BR112020022245A2 - compostos de tetra-hidrobenzafluoro[2,3-c]piridina e beta-carbolina para o tratamento, alívio e prevenção de distúrbios associados com agregação de tau - Google Patents

compostos de tetra-hidrobenzafluoro[2,3-c]piridina e beta-carbolina para o tratamento, alívio e prevenção de distúrbios associados com agregação de tau Download PDF

Info

Publication number
BR112020022245A2
BR112020022245A2 BR112020022245-3A BR112020022245A BR112020022245A2 BR 112020022245 A2 BR112020022245 A2 BR 112020022245A2 BR 112020022245 A BR112020022245 A BR 112020022245A BR 112020022245 A2 BR112020022245 A2 BR 112020022245A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
nmr
compound
mhz
dmso
tau
Prior art date
Application number
BR112020022245-3A
Other languages
English (en)
Inventor
Sreenivasachary NAMPALLY
Emanuele Gabellieri
Jerome Molette
Original Assignee
Ac Immune Sa.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ac Immune Sa. filed Critical Ac Immune Sa.
Publication of BR112020022245A2 publication Critical patent/BR112020022245A2/pt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/145—Amines having sulfur, e.g. thiurams (>N—C(S)—S—C(S)—N< and >N—C(S)—S—S—C(S)—N<), Sulfinylamines (—N=SO), Sulfonylamines (—N=SO2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/27—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carbamic or thiocarbamic acids, meprobamate, carbachol, neostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/444—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring heteroatom, e.g. amrinone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/473—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. acridines, phenanthridines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5386—1,4-Oxazines, e.g. morpholine spiro-condensed or forming part of bridged ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A61K31/5513—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D513/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

&nbsp; COMPOSTOS DE TETRA-HIDROBENZAFLUORO[ 2,3-C]PIRIDINA E BETA-CARBOLINA PARA O TRATAMENTO, ALÍVIO E PREVENÇÃO DE DISTÚRBIOS ASSOCIADOS COM AGREGAÇÃO DE TAU. A presente invenção refere-se aos novos compostos que podem ser usados no tratamento, alívio ou prevenção de um grupo de distúrbios e anormalidades associados com agregados de proteína Tau (unidade associada à Tubulina) incluindo, porém não limitados a, Emaranhados Neurofibrilares (NFTs), tal como doença de Alzheimer (DA).

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COM- POSTOS DE TETRA-HIDROBENZAFLUORO[2,3-C]PIRIDINA E BE- TA-CARBOLINA PARA O TRATAMENTO, ALÍVIO E PREVENÇÃO DE DISTÚRBIOS ASSOCIADOS COM AGREGAÇÃO DE TAU". Campo da Invenção
[001] A presente invenção refere-se aos novos compostos que podem ser usados no tratamento, alívio ou prevenção de um grupo de distúrbios e anormalidades associadas com os agregados de proteína Tau (unidade associada à tubulina) incluindo, porém não limitados aos, Emaranhados Neurofibrilares (NFTs), tais como doença de Alzheimer (DA). Antecedentes da Invenção
[002] Muitas doenças do envelhecimento são baseadas em ou associadas com depósitos extracelulares ou intracelulares de proteí- nas amiloides ou semelhantes às amiloides que contribuem para a pa- togênese, bem como para a progressão da doença. A proteína amiloi- de melhor caracterizada que forma agregados extracelulares é a beta amiloide (Aβ). Outros exemplos de proteínas amiloides que formam agregados extracelulares são o príon, ATTR (transtirretina) ou ADan (ADanPP). Proteínas semelhantes à amiloide, que formam principal- mente agregados intracelulares, incluem, porém não estão limitadas à Tau, alfa-sinucleína, proteína 43 de ligação ao DNA-TAR (TDP-43), e huntingtina (htt). Doenças envolvendo agregados de Tau são geral- mente listadas como tauopatias, tal como DA.
[003] Depósitos amiloides ou semelhantes aos amiloides resul- tam do dobramento incorreto de proteínas seguido por agregação para dar conjuntos de folha β em que vários peptídeos ou proteínas são mantidos juntos por ligações de hidrogênio intermoleculares. Embora proteínas amiloides ou semelhantes às amiloides tenham diferentes sequências de aminoácidos primários, seus depósitos frequentemente contêm muitos constituintes moleculares compartilhados, em particular a presença de estruturas quaternárias de folha β. A associação entre os depósitos de amiloides e doenças permanece pouco clara. Uma faixa diversificada de agregados de proteínas, incluindo tanto aqueles associados quanto não associados com doenças patológicas, foram considerados tóxicos, sugerindo que as características moleculares comuns da amiloide estão implicadas ou responsáveis pelo início da doença (Bucciantini et al., Nature, 2002, 416, 507-11). Vários multíme- ros de peptídeos ou proteínas agregados em folha β também foram associados à toxicidade para diferentes peptídeos ou proteínas que variam de dímeros a oligômeros solúveis de baixo peso molecular, protofibrilas ou depósitos fibrilares insolúveis.
[004] A doença de Alzheimer (DA) é uma doença neurológica acreditada ser causada principalmente por placas amiloides, um acú- mulo extracelular de depósito anormal de agregados de Aβ (beta- amiloide) no cérebro. As outras principais características neuropatoló- gicas na DA são os emaranhados neurofibrilares intracelulares (NFT) que se originam pela agregação da proteína Tau hiperfosforilada, Tau mal dobrada ou Tau patológica e seus conformadores. A DA comparti- lha sua etiopatologia com muitas tauopatias neurodegenerativas, em particular com tipos específicos de demência frontotemporal (DFT). A proteína Tau é uma proteína livremente solúvel, "naturalmente desdo- brada", que se liga avidamente aos microtúbulos (MT) para promover sua montagem e estabilidade. Os TM são de grande importância para a integridade do citoesqueleto dos neurônios - e desse modo, para a formação e funcionamento adequados dos circuitos neuronais, conse- quentemente para o aprendizado e memória. A ligação de Tau ao MT é controlada por fosforilação e desfosforilação dinâmica, como de- monstrado principalmente in vitro e em células não neuronais. No cé- rebro com DA, a patologia Tau (tauopatia) se desenvolve mais tarde do que a patologia amiloide, porém é ainda discutido de forma contro- versa se a proteína Aβ é o agente causador na DA, que constitui a es- sência da assim chamada hipótese da cascata amiloide (Hardy et al., Science 1992, 256, 184-185; Musiek et al., Nature Neurosciences 2015, 18(6), 800-806). Os mecanismos exatos que ligam a amiloide à patologia de Tau permanecem amplamente desconhecidos, porém são propostos para envolver a ativação de vias de sinalização neuronal que atuam sobre ou por GSK3 e cdk5 como as principais "Tau- quinases" (Muyllaert et al., Rev. Neurol. (Paris), 2006, 162, 903-7; Muyllaert et al., Genes Brain and Behav. 2008, Suppl 1, 57-66). Mes- mo que a tauopatia se desenvolva mais tarde do que a amiloide, não é apenas um efeito secundário inocente, mas um grande executor pato- lógico na DA. Em modelos experimentais de camundongos, os defei- tos cognitivos causados pela patologia amiloide são quase completa- mente aliviados pela ausência da proteína Tau (Roberson et al., Sci- ence, 2007, 316(5825), 750-4) e a gravidade da disfunção cognitiva e demência se correlacionam com a tauopatia, não com a patologia ami- loide.
[005] Doenças que envolvem agregados de Tau são geralmente listadas como tauopatias e incluem, porém não estão limitadas à, do- ença de Alzheimer (DA), DA familiar, PART (tauopatia primária relaci- onada à idade), doença de Creutzfeldt-Jacob, demência pugilística, síndrome de Down, doença Gerstmann-Sträussler-Scheinker (GSS), miosite de corpos de inclusão, angiopatia amiloide cerebral por proteí- na príon, lesão cerebral traumática (TBI), esclerose lateral amiotrófica (ELA), complexo Parkinsonismo-demência de Guam, doença do neu- rônio motor não Guamaniana com emaranhados neurofibrilares, doen- ça com grãos argirofílicos, degeneração corticobasal (CBD), emara- nhados neurofibrilares difusos com calcificação, demência frontotem- poral com parkinsonismo ligado ao cromossomo 17 (FTDP-17), doen-
ça de Hallervorden-Spatz, atrofia de múltiplos sistemas (MSA), doença de Niemann-Pick tipo C, degeneração pálido-ponto-nigral, doença de Pick (PiD), gliose subcortical progressiva, paralisia supranuclear pro- gressiva (PSP), panencefalite esclerosante subaguda, demência pre- dominante emaranhada, Parkinsonismo pós-encefalítico, distrofia mio- tônica, panencefalopatia de esclerose subaguda, mutações em LRRK2, encefalopatia traumática crônica (CTE), demência familiar bri- tânica, demência familiar dinamarquesa, outras degenerações lobares frontotemporais, Parkinsonismo de Guadalupe, neurodegeneração com acúmulo de ferro no cérebro, retardo mental relacionado a SLC9A6, tauopatia de substância branca com inclusões gliais globula- res, epilepsia, demência por corpos de Lewy (LBD), comprometimento cognitivo leve (MCI), esclerose múltipla, doença de Parkinson, demên- cia relacionada ao HIV, diabetes de início na idade adulta, amiloidose cardíaca senil, glaucoma, acidente vascular cerebral isquêmico, psico- se na DA e doença de Huntington. (Williams et al., Intern.
Med.
J., 2006, 36, 652-60; Kovacs et al., J Neuropathol Exp Neurol. 2008; 67(10): 963–975; Higuchi et al., Neuropsychopharmacology - 5th Ge- neration of Progress, 2002, Seção 9, Capítulo 94: 1339-1354; Hilton et al., Acta Neuropathol. 1995;90(1):101-6; Iqbal et al., Biochimica et Bi- ophysica Acta 1739 (2005) 198– 210; McQuaid et al., Neuropathol Appl Neurobiol. 1994 Apr;20(2):103-10; Vossel et al., Lancet Neurol 2017; 16: 311–22; Stephan et al., Molecular Psychiatry (2012) 17, 1056–1076; Anderson et al., Brain (2008), 131, 1736-1748; Savica et al., JAMA Neurol. 2013;70(7):859-866; Brown et al.
Molecular Neuro- degeneration 2014, 9:40; El Khoray et al., Front.
Cell.
Neurosci., 2014, Volume 8, Article22: 1-18; Tanskanen et al., Ann.
Med. 2008;40(3):232-9; Gupta et al., CAN J OPHTHALMOL—VOL. 43, NO. 1, 2008: 53-60; Dickson et al., Int J Clin Exp Pathol 2010;3(1):1-23; Fernández-Nogales et al., Nature Medicine, 20, 881–885 (2014); Bi et al., Nature Communications volume 8, número do artigo: 473 (2017); Murray et al., Biol Psychiatry. 1 de Abril de 2014; 75(7): 542–552).
[006] De todos os agentes em ensaios clínicos para o tratamento da doença de Alzheimer em 2017, os que visam Tau são muito escas- sos e representam apenas 8% dos ensaios clínicos de Fase II (Cummings et al., Alzheimer’s & Dementia: Translational Research & Clinical Interventions 3 (2017) 367-384). As abordagens terapêuticas atuais que têm como alvo a proteína Tau compreendem principalmen- te abordagens baseadas em anticorpos com a principal limitação de ter como alvo apenas Tau extracelular. Dentre as abordagens que usam moléculas pequenas, diversos inibidores da Tau cinase foram desenvolvidos, apesar de serem bastante desafiadores com respeito à toxicidade e especificidade. No entanto, atualmente apenas um inibi- dor da cinase, o Nilotinibe, é testado em ensaios clínicos. Por último, entre os inibidores da agregação de Tau, apenas um, LMTX, está atu- almente em ensaios clínicos (Cummings et al., 2017). Embora nos úl- timos anos, os tratamentos com base em Tau tenham se tornado um ponto de foco crescente, ainda há uma grande necessidade de agen- tes terapêuticos adicionais que visem os conformadores de Tau pato- lógicos que são conhecidos ou presumivelmente causam tauopatias.
[007] WO2011/128455 refere-se aos compostos específicos que são adequados para o tratamento de distúrbios associados com prote- ínas amileoides ou proteínas semelhantes à amiloide. Descrição das Figuras
[008] Figura 1: Redução de desdobramento intracelular de Tau por imunocitoquímica em células de neuroblastoma diferenciadas com o Exemplo 44. Os dados são mostrados como +SD médio. Sumário da Invenção
[009] Foi um objetivo da presente invenção fornecer compostos que podem ser usados no tratamento, alívio ou prevenção de um gru-
po de distúrbios e anormalidades associadas aos agregados de prote- ína Tau incluindo, porém não limitados a, NFTs, tal como a doença de Alzheimer (AD). Além disso, existe uma necessidade na técnica de compostos que possam ser usados como agentes terapêuticos para (a) diminuir agregados de Tau/NFTs, por reconhecimento de Tau agregada e desagregação de Tau, por exemplo, alterando a confor- mação molecular do agregado de Tau, e/ou (b) prevenir a formação de agregados de Tau e/ou (c) interferir intracelularmente com agregados de Tau. Os presentes inventores descobriram surpreendentemente que estes objetivos podem ser alcançados pelos compostos de fórmu- la (I), como descrito aqui a seguir.
[0010] Os compostos de fórmula (I) exibem uma alta capacidade na diminuição dos agregados de Tau, reconhecimento de Tau agrega- da e desagregação de Tau, por exemplo, alteração da conformação molecular do agregado de Tau. Alguns compostos de fórmula (I) previ- nem a formação de agregados de Tau e/ou interferem intracelularmen- te com agregados de Tau. Sem desejar estar ligado à teoria, assume- se que os compostos de fórmula (I) inibem a agregação de Tau ou de- sagregação de agregados de Tau pré-formados, incluindo quando pre- sentes intracelularmente. Devido às suas características únicas de de- sign, estes compostos apresentam propriedades tais como lipofilicida- de e peso molecular, captação cerebral e farmacocinética, permeabili- dade celular, solubilidade e estabilidade metabólica apropriados, a fim de ser um medicamento de sucesso para o tratamento, alívio ou pre- venção de tauopatias.
[0011] Análises ultraestruturais mostraram que as inclusões de Tau são compostas de filamentos helicoidais emparelhados (PHF) ou filamentos retos (SF). Análises estruturais de alta resolução mostraram que estes filamentos sãos compostos por uma região central que compreende os aminoácidos 306-378 de Tau que adaptam uma estru-
tura de beta/beta-hélice cruzada. Os compostos desta invenção po- dem reconhecer a Tau agregada ou Tau desagregada, por exemplo, alterando a conformação molecular do agregado de Tau, e podem, portanto, ser esperados facilitar a clearance de Tau.
[0012] Além disso, foi demonstrado que Tau é capaz de se propa- gar de célula para célula e que certas formas de Tau (que agem como sementes) são capazes de induzir a mudança estrutural da proteína Tau nativa dentro da célula saudável para sofrer dobramento incorreto e agregação. Considera-se que a Tau agregada é responsável pela semeadura e, portanto, pela disseminação da patologia Tau. Os com- postos desta invenção podem interferir intracelularmente com a Tau agregada e podem, portanto, ser esperados reduzir a disseminação de patologia Tau e finalmente prevenir ou reduzir os déficits cognitivos associados em DA.
[0013] A presente invenção descreve os novos compostos de fór- mula (I) tendo as capacidades de diminuir os agregados de Tau, reco- nhecer a Tau agregada e Tau desagregada, por exemplo, mudando a conformação molecular de agregado de Tau.
[0014] A presente invenção descreve alguns novos compostos de fórmula (I) tendo as capacidades de prevenir a formação de agregados de Tau e/ou interferir intracelularmente com os agregados de Tau.
[0015] A presente invenção fornece métodos para o tratamento de distúrbios e anormalidades associados com agregados de proteína Tau incluindo, porém não limitados a, NFTs, usando um composto de fórmula (I) ou uma composição farmacêutica do mesmo. A presente invenção também fornece uma composição farmacêutica que compre- ende um composto de fórmula (I) e um veículo ou excipiente farma- ceuticamente aceitável.
[0016] A presente invenção é sumariada nos seguintes itens:
[0017] 1. Um composto de fórmula (I):
(I)
[0018] ou estereoisômeros, misturas racêmicas, tautômeros, sais farmaceuticamente aceitáveis, profármacos, hidratos, solvatos e poli- morfos do mesmo;
[0019] em que
[0020] A é selecionado do grupo que consiste em ,
N E N G R N N N N N V , , , , ,
N e , em que , N , N ,
N E N G R
N N V , , , e podem ser ligados ao átomo de N em qualquer posição disponível, em que o anel de 5 membros contendo E e V é insaturado,
N N
N e em que , N , N , N , N e
G G é substituído por um ou mais substituintes Rj;
[0021] B é selecionado do grupo que consiste em O e NRa;
[0022] E e V são independentemente selecionados do grupo que consiste em N, NR5, O e S;
[0023] G é selecionado do grupo que consiste em um anel benze- no e um anel piridina;
[0024] J é selecionado do grupo que consiste em O, N–R1 e CH2 ou J é selecionado do grupo que consiste em CH ou C se J for ligado a R2;
[0025] Y, Y1, Y2 e Y3 são CZ;
[0026] Z é independentemente selecionado do grupo que consiste em H, halogênio, O–alquila, alquila e CN;
[0027] R é independentemente selecionado do grupo que consiste em e –NR3R4;
[0028] Ra é selecionado do grupo que consiste em H e alquila;
[0029] Rd, Re, Rf, e Rg são independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila, ou quaisquer dois de Rd, Re, Rf, e Rg podem ser ligados para formar um anel de 3 a 8 membros;
[0030] Rj é independentemente selecionado do grupo que consiste s r
N J em –halogênio, –O–alquila, –NR R , –CN, 3 4 t u, ,e , em que uma ligação em ponte contendo átomo de car- bono C1-2 ou uma ligação pode estar presente entre um átomo de car- bono e o átomo de carbono c ou d ou em que uma ligação em ponte contendo átomo de carbono C1-2 ou uma ligação pode estar presente entre o átomo de carbono b e o átomo de carbono c ou d;
[0031] R1 é selecionado do grupo que consiste em H e alquila;
[0032] R2 é independentemente selecionado do grupo que consis- te em alquila, ou –O–alquila e em que se dois R2 forem geminais, eles poderão ser ligados para formar um anel de 3 a 5 membros;
[0033] R3 e R4 são independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila;
[0034] R5 é selecionado do grupo que consiste em H e alquila;
[0035] n é 0, 1, 2, 3 ou 4;
[0036] r e s são independentemente 0, 1, 2 ou 3; e
[0037] t e u são independentemente 1, 2 ou 3.
[0038] 2. O composto de acordo com o item 1, que é um composto de fórmula (Ia): (Ia)
[0039] em que A, Ra, Rd, Re, Rf, Rg, Y, Y1, Y2 e Y3 são como defi- nidos no item 1.
[0040] 3. O composto de acordo com qualquer um dos itens 1 e 2, em que A é N , em que N podem ser ligados ao átomo de N em qualquer posição disponível, em que A é substituído por um ou mais substituintes Rj, e em que Rj é como definidos no item 1.
[0041] 4. O composto de acordo com qualquer um dos itens 1 a 3, que é um composto da fórmula (Ib):
(Ib)
[0042] em que Ra, Rj e Z são como definidos no item 1 e p é 1 ou
2.
[0043] 5. O composto de acordo com qualquer um dos itens 1 a 4, em que o composto é selecionado do grupo que consiste em
O N F N N NH O F N N N O NH
[0044] 6. Uma composição farmacêutica que compreende um composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5 e opcional- mente um veículo ou excipiente farmaceuticamente aceitáveis.
[0045] 7. O composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, para uso como um medicamento.
[0046] 8. O composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, para uso no tratamento, alívio ou prevenção de um distúrbio ou anormalidade associado com agregados de proteína Tau.
[0047] 9. O composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, para uso no decréscimo de agregação de Tau.
[0048] 10. O composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, para uso na prevenção da formação de agregados de Tau e/ou para uso na inibição de agregação de Tau.
[0049] 11. O composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, para uso na interferência intracelular com os agregados de Tau.
[0050] 12. Um método de tratamento, prevenção ou alívio de um distúrbio associado com os agregados de proteína Tau, o método compreendendo administrar uma quantidade eficaz de um composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, a um indivíduo em ne- cessidade do mesmo.
[0051] 13. Um método de diminuição de agregação de Tau, o mé- todo compreendendo administrar uma quantidade eficaz de um com- posto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, a um indivíduo em necessidade do mesmo.
[0052] 14. Um método de prevenção da formação de agregados de Tau e/ou de inibição de agregação de Tau, o método compreen- dendo administrar uma quantidade eficaz de um composto como defi- nido em qualquer um dos itens 1 a 5, a um indivíduo em necessidade do mesmo.
[0053] 15. Um método de interferência intracelularmente com os agregados de Tau, o método compreendendo administrar uma quanti- dade eficaz de um composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, a um indivíduo em necessidade do mesmo.
[0054] 16. O uso de um composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, na fabricação de um medicamento para o tratamento de um distúrbio ou anormalidade associado com agregados de proteí- na Tau.
[0055] 17. O uso de um composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, na fabricação de um medicamento para diminuir a agregação de Tau.
[0056] 18. O uso de um composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, na fabricação de um medicamento para a prevenção da formação de agregados de Tau e/ou para uso na inibição de agre- gação de Tau.
[0057] 19. O uso de um composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, na fabricação de um medicamento para interferir intra-
celularmente com os agregados de Tau.
[0058] 20. Uma mistura que compreende um composto como de- finido em qualquer um dos itens 1 a 5 e pelo menos um outro compos- to biologicamente ativo selecionado de um agente terapêutico diferen- te do composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, um ve- ículo, um diluente e um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[0059] 21. A mistura de acordo com o item 20, em que o outro composto biologicamente ativo é um composto usado no tratamento de amiloidose.
[0060] 22. A mistura de acordo com o item 20 ou 21, em que o ou- tro composto biologicamente ativo é selecionado do grupo que consis- te em compostos contra o estresse oxidativo, compostos antiapoptóti- cos, quelantes de metal, inibidores de reparo de DNA tais como piren- zepina e metabólitos, ácido 3-amino-1-propanossulfônico (3APS), 1,3- propanodissulfonato (1,3PDS), ativadores de α-secretase, inibidores de β- e γ-secretase, proteínas Tau, neurotransmissor, ruptores de fo- lha β, atrativos para componentes celulares de limpeza/depleção de beta amiloide, inibidores de beta amiloide truncada no N-terminal inclu- indo beta amiloide 3-42 piroglutamatada, moléculas anti-inflamatória, ou inibidores de colinesterase (ChEIs) tais como tacrina, rivastigmina, donepezil, e/ou galantamina, agonistas de M1, outros fármacos inclu- indo qualquer fármaco modificante de amiloide ou Tau e suplementos nutritivos, um anticorpo, incluindo qualquer anticorpo funcionalmente equivalente ou partes funcionais do mesmo ou uma vacina.
[0061] 23. A mistura de acordo com o item 22, em que o outro composto biologicamente ativo é um inibidor de colinesterase (ChEI).
[0062] 24. A mistura de acordo com o item 22, em que o outro composto biologicamente ativo é selecionado do grupo que consiste em tacrina, rivastigmina, donepezil, galantamina, niacina e memantina.
[0063] 25. A mistura de acordo com o item 22, em que o outro composto biologicamente ativo é um anticorpo, particularmente um anticorpo monoclonal, incluindo qualquer anticorpo funcionalmente equivalente ou partes funcionais do mesmo.
[0064] 26. A mistura de acordo com qualquer um dos itens 20 a 25, em que o composto e/ou o outro composto biologicamente ativo está/estão presente(s) em uma quantidade terapeuticamente eficaz.
[0065] 27. O composto para o uso de acordo com o item 8, o mé- todo de acordo com o item 12, ou o uso de acordo com o item 16, em que o distúrbio é selecionado de doença de Alzheimer (DA), DA famili- ar, Tauopatia Relacionada com a Idade Primária (PART), doença Creutzfeldt-Jacob, demência pugilística, síndrome de Down, doença Gerstmann-Sträussler-Scheinker (GSS), miosite de corpo de inclusão, angiopatia amiloide cerebral de proteína príon, lesão cerebral traumá- tica (TBI), esclerose lateral amiotrófica (ELA), complexo Parkinsonis- mo-demência de Guam, doença do neurônio motor não Guamaniana com emaranhados neurofibrilares, doença do grão argirofílico, degene- ração corticobasal (CBD), emaranhados neurofibrilares difusos com calcificação, demência frontotemporal com Parkinsonismo ligado ao cromossomo 17 (FTDP-17), doença Hallervorden-Spatz, atropia de múltiplos sistemas (AMS)), doença Niemann-Pick tipo C, degeneração pálido-ponto-nigral, doença de Pick (PiD), gliose subcortical progressi- va, paralisia supranuclear progressiva (PSP), panencefalite esclero- sante subaguda, demência com predomínio de emaranhados, parkin- sonismo pós-encefálico, distrofia miotônica, panencefalopatia de escle- rose subaguda, mutações em LRRK2, encefalopatia traumática crôni- ca (CTE), demência familiar britânica, demência familar dinamarquesa, outras degenerações lombares frontotemporais, Parkinsonismo de Guadalupe, neurodegeneração com acúmulo de ferro no cérebro, re- tardo metal relacionado com SLC9A6, tauopatia de substância branca com inclusões gliais globulares, epilepsia, demência de corpo de Lewy
(LBD), comprometimento cognitivo brando (MCI), esclerose múltipla, doença de Parkinson, demência relacionada ao HIV, diabetes de início na idade adulta, amiloidose cardíaca senil, glaucoma, acidente vascu- lar cerebral isquêmico, psicose em DA e doença de Huntingon, preferi- velmente doença de Alzheimer (DA), degeneração corticobasal (CBD), doença de Pick (PiD), e paralisia supranuclear progressiva (PSP).
[0066] 28. Uso do composto como definido em qualquer um dos itens 1 a 5, como uma referência analítica ou uma ferramenta de análi- se in vitro.
[0067] 29. Um composto da fórmula: ou ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Definições
[0068] Dentro do significado do presente pedido, as seguintes de- finições se aplicam:
[0069] "Alquila" refere-se a uma porção orgânica linear ou ramifi- cada saturada que consiste em átomos de carbono e hidrogênio. Exemplos de grupos alquila adequados têm de 1 a 6 átomos de car- bono, preferivelmente 1 a 4 átomos de carbono, e incluem metila, etila, propila, isopropila, n-butila, t-butila e isobutila.
[0070] "Hal" ou "halogênio" refere-se ao F, Cl, Br, e I, preferivel- mente F.
[0071] "Anel de 3 a 8 membros" refere-se a um anel de três, qua- tro, cinco, seis, sete ou oito membros, em que nenhum, um ou mais dos átomos de carbono no anel foram substituídos por 1 ou 2 (para o anel de três membros), 1, 2 ou 3 (para o anel de quatro membros), 1, 2, 3, ou 4 (para o anel de cinco membros) ou 1, 2, 3, 4, ou 5 (para o anel de seis membros) 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 (para o anel de sete mem-
bros), ou 1, 2, 3, 4, 5, 6 ou 7 (para o anel de oito membros) dos hete- roátomos iguais ou diferentes, pelos quais os heteroátomos são sele- cionados de O, N e S.
[0072] Compostos da presente invenção tendo um ou mais carbo- nos opticamente ativos podem existir como racematos ou misturas ra- cêmicas (incluindo misturas em todas as relações), estereoisômeros (incluindo misturas diastereoméricas e diastereômeros individuais, misturas enantioméricas e enantiômeros simples, misturas de confôr- meros e confôrmeros simples), tautômeros, atropisômeros, e rotâme- ros. Todas as formas isoméricas são incluídas na presente invenção. Os compostos descritos nesta invenção contendo ligações duplas ole- fínicas incluem isômeros geométricos E e Z. Também incluídos nesta invenção são todos sais, profármacos, polimorfos, hidratos e solvatos farmaceuticamente aceitáveis.
[0073] O termo "polimorfos" refere-se às várias estruturas cristali- nas dos compostos da presente invenção. Isto pode incluir, porém não está limitado à, morfologias cristalinas (e materiais amorfos) e todas as formas de treliça cristalina. Sais da presente invenção podem ser cris- talinos e podem existir como mais do que um polimorfo.
[0074] Solvatos, hidratos, bem como formas anidrosas do sal são também abrangidas pela invenção. O solvente incluído nos solvatos não está particularmente limitado e pode ser qualquer solvente farma- ceuticamente aceitável. Exemplos incluem água e C1–4 álcoois (tais como metanol ou etanol).
[0075] "Sais farmaceuticamente aceitáveis" são definidos como derivados dos compostos descritos, em que o composto origem é mo- dificado preparando sais de ácido ou base do mesmo. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, porém não estão limitados a, sais de ácido mineral ou orgânico de resíduos básicos tal como aminas; sais de álcali ou orgânicos de resíduos acídicos tal como áci-
dos carboxílicos; e similares. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem os sais não tóxicos convencionais ou os sais de amônio qua- ternário do composto origem formado, por exemplo, de ácidos inorgâ- nicos ou orgânicos não tóxicos. Por exemplo, tais sais não tóxicos convencionais incluem aqueles derivados de ácidos inorgânicos tais como, porém não estão limitados a, ácido hidroclórico, hidrobrômico, sulfúrico, sulfâmico, fosfórico, nítrico e similares; e os sais preparados a partir de ácidos orgânicos tais como, porém limitados a, ácido acéti- co, propiônico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, pamoico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glu- tâmico, benzoico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, toluenossulfônico, metanossulfônico, etano dissulfônico, oxálico, isetiônico e similares. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da pre- sente invenção podem ser sintetizados a partir do composto origem que contém uma porção básica ou ácida por métodos químicos con- vencionais. Geralmente, tais sais podem ser preparados reagindo as formas de ácido ou base livre destes compostos com uma quantidade estequiométrica da base ou ácido apropriado em água ou em um sol- vente orgânico, ou em uma mistura dos dois. Os solventes orgânicos incluem, porém não estão limitados a, meios não aquosos como éte- res, acetato de etila, etanol, isopropanol ou acetonitrila. Listas de sais adequados podem ser encontradas em Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18a ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1990, p. 1445, a descrição do qual é pelo presente incorporada por referência.
[0076] Os compostos da presente invenção podem também ser fornecidos na forma de um profármaco, a saber um composto que é metabolizado in vivo no metabólito ativo. Como usado aqui a seguir na descrição da invenção e nas reivindicações, o termo "profármaco" sig- nifica qualquer composto covalentemente ligado que libera o produto farmacêutico de origem ativodevido à biotransformação in vivo. A refe-
rência por Goodman e Gilman (The Pharmacological Basis of Thera- peutics, 8 ed, McGraw-Hill, Int. Ed. 1992, "Biotransformation of Drugs", p 13-15) que descreve os profármacos é geralmente incorporado pelo presente por referência.
[0077] "Farmaceuticamente aceitável" é definido como aqueles compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que são, dentro do escopo do julgamento médico seguro, adequados para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem toxicida- de excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou com- plicação comensurável com uma relação risco/benefício razoável.
[0078] Os pacientes ou indivíduos na presente invenção são tipi- camente animais, particularmente mamíferos, mais particularmente seres humanos.
[0079] "Tau" como usado aqui refere-se a uma proteína de ligação a microtúbulos altamente solúvel encontrada principalmente em neu- rônios e inclui as 6 isoformas principais, formas clivadas ou truncados, e outras formas modificadas tais como decorrentes de fosforilação, glicosilação, glicação, isomerização de prolil, nitração, acetilação, poli- aminação, ubiquitinação, sumoilação e oxidação.
[0080] "Tau agregada" refere-se aos monômeros agregados de peptídeos ou proteínas Tau que são dobrados nas estruturas oligomé- ricas ou poliméricas.
[0081] "Emaranhados neurofibrilares" (NFTs) como usado aqui, refere-se aos agregados insolúveis da proteína Tau hiperfosforilada contendo filamentos helicais emparelhados (PHF) e filamentos linea- res. Sua presença é uma característica de DA e outras doenças co- nhecidas como tauopatias.
[0082] As definições e definições preferidas fornecidas na seção "Definição" se aplicam a todas as modalidades descritas abaixo, a menos que de outro modo estabelecido.
Descrição Detalhada da Invenção
[0083] Os compostos da presente invenção serão descritos a se- guir. Deve-se entender que todas as possíveis combinações das se- guintes definições são também previstas.
[0084] Em uma modalidade, a presente invenção refere-se a um composto de fórmula (I): (I) ou estereoisômeros, misturas racêmicas, tautômeros, sais farmaceuti- camente aceitáveis, profármacos, hidratos, solvatos e polimorfos do mesmo.
[0085] Uma modalidade preferida do composto de fórmula (I) é (Ia)
[0086] Uma outra modalidade preferida do composto de fórmula (I) é
[0087] Mais preferivelmente, o composto de fórmula (I) é
(Ib)
[0088] As seguintes definições de A aplicam-se aos compostos de fórmula (I) e suas modalidades preferidas.
[0089] A é selecionado do grupo que consiste em ,
N E N G R N N N N N V , , , , , E G R
V e . Na fórmula e , G é selecionado de um anel benzeno e um anel pi-
E G R
V ridina. Portanto, e abrangem as seguintes modalidades
E N E R R V V
[0090] , ,
E E E N R R R N V
V V N , , , , , , ,e . Em uma modalidade preferida,
E E G R R
V V é selecionado de e
N E R
V . Em uma outra modalidade preferida é .
[0091] Em uma modalidade preferida, A é , N ,
E G R
V e .
[0092] Em uma modalidade mais preferida, A é selecionado de
E G R
N V ,e .
[0093] Em uma outra modalidade preferida, A é selecionado de
O N O O R R R N N N N , , , , S N S S R R R
N N N N , e .
[0094] Ainda em uma modalidade mais preferida, A é .
[0095] Nas definições de A acima e nas modalidades preferidas
N N
N das mesmas, , N , N , N , N ,
E G R
V , e podem ser liga- dos ao átomo de N em qualquer posição disponível.
[0096] Nas definições acima de A e nas modalidades preferidas das mesmas, A é substituído por um ou mais substituintes Rj, por exemplo, Rj pode estar presente uma ou dias vezes. Se A for anel fe- nila, então 1 ou 2 substituentes poderão estar preferivelmente presen- tes. Se A for um anel piridina, então 1 substituente poderá estar prefe- rivelmente presente.
[0097] As seguintes definições se aplicam à fórmula (I) e suas mo- dalidades preferidas, como apropriado.
[0098] B é selecionado do grupo que consiste em O e NRa. Mais preferivelmente B é NRa.
[0099] E e V são independentemente selecionados do grupo que
E G R
V consiste em N, NR5, O e S, de modo que seja se-
lecionado de 5
R O S N
R R R N , N , N , 5
R N O N S N N
R R R N , N , N , 5
R O S N N N N
R R R N , N , N , 5
R O S N R R R
N N N N , N , N , R5
O S N R R R
N N N N N N , ,e .
E G R V
[00100] Preferivelmente é selecionado de 5
R O S N
R R R N , N , N , 5
R N O N S N N R R R N , N , N ,
R5
O S N R R R
N N N N N N , ,e .
[00101] As mesmas combinações de E, V e G podem ser conside- radas para .
[00102] J é selecionado do grupo que consiste em O, N–R1 e CH2 ou J é selecionado do grupo que consiste em CH ou C se J for ligado a R2. Em uma modalidade, J é O, em outra modalidade, J é N–R1 (pre- ferivelmente N-Me) e em uma outra modalidade, J é CH2, CH ou C.
[00103] Y, Y1, Y2 e Y3 são CZ, mais preferivelmente Y, Y1, Y2 e Y3 são CH.
[00104] Z é independentemente selecionado do grupo que consiste em H, halogênio (preferivelmente F), O–alquila, alquila e CN, preferi- velmente H, halogênio (preferivelmente F), e O–alquila. Em uma mo- dalidade preferida, um Z é halogênio (preferivelmente F), ou O–alquila e o outro Z são H. Em uma modalidade mais preferida, um Z é halogê- nio (preferivelmente F) e os outros Z são H.
[00105] R é independentemente selecionado do grupo que consiste em e –NR3R4, preferivelmente R é .
[00106] Ra é selecionado do grupo que consiste em H e alquila, mais preferivelmente H e Me.
[00107] Rd, Re, Rf, e Rg são independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila, ou quaisquer dois de Rd, Re, Rf, e Rg podem ser ligados para formar um anel de 3 a 8 membros. Preferi- velmente Rd, Re, Rf, Rg são independentemente H ou Rd e Rf podem ser ligados juntamente para formar uma ligação em ponte de átomo de carbono C1-2. Mais preferivelmente Rd, Re, Rf, e Rg são H.
[00108] Rj é independentemente selecionado do grupo que consiste s r
N J em –halogênio, –O–alquila, –NR R , –CN, 3 4 t u, ,e em que uma ponte ou ligação contendo átomo de carbo- no C1-2 pode estar presente entre um átomo de carbono e o átomo de carbono c ou d ou em que uma ponte ou ligação contendo átomo de carbono C1-2 pode estar presente entre o átomo de carbono b e o áto- mo de carbono c ou d. Mais preferivelmente Rj é selecionado do grupo que consiste em –halogênio (preferivelmente –F), –O–alquila (preferi- velmente –O–Me) e (preferivelmente , ou ), ainda mais preferivelmente Rj é .
[00109] R1 é selecionado do grupo que consiste em H e alquila, pre- ferivelmente alquila, mais preferivelmente CH3.
[00110] R2 é independentemente selecionado do grupo que consis- te em alquila, ou –O–alquila e em que se dois R2 forem geminais, eles poderão ser ligados para formar um anel de 3 a 5 membros. Em uma modalidade, R2 é alquila, em outra modalidade, R2 é –O–alquila, em uma outra modalidade, dois R2 que são geminais podem ser ligados para formar um anel de 3 a 5 membros.
[00111] R3 e R4 são independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila. Em uma modalidade, R3 ou R4 é alquila e o outro é H. Em outra modalidade, R3 é alquila e R4 é alquila. Em uma outra modalidade, R3 e R4 são H.
[00112] R5 é selecionado do grupo que consiste em H e alquila. Em uma modalidade, R5 é H. Em outra modalidade, R5 é alquila.
[00113] n é 0, 1, 2, 3 ou 4, mais preferivelmente 0, 1 ou 2, ainda mais preferivelmente n é 0.
[00114] p é 1 ou 2, mais preferivelmente 1.
[00115] r e s são independentemente 0, 1, 2 ou 3.
[00116] t e u são independentemente 1, 2 ou 3.
[00117] Os compostos preferidos de fórmula (I) são
O N F N N NH O F N N N O NH
[00118] Os compostos preferidos são também ilustrados nos exem- plos.
[00119] Qualquer combinação das modalidades, modalidades pre- feridas e modalidades mais preferidas descrita aqui é também prevista na presente invenção. Composições Farmacêuticas
[00120] Enquanto é possível que os compostos da presente inven- ção sejam administrados sozinhos, é preferível formulá-los em uma composição farmacêutica de acordo com a prática farmacêutica pa- drão. Desse modo, a invenção também fornece uma composição far- macêutica que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) opcionalmente em mistura com um veí- culo, diluente, adjuvante ou excipiente farmaceuticamente aceitável.
[00121] Excipientes farmaceuticamente aceitáveis são bem conhe- cidos na técnica farmacêutica, e são descritos, por exemplo, em Re- mington's Pharmaceutical Sciences, 15a Ed., Mack Publishing Co., New Jersey (1975). O excipiente farmacêutico pode ser selecionado de acordo com a rotina de administração pretendida e a prática farma- cêutica padrão. O excipiente deve ser aceitável no sentido de não ser prejudicial ao receptor do mesmo.
[00122] Excipientes farmaceuticamente úteis que podem ser usa- dos na formulação da composição farmacêutica da presente invenção podem compreender, por exemplo, portadores, veículos, diluentes, solventes, tais como álcoois mono-hídricos, tais como etanol, isopro- panol e álcoois poli-hídricos, tal como glicóis e óleos comestíveis, tais como óleo de soja, óleo de coco, azeite de oliva, óleo de cártamo, óleo de semente de algodão, ésteres oleosos, tais como oleato de etila, mi- ristato de isopropila, aglutinantes, adjuvantes, solubilizantes, agentes espessantes, estabilizantes, desintegrantes, deslizantes, agentes lubri- ficantes, agentes de tamponamento, agentes umectantes, agentes de suspensão, agentes adoçantes, corantes, adoçantes, agentes de re- vestimento, conservantes, antioxidantes, agentes de processamento, modificadores e realçadores de liberação de fármaco tais como fosfato de cálcio, estearato de magnésio, talco, monossacarídeos, dissacarí- deos, amido, gelatina, celulose, metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, dextrose, hidroxipropil-ß-ciclodextrina, polivinilpirrolidona, ceras de baixo ponto de fusão, resinas de permuta iônica.
[00123] As vias de administração (liberação) dos compostos da in- venção incluem, porém não estão limitados a, um ou mais de: oral (por exemplo, como um comprimido, cápsula ou como uma solução ingerí- vel), tópica, mucosa (por exemplo como um spray nasal ou aerossol para inalação), nasal, parenteral (por exemplo, por uma forma injetá- vel), gastrointestinal, intraspinal, intraperitoneal, intramuscular, intrave- nosa, intrauterina, intraocular, intradérmica, intracranial, intratraqueal, intravaginal, intracerebroventricular, intracerebral, subcutânea, oftálmi- ca (incluindo intravítrea ou intracameral), transdérmica, retal, bucal, epidural e sublingual.
[00124] Por exemplo, os compostos podem ser administrados oral- mente na forma de comprimidos, cápsulas, óvulos, elixires, soluções ou suspensões, que podem conter agentes aromatizantes ou corantes,
para aplicações de liberação imediata, retardada, modificada, susten- tada, pulsada ou controlada.
[00125] Os comprimidos podem conter excipientes tais como celu- lose microcristalina, lactose, citrato de sódio, carbonato de cálcio, fos- fato de cálcio dibásico e glicina, desintegrantes tais como amido (pre- ferivelmente amido de milho, batata ou tapioca), glicolato de amido só- dico, croscarmelose sódica e certos silicatos complexos, e ligantes de granulação, tais como polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetilcelulose (HPMC), hidroxipropilcelulose (HPC), sacarose, gelatina e acácia. Além disso, agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, ácido esteárico, behenato de glicerila e talco podem ser incluídos. Composições sólidas de um tipo similar também podem ser emprega- das como enchimentos em cápsulas de gelatina. Excipientes preferi- dos a este respeito incluem lactose, amido, celulose, açúcar do leite ou polietilenoglicóis de alto peso molecular. Para suspensões aquosas e/ou elixires, o agente pode ser combinado com vários agentes ado- çantes ou aromatizantes, matérias corantes ou corantes, com agentes emulsionantes e/ou de suspensão e com diluentes, tais como água, etanol, propilenoglicol e glicerina, e combinações dos mesmos.
[00126] Se os compostos da presente invenção forem administra- dos parenteralmente, então os exemplos de tal administração incluirão um ou mais de: intravenosa, intra-arterial, intraperitoneal, intratecal, intraventricular, intrauretral, intrasternal, intracranial, intramuscular ou subcutaneamente administrados os compostos; e/ou usando técnicas de infusão. Para administração parenteral, os compostos são melhor usados na forma de uma solução aquosa estéril que pode conter ou- tras substâncias, por exemplo, sais ou glicose suficientes para tornar a solução isotônica com o sangue. As soluções aquosas devem ser adequadamente tamponadas (preferivelmente para um pH de 3 a 9), se necessário. A preparação de formulações parenterais adequadas sob condições estéreis é facilmente realizada por técnicas farmacêuti- cas padrão bem conhecidas por aqueles versados na técnica.
[00127] Como indicado, os compostos da presente invenção podem ser administrados intranasalmente ou por inalação e são convenien- temente liberados na forma de um inalador de pó seco ou uma apre- sentação de aerossol spray de um recipiente pressurizado, bomba, spray ou nebulizador com o uso de um propelente adequado, por exemplo, diclorodifluorometano, triclorofluorometano, diclorotetrafluo- roetano, um hidrofluoroalcano, tal como 1,1,1,2-tetrafluoroetano (HFA134AT) ou 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropano (HFA 227EA), dióxi- do de carbono ou outro gás adequado. No caso de um aerossol pres- surizado, a unidade de dosagem pode ser determinada fornecendo uma válvula para distribuir uma quantidade doseada. O recipiente pressurizado, bomba, spray ou nebulizador pode conter solução ou suspensão do composto ativo, por exemplo, usando uma mistura de etanol e o propulsor como solvente, que pode conter adicionalmente um lubrificante, por exemplo, trioleato de sorbitano. Cápsulas e cartu- chos (feitos, por exemplo, de gelatina) para uso em um inalador ou in- suflador podem ser formulados para conter uma mistura de pó do composto e uma base de pó adequada, tal como lactose ou amido.
[00128] Alternativamente, os compostos da presente invenção po- dem ser administrados na forma de supositório ou pessário, ou podem ser aplicados topicamente na forma de gel, hidrogel, loção, solução, creme, pomada ou pó para polvilhar. Os compostos da presente in- venção também podem ser administrados dérmica ou transdermica- mente, por exemplo, pelo uso de um emplastro para a pele.
[00129] Eles também podem ser administrados pelas vias pulmonar ou retal. Eles também podem ser administrados pela via ocular. Para uso oftálmico, os compostos podem ser formulados como suspensões micronizadas em solução salina, estéril isotônica, o pH foi ajustado,
ou, preferivelmente, como soluções em solução salina, estéril isotôni- ca, o pH foi ajustado, opcionalmente em combinação com um conser- vante, tal como um cloreto de benzilalcônio. Alternativamente, eles po- dem formulados em uma pomada tal como petrolato.
[00130] Para aplicação tópica na pele, os compostos da presente invenção podem ser formulados como uma pomada adequada con- tendo o composto ativo suspenso ou dissolvido em, por exemplo, uma mistura com um ou mais dos seguintes: óleo mineral, petrolato líquido, petrolato branco, propilenoglicol, cera emulsionante e água. Alternati- vamente, eles podem ser formulados como uma loção ou creme ade- quado, suspensos ou dissolvidos em, por exemplo, uma mistura de um ou mais dos seguintes: óleo mineral, monoestearato de sorbitano, um polietilenoglicol, parafina líquida, polissorbato 60, cera de ésteres cetí- licos, álcool cetearílico, 2-octildodecanol, álcool benzílico e água.
[00131] Tipicamente, um médico determinará a dosagem real que será mais adequada para um indivíduo individual. O nível de dose es- pecífica e a frequência de dosagem para qualquer indivíduo em parti- cular podem ser variados e dependerá de uma variedade de fatores, incluindo a atividade do composto específico empregado, a estabilida- de metabólica e a duração da ação de tal composto, a idade, o peso corporal, geral saúde, sexo, dieta, modo e tempo de administração, taxa de excreção, combinação de fármacos, a gravidade da condição específica e o indivíduo que está em terapia.
[00132] Uma dose proposta dos compostos de acordo com a pre- sente invenção para administração a um ser humano (de aproxima- damente 70 kg de peso corporal) é de 0,1 mg a 1 g, preferivelmente 1 mg a 500 mg do ingrediente ativo por dose unitária. A dose unitária pode ser administrada, por exemplo, 1 a 4 vezes por dia. A dose de- penderá da rotina de administração. Será apreciado que pode ser ne- cessário fazer variações de rotina para a dosagem, dependendo da idade e peso do paciente, bem como da gravidade da condição a ser tratada. A dose exata e a rotina de administração ficarão, em última instância, a critério do médico ou veterinário assistente.
[00133] Os compostos da invenção podem também ser usados em combinação com outros agentes terapêuticos. Quando um composto da invenção é usado em combinação com um segundo agente tera- pêutico ativo contra a mesma doença, a dose de cada composto pode diferir-se daquela quando o composto é usado sozinho.
[00134] As combinações acima referidas podem ser conveniente- mente apresentadas para uso na forma de uma formulação farmacêu- tica. Os componentes individuais de tais combinações podem ser ad- ministrados sequencial ou simultaneamente em formulações farma- cêuticas separadas ou combinadas por qualquer rotina conveniente. Quando a administração é sequencial, tanto o composto da invenção quanto o segundo agente terapêutico podem ser administrados primei- ro. Quando a administração é simultânea, a combinação pode ser ad- ministrada na mesma ou em diferentes composições farmacêuticas. Quando combinados na mesma formulação, será apreciado que os dois compostos devem ser estáveis e compatíveis entre si e os outros componentes da formulação. Quando formulados separadamente, eles podem ser fornecidos em qualquer formulação conveniente, conveni- entemente de tal maneira que sejam conhecidos para tais compostos na técnica.
[00135] As composições farmacêuticas da invenção podem ser produzidas de uma maneira conhecida per se por aqueles versados na técnica, como descrito, por exemplo, em Remington's Pharmaceutical Sciences, 15a Ed., Mack Publishing Co., New Jersey (1975).
[00136] As doenças ou condições que podem ser tratadas, aliviadas ou prevenidas com os compostos da presente invenção são distúrbios ou anormalidades associadas com agregados de proteína Tau, tal co-
mo distúrbios neurodegenerativos. Exemplos de doenças e condições que podem ser tratadas, atenuadas ou prevenidas são causadas por ou associadas à formação de lesões neurofibrilares. Esta é a patologia cerebral predominante na tauopatia. As doenças e condições compre- endem um grupo heterogêneo de doenças ou condições neurodegene- rativas, incluindo doenças ou condições que mostram coexistência de patologias Tau e amiloide.
[00137] Exemplos das doenças e condições que podem ser trata- das, aliviadas ou prevenidas incluem, porém não estão limitadas à, doença de Alzheimer (DA), DA familiar, PART (Tauopatia Relacionada com a Idade Primária), doença Creutzfeldt-Jacob, demência pugilísti- ca, síndrome de Down, doença Gerstmann-Sträussler-Scheinker (GSS), miosite de corpo de inclusão, angiopatia amiloide cerebral de proteína príon, lesão cerebral traumática (TBI), esclerose lateral amio- trófica (ELA), complexo Parkinsonismo-demência de Guam, doença do neurônio motor não Guamaniana com emaranhados neurofibrilares, doença do grão argirofílico, degeneração corticobasal (CBD), emara- nhados neurofibrilares difusos com calcificação, demência frontotem- poral com Parkinsonismo ligado ao cromossomo 17 (FTDP-17), doen- ça Hallervorden-Spatz, atropia de múltiplos sistemas (AMS)), doença Niemann-Pick tipo C, degeneração pálido-ponto-nigral, doença de Pick (PiD), gliose subcortical progressiva, paralisia supranuclear progressi- va (PSP), panencefalite esclerosante subaguda, demência com pre- domínio de emaranhados, parkinsonismo pós-encefálico, distrofia mio- tônica, panencefalopatia de esclerose subaguda, mutações em LRRK2, encefalopatia traumática crônica (CTE), demência familiar bri- tânica, demência familar dinamarquesa, outras degenerações lomba- res frontotemporais, Parkinsonismo de Guadalupe, neurodegeneração com acúmulo de ferro no cérebro, retardo metal relacionado com SLC9A6, tauopatia de substância branca com inclusões gliais globula-
res, epilepsia, demência de corpo de Lewy (LBD), comprometimento cognitivo brando (MCI), esclerose múltipla, doença de Parkinson, de- mência relacionada ao HIV, diabetes de início na idade adulta, amiloi- dose cardíaca senil, glaucoma, acidente vascular cerebral isquêmico, psicose em DA e doença de Huntingon. Preferivelmente, as doenças e condições que podem ser tratadas, aliviadas ou prevenidas incluem doença de Alzheimer (DA), bem como outras tauopatias neurodegene- rativas, tais como doença Creutzfeldt-Jacob, demência pugilística, es- clerose lateral amiotrófica (ELA), doença do grão argirofílico, degene- ração corticobasal (CBD), demência frontotemporal com Parkinsonis- mo ligado ao cromossomo 17 (FTDP-17), doença de Pick (PiD), parali- sia supranuclear progressiva (PSP), demência com predomínio de emaranhados, complex Parkinson-demência de Guam, doença Haller- vorden-Spatz, encefalopatia traumática crônica (CTE), lesão cerebral traumática (TBI), e outra degeneração lobar frontotemporal. Mais pre- ferivelmente doença de Alzheimer (DA), degeneração corticobasal (CBD), doença de Pick (PiD), e paralisia supranuclear progressiva (PSP).
[00138] Os compostos da presente invenção podem também ser usados to decrease protein aggregation, em particular agregação de Tau. A capacidade de um composto de diminuir a agregação de Tau pode, por exemplo, ser determinada usando o ensaio ThT (Hudson et al., FEBS J., 2009, 5960-72).
[00139] Os compostos da invenção podem ser usados no tratamen- to de uma ampla faixa de distúrbios, em que o processo de neuroin- flamação está associado com o desdobramento e/ou agregação pato- lógica da proteína Tau.
[00140] Os compostos da presente invenção podem ser usados como uma referência analítica ou uma ferramenta de análise in vitro para a caracterização de tecido com patologia Tau e para testar os compostos que visam a patologia Tau em tal tecido.
[00141] Os compostos de acordo com a presente invenção podem também ser fornecidos na forma de uma mistura com pelo menos um outro composto biologicamente ativo e/ou um veículo e/ou um diluente e/ou um excipiente farmaceuticamente aceitável. O composto e/ou o outro composto biologicamente ativo estão preferivelmente presentes em uma quantidade terapeuticamente eficaz.
[00142] A natureza do outro composto biologicamente ativo depen- derá do uso pretendido da mistura. A outra substância ou composto biologicamente ativo pode exercer seu efeito biológico pelo mesmo ou por um mecanismo similar ao composto de acordo com a invenção ou por um mecanismo de ação não relacionado ou por uma multiplicidade de mecanismos de ação relacionados e/ou não relacionados.
[00143] Geralmente, o outro composto biologicamente ativo pode incluir realçadores da transmissão de nêutrons, fármacos psicotera- pêuticos, inibidores da acetilcolinesterase, bloqueadores dos canais de cálcio, aminas biogênicas, tranquilizantes benzodiazepínicos, síntese de acetilcolina, realçadores de armazenamento ou liberação, agonistas do receptor pós-sináptico da acetilcolina, inibidores da monoamina oxidase A ou B, antagonistas do receptor de N-metil-D-aspartato glu- tamato, fármacos anti-inflamatórios não esteroidais, antioxidantes e antagonistas do receptor serotonérgico. Em particular, o outro compos- to biologicamente ativo pode ser selecionado do grupo que consiste em um composto usado no tratamento de amiloidose, compostos con- tra o estresse oxidativo, compostos antiapoptóticos, quelantes de me- tal, inibidores de reparo de DNA tais como pirenzepina e metabólitos, ácido 3-amino-1-propanossulfônico (3APS), 1,3-propanodissulfonato (1,3PDS), ativadores de α-secretase, inibidores de β- e γ-secretase, proteínas Tau, neurotransmissor, ruptores de folha β, atrativos para componentes celulares de limpeza/depleção de beta amiloide, inibido-
res de beta amiloide truncada no N-terminal incluindo beta amiloide 3- 42 piroglutamatada, moléculas anti-inflamatória, ou inibidores de coli- nesterase (ChEIs) tais como tacrina, rivastigmina, donepezil, e/ou ga- lantamina, agonistas de M1, outros fármacos incluindo qualquer fár- maco modificante de amiloide ou Tau e suplementos nutritivos, um an- ticorpo, incluindo qualquer anticorpo funcionalmente equivalente ou partes funcionais do mesmo, ou uma vacina.
[00144] Em uma outra modalidade, as misturas de acordo com a invenção podem compreender niacina ou memantina juntamente com um composto de acordo com a presente invenção e, opcionalmente, um veículo e/ou um diluente e/ou um excipiente farmaceuticamente aceitável.
[00145] Em ainda outra modalidade da invenção, são fornecidas misturas que compreendem como um outro composto biologicamente ativo "antipsicóticos atípicos", tais como, por exemplo, clozapina, zi- prasidona, risperidona, aripiprazol ou olanzapina para o tratamento de sintomas psicóticos positivos e negativos incluindo alucinações, delí- rios, distúrbios do pensamento (manifestados por incoerência acentu- ada, descarrilamento, tangencialidade), e comportamento bizarro ou desorganizado, bem como anedonia, afeto achatado, apatia, e retrai- mento social, juntamente com um composto de acordo com a invenção e, opcionalmente, um veículo farmaceuticamente aceitável e/ou um diluente e/ou um excipiente.
[00146] Outros compostos que podem ser adequadamente usados em misturas em combinação com o composto de acordo com a pre- sente invenção são, por exemplo, descritos no WO 2004/058258 (veja especialmente as páginas 16 e 17) incluindo alvos de fármacos tera- pêuticos (páginas 36 a 39), ácidos alcanossulfônicos e ácidos alca- nossulfúricos (páginas 39 a 51), inibidores de colinesterase (páginas 51 a 56), antagonistas de receptor de NMDA (páginas 56 a 58), estro-
gênios (páginas 58 a 59), fármacos anti-inflamatórios não esteroidais (páginas 60 e 61), antioxidantes (páginas 61 e 62), agonistas de re- ceptor ativado por proliferadores de peroxissoma (PPAR) (páginas 63 a 67), agentes de diminuição de colesterol (páginas 68 a 75), inibido- res de amiloide (páginas 75 a 77), inibidores de formação de amiloide (páginas 77 a 78), quelantes de metal (páginas 78 e 79), antipsicóticos e antidepressivos (páginas 80 a 82), suplementos nutricionais (páginas 83 a 89) e compostos que aumentam a disponibilidade de substâncias biologicamente ativas no cérebro (veja, páginas 89 a 93) e profárma- cos (páginas 93 e 94), cujo documento é incorporado aqui por referên- cia.
[00147] A invenção também inclui todas as variações isotópicas dos compostos da invenção. Uma variação isotópica do composto da in- venção é definida como uma em que pelo menos um átomo é substitu- ído por um átomo tendo o mesmo número atômico, porém uma massa atômica diferente da massa atômica usualmente encontrada na natu- reza. Exemplos de isotopes que podem ser incorporados nos compos- tos da invenção incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, enxofre, flúor e cloro, tais como 2H, 3H, 13 C, 14 C, 15 N, 17 O, 18 35 18 36 O, S, F e CI, respectivamente. Certas variações isotópicas da invenção, por exemplo, aquelas em que um isótopo radioativo tal como 3 14 H ou C é incorporado, são úteis em estudos de distribuição tecidual de fármaco e/ou substrato. Isótopos 4C triciados, isto é, 3H, e carbono- 14, são particularmente preferidos por sua facilidade de preparação e 18 delectabilidade. Compostos rotulados com F são particularmente adequados para aplicações de imageamento tal como PET. Além dis- so, a substituição com isótopos, tal como deutério, isto é, 2H, pode for- necer certas vantagens terapêuticas que resultam de maior estabilida- de metabólica, por exemplo, meia-vida in vivo aumentada ou requisitos de dosagem reduzidos e, portanto, pode ser preferida em alguns ca-
sos. As variações isotópicas dos compostos da invenção podem ge- ralmente ser preparados por procedimentos convencionais, tais como pelos métodos ilustrativos ou pelas preparações descritas nos Exem- plos e Preparações, aqui a seguir, usando variações isotópicas apro- priadas de reagentes adequados.
[00148] Os compostos da presente invenção podem ser sintetiza- dos por um dos métodos gerais apresentados nos seguintes esque- mas. Estes métodos são fornecidos apenas para propósitos ilustrativos e não devem ser interpretados como limitantes. Esquemas sintéticos gerais para a preparação de blocos de contrução desta invenção: Esquema 1 Legenda: ácido – solvente – base
[00149] O aquecimento de derivados de fenil-hidrazina comercial- mente disponíveis (Z = H, F ou OMe) com 3-oxopiperidina-1- carboxilato de terc-butila comercialmente disponível em um solvente adequado sob condições acídicas (síntese Fischer-Indole) forneceu os derivados tricíclicos (formação de regiômero possível por Z = F ou OMe) após purificação. No caso, regioisômeros foram formados, eles foram separados por cromatografia de fluido supercrítica (SFC) para obter os derivados de tetra-hidro-1H-pirido[3,4-b]indol desejados. A porção NH alifática, secundária dos blocos de construção tricíclicos foi também protegida com o grupo de proteção por Boc usando um sol- vente e base apropriados para fornecer os blocos de contrução prote- gidos por Boc-desejados, após purificação.
Esquema 2 Legenda: base – solvente – ácido - tosila
[00150] A porção NH dos blocos de construção tricíclicos foi tratada com iodeto de metila ou cloreto de tosila em um solvente apropriado usando uma base adequada para fornecer os derivados de N-metila ou N-tosila após purificação. O grupo de proteção por Boc foi clivado por tratamento com ácido em um solvente apropriado para fornecer os blocos de construção tricíclicos desejados de N-metila ou N-tosila após purificação. No caso, não houve nenhum tratamento com base após a clivagem do grupo de proteção por Boc, os sais correspondentes fo- ram obtidos. Esquema 3 Legenda: ácido – base - solvente
[00151] O aquecimento de derivados de fenil-hidrazina comercial- mente disponíveis (Z = F) com 2-oxo-8-azabiciclo[3.2.1]octano-8- carboxilato de terc-butila comercialmente disponível em um solvente adequado sob condições acídicas (síntese Fischer-Indole) forneceu os derivados tricíclicos. No caso de derivados de fenil-hidrazina 2 ou 3- substituída, os regioisômeros foram separados por cromatografia de fluido supercrítico (SFC). A porção amina alifática, secundária foi em seguida protegida por Boc usando solventes e base apropriados e ba- se para fornecer o bloco de construção desejado, após purificação. A porção NH da porção indol foi em seguida tratada com cloreto de tosila em um solvente apropriado usando uma base adequada para fornecer os derivados de N-tosila após purificação. O grupo de proteção por Boc foi clivado por tratamento com ácido em um solvente apropriado para fornecer os blocos de construção tricíclicos contendo uma amina secundária após purificação. No caso, não houve nenhum tratamento com base após clivagem do grupo de proteção por Boc, os sais cor- respondentes foram obtidos. Esquema 4 Legenda: solvente – base – ou – micro-ondas – morfolina – e – fenila - piridina
[00152] Derivados de benzo[d]tiazol (G = Ph) ou benzo[d]oxazol (G = Ph) comercialmente disponíveis que contêm dois átomos de halogê- nio (Br ou Cl) foram tratados com aminas primárias ou secundárias em um solvente apropriado e com uma base adicional. O grupo de saída X foi substituído por meio de substituição nucleofílica para fornecer os derivados de benzo[d]tiazol ou benzo[d]oxazol substituídos por amino correspondente após purificação. No caso de aminas menos reativas, os derivados desejados de benzo[d]tiazol ou benzo[d]oxazol foram ob- tidos realizando a reação de substituição nucleofílica sob condições de micro-ondas. Os derivados de tiazolo[5,4-b]piridina (G = Py) e ti-
azolo[4,5-b]piridina (G = Py) correspondentes contendo dois átomos de halogênio (Br ou Cl) foram tratados com morfolina em um solvente apropriado e com uma base adicional e os produtos de substituição nucleofílica, (derivados de morfolino-tiazolo[5,4-b]piridina (G = Py) e morfolino-tiazolo[4,5-b]piridina (G = Py)) foram obtidos após purifica- ção. Esquemas sintéticos gerais para a preparação de compostos desta invenção: Esquema 5 s r
N J t u s r
N J t u Legenda: catalisador de Pd – ligante – base – solvente - morfolina – e – pirimidina - pirazina
[00153] Os blocos de construção tricíclicos com B = NCH3, O foram acoplados com derivados de benzo[d]tiazol ou benzo[d]oxazol substi- tuídos, ou derivados de fenila ou piridina substituídos, por meio de química de paládio com uma fonte de paládio adequada como o aceta- to de paládio(II) (Pd(OAc)2), Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0)
(Pd2(dba)3) um ligante adequado como 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di- isopropoxibifenila (RuPhos), 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (Xantphos), 2-diciclo-hexilfosfino-2′,4′,6′-tri-isopropilbifenila (Xphos) e uma base adequada como o carbonato de césio (Cs2CO3) e terc- butóxido de sódio (NaOtBu) em um solvent adequado como o dioxano para fornecer os compostos desejados de fórmula (I) após purificação. Esquema 6 s r
N J t u s r
N J t u Legenda: catalisador de Pd – ligante – base – solvente - morfolina – e – pirimidina - pirazina
[00154] Os blocos de construção tricíclicos contendo um grupo N- tosila na porção indol, foram acoplados com derivados de ben- zo[d]tiazol ou benzo[d]oxazol substituídos, ou derivados de fenila ou piridina substituídos, por meio de química de paládio com uma fonte de paládio adequada como o acetato de paládio(II) (Pd(OAc)2), Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (Pd2(dba)3) um ligante adequa- do como 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenila (RuPhos), 4,5-
Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (Xantphos), 2-diciclo-hexilfosfino- 2′,4′,6′-tri-isopropilbifenila (Xphos) e uma base adequada como o car- bonato de césio (Cs2CO3) e terc-butóxido de sódio (NaOtBu) em um solvente adequado como o dioxano para fornecer os compostos dese- jados de fórmula (I) após purificação. No caso, o grupo tosila não é clivado durante o acoplamento de paládio, os compostos protegidos por tosila foram tratados de forma geral com uma base adequada co- mo o terc-butóxido de sódio (NaOtBu) em misturas de solventes ade- quadas como o dioxano e metanol para fornecer os compostos dese- jados de fórmula (I) após purificação. Esquema 7 Legenda: catalisador de Pd, ligante - base, solvente - morfolina
[00155] Os blocos de construção tricíclicos contendo um grupo N- tosila ou NCH3 na porção indol, foram acoplados com derivados de benzo[d]tiazol ou benzo[d]oxazol substituídos com halogênio por meio de química de paládio com uma fonte de paládio adequada como ace- tato de Paládio(II) (Pd(OAc)2), Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) (Pd2(dba)3) um ligante adequado como 2-diciclo-hexilfosfino-2′,6′-di- isopropoxibifenila (RuPhos), 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (Xantphos), 2-diciclo-hexilfosfino-2′,4′,6′-tri-isopropilbifenila (Xphos) e uma base adequada como carbonato de césio (Cs2CO3) e terc-
butóxido de sódio (NaOtBu) em um solvente adequado como dioxano para produzir os intermediários desejados. O acoplamento subsequen- te de paládio dos intermediários mono-halogenados com morfolina usando condições similares foi descrito para a primeira etapa, forne- ceu os compostos desejados de fórmula (I) após purificação. No caso, o grupo tosila não é clivado durante o acoplamento do paládio final, os compostos protegidos por tosila foram geralmente tratados com uma base adequada como o terc-butóxido de sódio (NaOtBu) em misturas de solventes apropriadas como o dioxano e metanol para fornecer os compostos desejados de fórmula (I) após purificação. Exemplos
[00156] Todos os reagentes e solventes foram obtidos de fontes comerciais e usados sem outra purificação. Os espectros de 1H RMN de foram registrados em espectrômetros Bruker AV 300 e 400 MHz em solventes deuterados. Os desvios químicos (δ) são reportados em par- tes por milhão e constantes de acoplamento (valores J) em hertz. As multiplicidades de Spin são indicadas pelos seguintes símbolos: s (singleto), d (dupleto), t (tripleto), q (quarteto), m (multipleto), bs (sin- gleto amplo). Os espectros de massa foram obtidos em um espectrô- metro Agilent 1290 Infinity II com um 6130 Chemstation e um espec- trômetro Agilent 1200 Infinity II com um 6130 Chemstation. Os dados de GC−Emforam coletados usando um cromatógrafo de gás Agilent 7890B e espectrômetro de massa 5977B. Os espectros de infraverme- lho foram obtidos em um espectrômetro PerkinElmer. A cromatografia foi realizada usando sílica-gel (Fluka: Silica ge10l 60, 0,063-0,2 mm) e solventes adequados como indicado nos exemplos específicos. A puri- ficação rápida foi conduzida com um Biotage Isolera com cartuchos de SNAP HP-Sil ou KP-NH (Biotage) e o gradiente de solvente indicado nos exemplos específicos. A cromatografia em camada fina (TLC) foi realizada em placas de sílica-gel com detecção de UV.
Exemplo Preparativo 1 Legenda: dioxano - etapa Etapa A
[00157] A uma solução de sal de HCl de (4-fluorofenil)hidrazina (1 g, 6,1 mmols) e 3-oxopiperidina-1-carboxilato de terc-butila (1,2 g, 6,1 mmols) em 1,4-dioxano (10 mL) foi adicionado H2SO4 concentrado (1 mL), 0 °C. Em seguida, a mistura de reação foi aquecida a 110 °C du- rante 3 h. A mistura de reação foi resfriada para 25 °C e o precipitado foi filtrado. O sólido foi dissolvido em água basificada com solução de NaOH e extraído com diclorometano. A fase orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título ciclizado como um sólido amarelo claro (0,6 g, 54 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,73 (br-s, 1H), 7,21-7,22 (m, 1H), 7,06-7,07 (m, 1H), 6,78-6,79 (m, 1H), 3,83 (s, 2H), 2,94-2,95 (m, 2H), 2,49-2,50 (m, 2H). EM: 191 (M+H)+. Etapa B
[00158] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (0,6 g, 3,15 mmols) em THF (10 mL) foram adicionados trietilamina (1,3 mL, 9,47 mmols) e dicarbonato de di-terc-butila (0,757 g, 3,46 mmols) e a mistura de reação foi agitada durante 12 h. Após a conclusão da reação como evidenciado por TLC, o solvente foi removido sob pres- são reduzida e a mistura de reação crua foi purificada por cromatogra-
fia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (80:20) para for- necer o composto do título como um sólido amarelo claro (0,55 g, 60%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,94 (br-s, 1H), 7,26-7,28 (m, 1H), 7,12-7,13 (m, 1H), 6,83-6,84 (m, 1H), 4,55 (s, 2H), 3,64-3,66 (m, 2H), 2,65 (s, 2H), 1,47 (s, 9H). EM: 191 (M-Boc)+. Etapa C
[00159] A uma solução do composto do título de Etapa B acima (0,55 g, 1,89 mmols) em THF (5 mL) foram adicionados hidreto de só- dio (0,136 g, 5,6 mmols), seguido por iodeto de metila (0,13 mL, 2,07 mmols). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente du- rante 2 h. A mistura foi dissolvida em acetato de etila (20 mL) e lavada com água e salmoura. A fase orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. A mistu- ra de reação crua foi purificada por cromatografia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (70:30) para fornecer o composto do título metilado (0,42 g, 73%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,40-7,42 (m, 1H), 7,18-7,19 (m, 1H), 6,92-6,93 (m, 1H), 4,61 (s, 2H), 3,64-3,65 (m, 5H), 2,67 (br-s, 2H), 1,47 (s, 9H). EM: 305,0 (M+H)+. Etapa D
[00160] A uma solução do composto do título de Etapa C acima (0,42 g, 1,38 mmols) em diclorometano (10 mL) foi adicionado HCl a 2N (5 mL) em 1,4-dioxano. A mistura de reação foi agitada durante a noite. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi evaporada para remover o solvente e lavada com dietil éter para fornecer o com- posto do título como um sólido off-white (0,25 g, 80 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9,83 (br-s, 1H), 7,47-7,50 (m, 1H),
7,30 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 7,02 (bs, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,67 (s, 3H), 3,40 (br-s, 2H), 2,92 (br-s, 2H). EM: 205,2 (M+H)+. Exemplo Preparativo 2 Legenda: etapa Etapa A
[00161] A uma solução do composto do título de Exemplo Prepara- tivo 1 Etapa B (0,55 g, 1,89 mmols) em THF (5 mL) foram adicionados hidreto de sódio (0,136 g, 5,6 mmols), e seguido por cloreto de p- toluenossulfonila (0,396 g, 2,07 mmols). A mistura de reação foi agita- da durante 30 minutos em temperatura ambiente. A mistura foi dissol- vida em acetato de etila (20 mL) e lavada com água e salmoura. A fa- se orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. A mistura de reação crua foi purifica- da por cromatografia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (70:30) para fornecer o composto do título (0,4 g, 47%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,00 (s, 1H), 7,77 (s, 2H), 7,30-7,32 (m, 3H), 7,16-7,18 (m, 1H), 4,87 (s, 2H), 3,64 (s, 2H), 2,62 (br-s, 2H), 2,32 (s, 3H), 1,39 (s, 9H). EM: 445,2 (M+H)+. Etapa B
[00162] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (0,4 g, 0,9 mmols) em diclorometano (10 mL) foi adicionado HCl a 2N (5 mL) em 1,4-dioxano. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 12 h. Após a conclusão da reação, a mistura de rea- ção foi evaporada para remover o solvente e lavada com dietil éter pa- ra fornecer o composto do título como um sólido off-white (0,25 g, 80 %). O produto cru foi levado como tal para a etapa seguinte.
EM: 345,0 (M+H)+. Exemplo Preparativo 3
O O .HCl N Boc O NBoc O NH (Boc)2O O NBoc NaH/MeI NH2
N N H H2SO4/ 100 °C N N
H THF H THF Step A Step B Step C Step D HCl/DCM
O NH .HCl
N Etapa A
[00163] A uma solução de sal de HCl de (4-metoxifenil)hidrazina (10 g, 57,5 mmols) e 3-oxopiperidina-1-carboxilato de terc-butila (11,4 g, 57,5 mmols) em 1,4-dioxano (100 mL) foi adicionado H2SO4 concen- trado (10 mL), 0 °C. Em seguida, a mistura de reação foi aquecida a 110 °C durante 3 h. A mistura de reação foi resfriada para 25 °C e o precipitado foi filtrado. O sólido foi dissolvido em água basificada com solução de NaOH e extraído com diclorometano. A fase orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título ciclizado como um sólido gomoso, marrom (10 g, cru). O produto foi levado como tal para a etapa seguinte. EM: 203,2 (M+H)+. Etapa B
[00164] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (10 g, 49,5 mmols) em THF (10 mL) foram adicionados trietilamina (20 mL, 148,5 mmol ) e dicarbonato de di-terc-butila (11,8 g, 54 mmols) e a mistura de reação foi agitada durante 12 h. Após a conclusão da rea- ção como evidenciado por TLC, o solvente foi removido sob pressão reduzida e a mistura de reação crua foi purificada por cromatografia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (80:20) para fornecer o composto do título como um sólido branco (4 g, 26,7%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,67 (br-s, 1H), 7,19 (d, J = 8,40
Hz, 1H), 6,89 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 6,66-6,67 (m, 1H), 4,54 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,65-3,66 (m, 2H), 2,64-2,66 (m, 2H), 1,44 (s, 9H). EM: 303,2 (M+H)+. Etapa C
[00165] A uma solução do composto do título de Etapa B acima (2 g, 6,6 mmols) em THF (10 mL) foram adicionados hidreto de sódio (0,317 g, 13,2 mmols), e seguido por iodeto de metila (0,4 mL, 7,26 mmols). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente du- rante 2 h. A mistura foi dissolvida em acetato de etila (200 mL) e lava- da com água e salmoura. A fase orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. A mistu- ra de reação crua foi purificada por cromatografia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (80:20) para fornecer o composto do título metilado (0,65 g, 30%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,30 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 6,92 (s, 1H), 6,73-6,73 (m, 1H), 4,59 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,60-3,64 (m, 5H), 2,66-2,68 (m, 2H), 1,45 (s, 9H). EM: 317,2 (M+H)+. Etapa D
[00166] A uma solução do composto do título de Etapa C acima (0,65 g, 2,05 mmols) em diclorometano (10 mL) foi adicionado HCl a 4N (5 mL) em 1,4-dioxano. A mistura de reação foi agitada durante a noite. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi evaporada para remover o solvente e lavada com dietil éter para fornecer o com- posto do título como um sólido off-white (0,5 g, 98 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9,80 (s, 2H), 7,35 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 6,79-6,80 (m, 1H), 4,39 (s, 2H), 3,77 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 3,38-3,40 (m, 2H), 2,90-2,92 (m, 2H). EM: 217,3 (M+H)+. Exemplo Preparativo 4
Etapa A
[00167] A uma solução do composto do título de Exemplo Prepara- tivo 3 Etapa B (2 g, 6,6 mmols) em THF (10 mL) foram adicionados hidreto de sódio (0,317 g, 13,2 mmols), seguido por cloreto de p- toluenossulfonila (1,5 g, 7,9 mmols). A mistura de reação foi agitada durante 2 h em temperatura ambiente. A mistura foi dissolvida em ace- tato de etila (200 mL) e lavada com água e salmoura. A fase orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (1,5 g, 50%). O produto cru foi levado como tal para a etapa seguinte. EM: 357,2 (M-Boc)+. Etapa B
[00168] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (1,5 g, 3,28 mmols) em diclorometano (15 mL) foi adicionado HCl a 2N (10 mL) em 1,4-dioxano. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 12 h. Após a conclusão da reação, a mistura de rea- ção foi evaporada para remover o solvente e lavada com dietil éter pa- ra fornecer o composto do título como um sólido off-white (1 g, 77 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9,91 (br-s, 2H), 7,83 (d, J = 8,40 Hz, 3H), 7,35 (d, J = 8,40 Hz, 2H), 7,06 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 6,93-6,94 (m, 1H), 4,61 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,57 (s, 4H), 3,44 (s, 4H), 2,89 (br-s, 2H), 2,32 (s, 3H). EM: 357,2 (M+H)+. Exemplo Preparativo 5
Etapa A
[00169] Uma solução de 5-fluoro-2-hidrazinailpiridina (5 g) e 3- oxopiperidina-1-carboxilato de terc-butila (5 g) em metanol (50 mL) foi agitada a 25 °C durante 12 h. Após conclusão da reação por TLC, a mistura de reação foi concentrada e o produto cru marrom escuro (10 g) foi diretamente para a etapa seguinte sem outra purificação. EM: 309,1 (M+H)+. Etapa B
[00170] Uma solução do composto título cru de Etapa A acima (10 g) em dietilenoglicol (20 ml) foi aquecida a 180° C usando um micro- ondas durante 90 min (4 bateladas). Após conclusão da reação por LCMS, a mistura de reação foi vertida em água, seguida por extração usando diclorometano. A camada orgânica foi separada, concentrada para fornecer o produto cru que foi lavado com dietil éter e secado sob vácuo para fornecer o composto do título como um sólido marrom cla- ro (1 g, 16%). EM: 192,2 (M+H)+. Etapa C
[00171] A uma solução do composto do título de Etapa B acima (1 g, 5,23 mmols) em THF (10 ml) foram adicionados trietilamina (2,2 ml, 15,39 mmols), seguida por dicarbonato de di-terc-butila (1,36 g, 6,28 mmols). A mistura de reação foi em seguida agitada em temperatura ambiente durante 12 h. Após a conclusão da reação como evidenciado por TLC, o solvente foi removido e a mistura de reação crua foi purifi- cada por cromatografia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (60:40) para fornecer o composto do título como um sólido ama- relo (1,1 g, 72%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,54 (s, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,65 (d, J = 12,40 Hz, 1H), 3,65-3,66 (m, 2H), 2,82 (t, J = 8,80 Hz, 2H), 1,95 (t, J = 6,40 Hz, 2H), 1,46 (s, 9H). EM: 292,2 (M+H)+. Etapa D
[00172] A uma solução do composto do título de Etapa C acima (1,1 g, 3,78 mmols) em N,N’-dimetilformamida (10 mL) foi adicionado hidre- to de sódio (0,226 g, 5,67 mmols) a 0° C. A mistura de reação foi agi- tada a 0 °C durante 30 min, seguida pela adição de iodeto de metila (0,25 mL, 4,15 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi em seguida agi- tada a 0 °C durante 30 min. Após conclusão da reação por TLC, a mis- tura de reação foi extinta com água gelada, seguida por extração usando acetato de etila (20 mL). A camada orgânica foi concentrada para fornecer o produto cru como sólido amarelo (1 g) que foi levado diretamente para a etapa seguinte sem outra purificação. EM: 306,1 (M+H)+. Etapa E
[00173] A uma solução do composto do título de Etapa D acima (1 g) em diclorometano (10 ml) foi adicionado HCl a 2N (5 mL) em 1,4- dioxano. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente du- rante 3 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi evapo- rada para remover o solvente e lavada com dietil éter para fornecer o composto do título como um sólido amarelo claro (0,25, 37 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,32 (t, J = 6,92 Hz, 2H), 8,32 (s, 1H), 7,87 (d, J = 9,12 Hz, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,45 (s, 2H), 2,94 (t, J =
5,88 Hz, 2H), 2,17 (t, J = 4,80 Hz, 2H). EM: 206,1 (M+H)+. Exemplo Preparativo 6 Etapa A
[00174] A uma solução do composto do título de Exemplo Prepara- tivo 5 Etapa C (1,1 g, 3,78 mmols) em N,N’-dimetilformamida (10 mL) foi adicionado hidreto de sódio (0,226 g, 5,67 mmols) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 0 °C durante 30 min, seguida por cloreto de p- toluenossulfonila (0,788 g, 4,15 mmols). A mistura de reação foi agita- da durante 30 min a 0 °C. A mistura foi extinta com água gelada e ex- traída com acetato de etila (20 mL). A fase orgânica foi separada, se- cada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzi- da para fornecer o composto do título cru como sólido marrom claro (1 g,). O produto cru foi levado como tal para a etapa seguinte. EM: 446,1 (M+H)+. Etapa B
[00175] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (1 g) em diclorometano (10 mL) foi adicionado HCl a 2N (5 mL) em 1,4- dioxano. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente du- rante 3 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi evapo- rada para remover o solvente e lavada com dietil éter para fornecer o composto do título como um sólido amarelo claro (0,75 g, 65 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,40 (d, J = 1,24 Hz, 1H), 7,97 (d, J = 8,24 Hz, 2H), 7,88 (q, J = 2,64 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,24 Hz, 2H), 3,37 (q, J = 5,20 Hz, 2H), 3,22 (t, J = 6,12 Hz, 2H), 2,33 (d, J = 12,52 Hz, 3H), 2,09 (t, J = 5,00 Hz, 2H). EM: 346,1 (M+H)+. Exemplo Preparativo 7
Legenda: menor – maior – etapa – separação por SFC Etapa A
[00176] A uma solução de sal de HCl de (3-fluorofenil)hidrazina (25 g, 153,7 mmols) e 3-oxopiperidina-1-carboxilato de terc-butila (30,59 g, 153,7 mmols) em 1,4-dioxano (250 mL) foi adicionado H2SO4 concen- trado (25 mL), 0 °C. Em seguida, a mistura de reação foi aquecida a 110 °C durante 3 h. A mistura de reação foi resfriada para 25 °C e o precipitado foi filtrado. O sólido foi dissolvido em água basificada com solução de NaOH e extraído com diclorometano. A fase orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título ciclizados como um sólido marrom claro (23 g). A mistura crua de regioisômeros foi le- vada como tal para a etapa seguinte. EM: 191 (M+H)+. Etapa B
[00177] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (23 g, 121,05 mmols) em THF (250 mL) foram adicionados trietilamina (33,7 mL, 242,1 mmol ) e dicarbonato de di-terc-butila (32 g, 145,2 mmols) e a mistura de reação foi agitada durante 12 h. Após a conclu- são da reação como evidenciado por TLC, o solvente foi removido sob pressão reduzida e a mistura de reação crua foi purificada por croma- tografia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (80:20) para fornecer o composto do títulos como um sólido amarelo claros (7 g, 20%). EM: 191,2 (M-Boc)+. Etapa C
[00178] A mistura de regioisômeros de Etapa B acima (7,0 g, rela- ção: 95/5) foi separada por coluna SFC Quiral (YMC Amylose-SA) pa- ra fornecer o regioisômero maior desejado como um sólido amarelo claro com 100% de pureza de regioisômero (3 g, 43 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,95 (br-s, 1H), 7,35-7,37 (m, 1H), 7,09-7,12 (m, 1H), 6,80-6,85 (m, 1H), 4,54 (s, 2H), 3,66 (t, J = 5,64 Hz, 2H), 2,67 (t, J = 5,48 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H). EM: 191,2 (M-Boc)+.
[00179] O regioisômero menor foi também isolado (0,3 g, 4,3 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 11,16 (s, 1H), 7,13 (d, J = 8,12 Hz, 1H), 6,96-7,01 (m, 1H), 6,68-6,70 (m, 1H), 4,56 (s, 2H), 3,67 (t, J = 5,64 Hz, 2H), 2,78 (t, J = 5,24 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H). EM: 191,2 (M-Boc)+. Etapa D
[00180] A uma solução do regioisômero maior de Etapa C acima (1,5 g, 5,16 mmols) em N,N’-dimetilformamida (15 mL) foi adicionado hidreto de sódio (0,3 g, 7,74 mmols), seguido por cloreto de p- toluenossulfonila (1,17 g, 6,19 mmols). A mistura de reação foi agitada durante 30 min em temperatura ambiente. A mistura dissolvida em acetato de etila (50 mL) e lavada com água e salmoura. A fase orgâni- ca foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. O material cru foi purificado por cromatografia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (80:20) para fornecer o composto do título (2 g, 87%).
H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,75-7,78 (m, 3H), 7,47-7,48 (m, 1H), 7,38-7,40 (m, 2H), 7,16-7,17 (m, 1H), 4,84 (s, 2H), 3,61-3,62 (m, 2H), 2,63-2,66 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 1,44 (s, 9H). EM: 345,2 (M-Boc)+. Etapa E
[00181] A uma solução do composto do título de Etapa D acima (2 g, 4,5 mmols) em diclorometano (120 mL) foi adicionado HCl a 2N (10 mL) em 1,4-dioxano. A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 12 h. Após a conclusão da reação, a mistura de rea- ção foi evaporada para remover o solvente e lavada com dietil éter pa- ra fornecer o composto do título como um sólido off-white (1,6 g 94 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9,65 (br-s, 2H), 7,93 (d, J = 7,92 Hz, 2H), 7,72-7,72 (m, 1H), 7,58-7,59 (m, 1H), 7,40 (d, J = 8,24 Hz, 2H), 7,19-7,24 (m, 1H), 4,65 (s, 2H), 3,36 (bs, 2H), 2,91 (br-s, 2H), 2,35 (s, 3H). EM: 345,2 (M+H)+. Exemplo Preparativo 8 Etapa A
[00182] A uma solução do regioisômero menor de Exemplo Prepa- rativo 7 Etapa C (0,3 g, 1,034 mmols) em THF (10 mL) foram adicio- nados hidreto de sódio (0,082 g, 2,06 mmols), seguido por cloreto de p-toluenossulfonila (0,294 g, 1,55 mmols). A mistura de reação foi agi- tada durante 30 min em temperatura ambiente. A mistura dissolvida em acetato de etila (30 mL) e lavada com água e salmoura. A fase or- gânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e o solvente remo- vido sob pressão reduzida para fornecer o composto do título cru (0,25 g, 55%). O produto cru foi levado como tal para a etapa seguinte.
EM: 345,1 (M+H)+. Etapa B
[00183] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (0,25 g, 0,56 mmols) em diclorometano (10 mL) foi adicionado HCl a 2N (2 mL) em 1,4-dioxano. A mistura de reação foi agitada em tempe- ratura ambiente durante 12 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi evaporada para remover o solvente e lavada com dietil éter para fornecer o composto do título cru como um sólido off-white (0,2 g). EM: 345,1 (M+H)+. Exemplo Preparativo 9 Etapa A
[00184] A uma solução do regioisômero maior de Exemplo Prepara- tivo 7 Etapa C (1,0 g, 3,44 mmols) em THF (15 mL) foram adicionados hidreto de sódio (0,275 g, 6,89 mmols), seguido por iodeto de metila (10,3 mL, 4,14 mmols). A mistura de reação foi agitada em temperatu- ra ambiente durante 30 min. A mistura foi dissolvida em acetato de eti- la (40 ml) e lavada com água, salmoura e secada sobre Na2SO4. A mistura de reação crua foi purificada por cromatografia de coluna rápi- da usando hexano/acetato de etila (70:30) para fornecer o composto do título (1,0 g, 96 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,38-7,40 (m, 1H), 7,28-7,29 (m, 1H), 6,87 (d, J = 12,80 Hz, 1H), 4,59 (s, 2H), 3,61-3,63 (m, 5H), 2,68 (s, 2H), 1,45 (s, 9H). EM: 305,1 (M+H)+. Etapa B
[00185] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (1,0 g, 3,28 mmols) em diclorometano (10 mL) foi adicionado HCl a 2N (5 mL) em 1,4-dioxano.
[00186] A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente durante 12 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi evaporada para remover o solvente e lavada com dietil éter para for- necer o composto do título como um sólido off-white (0,75 g 96 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9,86 (br-s, 2H), 7,46-7,47 (m, 1H), 7,34-7,37 (m, 1H), 6,89-6,90 (m, 1H), 4,39 (s, 2H), 3,63 (s, 3H), 3,37 (d, J = 6,04 Hz, 2H), 2,91-2,93 (m, 2H). EM: 205,1 (M+H)+. Exemplo Preparativo 10 Etapa A
[00187] A uma solução de sal de HCl de (4-fluorofenil)hidrazina (2 g, 12,3 mmols) e 2-oxo-8-azabiciclo[3,2,1]octano-8-carboxilato de terc- butila (2,7 g, 12,3 mmols) em 1,4-dioxano (30 mL) foi adicionado H2SO4 concentrado (2 mL), 0 °C. Em seguida, a mistura de reação foi aquecida a 100 °C durante 12 h. Após conclusão da reação, a mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente e o solvente foi re- movido por vácuo elevado para fornecer o material cru. O material cru foi basificado usando solução de hidróxido de sódio a 30%, seguido por extração usando acetato de etila (50 mL). A camada de acetato de etila foi lavada com água (20 mL) e solução de salmoura (10 mL). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para fornecer o composto do título cru como uma massa gomossa marrom claro (1,6 g, 83 %). O produto cru foi levado como tal para a etapa se- guinte. EM: 217,2 (M+H)+. Etapa B
[00188] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (2 g, 5,1 mmols) em THF (20 mL) foram adicionados trietilamina (2,56 mL, 18 mmols) e dicarbonato de di-terc-butila (2,21 g, 10 mmols) e a mistura de reação foi agitada durante 12 h. Após a conclusão da rea- ção como evidenciado por TLC, o solvente foi removido sob pressão reduzida e a mistura de reação crua foi purificada por cromatografia de coluna rápida usando 40% a 50% acetato de etila em éter de petróleo para fornecer o composto do título como um sólido amarelo claro (0,9 g, 31%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,94 (br-s, 1H), 7,22-7,23 (m, 2H), 6,80-6,81 (m, 1H), 5,09 (d, J = 5,20 Hz, 2H), 4,46 (br-s, 1H), 3,22 (br-s, 1H), 2,50-2,51 (m, 1H), 2,22 (br-s, 1H), 2,06 (br-s, 1H), 1,79 (br-s, 1H), 1,58-1,60 (m, 1H), 1,42 (s, 9H). EM: 261,2 (M-t-butila)+. Etapa C
[00189] A uma solução do composto do título de Etapa B acima (1 g, 3,16 mmols) em THF (15 mL) foi adicionado hidreto de sódio (60% em óleo mineral; 0,25 g, 6,32 mmols) em pequenas porções a 0° C. Após a adição ser concluída, a mistura de reação foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 30 min, e em seguida, a mistura de rea- ção foi novamente resfriada para 0° C. À mistura de reação foi em se- guida adicionada gota a gota a 0 °C uma solução de cloreto de p- toluenossulfonila (0,72 g, 3,79 mmols) em THF (5 mL). Após a adição ser concluída, a mistura de reação foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 2 h. Após conclusão da reação por TLC, a mistura de reação foi resfriada para 0° C e extinta com água gelada, seguida por extração usando acetato de etila (50 mL). A camada de acetato de etila foi lavada com água (10 mL) e solução de salmoura (10 mL). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para fornecer o produto cru, que foi purificado por coluna em sílica-gel usando 15% a 25% of acetato de etila em éter de petróleo para forne- cer o composto do título como um sólido off-white (0,9 g, 61%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,01-8,02 (m, 1H), 7,58-7,60 (m, 2H), 7,50-7,51 (m, 1H), 7,50-7,51 (m, 2H), 7,15-7,16 (m, 1H), 5,06 (br- s, 1H), 4,46 (br-s, 1H), 3,35 (br-s, 1H), 2,91 (br-s, 1H), 2,44 (br-s, 3H), 1,77-1,79 (m, 3H), 1,56-1,58 (m, 1H), 1,27-1,33 (m, 9H). EM: 371,1 (M-Boc)+. Etapa D
[00190] A uma solução do composto do título de Etapa C acima (0,9 g , 1,91 mmols) em diclorometano (5 mL) a 0° C foi adicionado HCl a 4N (10 mL) em 1,4-dioxano. A mistura de reação foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 12 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi evaporada para remover o solvente e lavada com dietil éter (10 mL) para fornecer o composto do título cru como um sólido off-white (0,65 g, 93%). EM: 371,1 (M+H)+. Exemplo Preparativo 11 Etapa A
[00191] A uma solução agitada de triptolina (2,3,4,9-tetra-hidro-1H- pirido[4,3-b]indol) (150 g, 0,871 mol) em THF (1,5 L) a 0 °C, trietilami- na (243 mL, 1,74 mol) e dicarbonato de di-terc-butila (228 g, 1,04 mol) foram adicionados e a mistura de reação foi agitada a 25 °C durante
12 h. Após a conclusão da reação (monitorada por TLC), água foi adi- cionada à mistura de reação sob resfriamento com gelo e extraída com acetato de etila (2 x 500 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (1 x 250 mL), secados sobre Na2SO4 anidroso, filtrados e evaporados sob pressão reduzida para fornecer o produto cru. O material cru foi agitado com dietil éter (200 mL) e o sólido desse modo obtido foi filtrado, lavado com dietil éter (2 x 100 mL) e secado para fornecer o composto do título como sólido marrom (200 g, 84 %). 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 7,94 (br-s, 1H), 7,51 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 7,33-7,34 (m, 1H), 7,11-7,13 (m, 2H), 4,67 (s, 2H), 3,79 (br-s, 2H), 2,83 (br-s, 2H), 1,53 (s, 9H). EM: 273,2 (M+H)+. Etapa B
[00192] A uma suspensão agitada de hidreto de sódio (15,86 g, 60% de óleo mineral, 1,10 mol) em THF seco (400 mL) a 0 °C, uma solução do composto do título de Etapa A acima (100 g, 0,367 mol) em THF seco (1 L) foi adicionada lentamente e agitada na mesma temper- tura ambiente durante 30 min. Em seguida, uma solução de cloreto de p-toluenossulfonila (105 g, 0,55 mol) em THF seco (100 mL) foi adicio- nada gota a gota a 0 °C, e a mistura de reação foi deixada agitar a 0 °C durante 1 h. Após conclusão da reação (monitorada por TLC), a mistura de reação foi resfriada para 0° C e extinta com água gelada (500 mL), seguida por extração usando acetato de etila (3 x 500 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (2 x 500 mL), salmoura (1 x 250 mL) e secados sobre Na2SO4, filtrados e eva- porados sob pressão reduzida para fornecer o produto cru que foi tritu- rado com hexano (250 mL). O sólido desse modo obtido foi filtrado, lavado com hexano (2 x 100 mL) e secado para fornecer o composto do título como sólido marrom claro (130 g, 83%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,01 (d, J = 10,40 Hz, 1H), 7,77 (br-
s, 2H), 7,45-7,48 (m, 1H), 7,13-7,24 (m, 4H), 4,88 (s, 2H), 3,63-3,65 (m, 2H), 2,65 (br-s, 2H), 2,31 (s, 3H), 1,46 (s, 9H). EM: 327,1 (M+-Boc). Etapa C
[00193] A uma solução do composto do título de Etapa B acima (130 g, 0,30 mol) em 1,4-dioxano (1,3 L) foi adicionado HCl a 4M em 1,4-dioxano (500 mL) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 25 °C durante 12 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi evaporada sob pressão reduzida e o resíduo foi lavado com dietil éter para fornecer o composto do título como sólido marrom claro (95 g, 94 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9,64 (br-s, 2H), 7,86-7,89 (m, 3H), 7,55 (d, J = 10,40 Hz, 1H), 7,27-7,30 (m, 4H), 4,67 (s, 2H), 3,47 (br-s, 2H), 2,92 (br-s, 2H), 2,33 (s, 3H). EM: 327,1 (M+H)+. Exemplo Preparativo 12 Etapa A
[00194] A uma suspensão agitada de hidreto de sódio (15,86 g, 60% de óleo mineral, 1,10 mol) em THF seco (400 mL) a 0 °C, uma solução do composto do título de Exemplo Preparativo 11 Etapa A (100 g, 0,367 mol) em THF seco (1 L) foi adicionada lentamente e agi- tada na mesma tempertura ambiente durante 30 min. Em seguida, uma solução de iodeto de metila (10 mL, 0,55 mol) em THF seco (100 mL) foi adicionada gota a gota a 0 °C, e a mistura de reação foi deixa- da agitar a 0 °C durante 1 h. Após conclusão da reação (monitorada por TLC), a mistura de reação foi resfriada para 0° C e extinta com água gelada (500 mL), seguida por extração usando acetato de etila (3 x 500 mL). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com água (2 x 300 mL), salmoura (1 x 250 mL) e secados sobre Na2SO4, filtrados e evaporados sob pressão reduzida para fornecer o produto cru que foi triturado com hexano (250 mL). O sólido desse modo obtido foi filtrado, lavado com hexano (2 x100 mL) e secado para fornecer o composto do título como sólido marrom (93 g, 88%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,39-7,41 (m, 2H), 7,09-7,11 (m, 1H), 6,98-7,00 (m, 1H), 4,58 (s, 2H), 3,64-3,66 (m, 5H), 2,69 (s, 2H), 1,45 (s, 9H). EM: 287,2 (M+H)+. Etapa B
[00195] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (93 g, 0,32 mol) em 1,4-dioxano (1,0 L) foi adicionado HCl a 4M em 1,4- dioxano (400 mL) a 0 °C. A mistura de reação foi agitada a 25 °C du- rante 12 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi eva- porada sob pressão reduzida e o resíduo foi lavado com dietil éter para fornecer o composto do título como sólido marrom claro (58 g, 80%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9,81 (br-s, 1H), 7,44-7,47 (m, 2H), 7,15-7,18 (m, 1H), 7,03-7,06 (m, 1H), 4,42 (s, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,41- 3,45 (m, 2H), 2,95 (br-s, 2H). EM: 187,1 (M+H)+. Exemplo Preparativo 13 Legenda: micro-ondas - etapa Etapa A
[00196] A uma solução de 6-bromo-2-clorobenzo[d]tiazol (1 g, 4,0 mmols) em etanol (6 mL), foi adicionada solução de metil amina a 4 M (1,5 mL) e a mistura de reação foi aquecida a 150 °C durante 45 min usando micro-ondas Biotage. A mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida, o produto cru foi dissolvido em diclorometano (150 mL) e lavado com solução de NaOH a 1 M, água, salmoura e secado sobre Na2SO4. O solvente foi removido sob pressão reduzida, para fornecer a mistura de reação crua que foi purificada por cromatografia de coluna rápida usando hexano: acetato de etila (50:50) para fornecer o composto do título as a solid (0,35 g, 36%). 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 7,72 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,29 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 5,40 (s, 1H), 3,13 (s, 3H). Exemplo Preparativo 14 Etapa A
[00197] A uma solução de 5-bromo-2-clorobenzo[d]tiazol (0,9 g, 3,62 mmols) em etanol (12 ml), foi adicionada solução de metil amina a 4 M(1mL) e a mistura de reação foi aquecida a 150 °C durante 45 min usando um micro-ondas Biotage. A mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão re- duzida, e a mistura de reação crua foi purificada por cromatografia de coluna rápida usando hexano: acetato de etila (50:50) para fornecer o composto do título como um sólido (0,57 g, 65%). 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 7,68 (t, J = 2,0 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 0,7 Hz, 1H), 7,22 (dd, J = 8,4, 1,9 Hz, 1H), 5,90 (s, 1H), 3,13 (s, 3H). Exemplo Preparativo 15
Etapa A
[00198] A uma solução de 2,5-diclorobenzo[d]tiazol (5 g, 24,5 mmols) em diclorometano seco (50 mL) foi adicionada uma solução a 2 M de dimetilamina em THF (18,37 mL, 36,65 mmols), e a mistura de reação foi resfriada para 0 oC. A esta mistura de reação fria foi adicio- nada trietilamina (6,8 mL, 49 mmols) gota a gota. Após a adição ser concluída, a mistura de reação foi deixada agitar em temperatura am- biente durante 4 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi tratada com água (2 x 20 mL) e extraída com diclorometano. A ca- mada orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e evapora- da para fornecer um sólido branco que foi usado triturado com dietil éter para fornecer o composto do título (4,5 g, 88%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,77 (d, J = 11,20 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 7,05-7,05 (m, 1H), 3,14 (s, 6H). EM: 213,4 (M+H)+. Exemplo Preparativo 16 Etapa A
[00199] A uma solução de 6-bromo-2-clorobenzo[d]tiazol (0,45 g, 1,81 mmols) em etanol (12 mL), foi adicionada uma solução a 2 M de dimetil amina em THF (3 mL) e a mistura de reação foi aquecida a 150 °C durante 45 min usando um micro-ondas Biotage. A mistura de rea- ção foi resfriada para temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida, e a mistura de reação crua foi purificada por cromatografia de coluna rápida usando hexano: acetato de etila (50:50) para fornecer o composto do título como um sólido (0,441 g 95%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,70 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,43–7,35 (m, 2H), 3,20 (s, 6H). Exemplo Preparativo 17 Etapa A
[00200] A uma solução de 2,6-diclorobenzo[d]oxazol (5 g, 26,8 mmols) em diclorometano seco (50 mL) foi adicionada morfolina (3,50 g, 40,3 mmols), e a mistura de reação foi resfriada para 0oC. A esta mistura de reação fria foi adicionada trietilamina (4,0 g, 39,6 mmols) gota a gota. Após a adição ser concluída, a mistura de reação foi dei- xada agitar em temperatura ambiente durante 4 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi tratada com água (2 x 20 mL) e ex- traído com diclorometano. A camada orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para fornecer um sólido branco que foi triturado com dietil éter para fornecer o composto do título (5 g, 78%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,59 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 11,20 Hz, 1H), 7,21 (dd, J = 2,80, 11,20 Hz, 1H), 3,71-3,74 (m, 4H), 3,57-3,60 (m, 4H). EM: 239,2 (M+H)+. Exemplo Preparativo 18
Etapa A
[00201] A uma solução de 2,5-diclorobenzo[d]oxazol (5 g, 26,8 mmols) em diclorometano seco (50 mL) foi adicionada morfolina (3,50 g, 40,3 mmols), e a mistura de reação foi resfriada para 0oC. A esta mistura de reação fria foram adicionados trietilamina (4,0 g, 39,6 mmols) gota a gota. Após a adição ser concluída, a mistura de reação foi deixada agitar em temperatura ambiente durante 4 h. Após a con- clusão da reação, a mistura de reação foi tratada com água (2 x 20 mL) e extraída com diclorometano. A camada orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e evaporada para fornecer um sólido branco que foi triturado com dietil éter para fornecer o composto do título (5,2 g, 81%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,44 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 7,06 (dd, J = 2,00, 8,40 Hz, 1H), 3,71-3,73 (m, 4H), 3,59-3,61 (m, 4H). EM: 239,2 (M+H)+. Exemplo Preparativo 19 Etapa A
[00202] A uma solução agitada de comercialmente disponível 2,6- 2,6-diclorobenzo[d]tiazol (500 g, 2,45 mol) em diclorometano (4 L) fo- ram adicionados trietilamina (1031 mL, 7,35 mol) e morfolina (290 mL, 3,67 mol) a 0 °C. Em seguida, a mistura de reação foi agitada a 25 °C durante 48 h. Após conclusão da reação (monitorada por TLC), água foi adicionada à mistura de reação, seguida por extração usando diclo- rometano (2 x 2,5 L). A camada orgânica foi secada sobre Na2SO4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida para fornecer o produto cru. Ao material cru foi adicionado terc-butil éter de metila (1 L), e a mistura foi agitada durante 2 h. O sólido foi coletado por filtragem, e secado sob vácuo em linha durante 6 h para fornecer o composto do título como um sólido marrom claro (530 g, 85%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,93-7,94 (m, 1H), 7,43-7,44 (m, 1H), 7,28-7,29 (m, 1H), 3,72-3,74 (m, 4H), 3,54-3,55 (m, 4H). EM: 255,1 (M+H)+. Exemplo Preparativo 20 Etapa A
[00203] A uma solução de 2,5-diclorobenzo[d]tiazol (5 g, 24,5 mmols) em diclorometano seco (50 mL) foi adicionada morfolina (3,19 g, 36,6 mmols), e a mistura de reação foi resfriada para 0 oC. A esta mistura de reação fria foram adicionada trietilamina (3,71 g, 36,7 mmols) gota a gota e a mistura de reação foi deixada agitar em tempe- ratura ambiente durante 4 h. Após a conclusão da reação, a mistura de reação foi tratada com água (2 x 20 mL) e extraída com diclorometano. A camada orgânica foi separada, secada sobre Na2SO4, filtrada e eva- porada sob pressão reduzida para fornecer um sólido branco que foi triturado com dietil éter para fornecer o composto do título (4,5 g, 86%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,82 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 7,11-7,11 (m, 1H), 3,72-3,73 (m, 4H), 3,55-3,56 (m, 4H). EM: 255,4 (M+H)+. Exemplo Preparativo 21
Etapa A
[00204] A uma solução de 3,4-difluoro nitrobenzeno (5 g, 31,4 mmols) em acetonitrila (50 mL), foram adicionados N-metil piperazina (3,7 g, 37,7 mmols) e carbonato de potássio (12,8 g, 94,3 mmols). A mistura de reação foi em seguida aquecida até o refluxo durante 3 ho- ras. A mistura de reação foi filtrada, concentrada sob vácuo, e o sólido obtido foi lavado com éter para fornecer o composto do título como só- lido amarelo (5,2 g, 69%). 1 H-RMN (300 MHz, CDCl3) δ = 7,89-8,03 (m, 2H), 6,90-6,91 (m, 1H), 3,33-3,34 (m, 4H), 2,60-2,61 (m, 4H), 2,38 (s, 3H). EM: 240,1 (M+H)+. Etapa B
[00205] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (5,2 g, 21,7 mmols) em etanol (100 mL), foi adicionado 10 % Pd/C (0,5 g) e a mistura de reação foi hidrogenada durante 16 horas. A mistura de reação foi filtrada através de almofada de celita e concentrada sob vá- cuo para fornecer o composto do título como sólido marrom (4,0 g, 88 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 6,75 (t, J = 9,20 Hz, 1H), 6,31 (t, J = 9,20 Hz, 2H), 4,97 (s, 2H), 2,82 (br-s, 4H), 2,43 (br-s, 4H), 2,21 (s, 3H). EM: 210,2 (M+H)+. Etapa C
[00206] A uma suspensão do composto do título de Etapa B acima (3,0 g, 14,33 mmols) em acetonitrila (30 mL) a 0 °C, foi adicionada ni- trito de terc-butila (2,5 mL, 21,5 mmols) durante um período de 10 min com uma seringa. Em seguida, brometo de cobre (II) (3,8 g, 17,2 mmols) foi adicionado em porções a 0°C e agitado durante 30 min. A mistura de reação foi deixada aquecer para 25 °C durante 1 h e aque- cida para 60 °C durante 4 h. Após conclusão da reação (monitorada por TLC), a mistura de reação foi filtrada através de almofada de celite, e lavada com acetato de etila para produzir o produto cru. O material cru foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (60-120) usando diclorometano/metanol (99:1) para fornecer o composto do tí- tulo como um sólido marrom (1 g, 25%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,40-7,41 (m, 1H), 7,28-7,31 (m, 1H), 6,96-6,98 (m, 1H), 2,98-2,99 (m, 4H), 2,46-2,47 (m, 4H), 2,22 (s, 3H). EM: 275,1 (M+H)+. Exemplo Preparativo 22 Etapa A
[00207] A uma solução de 3,4-difluoro nitrobenzeno (0,5 g, 3,14 mmols) em acetato de etila (10 mL), foram adicionados trimetilamina 81,3 mL, 9,42 mmols) seguida por cloridrato de 8-oxa-3- azabiciclo[3,2,1]octano (0,56 g, 3,77 mmols). A mistura de reação foi em seguida agitada em temperatura ambiente durante 16 h. A mistura de reação foi filtrada, concentrada sob vácuo, e o sólido obtido foi la- vado com éter para fornecer o composto do título como sólido amarelo (0,7 g, 88%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,99-8,02 (m, 2H), 7,10 (t, J = 8,88 Hz, 1H), 4,41 (br-s, 2H), 3,40 (d, J = 11,80 Hz, 2H), 3,13 (d, J = 10,64 Hz, 2H), 1,89 (br-s, 4H). EM: 253,1 (M+H)+.
Etapa B
[00208] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (0,7 g, 2,77 mmols) em etanol (20 mL), foi adicionado Pd/C a 10 % (0,1 g) e a mistura de reação foi hidrogenada durante 16 horas. A mistura de reação foi filtrada através de almofada de celite e concentrada sob vá- cuo para fornecer o composto do título como um sólido gomoso mar- rom claro (0,6 g, 96 %). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 6,71 (t, J = 9,64 Hz, 1H), 6,27-6,28 (m, 2H), 4,96 (s, 2H), 4,29 (br-s, 2H), 2,80 (br-s, 4H), 1,92-1,93 (m, 2H), 1,77-1,78 (m, 2H). EM: 223,1 (M+H)+. Etapa C
[00209] A uma suspensão do composto do título de Etapa B acima (0,50 g, 2,24 mmols) em acetonitrila (10 mL) a 0 °C, foi adicionado ni- trito de terc-butila (0,4 mL, 3,35 mmols) durante um período de 10 min com uma seringa. Em seguida, brometo de cobre (II) (0,6g, 2,68 mmols) foi adicionado em porções a 0°C e agitado durante 30 min. A mistura de reação foi deixada aquecer para 25 °C durante 1 h e aque- cida para 60 °C durante 4 h. Após conclusão da reação (monitorada por TLC), a mistura de reação foi filtrada através de almofada de celite, e lavada com acetato de etila para produzir o produto cru. O material cru foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (60-120) usando diclorometano/metanol (99:1) para fornecer o composto do tí- tulo como um sólido marrom claro (0,27 g, 42%). 1 H-RMN (300 MHz, CDCl3) δ = 7,17-7,19 (m, 2H), 6,75 (t, J = 8,68 Hz, 1H), 4,43 (br-s, 2H), 3,03-3,06 (m, 4H), 2,09 (br-s, 2H), 1,98 (br-s, 2H). EM: 288,0 (M+H)+. Exemplo Preparativo 23
Etapa A
[00210] A uma solução de 4-bromo-3-fluoroanilina (1 g, 5,26 mmols) em N,N’-dimetilformamida (10 ml), iodeto de potássio (2,18 g, 13,1 mmols), e carbonato de sódio (1,95 g, 18,4 mmols) foram adicionados e a mistura de reação foi aquecida para 150 °C. Em seguida 1-bromo- 2-(2-bromoetóxi)etano (1,34 g, 5,77 mmols) foi adicionado e o aqueci- mento foi continuado durante 16 h. Após conclusão da reação (monito- rada por TLC), a mistura de reação foi diluída com água (25 mL) e ex- traída com acetato de etila (2 x 15 mL). Os extratos orgânicos combi- nados foram secados sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para produzir o produto cru. O material cru foi purifi- cado por cromatografia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (80:20) para fornecer o composto do título (0,6 g, 43%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,43-7,44 (m, 1H), 6,93-6,94 (m, 1H), 6,73-6,74 (m, 1H), 3,70-3,72 (m, 4H), 3,13-3,14 (m, 4H). EM: 261,9 (M+H)+. Exemplo Preparativo 24 Etapa A
[00211] A uma solução de 2,6-diclorobenzo[d]oxazol (5 g, 26,6 mmols) em diclorometano seco (50 mL) a 0 °C, uma solução a 2 M de dimetilamina em THF (26,6 mL, 53,2 mmols) e trietilamina (5,6 mL, 39,9 mmols) foram adicionados. A mistura de reação foi em seguida agitada a 25 °C durante 4 h. Após a conclusão da reação (monitorada por TLC), a mistura de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com diclorometano (2 x 20 mL). Os extratos orgânicos combinados foram secados sobre Na2SO4, filtrados e evaporados sob pressão re- duzida para fornecer o produto cru. O material cru foi triturado com die-
til éter, filtrado, lavado com dietil éter e secado para fornecer o com- posto do título como um sólido (5 g, 96%) 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,56 (s, 1H), 7,23-7,24 (m, 1H), 7,16-7,16 (m, 1H), 3,13 (s, 6H). EM: 197,2 (M+H)+. Exemplo Preparativo 25 Etapa A
[00212] A uma solução de 5-bromo-2-fluoroanilina (1 g, 5,26 mmols) em N,N’-dimetilformamida (10 ml), iodeto de potássio (2,18 g, 13,1 mmols), e carbonato de sódio (1,95 g, 18,4 mmols) foram adicionados e a mistura de reação foi aquecida para 150 °C. Em seguida 1-bromo- 2-(2-bromoetóxi)etano (1,34 g, 5,77 mmols) foi adicionado e o aqueci- mento foi continuado durante 16 h. Após conclusão da reação (monito- rada por TLC), a mistura de reação foi diluída com água (25 mL) e ex- traída com acetato de etila (2 x 15 mL). Os extratos orgânicos combi- nados foram secados sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para produzir o produto cru. O material cru foi purifi- cado por cromatografia de coluna rápida usando hexano/acetato de etila (80:20) para fornecer o composto do título (0,8 g, 58%). 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 7,03-7,04 (m, 2H), 6,90-6,92 (m, 1H), 3,87-3,88 (m, 4H), 3,08-3,10 (m, 4H). Exemplo Preparativo 26
Legenda: acetona – L-prolina – dioxano – etapa - refluxo Etapa A
[00213] Uma solução de 5-bromo-3-iodopiridin-2-amina (5 g, 16,73 mmols) e isotiocianato de benzoíla (3,29, 20,16 mmol,) em acetona (10 mL) foi agitada a 60 °C durante 12 h. Após conclusão da reação (moni- torada por TLC), a mistura de reação foi evaporada sob pressão redu- zida e o sólido foi filtrado, lavado com hexano (200 mL) e secado para fornecer o composto do título como um sólido off-white (4 g, 52%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12,35 (s, 1H), 11,86 (s, 1H), 8,64- 8,65 (m, 2H), 7,99-7,99 (m, 2H), 7,67 (s, 1H), 7,56 (d, J = 9,40 Hz, 2H). EM: 461,5 (M+H)+. Etapa B
[00214] A uma solução do composto do título de Etapa A acima (4 g, 8,67 mmols) em 1,4-dioxano (60 mL) a 25 °C, carbonato de potássio (2,5 g, 18,1 mmols), L-prolina (0,28 g, 2,43 mmols) e iodeto de cobre(I) (0,462 g, 2,42 mmol,) foram adicionados e a mistura de reação foi agi- tada a 80 °C durante 16 h, Após conclusão da reação (monitorada por TLC) a mistura de reação foi vertida em água (100 mL) e NH4Cl aquo- so saturado (100 mL) e agitada a 25 °C durante 1 h. O sólido desse modo obtido foi filtrado, lavado com NH4Cl aquoso saturado (2 x 25 mL), água (2 x 25 mL) e secado para fornecer fornecer o composto do título cru como um sólido off-white (2,5 g). EM: 336,0 (M+H)+.
Etapa C
[00215] Uma suspensão do composto do título cru de Etapa B aci- ma (2 g, 5,98 mmols) em H2SO4 (70%, 6 mL) foi aquecida a 120 °C durante 2 h. Após conclusão da reação (monitorada por TLC), a mistu- ra de reação foi resfriada para 25 °C e lentamente vertida em 100 mL de água fria. Em seguida, a mistura de reação foi basificada usando NaOH aquoso (50%) e extraída com acetato de etila (6 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secadas sobre com Na2SO4, filtradas e o solvente foi concentradas sob pressão reduzida, para for- necer o composto do título como um sólido amarelo claro (0,3 g, 23%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,27-8,31 (m, 2H), 8,11 (s, 2H). EM: 230,4 (M+H)+. Etapa D
[00216] A uma suspensão do composto do título de Etapa C acima (0,3 g, 1,3 mmols) em acetonitrila (5 mL) a 0 °C, foi adicionado nitrito de terc-butila (0,2 g, 1,95 mmols) durante um período de 10 min com uma seringa. Em seguida, cloreto de cobre(II) (0,2 g, 1,48 mmols) foi adicionado em porções a 0°C e a mistura de reação foi agitada duran- te 30 min. A mistura de reação foi deixada aquecer para 25 °C durante 1 h e aquecida para 65 °C durante 4 h. Após conclusão da reação (monitorada por TLC), o solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo obtido foi diluído com água (20 mL) e extraído com diclo- rometano/metanol (95:5) (3 x 20 mL). Os orgânicos combinados foram lavados com salmoura (10 mL), secados sobre Na2SO4, filtrados e concentrados sob pressão reduzida para produzir o produto cru. O ma- terial cru foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (60- 120) usando diclorometano/metanol (99:1) para fornecer o composto do título como um sólido off-white (0,15 g, 46%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,91 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 8,82 (d, J = 1,60 Hz, 1H).
EM: 250,9 (M+H)+. Etapa E
[00217] A uma solução do composto do título de Etapa D acima (0,18 g, 0,72 mmols) em diclorometano seco (5 mL) a 0°C, trietilamina (0,3 mL, 2,16 mmols) e morfolina (74 mg, 0,85 mmols) foram adiciona- dos e a mistura de reação foi agitada a 25 °C durante 6 h. Após con- clusão da reação (monitorada por TLC), a mistura de reação foi con- centrada sob pressão reduzida para produzir o produto cru que foi pu- rificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (60 a 120 malhas) usando hexano/acetato de etila (70:30) para fornecer o composto do título como um sólido amarelo (0,18 g, 83%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,49 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 8,38 (d, J = 1,60 Hz, 1H), 3,72-3,74 (m, 4H), 3,61-3,62 (m, 4H). EM: 302,0 (M+H)+. Exemplo Preparativo 27 Legenda: nitrito de terc-butila – etapa – morfolina Etapa A
[00218] Uma solução de 2-bromo-6-cloropiridin-3-amina (5 g, 24,1 mmols) e tiocianato de potássio (7 g, 72,3 mmols) em etanol (50 mL), ácido hidroclórico (37 %, 100 mL) foi adicionada e a mistura de reação foi agitada a 100 °C durante 40-45 h. A conclusão da reação foi con- firmada por TLC. A mistura de reação foi resfriada para temperatura ambiente e concentrada para fornecer um sólido marrom, que foi divi- dido em diclorometano (150 mL) e NaOH aquoso a 1 N (50 mL). O só-
lido foi filtrado e secado para fornecer o composto do título cru como um sólido amarelo claro (3,5 g, 79 %). O produto foi levado como tal para a etapa seguinte. EM: 186,1 (M+H)+. Etapa B
[00219] A uma suspensão do composto do título de Etapa A acima (1,5 g, 8,08 mmols) em acetonitrila (25 mL) a 0°C foi adicionado nitrito de terc-butila (1,4 ml, 12,12 mmols) durante um período de 10 min com uma seringa. Em seguida, brometo de cobre(II) (2,16 g, 9,69 mmols) foi adicionado em porções. Após 30 minutos a 0°C, a mistura de rea- ção foi deixada aquecer para temperatura ambiente durante 2 h. O progresso da reação foi monitorado por TLC. Após conclusão da rea- ção, o solvente foi evaporado e diluído com água (20 mL) e diclorome- tano/metanol (95:5) (3 x 20 mL). Os orgânicos combinados foram la- vados com salmoura (10 mL), secados sobre Na2SO4, filtrados e con- centrados sob pressão reduzida. O composto cru foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (60-120), eluído com diclorome- tano/metanol(99:1) para fornecer o composto do título como um sólido amarelo claro (0,65 g, 32%). O produto foi levado como tal para a eta- pa seguinte. EM: 248,5 (M+H)+. Etapa C
[00220] A uma solução do composto título cru de Etapa B acima (0,65 g, 2,61 mmols) em diclorometano seco (5 mL), foram adiciona- das trietilamina (1,1 mL, 7,83 mmols) e morfolina (0,34 g, 3,91 mmols). A mistura de reação foi em seguida agitada em temperatura ambiente durante 6 h. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo. O com- posto cru foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (60- 120), eluído com éter de petróleo/acetato de etila (50/50) para fornecer o composto do título como um sólido amarelo (0,6 g, 90%).
H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,83 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,44 Hz, 1H), 3,72-3,74 (m, 2H), 3,59-3,60 (m, 2H). EM: 256,0 (M+H)+. Exemplo Preparativo 28 Etapa A
[00221] Em um tubo de micro-ondas 6-bromo-2-clorotiazolo[4,5- c]piridina comercialmente disponível (50 mg, 0,20 mmols) e morfolina (3,5 mL, 40,1 mmols) foram adicionados. O tubo foi selado e agitado em temperatura ambiente durante 10 minutos e em seguida a 150°C durante 10 minutos em um reator de micro-ondas (Biotage). O solven- te foi removido sob pressão reduzida para fornecer o composto do títu- lo (0,60 g, 78%). 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,48 (s, 1H), 8,05 (s, 1H), 3,61 (dd, 4H), 3,17 – 3,03 (m, 4H). Exemplo Preparativo 29 Etapa A
[00222] A uma solução agitada de comercialmente disponível (2- fluorofenil)hidrazina; cloridrato (10,0 g, 0,0615 mol) e 3-oxopiperidina- 1-carboxilato de terc-butila (12,3 g, 0,0615 mol) em 1,4-dioxano (100,0 mL) H2SO4 concentrado (10,0 mL) foi adicionado (a 0° C), em seguida aquecida para 100° C durante 12 h sob atmosfera de nitrogênio.
[00223] A mistura de reação foi concentrada e o produto cru foi ba- sificado usando solução de água de NaOH a 30% (pH=9-10) seguido por diclorometano extração. A camada de diclorometano foi concen- trada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (10,0 g, cru) como um óleo marrom.
[00224] O composto cru foi usado para a etapa seguinte sem outras purificações. EM: 191,1 (M+H)+. Etapa B
[00225] A uma solução do composto título cru de Etapa A acima (10,0 g, cru) em tetra-hidrofurano (100,0 mL) foram adicionados trieti- lamina (2,83 mL, 0,0205 mol) e dicarbonato de di-terc-butila (1,88 mL, 0,00820 mol) a 0° C, em seguida agitada em temperatura ambiente durante 12 h son nitrogênio. A reação foi monitorada por TLC e LCMS. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (50 mL) e água (100 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combinada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empre- gando um gradiente de éter de petróleo/acetato de etila (100/0 -> 90/10) para fornecer para fornecer o composto do título (1,5 g, 10%) como um sólido amarelo claro. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,32 (bs, 1H), 7,22 (d, J = 7,64 Hz, 1H), 6,86-6,88 (m, 2H), 4,58 (s, 2H), 3,68 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 2,69 (t, J = 5,00 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H). EM: 235,1 (M +H) -t-butila. Etapa C
[00226] A uma suspensão de hidreto de sódio (0,575 g, 15,0 mmols) em THF (10,0 mL), foi adicionado gota a gota uma solução de THF (10,0 mL) do composto do título de Etapa B acima (1,50 g, 5,00 mmols) a 0° C e a mistura foi agitada em temperatura ambiente duran- te 60 min. Cloreto de tosila (1,20 g, 6,00 mol) foi adicionado a 0° C go- ta a gota e em seguida agitada em temperatura ambiente durante 3 h sob atmosfera de nitrogênio.
[00227] Após conclusão da reação por TLC, a mistura de reação foi extinta com água gelada seguido por extração usando acetato de etila (50,0 mL). A camada orgânica foi separada, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e em seguida concentrada sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de petróleo/acetato de etila (100/0 -> 80/20) para fornecer o com- posto do título (1,6 g, 71,8%) como um sólido off-white. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,76 (d, J = 7,52 Hz, 2H), 7,42 (d, J = 8,08 Hz, 2H), 7,31 (d, J = 7,20 Hz, 1H), 7,22-7,24 (m, 1H), 7,07-7,09 (m, 1H), 4,94 (s, 2H), 3,69 (bs, 2H), 2,69 (bs, 2H), 2,35 (s, 3H), 1,46 (s, 9H). EM: 345,1 (M+H)+-Boc. Etapa D
[00228] A uma solução agitada do composto do título de Etapa C acima (1,6 g, 3,59 mmols) em diclorometano (10,0 mL) foi adicionado HCl a 4M em 1,4-dioxano (10,00 mL) a 0° C, em seguida agitado du- rante 2 h a 0 °C e aquecer para temperatura ambiente.
[00229] Após conclusão da reação por TLC, a mistura de reação foi concentrada para fornecer o composto do título (1,3 g, 94,6%) como sólido cinza.
[00230] O composto cru foi usado para a etapa seguinte sem outras purificações. EM: 345,1 (M+H)+ Exemplo Preparativo 30
Etapa A
[00231] A uma solução agitada (2-fluorofenil)hidrazina;cloridrato de comercialmente disponível (10,0 g, 0,0615 mol) e 3-oxopiperidina-1- carboxilato de terc-butila (12,3 g, 0,0615 mol) em 1,4-dioxano (100,0 mL) foi adicionado H2SO4 concentrado (10,0 mL) a 0° C. A reação foi em seguida aquecida a 100° C durante 12 h sob atmosfera de nitrogê- nio.
[00232] A mistura de reação foi concentrada e o produto cru foi ba- sificado usando solução de água de NaOH a 30% (pH=9-,10) seguido por diclorometano extração. A camada de diclorometano foi concen- trada sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (10,0 g, cru) como um óleo marrom.
[00233] O composto cru foi usado para a etapa seguinte sem outras purificações. EM: 191,1 (M+H)+. Etapa B
[00234] A uma solução agitada do composto do título de Etapa A (10,0 g, cru) em tetra-hidrofurano (100,0 mL) foram adicionados trieti- lamina (2,83 mL, 0,0205 mol) e dicarbonato de di-terc-butila (1,88 mL, 8,20 mmols) a 0° C. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 12 h sob atmosfera de nitrogênio. A reação foi monitorada por TLC e LCMS. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (50 mL) e água (100 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combi-
nada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evapora- dos sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biota- ge), empregando um gradiente de éter de petróleo/acetato de etila (100/0 -> 90/10) para fornecer o composto do título (1,5 g, 10%) como um sólido amarelo claro. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,32 (bs, 1H), 7,22 (d, J = 7,64 Hz, 1H), 6,86-6,88 (m, 2H), 4,58 (s, 2H), 3,68 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 2,69 (t, J = 5,00 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H). EM: 235,1 (M +H) -t-butila. Etapa C
[00235] A uma suspensão de hidreto de sódio (0,421 g, 0,0110 mol) em THF (10,0 mL), foi adicionada gota a gota uma solução de THF (10mL) do composto do título de Etapa B (1,1 g, 3,66 mol) a 0° C, A mistura foi em seguida agitada em temperatura ambiente durante 60 min. Iodometano (0,624 g, 4,39 mmols) foi adicionado a 0° C e a mis- tura foi em seguida agitada em temperatura ambiente durante 3 h sob atmosfera de nitrogênio.
[00236] Após conclusão da reação por TLC, a mistura de reação foi extinta com água gelada seguida por extração usando acetato de etila (50,0 mL). A camada orgânica foi separada, secada sobre sulfato de sódio, filtrada e em seguida concentrada para fornecer o composto do título (1,10 g, 96,2%) como um sólido marrom claro.
[00237] O composto cru foi usado para a etapa seguinte sem outras purificações. EM: 305,3 (M +H)+ Etapa D
[00238] A uma solução agitada de do composto do título de Etapa C (1,10 g, 3,52 mol) em diclorometano (5,0 mL) foi adicionada uma solu- ção de HCl a 4N em dioxano (10,00 mL) a 0° C. A mistura foi agitada durante 2 h a 0° e aquecer para temperatura ambiente.
[00239] A mistura de reação foi concentrada e o produto cru foi la- vada com dietil éter (10,00 mL), secado sob vácuo para fornecer o composto do título (750 mg, 78,8%) como um sólido cinza. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,94 (bs, 2H), 7,29 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 6,97-6,98 (m, 2H), 4,41 (s, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,37-3,38 (m, 2H), 2,92-2,93 (m, 2H). EM: 205,0 (M +H)+. Exemplo Preparativo 31 Etapa A
[00240] A uma solução de 2,5-dicloro-1,3-benzoxazol comercial- mente disponível (1,00g, 5,32 mmols) em diclorometano (50,0mL), trie- tilamina (1,61g,1,60 mol) e 1-metilpiperazina (0,693 g, 6,38 mmols) foram adicionados lentamente a 0°C. A mistura foi em seguida agitada a 25°C durante 12hr. A mistura de reação foi diluída com água (50,0 mL) e diclorometano (50,0 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com diclorometano mais duas vezes. A fase orgâ- nica combinada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de DCM/MeOH (100/0 -> 90/10) para fornecer o composto do título (1,0 g,73,9%) como um sólido bran- co. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,41 (d, J = 8,44 Hz, 1H), 7,33 (s, 1H), 7,02-7,03 (m, 1H), 3,59-3,61 (m, 4H), 2,41-2,42 (m, 4H), 2,23 (s, 3H). EM: 252,1 (M +H)+. Exemplo Preparativo 32
Etapa A
[00241] 2,5-dibromo piridina comercialmente disponível (1,0 g, 4,22 mmols) e N-metil piperazina (0,55 g, 5,49 mmols) foram dissolvidas em tolueno desgaseificado e carregadas com atmosfera de nitrogênio. Em seguida, Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,077 g, 0,084 mmols), xantphos (0,147 g, 0,253 mmols) e t-butóxido de sódio (0,609 g, 6,33 mmols) foram adicionados e a mistura foi aquecida para 100° C durante 5 h. A mistura de reação foi filtrada com celite, lavada com diclorometano e metanol e os solventes foram evaporados sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de DCM/MeOH (100/0 -> 96/04) para fornecer o composto do título (0,46 g, 37%) como um sólido amarelo claro. 1 H-RMN (400 MHz, MeOD) δ 8,14-8,14 (m, 1H), 7,63-7,64 (m, 1H), 6,79 (d, J = 9,08 Hz, 1H), 3,54-3,56 (m, 4H), 2,55-2,56 (m, 4H), 2,36 (s, 3H). EM: 258,1 (M +2H)+. Exemplo Preparativo 33 Legenda: tolueno - etapa
Etapa A
[00242] 2,5-dibromopirazina comercialmente disponível (0,500g, 2,10 mmols) e 1-metilpiperazina (0,105g, 1,05 mmols), Xantphos(0,073 g,0,126 mmols), Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,0385g, 0,126 mmols) e terc-butóxido de sódio (0,404 g,4,20 mmols) foram adicionados e tolueno seco e desgaseificado (15,0 ml) foi adicionado. O frasconete foi carregado com gás de argônio e selado e aquecido a 100 °C durante 12 horas. A mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,165 g, 28%) como um sólido gomoso marrom claro. O composto cru foi usado para a etapa seguinte sem outras puri- ficações. EM: 259,0 (M +2H)+. Exemplo Preparativo 34 Etapa A
[00243] A uma solução de 5-bromo-2-fluoropiridina comercialmente disponível (0,3 g, 1,70 mmols) e 6-oxa-3-azabiciclo[3,1,1]heptano 4- metilbenzenossulfonato (0,463 g, 1,7 mmols) em DMF, carbonato de potássio foi adicionado (0,707 g, 5,11 mmols). A reação aquecida para 90° C durante 12 h.
[00244] A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL) e água (30 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi ex- traída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combi-
nada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evapora- dos sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biota- ge), empregando um gradiente de acetato de etila/éter de petróleo (30/70) para fornecer o composto do título (0,14 g, 31%) como um só- lido branco. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,20 (d, J = 3,20 Hz, 1H), 7,71-7,73 (m, 1H), 6,63 (d, J = 11,60 Hz, 1H), 4,69-4,71 (m, 2H), 3,64-3,68 (m, 2H), 3,54-3,55 (m, 2H), 1,89-1,90 (m, 2H). EM: 255,1 (M +H)+. Exemplo Preparativo 35 Etapa A
[00245] A uma solução de 5-bromo-2-cloro-piridina comercialmente disponível (0,25 g, 2,451 mmols) e hexa-hidro-1H-furo[3,4-c]pirrol (0,647 g, 3,676 mmols) em DMF (5 mL), carbonato de potássio (0,677 g, 4,902 mmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 90 °C duran- te 12 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL) e água (30 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraí- da com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combinada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empre- gando um gradiente de acetato de etila/éter de petróleo (30/70) para fornecer o composto do título (0,25 g, 60%). EM: 271,1 (M +2H)+. Exemplo Preparativo 36
Legenda: tolueno Etapa A
[00246] 2,5-dibromopiridina comercialmente disponível (0,5 g, 2,2 mmols) e (R)-2-metilmorfolina (0,234 g, 2,9 mmols) foram adicionadas a um tubo de reação e tolueno desgaseificado (10,0 ml) foi adicionado. Em seguida, Xantphos (0,073 g, 2,1 mol), Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,024 g, 0,4 mmols) e Terc- butóxido de sódio (0,608 g, 6,3 mmols) foram adicionados e a solução foi aquecida a 100 °C durante 5 horas em tubo selado carregado com gás de argônio.
[00247] A mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP- Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de petróleo/acetato de etila (100/0 -> 70/30) para fornecer title compound (0,3 g, 55%) como um sólido off-white. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,18 (d, J = 3,20 Hz, 1H), 7,69-7,70 (m, 1H), 6,84 (d, J = 12,00 Hz, 1H), 3,87-3,88 (m, 3H), 3,48-3,49 (m, 2H), 2,74-2,76 (m, 1H), 1,14 (d, J = 8,00 Hz, 3H). EM: 257,1 (M +H)+. Exemplo Preparativo 37
Etapa A
[00248] 2,5-dibromopiridina comercialmente disponível (0,5 g, 2,2 mmols) e (S)-2-metilmorfolina (0,234 g, 2,9 mmols) foram adicionadas a um tubo de reação e tolueno desgaseificado (10,0 ml) foi adicionado. Em seguida Xantphos (0,073 g, 2,1 mol), Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,024 g, 0,4 mmols) e Terc- butóxido de sódio (0,608 g, 6,3 mmols) foram adicionados e a solução foi aquecida a 100 °C durante 5 horas em tubo selado carregado com gás de argônio.
[00249] A mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP- Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de petróleo/acetato de etila (100/0 -> 70/30) para fornecer o composto do título (0,37 g, 68%) como um sólido off-white. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,18 (d, J = 2,32 Hz, 1H), 7,70-7,71 (m, 1H), 6,84 (d, J = 9,04 Hz, 1H), 3,90-3,91 (m, 3H), 3,52-3,53 (m, 2H), 2,52-2,53 (m, 1H), 1,15 (d, J = 6,24 Hz, 3H). EM: 257,1 (M +H)+. Exemplo Preparativo 38 Etapa A
[00250] 2,5-dibromopiridina comercialmente disponível (1 g, 4,22 mmols) e (R)-3-metil morfolina (0,234 g, 2,9 mmols) foram adicionadas a um tubo de reação e tolueno desgaseificado (10,0 ml) foi adicionado. Em seguida, Xantphos (0,146 g, 0,253 mmols),
Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,048 g, 0,84 mmols) e Terc- butóxido de sódio (1,21 g, 12,66 mmols) foram adicionados e a solu- ção foi aquecida a 100 °C durante 6 horas em tubo selado carregado com gás de argônio. A mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de petró- leo/acetato de etila (100/0 -> 70/30) para fornecer o composto do título (0,17 g, 15%) como um sólido off-white. O composto cru foi usado para a etapa seguinte sem outras purificações. EM: 257,1 (M +H)+. Exemplo Preparativo 39 Etapa A
[00251] A uma solução de 5-bromo-2-fluoro-piridina comercialmente disponível (0,5 g, 2,84 mmols) e 7-oxa-2-azaspiro[3,5]nonano (0,36 g, 2,84 mol) em DMF (5 mL), carbonato de potássio foi adicionado (1,17 g, 8,52 mmols) e a mistura foi aquecida para 90 °C durante 12 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL) e água (30 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combinada foi seca- da sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados sob pres- são reduzida para fornecer o composto do título (0,44 g, 55%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,12 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 7,64-7,65 (m, 1H), 6,36 (d, J = 11,60 Hz, 1H), 3,66-3,69 (m, 4H), 3,52-3,54 (m, 4H), 1,71-1,73 (m, 4H). EM: 285,0 (M +H)+. Exemplo Preparativo 40
Etapa A
[00252] A uma solução de 5-bromo-2-cloro-piridina comercialmente disponível (0,83 g, 4,34 mmols) e 4-metóxi piperidina (0,5 g, 4,34 mmols) em DMF (5 mL), carbonato de potássio (1,79 g, 13,02 mmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida para 90 °C durante 12 h. A mis- tura de reação foi diluída com acetato de etila (50 mL) e água (30 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combinada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados sob pressão reduzi- da. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gra- diente de acetato de etila/éter de petróleo (30/70) para fornecer o composto do título (0,5 g, 42%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,14-8,15 (m, 1H), 7,63-7,64 (m, 1H), 6,85 (d, J = 9,12 Hz, 1H), 3,86-3,87 (m, 2H), 3,39-3,40 (m, 1H), 3,27 (s, 3H), 3,14-3,15 (m, 2H), 1,84-1,85 (m, 2H), 1,35-1,36 (m, 2H). EM: 273,1 (M +2H)+. Exemplo Preparativo 41 Etapa A
[00253] A uma solução de 2,5-dibromopiridina comercialmente dis- ponível (0,5 g, 2,11m mol) e ((1S,4S)-2-oxa-5-azabiciclo[2,2,1]heptano
(0,25 g, 2,53 mmols) foram adicionados a um tubo de reação e tolueno desgaseificado (10,0 ml) foi adicionado. Em seguida, Xantphos (0,073 g, 0,127 mmols), Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,024 g, 0,042m mol) e Terc-butóxido de sódio (0,61 g, 6,3 mmols) foram adici- onados e a solução foi aquecida a 100 °C durante 6 horas em tubo se- lado carregado com gás de argônio. A mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de petróleo/acetato de etila (100/0 -> 70/30) para fornecer o composto do título (0,3 g, 57%) como um sólido off-white. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,13 (s, 1H), 7,64-7,65 (m, 1H), 6,54 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,65 (s, 1H), 3,76 (d, J = 7,20 Hz, 1H), 3,61 (d, J = 6,80 Hz, 1H), 3,42 (d, J = 10,00 Hz, 1H), 3,19 (d, J = 10,00 Hz, 1H), 1,86-1,89 (m, 2H). EM: 255,1 (M +H)+. Exemplo Preparativo 42 Etapa A
[00254] A uma solução de 5-bromo-2-fluoro-piridina comercialmente disponível (0,23g, 1,30 mmols) e ((1R,4R)-2-oxa-5- azabiciclo[2,2,1]heptano (0,18 g, 1,30 mmols) em DMF (5 mL), carbo- nato de potássio (0,54 g, 3,9 mmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida para 90 °C durante 12 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL) e água (30 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combinada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os sol- ventes foram evaporados sob pressão reduzida para fornecer o com-
posto do título (0,32 g, 96%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,13 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,64-7,64 (m, 1H), 6,54 (d, J = 11,60 Hz, 1H), 4,81 (s, 1H), 4,65 (s, 1H), 3,76 (d, J = 10,00 Hz, 1H), 3,61 (d, J = 10,00 Hz, 1H), 3,43 (d, J = 13,20 Hz, 1H), 3,20 (d, J = 13,60 Hz, 1H), 1,83-1,86 (m, 2H). EM: 257,0 (M +2H)+. Exemplo Preparativo 43 Etapa A
[00255] A uma solução de 5-bromo-2-cloro-piridina comercialmente disponível (1 g, 5,19 mmols) e ((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolina (0,778 g, 6,75 mmols) em DMF (5 mL) carbonato de potássio (1,57 g, 11,43 mmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida para 90 °C durante 12 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (50 mL) e água (30 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combinada foi seca- da sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados sob pres- são reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregan- do um gradiente de acetato de etila/éter de petróleo (30/70) para for- necer o composto do título (0,17 g, 12%). 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,20 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 7,54-7,54 (m, 1H), 6,54 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 3,97-3,97 (m, 2H), 3,69-3,70 (m, 2H), 2,49-2,51 (m, 2H), 1,27 (d, J = 6,40 Hz, 6H). EM: 271,1(M +H)+. Exemplo Preparativo 44
Etapa A
[00256] A uma solução de 2,5-dibromopiridina comercialmente dis- ponível (0,5 g, 2,11 mmols) e ((S)-3-metilmorfolina (0,213 g, 2,11 mmols) foram adicionados a um tubo de reação e tolueno desgaseifi- cado (10,0 ml) foi adicionado. Em seguida, Xantphos 0,073 g ,0,12 mmols), Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,038 g, 0,042 mmols) e Terc-butóxido de sódio (0,608g, 6,33 mmols) foram adicionados e a solução foi aquecida a 100 °C durante 6 horas em tubo selado carre- gado com gás de argônio. A mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O cru purifica- do em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de petróleo/acetato de etila (100/0 -> 70/30) para fornecer o composto do título (0,23 g, 42%) como um sólido amarelo. 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,22-8,23 (m, 1H), 7,55-7,56 (m, 1H), 6,50 (d, J = 9,04 Hz, 1H), 4,23-4,24 (m, 1H), 4,01-4,02 (m, 1H), 3,76- 3,77 (m, 3H), 3,59-3,60 (m, 1H), 3,16-3,17 (m, 1H), 1,24 (d, J = 6,72 Hz, 3H). EM: 259,1 (M +H)+. Exemplo Preparativo 45
Etapa A
[00257] A uma solução de 2,5-dibromopiridina comercialmente dis- ponível (0,5 g, 2,11 mmols) e 2-oxa-7-azaspiro[3,5]nonano (0,268 g, 2,11 mmols) foram adicionados a um tubo de reação e tolueno desga- seificado (10,0 ml) foi adicionado. Em seguida Xantphos (0,073g, 0,12 mmols), Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (0,038 g, 0,042 mmols) e Terc-butóxido de sódio (0,608g, 6,33 mmols) foram adicionados e a solução foi aquecida a 100 °C durante 6 horas em tubo selado carre- gado com gás de argônio. A mistura de reação foi filtrada através de celite e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,37 g, 62%) como um sólido off-white. 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,19-8,19 (m, 1H), 7,52-7,53 (m, 1H), 6,59 (d, J = 9,04 Hz, 1H), 4,50 (s, 4H), 3,46-3,47 (m, 4H), 1,93-1,94 (m, 4H). EM: 285,0 (M +2H)+. Exemplo Preparativo 46 Etapa A
[00258] A uma solução de 5-bromo-2-fluoro-piridina comercialmente disponível (0,5 g, 3,34 mmols) e 3-oxa-8-azabiciclo[3,2,1]octano (0,882 g, 5,0133 mmols) em DMF(5 mL) carbonato de potássio (0,923 g, 6,6844 mmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida para 90 °C du- rante 12 h. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL) e água (30 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi ex- traída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combi- nada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evapora-
dos sob pressão reduzida para fornecer o composto do título (0,5 g, 67%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,17 (d, J = 2,12 Hz, 1H), 7,67-7,68 (m, 1H), 6,80 (d, J = 8,92 Hz, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,60-3,62 (m, 2H), 3,48-3,51 (m, 2H), 1,85-1,86 (m, 4H). EM: 271,1 (M +2H)+ Exemplo Preparativo 47 Etapa A
[00259] A uma suspensão agitada do composto do título de Exem- plo Preparativo 12 (0,370g, 0,00199 mol) e 2,5-dicloro-1,3-benzoxazol comercialmente disponível (0,336g, 0,00179 mol) em 15 mL de DMF (15 mL) carbonato de potássio (0,823g, 0,00595 mol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 100°C durante a noite. Após conclusão de re- ação por TLC, água foi adicionada e um sólido foi obtido. O sólido foi filtrado e lavado com hexano para fornecer o composto do título (0,4 g, cru). EM: 338,1 (M+H)+ Exemplo Preparativo 48 Etapa A
[00260] A uma suspensão agitada do composto do título de Exem- plo Preparativo 11 (0,350 g,0,00107 mol) e comercialmente disponível
(0,181g, 0,000965 mol) em 15 mL de DMF carbonato de potássio (0,445g, 0,000756 mol) foi adicionado e a mistura de reação foi aque- cida a 100°C durante a noite. Após conclusão da reação por TLC, água foi adicionada e um sólido foi obtido. O sólido foi filtrado e lavado com hexano para fornecer o composto do título (0,45 g, cru). EM: 478,1 (M+H)+ Exemplo Preparativo 49 Etapa A
[00261] A uma solução de 3,6-dicloropiridazina comercialmente dis- ponível (0,500 g, 3,3783 mmols) e (2S,6R)-2,6-dimetilmorfolina (0,505 g, 4,3918 mmols) em etanol (15 mL) foi adicionada trietilamina (0,516 g, 5,0675 mmols) e a reação foi aquecida a 80 °C durante 12 h. A mis- tura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de pe- tróleo/acetato de etila (100/0 -> 70/30) para fornecer o composto do título (0,500 g, 64,93%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,56 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 4,18-4,18 (m, 2H), 3,61-3,62 (m, 2H), 2,49-2,50 (m, 2H), 1,16 (d, J = 6,40 Hz, 6H). EM: 228,1(M +H)+ Exemplo Preparativo 51
Etapa A
[00262] A uma solução de comercialmente disponível 3,6- dicloropiridazina (0,500g, 3,36 mmols) e (2S)-2-metilmorfolina (0,339g, 3,36 mmols) em etanol (15 mL) foi adicionada trietilamina (0,509g, 5,03 mmols) e a reação foi aquecida a 80 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de petró- leo/acetato de etila (100/0 -> 70/30) para fornecer o composto do título (0,250 g, 34,5%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,57 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 4,08-4,09 (m, 2H), 3,91-3,92 (m, 1H), 3,53-3,54 (m, 2H), 2,90-2,92 (m, 1H), 2,58-2,61 (m, 1H), 1,16 (d, J = 6,40 Hz, 3H). EM: 214,1 (M +H)+. Exemplo Preparativo 52 Etapa A
[00263] A uma solução de 3,6-dicloropiridazina comercialmente dis- ponível (0,500g, 3,36 mmols) e (2R)-2-metilmorfolina (0,339g, 3,36 mmols) em etanol (15 mL) foi adicionada trietilamina (0,509g, 5,03 mmols) e a reação foi aquecida para 80 °C durante 12 h. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O cru purificado em co-
luna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de petró- leo/acetato de etila (100/0 -> 70/30) para fornecer o composto do título (0,250 g, 34,5%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,57 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 3,91-3,91 (m, 3H), 3,53-3,54 (m, 2H), 2,89-2,90 (m, 1H), 2,64-2,67 (m, 1H), 1,16 (d, J = 6,40 Hz, 3H). EM: 214,2 (M +H)+ . Exemplo Preparativo 53 Etapa A
[00264] A uma solução de 3,6-dicloropiridazina comercialmente dis- ponível (0,230g, 1,54 mmols) e 4-metoxipiperidina ( 0,265 g, 2,29 mmols) em etanol (15 mL) foi adicionada trietilamina (0,301 g, 2,29mmols) e a reação foi aquecida para 90 °C durante 12 h. A mistu- ra de reação foi concentrada sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biotage), empregando um gradiente de éter de pe- tróleo/acetato de etila (100/0 -> 70/30) para fornecer o composto do título (0,335 g, 95,44%). 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,50 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 3,92-3,93 (m, 2H), 3,43-3,44 (m, 1H), 3,27-3,27 (m, 5H), 1,88-1,89 (m, 2H), 1,43-1,44 (m, 2H). EM: 228,1 (M +H)+ . Exemplo Preparativo 54
Etapa A
[00265] A uma suspensão agitada do composto do título de Exem- plo Preparativo 12 (0,5 g, 2,24 mmols) e 2,6-dicloro-1,3-benzoxazol comercialmente disponível (0,43g, 2,24 mmols) em DMF (15mL) car- bonato de potássio (0,93 g,6,72 mmols) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 100°C durante a noite. Após conclusão da reação por TLC, água foi adicionada e um sólido foi obtido. O sólido foi filtrado, lavado com hexano para fornecer o composto do título (0,76 g, cru). EM: 338,1 (M+H)+ Exemplos 1-122
[00266] Os Exemplos desta invenção foram preparados seguindo os procedimentos gerais para o acoplamento Buchwald como reporta- do nos Esquemas 5, 6 e 7 acima. Os procedimentos específicos usa- dos são: Procedimento 1:
[00267] A uma solução agitada do derivado de amina tricíclica (0,15 g, 1 eq.) em 1,4-dioxano seco (5 mL), foi adicionado o derivado de bromo ou cloro correspondente (1 eq.) como indicado na Tabela 1, e terc-butóxido de sódio (3 eq.). A mistura de reação foi desgaseificada durante 10 min sob atmosfera de N2. Em seguida, tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (Pd2(dba)3; 0,05 eq) e 2-diciclo- hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenila (Ru-Phos; 0,1 eq) foram adicio- nados e a mistura de reação foi aquecida para 100 °C até a conclusão da reação. Após a conclusão da reação (monitorada por LCMS), a mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com acetato de etila. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir o produto cru. O material cru foi purificado por cromatografia de coluna rápida ou HPLC preparativa para fornecer o composto protegido por tosila. A uma solução de composto de tosila (1,0 eq) em dioxa- no:MeOH (1:1, 10 vol), foi adicionado NaOtBu (3 eq) e aquecida para 70°C durante 6 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o produto cru foi purificado por coluna para fornecer o produto dese- jado. O material cru foi purificado por cromatografia de coluna rápida ou HPLC preparativa para fornecer os compostos finais como indicado na Tabela 1. Procedimento 2:
[00268] A uma solução agitada do derivado de amina tricíclica (0,15 g, 1 eq.) em 1,4-dioxano seco (5 mL), foi adicionado o derivado de bromo ou cloro correspondente (1 eq.) como indicado na Tabela 1, e terc-butóxido de sódio (3 eq.). A mistura de reação foi desgaseificada durante 10 min sob atmosfera de N2. Em seguida, tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) (Pd2(dba)3; 0,05 eq) e 2-diciclo- hexilfosfino-2′,6′-di-isopropoxibifenila (Ru-Phos; 0,1 eq) foram adicio- nados e a mistura de reação foi aquecida para 100 °C até a conclusão da reação. Após a conclusão da reação (monitorada por LCMS), a mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com acetato de etila. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir o produto cru. O material cru foi purificado por cromatografia de coluna rápida ou HPLC preparativa para fornecer os compostos finais como indicado na Tabela 1. Procedimento 3:
[00269] Pd(OAc)2 (0,1 eq) e Xantphos (0,3 eq.) foram adicionados a um vaso de reação e dioxano desgaseificado (4 ml) foi adicionado. O frasconete foi carregado com gás de argônio e selado. A suspensão foi aquecida a 110 °C durante 1 minuto, em seguida derivado de amina tricíclica (70 mg, 1 eq.), derivado de bromo ou cloro (1,1 eq.) e Cs2CO3 (3,5 eq.) foram adicionados e a solução foi aquecida a 100 °C durante 18 horas. A mistura de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL) e água (30 mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi ex- traída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combi- nada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evapora- dos sob pressão reduzida. O cru purificado em coluna HP-Sil (Biota- ge), empregando um gradiente de DCM/MeOH (100/0 -> 95/05) para fornecer o composto protegido por tosila.
[00270] Derivados de tosila (50 mg, 1 eq.), Cs2CO3 (3 eq.) foram adicionados em um tubo de micro-ondas seguido por MeOH (Relação:
1.000, Volume: 4 ml) e THF desgaseificado (Relação: 2,000, Volume: 8 ml). A mistura de reação foi aquecida a 110 ºC durante 30 minutos em um reator de micro-ondas e resfriada em temperatura ambiente. Os solventes foram removidos sob pressão e o resíduo foi purificado em cartuchos HP-Sil SNAP usando um sistema de purificação Biotage Isolera One empregando um gradiente de DCM/MeOH (100/0 -> 90/10) para fornecer os compostos finais como indicado na Tabela 1. Procedimento 4:
[00271] A uma solução agitada do derivado de amina tricíclica (0,15 g, 1 eq.) em 1,4-dioxano seco (5 mL), foi adicionado o derivado de bromo ou cloro correspondente (1 eq.) como indicado na Tabela 1, e Cs2CO3 de sódio (3 eq.). A mistura de reação foi desgaseificada du- rante 10 min sob atmosfera de N2. Em seguida Pd(OAc)2; 0,1 eq) e 2- diciclo-hexilfosfino-2′,4′,6′-tri-isopropilbifenila (XPhos; 0,3 eq) foram adicionados e a mistura de reação foi aquecida para 100 °C até a con- clusão da reação. Após a conclusão da reação (monitorada por LCMS), a mistura de reação foi filtrada através de celite e lavada com acetato de etila. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para produzir o produto cru. O material cru foi purificado por cromatografia de coluna rápida ou HPLC preparativa para fornecer o composto pro- tegido por tosila. A uma solução de composto de tosila (1,0 eq) em dioxano:MeOH (1:1, 10 vol), foi adicionado NaOtBu (3 eq) e aquecido para 70°C durante 6 horas. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e o produto cru foi purificado por coluna para fornecer o produto desejado. O material cru foi purificado por cromatografia de coluna rá- pida ou HPLC preparativa para fornecer os compostos finais como in- dicado na Tabela 1. Procedimento 5
[00272] A uma solução agitada do derivado de amina tricíclica (150 mg, 1 eq) em dioxano seco (5 mL), foi adicionado o derivado de bromo ou cloro correspondente (1 eq.) como indicado na Tabela 1. Terc- butóxido de sódio (3 eq) foi adicionado e desgaseificado durante 10 min sob atmosfera de nitrogênio. A esta mistura de reação foi adicio- nado Ruphos G4 Pd (0,3 eq) e aquecido para 100oC até a conclusão da reação. A mistura de reação foi filtrada através de um leito de Celi- te, lavada com EtOAc. O filtrado foi concentrado e o cru foi purificado por cromatografia de coluna ou HPLC Prep para fornecer os exemplos como indicado na Tabela 1.
Tabela 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 11%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,57 (s, 1H), 7,39-7,40 (m, 3H), 7,09-7,11 (m, 1H), 6,98-7,00 (m, 1H), 1 4,44 (s, 2H), 3,72-3,73 (m, 7H), 3,58-3,60 (m, 2H), 3,48 (bs, 4H), 2,82 (bs, 2H).
3. 405,0
4. Procedimento 2
1. 11%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,53 (s, 1H), 7,35-7,37 (m, 3H), 7,09-7,11 (m, 1H), 6,98-7,00 (m, 1H), 2 4,42 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,56-3,57 (m, 2H), 3,11 (s, 6H), 2,82 (bs, 2H).
3. 363,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 19%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,39- 7,43 (m, 1H), 7,27- 7,31 (m, 2H), 7,20 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 6,99 (dd, J = 2,40, 8,40 Hz, 3 1H), 6,82-6,87 (m, 1H), 4,40 (bs, 2H), 3,69- 3,73 (m, 7H), 3,52- 3,58 (m, 6H), 2,51- 2,81 (m, 2H).
3. 407,0
4. Procedimento 2
1. 19%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,39- 7,42 (m, 1H), 7,28- 7,31 (m, 1H), 6,93- 6,98 (m, 2H), 6,82- 4 6,87 (m, 2H), 4,39 (br- s, 2H), 3,68-3,73 (m, 7H), 3,54-3,57 (m, 2H), 2,89-2,91 (m, 4H), 2,78-2,79 (m, 2H).
3. 384,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 19%;
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,92 (br-s, 1H), 7,28-7,32 (m, 1H), 7,13-7,16 (m, 1H), 6,83-6,97 (m, 3H), 6,76-6,78 (m, 1H), 5 4,36 (bs, 2H), 3,71- 3,73 (m, 4H), 3,57- 3,60 (m, 2H), 2,88- 2,90 (m, 4H), 2,73- 2,75 (m, 2H).
3. 370,2
4. Procedimento 1
1. 20%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,57 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 7,44- 7,39 (m, 2H), 7,22- 7,15 (m, 2H), 6,97- 6,91 (m, 1H), 4,43 (s, 6 2H), 3,74-3,72 (m, 7H), 3,59 (t, J = 5,20 Hz, 2H), 3,49 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 2,79 (t, J = 4,80 Hz, 2H).
3. 423,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 24%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,61 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 7,39- 7,43 (m, 1H), 7,28- 7,31 (m, 1H), 7,24 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 6,97 (dd, J = 2,40, 8,80 Hz, 7 1H), 6,83-6,87 (m, 1H), 4,46 (bs, 2H), 3,70- 3,75 (m, 7H), 3,62- 3,64 (m, 2H), 3,50- 3,53 (m, 4H), 2,79- 2,81 (m, 2H).
3. 423,0
4. Procedimento 2
1. 21%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,05 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,49- 7,52 (m, 1H), 7,40- 7,43 (m, 1H), 7,18- 7,21 (m, 1H), 6,91- 8 6,96 (m, 1H), 6,81- 6,83 (m, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,70-3,72 (m, 7H), 3,48 (t, J = 5,20 Hz, 2H), 3,29-3,32 (m, 4H), 2,75-2,76 (m, 2H).
3. 367,1
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 29%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,40- 7,44 (m, 1H), 7,30 (dd, J = 2,00, 10,40 Hz, 1H), 7,04-7,09 (m, 1H), 6,83-6,90 (m, 2H), 9 6,59-6,62 (m, 1H), 4,41 (bs, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 3,56- 3,59 (m, 2H), 2,79- 2,82 (m, 2H).
3. 329,0
4. Procedimento 2
1. 13%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,57 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 7,40- 7,44 (m, 1H), 7,18- 7,22 (m, 2H), 6,91- 11 6,96 (m, 2H), 4,47 (s, 2H), 3,12 (s, 3H), 3,63 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,13 (s, 6H), 2,79 (d, J = 4,80 Hz, 2H).
3. 381,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 18%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,39- 7,42 (m, 1H), 7,26 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 7,17- 7,20 (m, 1H), 3,52 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 6,90- 12 6,96 (m, 2H), 3,12 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,54 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,08 (s, 6H), 2,76 (t, J = 4,80 Hz, 2H).
3. 365,1
4. Procedimento 2
1. 12%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,40- 7,44 (m, 1H), 7,25 (d, J = 8,64 Hz, 1H), 7,19 (dd, J = 2,48, 9,80 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 2,40 13 Hz, 1H), 6,91-6,96 (m, 1H), 6,77 (dd, J = 2,44, 8,72 Hz, 1H), 4,41 (bs, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,55- 3,57 (m, 2H), 3,11 (s, 6H), 2,76-2,78 (m, 2H).
3. 365,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 25%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,60 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,23 (s, 1H), 6,93-6,98 (m, 2H), 6,74 (dd, J = 2,00, 8,60 Hz, 1H), 14 4,45 (br-s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,72-3,76 (m, 4H), 3,69 (s, 3H), 3,62- 3,65 (m, 2H), 3,50- 3,52 (m, 4H), 2,78- 2,80 (m, 2H).
3. 435,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 35%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,56 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,40 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,16 (dd, J = 2,40, 8,80 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 6,74 15 (dd, J = 2,40, 8,80 Hz, 1H), 4,41 (br-s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,72-3,74 (m, 4H), 3,68 (s, 3H), 3,57-3,60 (m, 2H), 3,47-3,50 (m, 4H), 2,78-2,80 (m, 2H).
3. 435,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 12%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,27- 7,31 (m, 2H), 7,09 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 6,82 (dd, J = 2,80, 8,60 Hz, 1H), 6,73 (dd, J = 16 2,40, 8,80 Hz, 1H), 4,39 (br-s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,71-3,73 (m, 4H), 3,67 (s, 3H), 3,55- 3,57 (m, 6H), 2,76- 2,79 (m, 2H).
3. 419,2
4. Procedimento 2
1. 11%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,56 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 9,20 Hz, 1H), 7,21 (s, 1H), 6,90-6,93 (m, 2H), 6,73 (dd, J = 17 2,00, 8,80 Hz, 1H), 4,44 (br-s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,69 (s, 3H), 3,61-3,64 (m, 2H), 3,12 (s, 6H), 2,78-2,79 (m, 2H).
3. 393,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 19%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,52 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 7,29- 7,37 (m, 2H), 7,12 (dd, J = 2,40, 8,80 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 2,40 Hz, 18 1H), 6,73 (dd, J = 2,40, 9,00 Hz, 1H), 4,39 (bs, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,55-3,58 (m, 2H), 3,10 (s, 6H), 2,79- 2,82 (m, 2H).
3. 393,2
4. Procedimento 2
1. 13%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,26- 7,31 (m, 2H), 7,14- 7,16 (m, 1H), 6,93- 6,97 (m, 2H), 6,74 (d, J 19 = 8,80 Hz, 1H), 4,38 (br-s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,55-3,55 (m, 2H), 3,10 (s, 6H), 2,78-2,80 (m, 2H).
3. 377,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 15%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,27- 7,31 (m, 2H), 7,20 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 6,97- 7,00 (m, 1H), 3,52 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 6,72- 20 6,75 (m, 1H), 3,12 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,72 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 3,67 (s, 3H), 3,52-3,58 (m, 6H), 2,78 (s, 2H).
3. 419,2
4. Procedimento 2
1. 22%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,24- 7,31 (m, 2H), 7,05 (d, J = 2,12 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 2,20 Hz, 1H), 21 6,72-6,77 (m, 2H), 4,38 (bs, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,54- 3,57 (m, 2H), 3,11 (s, 6H), 2,77-2,79 (m, 2H).
3. 377,1
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 13%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,94 (br-s, 1H), 7,60 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,29- 7,32 (m, 1H), 7,11- 7,16 (m, 2H), 6,83- 22 6,92 (m, 2H), 3,12 (s, 2H), 3,72 (t, J = 5,20 Hz, 4H), 3,66 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,51 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 2,75 (s, 2H).
3. 409,2
4. Procedimento 1
1. 11%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,94 (br-s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,39 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,29-7,32 (m, 1H), 7,16 (d, J = 10,00 Hz, 1H), 7,07-7,09 (m, 1H), 23 6,87 (t, J = 8,40 Hz, 1H), 4,38 (s, 2H), 3,73 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 3,60 (d, J = 4,80 Hz, 2H), 3,48 (t, J = 4,40 Hz, 4H), 2,78 (s, 2H).
3. 409,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 18%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,94 (br-s, 1H), 7,29-7,32 (m, 1H), 7,14-7,21 (m, 3H), 6,84-6,93 (m, 2H), 24 4,36 (s, 2H), 3,12 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 3,59 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,53 (t, J = 4,40 Hz, 4H), 2,76 (s, 2H).
3. 393,1
4. Procedimento 1
1. 23%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,93 (br-s, 1H), 7,26-7,31 (m, 2H), 7,15 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 3,52 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 6,83- 25 6,88 (m, 1H), 6,74- 6,76 (m, 1H), 4,35 (s, 2H), 3,71 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 3,54-3,60 (m, 6H), 2,75 (s, 2H).
3. 393,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 17%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,93 (br-s, 1H), 7,45 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 7,33- 7,36 (m, 1H), 7,29- 7,31 (m, 1H), 7,14- 26 7,17 (m, 1H), 7,03- 7,06 (m, 1H), 6,83- 6,89 (m, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,58 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,10 (s, 6H), 2,77 (s, 2H).
3. 367,1
4. Procedimento 1
1. 13 %
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,95 (br-s, 1H), 7,29-7,30 (m, 1H), 7,13-7,18 (m, 27 3H), 6,84-6,86 (m, 2H), 4,34 (s, 2H), 3,55-3,57 (m, 2H), 3,09 (s, 6H), 2,76-2,77 (m, 2H).
3. 351,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 23%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,95 (br-s, 1H), 7,23-7,32 (m, 2H), 7,14-7,16 (m, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,84- 28 6,88 (m, 1H), 6,68- 6,71 (m, 1H), 4,35 (br- s, 2H), 3,58-3,59 (m, 2H), 3,10 (s, 6H), 2,68- 2,75 (m, 2H).
3. 351,2
4. Procedimento 1
1. 21%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,53 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 7,40- 7,41 (m, 1H), 7,36 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,20 (dd, J = 2,40, 9,60 Hz, 1H), 7,13 (dd, J = 2,80, 29 8,80 Hz, 1H), 6,91- 6,91 (m, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,56 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,11 (s, 6H), 2,77-2,79 (m, 2H).
3. 381,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 19%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,57 (br-s, 1H), 7,51 (d, J = 11,60 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 10,80 Hz, 1H), 7,03 (s, 1H), 6,81-6,83 (m, 30 2H), 6,59 (d, J = 10,40 Hz, 1H), 4,32 (s, 2H), 3,66 (br-s, 6H), 3,58 (bs, 3H), 3,42 (br-s, 3H), 2,67 (br-s, 3H).
3. 421,1
4. Procedimento 1
1. 27%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,66 (br-s, 1H), 7,49 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,06-7,07 (m, 1H), 31 6,90 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 6,66-6,66 (m, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,72-3,73 (m, 8H), 3,59-3,60 (m, 2H), 3,47-3,48 (m, 4H), 2,78-2,79 (m, 2H).
3. 421,1
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 17%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,66 (br-s, 1H), 7,17-7,18 (m, 3H), 6,89-6,89 (m, 2H), 6,66-6,66 (m, 1H), 32 4,34 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,71-3,72 (m, 4H), 3,57-3,59 (m, 2H), 3,52-3,53 (m, 4H), 2,76-2,77 (m, 2H).
3. 405,2
4. Procedimento 1
1. 29%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,65 (br-s, 1H), 7,27 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 2,40 Hz, 33 1H), 6,73-6,74 (m, 1H), 6,65-6,66 (m, 1H), 4,34 (s, 2H), 3,70-3,71 (m, 4H), 3,55-3,56 (m, 7H), 2,71 (br-s, 2H), 2,51 (br-s, 2H).
3. 405,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 13%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,66 (br-s, 1H), 7,55 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 34 6,83-6,84 (m, 2H), 6,65-6,66 (m, 1H), 4,39 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,64-3,65 (m, 2H), 3,11 (s, 6H), 2,74-2,75 (m, 2H).
3. 379,2
4. Procedimento 1
1. 11%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,66 (br-s, 1H), 7,45 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 7,03-7,04 (m, 1H), 35 6,90 (d, J = 2,00 Hz, 1H), 6,66-6,67 (m, 1H), 4,34 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,57-3,58 (m, 2H), 3,10 (s, 6H), 2,77-2,78 (m, 2H).
3. 379,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 29%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,64 (br-s, 1H), 7,11-7,14 (m, 3H), 6,85-6,86 (m, 2H), 6,64-6,65 (m, 1H), 36 4,31 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,54-3,56 (m, 2H), 3,08 (s, 6H), 2,74 (br- s, 2H).
3. 363,3
4. Procedimento 1
1. 25%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,85 (br-s, 1H), 7,60 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 7,33 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 7,12 (s, 1H), 7,02-7,04 37 (m, 1H), 6,97 (d, J = 7,20 Hz, 1H), 6,90- 6,92 (m, 1H), 4,43 (s, 2H), 3,67-3,68 (m, 6H), 3,51-3,52 (m, 4H), 2,79 (br-s, 2H).
3. 391,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 27%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,84 (br-s, 1H), 7,49 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 7,31- 7,41 (m, 3H), 7,02- 7,10 (m, 2H), 6,94- 38 6,98 (m, 1H), 4,38 (s, 2H), 3,72-3,74 (m, 4H), 3,60-3,62 (m, 2H), 3,47-3,49 (m, 4H), 2,80-2,82 (m, 2H).
3. 391,2
4. Procedimento 1
1. 18%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,18- 7,24 (m, 2H), 6,87- 6,94 (m, 2H), 6,64- 6,69 (m, 2H), 3,52 (s, 39 2H), 3,74 (s, 3H), 3,12 (t, J = 5,20 Hz, 2H), 3,09 (s, 6H), 2,74 (s, 2H).
3. 363,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 17%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,94 (br-s, 1H), 7,95 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,41- 7,44 (m, 1H), 7,27- 7,30 (m, 1H), 7,12- 7,15 (m, 1H), 6,79- 40 6,87 (m, 2H), 4,29 (s, 2H), 3,69 (t, J = 5,20 Hz, 4H), 3,49 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,28 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 2,73 (t, J = 5,20 Hz, 2H).
3. 353,3
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. Rendimento: 16%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,95 (bs, 1H), 7,86 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,33-7,36 (m, 1H), 7,27-7,29 (m, 1H), 7,12-7,15 (m, 1H), 3,12 (d, J = 9,20 Hz, 41 1H), 6,83-6,88 (m, 1H), 4,66 (s, 2H), 3,83 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,72 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 2,97 (t, J = 4,80 Hz, 4H), 2,72 (t, J = 5,20 Hz, 2H).
3. 353,2
4. Procedimento 1
1. 13%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,94 (br-s, 1H), 7,55 (d, J = 8,40 Hz, 1H), 7,29- 7,32 (m, 1H), 7,09- 7,16 (m, 2H), 6,83- 42 6,88 (m, 2H), 3,12 (s, 2H), 3,65 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,11 (s, 6H), 2,76 (d, J = 5,20 Hz, 2H).
3. 367,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 21%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,85 (br-s, 1H), 7,86 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,29- 7,31 (m, 3H), 7,00- 7,01 (m, 1H), 6,93- 43 6,95 (m, 2H), 4,67 (s, 2H), 3,83-3,84 (m, 2H), 3,71-3,73 (m, 4H), 2,96-2,97 (m, 4H), 2,74-2,76 (m, 2H).
3. 335,2
4. Procedimento 1
1. 23%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,82 (br-s, 1H), 7,96 (d, J = 2,84 Hz, 1H), 7,30- 7,44 (m, 3H), 7,01- 7,03 (m, 1H), 6,95- 44 6,97 (m, 1H), 6,80 (d, J = 9,12 Hz, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,68-3,70 (m, 4H), 3,48-3,51 (m, 2H), 3,27-3,30 (m, 4H), 2,76-2,77 (m, 2H).
3. 335,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 24%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7,89 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,35- 7,43 (m, 3H), 7,08- 7,10 (m, 1H), 6,99- 7,03 (m, 2H), 4,69 (s, 45 2H), 3,83-3,86 (m, 2H), 3,70-3,75 (m, 7H), 3,70-3,72 (m, 7H), 2,97-3,00 (m, 4H), 2,77-2,79 (m, 2H).
3. 349,2
4. Procedimento 2
1. 28%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 8,05 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,49- 7,52 (m, 1H), 7,40- 7,43 (m, 2H), 7,09- 7,13 (m, 1H), 6,98- 46 7,02 (m, 1H), 6,82 (d, J = 9,20 Hz, 1H), 4,37 (s, 2H), 3,70-3,72 (m, 7H), 3,48-3,51 (m, 2H), 3,29-3,34 (m, 4H), 2,79-2,80 (m, 2H).
3. 349,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 14%
2. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) δ = 7,76 (s, 1H), 7,20-7,23 (m, 2H), 7,14-7,17 (m, 1H), 6,74-6,79 (m, 2H), 5,22 (d, J = 5,20 Hz, 1H), 4,84-4,87 (m, 1H), 47 3,78 (t, J = 9,20 Hz, 4H), 3,34-3,38 (m, 1H), 2,95 (t, J = 6,00 Hz, 4H), 2,32-2,49 (m, 3H), 2,02-2,07 (m, 1H), 1,79-1,86 (m, 1H).
3. 379,2
4. Procedimento 1
1. 13%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,96 (br-s, 1H), 7,84 (d, J = 1,44 Hz, 1H), 7,45- 7,45 (m, 1H), 7,28- 7,30 (m, 1H), 7,14- 48 7,15 (m, 1H), 6,84- 6,84 (m, 1H), 4,40 (s, 2H), 3,71-3,72 (m, 4H), 3,58-3,60 (m, 2H), 3,15-3,16 (m, 4H), 2,75-2,76 (m, 2H).
3. 371,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 28% 1
2. H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,97 (s, 1H), 8,34 (d, J = 0,7 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,29 (dd, J = 8,8, 4,5 Hz, 1H), 7,14 (dd, J = 9,9, 2,6 49 Hz, 1H), 6,95 – 6,71 (m, 1H), 4,74 (s, 2H), 3,90 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 3,73 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 3,51 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 2,76 (d, J = 5,9 Hz, 2H).
3. 410,15
4. Procedimento 3 e 5
1. 25%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,93 (br-s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,76 (s, 1H), 7,29-7,30 (m, 1H), 7,17 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 6,84- 50 6,87 (m, 2H), 4,47 (s, 2H), 3,74-3,75 (m, 4H), 3,67-3,68 (m, 2H), 3,17-3,18 (m, 4H), 2,77 (br-s, 2H).
3. 353,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 17%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,96 (br-s, 1H), 7,84 (d, J = 1,52 Hz, 1H), 7,46 (dd, J = 2,44, 15,42 Hz, 1H), 7,36-7,38 (m, 1H), 7,11 (dd, J = 2,28, 51 10,20 Hz, 1H), 6,79- 6,80 (m, 1H), 4,38 (s, 2H), 3,71-3,72 (m, 4H), 3,58-3,59 (m, 2H), 3,15-3,16 (m, 4H), 2,75-2,77 (m, 2H).
3. 371,2
4. Procedimento 1
1. 29%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,94 (bs, 1H), 7,84 (d, J = 1,52 Hz, 1H), 7,44- 7,45 (m, 1H), 7,35- 7,37 (m, 1H), 7,08- 52 7,10 (m, 1H), 6,78- 6,80 (m, 2H), 4,39 (s, 2H), 3,72-3,73 (m, 4H), 3,56-3,57 (m, 2H), 3,16-3,17 (m, 4H), 2,75-2,78(m, 2H).
3. 370,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 2 %
2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,96 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,31 (dd, J = 8,7, 4,6 Hz, 1H), 7,15 (td, J = 9,0, 8,2, 2,6 Hz, 1H), 6,87 (td, J 53 = 9,2, 2,6 Hz, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,74 (q, J = 5,6, 5,1 Hz, 4H), 3,63 (q, J = 5,6, 4,9 Hz, 2H), 3,59 – 3,50 (m, 4H), 2,79 (t, J = 5,6 Hz, 2H).
3. 410,15
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 22 %
2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,97 (s, 1H), 7,69 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,30 (dd, J = 8,7, 4,5 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 9,9, 2,6 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8,9 54 Hz, 1H), 6,86 (td, J = 9,2, 2,6 Hz, 1H), 4,73 (s, 2H), 3,91 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,72 (dd, J = 5,8, 3,9 Hz, 4H), 3,48 (t, J = 4,9 Hz, 4H), 2,83 – 2,67 (m, 2H).
3. 410,14
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 27%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,92 (br-s, 1H), 7,28-7,29 (m, 1H), 7,14 (dd, J = 2,48, 9,86 Hz, 1H), 6,96-6,98 (m, 2H), 55 6,83-6,83 (m, 3H), 4,29 (s, 2H), 3,71-3,72 (m, 4H), 3,51 (t, J = 5,52 Hz, 2H), 2,94- 2,97 (m, 4H), 2,73 (t, J = 5,28 Hz, 2H).
3. 352,2
4. Procedimento 1
1. 20%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,92 (br-s, 1H), 7,30 (dd, J = 4,40, 8,80 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 2,40, 9,60 Hz, 1H), 6,97-6,99 (m, 1H), 6,81-6,82 (m, 2H), 56 6,68 (dd, J = 2,40, 8,80 Hz, 1H), 4,19 (s, 2H), 3,71-3,72 (m, 4H), 3,34-3,35 (m, 2H), 3,03-3,04 (m, 4H), 2,71-2,72 (m, 2H).
3. 370,2
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 33%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,92 (br-s, 1H), 7,35-7,36 (m, 1H), 7,10 (dd, J = 2,16, 10,22 Hz, 1H), 6,92-6,96 (m, 2H), 57 6,87-6,89 (m, 2H), 6,79-6,79 (m, 1H), 4,27 (s, 2H), 3,71-3,73 (m, 4H), 3,49-3,50 (m, 2H), 3,08-3,09 (m, 4H), 2,74-2,75 (m, 2H).
3. 352,3
4. Procedimento 4
1. 16%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,82 (br-s, 1H), 7,39 (d, J = 7,64 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 7,96 Hz, 1H), 7,04 (t, J = 7,64 Hz, 1H), 6,89-6,93 (m, 3H), 58 6,78 (d, J = 8,72 Hz, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,72- 3,73 (m, 4H), 3,58- 3,59 (m, 2H), 2,89- 2,90 (m, 4H), 2,77 (bs, 2H).
3. 352,3
4. Procedimento 1
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 15%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,81 (br-s, 1H), 7,39 (d, J = 7,68 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 7,92 Hz, 1H), 7,01- 7,03 (m, 1H), 6,96- 59 6,96 (m, 3H), 6,87- 6,89 (m, 2H), 4,29 (s, 2H), 3,72-3,73 (m, 4H), 3,51-3,52 (m, 2H), 2,97-2,98 (m, 4H), 2,77 (br-s, 2H).
3. 334,2
4. Procedimento 1
1. 8 %;
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 10,92 (br-s, 1H), 7,34-7,36 (m, 1H), 7,10 (dd, J = 2,12, 10,16 Hz, 1H), 6,94-6,96 (m, 2H), 62 6,78-6,79 (m, 3H), 4,26 (s, 2H), 3,48-3,49 (m, 2H), 3,01 (bs, 4H), 2,75 (br-s, 2H),2,67 (br-s, 2H), 2,33 (br-s, 2H), 2,23 (s, 3H).
3. 365,2
4. Procedimento 4
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese 1,43,55%
2. 1,43,55%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,45 (t, J = 7,28 Hz, 2H), 7,20 (d, J = 8,56 Hz, 1H), 7,12-7,13 (m, 2H), 7,02 (t, J = 7,20 Hz, 67 1H), 6,81-6,82 (m, 1H), 4,88 (s, 2H), 3,95 (t, J = 5,56 Hz, 2H), 3,74- 3,75 (m, 4H), 3,71 (s, 3H), 3,05-3,06 (m, 4H), 2,87 (t, J = 5,12 Hz, 2H).
3. 389,2
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 12,9%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,85(bs, 1H), δ 7,38 (t, J = 6,00 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 10,00 Hz, 1H), 7,01-7,02 (m, 1H), 68 6,96 (t, J = 6,80 Hz, 1H), 4,71 (s, 2H), 3,80 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,67-3,69 (m, 4H), 3,28-3,29 (m, 4H), 2,74-2,75 (m, 2H).
3. 336,1
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 61%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,89 (s, 1H), 7,92 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,38-7,39 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,01-7,01 (m, 1H), 6,93-6,94 (m, 1H), 6,51 (d, J = 8,80 Hz, 69 1H), 4,26 (s, 2H), 3,83- 3,85 (m, 2H), 3,50- 3,51 (m, 2H), 3,41- 3,43 (m, 4H), 3,25- 3,26 (m, 2H), 2,96- 2,97 (m, 2H), 2,75- 2,76 (m, 2H).
3. 361,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 44%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,83 (s, 1H), 7,95 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,39-7,41 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 7,60 Hz, 1H), 6,96 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 70 4,29 (s, 2H), 4,23 (d, J = 6,00 Hz, 2H), 4,18 (d, J = 10,40 Hz, 2H), 3,62 (d, J = 10,40 Hz, 2H), 3,49-3,50 (m, 2H), 2,77-2,78 (m, 2H), 2,61-2,63 (m, 1H), 1,78 (d, J = 8,00 Hz, 1H).
3. 347,1
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 87%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,83 (s, 1H), 7,97 (d, J = 2,44 Hz, 1H), 7,45-7,46 (m, 1H), 7,39 (d, J = 7,68 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 7,68 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 7,64 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 7,00 Hz, 1H), 6,61 71 (d, J = 9,12 Hz, 1H), 4,69 (d, J = 6,28 Hz, 2H), 4,27 (s, 2H), 3,64- 3,67 (m, 2H), 3,46- 3,49 (m, 4H), 3,08- 3,09 (m, 1H), 2,77 (bs, 2H), 1,89 (d, J = 8,40 Hz, 1H).
3. 347,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 50,3%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,83 (s, 1H), 7,95 (d, J = 2,64 Hz, 1H), 7,37-7,39 (m, 2H), 7,31 (d, J = 7,96 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 7,32 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 7,56 Hz, 1H), 6,81 74 (d, J = 9,16 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,83-3,87 (m, 3H), 3,48-3,49 (m, 4H), 2,76 (bs, 2H), 2,30-2,33 (m, 2H), 1,14 (d, J = 6,16 Hz, 3H).
3. 349,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 52%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,83 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,30- 7,32 (m, 3H), 6,94- 6,95 (m, 2H), 6,81 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 4,30 75 (s, 2H), 3,83-3,86 (m, 3H), 3,50-3,55 (m, 4H), 2,66-2,76 (m, 3H), 2,34 (bs, 1H), 1,14 (d, J = 4,00 Hz, 3H).
3. 349,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 38%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,83 (s, 1H), 7,95 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,38-7,40 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 7,60 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 6,81 76 (d, J = 9,20 Hz, 1H), 4,29 (s, 2H), 3,96 (d, J = 11,60 Hz, 2H), 3,60- 3,61 (m, 2H), 3,49 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 2,77 (bs, 2H), 2,27 (t, J = 10,80 Hz, 2H), 1,14 (d, J = 6,00 Hz, 6H).
3. 363,4
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 55%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,83 (s, 1H), 7,96 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,38-7,40 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 6,98-7,01 (m, 2H), 6,97 (d, J = 6,80 Hz, 1H), 4,30 (s, 2H), 77 3,60-3,61 (m, 2H), 3,50 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,31 (s, 2H), 3,22- 3,23 (m, 2H), 2,77 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 1,93- 1,93 (m, 4H), 1,68- 1,69 (m, 2H).
3. 375,2
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 54%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,83 (s, 1H), 7,96 (d, J = 2,44 Hz, 1H), 7,30-7,32 (m, 3H), 6,93-6,95 (m, 2H), 6,73 (d, J = 9,12 Hz, 1H), 4,13 (s, 2H), 4,09- 78 4,10 (m, 1H), 3,88- 3,89 (m, 1H), 3,62- 3,64 (m, 3H), 3,45- 3,47 (m, 3H), 2,98- 3,00 (m, 1H), 2,95- 2,97 (m, 2H), 1,04 (d, J = 6,52 Hz, 3H).
3. 349,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 65%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,81 (s, 1H), 7,96 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,37-7,39 (m, 2H), 7,30 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,02 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 6,72 79 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 4,28 (s, 2H), 4,16-4,17 (m, 1H), 3,88-3,89 (m, 1H), 3,61-3,63 (m, 3H), 3,48-3,49 (m, 3H), 2,94-2,96 (m, 1H), 2,76 (bs, 2H), 1,03 (d, J = 6,40 Hz, 3H).
3. 349,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 57%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,81 (s, 1H), 7,89 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,38-7,39 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,01-7,01 (m, 1H), 6,96 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 6,37 (d, J = 80 8,80 Hz, 1H), 4,26 (s, 2H), 3,63 (bs, 4H), 3,53-3,54 (m, 4H), 3,45 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 2,76 (t, J = 5,20 Hz, 2H), 1,71 (t, J = 5,20 Hz, 4H).
3. 375,2
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 71%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,82 (s, 1H), 7,94 (d, J = 2,96 Hz, 1H), 7,38-7,38 (m, 2H), 7,31 (d, J = 7,96 Hz, 1H), 7,01-7,02 (m, 1H), 6,93-6,94 (m, 1H), 6,81 (d, J = 9,12 Hz, 82 1H), 4,28 (d, J = Hz, 2H), 3,79-3,80 (m, 2H), 3,48 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,32-3,33 (m, 1H), 3,26 (s, 3H), 2,97-2,99 (m, 2H), 2,75-2,76 (m, 2H), 1,86-1,87 (m, 2H), 1,39-1,40 (m, 2H).
3. 363,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 65%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,82 (s, 1H), 7,93 (d, J = 2,76 Hz, 1H), 7,37-7,38 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,04 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 7,84 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 7,16 Hz, 1H), 6,81 83 (d, J = 9,12 Hz, 1H), 4,33 (s, 4H), 4,28 (s, 2H), 3,47 (t, J = 5,40 Hz, 2H), 3,30-3,32 (m, 4H), 2,76 (t, J = 5,04 Hz, 2H), 1,80 (t, J = 5,32 Hz, 4H).
3. 375,2
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 69%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6):δ 10,82 (s, 1H), 7,90 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,38-7,39 (m, 2H), 7,31 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 8,00 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 6,52 (d, J = 9,20 Hz, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,60 (s, 85 1H), 4,26 (s, 2H), 3,74 (d, J = 7,20 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 7,20 Hz, 1H), 3,43-3,45 (m, 3H), 3,16 (d, J = 10,00 Hz, 1H), 2,76 (bs, 2H), 1,88 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 1,81 (d, J = 9,60 Hz, 1H).
3. 347,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 38%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 400 MHz, DMSO-d6: δ 10,83 (s, 1H), 7,91 (d, J = 2,84 Hz, 1H), 7,40-7,41 (m, 2H), 7,31 (d, J = 7,96 Hz, 1H), 7,03 (t, J = 7,92 Hz, 1H), 6,95 (t, J = 7,44 Hz, 1H), 6,52 (d, J = 8,96 Hz, 1H), 86 4,71 (s, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,26 (s, 2H), 3,74 (d, J = 7,08 Hz, 1H), 3,62 (d, J = 7,20 Hz, 1H), 3,41-3,43 (m, 3H), 3,15-3,17 (m, 1H), 2,77 (t, J = 5,24 Hz, 2H), 1,88 (d, J = 9,44 Hz, 1H), 1,81 (d, J = 9,60 Hz, 1H).
3. 347,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 71%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,18 (s, 1H), 7,99 (d, J = 2,92 Hz, 1H), 7,43-7,43 (m, 1H), 7,13 (d, J = 8,08 Hz, 1H), 6,96-6,97 (m, 1H), 6,81 (d, J = 9,08 87 Hz, 1H), 6,70-6,72 (m, 1H), 4,38 (s, 2H), 3,69- 3,70 (m, 4H), 3,53 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,28- 3,30 (m, 4H), 2,87 (t, J = 5,12 Hz, 2H).
3. 353,2
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 19%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,15 (s, 1H), 7,88 (d, J = 2,92 Hz, 1H), 7,33 (dd, J = 3,04, 9,12 Hz, 1H), 7,12 (d, J = 8,08 Hz, 1H), 6,91-6,93 (m, 2H), 88 6,69-6,71 (m, 1H), 4,71 (s, 2H), 3,88 (t, J = 5,64 Hz, 2H), 3,71- 3,73 (m, 4H), 2,96- 2,97 (m, 4H), 2,85 (t, J = 5,44 Hz, 2H).
3. 353,3
4. Procedimento 5
1. 45%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,17 (s, 1H), 7,27 (d, J = 8,68 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 8,04 Hz, 1H), 6,97- 89 6,98 (m, 2H), 6,70- 6,72 (m, 2H), 4,44 (s, 2H), 3,70-3,71 (m, 4H), 3,55-3,56 (m, 6H), 2,87-2,89 (m, 2H).
3. 393,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 49%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,24-7,26 (m, 2H), 7,01-7,02 (m, 2H), 6,75-6,76 (m, 2H), 90 4,45 (s, 2H), 3,65-3,70 (m, 9H), 3,54-3,55 (m, 4H), 2,90 (s, 2H).
3. 407,1
4. Procedimento 2
1. 66%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,23-7,25 (m, 2H), 7,11-7,12 (m, 1H), 6,84-6,85 (m, 3H), 91 4,41 (s, 2H), 3,88 (s, 3H), 3,71-3,72 (m, 4H), 3,56-3,57 (m, 6H), 2,79 (bs, 2H).
3. 407,3
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 76,1%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,33 (s, 1H), 7,96 (d, J = 3,20 Hz, 1H), 7,42-7,43 (m, 1H), 7,22 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 6,87-6,88 (m, 92 3H), 4,31 (s, 2H), 3,70- 3,71 (m, 4H), 3,45- 3,47 (m, 2H), 3,28- 3,30 (m, 4H), 2,68- 2,76 (m, 2H).
3. 353,1
4. Procedimento 3
1. 50,0%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 11,32 (s, 1H), 7,28 (d, J = 8,72 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 6,87- 93 6,87 (m, 2H), 6,75 (dd, J = 2,44, 8,74 Hz, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,70-3,71 (m, 4H), 3,55-3,56 (m, 6H), 2,78 (t, J = 5,44 Hz, 2H).
3. 393,1
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 17,6%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,13 (s, 1H), 7,93 (s, 1H), 7,41 (t, J = 6,80 Hz, 2H), 7,10 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 7,00 (t, J = 7,20 94 Hz, 1H), 4,67 (s, 2H), 3,83 (bs, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,33 (bs, 4H), 2,77 (bs, 2H), 2,41 (bs, 4H), 2,19 (s, 3H), 3. 363,2
4. Procedimento 5
1. 13,4%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,03 (s, 1H), 7,44 (t, J = 7,60 Hz, 3H), 6,98-7,00 (m, 2H), 6,81 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 4,36 (s, 2H), 95 3,69 (s, 3H), 3,47 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,29 (bs, 4H), 2,73 (bs, 2H), 2,37-2,38 (m, 4H), 2,16 (s, 3H).
3. 362,2
4. Procedimento 5
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 31,8%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,49 (d, J = 10,00 Hz, 3H), 7,40- 7,41 (m, 1H), 7,30 (d, J = 10,00 Hz, 1H), 7,11 (t, J = 7,60 Hz, 1H), 96 7,00 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 4,78 (s, 2H), 3,85 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,71-3,72 (m, 7H), 3,33-3,35 (m, 3H), 2,29-2,33 (m, 2H).
3. 350,2
4. Procedimento 5
1. 50,3%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,41 (t, J = 7,60 Hz, 2H), 7,26 (d, J = 8,68 Hz, 1H), 7,08-7,10 (m, 2H),
O 7,00 (t, J = 7,12 Hz,
N N 97 N N 1H), 6,81 (d, J = 8,68
N Hz, 1H), 4,42 (s, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,57 (bs, 6H), 2,80 (s, 2H), 2,40- 2,41 (m, 4H), 2,22 (s, 3H).
3. 402,3
4. Procedimento 3
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 25,7%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,83 (s, 1H), 7,39 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 6,94- 98 6,95 (m, 3H), 6,72- 6,73 (m, 1H), 4,35 (s, 2H), 3,56-3,57 (m, 6H), 2,78 (s, 2H), 2,40-2,41 (m, 4H), 2,22 (s, 3H).
3. 388,2
4. Procedimento 3
1. 21 %
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,84 (bs, 1H), 7,39 (d, J = 7,68 Hz, 1H), 7,27- 7,29 (m, 2H), 6,94- 99 6,96 (m, 3H), 6,77 (d, J = 7,96 Hz, 1H), 4,37 (s, 2H), 3,70-3,71 (m, 4H), 3,55-3,56 (m, 6H), 2,79 (bs, 2H).
3. 375,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 30,5%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,42 (t, J = 7,32 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 8,72 Hz, 1H), 7,09-7,10 (m, 1H), 100 7,00 (t, J = 7,28 Hz, 1H), 6,82-6,82 (m, 1H), 4,43 (s, 2H), 3,71-3,73 (m, 7H), 3,55-3,56 (m, 6H), 2,81 (s, 2H).
3. 389,2
4. Procedimento 4
1. 25,3%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,44- 7,45 (m, 2H), 7,29- 7,29 (m, 1H), 7,14 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 7,01- 7,03 (m, 1H), 6,94- 101 6,94 (m, 1H), 6,65- 6,65 (m, 1H), 4,91 (s, 2H), 3,97 (t, J = 5,40 Hz, 2H), 3,71-3,72 (m, 7H), 3,05-3,06 (m, 4H), 2,88 (bs, 2H).
3. 389,3
4. Procedimento 4
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 46,7%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,96 (s, 1H), 7,42 (d, J = 7,76 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,04 Hz, 1H), 7,18 (d, J = 8,52 Hz, 1H), 7,12- 7,13 (m, 1H), 7,06 (t, J 102 = 7,84 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,16 Hz, 1H), 6,79- 6,80 (m, 1H), 4,81 (s, 2H), 3,95 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,73-3,74 (m, 4H), 3,04-3,05 (m, 4H), 2,86-2,87 (m, 2H).
3. 375,2
4. Procedimento 4
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 33,4%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,94 (s, 1H), 7,35-7,36 (m, 1H), 7,27 (d, J = 8,68 Hz, 1H), 7,09-7,10 (m, 1H), 7,00 (d, J = 2,24 Hz, 103 1H), 6,79-6,79 (m, 1H), 6,73-6,74 (m, 1H), 4,34 (s, 2H), 3,70-3,71 (m, 4H), 3,54-3,55 (m, 6H), 2,77 (t, J = 5,08 Hz, 2H).
3. 393,3
4. Procedimento 4
1. 7%;
2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,38- 7,42 (m, 1H), 7,27- 7,31 (m, 2H), 7,09 (d, J = 2,40 Hz, 1H), 6,80- 104 6,87 (m, 2H), 4,40 (bs, 2H), 3,70-3,73 (m, 4H), 3,68 (s, 3H), 3,55-3,57 (m, 6H), 2,75-2,79 (m, 2H).
3. 407,2 4 Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 11%;
2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,12 (d, J = 3,20 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,24-7,24 (m, 1H), 7,09 (d, J = 6,80 Hz, 105 1H), 6,87-6,88 (m, 1H), 6,76 (d, J = 9,20 Hz, 1H), 3,67-3,69 (m, 9H), 3,30-3,31 (m, 4H), 2,85-2,86 (m, 2H), 1,87 (bs, 2H).
3. 350,2
4. Procedimento 2
1. 23%;
2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,16 (d, J = 1,12 Hz, 1H), 7,94 (d, J = 2,12 Hz, 1H), 7,28-7,28 (m, 1H), 7,16-7,16 (m, 1H), 107 6,66 (d, J = 8,96 Hz, 1H), 3,93 (bs, 2H), 3,71-3,72 (m, 7H), 3,01-3,02 (m, 4H), 2,89-2,90 (m, 2H), 2,08 (bs, 2H).
3. 368,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 28%;
2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,94 (bs, 1H), 7,96 (d, J = 3,00 Hz, 1H), 7,42- 7,43 (m, 1H), 7,35- 7,37 (m, 1H), 7,09- 108 7,09 (m, 1H), 6,79- 6,79 (m, 1H), 4,28 (s, 2H), 3,69-3,70 (m, 4H), 3,49 (bs, 2H), 3,28- 3,29 (m, 4H), 2,75 (bs, 1H).
3. 353,2
4. Procedimento 2 1,29%;
2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,99 (bs, 1H), 7,86 (d, J = 2,80 Hz, 1H), 7,33- 7,34 (m, 2H), 7,08- 7,08 (m, 1H), 6,94 (d, J 109 = 9,08 Hz, 1H), 6,78- 6,78 (m, 1H), 4,64 (s, 2H), 3,81-3,82 (m, 2H), 3,71-3,73 (m, 4H), 2,96-2,97 (m, 4H), 2,74 (bs, 2H).
3. 353,2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese 1,26%;
2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,04 (bs, 1H), 7,48-7,49 (m, 1H), 7,38-7,40 (m, 1H), 7,30 (d, J = 10,40 Hz, 110 1H), 6,81-6,83 (m, 2H), 4,35 (s, 2H), 3,67-3,70 (m, 7H), 3,47-3,48 (m, 2H), 3,30-3,31 (m, 4H), 2,77 (bs, 2H).
3. 367,2
4. Procedimento 2
1. 25%;
2. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 7,88 (d, J = 2,88 Hz, 1H), 7,35- 7,35 (m, 2H), 7,28- 7,29 (m, 1H), 7,01 (d, J = 9,20 Hz, 1H), 6,81- 111 6,82 (m, 1H), 4,66 (s, 2H), 3,81-3,83 (m, 2H), 3,72-3,73 (m, 4H), 3,68 (s, 3H), 2,97-2,98 (m, 4H), 2,76 (bs, 2H).
3. 367,2
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 16 %
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,63 (d, J = 2,64 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,80 Hz, 1H), 7,57-7,58 (m, 1H), 7,41-7,43 (m, 2H), 112 7,13 (t, J = 7,56 Hz, 1H), 7,02 (t, J = 7,28 Hz, 1H), 4,73 (s, 2H), 3,87 (t, J = 5,48 Hz, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,85 (bs, 2H).
3. 289,2
4. Procedimento 2
1. 12 %
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,91 (bs, 1H), 8,54 (d, J = 2,56 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,84 Hz, 1H), 7,33- 113 7,35 (m, 3H), 6,96- 6,97 (m, 2H), 4,66 (s, 2H), 3,89 (t, J = 5,40 Hz, 2H), 2,85 (bs, 2H).
3. 275,1
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 20%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,90 (s, 1H), 7,38-7,39 (m, 2H), 7,27-7,30 (m, 2H), 7,01-7,01 (m, 1H), 6,93-6,93 (m, 1H), 4,72 (s, 2H), 3,78-3,80 117 (m, 4H), 3,36-3,37 (m, 1H), 3,27 (s, 3H), 3,03- 3,04 (m, 2H), 2,75- 2,77 (m, 2H), 1,88- 1,88 (m, 2H), 1,43- 1,44 (m, 2H).
3. 364,3
4. Procedimento 2
1. 47%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 400 MHz, DMSO-d6: δ 10,90 (s, 1H), 7,37-7,39 (m, 2H), 7,27-7,29 (m, 2H), 7,03-7,03 (m, 2H), 118 4,72 (s, 2H), 3,83-3,84 (m, 5H), 3,58-3,58 (m, 2H), 2,72-2,73 (m, 3H), 2,44-2,46 (m, 1H), 1,15-1,16 (m, 3H).
3. 350,1
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 11%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,89 (s, 1H), 7,43 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 7,27- 7,29 (m, 2H), 7,01- 7,01 (m, 1H), 6,93- 119 6,93 (m, 1H), 4,64 (s, 2H), 3,88-3,89 (m, 5H), 3,58-3,58 (m, 2H), 2,75-2,76 (m, 3H), 2,43-2,44 (m, 1H),1,15 (d, J = 6,40 Hz, 3H).
3. 350,2
4. Procedimento 2 1,30 %
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,90 (s, 1H), 7,37-7,39 (m, 2H), 7,27-7,30 (m, 2H), 6,95-6,95 (m, 2H), 4,73 (s, 2H), 3,95-3,97 120 (m, 2H), 3,81-3,83 (m, 2H), 3,62-3,63 (m, 2H), 2,77-2,78 (m, 2H), 2,33-2,35 (m, 2H), 1,14 (d, J = 6,00 Hz, 6H).
3. 364,3
4. Procedimento 2
1. Produção; % Derivado Derivado 2. 1H-RMN Exem- Exemplo de pro- de amina de Bromo 3. MH+ (ESI) plo duto tricíclica ou Cloro e 4. Procedimento de síntese
1. 38 %
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,95 (s, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,57 (d, 1H), 7,33 (dd, 1H), 7,18 (m, 2H), 6,98 – 121 6,77 (m, 3H), 4,54 (s, 2H), 3,78 (t, 2H), 3,72 (t, 4H), 3,60 (t, 4H), 2,79 (t, 2H).
3. 403,21
4. Procedimento 3
1. 25 %
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,96 (s, 1H), 7,96 (d, 1H), 7,53 (s, 2H), 7,31 (dd, 1H), 7,25 – 7,03 (m, 3H), 122 6,87 (t, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,70 (m, 6H), 3,56 (m, 4H), 2,89 – 2,68 (m, 2H).
3. 403,19
4. Procedimento 3 Exemplo 123
ETAPA A
[00273] A uma solução de Exemplo 44 em THF (15,0mL), hidreto de sódio (60%) (0,0412g,1,79 mmols) foi adicionado lentamente a 0°C, em seguida agitada durante 1 h a 25°C. Iodeto de etila (0,305g, 0,00179 mol) em 15,0 mL de THF foi adicionado lentamente a 0°C, em seguida agitado durante 2 h a 25°C. A mistura de reação foi monitora- da por LCMS, a mistura de reação foi diluída com água (50,0mL). A fase orgânica foi separada e a fase aquosa foi extraída com acetato de etila mais duas vezes. A fase orgânica combinada foi secada sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados sob pressão reduzi- da. O cru purificado em coluna HP-Sil (biotage) empregando um gradi- ente de acetato de etila/éter de petróleo (50/50) para fornecer o com- posto do título como um sólido off-white. 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,05 (d, J = 2,88 Hz, 1H), 7,49-7,50 (m, 1H), 7,42 (d, J = 8,20 Hz, 2H), 7,08-7,08 (m, 1H), 6,97-6,97 (m, 1H), 6,81 (d, J = 9,08 Hz, 1H), 4,38 (s, 2H), 4,18 (q, J = 7,08 Hz, 2H), 3,69-3,70 (m, 4H), 3,50 (t, J = 5,60 Hz, 2H), 3,29-3,30 (m, 4H), 2,78 (t, J = 5,52 Hz, 2H), 1,26 (t, J = 7,12 Hz, 3H). EM: 363,2 (M +H)+ . Sal de HCl dos Compostos da Presente Invenção Procedimento Geral
[00274] A uma solução de um composto exemplar (0,1 g) em DCM seco (10 mL), resfriada para 0°C, foi adicionado HCl a 1M em éter (5 eq) ou HCl a 4M em dioxano (5 eq) e agitada durante 15 minutos. A mistura de reação foi concentrada sob vácuo e triturada com dietiléter para fornecer o produto desejado como indicado na Tabela 2. Exemplos
[00275] Seguindo o procedimento de sal de cloridrato como descrito no procedimento geral acima, os seguintes compostos foram prepara- dos.
Tabela 2
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI)
1. 83%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,21 (d, J = 8,36 Hz, 1H), 7,63 (bs, 123 1H), 7,37-7,40 (m, 3H), HCl 6,99-7,01 (m, 2H), 4,53 (s, 2H), 4,20-4,22 (m, 2H), 3,74-3,75 (m, 4H), 3,57- 3,58 (m, 6H), 2,83 (s, 2H), , 1,28 (t, J = 7,16 Hz, 3H).
3.363,2
1. 65 %
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,83 (bs, 1H), 7,92-7,93 (m, 1H), 7,41-7,43 (m, 1H), 7,35- 108 7,37 (m, 1H), 7,05-7,07 HCl (m, 1H), 6,77-6,79 (m, 1H), 4,25 (s, 2H), 3,68-3,69 (m, 4H), 3,52 (bs, 2H), 3,25- 3,27 (m, 4H), 2,83 (bs, 1H).
3. 353,1
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI)
1. 85%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,85 (bs, 1H), 7,91-7,93 (m, 1H), 7,40-7,42 (m, 1H), 7,36- 109 7,37 (m, 1H), 7,03-7,05 HCl (m, 1H), 6,77-6,79 (m, 1H), 4,27 (s, 2H), 3,65-3,67 (m, 4H), 3,57 (bs, 2H), 3,25- 3,27 (m, 4H), 2,85 (bs, 1H).
3.353,1
1. 82%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 400 MHz, DMSO-d6: δ 8,20 (d, J = 110 7,88 Hz, 1H), 7,62 (s, 1H), HCl 7,38-7,41 (m, 3H), 6,83- 6,84 (m, 1H), 4,48 (s, 2H), 3,69-3,73 (m, 7H), 3,56- 3,59 (m, 6H), 2,82 (s, 2H).
3.367,2
1. 79%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,08 (d, J = 8,72 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 111 9,64 Hz, 1H), 7,44-7,46 HCl (m, 2H), 7,31-7,32 (m, 1H), 6,85-6,86 (m, 1H), 4,93 (s, 2H), 4,02 (t, J = 5,16 Hz, 2H), 3,70 (bs, 7H), 3,11 (bs, 4H), 2,87 (s, 2H).
3. 367,2
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI)
1. 74%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,91 (s, 1H), 8,14-8,15 (m, 1H), 7,40 (d, J = 7,72 Hz, 1H), 80 HCl 7,33 (d, J = 7,96 Hz, 1H), 7,05 (t, J = 7,60 Hz, 2H), 6,90-6,92 (m, 2H), 4,37 (bs, 2H), 3,97 (bs, 3H), 3,53-3,54 (m, 7H), 2,79 (s, 2H), 1,77-1,78 (m, 4H).
3.375,2
1. 87%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,93 (s, 1H), 8,17-8,18 (m, 1H), 7,33-7,35 (m, 3H), 7,11- 69 HCl 7,13 (m, 1H), 6,99-7,03 (m, 2H), 4,38 (s, 2H), 3,73- 3,75 (m, 4H), 3,59-3,61 (m, 4H), 3,48-3,49 (m, 2H), 3,12-3,13 (m, 2H), 2,80 (s, 2H).
3. 361,3
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI) 1,89%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,93 (s, 1H), 8,16-8,17 (m, 1H), 7,41 (d, J = 7,68 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 7,72 Hz, 2H), 86 HCl 7,21 (d, J = 9,84 Hz, 1H), 7,05 (t, J = 7,96 Hz, 1H), 6,97 (t, J = 7,44 Hz, 1H), 5,17 (s, 1H), 4,78 (s, 1H), 4,38 (s, 2H), 3,74-3,76 (m, 2H), 3,59-3,60 (m, 3H), 3,39-3,41 (m, 1H), 2,81 (s, 2H), 1,98 (s, 2H).
3. 347,1 1,78%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,92 (s, 1H), 8,16-8,17 (m, 1H), 7,41 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,00 Hz, 2H), 85 HCl 7,21 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 7,03-7,04 (m, 1H), 6,95- 6,95 (m, 1H), 5,17 (s, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,39 (s, 2H), 3,75-3,77 (m, 2H), 3,59- 3,60 (m, 3H), 3,39-3,41 (m, 1H), 2,81-2,82 (m, 2H), 1,99 (s, 2H).
3. 347,1
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI) 1,78%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,92 (s, 1H), 8,16-8,17 (m, 1H), 7,41 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,00 Hz, 2H), 82 HCl 7,21 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 7,03-7,04 (m, 1H), 6,95- 6,95 (m, 1H), 5,17 (s, 1H), 4,79 (s, 1H), 4,39 (s, 2H), 3,75-3,77 (m, 2H), 3,59- 3,60 (m, 3H), 3,39-3,41 (m, 1H), 2,81-2,82 (m, 2H), 1,99 (s, 2H).
3. 347,1
1. 88%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,98 (s, 1H), 8,18-8,19 (m, 1H), 44 HCl 7,34-7,35 (m, 4H), 6,96- 6,98 (m, 2H), 4,46 (s, 2H), 3,61-3,62 (m, 10H), 2,84 (s, 2H).
3.335,3
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI) 1,85%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,24-8,24 (m, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,39- 46 HCl 7,41 (m, 3H), 7,12 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 7,01 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 4,52 (s, 2H), 3,62-3,64 (m, 13H), 2,85 (bs, 2H).
3.349,3
1. 78 %
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,07 (bs, 1H), 7,61-7,63 (m, 1H), 7,43- 7,45 (m, 3H), 7,15 (t, J = 45 HCl 7,76 Hz, 1H), 7,04 (t, J = 7,00 Hz, 1H), 4,95 (s, 2H), 4,02-4,03 (m, 2H), 3,71- 3,72 (m, 7H), 3,11-3,12 (m, 4H), 2,89-2,90 (m, 2H).
3. 349,2 1,88%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,91 (s, 1H), 8,16 (d, J = 8,28 Hz, 1H), 7,33-7,35 (m, 4H), 83 HCl 7,05 (t, J = 7,04 Hz, 1H), 6,97 (t, J = 7,08 Hz, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,72 (bs, 2H), 3,63 (s, 6H), 3,40 (bs, 2H), 2,81 (bs, 2H), 1,56-1,58 (m, 4H).
3. 375,2
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI)
1. 81%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,94 (s, 1H), 8,16 (d, J = 9,04 Hz, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,42 (d, J = 7,72 Hz, 1H), 7,34 (d, J 79 HCl = 8,00 Hz, 2H), 7,06 (t, J = 7,24 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,56 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 3,97-4,00 (m, 1H), 3,66- 3,67 (m, 4H), 3,32-3,38 (m, 4H), 2,84 (s, 2H), 1,19- 1,21 (m, 3H).
3. 349,3
1. 69%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,92 (s, 1H), 8,15 (d, J = 7,68 Hz, 1H), 7,52 (bs, 1H), 7,41 (d, J = 7,56 Hz, 2H), 7,34 (d, J 76 HCl = 7,96 Hz, 1H), 7,06 (t, J = 7,68 Hz, 1H), 6,97 (t, J = 7,16 Hz, 1H), 4,44 (s, 2H), 4,08-4,11 (m, 2H), 3,66 (bs, 4H), 2,83 (bs, 2H), 2,65-2,67 (m, 2H), 1,16 (d, J = 6,16 Hz, 6H).
3. 363,2
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI)
1. 85%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,90 (s, 1H), 8,09 (bs, 1H), 7,59 (bs, 1H), 7,41 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,00 Hz, 2H), 7,06 (t, J = 7,20 75 HCl Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,60 Hz, 1H), 4,44 (s, 2H), 4,04- 4,07 (m, 1H), 3,94-3,96 (m, 2H), 3,88-3,91 (m, 4H), 3,03-3,05 (m, 1H), 2,68- 2,73 (m, 3H), 1,16 (d, J = 6,00 Hz, 3H).
3. 349,2 1,79%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,90 (s, 1H), 8,10 (bs, 1H), 7,53 (bs, 1H), 7,41 (d, J = 7,60 Hz, 1H), 7,34 (d, J = 8,00 74 HCl Hz, 2H), 7,06 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 8,00 Hz, 1H), 4,44 (s, 2H), 3,94- 3,96 (m, 3H), 3,38-3,40 (m, 4H) 2,68-2,68 (m, 4H), , 1,16 (d, J = 6,40 Hz, 3H).
3. 349,3
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI)
1. 82%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 10,93 (s, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,41- 7,43 (m, 3H), 7,34 (d, J = 8,00 Hz, 1H), 7,06 (t, J = 71 HCl 6,80 Hz, 1H), 6,98 (t, J = 7,20 Hz, 1H), 4,44-4,47 (m, 2H), 4,00-4,10 (m, 4H), 3,65-3,66 (m, 4H), 2,83 (bs, 2H), 2,03-2,04 (m, 2H). 3,347,1
1. 71%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): 400 MHz, DMSO-d6: δ 8,23 (s, 1H), 105 7,96 (s, 1H), 7,35 (d, J = HCl 10,80 Hz, 3H), 7,01-7,02 (m, 1H), 3,59-3,68 (m, 13H), 2,91 (bs, 2H), 1,91 (bs, 2H).
3. 350,1
1. Produção Exem- Base livre de Produto 2. 1H-RMN plo partida
3. MH+ (ESI) 1,82%
2. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,24 (s, 1H), 8,00 (d, J = 9,20 Hz, 1H), 107 7,60 (s, 1H), 7,39 (t, J = HCl 7,60 Hz, 1H), 7,20 (d, J = 9,60 Hz, 1H), 3,91-3,98 (m, 2H), 3,74-3,76 (m, 7H), 3,16 (s, 4H), 2,96-2,97 (m, 2H), 2,06 (bs, 2H).
3. 368,3
DESCRIÇÃO DO ENSAIO BIOLÓGICO Ensaio de desagregação de Tau de tamanho natural (flTau) por Tioflavina T (ThT)
[00276] A isoforma mais longa da Tau humana (2N4R; 441 aminoá- cidos) foi expressa em bactérias e purificada. Para o ensaio de desa- gregação de Tau por ThT, 35 µM de Tau de tamanho natural (fl) re- combinante em PBS foram agregados durante 24 horas a 37°C na presença de 50 µM de heparina (Sigma-Aldrich) e 10 mM de DTT (Sigma-Aldrich) sob agitação a 750 RPM. Os compostos foram dissol- vidos em dimetil sulfóxido anidroso (DMSO, Sigma-Aldrich) para obter uma concentração de 10 mM. Agregados de flTau e diluições seriais de compostos foram misturados juntamente em PBS (volume de 50 µL) para uma concentração final de 2 μM de agregados de flTau e de 160 a 0,04 µM de compostos. A mistura foi incubada durante 30 minu- tos em temperatura ambiente (RT), em seguida 40 µL desta mistura foram transferidos em uma placa de ensaio preta de 384 cavidades (Perkin-Elmer) e misturados com 10 µL de 100 µM de ThT em glicina a 250 mM (ambos de Sigma-Aldrich) em PBS. A fluorescência (unidades de fluorescência relativa; RFU) foi medida em monoplicata ou duplica-
ta em um leitor Tecan (excitação: 440 nm; emissão: 485 nm). A por- centagem de desagregação de flTau foi em seguida calculada e a me- tade da quacentração eficaz máxima (EC50) foi determinada usando GraphPad Prism versão 5 (GraphPad Software) assumindo um modelo de ajuste de sítio de ligação única. Ensaio de desagregação de Tau K18 por ThT
[00277] O fragmento de Tau K18, abrangendo os aminoácidos 244 a 372 da isoforma mais longa (2N4R) de Tau441 humana, foi expresso em bactérias e purificado ou adquirido de SignalChem. Para o ensaio de desagregação de K18 por ThT, 35 µM de K18 recombinante em PBS foram agregados durante 24 horas a 37°C na presença de 50 µM de heparina (Sigma-Aldrich) e 10 mM de DTT (Sigma-Aldrich) sob agi- tação a 750 RPM. Os compostos foram dissolvidos em dimetil sulfóxi- do anidroso (DMSO, Sigma-Aldrich) para obter uma concentração de 10 mM. Agregados de K18 e diluições seriais de compostos foram mis- turados juntamente em PBS (volume 50 µL) para uma concentração final de 2 μM de agregados de K18 e de 160 a 0,04 µM de compostos. A mistura foi incubada durante 30 minutos em temperatura ambiente (RT), em seguida 40 µL desta mistura foram transferidos em uma pla- ca de ensaio preta de 384 cavidades (Perkin-Elmer) e misturados com 10 µL de 100 µM de ThT em glicina a 250 mM (ambos de Sigma- Aldrich) em PBS. A fluorescência (unidade de fluorescência relativa; RFU) foi medida em monoplicata ou duplicata em um leitor Tecan (ex- citação: 440 nm; emissão: 485 nm). A porcentagem de desagregação de K18 foi em seguida calculada e a metade da concentração eficaz máxima (EC50) foi determinada usando GraphPad Prism versão 5 (GraphPad Software) assumindo um modelo de ajuste de ligação úni- ca.
[00278] Os seguintes compostos exemplares foram medidos:
Exemplos EC50 de desagregação de EC50 de desagregação de Tau K18 flTau (µM) (µM) 1 +++ 2 +++ 6 +++ 7 +++ 8 +++ 9 +++ 11 +++ 12 +++ 13 +++ 14 +++ 15 +++ 16 +++ 17 +++ 18 +++ 19 +++ 20 +++ 21 +++ 22 +++ 23 +++ 24 +++ 25 +++ 26 +++ 27 +++ 28 +++ 29 +++ 30 +++ 31 +++ 32 +++ 33 ++ 34 +++
Exemplos EC50 de desagregação de EC50 de desagregação de Tau K18 flTau (µM) (µM) 35 +++ 36 +++ 37 ++ 38 +++ 39 +++ 40 +++ 41 +++ 42 +++ 43 +++ 44 +++ 45 +++ 46 +++ 47 ++ 48 +++ 49 +++ 50 ++ 51 ++ 52 +++ 53 +++ 54 +++ 55 +++ 56 +++ 57 +++ 58 +++ 59 +++ 62 ++ 67 +++ 68 +++ 70 +++ 76 +++
Exemplos EC50 de desagregação de EC50 de desagregação de Tau K18 flTau (µM) (µM) 77 +++ 78 +++ 86 +++ 87 +++ 88 +++ 89 +++ 90 +++ 91 +++ 92 +++ 93 +++ 94 ++ 95 + 96 +++ 97 ++ 98 + 99 +++ 100 +++ 101 +++ 102 +++ 103 +++ 104 +++ 112 +++ 113 +++ 117 +++ 118 +++ 119 +++ 120 +++ 121 ++ 122 +++ 80 HCl ++
Exemplos EC50 de desagregação de EC50 de desagregação de Tau K18 flTau (µM) (µM) 69 HCl +++ 86 HCl +++ 85 HCl ++ 82 HCl +++ 107 HCl + 123 HCl +++ 108 HCl +++ 109 HCl +++ 110 HCl +++ 111 HCl +++ 44 HCl +++ 46 HCl ++ 45 HCl +++ 83 HCl + 79 HCl ++ 76 HCl +++ 75 HCl +++ 74 HCl +++ 71 HCl ++ 105 HCl + Legenda: +++ EC50 < 10 uM; ++ EC50 10<x<25 uM; + EC50 25<x<50 uM. Redução de agregação intracelular de Tau
[00279] Uma linhagem celular de neuroblastoma humano superex- pressando a forma de tamanho natural de Tau humana transportando a mutação P301L foi cultivada em meio completo [DMEM-F12 4,5 g/L de Glutamax (Invitrogen), 15% de FBS (Biochrom), 1% de Peni/Estrep (Invitrogen) supplementado com 2,5 µg/ml de G418 (Sigma-Aldrich) antibiótico de seleção]. No dia antes do experimento, 5x105 célu- las/cavidade foram semeadas em uma placa de 6 cavidades em 3 mL de meio completo. No dia seguinte, as células foram incubadas com DMSO ou um composto da presente invenção em 5 µM durante mais 24 h a 37°C. Após incubação, as células foram tripsinizadas, ressu- pensas em 100 µl de tampão homogeneizado [Tris-HCl a 25 mM , pH 7,4, NaCl a 150 mM, EDTA a 1 mM, EGTA a 1 mM contendo inibidores de fosfatase (NaF a 30 mM, Na3VO4 a 0,2 mM, ácido ocadaico a 1 nM, PMSF a 1 mM, Na4P2O7 a 5 mM) e coquetel de inibidor de protease (CompleteTM, Roche)], e em seguida lisado fisicamente com três ciclos rápidos de congelamento e descongelamento. As amostras fora mem seguida testadas diretamente no ensaio AlphaLISA.
[00280] A Tau fosforilada, agregada e total foram quantificadas por AlphaLisa usando os seguintes pares de anticorpo:  Contas aceptoras de HT7 + biotina (BT)-Contas doado- ras de Tau13: Tau toral  Contas aceptoras de HT7 + biotina (BT)-Contas doado- ras de HT7: Tau humana agregada
[00281] A Tau13 (Abcam) foi biotinilada usando o kit de biotinilação em fase sólida EZ-Link® NHS-PEO (Thermo Scientific), enquanto a HT7-biotina era de uma fonte comercial (Thermo Scientific).
[00282] Para cada par de anticorpos foi otimizada a concentração de contas aceptoras e anticorpos biotinilados. Todas as amostras fo- ram primeiramente testadas em uma série de diluições em PBS para identificar a faixa linear e diluição ideal para cada amostra e ensaio. Para o protocolo final, os seguintes reagentes foram adicionados em um placa branca de 384 cavidades OptiPlate (PerkinElmer):  5 µL de amostra teste diluída  20 µL de uma mistura de contas aceptoras de biotina- mAb nas seguintes concentrações finais:  HT7-BT a 1,25 nM em combinação com contas de HT7- Acc a 10 µg/ml
 Tau13-BT a 5 nM em combinação com contas de HT7- Acc a 2,5 µg/ml
[00283] Após a incubação desta mistura em temperatura ambiente durante 1 h, 25 µL de contas doadoras de estreptavidina (Perkin El- mer) em 25 µg/mL foram adicionados no escuro. As placas foram ana- lisadas após 30 min de incubação usando o instrumento EnSpire Al- pha e EnSpire Workstation versão 3.00. Os dados para Tau foram normalizados para Tau total e em seguida expressos como a porcen- tagem das células tratadas com DMSO.
[00284] Os seguintes compostos exemplares foram medidos: Exemplo % de redução de agregação intracelular de Tau 12 + 21 + 38 + 43 ++ 44 +++ 45 ++ 46 ++ Legenda: +++ %>50; ++ % 50<x<25; + % 25<x<10. Redução de desdobramento intracelular de Tau por imunocito- química
[00285] Uma linhagem celular de neuroblastoma humano superex- pressando a forma de tamanho natural de Tau humana transportando a mutação P301L foi cultivada em meio completo [DMEM-F12 4,5 g/L de Glutamax (Invitrogen), 15% de FBS (Biochrom), 1% de Peni/Estrep (Invitrogen) suplementado com 2,5 µg/ml de G418 (Sigma-Aldrich) an- tibiótico de seleção].
[00286] Para induzir ao acúmulo de Tau desdobrada intracelular, as células foram diferenciadas in vitro de células de neuroblastoma para células semelhantes a neurônios. Para isto, as células foram semea- das em placa de 96 cavidades em uma densidade de 2500 célu-
las/cavidade em 100 µl de meio completo suplementado com 10 µM de ácido retinoico (RA; Sigma, R2625) durante 1 semana.
A cada 2 a 3 dias, o meio foi mudado e ácido retinoico fresco foi adicionado.
Para avaliar a capacidade dos compostos desta invenção de reduzir os ní- veis de Tau intracelular desdobrada, os compostos foram dispensados nas células em concentrações entre 0,1 e 10 nM durante 24 horas.
Após a incubação com os compostos, as células foram fixadas em PFA a 4% durante 15 min e lavadas 3 vezes em PBS.
Em seguida, as células foram bloqueadas em soro de cabra puro a 10% (NGS), Triton X-100 a 0,25% em PBS durante 2 h em temperatura ambiente.
As cé- lulas fixadas, permeabilizadas foram em seguida incubadas durante a noite em 5% de NGS/0,25% de Triton X-100 em PBS com anticorpo anticamundongo MC1 monoclonal (fornecido por Prof.
Peter Davies, Albert Einstein College of Medicine, Nova Iorque, EUA) diluído 1:4000 para detectar a Tau desdobrada e anticoelho policlonal, Tau total (Ab- cam; ab64193), e diluído 1:400 para detectar a Tau total.
Após a incu- bação com anticorpos primários, as células foram lavadas 3 vezes em PBS e em seguida incubadas 30 min com anticorpos secundários anti- camundongo de cabra FITC (Abcam ab6785) e anticoelho de cabra Alexa Fluor 594 (Abcam 150080). As células foram em seguida lava- das 3 vezes em PBS e as imagens adquiridas com Incucyte.
O sinal para a Tau desdobrada foi normalizada para sinal de Tau total e a re- dução de desdobramento de Tau foi expresso como a porcentagem em comparação com as células tratadas com veículo.
Os dados são a média de pelo menos 3 imagens/cavidade.
Quando avaliado quanto a sua capacidade de reduzir o desdobramento intracelular de Tau, o Exemplo 44 mostrou potência em baixa concentração de nM como mostrado na Figura 1. Ensaio de inibição de agregação de Tau de tamanho natural (flT) por ThT
[00287] A isoforma de Tau humana (2N4R; 441 aminoácidos) foi adquirida de Biotechne (USA). A proteína foi expressa em bactérias E coli, purificada e concentrada em PBS para uma concentração final de 50 µM.
[00288] Para induzir a agregação de Tau, 4 uM de flTau monoméri- ca foram incubados durante 72 horas a 37°C sob ciclos de agitação que consistem tanto em agitação orbital quanto função de mistura usando o misturador Hula (Life Technologies) com Filamentos helicoi- dais emparelhados de Tau (PHF) enriquecidos a partir do cérebro post-mortem de um paciente de doença de Alzheimer (DA) obtido de uma fonte externa (Tissue Solutions) diluído 1:200. O procedimento de enriquecimento foi modificado a partir de Jicha et al, 1997 (Journal of Neuroscience Research 48:128–132 (1997)) e Rostagno and Ghiso, 2009 (Current protocols in cell biology (2009), Capítulo 3, Unidade 3.33
3.33,1-33). Resumidamente, Cerca de 9 g da amostra cerebral huma- na de DA foram descongeladas em gelo e homogeneizadas com 50 ml de tampão de homogeneização [NaCl a 0,75 M em tampão de RAB (2- (N-morfolino a 100 mM) ácido etanossulfônico (MES), EGTA a 1 mM, MgSO4 a 0,5 mM, DTT a 2 mM, pH 6,8) suplementado com inibidores de protease (Completo; Roche 11697498001)] em um homogeneiza- dor de vidro Dounce. O homogeizado foi em seguida incubado a 4°C durante 20 min para deixar despolimerizar quaisquer microtúbulos re- siduais, antes de ser transferido para garrafas de centrífuga de poli- carbonato (16 x 76 mm; Beckman 355603) e centrifugado a 11.000 g (12,700 RPM) em uma ultracentrífuga (Beckman, XL100K) durante 20 min a 4°C usando o rotor 70,1 pré-resfriado (Beckman, 342184). As péletes foram mantidas em gelo. Os sobrenadantes foram misturados em garrafas de policarbonato e centrifugados novamente a 100.000 g (38.000 RPM) durante 1 hora a 4°C no rotor 70,1 Ti para isolar as pé- letes ricas em PHF, enquanto a Tau solúvel permaneceu nos sobrena-
dantes. As péletes da primeira e segunda centrifugações foram res- suspensas em 120 mL de tampão de extração [Tris-HCl a 10 mM, pH 7,4, sacarose a 10%, NaCl a 0,85 M, inibidor de protease a 1% (Calbi- ochem 539131), EGTA a 1 mM, inibidor de fosfatase a 1% (Sigma P5726 e P0044)]. A solução foi em seguida transferida em garrafas de centrífuga de policarbonato (16 x 76 mm; Beckman 355603) e centrifu- gada em 15.000 g (14,800 RPM) em uma ultracentrífuga (Beckman, XL100K) durante 20 min a 4°C usando o rotor 70,1 Ti. Na presença de sacarose a 10% em centrifugação em baixa velocidade, a maior parte do PHF permaneceu no sobrenadante, enquanto NFTs intactos ou fra- gmentados e agregados maiores de PHF foram peletizados. As péle- tes foram descartadas. 20% Sarkosyl (Sigma L7414-10ML) foi adicio- nado aos sobrenadantes para uma concentração final de 1% e agitado em temperatura ambiente durante 1 h. Esta solução foi em seguida centrifugada em garrafas de policarbonato a 100.000 g (38,000 RPM) durante 1 h a 4°C no rotor 70,1 Ti, e as péletes contendo o material rico em PHF foram ressuspensas em um volume final total de 1,5 mL de PBS, aliquotadas e armazenadas a -80°C.
[00289] Para testar a capacidade dos compostos desta invenção em inibir a agregação de Tau, diluição serial de compostos em DMSO foi adicionada à mistura monomérica de flTau/PHF antes da incuba- ção. Após incubação, 40 µl da mistura foram transferidos em uma pla- ca de ensaio preta de 384 cavidades (Perkin-Elmer) e misturados com 10 µl de 100 µM de ThT em glicina a 250 mM (ambos de Sigma- Aldrich, Buchs, Suíça) em PBS. A fluorescência foi medida em mono- plicata em um leitor Tecan Spark usando filtro (excitação a 448 nm/ BW 7nm, emissão a 485 nm/ BW 20 nm). Um tipo de resposta à dose de curva foi obtido por dois experimentos independentes, cada qual com duplicatas técnicas e a IC50 foi calculada usando GraphPad Prism 7,03.
[00290] Os valores de IC50 da inibição de agregação de flTau com Exemplo 44 e Exemplo 46 são indicados na tabela abaixo: Exemplo IC50 (uM) 44 0,39 46 1,2

Claims (20)

REIVINDICAÇÕES
1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (I): (I) ou estereoisômeros, misturas racêmicas, tautômeros, sais farmaceuti- camente aceitáveis do mesmo; em que A é selecionado do grupo que consiste em ,
N E
N
G R
N
N N N N V , , , , ,
N e , em que , N , N ,
N E
N
G R
N N V , , , e podem ser ligados ao átomo de N em qualquer posição
N
N
N disponível, e em que , N , N , N , N e é substituído por um ou mais substituintes Rj; B é selecionado do grupo que consiste em O e NRa; E e V são independentemente selecionados do grupo que consiste em N, NR5, O e S; G é selecionado do grupo que consiste em um anel benze- no e um anel piridina; J é selecionado do grupo que consiste em O, N–R1 e CH2 ou J será selecionado do grupo que consiste em CH ou C se J for li- gado a R2; Y, Y1, Y2 e Y3 são CZ; Z é independentemente selecionado do grupo que consiste em H, halogênio, O–alquila, alquila e CN; R é independentemente selecionado do grupo que consiste em e –NR3R4; Ra é selecionado do grupo que consiste em H e alquila; Rd, Re, Rf, e Rg são independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila, ou quaisquer dois de Rd, Re, Rf, e Rg podem ser ligados para formar um anel de 3 a 8 membros; Rj é independentemente selecionado do grupo que consiste s r
N J em –halogênio, –O-alquila, –NR R , –CN, 3 4 t u, ,e , em que uma ponte ou ligação contendo átomo de car- bono C1-2 pode estar presente entre um átomo de carbono e o átomo de carbono c ou d ou em que uma ponte ou ligação contendo átomo de carbono C1-2 pode estar presente entre o átomo de carbono b e o átomo de carbono c ou d; R1 é selecionado do grupo que consiste em H e alquila; R2 é independentemente selecionado do grupo que consis- te em alquila, ou –O–alquila e em que se dois R2 forem geminais, eles poderão ser ligados para formar um anel de 3 a 5 membros; R3 e R4 são independentemente selecionados do grupo que consiste em H e alquila; R5 é selecionado do grupo que consiste em H e alquila; n é 0, 1, 2, 3 ou 4; r e s são independentemente 0, 1, 2 ou 3; e t e u são independentemente 1, 2 ou 3.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que apresenta a Fórmula (Ia): (Ia) na qual A, Ra, Rd, Re, Rf, Rg, Y, Y1, Y2 e Y3 são como definidos na rei- vindicação 1.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, carac- terizado pelo fato de que A é N , sendo que N podem ser ligados ao átomo de N em qualquer posição disponível, sendo que N é substituído por um ou mais substituintes Rj, e sendo que Rj é como definido na reivindicação 1.
4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 3, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula (Ib): (Ib) na qual Ra, Rj e Z são como definidos na reivindicação1, e p é 1 ou 2.
5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 4, caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo que consiste em:
N O
N N
N N
6. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das rei- vindicações 1 a 5, e opcionalmente um veículo ou excipiente farma- ceuticamente aceitáveis.
7. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reividnicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é na fabrica- ção de um medicamento para tratamento de um distúrbio ou anormali- dade associado com agregados de proteína Tau em um indivíduo em necessidade do mesmo.
8. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reividnicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é na fabrica- ção de um medicamento para o tratamento de doença de Alzheimer em um indivíduo em necessidade do mesmo.
9. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reividnicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é na fabrica- ção de um medicamento para o tratamento de PSP em um indivíduo em necessidade do mesmo.
10. Uso de uma quantidade eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um medicamento para diminuição de agregação de Tau em um indivíduo em necessidade da mesma.
11. Uso de uma quantidade eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um medicamento para prevenção da formação de agregados de Tau e/ou de inibição de agregação de Tau em um indivíduo em necessidade da mesma
12. Uso de uma quantidade eficaz de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um medicamento para interferência in- tracelularmente com os agregados de Tau em um indivíduo em neces- sidade da mesma.
13. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 7 a 12, caracterizado pelo fato de que o indivíduo é animal ou ser huma- no.
14. Mistura, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, e pelo menos um outro composto biologicamente ativo selecionado de um agente terapêutico diferente do composto, como definido em qual- quer uma das reivindicações 1 a 5, um veículo, um diluente ou um ex- cipiente farmaceuticamente aceitável.
15. Mistura, de acordo com a reivindicação 14, caracteriza- da pelo fato de que o outro composto biologicamente ativo é um com-
posto usado no tratamento de amiloidose.
16. Mistura, de acordo com a reivindicação 14 ou 15, carac- terizada pelo fato de que o outro composto biologicamente ativo é se- lecionado do grupo que consiste em compostos contra o estresse oxi- dativo, compostos antiapoptóticos, quelantes de metal, inibidores de reparo de DNA tais como pirenzepina e metabólitos, ácido 3-amino-1- propanossulfônico (3APS), 1,3-propanodissulfonato (1,3PDS), ativado- res de α-secretase, inibidores de β- e γ-secretase, proteínas Tau, neu- rotransmissor, ruptores de folha β, atrativos para componentes celula- res de limpeza/depleção de beta amiloide, inibidores de beta amiloide truncada no N-terminal incluindo beta amiloide 3-42 piroglutamatada, moléculas anti-inflamatória, ou inibidores de colinesterase (ChEIs) tais como tacrina, rivastigmina, donepezil, e/ou galantamina, agonistas de M1, outros fármacos incluindo qualquer fármaco modificante de ami- loide ou Tau e suplementos nutritivos, um anticorpo, incluindo qualquer anticorpo funcionalmente equivalente ou partes funcionais do mesmo ou uma vacina.
17. Mistura, de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 14 a 16, caracterizada pelo fato de que o composto e/ou o outro composto biologicamente ativo está/estão presente(s) em uma quanti- dade terapeuticamente eficaz.
18. Uso, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é selecionado de doença de Alzheimer (DA), DA familiar, Tauopatia Relacionada com a Idade Primária (PART), doença Creutzfeldt-Jacob, demência pugilística, síndrome de Down, doença Gerstmann-Sträussler-Scheinker (GSS), miosite de corpo de inclusão, angiopatia amiloide cerebral de proteína príon, le- são cerebral traumática (TBI), esclerose lateral amiotrófica (ELA), complexo Parkinsonismo-demência de Guam, doença do neurônio mo- tor não Guamaniana com emaranhados neurofibrilares, doença do grão argirofílico, degeneração corticobasal (CBD), emaranhados neu- rofibrilares difusos com calcificação, demência frontotemporal com Parkinsonismo ligado ao cromossomo 17 (FTDP-17), doença Haller- vorden-Spatz, atropia de múltiplos sistemas (AMS)), doença Niemann- Pick tipo C, degeneração pálido-ponto-nigral, doença de Pick (PiD), gliose subcortical progressiva, paralisia supranuclear progressiva (PSP), panencefalite esclerosante subaguda, demência com predomí- nio de emaranhados, parkinsonismo pós-encefálico, distrofia miotôni- ca, panencefalopatia de esclerose subaguda, mutações em LRRK2, encefalopatia traumática crônica (CTE), demência familiar britânica, demência familar dinamarquesa, outras degenerações lombares fron- totemporais, Parkinsonismo de Guadalupe, neurodegeneração com acúmulo de ferro no cérebro, retardo metal relacionado com SLC9A6, tauopatia de substância branca com inclusões gliais globulares, epi- lepsia, demência de corpo de Lewy (LBD), comprometimento cognitivo brando (MCI), esclerose múltipla, doença de Parkinson, demência re- lacionada ao HIV, diabetes de início na idade adulta, amiloidose cardí- aca senil, glaucoma, acidente vascular cerebral isquêmico, psicose em DA e doença de Huntingon.
19. Uso do composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que é como uma refe- rência analítica ou uma ferramenta de análise in vitro.
20. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a Fórmula: ou ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
BR112020022245-3A 2018-06-04 2019-05-30 compostos de tetra-hidrobenzafluoro[2,3-c]piridina e beta-carbolina para o tratamento, alívio e prevenção de distúrbios associados com agregação de tau BR112020022245A2 (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP18175845.9 2018-06-04
EP18175845 2018-06-04
PCT/EP2019/064144 WO2019233883A1 (en) 2018-06-04 2019-05-30 Tetrahydrobenzofuro[2,3-c]pyridine and beta-carboline compounds for the treatment, alleviation or prevention of disorders associated with tau aggregates

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BR112020022245A2 true BR112020022245A2 (pt) 2021-02-02

Family

ID=62530123

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112020022245-3A BR112020022245A2 (pt) 2018-06-04 2019-05-30 compostos de tetra-hidrobenzafluoro[2,3-c]piridina e beta-carbolina para o tratamento, alívio e prevenção de distúrbios associados com agregação de tau

Country Status (14)

Country Link
US (2) US11684625B2 (pt)
EP (1) EP3802533A1 (pt)
JP (1) JP7357371B2 (pt)
KR (1) KR102550423B1 (pt)
CN (1) CN112351984B (pt)
AR (1) AR115464A1 (pt)
AU (1) AU2019280590B2 (pt)
BR (1) BR112020022245A2 (pt)
CA (1) CA3102343C (pt)
EA (1) EA202092557A1 (pt)
IL (1) IL279106A (pt)
MX (1) MX2020013115A (pt)
TW (1) TWI743484B (pt)
WO (1) WO2019233883A1 (pt)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11202109111VA (en) * 2019-02-27 2021-09-29 Univ California Azepino-indoles and other heterocycles for treating brain disorders
EP3941477A1 (en) * 2019-03-01 2022-01-26 AC Immune SA Novel compounds for the treatment, alleviation or prevention of disorders associated with tau aggregates
EP4165042A1 (en) * 2020-06-10 2023-04-19 Delix Therapeutics, Inc. Tricyclic psychoplastogens and uses thereof
US20240116984A1 (en) * 2021-04-25 2024-04-11 University Of Notre Dame Du Lac Modified peptides for the inhibition of abnormal tau accumulation

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1136493A1 (en) * 2000-03-23 2001-09-26 Sanofi-Synthelabo 2-(Thienopyridinyl)pyrimidone, 2-(furopyridinyl)pyrimidone 2-(isoquinolinyl)pyrimidone, 2-(pyridoindolyl)pyrimidone and 2-(benzofuropyridinyl)pyrimidone derivatives
TWI335913B (en) * 2002-11-15 2011-01-11 Vertex Pharma Diaminotriazoles useful as inhibitors of protein kinases
CA2511599A1 (en) 2002-12-24 2004-07-15 Neurochem (International) Limited Therapeutic formulations for the treatment of beta-amyloid related diseases
US20090023756A1 (en) 2006-02-23 2009-01-22 Pfizer Inc Substituted quinazolines as pde10 inhibitors
ES2637794T3 (es) * 2007-11-14 2017-10-17 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Derivados de imidazo[1,2-A]piridina y su uso como moduladores alostéricos positivos de receptores MGLUR2
KR101851810B1 (ko) 2010-04-16 2018-04-26 에이씨 이뮨 에스.에이. 아밀로이드 또는 아밀로이드-유사 단백질과 관련된 질환의 치료를 위한 신규 화합물
EP3013824B8 (en) * 2013-06-28 2018-11-21 Alzprotect Carboline compounds usable in the treatment of neurodegenerative diseases
CN107216327A (zh) * 2017-06-27 2017-09-29 山东大学 5型磷酸二酯酶抑制剂及其制备方法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
AR115464A1 (es) 2021-01-20
JP2021525272A (ja) 2021-09-24
EA202092557A1 (ru) 2021-04-01
TWI743484B (zh) 2021-10-21
CA3102343C (en) 2023-08-29
AU2019280590A1 (en) 2020-11-19
KR102550423B1 (ko) 2023-07-04
WO2019233883A1 (en) 2019-12-12
JP7357371B2 (ja) 2023-10-06
CA3102343A1 (en) 2019-12-12
KR20210005724A (ko) 2021-01-14
EP3802533A1 (en) 2021-04-14
TW202017924A (zh) 2020-05-16
US11684625B2 (en) 2023-06-27
IL279106A (en) 2021-01-31
CN112351984B (zh) 2024-01-02
MX2020013115A (es) 2021-05-12
US20230255976A1 (en) 2023-08-17
AU2019280590B2 (en) 2022-11-17
CN112351984A (zh) 2021-02-09
US20210267989A1 (en) 2021-09-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP2558446B1 (en) Novel compounds for the treatment of diseases associated with amyloid or amyloid-like proteins
AU2019205087B2 (en) 1, 3, 4, 5-tetrahydro-2H-pyrido(4,3-b)indole derivatives for the treatment, alleviation or prevention of disorders associated with Tau aggregates like Alzheimer&#39;s disease
BR112020022245A2 (pt) compostos de tetra-hidrobenzafluoro[2,3-c]piridina e beta-carbolina para o tratamento, alívio e prevenção de distúrbios associados com agregação de tau
CA3131805C (en) Novel compounds for the treatment, alleviation or prevention of disorders associated with tau aggregates
US11814378B2 (en) Compounds for the treatment, alleviation or prevention of disorders associated with Tau aggregates
TWI812677B (zh) 用於治療、改善或預防與tau聚集體有關的病症之新穎化合物
EA044393B1 (ru) Соединения тетрагидробензофуро[2,3-c]пиридина и бета-карболина для лечения, облегчения или профилактики расстройств, связанных с агрегатами тау-белка
EA043389B1 (ru) ПРОИЗВОДНЫЕ 1,3,4,5-ТЕТРАГИДРО-2Н-ПИРИДО[4,3-b]ИНДОЛА ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ, ОБЛЕГЧЕНИЯ ИЛИ ПРОФИЛАКТИКИ РАССТРОЙСТВ, СВЯЗАННЫХ С АГРЕГАТАМИ ТАУ, ТАКИХ КАК БОЛЕЗНЬ АЛЬЦГЕЙМЕРА
TW202231272A (zh) 新穎化合物

Legal Events

Date Code Title Description
B350 Update of information on the portal [chapter 15.35 patent gazette]
B06W Patent application suspended after preliminary examination (for patents with searches from other patent authorities) chapter 6.23 patent gazette]