BR112018011969B1 - Compostos heteroaromáticos como inibidores de btk, seu uso, seu processo para preparação e composição farmacêutica que os compreende - Google Patents

Abstract

COMPOSTOS HETEROAROMÁTICOS COMO INIBIDORES DE BTK. A presente invenção refere-se a compostos da fórmula (I) em que os grupos R1, Cy e Y são definidos aqui, os quais são adequados para o tratamento de doenças relacionadas com BTK, e processos para a preparação destes compostos, preparações farmacêuticas contendo estes compostos, e seus métodos de utilização.

Description

CAMPO TÉCNICO

[0001] A presente invenção refere-se a novos compostos que ini bem BTK e seu uso como medicamentos.

INFORMAÇÃO ANTECEDENTE

[0002] Os membros da família da proteína cinase de enzimas hu manas desempenham papéis regulatórios importantes numa multiplicidade de distintos processos de transdução de sinal devido à sua modificação translaciona de proteínas específicas por meio da adição de um grupo fosfato (Hunter, Cell 1987, 50, 823-829). A tirosina cinase de Bruton (BTK) é um membro da família Tec de tirosina cinases e desempenha um papel crítico no desenvolvimento de células B, ativação e produção de anticorpos.

[0003] A contribuição da BTK para a biologia da célula B é exem plificada na imunodeficiência de agamaglobulinemia ligada a X (XLA) em humanos (revisto em Lindvall, Immunol. Rev. 2005, 203, 200-215) que exibe sinalização atenuada de cálcio sobre o envolvimento de receptor da célula B (BCR), ausência de células B maduras na periferia devido ao bloqueio entre o estágio pró- e pré-célula B e têm níveis mais baixos de anticorpos circulantes do que indivíduos saudáveis normais. O resultado de recentes ensaios clínicos com moléculas anti-CD20 de esgotamento de células B em doenças como artrite reumatoide (RA) e esclerose múltipla (MS) sustentam a hipótese de que as células B oferecem um importante nó de intervenção para o controle de doenças autoimunes (Townsend, Immunol. Rev 2010, 237, 264-283). Como tal, a atenuação da ativação e proliferação de células B por meio da inibição de BTK pode oferecer benefícios terapêuticos similares e é consistente com a resistência demonstrada de camundongos deficientes de BTK à artrite induzida por colágeno (Jansson, Clin. Exp. Immunol. 1993, 94, 459-465) e encefalite auto-imune experimental (Svensson, Eur. J. Immunol. 2002, 32, 1939-1946 e Mangla, Blood 2004, 104, 1191-1197). Similarmente, a eficácia clínica observada com um anticorpo neutralizante para o fator BlyS estimulante de células B sustenta um papel para as células B na patofisiologia do lúpus eritematoso sistêmico (LES) (La Cava, Expert Opin. Biol. Ther. 2010, 10, 1555- 1561). Devido à necessidade de BTK para a produção de auto-anticorpos, incluindo anticorpos anti-DNA, em modelos murinos de SLE (Steinberg, J. Clin. Invest. 1982, 70, 587-597; Golding, J. Immunol. 1983, 130, 1043 -1046; Scribner, J. Immunol. 1987, 138, 3611-3617; Seldin, J. Exp. Med. 1987, 166, 1585-1590; Takeshita, Int. Immunol. 1998, 10, 435-4444; (Imunol. 2003, 171, 1850-1858), inibidores de BTK podem oferecer benefícios terapêuticos para pacientes com SLE.

[0004] Dentro de células mieloides, transdução de sinal de BTK é necessária para liberação estimulada da liberação de citocinas inflamatórias, como o TNFα de monócitos estimulados (Horwood, J. Exp. Med. 2003, 197, 1603-1611) e para organização citoesquelética de actina ideal e reabsorção óssea lacunar em osteoclastos isolados (Danks, J. Bone Miner. Res. 2010, 26, 182-192). Os mastócitos derivados da medula óssea deficientes de BTK exibem desgranulação induzida por ativação prejudicada e liberação de citocinas. Devido ao papel da BTK em processos de transdução de sinais através de múltiplos tipos celulares implicados na patogênese de distúrbios autoimunes e alérgicos, inibição da atividade da BTK pode fornecer benefícios clínicos em doenças tais como RA, MS, SLE, nefrite por lúpus, doença de Sjogren, vasculite, asma e distúrbios alérgicos.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0005] Atualmente, compostos tais como A e C (descritos abaixo) e aqueles representados, por exemplo, na publicação N° PCT WO 2014025976 são conhecidos como inibidores de BTK. Entretanto, como apresentado aqui abaixo, estes compostos reagem de forma cruzada com e inibem outras cinases. Portanto, esses representativos não são seletivos para BTK em relação a outros alvos. A ausência de inibição seletiva da BTK aumenta a probabilidade de efeitos adversos em um cenário clínico.

[0006] Além da eficácia e seletividade, um composto terapêutico deve ter um perfil de segurança favorável, tal como a segurança cardi-ovascular. Um parâmetro para avaliar a segurança cardiovascular (CV) de um composto é a pressão arterial média (MAP). Uma alteração estatisticamente significativa em MAP em um estudo pré-clínico de segurança CV de ratos é indicativa de eventos cardiovasculares adversos em humanos. Como fornecido aqui abaixo, os compostos comparativos A, B, e C mostram aumentos estatisticamente significativos em MAP em um estudo de CV em ratos. Os dados sugerem que estes compostos podem não ter um perfil de segurança cardiovascular favorável em humano.

[0007] Tendo em vista as preocupações de segurança acima men cionadas com os outros inibidores de BTK conhecidos, ainda permanece uma necessidade de compostos adicionais que sejam altamente seletivos para a inibição de BTK e não tenham um impacto adverso sobre parâmetros cardiovasculares relevantes tal como MAP.

[0008] Os compostos da presente invenção mantêm a atividade ini- bidora potente requisitada contra BTK para tratar as doenças relacionadas com BTK acima mencionadas, e solucionam os problemas de se- lectividade e de segurança cardiovascular associados com outros inibidores de BTK conhecidos, tais como aqueles representados pelos compostos comparativos A, B e C (descritos abaixo). A selectividade de BTK e o perfil de segurança cardiovascular favorável que são demonstrados pelos compostos da presente invenção representam melhorias inesperadas e surpreendentes sobre outros inibidores de BTK conhecidos.

[0009] Em particular, os compostos da presente invenção solucio nam os problemas de eficácia e segurança associados com outros inibidores de BTK conhecidos, mantendo um alto nível de potência e seletividade em inibição da atividade de BTK, sem ter quaisquer efeitos estatisticamente significativos sobre MAP.

[00010] Consequentemente, esta invenção compreende uma nova classe de compostos heteroaromáticos e métodos para o preparo e utilização dos mesmos. Estes compostos são úteis para o tratamento de distúrbios autoimunes e alérgicos, pelo fato de que eles exibem um excelente efeito inibidor sobre a BTK.

[00011] Em uma primeira modalidade genérica, é fornecido um composto da fórmula (I)

em que: Cy é selecionado de

cada R1 é independentemente selecionado de hidrogênio ou metila; R2 é L-Ar, em que Ar é fenila ou piridinila e cada é opcionalmente substituído por um ou mais de halogênio, halo C1-4 alquila, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, -CN, halo C1-4 alcóxi, ou cicloalquila; L é -(CH2)- ou -(CHCH3)-; Y é C6-C8 espirociclo contendo 1 átomo de nitrogênio de anel, e é substituído por um R3; R3 é selecionado de

cada R4 é independentemente selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; cada grupo definido acima para R1-R4 e Y pode ser onde possível parcialmente ou totalmente halogenado; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

[00012] Em outra modalidade, é fornecido um composto da fórmula (I) de acordo com a modalidade aqui acima e em que: Y é selecionado de

ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

[00013] Em outra modalidade, é fornecido um composto da fórmula (I) de acordo com as modalidades aqui acima e em que: Cy é

Y é selecionado de R3 é

em que cada R4 é independentemente selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

[00014] Em outra modalidade, é fornecido um composto da fórmula (I) de acordo com a modalidade aqui acima e em que:

Y é selecionado de R3 é

em que R4 é selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

[00015] Em outra modalidade, é fornecido um composto da fórmula (I) de acordo com a modalidade aqui acima e em que: Cy é

Y é selecionado de

R3 é em que R4 é selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

[00016] Em outra modalidade, é fornecido um composto da fórmula (I) de acordo com a modalidade aqui acima e em que: Cy é

Y é selecionado de

R3 é em que cada R4 é independentemente selecionado de hidro- gênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

[00017] Em outra modalidade, é fornecido um composto da fórmula (I) de acordo com a modalidade aqui acima e em que: Cy é

Y é selecionado de

R3 é em que cada R4 é independentemente selecionado de hidro- gênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

[00018] Em outra modalidade, é fornecido um composto da fórmula (I) de acordo com quaisquer das modalidades aqui acima e em que: cada R4 é independentemente selecionado de hidrogênio, metila, ou ciclopropila; ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

[00019] Em outra modalidade, é fornecido um composto da fórmula (I) de acordo com quaisquer das modalidades aqui acima e em que: R2 é L-Ar, em que Ar é fenila ou piridinila e cada é opcionalmente substituído por um ou mais de halogênio, halometila, metila, me- tóxi, -CN, halometóxi, ou ciclopropila; L é -(CH2)- ou -(CHCH3)- ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

[00020] Em outra modalidade, a invenção fornece compostos preparados na Tabela I que podem ser preparados tendo em vista os esquemas gerais, exemplos e métodos descritos aqui e aqueles conhecidos na técnica. Tabela I. Propriedades físicas e biológicas de representativos da pre- sente invenção

[00021] Em uma segunda modalidade genérica, é fornecida uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeutica- mente eficaz de um composto de acordo com a primeira modalidade ou qualquer de suas modalidades relacionadas ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo.

[00022] Em uma terceira modalidade genérica, é fornecido um método de tratar uma doença selecionada dentre artrite reumatoide, lúpus eritematoso sistêmico, nefrite lúpica, doença de Sjogren, vasculite, es-cleroderma, asma, rinite alérgica, eczema alérgico, linfoma de célula B, esclerose múltipla, reumatóide artrite juvenil, artrite idiopática juvenil, doença inflamatória intestinal, doença do enxerto versus hospedeiro, ar-trite psoriática, espondilite anquilosante e uveíte, compreendendo admi-nistrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a primeira modalidade ou qualquer de suas modalidades relacionadas ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00023] Em uma quarta modalidade genérica, é fornecido um processo para preparação de um composto de acordo com a primeira modalidade ou qualquer de suas modalidades relacionadas por: acoplamento de um composto de fórmula A

com um composto de fórmula E

para formar um composto de fórmula G

em que cada R1 é independentemente selecionado de hidro-gênio ou metila; X é um halogênio (isto é cloro, bromo, ou iodo); LG é um grupo de saída; e Y' é C6-C8 espirociclo contendo 1 nitrogênio de anel tamponado por um grupo de proteção; acoplamento do composto de fórmula (I-l) com um éster ou ácido borônico heterocíclico de fórmula C

na presença de uma base adequada e catalisador de paládio seguidos por hidrólise da nitrila para carboxamida para formar um com-posto de fórmula (II-1)

em que cada grupo R do composto de fórmula C é H, alquila, ou ambos ou grupos R são conectados para formar um anel; Cy no composto de fórmula (II-1) é selecionado de

R2 é L-Ar, em que Ar é fenila ou piridinila e cada é opcional-mente substituído por um ou mais de halogênio, halo C1-4 alquila, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, -CN, halo C1-4 alcóxi, ou cicloalquila; L é -(CH2)- ou -(CHCH3)-; e

[00024] Desproteção do nitrogênio tamponado do composto de fórmula (II-1) sob uma condição acídica e acoplamento do composto de fórmula desprotegido (II-1) com um composto selecionado de

para formar um composto de fórmula (I)

em que Y é C6-C8 espirociclo contendo 1 nitrogênio de anel ligado ou covalentemente ligado a R3, em que R3 é

cada R4 é independentemente selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[00025] A Figura anexa, que é incluída para fornecer também o en-tendimento da tecnologia objeto e é incorporada em, e constitui uma parte desta especificação, ilustra aspectos da tecnologia objeto, e jun-tamente com a invenção serve para explicar os princípios da tecnologia objeto.

[00026] Figura 1 mostra que os compostos da presente invenção, por exemplo, Exemplos 12 e 22, não eliciam nenhum efeito sobre pressão arterial média (MAP) in vivo em comparação aos compostos comparati-vos A-C (descritos na seção de exemplo).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO Definições

[00027] Os termos que não são especificamente definidos aqui têm os significados que são aparentes ao homem versado à luz de toda des-crição e o contexto como um todo.

[00028] Como usado aqui, as seguintes definições aplicam-se, a menos que estabelecido de outro modo:

[00029] O uso do prefixo Cx-y, em que x e y cada representa um número natural, indica que a estrutura de anel ou cadeia ou combinação de estrutura de anel e cadeia como um todo, especificada e mencionada em associação direta, pode consistir em um máximo de y e um mínimo de x átomos de carbono.

[00030] Alquila denota cadeias de hidrocarboneto saturadas, mono-valentes, que podem estar presentes em tanto a forma de cadeia linear (não ramificada) quanto ramificada. Se uma alquila for substituída, a substituição pode ocorrer independentemente uma da outra, por mono ou polissubstituição em cada caso, sobre todos os átomos de carbono transportando hidrogênio.

[00031] Por exemplo, o termo "C1-5 alquila" inclui, por exemplo, H3C-, H3C-CH2-, H3C-CH2-CH2-, H3C-CH(CH3)-, H3C-CH2-CH2-CH2-, H3C- CH2-CH(CH3)-, H3C-CH(CH3)-CH2-, H3C-C(CH3)2-, H3C-CH2-CH2-CH2- CH2-, H3C-CH2-CH2-CH(CH3)-, H3C-CH2-CH(CH3)-CH2-, H3C-CH(CH3)- CH2-CH2-, H3C-CH2-C(CH3)2-, H3C-C(CH3)2-CH2-, H3C-CH(CH3)- CH(CH3)- e H3C-CH2-CH(CH2CH3)-.

[00032] Outros exemplos de alquila são metila (Me; -CH3), etila (Et; - CH2CH3), 1-propila (n-propila; n-Pr; -CH2CH2CH3), 2-propila (i-Pr; iso- propila; -CH(CH3)2), 1-butila (n-butila; n-Bu; -CH2CH2CH2CH3), 2-metil- 1-propila (iso-butila; i-Bu; -CH2CH(CH3) 2), 2-butila (sec-butila; sec-Bu; -CH(CH3)CH2CH3), 2-metil-2-propila (terc-butila; t-Bu; -C(CH3)3), 1-pen- tila (n-pentila; -CH2CH2CH2CH2CH3), 2-pentila (-CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-pentila (-CH(CH2CH3)2), 3-metil-1-butila (iso-pentila; -CH2CH2CH(CH3)2), 2-metil-2-butila (-C(CH3)2CH2CH3), 3-metil-2-butila (-CH(CH3)CH(CH3)2), 2,2-dimetil-1-propila (neo-pentila; -CH2C(CH3)3), 2-metil-1-butila (-CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-hexila (n-hexila; -CH2CH2CH2CH2CH2CH3), 2-hexila (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3), 3-hexila (-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3)), 2-metil-2-pentila (-C(CH3)2CH2CH2CH3), 3-metil-2-pentila (-CH(CH3)CH- (CH3)CH2CH3), 4-metil-2-pentila (-CH(CH3)CH2CH(CH3)2), 3-metil-3- pentila (-C(CH3)(CH2CH3)2), 2-metil-3-pentila (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2), 2,3-dimetil-2-butila (-C(CH3)2CH(CH3)2), 3,3-dimetil-2-butila (-CH(CH3)C(CH3)3), 2,3-dimetil-1-butila (-CH2CH(CH3)CH(CH3)CH3), 2,2-dimetil-1-butila (-CH2C(CH3)2CH2CH3), 3,3-dimetil-1-butila (- CH2CH2C(CH3)3), 2-metil-1-pentila (-CH2CH(CH3)CH2CH2CH3), 3-metil- 1-pentila (-CH2CH2CH(CH3)CH2CH3), 1-heptila (n-heptila), 2-metil-1-he- xila, 3-metil-1-hexila, 2,2-dimetil-1-pentila, 2,3-dimetil-1-pentila, 2,4-di- metil-1-pentila, 3,3-dimetil-1-pentila, 2,2,3-trimetil-1-butila, 3-etil-1-pen- tila, 1-octila (n-octila), 1-nonila (n-nonila); 1-decila (n-decila), etc.

[00033] Pelos termos propila, butila, pentila, hexila, heptila, octila, nonila, decila, etc. sem qualquer outra definição são destinados grupos hidrocarboneto saturados com o correspondente número de átomos de carbono, em que todas as formas isoméricas são incluídas.

[00034] A definição acima para alquila também se aplica se a alquila for uma parte de outro grupo (combinado) grupo, tal como, por exemplo, Cx-y alquilamino ou Cx-y alcóxi.

[00035] Ao contrário de alquila, alquenila consiste em pelo menos dois átomos de carbono, em que pelo menos dois átomos de carbono adjacentes são unidos por uma ligação dupla C-C e um átomo de car-bono pode somente ser parte de uma ligação dupla C-C. Se em uma alquila como anteriormente definido tendo pelo menos dois átomos de carbono, dois átomos de hidrogênio sobre átomos de carbono adjacentes são formalmente removidos e as valências livres são saturadas para formar uma segunda ligação, a correspondente alquenila é formada.

[00036] Alquenila may opcionalmente estar presente na orientação cis ou trans ou E ou Z com relação à(s) ligação(ões) dupla(s).

[00037] Ao contrário de alquila, alquinila consiste em pelo menos dois átomos de carbono, em que pelo menos dois átomos de carbono adjacentes são unidos por uma ligação tripla C-C. Se em uma alquila como anteriormente definido tendo pelo menos dois átomos de carbono, dois átomos de hidrogênio em cada caso em átomos de carbono adjacentes são formalmente removidos e as valências livres são satu-radas para formar duas outras ligações, a correspondente alquinila é formada.

[00038] Haloalquila (haloalquenila, haloalquinila) é derivada da ante-riormente definida alquila (alquenila, alquinila) substituindo um ou mais átomos de hidrogênio da cadeia de hidrocarboneto independentemente uma da outra por átomos de halogênio, que podem ser idênticos ou di-ferentes. Se uma haloalquila (haloalquenila, haloalquinila) deve ser tam-bém substituída, as substituições podem ocorrer independentemente uma da outra, na forma de mono ou polissubstituições em cada caso, sobre todos os átomos de carbono transportando hidrogênio.

[00039] Exemplos de haloalquila (haloalquenila, haloalquinila) são -CF3, -CHF2, -CH2F, -CF2CF3, -CHFCF3, -CH2CF3, -CF2CH3, -CHFCH3, -CF2CF2CF3, -CF2CH2CH3, -CF=CF2, -CC1=CH2, -CBr=CH2, -C=C-CF3, -CHFCH2CH3, -CHFCH2CF3 etc.

[00040] Halogênio refere-se a átomos de flúor, cloro, bromo e/ou iodo.

[00041] Cicloalquila é preparada dos subgrupos aneis de hidrocarbo- neto monocíclicos, anéis de hidrocarboneto bicíclicos e aneis hidrocar- boneto espiro. Os sistemas são saturados. Nos anéis de hidrocarboneto bicíclicos, dois aneis são unidos de modo que eles tenham pelo menos dois átomos de carbono juntos.

[00042] Se a cicloalquila deve ser substituída, as substituições podem ocorrer independentemente uma da outra, na forma de mono ou polissubstituições em cada caso, sobre todos os átomos de carbono transportando hidrogênio. Cicloalquila em si pode ser ligada como um substituinte à molécula por meio de cada posição adequada do sistema de anel.

[00043] Exemplos de cicloalquila são ciclopropila, ciclobutila, ciclo- pentila, ciclo-hexila, ciclo-heptila.

[00044] Correspondentes grupos são um exemplo:

[00045] Espirociclo é um anel de hidrocarboneto espiro, átomo de carbono (espiroátomo) pertence a dois anéis juntos.

[00046] Arila denota carbociclos mono, bi ou tricíclicos com pelo menos um carbociclo aromático. Preferivelmente, ela denota um grupo mo- nocíclico com seis átomos de carbono (fenila) ou um grupo bicíclico com nove ou dez átomos de carbono (dois aneis de seis membros ou um anel de seis membros com um anel de cinco membros), em que o segundo anel pode também ser aromático ou, contudo, pode também ser saturado ou parcialmente saturado.

[00047] Se uma arila deve ser substituída, as substituições podem ocorrer independentemente uma da outra, na forma de mono ou polis- substituições em cada caso, sobre todos os átomos de carbono trans-portando hidrogênio. Arila em si pode ser ligada como um substituinte à molécula por meio de cada posição adequada do sistema de anel.

[00048] Exemplos de arila são fenila e naftila.

[00049] A definição acima de arila também se aplica se a arila for parte de outro grupo (combinado) como, por exemplo, em arilamino, ari- lóxi ou arilalquila.

[00050] Heterociclila denota sistemas de anel, que são derivados da cicloalquila ou espirociclo anteriormente definidos substituindo um ou mais dos grupos -CH2- independentemente um do outro nos anéis hi- drocarboneto pelos grupos -O-, -S- ou -NH-, em que um total de não mais do que cinco heteroátomos podem estar presentes, pelo menos um átomo de carbono pode estar presente entre dois átomos de oxigênio e entre dois átomos de enxofre ou entre um átomo de oxigênio e um de enxofre e o anel como um todo deve ter estabilidade química. Heteroátomos podem opcionalmente estar presentes em todos os pos-síveis estágios de oxidação (enxofre ^ sulfóxido -SO-, sulfona -SO2-; nitrogênio ^ N-óxido).

[00051] Se uma heterociclila for substituída, as substituições podem ocorrer independentemente uma da outra, na forma de mono ou polis- substituições em cada caso, sobre todos os átomos de nitrogênio e/ou carbono transportando hidrogênio. Heterociclila em si pode ser ligada como um substituinte à molécula por meio de cada posição adequada do sistema de anel.

[00052] Exemplos de heterociclila são tetra-hidrofuranila, tetra-hidro- piranila, piperidinila, piperazinila, pirrolidinila, morfolinila, ou os seguintes espirociclos heterocíclicos

[00053] Heteroarila denota anéis heteroaromáticos monocíclicos ou anéis policíclicos com pelo menos um anel heteroaromático, que comparado com a correspondente arila ou cicloalquila, em vez de um ou mais átomos de carbono, um ou mais heteroátomos idênticos ou diferentes, selecionados independentemente um do outro dentre nitrogênio, enxofre e oxigênio, em que o grupo resultante deve ser quimicamente estável. O pré-requisito para a presença de heteroarila é um heteroá- tomo e um sistema heteroaromático.

[00054] Se uma heteroarila deve ser substituída, as substituições podem ocorrer independentemente uma da outra, na forma de mono ou polissubstituições em cada caso, sobre todos os átomos de nitrogênio e/ou carbono transportando hidrogênio. Heteroarila em si pode ser ligada como um substituinte à molécula por meio de cada posição adequada do sistema de anel, tanto carbono quanto nitrogênio.

[00055] Exemplos de heteroarila são piridinila, piridazinila, pirimi- dinila, pirazinila, benzoxazolila, indolila, isoindolila, benzofuranila, ben- zimidazolila, benzotiazolila, e similares.

[00056] Heteroátomos podem opcionalmente estar presentes em todos os possíveis estágios de oxidação (enxofre ^ sulfóxido -SO-, sulfona -SO2-; nitrogênio ^ N-óxido).

[00057] Carbociclos incluem anéis hidrocarboneto contendo de três a doze átomos de carbono. Estes carbociclos podem ser sistemas de anel aromático ou não aromático. Os sistemas de anel não aromáticos podem ser mono- ou poli-insaturados. Carbociclos preferidos incluem, porém não estão limitados a ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo- pentenila, ciclo-hexila, ciclo-hexenila, ciclo-heptanila, ciclo-heptenila, fe- nila, indanila, indenila, benzociclobutanila, di-hidronaftila, tetra-hidronaf- tila, naftila, deca-hidronaftila, benzociclo-heptanila e benzociclo-hepte- nila.

[00058] Todos os sistemas cíclicos e acíclicos definidos nesta seção acima mencionada dever ser entendidos ser opcionalmente parcialmente ou totalmente halogenado onde possível, e a menos que de outro modo indicado.

[00059] Estereoquímica/solvates/hidratos: A menos que especificamente indicado, em toda a especificação e reivindicações anexas, uma dada fórmula química ou nome deve abranger tautômeros e todos os seus isômeros estéreos, óticos e geométricos (por exemplo, enantiôme- ros, diastereômeros, isômeros E/Z, etc.) e racematos, bem como misturas em diferentes proporções dos enantiômeros separados, mixturas de diastereômeros, ou misturas de quaisquer das formas anteriores, onde existem tais isômeros e enantiômeros, bem como sais, incluindo sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos. Os compostos e sais da in-venção podem existir em formas não solvatadas, bem como solvatadas com solventes farmaceuticamente aceitáveis, tal como água, etanol e similares. Em geral, as formas solvatadas, tais como hidratos são con-siderados equivalentes às formas não solvatadas para os propósitos da invenção.

[00060] Compostos da invenção também incluem suas formas iso- topicamente rotuladas. Uma forma isotopicamente rotulada de um agente ativo de uma combinação da presente invenção é idêntica ao referido agente ativo, porém para o fato de que um ou mais átomos do referido agente ativo foram substituídos por um átomo ou átomos tendo uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa do referido átomo que é geralmente encontrado na natureza. Exemplos de isotopes que são facilmente comercialmente disponíveis, e que podem ser incorporados em um agente ativo de uma combinação da presente invenção de acordo com procedimentos bem estabelecidos, incluem isótopos de hidrogênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, fósforo, flúor e cloro, por exemplo, 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 18O, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F, e 36Cl, respectivamente. Um agente ativo de uma combinação da presente invenção, um pró-fár- maco do mesmo, ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos quais contém um ou mais dos isótopos acima mencionados e/ou outros isótopos de outros átomos é contemplado incluir-se no escopo da presente invenção.

[00061] Sais: A frase "farmaceuticamente aceitável" é empregada aqui para se referir a esses compostos, materiais, composições, e/ou formas de dosagem que se incluem no escopo de diagnóstico médico seguro, adequados para uso em contato com os tecidos de seres humanos e animais sem excessiva toxicidade, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, e comensurados com uma relação risco/benefício razoável.

[00062] Como usado aqui "sais farmaceuticamente aceitáveis" referem-se a derivados dos compostos descritos, nos quais o composto origem é modificado preparando sais de ácido ou base do mesmo. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, porém não estão limitados a, sais de ácido mineral ou orgânico de resíduos básicos, tais como aminas; sais alcalinos ou orgânicos de resíduos acídicos, tais como ácidos carboxílicos; e similares.

[00063] Por exemplo, tais sais incluem acetatos, ascorbatos, benze- nossulfonatos, benzoatos, besilatos, bicarbonatos, bitartaratos, brome- tos/bromidratos, Ca-edetatos/edetatos, cansilatos, carbonatos, clore- tos/cloridratos, citratos, edisilatos, dissulfonatos de etano, estolatos esi- latos, fumaratos, gluceptatos, gluconatos, glutamatos, glicolatos, glicoli- larsnilatos, hexilresorcinatos, hidrabaminas, hidroximaleatos, hidro- xinaftoatos, iodetos, isotionatos, lactatos, lactobionatos, malatos, male- atos, mandelatos, metanossulfonatos, mesilatos, metilbrometos, meti- lnitratos, metilsulfatos, mucatos, napsilatos, nitratos, oxalatos, pamoa- tos, pantotenatos, acetatos de fenila, fosfatos/difosfatos, poligalacturo- natos, propionatos, salicilatos, estearatos, subacetatos, sucinatos, sul-famidas, sulfatos, tanatos, tartaratos, teoclatos, toluenossulfonatos, tri- etiodetos, amônio, benzatinas, cloroprocaínas, colinas, dietanolaminas, etilenodiaminas, megluminas e procaínas.

[00064] Outros sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com cátions de metais como alumínio, cálcio, lítio, magnésio, potássio, sódio, zinco e similares (veja também Pharmaceutical Salts, Birge, S.M. et al., J. Pharm. Sci., (1977), 66, 1-19).

[00065] Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto origem que contém uma porção básica ou acídica, por métodos químicos convencionais. Geral-mente, tais sais podem ser preparados reagindo a forma de base ou ácido livre destes compostos, com uma quantidade suficiente da base ou ácido apropriado em água ou em um diluente orgânico como éter, acetato de etila, etanol, isopropanol, ou acetonitrila, ou uma mistura dos mesmos.

[00066] Sais de outros ácidos que não aqueles mencionados acima, que, por exemplo, são úteis para purificar ou isolar os compostos da presente invenção (por exemplo, trifluoroacetatos), também compreendem uma parte da invenção.

[00067] Algumas notações abreviadas e suas correspondências de estrutura são listadas abaixo:

[00068] Em uma representação, tal como, por exemplo:

[00069] A linha sólida significa que o sistema de anel pode ser ligado à molécula por meio do átomo de carbono 1, 2 ou 3, e é desse modo equivalente à seguinte representação:

[00070] Por uma quantidade terapeuticamente eficaz, para os propósitos desta invenção, entende-se uma quantidade de substância que é capaz de evitar sintomas de enfermidade ou aliviar estes sintomas, ou que prolongam a sobrevivência de um paciente tratado. Lista de abreviações

[00071] Aspectos e vantagens da presente invenção tornar-se-ão evidentes a partir dos seguintes exemplos detalhados, que ilustram os fundamentos da invenção a título de exemplo, sem restringir seu escopo:

Preparação dos compostos de acordo com a invenção Métodos Sintéticos Gerais

[00072] Condições de reação ideais e tempos de reação podem variar dependendo dos particulares reagentes usados. A menos que de outro modo especificado, solventes, temperaturas, pressões e outras condições de reação podem ser prontamente selecionadas por alguém versado na técnica. Procedimentos específicos são fornecidos na seção de Exemplos Sintéticos. Intermediários e produtos podem ser purificados por cromatografia de sílica gel, recristalização e/ou HPLC de fase reversa (RHPLC). Os enantiômeros discretos podem ser obtidos por re-solução de produtos racêmicos usando HPLC quiral. Os métodos de purificação de RHPLC usados em qualquer lugar de 0 a 100% de ace- tonitrila em água contendo 0,1% de ácido fórmico, 0,1% de TFA, ou bi-carbonato de amônio a 2,5 mM e usada uma das seguintes colunas: coluna Waters Sunfire OBD C18 5 μm 30 x 150 mm coluna Waters XBridge OBD C18 5 μm 30 x 150 mm coluna Waters ODB C8 5 μm 19 x 150 mm coluna Waters Atlantis ODB C18 5 μm 19 x 50 mm coluna Waters Atlantis T3 OBD 5 μm 30 x 100 mm coluna Phenomenex Gemini Axia C18 5 μm 30 x 100 mm Métodos de HPLC: Tabela 1: Método de HPLC analítico A

Tabela 2: Método de HPLC analítico B

Tabela 3: Método de HPLC ana ítico C

[00073] Os compostos de acordo com a invenção são preparados pelos métodos de síntese descritos a seguir em que os substituintes das fórmulas gerais têm os significados fornecidos anteriormente. Estes mé-todos são destinados como uma ilustração da invenção sem restringir sua matéria objeto e o escopo dos compostos reivindicados a estes exemplos. Onde a preparação de compostos de partida não é descrita, eles são comercialmente obtidos ou podem ser preparados analogamente por conhecidos compostos ou métodos descritos aqui. Substâncias descritas na literatura são preparadas de acordo com os métodos de síntese publicados.

[00074] Formações de ligação de amida podem ser realizadas por condições de acoplamento padrão bem conhecidas na técnica (por exemplo, Bodanszky, M. The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, 1984, que é aqui incorporada por referência em sua totalidade), tal como, reagindo um ácido carboxílico e uma amina na presença de reagentes de acoplamento, tal como, hexafluorofosfato de O-(7-azaben- zotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametil-urônio (HATU). Uso de grupos de pro-teção (isto é, proteção ou desproteção de um grupo funcional) pode ser realizado por condições padrão bem conhecidas na técnica (por exemplo, Greene, T. W.; Wuts, P. G. M. Protective Groups in Organic Synthesis, 3a Ed. Nova Iorque, Wiley, 1999, que é aqui incorporado por referência em sua totalidade).

[00075] Compostos de fórmula I podem ser preparados como mostrado no esquema I ou II abaixo. Esquema I

[00076] No Esquema I, um pirazol de fórmula A, em que X pode ser bromo, cloro, ou iodo, é reagido com um ácido borônico adequado de fórmula B (R = H), um éster borônico adequado de fórmula B (R = me- tila), ou um éster borônico adequado de fórmula C sob uma condição de acoplamento cruzado catalisada por paládio, tal como, a presença de uma base adequada (por exemplo, CS2CO3 aquoso, NaH), um catalisador adequado [por exemplo, tetracis(trifenilfosfina)paládio(0)], em um solvente adequado (por exemplo, DME) e em uma temperatura adequada para fornecer um composto de fórmula D. O heterociclo D é reagido com um composto de fórmula E, em que LG é um grupo de saída adequado (por exemplo, O-Ts), em um solvente adequado (por exemplo, DMA), na presença de uma base adequada (por exemplo, NaH) e em uma temperatura adequada para fornecer um composto de fórmula F. A nitrila F é hidrolisada para a correspondente carboxamida sob uma condição adequada, tal como, em um solvente adequado ou uma mistura de solventes (por exemplo, uma mistura de água e etanol), na presença de um reagente adequado, tal como, (hidrido(ácido dimetilfosfi- noso-KP) [hidrogeno bis(dimetilfosfinito-KP)]platina(II) e em uma temperatura adequada. A subsequente desproteção e acoplamento de amida usando condições bem conhecidas na técnica, tal como, aquelas descritas acima fornecem um composto de fórmula (I).

[00077] Adicionalmente, os compostos de fórmula I podem ser pre-parados de acordo com Esquema II. Esquema II

[00078] De acordo com Esquema II, um pirazol de fórmula A, em que X pode ser bromo, cloro, ou iodo, pode ser reagido com um composto de fórmula E, em que LG é um grupo de saída (por exemplo, O-Ts), em um solvente adequado (por exemplo, acetona), na presença de tal base adequada (por exemplo, CS2CO3, NaH) e em uma temperatura adequada para fornecer um heterociclo de fórmula G. O amino-pirazol G pode ser reagido com um ácido borônico adequado de fórmula B (R = H), um éster borônico adequado de fórmula B (R = metila) ou um éster borônico adequado de fórmula C sob uma condição de acoplamento cruzado catalisada por paládio, tal como, a presença de uma base adequada (por exemplo, K2CO3 aquoso), um catalisador adequado [por exemplo, tetracis(trifenilfosfina)paládio(0)], em um solvente adequado (por exemplo, DME) e em uma temperatura adequada para gerar um composto de fórmula F. A nitrila F podem ser convertidas em um composto de fórmula (I) de acordo com o método descrito no esquema I. EXEMPLOS SINTÉTICOS: Método A Síntese de Intermediário I-1

[00079] Cs2CO3 é adicionado a uma solução do R-1 (22,0 g, 118 mmols) e R-2 (47,6 g, 129 mmols) em acetona (250 mL). A mistura é aquecida a 80°C durante 2 dias. A mistura é diluída com água (200 mL) e extraída com CH2CI2 (100 mL x 2). Os orgânicos são em seguida co-letados e concentrados para fornecer 1-1 (25 g), m/z = 382,1 [M + H]. Método B Síntese de Intermediário 1-2

[00080] Hidreto de sódio (14,3 g; 372,2 mmols) é adicionado a uma solução do R-1 (58 g; 310,2 mmols) em DMA (460 mL). Após 30 min, R- 3 (130,2 g; 341,2 mmols) é adicionado e aquecido a 80°C durante 18 horas. A reação é resfriada para temperatura ambiente e diluída com MeOH (250 mL) e água (35 mL). A reação é em seguida agitada vigo-rosamente durante a noite. A mistura heterogênea é filtrada a vácuo para produzir, após secagem, 96 g de um sólido como uma mistura de 1:1 de isômeros de pirazol. O sólido é combinado com 240 mL de CH2CI2 e agitado vigorosamente durante a noite. A mistura heterogênea é filtrada a vácuo e produzidos 40 g de um sólido esbranquiçado. O sólido é combinado com 58 mL de 2 e agitado vigorosamente. Após duas horas, a solução heterogênea é sonicada durante 5 minutos e em se-guida resfriada para 5°C e agitada durante uma hora. A solução hetero-gênea é filtrada a vácuo e o sólido é lavado com CH2CI2 frio (2x), cole-tado e secado para produzir 1-2 (27,7 g). Os filtrados combinados são diluídos com 180 mL de i-PrOH e agitados vigorosamente durante 3 ho-ras. A solução heterogênea é filtrada e o sólido é lavado com uma pe-quena quantidade de i-PrOH (2x). O filtrado é concentrado a vácuo para fornecer um resíduo que é combinado com 32 mL de CH2CI2 e sonicado durante 5 minutos. Após mais uma hora de agitação, a solução é resfri-ada para 0°C e agitada uma hora. A solução heterogênea é filtrada e os sólidos coletados e secados para produzir quantidades adicionais de I2 (5,6 g). Quantidade total de I-2 isolado é 33,3 g, m/z 394,0/396,0 [M + H]. Método C Síntese de intermediário I-3

[00081] I-I (1,1 g, 2,9 mmols), R-4 (1,71 g, 3,2 mmols), carbonato de potássio aquoso a 2 M (2,9 ml, 5,8 mmols), tetracis(trifenilfosfina)palá- dio(0) (333 mg, 0,3 mmol) e DME (6 mL) são combinados e selados em um tubo de micro-ondas e aquecida para 120°C termicamente durante a noite. A mistura é filtrada, em seguida diluída com água (100 mL) e extraída com EtOAc (4 x 200 mL). As camadas de EtOAc combinadas são secadas sobre sulfato de sódio e concentrados. O resíduo bruto purificado por cromatografia flash (SiO2, 0 a 60% de EtOAc/Heptano) para produzir 1,2 g de 1-3, m/z = 500,5 [M + H].

[00082] O seguinte intermediário é preparado de modo similar: Estrutura Intermediário m/z

Método D Síntese de Intermediário I-5

[00083] R-1 (2,0 g, 10,7 mmols), R-4 (6,4 g, 60%, 11,8 mmols), Cs2CO3 aquoso a 2 M (10,7 ml; 21 mmols), tetracis(trifenilfosfina)palá- dio(0) (1,2 g; 1,1 mmol), e DME (6 mL) são combinados em um tubo de micro-ondas e aquecidos para 135°C em um micro-ondas durante duas horas. A mistura é filtrada, em seguida diluída com água e extraída com EtOAc. Os extratos combinados são secados sobre sulfato de sódio e concentrados para fornecer um resíduo bruto que é purificado por cro- matografia flash (0 a 100% de EtOAc em heptano) para produzir 3,2 g de I-5, m/z = 382,1 [M + H].

[00084] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método E Síntese de Intermediário I-8

[00085] Hidreto de sódio (250 mg, 6,5 mmols) é adicionado a uma solução de I-5 (1,64 g, 5,4 mmols) em DMA (10 mL). Após 5 min, R-3 (2,26 g, 5,9 mmols) é adicionado e aquecido a 70°C durante 18 horas. A mistura é diluída com água (20 mL) e extraída com EtOAc (4 x 10 mL). Os extratos de EtOAc combinados são secados sobre sulfato de sódio, filtrados e em seguida concentrados a vácuo. O resíduo bruto é purifi-cado por cromatografia flash (SiO2, 0 a 50% de EtOAc em heptano) para fornecer 1,1 g de I-8, m/z = 514,5 [M + H].

[00086] O seguinte intermediário é preparado de modo similar:

Método F Síntese de Intermediário I-10

[00087] I-3 (845 mg, 1,7 mmol) é dissolvido em THF (15 mL). Uma solução a 1 M de R-5 em THF (5,1 ml, 5,1 mmols) é adicionada à solu-ção. A mistura é agitada a 70°C durante a noite. A solução de reação é dividida entre NH4CI saturado (solução aquosa) e EtOAc. As camadas são separadas e a camada orgânica é concentrada a vácuo. Uma pe-quena quantidade de CH2CI2 é adicionada ao resíduo e o sólido resultante é filtrado para produzir 900 mg de I-10, m/z = 370,3 [M + H].

[00088] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método G Síntese de Intermediário I-13

[00089] Carbonato de potássio (270 mg, 1,94 mmol) é adicionado a uma solução de I-10 (143 mg, 0,39 mmol) em DMA (5 mL). Após 5 min, R-6 (110 mg, 0,47 mmol) é adicionado e a solução é aquecida para 70°C durante 18 horas. A solução crua é carregada diretamente sobre uma coluna de sílica e purificada (Gradiente: 0 - 60% de EtOAc em heptano) para produzir 71 mg de I-13, m/z = 528,4 [M + H].

[00090] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método H Síntese de Intermediário I-21

[00091] A uma solução agitada de R-7 (19,2 g, 99,1 mmols) em DMA (54 mL) é adicionado carbonato de potássio (27,4 g, 198,1 mmols). R-8 (23,0 g, 109 mmols) é em seguida adicionado lentamente. A reação é agitada em temperatura ambiente durante 6 horas. A reação é em seguida interrompida bruscamente com água e extraída com EtOAc. O EtOAc é concentrado a vácuo e o resíduo é purificado por cromatografia flash (SiO2, 10% de EtOAc em hexanos) para produzir 18 g de I-21, m/z = 324,4 [M + H].

[00092] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método I Síntese de Intermediário I-31

[00093] Em um frasco de 1L são colocados R-7 (25 g, 128,8 mmols) e carbonato de potássio (35,6 g, 257,7 mmols) em 100 ml de DMF. A esta mistura é adicionado R-9 (33,9g, 141,7 mmols) e a reação deixada agitar durante a noite. A reação é em seguida filtrada e concentrada. O resíduo é dissolvido em CH2CI2 e filtrado através de celita. O filtrado é concentrado para fornecer 45,4 g de I-31, m/z = 353,4 [M + H]. Interme-diário I-31 é usado em etapas subsequentes sem purificação adicional.

[00094] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método J Síntese de Intermediário I-52

[00095] Em um frasco de 1L são colocados R-7 (75 g, 386,5 mmols) e K2CO3 (106,7 g, 773 mmols) em 100 mL de DMF. A isto é adicionado R-10 (101,6 g, 425,2 mmols) e a reação deixada agitar durante a noite. A reação é filtrada e concentrada. O resíduo é dissolvido em CH2CI2 e filtrado através de celita. O filtrado é concentrado para fornecer 136 g de I-52, m/z = 353,0 [M + H]. Intermediário I-52 é usado em etapas sub-sequentes sem purificação adicional. Método K Síntese de Mistura de Intermediários I-53

[00096] A uma mistura de R-7 (5,0 g, 25,8 mmols), acetonitrila (29 mL) e carbonato de potássio (7,1 g, 51,5 mmols) é adicionado R-11 (3,9 mL, 25,6 mmols). A mistura é agitada durante 18 horas sob Ar. A reação é em seguida concentrada e o resíduo é dividido entre EtOAc e água. As camadas são separadas e a camada aquosa é extraída com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas são lavadas com solução salina, secadas sobre MgSO4, filtradas e concentradas para produzir 8,75 g de I-53, m/z = 271,0 [M + H]. Mistura de Intermediário I-53 é usada em etapas subsequentes sem purificação adicional.

[00097] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método L Síntese de Intermediário I-60

[00098] I-2 (1,1 g, 2,8 mmols), I-53 (1,12g, 4,16 mmols), carbonato de césio (1,81 g, 5,5 mmols) são combinados em um tubo de microondas e o vaso é inundado com Ar. DME (6,6 mL) e Pd(PPh3)4 (320 mg, 0,28 mmol) são adicionados e o vaso é desgaseificado e termica- mente aquecido para 125°C durante a noite. A mistura é filtrada através de celita e a celita é lavada com EtOAc e água. As camadas são separadas e o aquoso é extraído com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas são lavadas com solução salina, secadas sobre MgSO4, filtradas e concentradas. O resíduo é purificado por cromatografia flash (SiO2, 10 a 80% de EtOAc em heptano) para fornecer 407 mg de I-60, m/z = 542,2 [M + H]. Método M Síntese de Intermediário I-61

[00099] I-2 (1,0 g, 1,31 mmol), I-30 (790 mg, 2,8 mmols), carbonato de césio (1,6 g, 5,1 mmols), Pd(PPh3)4 (0,29 g, 0,25 mmol) e DME (6 mL) são combinados em um tubo de micro-ondas e aquecidos termica- mente para 125°C durante a noite. A mistura é filtrada, em seguida dilu-ída com água (30 mL) e extraída com EtOAc (4 x 30 mL). Os extratos orgânicos combinados são secados sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados para fornecer o resíduo cru. O material bruto é purificado por meio de cromatografia flash (SiO2, 0 a 100% de EtOAc em heptano) para produzir 1,1 g de I-61, m/z = 474,3 [M + H].

[000100] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método N Síntese de Intermediário I-87

[000101] I-2 (0,7 g, 1,8 mmol), I-39 (1,5 g, 3,5 mmols), carbonato de césio (1,15 g, 3,5 mmols), Pd(PPh3)4 (0,2 g, 0,21 mmol), são combina-dos em um tubo de micro-ondas. Dioxano desgaseificado (8 mL) e água (2 mL) são adicionados. O vaso de reação é selado sob argônio e aque-cido em um micro-ondas durante 60 min a 125°C. A reação é transferida para a funil separatório, diluída com EtOAc e enxaguada com água e solução salina. Os orgânicos são secados, filtrados, e evaporados a vá-cuo. O resíduo é em seguida purificado por meio de cromatografia flash (SiO2, 0 a 55% de EtOAc/heptano) para produzir 710 mg de I-87, m/z = 622,2 [M + H].

[000102] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método O Síntese de Intermediário I-95

[000103] I-2 (310 mg, 0,78 mmol), I-21 (380 mg, 1,17 mmol), triciclo- hexilfosfina (175 mg, 0,63 mmol) e fosfato de potássio (500 mg, 2,3 mmols) são combinados em frasconete de micro-ondas de 20 mL em 8 ml de dioxano e 2 mL de água. Ar é borbulhado através da solução du-rante 10 minutos. Tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0) é em seguida adicionado e Ar é borbulhado através da reação durante mais 5 minutos. A reação é selada e aquecida em um micro-ondas durante 60 minutos a 120°C. Após resfriar para temperatura ambiente, a solução de reação é diluída com água e extraída com EtOAc (2x).

[000104] Os extratos orgânicos combinados são secados sobre MgSO4, filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo bruto é purificado por cromatografia flash (SiO2, 10 a 90% de EtOAc em heptano) e produz 340 mg de I-95, m/z = 514,3 [M + H].

[000105] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método P Síntese de Intermediário I-101

[000106] Em um frasco de 1L são colocados I-2 (32,0 g, 80,8 mmols), I-31 (56,9 g, 161,5 mmols), carbonato de césio (52,6 g, 161,5 mmols) e Pd(PPh3)4 em 225 ml de DMA desgaseificado por Ar e 75 ml de água. Isto é equipado com um condensador sob argônio e em seguida aque-cido para 140°C sobre um bloqueio de reação pré-aquecido. Após 45 min, a reação é resfriada para temperatura ambiente e em seguida fil-trada. Os sólidos são enxaguados com mínimo de EtOAc. Os filtrados combinados são transferidos para um funil separatório de 2 L, diluídos com aproximadamente 750 mL de água e extraídos com EtOAc (750 mL). O EtOAc é em seguida enxaguado com mais 750 mL de água e em seguida 750 mL de solução salina. Os orgânicos são em seguida combinados, secados sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados a vácuo. Cromatografia flash (SiO2, 0 a 75% de EtOAc/heptano) produz 25 g de I-101. As frações impuras são isoladas e novamente purificadas por cromatografia flash (SiO2, 0 a 75% de EtOAc/heptano) para produzir 7,5 g de I-101. Total de 33 g de I-101 (75%), m/z = 560,4 [M + H].

[000107] O seguinte intermediário é preparado de modo similar:

Método Q Síntese de Intermediário I-103

[000108] Hidrido(ácido dimetilfosfinoso-KP)[hidrogeno bis(dimetilfosfi- nito-KP)]platina(II) (79 mg, 0,19 mmol) é adicionado a I-95 (1,0 g, 1,9 mmol) em água (3,0 mL) e etanol (15 mL). A reação heterogênea é aquecida para 80°C. Após 18 horas, a reação é resfriada para tempe-ratura ambiente. A reação é concentrada a vácuo. O resíduo é combi-nado com EtOAc e filtrado. O filtrado é concentrado a vácuo para pro-duzir 500 mg de I-103, m/z = 532,3 [M + H]. O produto é usado em etapas subsequentes sem purificação adicional.

[000109] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método R Síntese de Intermediário I-130

[000110] I-102 (61,5 g; 113,6 mmols) é dissolvido em etanol (200 mL) e água (40 mL). Hidrido(ácido dimetilfosfinoso-KP)[hidrogeno bis(dime- tilfosfinito-KP)]platina(II) (2,91 g; 6,8 mmols) é adicionado e a reação deixada agitar a 80°C durante 16 horas. A solução de reação é diluída com água, extraída com 5% de MeOH/CH2Cl2 e a camada orgânica é coletada, secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada a vácuo. O resí-duo é purificado por cromatografia flash (SiO2, 0 a 100% de EtOAc em Hep, em seguida 0 a 20% de MeOH em CH2Cl2) para produzir 57,2 g de I-130, m/z = 560,3 [M + H]. Método S Síntese de Intermediário I-131

[000111] Hidrido(ácido dimetilfosfinoso-KP)[hidrogeno bis(dimetilfosfi- nito-KP)]platina(II) (2,91 g; 6,8 mmols) (863 mg 2,0 mmols) é adicionado à solução de I-101 (11,4 g, 20,2 mmols) em água (30 mL) e etanol (100 mL) em um vaso selável. O vaso é selado e aquecido para 95°C durante a noite. A reação é concentrada a vácuo, diluída com EtOAc e filtrada através de celita. O filtrado é concentrado a vácuo para produzir 12 g de I-131, m/z = 560,4 [M + H]. O material (I-131) é usado sem purificação adicional. Método T Síntese de Intermediário I-132

[000112] I-109 (1,04 g, 2,5 mmols), I-41 (1,5 g, 5,0 mmols), carbonato de césio (1,64 g, 5,0 mmols), Pd(PPh3)4 (0,29 g, 0,25 mmol) são com-binados em um tubo de micro-ondas. Dioxano desgaseificado (8 mL) e água (2 mL) são adicionados. O vaso de reação é selado sob argônio e aquecido em um micro-ondas durante 60 min a 125°C. A reação é trans-ferida para um funil separatório, diluída com EtOAc e enxaguada com água e solução salina. Os orgânicos são secados, filtrados, e concen-trados a vácuo. O resíduo é em seguida purificado por meio de croma- tografia flash (SiO2, 0 a 20% de MeOH em DCM) para produzir 1000 mg de I-132, m/z = 517,4 [M + H]. Método U Síntese de Intermediário I-133

[000113] I-95 (1,34 g, 2,6 mmols) é aquecido para 140°C em trimeti- lortoformiato

[000114] (R-12) (17,4 mL). Após 18 horas, o excesso de trimetilorto- formiato é removido a vácuo. O resíduo amarelo é diluído com etanol absoluto (15 mL), boro-hidreto de sódio (R-13) (118 mg, 3,1 mmols) é adicionado e a mistura agitada nisso. Após 3 horas, o solvente é remo-vido a vácuo. O resíduo é diluído com água, extraído com EtOAc, secado sobre MgSO4, filtrado e concentrado a vácuo. O resíduo bruto é purificado por cromatografia flash (SiO2, 10 a 80% de EtOAc em hep-tano) para produzir 920 mg de I-133, m/z = 528,3 [M + H].

[000115] Os seguintes intermediários são preparados de modo similar:

Método V Síntese de Intermediário I-136

[000116] Hidrido(ácido dimetilfosfinoso-KP)[hidrogeno bis(dimetilfosfi- nito-KP)]platina(II) (70 mg, 0,16 mmol) é adicionado a I-133 (890 mg, 1,7 mmol) em água (0,8 mL) e etanol (2,4 mL). A reação heterogênea é aquecida para 80°C. Após 18 horas, a reação é resfriada para isso. Mais hidrido(ácido dimetilfosfinoso-KP)[hidrogeno bis(dimetilfosfinito- KP)]platina(II) (80 mg, 0,19 mmol) é adicionado e a reação é aquecida para 80°C durante 96 horas. A reação é concentrada a vácuo e dividida entre EtOAc e água. As camadas são separadas e a camada aquosa é extraída com EtOAc (2x). As camadas orgânicas combinadas são lava-das com solução salina, secadas sobre MgSO4, filtradas e concentradas para fornecer um resíduo que é purificado por cromatografia flash (SiO2, 30 a 100% de EtOAc em heptano) produzindo 500 mg de I-136, m/z = 546,4 [M + H].

[000117] Os seguintes intermediários são preparados de modo simi- lar:

Método W Síntese de Exemplo 1

[000118] I-110 (84 mg, 0,17 mmol) é tratado com uma solução de HCl a 4,0 M em dioxano (0,427 ml, 1,7 mmol) e agitado com ela durante 0,5 h. A reação é concentrada a vácuo para fornecer 120 mg de I-158. A uma solução de cloreto de acriloíla (0,03 ml 0,37 mmol) em CH2CI2 (5 mL) são adicionados I-158 e DIEA (0,15 mL, 0,84 mmol). Após agitar em temperatura ambiente durante a noite, cloreto de amônio aquoso saturado (4 mL) é adicionado e a mistura é extraída com EtOAc (4 x 20 mL). Os extratos orgânicos combinados são secados sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados a vácuo. O resíduo é purificado por RHPLC (Coluna: Luna PFP(2) Prep; Gradiente: 25% a 30% de ACN em água (0,1% de TFA)) para fornecer 5 mg de Exemplo 1.

[000119] O seguinte composto é preparado de modo similar: Exemplo 26. Método X Síntese de Exemplo 2

[000120] A uma solução de I-139 (220 mg, 0,42 mmol) em CH2Cl2 (5 mL) é adicionada uma solução de HCl a 4,0 M em dioxano (2,0 ml; 8,0 mmols) e a reação é agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. A solução é concentrada a vácuo para fornecer 175 mg de I-159.

[000121] A uma solução de ácido 2-butinoico (35 mg; 0,41 mmol) em THF (5 ml) são adicionados cloroformiato de isobutila (62 mg; 0,45 mmol) e N-metilmorfolina (166 mg; 1,6 mmol). A reação é agitada em temperatura ambiente durante 15 minutos, em seguida é transferida para uma solução de I-159 (175 mg; 0,41 mmol) em THF (10 mL) e agitada durante uma hora em temperatura ambiente. A mistura é em seguida dividida entre 10% de MeOH em CH2CI2 e água e filtrada através de um separador de fase e o filtrado é concentrado. O resíduo é purifi-cado por cromatografia flash (SiO2, acetato de etila em heptano 0 a 100%, em seguida MeOH em CH2CI2 0 a 20%) para produzir, após concentração a vácuo, 127 mg de Exemplo 2.

[000122] Os seguintes compostos são preparados de modo similar: Exemplos 3-9, 13, 14, 19, 24, 27-29, 34-37, 44, 52-60. Método Y Síntese de Exemplo 12

[000123] A uma solução de I-130 (57 g, 102 mmols) em CH2Cl2 (250 mL) é adicionada uma solução de HCl a 4,0 M em dioxano (101,9 mL, 407,4 mmols). Esta solução de reação é deixada agitar como está, durante 16 horas, em seguida concentrada a vácuo para fornecer 57,5 g de I-160 que é usado sem purificação adicional. Uma solução de ácido 2-butinoico (11,6 g, 138 mmols) em IPAc (228 mL) é resfriada para 0°C e cloroformiato de isobutila (18 mL, 138 mmols) seguido por N-metilmor- folina (50,5 mL, 460 mmols) são adicionados sequencialmente gota a gota. A solução é deixada agitar a 0°C durante 15 minutos, em seguida é transferida para uma solução de I-160 (57 g, 115 mmols) em IPAc (200 mL). A mistura de reação é agitada durante uma hora, em seguida diluída com 300 mL de água e aquecida para 50°C durante 3 horas, em seguida agitada durante a noite como está. A mistura heterogênea é filtrada a vácuo e o sólido é lavado com água, coletado e secado para produzir 39 g de Exemplo 12. O filtrado é coletado e as camadas são separadas. A camada de IPAc é concentrada e o resíduo suspenso em EtOAc e aquecido até uma solução homogênea ser observada. A solução é resfriada como está e o precipitado resultante é filtrado, coletado e secado para produzir mais 8,2 g de Exemplo 12. Método Z Síntese de Exemplo 22

[000124] A uma solução de I-131 (77,4 g, 138,3 mmols) em CH2Cl2 (250 mL) é adicionado MeOH (50 mL) seguido por uma solução de HCl a 4 M em dioxano (138,3 mL, 553,3 mmols). Esta solução de reação é deixada agitar em temperatura ambiente durante 4 horas e em seguida concentrada a vácuo para produzir 69,6 g de I-161 que é usado sem purificação adicional.

[000125] Uma solução de ácido 2-butinoico (14,3 g, 168,4 mmols) em IPAc (350 mL) é resfriada para 0°C e cloroformiato de isobutila (25,4 g, 182. 4 mmols) seguido por N-metilmorfolina (57,3 g, 561 mmols) são adicionados sequencialmente gota a gota. A solução é deixada agitar a 0°C durante 30 minutos, em seguida é transferida para uma solução de I-161 (69,6 g, 140,3 mmols) em IPAc (350 mL). A solução é aquecida para temperatura ambiente e agitada durante uma hora, em seguida diluída com 800 ml de água e aquecida para 50°C durante 45 minutos. A mistura é em seguida resfriada para temperatura ambiente e agitada durante 30 minutos e em seguida filtrada. O sólido é coletado e secado para produzir 55 g de Exemplo 22. Método AA Síntese de Exemplo 25

[000126] A uma solução de I-139 (624 mg, 1,15 mmol) em CH2CI2 (10 mL) é adicionada uma solução de HCl em dioxano (4 M, 2,8 mL, 11,5 mmols) gota a gota. A solução é decantada e o resíduo é secado a vácuo para produzir 571 mg de I-162. O material bruto (I-162) é usado sem purificação adicional. Uma solução de I-162 (571 mg, 1,51 mmol) em DMF (10 mL) e DIEA (0,60 mL, 3,4 mmols) é agitada durante 15 minutos, em seguida ácido 2-butinoico (97 mg, 1,51 mmol) e HATU (440 mg, 1,1 mmol) são adicionados. Após 30 minutos, NH4Cl aquoso saturado (50 mL) é adicionado, e a mistura é extraída com EtOAc. O extrato orgânico é lavado com água e solução salina, secado sobre sulfato de sódio, filtrado e concentrado a vácuo para fornecer um resíduo bruto que é purificado por cromatografia flash (SiO2, 0 a 10% de MeOH em EtOAc) produzindo 55 mg de Exemplo 25.

[000127] Os seguintes compostos são preparados de modo similar: Exemplos 15-18, 21, 23, 30-33, 38, 39, 40, 41, 51. Método AB Síntese de Exemplo 43

[000128] A uma solução de I-103 (1,2 g, 2,3 mmols) em CH2CI2 (15 mL) é adicionada uma solução de HCl em dioxano (4 M, 5 mL, 20 mmols). A mistura é agitada em temperatura ambiente durante uma hora, em seguida concentrada a vácuo e o resíduo é triturado com CH2CI2. O sólido é filtrado, coletado e secado para produzir 1,09 g de I-163 que é usado sem purificação adicional.

[000129] A uma solução do ácido acrílico (50 mg, 0,69 mmol) e HATU (264 mg, 0,69 mmol) em DMA (2,5 mL) são adicionados I-163 (250 mg, 0,53 mmol) e DIEA (0,47 mL, 2,7 mmols). Após agitar em temperatura ambiente durante a noite, a reação é concentrada a vácuo para fornecer um resíduo que é purificado por cromatografia flash (SiO2, 0 a 10% de MeOH em CH2CI2) fornecendo 106 mg de Exemplo 43.

[000130] Os seguintes compostos são preparados de modo similar: Exemplos 20, 42, 48. Método AC Síntese de Exemplo 45

[000131] A uma solução de I-137 (100 mg, 0,21 mmol) em CH2Cl2 (5 mL) é adicionado TFA (1,5 mL) e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante a noite. A reação é concentrada a vácuo para produzir I-164 que é usado sem purificação adicional.

[000132] A uma solução do ácido 2-butinoico (20 mg, 0,24 mmol) e EDC (78 mg, 0,41 mmol) em DMF (1 mL) é adicionado DIEA (0,12 mL, 0,80 mmol). Após 15 min, I-164 (100 mg, 0,27 mmol) é adicionado. Após agitar em temperatura ambiente durante a noite, a reação é concentrada a vácuo. Purificação por RHPLC (10-90% de ACN/H2O com 0,1% de TFA) produziu 9 mg de Exemplo 45. Método AD Síntese de Exemplo 47

[000133] I-106 (87 mg, 0,159 mmol) é dissolvido em 5 mL de CH2Cl2. TFA (1 mL) é adicionado e a mistura é agitada em temperatura ambiente durante uma hora. A solução é concentrada a vácuo e o resíduo é dis-solvido em MeOH e filtrado através de uma coluna Agilent StratoSpheres SPE de 500 mg (MP PL-HCO3). O filtrado é concentrado a vácuo para produzir I-165 que é usado sem purificação adicional.

[000134] A uma solução do ácido 2-butinoico (17 mg, 0,207 mmol) e HATU (79 mg 0,21 mmol) em DMA (1 mL) são adicionados I-165 (71 mg, 0,159 mmol) e DIEA (0,083 mL, 0,48 mmol). Após agitar em temperatura ambiente durante a noite, NH4Cl aquoso saturado (4 mL) é adicionado e a mistura é extraída com EtOAc (4 x 20 mL). Os extratos orgânicos combinados são secados sobre sulfato de sódio, filtrados e concentrados a vácuo para fornecer um resíduo que é purificado por cro- matografia flash (SiO2, 1 a 6% de MeOH em CH2Cl2) para fornecer 21 mg de Exemplo 47.

[000135] Os seguintes compostos são preparados de modo similar: Exemplos 46, 49, 50. Método AE Síntese de Exemplo 48

[000136] Em um frasconete são colocados I-164 (100 mg, 0,27 mmol), ácido acrílico (28 mg, 0,4 mmol), TBTU (127 mg, 0,4 mmol) e trietilamina (40 mg, 0,4 mmol) em 1 mL de DMF. Após agitar em temperatura am-biente durante a noite, o solvente é removido a vácuo para fornecer um resíduo que é purificado por RHPLC (10 a 80% de MeCN/água + 0,1% de TFA) para produzir 20 mg de Exemplo 48. Método AF Síntese de Exemplo 11

[000137] A uma solução de I-132 (1,0 g, 1,94 mmol) em CH2CI2 (5 mL) é adicionado TFA (3 mL) gota a gota. Após 3 horas em temperatura ambiente, o solvente é removido para fornecer um resíduo que é dissol-vido em MeOH e passado através de colunas Agilent StratoSpheres SPE múltiplas (MP PL-HCO3) de 500 mg. Os cartuchos são lavados com MeOH. O filtrado é concentrado a vácuo para fornecer 806 mg de I-167 que é usado sem purificação adicional.

[000138] A uma solução de ácido 2-butinoico (197 mg, 2,3 mmols) em EtOAc (10 mL) é adicionado cloroformiato de isobutila (350 mg, 2,5 mmols) seguido por N-metilmorfolina (0,79 g, 7,7 mmols). A mistura é agitada durante 10 minutos, em seguida é adicionada a uma solução de I-167 (806 mg, 1,9 mmol) em THF (10 mL) e agitada durante 30 minutos em temperatura ambiente. A reação é diluída com água e extraída com EtOAc, secada sobre MgSO4, filtrada e concentrada. O resíduo bruto é purificado por cromatografia flash (SiO2, 0 a 10% de MeOH em CH2Cl2) para produzir 370 mg de Exemplo 11.

[000139] Os seguintes compostos são preparados de modo similar: Exemplo 10

Uso Terapêutico

[000140] Com base nas suas propriedades biológicas, os compostos de fórmula (I) de acordo com a invenção, os seus tautômeros, racematos, enantiômeros, diastereômeros, misturas dos mesmos e os sais de todas as formas acima mencionadas são adequados para o tratamento de distúrbios autoimunes e alérgicos, na medida em que exibem bom efeito inibitório sobre BTK.

[000141] Tais doenças incluem, por exemplo: artrite reumatóide, lúpus eritematoso sistêmico, nefrite por lúpus, doença de Sjogren, vasculite, esclerodermia, asma, rinite alérgica, eczema alérgico, linfoma de céfula B, esclerose múltipla, reumatóide artrite juvenil, artrite idiopática juvenil, doença inflamatória intestinal, doença do enxerto versus hospedeiro, ar-trite psoriática, espondilite anquilosante e uveíte.

[000142] Os compostos de fórmula (I) podem ser utilizados sozinhos ou em combinação com outra substância ativa de acordo com a invenção, e/ou opcionalmente também em combinação com pelo menos uma outra substância farmacologicamente ativa. A outra substância farma- cologicamente ativa pode ser um agente imunomodulatório, um agente anti-inflamatório ou um agente quimioterápico. Exemplos de tais agentes incluem, porém não se limitam a, ciclofosfamida, micofenolato (MMF), hidroxicloroquina, glicocorticóides, corticosteróides, imunossu- pressores, NSAIDs, inibidores de enzima ciclooxigenase não específica e específica de COX-2, antagonistas de receptores de receptor de ne-crose de tumor (TNF) e metotrexato.

[000143] As preparações adequadas incluem, por exemplo, comprimidos, cápsulas, supositórios, soluções - particularmente soluções para injecção (s.c., i.v., i.m.) e infusão - elixíres, emulsões ou pós dispersá-veis. O conteúdo do(s) composto(s) farmaceuticamente ativo(s) deve estar na faixa de 0,1 a 90% em peso, preferivelmente 0,5 a 50% em peso da composição como um todo, isto é, em quantidades que são suficientes para atingir a faixa de dosagem especificada abaixo. As do-ses especificadas podem, se necessário, ser dadas várias vezes ao dia.

[000144] Comprimidos adequados podem ser obtidos, por exemplo, misturando a(s) substância (s) ativa(s) com excipientes conhecidos, por exemplo, diluentes inertes, tais como carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou lactose, desintegrantes tal como amido de milho ou ácido al- gínico, aglutinantes tal como amido ou gelatina lubrificantes tais como estearato de magnésio ou talco e/ou agentes para retardar a libertação, tal como carboximetilcelulose, ftalato de acetato de celulose, ou acetato de polivinila. Os comprimidos podem também compreender várias ca-madas.

[000145] Os comprimidos revestidos podem ser preparados, conse-quentemente, revestindo os núcleos produzidos analogamente aos comprimidos com substâncias normalmente utilizadas para revestimen-tos de comprimidos, por exemplo, colidona ou goma laca, goma arábica, talco, dióxido de titânio ou açúcar. Para obter uma liberação retardada ou evitar incompatibilidades, o núcleo pode também consistir várias ca-madas. De modo similar, o revestimento do comprimido pode consistir em várias camadas para obter liberação retardada, possivelmente usando os excipientes mencionados acima para os comprimidos.

[000146] Xaropes ou elixires contendo as substâncias activas ou com-binações de acordo com a invenção podem adicionalmente conter um adoçante tal como sacarina, ciclamato, glicerol ou açúcar e um realça- dor de sabor, por exemplo, um aromatizante tal como vanilina ou extrato de laranja. Podem também conter adjuvantes de suspensão ou espes- santes tais como carboximetilcelulose sódica, agentes umectantes tais como, por exemplo, produtos de condensação de álcoois graxos com óxido de etileno, ou conservantes tais como p-hidroxibenzoatos.

[000147] Soluções para injeção e infusão são preparadas da maneira usual, por exemplo, com a adição de agentes isotônicos, conservantes tal como p-hidroxibenzoatos, ou estabilizantes como sais de metal alca-lino de ácido etilenodiamina tetra-acético, opcionalmente utilizando emulsionantes e/ou dispersantes, embora se água é utilizada como o diluente, por exemplo, os solventes orgânicos podem opcionalmente ser utilizados como agentes de solvação ou auxiliares de dissolução, e transferidos para frasconetes de injeção ou ampolas ou frascos de infu-são.

[000148] Cápsulas contendo mais substâncias ativas ou combinações de substâncias ativas podem, por exemplo, ser preparadas misturando as substâncias ativas com veículos inertes, tal como lactose ou sorbitol e empacotando-as em cápsulas de gelatina.

[000149] Supositórios adequados podem ser preparados, por exemplo, misturando com veículos fornecidos para este propósito, tais como gorduras neutras ou polietilenoglicol ou derivados dos mesmos.

[000150] Excipientes que podem ser utilizados incluem, por exemplo, água, solventes orgânicos farmaceuticamente aceitáveis, tais como pa-rafinas (por exemplo, frações de petróleo), óleos vegetais (por exemplo, óleo de amendoim ou gergelim), álcoois mono- ou polifuncionais (por exemplo, etanol ou glicerol), veículos tais como, por exemplo, pós mi-nerais naturais (por exemplo, caulins, argilas, talco, giz), pós minerais sintéticos (por exemplo, ácido silícico de alta dispersão e silicatos), açú-cares (por exemplo, cana de açúcar, lactose e glicose), emulsificantes (por exemplo, lignina, licores de sulfito gastos, metilcelulose, amido e polivinilpirrolidona) e lubrificantes (por exemplo, estearato de magnésio, talco, ácido esteárico e lauril sulfato de sódio).

[000151] As preparações são administradas pelos métodos usuais, preferivelmente por via oral ou transdérmica, mais preferivelmente por via oral. Para administração oral, os comprimidos podem de fato conter, além dos acima mencionados veículos, aditivos tais como citrato de só-dio, carbonato de cálcio e fosfato dicálcio juntamente com vários aditivos tal como amido, preferivelmente amido de batata, gelatina e similares. Além disso, lubrificantes tais como o estearato de magnésio, lauril sul-fato de sódio e talco podem ser usados ao mesmo tempo para o pro-cesso de produção de comprimidos. No caso de suspensões aquosas, as substâncias activas podem ser combinadas com vários realçadores de sabor ou corantes, além dos excipientes mencionados acima.

[000152] Para uso parenteral, soluções das substâncias ativas com veículos líquidos adequados podem ser usadas.

[000153] A dosagem para uso intravenoso é de 1 a 1000 mg por hora, preferivelmente entre 5 e 500 mg por hora.

[000154] Entretanto, algumas vezes ser necessário afastar-se das quantidades especificadas, dependendo do peso corporal, rotina de ad-ministração, da resposta individual ao fármaco, da natureza de sua for-mulação e do tempo ou intervalo no qual o medicamento é administrado. Desse modo, em alguns casos, pode ser suficiente usar menos do que a dose mínima dada acima, enquanto que em outros casos, o limite su-perior pode ter que ser excedido. Quando administrando grandes quan-tidades, pode ser aconselhável dividí-las em várias doses menores dis-tribuídas ao longo do dia.

Descrição das Propriedades Biológicas Ensaio de Inibição de BTK vs. EGFR

[000155] Ensaio de Ligação Eu Cinase BTK Lanthscreen®:

[000156] Um ensaio de ligação Eu Kinase Lanthscreen® (Life Techno-logies) é realizado para quantificar a capacidade do composto teste ligar-se a BTK. O ensaio é com base na ligação e deslocamento do Tra- çador de cinase marcada com Alexa Fluor647 # 236 para o sítio de ligação de ATP de BTK marcado com His de tamanho natural humano (Life Technologies cat # PV3587) com detecção de TR-FRET usando um an-ticorpo anti-His marcado por európio. O ensaio é montado em placas pretas de NBS de 384 cavidades de baixo volume (Corning) onde BTK a 2 nM e composto teste em DMSO em concentrações variáveis são pré-incubados por 30 minutos a 28°C em tampão de ensaio consistindo em HEPES a 50 mM, pH 7,4, MgCl2 a 10 mM, EGTA a 1 mM. Na3VO4 a 100 μM e Brij 35 a 0,01%. Em seguida, 2 nM de anticorpo anti-His de Eu e 30 nM de Traçador de Cinase são adicionados e incubados durante 60 min a 28°C. Após a incubação, sinal TR-FRET é lido em uma leitora de placa Envision (Excitação: 340 nm; Emissões: 615 e 665 nm). A relação de emissão de 665:615 nm é calculada e convertida em POC em comparação com as cavidades de controle e em branco.

Inibição da produção de IL-6 em células B co-estimuladas com ODN 2006 e anti-hlgD

[000157] As células B CD19+ primárias (AllCells # PB010F) são des-congeladas e semeadas em RPMI contendo 10% de HI FBS em uma placa de cultura de de tecido de 384 cavidades a 20.000 células/cafi- dade. As células são tratadas com composto teste (concentração final de DMSO a 0,5%) e incubadas por uma hora a 37°C, CO2 a 5%. As células são então estimuladas com 5 ug/mL de IgD anti-humano F(ab')2 de cabra (SouthernBiotech # 2032) e 2 uM de ODN 2006 (InvivoGen # tlrl-2006) e incubadas por 18 a 24 horas a 37°C, CO2 a 5%. IL-6 no so- brenadante é medida utilizando o kit # K211AKB-6 da Meso Scale Discovery.

[000158] Inibição da autofosforilação de EGFR em células epiteliais humanas A431 estimuladas com fator de crescimento epitelial

[000159] [000151] élulas A431 (ATCC # CRL-1555 FZ) são descon geladas e semeadas em DMEM contendo FBS a 10% em uma placa tratada com cultura de tecido de 384 cavidades a 15.000 células/cavi- dade. Após incubação por 24 horas a 37°C, CO2 a 5%, as células são tratadas com o composto teste (concentração final de DMSO a 1%) e incubadas por 16 horas a 37°C, CO2 a 5%. EGF (Millipore, 01-107) é adicionado em uma concentração final de 60 ng/mL e incubado por 10 minutos. O meio é removido, as células são lisadas e fosfo EGF é me-dido (Meso Scale Diagnostics, N31CB-1).

[000160] Compostos representativos da presente invenção são testados e mostram inibição de BTK (Tabela I). Assim, eles têm a capacidade de demonstrar benefícios clínicos para o tratamento de distúrbios autoi- munes. Adicionalmente, compostos da presente invenção, como repre-sentados por exemplos na Tabela II, são seletivos para inibição de BTK em relação a outras cinases relacionadas. Por exemplo, os dados apre-sentados na Tabela II demonstram que os compostos da presente in-venção possuem um elevado grau de selectividade de BTK em relação ao EGFR. Nesta tabela, a atividade de BTK é medida pela produção de IL-6 em células B CD19+ primárias, e a atividade de EGFR é medida por fosforilação de EGFR em células A431. Tabela II, Dados de seletividade de EGFR para compostos representa-tivos da presente invenção Exemplo IC50 de IL-6 de célula B (nM) A431 p-EGFR IC50 (nM)

[000161] Portanto, como pode ser apreciado por uma pessoa versada na técnica, os compostos da presente invenção têm um menor potencial de efeitos adversos, devido à atividade descontrolada, como demonstrado por sua alta seletividade contra o EGFR em ensaios celulares.

Ensaios de Inibição de BTK v. BMX, TEC

[000162] Os compostos preferidos da presente invenção apresentam uma faixa de inibição seletiva de BTK em relação a outras cinases rela-cionadas BMX, TEC, e TXK relativamente aos inibidores de BTK conhe-cidos. Os seguintes são utilizados como compostos de teste: composto da presente invenção e 1-[(3R)-3-[4-amino-3-(4-fenoxifenil) pirazolo[3,4- d]pirimidin-1-il]-1-piperidil]prop-2-en-1-ona (composto comparativo A, ibrutinibe), 5-amino-1-(7-but-2-inoil-7-azaspiro[3,4]octan-2-il)-3-(4-iso- propoxifenil)pirazol-4-carboxamida (composto comparativo B, Exemplo 168 WO 2014/025976), N-(3-(5-fluoro-2-(4-(2-metoxietóxi)fenilamino)pi- rimidin-4-ilamino)fenil)acrilamida (composto comparativo C, Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics 2013, 346:219-228) que são conhecidos inibidores de BTK.

Ensaios BTK, BMX, e TXK

[000163] Ensaio Z'-LYTE™ (Life Technologies):

[000164] O ensaio de Z'-Lyte emprega um formato de enzima acoplada, com base em FRET e baseia-se na sensibilidade diferencial de peptídeos fosforilados e não fosforilados à clivagem proteolítica. A atividade de BTK humana recombinante (de tamanho natural, marcada com His), BMX (de tamanho natural, marcada com His) ou Txk (de tamanho natural, marcada com GST) é estimada medindo a fosforilação de um substrato de peptídeo FRET sintético marcado com Cumarina e Fluo- resceína. As misturas de ensaio de 10 μL contêm HEPES a 50 mM (pH 7,5), Brij-35 a 0,01%, MgC12 a 10 mM, EGTA a 1 mM, substrato de peptídeo FRET a 2 μM (Peptídeo Tyr 1 Z'-LYTE™ para BTK e BMX , e peptídeo Tyr 06 para TXK), e cinase (1,3-9,3 ng de BTK; 2,8-45,0 ng BMX; 2,3-93,6 ng TXK). As incubações são realizadas a 22°C em placas pretas de 384 cavidades de polipropileno (Corning). Antes do ensaio, cinase, substrato de peptídeo FRET e compostos teste serialmente diluídos são pré-incubados junto, em tampão de ensaio (7,5 μL) durante 10 minutos, e o ensaio é iniciado pela adição de 2,5 μL de tampão de ensaio contendo 4xATP (25 μM para BTK; 100 μM para BMX e TXK). Após a incubação de 60 minutos, as misturas de ensaio são bruscamente interrompidas pela adição de 5 μL de reagente de desenvolvimento Z'-LYTE™, e uma hora após as emissões de Cumarina (445 nm) e Fluoresceína (520 nm) são determinadas após excitação a 400 nm usando uma leitora de placa Envision. Uma relação de emissão (445 nm/520 nm) é determinada para quantificar o grau de fosforilação do substrato.

Ensaio TEC

[000165] Ensaio de Ligação Lanthscreen® Eu Kinase (Life Technologies):

[000166] O ensaio de ligação de Eu Cinase Lanthscreen® para BMX é realizado como definido acima para BTK, com a exceção de que Tc ci- nase de tamanho natural recombinante humana a 1 nM (marcada com His) e Traçador de Cinase #178 marcado com Alexa Fluor647 foram usados em vez disso.

[000167] Compostos representativos da presente invenção são avaliados quanto à inibição da BTK, BMX, e TXK medindo a fosforilação de um substrato (ensaio Z'-LYTE™, Life Technologies) e TEC medindo o deslocamento de um "traçador" (ensaio de ligação a Eu Cinase Lanths- creen®, Life Technologies). Tabela III. Seletividade de BMX, TEC e TXK para compostos da presente invenção

[000168] Estes resultados mostram que os compostos da presente in-venção são seletivos para inibição de BTK em comparação com outras cinases pelo menos 10 vezes. Veja a Tabela III.

[000169] Ensaio In-Vivo - Comparação entre os compostos da presente invenção e os compostos comparativos A, B e C

[000170] Em um estudo in vivo, composto seletos da presente invenção e compostos comparativos A-C são avaliados em ratos conscientes instrumentados por telemetria para determinar seus efeitos na pressão arterial média (PAM) em doses a, ou acima de concentrações terapeu- ticamente relevantes. Os seguintes compostos são avaliados a 10 mg/kg po qd e 30 mg/kg po qd ao longo do curso de cinco dias: Exemplos 12 e 22 da presente invenção e compostos comparativos A-C, isto é, 1-[(3R)-3-[4-amino-3-(4-fenoxifenil)pirazolo[3,4-d]pirimidina-1-il]-1-pi- peridil]prop-2-en-1-ona (composto comparativo A, ibrutinibe), 5-amino- 1-(7-but-2-inoil-7-azaspiro [3,4]octan-2-il)-3-(4-isopropoxifenil) pirazol- 4-carboxamida (composto comparativo B, Exemplo 168 WO 2014/025976) e N-(3-(5-fluoro-2-(4-(2-metoxietóxi)fenilamino)pirimidin- 4-ilamino)fenil)acrilamida (composto comparativo C, Journal of Pharma-cology and Experimental Therapeutics 2013, 346: 219-228).

Protocolo Experimental

[000171] Todos os animais (instrumentados por telemetria) são alojados individualmente em gaiolas metabólicas. Os ratos são aclimatados à gaiola metabólica por pelo menos 3 dias e em seguida dosados com veículo por até 4 dias. A pressão sangüínea, a freqüência cardíaca e peso corporal são coletados durante o período basal e os animais são randomizados em 3 grupos com base nestes parâmetros (n = 8- 9/grupo). Os grupos de tratamento são: veículo e composto teste (10 mg/kg po e 30 mg/kg po qd); os animais são tratados com composto por 5 dias. No dia seguinte, os ratos são novamente dosados com o com-posto teste e as amostras de plasma são colhidas por meio de sangra- mento do rabo, para exposições ao composto em vários momentos após a dose para capturar o Tmax (n = 3-9/grupo). A pressão arterial média (MAP) e a frequência cardíaca (HR) são coletadas continuamente du-rante todo o estudo. Análise estatística é realizada utilizando o GraphPad Prism com base na média do valor médio de 24 horas durante cinco dias de administração do composto (ANOVA unilateral com o pós- teste de Dunnett versus Veículo; p<0,05 é considerado estatisticamente significante).

[000172] Os resultados mostram que os compos tos da presente in-venção, por exemplo, Exemplos 12 e 22, não eliciam não nenhum efeito sobre a MAP em ratos quando comparados ao composto comparativo A, B e C. Como pode ser apreciado por uma pessoa versada na técnica, mudanças significantes na pressão arterial média em ratos podem ser indicativas de maior risco de eventos cardiovasculares adversos em um cenário clínico. Portanto, o fato de os compostos da presente invenção não apresentarem efeitos estatisticamente significativos sobre a MAP é surpreendente e inesperado. Veja a Tabela IV e Figura 1.

[000173] Todos os documentos de patente e não patente ou literatura citada neste Pedido são aqui incorporados por referência na sua íntegra.

Claims (23)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula (I)

em que: Cy é selecionado de

cada RI é independentemente selecionado de hidrogênio ou metila; R2 é L-Ar, em que Ar é fenila ou piridinila e cada um é não substituído ou substituído por um ou mais de halogênio, halo C1-4 alquila, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, -CN, halo C1-4 alcóxi, ou cicloalquila, em que a cicloalquila é selecionada de ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclohexila ou cicloheptila; L é -(CH2)- ou -(CHCH3)-; Y é C6-C8 spirociclo contendo 1 átomo de nitrogênio de anel, e é substituído por um R3; R3 é selecionado de

cada R4 é independentemente selecionado de hidrogênio, C14 alquila, ou C3-4 cicloalquila; cada grupo definido acima durante R1-R4 e Y pode ser onde possível parcialmente ou totalmente halogenado; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: Y é selecionado de

ou ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Cy é

Y é selecionado de

em que R3 é

ou cada R4 é independentemente selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, e caracteri-zado pelo fato de que Cy é

Y é selecionado de

em que R3 é

R4 é selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Cy é

Y é selecionado de

em que R3 é

R4 é selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

6. Composto de acordo com a reivindicação 1 e caracteri-zado pelo fato de que Cy é

Y é selecionado de

em que R3 é

cada R4 é independentemente selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

7. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que Cy é

Y é selecionado de

em que R3 é

cada R4 é independentemente selecionado de hidrogênio, CI-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindi-cações 1 a 7, caracterizado pelo fato de que cada R4 é independente-mente selecionado de hidrogênio, metila, ou ciclopropila; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

9. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 7, caracterizado pelo fato de que: R2 é L-Ar, em que Ar é fenila ou piridinila e cada uma é mão substituída ou substituída por um ou mais dentre halogênio, halometila, metila, metóxi, -CN, halometóxi, ou ciclopropila; L é -(CH2)- ou -(CHCH3)- ou um sal farmaceuticamente aceitável ou hidrato do mesmo.

10. Composto, caracterizado pelo fato de que é selecionado

ou os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

11. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

12. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

13. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

14. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

15. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

16. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri zado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

17. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

18. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

19. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

20. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracteri-zado pelo fato de que apresenta a fórmula:

ou o sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

21. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 17 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

22. Uso de um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 20 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medi-camento para o tratamento de uma doença selecionada dentre artrite reumatoide, lúpus eritematoso sistêmico, nefrite lúpica, doença de Sjo-gren, vasculite, escleroderma, asma, rinite alérgica, eczema alérgico, linfoma de célula B, esclerose múltipla, reumatóide artrite juvenil, artrite idiopática juvenil, doença inflamatória intestinal, doença do enxerto versus hospedeiro, artrite psoriática, espondilite anquilosante e uveíte.

23. Processo para preparação de um composto como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que compreende: (1) acoplamento um composto de fórmula

com um composto de fórmula E

para formar um composto de fórmula G

em que cada RI é independentemente selecionado de hidrogênio ou metila; X é um halogênio; LG é um grupo de saída; e Y' é C6-C8 espi- rociclo contendo 1 nitrogênio de anel tamponado por um grupo de pro teção; (2) acoplamento do composto de fórmula G com um éster ou ácido borônico heterocíclico de fórmula C

na presença de uma base adequada e catalisador de paládio seguidos por hidrólise da nitrila para carboxamida para formar um composto de fórmula (II-1)

em que cada grupo R do composto de fórmula C é H, alquila, ou ambos ou grupos R são conectados para formar um anel; Cy no composto de fórmula (II-1) é selecionado de

R2 é L-Ar, em que Ar é fenila ou piridinila e cada uma é não substituída ou substituída por um ou mais dentre halogênio, halo C1-4 alquila, C1-4 alquila, C1-4 alcóxi, -CN, halo C1-4 alcóxi, ou cicloalquila; em que a cicloalquila é selecionada de ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclohexila ou cicloheptila; L é -(CH2)- ou -(CHCH3)-; e (iii) Desproteção do nitrogênio tamponado do composto de fórmula (II-1) sob uma condição acídica e acoplamento do composto desprotegido de fórmula (II-1) com um composto selecionado de

para formar um composto de fórmula (I)

em que Y é C6-C8 espirociclo contendo 1 nitrogênio de anel ligado a R3, em que R3 é

cada R4 é independentemente selecionado de hidrogênio, C1-4 alquila, ou C3-4 cicloalquila; ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

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