AA, em que L-AA tem a estrutura:
, A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de PEG1800-2400 e de L-AA seja menor que 64, as restantes porções Q e Y são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA.
[0010] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (V): (V) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, especificada pelo fato de que Y é PEG1800-2400 ou H; Q é H ou L-AA, em que L-AA tem a estrutura: , A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de PEG1800-2400 e de L-AA seja menor que 64, as restantes porções Q e Y são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA.
[0011] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula
(VI): (VI), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que Y1 é -C(=O)CH2-(OCH2CH2)x-OCH3 ou H; x é um número inteiro de entre 39 e 53; e Q é H ou L-AA, no qual L-AA tem a estrutura: ,
[0012] A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de Y1 e de L-AA for menor que 64, as restantes porções Q e Y1 são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA. Em algumas modalidades, é descrito o com- posto de fórmula (VI) em que A é -S-. Em algumas modalidades, é des- crito o composto de fórmula (VI) em que A é -N(CH3).
[0013] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (VII): (VII) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, especificada pelo fato de que Y2 é -C(=O)CH2-(OCH2CH2)y-OCH3 ou H; y é um número inteiro de entre 39 e 53; e Q é H ou L-AA, no qual L-AA tem a estrutura:
, A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de Y2 e de L-AA for menor que 64, as restantes porções Q e Y2 são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA. Em algumas modalidades, é descrito o composto de fórmula (VII) em que A é -S-. Em algumas modalidades, é descrito o composto de fórmula (VII) em que A é -N(CH3).
[0014] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, preparado pelo processo que compreende os passos de dissolução do composto de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em ácido acético glacial para formar uma solução, liofilização da solução e sublimação do ácido acético a pressão reduzida.
[0015] Em algumas modalidades, são descritos métodos de trata- mento de câncer compreendendo a administração intravenosa a um su- jeito com necessidade do mesmo de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, e um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitá- vel.
[0016] Em algumas modalidades, é descrito o uso de uma compo-
sição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, no tratamento de câncer.
[0017] Em algumas modalidades, é descrito o uso de uma compo- sição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, para uso na fabricação de um medicamento para o tra- tamento de câncer.
[0018] Em algumas modalidades, é descrito um kit de partes com- preendendo um ou mais recipientes que compreende uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, e instruções de uso. Breve Descrição dos Desenhos
[0019] A Figura 1 apresenta um modelo de Xenoenxerto de Leuce- mia Linfoblástica Aguda (ALL) em camundongos SCID usando células de leucemia linfoblástica aguda humana (RS4:11) para várias macro- moléculas da presente invenção. É mostrada a avaliação da eficácia do veículo (solução salina tamponada com fosfato), Composto A (formu- lado em HP-β-CD a 30%, pH 4), Composto 1 em PBS (equivalente a 10 mg/kg do Composto A) e Composto 2 em PBS (equivalente a 10 mg/kg e 30 mg/kg do Composto A).
[0020] A Figura 2 apresenta a morte celular (apoptose) em vários pontos de tempo após uma dose única de veículo (solução salina tam- ponada com fosfato) ou do Comporto 2 em PBS (equivalente a 10 e 30 mg/kg do Composto A). A resposta de Caspase 3 Clivada (CC3) foi usada como uma medida da morte celular e foi determinada usando o kit Cell Signalling Pathscan ELISA.
[0021] A Figura 3 apresenta um modelo de Xenoenxerto de Leuce- mia Linfoblástica Aguda (ALL) em camundongos SCID usando células de leucemia linfoblástica aguda humana (RS4:11) para os vários den- drímeros descritos. É mostrada a avaliação da eficácia do veículo (so- lução salina tamponada com fosfato, PBS), uma formulação do Com- posto A em HP-β-CD a 30%, Composto 1 em PBS (equivalente a 20 mg/kg do Composto A) e Composto 2 em PBS (equivalente a 20 mg/kg do Composto A).
[0022] A Figura 4 apresenta a morte celular (apoptose), em vários pontos de tempo após uma dose única do veículo (solução salina tam- ponada com fosfato), formulações do Composto A em HP-β-CD a 30% a 5 mg/kg e 10 mg/kg e o dendrímero do Composto 1 em PBS a 10 mg/kg do Composto A equivalente. A resposta da poli-ADP ribose poli- merase (PARP) clivada foi usada como uma medida da morte celular.
[0023] A Figura 5 apresenta um modelo de Xenoenxerto de Leuce- mia Linfoblástica Aguda (ALL) em camundongos Rag2-/- usando células de leucemia linfoblástica aguda humana (RS4:11) para o Composto 2 e o veículo. É mostrada a avaliação da eficácia do veículo (solução salina tamponada com fosfato, PBS) e Composto 2 em PBS (equivalente a 10 mg/kg e 30 mg/kg do Composto A).
[0024] A Figura 6 apresenta o dendrímero de fórmula (IV).
[0025] A Figura 7 apresenta o dendrímero de fórmula (V).
[0026] A Figura 8 apresenta um Modelo de Xenoenxerto SuDHL-4 em camundongos SCID para o veículo (solução salina tamponada com fosfato, PBS), Composto 2 em PBS (equivalente a 50 mg/kg do Com- posto A), Composto 1 em PBS (equivalente a 50 mg/kg de composto A), rituximab (10 mg/kg), uma combinação do Exemplo 2 (10 mg/kg, 30 mg/kg e 50 mg/kg de composto A equivalente) com rituximab (10 mg/kg), e uma combinação do Composto 1 (10 mg/kg, 30 mg/kg e 50 mg/kg do Composto A equivalente) com rituximab (10 mg/kg). Ver o Exemplo 18.
[0027] A Figura 9 ilustra a atividade antitumoral in vivo em um mo- delo de tumor de câncer do pulmão de células pequenas humanas apre- sentado pelo Composto 1 em combinação com o inibidor de mTOR AZD2014.
[0028] A Figura 10 ilustra a atividade antitumoral in vivo em um mo- delo de tumor DLBCL humano apresentado pelo Composto 1 em com- binação com acalabrutinib. Descrição Detalhada
[0029] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (I) (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, especificada pelo fato de que: O Núcleo é * indica ligação covalente a uma porção carbonila de (BU1); b é 2; BU são unidades de construção; BUx são unidades de construção de geração x, em que o número total de unidades de construção na geração x do dendrímero de fórmula (I) é igual a 2(x) e o número total de BU no dendrímero de fórmula (I) é igual a (2x-1)b; em que BU tem a seguinte estrutura:
# indica ligação covalente a uma porção amina do Núcleo ou uma porção amina de BU; + indica uma ligação covalente a uma porção carbonila de BU ou uma ligação covalente a W ou Z; W é independentemente (PM)c ou (H)e; Z é independentemente (L-AA)d ou (H)e; PM é PEG1800-2400; L-AA é um ligante covalentemente ligado a um agente ativo; em que L- AA é da fórmula: em que A é –N(CH3) ou -S-; é o ponto de ligação a uma porção amina de BUx; desde que (c+d) ≤ (2x)b e d seja ≥ 1; e desde que se (c+d) < (2x)b, então quaisquer grupos W e Z rema- nescentes são (H)e, em que e é [(2x)b ]-(c+d).
[0030] Será apreciado que o núcleo do dendrímero representa a unidade central a partir da qual o dendrímero é construído. A este res- peito, o núcleo representa a unidade central a partir do qual a primeira e as gerações subsequentes de unidades de construção são "cresci- das". Em uma modalidade, o Núcleo, em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) é em que * indica uma ligação covalente às unidades de construção do dendrímero. Em algumas modalidades, o Núcleo, em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) é em que * indica uma ligação covalente às unidades de construção do dendrímero.
[0031] O termo "unidade de construção" ou "BU" inclui moléculas tendo pelo menos três grupos funcionais, um para ligação ao núcleo ou uma unidade de construção em uma geração (ou camada) anterior de unidades de construção e dois ou mais grupos funcionais para fixação às unidades construção na geração (ou camada) seguinte de unidades de construção. As unidades de construção são usadas para construir as camadas de dendrímeros, por adição ao núcleo ou à camada anterior de unidades de construção. Em algumas modalidades, as unidades de construção têm três grupos funcionais.
[0032] O termo "geração" inclui o número de camadas de unidades de construção que compõem um dendrón ou dendrímero. Por exemplo, um dendrímero de uma geração terá uma camada de unidades de cons- trução ligada ao núcleo, por exemplo, Núcleo-[[unidade de constru- ção]b, onde b é o número de dendróns ligados ao núcleo e a valência do núcleo. Um dendrímero de duas gerações tem duas camadas de uni- dades de construção em cada dendrón ligadas ao núcleo. Por exemplo,
quando a unidade de construção tem um ponto de ramificação bivalente, o dendrímero pode ser: Núcleo[[unidade de construção][unidade de construção]2]b, um dendrímero de três gerações tem três camadas de unidades de construção em cada dendrón ligadas ao núcleo, por exem- plo Núcleo-[[unidade de construção][unidade de construção]2[unidade de construção]4]b, um dendrímero de cinco gerações tem cinco cama- das de unidades de construção em cada dendrón ligadas ao núcleo, por exemplo Núcleo-[[unidade de construção][unidade de construção]2[uni- dade de construção]4[unidade de construção]8[unidade de constru- ção]16]b, um dendrímero de 6 gerações tem seis camadas de unidades de construção ligadas ao núcleo, por exemplo, Núcleo-[[unidade de construção][unidade de construção]2[unidade de construção]4[unidade de construção]8[unidade de construção]16[unidade de construção]32]b, e semelhantes. A última geração de unidades de construção (a geração mais exterior) fornece a funcionalização da superfície do dendrímero e o número de grupos funcionais de superfície disponíveis para a ligação do grupo modificador farmacocinético (PM) e/ou ligante e agente ativo (L-AA).
[0033] O termo " grupos funcionais de superfície " se refere aos gru- pos funcionais não reagidos que são encontrados na geração final das unidades de construção. Em algumas modalidades, o número de grupos funcionais de superfície é igual a (2x)b, em que x é o número de gera- ções no dendrímero e b é o número de dendróns. Em algumas modali- dades, os grupos funcionais de superfície são grupos funcionais de amina primária.
[0034] O número total de unidades de construção em um dendrí- mero com unidades de construção tendo 3 grupos funcionais (por exem- plo, um ponto de ramificação) é igual a (2x-1)b, onde x é igual ao número de geração e b é igual ao número de dendróns. Por exemplo, em um dendrímero tendo um núcleo com dois dendróns ligados (b = 2), se cada unidade de construção tiver um ponto de ramificação e existirem 5 ge- rações, haverá 62 unidades de construção e a geração mais exterior terá 16 unidades de construção com 64 grupos funcionais de superfície. Em algumas modalidades, os grupos funcionais de superfície são por- ções amina, por exemplo, aminas primárias ou secundárias. Em algu- mas modalidades, o dendrímero é um dendrímero de quinta geração tendo um Núcleo bivalente, 62 unidades de construção e 64 grupos fun- cionais de aminas primárias.
[0035] Em algumas modalidades, as unidades de construção, em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) têm a estrutura: em que # indica ligação covalente a uma porção amina do Núcleo ou uma porção amina de uma unidade de construção, e + indica uma liga- ção covalente a uma porção carbonila de uma unidade de construção, ou uma ligação covalente a um grupo modificador farmacocinético, um ligante ligado a um agente ativo ou um hidrogênio. Em algumas moda- lidades, o dendrímero tem 62 unidades de construção com 64 grupos funcionais de aminas primárias.
[0036] Em algumas modalidades, as unidades de construção, em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) têm a estrutura: # em que # indica ligação covalente a uma porção amina do Núcleo ou uma porção amina de uma unidade de construção, e + indica uma liga- ção covalente a uma porção carbonila de uma unidade de construção,
ou uma ligação covalente a um grupo modificador farmacocinético, um ligante ligado a um agente ativo ou um hidrogênio.
[0037] O termo "grupo modificador farmacocinético" ou "PM" inclui porções que podem modificar ou modular o perfil farmacocinético do dendrímero ou o agente ativo que está a entregar. Em algumas modali- dades, o PM pode modular a distribuição, metabolismo e/ou excreção do dendrímero ou do agente ativo. Em algumas modalidades, o PM pode influenciar a taxa de liberação do agente ativo, quer abrandando ou aumentando a taxa à qual o agente ativo é liberado do dendrímero quer por vias de degradação química (por exemplo, hidrólise) ou enzi- mática. Em algumas modalidades, o PM pode alterar o perfil de solubi- lidade do dendrímero, quer aumentando ou diminuindo a solubilidade em um portador farmaceuticamente aceitável. Em algumas modalida- des, o PM pode ajudar o dendrímero a entregar o agente ativo a tecidos específicos (por exemplo, tumores).
[0038] Em algumas modalidades, em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV) e (V), o PM é polietilenoglicol (PEG). Em algumas modalidades, o PEG tem um peso molecular entre cerca de 1800 e cerca de 2400 Da. Em algumas modalidades, o PEG tem um peso molecular médio de cerca de 2150 Da. Um perito na técnica en- tenderia rapidamente que o termo "PEG1800-2400” inclui PEG com um peso molecular médio entre cerca de 1800 e cerca de 2400 Da.
[0039] Em algumas modalidades, o PEG tem um índice de polidis- persividade (PDI) entre cerca de 1,00 e cerca de 2,00, entre cerca de 1,00 e 1,50, por exemplo entre cerca de 1,00 e cerca de 1,25, entre cerca de 1,00 e cerca de 1,10 ou entre cerca de 1,00 e cerca de 1,10. Em algumas modalidades, o PDI do PEG é cerca de 1,05. O termo "ín- dice de polidispersividade" se refere a uma medida da distribuição da massa molecular em uma dada amostra de polímero. O PDI é igual ao peso molecular médio ponderado (Mw) dividido pelo número de peso molecular médio (Mn) e indica a distribuição de massas moleculares in- dividuais em um lote de polímeros. O PDI tem um valor igual ou superior a 1, mas à medida que o polímero se aproxima do comprimento uni- forme da cadeia e do peso molecular médio, o PD1 estará mais próximo de 1.
[0040] Em algumas modalidades, o dendrímero tem menos do que (2x)b grupos PEG, em que x é o número de gerações do dendrímero e b é o número de dendróns. Em algumas modalidades, todos os grupos funcionais de superfície estão covalentemente ligados a grupos PEG. Em algumas modalidades, quando x é 5, o dendrímero tem entre cerca de 25 e cerca de 60 grupos PEG. Em algumas modalidades, o dendrí- mero não tem mais do que 2x grupos PEG. Em algumas modalidades, o dendrímero tem 2x grupos PEG. Por exemplo, quando a unidade de construção do dendrímero tem um ponto de ramificação bivalente, um dendrímero de segunda geração não teria mais do que 4 grupos PEG, um dendrímero de terceira geração não teria mais do que 8 grupos PEG, um dendrímero de quarta geração não teria mais do que 16 grupos PEG, um dendrímero de quinta geração não teria mais do que 32 grupos PEG. Em algumas modalidades, o dendrímero tem menos do que 2 x grupos PEG. Em algumas modalidades, o dendrímero tem entre cerca de 25 e cerca de 64 grupos PEG. Em algumas modalidades, o dendrí- mero tem entre cerca de 25 e cerca de 40 grupos PEG. Em algumas modalidades, o dendrímero não tem mais do que 32 grupos PEG. Em algumas modalidades, o dendrímero tem entre cerca de 25 e cerca de 32 grupos PEG. Em algumas modalidades, o dendrímero tem entre cerca de 28 e cerca de 32 grupos PEG. Em algumas modalidades, o dendrímero tem 29 grupos PEG, 30 grupos PEG, 31 grupos PEG ou 32 grupos PEG.
[0041] Os dendrímeros descritos de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) incluem um ligante covalentemente ligado a um agente ativo
(L-AA), no qual o ligante (L) está covalentemente ligado aos grupos fun- cionais de superfície na geração final das unidades de construção em uma extremidade do ligante e a um agente ativo (AA) na outra extremi- dade do ligante. Em algumas modalidades, o ligante em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) tem a estrutura: no qual está covalentemente ligado aos grupos funcionais de amina na geração final das unidades de construção, é um ponto de liga- ção covalente ao agente ativo (AA) e A é –N(CH3) ou -S-. Em algumas modalidades, A é –S-. Em algumas modalidades, A é –N(CH3).
[0042] Em algumas modalidades, AA é um inibidor de Bcl. Em algu- mas modalidades, AA é um inibidor de Bcl-2 e/ou Bcl-XL. Em algumas modalidades, AA é um inibidor de Bcl-2 e/ou Bcl-XL descrito na Patente dos E.U.A. Nº 9,018,381. Em algumas modalidades, AA em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) tem a estrutura: em que é um ponto de ligação covalente ao ligante. Em algumas modalidades, AA em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) tem a estrutura:
.
[0043] Em algumas modalidades, a estrutura de L-AA em qualquer um dos dendrímeros de (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) é: , no qual está covalentemente ligado aos grupos funcionais de amina na geração final das unidades de construção, e A é –N(CH3) ou -S-. Em algumas modalidades, A é –S-. Em algumas modalidades, A é – N(CH3).
[0044] Em algumas modalidades, a estrutura de L-AA em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII) é:
, no qual está covalentemente ligado aos grupos funcionais de amina na geração final das unidades de construção, e A é –N(CH3) ou -S-. Em algumas modalidades, A é –S-. Em algumas modalidades, A é – N(CH3).
[0045] Em algumas modalidades, o dendrímero de qualquer uma das fórmulas (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) tem menos do que (2 x)b grupos L-AA, em que x é o número de gerações do dendrímero e b é o número de dendróns. Em algumas modalidades, todos os grupos funci- onais de superfície estão covalentemente ligados a grupos L-AA. Em algumas modalidades, quando x é 5, o dendrímero tem entre cerca de 25 e cerca de 64 grupos L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero não tem mais do que 2x grupos L-AA. Em algumas modalidades, o den- drímero tem 2x grupos L-AA. Por exemplo, quando a unidade de cons- trução do dendrímero tem um ponto de ramificação bifuncional, um den- drímero de segunda geração não teria mais do que 4 grupos L-AA, um dendrímero de terceira geração não teria mais do que 8 grupos L-AA, um dendrímero de quarta geração não teria mais do que 16 grupos L- AA, um dendrímero de quinta geração não teria mais do que 32 grupos L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero tem menos do que 2 x grupos L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero tem entre cerca de 25 e cerca de 64 grupos L-AA. Em algumas modalidades, o dendrí- mero tem entre cerca de 25 e cerca de 40 grupos L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero não tem mais do que 32 grupos L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero tem entre cerca de 25 e cerca de 32 grupos L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero tem entre cerca de 28 e cerca de 32 grupos L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero tem 29 grupos L-AA, 30 grupos L-AA, 31 grupos L-AA ou 32 grupos L-AA.
[0046] Em algumas modalidades, em qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) a soma dos grupos L-AA e dos grupos PEG pode ser igual a não mais do que 64. Em algumas modalidades, a soma dos grupos L-AA e grupos PEG pode ser inferior a 64, desde que o dendrímero tenha pelo menos um grupo L-AA. Em algumas modalidades, a soma de grupos L-AA e grupos PEG pode estar entre cerca de 50 e cerca de 64. No caso em que a soma dos grupos L- AA e grupos PEG é inferior a 64, as unidades funcionais de superfície não reagidas da geração final de unidades de construção permanecem grupos de aminas primárias, desde que o dendrímero tenha, pelo me- nos, um grupo L-AA. Por exemplo, o número de grupos de aminas pri- márias na geração final das unidades de construção é igual a 64 menos a soma dos grupos L-AA e PEG (por exemplo, 64-(L-AA + PEG), desde que o dendrímero tenha pelo menos um grupo L-AA. Por exemplo, se a soma dos grupos L-AA e grupos PEG é de 50, então, 14 grupos funcio- nais de superfície permanecerão porções de amina primária, se a soma dos grupos L-AA e grupos PEG é de 51, 13 dos grupos funcionais de superfície permanecerão porções de amina primária, se a soma dos gru- pos L-AA e grupos PEG é de 52, então 12 dos grupos funcionais de superfície permanecerão porções de amina primária, se a soma dos gru- pos L-AA e grupos PEG é de 53, então 11 dos grupos funcionais de superfície permanecerão porções de amina primária, etc. Em algumas modalidades, o número de porções amina primária no dendrímero é en- tre cerca de 0 e cerca de 14. Em algumas modalidades, se a soma do número de grupos PEG e o número de grupos L-AA é menor do que (2x)b, em que x é o número de gerações do dendrímero e b é o número de dendróns, então os restantes grupos funcionais de superfície são iguais a 64 menos a soma dos grupos PEG e dos grupos L-AA, desde que o dendrímero tenha pelo menos um grupo L-AA.
[0047] Em algumas modalidades, se W é (PM)c ou (H)e; Z é (L-AA)d ou (H)e; desde que (c+d) ≤ (2x)b e desde que d seja ≥ 1; em que x é o número de gerações e b é o número de dendróns; e desde que se (c+d) < (2x)b, então quaisquer grupos W e Z restantes são (H)e, em que e é [2(x+1)]-(c+d). Por exemplo, quando b é 2 e x é 5, então (c+d) ≤ 64. Em algumas modalidades, (c+d) = 64; isto é, a soma de (PM)c e (L-AA)d é igual a 64. Em algumas modalidades, quando b é 2 e x é 5, então (c+d) < 64; isto é, a soma de (PM)c e (L-AA)d é menor do que 64, desde que d seja ≥ 1. Em algumas modalidades, (c+d) é um número inteiro entre 50 e 64. Em algumas modalidades, (c+d) é um número inteiro entre 58 e 64.
[0048] Em algumas modalidades, (c+d) = (2x)b, caso em que não há (H)e e e é 0. Por exemplo, se b é 2 e x é 5, e a soma de (PM)c e (L- AA)d é igual a 64, então não há grupos funcionais de superfície não substituídos na quinta geração das unidades de construção no dendrí- mero e, portanto, e é 0. No entanto, (c+d) < (2x)b, então (H)e é igual a (2x)b-(c+d). Por exemplo, se b é 2, x é 5 e a soma de (PM)c e (L-AA)d é menor que 64, então o número de grupos funcionais de superfície não substituídos na quinta geração dos blocos de construção é igual a 64 menos a soma de (PM)c e (L-AA)d. Nesse caso, e é igual a 64 menos a soma de (PM)c e (L-AA)d. Em algumas modalidades, quando a soma de (c+d) é um número inteiro entre 50 e 64, e é um número inteiro entre 0 e 14. Em algumas modalidades, quando (c+d) é um número inteiro entre 58 e 64, e é um número inteiro entre 0 e 6. Em algumas modalidades, (c+d) é 58 e e é 6. Em algumas modalidades, (c+d) é 59 e e é 5. Em algumas modalidades, (c+d) é 60 e e é 4. Em algumas modalidades, (c+d) é 61 e e é 3. Em algumas modalidades, (c+d) é 62 e e é 2. Em algumas modalidades, (c+d) é 63 e e é 1. Em algumas modalidades, (c+d) é 60 e e é 0.
[0049] Em algumas modalidades, qualquer um dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII), tem um peso molecular de cerca de 90 a cerca de 120 KDa. Em algumas modalidades, o dendrí- mero tem um peso molecular de cerca de 100 e 115 Da. Em algumas modalidades, o dendrímero tem um peso molecular de cerca de 100 a cerca de 110 Da. Em algumas modalidades, o dendrímero tem um peso molecular de cerca de 100 a cerca de 105 Da. Em algumas modalida- des, o peso molecular do dendrímero é de cerca de 100 kDa, cerca de 101 kDa, cerca de 102 kDa, cerca de 103KDa, cerca de 104 kDa, cerca de 105 kDa, cerca de 106 KDa, cerca de 107 kDa, cerca de 108 kDa, cerca de 109 kDa ou cerca de 110 kDa.
[0050] Em algumas modalidades, quando BU é ou # . o PEG está covalentemente ligado à funcionalidade amina na posição ε da BU e o L-AA está covalentemente ligado à funcionalidade amina na posição α da BU.
[0051] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (II):
(II), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, especificada pelo fato de que b é 2; O Núcleo é
* indica ligação covalente a uma porção carbonila de (BU1); BU são unidades de construção e o número de BU é igual a 62; em que BU tem a seguinte estrutura:
# indica ligação covalente a uma porção amina do Núcleo ou uma porção amina de BU, e + indica uma ligação covalente a uma por- ção carbonila de BU ou uma ligação covalente a W ou Z; W é independentemente (PM)c ou (H)e; Z é independentemente (L-AA)d ou (H)e; PM é PEG1800-2400; L-AA é um ligante covalentemente ligado a um agente ativo; em que L- AA é da fórmula:
em que A é –N(CH3) ou -S-; indica ligação covalente a uma porção amina de BU5; desde que (c+d) seja ≤ 64 e d seja ≥ 1; e desde que se (c+d) < 64, então quaisquer grupos W e Z remanescen- tes são (H)e, em que e é 64-(c+d).
[0052] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), A é –N(CH3). Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), A é –S-.
[0053] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), c é um número inteiro entre 25 e 32. Em algumas modalidades do dendrí- mero de fórmula (II), c é um número inteiro entre 29 e 32. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), c é 29. Em algumas moda- lidades do dendrímero de fórmula (II), c é 30. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), c é 31. Em algumas modalidades do den- drímero de fórmula (II), c é 32.
[0054] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), d é um número inteiro entre 25 e 32. Em algumas modalidades do dendrí- mero de fórmula (II), d é um número inteiro entre 29 e 32. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), d é 29. Em algumas moda- lidades do dendrímero de fórmula (II), d é 30. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), d é 31. Em algumas modalidades do den- drímero de fórmula (II), d é 32.
[0055] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), e é um número inteiro entre 0 e 14. Em algumas modalidades do dendrí- mero de fórmula (II), e é um número inteiro entre 0 e 6. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), e é 0. Em algumas modali- dades do dendrímero de fórmula (II), e é 1. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), e é 2. Em algumas modalidades do den- drímero de fórmula (II), e é 3. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), e é 4. Em algumas modalidades do dendrímero de fór- mula (II), e é 5. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), e é 6.
[0056] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (II), L- AA é: .
[0057] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (III): D-Núcleo-D (III) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que O Núcleo é
Dé AP é um ponto de ligação a outra unidade de construção; W é independentemente (PM)c ou (H)e; Z é independentemente (L-AA)d ou (H)e; PM é PEG1800-2400; L-AA é um ligante covalentemente ligado a um agente ativo; em que L- AA é da fórmula: em que A é –N(CH3), -O-, -S- ou –CH2-; desde que se (c+d) < 64, então quaisquer grupos W e Z remanescen- tes são (H)e, em que e é 64-(c+d); e d é ≥ 1.
[0058] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), (PM)c A é –N(CH3). Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), A é –S-.
[0059] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), c é um número inteiro entre 25 e 32. Em algumas modalidades do dendrí- mero de fórmula (III), c é um número inteiro entre 29 e 32. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), c é 29. Em algumas moda- lidades do dendrímero de fórmula (III), c é 30. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), c é 31. Em algumas modalidades do den- drímero de fórmula (III), c é 32.
[0060] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), d é um número inteiro entre 25 e 32. Em algumas modalidades do dendrí- mero de fórmula (III), d é um número inteiro entre 29 e 32. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), d é 29. Em algumas moda- lidades do dendrímero de fórmula (III), d é 30. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), d é 31. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), d é 32.
[0061] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), e é um número inteiro entre 0 e 14. Em algumas modalidades do dendrí- mero de fórmula (III), e é um número inteiro entre 0 e 6. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), e é 0. Em algumas modali- dades do dendrímero de fórmula (III), e é 1. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), e é 2. Em algumas modalidades do den- drímero de fórmula (III), e é 3. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), e é 4. Em algumas modalidades do dendrímero de fór- mula (III), e é 5. Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), e é 6.
[0062] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (III), L- AA é: .
[0063] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (IV):
(IV), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que Y é PEG1800- 2400 ou H; Q é H ou L-AA, em que L-AA tem a estrutura:
, A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de PEG1800-2400 e de L-AA seja menor que 64, as restantes porções Q e Y são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA.
[0064] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (IV), A é –N(CH3). Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (IV), A é –S-.
[0065] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem entre 25 e 32 PEG1800-2400. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem entre 29 e 32 PEG1800-2400. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 29 PEG1800-2400. Em algumas modali- dades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 30 PEG1800-2400. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 31 PEG1800-2400. Em al- gumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 32 PEG1800-2400.
[0066] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem entre 25 e 32 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem entre 29 e 32 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 29 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 30 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 31 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 32 L-AA.
[0067] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem entre 0 e 14 hidrogênios nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalida- des, o dendrímero de fórmula (IV) tem entre 0 e 6 hidrogênios nas posi- ções Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 1 hidrogênio nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 2 hidrogênios nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 3 hidrogê- nios nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 4 hidrogênios nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 5 hidrogênios nas posi- ções Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (IV) tem 6 hidrogênios nas posições Q e/ou Y.
[0068] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (V): (V) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, especificada pelo fato de que Y é PEG1800-2400 ou H; Q é H ou L-AA, em que L-AA tem a estrutura: , A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de PEG1800-2400 e de L-AA seja menor que 64, as restantes porções Q e Y são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA.
[0069] Em algumas modalidades do dendrímero de fórmula (V), A é
–N(CH3) (Composto 1). Em algumas modalidades do dendrímero de fór- mula (V), A é –S- (Composto 2).
[0070] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem entre 25 e 32 PEG1800-2400. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem entre 29 e 32 PEG1800-2400. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 29 PEG1800-2400. Em algumas modalida- des, o dendrímero de fórmula (V) tem 30 PEG1800-2400. Em algumas mo- dalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 31 PEG1800-2400. Em algu- mas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 32 PEG1800-2400.
[0071] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem entre 25 e 32 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem entre 29 e 32 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 29 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 30 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 31 L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 32 L-AA.
[0072] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem entre 0 e 14 hidrogênios nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalida- des, o dendrímero de fórmula (V) tem entre 0 e 6 hidrogênios nas posi- ções Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 1 hidrogênio nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 2 hidrogênios nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 3 hidrogê- nios nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 4 hidrogênios nas posições Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 5 hidrogênios nas posi- ções Q e/ou Y. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (V) tem 6 hidrogênios nas posições Q e/ou Y.
[0073] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula
(VI): (VI), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que Y1 é -C(=O)CH2-(OCH2CH2)x-OCH3 ou H; x é um número inteiro de entre 39 e 53; e Q é H ou L-AA, no qual L-AA tem a estrutura: ,
[0074] A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de Y1 e de L-AA for menor que 64, as restantes porções Q e Y1 são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA. Em algumas modalidades, é descrito o com- posto de fórmula (VI) em que A é -S-. Em algumas modalidades, é des- crito o composto de fórmula (VI) em que A é -N(CH3).
[0075] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem entre 25 e 32 porções Y1. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem entre 29 e 32 porções Y1. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 29 porções Y1. Em algumas modalida- des, o dendrímero de fórmula (VI) tem 30 porções Y1. Em algumas mo- dalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 31 porções Y1. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 32 porções Y1.
[0076] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem entre 25 e 32 porções L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem entre 29 e 32 porções L-AA. Em algumas modalida- des, o dendrímero de fórmula (VI) tem 29 porções L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 30 porções L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 31 porções L- AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 32 por- ções L-AA.
[0077] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem entre 0 e 14 hidrogênios nas posições Q e/ou Y1. Em algumas modali- dades, o dendrímero de fórmula (VI) tem entre 0 e 6 hidrogênios nas posições Q e/ou Y1. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 1 hidrogênio nas posições Q e/ou Y1. Em algumas modalida- des, o dendrímero de fórmula (VI) tem 2 hidrogênios nas posições Q e/ou Y1. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 3 hidrogênios nas posições Q e/ou Y1. Em algumas modalidades, o den- drímero de fórmula (VI) tem 4 hidrogênios nas posições Q e/ou Y1. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 5 hidrogênios nas posições Q e/ou Y1. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VI) tem 6 hidrogênios nas posições Q e/ou Y1.
[0078] Em algumas modalidades, x é um número inteiro entre 39 e
53. Em algumas modalidades, x é um número inteiro entre 41 e 50. Em algumas modalidades, x é um número inteiro entre 44 e 48. Em algumas modalidades, x é um número inteiro selecionado de 45, 46 ou 47. Em algumas modalidades, x é 39. Em algumas modalidades, x é 40. Em algumas modalidades, x é 41. Em algumas modalidades, x é 42. Em algumas modalidades, x é 43. Em algumas modalidades, x é 44. Em algumas modalidades, x é 45. Em algumas modalidades, x é 46. Em algumas modalidades, x é 47. Em algumas modalidades, x é 48. Em algumas modalidades, x é 49. Em algumas modalidades, x é 50. Em algumas modalidades, x é 51. Em algumas modalidades, x é 52. Em algumas modalidades, x é 53.
[0079] Em algumas modalidades, são descritas composições far- macêuticas que compreendem um dendrímero liofilizado de fórmula (VII): (VII) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, especificada pelo fato de que Y2 é -C(=O)CH2-(OCH2CH2)y-OCH3 ou H; y é um número inteiro de entre 39 e 53; e Q é H ou L-AA, no qual L-AA tem a estrutura: ,
[0080] A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de Y2 e de L-AA for menor que 64, as restantes porções Q e Y2 são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA. Em algumas modalidades, é descrito o com- posto de fórmula (VII) em que A é -S-. Em algumas modalidades, é des- crito o composto de fórmula (VII) em que A é -N(CH3).
[0081] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem entre 25 e 32 porções Y2. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem entre 29 e 32 porções Y2. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 29 porções Y2. Em algumas modali- dades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 30 porções Y2. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 31 porções Y2. Em al- gumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 32 porções Y2.
[0082] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem entre 25 e 32 porções L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem entre 29 e 32 porções L-AA. Em algumas modali- dades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 29 porções L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 30 porções L-AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 31 porções L-
AA. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 32 porções L-AA.
[0083] Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem entre 0 e 14 hidrogênios nas posições Q e/ou Y2. Em algumas modali- dades, o dendrímero de fórmula (VII) tem entre 0 e 6 hidrogênios nas posições Q e/ou Y2. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 1 hidrogênio nas posições Q e/ou Y2. Em algumas modalida- des, o dendrímero de fórmula (VII) tem 2 hidrogênios nas posições Q e/ou Y2. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 3 hidrogênios nas posições Q e/ou Y2. Em algumas modalidades, o den- drímero de fórmula (VII) tem 4 hidrogênios nas posições Q e/ou Y2. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 5 hidrogênios nas posições Q e/ou Y2. Em algumas modalidades, o dendrímero de fórmula (VII) tem 6 hidrogênios nas posições Q e/ou Y2.
[0084] Em algumas modalidades, y é um número inteiro entre 39 e
53. Em algumas modalidades, y é um número inteiro entre 41 e 50. Em algumas modalidades, y é um número inteiro entre 44 e 48. Em algumas modalidades, y é um número inteiro selecionado de 45, 46 ou 47. Em algumas modalidades, y é 39. Em algumas modalidades, y é 40. Em algumas modalidades, y é 41. Em algumas modalidades, y é 42. Em algumas modalidades, y é 43. Em algumas modalidades, y é 44. Em algumas modalidades, y é 45. Em algumas modalidades, y é 46. Em algumas modalidades, y é 47. Em algumas modalidades, y é 48. Em algumas modalidades, y é 49. Em algumas modalidades, y é 50. Em algumas modalidades, y é 51. Em algumas modalidades, y é 52. Em algumas modalidades, y é 53.
[0085] A linguagem "sal farmaceuticamente aceitável" inclui sais de adição de ácido ou base que retêm a eficácia biológica e propriedades dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VIII) e que, tipicamente, não são indesejáveis do ponto de vista biológico ou outro.
Em muitos casos, os dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) são capazes de formar sais de ácidos e/ou bases em virtude da presença de grupos básicos e/ou carboxila ou grupos semelhantes a esses.
[0086] Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII) podem ser sintetizados a partir de uma porção básica ou acídica, por métodos químicos convencionais. Em geral, tais sais podem ser preparados por reação de formas de ácido livre destes compostos com uma quantidade estequiométrica da base apropriada ou por reação de formas de base livre destes compostos com uma quantidade estequiométrica do ácido apropriado. Tais reações são tipicamente levadas a cabo em água ou em um solvente orgânico ou em uma mistura dos dois. Geralmente, o uso de meios não aquosos tais como éter, acetato de etila, etanol, isopropanol ou acetonitrila é de- sejável, quando praticável. Listas de sais adequados adicionais podem ser encontradas, por exemplo, em "Remington's Pharmaceutical Scien- ces", 20ª edição, Mack Publishing Company, Easton, Pa., (1985); Berge et al., "J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19 e em "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use" de Stahl e Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Alemanha, 2002).
[0087] Também é pretendido que qualquer fórmula apresentada no presente documento possa representar formas não marcadas bem como formas isotopicamente etiquetadas para os dendrímeros de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Compostos isotopicamente marcados têm estruturas repre- sentadas pelas fórmulas apresentadas no presente documento com a exceção de um ou mais átomos estarem substituídos por um átomo do mesmo elemento, mas com número de massa diferente. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VIII) e seus sais incluem isótopos de hidrogênio,
carbono, nitrogênio, oxigênio, fósforo, flúor e cloro, tais como 2H, 3H, 11 C, 13C, 14C, 15N, 35S e 125I. Os dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VIII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, podem in- cluir vários compostos isotopicamente marcados nos quais estão pre- sentes isótopos radioativos, tais como 3H, 11 C, 14 C, 35 Se 36 Cl. Dendrí- meros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VIII), ou um seu sal far- maceuticamente aceitável, isotopicamente marcados podem ser geral- mente preparados por técnicas convencionais conhecidas dos peritos na técnica ou por processos análogos aos descritos nos Exemplos em anexo usando reagentes isotopicamente marcados apropriados em vez dos reagentes não marcados previamente usados.
[0088] Os dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, podem ter diferentes for- mas isoméricas. A linguagem "isômero óptico" ou "estereoisômero" se refere a qualquer uma das várias configurações estereoisoméricas que podem existir para um determinado dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Em particular, os dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), (VII) e (VIII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, possuem quiralidade e como tal podem existir como misturas de enantiômeros com excesso enantiomérico entre cerca de 0% e> 98% e.e. Quando um composto é um enantiômero puro, a estereoquímica em cada centro quiral pode ser especificada quer por R ou S. Tais designações também podem ser usa- das para misturas que são enriquecidas em um enantiômero. Compos- tos resolvidos cuja configuração absoluta seja desconhecida podem ser designados (+) ou (-) dependendo da direção (dextro- ou levorotatória) na qual rodam o plano de luz polarizada ao comprimento de onda da linha do sódio D. É pretendido que a presente invenção inclua todos de tais possíveis isômeros, incluindo misturas racêmicas, formas optica- mente puras e misturas de intermediários. Isômeros opticamente ativos
(R) e (S) podem ser preparados usando síntons quirais, reagentes qui- rais ou catalisadores quirais, ou resolvidos usando técnicas convencio- nais bem conhecidas na técnica, tais como HPLC quiral.
[0089] Em algumas modalidades, são descritas composições liofili- zadas que compreendem um dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, preparado pelo processo que compreende os passos de dissolução do composto de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuti- camente aceitável, em ácido acético glacial para formar uma solução, liofilização da solução e sublimação do ácido acético a pressão redu- zida.
[0090] A linguagem "composições farmaceuticamente aceitável" in- clui compostos, materiais, diluentes ou solventes, excipientes, composi- ções, e/ou formas de dosagem que são adequadas, dentro do escopo de avaliação médica fundamentada, para uso em contato com tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade, irritação, resposta alér- gica, ou outro problema ou complicação excessivos, como determinado pelo perito na técnica.
[0091] As composições descritas podem ser obtidas por procedi- mentos convencionais usando excipientes farmacêuticos convencionais bem conhecidos na técnica, por exemplo, agentes de suspensão, agen- tes dispersantes ou molhantes, conservantes, antioxidantes, agentes emulsificantes, aglutinantes, desintegrantes, deslizantes, lubrificantes ou sorventes.
[0092] Em algumas modalidades, as composições farmacêuticas descritas são reconstituídas em um diluente ou solvente farmaceutica- mente aceitável para formar uma solução injetável estéril em um ou mais sistemas tampão, diluentes ou solventes não tóxicos aquosos ou não aquosos parentericamente aceitáveis, agentes solubilizantes, co- solventes ou transportadores. Uma preparação injetável estéril também pode ser uma suspensão aquosa ou oleosa injetável estéril ou suspen- são em um diluente ou solvente, transportador ou co-solvente não aquoso, que pode ser formulado de acordo com procedimentos conhe- cidos usando um ou mais dos agentes dispersantes ou molhantes apro- priados e agentes de suspensão. Em algumas modalidades, o diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável compreende uma solução tampão de citrato. Em algumas modalidades, o tampão citrato está em pH 5. Em algumas modalidades, o tampão citrato compreende mono- hidrato de ácido cítrico, diidrato de citrato de sódio e dextrose anidra. Em algumas modalidades, o diluente ou solvente é um tampão de citrato a 50 mM a pH 5 em 5% (p/p) de dextrose. Em algumas modalidades, o diluente ou solvente é um tampão de citrato/fosfato de pH 5 diluído 1 em 10 com 5% p/v de glicose. Em algumas modalidades, o diluente ou sol- vente farmaceuticamente aceitável compreende uma solução tampão de acetato. Em algumas modalidades, a solução tampão de acetato está em pH 5. Em algumas modalidades, a solução tampão de acetato com- preende ácido acético, acetato de sódio anidro e dextrose. Em algumas modalidades, o tampão de acetato compreende tampão de acetato a 100 mM (pH 5) em 2,5% (p/p) de dextrose.
[0093] As composições farmacêuticas poderiam ser reconstituídas para formar uma solução para injeção de bolus iv/infusão, dendrímero estéril para reconstituição com um sistema de tampão, ou um sistema liofilizado (quer apenas dendrímero ou com excipientes) para reconsti- tuição com um sistema tampão com ou sem outros excipientes. O ma- terial seco a frio liofilizado pode ser preparado a partir de solventes não aquosos ou solventes aquosos. A forma de dosagem também poderia ser um concentrado para diluição adicional para infusão subsequente.
[0094] A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com um ou mais excipientes para produzir uma única forma de dosagem irá necessariamente variar dependendo do hospedeiro tratado e da via particular de administração. Para informação adicional sobre Vias de Administração e Regimes de Dosagem, o leitor é remetido para o Capí- tulo 25,3 no Volume 5 de Comprehensive Medicinal Chemistry (Corwin Hansch; Presidente do Conselho Editorial), Pergamon Press 1990.
[0095] Os dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, podem ser administrados uma, duas, três vezes ao dia ou tantas vezes, em um período de 24 horas, quanto o medicamente necessário. O perito na técnica seria prontamente capaz de determinar a quantidade de cada dose individual com base no sujeito. Em algumas modalidades, os dendrímeros de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são administrados em uma forma de dosagem. Em algumas modalidades, os dendrímeros de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) e (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, são administrados em múltiplas formas de dosagem.
[0096] Em algumas modalidades, o pH da composição farmacêutica está entre cerca de 4,0 e cerca de 6,0, por exemplo, entre cerca de 4,8 a cerca de 5,6.
[0097] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica com- preende entre cerca de 90-110% do dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, quando testado contra um padrão de referência de pureza conhecida.
[0098] Em algumas modalidades, a pureza da composição farma- cêutica não é inferior a cerca de 75%, cerca de 80%, cerca de 85%, cerca de 90% ou cerca de 95%, como medido por análise de cromato- grafia de exclusão de tamanho-UV (SEC-UV). Em algumas modalida- des, a pureza da composição farmacêutica não é inferior a cerca de 85%, como medido pela análise SEC-UV.
[0099] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica com- preende menos de cerca de 10% p/p de impurezas totais, por exemplo,
cerca de 9%, cerca de 8%, cerca de 7%, cerca de 6%, cerca de 5%, cerca de 4%, cerca de 3%, cerca de 2% ou cerca de 1%. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende menos do que entre cerca de 1% e 10% p/p de impurezas totais. Em algumas modali- dades, a composição farmacêutica compreende menos do que entre cerca de 1% e 5% p/p de impurezas totais. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende menos do que cerca de 3% p/p de impurezas totais.
[0100] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica com- preende menos de cerca de 10%, cerca de 9%, cerca de 8%, cerca de 7%, cerca de 6%, cerca de 5%, cerca de 4%, cerca de 3%, cerca de 2% ou cerca de 1% p/p do Composto A livre.
[0101] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica com- preende menos de cerca de 10%, cerca de 9%, cerca de 8%, cerca de 7%, cerca de 6%, cerca de 5%, cerca de 4%, cerca de 3%, cerca de 2%, cerca de 1% ou cerca de 0,5% p/p de qualquer impureza única não es- pecificada. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica com- preende cerca de 0,5% p/p de qualquer impureza única não especifi- cada.
[0102] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica com- preende menos de cerca de 10%, cerca de 9%, cerca de 8%, cerca de 7%, cerca de 6%, cerca de 5%, cerca de 4%, cerca de 3%, cerca de 2% ou cerca de 1% p/p de impurezas livres totais.
[0103] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica com- preende não mais do que cerca de 10%, cerca de 9%, cerca de 8%, cerca de 7%, cerca de 6%, cerca de 5%, cerca de 4%, cerca de 3% cerca de 2% ou cerca de 1% p/p de ácido acético. Em algumas modali- dades, a composição farmacêutica compreende não mais do que cerca de 1,5% p/p de ácido acético.
[0104] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica tem um tamanho médio de partícula determinado por dispersão dinâmica de luz (DLS) entre cerca de 15 e cerca de 25 d.nm, por exemplo, entre cerca de 17 e cerca de 19 d.nm.
[0105] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica tem um PDI como determinado por dispersão dinâmica de luz (DLS) entre cerca de 0,20 e cerca de 0,30.
[0106] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica com- preende não mais do que cerca de 10.000, cerca de 9.000, cerca de
8.000, cerca de 7.000, cerca de 6.000, cerca de 5.000, cerca de 4.000, cerca de 3.000, cerca de 2.000, cerca de 1.000 ou cerca de 500 partí- culas maiores ou iguais a cerca de 10 µm por recipiente de 50 mL após a reconstituição em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitá- vel. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica compreende não mais do que cerca de 6.000 partículas maiores ou iguais a cerca de 10 μm por recipiente de 50 mL após a reconstituição em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável.
[0107] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica com- preende não mais do que cerca de 1.000, cerca de 900, cerca de 800, cerca de 700, cerca de 600, cerca de 500, cerca de 400, cerca de 300, cerca de 200, cerca de 100 ou cerca de 50 partículas maiores ou iguais a cerca de 25 µm por recipiente de 50 mL após a reconstituição em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável. Em algumas modali- dades, a composição farmacêutica compreende não mais do que cerca de 600 partículas maiores ou iguais a cerca de 25 μm por 50 mL após a reconstituição em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável.
[0108] Em algumas modalidades, a osmolalidade da composição farmacêutica está entre cerca de 200 e cerca de 400 mOsmol/kg, por exemplo, entre cerca de 250 e cerca de 350 mOsmol/kg, entre cerca de 260 e cerca de 330 mOsmol/kg, ou entre cerca de 270 e cerca de 328 mOsmol/kg após reconstituição em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável.
[0109] Em algumas modalidades, a composição farmacêutica tem um limite de endotoxina de não mais do que cerca de 0,1, cerca de 0,09, cerca de 0,08, cerca de 0,07, cerca de 0,06, cerca de 0,05, cerca de 0,04, cerca de 0,03, cerca de 0,02 ou cerca de 0,01 EU/mg.
[0110] Em algumas modalidades, o ácido acético tem um baixo teor de água, por exemplo, menos do que cerca de 1000 ppm, menos do que cerca de 900 ppm, menos do que cerca de 800 ppm, menos do que cerca de 700 ppm, menos do que cerca de 600 ppm, menos do que cerca de 500 ppm, menos do que cerca de 400 ppm, menos do que cerca de 300 ppm, menos do que cerca de 200 ppm, menos do que cerca de 100 ppm ou menos do que cerca de 50 ppm. Em algumas mo- dalidades, o ácido acético tem um teor de água inferior a cerca de 10%, inferior a cerca de 5%, inferior a cerca de 4%, inferior a cerca de 3%, inferior a cerca de 2%, inferior a cerca de 1%, inferior a cerca de 0,5%, inferior a cerca de 0,1%, inferior a cerca de 0,09%, inferior a cerca de 0,08%, inferior a cerca de 0,07%, inferior a cerca de 0,06%, inferior a cerca de 0,05%, inferior a cerca de 0,04%, inferior a cerca de 0,03 %, inferior a cerca de 0,02% ou inferior a cerca de 0,01%.
[0111] Em algumas modalidades, é descrita uma composição far- macêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que a composição farmacêutica compreende ácido acético. Em al- gumas modalidades, é descrita uma composição farmacêutica que com- preende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que a compo- sição farmacêutica compreende não mais do que cerca de 2% de ácido acético. Em algumas modalidades, a composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V),
(VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, e compreende não mais do que cerca de 2% de ácido acético, e em que o ácido acético compreende menos do que cerca de 200 ppm de água.
[0112] Em algumas modalidades, são descritos métodos de trata- mento de câncer que compreende a administração intravenosa a um sujeito com necessidade do mesmo de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável.
[0113] Em um aspecto, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI), ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para uso no trata- mento de câncer.
[0114] Em um aspecto, é descrito o uso de uma composição farma- cêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, na fabricação de um medicamento para o tratamento de um câncer.
[0115] Em um aspecto, são descritas composições farmacêuticas que compreende um dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para uso no trata- mento de câncer.
[0116] A linguagem "tratar", "tratando" e "tratamento" inclui a redu- ção ou inibição da atividade enzimática ou proteica relacionada com Bcl- 2 e/ou Bcl-XL ou câncer em um sujeito, melhoria de um ou mais sinto- mas de câncer em um sujeito ou o abrandamento ou retardamento da progressão de câncer em um sujeito. A linguagem "tratar", "tratando" e "tratamento" também inclui a redução ou inibição do crescimento de um tumor ou proliferação de células cancerosas em um sujeito.
[0117] O termo "câncer" inclui, mas não está limitado a, malignida- des hematológicas (por exemplo, linfomas, leucemia) e sólidas. O termo "câncer" inclui, por exemplo, leucemias de células T, linfomas de células T, linfoma linfoblástico agudo (ALL), leucemia mielogênica aguda (AML), leucemia linfocítica crônica (CLL), linfoma linfocítico pequeno (SLL), leucemia mielogênica crônica (CML), leucemia monocítica aguda (AML), mieloma múltiplo, linfoma de células do manto, linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma de Burkitt, linfoma não-Hodgkin, lin- foma folicular e tumores sólidos, por exemplo, câncer do pulmão de cé- lulas não-pequenas (NSCLC, por exemplo, NSCLC mutante de EGF, NSCLC mutante de KRAS), câncer do pulmão de células pequenas (SCLC), câncer de mama, neuroblastoma, câncer do ovário, câncer da próstata, melanoma (por exemplo, melanoma mutante de BRAF, mela- noma mutante de KRAS), câncer pancreático, câncer uterino, endome- trial e do cólon (por exemplo, câncer do cólon mutante de KRAS, câncer do cólon mutante de BRAF).
[0118] O termo "sujeito" inclui mamíferos de sangue quente, por exemplo, primatas, cães, gatos, coelhos, ratos e camundongos. Em al- gumas modalidades, o sujeito é um primata, por exemplo, um humano. Em algumas modalidades, o sujeito está sofrendo de câncer ou de um distúrbio imune. Em algumas modalidades, o sujeito está necessitado de tratamento (por exemplo, o sujeito irá beneficiar biologicamente ou medicamente de tratamento). Em algumas modalidades, o sujeito está sofrendo de câncer. Em algumas modalidades, o sujeito está sofrendo de um câncer positivo quanto a EGFR-M (por exemplo, câncer do pul- mão de células não pequenas). Em algumas modalidades, o câncer po- sitivo quanto a EGFR-M tem uma mutação predominantemente positiva para T790M. Em algumas modalidades, o câncer positivo quanto a EGFR-M tem uma mutação predominantemente negativa para T790M.
Em algumas modalidades, o sujeito está sofrendo de malignidade he- matológica (por exemplo, linfomas, leucemia) ou sólida, tal como, por exemplo, linfoma linfoblástico agudo (ALL), leucemia mielogênica aguda (LMA), leucemia linfocítica crônica (LLC), linfoma linfocítico (SLL), leu- cemia mieloide crônica (CML), leucemia monocítica aguda (AMoL), mi- eloma múltiplo, linfoma de células do manto, linfoma difuso de células B grandes (DLBCL), linfoma de Burkitt, linfoma não Hodgkin, linfoma foli- cular e tumores sólidos, por exemplo, câncer do pulmão de células não pequenas (NSCLC), câncer do pulmão de pequenas células (CPPC), câncer da mama, neuroblastoma, câncer da próstata, melanoma, cân- cer pancreático, uterino, endometrial e do cólon.
[0119] A linguagem "quantidade eficaz" inclui uma quantidade de um dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou um segundo agente anticancerí- geno que induz uma resposta biológica ou médica em um sujeito, por exemplo, a redução ou inibição da atividade enzimática ou proteica re- lacionada com Bcl-2 e/ou Bcl-XL ou câncer; melhoria dos sintomas de câncer; ou a desaceleração ou atraso da progressão do câncer. Em al- gumas modalidades, a linguagem "quantidade eficaz" inclui a quanti- dade de um dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ou um segundo agente an- ticancerígeno, que quando administrada a um sujeito, é eficaz para, pelo menos parcialmente, aliviar, inibir e/ou melhorar câncer ou inibir Bcl-2 e/ou Bcl-XL, e/ou reduzir ou inibir o crescimento de um tumor ou a pro- liferação de células cancerígenas em um sujeito.
[0120] Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pode ser entre cerca de 1 e cerca de 500 mg/kg. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um dendrí-
mero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável, pode ser entre cerca de 10 e cerca de 300 mg/kg. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um dendrí- mero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável, pode ser entre cerca de 10 e cerca de 100 mg/kg. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um dendrí- mero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável, pode ser entre cerca de 10 e cerca de 60 mg/kg. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um dendrímero descrito de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pode ser entre cerca de 10 e cerca de 30 mg/kg. Em algumas modalidades, uma quantidade eficaz de um dendrí- mero de (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, pode ser cerca de 20 a cerca de 100 mg/kg. Em algu- mas modalidades, uma quantidade eficaz de um dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, pode ser cerca de 10 mg/kg, cerca de 30 mg/kg, cerca de 40 mg/kg, cerca de 50 mg/kg, cerca de 60 mg/kg, cerca de 70 mg/kg, cerca de 80 mg/kg, cerca de 90 mg/kg, cerca de 100 mg/kg, cerca de 300 mg/kg ou cerca de 145 mg/kg.
[0121] Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de câncer em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separa- damente, sequencialmente ou simultaneamente por via oral uma quan- tidade eficaz de acalabrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, ao sujeito. Em uma modalidade, é descrito um método de trata-
mento de linfoma em um sujeito que compreende a administração intra- venosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quan- tidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconsti- tuído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e admi- nistrar separadamente, sequencialmente ou simultaneamente por via oral uma quantidade eficaz de acalabrutinib, ou um seu sal farmaceuti- camente aceitável, ao sujeito.
Em uma modalidade, é descrito um mé- todo de tratamento de linfoma não-Hodgkin em um sujeito que compre- ende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável; e administrar separadamente, sequencialmente ou simultaneamente por via oral uma quantidade eficaz de acalabrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao sujeito.
Em uma moda- lidade, é descrito um método de tratamento de DLBCL em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição far- macêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separadamente, sequenci- almente ou simultaneamente por via oral uma quantidade eficaz de aca- labrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao sujeito.
Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de DLBCL ati- vado por células B (ABC-DLBCL) em um sujeito que compreende a ad- ministração intravenosa de uma composição farmacêutica que compre- ende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitá-
vel, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente acei- tável; e administrar separadamente, sequencialmente ou simultanea- mente por via oral uma quantidade eficaz de acalabrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao sujeito.
Em uma modalidade, é des- crito um método de tratamento de DLBCL sensível a BTK ou insensível a BTK em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separa- damente, sequencialmente ou simultaneamente por via oral uma quan- tidade eficaz de acalabrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, ao sujeito.
Em algumas modalidades, é descrito um método de tra- tamento de OCI-LY10 DLBCL em um sujeito que compreende a admi- nistração intravenosa de uma composição farmacêutica que compre- ende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente acei- tável; e administrar separadamente, sequencialmente ou simultanea- mente por via oral uma quantidade eficaz de acalabrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao sujeito.
Em uma modalidade, é des- crito um método de tratamento de MCL em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável; e administrar separadamente, sequencialmente ou simultaneamente por via oral uma quantidade eficaz de acalabrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao sujeito.
Em uma moda- lidade, é descrito um método de tratamento de leucemia em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição far- macêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separadamente, sequenci- almente ou simultaneamente por via oral uma quantidade eficaz de aca- labrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao sujeito.
Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de CLL em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composi- ção farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um den- drímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separadamente, sequencialmente ou simultaneamente por via oral uma quantidade efi- caz de acalabrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao su- jeito.
Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de AML em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um dilu- ente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separada- mente, sequencialmente ou simultaneamente por via oral uma quanti- dade eficaz de acalabrutinib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, ao sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farma- cêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para tratamento de câncer em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farmacêutica que compre- ende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou
(VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável, e (ii) administração oral de acalabrutinib ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofili- zado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável, para tratamento de linfoma não-Hodgkin em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, se- quencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável; e (ii) administração oral de acalabrutinib ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de DLBCL em um sujeito, em que o referido tratamento com- preende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a ad- ministração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) administração oral de acalabrutinib ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, para o tratamento de DLBCL ativado por células B em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuti-
camente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceu- ticamente aceitável; e (ii) administração oral de acalabrutinib ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de DLBCL sensível a BTK ou insensível a BTK em um su- jeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, se- quencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável; e (ii) administração oral de acalabrutinib ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de OCI-LY10 DLBCL em um sujeito, em que o referido tra- tamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultanea- mente (i) a administração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) adminis- tração oral de acalabrutinib ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de MCL em um su- jeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, se- quencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica-
mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável; e (ii) administração oral de acalabrutinib ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de leucemia em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farmacêutica que compre- ende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) administração oral de acalabrutinib ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofili- zado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farma- ceuticamente aceitável, para o tratamento de CLL em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencial- mente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa do dendrí- mero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou sol- vente farmaceuticamente aceitável; e (ii) administração oral de acala- brutinib ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma compo- sição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, para o tratamento de AML em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farma- cêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, re- constituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e
(ii) administração oral de acalabrutinib ao referido sujeito.
Em uma mo- dalidade, é descrito acalabrutinib para o tratamento de câncer em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, se- quencialmente ou simultaneamente (i) a administração oral de acalabru- tinib e (ii) administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconsti- tuído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao refe- rido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito acalabrutinib para o trata- mento de DLBCL em um sujeito, em que o referido tratamento compre- ende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a admi- nistração oral de acalabrutinib e (ii) administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito acalabrutinib para o tratamento de DLBCL ativado por células B (ABC- DLBCL) em um sujeito, em que o referido tratamento compreende se- paradamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração oral de acalabrutinib e (ii) administração intravenosa de uma composi- ção farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito acalabruti- nib para o tratamento de DLBCL sensível a BTK ou insensível a BTK em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separada- mente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração oral de acalabrutinib e (ii) administração intravenosa de uma composição far- macêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável,
reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito acalabrutinib para o tratamento de OCI-LY10 DLBCL em um sujeito, em que o referido tra- tamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultanea- mente (i) a administração oral de acalabrutinib e (ii) administração intra- venosa de uma composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou sol- vente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modali- dade, é descrito acalabrutinib para o tratamento de MCL em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencial- mente ou simultaneamente (i) a administração oral de acalabrutinib e (ii) administração intravenosa de uma composição farmacêutica que com- preende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito acalabrutinib para o tratamento de leu- cemia em um sujeito, em que o referido tratamento compreende sepa- radamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração oral de acalabrutinib e (ii) administração intravenosa de uma composi- ção farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito acalabruti- nib para o tratamento de CLL em um sujeito, em que o referido trata- mento compreende separadamente, sequencialmente ou simultanea- mente (i) a administração oral de acalabrutinib e (ii) administração intra- venosa de uma composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou sol- vente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito. Em uma modali- dade, é descrito acalabrutinib para o tratamento de AML em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencial- mente ou simultaneamente (i) a administração oral de acalabrutinib e (ii) administração intravenosa de uma composição farmacêutica que com- preende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
[0122] Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de câncer em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separa- damente, sequencialmente ou simultaneamente por via intravenosa uma quantidade eficaz de rituximab, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao sujeito. Em uma modalidade, é descrito um método de tra- tamento de linfoma em um sujeito que compreende a administração in- travenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, re- constituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separadamente, sequencialmente ou simultaneamente por via intravenosa uma quantidade eficaz de rituximab, ou um seu sal far- maceuticamente aceitável, ao sujeito. Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de linfoma não-Hodgkin em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farma- cêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero lio-
filizado de (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuti- camente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceu- ticamente aceitável; e administrar separadamente, sequencialmente ou simultaneamente por via intravenosa uma quantidade eficaz de rituxi- mab, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao sujeito.
Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de DLBCL em um su- jeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrí- mero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou sol- vente farmaceuticamente aceitável; e administrar separadamente, se- quencialmente ou simultaneamente por via intravenosa uma quantidade eficaz de rituximab, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao su- jeito.
Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de DLBCL ativado por células B de centro germinal (GCB-DLBCL) em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composi- ção farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um den- drímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separadamente, sequencialmente ou simultaneamente por via intravenosa uma quanti- dade eficaz de rituximab, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao sujeito.
Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de leucemia em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrí- mero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou sol- vente farmaceuticamente aceitável; e administrar separadamente, se- quencialmente ou simultaneamente por via intravenosa uma quantidade eficaz de rituximab, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao su- jeito.
Em uma modalidade, é descrito um método de tratamento de CLL em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um dilu- ente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separada- mente, sequencialmente ou simultaneamente por via intravenosa uma quantidade eficaz de rituximab, ou um seu sal farmaceuticamente acei- tável, ao sujeito.
Em uma modalidade, é descrito um método de trata- mento de AML em um sujeito que compreende a administração intrave- nosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quanti- dade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconsti- tuído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e admi- nistrar separadamente, sequencialmente ou simultaneamente por via in- travenosa uma quantidade eficaz de rituximab, ou um seu sal farmaceu- ticamente aceitável, ao sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, para tratamento de câncer em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farma- cêutica que compreende o dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) adminis- tração intravenosa de rituximab ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de linfoma em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, se- quencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável; e (ii) administração intravenosa de rituximab ao re- ferido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farma- cêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de linfoma não-Hodgkin em um sujeito, em que o re- ferido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou si- multaneamente (i) a administração intravenosa do dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuti- camente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceu- ticamente aceitável; e (ii) administração intravenosa de rituximab ao re- ferido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farma- cêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de DLBCL em um sujeito, em que o referido trata- mento compreende separadamente, sequencialmente ou simultanea- mente: (ii) a administração intravenosa de uma composição farmacêu- tica compreendendo o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconsti- tuído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) ad- ministração intravenosa de rituximab ao referido sujeito.
Em uma moda- lidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de DLBCL ativado por células B de centro germinal (GCB-DLBCL) em um sujeito,
em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencial- mente ou simultaneamente: (i) a administração intravenosa da compo- sição farmacêutica compreendendo o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) administração intravenosa de rituximab ao referido su- jeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o trata- mento de leucemia em um sujeito, em que o referido tratamento com- preende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a ad- ministração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) rituximab intravenoso ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrita uma composição far- macêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de CLL em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composição farmacêutica que compre- ende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) administração intravenosa de rituximab ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é des- crita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero li- ofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de AML em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencial-
mente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa da composi- ção farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) administração intravenosa de rituximab ao referido su- jeito.
Em uma modalidade, é descrito rituximab para o tratamento de câncer em um sujeito, em que o referido tratamento compreende sepa- radamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração in- travenosa de rituximab e (ii) administração intravenosa de uma compo- sição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito rituximab para o tratamento de linfoma em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simulta- neamente (i) a administração intravenosa de rituximab e (ii) administra- ção intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito rituximab para o tratamento de linfoma não-Ho- dgkin em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separa- damente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração in- travenosa de rituximab e (ii) administração intravenosa de uma compo- sição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito rituximab para o tratamento de DLBCL em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simulta- neamente (i) a administração intravenosa de rituximab e (ii) administra- ção intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito rituximab para o tratamento de DLBCL ativado por células B de centro germinal (GCB-DLBCL) em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa de rituximab e (ii) ad- ministração intravenosa de uma composição farmacêutica que compre- ende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito rituximab para o tratamento de leucemia em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa de rituximab e (ii) uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma modalidade, é descrito rituximab para o tratamento de CLL em um su- jeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, se- quencialmente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa de rituximab e (ii) uma composição farmacêutica que compreende um den- drímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
Em uma mo- dalidade, é descrito rituximab para o tratamento de AML em um sujeito, em que o referido tratamento compreende separadamente, sequencial- mente ou simultaneamente (i) a administração intravenosa de rituximab e (ii) uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
[0123] Em uma modalidade, são descritos métodos de tratamento de câncer em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende uma quantidade efi- caz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separa- damente, sequencialmente ou simultaneamente por via oral uma quan- tidade eficaz de vistusertib (AZD2014), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, ao sujeito. Em uma modalidade, são descritos métodos de tratamento de câncer de pulmão de células pequenas em um sujeito que compreende a administração intravenosa de uma composição far- macêutica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e administrar separadamente, sequenci- almente ou simultaneamente por via oral uma quantidade eficaz de vis- tusertib (AZD2014), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, ao su- jeito. Em uma modalidade, é descrita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o trata- mento de câncer em um sujeito, em que o referido tratamento compre- ende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a admi- nistração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) administração oral de vistusertib (AZD2014) ao referido sujeito. Em uma modalidade, é des- crita uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero li- ofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de câncer de pulmão de células pequenas em um sujeito, em que o referido tratamento com- preende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) a ad- ministração intravenosa da composição farmacêutica que compreende o dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável; e (ii) administração oral de vistusertib (AZD2014) ao referido sujeito. Em uma modalidade, é des- crito vistusertib (AZD2014), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para o tratamento de câncer em um sujeito, em que o referido trata- mento compreende separadamente, sequencialmente ou simultanea- mente (i) a administração oral de vistusertib (AZD2014); e (ii) adminis- tração intravenosa de uma composição farmacêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um dilu- ente ou solvente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito. Em uma modalidade, é descrito vistusertib (AZD2014), ou um seu sal far- maceuticamente aceitável, para o tratamento de câncer de pulmão de células pequenas em um sujeito, em que o referido tratamento compre- ende separadamente, sequencialmente ou simultaneamente (i) admi- nistração oral de vistusertib, ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, e (ii) uma composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, reconstituído em um diluente ou sol- vente farmaceuticamente aceitável ao referido sujeito.
[0124] Em um aspecto, são descritos métodos para inibir Bcl-2 e/ou Bcl-XL em um sujeito com necessidade dos mesmos, que compreende a administração intravenosa ao sujeito de uma composição farmacêu- tica que compreende uma quantidade eficaz de um dendrímero de fór- mula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, reconstituído em um diluente ou solvente farmaceuti- camente aceitável.
[0125] Em um aspecto, é descrita uma composição farmacêutica compreendendo um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para uso na inibição de Bcl-2 e/ou Bcl-XL.
[0126] Em um aspecto, é descrito o uso de uma composição farma- cêutica que compreende um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, na fabricação de um medicamento para a inibição de Bcl-2 e /ou Bcl-XL.
[0127] Em um aspecto, são descritas composições farmacêuticas compreendendo um dendrímero liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, para uso na inibição de Bcl-2 e/ou Bcl-XL.
[0128] O termo "Bcl-2" se refere a células linfoma de B 2 e o termo "Bcl-XL" se refere a células linfoma B extra-grande, quais membros anti- apoptóticos da família Bcl-2 de proteínas.
[0129] Em algumas modalidades, é descrito um kit de partes com- preendendo um ou mais recipientes que compreende uma composição farmacêutica liofilizada que compreende um dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitá- vel, e instruções de uso. Em algumas modalidades, o kit compreende ainda um ou mais recipientes de um diluente ou solvente farmaceutica- mente aceitável. O termo "recipiente" inclui qualquer recipiente ade- quado para encerrar as composições farmacêuticas liofilizadas e dilu- entes ou solventes farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, frascos,
bolsas IV, caixas, envelopes, garrafas, seringas e semelhantes. Em al- gumas modalidades, os kits compreendem ainda componentes neces- sários para administrar as composições farmacêuticas liofilizadas que compreendem um dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV), (V), (VI) ou (VII), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, por exemplo, bolsas IV, agulhas, seringas, tubos e semelhantes.
[0130] Em algumas modalidades, o diluente ou solvente farmaceu- ticamente aceitável compreende uma solução tampão de citrato. Em al- gumas modalidades, o tampão citrato está em pH 5. Em algumas mo- dalidades, o tampão citrato compreende mono-hidrato de ácido cítrico, diidrato de citrato de sódio e dextrose anidra. Em algumas modalidades, o diluente ou solvente é um tampão de citrato a 50 mM a pH 5 em 5% (p/p) de dextrose.
[0131] Em algumas modalidades, o diluente ou solvente farmaceu- ticamente aceitável compreende uma solução tampão de acetato. Em algumas modalidades, a solução tampão de acetato está em pH 5. Em algumas modalidades, a solução tampão de acetato compreende ácido acético, acetato de sódio anidro e dextrose. Em algumas modalidades, o tampão de acetato compreende tampão de acetato a 100 mM (pH 5) em 2,5% (p/p) de dextrose. Exemplos
[0132] Aspectos da presente invenção podem ser ainda definidos por referência aos seguintes exemplos não limitadores, os quais des- crevem em detalhe a preparação de certos compostos e intermediários da presente invenção e métodos para o uso dos compostos da presente invenção. Será evidente para os peritos na técnica que muitas modifica- ções, tanto nos materiais como nos métodos, podem ser praticadas sem abandonar o escopo da presente invenção. A menos que afirmado em contrário: (i) todas as sínteses foram realizadas à temperatura ambiente, isto é,
na faixa de 17 a 25 °C, e sob uma atmosfera de um gás inerte, tal como nitrogênio, salvo indicação em contrário; (ii) as evaporações foram realizadas por evaporação rotativa sob pres- são reduzida, usando equipamento de Buchi ou Heidolph; (iii) a liofilização foi realizada usando um sistema de liofilização Labconco FreeZone 6 Plus ou outros sistemas no presente documento descritos ou outro sistema apropriado como determinado por um perito na técnica; (iv) as purificações por cromatografia por exclusão por tamanho foram realizadas usando colunas embaladas com esferas Sephadex LH-20; (v) a cromatografia preparativa foi realizada em um sistema Gilson Prep GX-271 com coleta acionada por UV, usando uma coluna Waters XBridge BEH C18 (5 μM, 30 x 150 mm); (vi) as purificações por ultrafiltração foram realizadas usando um sistema de acionamento de bomba de engrenagem Cole-Parmer ligado a uma cassete de membrana (Merck Millipore Pellicon 3, 0,11 m2, 10 kDa). (vii) a cromatografia analítica foi realizada em um Módulo de Separação Waters Alliance 2695 com detecção de PDA; (viii) os rendimentos, quando presentes, não são necessariamente os máximos alcançáveis; (ix) em geral, as estruturas dos produtos finais dos dendrímeros foram confirmadas por espectroscopia RMN; os valores dos desvios quí- micos de RMN 1H e 19F foram medidos na escala delta [os espectros de ressonância magnética de prótons foram determinados usando um ins- trumento Bruker Avance 300 (300 MHz)]; as medições foram realizadas à temperatura ambiente salvo indicação em contrário; RMN 1H usa o solvente como pico residual como o padrão interno e as seguintes abre- viaturas: s, singleto; d, dupleto; t, tripleto; q, quarteto; m, multipleto; dd, dupleto de dupletos; ddd, dupleto de dupletos de dupletos; dt, dupleto de tripletos; br s, singleto largo. (x) em geral, os produtos finais de dendrímero também foram especifi- cados por HPLC, usando um Módulo de Separação Waters Alliance 2695 com detecção de PDA, ligado a uma Coluna Waters XBridge C8 (3,5 µm, 3 x 100 mm) ou a uma Coluna Phenomenex Aeris C8 (3,6 µm, 2,1 x de 100 mm); (xi) a pureza intermédia foi avaliada por espectroscopia de massa após cromatografia líquida (LC-MS); usando um UPLC Waters equipado com um espectrômetro de massa Waters SQ (Temp. da coluna 40 oC, UV = 220-300 nm ou 190-400 nm, Espec. de Massa = ESI com troca posi- tivo/negativo) a uma taxa de fluxo de 1 mL/min usando um sistema sol- vente de 97% de A + 3% de B até 3% de A + 97% de B ao longo de 1,50 min (tempo de processamento total com equilibração de novo para as condições de partida, etc., 1,70 min), em que A = ácido fórmico a 0,1% ou ácido trifluoroacético a 0,05% em água (para manipulação acídica) ou hidróxido de amônio a 0,1% em água (para manipulação básica) e B = acetonitrila.
Para a análise acídica, a coluna usada foi uma Waters Acquity HSS T3 (1,8 µm, 2,1 x 50 mm), para a análise básica, a coluna usada foi uma Waters Acquity BEH C18 (1,7 µm, 2,1 x 50 mm). Alterna- tivamente, UPLC foi realizada usando um UPLC Waters equipado com um espectrômetro de massa Waters SQ (Temp. da coluna 30 oC, UV = 210-400 nm, Espec. de Massa = ESI com troca positivo/negativo) a uma taxa de fluxo de 1 mL/min usando um gradiente de solvente de 2 até 98% de B ao longo de 1,5 min (tempo de processamento total com equi- libração de novo para as condições de partida 2 min), em que A = ácido fórmico a 0,1% em água e B = ácido fórmico a 0,1% em acetonitrila (para manipulação acídica) ou A = hidróxido de amônio a 0,1% em água e B = acetonitrila (para manipulação básica). Para a análise acídica, a co- luna usada foi uma Waters Acquity HSS T3 (1,8 µm, 2,1 x 30 mm), para a análise básica, a coluna usada foi uma Waters Acquity BEH C18 (1,7 µm, 2,1 x 30 mm); O íon molecular relatado corresponde a [M+H]+ a menos que especificado em contrário; para moléculas com múltiplos pa- drões isotópicos (Br, Cl, etc.), o valor relatado é o obtido com a intensi- dade mais elevada, a menos que especificado de outro modo. (xii) foram usadas as seguintes abreviaturas: ACN Acetonitrila BHA Benzidrilamina BOC terc-butiloxicarbonila CoA Certificado de Análise DGA Ácido diglicólico DIPEA Diisopropiletilamina DMF Dimetilformamida DMSO Dimetilsulfóxido FBA Ácido 4-fluorobenzoico Glu Glutárico HP-β-CD hidróxipropil-beta-ciclodextrina MeOH Metanol MIDA Ácido metiliminodiacetico MSA Ácido metanosulfonico MTBE Éter de metil tert-butila MW Peso molecular NMM N-Metilmorfolina PBS Salino tamponado com fosfato PEG Polietilenoglicol PTFE Politetrafluoroetileno PyBOP Hexafluorofosfato de enzotriazol-1-il-oxitripirrolidinofosfô- nio QS/qs Quantum sufficit (o montante que é necessário) SBE-β-CD Éter sulfobutílico de beta-ciclodextrina (Captisol®) TDA Ácido tiodiglicolico
TFA Ácido trifluoroacético WFI Água para injeção WFI
[0133] Tal como usado nos Exemplos, o termo "BHALys" se refere a 2,6-diamino-N-benzidril-hexanamida ligada a lisina. BHA tem a estru- tura: em que * indica uma ligação covalente aos blocos de construção de li- sina. O termo "Lys" se refere às unidades de construção do dendrí- mero e tem a estrutura: # em que # indica ligação covalente a uma porção amina de BHALys ou uma porção amino de uma unidade de construção Lys, e + indica uma ligação covalente a uma porção carbonila de uma unidade de constru- ção Lys ou uma ligação covalente a PEG ou ao ligante ligado ao agente ativo.
[0134] Por conveniência, apenas a geração de superfície das uni- dades de construção nos dendrímeros dos Exemplos está incluída no nome do dendrímero. Ainda, o símbolo ‡ no nome se refere ao número teórico de grupos ε-amino disponíveis para conjugação com PEG e o símbolo † no nome se refere ao número teórico de grupos α-amino no dendrímero disponível para conjugação com o ligante ligado ao agente ativo, respectivamente. Como um exemplo, o nome "BHALys[Lys]32†[α- TDA-Composto A]32[ε-PEG2100, 2200]32‡” se refere a um dendrímero de quinta geração com núcleo BHALys, unidades de construção Lys na (quinta) camada superficial, aproximadamente 32 Composto A conjuga- dos com os grupos α-amino das unidades de construção de superfície
Lys com ligantes de ácido tiodiacético, aproximadamente 32 grupos PEG com peso molecular médio entre 2100 e 2200 conjugado com os grupos ε-amino das unidades de construção de superfície de Lys. Exemplo 1: Preparação e Caracterização dos Compostos 1 e 2
1. Preparação e Caracterização de BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε- PEG~2000]32‡
[0135] Nota: 32‡ se refere ao número teórico de grupos ε-amino dis- poníveis para substituição com PEG~2000. O número médio real de gru- pos PEG~2000 ligados ao BHALys[Lys]32 foi determinado experimental- mente por 1H RMN (ver seção abaixo no presente Exemplo intitulada Caracterização de BHALys[Lys]32[α-NH2-TFA]32[ε-PEG~2000]32‡). (a) BHALys[Boc]2
[0136] Éster de α,ε-(t-Boc)2-(L)-lisina p-nitrofenol sólido (2,787 kg, 5,96 mol) foi adicionado a uma solução de aminodifenilmetano (benzi- drilamina) (0,99 kg, 5,4 mol) em acetonitrila anidra (4,0 L), DMF (1,0 L) e trietilamina (1,09 kg) ao longo de um período de 15 min. A mistura de reação foi agitada a 20 °C durante a noite. A mistura de reação foi então aquecida até 35 °C e hidróxido de sódio aquoso (0,5 N, 10 L) foi lenta- mente adicionado ao longo de 30 min. A mistura foi agitada durante 30 min adicionais e depois filtrada. O bolo sólido foi lavado com água e seco até um peso constante (2,76 kg, 5,4 mol) em 100% de rendimento. 1 H RMN (CD3OD) δ 7,3 (m, 10H, Ph Calculado 10H); 6,2 (s, 1H, CH-Ph2 Calculado 1H); 4,08 (m, α-CH, 1H), 3,18 (l, ε-CH2) e 2,99 (m, ε-CH2 2H); 1,7-1,2 (br, β,γ,δ-CH2) e 1,43 (s, tBu) total para β,γ,δ-CH2 e tBu 25H Calculado 24H. MS (ESI +ve) encontrado 534,2 [M+Na]+ calculado para C29H41N3O5Na [M+Na]+ 534,7. (b) BHALys[HCl]2
[0137] Uma solução de HCl concentrado (1,5 L) em metanol (1,5 L) foi adicionada lentamente, em três porções, a uma suspensão agitada de BHALys[Boc]2 (780,5 g, 1,52 mol) em metanol (1,5 L) a uma veloci- dade para minimizar a formação excessiva de espuma. A mistura de reação foi agitada durante 30 min adicionais, depois concentrada sob vácuo a 35 °C. O resíduo foi retomado em água (3,4 L) e concentrado sob vácuo a 35 °C duas vezes, depois armazenado sob vácuo durante a noite. Acetonitrila (3,4 L) foi então adicionada e o resíduo foi nova- mente concentrado sob vácuo a 35 °C de modo a dar BHALys[HCl] 2 como uma solução branca (586 g, 1,52 mol) em 100% de rendimento. 1 H RMN (D2O) δ 7,23 (m l, 10H, Ph Calculado 10H); 5,99 (s, 1H, CH- Ph2 Calculado 1H); 3,92 (t, J = 6,5 Hz, α-CH, 1H, Calculado 1H); 2,71 (t, J = 7,8 Hz, ε-CH2, 2H, Calculado 2H); 1,78 (m, β,γ,δ-CH2, 2H), 1,47 (m, β,γ,δ-CH2, 2H), e 1,17 (m, β,γ,δ-CH2, 2H, total 6H Calculado 6H). MS (ESI +ve) encontrado 312 [M+H]+ calculado para C 19H26N3O [M+H]+
312. (c) BHALys[Lys]2[Boc]4
[0138] A uma suspensão de BHALys[HCl]2 (586 g, 1,52 mmol) em DMF anidro (3,8 L) foi lentamente adicionada trietilamina (1,08 kg) de modo a manter a temperatura da reação abaixo de 30 °C. Éster de α,ε- (t-Boc)2-(L)-lisina p-nitrofenol sólido (1,49 kg) foi adicionado em três por- ções, lentamente e com agitação durante 2 horas entre adições. A rea- ção foi deixada a agitar durante a noite. Uma solução aquosa de hidró- xido de sódio (0,5 M, 17 L) foi lentamente adicionada à mistura bem agitada, e a agitação foi mantida até o precipitado sólido se mover livre- mente. O precipitado foi recolhido por filtração e o bolo sólido foi bem lavado com água (2 x 4 L) depois com acetona/água (1:4, 2 x 4 L). O sólido foi novamente colocado em suspensão com água e depois filtrado e seco sob vácuo durante a noite para dar BHALys [Lys]2[Boc]4 (1,51kg) em 100% de rendimento. 1H RMN (CD3OD) δ 7,3 (m, 10H, Ph Calculado 10H); 6,2 (s, 1H, CH-Ph2 Calculado 1H); 4,21 (m, α-CH), 4,02 (m, α-CH) e 3,93 (m, α-CH, total 3H Calculado 3H); 3,15 (m, ε-CH2) e 3,00 (m, ε-
CH2 total 6H, Calculado 6H); 1,7-1,3 (br, β,γ,δ-CH2) e 1,43 (s, tBu) total para β,γ,δ-CH2 e tBu 57H, Calculado 54H. MS (ESI +ve) encontrado 868,6 [M-Boc]+; 990,7 [M+Na]+ calculado para C51H81N7O11Na [M+Na]+ 991,1. (d) BHALys[Lys]2[HCl]4
[0139] BHALys[Lys]2[Boc]4 (1,41 kg, 1,46 mol) foi suspenso em me- tanol (1,7 L) com agitação a 35 °C. Ácido clorídrico (1,7 L) foi misturado com metanol (1,7 L), e a solução resultante foi adicionada em quatro porções à suspensão de dendrímero e deixada a agitar durante 30 min. O solvente foi removido sob pressão reduzida e processado com duas faixas sucessivas de água (3,5 L), seguidas por duas faixas sucessivas de acetonitrila (4 L) para dar BHALys[Lys]2[HCl]4 (1,05 kg, 1,46 mmol) em 102% de rendimento. 1H RMN (D2O) δ 7,4 (m l, 10H, Ph Calculado 10H); 6,14 (s, 1H, CH-Ph2 Calculado 1H); 4,47 (t, J = 7,5 Hz, α-CH, 1H ), 4,04 (t, J = 6,5 Hz, α-CH, 1H ), 3,91 (t, J = 6,8 Hz, α-CH, 1H, total 3H, Calculado 3H); 3,21 (t, J = 7,4 Hz, ε-CH2, 2H), 3,01 (t, J = 7,8 Hz, ε-CH2, 2H) e 2,74 (t, J = 7,8 Hz, ε-CH2, 2H, total 6H, Calculado 6H); 1,88 (m, β,γ,δ-CH2), 1,71 (m, β,γ,δ-CH2), 1,57 (m, β,γ,δ-CH2) e 1,35 (m, β,γ,δ- CH2 total 19H, Calculado 18H). (e) BHALys[Lys]4[Boc]8
[0140] BHALys[Lys]2[HCl]4 (1,05 kg, 1,47 mol) foi dissolvido em DMF (5,6 L) e trietilamina (2,19 L). O éster de α,ε-(t-Boc)2-(L)-lisina p- nitrofenol (2,35 kg, 5,03 mol) foi adicionado em três porções e a reação agitada durante a noite a 25 °C. Uma solução de NaOH (0,5 M, 22 L) foi adicionada e a mistura resultante foi filtrada, lavada com água (42 L) e depois seca ao ar. O sólido foi seco sob vácuo a 45 °C para dar BHALys [Lys]4[Boc]8 (2,09 kg, 1,11 mol) em 76% de rendimento. 1H RMN (CD3OD) δ 7,3 (m, 10H, Ph Calculado 10H); 6,2 (s, 1H, CH-Ph2 Calcu- lado 1H); 4,43 (m, α-CH), 4,34 (m, α-CH), 4,25 (m, α-CH) e 3,98 (br, α- CH, total 7H, Calc 7H); 3,15 (br, ε-CH2) e 3,02 (br, ε-CH2 total 14H, Calc
14H); 1,9-1,2 (br, β,γ,δ-CH2) e 1,44 (br s, tBu) total para β,γ,δ-CH2 e tBu 122H, Calc 144H. (f) BHALys[Lys]4[TFA]8
[0141] A uma suspensão agitada de BHALys[Lys]4[Boc]8 (4 g, 2,13 mmol) em DCM (18 mL) foi adicionado TFA (13 mL) a 0 °C. Os sólidos dissolvidos, e a solução foi agitada durante a noite sob uma atmosfera de árgon. Os solventes foram removidos sob vácuo e o TFA residual foi removido por trituração com éter dietílico (100 mL). O produto foi redis- solvido em água e depois liofilizado para dar BHALys[Lys]4[TFA]8 como um sólido esbranquiçado (4,27 g, 2,14 mmol) em 101% de rendimento. 1 H RMN (D2O) δ 7,21 (m l, 10H, Ph Calculado 10H); 5,91 (s, 1H, CH- Ph2 Calculado 1H); 4,17 (t, J = 7,4 Hz, α-CH, 1H ), 4,09 (t, J = 7,1 Hz, α- CH, 1H ), 4,02 (t, J = 7,2 Hz, α-CH, 1H, 3,84 (t, J = 6,5 Hz, α-CH, 2H), 3,73 (t, J = 6,7 Hz, α-CH, 1H), 3,67 (t, J = 6,7 Hz, α-CH, 1H, total 7H, Calculado 7H); 3,0 (m, ε-CH2), 2,93 (m, ε-CH2) e 2,79 (b, ε-CH2, total 15H, Calculado 14H); 1,7 (br, β,γ,δ-CH2), 1,5 (br, β,γ,δ-CH2), 1,57 (m, β,γ,δ-CH2) e 1,25 (br, β,γ,δ-CH2 total 45H, Calculado 42H). MS (ESI +ve) encontrado 541,4 [M+2H]2+; calculado para C55H99N15O7 [M+2H]2+ 541,2. (g) BHALys[Lys]8[Boc]16
[0142] Uma solução de éster de α,ε-(t-Boc)2-(L)-lisina p-nitrofenol (1,89 g, 4,05 mmol) em DMF (25 mL) foi adicionada a uma solução de BHALys [Lys]4[NH2TFA]8 (644 mg, 0,32 mmol) e trietilamina (0,72 mL, 5,2 mmol) em DMF (25 mL) e a reação foi deixada a agitar durante a noite sob uma atmosfera de árgon. A mistura de reação foi vertida em gelo/água (500 mL), depois filtrada e o sólido recolhido foi seco durante a noite sob vácuo. O sólido seco foi cuidadosamente lavado com aceto- nitrila para dar BHALys[Lys]8[Boc]16 como um sólido esbranquiçado (0,82 g, 0,22 mmol) em 68% de rendimento. 1H RMN (CD3OD) δ 7,3 (m, 10H, Ph Calculado 10H); 6,2 (s l, 1H, CH-Ph2 Calculado 1H); 4,48 (l, α-
CH), 4,30 (l, α-CH) e 4,05 (br, α-CH, total 16H Calculado 15H); 3,18 (br, ε-CH2) e 3,02 (m, ε-CH2 total 31H, Calculado 30H); 1,9-1,4 (br, β,γ,δ- CH2) e 1,47 (br s, tBu) total para β,γ,δ-CH2 e tBu 240H, Calculado 234H. MS (ESI+ve) encontrado 3509 [M+H-(Boc)2]+ calculado para C173H306N31O43 [M+H-(Boc)2]+ 3508,5; 3408 [M+H-(Boc)3]+ calculado para C168H298N31O41 [M+H-(Boc)3]+ 3408,4. (h) BHALys[Lys]8[TFA]16
[0143] Uma solução de TFA/DCM (1:1, 19 mL) foi adicionada lenta- mente a uma suspensão agitada de BHALys[Lys]8[Boc]16 (800 mg, 0,22 mmol) em DCM (25 mL). Os sólidos foram dissolvidos e a solução foi agitada durante a noite sob uma atmosfera de árgon. Os solventes fo- ram removidos sob vácuo e o TFA residual foi removido por liofilização repetida do resíduo, para dar BHALys[Lys]8[TFA]16 como um liofilato es- branquiçado (848 mg, 0,22 mmol) em 100% de rendimento 1H RMN (D2O) δ 7,3 (m l, 10H, Ph Calculado 10H); 6,08 (s, 1H, CH-Ph2 Calculado 1H); 4,3 (m, α-CH), 4,18 (m, α-CH), 4,0 (m, α-CH) e 3,89 (m, α-CH, total 16H, Calculado 15H); 3,18 (br, ε-CH2) e 2,94 (m, ε-CH2 total 32H, Cal- culado 30H); 1,9 (m, β,γ,δ-CH2), 1,68 (m, β,γ,δ-CH2) e 1,4 (m, β,γ,δ-CH2 total 99H, Calculado 90H). MS (ESI +ve) encontrado 2106 [M+H]+ cal- culado para C103H194N31O15 [M+H]+ 2106,9. (i) BHALys[Lys]16[Boc]32
[0144] Uma solução de éster de α,ε-(t-Boc)2-(L)-lisina p-nitrofenol (1,89 g, 4,05 mmol) em DMF (25 mL) foi adicionada a uma solução de BHALys [Lys]8[TFA]16 (644 mg, 0,32 mmol) e trietilamina (0,72 mL, 5,2 mmol) em DMF (25 mL) e a reação foi deixada a agitar durante a noite sob uma atmosfera de árgon. A reação foi vertida em gelo/água (500 mL), depois filtrada e o sólido recolhido foi seco durante a noite sob vá- cuo. O sólido seco foi cuidadosamente lavado com acetonitrila para dar BHALys[Lys]16[Boc]32 como um sólido esbranquiçado (0,82 g, 0,2 2 mmol) em 68% de rendimento.
[0145] 1 H RMN (CD3OD) δ 7,28 (m, 9H, Ph Calculado 10H); 6,2 (s l, 1H, CH-Ph2 Calculado 1H); 4,53 (l, α-CH), 4,32 (l, α-CH) e 4,05 (br, α- CH, total 35H, Calculado 31H); 3,18 (l, ε-CH2) e 3,04 (m, ε-CH2 total 67H, Calculado 62H); 1,9-1,5 (l, β,γ,δ-CH2) e 1,47 (br s, tBu) total para β,γ,δ-CH2 e tBu 474H Calculado, 474H. MS (ESI+ve) encontrado 6963 [M+H-(Boc)4]+ calculado para C339H610N63O87 [M+H-(Boc)4]+ 6960,9; 6862 [M+H-(Boc)5]+ calculado para C334H604N63O85 [M+H-(Boc)5]+ 6860,8. (j) BHALys[Lys]16[TFA]32
[0146] Uma solução de TFA/DCM (1:1, 19 mL) foi adicionada lenta- mente a uma suspensão agitada de BHALys[Lys]16[Boc]32 (800 mg, 0,1 1mmol) em DCM (25 mL). Os sólidos foram dissolvidos e a solução foi agitada durante a noite sob uma atmosfera de árgon. Os solventes fo- ram removidos sob vácuo e o TFA residual foi removido por liofilização repetida do resíduo, para dar BHALys[Lys]16[TFA]32 como um liofilato esbranquiçado (847 mg, 0,11mmol) em 100% de rendimento 1H RMN (D2O) δ 7,3 (m l, 11H, Ph Calculado 10H); 6,06 (s, 1H, CH-Ph2 Calculado 1H); 4,3 (m, α-CH), 4,19 (m, α-CH), 4,0 (m, α-CH) e 3,88 (m, α-CH, total 35H, Calculado 31H); 3,15 (l, ε-CH2) e 2,98 (m, ε-CH2 total 69H, Calcu- lado 62H); 1,88 (m, β,γ,δ-CH2), 1,7 (m, β,γ,δ-CH2) e 1,42 (m, β,γ,δ-CH2 total 215H, Calculado 186H). MS (ESI+ve) encontrado 4158 [M+H]+ calculado para C199H386N63O31 [M+H]+ 4157,6 (k) HO-Lys(α-BOC)(ε-PEG2100)
[0147] DIPEA (0,37 mL, 2,10 mmol) foi adicionado a uma mistura arrefecida em gelo de NHS-PEG2100 (por exemplo, )(2,29 g, 1,05 mmol) e N-α-t-BOC-L-lisina (0,26 g, 1,05 mmol) em DMF (20 mL). A mistura agitada foi deixada a aquecer até à temperatura am- biente durante a noite, depois quaisquer sólidos remanescentes foram filtrados (0,45 µm de acrodisc PALL) antes de remover o solvente sob vácuo. O resíduo foi retomado em ACN/H2O (1:3, 54 mL) e purificado por HPLC preparativa (Waters XBridge C18, 5 μm, 19 x 150 mm, ACN a 25 a 32% (5-15 min), ACN a 32 a 60% (15 a 20 min), sem tampão, 8 mL/min, RT = 17 min), proporcionando 1,41 g (56%) de HO- Lys(BOC)(PEG2100). 1H RMN (CD3OD) δ 3,96-4,09 (m, 1H), 3,34-3,87 (m, 188H); 3,32 (s, 3H), 3,15 (q, J = 6,0 Hz, 2H), 2,40 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,28-1,88 (m, 6H), 1,41 (s, 9H). (l) BHALys[Lys]32[α-BOC]32[ε-PEG2100]32‡
[0148] A uma mistura agitada de BHALys[Lys]16[TFA]32 (0,19 g, 24 µmol) em DMF (20 mL) foi adicionado DIPEA (0,86 mL, 4,86 mmol). Essa mistura foi então adicionada gota a gota a uma mistura agitada de PyBOP (0,62 g, 1,20 mmol) e Lys(BOC)(PEG2100) (2,94 g, 1,20 mmol) em DMF (20 mL) à temperatura ambiente. A mistura de reação foi dei- xada a agitar durante a noite e depois diluída com água (200 mL). A mistura aquosa foi submetida a uma filtração de centramato (membrana de 5 k, 20 L de água). O retentado foi liofilizado, fornecendo 1,27 g (73%) do dendrímero desejado. HPLC (C8 XBridge, 3 x 100 mm, gradiente: ACN a 5% (0-1 min), ACN/H2O a 5-80%) (1-7 min), ACN a 80% (7-12 min), ACN a 80-5% (12-13 min), ACN a 5% (13-15 min), 214 nm, TFA a 0,1%) Rf (min) = 8,52. 1H-RMN (300MHz, D2O) δ (ppm): 1,10-2,10 (m, Lys CH2 (β, χ, δ) e BOC, 666H), 3,02-3,36 (m, Lys CH2 (ε), 110H), 3,40 (s, PEG-OMe, 98H), 3,40-4,20 (m, PEG-OCH2, 5750H + Lys CH de su- perfície, 32H), 4,20-4,50 (m, Lys, CH interno 32H), 7,20-7,54 (m, BHA, 8H). 1H RMN indica aproximadamente 29 PEGs. (m) BHALys[Lys]32[α-TFA]32[ε-PEG2100]32‡
[0149] Foram agitadas 1,27 g (17,4 µmol) de BHALys[Lys]32[α- BOC]32[ε-PEG2100]32 em TFA/DCM (1:1, 20 mL) à temperatura ambiente durante a noite. Os voláteis foram removidos em vácuo, e em seguida o resíduo foi retomado em água (30 mL). A mistura foi, então, concen-
trada. Esse processo foi repetido mais duas vezes antes de ser liofili- zado, fornecendo 1,35 g (106%) do produto desejado como um óleo vis- coso incolor. HPLC (C8 XBridge, 3 x 100 mm, gradiente: ACN a 5% (0- 1 min), ACN/H2O a 5-80%) (1-7 min), ACN a 80% (7-12 min), ACN a 80- 5% (12-13 min), ACN a 5% (13-15 min), 214 nm, 0,1% TFA) Rf (min) = 8,51. 1H-RMN (300MHz, D2O) δ (ppm): 1,22-2,08 (Lys CH2 ((β, χ, δ), 378H), 3,00-3,26 (Lys CH2 (ε), 129H), 3,40 (PEG-OMe, 96H), 3,45-4,18 (PEG-OCH2, 5610H + Lys CH de superfície, 32H), 4,20-4,46 (Lys, CH interno, 33H), 7,24-7,48 (8H, BHA). 1H RMN indica aproximadamente 29 PEGs. (n) Caracterização de BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG~2000]32‡
[0150] A Tabela 1 ilustra os vários lotes de BHALys[Lys]32[α- NH2TFA]32[ε-PEG~2000]32# usados na síntese dos Compostos 1 e 2 abaixo, que têm ligeiramente diferentes comprimentos de PEG. O nú- mero real de cadeias de PEG no dendrímero também é calculado por RMN de prótons. Tabela 1. Vários lotes de BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG~2000]32‡ Lote Escala Comprimento de Número de PEGs (x) em MW** Estimado PEG a partir de BHALys[Lys]32[α-NH2.TFA]32[ε-PEG~2000]x (kDa) CoA (Da) (a partir de RMN de prótons*) 1 101 mg 2200 29 75,7 2 98 mg 2200 29 75,7 3 74,8 g 2100 29 72,8 4 137 mg 2200 29 75,7 5 1,19 g 2100 31 77,0 6 18,98 g 2100 29 72,8 * O número de PEGs é calculado a partir de RMN de prótons. Para o lote 1: N° de PEGs = Número (integração) de prótons na região PEG de RMN (3,4-4,2 ppm)/Número médio (média) de prótons por cadeia de PEG (CoA PEG/44Da x 4H) = 5706H / (2200/44 x 4) = 28,53 (aprox. 29 unidades de PEG) ** Peso Molecular estimado pela adição de MW de vários componentes. Para o lote 1:
MW total = Mw do dendrímero + Mw de TFA + Mw de PEG = BHALys[Lys]32 + 32(TFA) + 29(PEG) = 8.258 + 3.648 + 63800 = ~75,7 kDa
[0151] A RMN de prótons para os vários lotes de BHALys[Lys] 32[α- NH2TFA]32[ε-PEG~2000]32‡ é apresentada na Tabela 2: Tabela 2. Dados de RMN de próton para Vários Lotes de BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG~2000]32‡ Lote Escala RMN de próton de BHALys[Lys]32[α-NH2.TFA]32[ε-PEG~2000]x 1 101 mg 1,22-2,08 (Lys CH2(βχδ, 378H), 3,00-3,26 (Lys CH2 (α), 129H), 3,40 (PEG-OMe, 96H), 3,45-4,18 (PEG-OCH2, 5610H + Lys CH de superfície, 32H), 4,20-4,46 (Lys, CH interno, 33H), 7,24-7,48 (8H, BHA). 2 98 mg Quanto ao lote 1 3 74,8 g 1,02-2,18 (Lys CH2(βχδ, 378H), 2,94-3,36 (Lys CH2 (α), 129H), 3,41 (PEG-OMe, 93H), 3,45-4,18 (PEG-OCH2, 5432H + Lys CH de superfície, 32H), 4,18-4,50 (Lys, CH interno, 32H), 7,12-7,64 (9H, BHA). 4 137 mg Quanto ao lote 1 5 1,19 g 1,02-2,16 (Lys CH2(βχδ, 378H), 2,93-3,36 (Lys CH2 (α), 129H), 3,41 (PEG-OMe, 101H), 3,45-4,18 (PEG-OCH2, 5908H + Lys CH de superfície, 32H), 4,18-4,50 (Lys, CH interno, 33H), 7,21-7,54 (9H, BHA). 6 18,98 g Quanto ao lote 3
2. Preparação do Composto 1: BHALys[Lys]32[α-MIDA-Composto A]32†[ε-PEG2100]32‡
[0152] Nota: 32† se refere ao número teórico de grupos α-amino no dendrímero disponível para substituição com MIDA-Composto A. O nú- mero médio real de grupos MIDA-Composto A ligados a BHALys[Lys]32 foi determinado experimentalmente por 19F RMN (ver o Exemplo 2). 32‡ se refere ao número teórico de grupos ε-amino, no dendrímero, dispo- níveis para substituição com PEG2100. O número médio real de grupos PEG2100 ligados a BHALys[Lys]32 foi determinado experimentalmente por 1H RMN. (a) Preparação de MIDA-Composto A
[0153] A uma suspensão agitada magneticamente de Composto A (200 mg, 0,21 mmol) em DCM (5 mL) à temperatura ambiente foi adici- onado e DIPEA (24 µL, 0,14 mmol), NMM (72 µL, 0,66 mmol) e 4-metil- morfolino-2,6-diona (33 mg, 0,26 mmol). A suspensão se dissolveu ra- pidamente e a mistura foi deixada a agitar à temperatura ambiente du- rante a noite. 4-metilmorfolino-2,6-diona adicional foi adicionada ao longo das 24 horas seguintes até a reação ser considerada > 80% com- pleta por HPLC.
Os voláteis foram então removidos em vácuo e o resí- duo purificado por HPLC preparativa (BEH 300 Waters XBridge C18, 5 μM, 30 x 150 mm, ACN/água a 50-70% (5-40 min), TFA a 0,1%, RT = 23 min) fornecendo 190 mg (84%) de produto como um sólido branco.
LCMS (C18, gradiente: ACN/H2O a 50-60% (1-10 min), ACN a 60% (10- 11 min), ACN a 60-50% (11-13 min), ACN a 50% (13-15 min), ácido fórmico a 0,1%, 0,4 mL/min, Rf (min) = 2,55. ESI (+ve) observado [M + H]+ = 1074. Calculado para C50H55ClF3N5O10S3 = 1073,28 Da. 1H-RMN (300MHz, CD3OD) δ (ppm): 0,86-1,07 (m, 1H), 1,08-1,37 (m, 2H), 1,72- 1,88 (m, 1H), 1,96-2,09 (m, 1H), 2,10-2,24 (m, 1H), 2,24-2,38 (m, 1H), 2,66 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 2,79 (t, J = 12,6 Hz, 1H), 2,92 (s, 3H), 3,00 (s, 3H), 3,14-3,28 (m, 2H), 3,33-3,43 (m, 2H), 3,47-3,57 (m, 2H), 3,72 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,89 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 4,03-4,15 (m, 1H), 4,06 (s, 2H), 4,19 (s, 2H), 4,43 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,54-4,64 (m, 2H), 6,88 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,09- 7,25 (m, 4H), 7,26-7,47 (m, 8H), 7,61 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 9,0
Hz, 2H), 8,07 (dd, J = 9,3, 2,1 Hz, 1H), 8,31 (d, J = 2,1 Hz, 1H). Método alternativo de preparação
[0154] O composto A (28,00 g, 2,96 x 10-2 mol) e 4-metilmorfolino- 2,6-diona (7,24 g, 5,33 x 10-2 mol, 1,80 equiv.) foram carregados em um recipiente de reação de 3 gargalos com uma sonda de temperatura interna e funil de carga equalizador de pressão, sob uma atmosfera de N2. DCM (250 mL, 9 vol.) foi introduzido e a suspensão resultante foi arrefecida até 0°C. TEA (6,25 mL, 4,44 x 10-2 mol., 1,5 equiv.) em DCM (50 mL, 1,8 vol.) foi adicionado gota a gota ao longo de um período de 10 minutos enquanto se mantinha a temperatura a 0 °C. Controles da reação em processo foram feitos a cada hora. A reação foi considerada completa quando o Composto A era <10% por área de pico (tipicamente 4,5 h após o final da adição). A mistura de reação foi diluída com DCM (1,40 L, 50 vol.) e lavada duas vezes com Na2CO3 aq. a 1,6 M (1,60 L, 50 vol.). A camada orgânica foi seca sobre MgSO4 (90 g, 5% p/v), filtrada através de um funil de vidro sinterizado e lavada com DCM (100 mL, 5 vol.) proporcionando um sólido esbranquiçado, após concentração em vácuo (0,2 bar, 30°C) (33,07 g, 95% de rendimento, 90,6% por HPLC). (b) Preparação de BHALys[Lys]32[α-MIDA-Composto A]32†[ε- PEG2100]32‡ Método de preparação de pequena escala * = BHALys[Lys]16
[0155] A uma mistura agitada magneticamente do Composto A- MIDA (730 mg, 0,68 mmol) e PyBOP (353 mg, 0,68 mmol) em DMF (10 mL) à temperatura ambiente foi adicionada uma mistura de BHALys[Lys]32[α-NH2TFA]32[ε-PEG2100]31 (934 mg, 12,1 μmol, Lote 5 do Exemplo 4) e NMM (255 μL, 2,32 mmol), também em DMF (10 mL). Após 16 horas à temperatura ambiente, os voláteis foram removidos e o resíduo foi purificado por cromatografia de exclusão por tamanho (sephadex, LH20, ACN). As fracções apropriadas, como avaliado por HPLC, foram combinadas e concentradas. O resíduo foi, em seguida, retomado em água, filtrado (0,22 μm) e liofilizado, proporcionando 1,19 g (92%) do material desejado como um sólido cor de rosa pálido. HPLC (C8 Xbridge, 3 x 100 mm, gradiente: ACN/H2O a 42-50%) (1-7 min), ACN a 50-80% (7-8 min), ACN a 80% (8-11 min), ACN a 80-42% (11-12 min), ACN a 42% (12-15 min), 214 nm, formato de amônio a 10 mM) Rf (min) = 10,80. 1H-RMN (300MHz, CD3OD) δ (ppm): 0,45-1,92 (m, 565H), 2,08-2,78 (m, 228H), 2,79-3,00 (m, 96H), 3,01-3,28 (m, 180H), 3,35 (s, 180H), 3,46-4,20 (m, 6164H), 4,20-4,68 (m, 139H), 6,40-8,52 (m, 680H). Método (alternativo) de preparação de larga escala
[0156] DMF (225 mL, 16,5 vol.) foi adicionado a BHALys[Lys]32[α- NH2TFA]32[ε-PEG2100]29 (13,49 g, 1,72 x 10-4 mol, Lote 6 do Exemplo 4) e Composto A-MIDA (8,50 g, 6,87 x 10-3 mol, 40,2 equiv.) sob uma at- mosfera de N2. NMM (3,60 mL, 3,30 x 10-2 mol, 192 equiv.) foi introdu- zido, e a mistura de reação foi aquecida até 30-35 °C para ajudar na dissolução (aproximadamente 5 minutos). A mistura foi então nova- mente arrefecida até 20 °C e PyBOP (4,13 g, 7,56 x 10-3 mol, 44 equiv.) foi introduzido em duas porções iguais. No monitoramento do controle do processo revelou a conclusão da reação após 2 h. A mistura de rea- ção foi diluída com ACN (225 mL, 16,5 volumes), filtrada através de um funil de sinterização e submetida a 16 diavolumes (constantes) (200 mL,
ACN) de ultrafiltração (Merck Millipore Pellicon 3, 0,11 m2 cassete, 10kDa), mantendo uma pressão transmembranar (TMP) de 25 PSI e 44 L/m2/hora (LMH). Concentração sob pressão reduzida (40 °C, 0,2 bar; 60 minutos), e secagem à temperatura ambiente por 16 h adicionais produziu 23,5 g de material purificado como um xarope laranja claro. O xarope foi dissolvido em THF (235 mL, 10 volumes) a 35-40 °C (10 mi- nutos) e filtrado através de uma membrana PTFE de 0,45 micrômetro, de 47 mm (Merck-Millippore Omnipore). O filtrado foi concentrado para metade do seu volume original (100 mL, 4,3 volumes) e carregado para um funil de carga equalizador de pressão enquanto retorna à tempera- tura ambiente.
[0157] MTBE (400 mL, 19,5 volumes) foi carregado para um BFR de 3-gargalos equipado com uma sonda de temperatura interna, e arre- fecido até 0°C com o auxílio de um banho de gelo externo sob uma at- mosfera de N2. Ao atingir 0°C, a adição de dendrímero começou com uma duração de 15 minutos (temperatura interna máxima de 5°C), en- quanto a agitação continuou durante 45 minutos (a 0-5°C) de modo a permitir o amadurecimento do precipitado. Transferir a mistura resul- tante para um filtro de vácuo Buchner (160 mm de diâmetro), sob N2, proporcionou o primeiro bolo úmido dentro de 15 minutos. O bolo de filtração foi lavado duas vezes com 5 vol. MTBE (100 mL por lavagem) e levado até à secura (sob N2) com uma duração total de 15 minutos. O bolo de filtração foi transferido para uma estufa de vácuo onde a seca- gem ocorreu a 25°C, 0,2 bar até se atingir uma massa constante (48 h), proporcionando pó branco de fluxo livre em 18,98 g (102% de rendi- mento). HPLC (C8 Phenomenix Aeris, 2,1 x 100 mm, gradiente: ACN a 5% (0-1 min), ACN/H2O a 5-45% (1-2 min), ACN a 45-60% (2-8 min), ACN a 60% (8-10 min), ACN a 60-90% (10-10,1 min), ACN a 90% (10,1- 12 min), ACN a 90-5% (12-15 min), ACN a 5% (15-20 min), 272 nm, formato de amônio a 10 mM) Rf (min) = 14,94. 1H-RMN (300MHz,
CD3OD) δ (ppm): 0,31-2,84 (m, 953H), 2,86-3,27 (m, 211H), 3,35 (s, 109H), 3,37-4,23 (m, 5734H), 4,24-4,64 (m, 95H), 6,26-8,41 (m, 632H). 19 F-RMN (300MHz, DMSO-d6) δ: -107,1 ppm (3,64 mg, FBA, integração do conjunto a 100), -79,1 ppm (31,2 mg de dendrímero, 108,82). Isso proporciona 8,91 mg de Composto A (ou 28,6% de carga).
3. Preparação do Composto 2: BHALys[Lys]32[α-TDA-Composto A]32†[ε-PEG2100, 2200]32‡
[0158] Nota: 32† se refere ao número teórico de grupos α-amino no dendrímero disponível para substituição com TDA-Composto A. O nú- mero médio real de grupos TDA-Composto A ligados a BHALys[Lys]32 foi determinado experimentalmente por 1H RMN (ver o Exemplo 2). 32‡ se refere ao número teórico de grupos ε-amino, no dendrímero, dispo- níveis para substituição com PEG2100, 2200. O número médio real de gru- pos PEG2100, 2200 ligados ao BHALys[Lys]32 foi determinado experimen- talmente por 1H RMN. (a) Preparação de TDA-Composto A
[0159] A uma suspensão agitada magneticamente de Composto A (70 mg, 74,1 µmol) em DCM (5 mL) à temperatura ambiente foi adicio- nado anidrido tiodiglicólico (TDA, 10 mg, 74,1 µmol) e DIPEA (33 μL, 185 µmol). A suspensão se dissolveu rapidamente e a mistura foi dei- xada a agitar à temperatura ambiente durante a noite. Anidrido tiodigli- cólico adicional foi adicionado ao longo das 24 horas seguintes até a reação ser considerada > 80% completa por HPLC. Os voláteis foram então removidos em vácuo e o resíduo purificado por HPLC preparativa (BEH 300 Waters XBridge C18, 5 μM, 30 x 150 mm, ACN/água a 60- 80% (5-40 min), TFA a 0,1%, RT = 22 min) fornecendo 63 mg (70%) de produto como um sólido branco. LCMS (C18, gradiente: ACN/H2O a 50- 60% (1-10 min), ACN a 60% (10-11 min), ACN a 60-50% (11-13 min), ACN a 50% (13-15 min), ácido fórmico a 0,1%, 0,4 mL/min, Rf (min) = 7,33. ESI (+ve) observado [M + H]+ = 1077. Calculado para C49H52ClF3N4O10S4 = 1076,22 Da. 1H-RMN (300MHz, CD3OD) δ (ppm): 0,87-1,04 (m, 1H), 1,08-1,36 (m, 3H), 1,71-1,90 (m, 1H), 1,96-2,40 (m, 3H), 2,64 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 2,77 (t, J = 12,6 Hz, 1H), 2,94 (s, 3H), 3,18-3,30 (m, 2H), 3,35 (s, 2H), 3,40 (s, 2H), 3,46-3,55 (m, 2H), 3,73 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 3,90 (d, J = 12,9Hz, 1H), 4,02-4,15 (m, 1H), 4,40-4,48 (m, 3H), 6,86 (d, J = 9,3Hz, 2H), 6,92 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 9,0Hz, 1H), 7,08-7,46 (m, 13H), 7,61 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 8,08 (dd, J = 9,3, 2,1Hz, 1H), 8,31 (d, J = 2,1 Hz, 1H). Método alternativo de preparação
[0160] O composto A (25,50 g, 2,70 x 10-2 mol) e TDA (4,81 g, 3,64 x 10-2 mol, 1,35 equiv.) foram carregados em um recipiente de reação de 3 gargalos equipado com uma sonda de temperatura interna e funil de carga equalizador de pressão, sob uma atmosfera de N 2. DCM (255 mL, 10 vol.) foi introduzido e a suspensão resultante foi arrefecida até - 10°C. TEA a 0,29 M em DCM, (100 mL, 3,77 x 10-2 mol, 1,4 equiv.) foi introduzido ao longo de um período de 40 minutos enquanto se manti- nha a temperatura a -10°C. Controles da reação em processo (IPC's) foram feitos a cada hora. A reação foi considerada completa quando o Composto A tinha <10% de área por HPLC (tipicamente 4,5 h após o final da adição). A mistura de reação foi diluída com DCM (1,66 L, 65 vol.) e lavada três vezes com solução salina tamponada com fosfato (PBS) (1,02 L, 40 vol.). Os extratos orgânicos combinados foram secos sobre MgSO4 (100 g, 5% p/v), proporcionando um sólido amarelo pálido,
após concentração em vácuo (0,2 bar, 25 °C) durante a noite (tipica- mente 24,5 g, rendimento de 85%, 86,83%, em HPLC). (b) Preparação de BHALys[Lys]32[α-TDA-Composto A]32†[ε-PEG2100, 2200]32‡ Método de preparação de pequena escala * = BHALys[Lys]16
[0161] A uma mistura agitada magneticamente do Composto A-TDA (62 mg, 58 μmol) e PyBOP (30 mg, 58 μmol) em DMF (1 mL) à tempe- ratura ambiente foi adicionada uma mistura de BHALys[Lys]32[α- NH2TFA]32[ε-PEG2200]29 (97 mg, 1,28 μmol, Lote 2 do Exemplo 4) e NMM (27 μL, 0,24 mmol), também em DMF (2 mL). Após 16 horas à tempe- ratura ambiente, os voláteis foram removidos e o resíduo foi purificado por cromatografia de exclusão por tamanho (sephadex, LH20, MeOH). As fracções apropriadas, como avaliado por HPLC, foram combinadas e concentradas. O resíduo foi, em seguida, retomado em água, filtrado (0,22 μm) e liofilizado, proporcionando 98 mg (72%) do material dese- jado como um sólido cor de rosa pálido. HPLC (C8 Xbridge, 3 x 100 mm, gradiente: ACN/H2O a 42-50%) (1-7 min), ACN a 50-80% (7-8 min), ACN a 80% (8-11 min), ACN a 80-42% (11-12 min), ACN a 42% (12-15 min), 214 nm, formato de amônio a 10 mM) Rf (min) = 10,24. 1H-RMN (300MHz, CD3OD) δ (ppm): 0,62-2,33 (m, 589H), 2,37-2,69 (m, 87H),
2,69-2,92 (m, 98H), 2,94-3,27 (m, 202H), 3,35 (s, 113H), 3,37-4,10 (m, 5781H), 4,10-4,70 (m, 154H), 6,50-8,45 (m, 661H). Método (alternativo) de preparação de larga escala * = BHALys[Lys]16
[0162] DMF (495 mL, 16,5 vol.) foi adicionado a BHALys[Lys]32[α- NH2TFA]32[ε-PEG2100]29, (30,6 g, 3,82 x 10-4 mol, Lote 3 do Exemplo 4) e Composto A-TDA (19,01 g, 1,53 x 10-2 mol, 40 equiv.) sob uma atmos- fera de N2. NMM (8,06 mL, 7,33 x 10-2 mol, 192 equiv.) foi introduzido, e a reação foi aquecida até 30°C para ajudar na dissolução (aproximada- mente 10 min). A mistura foi então novamente arrefecida até 20°C e PyBOP (9,20 g, 1,68 x 10-2 mol, 44 equiv.) foi introduzido em duas por- ções iguais. No monitoramento do controle do processo revelou a con- clusão da reação após 2 h. A mistura de reação foi diluída com ACN (495 mL, 16,5 vol.), filtrada através de um funil de sinterização e subme- tida a 10 diavolumes constantes (600 mL, ACN) de ultrafiltração (cas- sete de 3, 2 x 0,11 m2 da Merck Millipore Pellicon), mantendo uma pres- são transmembranar (TMP) de 18 PSI e 48 L/m2/hora (LMH). Concen- tração sob pressão reduzida (45 °C, 0,2 bar; durante 30 min), e secagem à temperatura ambiente por 16 h adicionais produziu 45,7 g de produto purificado (Lote A) como um xarope amarelo escuro. Esse processo foi repetido para produzir outros 46,8 g de material (Lote B).
[0163] Os dois lotes (Lotes A e B) foram tomados individualmente em THF (4,7 vol.) e aquecidos a 35-40°C até a dissolução estar com- pleta (10 min). A um recipiente de fundo redondo de 3 gargalos sepa- rado, equipado com um termômetro interno, funil de carga equalizador de pressão e agitador magnético, foi adicionado MTBE (1,8 L, 19,5 vol.). O solvente foi então arrefecido até 0°C com o auxílio de um banho de gelo externo.
As soluções de THF combinadas dos lotes A e B foram carregadas no funil de carga ao atingir a temperatura ambiente e intro- duzidas gota a gota à solução agitada de MTBE enquanto se mantinha a temperatura a 0°C.
À primeira vista da nebulosidade, a reação foi se- meada com BHALys[Lys]32[α-TDA-Compound A]27[ε-PEG2200]29 sólido (0,95 g, 1% p/p em relação aos lotes de entrada A e B) e a adição foi retomada, com duração de 30 minutos.
A cristalização foi deixada a amadurecer durante 60 minutos, antes de ser transferida para um filtro de vácuo Buchner (160 mm de diâmetro) sob N2 (com duração de 15 min). O bolo de filtração foi lavado duas vezes com 5 vol.
MTBE (300 mL por lavagem) e levado até à secura (sob N2) com uma duração total de 30 minutos.
O bolo de filtração foi transferido para uma estufa de vácuo onde a secagem ocorreu a 40 °C, 0,2 bar até se atingir uma massa constante (24 h), proporcionando pó branco de fluxo livre em 74,8 g (105% de rendimento). HPLC (C8 Phenomenix Aeris, 2,1 x 100 mm, gradiente: ACN a 5% (0-1 min), ACN/H2O a 5-45% (1-2 min), ACN a 45-60% (2-8 min), ACN a 60% (8-10 min), ACN a 60-90% (10-10,1 min), ACN a 90% (10,1-12 min), ACN a 90-5% (12-15 min), ACN a 5% (15-20 min), 272 nm, formato de amônio a 10 mM) Rf (min) = 14,92. 1H- RMN (300MHz, CD3OD) δ (ppm): 0,40-2,30 (m, 589H), 2,31-2,79 (m, 154H), 2,81-3,29 (m, 263H), 3,35 (s, 116H), 3,36-4,10 (m, 5924H), 4,13- 4,62 (m, 151H), 6,28-8,52 (m, 622H). 19F-RMN (300MHz, DMSO-d6) δ: -106,9 ppm (3,81 mg, FBA, integração do conjunto a 100), -79,0 ppm (21,4 mg de dendrímero, 62,80). Isso proporciona 5,36 mg de Composto
A (ou 25,1% de carga). Exemplo 2: Introdução de Fármaco do Composto de dendrímeros
[0164] A introdução de fármaco do Composto A nos dendrímeros preparados acima foi determinada por RMN.
[0165] % de introdução de Composto A por 1H RMN: A introdução de Composto A foi estimada por meio da integração da região aromática (6,5-8,5 ppm), que era representativa do Composto A, em comparação com a região PEG (3,4-4,2 ppm), que é representativa do suporte do dendrímero. 19
[0166] % de introdução de Composto A por F RMN: As introdu- ções do Composto A foram calculadas através da realização de uma 19F RMN do conjugado usando um padrão interno (ácido 4-fluorobenzóico, FBA). Uma experiência foi tipicamente realizada pesando com precisão uma massa conhecida de dendrímero e FBA em um único recipiente. Este foi então retomado em DMSO, sonicado (2 min) e depois analisado por RMN (100 varrimentos, 30 s de tempo de atraso). Os picos de FBA e de dendrímero foram então integrados e a % de Composto A calculada usando razões molares (proporção molar de 3:1 de Composto (3F) para FBA (1F). Tabela 3. Introdução Percentual do Composto A em Dendrímero Lys Composto Escala Introdução de Composto A MW* (kDa) Nº. de Composto A por (%) dendrímero 1 Pequena Escala 23,6 (19F RMN) 99,7 25 (1,19 g) Larga Escala (18,98 28,6 (19F RMN) 101,6 31 g) 2 Pequena Escala (98 28,6 (1H RMN) 106,0 32 mg) Larga Escala (74,8 g) 25,1 (19F RMN) 96,2 27 * O peso molecular total pode ser estimado usando os MW estimados do suporte do dendrímero, o MW do Composto A-ligante e a % de in- trodução de Composto A a partir de RMN,isto é, para Exemplo: MW= MW do suporte do dendrímero – 32(MW TFA) / (100 –
introdução de Composto A %((Mr o Composto A-ligante – água)/Mr Composto A))/100 = 75700 - 3648 (100 – 28,2((1058 – 18)/945))/100 = 72052 (100 – 28,2(1,10))/100 = 72052 0,6898 = ~104,5 kDa Exemplo 4: Estudos de eficácia de Rato e Camundongo
[0167] As formulações usadas nos estudos de eficácia foram pre- paradas como se segue:
[0168] Preparação das formulações em PBS dos Compostos 1 e 2 para estudo de eficácia de dosagem de RS4;11: As quantidades apro- priadas dos Compostos 1 e 2 foi pesada em um balão volumétrico. 10 mL de Solução Salina Tamponada com Fosfato (PBS) de Dulbecc foram adicionados e as formulações foram então agitadas até o composto se dissolver completamente.
[0169] Formulações do Composto 1 para estudo de eficácia de Su- DHL-4: O Composto 1 foi formulado em um tampão de citrato/fosfato a pH 5 diluído 1:10 com glucose a 5% e contendo Kolliphor HS-15 a 1% p/v, a concentrações até 105 mg/mL do Composto 1 (equivalente a até 30 mg/mL da concentração do Composto A).
[0170] 100 mL de tampão de citrato/fosfato de McIlvane a pH 5 fo- ram preparados. 1,02 g de mono-hidrato de ácido cítrico e 3,69 g de dodeca-hidrato de fosfato sódico foram pesados para um recipiente e foram adicionados 95 mL de água para injeção. O veículo foi agitado (ou sonicado) de modo a dissolver. O pH foi, então, medido e ajustado até pH 5, com HCl ou NaOH a 0,1M, como necessário. O veículo foi ajustado em volume (100 mL) com Água para Injeção.
[0171] Este tampão McIlvane foi usado para preparar o veículo tam- pão diluído (tampão de citrato/fosfato a pH 5 diluído 1:10 com glucose a 5% e contendo Kolliphor HS-15 a 1% p/v). A quantidade necessária de tampão de citrato/fosfato de McIllvanes, equivalente a 10% do volume alvo total a ser preparado, foi adicionada a um recipiente adequado. So- lução de glucose a 5% comercialmente disponível foi adicionada a apro- ximadamente 90% do volume alvo. Kolliphor HS-15 equivalente a 1% p/v foi adicionado e o veículo foi agitado para dissolver o Kolliphor HS-
15. O pH foi medido e ajustado para pH 5,0 ± 0,05 com HCl ou NaOH a 0,1M (se necessário). O veículo foi, então, ajustado em volume com glu- cose a 5%. Esse foi esterilizado por filtração usando um filtro de seringa com tamanho de poro de 0,22 μm, se necessário.
[0172] Para preparar a formulação do Composto 1 para a dose mais elevada (10 mg/mL do Composto A ou Composto 1 equivalente a 37 mg/mL), 370 mg do Exemplo 9, equivalente a 100 mg do Composto A, foram transferidos para um recipiente adequado com um agitador mag- nético. Enquanto o agitador magnético estava em funcionamento, o ve- ículo tamponado diluído (tampão de citrato/fosfato a pH 4 foi diluído 1:10 com glucose a 5% contendo Kolliphor HS-15 a 1% p/v) foi adicionado a 95% do volume alvo (9,5 mL). Agitação continuada para auxiliar a dis- solução, evitando a geração de espuma excessiva, até que foi formada uma solução límpida. A formulação foi, então, ajustada para o volume (0,5 mL) com veículo tamponado diluído e o pH final foi verificado. A formulação foi avaliada visualmente de modo a excluir a presença de partículas. 2 e 6 mg/mL foram preparados a partir da concentração mais elevada.
[0173] As formulações do Composto 1 foram preparadas à tempe- ratura ambiente e doseadas dentro dos 5 minutos após a preparação.
[0174] Formulações do Composto 2 para dosagem no estudo de eficácia de SuDHL-4: O Composto 2 foi formulado em um tampão de citrato/fosfato a pH 4 diluído 1:10 com Glucose a 5% e contendo Kol- liphor HS-15 a 1% p/v, a concentrações até 121 mg/mL do Composto 2 (equivalente de até 30 mg/mL da concentração do Composto A).
[0175] 100 mL de tampão de citrato/fosfato de McIlvane a pH 4 fo- ram preparados. 1,29 g de mono-hidrato de ácido cítrico e 2,76g de do- deca-hidrato de fosfato sódico foram pesados para um recipiente e fo- ram adicionados 95 mL de água para injeção. O veículo foi agitado (ou sonicado) de modo a dissolver. O pH foi, então, medido e ajustado até pH 4, com HCl ou NaOH a 0,1M, como necessário. O veículo foi ajus- tado em volume (100 mL) com Água para Injeção.
[0176] Este tampão McIlvane foi usado para preparar o veículo tam- pão diluído (tampão de citrato/fosfato a pH 4 diluído 1:10 com glucose a 5% e contendo Kolliphor HS-15 a 1% p/v). A quantidade necessária de tampão de citrato/fosfato de McIlvane, equivalente a 10% do volume alvo total a ser preparado, foi adicionada a um recipiente adequado. So- lução de glucose a 5% comercialmente disponível foi adicionada a apro- ximadamente 90% do volume alvo. Kolliphor HS-15 equivalente a 1% p/v foi adicionado e o veículo foi agitado para dissolver o Kolliphor HS-
15. O pH foi medido e ajustado para pH 4,0 ± 0,05 com HCl ou NaOH 0,1M (se necessário). O veículo foi, então, ajustado em volume com glu- cose a 5%. Esse foi esterilizado por filtração usando um filtro de seringa com tamanho de poro de 0,22 μm, se necessário.
[0177] Para preparar a formulação do Composto 2 para a dose mais elevada (10 mg/mL do Composto A ou Composto 2 equivalente a 39 mg/mL), 390 mg do Composto 2, equivalente a 100 mg do Composto A, foram transferidos para um recipiente adequado com um agitador mag- nético. Enquanto o agitador magnético estava em funcionamento, o ve- ículo tamponado diluído (tampão de citrato/fosfato a pH 4 foi diluído 1:10 com glucose a 5% contendo Kolliphor HS-15 a 1% p/v) foi adicionado a 95% do volume alvo (9,5 mL). A agitação da formulação foi continuada para auxiliar a dissolução, evitando a geração de espuma excessiva, até que foi formada uma solução límpida. A formulação foi, então, ajustada para o volume (0,5 mL) com veículo tamponado diluído e o pH final foi verificado. A formulação foi avaliada visualmente de modo a excluir a presença de partículas. 2 e 6 mg/mL foram preparados a partir da con- centração mais elevada.
[0178] As formulações do Composto 2 foram preparadas à tempe- ratura ambiente e doseadas dentro dos 5 minutos após a preparação. Formulação do Composto A em HP-β-CD a 30% p/v
[0179] Veículo HP-β-CD a 30% p/v foi preparado. Foram pesados 3 g de HP-β-CD (Roquette Kleptose, grau parenteral) em um balão volu- métrico de 10 mL e 8 mL de WFI foram adicionados e agitados (ou so- nicados) para dissolver. Uma vez dissolvido, o volume foi completado até 10 mL com WFI.
[0180] A quantidade apropriada de Composto A foi pesada em um balão volumétrico de 10 mL. Foram então adicionados 8 mL de veículo HP-β-CD a 30% p/v e a formulação foi agitada. MSA a 1 M foi adicio- nado, gota a gota, até o pH ser reduzido para cerca de 2. A formulação foi então agitada até o composto se dissolver completamente. O pH foi medido e ajustado até pH 4, gota a gota, usando MSA a 1 M ou NaOH. A formulação foi então agitada de modo a garantir que fosse obtida uma solução límpida (com névoa possível). O volume foi então completado até 10 mL com veículo HP-β-CD a 30% p/v e agitado. O pH final foi medido e registrado e a formulação filtrada através de um filtro de 0,22 uM antes da administração. Outras forças de formulação foram prepa- radas através da diluição o Composto A em HP-β-CD a 30% p/v com uma quantidade apropriada de veículo HP-β-CD a 30% p/v.
[0181] Eficácia dos Compostos 1 e 2 em Modelo de Xenoenxerto RS4;11: Foram inoculadas 5x106 células RS4;11 em um volume total de 100 μL subcutaneamente no flanco direito do camundongo. Quando o volume do tumor atingiu aproximadamente ~350 mm3, os camundongos portadores de tumor foram distribuídos aleatoriamente em grupos de 4 animais e tratados quer com veículo de controle (PBS) ou com trata- mento. A Figura 1 mostra que, com taxas de liberação diferentes, os dendrímeros exibem eficácia diferente. Composto 1 a 10 mg/kg do Com- posto A equivalente e Composto 2 a 30 mg/kg do Composto A equiva- lente com dose única IV mostraram ter atividade semelhante ou ligeira- mente melhor do que 10 mg/kg IV do Composto A HP-β-CD, uma vez, (100%, 98 % vs. 90% de regressão, respectivamente). Tabela 4. Sumário dos dados de inibição e regressão para os Com- postos 1 e 2 Eficácia Número do Tratamento % de Inibição % de Regressão Valor de P Grupo T-C (Dias) Dia (47) Dia(47) Dia (47) 1 Veículo 2 Composto A 5 mg/kg >100 90 <0,0001 Composto 2 10 mg/kg do Composto A 3 equivalente (39 mg/kg da macromolé- >100 56 <0,0001 cula) Composto 2 30 mg/kg do Composto A 4 equivalente (117 mg/kg da macromolé- >100 100 <0,0001 >32 cula) Composto 1 10 mg/kg do Composto A equivalente (37 mg/kg da macromolé- >100 98 0,0085 cula)
[0182] Quando o volume do tumor RS4;11 atingiu aproximada- mente ~400-600mm3, grupos de 3 camundongos portadores de tumores foram tratados com uma única dose quer de veículo (PBS) ou Exemplo 2 IV a 10 e 30 mg/kg. Os tumores foram coletados em diferentes pontos temporais após a dose e processados para análise. Os resultados mos- traram que o ligante induz a resposta apoptótica comparável, tal como indicado por caspase 3 clivada, as respostas atingiram um pico a 16-28 h após a dose (Figura 2). O Composto 2 a 30 mg/kg do Composto A equivalente (117 mg/kg do Composto 2) induziu a resposta CC3 mais elevada.
[0183] A Figura 3 mostra que o Composto 1 e Composto 2 dosea- dos a 20 mg/kg do Composto A equivalente (78 e 74 mg/kg de Com- posto 1 e 2, respectivamente) foram ligeiramente mais eficazes do que o Composto A na formulação HP-β-CD a 10 mg/kg por semana.
[0184] Ainda, a morte celular (apoptose) foi medida usando PARP clivada (Figura 4). O composto A na formulação HP-β-CD (ver Exemplo 2) induziu PARP clivada imediatamente após o tratamento 1 e 3 h, en- quanto o Composto 1 causou morte celular máxima a 20 h após a dose individual.
[0185] Eficácia do Composto 2 em Modelo de Xenoenxerto RS4;11 em ratos Rag2-/-: A Figura 5 mostra que o Composto 2 doseado a 30 mg/kg do Composto A equivalente (117 mg/kg do Composto 2) provoca a regressão do tumor RS4;11. 10 mg/kg do Composto A equivalente (39 mg/kg do Composto 2) dose única do Composto 2 inibiram o cresci- mento do tumor (estase).
[0186] Compostos 1 e 2 melhoram a inibição do crescimento do tu- mor por rituximab em Modelo de Xenoenxerto SuDHL-4 em Camundon- gos SCID: O modelo de xenoenxerto SuDHL-4 foi usado para testar a capacidade dos Compostos 1 e 2 para melhorar a atividade de rituximab na inibição do crescimento tumoral. Quando os tumores cresceram para aproximadamente 175-250 mm3, os camundongos foram distribuídos aleatoriamente para os seguintes grupos: (1) grupo de veículo de controle; (2) grupo de tratamento do Composto 2 (50 mg/kg do Composto A equi- valente, 195 mg/kg do Composto 2, i.v. uma vez por semana durante 5 semanas); (3) grupo de tratamento do Composto 1 (50 mg/kg do Composto A equi- valente, 185 mg/kg do Composto 1, i.v. uma vez por semana durante 5 semanas); (4) grupo de rituximab (10 mg/kg i.p. uma vez por semana durante 5 semanas); (5) Composto 2 (10 mg/kg do Composto A equivalente, 39 mg/kg do Composto 2) mais rituximab; (6) Composto 2 (30 mg/kg do Composto A equivalente, 117 mg/kg do Composto 2) mais rituximab; (7) Composto 2 (50 mg/kg do Composto A equivalente, 195 mg/kg do Composto 2) mais rituximab; (8) Composto 1 (10 mg/kg do Composto A equivalente, 37 mg/kg do Composto 1) mais rituximab; (9) Composto 1 (30 mg/kg do Composto A equivalente, 111 mg/kg do Composto 1) mais rituximab; (10) Composto 1 (50 mg/kg do Composto A equivalente, 185 mg/kg do Composto 1) mais rituximab;
[0187] Os tamanhos dos tumores foram medidos 2 vezes por se- mana e calculados como: Volume do tumor = (AxB2)/2 em que A e B são o comprimento e a largura do tumor (em mm), respectivamente.
[0188] Os resultados são mostrados na Figura 8. Os Compostos 1 e 2 a 50 mg/kg do Composto A equivalente (185 e 195 mg/kg do den- drímero, respectivamente) inibiram significativamente o crescimento do tumor em comparação com o controle de veículo com o Composto 2 sendo ligeiramente mais eficaz como monoterapia do que o Composto 1 a 50 mg/kg do Composto A. A Tabela 5 sumariza os valores de inibi- ção do crescimento tumoral (TIC) e atraso de crescimento tumoral (T- C) calculados como % de Inibição e % de Regressão. O cálculo é base- ado na média geométrica do RTV em cada grupo.
[0189] No dia específico, para cada grupo tratado, calcular o valor de Inibição pela fórmula: % de inibição = (CG-TG) * 100 / (CG-1), em que "CG" significa a média geométrica do rtv do grupo de controle e "TG" significa a Média Geométrica do Volume Relativo do Tumor (rtv) do grupo tratado. "CG" deve usar o grupo de controle correspondente do grupo tratado quando calculado. Se a Inibição > 100%, em seguida, é necessária para calcular a regressão através da fórmula: Regressão = 1 – TG
[0190] O valor TIC é de 63,5% para 50 mg/kg do Composto A equi- valente (195 mg/kg de Composto 2), 40,44% para 50 mg/kg do Com- posto A equivalente (185 mg/kg de Composto 1) e 75,27% para 10 mg/kg de rituximab. Desse modo, o Composto 1 e 2 doseados a 50 mg/kg do Composto A equivalente são significativamente ativos no pre- sente modelo. Mais significativamente, uma combinação dos Compos- tos 1 e 2 a 10, 30 e 50 mg/kg do Composto A equivalente com rituximab (10 mg/kg) resultou na regressão do tumor. Ainda, o tratamento de com- binação resultou em regressão completa do tumor na maioria dos ani- mais, enquanto não foi observado nenhum com os tratamentos com um único medicamento. Tabela 5. Sumário dos dados de eficácia dos Compostos 1 e 2 em combinação com rituximab Eficácia Tratamento % de Inibição (TIC) % de Regressão Valor de P T-C (Dias) Dia(41) Dia (41) Dia(41) 1 Veículo Composto 2 (50 mg/kg do Composto A equiva- 2 63,5 0,0002 lente,195 mg/kg do Composto 2) Composto 1 3 (50 mg/kg do Composto A equiva- 40,44 0,0420 lente,185 mg/kg do Composto 1) 4 rituximab (10 mg/kg) 75,27 0,0010 >16 rituximab (10 mg/kg) mais 5 Composto 2 (10 mg/kg do Com- >100 97 0,0005 >37 posto A equivalente, 39 mg/kg do Composto 2) rituximab (10 mg/kg) mais 6 Composto 2 >100 100 <0,0001 >37 (30 mg/kg do Composto A equiva- lente,117 mg/kg do Composto 2)
rituximab (10 mg/kg) mais Composto 2 7 >100 100 <0,0001 >37 (50 mg/kg de Composto A equiva- lente, 195 mg/kg do Composto 2) rituximab (10 mg/kg) mais 8 Composto 1 (10 mg/kg do Com- >100 69 0,0230 >37 posto A equivalente, 37 mg/kg do Composto 1) rituximab (10 mg/kg) mais Composto 1 9 >100 100 <0,0001 >37 30 mg/kg de Composto A equiva- lente, 111 mg/kg do Composto 1) rituximab (10 mg/kg) mais Composto 1 10 >100 100 <0,0001 >37 (50 mg/kg de Composto A equiva- lente, 185 mg/kg do Composto 1) Exemplo 5: Atividade antitumoral de agente único e combinação in vivo em um modelo de tumor de câncer do pulmão de células pequenas humano
[0191] O Composto 2 e AZD2014 (vistusertib, um inibidor de mTOR apresentado abaixo) induziram o agente único e a atividade antitumoral de combinação em camundongos portadores de tumor NCI-H1048 (Fi- gura 9). Uma administração i.v. (qw) semanal do Composto 2 a 103 mg/kg (equivalente a 30 mg/kg do Composto A) resultou em atividade antitumoral significativa de 76% de TGI (p <0,05). A administração do inibidor de mTOR AZD2014 a 15 mg/kg por dia (qd) resultou em ativi- dade antitumoral significativa de 84% de TGI (p <0,05). A combinação do Composto 1 com AZD2014 resultou em 91% de regressão do tumor (p <0,05 relativamente à atividade de agente único).
[0192] O Composto 1 foi formulado em tampão de citrato/fosfato a pH 5,0 contendo glucose a 4,5% p/v e doseado por via intravenosa (i.v.) em um volume de 5 mL/kg. O AZD2014 foi formulado em hidroxipropil- metilcelulose a 0,5%/Tween 80 a 0,1% e doseado oralmente em um vo- lume de 10 mL/kg.
[0193] Foram injetadas 5 x 106 células tumorais NCI-H1048 subcu- taneamente no flanco direito de camundongos fêmeas C.B-17 SCID em um volume de 0,1 mL contendo 50% de matrigel. O volume tumoral (me- dido com paquímetro) foi calculado usando a fórmula: comprimento (mm) x largura (mm)2 x 0,52. Para estudos de eficácia, camundongos foram distribuídos aleatoriamente com base no volume tumoral e a ini- bição do crescimento foi avaliada por comparação das diferenças do volume tumoral entre grupos de controle e tratados. A dosagem come- çou quando o volume tumoral médio alcançou aproximadamente 124 mm3.
(vistusertib) AZD2014 Exemplo 6: Atividade antitumoral de agente único e combinação in vivo em um modelo de DLBCL humano
[0194] 5 x 106 células tumorais Ly10 foram injetadas subcutanea- mente no flanco direito de camundongos fêmeas C.B-17 SCID em um volume de 0,1 mL contendo 50% de matrigel. O Composto 1 foi formu- lado em tampão de citrato/fosfato a pH 5,0, diluído 1 para 10 com 5% de glucose contendo Kolliphor HS15 a 1% p/v e doseado como uma administração semanal por via intravenosa (i.v.) a um volume de 5 mL/kg a uma dose de 103 mg/kg (30 mg/kg de API). O acalabrutinib foi formulado em hidroxipropilmetilcelulose a 0,5%/Tween 80 a 0,2% e do- seado duas vezes por dia (bid) como uma administração oral (po) a um volume de 10 mL/kg a uma dose de 12,5 mg/kg. Os volumes tumorais (medidos com paquímetro), peso do corpo dos animais e estado tumoral foram registrados duas vezes por semana durante o estudo. O volume tumoral foi calculado usando a fórmula: comprimento (mm) x largura
(mm)2 x 0,52. No caso dos estudos de eficácia, a inibição do cresci- mento desde o início do tratamento foi avaliada por comparação das diferenças do volume tumoral entre grupos de controle e tratados. A do- sagem começou quando o tamanho tumoral médio alcançou aproxima- damente 166 mm3.
[0195] Como apresentado na Figura 10, a combinação do Com- posto 1 com acalabrutinib resultou em atividade antitumoral in vivo sig- nificativa no modelo de xenoenxerto OCI-Ly10 DLBCL. A administração i.v. semanal de 103 mg/kg do Composto 1 (30 mg/kg do Composto A) em combinação com administração oral de 12,5 mg/kg de acalabrutinib duas vezes por dia resultou em regressão completa em 8 de 8 camun- dongos portadores de tumor 10 dias após o início do tratamento. As re- gressões completas foram mantidas mesmo após o final do tratamento (3 semanas de tratamento com 35 dias de acompanhamento). Em con- traste, o agente único do Composto 1 ou acalabrutinib mostrou atividade de agente único relativamente modesta, atingindo aproximadamente 64% e 58% de inibição do crescimento tumoral (TGI), respectivamente.
Acalabrutinib Exemplo 9: Investigações de liofilização
[0196] Os compostos 1 e 2 hidrolisam para liberar a fração ativa na presença de água e, portanto, devem ser dados passos para minimizar a exposição à umidade e a taxa de hidrólise usando solventes alternati- vos, controlando a temperatura e o tempo durante a fabricação do liófilo. Vários solventes não aquosos foram investigados no papel para uso em liofilização incluindo, por exemplo, acetona, ácido acético (glacial), acetonitrila, álcool terc-butílico, etanol,
n-propanol, n-butanol, isopropanol, acetato de etila, carbonato de dime- tila, diclorometano, metiletilcetona, metilisobutilcetona, 1-pentanol, ace- tato de metila, metanol, tetracloreto de carbono, dimetilsulfóxido, hexa- fluoroacetona, clorobutanol, dimetil sulfona, ácido acético, cicloexano e ácido acético glacial.
[0197] Após investigação inicial, o ácido acético glacial e o álcool terc-butílico foram considerados candidatos potencialmente adequados. Esses dois solventes foram avaliados ainda para determinar se ambos os compostos têm solubilidade suficiente para atingir ≥100 mg/mL de concentração de solução por observações visuais. Neste método, apro- ximadamente 20 mg de composto foram adicionados a 200 µL de cada solvente e a amostra foi sonicada para auxiliar na dissolução.
[0198] Ambos os Compostos 1 e 2 se dissolveram rapidamente em ácido acético glacial, mas não se dissolveram em álcool terc-butílico até sonicação prolongada. A sonicação prolongada resultou em au- mento de temperatura, o que também pode ter contribuído para a dis- solução de ambos os compostos em álcool terc-butílico. Uma vez arre- fecidos à temperatura ambiente, a precipitação foi observada em ambas as soluções do Composto 1 e 2 em álcool terc-butílico, indicando que o efeito de aquecimento mais provável devido à sonicação prolongada re- sultou em solução supersaturada que não é estável à temperatura am- biente. Portanto, se conclui que ambos os Compostos 1 e 2 tinham so- lubilidade aceitável em ácido acético glacial enquanto, com base nas previsões de dose atuais, a solubilidade era insuficiente em álcool terc- butílico para o processo de liofilização.
[0199] Vários solventes também foram avaliados em combinação com ácido acético glacial para uso no processo de liofilização, incluindo acetona, anisol, 1-butanol, 2-butanol, acetato de butila, éter metílico de terc-butila, DMSO, etanol, acetato de etila, éter etílico, formato de etila,
ácido fórmico heptano, acetato de isobutila, acetato de isopropila, ace- tato de metila, 3-metil-1-butanol, metiletilcetona, metilisobutilcetona, 2- metil-1-propanol, pentano, 1-pentanol, 1-propanol, 2-propanol, acetato de propila. Nenhum desses solventes foi considerado adequado para liofilização em combinação com ácido acético glacial. Portanto, apenas o ácido acético glacial foi levado adiante para desenvolver o processo de liofilização de ambos os compostos.
[0200] Para a avaliação do processo de liofilização, os Compostos 1 e 2 foram dissolvidos separadamente em ácido acético glacial a uma concentração de aproximadamente 100 mg/mL e colocados em frascos de vidro tipo I de liofilização de 10 mL com rolhas de liofilização e con- gelados a -40°C. Estas amostras foram liofilizadas usando uma tempe- ratura de prateleira de cerca de -40°C a -35°C e uma pressão de vácuo de aproximadamente 100mTorr. A secagem secundária foi realizada aquecendo a 20°C durante 6 horas e mantendo esta temperatura du- rante 1 hora em torno de 100mTorr. Os liófilos resultantes tinham uma boa aparência por inspeção visual e foram posteriormente testados quanto à estabilidade física e química.
[0201] Além da estabilidade química do liófilo durante o processo de liofilização, a estabilidade química das soluções do Composto 1 e 2 em ácido acético glacial também foi testada em condições ambientais e congeladas usando HPLC de fase reversa com detecção de UV para determinar a concentração do Composto A nas formulações, de acordo com os seguintes parâmetros, mostrados para análise do Composto 1: Fase Móvel A ácido trifluoroacético a 0,07% em água Fase Móvel B ácido trifluoroacético a 0,07% em acetonitrila Coluna Waters X Bridge Phenyl, 2,5 μm 30 x 3,0 mm Temperatura da coluna 60°C Taxa de fluxo 1,0 mL/min Tempo % Fase móvel A % Fase Móvel B 0 min 60 40 6,0 20 80 Gradiente 6,5 20 80 6,7 60 40 8,0 60 40 Volume de injeção 4 μL
Tempo de operação 8,0 min Modo/comprimento de onda do de- UV a 332 nm tector Rt Composto A Aproximadamente 2,5 min Rt Composto 1 Aproximadamente 5,0 min
[0202] O Composto A foi usado para quantificar a quantidade livre do Composto A nas formulações liofilizadas do Composto 1. Para pre- parar a solução padrão contendo o Composto A a 30 μg/mL, aproxima- damente 15 mg do Composto A foram pesados com precisão em um frasco volumétrico de 50 mL com diluição para o volume com dimetila- cetamida. Uma quantidade de 5 mL da solução de calibração resultante foi adicionada a um balão volumétrico de 50 mL e diluída até o volume com dimetilacetamida. Para preparar as amostras dos Compostos 2, aproximadamente 20 mg do Composto 1 foram pesados com precisão como um pó seco em um frasco volumétrico de 20 mL, seguido por di- luição do volume com dimetilacetamida. Cálculo da % de Composto A Livre:
[0203] Os resultados foram comparados com o Composto A (% p/p) nos Compostos 1 e 2, como mostrado na Tabela 6. Tabela 6: Porcentagem de Composto A Livre por HPLC ID da Amostra Composto Composto A Livre (%) Substância Farmacológica 1 0,19 2 0,07 1 1,243 Amostras liofilizadas 2 0,261 Solução de amostra em ácido acético 1 1,166 glacial congelada 2 0,196 Solução de amostra em ácido acético 1 4,621 glacial em condições ambiente
2 0,635
[0204] A Tabela 6 ilustra que nas amostras do Composto 1 houve degradação significativa durante o processo de liofilização, à medida que a % de Composto A livre aumentou para ~ 1,2%. Esse aumento foi equivalente ao da solução congelada, o que indica que a degradação ocorreu principalmente no processo de preparação da solução. A de- gradação na solução do Composto 1 em ácido acético glacial armaze- nado em condições ambiente foi muito maior do que em condições de congelamento. No entanto, não houve degradação significativa nas so- luções liófilas e congeladas do Composto 2, enquanto a solução do Composto 2 em ácido acético glacial armazenado em condições ambi- entais também exibiu degradação significativa.
[0205] Portanto, se conclui que ambas as soluções dos Compostos 1 e 2 em ácido acético glacial eram estáveis durante o processo de lio- filização e armazenamento em condições de congelamento (-20 °C).
[0206] Um segundo procedimento de liofilização em pequena es- cala foi realizado nos Compostos 1 e 2. As soluções dos Compostos 1 e 2 foram preparadas dissolvendo 134,8 mg do Composto 1 em 1,348 mL de ácido acético e 143,2 mg do Composto 2 em 1,432 mL de ácido acético. Foram retirados 200 μL de cada solução para estudos de esta- bilidade da solução em condições ambiente e para estudos de estabili- dade da solução congelada. O restante das soluções foi liofilizado de acordo com o procedimento abaixo em frascos transparentes de 10 mL:
1. Arrefecer até -40°C ao longo de 2 horas
2. Manter a -40°C durante 30 min
3. Vácuo a 300 mTorr a -40°C durante 1440 min (1 dia)
4. Aumentar a rampa para -35°C ao longo de 1 dia
5. Aquecer a 20°C ao longo de um dia, reduzindo a pressão para 100 mTorr
6. Manter a 20°C a 100 mTorr durante 2 horas.
7. Retornar à temperatura ambiente usando sangramento de Nz e fechar os frascos dentro do liofilizador.
8. Descarregar e selar, armazenar no congelador.
[0207] Se conclui que ambas as soluções dos Compostos 1 e 2 em ácido acético glacial eram estáveis durante o processo de liofilização e armazenamento em condições de congelamento (-20°C). Objetivo
[0208] Apenas o Composto 1 foi levado adiante para adicional de- senvolvimento do produto. O escopo dos estudos incluiu a formulação de uma solução a granel compreendendo o Composto 1, o controle de parâmetros de processos críticos, compatibilidade de material e liofiliza- ção. Foram fabricados três lotes de laboratório em escala real de apro- ximadamente 160 frascos/1,77 kg por lote. O Composto 1 foi formulado como uma solução de 50 mg/mL em ácido acético glacial e preenchido com um volume alvo nominal de 10,0 mL em um frasco de vidro trans- parente Tipo I de 50 mL para liofilização para fabricar o fármaco con- tendo 500 mg do Composto 1 em um Frasco de 50 mL, sem outros ex- cipientes. Materiais
[0209] A Tabela 7 lista os materiais usados nos estudos. Todos os materiais estavam dentro das datas de validade designadas. Tabela 7: Lista de Materiais Materiais Dimensões Vendedores Composto 1 5 frascos (80 g cada) N/A 1 frasco (50 g) Ácido acético anidro Frascos 1 L Rathburn Tubo de silicone curado com platina 0,125" ID Saint-Gobain Performance Plastics Tubo de silicone curado com platina 0,25" ID Saint-Gobain Performance Plastics Vedante de silicone curado com platina ¾" ID Precision Polymer Products Nitrogênio ultrapuro UN1066 Ar-gás Bocal Enchedor 316L SS 1/8" ID Cole-Parmer (Overlook Industries) Millipak 20 PVDF tamanho do poro 0,22 μm Millipore Saco provisório 1 L TK8, BPV 2D A-Flex 20", ¼" x ¼" x 1/8" Luer ATMI/Pall Life Sciences Equipamento
[0210] Os equipamentos listados na Tabela 8 foram usados nos es-
tudos, desde o desenvolvimento até os lotes técnicos de escala com- pleta. Pesagem, mistura e elaboração foram conduzidas em um isolador purgado com nitrogênio para reduzir a umidade na atmosfera e inibir a hidrólise do Composto A a partir do Composto 1. O recipiente do com- posto foi controlado a 18°C ± 1 °C para minimizar a hidrólise do Com- posto A a partir do Composto 1 em ácido acético durante a elaboração. Esta temperatura não pode ser ajustada para um valor muito baixo de- vido ao risco de o ácido acético congelar. A filtragem e o enchimento foram realizados na bancada do laboratório à temperatura ambiente. Tabela 8: Lista de Equipamento Equipamento Recipiente encamisado de vidro 2 L & 3 L (Chemglass) Barras de Agitação revestidas de Teflon, 2" $ 3" ID Agitador magnético VWR com visor digital Unidade de arrefecimento VWR Termômetro Fisher Isolador de Amostragem Balança de Carga Superior Balança analítica Watson Marlow, Bomba de Filtro Peristáltica Watson Marlow, Flexicon, Bomba de Enchimento Peristáltica Lyo Star III, Liofilizador de Desenvolvimento Fechos de Recipiente
[0211] Os frascos foram lavados à mão, enxaguados com água des- tilada e secos em estufa a 130°C durante 6 horas. Estes foram equili- brados à temperatura ambiente antes de serem submetidos ao enchi- mento. Rolhas e selos foram usados como estão, sem tratamento adici- onal (Tabela 9). Tabela 9: Fechos de Recipientes Primários Componentes Frasco de 50 mL, coroa de 20 mm, não estéril, vidro transparente, frasco de tipo I, Schott, p/n 1097603 Rolha de 20 mm Flurotec lyo, West, pronta para esterilização, p/n 19700033 ou 19700041 Selo Superior do tipo Flip-Off Mate de 20 mm, West, Branco, p/n 54202047 Processo de Fabricação do Lote Final
[0212] A formulação que compreende o Composto 1 foi composta na concentração de 50 mg/mL em ácido acético glacial de acordo com a fórmula principal na Tabela 10. Cálculo
[0213] O peso final do Composto 1 foi corrigido para pureza (98,9%) a partir do certificado de análise (CoA). O peso corrigido é calculado da seguinte forma: (a) Calcule o peso do Composto 1 necessário para o lote de acordo com a fórmula principal na Tabela 10. (b) Para uma solução de 100 mL, peso Composto 1 = 100 mL (4,75/100) = 4,75 g (c) Correção da pureza, peso do Composto 1 = 4,75 ÷ (98,9/100) = 4,8028 g. Tabela 10: Distribuição da Fórmula Principal Ingrediente Concentração (mg/mL) %p/p1 Composto 1 50 mg/mL 4,75 2 Ácido acético glacial Qs para 1 mL Qs para 100% 1 Densidade da formulação = 1,0531 g/mL @ 25°C. 2 Densidade = 1,05 g/mL Configuração do equipamento (a) Todo o equipamento (balança, recipiente, misturador) foi co- locado dentro do isolador. Um tubo de silicone do tanque de nitrogênio foi conectado à entrada do isolador. A válvula de nitrogênio foi ligada e ajustado o regulador para manter o fluxo de nitrogênio em aproximada- mente 200 SCFH (pés cúbicos padrão por hora). (b) O isolador foi purgado com gás nitrogênio puro durante não menos de 10 minutos e, de preferência, por pelo menos 30 minutos e um fluxo constante de nitrogênio foi mantido durante a composição. (c) O recipiente de elaboração com camisa de vidro e o mistu- rador foram instalados e conectados à unidade de arrefecimento ao re- cipiente. (c) A temperatura do refrigerador foi ajustada para 18 °C e o en- chimento atingiu 18°C antes de prosseguir.
Elaboração (a) Uma quantidade de 90% do peso do lote de ácido acético glacial anidro foi dispensada no recipiente de vidro. (b) Foi iniciada uma mistura lenta entre 200 a 300 rpm. (c) A solução de ácido acético foi arrefecida à temperatura de 18 °C e a solução foi mantida a essa temperatura durante um mínimo de 5 minutos. (d) A quantidade pré-pesada corrigida do Composto 1 foi dis- pensada no recipiente com mistura contínua.
Este ponto foi definido como o tempo zero e o tempo alvo total para um lote desde a adição do Composto 1 ao ácido acético até a colocação das bandejas no liofiliza- dor foi de até 7 horas no máximo, para minimizar a geração do Com- posto A livre. (e) A velocidade de mistura foi aumentada como necessário para alcançar a dissolução completa do Composto 1. (f) Foi adicionado ácido acético glacial ao peso do lote e a solu- ção foi misturada durante mais 10 min. (g) Nesta fase, a amostra zero (2 x 10 mL) foi retirada para ana- lisar a aparência, densidade, osmolalidade, ensaio e teste de impure- zas.
A amostra foi diluída para concentração de 1 mg/mL em dimetila- cetamida (DMA) de acordo com o método de HPLC descrito acima.
To- das as amostras foram tapadas e armazenadas a -20 °C.
Filtração (a) A solução foi filtrada imediatamente após a preparação. (b) O tubo de silicone de 0,25 "ID foi conectado do recipiente a 2 filtros Millipak 20 conectados em tandem.
O tubo de silicone foi encaminhado através da cabeça da bomba peristáltica e conectou a saída do tubo a um saco de provisório (TK8) ou garrafa de pirex de vidro. (c) A solução compreendendo o Composto 1 foi lentamente fil- trada por bomba para o recipiente receptor descartando o volume inicial de 10 a 20 mL. (d) uma amostra após filtração foi retirada para ensaio e testes de impureza. A amostra foi diluída para concentração de 1 mg/mL em dimetilacetamida (DMA) de acordo com o método de HPLC descrito acima. A amostra foi tapada e armazenada a -20°C. Preenchimento do Produto (a) A precisão do enchimento do produto foi determinada à tem- peratura ambiente usando a bomba peristáltica. (b) A densidade da solução foi medida à temperatura ambiente e definiu o peso de enchimento com base em 10 mL nominais/frasco. (c) Os frascos foram enchidos com o peso de enchimento alvo. Cada frasco foi parcialmente tapado e imediatamente carregado no lio- filizador assim que a bandeja estiver cheia. (d) Dois frascos de amostra de 10 mL foram retirados no final do enchimento para ensaio e impurezas. A amostra foi extinta imediata- mente com DMA (1 mg/mL) e armazenada a -20°C. Liofilização
[0214] O processo final de liofilização na Tabela 11 foi aplicado a três lotes técnicos. Os frascos de produto foram carregados a 5 °C de temperatura de prateleira. O congelamento foi conduzido a uma taxa de rampa mais lenta de 0,2°C/min. O ácido acético congelado foi sublimado usando uma rampa de -30°C a -20°C ao longo de 30 horas, em seguida, estático a -20°C durante 55 horas durante a secagem primária a 100 mTorr de pressão de vácuo. Qualquer solvente restante foi removido por dessorção a 25°C e pressão reduzida de 20 mTorr durante 12 horas de secagem secundária. Todos os frascos foram novamente preenchi- dos com nitrogênio antes de serem fechados a uma pressão de vácuo de 700 Torr e armazenados na temperatura de armazenamento reco- mendada de -20°C. A pressão de novo enchimento (700 Torr) foi man- tida próxima do nível atmosférico (760 Torr) para manter uma ligeira pressão de vácuo dentro do frasco a fim de garantir a integridade do fechamento do recipiente do frasco tapado. A configuração da pressão de vácuo (20 mTorr) antes do novo enchimento na Tabela 11 se refere à pressão de vácuo em execução antes do início do processo de novo enchimento, que corresponde à pressão de vácuo de secagem secun- dária de 20 mTorr. Tabela 11: Processo de Liofilização Ponto de Ajuste Fase de Carga do Produto 5°C da Prateleira Fase de Tratamento Térmico Modo Controle Temperatura S.P. Tempo de Absorção Passo Tempo de Rampa (Min) do Passo (°C) (Min) 1 Normal -30 175 90 2 Normal -5 50 240 3 Normal -30 125 90 Condensador Condensador -50 N/A N/A a Frio SP Evacuar Evacuar SP a 100 mT Fase Seca Primária Tempo de Modo Controle Temperatura S.P. Rampa Vác. Cont. SP Passo Absorção do Passo (°C) Tempo (Min) (mT) (Min) 1 Normal -30 0 60 100 2 Normal -20 1800 3320 100 Teste de Aumento Pressão N/A Não Fase Seca Secundária Passo Modo Controle Temperatura S.P. Rampa Tempo de Vác. Cont. SP do Passo (°C) Tempo Absorção (mT) (Min) (Min) 1 Normal 25 520 720 20 Teste de Aumento Pressão N/A Não Fase de Interrupção Ponto de Ajuste da Prateleira -20 °C Vácua Antes Novo Enchimento 20 mT Novo Enchimento antes da Interrupção Sim Modo de Interrupção Manual
[0215] O produto liofilizado final foi analisado para a aparência, en- saio, impurezas, teor de água, solvente residual (ácido acético), recons- tituição (tempo, aparência, pH, contagem de partículas e tamanho de partícula).
Resultados: Lote Técnico 1
[0216] O tamanho total do lote, incluindo ácido acético e Composto 1, foi de 1,770 kg. Uma retenção de cinco horas a 18°C foi conduzida antes da solução ser filtrada, preenchida e carregada no liofilizador para imitar o tempo de processamento esperado do tamanho do lote GMP (~ 23 kg). O tempo total do processo desde o início da adição do Composto 1 ao ácido acético foi de seis horas e 38 minutos. O Composto 1 se dissolveu completamente em 12 minutos. A aparência do bolo liofilizado era lisa, compacta e esbranquiçada. As Tabelas 12-17 fornecem a ca- racterização do Lote Técnico 1.
[0217] O Lote Técnico 1 foi reconstituído em um tampão de citrato a 50 mM (pH 5) em 5% (p/p) de dextrose (3,68 mg/mL de mono-hidrato de ácido cítrico, 9,56 mg/ mL de diidrato de citrato de sódio e 50 mg/mL de dextrose anidra). Um diluente ou solvente alternativo é um tampão de acetato a 100 mM (pH 5) em 2,5% (p/p) de dextrose (1,76 mg/mL de ácido acético, 5,78 de acetato de sódio anidro, 25 mg/mL de dextrose anidra). Tabela 12: Dados de Reconstituição do Lote Técnico 1 Frasco Tempo para completar a dis- Aparência Volume (mL) pH No. solução (min) Solução límpida, cor amarela 1 20 5,41 5,04 fraca, livre de partículas visíveis Solução límpida, cor amarela 2 20 5,23 5,04 fraca, livre de partículas visíveis Tabela 13: Impurezas do Lote Técnico 1 (% de área) Ensaio %Imp. %Imp %Imp %Imp %Livre Comp A % Total %Imp. %Imp. Amostra (Comp A ) RRT- RRT- RRT- Comp A (%marca- Imp. RRT-0,17 RRT-0,42 RRT-0,532 0,58 0,82 0,89 dor) T = 30 ND 99,21 0,31 0,31 (pré-filtro) Após filtro 0,24 99,86 0,59 0,10 0,21 0,28 Fim do preenchi- mento 0,22 99,67 0,53 0,06 0,19 0,82 (6 h, 14 min)
Lio 0,28 106,29 0,62 0,09 0,25 0,28 Frasco-1 Lio 0,28 99,59 0,65 0,11 0,25 0,29 Frasco-2 Tabela 14: Umidade Residual no Lote Técnico 1 Amostra Peso do bolo (g) % de água (p/p) (KF) % Média de Água (p/p) 1 0,5230 0,0040 0,0031 2 0,5011 0,0021 Tabela 15: Solvente Residual no Lote Técnico 1 Amostra % de Ácido Acético (p/p) (HPLC) % Média de Ácido Acético (p/p) Fim da secagem primária-frasco 1 7,81 8,17 Fim da secagem primária-frasco 2 8,52 Secagem secundária-frasco 1 0,05 0,05 Secagem secundária-frasco 2 0,04 Lio-Frasco 1 0,01 0,01 Lio-Frasco 2 0,01 Tabela 16: Contagens de Partículas do Lote Técnico 1 (USP <788>)1 Especificação USP Partículas Médias cumulati- Número de partí- Número de partícu- (partículas/recipiente) vas em 5 mL (n = 3) culas/mL las/frasco 6000 partículas ≥ 10 μm 156,33 31,3 322 600 partículas ≥ 25 μm 0,67 0,1 1 1 2 frascos agrupados, 40 mL no total Tabela 17: Tamanho de Partícula do Lote Técnico 1 (Malvern Zeta- Sizer Nano-ZS90) a 25°C Amostra Z-Média PDI d.nm 18,87 0,281 Bandeja Superior 18,77 0,279 18,57 0,280 18,20 0,234 Bandeja Inferior 17,85 0,228 18,57 0,280 Lote Técnico 2
[0218] Um lote de 1,681 L (1,77 kg) do Composto 1 e ácido acético foi composto, filtrado, preenchido e liofilizado usando o mesmo processo e tempos como descrito acima para o Lote Técnico 1. O tempo total do processo desde a dispensa do Composto 1 até o início da liofilização foi de seis horas e 53 minutos. O tempo para completar a dissolução do Composto 1 foi de 15 minutos. O preenchimento alvo para o lote foi de 10,3 mL/frasco (10,85 g/frasco, densidade 1,0531). A aparência do bolo liofilizado era suave, compacta, esbranquiçada e consistente com a apa- rência do Lote Técnico 1 e especificações. A Tabela 18 sumariza as impurezas encontradas no Lote Técnico 2. Tabela 18: Impurezas do Lote Técnico 2 (% de área) Ensaio Comp Ensaio %Livre Imp. Total % Imp. % Imp. RRT- %Imp RRT- Amostra 1 Comp 1 Comp A (%) RRT-0,42 054 0,83 (mg/mL) (% marcador) T = 30 49,5 99,1 ND 0,26 0,26 (Pré-filtro) Após Filtro 50,2 100,5 0,09 0,39 0,05 0,09 0,25 Fim do Preen- 50,5 101,4 0,12 0,42 0,06 0,11 0,25 chimento Lote Técnico 3
[0219] Um tamanho de lote de 1,681 L (1,77 kg) do Composto 1 e ácido acético foi composto, filtrado, preenchido e liofilizado usando o mesmo processo e tempo como descrito acima para o Lote Técnico 1 e
2. O tempo total do processo desde dispensa do Composto 1 até o início da liofilização foi de 6 horas e 47 minutos. O tempo para completar a dissolução do Composto 1 foi de 15 minutos. O preenchimento alvo para o lote foi de 10,3 mL/frasco (10,85 g/frasco, densidade 1,0531 g/mL). Os resultados foram próximos de 100% para o ensaio de todas as amos- tras com impurezas totais abaixo de 0,5%. A aparência do bolo liofili- zado para o Lote Técnico 3 era suave, compacta e esbranquiçada, con- sistente com a aparência dos Lotes Técnicos 1 e 2. A Tabela 19 suma- riza as impurezas do Lote Técnico 3. Tabela 19: Impurezas do Lote Técnico 3 (% de área) Ensaio Ensaio Ensaio %Livre Imp. Total % Imp. % Imp. %Imp RRT- Amostra Comp 1 Comp 1 Comp A Comp A (%) RRT-0,42 RRT-054 0,83 (mg/mL) (% marcador) (mg/mL) T = 30 49,9 99,8 ND ND 0,27 0,27 (Pré-filtro) Após Filtro 49,9 99,8 0,02 0,15 0,46 0,07 0,13 0,26 Fim do Pre- 50,0 100,1 0,02 0,15 0,47 0,08 0,13 0,26 enchimento

Claims (1)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (I) (I) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, caracterizada pelo fato de que: o Núcleo é * indica ligação covalente a uma porção carbonila de (BU1); b é 2; BU são unidades de construção; BUx são unidades de construção de geração x, em que o número total de unidades de construção na geração x do dendrímero de fórmula (I) é igual a 2(x) e o número total de BU no dendrímero de fórmula (I) é igual a (2x-1)b; em que BU tem a seguinte estrutura: # indica ligação covalente a uma porção amina do Núcleo ou uma porção amina de BU; + indica uma ligação covalente a uma porção carbonila de BU ou uma ligação covalente a W ou Z; W é independentemente (PM)c ou (H)e; Z é independentemente (L-AA)d ou (H)e; PM é PEG1800-2400;
    L-AA é um ligante covalentemente ligado a um agente ativo; em que L- AA é da fórmula: em que A é –N(CH3) ou -S-; é o ponto de ligação a uma porção amina de BUx; desde que (c+d) ≤ (2x)b e d seja ≥ 1; e desde que se (c+d) < (2x)b, então quaisquer grupos W e Z rema- nescentes são (H)e, em que e é [(2x)b ]-(c+d).
    2. Composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (II) (II), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, caracterizada pelo fato de que b é 2; o Núcleo é
    * indica ligação covalente a uma porção carbonila de (BU1); BU são unidades de construção e o número de BU é igual a 62; em que BU tem a seguinte estrutura: # indica ligação covalente a uma porção amina do Núcleo ou uma porção amina de BU, e + indica uma ligação covalente a uma por- ção carbonila de BU ou uma ligação covalente a W ou Z; W é independentemente (PM)c ou (H)e; Z é independentemente (L-AA)d ou (H)e; PM é PEG1800-2400; L-AA é um ligante covalentemente ligado a um agente ativo; em que L- AA é da fórmula: em que A é –N(CH3) ou -S-; indica ligação covalente a uma porção amina de BU5; desde que (c+d) seja ≤ 64 e d seja ≥ 1; e desde que se (c+d) < 64, então quaisquer grupos W e Z remanescentes são (H)e, em que e é 64-(c+d).
    3. Composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (III): D-Núcleo-D (III) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, caracterizado pelo fato de que o Núcleo é Dé AP é um ponto de ligação a outra unidade de construção; W é independentemente (PM)c ou (H)e; Z é independentemente (L-AA)d ou (H)e; PM é PEG1800-2400; L-AA é um ligante covalentemente ligado a um agente ativo; em que L- AA é da fórmula: em que A é –N(CH3), -O-, -S- ou –CH2-; desde que se (c+d) < 64, então quaisquer grupos W e Z remanescentes são (H)e, em que e é 64-(c+d); e d é ≥ 1.
    4. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que A é –O-.
    5. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que A é –S-.
    6. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que o PEG tem um peso molecular médio entre cerca de 2000 e cerca de 2200 Da.
    7. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 6, caracterizada pelo fato de que o PEG tem um peso molecular médio de cerca de 2150 Da.
    8. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que c é um número inteiro entre 25 e cerca de 32.
    9. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que c é um número inteiro entre 29 e 32.
    10. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 9, caracterizada pelo fato de que c é 29 ou 30.
    11. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que d é um número inteiro entre 25 e 32.
    12. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 11, caracterizada pelo fato de que d é um número inteiro entre 29 e
    32.
    13. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 12, caracterizada pelo fato de que d é 32.
    14. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizada pelo fato de que (c+d) é igual a um número inteiro entre 50 e 64.
    15. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 14, caracterizada pelo fato de que (c+d) é igual a um número inteiro entre 58 e 64.
    16. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada pelo fato de que e é um número inteiro entre 0 e 14.
    17. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 16, caracterizada pelo fato de que e é um número inteiro entre 0 e
    6.
    18. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizada pelo fato de que L-AA é .
    19. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 18, caracterizada pelo fato de que BU é # .
    20. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizada pelo fato de que o Núcleo é * * .
    21. Composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (IV):
    (IV), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, caracterizada pelo fato de que Y é PEG1800-2400 ou H; Q é H ou L-AA, em que L-AA tem a estru- tura: , A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de PEG1800-2400 e de L-AA seja menor que 64, as restantes porções Q e Y são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA.
    22. Composição farmacêutica que compreende um dendrí- mero liofilizado de fórmula (V):
    (V) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, caracterizada pelo fato de que Y é PEG1800-2400 ou H; Q é H ou L-AA, em que L-AA tem a estrutura: , A é –S- ou –N(CH3), desde que se a soma de PEG1800-2400 e de L-AA seja menor que 64, as restantes porções Q e Y são H, e desde que pelo menos um Q seja L-AA.
    23. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 22, caracterizada pelo fato de que A é –S-.
    24. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 22, caracterizada pelo fato de que A é –N(CH3).
    25. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 24, caracterizada pelo fato de que a soma de
    PEG1800-2400 e L-AA é um número inteiro entre 50 e 64.
    26. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 25, caracterizada pelo fato de que a soma de PEG1800-2400 e L-AA é um número inteiro entre 58 e 64.
    27. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 26, caracterizada pelo fato de que o dendrímero tem entre 25 e 32 PEG1800-2400.
    28. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 27, caracterizada pelo fato de que o dendrímero tem entre 29 e 32 PEG1800-2400.
    29. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 28, caracterizada pelo fato de que o dendrímero tem entre 25 e 32 L-AA.
    30. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 29, caracterizada pelo fato de que o dendrímero tem entre 29 e 32 L-AA.
    31. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 30, caracterizada pelo fato de que o dendrímero tem entre 0 e 14 hidrogênios nas posições Q e/ou Y.
    32. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 31, caracterizada pelo fato de que o dendrímero tem entre 0 e 6 hidrogênios nas posições Q e/ou Y.
    33. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 21 a 32, caracterizada pelo fato de que o PEG tem um peso molecular médio entre cerca de 2000 e 2200 Da.
    34. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 33, caracterizada pelo fato de que o PEG tem um PDI de entre cerca de 1,00 e 1,10.
    35. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 34, caracterizada pelo fato de que o PEG tem um PDI de cerca de
    1,05.
    36. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 35, caracterizada pelo fato de que o dendrímero tem um peso molecular entre cerca de 90 e 120 kDa.
    37. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 36, caracterizada pelo fato de que o dendrímero tem um peso mo- lecular entre cerca de 103 e 107 kDa.
    38. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 37, caracterizada pelo fato de que AA é o Com- posto A: (Composto A).
    39. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 37, caracterizada pelo fato de que o pH da com- posição farmacêutica está entre cerca de 4,0 e cerca de 6,0.
    40. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 39, caracterizada pelo fato de que o pH da composição farmacêu- tica está entre cerca de 4,8 a cerca de 5,6.
    41. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 40, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica compreende entre cerca de 90-110% do dendrímero de fórmula (I), (II), (III), (IV) ou (V), quando testado contra um padrão de referência de pureza conhecida.
    42. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 41, caracterizada pelo fato de que a pureza da composição farmacêutica não é inferior a 85% como medido por SEC- UV.
    43. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 42, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica compreende menos do que cerca de 3% p/p de impurezas totais.
    44. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 43, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica com- preende ≤1,0% p/p de Composto A livre.
    45. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 43, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica com- preende ≤0,5% p/p de qualquer impureza única não especificada.
    46. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 43, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica com- preende ≤1,2% p/p de impurezas livres totais.
    47. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 46, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica compreende não mais do que 1,5% p/p de ácido acético.
    48. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 47, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica tem um tamanho médio de partícula determinado por DLS entre cerca de 15 e cerca de 25 d.nm.
    49. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 48, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica tem um PDI como determinado por DLS entre cerca de 0,20 e cerca de 0,30.
    50. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 49, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica compreende não mais do que cerca de 6000 partículas maiores ou iguais a cerca de 10 μm por recipiente de 50 mL após a reconstituição em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável.
    51. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 49, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica compreende não mais do que cerca de 600 partículas mai- ores ou iguais a cerca de 25 μm por recipiente de 50 mL após a recons- tituição em um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitável.
    52. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 51, caracterizada pelo fato de que a osmolalidade da composição farmacêutica está entre cerca de 200 e cerca de 400 mOsmol/kg após a reconstituição em um diluente ou solvente farmaceu- ticamente aceitável.
    53. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 52, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica compreende não mais do que cerca de 0,06 EU/mg.
    54. Composição farmacêutica que compreende um com- posto liofilizado de fórmula (I), (II), (III), (IV) ou (V) preparado pelo pro- cesso caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de disso- lução do composto de fórmula (I), (II), (III), (IV) ou (V) em ácido acético glacial para formar uma solução, liofilização da solução e sublimação do ácido acético a pressão reduzida.
    55. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 54, caracterizada pelo fato de que a composição farmacêutica compreende não mais do que 5% de ácido acético.
    56. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindica- ção 55, caracterizada pelo fato de que o ácido acético compreende me- nos do que cerca de 200 ppm de água.
    57. Método de tratamento de câncer, caracterizado pelo fato de que compreende a administração intravenosa a um sujeito em ne- cessidade do mesmo da composição farmacêutica, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 56, ou um seu sal farmaceutica- mente aceitável, e um diluente ou solvente farmaceuticamente aceitá- vel.
    58. Uso de uma composição farmacêutica, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 56, caracterizado pelo fato de que é no tratamento de câncer.
    59. Uso de uma composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 56, caracterizado pelo fato de que é para uso na fabricação de um medicamento para o tratamento de cân- cer.
    60. Kit de partes caracterizado pelo fato de que compreende um ou mais recipientes que compreendem uma composição farmacêu- tica liofilizada como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 56, e instruções de uso.
    61. Kit, de acordo com a reivindicação 60, caracterizado pelo fato de que o kit compreende ainda um ou mais recipientes de um dilu- ente ou solvente farmaceuticamente aceitável.
    62. Kit, de acordo com a reivindicação 59, caracterizado pelo fato de que o diluente ou solvente compreende uma solução tampão de citrato.
    63. Kit, de acordo com a reivindicação 59, caracterizado pelo fato de que o diluente ou solvente compreende uma solução tampão de acetato.
BR112021002586-3A 2018-08-17 2019-08-15 formulações de dendrímero BR112021002586A2 (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862719319P 2018-08-17 2018-08-17
US62/719,319 2018-08-17
PCT/IB2019/056924 WO2020035815A1 (en) 2018-08-17 2019-08-15 Dendrimer formulations

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BR112021002586A2 true BR112021002586A2 (pt) 2021-05-04

Family

ID=68084891

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112021002586-3A BR112021002586A2 (pt) 2018-08-17 2019-08-15 formulações de dendrímero

Country Status (22)

Country Link
US (1) US20220273677A1 (pt)
EP (1) EP3837017A1 (pt)
JP (1) JP2021534172A (pt)
KR (1) KR20210046704A (pt)
CN (1) CN112543664A (pt)
AR (1) AR115983A1 (pt)
AU (1) AU2019322205C1 (pt)
BR (1) BR112021002586A2 (pt)
CA (1) CA3108648A1 (pt)
CL (1) CL2021000389A1 (pt)
CO (1) CO2021002980A2 (pt)
CR (1) CR20210086A (pt)
DO (1) DOP2021000028A (pt)
EA (1) EA202190458A1 (pt)
IL (1) IL280829B1 (pt)
MX (1) MX2021001831A (pt)
PE (1) PE20210861A1 (pt)
PH (1) PH12021550323A1 (pt)
SG (1) SG11202101394YA (pt)
TW (1) TW202021575A (pt)
UY (1) UY38337A (pt)
WO (1) WO2020035815A1 (pt)

Families Citing this family (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JOP20190191A1 (ar) * 2017-02-22 2019-08-08 Astrazeneca Ab وحدات شجرية علاجية

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2636599C (en) * 2006-01-20 2014-07-15 Starpharma Pty Limited Modified macromolecule
TWI535712B (zh) * 2010-08-06 2016-06-01 阿斯特捷利康公司 化合物
SI2729179T1 (sl) * 2011-06-06 2021-01-29 Starpharma Pty Ltd Makromolekule
US20160220689A1 (en) * 2013-09-10 2016-08-04 Starpharma Pty Ltd. Macromolecules of dendrimer-platinum conjugates
JOP20190191A1 (ar) * 2017-02-22 2019-08-08 Astrazeneca Ab وحدات شجرية علاجية
TWI831817B (zh) * 2018-08-17 2024-02-11 瑞典商阿斯特捷利康公司 治療癌症之方法

Also Published As

Publication number Publication date
CO2021002980A2 (es) 2021-03-19
CA3108648A1 (en) 2020-02-20
IL280829A (en) 2021-04-29
EP3837017A1 (en) 2021-06-23
JP2021534172A (ja) 2021-12-09
PE20210861A1 (es) 2021-05-18
WO2020035815A1 (en) 2020-02-20
US20220273677A1 (en) 2022-09-01
IL280829B1 (en) 2024-02-01
CN112543664A (zh) 2021-03-23
MX2021001831A (es) 2021-04-28
AR115983A1 (es) 2021-03-17
CL2021000389A1 (es) 2022-02-25
AU2019322205B2 (en) 2023-03-16
AU2019322205A1 (en) 2021-04-08
AU2019322205C1 (en) 2023-09-07
SG11202101394YA (en) 2021-03-30
DOP2021000028A (es) 2021-03-15
TW202021575A (zh) 2020-06-16
CR20210086A (es) 2021-03-19
EA202190458A1 (ru) 2021-09-28
KR20210046704A (ko) 2021-04-28
UY38337A (es) 2020-02-28
PH12021550323A1 (en) 2021-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2811367T3 (es) Análogos de éteres fosfolipídicos como vehículos de fármacos que seleccionan como objetivo el cáncer
ES2477873T3 (es) Disolución acuosa de composición farmacéutica de 20(R)-ginsenósido Rg3 y procedimiento de la misma
ES2525257T3 (es) Composiciones de ciclopolisacárido y de bendamustina
JP6257734B2 (ja) デシタビン誘導体製剤
JP7074761B2 (ja) 治療用デンドリマー
BR112021002147A2 (pt) conjugados para uso em métodos de tratamento de câncer
WO2021164538A1 (zh) 一种多靶点酪氨酸激酶抑制剂
WO2012004438A1 (es) Una formulación farmacéutica inyectable de melfalano
US20190091152A1 (en) Use of umirolimus and its derivatives for treating cancer
BR112021002586A2 (pt) formulações de dendrímero
ES2771423T3 (es) Composición de cabazitaxel
BR112020009737A2 (pt) composições estáveis de compostos de carfilzomib peguilados
CN116133693A (zh) 载药的大分子及其制备方法
TW201521787A (zh) 烏米莫司（ｕｍｉｒｏｌｉｍｕｓ）及其衍生物於治療癌症之用途

Legal Events

Date Code Title Description
B06W Patent application suspended after preliminary examination (for patents with searches from other patent authorities) chapter 6.23 patent gazette]