BR112021002467A2 - composições e métodos para o tratamento de mastite - Google Patents

Abstract

COMPOSIÇÕES E MÉTODOS PARA O TRATAMENTO DE MASTITE. A presente invenção refere-se a um mineral selecionado do grupo que consiste em ferro, manganês e magnésio, ou combinação de dois ou mais dos mesmos; um ácido graxo n-3 selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico); ou uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSIÇÕES E MÉTODOS PARA O TRATAMENTO DE MASTITE".

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção refere-se a composições para uso no tratamento ou prevenção de mastite, por exemplo, mastite subclínica, em um indivíduo. Em particular, a invenção se refere ao uso de minerais como ferro, manganês e magnésio; ácidos graxos como ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa- linolênico); e proteínas como alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina no tratamento ou prevenção de mastite, em particular em mastites subclínicas.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] A OMS recomenda que os bebês sejam amamentados exclusivamente durante os primeiros seis meses de vida para alcançar o crescimento, o desenvolvimento e a saúde ideais e que a amamentação seja mantida até os 2 anos de idade. De acordo com a OMS, o aleitamento materno exclusivo significa que o bebê recebe apenas leite materno (não são administrados outros líquidos ou sólidos – nem mesmo água – com exceção da solução de reidratação oral, ou gotas/xaropes de vitaminas, minerais ou medicamentos). A OMS recomenda também o início precoce da amamentação, pois isso pode ser fundamental para a sobrevivência dos recém-nascidos e para estabelecer a amamentação a longo prazo.

[003] A mastite é uma inflamação do tecido da glândula mamária, que pode ser classificada como subclínica ou clínica, dependendo do grau de inflamação.

[004] A mastite pode ocorrer a qualquer momento durante a lactação e é experimentada por até cerca de 33% de mulheres lactantes. A ocorrência é particularmente predominante durante a segunda e a terceira semana pós-parto.

[005] A mastite subclínica (MSC) é uma condição inflamatória da mama lactante que é compreendida como sendo causada pela estase do leite e/ou infecção, e tem sido associada a um risco elevado de falha na lactação e ao baixo ganho de peso do bebê.

[006] As infecções por Staphylococcus, em particular as infecções por S. aureus e S. epidermidis, são entendidas como sendo uma causa primária de mastite.

[007] A mastite pode resultar em restrição ou mesmo falta de iniciação da amamentação de um bebê.

[008] Além disso, a composição do leite materno pode mudar durante a mastite, por exemplo, aumentando o conteúdo de sódio e de mediadores inflamatórios, o que pode afetar negativamente a nutrição fornecida ao bebê.

[009] O tratamento atual das mastites tipicamente envolve a administração de antibióticos. Entretanto, o amplo uso de antibióticos apresenta vários desafios, incluindo a ineficácia devido à resistência aos antibióticos, a criação de cepas de bactérias resistentes a múltiplos antibióticos, a formação de biofilmes, candidíase vaginal e diarreia associadas a antibióticos.

[010] Além disso, foi indicado que não há provas suficientes para apoiar a eficácia da terapia antibiótica para o tratamento da mastite lactacional (Jahanfar, S. et al. (2013) Cochrane Database Syst Rev 28: CD005458).

[011] Consequentemente, há uma necessidade significativa de métodos aprimorados para tratamento e prevenção da mastite.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[012] Os inventores descobriram surpreendentemente que vários minerais no leite das mulheres com mastite subclínica, como ferro, manganês e magnésio, estão presentes em concentrações anormais.

[013] As concentrações de sódio e potássio no leite são comumente utilizadas no diagnóstico de mastite subclínica. Por exemplo, vários estudos descobriram que as proporções de Na:K no leite de mulheres saudáveis com 1 mês pós-parto, de modo geral, são em média 0,6 ou menos. Isso corresponde às concentrações médias de sódio e potássio do leite humano na faixa entre 5 a 6 mmol/L e 13 a 14 mmol/L, respectivamente. Em contrapartida, a concentração média de sódio no leite de mastite é maior que 16 mmol/L. Consequentemente, uma razão Na:K menor ou igual a 0,6 é considerada normal; uma razão Na:K maior que 0,6, mas menor ou igual a 1,0 é considerada como moderadamente elevada; e uma razão Na:K maior que 1,0 é considerada muito elevada.

[014] Um outro estudo sugere que uma queda normal na [Na+] é altamente preditiva de lactação bem-sucedida, embora uma elevação prolongada da [Na+] signifique lactogênese prejudicada com alto risco de falha.

[015] Os inventores estudaram as concentrações de componentes adicionais no leite de mulheres com razões Na:K mais altas que 0,6 e compararam estas com as concentrações encontradas no leite de mulheres normais. Diferenças de composição foram identificadas em vários minerais.

[016] Especificamente, os inventores descobriram que as mulheres com mastite subclínica têm: concentrações mais altas de minerais, como ferro, manganês, magnésio, cobre, zinco e selênio; e concentrações mais baixas de minerais como cálcio e fósforo em seu leite em comparação com mulheres normais.

[017] Os minerais que exibem concentrações mais baixas no leite de mulheres com mastite subclínica (por exemplo, cálcio e fósforo) correlacionam-se com deficiências que podem estar causando ou contribuindo para a mastite subclínica. A suplementação com tais minerais pode, portanto, prevenir ou tratar as mastites subclínicas. Além disso, os minerais com concentrações mais altas no leite de mulheres com mastite subclínica (por exemplo, ferro, manganês, magnésio, cobre, zinco e selênio) se correlacionam com o uso natural desses minerais no combate à infecção e/ou inflamação. A suplementação com tais minerais pode, portanto, ser benéfica para a luta natural contra a infecção e a inflamação, prevenindo ou tratando, assim, a mastite subclínica.

[018] Sem se ater à teoria, este raciocínio é apoiado pelo conhecimento de que o selênio melhora a atividade antibacteriana no leite e que a suplementação de selênio melhora os sintomas associados à mastite em vacas; de modo similar, foi mostrado que o cobre e o zinco também reduzem os sintomas da mastite em vacas e melhoraram o sistema imune (O 'Rourke, D. (2009) Irish Veterinary Journal 62 Supplement: 15-20).

[019] Os inventores acreditam que as concentrações minerais mais altas observadas em seus dados podem resultar do aumento da absorção ou da hiperacumulação do soro como parte dos mecanismos de defesa do hospedeiro para combater a inflamação, o que é consistente com os papéis para, por exemplo, o manganês, o ferro e o magnésio na função imune e no combate à inflamação (Rahmani, S. et al. (2015) J Nutr Food Sci 5: 1; Son, E.W. et al. (2007) Arch Pharm Res 30: 743-749; Maggini, S. et al. (2007) Br J Nutr 98 Suppl 1: S29-35; Tam, M. et al. (2003) Eur J Clin Nutr 57: 1193-1197; Kim, D.J. et al. (2010) Diabetes Care 33: 2604-2610; King, D.E. et al. (2005) J Am Coll Nutr 24: 166-171; Song, Y. et al. (2007) Am J Clin Nutr 85: 1068-1074).

[020] O papel de certos minerais dietários na prevenção da mastite subclínica (por exemplo, ferro, manganês, magnésio, cobre, cálcio e fósforo) foi também confirmado pelos inventores nos experimentos descritos no Exemplo 2.

[021] O estado inflamatório associado às mastites subclínicas altera os teores e razões de ácidos graxos no leite. Em particular, os inventores descobriram que as concentrações de ácidos graxos variam no leite de mulheres com mastite subclínica. Por exemplo, os inventores descobriram que os ácidos graxos n-3 ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico) estão presentes em concentrações mais baixas no leite das mulheres com mastite subclínica em comparação com as mulheres normais. Os inventores encontraram também razões n-6:n-3 mais altas e razões ácido araquidônico (ARA):DHA mais altas no leite de mulheres com mastite subclínica em comparação com mulheres normais.

[022] A razão n-6:n 3 mais alta, a razão ARA:DHA e as quantidades mais baixas de DHA apontam em direção a um estado pró- inflamatório. A suplementação com ácidos graxos n-3, como DHA e ácido alfa-linolênico, pode, portanto, ser utilizada também no tratamento ou prevenção da mastite subclínica de modo similar ao aqui descrito em relação a minerais, como cálcio e fósforo.

[023] Além disso, os inventores descobriram que alfa- lactalbumina, lactoferrina e albumina estão presentes em concentrações mais altas no leite de mulheres com mastite subclínica em comparação com mulheres normais. A suplementação com estas proteínas pode, portanto, ser utilizada também no tratamento ou prevenção da mastite subclínica de um modo similar ao aqui descrito em relação a minerais, como ferro, manganês, magnésio, cobre, zinco e selênio.

[024] Consequentemente, em um aspecto a invenção apresenta um mineral selecionado do grupo que consiste em ferro, manganês, magnésio e uma combinação de dois ou mais dos mesmos, para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

[025] Em um outro aspecto, a invenção apresenta ferro para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, de preferência sendo que o ferro está em uma combinação com manganês e/ou magnésio.

[026] Em um outro aspecto, a invenção apresenta ferro para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, sendo que o ferro é administrado ao indivíduo com manganês e/ou magnésio. Em uma modalidade, o ferro é administrado ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente com manganês e/ou magnésio, de preferência simultaneamente.

[027] Em um outro aspecto, invenção apresenta manganês para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, de preferência, sendo que o manganês está em uma combinação com ferro e/ou magnésio.

[028] Em um outro aspecto, a invenção apresenta manganês para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, sendo que o manganês é administrado ao indivíduo com ferro e/ou magnésio. Em uma modalidade, o manganês é administrado ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente com ferro e/ou magnésio, de preferência simultaneamente.

[029] Em um outro aspecto, invenção apresenta magnésio para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, de preferência, sendo que o magnésio está em uma combinação com ferro e/ou manganês.

[030] Em um outro aspecto, a invenção apresenta magnésio para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, sendo que o magnésio é administrado ao indivíduo com ferro e/ou manganês. Em uma modalidade, o magnésio é administrado ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente com ferro e/ou manganês, de preferência simultaneamente.

[031] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma combinação de dois ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em (a) ferro; (b) manganês; e (c) magnésio para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

[032] Em uma modalidade, dois ou mais dentre (a), (b) e (c) são administrados ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente.

[033] Em uma modalidade preferencial, dois ou mais dentre (a), (b) e (c) são administrados ao indivíduo simultaneamente.

[034] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma composição que compreende um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em ferro, manganês e magnésio para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

[035] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um método para tratar ou prevenir a mastite, sendo que o método compreende a administração de um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em ferro, manganês e magnésio a um indivíduo precisando dos mesmos.

[036] Em uma modalidade, dois ou mais dentre ferro, manganês e magnésio são administrados ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente.

[037] Em uma modalidade preferencial, dois ou mais dentre ferro, manganês e magnésio são administrados ao indivíduo simultaneamente.

[038] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro e manganês. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro e manganês, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência simultaneamente.

[039] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro, manganês e magnésio. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro, manganês e magnésio, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência simultaneamente.

[040] Em uma modalidade, o mineral está em combinação com um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em cobre, zinco, selênio, cálcio e fósforo. Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende adicionalmente um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em cobre, zinco, selênio, cálcio e fósforo. Em uma modalidade, o ferro, manganês, magnésio ou a combinação de dois ou mais dos mesmos são administrados ao indivíduo com um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em cobre, zinco, selênio, cálcio e fósforo, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[041] Em uma modalidade, o mineral está em combinação com a vitamina E. Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende adicionalmente a vitamina E. Em uma modalidade, o ferro, o manganês, o magnésio ou a combinação de dois ou mais dos mesmos são administrados ao indivíduo com a vitamina E, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[042] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro, manganês e um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em cobre, zinco, selênio, cálcio e fósforo. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro, manganês e um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em cobre, zinco, selênio, cálcio e fósforo, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[043] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro, manganês e vitamina E. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro, manganês e vitamina E, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[044] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro, manganês, magnésio e um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em cobre, zinco, selênio, cálcio e fósforo. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro, manganês, magnésio e um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em cobre, zinco, selênio, cálcio e fósforo, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[045] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro, manganês, magnésio e vitamina E. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro, manganês, magnésio e vitamina E, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[046] Em uma modalidade preferencial, a combinação ou composição compreende ferro, manganês, cobre, zinco, selênio e vitamina E. Em uma modalidade preferencial, o indivíduo é administrado com ferro, manganês, cobre, zinco, selênio e vitamina E, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[047] Em uma modalidade, o mineral está em combinação com um ácido graxo n-3, de preferência um ácido graxo selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico). Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ainda um ácido graxo n-3, de preferência um ácido graxo selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico). Em uma modalidade, o ferro, o manganês, o magnésio ou a combinação de dois ou mais dos mesmos são administrados ao indivíduo com um ácido graxo n-3 (de preferência um ácido graxo selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico)), de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[048] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro, manganês e um ácido graxo n-3, de preferência um ácido graxo selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa- linolênico). Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro, manganês e um ácido graxo n-3 (e preferência um ácido graxo selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico)), de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[049] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro, manganês, magnésio e um ácido graxo n-3, de preferência um ácido graxo selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa- linolênico). Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro, manganês, magnésio e um ácido graxo n-3 (de preferência um ácido graxo selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico)), de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[050] Em uma modalidade, o mineral está em combinação com uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina. Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende adicionalmente uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina. Em uma modalidade, o ferro, o manganês, o magnésio ou a combinação de dois ou mais dos mesmos são administrados ao indivíduo com uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[051] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro, manganês e uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro, manganês e uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[052] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro, manganês, magnésio e uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro, manganês, magnésio e uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa- lactalbumina, lactoferrina e albumina, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[053] Em uma modalidade, o mineral está em combinação com fosfatidilcolina e/ou lecitina. Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende adicionalmente fosfatidilcolina e/ou lecitina. Em uma modalidade, o ferro, o manganês, o magnésio ou a combinação de dois ou mais dos mesmos são administrados ao indivíduo com a fosfatidilcolina e/ou a lecitina, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[054] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro e manganês; e fosfatidilcolina e/ou lecitina. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro e manganês; e fosfatidilcolina e/ou lecitina, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[055] Em uma modalidade, a combinação ou composição compreende ferro e manganês e magnésio; e fosfatidilcolina e/ou lecitina. Em uma modalidade, o indivíduo é administrado com ferro e manganês e magnésio; e fosfatidilcolina e/ou lecitina, de preferência simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, simultaneamente.

[056] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um ácido graxo n-3 para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

[057] Em uma modalidade, um ácido graxo n-3 selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico).

[058] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

[059] Em uma modalidade, o ferro, o manganês, o magnésio ou a combinação, o ácido graxo ou a proteína estão sob a forma de uma composição.

[060] Em uma modalidade, a composição é uma composição nutricional ou uma composição farmacêutica, de preferência uma composição nutricional.

[061] Em uma modalidade, a composição é uma composição nutricional materna, de preferência para uso durante a lactação e/ou a gravidez.

[062] Em uma modalidade, o ferro, o manganês, o magnésio, a combinação, o ácido graxo, a proteína ou a composição estão sob a forma de um comprimido, cápsula de gel, pó, leite em pó materno, produto alimentício, em formato líquido (por exemplo, formato pronto para o consumo) e/ou bebida.

[063] Em uma modalidade, a mastite é a mastite subclínica ou a mastite clínica.

[064] Em uma modalidade preferencial, a mastite é a mastite subclínica.

[065] Em uma modalidade, o indivíduo está em risco de sofrer de mastite subclínica ou mastite clínica.

[066] Em uma modalidade, o risco de sofrer de mastite (como a mastite subclínica ou a mastite clínica) é indicado pela presença de um ou mais fatores de risco selecionados do grupo que consiste em histórico familiar de mastite subclínica ou de mastite clínica, dificuldades para amamentar, separação mãe-bebê (por exemplo, separação maior que 24 h), duto bloqueado, estase de leite, mamilos rachados, alimentação pré-láctea, oferta excessiva de leite, ingurgitamento mamário, amamentação em seios alternados em mamadas consecutivas, anormalidades na boca do bebê, um frênulo curto no bebê, uso materno de antibióticos, histórico prévio de mastite no indivíduo, estresse materno, parto em hospital privado versus público e a presença de Staphylococcus aureus no leite.

[067] Em uma modalidade, o indivíduo é um ser humano, por exemplo uma mulher que deseja engravidar, que está grávida ou que é lactante.

[068] Em uma modalidade, o indivíduo é um animal de rebanho ou um animal de estimação. Em uma modalidade, o indivíduo é uma vaca ou um cão. Em uma outra modalidade, o indivíduo é um rato ou um camundongo.

[069] Em uma modalidade, o tratamento ou a prevenção aumentam a probabilidade de o indivíduo começar e/ou continuar a amamentar.

[070] Em uma modalidade, o tratamento ou a prevenção aumentam a probabilidade de o indivíduo amamentar exclusivamente o seu bebê.

[071] Em uma modalidade, o tratamento ou a prevenção aumentam a duração (período, por exemplo, número de dias, semanas, meses) da amamentação pelo indivíduo.

[072] Em uma modalidade, o indivíduo é capaz de amamentar durante ao menos 4 meses, de preferência 4 a 24 meses, opcionalmente 4 a 6 meses.

[073] Em uma modalidade, o indivíduo é capaz de amamentar durante ao menos 6 meses, de preferência 6 a 24 meses.

[074] Em uma modalidade, o tratamento ou a prevenção aumentam a qualidade do leite materno do indivíduo.

[075] Em uma modalidade, o tratamento ou a prevenção aumentam a quantidade de leite materno do indivíduo.

[076] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma composição para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, sendo que a composição compreende um mineral, um ácido graxo, uma proteína ou combinação conforme definido aqui.

[077] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma combinação de (a) ferro; (b) manganês; (c) cobre; (d) zinco; (e) selênio; e (f) vitamina E para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um sujeito, de preferência, sendo que (a) a (f) são administrados ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência, sendo que (a) a (f) são administrados ao indivíduo simultaneamente.

[078] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma composição que compreende ferro, manganês, cobre, zinco, selênio e vitamina E para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

[079] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um método para tratamento ou prevenção de mastite, sendo que o método compreende administrar ferro, manganês, cobre, zinco, selênio e vitamina E a um indivíduo que precise do mesmo, de preferência sendo que o ferro, o manganês, o cobre, o zinco, o selênio e a vitamina E são administrados ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência o ferro, o manganês, o cobre, o zinco, o selênio e a vitamina E são administrados ao indivíduo simultaneamente.

[080] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um mineral selecionado do grupo que consiste em ferro, manganês, magnésio e uma combinação de dois ou mais dos mesmos, para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo.

[081] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma combinação de dois ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em (a) ferro; (b) manganês; e (c) magnésio para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo.

[082] Em um outro aspecto, a invenção apresenta o ferro para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo, de preferência sendo que o ferro é administrado ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente com manganês e/ou magnésio.

[083] Em um outro aspecto, a invenção apresenta o manganês para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo, de preferência sendo que o manganês é administrado ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente com ferro e/ou magnésio.

[084] Em um outro aspecto, a invenção apresenta o magnésio para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo, de preferência sendo que o magnésio é administrado ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente com ferro e/ou manganês.

[085] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma composição que compreende um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em ferro, manganês e magnésio para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo.

[086] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um método para redução do risco de mastite, sendo que o método compreende a administração de um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em ferro, manganês e magnésio a um indivíduo precisando dos mesmos.

[087] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma combinação de (a) ferro; (b) manganês; (c) cobre; (d) zinco; (e) selênio; e (f) vitamina E para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo.

[088] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma composição que compreende ferro, manganês, cobre, zinco, selênio e vitamina E para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo.

[089] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um ácido graxo n-3 e/ou n-6 para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo.

[090] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina para uso na redução do risco de mastite em um indivíduo.

[091] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um método para a redução do risco de mastite, sendo que o método compreende administrar ferro, manganês, cobre, zinco, selênio e vitamina E a um indivíduo que precise do mesmo, de preferência sendo que o ferro, o manganês, o cobre, o zinco, o selênio e a vitamina E são administrados ao indivíduo simultânea, sequencial ou separadamente, com mais preferência o ferro, o manganês, o cobre, o zinco, o selênio e a vitamina E são administrados ao indivíduo simultaneamente.

DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[092] Figura 1

[093] Comparação das concentrações de ferro entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[094] Figura 2

[095] Comparação das concentrações de manganês entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[096] Figura 3

[097] Comparação das concentrações de magnésio entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[098] Figura 4

[099] Comparação das concentrações de cobre entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[0100] Figura 5

[0101] Comparação das concentrações de zinco entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[0102] Figura 6

[0103] Comparação das concentrações de selênio entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[0104] Figura 7

[0105] Comparação das concentrações de cálcio entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[0106] Figura 8

[0107] Comparação das concentrações de fósforo entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[0108] Figura 9

[0109] Comparação das concentrações de ácido docosaexaenoico (DHA) entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[0110] Figura 10

[0111] Comparação das concentrações de ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico) entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[0112] Figura 11

[0113] Comparação das concentrações de alfa-lactalbumina entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[0114] Figura 12

[0115] Comparação das concentrações de lactoferrina entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

[0116] Figura 13

[0117] Comparação das concentrações de albumina entre o leite de mães com mastite subclínica e o leite de mães normais em 6 pontos no tempo pós-parto (V1 = 0-3 d; V2 = 17 ± 3 d; V3 = 30 ± 3 d; V4 = 60 ± 5 d; V5 = 90 ± 5 d; e V6 =120 ± 5 d).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0118] Os termos "compreendendo", "compreende" e "que compreende", como usados aqui, são sinônimo de "incluindo" ou "inclui"; ou "contendo" ou "contém", e são inclusivos ou não limitados e não excluem membros, elementos ou etapas não citados. Os termos "compreendendo", "compreende" e "compreendido de" incluem também o termo "que consiste em".

[0119] Mastite

[0120] A mastite é uma inflamação do tecido da glândula mamária, que pode ser classificada como subclínica ou clínica, dependendo do grau de inflamação.

[0121] A mastite clínica é uma forma de mastite associada à redução da secreção de leite, sinais visíveis de inflamação da mama e alterações no aspecto do leite, que podem ser acompanhadas por sinais sistêmicos. A mastite subclínica é uma forma de mastite caracterizada por secreção reduzida de leite e uma contagem bacteriana elevada no leite na ausência de alterações inflamatórias evidentes, incluindo dor (Fernández, L. et al. (2014) Beneficial Microbes 5: 169-183).

[0122] As concentrações de sódio e potássio no leite são comumente utilizadas no diagnóstico de mastite subclínica. Por exemplo, vários estudos descobriram que as proporções de Na:K no leite de mulheres saudáveis com 1 mês pós-parto, de modo geral, são em média 0,6 ou menos. Isso corresponde às concentrações médias de sódio e potássio do leite humano na faixa entre 5 a 6 mmol/L e 13 a 14 mmol/L, respectivamente. Em contrapartida, a concentração média de sódio no leite de mastite é maior que 16 mmol/L. Consequentemente, uma razão Na:K menor ou igual a 0,6 é considerada normal; uma razão Na:K maior que 0,6, mas menor ou igual a 1,0 é considerada como moderadamente elevada; e uma razão Na:K maior que 1,0 é considerada muito elevada.

[0123] A mastite pode ocorrer a qualquer momento durante a lactação e é experimentada por até cerca de 33% de lactantes. A ocorrência é particularmente predominante durante a segunda e a terceira semana pós-parto.

[0124] A mastite subclínica (MSC) é uma condição inflamatória da mama lactante que é compreendida como sendo causada pela estase do leite e/ou infecção, e tem sido associada a um risco elevado de falha na lactação e ao baixo ganho de peso do bebê.

[0125] As infecções por Staphylococcus, em particular as infecções por S. aureus e S. epidermidis, são entendidas como sendo uma causa primária de mastite.

[0126] A mastite pode resultar em restrição ou mesmo falta de iniciação da amamentação de um bebê. Além disso, a composição do leite materno pode mudar durante a mastite, por exemplo, aumentando o conteúdo de sódio e de mediadores inflamatórios, o que pode afetar negativamente a nutrição fornecida ao bebê.

[0127] Mineral

[0128] Em um aspecto, a invenção apresenta um mineral selecionado do grupo que consiste em ferro, manganês, magnésio e uma combinação de dois ou mais dos mesmos, para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

[0129] Em uma modalidade, o mineral está em combinação com um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em cobre, zinco, selênio, cálcio e fósforo.

[0130] Os minerais podem ser utilizados em qualquer forma adequada para a ingestão por animais, de preferência seres humanos (por exemplo, não são tóxicos). Os minerais podem ser utilizados, por exemplo, em composições como composições nutricionais, em qualquer quantidade adequada. O versado na técnica será capaz de determinar as quantidades adequadas dependendo da dosagem desejada do mineral. As dosagens podem depender de fatores como idade, tamanho e estado de saúde da mulher a quem são administradas, de seu estilo de vida, bem como de sua herança genética. As dosagens podem estar de acordo com as ingestões diárias recomendadas (IDR) desenvolvidas por organizações como o Food and Nutrition Board da Academia Nacional de Ciências, EUA.

[0131] O versado na técnica pode prontamente determinar uma dose adequada de um dos agentes da invenção para administração a um indivíduo sem experimentação indevida. Tipicamente, um médico determinará a dosagem real que será a mais adequada para um indivíduo e essa dosagem dependerá de uma variedade de fatores incluindo a atividade do agente específico empregado, a estabilidade metabólica e a extensão da ação daquele agente, peso corporal, saúde geral, gênero, dieta, modo e horário de administração, taxa de excreção, combinação de fármacos, gravidade da condição específica, e o indivíduo que estiver sendo submetido à terapia. Naturalmente, pode haver casos individuais em que faixas de dosagem mais altas ou mais baixas são justificadas.

[0132] Em uma modalidade, a dosagem de ferro é de cerca de 2,7 a 45, 5 a 25 ou 9 a 10 mg/dia. Uma dosagem de cerca de 9 a 10 mg/dia pode ser preferencial para mulheres amamentando.

[0133] Em uma outra modalidade, a dosagem de ferro é de cerca de 30 a 60 mg/dia. Uma dosagem de cerca de 30 a 60 mg/dia pode ser preferencial para mulheres grávidas.

[0134] Em uma modalidade, a dosagem de ferro é de ao menos 9,1 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de ferro é de ao menos 9,5 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de ferro está na faixa de 9,5 a 60 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 50 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 40 mg/dia.

[0135] Em uma modalidade, a dosagem de ferro para uma mulher lactante é de ao menos 9,1 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de ferro é de ao menos 9,5 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de ferro está na faixa de 9,5 a 60 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 30 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 20 mg/dia.

[0136] Em uma modalidade, a dosagem de ferro é de ao menos 11,6 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de ferro é de ao menos 12 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de ferro está na faixa de 12 a 60 mg/dia, por exemplo, de 12 a 50 mg/dia, por exemplo, de 12 a 40 mg/dia.

[0137] Em uma modalidade, a dosagem de ferro para uma mulher lactante é de ao menos 11,6 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de ferro é de ao menos 12 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de ferro está na faixa de 12 a 60 mg/dia, por exemplo, de 12 a 30 mg/dia, por exemplo, de 12 a 20 mg/dia.

[0138] O ferro pode estar compreendido sob qualquer forma adequada para ingestão por uma mulher, como uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante. Por exemplo, o ferro pode estar compreendido sob a forma de sulfato de ferro, citrato de ferro, citrato de colina de ferro, citrato de amônio de ferro, cloreto de ferro, fumarato de ferro, gluconato de ferro, pirofosfato de ferro ou uma mistura dos mesmos.

[0139] Em uma modalidade, a dosagem de manganês é de cerca de 1,8 a 11, 2 a 3 ou 2,5 a 2,7 mg/dia. Uma dosagem de cerca de 2,5 a 2,7 mg/dia pode ser preferencial para mulheres amamentando. Uma dosagem de cerca de 1,9 a 2,1 mg/dia pode ser preferencial para mulheres grávidas.

[0140] Em uma modalidade, a dosagem de manganês é de ao menos 2,1 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de manganês é de ao menos 2,3 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de manganês está na faixa de 2,1 a 4 mg/dia, por exemplo, de 2,3 a

3,5 mg/dia.

[0141] Em uma modalidade, a dosagem de manganês para uma mulher lactante é de ao menos 2,1 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de manganês é de ao menos 2,3 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de manganês está na faixa de 2,1 a 4 mg/dia, por exemplo, de 2,3 a 3,5 mg/dia.

[0142] Em uma modalidade, a dosagem de manganês é de ao menos 2,6 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de manganês é de ao menos 3,0 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de manganês está na faixa de 2,6 a 4 mg/dia, por exemplo, de 3,0 a 3,5 mg/dia.

[0143] Em uma modalidade, a dosagem de manganês para uma mulher lactante é de ao menos 2,6 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de manganês é de ao menos 3,0 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de manganês está na faixa de 2,6 a 4 mg/dia, por exemplo, de 3,0 a 3,5 mg/dia.

[0144] O manganês pode estar compreendido sob qualquer forma adequada para ingestão por uma mulher, como uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante. Por exemplo, o manganês pode estar compreendido sob a forma de gluconato de manganês, sulfato de manganês, ascorbato de manganês, quelatos de aminoácidos de manganês, aspartato de manganês, picolinato de manganês, fumarato de manganês, malato de manganês, succinato de manganês, citrato de manganês ou uma mistura dos mesmos.

[0145] Em uma modalidade, a dosagem de magnésio é de cerca de 35 a 350, 200 a 350 ou 300 a 350 mg/dia. Uma dosagem de cerca de 300 a 350 mg/dia pode ser preferencial para mulheres amamentando.

[0146] Em uma modalidade, a dosagem de magnésio é de ao menos 270 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de magnésio é de ao menos 300 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de magnésio está na faixa de 270 a 350 mg/dia, por exemplo, de 300 a 350 mg/dia.

[0147] Em uma modalidade, a dosagem de magnésio para uma mulher lactante é de ao menos 270 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de magnésio é de ao menos 300 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de magnésio está na faixa de 270 a 350 mg/dia, por exemplo, de 300 a 350 mg/dia.

[0148] Em uma modalidade, a dosagem de magnésio é de ao menos 302 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de magnésio é de ao menos 305 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de magnésio está na faixa de 302 a 350 mg/dia, por exemplo, de 305 a 350 mg/dia.

[0149] Em uma modalidade, a dosagem de magnésio para uma mulher lactante é de ao menos 302 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de magnésio é de ao menos 305 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de magnésio está na faixa de 302 a 350 mg/dia, por exemplo, de 305 a 350 mg/dia.

[0150] O magnésio pode estar compreendido sob qualquer forma adequada para ingestão por uma mulher, como uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante. Por exemplo, o magnésio pode estar compreendido sob a forma de cloreto de magnésio, citrato de magnésio, sulfato de magnésio, óxido de magnésio, hidróxido de magnésio, quelatos de aminoácidos de magnésio (por exemplo, quelatos de glicinato, lisinato, orotato, taurato, aspartato, treonato e/ou malato) ou uma mistura dos mesmos.

[0151] Em uma modalidade, a dosagem de cobre é de cerca de 0,1 a 10, 0,1 a 2 ou 0,5 a 1,5 mg/dia.

[0152] Em uma modalidade, a dosagem de cobre é de ao menos 1,250 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de cobre é de ao menos 1,30 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de cobre está na faixa de 1,250 a 10 mg/dia, por exemplo, de 1,30 a 2 mg/dia, por exemplo, de 1,30 a 1,50 mg/dia.

[0153] Em uma modalidade, a dosagem de cobre para uma mulher lactante é de ao menos 1,250 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de cobre é de ao menos 1,30 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de cobre está na faixa de 1,250 a 10 mg/dia, por exemplo, de 1,30 a 2 mg/dia, por exemplo, de 1,30 a 1,50 mg/dia.

[0154] Em uma modalidade, a dosagem de cobre é de ao menos 1,46 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de cobre é de ao menos 1,48 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de cobre está na faixa de 1,46 a 10 mg/dia, por exemplo, de 1,46 a 2 mg/dia, por exemplo, de 1,48 a 1,50 mg/dia.

[0155] Em uma modalidade, a dosagem de cobre para uma mulher lactante é de ao menos 1,46 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de cobre é de ao menos 1,48 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de cobre está na faixa de 1,46 a 10 mg/dia, por exemplo, de 1,46 a 2 mg/dia, por exemplo, de 1,48 a 1,50 mg/dia.

[0156] O cobre pode estar compreendido sob qualquer forma adequada para ingestão por uma mulher, como uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante. Por exemplo, o cobre pode estar compreendido sob a forma de óxido de cobre, cloreto de cobre, gluconato de cobre, sulfato de cobre, quelatos de aminoácidos de cobre ou uma mistura dos mesmos.

[0157] Em uma modalidade, a dosagem de zinco pode ser de cerca de 5 a 40, 7 a 13 ou 9,5 a 12 mg/dia.

[0158] Em uma modalidade, a dosagem de zinco é de ao menos 9,5 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de zinco é de ao menos 10 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de zinco está na faixa de 9,5 a 12 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 11,5 mg/dia, por exemplo, de 10 a 11 mg/dia.

[0159] Em uma modalidade, a dosagem de zinco para uma mulher lactante é de ao menos 9,5 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de zinco é de ao menos 10 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de zinco está na faixa de 9,5 a 12 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 11,5 mg/dia, por exemplo, de 10 a 11 mg/dia.

[0160] O zinco pode estar compreendido sob qualquer forma adequada para ingestão por uma mulher, como uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante. Por exemplo, o zinco pode estar compreendido sob a forma de acetato de zinco, cloreto de zinco, citrato de zinco, gluconato de zinco, lactato de zinco, óxido de zinco, sulfato de zinco, carbonato de zinco ou uma mistura dos mesmos.

[0161] Em uma modalidade, a dosagem de selênio pode ser de cerca de 20 a 400, 25 a 250, 26 a 85 ou 60 a 70 µg/dia.

[0162] Em uma modalidade, a dosagem de selênio é de ao menos 131 µg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de selênio é de ao menos 135 µg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de selênio está na faixa de 131 a 400 µg/dia, por exemplo, de 140 a 250 µg/dia, por exemplo, de 150 a 200 µg/dia.

[0163] Em uma modalidade, a dosagem de selênio para uma mulher lactante é de ao menos 131 µg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de selênio é de ao menos 135 µg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de selênio está na faixa de 131 a 400 µg/dia, por exemplo, de 140 a 250 µg/dia, por exemplo, de 150 a 200 µg/dia.

[0164] O selênio pode estar compreendido sob qualquer forma adequada para ingestão por uma mulher, como uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante. Por exemplo, o selênio pode estar compreendido sob a forma de selenito de sódio, selenito hidrogênio de sódio ou uma mistura dos mesmos.

[0165] Em uma modalidade, a dosagem de cálcio é de cerca de 100 a 2500, 500 a 2000 ou 1000 a 1500 mg/dia.

[0166] Em uma modalidade, a dosagem de cálcio é de ao menos 750 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de cálcio é de ao menos 850 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de cálcio está na faixa de 750 a 2500 mg/dia, por exemplo, de 850 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 900 a 1500 mg/dia.

[0167] Em uma modalidade, a dosagem de cálcio para uma mulher lactante é de ao menos 750 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de cálcio é de ao menos 850 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de cálcio está na faixa de 750 a 2500 mg/dia, por exemplo, de 850 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 900 a 1500 mg/dia.

[0168] Em uma modalidade, a dosagem de cálcio é de ao menos 860 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de cálcio é de ao menos 900 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de cálcio está na faixa de 860 a 2500 mg/dia, por exemplo, de 900 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 900 a 1500 mg/dia.

[0169] Em uma modalidade, a dosagem de cálcio para uma mulher lactante é de ao menos 860 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de cálcio é de ao menos 900 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de cálcio está na faixa de 860 a 2500 mg/dia, por exemplo, de 900 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 900 a 1500 mg/dia.

[0170] O cálcio pode estar compreendido sob qualquer forma adequada para ingestão por uma mulher, como uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante. Por exemplo, o cálcio pode estar compreendido sob a forma de citrato de cálcio, carbonato de cálcio ou uma mistura dos mesmos.

[0171] Em uma modalidade, a dosagem de fósforo é de cerca de 70 a 4000, 100 a 1500 ou 250 a 1250 mg/dia.

[0172] Em uma modalidade, a dosagem de fósforo é de ao menos 1275 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de fósforo é de ao menos 1300 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de fósforo está na faixa de 1300 a 4000 mg/dia, por exemplo, de 1300 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 1300 a 1500 mg/dia.

[0173] Em uma modalidade, a dosagem de fósforo para uma mulher lactante é de ao menos 1275 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de fósforo é de ao menos 1300 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de fósforo está na faixa de 1300 a 4000 mg/dia, por exemplo, de 1300 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 1300 a 1500 mg/dia.

[0174] Em uma modalidade, a dosagem de fósforo é de ao menos 1250 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de fósforo é de ao menos 1275 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de fósforo está na faixa de 1250 a 4000 mg/dia, por exemplo, de 1275 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 1300 a 1500 mg/dia.

[0175] Em uma modalidade, a dosagem de fósforo para uma mulher lactante é de ao menos 1250 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de fósforo é de ao menos 1275 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de fósforo está na faixa de 1250 a 4000 mg/dia, por exemplo, de 1275 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 1300 a 1500 mg/dia.

[0176] O fósforo pode estar compreendido sob qualquer forma adequada para ingestão por uma mulher, como uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante. Por exemplo, o fósforo pode estar compreendido sob a forma de fosfato de sódio.

[0177] Em uma outra modalidade da presente invenção, a dosagem de ferro está na faixa de 9,5 a 60 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 30 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 20 mg/dia; a dosagem de manganês está na faixa de 2,1 a 4 mg/dia, por exemplo, de 2,3 a 3,5 mg/dia; a dosagem de magnésio está na faixa de 270 a 350 mg/dia, por exemplo, de 300 a 350 mg/dia; a dosagem de cobre está na faixa de 1,250 a 10 mg/dia,

por exemplo, de 1,30 a 2 mg/dia, por exemplo, de 1,30 a 1,50 mg/dia; a dosagem de cálcio está na faixa de 750 a 2500 mg/dia, por exemplo, de 850 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 900 a 1500 mg/dia; e a dosagem de fósforo está na faixa de 1300 a 4000 mg/dia, por exemplo, de 1300 a 2000 mg/dia, por exemplo, de 1300 a 1500 mg/dia. Em tal modalidade, o indivíduo que recebe a combinação ou a composição mineral compreendendo a mesma é, por exemplo, uma mulher lactante.

[0178] Vitaminas, ácidos graxos e proteínas

[0179] Os minerais aqui descritos podem ser utilizados em combinação com outros agentes, em particular vitamina E, ácidos graxos n-3 (de preferência selecionados do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa- linolênico)) e/ou uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina.

[0180] Em um outro aspecto, a invenção apresenta um ácido graxo n-3 para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, de preferência caracterizado por o ácido graxo ser selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico).

[0181] Em um outro aspecto, a invenção apresenta uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

[0182] Tais agentes (vitamina E, ácidos graxos n-3, alfa- lactalbumina, lactoferrina e albumina) podem ser utilizados sob qualquer forma adequada para ingestão por animais, de preferência humanos (por exemplo, não tóxicos). Os agentes podem ser utilizados, por exemplo, em composições como composições nutricionais, em qualquer quantidade adequada. O versado na técnica será capaz de determinar as quantidades adequadas dependendo da dosagem desejada do agente. As dosagens podem depender de fatores como idade, tamanho e estado de saúde da mulher a quem são administradas, de seu estilo de vida, bem como de sua herança genética. As dosagens podem estar de acordo com as ingestões diárias recomendadas (IDR) desenvolvidas por organizações como o Food and Nutrition Board da Academia Nacional de Ciências, EUA.

[0183] Em uma modalidade, a dosagem de vitamina E é de cerca de 11 a 1000, 7,5 a 300 ou 11 a 19 mg/dia.

[0184] Em uma modalidade, a dosagem de vitamina E é de ao menos 8,1 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de fósforo é de ao menos 8,5 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de fósforo está na faixa de 8,1 a 300 mg/dia, por exemplo, de 8,5 a 19 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 19 mg/dia.

[0185] Em uma modalidade, a dosagem de vitamina E para uma mulher lactante é de ao menos 8,1 mg/dia. Em uma outra modalidade, a dosagem de fósforo é de ao menos 8,5 mg/dia. Em ainda uma outra modalidade, a dosagem de fósforo está na faixa de 8,1 a 300 mg/dia, por exemplo, de 8,5 a 19 mg/dia, por exemplo, de 9,5 a 19 mg/dia.

[0186] A vitamina E pode estar, por exemplo, sob a forma de um tocoferol ou uma mistura de diferentes tocoferóis. Por exemplo, a vitamina E pode ser alfa-tocoferol, gama-tocoferol ou uma mistura de alfa-tocoferol e gama-tocoferol.

[0187] A vitamina E pode estar compreendida sob qualquer forma adequada para ingestão por uma mulher, como uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante, por exemplo, alfa-tocoferol e/ou gama-tocoferol, e/ou pode estar compreendida sob a forma de mistura de concentrado de tocoferol, l-vitamina E, d,l-vitamina E, tocoferóis misturados puros, d,l-alfa-tocoferol, acetato de d,l-alfa- tocoferol, extrato rico em tocoferol ou uma mistura dos mesmos.

[0188] Em uma modalidade, a vitamina E é alfa-tocoferol.

[0189] Em uma modalidade, a dosagem de ácido docosaexaenoico (DHA) é menor que ou igual a 1000 mg/dia, de preferência cerca de 500 a 1000 mg/dia.

[0190] Em uma modalidade, a dosagem de ácido alfa-linolênico é menor que ou igual a 2000 mg/dia, de preferência cerca de 500 a 1000 mg/dia.

[0191] Em uma outra modalidade, a dosagem de fosfatidil colina é de cerca de 1500 a 1750 mg/dia.

[0192] Em uma outra modalidade, a dosagem de lecitina é de cerca de 1500 a 1750 mg/dia.

[0193] Em uma modalidade, a dosagem de lactoferrina é de cerca de 5 a 500 mg/dia, de preferência cerca de 100 a 500 mg/dia.

[0194] No que diz respeito às dosagens aqui definidas como quantidades por dose diária, a quantidade de nutriente em uma composição administrada ao indivíduo pode variar dependendo de se destinar a ser consumida uma vez ao dia, ou mais ou menos frequentemente. Métodos de tratamento

[0195] O termo "combinação", ou os termos "em combinação", "utilizado em combinação com" ou "preparação combinada", como aqui utilizados, podem se referir à administração combinada de dois ou mais agentes simultânea, sequencial ou separadamente.

[0196] O termo "simultâneo", como usado aqui, significa que os agentes são administrados simultaneamente, ou seja, ao mesmo tempo.

[0197] O termo "sequencial", como usado aqui, significa que os agentes são administrados um após o outro.

[0198] O termo "separado/a", como usado aqui, significa que os agentes são administrados independentemente um do outro mas dentro de um intervalo de tempo que permite que os agentes apresentem um efeito combinado, de preferência, sinérgico. Dessa forma, a administração "separadamente" pode permitir que um agente seja administrado, por exemplo dentro de 1 minuto, 5 minutos ou 10 minutos após o outro.

[0199] Deve-se considerar que todas as referências da presente invenção ao tratamento incluem tratamento curativo, paliativo e profilático. O tratamento de mamíferos, particularmente seres humanos, é preferencial. Tratamentos tanto humanos como veterinários estão dentro do escopo da invenção.

[0200] Os minerais, ácidos graxos, proteínas, combinações e composições aqui descritos podem ser administrados a uma mulher que deseja engravidar, a uma mulher grávida e/ou a uma mulher lactante.

[0201] Se a administração for a uma mulher que deseja engravidar, a administração pode ser, por exemplo, durante ao menos 1, 2, 3 ou 4 meses antes da gravidez ou gravidez desejada.

[0202] Se a administração for a uma mulher grávida, a administração pode ser, por exemplo, durante ao menos 4, ao menos 8, ao menos 12, ao menos 16, ao menos 20, ao menos 24, ao menos 28 ou ao menos 36 semanas durante a gravidez. À medida que as necessidades nutricionais aumentam no segundo e no terceiro trimestre de gravidez, pode ser particularmente benéfico se a administração for durante todo o segundo e/ou terceiro trimestres de gravidez.

[0203] A administração antes da gravidez e/ou durante a gravidez pode possibilitar que uma mulher acumule um armazenamento de um ou mais dentre os minerais, ácidos graxos e/ou proteínas antes da lactação.

[0204] Se a administração for a uma mulher lactante, a administração pode ser por exemplo para qualquer parte do período de lactação até 2 anos por exemplo, até 1 ano, até 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou 9 meses após o nascimento.

[0205] Em uma modalidade, a administração é a uma mulher que deseja engravidar, a uma mulher grávida e/ou a uma mulher lactante. Composição

[0206] O termo "composição nutricional materna", como usado aqui, se refere a qualquer composição que tenha sido especificamente fabricada para consumo por uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante, ou uma composição que é especificamente comercializada para mulheres grávidas, mulheres tentando engravidar ou mulheres lactantes (por exemplo, amamentando).

[0207] A composição nutricional materna pode ser, por exemplo, um produto alimentício, um produto alimentício funcional, uma bebida, um produto lácteo ou produto substituto lácteo, uma formulação farmacêutica ou um suplemento.

[0208] O termo "produto lácteo", como usado aqui, se refere a produtos alimentícios produzidos a partir de animais como vacas, cabras, ovelhas, iaques, cavalos, camelos e outros mamíferos. Exemplos de produtos lácteos são leite com baixo teor de gordura (por exemplo, leite com 0,1%, 0,5% ou 1,5% de gordura), leite isento de gordura, leite em pó, leite integral, produtos de leite integral, manteiga, leitelho, produtos de leitelho, leite desnatado, produtos isentos de lactose, produtos com alto teor de gordura do leite, leite condensado, creme de leite fresco, queijo, sorvete e produtos de confeitaria, bebidas probióticas ou bebidas do tipo iogurte probiótico. Um produto substituto lácteo pode ser um substituto lácteo à base de soja, amêndoa ou vegetal, por exemplo, um substituto de leite ou iogurte.

[0209] O termo "formulação farmacêutica", como usado aqui, se refere a uma composição que compreende ao menos um agente farmaceuticamente ativo, substância química ou fármaco. A formulação farmacêutica pode estar sob a forma sólida ou líquida e pode compreender ao menos um agente ativo adicional, carreador, veículo, excipiente, ou agente auxiliar identificável por um versado na técnica. A formulação farmacêutica pode estar sob a forma de um comprimido, cápsula, grânulos, pó, líquido ou xarope.

[0210] O termo "bebida" como usado aqui, se refere a um produto nutricional sob a forma líquida ou semilíquida que pode ser consumido com segurança por um indivíduo. O produto da bebida pode ser um produto à base de água, como um produto em que os agentes da invenção são dissolvidos ou suspensos em água.

[0211] O termo "produto alimentício", como aqui usado, se refere a qualquer tipo de produto que pode ser consumido com segurança por uma mulher, em particular uma mulher grávida, uma mulher tentando engravidar ou uma mulher lactante (por exemplo, amamentando). O dito produto alimentício pode estar na forma sólida, semissólida ou líquida e pode compreender um ou mais nutrientes, alimentos ou suplementos nutricionais. Por exemplo, o produto alimentício pode compreender adicionalmente um ou mais dentre os seguintes nutrientes e micronutrientes: uma fonte de proteínas, uma fonte de lipídios, uma fonte de carboidratos, vitaminas e minerais. A composição pode conter, também, antioxidantes, estabilizantes (quando fornecidos sob a forma sólida) ou emulsificantes (quando fornecidos sob a forma líquida).

[0212] O termo "produto alimentício funcional", como usado aqui, se refere a um produto alimentício que fornece uma função adicional de promoção da saúde ou de prevenção de doença ao indivíduo. Produtos alimentícios e produtos alimentícios funcionais incluem, por exemplo, produtos à base de cereais, iogurtes ou outros produtos derivados de leite e barras.

[0213] O termo "suplemento" como usado aqui se refere a um produto nutricional que fornece nutrientes (por exemplo, vitaminas e/ou minerais) a um indivíduo e que não pode, de outro modo, ser consumidos em quantidades suficientes pelo dito indivíduo. Os suplementos podem, por exemplo, ser fornecidos sob a forma de um comprimido, uma pastilha, uma pastilha, uma cápsula ou comprimido mastigável, uma cápsula ou um suplemento em pó que pode ser, por exemplo, dissolvido em água ou leite, ou polvilhado em alimentos. Os suplementos fornecem tipicamente os nutrientes selecionados sem fornecer uma porção significativa das necessidades nutricionais gerais de um indivíduo. Tipicamente, os suplementos não representam mais de 0,1%, 1%, 5%, 10% ou 20% da necessidade energética diária do indivíduo. No contexto da presente invenção, o indivíduo pode ser, por exemplo, uma mulher tentando engravidar, uma mulher grávida e/ou uma mulher lactante.

[0214] O termo "suplemento de gravidez", como usado aqui, se refere a um suplemento que é especificamente formulado para administração a uma mulher que está tentando engravidar e/ou a uma mulher que está grávida, ou comercializado para uma mulher que está tentando engravidar e/ou uma mulher que está grávida.

[0215] O termo "suplemento de lactação", como usado aqui, se refere a um suplemento que é especificamente formulado para administração a uma mulher que está lactante ou comercializado para uma mulher que está lactante. O consumo de suplementos de lactação pode ter o início aconselhado durante a gravidez.

[0216] As composições da invenção podem compreender também ingredientes comumente utilizados em composições nutricionais maternas. Alguns exemplos não-limitadores de tais ingredientes incluem: probióticos, lipídios, carboidratos, agentes farmaceuticamente ativos e aditivos convencionais, como antioxidantes, estabilizantes, emulsificantes, acidulantes, espessantes, tampões ou agentes para ajuste de pH, agentes quelantes, corantes, excipientes, agentes flavorizantes, agentes osmóticos, veículos farmaceuticamente aceitáveis, conservantes, açúcares, adoçantes, texturizantes, emulsificantes e água.

[0217] Pode também ser benéfico que as composições da invenção compreendam probióticos. Os probióticos podem ajudar os nutrientes a passar pelo intestino.

[0218] O termo probiótico, como usado aqui, se refere a bactérias probióticas vivas, bactérias probióticas não-replicantes, bactérias probióticas mortas, bactérias probióticas não-viáveis, fragmentos de bactérias probióticas como DNA, metabólitos de bactérias probióticas, compostos citoplasmáticos de bactérias probióticas, materiais de parede celular de bactérias probióticas, sobrenadantes de cultura de bactérias probióticas, e combinações de qualquer um dos anteriores.

[0219] O probiótico pode ser bactérias probióticas vivas, bactérias probióticas não-replicantes, bactérias probióticas mortas, bactérias probióticas não-viáveis e qualquer combinação dos mesmos. Indivíduo

[0220] O termo "indivíduo", como usado aqui, se refere a um animal humano ou não humano. O animal não humano pode ser, por exemplo, um animal de rebanho ou um animal de estimação.

[0221] Um "animal de estimação" é qualquer animal domesticado e inclui, mas não se limita a, gatos, cães, coelhos, porquinhos-da-índia, furões, hamsters, camundongos, gerbilos, cavalos, vacas, cabras, carneiros/ovelhas, jumentos, porcos e similares.

[0222] Em uma modalidade, o indivíduo é um indivíduo humano. Em uma modalidade, o indivíduo é um animal de estimação. De preferência, o indivíduo é um ser humano.

[0223] Em uma modalidade, o indivíduo está em risco de mastite e/ou de mastite subclínica. Em uma outra modalidade, o indivíduo é um animal lactante.

[0224] Em uma modalidade, o indivíduo humano é uma mulher.

[0225] Em uma outra modalidade, o indivíduo humano é uma mulher lactante. Em uma outra modalidade, o indivíduo humano é uma mulher grávida.

[0226] Em ainda uma outra modalidade, o indivíduo humano é uma mulher em risco de mastite e/ou de mastite subclínica.

[0227] Em uma outra modalidade, o indivíduo humano é uma mulher lactante em risco de mastite e/ou de mastite subclínica.

[0228] Tratamento e prevenção

[0229] O termo "prevenir", como usado aqui, inclui a prevenção e a redução do risco de uma condição.

[0230] Os versados na técnica entenderão que podem combinar todos os recursos da presente invenção aqui descritos, sem se afastar do escopo da invenção como descrito.

[0231] Vários recursos e modalidades preferenciais da presente invenção serão agora descritos a título de exemplos não limitadores.

[0232] A prática da presente invenção empregará, salvo indicação em contrário, técnicas convencionais de química, bioquímica, biologia molecular, microbiologia e imunologia, que estão dentro das capacidades de uma pessoa versada na técnica. Essas técnicas são explicadas na literatura. Exemplos Exemplo 1 Métodos

[0233] No âmbito de um estudo observacional europeu multicêntrico para caracterizar a composição do leite humano (LH) nos primeiros quatro meses de lactação (estudo Atlas de Nutrientes do Leite Humano), foi proposto compreender se existem diferenças na composição do leite humano entre mulheres lactantes com mastite subclínica (MSC) em relação àquelas sem, com base nas razões sódio/potássio (Na/K) no leite humano.

Protocolo do estudo

[0234] O estudo ATLAS foi conduzido em sete países da Europa (França, Itália, Noruega, Portugal, Romênia, Espanha e Suécia) como uma coorte longitudinal, observacional, na qual o LM, bem como múltiplos parâmetros maternos e infantis foram coletados em seis momentos pós-parto (0 a 3 d, 17 ± 3 d, 30 ± 3 d, 60 ± 5 d, 90 ± 5 d e 120 ± 5 d). Os conselhos de ética institucionais e locais de cada centro aprovaram o estudo. As participantes forneceram um termo de consentimento livre e esclarecido para participar do estudo após receberem explicações e terem lido e compreendido a finalidade e o objetivo do estudo em seus respectivos idiomas locais. As mulheres grávidas foram recrutadas antes do parto, de modo geral durante o último trimestre de gestação. Os critérios de inclusão para este estudo foram: (a) mulheres grávidas com idades compreendidas entre 18 e 40 anos; (b) IMC entre 19 e 29, inclusive; (c) intenção de amamentar pelo menos até 4 meses após o parto; e (d) concordância com o protocolo do estudo e assinatura do termo de consentimento livre e esclarecido. Os critérios de exclusão para este estudo foram: (a) participação atual de outro ensaio; (b) apresentação de condições que contraindiquem o aleitamento materno; (c) condições médicas ou sob medicamentos para condições como anormalidades metabólicas e cardiovasculares; (d) probabilidades dietárias como anorexia ou bulimia; e (e) indivíduos não capazes de cumprir os procedimentos do estudo. Todos os dados deste estudo foram coletados por enfermeiros e auxiliares de pesquisa dedicados, treinados e certificados. Os dados maternos incluíram: dados demográficos, antropometria, história médica, história de suplementos dietários e diários alimentares de três dias. Os dados relativos aos lactentes incluíam: dados demográficos, antropometria, antecedentes de utilização de medicamentos, composição corporal (um centro em França e um na Suécia) e diário de ingestão infantil (apenas três centros na França). Amostragem padronizada de leite humano

[0235] A amostragem de leite materno foi padronizada para todos os indivíduos. O leite foi coletado às 11h00 ± 2h00 usando um extrator de leite elétrico (Medela Symphony). Para cada mãe, o leite foi coletado da mesma mama durante todo o estudo e as mães foram solicitadas a esvaziar a mama na mamada anterior. As amostras de leite materno total único coletadas foram misturadas e uma alíquota de 10 a 40 mL de LM para cada ponto no tempo foi coletada. Para colostro, ou o primeiro ponto no tempo 5 a 10 mL foram coletados. O restante do leite humano foi devolvido à mãe para alimentação do bebê em um momento posterior, se necessário. Cada amostra de leite humano coletada foi transferida para tubos de congelamento, rotulada com o número do indivíduo e informações de coleta, armazenada a -18°C em freezer doméstico, transferida para o hospital para armazenamento a -80°C e depois enviada em gelo seco para o Centro de Pesquisa Nestlé (Lausanne, Suíça), onde foi armazenada a -80°C até a análise. As amostras de leite humano congeladas foram descongeladas uma vez para separação em alíquotas em 15 frações individuais de pequeno volume (0,2 mL a 2 mL) em tubos de polipropileno separados dedicados às diferentes análises. Avaliação do estado de MSC

[0236] As mulheres lactantes foram categorizadas em dois grupos: aquelas com qualquer MSC (definidas como razão Na/K > 0,6) e aquelas normais (definidas como razão Na/K ≤ 0,6) com base nas razões Na/K no leite humano no início da lactação (dias 2, 17 e 30). Mulheres lactantes com pelo menos 1 ocorrência de MSC durante qualquer um desses três momentos foram classificadas como tendo alguma MSC, enquanto aquelas na categoria normal não tiveram nenhuma ocorrência de MSC em nenhum desses momentos.

[0237] Quantificação de ácidos graxos no leite humano

[0238] Os perfis de ácidos graxos foram determinados mediante a preparação dos metil ésteres de ácidos graxos (FAMEs). Uma transesterificação direta do leite humano foi executada com a solução de ácido clorídrico metanólico conforme descrito por Cruz-Hernandez et al. (Cruz-Hernandez, C. et al. (2017) J Sep Sci 40: 3289-3300). Resumidamente, em um tubo de ensaio de vidro de tampa roscada de 10 mL, leite (250 µL) foi adicionado e misturado com 300 µL de solução de FAME de padrão interno 11:0 (3 mg/mL) e 300 µL de solução de TAG de padrão interno 13:0 (3 mg/mL). Após a adição de 2 mL de metanol, 2 mL de ácido clorídrico metanólico (3 N) e 1 mL de hexano, os tubos foram aquecidos a 100°C durante 90 min. Para parar a reação, adicionaram-se 2 mL de água e após centrifugação (1200 g x 5 min) a fase superior (hexano) foi transferida para frascos de cromatografia gasosa. A análise de FAMEs foi executada por cromatógrafo gasoso usando uma coluna capilar CP-Sil 88 (100 m, 0,25 mm id. 0,25 µm de espessura de filme) e sua identificação por comparação de tempo de retenção com padrões autênticos (padrão GC Nestlé 36 obtido junto a NuCheck-Prep, Elysan MN. EUA). Quantificação de proteína no leite humano

[0239] O teor de proteína total no leite humano foi medido usando o método colorimétrico de ácido bicinconínico (BCA) de acordo com o protocolo fornecido com o kit de ensaio BCA (ThermoFisher Scientific). As quatro principais proteínas do leite humano alfa-lactalbumina, lactoferrina, albumina sérica e caseínas foram quantificadas usando um sistema LabChip conforme descrito anteriormente (Affolter et al. (2016) Nutrients 8: 504).

[0240] Quantificação de minerais no leite humano

[0241] A quantificação de minerais foi realizada usando Espectrometria de Massa Plasmática Indutivamente Acoplada

(ICP-MS).

[0242] Para sódio (Na), magnésio (Mg), fósforo (P), potássio (K), cálcio (Ca), manganês (Mn), ferro (Fe), cobre (Cu), zinco (Zn) e selênio (Se), 0,7 mL de leite materno humano foi transferido para vasos de PFA e mineralizado em um sistema de digestão de micro-ondas CEM® usando HNO3/H2O2. As amostras mineralizadas foram transferidas para tubos de PE, diluídas com água MQ e germânio (Ge) e telúrio (Te) foram adicionados como padrões internos. A quantificação foi realizada por ICP-MS usando He como gás de colisão.

[0243] Materiais de Referência Certificados (CRM) foram adicionados a todas as séries analíticas para controlar a qualidade da quantificação. Resultados

[0244] As concentrações de ferro, manganês, magnésio, cobre, zinco, selênio, cálcio, fósforo, DHA, ácido octadecatrienoico 18:3 n-3, alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina no leite de mães com mastite subclínica e no leite de mães normais nos 6 pontos no tempo pós-parto são mostradas nas Figuras 1 a 13 e Tabelas 1 a 3.

[0245] Mulheres com mastite subclínica apresentam concentrações de ferro, manganês, magnésio, cobre, zinco e selênio mais altas; e concentrações mais baixas de cálcio e fósforo em seu leite em comparação com mulheres normais.

[0246] Os ácidos graxos n-3 ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico) estão presentes em concentrações mais baixas no leite das mulheres com mastite subclínica em comparação com as mulheres normais.

[0247] Além disso, a alfa-lactalbumina, a lactoferrina e a albumina estão presentes em concentrações mais altas no leite de mulheres com mastite subclínica em comparação com mulheres normais.

Dia 2 Dia 17 Dia 30 Dia 60 Dia 90 Dia 120 Valor P geral Ferro Qualquer 601 ± 392 461 ± 310 346 ± 162 292 ± 141 264 ± 140 216 ± 103 <0,0001 (µg/L) MSC (n= 91) (n=97) (n=84) (n=78) (n=74) (n=71) Normal 415 ± 193 389 ± 186 326 ± 137 278 ± 132 245 ± 127 262 ± 502 (n=111) (n=192) (n=174) (n=166) (n=156) (n=148) Manganês Qualquer 6,6 ± 3,9 4,4 ± 1,6 3,7 ± 1,1 4,5 ± 3,4 3,4 ± 0,8 3,7 ± 0,9 <0,0001 (µg/L) MSC (n= 79) (n=41) (n=26) (n=22) (n=19) (n=13) Normal 5,8 ± 3,1 3,9 ± 1,3 3,5 ± 1,0 3,4 ± 0,9 3,3 ± 0,7 4,0 ± 2,2 (n=92) (n=103) (n=75) (n=45) (n=36) (n=37) Magnésio Qualquer 38,5 ± 8,5 35,0 ± 6,2 34,2 ± 5,5 37,4 ± 5,8 38,8 ± 5,4 38,4 ± 5,4 0,076 (mg/L) MSC (n=87) (n=94) (n=80) (n=76) (n=72) (n=69) Normal 38,0 ± 6,5 34,3 ± 5,7 33,9 ± 5,2 36,5 ± 5,6 38,6 ± 5,9 39,3 ± 6,2 (n=106) (n=171) (n=149) (n=162) (n=154) (n=145) Cobre Qualquer 533 ± 267 529 ± 135 423 ± 86 325 ± 74 268 ± 72 221 ± 69 <0,001 (µg/L) MSC (n=91) (n=97) (n=84) (n=78) (n=74) (n=71) Normal 472 ± 175 522 ± 111 422 ± 89 304 ± 76 256 ± 77 228 ± 89 (n=111) (n=192) (n=174) (n=166) (n=156) (n=148) Zinco Qualquer 7975 ± 3234 ± 2422 ± 906 1616 ± 1113 ± 521 996 ± 520 <0,0001 (µg/L) MSC 3093 1274 (n=84) 1208 (n=74) (n=71) (n= 91) (n=97) (n=78) Normal 7178 ± 3590 ± 2686 ± 872 1599 ± 692 1219 ± 571 1031 ± 563 2734 1051 (n=174) (n=166) (n=153) (n=148) (n=111) (n=192) Selênio Qualquer 37 ± 19 19 ± 6 15 ± 3 12 ± 3 10 ± 2 9±2 <0,0001 (µg/L) MSC (n= 91) (n=97) (n=84) (n=78) (n=74) (n=71) Normal 26 ± 12 18 ± 3 15 ± 3 12 ± 2 10 ± 2 10 ± 6 (n=111) (n=192) (n=174) (n=166) (n=156) (n=148) Cálcio Qualquer 256 ± 73 281 ± 54 296 ± 47 299 ± 41 288 ± 45 271 ± 36 0,003 (mg/L) MSC (n=91) (n=97) (n=84) (n=78) (n=74) (n=71) Normal 295 ± 72 293 ± 55 296 ± 51 301 ± 45 297 ± 48 284 ± 42 (n=111) (n=192) (n=174) (n=166) (n=156) (n=148) Fósforo Qualquer 109 ± 41 150 ± 31 149 ± 29 138 ± 21 128 ± 18 126 ± 20 <0,0001 (mg/L) MSC (n=91) (n=97) (n=84) (n=78) (n=74) (n=71) Normal 144 ± 32 169 ± 28 155 ± 24 139 ± 21 133 ± 20 131 ± 22 (n=111) (n=192) (n=174) /n=166) (n=156) fn=148)

[0248] Tabela 1. Concentrações de minerais e oligoelementos do leite humano através da lactação pela presença ou ausência de mastite subclínica (MSC). Dia 2 Dia 17 Dia 30 Dia 60 Dia 90 Dia 120 Valor P geral DHA (mg/100 mL) Qualquer 11,5 ± 7,8 12,6 + 9,0 10,5 + 5,8 10,3 ± 6,1 9,5 ± 10,0 8,4 ± 5,9 0,0001 MSC (n=103) (n=103) (n=89) (n=78) (n=77) (n=74) Normal 13,7 ± 8,8 15,1 ± 13,6 ± 11,3 ± 8,4 10,8 ± 6,9 11,7 ± (n=158) 10,2 11,0 (n=155) (n=144) 15,8 (n=187) (n=168) (n=137) ácido Qualquer 13,9 ± 21,8 ± 24,5 ± 27,8 ± 27,3 ± 23,6 ± <0,0001 octadecatrienoico MSC 11,2 19,4 18,7 24,7 27,6 18,8 18:3 n-3 (n=100) (n=104) (n=90) (n=80) (n=77) (n=76) (mg/100 mL) Normal 17,0 ± 29,1 ± 29,3 ± 32,8 ± 27,9 ± 32,3 ± 11,3 21,9 23,7 33,8 24,7 30,4 (n=159) (n=187) (n=171) (n=161) (n=154) (n=144)

[0249] Tabela 2. Concentrações de ácidos graxos do leite humano através da lactação pela presença ou ausência de mastite subclínica (MSC). Dia 2 Dia 17 Dia 30 Dia 60 Dia 90 Dia 120 Valor P geral Alfa- Qualquer 3232,8 ± 3131,2 ± 2893,1 ± 2469,0 ± 2249,5 ± 2089,4 ± <0,0001 lactalbumina MSC 685,0 548,4 506,6 466,5 422,3 415,8 (ng/µL) (n=102) (n=104) (n=91) (n=81) (n=77) (n=75) Normal 3043,6 ± 3036,6 ± 2740,7 ± 2278,1 ± 2126,7 ± 2015,8 ± 597,1 544,4 499,1 372,4 374,1 378,0 (n=128) (n=187) (n=170) (n=162) (n=156) (n=147) Lactoferrina Qualquer 7053,9 ± 3315,6 ± 2430,8 ± 1757,1 ± 1543,1 ± 1510,4 ± <0,0001 (ng/µL) MSC 3832,6 2486,1 2176,9 955,4 699,2 1502,3 (n=102) (n=104) (n=91) (n=81) (n=77) (n=75) Normal 5340,2 ± 2379,4 ± 1765,9 ± 1339,0 ± 1298,6 ± 1468,2 ± 2372,7 913,4 680,7 485,6 810,1 3269,1 (n=128) (n=187) (n=170) (n=162) (n=156) (n=147) Albumina Qualquer 1534,6 ± 729,2 ± 659,1 ± 536,5 ± 474,7 ± 483,8 ± <0,0001 (ng/µL) MSC 1821,9 671,1 655,3 190,5 130,2 388,8 (n=102) (n=104) (n=91) (n=81) (n=77) (n=75) Normal 813,3 ± 551,8 ± 529,7 ± 469,2 ± 455,8 ± 516,8 ± 1342,5 160,6 301,8 123,3 126,8 894,1 (n=128) (n=187) (n=170) (n=162) (n=156) (n=147)

[0250] Tabela 3. Concentrações de proteínas do leite humano através da lactação pela presença ou ausência de mastite subclínica (MSC). Exemplo 2 Métodos População de estudo

[0251] Este estudo utilizou dados do 'ATLAS’, um estudo longitudinal, observacional em sete países europeus entre dezembro de 2012 e janeiro de 2016. O estudo foi aprovado pelos conselhos de ética institucionais e locais de cada centro e registrado no ClincalTrials.gov com o identificador NCT01894893. Dados demográficos maternos e infantis, antropometria e história médica foram coletados por enfermeiros e auxiliares de pesquisa treinados e certificados.

[0252] O leite humano foi coletado de 305 mulheres em 7 países europeus. Destas, 185 forneceram informações sobre a ingestão alimentar. Oito mulheres foram ainda excluídas devido à falta de informações, resultando em um tamanho amostral final de 177 mulheres. O termo de consentimento livre e esclarecido foi obtido de todas as mulheres em seus respectivos idiomas locais.

[0253] Análise da MSC

[0254] As amostras de leite foram obtidas utilizando um extrator de leite elétrico (Medela Symphony, Suíça) da mesma mama durante todo o período de estudo, às 11:00 h ± 2: 00 h para evitar a influência circadiana. As amostras foram primeiro congeladas a -18°C até a entrega ao Centro de Pesquisa Nestlé (Lausanne, Suíça) e depois a - 80°C para análise adicional.

[0255] A MSC foi avaliada no início da lactação, nas visitas 1 (0 a 3 dias pós-parto), 2 (17 dias pós-parto ± 3 dias) e 3 (30 dias pós-parto ± 3 dias). A MSC foi definida como tendo uma razão de potássio de sódio (Na/K) no leite materno mais alta que 0,6 em qualquer uma das três visitas. A MSC moderada foi definida como a razão Na/K entre > 0,6 e

≤ 1, enquanto a MSC grave como a razão Na/K > 1.

[0256] Dados de ingestão dietária

[0257] A ingestão dietária foi avaliada com os diários alimentares de 3 dias nas visitas 2 (V2) e 3 (V3). As informações dietárias foram então traduzidas para ingestões de nutrientes e grupos de alimentares pela Nutrilog usando o banco de dados francês de classificação de grupos alimentares e composição de nutrientes (CIQUAL).

[0258] Dietas que continham menos de 1074,8 kcal ou mais de 4776,9 kcal de energia foram consideradas com resultados fora dos limites e foram removidas. Após a remoção das dietas atípicas do conjunto de dados, considerou-se cada visita na V2-V3 por sua vez e o subconjunto de indivíduos que compareceram a essa visita. Para cada visita, removeu-se um indivíduo e todas as informações dietárias associadas de uma determinada visita se menos de duas dietas atípica fossem relatadas para esse indivíduo ao longo do período de pesquisa de três dias para essa visita. Por exemplo, se um indivíduo S1 compareceu à visita V2 e relatou uma dieta atípica e uma dieta não atípica para essa visita, então removeu-se S1 e todas as dietas relatadas para V2 do conjunto de dados. Os 177 indivíduos que compareceram a pelo menos uma visita foram retidos para análise.

[0259] Uma vez calculado o consumo médio diário, este foi normalizado pela ingestão média diária de energia para aquela visita em kcal/dia. Esse consumo ajustado foi então calculado em média em todas as visitas que cada indivíduo participou dentro do subconjunto. Como etapa final, foi realizada a normalização para média zero e o desvio padrão de 1. Um exemplo de conduta para um indivíduo que participou de todas as visitas em S2 (visitas V2-V3).

[0260] Os valores de referência dietários para a ingestão de nutrientes para mulheres lactantes foram extraídos do relatório de síntese da Autoridade Europeia de Segurança Alimentar (EFSA) sobre

Valores de referência dietética para nutrientes. Análise estatística

[0261] Utilizou-se a regressão multivariável para examinar a associação entre a ingestão nutricional em relação à MSC. O teste de Wilcox foi utilizado para calcular os valores de p.

[0262] As análises foram executadas com R.

[0263] Os resultados são relatados na Tabela 4.

[0264] Também se utilizou a regressão multivariável para examinar a associação entre a ingestão nutricional em relação à MSC. O modelo estatístico tem o status de MSC, o país e modo de parto como covariáveis e as estimativas de contraste foram calculadas para mostrar as diferenças entre o grupo MSC e o grupo não MSC. Uma transformação logarítmica foi aplicada, uma vez que os dados de ingestão de nutrientes de modo geral têm uma distribuição assimétrica.

[0265] As análises foram executadas com o software estatístico R ver 3.2.1 e a massa e o contraste dos pacotes foram usados para modelagem e estimativa.

[0266] Os resultados são relatados na Tabela 5. Resultados

[0267] A Tabela 4 relata a ingestão mediana de certos nutrientes para mulheres com MSC (ou seja, aquelas com razão entre potássio e sódio no leite humano (Na/K) >0,6 durante qualquer uma das seguintes visitas: dias 2, 17 e 30), e para mulheres sem MSC (ou seja, aquelas sem MSC são definidas como tendo uma razão Na/K ≤0,6 durante qualquer uma das seguintes visitas: dias 2, 17 e 30).

[0268] Estes dados mostram que no grupo de mulheres com mastite subclínica certos minerais (ou seja, ferro, manganês, magnésio, cobre, cálcio, fósforo) estavam presentes em quantidades menores na dieta em comparação com a dieta das mulheres que não tinham mastite subclínica.

[0269] De modo similar, os dados mostram que no grupo de mulheres com mastite subclínica certa vitamina E estava presente em quantidades mais baixas na dieta, em comparação com a dieta de mulheres que não tinham mastite subclínica.

[0270] A Tabela 5 relata a ingestão mediana de zinco e selênio para mulheres com MSC (ou seja, aquelas com razão entre potássio e sódio no leite humano (Na/K) >0,6 durante qualquer uma das seguintes visitas: dias 2, 17 e 30), e para mulheres sem MSC (ou seja, aquelas sem MSC são definidas como tendo uma razão Na/K ≤0,6 durante qualquer uma das seguintes visitas: dias 2, 17 e 30).

[0271] Estes dados mostram que no grupo de mulheres com mastite subclínica certos minerais além dos mencionados anteriormente (ou seja, zinco e selênio) estavam presentes em quantidades mais baixas na dieta em comparação com a dieta das mulheres que não tinham mastite subclínica.

[0272] Estas descobertas fornecem, dessa forma, evidências adicionais de que a suplementação de um ou mais desses nutrientes na dieta pode prevenir e/ou tratar as mastites subclínicas. Tabela 4 Ingestão mediana de energia e nutrientes Diferença na Mulheres com MSC* em Mulheres com MSC em ingestão mediana Dieta média de V2-V3 qualquer visita n=52 nenhuma visita n=125 teste-wilcox, entre MSC e não Mediana Mediana valor de p MSC Magnésio, mg 265 313 0,01 -48,003 Fósforo, mg 1254 1340 0,01 -85,926 Cálcio, mg 744 974 0,00 -229,719 Manganês, mg 2 3 0,02 -0,498 Ferro, total, mg 9 11 0,06 -1,632 Cobre, mg 1,2 1,4 0,01 -0,213 Vitamina E, mg 8 10 0,02 -1,467

Tabela 5 Ingestão mediana de energia e nutrientes Diferença na Dieta média de Mulheres com MSC* Mulheres com MSC em Valor de p ingestão média V2-V3 em qualquer visita n=52 nenhuma visita n=125 contraste geométrica entre Média geométrica Média geométrica MSC e não MSC estimada estimada Zinco, mg 9,46 10,84 0,0325 -1,39 Selênio, µg 130,96 156,64 0,0064 -25,68

[0273] Todas as publicações mencionadas no relatório descritivo acima estão aqui incorporadas, a título de referência. Várias modificações e variações dos agentes, composições, usos e métodos descritos da presente invenção serão evidentes aos versados na técnica sem se afastar do escopo e espírito da presente invenção. Embora a presente invenção tenha sido descrita em relação a modalidades preferenciais específicas, deve-se compreender que a invenção tal como reivindicada não se destina a ser indevidamente limitada a essas modalidades específicas. De fato, várias modificações dos modos descritos para realização da invenção, os quais são óbvios ao versado na técnica, se destinam a estar dentro do escopo das reivindicações apresentadas a seguir.

Claims (16)

REIVINDICAÇÕES

1. Mineral, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo que consiste em ferro, manganês, magnésio e uma combinação de dois ou mais dos mesmos, para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

2. Mineral para uso, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a combinação compreende ferro e manganês, de preferência em que a combinação compreende ferro, manganês e magnésio.

3. Mineral para uso, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o mineral está em combinação com um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em cobre, zinco, selênio, cálcio e fósforo.

4. Mineral para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que o mineral está em combinação com vitamina E.

5. Mineral para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que a combinação compreende ferro, manganês, cobre, zinco, selênio e vitamina E.

6. Mineral para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizado pelo fato de que o mineral está em combinação com: (a) um ácido graxo n-3, de preferência em que o mineral está em combinação com um ácido graxo selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico); (b) uma proteína selecionada do grupo que consiste em alfa- lactalbumina, lactoferrina e albumina; e/ou (c) fosfatidilcolina e/ou lecitina.

7. Ácido graxo n-3 para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, caracterizado pelo fato de que, de preferência, o ácido graxo é selecionado do grupo que consiste em ácido docosaexaenoico (DHA) e ácido octadecatrienoico 18:3 n-3 (ácido alfa-linolênico).

8. Proteína, caracterizada pelo fato de que é selecionada do grupo que consiste em alfa-lactalbumina, lactoferrina e albumina para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.

9. Mineral, ácido graxo ou proteína para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizados pelo fato de que o mineral, ácido graxo ou proteína está sob a forma de uma composição, de preferência uma composição nutricional materna, de preferência para uso durante a lactação e/ou gravidez.

10. Mineral, ácido graxo ou proteína para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizados pelo fato de que a mastite é mastite subclínica ou mastite clínica, de preferência mastite subclínica.

11. Mineral, ácido graxo ou proteína para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizados pelo fato de que o indivíduo está em risco de sofrer de mastite subclínica ou mastite clínica.

12. Mineral, ácido graxo ou proteína para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizados pelo fato de que o tratamento ou a prevenção aumenta a probabilidade de o indivíduo iniciar e/ou continuar a amamentação; e/ou aumenta a probabilidade de o indivíduo amamentar exclusivamente seu bebê e/ou aumenta a duração da amamentação do indivíduo.

13. Mineral, ácido graxo ou proteína para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizados pelo fato de que o indivíduo é capaz de amamentar durante ao menos

4 meses, de preferência 4 a 24 meses, opcionalmente 4 a 6 meses.

14. Mineral, ácido graxo ou proteína para uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações precedentes, caracterizados pelo fato de que o tratamento ou a prevenção aumenta a qualidade e/ou a quantidade do leite materno do indivíduo.

15. Composição para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo, caracterizada pelo fato de que a composição compreende um mineral ou combinação, ácido graxo ou proteína, como definidos em qualquer uma das reivindicações precedentes.

16. Composição, caracterizada pelo fato de que compreende um ou mais minerais selecionados do grupo que consiste em ferro, manganês e magnésio para uso no tratamento ou prevenção de mastite em um indivíduo.