BR112017007194B1 - Compostos de hidroxil purina e uso dos mesmos - Google Patents

Compostos de hidroxil purina e uso dos mesmos Download PDF

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Abstract

compostos de hidroxil purina e aplicações dos mesmos. compostos de hidroxil purina representados pela fórmula (i), tautômeros ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, e aplicações dos mesmos como inibidores de pde2 ou tnf-(alfa).

Description

Campo da Invenção
[001] A presente invenção refere-se a uma série de compostos de hidroxil purina e aplicações dos mesmos como inibidores de PDE2 ou TNF-α, especificamente refere-se a um composto tendo uma estrutura de fórmula (I), um tautômero do mesmo ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo.
Técnicas Anteriores
[002] Fosfodiesterases (PDE) Catalisa a hidrolização de nucleotí- deos cíclicos cGMP e cAMP, e regula várias respostas fisiológicas con-trolando as concentrações intramoleculares destes dois importantes mensageiros secundários. A regulação intramolecular anormal dos nu- cleótidos cíclicos cGMP e cAMP é a causa de muitas doenças, já existem vários fármacos que podem melhorar o tratamento de doenças através da inibição da atividade de PDE, tais como inibidores de PDE5 para hipertensão pulmonar e inibidores de PDE4 para artrite causada por psoríase. Existem onze categorias dos genes de fosfodiesterase atualmente conhecidos, cada categoria pode ser expressa em vários subtipos, com um total de mais de 100 subtipos de PDE. Diferentes subtipos têm estruturas diferentes e distribuição de tecidos diferentes, a atividade dos nucleotídeos cíclicos cGMP e cAMP e a função fisiológica da regulação também são muito diferentes.
[003] PDE2 fosfodiesterase pode catalisar a hidrolização de nucleo- tídeos cíclicos cGMP e cAMP, entretanto a atividade de cAMP é regulada por cGMP, que desempenha um papel fundamental no equilíbrio intracelular das funções de cGMP e cAMP. PDE2 é amplamente expressa em tecidos humanos, distribuídos principalmente no coração, sistema nervoso central, fígado, glândula adrenal, células endoteliais, e plaquetas e assim por diante. A PDE2 está envolvida na regulação de diversas ativi- dades fisiológicas, tais como aprendizagem, memória e processos cognitivos do centro principal, a manutenção do ritmo básico do coração, músculo liso e células endoteliais, a manutenção da permeabilidade das células endoteliais, regulação de resposta inflamatória. O nocaute do gene PDE2 levará à morte de embriões de ratos. A inibição da atividade de PDE2 pode ser utilizada para uma variedade de doenças centrais principais, doenças cardiovasculares e controle da inflamação.
[004] A atividade inibidora de PDE não seletiva de uma variedade de compostos de purina natural e sintética foi encontrada muito cedo, tal como cafeína, teofilina, pentoxifilina e assim por diante. A pentoxifilina (atividade de PDE2) foi aprovada para uso clínico em claudicação de membros inferiores causada por oclusão vascular periférica, cujas principais funções são a redução da viscosidade sanguínea, a melhora da deformação eritrocitária, inibição da agregação plaquetária, etc. Novos inibidores de PDE2 de alta seletividade também têm sido relatados para controlar a divisão de células endoteliais e a regeneração de vasos sanguíneos. No entanto, em geral, o desenvolvimento e aplicação de novos inibidores de PDE2 seletivos estão ainda muito limitados e a descoberta e aplicação de novos inibidores de PDE2 tem amplas perspectivas.
[005] O fator de necrose tumoral alfa (TNF-α) é uma citocina com múltiplas atividades biológicas, o que tem um impacto significativo na ocorrência, desenvolvimento e prognóstico de múltiplas doenças. O TNF-α é produzido principalmente por monócitos e células macrófa- gas, que estão envolvidos na imunomodulação e na coordenação da rede de citoquinas. Em circunstâncias normais, o TNF-α desempenha um papel importante na defesa imunológica e na vigilância imunológi- ca, mas em alguns casos tem efeitos adversos. A pesquisa mostra que a sobreexpressão de TNF-α pode induzir a expressão de citocinas pró- inflamatórias, tais como interleucon 1 (IL-1) e IL-6, aumentar a permeabilidade das células endoteliais e regular a expressão de moléculas de adesão e ativar neutrófilos e eosinófilos, e induzem células sinovi- ais de ossos e células de cartilagem para secretar substâncias de fase aguda e enzimas de degradação de tecidos e semelhantes para promover a ocorrência de inflamação. Estas reações patológicas desempenham um papel muito importante na ocorrência e desenvolvimento de muitas doenças inflamatórias mediadas por imunidade (IMID), tais como artrite reumatóide (RA), artrite psoriática (PsA), espondilite an- quilosante (AS), doença inflamatória intestinal (IBD), artrite crônica juvenil (JCA) e vasculite, etc. Estudos mostraram que o TNF-α é um alvo ideal para IMIDs acima de múltiplos, e o uso de antagonistas de TNF-α (inibidores de TNF-α) para neutralizar o TNF-α em excesso é uma forma ideal de prevenir doenças inflamatórias crônicas devido à sobreex- pressão de TNF-α. A PDE2 regula a expressão de TNF-α de acordo com o mecanismo, portanto o nível de TNF-α pode ser controlado regulando a atividade de PDE2, de modo a controlar a inflamação.
Teor da Presente Invenção
[006] A presente invenção proporciona um composto tendo uma estrutura de fórmula (I), um tautômero do mesmo ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, em que, a unidade estrutural pode ser substituída por especificamente substituída por ; L11 é selecionado de ausência, ou C(R)(R'); cada um de R, R' é independentemente selecionado de H, um halogênio, OH, NH2, CN, ou uma alquila ou heteroalquila opcionalmente substituída de 1 a 6 membros; opcionalmente, R, R' podem formar um cicloalquila, hetero- cicloalquila de 3 a 6 membros por ciclização; A representa ausência, ou é selecionado de cicloalquila, he- terocicloalquila, arila, ou heteroarila, cada um dos quais é opcionalmente substituído; L12 é selecionado de uma alquila ou heteroalquila opcio-nalmente substituída de 1 a 6 membros; R1 é selecionado de uma alquila ou heteroalquila opcional-mente substituída de 1 a 6 membros; "hetero" representa N, O, S,C(=O), S(=O), ou S(=O)2,o nú-mero do heteroáromo em cada grupo é selecionado de 1, 2, 3 ou 4.
[007] Em algumas modalidades da presente invenção, os substi- tuintes nos R, R', A, L12 e R1 são independentemente selecionados dentre halogênio, OH, NH2, CN, ou a alquila ou heteroalquila opcionalmente substituída de 1 a 6 membros, o número do substituinte em cada grupo é independentemente selecionado de 1, 2 ou 3.
[008] Em algumas modalidades da presente invenção, os substi- tuintes nos R, R', A, L12 e R1 são independentemente selecionados do halogênio, CF3, CN, OH, Me, Et, n-propila, isopropila, ciclopropila, ou
[009] Em algumas modalidades da presente invenção, o R e R' são independentemente selecionados de H, Me, CF3, ou Et.
[0010] Em algumas modalidades da presente invenção, o L11 é se-lecionado de
[0011] Em algumas modalidades da presente invenção, o A é se lecionado dentre alquila ou cicloalquila de 3 a 12 membros, ou arila ou heteroarila de 5 a 12 membros, cada um dos quais é opcionalmente substituído.
[0012] Em algumas modalidades da presente invenção, o A é se lecionado de ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, ciclo-hexila, epoxi- pentila, fenila, piridinila, pirazinila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, ou biciclo[1,1,1]pentano, ou um grupo bicíclíco, um grupo espiro ou um grupo cíclico fundido consistindo em quaisquer dois dos grupos acima, cada um dos quais é opcionalmente substituído.
[0013] Em algumas modalidades da presente invenção, o A é se-lecionado de , cada um dos quais é opcionalmente substituído.
[0014] Em algumas modalidades da presente invenção, o A é se-lecionado de
[0015] Em algumas modalidades da presente invenção, o L12 é selecionado de metileno,
[0016] Em algumas modalidades da presente invenção, o R1 é se- lecionado de Me, CHF2, CF3, Et, CH2CF3, isopropila, , ciclopropi-la,
[0017] A presente invenção é selecionada do grupo consistindo em:
[0018] Além disso, a presente invenção é selecionada do grupo consistindo em:
[0019] A presente invenção também fornece uma aplicação do composto, do tautômero do mesmo ou do sal farmaceuticamente acei-tável do mesmo na fabricação de um inibidor de PDE2 e um inibidor de TNF-α.
Definições Relevantes
[0020] A menos que de outro modo especificado, os seguintes termos e frases aqui utilizados pretendem ter os seguintes significados. Um termo específico ou frase não deve ser considerado incerto ou confuso na ausência de uma definição específica enquanto deve ser entendido de acordo com o significado comum. Quando um nome comercial aparece aqui, refere-se à mercadoria correspondente ou seu ingrediente ativo.
[0021] Neste contexto, o termo "farmaceuticamente aceitável" des tina-se aos compostos, materiais, composições e/ou formas de dosagem que estão dentro do âmbito de um julgamento médico confiável e aplicáveis para utilização em contato com tecido animal e humano mas sem demasiada toxicidade, irritação, reações alérgicas ou outros pro-blemas ou complicações, que também satisfazem a relação benefí- cio/risco razoável.
[0022] O termo "sal farmaceuticamente aceitável" refere-se ao sal do composto da presente invenção, que é preparado pelo composto com o substituinte específico descoberto por um ácido ou alcalino rela-tivamente não tóxico. Quando o composto de uma presente invenção contém um grupo funcional relativamente ácido, pode-se obter um sal de adição de álcali por contato do composto numa forma neutra com uma quantidade suficiente de álcali em uma solução pura ou com um solvente inerte adequado. O sal de adição de álcali farmaceuticamente aceitável inclui o sal de sódio, potássio, cálcio, amônio, amoníaco orgânico ou magnésio ou semelhantes. Quando o composto da presente invenção contém um grupo funcional relativamente alcalino, pode-se obter um sal de adição de ácido por contato do composto numa forma neutra com uma quantidade suficiente de ácido em uma solução pura ou em um solvente inerte adequado. Exemplos do sal de adição de ácido farmaceuticamente aceitável inclui um sal de ácido inorgânico que inclui ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido nítrico, ácido carbô-nico, bicarbonato, ácido fosfórico, hidrogenofosfato, di- hidrogenofosfato, ácido sulfúrico, sulfato de hidrogênio, ácido iodídrico, ácido fosforoso etc; e sal de ácido orgânico que inclui ácido acético, ácido propiônico, ácido isobutírico, ácido maléico, ácido malônico, ácido benzoico, ácido succínico, ácido subérico, ácido fumárico, ácido lático, ácido mandélico, ácido ftálico, ácido fenilsulfônico, ácido sulfôni- co p-tolueno, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido metilsulfônico e semelhantes; e inclui também sal de aminoácido (por exemplo, arginina, etc.), e sal de ácido orgânico tal como ácido glucurônico e semelhantes (ver Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)). Alguns compostos específicos de uma presente invenção contêm tanto grupos funcionais alcalinos como ácidos de modo a serem transformados para serem quaisquer sais de adição de álcali ou sais de adição de ácido.
[0023] De preferência, a forma neutra de um composto é regene rada por contato de um sal com uma base ou um ácido de uma maneira convencional e depois separando o composto original. A diferença entre uma forma original de um composto e as várias formas de sal reside em algumas propriedades físicas, tais como a solubilidade que em um solvente polar é diferente.
[0024] O "sal farmaceuticamente aceitável" na presente invenção é o derivado do composto da presente invenção, em que o composto original é modificado por salificação com um ácido ou um álcali. Exemplos do sal farmaceuticamente aceitável incluem, mas não se limitam a: um ácido inorgânico ou um sal de ácido orgânico de um álcali tal como amina, um sal de metal alcalino ou um sal orgânico de um radical ácido tal como ácido carboxílico e assim por diante. O sal farmaceuticamente aceitável inclui sais convencionalmente não tóxicos ou sais de amônio quaternário do composto origem, tal como um sal formado por um ácido inorgânico ou ácido orgânico não tóxico. O sal convencionalmente não tóxico inclui, mas não se limita, aos sais deri-vados de ácidos inorgânicos e ácidos orgânicos, os ácidos inorgânicos ou ácidos orgânicos são selecionados de ácido 2-acetoxibenzoico, ácido 2-isetiônico, ácido acético, ácido ascórbico, ácido fenilsulfônico, ácido benzoico, bicarbonato, ácido carbônico, ácido cítrico, ácido edé- tico, ácido etanodissulfônico, ácido etanossulfônico, ácido fumárico, glucoeptose, ácido glucônico, ácido glutâmico, ácido glicólico, ácido bromídrico, ácido clorídrico, hidriodato, hidroxila, hidroxinaftoico, ácido isetiônico, ácido láctico, lactose, ácido dodecanossulfônico, ácido ma- leico, ácido málico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido nítrico, ácido oxálico, ácido pamoico, ácido pantotênico, ácido fenilacé- tico, ácido fosfórico, poligalacturonano, ácido propiônico, ácido salicíli- co, ácido esteárico, ácido folinato, ácido succínico, ácido aminossulfô- nico, ácido sulfanílico, ácido sulfúrico, ácido tânico, ácido tartárico e ácido p-toluenossulfônico.
[0025] O sal farmaceuticamente aceitável da presente invenção pode ser preparado por um método convencional com um composto origem contendo um grupo ácido ou alcalino. De um modo geral, o mé-todo de preparação do sal compreende que em água ou em um solvente orgânico ou na mistura de água e solvente orgânico, faz-se reagir estes compostos em formas de ácidos livres ou álcalis com quantidade estequiométrica de álcalis adequados. Em geral, preferencialmente escolhem-se meios não aquosos tais como éter, acetato de eti- la, etanol, isopropanol ou acetonitrila e assim por diante.
[0026] Exceto para a forma de sal, existe uma forma de profárma- co para o composto na presente invenção. O profármaco do composto descrito napresente invenção é facilmente transformado para ser o composto da presente invenção via alterações químicas sob condições fisiológicas. Além disso, o profármaco pode ser transformado para ser o composto de uma presente invenção por meio de um método químico ou bioquímico em ambiente in vivo.
[0027] Alguns compostos da presente invenção podem existir sob a forma de formas não solvatadas ou solvatadas, incluindo formas de hidrato. Em geral, a forma de solvato é semelhante à forma não solva- tada, ambas as quais estão incluídas no âmbito da presente invenção.
[0028] Alguns compostos de uma presente invenção podem conter átomos de carbono assimétricos (centro óptico) ou ligações duplas. Os isómeros de racêmicos, diastereômeros, isômeros geométricos e isô- meros únicos estão incluídos no âmbito da presente invenção.
[0029] A representação esquemática do isômero racêmico, do áci do escamárico e do composto enantiomérico de uma presente invenção é de Maehr, J. Chem. Ed. 1985, 62: 114-120. A menos que indicado de outra forma, o configuração absoluta de um estereocentro é representado pela cunha e linhas tracejadas. Quando o composto de uma presente invenção contém uma ligação dupla de vinila ou outro centro geométrico assimétrico, a menos que de outro modo especificado, os isômeros geométricos E, Z estão incluídos. Similarmente, todas as formas tautoméricas são incluídas dentro do âmbito da presente invenção.
[0030] O composto de uma presente invenção pode existir como um isômero geométrico ou estereoisomérico específico. A presente invenção contempla toda esta classe de compostos, incluindo os isô- meros trans e cis, antímeros (-) e (+), antímeros (R) e (S), diastereô- meros, isômero (D), Isômero (L), assim como misturas racêmicas e outras misturas, tais como misturas enantioméricas ou diastereoisôme- ras enriquecidas, todas estas misturas estão dentro do âmbito da pre-sente invenção. Podem existir outros átomos de carbono assimétricos em substituintes tais como em um alquila. Todos estes isômeros e suas misturas estão incluídos no âmbito da presente invenção.
[0031] Os isômeros opticamente ativos (R) e (S), e (D) e (L) po dem ser preparados por síntese assimétrica ou reagentes quirais ou outras técnicas convencionais. Se for desejado um enantiómero de um composto da presente invenção, pode-se utilizar a síntese assimétrica ou ação de derivatização dos auxiliares quirais na preparação, nas quais as misturas de diastereômeros resultantes são isoladas e os grupos auxiliares são clivados para proporcionar o enantiômero desejado puro. Ou, quando uma molécula contém um grupo funcional alcalino (tal como amina) ou um grupo funcional ácido (tal como carboxila), um sal de diastereômero é formado com um álcali ou ácido óptico ativo apropriado, e então o enantiômero puro pode ser reciclado após dissolução sobre o sal de diastereômero por métodos comuns que são conhecidos na arte. Além disso, a separação de um enantiômero e um diastereômero é usualmente realizada pelo método cromatográfico, o método de cromatografia emprega uma fase estacionária quiral, e opcionalmente combinado com o método de derivatização química (por exemplo, uma amina gera um carbamato).
[0032] Um ou mais átomos que constituem o composto da presen te invenção podem compreender uma proporção não natural de isótopos atômicos. Por exemplo, o composto pode ser marcado por um isótopo radioativo, tal como trítio (3H), iodo-125(125I) ou C-14(14C). Todas as variações na composição isotópica do composto revelado na presente invenção, quer radioativa ou não, estão incluídas no âmbito da presente invenção.
[0033] O termo "um veículo farmaceuticamente aceitável" refere- se a qualquer formulação ou meio de suporte que seja capaz de fornecer uma quantidade efetiva da substância ativa revelada na presente invenção, que não interfira com a atividade biológica da substância ativa e sem efeitos tóxicos no hospedeiro ou no paciente, o transportador representativo inclui água, óleo, vegetais e minerais, base de creme, matriz de loção, matriz de pomada, etc. A matriz compreende uma suspensão, um aumentador de viscosidade, potenciadores trans- dérmicos, etc. A sua formulação é bem conhecida por pessoas na arte de cosmética ou fármacos de uso tópico. Outras informações sobre a transportadora podem se referir a Remington: The Science e Practice of Pharmacy, 21a Ed., Lippincott, Williams & Wilkins (2005), O conteúdo do qual é incorporado neste artigo como referência.
[0034] O termo "excipiente" refere-se geralmente a um veículo, diluente e/ou meio necessário para a preparação de uma composição farmacêutica eficaz.
[0035] Em termos de fármaco ou agente farmacológico ativo, o termo "quantidade efetiva" ou "quantidade terapeuticamente efetiva" refere-se a quantidade suficiente de fármaco ou formulação que pode conseguir os efeitos desejados mas não apresenta toxicidade. Para a formulação oral da presente invenção, "uma quantidade efetiva" de uma substância ativa na composição é a quantidade necessária para alcançar os efeitos desejados em combinação com outra substância ativa na composição. A determinação do montante efetivo varia de pessoa para pessoa, o que depende da idade e da situação geral do beneficiário, também da substância ativa específica. Em um caso, uma quantidade efetiva apropriada pode ser determinada por uma pessoa versada na arte de acordo com testes convencionais.
[0036] O termo "ingrediente ativo", "agente terapêutico", "substân cia ativa" ou "agente ativo" refere-se a uma entidade química, que pode tratar eficazmente o distúrbio, doença ou enfermidade de um indivíduo alvo.
[0037] O termo "substituído" refere-se a um ou mais átomos de hidrogênio num átomo específico opcionalmente substituído por um substituinte, incluindo um deutério e uma variante de hidrogênio, desde que o estado de valência do átomo específico seja normal e o com- posto obtido após substituição seja estável. Quando o substituinte é um grupo cetona (isto é, =O), significa que dois átomos de hidrogênio são substituídos. Uma substituição do grupo cetona não ocorre em um arila. O termo "opcionalmente substituído" significa que pode ser substituído ou não substituído, a menos que de outro modo especificado, o tipo e número de substituintes pode ser arbitrário sob a premissa de estabilidade disponível na química.
[0038] Quando qualquer parâmetro (por exemplo R) mostra uma ocorrência durante mais de uma vez na composição ou estrutura do composto, a definição de cada ocorrência é independente. Portanto, por exemplo, se um grupo é substituído por 0 ~ 2 de R, o grupo pode opcionalmente ser substituído por no máximo dois R, e R tem uma opção independente em cada caso. Além disso, a combinação de substi- tuintes e/ou as suas variantes só é permitida se tal combinação levar a um composto estável.
[0039] Quando o número do grupo de ligação é 0, tal como -(CRR)0-, indica que o grupo de ligação é uma ligação simples.
[0040] Quando um dos parâmetros é selecionado de uma ligação simples, indica que os dois grupos aos quais está ligado estão direta-mente ligados, por exemplo, quando o L em A-L-Z representa uma li-gação simples, indica que a estrutura é realmente A-Z.
[0041] Quando ligações de um substituinte podem estar ligadas de forma cruzada a dois átomos de um anel, o substituinte pode ser ligado a átomos arbitrários no anel. Quando o substituinte listado não especifica por qual átomo está ligado à fórmula de estrutura geral incluindo o composto que não é mencionado especificamente, o substituin- te pode ser ligado através de qualquer um dos seus átomos. A combinação de substituintes e/ou suas variantes é permitida somente se tal combinação levar a um composto estável. Por exemplo, uma unidade estrutural ou representa que a conexão pod ocorrer em qualquer átomo no ciclo-hexila ou ciclo-hexadieno.
[0042] A menos que de outro modo especificado, o termo "haloge- nado" ou "halogênio" em si ou como parte de outro substituinte refere- se a átomo de flúor, cloro, bromo ou iodo. Além disso, o termo "alquila halogenado" pretende incluir alquila monoalogenado e alquila polialo- genado. Por exemplo, o termo"(C1-C4) alquila halogenado" pretende incluir, mas não limitando a trifluorometila, 2, 2, 2-trifluoroetila, 4- clorobutila e 3-bromopropila, etc..
[0043] Exemplos de alquila halogenada incluem, mas não estão limitados a: trifluorometila, triclorometila, pentafluoroetila, e pentacloro- etila. O "alcóxi" representa que o grupo alquila com um número especí-fico de átomos de carbono está ligado por uma ponte de oxigênio. O C1-6 alcóxi inclui C1, C2, C3, C4, C5 e C6 alcóxi. Examplos de alcóxi Incluem mas não se limitam a: metóxi, etóxi, n-propóxi, iso-propóxi, n- butóxi, sec-butóxi, terc-butóxi, n-pentilóxi e S-pentilóxi. O "cicloalquila" inclui grupo cíclico saturado, tal como ciclopropila, ciclobutila ou ciclo- pentila. A cicloalquila de 3 a 7 membros inclui C3, C4, C5, C6 e C7 ciclo- alquila. A "alquenila" inclui cadeia de hidrocarboneto linear ou ramificada, em que quaisquer locais estáveis na cadeia existem uma ou mais ligações duplas C-C, tais como vinila e propenila.
[0044] O termo "halo" ou "halogênio" refere-se a flúor, cloro, bromo e iodo.
[0045] A menos que de outro modo especificado, o termo "hétero" Refere-se a um heteroátomo ou a um grupo heteroatômico (isto é, um grupo que contém um heteroátomo), não incluindo átomos de grupos de carbono (C) e hidrogênio (H) e contendo estes heteroátomos, tais como incluindo oxigênio (O), nitrogênio(N), enxofre (S), silício (Si), germânio (Ge), alumínio (Al), boro (B), -O-, -S-, =O, =S, -C(=O)O-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O), -S(=O)2-, e opcionalmente substituído -C(=O)N(H)-, -N(H)-, -C(=NH)-, -S(=O)2 N(H)- ou -S(=O) N(H)-.
[0046] A menos que de outro modo especificado, o "Anel" refere- se a cicloalquila não substituída ou substituída, heterocicloalquila, ci- cloalquenila, heterocicloalquenila, cicloalquinila, heterocicloalquinila, arila ou heteroarila. O anel inclui um único anel, um anel de junta, um anel espiro, um anel fundido ou um anel em ponte. Um certo número de átomos no anel é geralmente definido como o membro do anel, por exemplo, "anel de 5 a 7 membros" é um anel anelado com 5 a 7 átomos. A menos que de outro modo especificado, o anel opcionalmente contém 1 a 3 heteroátomos. Portanto, "anel de 5 a 7 membros" inclui, por exemplo, fenil piridina e piperidinila; por outro lado, o termo "anel heterocicloalquila de 5 a 7 membros" inclui piridila e piperidinila, mas não inclui fenila. O termo "anel" inclui também um sistema de anel que contém pelo menos um anel, em que cada anel é da definição acima de forma independente.
[0047] A menos que de outro modo especificado, o termo "hetero- ciclo" ou "heterociclila" refere-se a um anel monocíclico, bicíclico ou tricíclico estável contendo um heteroátomo e um grupo heteroatômico, podem ser saturados, parcialmente insaturados ou não saturados (aromáticos), contêm átomos carbono e 1, 2, 3 ou 4 de heteroátomos no anel que são independentemente selecionados do grupo que consiste em N, O e S, em que qualquer dos heterociclos podem ser fundidos a um anel benzeno para formar um anel bicíclico. Nitrogênio e átomos de enxofre podem ser opcionalmente oxidados (isto é, NO e S(O)p, p é 1 ou 2). O átomo de nitrogênio pode ser substituído ou não substituído (isto é, N ou NR, em que R é H ou outro substituinte que tenha sido aqui definido). O heterociclo pode ser ligado ao grupo lateral de qualquer heteroátomo ou átomo de carbono para formar uma estrutura estável. Se o composto formado for estável, o heterociclo aqui descrito pode ser substituído no seu átomo de carbono ou nitro-gênio. O átomo de nitrogênio no heterociclo é opcionalmente quaterni- zado. Como uma preferida modalidade da presente invenção, Quando o número total de átomos de S e O contidos no heterociclo excede 1, estes heteroátomos não são adjacentes um ao outro. Como outra modalidade preferida da presente invenção, o número total de átomos de S e O no heterociclo não é superior a 1. Tal como aqui utilizado, o termo "grupo heterocíclico aromático" ou "heteroarila" refere-se a um anel estável heteroaromático de monociclo ou biciclo ou bicíclico de 5, 6, 7 membros de 7, 8, 9 ou 10 membros, que contém átomos de carbono e 1, 2, 3 ou 4 de heteroátomo no anel que são independentemente selecionados do grupo que consiste em N, O e S. O átomo de nitorgênio pode ser substituído ou não substituído (isto é, N ou NR, em que R é H ou outro substituinte que foi aqui definidoOs átomos de nitrogênio e enxofre podem ser opcionalmente oxidados (isto é, NO e S(O)p, p é 1 ou 2). Vale ressaltar que o número total de átomos de S e O no anel heteroaromático não é maior que 1. Anéis com pontes também estão incluídos na definição do heterociclo. Quando um ou mais átomos (isto é, C, O, N, ou S) estão conectados a dois átomos de carbono não adjacentes ou átomos de nitrogênio, um anel em ponte é formado. O anel em ponte preferido inclui mas não se limita a: um átomo de carbono, dois átomos de carbono, um átomo de nitrogênio, dois átomos de nitrogênio e um grupo carbono-nitrogênio. Vale a pena notar que, uma ponte sempre converte um anel monocíclico em um anel tricíclico. No anel em ponte, o substituinte no anel também pode ser localizado na ponte.
[0048] Exemplos de compostos de heterocíclicos incluem mas não se limitam a: acridinila, azocinila, benzimidazolila, benzofuranila, ben- zomercaptofuranila, benzomercaptofenila, benzoxazolila, benzoxazoli- nila, benzotiazolila, benzotriazolila, benzotetrazolila, benzoisoxazolila, benzoisotiazolila, benzoimidazolinila, carbazolila, 4aH-carbazolila, car- bolinila, cromanila, cromeno, cinnolinila deca-hidroquinolila, 2H,6H- 1,5,2-ditiazinila, di-hidrofuro[2,3-b]tetra-hidrofuranila, furanila, furazani- la, imidazolidinila, imidazolinila, imidazolila, 1H-indazolila, indoalqueni- la, indolinila, indolizinila, indolila, 3H-indolila, grupo isatino, isobenzofu- ranila, isoindolila, isoindolinila, isoquinolila, isotiazolila, isoxazolila, me- tilenodioxifenila, morfolinila, naftiridinila, octaidroisoquinolila, oxadiazolila, 1,2,3-oxadiazolila, 1,2,4-oxadiazolila, 1,2,5-oxadiazolila, 1,3,4- oxadiazolila, oxazolidinila, oxazolila, hidroxil indila, pirimidila, fenantri- dinila, fenantrolinila, fenazina, fenotiazina, benzopurinila, fenoxazinila, ftalazinila, piperazinila, piperidila, oxopiperidinila, 4-oxopiperidinila, pi- peronila, pteridila, purinila, piranila, pirazinila, pirazolidinila, pirazolinila, pirazolila, piridazinila, oxazolopiridina, piridinoimidazole, piridinotiazol, piridinila, pirrolidinila, pirrolinila, 2H-pirrolila, pirrolila, quinazolinila, qui- nolila, 4H-quinolizinila, quinoxalinila, quinuclidinila, tetra-hidrofurila, te- tra-hidroisoquinolinila, tetra-hidroquinolinila, tetrazolila, 6H-1,2,5- tiadiazinila, 1,2,3-tiadiazolila, 1,2,4-tiadiazolila, 1,2,5-tiadiazolila, 1,3,4- tiadiazolila,tiantrenila, tiazila, isotiazolilatienila, tienila, tiofenoxazolila, tiofenotiazolila, tiofenoimidazolila, triazinila, 1,2,3-triazolila, 1,2,4- triazolila, 1,2,5-triazolila, 1,3,4-triazolila e xantenila. Compostos de anel fundido e anel espiro são também incluídos.
[0049] A menos que de outro modo especificado, o termo "hidro- carbonila" ou seu conceito específico (tais como alquila, alquenila, al- quinila, fenila, etc.) em si ou como parte de outro substituinte representa um hidrocarboneto linear, ramificado ou cíclico ou uma combinação dos mesmos, que pode ser totalmente saturado, monocíclico ou policí- clico insaturado, pode ser monossubstituído, dissubstituído ou polis- substituído, pode ser univalente (tal como metila), bivalente (tal como metileno) ou multivalente (tal como metenila), pode incluir grupos atô-micos bivalentes ou multivalentes, com um número especificado de átomos de carbono (tal como C1-C10 refere-se a 1 ~ 10 átomos de carbono). O termo "alquila" inclui, mas não se limita a, um hidrocarbo- nila alifático e hidrocarbonila aromático, o hidrocarbonila alifático inclui estruturas lineares e cíclicas, especificamente inclui, mas não se limita a alquila, alquenila e alquinila, o hidrocarbonila aromático inclui, mas não se limita a, hidrocarbonila aromático de 6 a 12 membros, tais como benzeno, naftaleno e semelhantes. Em algumas modalidades, o termo "hidrocarbonila" refere-se a grupos lineares ou ramificados ou sua combinação, que podem ser completamente saturadas, monocícli- cas ou policíclicas insaturadas, pode incluir grupos divalentes e polivalentes. Exemplos de hidrocarbonetos saturados incluem, mas não se limitam a, homólogos ou isômeros de metila, etila, n-propila, iso- propila, n-butila, terc-butila, iso-butila, sec-butila, iso-butila, ciclo-hexila, (ciclo-hexila) metila, ciclopropil metila, e n-amila, n-hexila, n-heptila, noctila e semelhantes. Alquilamento insaturado tem uma ou mais dupla ou tripla ligações, exemplos dos quais inclui, mas não se limitando a, vinila, 2-propenila, butenila, crotila, 2-isopentenila, 2-butadienila, 2,4- (pentadienila), 3-(1,4-pentadienila), acetenila, 1- e 3- propinila, 3- butinila e homólogos e isómeros mais avançados.
[0050] A menos que de outro modo especificado, o termo "heteroi- drocarbonila" ou seu próprio conceito específico (tais como heteroal- quila, heteroalquenila, heteroalquinila, heteroarila, etc.) ou o termo combinado com outro termo refere-se a um hidrocarboneto estável, linear ou ramificado ou cíclico, que consiste num certo número de átomos de carbono e pelo menos um heteroátomo. Em algumas modalidades, o termo "heteroidrocarbonila" ou o termo que combina com outro termo refere-se a um hidrocarboneto estável linear, ramificado e suas combinações, que consiste em um certo número de átomos de carbono e pelo menos um heteroátomo. Em uma modalidade típica, o heteroátomo é selecionado do grupo consistindo em B, O, N e S, em que os átomos de nitrogênio e de enxofre são opcionalmente oxidados, e o átomo de nitrogênio é opcionalmente quaternizado. Os hete- roátomos B, O, N e S podem ser localizados em qualquer posição interna do heteroidrocarbonila (incluindo a posição em que o hidrocar- bonila está ligado a parte restante da molécula). Exemplos incluem, mas não se limitam a, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2- N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2, -S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2- CH3, -CH=CH-O-CH3, -CH2-CH=N-OCH3 e -CH=CH-N(CH3)-CH3. No máximo dois heteroátomos são adjacentes, tais como -CH2-NH-OCH3.
[0051] Os termos "alcóxi", "alquilamino" e "alquiltio" (ou tioalcóxi) são as expressões idiomáticas, que se refere ao grupo alquila, está ligado ao resto da molécula através de um oxigênio, um amina ou um átomo de enxofre, respectivamente.
[0052] A menos que de outro modo especificado, o termo "ciclo- hidrocarbonila", "heterociclo-hidrocarbonila" ou seus conceitos específi-cos (tais como arila, heteroarila, cicloalquila, heterocicloalquila, cicloal- quenila, heterociclovinila, cicloalquinila, heterocicloalquinila, etc.) em si, ou o termo combinando com outros termos refere-se, respectivamente, a um cíclico "hidrocarbonila", "heteroidrocarbonila". Além disso, em termos de heteroidrocarbonila ou heterociclo-hidrocarbonila (tais como he- teroalquila, heterocicloalquila), heteroátomos podem ocupar a posição em que o anel heterocíclico está ligado à parte restante da molécula. Examples da cicloalquila incluem, mas não se limitam a, ciclopentila, ciclo-hexila, 1-ciclo-hexenila, 3-ciclo-hexenila, cicloeptila etc.. Exemplos não restringidos do heterociclila incluem 1-(1,2,5,6-tetra-hidropiridinila), 1-piperidila, 2-piperidila, 3-piperidila, 4-morfolinila, 3-morfolinila, tetra- hidrofuran-2-ila, tetra-hidrofuranilindol-3-ila, tetra-hidrotiofeno-2-ila, tetra- hidrotiofeno-3-ila, 1-piperazinila e 2-piperazinila.
[0053] A menos que de outro modo especificado, o termo "arila" refere-se a um substituinte de hidrocarboneto aromático poliinsatura- do, que pode ser monossubstituído, di-substituído ou multissubstituído e pode ser univalente, bivalente ou multivalente. Pode ser monocíclico ou policíclico (de preferência 1 ~ 3 anéis). Eles se fundem ou se conectam por uma ligação covalente. O termo "heteroarila" refere-se a um arila (ou anel) contendo 1 ~ 4 heteroátomos. Numa modalidade exemplar, o heteroátomo é selecionado do grupo que consiste em B, N, O e S, em que os átomos de nitrogênio e enxofre são opcionalmente oxidados, e o átomo de nitrogênio é opcionalmente quaternizado. O grupo heteroarila pode ser ligado à parte restante da molécula através de um heteroátomo. Exemplos não restringidos de um arila ou um he- teroarila incluem fenila, 1-naftila, 2-naftila, 4-bifenila, 1-pirrolila, 2- pirrolila, 3-pirrolila, 3-pirazolila, 2-imidazolila, 4-imidazolila, pirazinila, 2- oxazolila, 4-oxazolila, 2-fenil-4-oxazolila, 5-oxazolila, 3-isoxazolila, 4- isoxazolila, 5-isoxazolila, 2-tiazolila, 4-tiazolila, 5-tiazolila, 2-furanila, 3- furanila, 2-tienila, 3-tienila, 2-piridinila, 3-piridinila, 4-piridinila, 2- pirimidinila, 4-pirimidinila, 5-benzotiazolila, purinila, 2-benzoimidazolila, 5-indolila, 1-isoquinolila, 5-isoquinolila, 2-quinoxalila, 5-quinoxalila, 3- quinolila e 6-quinolila. Qualquer um dos substituintes nos sistemas de anéis de arila e heteroarila são selecionados de substituintes aceitáveis descritos abaixo.
[0054] Por razões de brevidade, quando utilizado em combinação com outros termos (por exemplo, arilóxi, ariltio, aralquila), a arila inclui a definição do anel arila e heteroarila definido acima. Portanto, o termo "aralquila" destina-se a incluir os grupos em que arila está ligado a al-quila (isto é, benzila, fenil etila, piridil metila ), incluindo aqueles alquilas em que átomos de carbono (tais como metileno) foram substituídos por átomos de oxigênio, tal como fenóxi metila, 2-piridiloximetil-3-(1- naftóxi) propila, etc.
[0055] O termo "grupo de saída" refere-se a um grupo funcional ou átomo que pode ser substituído por outro átomo ou grupo funcional através de uma reação de substituição (por exemplo, reação de substi-tuição nucleofílica). Por exemplo, os grupos de saída representativos incluem triflato; cloro, bromo, iodo; sulfonato, tal como mesilato, tosila- to, p-bromobenzeno sulfonato, p-tosilato etc.; acilóxi, tais como acetó- xi, trifluoroacetóxi e assim por diante.
[0056] O termo "grupo protetor" inclui, mas não se limita a, "grupo protetor de um amino", "grupo protector de um hidroxila", ou "grupo protetor de um grupo mercapto". O termo "grupo protetor de um amino" refere-se a um grupo protetor que é adequado para evitar que reações secundárias ocorram no átomo de nitrogênio de um grupo amino. Um grupo protetor representativo de um amino inclui, mas não se limita a: formila; acila, tal como alcanoila (tal como acetila, tricloroacetila ou trifluoroacetila); alcóxicarbonila, tal como terc-butoxicarbonila (Boc); arilmetoxicarbonila, tal como benziloxicarbonila (Cbz) e 9- fluorenilmetoxicarbonila (Fmoc); aril metila, tais como benzila (Bn), tri- fenil metila (Tr), 1,1-bis- (4'-metoxifenil) metila; silila, tal como trimetilsi- lila (TMS) e terc-butildimetilsilila (TBS) e etc.. O termo "grupo protetor de um hidroxilo" refere-se a um grupo protetor que é adequado para prevenir reações secundárias de um grupo hidroxila. Um grupo protetor representativo de uma hidroxila inclui, mas não se limita a: alquila, tal como metila, etila, e terc-butila; acila, tal como alcanoíla (tal como acetila); aril metila, tal como benzila (Bn), p-metoxibenzila (PMB), 9- fluorenilmetila (Fm) e difenilmetila (difenilmetila, DPM); silila, tal como trimetilsilila (TMS) e terc-butildimetilsilila (TBS) e etc.
[0057] O composto da presente invenção pode ser preparado através de muitos métodos sintéticos que são bem conhecidos daqueles versados na arte, incluindo as modalidades específicas listadas abaixo e a suas combinações com outros métodos sintéticos químicos e os métodos alternativos equivalentes que são conhecidos do especialista na arte, as modalidades preferidas não se limitam às modalida- des da presente invenção.
[0058] Os solventes utilizados na presente invenção estão comer cialmente disponíveis, os quais podem ser utilizados sem purificação adicional. A presente invenção adota as seguintes abreviaturas: aq re-presenta água; HATU representa O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'- tetrametilurônio hexafluorofosfato; EDC representa cloridrato de N-(3- dimetilaminopropil)-N’-etila carbodiimida; m-CPBA representa ácido m- cloroperbenzoico; eq representa equivalente, igual-quantitativo; CDI representa carbonila diimidazol; DCM representa diclorometano; PE representa éter de petróleo; DIAD representa azodicarboxilato de diisopropila; DMF representam N, N-dimetilformamida; DMSO representa dimetilsulfóxido; EtOAc representa acetato de etila; EtOH representa etanol; MeOH representa metanol; Cbz representa benziloxicarbonila, um grupo protetor de um amino; Boc representando terc- butoxicarbonila, um grupo protetor de uma amina; HOAc representa ácido acético; NaCNBH3 representa cianoboro-hidreto de sódio; r.t representa temperatura ambiente; O/N representa durante a noite; THF representam tetra-hidrofurano; Boc2O representa dicarbonato de di- terc-butila; TFA representa ácido trifluoroacético; DIPEA representam diisopropiletilamina; SOCl2 representa cloreto de tionila; CS2 representa dissulfeto de carbono; TsOH representa ácido p-toluenossulfônico; NFSI representa N-fluorobenzenossulfonimida; NCS representa N- clorossuccinimida; N-Bu4NF representa fluoreto de tetrabutilamônio; IPrOH representa 2-propanol; Pf representa ponto de fusão; LDA representa diisopropilamida de lítio; TMSCF3 representa trifluorometiltri- metilsilano; Ti(Oi-Pr)4 representa titanato de tetraisopropila; MsCl representa cloreto de metanossulfonila; DMAP representa N,N-dimetil-4- aminopiridina; TEA representa trietilamina; BnBr representa brometo de benzila; DIEA representa diisopropiletilamina; BH3DMS representa sulfureto de dimetila borano ; DMP representa periodinano de Dess- Martin; TBAF representa fluoreto de tetrabutilamônio; HOBT representa 1-hidroxibenzotriazol; AIBN representa 2,2'-azo bi-sisobutironitrila; NBS representa N-bromossuccinimida.
[0059] Os compostos são denominados por trabalho manual ou pelo software ChemDraw®, os compostos comercialmente disponíveis são nomeados de acordo com o catálogo dos fornecedores.
Descrição Detalhada da Modalidade Preferida
[0060] Os exemplos seguintes ilustram adicionalmente a presente invenção, porém a presente invenção não está limitada a eles. Modalidade 1 3,7-Dimetil-1-(6,6,6-triflúor-5-hidróxi-5-metilhexil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona 3,7-Dimetil-1-(6,6,6-triflúor-5-metil-5-(trimetilsilóxi)hexil)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona
[0061] 3,7-Dimetil-1-(5-oxoexil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (200 mg, 0,719 mmol), fluoreto de césio (10,9 mg, 0,0719 mmol) foram dis-solvidos em tetra-hidrofurano (2 mL), trifluorometiltrimetilsilano (153 mg, 1,08 mmol) foi adicionado gota a gota a 0°C. A solução de reação foi agitada a 20°C por duas horas, a reação foi saciada por adição de solução salina saturada (50 mL), extraída com acetato de etila (100 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada (100 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida, em seguida foi secada em vácuo para liberar 3,7-dimetil-1- (6,6,6-triflúor-5-metil-5-(trimetilsilóxi)hexil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (200 mg, sólido branco), rendimento: 66%. MS-ESI: calculada para [M+H]+ 421, encontrado 421. Etapa 2 3,7-Dimetil-1-(6,6,6-triflúor-5-hidróxi-5-metilhexil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[0062] 3,7-Dimetil-1-(6,6,6-triflúor-5-metil-5-(trimetilsilóxi)hexil)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (200 mg, 0,476 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (2 mL), ácido clorídrico a 1 M (0,5 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C, e em seguida a mistura foi agitada a 20°C por uma hora. A mistura foi resfriada para 0°C e a reação foi saciada por adição de solução de bicarbonato de sódio (30 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (100 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada (100 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi isolado e purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 3,7-dimetil-1-(6,6,6-triflúor-5-hidróxi-5-metilhexil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (50,0 mg, sólido branco), rendimento: 30%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,85 (s, 1H), 4,02-3,98 (m, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,52 (s, 3H), 1,69-1,64 (m, 4H), 1,52-1,48 (m, 2H), 1,28 (s, 3H). MS- ESI: calculada para [M+H]+ 349, encontrado 349. Modalidade 2 1-(5-Hidróxi-5-metilheptil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6 (3H,7H)-diona Etapa 1 5-(3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)pentanoato de etila
[0063] 3,7-Dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (500 mg, 28,0 mmols),bromovalerato de etila (7,51 g, 33,4 mmols), carbonato de po- tássio(7,73 g, 56,0 mmols) e iodeto de potássio (500 mg, 2,80 mmols) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (62 mL). A solução de rea-ção foi aquecida a 110°C e agitada por duas horas. A mistura de reação foi vertida em água e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado para liberar 5-(3,7- dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-purina-1-il)pentanoato de etila (5,00 g, sólido amarelo), rendimento: 50%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,51 (s, 1H), 4,14-4,09 (m, 2H), 4,04-4,01 (m, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,57 (s, 3H) 2,37-2,33 (m, 2H), 1,72-1,69 (m, 4H), 1,25 (t, J = 7,2 Hz, 3H). Etapa 2 1-(5-Etil-5-hidroxiheptil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[0064] 5-(3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-purina-1- il)pentanoato de etila (0,500g, 1,62 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano anidroso (5 mL). Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, bro-meto de etilmagnésio (solução de éter de 3 M, 3,42 mL, 9,72 mmols) foi lentamente adicionado gota a gota a -78°C. A solução de reação foi agi-tada a -78°C por 0,5 hora, lentamente aquecido a 0°C, e em seguida reagiu por 0,5 hora. A solução de reação foi vertida em água e extraída com acetato de etila (30 mL x 3). As fase orgânicas foram combinadas, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concen-trado sob pressão reduzida para liberar 1-(5-etil-5-hidroxieptila-3,7- dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (0,300 g, óleo incolor), rendimento: 57%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,50 (s, 1H), 4,05-4,01 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 1,70-1,37 (m, 10H) 0,86 (t, J = 7,6 Hz, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 323, encontrado 323. Modalidade 3 1-(4-(1-Hidroxiciclopropil)butil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona
[0065] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, brometo de etilmag- nésio (solvente éter a 3 M, 1,1 mL, 3,24 mmols) foi adicionado a -35°C em uma solução de 5-(3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-purina- 1-il)pentanoato de etila (500 mg, 1,62 mmol) e titanato de tetraisopropi- la (461 mg, 1,62 mmol) em tetra-hidrofurano (10 mL). A solução de reação foi lentamente aquecida a 25°C e agitada por duas horas. A reação foi saciada por adição de água (10 mL). A substância insolúvel foi removida por filtração e o filtrado foi extraído com acetato de etila (20 mL x 3). As fase orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, isolado e purificado por cromatografia líquida de alta performance para liberar 1-(4-(1-hidroxiciclopropil)butil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (90,0 mg, sólido branco), rendimento: 19%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,86 (s, 1H), 4,03-3,90 (m, 5H), 3,51 (s, 3H), 1,72-1,53 (m, 6H), 0,68-0,59 (m, 2H), 0,46-0,38 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 293, encontrado 293. Modalidade 4 3,7-Dimetil-1-((1-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2- il)ciclopropil)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-acetilciclopropano de etila
[0066] Ácido Etil-3-oxobutanoico (10,0 g, 76,8 mmols) e 1,2- dibromoetano (21,7 g, 115 mmols) foram dissolvidos em dimetilsulfóxido (300 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, carbonato de potássio (42,5 g, 307 mmols) foi adicionado em porções. A solução de reação foi agitada a 25°C por 24 horas. Água (500 mL) foi adicionada, e a solução de reação foi extraída com acetato de etila (300 mL x 3). As fases orgâ-nicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, fil-tradas, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf=0,4) para liberar etil 1-acetilciclopropano (6,00 g, óleo branco), rendimento: 50%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,25-4,20 (m, 2H), 2,44 (s, 3H), 1,47-1,42 (m, 4H), 1,32-1,28 (m, 3H). Etapa 2 Ácido 1-(1,1,1-Triflúor-2-hidroxipropan-2- il)ciclopropanocarboxílico
[0067] 1-acetilciclopropano etila (2,00 g, 12,8 mmols) e fluoreto de césio (195 mg, 1,28 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (30 mL), e em seguida trifluorometiltrimetilsilano (3,64 g, 25,6 mmols) foi adi-cionado a 0°C. A solução de reação foi reagida a 20°C sob atmosfera de nitrogênio gasoso para 6 horas. Em seguida ácido clorídrico diluído 4 N (7 mL) foi adicionado. A mistura foi reagida a temperatura ambiente sob atmosfera de gás nitrogênio por 6 horas. A reação foi saciada por adição de uma solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (30 mL) e ex-traída com acetato de etila (100 mL x 3). A fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso e filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar ácido 1-(1,1,1-triflúor-2- hidroxipropan-2-il)ciclopropanocarboxílico (1,70 g, óleo branco), rendimento: 59%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,14-4,10 (m, 2H), 1,64 (s, 3H), 1,29-1,24 (m, 3H), 1,23-1,22 (m, 2H), 0,92-0,90 (M, 2H). Etapa 3 1,1,1-Triflúor-2-(1-(hidroximetil)ciclopropil)propan-2-ol
[0068] Ácido 1-(1,1,1-Triflúor-2-hidroxipropan-2- il)ciclopropanocarboxílico (400 mg, 1,77 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano anidroso (10 mL), hidreto de alumínio e lítio (81,0 mg, 2,12 mmol) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi aquecida a 25°C e agitada por uma hora. A reação foi saciada por adição de água (10 mL), extraída com acetato de etila (50 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,2) para liberar 1,1,1-triflúor-2-(1- (hidroximetil)ciclopropil)propan-2-ol (200 mg, óleo amarelo), rendimento: 61%. 1H RMN: (400 MHz, DMSO-d6): δ 5,64 (s, 1H), 4,63-4,60 (m, 1H), 3,64-3,60 (m, 1H), 3,23-3,17 (m, 1H), 1,36 (s, 1H), 1,36 (s, 3H), 0,83-0,91 (m, 1H), 0,56-0,55 (m, 1H), 0,39-0,35 (m, 2H). Etapa 4 (1-(1,1,1-Triflúor-2-hidroxipropan-2- il)ciclopropil)metilmetanossulfonato
[0069] 1,1,1-Triflúor-2-(1-(hidroximetil)ciclopropil)propan-2-ol(100 mg, 0,543 mmol) foi dissolvido em diclorometano (5 mL), trietilamina (110 mg, 1,08 mmol) e cloreto de metanossulfonila (62,2 mg, 0,543 mmol) foram adicionados a 0°C. A solução de reação foi reagida a 0°C por duas horas. A reação foi saciada por adição de uma solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (10 mL), extraída com diclorome- tano (10 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução aquosa de cloreto de sódio saturado (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar (1-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2- il)ciclopropil)metilmetanossulfonato (80,0 mg, óleo amarelo), rendimento: 56%. Etapa 5 3,7-Dimetil-1-((1-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2- il)ciclopropil)metil)-1H-purina-2,6-(3H, 7H)-diona
[0070] (1-(1,1,1-Triflúor-2-hidroxipropan-2- il)ciclopropil)metilmetanossulfonato (80,0 mg, 0,305 mmol), 3,7-dimetil- 1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (54,9 mg, 0,305 mmol), iodeto de potássio (5,10 mg, 0,0305 mmol) e carbonato de potássio (126 mg, 0,915 mmol) foram dissolvidos em N, N-dimetilformamida anidroso (5 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e reagida por duas horas. A solução de reação foi resfriada para 20°C, filtrada, e purificada por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 3,7-dimetil-1-((1- (1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)ciclopropil)metil)-1H-purina-2,6-(3H, 7H)-diona (40,0 mg, sólido branco), rendimento: 38%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 4,45 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,24 (d,J = 6,8 Hz, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,53 (s, 3H), 1,53 (s, 3H), 0,92-0,88 (m, 1H), 0,64-0,63(m, 1H), 0,41-0,38 (m, 1H), 0,15-0,12 (m, 1H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 347, encontrado 347. Modalidade 5 1-(3-Hidróxi-3-(trifluorometil)ciclobutil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 3-oxociclobutanocarboxilato de metila
[0071] Ácido 3-oxociclobutanocarboxílico (25 g, 0,220 mmol), me tanol (14 mL) e N,N-dimetil-4-aminopiridina (3,00 g, 353 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (500 mL), agitados a 25°C, cloridrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (64,0 g, 340 mmols) foi adi-cionado gota a gota lentamente, e a mistura foi agitada durante a noite. A solução de reação foi lavada sucessivamente com solução aquosa de ácido clorídrico (1,5 N, 72 mL), água (150 mL x 2) e solução salina saturada (75 mL x 2). A fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida pra fornecer o produto 3-oxociclobutanocarboxilato de metila (25 g, líquido amarelo), rendimento: 89%. Etapa 2 5,8-dioxaspiro[3,4]octano-2-carboxilato de metila
[0072] Metil-3-oxociclobutanocarboxilato (25,0 g, 195 mmols), eti- leno glicol (35,0 g, 564 mmols) e ácido p-toluenessulfônico (3,50 g, 20,0 mmols) foram dissolvidos em tolueno (250 mL), depois de equipado com um separador de água, a mistura de reação foi aquecida a refluxo durante a noite. A solução de reação foi resfriada para 25°C e lavada sucessivamente com água (300 mL x 2), solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (500 mL x 2). A fase orgânica foi secada sobre sulfato de magnésio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 5,8-dioxaspiro[3,4]octano-2- carboxilato de metila (22,5 g, líquido amarelo), rendimento: 90%. Etapa 3 5,8-Dioxaspiro[3,4]octan-2-ilmetanol
[0073] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, hidreto de alumínio e lítio (5,20 g, 136 mmols) foi lentamente dissolvido em tetra-hidrofurano (240 mL) a 0°C, e em seguida 5,8-dioxaspiro[3,4]octano-2-carboxilato de metila (19,5 g, 113 mmols) dissolvido em tetra-hidrofurano (60 mL) foi adicionado gota a gota. A reação foi lentamente aquecida a 25°C e agitada por 3,5 horas. A solução de reação foi resfriada para 0°C e água (5,20 g, 289 mmols), 15% hidróxido de sódio (5,20 g, 19,5 mmols) e água (15,6 g, 867 mmols) foram lentamente adicionados sucessivamente. A mistura de reação foi filtrada e o bolo de filtração foi lavado com tetra-hidrofurano (10 mL x 3) e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar o produto 5,8-dioxaspiro[3,4]octan-2-ilmetanol (10,0 g, líquido amarelo), rendimento: 62%. 1H-RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 3,90-3,87 (m, 4H), 3,67 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 2,45-2,40 (m, 2H), 2,38-2,26 (m, 1H), 2,132,08 (m, 2H). Etapa 4 Metanossulfonato de 5,8-dioxaspiro[3,4]octan-2-ilmetila
[0074] 5,8-Dioxaspiro[3,4]octan-2-ilmetanol(500 mg, 53,1 mmols) e trietilamina (896 mg, 6,90 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (23 mL), cloreto de metanossulfonila (1,40 g, 12,6 mmols) foi lentamente adicionado a 0°C. A solução de reação foi aquecida a 25°C e agitada durante a noite. A reação foi saciada por adição de água (50 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto metanossulfonato de 5,8-dioxaspiro[3,4]octan-2-ilmetila (2,30 g, líquido amarelo). MS-ESI calculada para [M+H]+ 223, encontrado 223. Etapa 5 1-(5,8-Dioxaspiro[3,4]octan-2-ilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[0075] Metanossulfonato de 5,8-Dioxaspiro[3,4]octan-2-ilmetil (1,00 g, 4,50 mmols), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (810 mg, 4,50 mmol), carbonato de potássio (1,20 g, 13,5 mmols) e iodeto de potássio (75,0 mg, 0,45 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (20 mL). A reação foi aquecida a 130°C e agitada por 3,5 horas. A solução de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida pra fornecer 1-(5,8-dioxaspiro[3,4]octan-2- ilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (1,50 g, líquido marrom), rendimento: 93%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 307, encontrado 307. Etapa 6 3,7-Dimetil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[0076] 1-(5,8-Dioxaspiro[3,4]octan-2-ilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (1,50 g, 5,00 mmols) foi dissolvido em acetona (18 mL), solução aquosa de ácido clorídrico (4 N, 3 mL) foi adicionada. A reação foi aquecida a 30°C e agitada durante a noite. A mistura de reação foi diluída com água, aajustada a pH neutro com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (20 mL) e extraída com acetato de etila (150 mLx 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o produto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,2) para liberar o produto 3,7-dimetil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (180 mg, sólido branco), rendimento: 14%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,49 (s, 1 H), 4,25 (d, J = 7,6 Hz, 2 H), 3,95 (s, 3 H), 3,55 (s, 3 H), 3,13- 2,96 (m, 4 H), 2,95-2,84 (m, 1 H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 263, encontrado 263. Etapa 7 1-((3-Hidróxi-3-(trifluorometil)ciclopentil)metil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona
[0077] 3,7-Dimetil-1-((3-oxociclopentil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (100 mg, 0,382 mmol) e fluoreto de césio (11,5 mg, 0,0763 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano anidroso (3 mL), e trifluo- rometiltrimetilsilano (95,0 mg, 0,640 mmol) foi adicionado sob atmosfera de nitrogênio gasoso. A solução de reação foi lentamente aquecida a 30°C e agitada por 12 horas. Solução aquosa de ácido clorídrico (1 N, 5 mL) foi adicionado na mistura de reação, que foi em seguida agitada por mais 0,5 hora. A solução de reação foi diluída com água (50 mL), o valor do pH foi ajustado a 7 com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (10 mL), concentrada sob pressão reduzida, e purificada por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 1-((3-hidróxi-3-(trifluorometil)ciclopentil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (80,0 mg, sólido branco), rendimento: 64%. 1H RMN: (400 MHz, Mehonal-d4) δ 8,54 (s, 1H), 4,13-4,07 (m, 5H), 3,56 (s, 3H), 2,58-2,48 (m, 3H), 2,14-2,10 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+333, encontrado 333. Modalidade 6 1-((3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)metil)-3- hidroxiciclobutanocarbonitrila Etapa 1 (((1,3-Dibromopropan-2-il)óxi)metil)benzeno
[0078] 2-(Bromometil)oxirano(8,40 g, 61,3 mmols) foi adicionado a uma solução de cloreto cuproso (6,87 g, 51,1 mmols) em brometo de benzila (8,74 g, 51,1 mmols) a temperatura ambiente. A reação foi agi-tada a 150°C por 11 horas. A solução de reação foi resfriada para tem-peratura ambiente, água (100 mL) foi lentamente adicionado e a mistura de reação foi extraída com acetato de etila (100 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas e secada sobre sulfato de sódio anidro- so, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o produto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (éter de petróleo, Rf = 0,6) para liberar o produto (((1,3- dibromopropan-2-il)óxi)metil)benzeno (8,60 g, óleo amarelo), rendi- mento: 44%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,39-7,31 (m, 5H), 4,67 (s, 2H), 3,82-3,78 (m, 1H), 3,58 (d, J = 5,2 Hz, 4H). Etapa 2 3-(benzilóxi)-1-cianociclobutano carboxilato de etila
[0079] Cianoacetato de etila (2,76 g, 24,3 mmols) foi adicionado lentamente a temperatura ambiente a uma solução de (((1,3- dibromopropan-2-il)óxi)metil)benzeno (7,00 g, 18,2 mmols) e carbonato de potássio (10,0 g, 72,7 mmols) em N, N-dimetilformamida (35 mL). A reação foi agitada a 90°C por 4 horas. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada, e o sólido foi lavado com acetato de etila (20 mL). A fase orgânica resultante foi lavada com u solução aquosa de cloreto de amônio saturado (20 mL x 3). A fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o produto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (30:1 éter de petró- leo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar o produto 3-(benzilóxi)-1- cianociclobutano carboxilato de etila (3,80 g, óleo incolor), rendimento: 81%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,40-7,28 (m, 5H), 4,48-4,44 (m, 2H), 4,37-4,31 (m, 1H), 4,30-4,24 (m, 2H), 2,97 -2,80 (m, 2H), 2,73-2,65 (m, 2H), 1,37-1,30 (m, 3H). Etapa 3 3-(Benzilóxi)-1-(hidroximetil)ciclobutanocarbonitrila
[0080] Boroidreto de sódio (1,39 g, 36,6 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano e água (20 mL:2 mL), e a solução de 3-(benzilóxi)-1- cianociclobutano carboxilato de etila (3,80 g, 14,6 mmols) em tetra- hidrofurano (22 mL) foi lentamente adicionado gota a gota a 0°C durante 20 minutos. A reação foi agitada a temperatura ambientepor duas horas. A mistura foi diluída com acetato de etila (50 mL), lavadas com água (30 mL) e solução salina saturada (30 mL) separadamente, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentra- do sob pressão reduzida para liberar o produto bruto 3-(benzilóxi)-1- (hidroximetil)ciclobutanocarbonitrila (3,70 g, óleo incolor). 1H RMN: (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,38-7,25 (m, 5H), 5,57-5,52 (m, 1H), 4,39-4,36 (m, 2H), 4,13-4,04 (m, 1H), 3,57-3,51 (m, 2H), 2,58-2,51 (m, 1H), 2,492,45 (m, 1H), 2,31-2,09 (m, 2H). Etapa 4 Metanossulfonato de (3-(Benzilóxi)-1-cianociclobutil)metila
[0081] 3-(Benzilóxi)-1-(hidroximetil)ciclobutanocarbonitrila (3,70 g, 15,3 mmols) e trietilamina (3,10 g, 30,6 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (35 mL), cloreto de metanossulfonila (3,29 g, 28,7 mmols) foi lentamente adicionado a 0°C. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 4 horas, solução aquosa de cloreto de amônio saturado (30 mL) foi adicionado e a mistura de reação foi extraída com acetato de etila (50 mL x 2), o fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para para liberar o produto bruto metanossulfonato de (3- (benzilóxi)-1-cianociclobutil)metila (4,56 g, óleo marrom escuro). 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,36-7,26 (m, 5H), 4,47-4,45 (m, 2H), 4,44-4,38 (m, 2H), 3,21-3,18 (m, 1H), 3,17 -3,14 (m, 3H), 2,81-2,60 (m, 2H), 2,53-2,26 (m, 2H). Etapa 5 3-(Benzilóxi)-1-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin- 1-il)metil)ciclobutanocarbonitrila
[0082] Metanossulfonato de (3-(Benzilóxi)-1-cianociclobutil)metila (4,50 g, 15,2 mmols), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (2,75 g, 15,2 mmols e iodeto de potássio (1,26 g, 7,62 mmols) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (100 mL), carbonato de potássio (6,32 g, 45,7 mmols) foi adicionado, a mistura de reação foi aquecida a 120°C e colocada em refluxo por 4 horas. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, água (50 mL) foi adicionada e a mistura de reação foi extraída com acetato de etila (50 mLx 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o fil-trado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto bruto 3-(benzilóxi)-1-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil)ciclobutanocarbonitrila (4,60 g, sólido amarelo). MS-ESI calculada para [M+H]+ 380, encontrado 380. Etapa 6 1-((3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)metil)-3- hidroxiciclobutanocarbonitrila
[0083] 3-(Benzilóxi)-1-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro- 1H-purin-1-il)metil)ciclobutanocarbonitrila(100 mg, 0,263 mmol) foi dissolvido em diclorometano (10 mL), e cloreto férrico (128 mg, 0,790 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada em temperatura ambiente por 12 horas. Água (10 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com diclorometano (40 mLx 3). As fases orgânicas foram combinadas e secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi con-centrado sob pressão reduzida, o produto resultante foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil)-3-hidroxiciclobutanocarbonitrila (12,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 16%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,56 (s, 1H), 4,664,49 (m, 1H), 4,45-4,37 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 3,62 (s, 3H) 2,96-2,85 (m, 2H), 2,60-2,49 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 290, encontrado 290. Modalidade 7 Etapa 1 Metil éster de ácido 3-(hidroximetil)biciclo[1,1,1]pentano-1- carboxílico de metila
[0084] Ácido 3-(Metoxicarbonil)biciclo[1,1,1]pentano-1-carboxílico (100 mg, 0,587 mmol) e trietilamina (71,0 mg, 0,705 mmol) foram dis-solvidos em tetra-hidrofurano (20 mL), cloroformiato de metila (56,0 mg, 0,587 mmol) foi lentamente adicionado gota a gota a -10°C. A solução de reação foi agitada a 0°C por meia hora e em seguida boroi- dreto de sódio (33,0 mg, 0,881 mmol) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada por mais 2 horas. Água (10 mL) foi adicionada à solução de reação, que foi em seguida extraída com acetato de etila (10 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas e lavadas com cloreto de sódio saturado (10 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar metil éster de ácido 3-(hidroximetil)biciclo[1,1,1]pentano-1-carboxílico de metila (80,0 mg, óleo incolor), rendimento: 87%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3)δ3,65 (s, 3H), 3,60 (s, 2H), 2,00 (s, 6H). Etapa 2 Metil éster de ácido 3-(((metilsulfonil)óxi)metil)biciclo[1,1,1]pentano- 1-carboxílico de metila
[0085] 3-(hidroximetil)biciclo[1,1,1]pentano-1-carboxilato de metila (40,0 mg, 0,256 mmol) e trietilamina (39,0 mg, 0,384 mmol) foram dis-solvidos em diclorometano (15 mL), cloreto de metanossulfonila (35,0 mg, 0,307 mmol) foi lentamente adicionado gota a gota a 0°C. A solução de reação foi agitada a 0°C por duas horas, a solução de reação foi diluída com diclorometano (10 mL), a fase orgânica foi lavada com água (10 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar metil éster de ácido 3-(((metilsulfonil)óxi)metil)biciclo[1,1,1]pentano-1-carboxílico de metila (50,0 mg, óleo amarelo), rendimento: 83%. Etapa 3 Metil éster de ácido 3-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H- purin-1-il)metil)biciclo[1,1,1]pentano-1-carboxílico de metila
[0086] Metil éster de ácido 3-(((metilsulfonil)óxi)metil)biciclo[1,1,1] pentano-1-carboxílico de metila (100 mg, 0,426 mmol) e 3,7-dimetil- 1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (77,0 mg, 0,427 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (20 mL), carbonato de potássio (88,0 mg, 0,640 mmol) e iodeto de potássio (8,00 mg, 0,0430 mmol) foram adicionados em temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada a 100°C por duas horas, o solução de reação foi resfriada para temperatura ambiente e concentrada, diluída com acetato de etila (20 mL), a fase orgânica foi lavada com água (20 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, e isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,2) para liberar metil éster de ácido 3-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)metil) biciclo[1,1,1]pentano-1-carboxílico de metila (100 mg, sólido amarelo), rendimento: 73%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,50 (s, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,52 (s, 3H), 1,95 (s, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+319, en-contrado 319. Etapa 4 Ácido 3-((3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil)biciclo[1,1,1]pentano-1-carboxílico
[0087] Metil éster de ácido 3-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra- hidro-1H-purin-1-il)metil)biciclo[1,1,1]pentano-1-carboxílico de metila (100 mg, 0,314 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (15 mL) e água (5 mL), hidróxido de lítio (26,0 mg, 0,628 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente. Após agitar a temperatura ambiente por duas horas, ácido clorídrico diluído 2N (10 mL) foi adicionado à solução de reação, o valor do pH foi ajustado a 4, a mistura foi em seguida extraída com acetato de etila (15 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas e lavadas com solução aquosa de cloreto de sódio saturado (20 mL x 2),secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar ácido 3-((3,7-dimetil- 2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)metil)biciclo[1,1,1]pentano-1- carboxílico (90,0 mg, sólido branco), rendimento: 94%.
[0088] MS-ESI calculada para [M+H]+ 305, encontrado 305. Etapa 5 3-((3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)metil)-N- metóxi-N-metilbiciclo[1,1,1]pentano-1-carboxamida
[0089] Ácido 3-((3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin- 1-il)metil)biciclo[1,1,1]pentano-1-carboxílico (30,0 mg, 0,0986 mmol) e N, O-dimetilhidroxilamina (10,0 mg, 0,0986 mmol) foram dissolvidos em diclorometano (20 mL), hexafluorofosfato de 2-(7-azobenzotriazol)- N,N,N',N'-tetrametilurônio (75,0 mg, 0,197 mmol) e diisopropiletilamina (19,0 mg, 0,148 mmol) foram adicionados em temperatura ambiente. Após agitar a temperatura ambiente por 12 horas, água (20 mL) foi adicionado à solução de reação, que foi em seguida extraída com di- clorometano (20 mL x 2), as fases orgânicas foram combinadas e la-vadas com solução aquosa de cloreto de amônio saturado (20 mL x2), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, e o filtrado foi con-centrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:2 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,2) para liberar 3-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro- 1H-purin-1-il)metil)-N-metóxi-N-metilbiciclo[1,1,1]pentano-1- carboxamida(30,0 mg, sólido branco), rendimento: 88%.
[0090] MS-ESI calculada para [M + H]+ 348, encontrado 348. Etapa 6 1-((3-Acetilbiciclo[1,1,1]pentan-1-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona
[0091] 3-((3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil)-N-metóxi-N-metilbiciclo[1,1,1]pentano-1-carboxamida (20,0 mg, 0,0575 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (20 mL), brometo de etilmagnésio (solução de éter a 3 M, 0,040 mL, 0,120 mmol) foi adi-cionado à solução de reação a -78°C, após agitar por mais 30 minutos, a solução de reação foi aquecida em temperatura ambiente e colocada para reagir por 4 horas. Solução aquosa de cloreto de amônio saturado (10 mL) foi adicionado à solução de reação a 0°C, que foi em seguida extraída com acetato de etila (15 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas e lavadas com solução de cloreto de sódio saturado (20 mL x2), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. E o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petró- leo/acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 1-((3-acetilbiciclo[1,1,1] pen- tan-1-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (15,0 mg, óleo incolor), rendimento: 86%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,55 (s, 1H), 4,17 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,59 (s, 3H), 2,07 (s, 3H), 1,97 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 303, encontrado 303. Etapa 7 3,7-Dimetil-1-((3-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2- il)biciclo[1,1,1]pentan-1-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[0092] 1-((3-Acetilbiciclo[1,1,1]pentan-1-il)metil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6-(3H,7H)-diona (20,0 mg, 0,0660 mmol) e trifluorometiltrime- tilclorossilano (19,0 mg, 0,132 mmol) foram dissolvidos em tetra- hidrofurano (15 mL), fluoreto de césio (10,0 mg, 00660 mmol) foi adici-onado à solução de reação a temperatura ambiente e a reação foi agitada por mais umas 12 horas a temperatura ambiente. À solução de reação foi adicionado ácido clorídrico diluído 2N (10 mL), que foi em seguida agitada por 30 minutos, extraída com acetato de etila (20 mL x 2), as fases orgânicas foram combinadas e lavadas com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (20 mL x 2), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia líquida de alta performance para liberar 3,7-dimetil-1-((3-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2- il)biciclo[1,1,1] pentan-1-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (5,00 mg, óleo incolor), rendimento: 20%,1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,59 (s, 1H), 4,20 (s, 2H), 4,02 (s, 3H), 3,59 (s, 3H), 1,97 (s, 6H), 1,79 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 373, encontrado 373. Modalidade 8 Etapa 1 3,7-Dimetil-1-[[3-[2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1- (trifluorometil)etil]ciclobutil] metil]purina-2,6-diona
[0093] 3,7-Dimetil-1-[[3-(2,2,2-triflúor-1,1-di-hidróxi-etil)ciclobutil] metil]purina-2,6-diona (60,0 mg, 0,165 mmol) e fluoreto de césio (25,2 mg, 0,165 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), triflu- orometiltrimetilclorossilano (70,6 mg, 0,496 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitados por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio ani- droso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1 (8,00 mg, sólido amarelo) (isômero 1, o primeiro pico) rendimento: 12%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,01 (s, IH), 4,22-4,17 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 3,54 (s, 3H), 3,55-3,19 (m, 1H), 2,63-2,56 (m, 1H), 2,50-2,42 (m, 2H), 1,82-1,78 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 415, encontrado 415.
[0094] E produto 2 (isômero 2, o segundo pico), rendimento: 6%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,20 (s, 1H), 4,04-4,00 (m, 5H), 3,55 (s, 3H), 2,70-2,65(m, 1H), 2,55-2,53 (m, 1H), 2,17-2,12 (m, 2H), 2,02-1,98 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 415, encontrado 415. Modalidade 9 Etapa 1 Àcido 3-Metileno ciclobutanocarboxílico
[0095] 3-Metileno ciclobutironitrila (10,0 g, 107 mmol) e hidróxido de potássio (18,1 g, 322 mmol) foram dissolvidos em etanol (100 mL) e água (50 mL), após reagir a 100°C por duas horas, ácido clorídrico a 1 N (120 mL) foi adicionado. A mistura resultante foi extraída com diclo- rometano (30 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar ácido 3- metilenociclobutanocarboxílico (11,0 g, óleo amarelo), rendimento: 91%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4)δ4,83-4,76 (m, 2H), 3,15-2,96 (m, 1H), 2,95-2,92 (m, 4H). Etapa 2 Ciclobutanocarboxilato de metil-3-metileno
[0096] Àcido 3-Metilenociclobutanocarboxílico (11,0 g, 98,1 mmols) e carbonato de potássio (27,1 g, 196 mmols) foram dissolvidos em acetona (100 mL), sulfato de dimetila (14,8 g, 117 mmols) foi adiciona- do a 25°C. Após reagir a 70°C por 12 horas, a reação foi saciada por adição de água (20 mL), extraída com diclorometano (30 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar ciclobutanocarboxilato de metil-3- metileno (12,0 g, óleo amarelo), rendimento: 97%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,83-4,79 (m, 2H), 3,96 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 3,17-3,15 (m, 1H), 2,95-2,92 (m, 2H). Etapa 3 3-(Hidroximetil) ciclobutano carboxilato de metila
[0097] Ciclobutanocarboxilato de metil-3-metileno (2,00 g, 15,8 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (30 mL), sulfeto de dimetil borano (3,61 g, 47,5 mmols) foi adicionado gota a gota a -10°C e em seguida posto para reagir a -10°C por 3 horas, 3 N solução aquosa de hidróxido de sódio (10 mL) e peróxido de hidrogênio (5 mL) foram adi-cionados e a reação foi continuado por uma hora, a solução de reação foi saciada por adição de solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (30 mL), extraída com diclorometano (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 3-(hidroximetil)ciclobutanocarboxilato de me- tila (2,00 g, óleo amarelo), rendimento: 87%,1H RMN: (400 MHz, Me- tanol-d4)δ3,70 (s, 3H), 3,58 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,49 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,10-3,05 (m, 1H), 2,32-2,26 (m, 3H), 2,03-1,98 (m, 2H). Etapa 4 3-(((metilsulfonil)óxi)metil)ciclobutanocarboxilato de metila
[0098] 3-(hidroximetil) ciclobutanocarboxilato de metila (1,00 g, 6,94 mmols) e trietilamina (2,11 g, 20,8 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (20 mL), cloreto de metanossulfonila (1,59 g, 13,9 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi lentamente aquecido a temperatura ambiente e agitada por duas horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio (50 mL). A mistura resultante foi extraída com diclorometano (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 3- (((metilsulfonil)óxi)metil) ciclobutanocarboxilato de metila (1,40 g, óleo amarelo), rendimento: 91%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4)δ4,28 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 4,19 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,20-3,08 (m, 4H), 2,40-2,34 (m, 3H), 2,13-2,09 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 223, encontrado 223. Etapa 5 3-[(3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil]ciclobutanocarboxilato de metila
[0099] 3-(((metilsulfonil)óxi)metil)ciclobutanocarboxilato de etila (1,40 g, 6,30 mmols), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (1,13 g, 6,30 mmols), iodeto de potássio (209 mg, 1,26 mmol) e carbonato de potássio (2,61 g, 18,90 mmols) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (100 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. Em seguida A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada, em que foi adicionado água (100 mL), extraída com diclorometano (10 mLx 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 3-[(3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H- purin-1-il)metil] ciclobutanocarboxilato de metila (1,50 g, sólido amarelo), rendimento: 78%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4)δ7,51 (s, 1H), 4,18-4,10 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,55 (s, 3H) 3,26-2,65 (m, 2H), 2,29-2,13 (m, 4H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 307, encontrado 307. Etapa 6 Ácido 3-[(3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil]ciclobutanocarboxílico
[00100] 3-[(3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil] ciclobutanocarboxilato de metila (1,00 g, 3,26 mmols) e hidróxido de potássio (548 mg, 9,78 mmols) foram dissolvidos em metanol (10 mL) e água (5 mL). A solução de reação foi aquecida a 90°C e agitada por 3 horas. A mistura resultante foi resfriada para temperatura ambiente, neutralizada por adição de ácido clorídrico a 1 N (20 mL) e filtrada, extraída com diclorometano (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar ácido 3-[(3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7- tetra-hidro-1H-purin-1-il)metil]ciclobutanocarboxílico (800,00 mg, sólido amarelo), rendimento: 84%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 293, encontrado 293. Etapa 7 3-[(3,7-Dimetil-2,6-dioxo-purin-1-il)metil]-N-metóxi-N-metil ciclobu- tanocarboxamida
[00101] Ácido 3-[(3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin- 1-il)metil] ciclobutanocarboxilico (300 mg, 1,03 mmol), cloridrato de N,O-dimetilhidroxilamina (200 mg, 2,05 mmols), cloridrato de 1-etil-(3- dimetilaminopropil) carbodiimida (394 mg, 2,06 mmols), 1- hidroxibenzotriazol (27,8 mg, 0,206 mmol) e trietilamina (312 mg, 3,09 mmol) foram dissolvidos em diclorometano (10 mL). A mistura de reação foi agitada a 25°C por 12 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, o valor de Rf = 0,3) para liberar 3- [(3,7-dimetil-2,6-dioxo-purin-1-il)metil]-N-metóxi-N- metilciclobutanocarboxamida (200 mg, sólido amarelo), rendimento: 58%.MS-ESI calculada para [M+H]+336, encontrado 336. Etapa 8 1-[(3-Acetilciclobutil)metil]-3,7-dimetilpurina-2,6-diona
[00102] 3-[(3,7-Dimetil-2,6-dioxo-purin-1-il)metil]-N-metóxi-N- metilciclobutanocarboxamida (300 mg, 0,894 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (10 mL). Brometo de metilmagnésio (solução de éter a 3 M, 1,49 mL, 4,47 mmols) foi adicionado gota a gota a 0°C e agitada por 3 horas. A solução de reação foi saciada por adição de solução aquosa de cloreto de amônio saturado (20 mL) e extraída com diclo- rometano (10 mL x 3).As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, o valor de Rf = 0,5) para liberar 1-[(3-acetilciclobutil)metil]-3,7-dimetilpurina- 2,6-diona (200 mg, sólido amarelo), rendimento: 77%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 291, encontrado 291. Etapa 9
[00103] 1-[(3-Acetilciclobutil)metil]-3,7-dimetilpurina-2,6-diona (250 mg, 0,861 mmol) e fluoreto de césio (130 mg, 0,861 mmol) foram dis-solvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil-trifluorometil-silano (244 mg, 1,72 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitado por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgâ-nicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1 (65,0 mg, sólido amarelo) (isômero 1, o primeiro pico), rendimento: 20%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4)δ8,21 (s, 1H), 4,23 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 4,03 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 3,26-3,19 (m, 2H), 2,63-2,56 (m, 2H), 2,55-2,42 (m, 2H), 1,82-1,78 (m, 3H).MS-ESI calculada para [M+H]+361, encontrado 361.
[00104] Produto 2 (isômero 2, o segundo pico), rendimento: 22%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,05 (s, 1H), 4,01-3,99 (m, 5H), 4,03 (s, 3H), 3,54 (s, 3H), 2,71-2,66 (m, 1H), 2,55-2,54 (m, 1H), 2,17-2,12 (m, 2H), 2,02-1,98 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+361, encontrado 361. Modalidade 10 Etapa 1 1,4-dioxaspiro[4,4]nonano-7-carboxilato de metila
[00105] 3-oxociclopentanocarboxilato de metila (16,0 g, 110 mmols), ácido p-toluenossulfônico (14,0 g, 220 mmols) e etileno glicol (969 mg, 5,60 mmols) foram dissolvidos em tolueno anidroso (160 mL), depois de equipado com um separador de água, a mistura de reação foi aquecida a refluxo por 4 horas. A reação foi saciada por adição de água (200 mL), extraída com acetato de etila, e as fases orgânicas foram combinadas. A fase orgânica combinada foi lavada sucessivamente com água (200 mL x 2), solução aquosa de cloreto de sódio saturado (200 mL x 2), secada sobre sulfato de magnésio anidroso e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel (5:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 1,4-dioxaspiro[4,4]nonano-7-carboxilato de metila (6,20 g, óleo amarelo), rendimento: 29%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 3,93-3,89 (m, 4H), 3,69 (s, 3H), 2,91-2,89 (m, 1H), 2,11-1,82 (m, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 187, encontrado 187. Etapa 2 (1,4-Dioxaspiro [4,4] nonan-7-il)-metanol
[00106] 1,4-dioxaspiro[4,4]nonano-7-carboxilato de metila (1,00 g, 10,7 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidroso (30 mL), sob atmosfera de gás nitrogênio, hidreto de alumínio e lítio (531 mg, 13,9 mmols) foi lentamente adicionado a -10°C. A solução de reação foi len-tamente aquecida a 25°C e agitada por 3 horas. Água (0,5 mL), solução de hidróxido de sódio a 15% (0,5 mL) e água (1,5 mL) foram adicionados sucessivamente à solução de reação. A substância insolúvel foi removida por filtração e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar (1,4-dioxaspiro[4,4]nonano-7-il)-metanol (1,5 mg, óleo amarelo), rendimento: 88%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 3,94-3,89 (m, 4H), 3,58-3,57 (m, 2H), 2,31-1,48 (m, 7H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 159, encontrado 159. Etapa 3 Metanossulfonato de 1,4-Dioxaspiro[4,4]nonan-7-ilmetila
[00107] (1,4-Dioxaspiro[4,4]nonano-7-il)-metanol (500 mg, 53,1 mmols) e trietilamina (800 mg, 7,92 mmols) foram dissolvidos em diclo- rometano anidroso (5 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, cloreto de metanossulfonila (433 mg, 3,80 mmols) foi lentamente adicionado a 0°C. A solução de reação foi aquecida a 25°C e agitada por duas horas. A reação foi saciada por adição de água (40 mL) e extraída com acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas, lavada a sucessivamente com água (20 mL x 2), solução aquosa de cloreto de sódio saturado (50 mL x 2), secada sobre sulfato de magnésio anidro- so, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para libe- rar metanossulfonato de 1,4-dioxaspiro[4,4]nonan-7-ilmetila (800 mg, óleo amarelo). MS-ESI calculada para [M+H]+ 237, encontrado 237. Etapa 4 (1,4-Dioxaspiro[4,4]nonan-7-ilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00108] Metanossulfonato de 1,4-Dioxaspiro[4,4]nonan-7-ilmetila (300 mg, 1,27 mmol) foi dissolvido em N,N-dimetilformamida anidroso (10 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, carbonato de potássio (350 mg, 2,54 mmols), iodeto de potássio (21,0 mg, 0,130 mmol), 2,6- hidróxi-3,7-dimetilpurina (275 mg, 1,52 mmol) foram adicionados a 25°C. A solução de reação foi aquecida a 130°C e agitada por 3 horas. A solução de reação foi resfriada para 25°C, saciada por adição de água (40 mL), e extraída com acetato de etila (30 mL x 2). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução aquosa de cloreto de sódio saturada (100 mL x 2), secadas sobre sulfato de magnésio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar (1,4-dioxaspiro[4,4]nonan-7-ilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (200 mg, sólido branco), rendimento: 45%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 321, encontrado 321. Etapa 5 3,7-Dimetil-1-(3-oxociclopentilmetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00109] (1,4-dioxaspiro[4,4]nonan-7-ilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (200 mg, 0,620 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano anidroso (5 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, ácido clorídrico concentrado (3 mL) foi adicionado a 25°C. A solução de reação foi agitada a 25°C por uma hora. A mistura foi diluída com água (60 mL) e a reação foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução aquosa de cloreto de sódio saturado (100 mL x 2), secadas sobre sulfato de magnésio anidroso, filtradas, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 3,7-dimetil-1-(3- oxociclopentilmetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (100 mg, óleo amarelo), rendimento: 57%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 277, encontrado 277. Etapa 6 1,3-trans-1-((3-Hidróxi-3-(trifluorometil)ciclopentil)metil)-3,7- dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona 1,3-cis-1-((3-Hidróxi-3-(trifluorometil)ciclopentil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00110] 3,7-Dimetil-1-((3-oxociclopentil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (100 mg, 0,362 mmol) e fluoreto de césio (11,0 mg, 0,0725 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano anidroso (3 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, trifluorometiltrimetilsilano (95,0 mg, 0,640 mmol) foi adicionado. A solução de reação foi lentamente aquecida a 30°C e agitada por 12 horas. À solução de reação foi adicionado solução aquosa de ácido clorídrico (1 N, 5 mL), e a reação foi agitada por mais 0,5 hora a 30°C. A solução de reação foi diluída com água (50 mL) e o valor do pH foi ajustado para 7 com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (10 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL x 2). As fases orgânicas foram combinadas, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar dois produtos isoméricos.
[00111] Produto 1 (isômero 1, o primeiro pico) (40,0 mg, sólido branco), rendimento: 32%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,68 (s, 1H), 4,13-4,08 (m, 2H), 4,05 (s, 3H), 3,61 (s, 3H), 2,80-2,78 (m, 1H), 2,40-2,24 (m, 1H), 2,04-2,03 (m, 1H), 2,01-1,87 (m, 2H), 1,84-1,76 (m, 1H), 1,62-1,60 (m, 1H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 347, encontrado 347.
[00112] Produto 2 (isômero 2, o segundo pico) (20,0 mg, sólido branco), rendimento: 16%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,62 (s, 1H), 4,22-4,18 (m, 1H), 4,05-4,04 (m, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,63 (s, 3H), 2,65-2,63 (m, 1H), 2,09-2,01 (m, 4H), 1,70-1,68 (m, 1H), 1,67-1,65 (m, 1H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 347, encontrado 347. Modalidade 11 1-((4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6(3H, 7H)-diona Etapa 1 1,4-dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxilato de etila
[00113] Ácido 4-oxociclo-hexanocarboxilato de etila (30,0 g, 176 mmols), etileno glicol (22,0 g, 353 mmols) e ácido p-toluenossulfônico (304 mg, 1,70 mmol) foram dissolvidos em tolueno (315 mL), depois de equipado com um separador de água, a mistura de reação foi aquecida a refluxo durante a noite. A mistura de reação foi resfriada para 25°C e lavada sucessivamente com água (300 mL x 2), solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (500 mL x 2), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de magnésio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar o produto 1,4-dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxilato de etila (37,2 g, líquido amarelo), rendimento: 99%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 215, encontrado 215. Etapa 2 1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetanol
[00114] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, hidreto de alumínio e lítio (2,30 g, 61,0 mmols) foi lentamente adicionado em tetra- hidrofurano (60 mL) a 0°C, uma solução de 1,4-dioxaspiro[4,5]decano- 8-carboxilato de etila (10,0 g, 42,0 mmols) em tetra-hidrofurano (40 mL) foi adicionado gota a gota. A reação foi lentamente aquecido a 25°C e agitada por 3,5 horas. A solução de reação foi resfriada para 0°C e água (2,3 g, 127 mmols), hidróxido de sódio a 15% (2,3 g, 8,60 mmol) e água (6,9 g, 383 mmol) foram lentamente adicionados sucessivamente. A mistura resultante foi filtrada e o bolo de filtração foi lavado com tetra-hidrofurano (50 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto 1,4- dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetanol (6,22 g, líquido amarelo), rendimento: 89%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 173, encontrado 173. Etapa 3 Metanossulfonato de 1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetila
[00115] 1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetanol (2,00 g, 12,0 mmols) e diisopropiletilamina (3,10 g, 24,0 mmols) foram dissolvidos em diclo- rometano (40 mL), cloreto de metanossulfonila (3,90 g, 30,0 mmols) foi lentamente adicionado a 0°C. A solução de reação foi aquecida a 25°C e agitada durante a noite. A reação foi saciada por adição de uma solução aquosa de cloreto de amônio saturado (100 mL) e extraída com acetato de etila (200 mLx 3). As fases orgânicas foram combinadas, secada sobre sulfato de magnésio anidroso e filtradas, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (3:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar o produto metanossulfonato de 1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8- ilmetila (1,80 g, líquido amarelo), rendimento: 60%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 251, encontrado 251. Etapa 4 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00116] Metanossulfonato 1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetila (1,50 g, 6,00 mmols), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (1,00 g, 6,00 mmol), carbonato de potássio (2,50 g, 18,0 mmols), iodeto de potássio (100 mg, 0,600 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (20 mL), o solução de reação foi aquecida a 130°C e agitada por 3 horas. A solução de reação foi resfriada para 25°C, saciada com solução salina saturada (100 mL) e extraída com acetato de etila (500 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secada sobre sulfato de magnésio anidroso, filtradas, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petró- leo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar o produto 1-(1,4- dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (1,75 g, sólido branco), rendimento: 63%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 335, encontrado 335. Etapa 5 3,7-Dimetil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00117] 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (1,50 g, 4,50 mmols) foi dissolvido em acetona (15 mL), e solução aquosa de ácido clorídrico (2N, 2,5 mL) foi adicionada. A reação foi agitada durante a noite a 25°C, saciada por adição de água (50 mL) e extraída com acetato de etila (50 mL x 3). As fases or gânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:3 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar o produto 3,7-dimetil-1-((4-oxociclo- hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (1,02 g, sólido branco), rendi-mento: 78%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 291, encontrado 291. Etapa 6 1-((4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona
[00118] 3,7-Dimetil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (100 mg, 0,330 mmol) e fluoreto de césio (60,0 mg, 0,350 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (5 mL), sob atmosfera de nitro-gênio gasoso, trifluorometiltrimetilsilano (75,0 mg, 0,500 mmol) foi len-tamente adicionado. A solução de reação foi agitada a 30°C por 3 horas. A solução de reação foi resfriada para 25°C, na qual a solução aquosa de ácido clorídrico (4 N, 3 mL) foi adicionada, em seguida agitada a 25°C por meia hora, o valor de pH da mistura resultante foi ajustado para 7, e diluída com água e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, concentradas sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1-((4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo- hexil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (24,0 mg, sólido branco), rendimento: 39%.
[00119] 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,86 (s, 1H), 4,04 (d, J = 7,2 Hz, IH), 3,97 (s, 3H), 3,89 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,53 (s, 3H), 2,061,97 (m, 2H), 1,88-1,77 (m, 3H), 1,62-1,43 (m, 4H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 361, encontrado 361. Modalidade 12 Etapa 1 4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexanocarboxilato de etila
[00120] 4-oxociclo-hexanocarboxilato de etila (10,0 g, 58,7 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (100 mL), trifluorometiltrimetilsilano (12,5 g, 88,1 mmols) e fluoreto de césio (8,92 g, 58,7 mmols) foram adicionados à temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente por 12 horas, fluoreto tetrabutilamônio (9,27 g, 29,4 mmols) foi adicionado, após agitar a temperatura ambiente por 30 minutos, acetato de etila (80 mL) foi adicionado para diluir a solução de reação, a fase orgânica foi lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e concentrada, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petró- leo/acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 4-hidróxi-4- (trifluorometil)ciclo-hexanocarboxilato de etila (12,0 g, óleo incolor), rendimento: 85%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,20-4,12 (m, 2H), 2,03-1,86 (m, 9H), 1,29-1,25 (m, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 241, encontrado 241. Etapa 2 4-(Hidroximetil)-1-(trifluorometil)ciclo-hexanol
[00121] 4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexanocarboxilato de etila (12,00 g, 49,9 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (20 mL), hi- dreto de alumínio e lítio (3,79 g, 100 mmols) foi adicionado a 0°C e co-locado para reagir por duas horas. A reação foi saciada por adição de água (30 mL). A mistura resultante foi extraída com (50 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,2) para liberar 4-(hidroximetil)-1-(trifluorometil)ciclo-hexanol (9,00 g, óleo incolor), rendimento: 91%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 3,58-3,40 (m, 2H), 1,90-1,40 (m, 9H). Etapa 3 metanossulfonato de (4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metila
[00122] 4-(Hidroximetil)-1-(trifluorometil)ciclo-hexanol (11,0 g, 55,5 mmols) e trietilamina (1,18 g, 11,6 mmols) foram dissolvidos em diclo- rometano (80 mL) e cloreto de metanossulfonila (14,4 g, 125 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente por duas horas, diluída com diclorometano (60 mL), lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cro- matografia de coluna em sílica-gel (4:1 éter de petróleo/acetato de eti- la, Rf = 0,5) para liberar metanossulfonato de (4-hidróxi-4- (trifluorometil)ciclo-hexil)metila (13,00 g, óleo incolor), rendimento: 85%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,25-4,01 (m, 2H), 3,10-3,07 (m, 3H), 2,03-1,24 (m, 9H). Etapa 4 1-(((1S,4S)-4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00123] Metanossulfonato de (4-Hidróxi-4-(trifluorometil) ciclo- hexil)metila (10,0 g, 36,2 mmols) foi dissolvido em N,N- dimetilformamida (100 mL), e 3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (6,52 g, 36,2 mmols), carbonato de potássio (7,50 g, 54,3 mmols) e iodeto de potássio (184 mg, 1,11 mmol) foram adicionados na solução de reação a temperatura ambiente. A solução de reação foi aquecida a 100°C e colocada para reagir por 5 horas, a solução de reação foi concentrada e diluída com acetato de etila (100 mL), a fase orgânica foi lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e separated por SFC preparativa para liberar o produto 1 (2,5 g, sólido branco) (isômero 1, o primeiro pico), rendimento: 19%. As condições de separação: coluna: Chiralpak AD-3 150 x 4,6 mm, I.D: 3um, fase móvel: etanol (0,05% dietilamina) em CO2 de 5% a 40% a 2,5 mL/min, comprimento de onda: 220 nm. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 4,02 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,53 (s, 3H), 2,16-2,02 (m, 1H), 1,99-1,98 (m, 2H), 1,871,80 (m, 2H), 1,60-1,49 (m, 2H), 1,48-1,46 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 361, encontrado 361.
[00124] Produto 2 (2,40 g, sólido branco) (isômero 2, o segundo pico), rendimento: 19%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,88 (s, 1H), 3,99 (s, 3H), 3,90 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,54 (s, 3H), 1,84-1,81 (m, 3H), 1,581,46 (m, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 361, encontrado 361. Modalidade 13 1-((4-Hidróxi-4-metilciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00125] 3,7-Dimetil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (50,0 mg, 0,170 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (2 mL). Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, reagente de metil Grignard (sol-vente de éter a 3 M, 0,4 mL, 1,20 mmol) foi lentamente adicionado a - 78°C. A solução de reação foi agitada a -78°C por 0,5 hora e lentamente aquecido a 0°C e agitada por mais 0,5 hora. A reação foi saciada por adição de uma solução aquosa de cloreto de amônio saturado, cujo valor de pH foi ajustado para 7. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila, secada sobre sulfato de sódio anidroso e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromato- grafia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1- ((4-hidróxi-4-metilciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (8,0 mg, sólido branco), rendimento: 16%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,86 (s, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,88 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,52 (s, 3H), 1,85-1,78 (m, 1H), 1,73-1,57 (m, 3H), 1,46-1,33 (m, 2H), 1,321,15 (m, 6H). MS-ESI calculada para [M+H-H2O]+ 289, encontrado 289. Modalidade 14 1-((4-Etil-4-hidroxiciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00126] 3,7-Dimetil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (50,0 mg, 0,170 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (2 mL). Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, reagente de etila Grignard (3 M in solvente de éter, 0,4 mL, 1,20 mmol) foi lentamente adicionado a - 78°C. A solução de reação foi agitada a -78°C por 0,5 hora e lentamen- te aquecido a 0°C e agitada por mais 0,5 hora. A reação foi saciada por adição de uma solução aquosa de cloreto de amônio saturado, cujo valor de pH foi ajustado para 7. Em seguida a mistura resultante foi extraída com acetato de etila, secada sobre sulfato de sódio anidroso e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1-((4-etil-4-hidroxiciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (42,0 mg, sólido branco), rendimento: 77%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,86 (s, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,88 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,54-3,50 (m, 3H), 1,93-1,80(m, 1H), 1,76-1,72 (m, 2H), 1,66-1,51 (m, 3H), 1,38-1,28 (m, 3H), 1,27-1,13 (m, 2H), 0,89 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS-ESI calculada para [M+H-H2O]+ 303, encontrado 303. Modalidade 15 Etapa 1 2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilideno)acetato de etila
[00127] Fosfonoacetato de trietila (12,2 g, 54,4 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (100 mL), hidreto de sódio (1,92 g, 48,0 mmols) foi adicionado em porções a 0°C, a reação foi agitada sob atmosfera de nitrogênio gasoso por 30 minutos. Uma solução de 1,4-ciclo- hexanodiona monoetileno acetal (5,00 g, 32,0 mmols) dissolvido em tetra-hidrofurano (15 mL) foi adicionado gota a gota à solução de reação a 0°C, e a reação foi agitada a 25°C por 3 horas. A reação foi saciada por adição de água (25 mL) e extraída com diclorometano (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (20 mL), secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por croma- tografia de coluna em sílica-gel (5:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilideno)acetato de etila (6,30 g, óleo incolor), rendimento: 93%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 5,67 (s, 1H), 4,15 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,98 (s, 4H), 3,00 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,38 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 1,84-1,68 (m, 4H), 1,28 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 227, encontrado 227. Etapa 2 2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-il)acetato de etila
[00128] 2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilideno)acetato de etila (3,80 g, 17,9 mmols) foi dissolvido em metanol (50 mL), seco em paládio sobre carbono (paládio 10%, água 1%, 400 mg) foi adicionado, a reação foi colocada para reagir sob atmosfera de gás hidrogênio (50 psi) por 18 horas a temperatura ambiente. A solução de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 2-(1,4- dioxaspiro[4,5]decan-8-il)acetato de etila (3,50 g, óleo incolor), rendi-mento: 91%. 1H-RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 4,12 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,93 (s, 4H), 2,22 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 1,90-1,64 (m, 5H), 1,63-1,48 (m, 2H), 1,401,16 (m, 5H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 229, encontrado 229. Etapa 3 2-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etanol
[00129] 2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-il)acetato de etila (1,00 g, 4,38 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (20 mL), hidreto de alumínio e lítio (216 mg, 5,69 mmols) foram adicionados em porções a 0°C e agitados por 18 horas sob atmosfera de nitrogênio gasoso. A solução de reação foi resfriada para 0°C, água (0,2 mL), 15% de solução aquosa de hidróxido de sódio (0,2 mL) e água (0,6 mL) foram lentamente adicionados sucessivamente. A mistura de reação foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto 2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etanol (780 mg, óleo amarelo), rendimento: 96%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 3,94 (s, 4H), 3,69 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 1,79-1,65 (m, 4H), 1,59-1,38 (m, 5H), 1,34-1,17 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 187, encontrado 187. Etapa 4 Metanossulfonato de 2-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etila
[00130] 2-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etanol (400 mg, 2,15 mmols) e trietilamina (435 mg, 4,30 mmols) foram dissolvidos em diclo- rometano (10 mL), cloreto de metanossulfonila (369 mg, 3,23 mmols) foi lentamente adicionado a 0°C. A solução de reação foi agitada a 0°C por 4 horas. A reação foi saciada por adição de água (10mL) e extraída com diclorometano (30 mL x 2). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar metanossulfonato de 2- (1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etila (500 mg bruto, óleo amarelo). 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 4,28 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,94 (s, 4H), 3,01 (s, 3H), 1,76-1,63 (m, 6H), 1,60-1,43 (m, 3H), 1,37-1,21 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 265, encontrado 265. Etapa 5 1-(2-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00131] 3,7-Dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (204 mg, 1,13 mmol) foi dissolvido em N,N-dimetilformamida (15 mL), metanossulfo- nato de 2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etila (300 mg, 1,13 mmol), carbonato de potássio (312 mg, 2,26 mmols) e iodeto de potássio (225 mg, 1,36 mmol) foram adicionados. A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,2) para liberar 1-(2-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (190 mg, sólido branco), rendimento: 48%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,50 (s, 1H), 4,09-4,03 (m, 2H), 4,02 (s, 3H), 3,99 (s, 4H), 3,57 (s, 1H), 1,90-1,70 (m, 5H), 1,68-1,47 (m, 6H), 1,45-1,31 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 349, encontrado 349. Etapa 6 3,7-Dimetil-1-(2-(4-oxociclo-hexil)etil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00132] 1-(2-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-il)etil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (190 mg, 545 μmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (3 mL) e ácido clorídrico concetrado (1 mL) foi adicionado. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente por 18 horas. A solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida e o valor do pH da fase aquosa foi neutralizado para 7 com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado e extraída com acetato de etila (20 mL x 2). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (10 mL), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 3,7-dimetil-1-(2-(4-oxociclo-hexil)etil)-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (150 mg, óleo incolor), rendimento: 90%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 305, encontrado 305. Etapa 7 3,7-Dimetil-1-(2-(4-(trifluorometil)-4-((trimetilsilil)óxi)ciclo- hexil)etil)-1-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00133] 3,7-Dimetil-1-(2-(4-oxociclo-hexil)etil)purina-2,6-diona (145 mg, 0,476 mmol) e fluoreto de césio (7,2 mg, 0,0476 mmol) foram dis-solvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trifluorometiltrimetilsilano (203 mg, 1,43 mmol) foi lentamente adicionado sob atmosfera de nitrogênio gasoso. A solução de reação foi agitada a 25°C por 18 horas. A solução de reação foi diluída com água (20 mL) e extraída com acetato de etila (15 mL x 2). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (10 mL), secada sobre sulfato de sódio ani- droso, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 3,7-dimetil-1-(2-(4-(trifluorometil)-4-((trimetilsilil)óxi)ciclo- hexil)etil)-1-purina-2,6(3H,7H)-diona (170 mg, colorless liquid), rendi-mento: 80%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 447, encontrado 447. Etapa 8
[00134] 3,7-Dimetil-1-[2-[4-(trifluorometil)-4-trimetilsililóxi-ciclo- hexil]etil]purina-2,6-diona (160 mg, 0,358 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (3 mL) e ácido clorídrico concentrado (12 M, 0,107 mL) foi adicionado. A solução de reação foi agitada a 25°C por 18 horas. A mistura de reação foi diluída com água, cujo valor de pH foi ajustado para 7 com uma solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (10 mL), extraída com acetato de etila (10 mL x 2). As fases orgânicas foram combinadas, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, concentradas sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cro- matografia líquida de alta performance preparativa para liberar o pro- duto 1 (40,0 mg, sólido branco) (isômero 1, o primeiro pico), rendimento: 27%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 8,01 (s, 1H), 4,09-3,94 (m, 5H), 3,53 (s, 3H), 1,97-1,79 (m, 4H), 1,76-1,62 (m, 3H), 1,61-1,45 (m, 4H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 375, encontrado 375.
[00135] E produto 2 (15,0 mg, sólido branco) (isômero 2, o segundo pico), rendimento: 10%. 1H-RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 8,01 (s, 1H), 4,09-3,95 (m, 5H), 3,53 (s, 3H), 1,87-1,68 (m, 4H), 1,64-1,48 (m, 4H), 1,46-1,25 (m, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 375, encontrado 375. Modalidade 16 1-((4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 etil-8-metil-1,4-dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxilato
[00136] Etil éster de ácido 1,4-dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxílico de etila (5,00 g, 23,3 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidro- so (100 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, uma solução de diisopropilamida de lítio (solução de tetra-hidrofurano a 2 M, 14,0 mL, 28,0 mmols) foi lentamente adicionado gota a gota a -78°C, a solução de reação foi agitada a -78°C por uma hora. Iodometano (6,62 g, 46,7 mmols) foi lentamente adicionado e a mistura de reação foi agitada por mais uma hora. A reação foi saciada por adição de água (100 mL). A mistura de reação foi extraída com acetato de etila (100 mL x 3) e as fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar etil-8-metil-1,4- dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxilato (5,00 g, óleo amarelo), rendimento: 94%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,16-4,10 (m, 2H), 3,933,86 (m, 4H), 2,13-2,06 (m, 2H), 1,61-1,48 (m, 6H), 1,25-1,22 (m, 3H), 1,15 (s, 3H). Etapa 2 etil-1-metil-4-oxociclo-hexanocarboxilato
[00137] etil-8-metil-1,4-dioxaspiro[4,5] decano-8-carboxilato (5,00 g, 21,9 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (50 mL), e solução aquosa de ácido clorídrico 1 N (20 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C, e em seguida agitados a 20°C por uma hora. A mistura foi resfriada para 0°C e a reação foi saciada por adição de a solução aquosa de bicarbonato de sódio (50 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (100 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada (100 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar etil-1-metil-4-oxociclo-hexanocarboxilato (3,00 g, óleo incolor), rendimento de 74%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,26-4,11 (m, 2H), 2,46-2,29 (m, 5H), 1,74-1,55 (m, 3H), 1,33-1,26 (m, 6H). Etapa 3 4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil) ciclo-hexanocarboxilato de etila
[00138] Etil-1-metil-4-oxociclo-hexanocarboxilato (3,00 g, 16,3 mmols), fluoreto de césio (247 mg, 1,63 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (50 mL) e em seguida trifluorometil trimetilsilano (4,63 g, 35,3 mmol) foi adicionado a 0°C. Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, a solução de reação foi reagida a 20°C por 6 horas. Em seguida solução aquosa de ácido clorídrico 4 N (4 mL) foi adicionada. Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, a mistura foi reagida a temperatura ambiente por 6 horas. A reação foi saciada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (30 mL) e extraída com acetato de etila (100 mL x 3), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso e filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petró- leo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 4-hidróxi-1-metil-4- (trifluorometil)ciclo-hexanocarboxilato de etila (3,00 g, óleo incolor), rendimento: 73%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,20-4,12 (m, 2H), 2,03-1,31 (m, 8H), 1,29-1,23 (m, 6H). Etapa 4 4-(Hidroximetil)-4-metil-1-(trifluorometil)ciclo-hexanol
[00139] etil-4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil) ciclo- hexanocarboxilato (3,00 g, 11,8 mmols) foi dissolvido em tetra- hidrofurano anidroso (50 mL), hidreto de alumínio de lítio (896 mg, 23,6 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi aquecida a 25°C e agitada por uma hora. A reação foi saciada por adição de água (20 mL), extraída com acetato de etila (50 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (3:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,2) para liberar 4- (hidroximetil)-4-metil-1-(trifluorometil)ciclo-hexanol (2,00 g, óleo incolor), rendimento: 80%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 3,25 (s, 2H), 1,76-1,64 (m, 6H), 1,29-1,26 (m, 2H), 0,93-0,91 (m, 3H). Etapa 5 Metanossulfonato de (4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo- hexil)metila
[00140] 4-(Hidroximetil)-4-metil-1-(trifluorometil)ciclo-hexanol (2,00 g, 9,42 mmols) foi dissolvido em diclorometano (30 mL), trietilamina (953 mg, 9,42 mmols) e cloreto de metanossulfonila (1,08 g, 9,42 mmols) fo-ram adicionados a 0°C. A solução de reação foi reagida a 0°C por duas horas. A reação foi saciada por adição de uma solução aquosa de bi-carbonato de sódio saturado (10 mL), extraída com diclorometano (50 mL x 3), a fase orgânicas foram combinadas, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar metanossulfonato de (4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo- hexil)metila (2,00 g, óleo amarelo), rendimento de 73%. Etapa 6 1-((4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00141] Metanossulfonato de (4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil) ci- clo-hexil)metila (100 mg, 0,344 mmol), 3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (62,1 mg, 0,344 mmol), iodeto de potássio (5,70 mg, 0,0344 mmol) e carbonato de potássio(47,6 mg, 0,344 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida anidroso (5 mL). A solução de reação foi aquecida a 150°C por micro-ondas e colocado pra reagir por 4 horas. A solução de reação foi resfriada para 20°C, filtrada, purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 1-((4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (3,0 mg, sólido branco), rendimento: 2%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,96 (s, 2H), 3,54 (s, 3H), 1,81-1,64 (m, 6H), 1,63-1,34 (m, 2H), 1,00 (s, 3H). MS- ESI calculada para [M+H]+ 375, encontrado 375. Modalidade 17 1-((4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 8-(metoximetil)-1,4-dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxilato de etila
[00142] 1,4-Dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxilato de etila (5,00 g, 23,3 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidroso (100 mL), sob at-mosfera de nitrogênio gasoso, a solution de diisopropilamida de lítio (so-lução a 2 M de n-hexano, 14,0 mL, 28,0 mmols) foi lentamente adicionado gota a gota a -78°C, e a reação foi agitada a -78°C por uma hora. Metoxibromometano (5,83 g, 46,7 mmols) foi lentamente adicionado e a mistura de reação foi agitada por mais uma hora. A reação foi saciada por adição de água (100 mL). A mistura de reação foi extraída com ace-tato de etila (100 mL x 3) e as fases orgânicas foram combinadas, se-cadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concen-trado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petróleo/acetato de etila,Rf = 0,3) para liberar 8-(metoximetil)-1,4-dioxaspiro[4,5]decano-8-carboxilato de etila (5,00 g, óleo amarelo), rendimento: 83%. 1H RMN: (400 MHz, Me- tanol-d4) δ 4,18 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 3,94 (s, 4H), 3,55 (s, 2H), 3,33 (s, 3H), 2,14-2,12 (m, 2H), 1,65-1,57 (m, 6H), 1,26 (t, J = 6,8 Hz, 3H). Etapa 2 1-(Metoximetil)-4-oxociclo-hexanocarboxilato de etila
[00143] 8-(Metoximetil)-1,4-dioxaspiro[4,5] decano-8-carboxilato de etila (5,00 g, 19,4 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (50 mL), ácido clorídrico diluído 1 N (10 mL) foi adicionado gota a gota a 0°C e agitado a 20°C por uma hora. A mistura foi resfriada para 0°C e saciada por adição de uma solução aquosa de bicarbonato de sódio (50 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (100 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada (100 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petró- leo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar 1-(metoximetil)-4-oxociclo- hexanocarboxilato de etila (3,00 g, óleo branco), rendimento: 73%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,25 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 3,52 (s, 2H), 3,34 (s, 3H), 2,52-2,30 (m, 6H), 1,82-1,78 (m, 2H), 1,30 (t, J = 6,8 Hz, 3H). Etapa 3 4-hidróxi-1-(metoximetil)-4-(trifluorometil)ciclo-hexanocarboxilato de etila
[00144] 1-(Metoximetil)-4-oxociclo-hexanocarboxilato de etila (3,00 g, 14,0 mmols), fluoreto de césio (243 mg, 1,40 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (50 mL) e em seguida trifluorometil trimetilsilano (3,98 g, 28,0 mmols) foi adicionado a 0°C. Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, o solução de reação foi reagida a 20°C por 6 horas. Em seguida ácido clorídrico diluido 4N (7 mL) foi adicionado. Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, a mistura foi reagida a temperatura ambiente por 6 horas. A reação foi saciada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (30 mL) e extraída com acetato de etila (100 mL x 3), o fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso e filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar 4-hidróxi-1-(metoximetil)-4-(trifluorometil)ciclo- hexanocarboxilato de etila (1,7 g, óleo incolor), rendimento: 43%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) 4,18-4,09 (m, 2H), 3,61 (s, 2H), 3,33 (s, 3H), 1,84-1,71 (m, 8H), 1,28-1,25 (m, 3H). Etapa 4 4-(Hidroximetil)-4-(metoximetil)-1-(trifluorometil)ciclo-hexanol
[00145] 4-hidróxi-1-(metoximetil)-4-(trifluorometil) ciclo- hexanocarboxilato de etila (1,50 g, 5,28 mmols) foi dissolvido em tetra- hidrofurano anidroso (50 mL), hidreto de alumínio e lítio (220 mg, 5,81 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi aquecida a 25°C e agitada por uma hora. A reação foi saciada por adição de água (20 mL), extraída com acetato de etila (50 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica- gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,2) para liberar 4- (hidroximetil)-4-(metoximetil)-1-(trifluorometil) ciclo-hexanol (1,20 g, óleo incolor), rendimento: 84%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 3,33-3,32 (m, 7H), 1,67-1,63 (m, 4H), 1,52-1,48 (m, 4H). Etapa 5 Metanossulfonato de (4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo- hexil)metila
[00146] 4-(Hidroximetil)-4-(metoximetil)-1-(trifluorometil)ciclo-hexanol (1,20 g, 4,95 mmols) foi dissolvido em diclorometano (20 mL), trietilami- na (851 mg, 9,91 mmols) e cloreto de metanossulfonila (851 mg, 7,43 mmols) foram adicionados a 0°C. A solução de reação foi reagida a 0°C por duas horas. A reação foi saciada por adição da solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (10 mL), extraída com diclorometano (50 mL x 3), a fase orgânicas foram combinadas, lavadas com solução de cloreto de sódio saturada(50 mL x 3), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar metanossulfonato de (4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo- hexil)metila (1,30 g, óleo amarelo), rendimento: 92%. Etapa 6 1-((4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00147] Metanossulfonato de (4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil) ci- clo-hexil)metila (300 mg, 1,05 mmol), 3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (189 mg, 1,05 mmol), iodeto de potássio (17,4 mg, 0,105 mmol) e carbonato de potássio (435 mg, 3,15 mmols) foram dis-solvidos em N,N-dimetilformamida anidroso (5 mL). A solução de reação foi aquecida a 150°C por micro-ondas e colocada para reagir por duas horas. A solução de reação foi resfriada para 20°C, filtrada, purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 1-((4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (12,0 mg, sólido branco), rendimento: 3%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,87 (s, 1H), 4,06 (s, 2H), 3,83 (s, 3H), 3,98 (s, 3H), 3,53 (s, 2H), 3,42 (s, 3H), 1,69-1,58 (m, 8H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 405, encontrado 405. Modalidade 18 1-((4-(3-Hidroxipentan-3-il)-ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 4-(hidroximetil)ciclo-hexanocarboxilato de metila
[00148] Ácido 4-(metoxicarbonil) ciclo-hexanocarboxílico (1,20 g, 6,45 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidroso (20 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso sulfeto de dimetil borano (10 M, 1,0 mL, 10,3 mmols) foi lentamente adicionado gota a gota a 0°C, o solução de reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora, lentamente aquecido a 25°C e em seguida agitados por mais uma hora. A reação foi saciada por adição de água (40 mL) e a solução de reação goi extraída com acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas, lavada sucessivamente com água e solução aquosa de cloreto de sódio saturado, secadas sobre sulfato de magnésio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 4-(hidroximetil)ciclo-hexanocarboxilato de metila (1,00 g, sólido branco), rendimento: 91%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 3,67 (s, 3H), 3,48-3,46 (m, 2H), 2,26-2,25 (m, 1H), 2,05-2,01 (m, 2H), 1,89-1,85 (m, 2H), 1,47-1,43 (m, 2H), 1,31 (s, 1H), 1,01-0,98 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 173, encontrado 173. Etapa 2 4-(((metilsulfonil)óxi)metil)ciclo-hexanocarboxilato de metila
[00149] 4-(hidroximetil)ciclo-hexanocarboxilato de metila (900 mg, 5,20 mmols) e trietilamina (1,58 g, 15,6 mmols) foram dissolvidos em diclorometano anidroso (5 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, cloreto de metanossulfonila (720 mg, 6,30 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi aquecida a 25°C e agitada por duas ho- ras. A reação foi saciada por adição de água (60 mL) e a solução de reação foi extraída com acetato de etila. As fases orgânicas foram combinadas, lavadas sucessivamente com água e solução aquosa de cloreto de sódio saturado, secadas sobre sulfato de magnésio anidro- so, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por placa TLC preparativa (3:1 éter de petró- leo/acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 4- (((metilsulfonil)óxi)metil)ciclo-hexanocarboxilato de metila (1,00 g, sólido branco), rendimento: 91%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 3,67 (s, 3H), 3,48-3,46 (m, 2H), 3,01 (s, 3H), 2,26-2,25 (m, 1H), 2,05-2,01 (m, 2H), 1,89-1,85 (m, 2H), 1,47-1,43 (m, 2H), 1,31 (s, 1H), 1,01-0,98 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 251, encontrado 251. Etapa 3 4-((3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil)ciclo-hexanocarboxilato de metila
[00150] 4-(((metilsulfonil)óxi)metil)ciclo-hexanocarboxilato de me- tila (350 mg, 2,32 mmols) foi dissolvido em 5 mL de N,N- dimetilformamida anidroso, sob atmosfera de nitrogênio gasoso, car-bonato de potássio (640 mg, 4,64 mmols), iodeto de potássio (38,0 mg, 0,230 mmol) e 2,6-hidróxi-3,7-dimetilpurina (501 mg, 2,80 mmols) foram adicionados a 25°C. A solução de reação foi agitada a 130°C por 3 horas. 40 mL de água foram adicionados na solução de reação, que foi extraída com acetato de etila, as fases orgânicas foram combinadas, lavadas sucessivamente com água e solução aquosa de cloreto de sódio saturado, secadas sobre sulfato de magnésio anidroso, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por placa TLC preparativa para liberar o produto 4-((3,7- dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)metil)ciclo- hexanocarboxilato de metila (400 mg, sólido branco), rendimento: 52%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 335, encontrado 335. Etapa 4 1-((4-(3-Hidroxipentan-3-il)-ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00151] 4-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil)ciclo-hexanocarboxilato de metila (100 mg, 0,30 mmol) foi dis-solvido em 5 mL tetra-hidrofurano anidroso, sob atmosfera de nitrogênio gasoso, solução de brometo de magnésio de etila (solução em éter 3 M, 1 mL, 3,00 mmols) foi lentamente adicionado gota a gota a -65°C e a reação foi agitada a -65 C por duas horas. A solução de reação foi adicionada com água (40 mL) e extraída com acetato de etila, as fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução aquosa de cloreto de sódio saturado (50 mL), secadas sobre sulfato de magnésio anidro- so, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1-((4-(3-hdroxipentan-3-il)-ciclo- hexil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (20,0 mg, sólido branco), rendimento: 19%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,52 (s, 1H), 4,00 (s, 3H), 3,90-3,88 (m, 2H), 3,59 (s, 3H), 1,80-1,74 (m, 6H)-1,45 (m, 4H), 1,11-1,10 (m, 4H), 0,86-0,82 (m, 6H). MS ESI calculada para [M+H]+ 363, encontrado 363. Modalidade 19 3,7-Dimetil-1-[[trans-4-(2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1-metil-etil)ciclo- hexil]metil]purina-2,6-diona Etapa 1 trans-4-hidroximetilciclo-hexanocarboxilato de metila
[00152] Monometil éster de ácido trans-Ciclo-hexano-1,4- dicarboxílico (5,00 g, 26,8 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (100 mL), sulfeto de dimetil borano (3,06 g, 40,3 mmols) foi adicionado a 0°C e a mistura de reação foi reagida a temperatura ambiente por duas horas. A reação foi saciada por adição de metanol saturado (50 mL). Após concetração, água (50 mL) foi adicionado à mistura, que foi em seguida extraída com acetato de etila (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar trans-4-hidroximetilciclo-hexanocarboxilato de metila (4,00g, óleo amarelo),rendimento: 87%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 3,67 (s, 3H), 3,43-3,38 (m, 2H), 2,31-2,54 (m, 1H), 2,031,98 (m, 2H), 1,90-1,82 (m, 2H), 1,45-1,38 (m, 3H), 1,03-0,99 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 173, encontrado 173. Etapa 2 4-(((metilsulfonil)óxi)metil)ciclo-hexanocarboxilato de trans-metila
[00153] trans-4-hidroximetilciclo-hexanocarboxilato de metila (3,00 g, 23,2 mmols) e trietilamina (7,05 g, 69,6 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (50 mL), e cloreto de metanossulfonila (7,98 g, 69,6 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi lentamente aque-cida em temperatura ambiente e agitada por duas horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio (50 mL). A mistura resultante foi extraída com diclorometano (20 mL x 3). As fa-ses orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (30 mL), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 4-(((metilsulfonil) óxi)metil)ciclo-hexanocarboxilato de trans-metil (5,80 g, óleo amarelo), rendimento: 99%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,10-4,03 (m, 2H), 3,65 (s, 3H), 3,07 (s, 3H), 2,42-2,31 (m, 1H), 2,10-2,03 (m 2H), 1,901,82 (m, 2H), 1,75-1,66 (m, 1H), 1,48-1,42 (m, 2H), 1,21-1,10 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 251, encontrado 251. Etapa 3 4-((3,7-Dimetil-2,6-dioxo-purin-1-il)metil)ciclo-hexanocarboxilato de trans-metila
[00154] 4-(((metilsulfonil)óxi)metil)ciclo-hexanocarboxilato de trans- Metila (1,00 g, 4,00 mmols), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (719 mg, 4,00 mmols), iodeto de potássio (66,0 mg, 0,397 mmol) e carbonato de potássio (1,10 g, 7,96 mmols) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (acetato de etila, Rf = 0,1) para liberar 4-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-purin-1- il)metil)ciclo-hexanocarboxilato de trans-metila (800 mg, sólido amarelo), rendimento: 60%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,90-3,82 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,51 (s, 3H) 2,33-2,25 (m, 1H), 2,03-1,98 (m, 2H), 1,80-1,74 (m, 3H), 1,42-1,36 (m, 2H), 1,21-1,10 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 335, encontrado 335. Etapa 4 1-(trans-4-Acetilciclo-hexilmetil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona
[00155] Ácido 4-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-purin-1-il)metil) ciclo- hexanocarboxílico de trans-metila (300 mg, 0,897 mmol) e cloridrato de O,N-dimetilhidroxilamina (114 mg, 1,17 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (25 mL), brometo de metilmagnésio (solução de éter a 3 M, 1,50 mL, 4,50 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi aquecida em temperatura ambiente lentamente e agitada por 12 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de cloreto de amônio saturado (10 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (30 mL), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar 1-(trans-4-acetilciclo-hexilmetil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (80,0 mg, óleo amarelo), rendimento: 29%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,92-3,84 (m, 2H), 3,55 (s, 3H), 2,42-2,33 (m, 1H), 2,15 (s, 3H), 1,981,88 (m, 2H), 1,85-1,75 (m, 3H), 1,32-1,10 (m, 4H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 319, encontrado 319. Etapa 5 3,7-Dimetil-1-[[trans-4-(2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1-metil-etil)ciclo- hexil]metil]-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00156] 1-(trans-4-Acetilciclo-hexilmetil)-3,7-dimetil-3,7-di-hidro- purina-2,6-diona (80,0 mg, 0,251 mmol), fluoreto de césio (11,5 mg, 0,753 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil- trifluorometil-silano (71,6 mg, 0,502 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitado por 12 horas, ácido clorídrico 1 N (10 mL) foi adicionado na solução de reação, que foi em seguida agitada em tem-peratura ambiente por uma hora, a reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgâ-nicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (30 mL), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. E o resíduo foi purificado por cro- matografia líquida de alta performance preparativa para liberar 3,7- dimetil-1-[[trans-4-(2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1-metil-etil)ciclo-hexil]metil]- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (35,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 70%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,88 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,53 (s, 3H), 1,96-1,67 (m, 6H), 1,22 (s, 3H), 1,151,06 (m, 4H). MS-ESI calcd.for [M+H]+ 389, encontrado 389. Modalidade 20 3,7-Dimetil-1-[trans-4-(2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1-trifluorometil- etil)ciclo-hexilmetil]-3,7-di-hidro-purina-2,6-diona Etapa 1 3,7-Dimetil-1-[trans-4-(2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1-trifluorometil- etil)ciclo-hexilmetil]-3,7-di-hidro-purina-2,6-diona
[00157] 4-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-purin-1-il)metil) ciclo- hexanocarboxilato de trans-metila (200 mg, 0,598 mmol), fluoreto de césio (45,4 mg, 0,299 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil-trifluorometil-silano (340 mg, 2,39 mmols) foi adicionado em temperatura ambiente e agitado por 12 horas, ácido clorídrico 1 N (10 mL) foi adicionado na solução de reação, que foi em seguida agitada em temperatura ambiente por uma hora, a reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (20 mL), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. E o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 3,7-dimetil-1-[trans-4-(2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1-trifluorometil- etil)ciclo-hexilmetil]-3,7-di-hidro-purina-2,6-diona (35,0 mg, sólido ama-relo), rendimento: 41%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,88 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,53 (s, 3H), 2,08-1,79 (m, 6H), 1,30-1,24 (m, 2H), 1,111,08 (m, 2H). MS-ESI calcd.for [M+H]+ 443, encontrado 443. Modalidade 21 1-[[trans-4-(1-hidroxiciclopropil)ciclo-hexil]metil]-3,7- dimetilpurina-2,6-diona Etapa 1 1-[[trans-4-(1-Hidroxiciclopropil)ciclo-hexil]metil]-3,7- dimetilpurina-2,6-diona
[00158] 4-[(3,7-dimetil-2,6-dioxo-purin-1-il)metil] ciclo- hexanocarboxilato de trans-metila (200 mg, 0,598 mmol), titanato de tetraisopropila (340 mg, 1,20 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (10 mL), brometo de etilmagnésio (solução de éter a 3 M, 0,39 mL, 1,17 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitados por 12 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de cloreto de amônio saturado (50 mL). A mistura resultante foi extraída com ace-tato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (30 mL), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 1-[[trans-4-(1-hidroxiciclopropil)ciclo- hexil) metil)-3,7-dimetilpurina-2,6-diona (70,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 35%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,87 (s, 1H), 3,98 (s, 3H), 3,88 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,53 (s, 3H), 1,79-1,71 (m, 5H), 1,29-1,07 (m, 5H), 0,600,57 (m, 2H), 0,42-0,39 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 333, encontrado 333. Modalidade 22 1-(2-(3-Etil-3-hidroxiciclo-hexil)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 Metanossulfonato de 2-(3-Etil-3-hidroxiciclo-hexil)etila
[00159] 1-Etil-3-(2-hidroxietil)ciclo-hexanol (450 mg, 2,61 mmols) e diisopropiletilamina (500 mg, 3,92 mmols) foram dissolvidos em diclo- rometano (10 mL), e cloreto de metanossulfonila (600 mg, 5,40 mmols) foi lentamente adicionado a 0°C. A solução de reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A reação foi saciada por adição de água e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi con-centrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel (10:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar o produto metanossulfonato de 2-(3-etil-3- hidroxiciclo-hexil)etila (450 mg, óleo amarelo), rendimento: 69%. MS- ESI calcd. [M+H]+ 251, encontrado 251. Etapa 2 1-(2-(3-Etil-3-hidroxiciclo-hexil)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00160] Metanossulfonato de 2-(3-Etil-3-hidroxiciclo-hexil)etila (200 mg, 0,790 mmol),3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (144 mg, 0,790 mmol) e carbonato de potássio(220 mg, 1,60 mmol), iodeto de potássio (13,1 mg, 0,0790 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (3 mL). A solução de reação foi aquecida a 130°C e agitada por 3 horas. A solução de reação foi resfriada para 25°C, na qual solução salina saturada foi adicionada, e em seguida extraída com acetato de etila (40 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1-(2-(3-etil-3-hidroxiciclo-hexil)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (70,0 mg, sólido branco), rendimento: 26%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,86 (s, 1H), 4,09-3,94 (m, 5H), 3,52 (s, 3H), 1,88-1,84 (m, 1H), 1,80-1,40 (m, 10H), 1,26-1,16 (m, 1H), 1,02-0,95 (m, 1H), 0,91 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS-ESI calculada para [M+H-18]+ 317, encontrado 317. Modalidade 23 Etapa 1 3-trifluorometil-3-trimetilsililóxi-ciclo-hexanocarboxilato de etila
[00161] etil-3-oxociclo-hexanocarboxilato (1,00 g, 5,88 mmols), fluo- reto de césio (446 mg, 2,94 mmols) foram dissolvidos em tetra- hidrofurano (30 mL), trimetil-trifluorometil-silano (1,67 g, 11,7 mmols) foi adicionado em temperatura ambiente e agitados por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL). A mistura resultante extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (60 mL), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 3-trifluorometil-3-trimetilsilóxi-ciclo- hexanocarboxilato de etila (1,40 g, óleo amarelo), rendimento: 76%. MS-ESI calculada para [M+H]+313, encontrado 313. Etapa 2 (3-Trifluorometil-3-trimetilsilaniloxiciclo-hexil)metanol
[00162] 3-trifluorometil-3-trimetilsililóxi-ciclo-hexanocarboxilato de etila (1,00 g, 3,20 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (10 mL), e tetra-hidropirano de lítio (243 mg, 6,40 mmols) foi adicionado a 0°C por uma hora. A reação foi saciada por adição de água (10 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar (3-trifluorometil-3-trimetilsilaniloxiciclo-hexil) metanol (800 mg, óleo incolor), rendimento 92%. MS-ESI calculada para [M+H]+271, encontrado 271. Etapa 3 metanossulfonato de [3-(Trifluorometil)-3-trimetilsililoxiciclo-hexil) de metila
[00163] (3-Trifluorometil-3-trimetilsilaniloxiciclo-hexil)metanol (850 mg, 3,14 mmols) e trietilamina (953 mg, 9,42 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (15 mL), cloreto de metanossulfonila (719 mg, 6,28 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi lentamente aquecido a temperatura ambiente e agitado por duas horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio (10 mL). A mistura resultante foi extraída com diclorometano (20 mL x3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (20 mL), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar metanos- sulfonato de [3-(trifluorometil)-3-trimetilsililoxiciclo-hexil)metila (900 mg, óleo amarelo), rendimento: 82%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,36-4,32 (m, 1H), 4,17-4,13 (m, 1H), 3,08 (s, 3H), 2,12-1,60 (m, 9H), 0,16 (s, 9H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 349, encontrado 349. Etapa 4 3,7-Dimetil-1-[[3-(trifluorometil)-3-trimetilsililóxi-ciclo- hexil]metil]purina-2,6-diona
[00164] Metanossulfonato de [3-(trifluorometil)-3-trimetilsililoxiciclo- hexil)metila (200 mg, 0,573 mmol),3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (103 mg, 0,574 mmol), iodeto de potássio (28,6 mg, 0,172 mmol) e carbonato de potássio (374 mg, 1,15 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (30 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta per-formance preparativa para liberar 3,7-dimetil-1-[[3-(trifluorometil)-3- trimetilsililóxi-ciclo-hexil]metil]purina-2,6-diona (150 mg, sólido amarelo), rendimento: 60%. MS-ESI calculada para [M+H]+433, encontrado 433. Etapa 5
[00165] 3,7-Dimetil-1-[[3-(trifluorometil)-3-trimetilsililóxi-ciclo-hexil] metil]purina-2,6-diona (200 mg, 0,462 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (10 mL), ácido clorídrico 1 N (10 mL) foi adicionado e a mis-tura resultante foi agitada em temperatura ambiente por uma hora, a reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL).A mistura de reação foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1 (10,0 mg, sólido amarelo) (isômero 1, o primeiro pico), rendimento: 6%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,87 (s, 1H), 3,97 (s, 3H), 3,89-3,83 (m, 2H), 3,52 (s, 3H), 2,23-2,22 (m, 1H), 1,761,07 (m, 8H). MS-ESI calculada para [M+H]+361, encontrado 361.
[00166] Produto 2 (85,0 mg, sólido amarelo) (isômero 2, o segundo pico), rendimento: 51%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,87 (s, 1H), 4,31-4,26 (m, 1H), 3,99-3,95 (m, 4H), 3,55 (s, 3H), 2,26-1,88 (m, 3H), 1,79-1,47 (m, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 361, encontrado 361. Modalidade 24 1-((5-Hidróxi-5-(trifluorometil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 (3,4-Di-hidro-2H-piran-2-il) metanol
[00167] 3,4-Di-hidro-2H-piran-2-carbaldeido (3,00 g, 26,7 mmols) foi dissolvido em metanol (20 mL), boroidreto de sódio (2,02 g, 53,5 mmols) foi adicionado a 0°C por duas horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de cloreto de amônio saturado (30 mL). A mistura resultante foi extraída com diclorometano (20 mL x 3), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar (3,4-di-hidro-2H-piran-2-il) metanol (1,50 g, óleo amarelo), rendimento: 49%,1H-RMN: (400 MHz, Metanol- d4) δ 6,40 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 4,71-4,68 (m, 1H), 3,86-3,83 (m, 1H), 3,82-3,61 (m, 2H), 2,13-2,12 (m, 1H), 2,10-2,08 (m, 1H), 2,02-2,01 (m, 1H), 1,68-1,63 (m, 1H). Etapa 2 Metanossulfonato de (3,4-Di-hidro-2H-piran-2-il) metila
[00168] (3,4-Di-hidro-2H-piran-2-il) metanol (1,50 g, 13,1 mmols) e trietilamina (2,66 g, 26,3 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (20 mL), e cloreto de metanossulfonila (3,01 g, 26,3 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi lentamente aquecido a temperatura ambiente e agitado por duas horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio (10 mL). A mistura resultante foi extraída com diclorometano (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar (3,4-di-hidro-2H-piran-2-il) metilmetanos- sulfonato (1,70 g, óleo amarelo), rendimento: 67%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 193, encontrado 193. Etapa 3 1-((3,4-Di-hidro-2H-piran-2-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona
[00169] (3,4-Di-hidro-2H-piran-2-il)metilmetanossulfonato (1,70 g, 8,84 mmols), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-diona (1,59 g, 8,84 mmols), io- deto de potássio (146 mg, 0,884 mmol) e carbonato de potássio (2,44 g, 17,7 mmols) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (50 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar 1-((3,4-di-hidro-2H-piran-2-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6-(3H,7H)-diona (1,30 g, sólido amarelo), rendimento: 53%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 277, encontrado 277. Etapa 4 1-((5-Hidroxitetra-hidro-2H-piran-2-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6-(3H,7H)-diona
[00170] 1-((3,4-Di-hidro-2H-piran-2-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6-(3H,7H)-diona (600 mg, 2,17 mmols) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (30 mL), e sulfeto de dimetil borano (825 mg, 10,7 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi lentamente aquecida em temperatura ambiente e agitada por 12 horas, solução aquosa de hi-dróxido de sódio 3 N (30 mL) e peróxido de hidrogênio (10 mL) foram adicionados e a reação foi continuada por uma hora. A reação foi saciada por adição de metanol (10 mL), lavada com solução aquosa de tiossulfato de sódio (30 mL) e extraída com diclorometano (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. E o resíduo foi purificado por placa TLC preparativa (20:1 diclorometano/metanol, Rf = 0,3)1-((5- hidroxitetra-hidro-2H-piran-2-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (130 mg, óleo amarelo), rendimento: 20%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 4,25-4,23 (m, 1H), 4,20 (s, 3H), 3,98-3,67 (m, 5H), 3,54 (s, 3H), 2,10-1,77 (m, 2H), 1,49-1,31 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 295, encontrado 295. Etapa 5 3,7-Dimetil-1-((5-oxotetra-hidro-2H-piran-2-il)metil)-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona
[00171] 1-((5-Hidroxitetra-hidro-2H-piran-2-il)metil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6-(3H,7H)-diona (130 mg, 0,441 mmol) foi dissolvido em diclo- rometano (10 mL), periodinano de Dess-Martin (138 mg, 1,33 mmol) foi adicionado, e em seguida reagido a 25°C por 3 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (20 mL), a mistura resultante foi extraída com diclorometano (10 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por placa TLC preparativa (20:1 diclorometano/metanol, Rf = 0,4) para liberar 3,7-dimetil-1-((5-oxotetra-hidro-2H-piran-2-il)metil)-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (60,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 47%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 293, encontrado 293. Etapa 6 1-((5-Hidróxi-5-(trifluorometil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00172] 3,7-Dimetil-1-((5-oxotetra-hidro-2H-piran-2-il)metil)-1H- purina-2,6-(3H,7H)-diona (60,0 mg, 0,205 mmol), fluoreto de césio (6,24 mg, 0,0411 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil trifluorometilsilano (87,5 mg, 0,615 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitados por 5 horas, ácido clorídrico 1 N (10 mL) foi adicionado e agitados a temperatura ambiente por uma hora. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 1-((5-hidróxi-5-(trifluorometil)tetra-hidro-2H-piran-2-il)-3,7- dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (15,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 30%, 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,28 (s, 1H), 4,39-4,10 (m, 2H), 4,05 (s, 3H), 3,93-3,89 (m, 2H), 3,55 (s, 3H), 3,32-3,27 (m, 1H), 1,89-1,65 (m, 4H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 363, encontrado 363. Modalidade 25 1-(4-(3-Hidroxipentan-3-il)benzil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona Etapa 1 4-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil)benzoato de metila
[00173] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, 3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H, 7H)-diona (180 mg, 1,00 mmol), 4-(bromometil)benzoato de metila (251 mg, 1,10 mmol), iodeto de potássio (55,0 mg, 0,33 mmol) e carbonato de potássio (179 mg, 1,30 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida anidroso (4 mL) a 25°C, e em seguida aquecidos a 110°C e agitados por 3 horas. Após arrefecimento a 25°C, a mistura de reação foi diluída com água e extraída com acetato de etila (30 mL x 2). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 4-((3,7- dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)metil)benzoato de metila (300 mg, sólido branco), rendimento: 91%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 329, encontrado 329. Etapa 2 1-(4-(3-Hidroxipentan-3-il)benzil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona
[00174] 4-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil) benzoato de metila (200 mg, 0,610 mmol) foi dissolvido em te- tra-hidrofurano anidroso (3 mL). Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, brometo de etilmagnésio (3 M solução de éter, 1,2 mL, 3,60 mmols) foi adicionado gota a gota a -78°C. A solução de reação foi agitada a essa temperatura por 0,5 hora e espontaneamente aquecida a 25°C e con-tinuada por uma hora, e a reação foi continuada por uma hora. Solução aquosa de cloreto de amônio saturado (5 mL) foi adicionado e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (30 mL *2). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio ani- droso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por placa TLC preparativa (1:3 éter de petró- leo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 1-(4-(3-hidroxipentan-3- il)benzil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (190 mg, sólido branco), rendimento: 87%, 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,85 (s, 1H), 7,32 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,28 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,25 (s, 2H), 3,96 (s, 3H), 3,52 (s, 3H), 1,82-1,72 (m, 4H), 0,69 (t, J = 7,2 Hz, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 357, encontrado 357. Modalidade 26 3,7-dimetil-1-(3-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)benzil)-1H- purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 3-acetilbenzoato de etila
[00175] Ácido 3-acetilbenzoico (500 mg, 3,05 mmols) foi dissolvido em N,N-dimetilformamida (20 mL), iodeto de etila (475 mg, 3,05 mmols) e carbonato de potássio (632 mg, 4,57 mmols) foram adicionados em temperatura ambiente. Após agitar a temperatura ambiente por duas horas, a solução de reação foi concentrada e diluída com acetato de etila (30 mL), a fase orgânica foi lavada com água (20 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (5:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 3-acetilbenzoato de etila (530 mg, sólido branco), rendimento: 90%. 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ 8,60 (s, 1H), 8,24 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,56 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,41 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,66 (s, 3H), 1,42 (t, J = 7,2 Hz, 3H).MS- ESI calculada para [M+H]+ 193, encontrado 193. Etapa 2 3-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)benzoato de etila
[00176] 3-Acetilbenzoato de etila (500 mg, 2,60 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (20 mL), trifluorometiltrimetilsilano (370 mg, 2,60 mmols) e fluoreto de césio (79,0 mg, 0,520 mmol) foram adicionados em temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente por 12 horas, diluída com acetato de etila (30 mL), a fase orgânica foi lavada com água (20 mL x 2), secada com sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (2:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 3-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il) benzoato de etila (600 mg, sólido amarelo), rendimento: 88%,1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 8,26 (s, 1H), 8,05 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,39 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,82 (s, 3H), 1,40 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 263, encontrado 263. Etapa 3 1,1,1-Triflúor-2-(3-hidroximetil)fenil)propan-2-ol
[00177] 3-(1,1,1-Triflúor-2-hidroxipropan-2-il)benzoato de etila (500 mg, 1,91 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (20 mL), e hidreto de alumínio e lítio (108 mg, 2,87 mmols) foi adicionado à solução de reação a 0°C, a mistura foi agitada em temperatura ambiente por duas horas, água (0,1 mL), hidróxido de sódio a 15% (0,1 mL) e água (0,3 mL) foram adicionados separadamente à solução de reação e agitada por 20 minutos. A solução de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL) e a fase orgânica foi lavada com água (20 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 1,1,1-triflúor-2-(3- hidroximetil)fenil)propan-2-ol (400 mg, sólido amarelo), rendimento: 95%. 1H-RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,62 (s, 1H), 8,05 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,41-7,37 (m, 2H), 4,73 (s, 2H), 1,80). MS-ESI calculada para [M+H]+ 221, encontrado 221. Etapa 4 Metanossulfonato de 3-(1,1,1-Triflúor-2-hidroxipropan-2-il)benzila
[00178] 1,1,1-Triflúor-2-(3-hidroximetil)fenil)propan-2-ol (400 mg, 1,82 mmol) e trietilamina (275 mg, 2,72 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (20 mL), cloreto de metanossulfonila (250 mg, 2,18 mmols) foi adicionado à solução de reação a 0°C, agitados por duas horas. A solução de reação foi diluída por diclorometano (30 mL), e a fase orgânica foi lavada com água (20 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar metanossulfonato de 3-(1,1,1-triflúor-2- hidroxipropan-2-il)benzila (500 mg, óleo amarelo), rendimento: 92%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 299, encontrado 299. Etapa 5 3,7-Dimetil-1-(3-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)benzil)-1H- purina-2,6-(3H, 7H)-diona
[00179] Metanossulfonato de 3-(1,1,1-Triflúor-2-hidroxipropan-2- il)benzila (100 mg, 0,335 mmol) e 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H, 7H)- diona (60,0 mg, 0,335 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (20 mL), carbonato de potássio (70,0 mg, 0,502 mmol) e iodeto de potássio (6,00 mg, 0,0335 mmol) foram adicionados em temperatura ambiente. Após agitar a 100°C por duas horas, a mistura de reação foi arrefecida e concentrada, diluída com acetato de etila (30 mL), a fase orgânica foi la-vada com água (20 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, fil-trada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi pu-rificado por cromatografia líquida de alta performance para liberar 3,7- dimetil-1-(3-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)benzil)-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (30,0 mg, sólido branco), rendimento: 23%,1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,90 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,49 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,38-7,32 (m, 2H), 5,21 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 1,71 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 383, encontrado 383. Modalidade 27 3,7-Dimetil-1-(4-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)fenil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 4-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)benzoato de metila
[00180] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, 4-acetilbenzoato de metila (10,0 g, 56,1 mmols) e trimetil(trifluorometil)silano (16,0 g, 112 mmols) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano anidroso (150 mL) a 0°C, fluoreto tetrabutilamônio (22,0 g, 84,2 mmols) foi lentamente adicionado. A reação foi lentamente aquecida em temperatura ambiente e agitada durante a note. A reação foi saciada por adição de água (50 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (50 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas sucessivamente com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado e solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto 4-(1,1,1- triflúor-2-hidroxipropan-2-il)benzoato de metila (7,00 g, líquido amarelo), rendimento: 50%,1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 8,04 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,68 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,27 (s, 1H), 1,80 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 249, encontrado 249. Etapa 2 1,1,1-Triflúor-2-(4-(hidroximetil)fenil)propan-2-ol
[00181] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, hidreto de alumínio e lítio (1,61 g, 42,3 mmols) foi lentamente adicionado a uma solução de 4- (1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)benzoato de metila (7,00 g, 28,2 mmols) em tetra-hidrofurano (150 mL). A solução de reação foi agitada a 0°C por 3 horas. Água (1,60 mL), solução dehidróxido de sódio a 15% (1,60 mL) e água (4,80 mL) foram lentamente adicionados sucessiva-mente a 0°C. Filtrada e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para liberar 1,1,1-triflúor-2-(4-(hidroximetil)fenil)propan-2-ol(2,40 g, líquido amarelo), rendimento: 93%. 1H-RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,55 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 4,66 (s, 2H), 3,37 (s, 1H) (S, 1H), 1,75 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 221, encontrado 221. Etapa 3 Metanossulfonato de 4-(1,1,1-Triflúor-2-hidroxipropan-2-il)fenila
[00182] 1,1,1-Triflúor-2-(4-(hidroximetil)fenil)propan-2-ol (5,80 g, 26,3 mmols) e diisopropiletilamina (10,2 g, 79,0 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (80 mL), cloreto de metanossulfonila (4,53 g, 39,5 mmols) foi lentamente adicionado a 0°C. A solução de reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de cloreto de amônio saturado (50 mL) e extraída com diclorometano (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (5:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar o produto meta- nossulfonato de 4-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)fenil (3,45 g, óleo amarelo), rendimento: 44%. 1HRMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,66 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,46 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,26 (s, 2H), 2,96 (s, 3H), 2,84 (s, 1H), 1,80 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 299, encontrado 299. Etapa 4 3,7-Dimetil-1-(4-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)fenil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00183] Metanossulfonato de 4-(1,1,1-Triflúor-2-hidroxipropan-2- il)fenila (1,95 g, 10,8 mmols), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (652 mg, 3,62 mmols), carbonato de potássio (2,99 g, 21,6 mmols) e iodeto de potássio (180 mg, 1,08 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (30 mL). A solução de reação foi aquecida a 130°C e agitada por 3 horas. A solução de reação foi resfriada para temperatura ambiente, solução salina saturada (20 mL) foi adicionado e extraída com acetato de etila (100 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, isolado e purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel (1:2 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar o produto 3,7-dimetil-1-(4-(1,1,1-triflúor-2- hidroxipropan-2-il)fenil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (1,27 g, sólido branco), rendimento: 31%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,57-7,55 (m, 5H), 5,20 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 2,60 (s, 1H), 1,74(s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 383, encontrado 383. Modalidade 28 Etapa 1 6-bromonicotinato de metila
[00184] Ácido 6-bromonicotínico (1,00 g, 4,95 mmols) foi dissolvido em N,N-dimetilformamida (30 mL), iodometano (0,703 g, 4,95 mmols) e carbonato de potássio(1,03 g, 7,43 mmols) foram adicionados. A solução de reação foi agitada a 20°C por 12 horas. A solução de reação foi diluída com água (100 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL x 3), o fase orgânica doi secada sobre sulfato de sódio anidroso e filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (2:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 6-bromonicotinato de metila (1,00 g, sólido branco), rendimento: 94%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 216 e 218, encontrado 216 e 218. Etapa 2 (6-Bromopiridin-3-il) metanol
[00185] 6-bromonicotinato de metila (1,00 g, 4,63 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (20 mL), e hidreto de alumínio e lítio (351 mg, 9,26 mmols) foi adicionado a 0° e deixado reagir por uma hora. A reação foi saciada por adição de água (10 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio ani- droso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar (6- bromopiridin-3-il) metanol (600 mg, óleo amarelo), rendimento: 69%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 188 e 190, encontrado 188 e 190. Etapa 3 Metanossulfonato de (6-Bromopiridin-3-il)metila
[00186] (6-Bromopiridin-3-il)metanol (1,00 g, 5,32 mmols) e trietila- mina (1,18 g, 11,6 mmols) foram dissolvidos em diclorometano (20 mL) e cloreto de metanossulfonila (1,38 g, 12,0 mmols) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente por duas horas, diluída com diclorometano (20 mL), lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (30 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (4:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar metanossulfonato de (6-bromopiridin-3-il)metila (1,20 g, óleo incolor), rendimento: 85%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 266 e 268, encontrado 266 e 268. Etapa 4 1-((6-Bromopiridin-3-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona
[00187] Metanossulfonato de (6-bromopiridin-3-il)metila (500 mg, 1,88 mmol) foi dissolvido em N,N-dimetilformamida (20 mL), 3,7- dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (338 mg, 1,88 mmol), carbonato de potássio (389 mg, 2,82 mmols) e iodeto de potássio (184 mg, 1,11 mmol) foram adicionados na solução de reação a temperatura ambiente. A solução de reação foi aquecida a 100°C e reagida por duas horas, em seguida diluída com acetato de etila (20 mL) e a fase orgânica foi lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (20 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 1-((6-bromopiridin-3-il)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (300 mg, sólido amarelo), rendimento: 46%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 350 e 352, encontrado 350 e 352. Etapa 5 1-((6-Acetilpiridin-3-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00188] 1-((6-Bromopiridin-3-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (2,00 g, 5,71 mmols) foi dissolvido em 1,4-dioxano (50 mL), tributil(1-etoxivinil)estanano (8,25 g, 22,8 mmols) e tetra- cis(trifenilfosfino)paládio (329 mg, 0,285 mmol) foram adicionados na solução de reação a temperatura ambiente. A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por duas horas. A solução de reação foi resfriada para temperatura ambiente, diluída com acetato de etila (70 mL), lavadas com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (20 mL) (30 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, concentrado, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (3:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 1-((6-acetilpiridin-3-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (1,00 g, sólido amarelo), rendimento: 56%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 8,83 (s, 1H), 8,00-7,98 (m, 1H), 7,95-7,93 (m, 1H), 7,54 (s, 1H), 5,27 (s, 2H) 4,01 (s, 3H), 3,59 (s, 3H), 2,71 (s, 3H). MS-ESI calcu- lada para [M+H]+ 314, encontrado 314. Etapa 6 3,7-Dimetil-1-((6-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona
[00189] 1-((6-Acetilpiridin-3-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (150 mg, 0,478 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (30 mL), trifluorometiltrimetilsilano (102 mg, 0,718 mmol) e fluoreto de césio (73,0 mg, 0,478 mmol) foram adicionados em temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente por 12 horas, fluoreto tetrabutilamônio (50,0 mg, 0,207 mmol) foi adicionado. Após agitar a temperatura ambiente por 30 minutos, a mistura de reação foi diluída por acetato de etila (20 mL) e a fase orgânica foi lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (20 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance para liberar 3,7-dimetil-1-((6-(1,1,1-triflúor- 2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (50 mg, sólido branco), rendimento: 27%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 8,76 (s, 1H), 7,99 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,44 (d, J = 8,0 Hz, 1H) 5,23 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,58 (s, 3H), 1,68 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 384, encontrado 384. Modalidade 29 3,7-Dimetil-1-(([[5-(2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1-metil-etil)-2-piridil]metil]- diona Etapa 1 1-(6-(Bromometil)-3-piridil)etanona
[00190] 1-(6-Metil-3-piridil)etanona (500 mg, 3,70 mmols), N- bromossuccinimida (658 mg, 3,70 mmols), azodiisobutironitrila (182 mg, 1,11 mmol) foram dissolvidos em tetracloreto de carbono (20 mL), que foi reagida a 90°C por 12 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (30 mL). A mistura foi extraída com diclorometano (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 1-[6-(bromometil)-3-piridil]etanona (125 mg, óleo amarelo), rendimento: 16%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 214, 216, encontrado 214,216. Etapa 2 1-((5-Acetil-2-piridil)metil)-3,7-dimetilpurina-2,6-diona
[00191] 1-(6-(Bromometil)-3-piridil)etanona (100 mg, 0,467 mmol), 3,7-dimetilpurina-2,6-diona (84,2 mg, 0,467 mmol), iodeto de potássio (7,70 mg, 0,0467 mmol) e carbonato de potássio (194 mg, 1,40 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 1-((5-acetil-2- piridil)metil)-3,7-dimetilpurina-2,6-diona (50,0 mg, sólido amarelo), ren- dimento: 34%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 314, encontrado 314. Etapa 3 3,7-Dimetil-1-[[5-(2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1-metil-etil)-2- piridil]metil]purina-2,6-diona
[00192] 1-((5-Acetil-2-piridil)metil)-3,7-dimetilpurina-2,6-diona (50,0 mg, 0,159 mmol), fluoreto de césio (24,2 mg, 0,159 mmol) foram dis-solvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil-trifluorometil-silano (113 mg, 0,798 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitada por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concen-trado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 3,7-dimetil-1-[[5- (2,2,2-triflúor-1-hidróxi-1-metil-etil)-2-piridil]metil]purina-2,6-diona (10,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 16%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol- d4) δ 8,96 (s, 1H), 8,75 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 5,55 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 1,86 (s, 3H). MS- ESI calculada para [M+H]+ 384, encontrado 384. Modalidade 30 3,7-Dimetil-1-((5-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)pirazin-2-il)- purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 N-Metóxi-N,5-dimetilpirazina-2-carboxamida
[00193] Ácido 5-metilpirazina-2-carboxílico (2,00 g, 14,5 mmol), 1- hidroxibenzotriazol (391 mg, 2,90 mmols), cloridrato de 1-(3- dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (1,69 g, 17,4 mmols) foram dis-solvidos em diclorometano anidroso (10 mL) e triclorometano (30 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, trietilamina (1,76 g, 17,4 mmols) foi lentamente adicionado a 0°C e a mistura de reação foi agitada a 25°C por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (50 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (50 mL x 3) e as fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (20:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,1) para liberar o N-metóxi-N,5- dimetilpirazina-2-carboxamida (2,00 g, óleo amarelo), rendimento: 76%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 8,80 (s, 1H), 8,45 (s, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,40 (s, 3H), 2,61 (s, 3H). Etapa 2 1-(5-Metilpirazin-2-il)etanona
[00194] N-metóxi-N,5-dimetilpirazina-2-carboxamida (1,50 g, 8,28 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (30 mL), brometo de metil- magnésio (3 M solução de éter, 13,3 mL, 39,9 mmols) foi adicionado a 0°C, seguido por agitação a 25°C por uma hora. A mistura foi resfriada para 0°C e a reação foi saciada por adição de água (10 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (30 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (20:1 éter de petró- leo/acetato de etila, Rf = 0,2) para liberar 1-(5-metilpirazin-2-il)etanona (700 mg, óleo amarelo), rendimento: 62%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 137, encontrado 137. Etapa 3 1-(5-(Bromometil)pirazin-2-il)etanona
[00195] 1-(5-Metilpirazin-2-il)etanona (700 mg, 5,14 mmols) foi dissolvido em tetracloreto de carbono (20 mL), e em seguida azobisisobu- tironitrila (169 mg, 1,03 mmol) e N-bromossuccinimida (1,14 g, 6,43 mmols) foram adicionados. A solução de reação foi reagida a 100°C sob atmosfera de nitrogênio gasoso por 5 horas. A mistura de reação foi diretamente filtrada e concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (20:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf=0,5) para liberar 1-(5- (bromometil)pirazina-2-il)etanona (300 mg, óleo amarelo), rendimento: 27%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 215 e 217, encontrado 215 e 217. Etapa 4 1-((5-Acetilpirazin-2-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona
[00196] 1-(5-(bromometil)pirazin-2-il)etanona (300 mg, 1,40 mmol), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (251 mg, 1,40 mmol), iodeto de potássio (23,2 mg, 0,140 mmol) e carbonato de potássio (578 mg, 4,19 mmols) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida anidroso (20 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e reagida por 3 horas. A solução de reação foi resfriada para 20°C, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 1-((5- acetilpirazin-2-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (300 mg, sólido amarelo), rendimento: 68%. MS ESI calculada para [M+H]+ 315, encontrado 315. Etapa 5 3,7-Dimetil-1-((5-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)pirazin-2-il)-1H- purina-2,6(3H, 7H)-diona
[00197] 1-((5-Acetilpirazin-2-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (300 mg, 0,954 mmol), fluoreto de césio (14,5 mg, 0,0954 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano anidroso (10 mL). Em seguida trifluorometil trimetilsilila (407 mg, 2,86 mmols) foi adicionado. Sob at-mosfera de nitrogênio gasoso, o solução de reação foi reagida a 25°C por duas horas. Em seguida ácido clorídrico (4 N, 4 mL) foi adicionado. Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, a mistura foi reagida a temperatura ambiente por uma hora. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (10 mL), a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 x 3 mL), o fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 3,7-dimetil-1-((5-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)pirazin- 2-il)-1H-purina-2,6(3H, 7H)-diona (100 mg, sólido branco), rendimento: 40%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,85 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 7,92 (s, 1H), 5,40 (s, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 1,78 (s, 3H). MS ESI calculada para [M+H]+ 385, encontrado 385. Modalidade 31 1-((3-(1,1,1,3,3,3-Hexafluoro-2-hidroxipropan-2-il)isoxazol-5-il)-3,7- dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 5-(bromometil)isoxazol-3-carboxilato de metila
[00198] Etil éster de ácido 5-metilisoxazol-3-carboxílico de metila (5,00 g, 35,4 mmols), N-bromossuccinimida (6,31 g, 35,4 mmols), pe- róxido de benzoíla (858 mg, 3,54 mmols) foram dissolvidos em tetracloreto de carbono (20 mL), que foi em seguida reagida a 80°C por 12 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de tios- sulfato de sódio saturada (30 mL). A mistura foi extraída com dicloro- metano (20 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (3:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar etil éster de ácido 5- (bromometil)isoxazol-3-carboxílico de metila (2,00 g, óleo amarelo), rendimento: 26%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 6,88 (s, 1H), 4,73 (s, 2H), 3,97 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 220, 222, encontrado 220, 222. Etapa 2 5-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil)carboxilato de metila
[00199] 5-(bromometil) isoxazol-3-carboxilato de etila (2,00 g, 9,09 mmols), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (1,64 g, 9,09 mmols), iodeto de potássio (151 mg, 0,909 mmol) e carbonato de potássio(2,51 g, 18,2 mmols) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (50 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. Em se-guida A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar 5-((3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra- hidro-1H-purin-1-il)metil) carboxilato de metila (1,70 g, sólido amarelo), rendimento: 59%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,06 (s, 1H), 6,82 (s, 1H), 5,22 (s, 2H), 3,87 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 3,45 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 320, encontrado 320. Etapa 3 1-((3-(1,1,1,3,3,3-Hexafluoro-2-hidroxipropan-2-il)isoxazol-5-il)-3,7- dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00200] 5-((3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)metil) carboxilato de metila (200 mg, 0,626 mmol), fluoreto de césio (95,0 mg, 0,626 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil trifluorometilsilano (445 mg, 3,13 mmols) foi adicionado em temperatura ambiente e a mistura resultante foi agitada por 12 horas, ácido clorídrico 1 N (10 mL) foi adicionado e amistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por uma hora. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada (30 mL), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por croma- tografia líquida de alta performance preparativa para liberar 1-((3- (1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-hidroxipropan-2-il)isoxazol-5-il)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (10,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 4%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,95 (s, 1H), 6,52 (s, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,57 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 428, encontrado 428. Modalidade 32 3,7-Dimetil-1-((3-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)isoxazol-5-il)- 1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(5-Metilisoxazol-3-il)etanona
[00201] 5-Metilisoxazol-3-carboxilato de metila (5,00 g, 35,4 mmols) e trietilamina (21,5 g, 213 mmols) foram dissolvidos em tetra- hidrofurano (80 mL), brometo de metilmagnésio (solução de éter a 3 M, 35 mL, 105 mmols) foi adicionado a 0°C, a mistura resultante foi reagida por 3 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de cloreto de amônio saturado (30 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (30 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (3:1 éter de petró- leo/ acetato de etila, Rf = 0,7) para liberar 1-(5-metilisoxazol-3- il)etanona (1,00 g, óleo amarelo), rendimento: 23%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 6,39 (s, 1H), 2,58 (s, 3H), 2,49 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 126, encontrado 126. Etapa 2 1-(5-(Bromometil)isoxazol-3-il)etanona
[00202] 1-(5-Metilisoxazol-3-il)etanona (100 mg, 0,799 mmol), N- bromossuccinimida (142 mg, 0,799 mmol), peróxido de benzoíla (19,3 mg, 0,0800 mmol) foram dissolvidos em tetracloreto de carbono (10 mL), que foram em seguida reagidos a 90°C por 12 horas. A reação foi saciada por adição de solução de tiossulfato de sódio saturada (30 mL). A mistura foi extraída com diclorometano (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 1-(5-(bromometil)isoxazol-3-il)etanona (150 mg, óleo amarelo), rendimento: 93%. MS-ESI calcd/ por [M+H]+ 204 e 206, encontrado 204 e 206. Etapa 3 1-((3-Acetilisoxazol-5-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)- diona
[00203] 1-(5-(Bromometil)isoxazol-3-il)etanona (150 mg, 0,735 mmol), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (132 mg, 0,735 mmol), iodeto de potássio (61,0 mg, 0,367 mmol) e carbonato de potássio (305 mg, 2,21 mmols) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 1-((3-acetilisoxazol-5-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)- diona (50,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 22%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 304, encontrado 304. Etapa 4 3,7-Dimetil-1-((3-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)isoxazol-5-il)- 1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00204] 1-[(3-Acetilisoxazol-5-il)metil]-3,7-dimetil-purina-2,6- (3H,7H)-diona (50,0 mg, 0,164 mmol), fluoreto de césio (25,0 mg, 0,164 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil trifluo- rometilsilano (70,3 mg, 0,494 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e a mistura resultante foi agitada por 12 horas, ácido clorídrico 1 N (10 mL) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por uma hora, a reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (50 mL). A mistu- ra foi então extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. E o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 3,7-dimetil-1-((3- (1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)isoxazol-5-il)-1H-purina-2,6-(3H,7H)- diona (22,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 36%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,98 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,01 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 1,71(s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 374, encontrado 374. Etapa 33 3,7-Dimetil-1-((2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-4- il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(4-(Bromometil)tiazol-2-il)etanona
[00205] 1-(4-Metiltiazol-2-il)etanona (200 mg, 1,42 mmol), N- bromossuccinimida (252 mg, 1,42 mmol), e azobisisobutironitrila (46,6 mg, 0,284 mmol) foram dissolvidos em tetracloreto de carbono (20 mL), que foi em seguida reagida a 80°C por 12 horas. A reação foi sa- ciada por adição de solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (30 mL). A mistura foi extraída com diclorometano (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 1-(4-(bromometil)tiazol-2-il)etanona (200 mg, óleo amarelo), rendimento: 64%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,97 (s, 1H), 4,73 (s, 2H), 2,66 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 220, 222, encontrado 220, 222. Etapa 2 1-((2-Acetiltiazol-4-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H, 7H)-diona
[00206] 1-(4-(Bromometil)tiazol-2-il)etanona (100 mg, 0,454 mmol), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (81,9 mg, 0,454 mmol), iodeto de potássio (7,50 mg, 0,0454 mmol) e carbonato de potássio (125 mg, 0,908 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas, em seguida resfriada a temperatura ambiente, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 1-((2-acetiltiazol-4-il)metil)-3,7- dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (80,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 55%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,92 (s, 1H), 7,73 (s, IH), 5,38 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,57 (s, 3H) 2,64 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 320, encontrado 320. Etapa 3 3,7-Dimetil-1-((2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-4-il)- metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00207] 1-((2-Acetiltiazol-4-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (200 mg, 0,626 mmol), fluoreto de césio (95,0 mg, 0,626 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil- trifluorometil-silano (267 mg, 1,88 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitados por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL), a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. E o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 3,7-dimetil-1-((2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-4-il)- metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (100 mg, sólido amarelo), rendimento: 41%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,10 (s, 1H), 7,33 (s, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,03 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 1,80 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 390, encontrado 390. Modalidade 34 3,7-Dimetil-1-((5-metil-2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-4- il)-metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(4-(Bromometil)-5-metiltiazol-2-il)etanona
[00208] 1-(4,5-Dimetilpiridin-2-il)etanona (200 mg, 1,29 mmol), N- bromossuccinimida (229 mg, 1,29 mmol), azobisisobutironitrila (21,1 mg, 0,129 mmol) foram dissolvidos em tetracloreto de carbono (10 mL), que foi em seguida reagido a 80°C por 12 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (30 mL). A mistura foi extraída com diclorometano (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 1-(4-(bromometil)-5-metiltiazol-2- il)etanona (200 mg, óleo amarelo), rendimento: 66%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,88 (s, 2H), 2,65 (s, 3H), 2,47 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 234, 236, encontrado 234, 236. Etapa 2 1-((2-Acetil-5-metiltiazol-4-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona
[00209] 1-(4-(Bromometil)-5-metiltiazol-2-il)etanona (500 mg, 0,854 mmol), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (154 mg, 0,854 mmol), iodeto de potássio (14,0 mg, 0,0854 mmol) e carbonato de potássio (354 mg, 2,56 mmols) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. Em seguida A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 1-((2-acetil-5-metiltiazol-4-il)metil)-3,7- dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (200 mg, sólido amarelo), rendi-mento: 70%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,90 (s, 1H), 5,35 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,55 (s, 3H), 2,66 (s, 3H), 2,61 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 334, encontrado 334. Etapa 3 3,7-Dimetil-1-((5-metil-2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-4- il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00210] 1-((2-Acetil-5-metiltiazol-4-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6-(3H,7H)-diona (80,0 mg, 0,240 mmol), fluoreto de césio (18,2 mg, 0,120 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil- trifluorometil-silano (102 mg, 0,720 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitados por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL), extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concen-trado sob pressão reduzida. E o resíduo foi purificado por cromatogra- fia líquida de alta performance preparativa para liberar 3,7-dimetil-1- ((5-metil-2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-4-il)metil)-1H- purina-2,6-(3H,7H)-diona (35,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 36%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,27 (s, 1H), 5,36 (s, 2H), 4,06 (s, 3H), 3,57 (s, 3H), 2,73 (s, 3H), 1,90 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 404, encontrado 404. Modalidade 35 3,7-Dimetil-1-((2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-5- il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(5-Metiltiazol-2-il)etilciclo-hexanona
[00211] 5-Metiltiazol (2,00 g, 20,2 mmols) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (50 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, n-butil lítio (2,5 M solução de tetra-hidrofurano, 9,68 mL, 24,2 mmols) foi lentamente adicionado gota a gota a -78°C. A reação foi agitada a -78°C por 0,5 hora e uma solução de N-metóxi-N-metilacetamida (2,50 g, 24,2 mmols) em tetra-hidrofurano (1 mL) foi lentamente adicionada gota a gota. A solução de reação foi aquecida a 0°C e agitada por 1,5 horas. Água (10 mL) foi lentamente adicionado na solução de reação a 0°C e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (30 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e destiladas sob pressão reduzida. O produto resultante foi purificado por placas preparativas de alta performance (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,7) para liberar o produto 1-(5- metiltiazol-2-il)etilciclo-hexanona (1,45 g, sólido amarelo), rendimento: 51%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,73 (s, 1H), 2,61 (s, 3H), 2,57 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 142, encontrado 142. Etapa 2 1-(5-(Bromometil)tiazol-2-il)etilciclo-hexanona
[00212] 1-(5-Metiltiazol-2-il)etilciclo-hexanona (200 mg, 1,42 mmol) e azoisobutironitrila (2,33 mg, 0,0142 mmol) foram dissolvidos em clo-rofórmio (5 mL), bromossuccinimida (252 mg, 1,42 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente. A reação foi aquecida a 78°C e agitada por 16 horas. A solução de reação foi resfriada para temperatura ambiente, água (30 mL) foi lentamente adicionada e a mistura resultante foi extraída com clorofórmio (30 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas e secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto bruto 1-(5-(bromometil)tiazol-2-il)etil ciclo-hexanona (290 mg, óleo amarelo). MS-ESI calculada para [M+H]+ 220 e 222, encontrado 220 e 222. Etapa 3 1-((2-Acetiltiazol-5-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00213] ciclo-hexanona de 1-(5-(Bromometil)tiazol-2-il)etila (290 mg, 1,05 mmol), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (284 mg, 1,58 mmol) e iodeto de potássio (17,5 mg, 0,105 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (5 mL), carbonato de potássio (437 mg, 3,16 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi reagida a 130°C por 2,5 horas. A solução de reação foi resfriada para temperatura ambiente, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o produto re-sultante foi purificado por uma placa preparativa de alta performance (acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar o produto 1-((2-acetiltiazol-5- il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (292 mg, sólido ama-relo), rendimento: 87%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 320, encontrado 320. Etapa 4 3,7-Dimetil-1-((2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-5- il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00214] 1-((2-Acetiltiazol-5-il)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (280 mg, 0,438 mmol) e fluoreto de césio (6,66 mg, 0,0438 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (6 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, trifluorometiltrimetilsilano (75,0 mg, 0,500 mmol) foi adicionado lentamente. A mistura de reação foi agitada a 25°C por 1,5 horas. Após adicionar solução aquosa de ácido clorídrico 4 N (0,2 mL) e agitar por meia hora a temperatura ambiente, o valor de pH da mistura de reação foi ajustado para 7 com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (10 mL), água (20 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com acetato de etila (50 mL x 3), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida, o produto bruto foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 3,7-dimetil-1- ((2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-5-il)metil)-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (32,0 mg, sólido branco), rendimento: 19%, 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,89 (s, 1H), 7,82 (s, 1H), 5,35 (s, 2H), 4,00 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 1,76 (s, 3H).MS-ESI calculada para [M+H]+ 390, encontrado 390. Modalidade 36 3,7-Dimetil-1-(2-(4-metil-2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol- 5-il)etil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(5-(2-Hidroxietil)-4-metiltiazol-2-il) etanona
[00215] 2-(4-Metiltiazol-5-il)etanol (500 mg, 3,49 mmols) foi dissolvido em tetra-hidrofurano (100 mL), n-butil lítio (solução a 3 M de n- hexano, 2,33 mL, 6,98 mmols) foi adicionado a -78°C, após reação po meia hora N-metóxi-N-metil-acetamida (432 mg, 4,19 mmols) foi adicionado na mistura de reação, a agitação foi continuada por 3 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de cloreto de amônio saturado (50 mL), extraída com acetato de etila (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromato- grafia de coluna em sílica-gel (5:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,1) para liberar 1-(5-(2-hidroxietil)-4-metiltiazol-2-il)etanona (200 mg, óleo amarelo), rendimento: 31%,1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 3,78 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,18 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,67 (s, 3H), 2,47 (s, 3H). MS- ESI calculada para [M+H]+ 186, encontrado 186. Etapa 2 Metanossulfonato de 2-(2-Acetil-4-metil-tiazol-5-il)etila
[00216] 1-(5-(2-Hidroxietil)-4-metiltiazol-2-il)etanona (120 mg, 0,647 mmol) e trietilamina (196 mg, 1,94 mmol) foram dissolvidos em diclo- rometano (10 mL), cloreto de metanossulfonila (148 mg, 1,30 mmol) foi adicionado a 0°C. A solução de reação foi lentamente aquecida em temperatura ambiente e agitada por duas horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio (50 mL) e extraída com diclorometano (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar metanossul- fonato de 2-(2-acetil-4-metil-tiazol-5-il)etila (150 mg, óleo amarelo), rendimento: 88%,1H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ 4,41 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,27 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,01 (s, 3H), 2,67 (s, 3H), 2,46 (s, 3H).MS-ESI calculada para [M+H]+ 264, encontrado 264. Etapa 3 1-(2-(2-Acetil-4-metiltiazol-5-il)etil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)- diona
[00217] Metanossulfonato de 2-(2-acetil-4-metil-tiazol-5-il)etila (150 mg, 0,569 mmol), 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (102 mg, 0,569 mmol), iodeto de potássio (18,9 mg, 0,114 mmol) e carbonato de potássio (236 mg, 1,71 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. Em seguida a mistura foi resfriada para temperatura ambiente, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. E o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 1-(2-(2-acetil-4-metiltiazol-5-il)etil)- 3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (30,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 15%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 348, encontrado 348. Etapa 4 3,7-Dimetil-1-(2-(4-metil-2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol- 5-il)etil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00218] 1-(2-(2-Acetil-4-metiltiazol-5-il)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6-(3H,7H)-diona (40,0 mg, 0,115 mmol), fluoreto de césio (17,5 mg, 0,115 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil trifluorometilsilano (49,0 mg, 0,345 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e a mistura resultante foi agitada por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL), a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 3,7-dimetil-1-(2-(4-metil-2-(1,1,1-triflúor- 2-hidroxipropan-2-il)tiazol-5-il)etil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (15,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 31%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,37 (s, 1H), 4,25 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 4,01 (s, 3H), 3,54 (s, 3H), 3,26 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,50 (s, 3H), 1,90 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 418, encontrado 418. Modalidade 37 1-(3-Hidróxi-2-(hidroximetil)-2-metilpropil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6-(3H,7H)-diona
[00219] 3,7-Dimetil-1-((3-metiloxetan-3-il)metil)1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (20,0 mg, 0,0757 mmol) foi dissolvido em 0,16% de ácido clorídrico (0,5 mL) e a reação foi agitada em temperatura ambiente por 6 horas, cujo valor de pH foi ajustado para 7 com solução saturada aquosa de bicarbonato de sódio e o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance para liberar 1-(3-hidróxi-2- (hidroximetil)-2-metilpropil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (12,0 mg, sólido branco), rendimento: 56%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,58 (s, 1H), 4,25-3,94 (m, 7H), 3,62 (s, 3H), 3,35-3,26 (m, 2H), 3,25-3,14 (m, 2H), 1,01 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 283, encontrado 283. Modalidade 38 1-(2-(2-Hidróxi-2-metilciclopropil)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 2-(2-(3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)etóxi)acetato de etila
[00220] 1-(2-Hidroxietil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (100 mg, 0,446 mmol) foi adicionado a uma solução de hidreto de sódio (21,0 mg, 0,890 mmol) em N,N-dimetilformamida (10 mL) a temperatura ambiente, a solução de reação foi agitada a 25°C por uma hora. 2-bromoacetato de etila (149 mg, 0,890 mmol) foi adicionado e em se- guida a solução de reação foi agitada por mais 16 horas. A substância insolúvel foi removida por filtração, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 2-(2-(3,7-dimetil- 2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)etóxi)acetato de etila (60,0 mg, sólido branco), rendimento: 43%. MS-ESI calculada para [M+H]+311, encontrado 311. Etapa 2 1-(2-(2-Hidróxi-2-metilciclopropil)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00221] Solução de brometo de magnésio de metila (solução de tetra- hidrofurano a 3 M, 0,43 mL, 1,29 mmol) foi lentamente adicionado gota a gota a uma solução de 2-(2-(3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H- purin-1-il)etóxi)acetato de etila em tetra-hidrofurano (5 mL) a -78°C. A so-lução de reação foi agitada a -78°C por duas horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de cloreto de amônio saturada (20 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas e concentradas sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia líquida de alta performance prepa-rativa para liberar 1-(2-(2-hidróxi-2-metilciclopropil) etil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (40,0 mg, óleo incolor), rendimento: 42%, 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 4,23 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,72 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,53 (s, 3H), 3,32 (s, 2H), 1,13 (s, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 296, encontrado 296. Modalidade 39 1-(2-((1-Hidroxiciclobutil)metóxi)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(Hidroximetil)ciclobutanol
[00222] Uma solução de ácido 1-hidroxiciclobutanoico (1,16 g, 10,0 mmols) em tetra-hidrofurano (10 mL) foi adicionado gota a gota a uma solução de hidreto de alumínio e lítio (1,52 g, 40,0 mmols) em tetra- hidrofurano (30 mL) a 25°C. A solução de reação foi aquecida até o reflu-xo por uma hora. A solução de reação foi resfriada para 25°C, saciada por adição de água (20 mL), extraída com acetato de etila (50 mL x 3), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o fil-trado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 1- (hidroximetil)ciclobutanol (0,800 g, óleo incolor), rendimento: 80%. Etapa 2 2-(3,7-Dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)etilmetanossulfonato
[00223] Trietilamina (600 mg, 6,00 mmols) e cloreto de metanossulfo- nila (342 mg, 3,00 mmols) foram adicionados a uma solução de 1-(2- hidroxietil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (448 mg, 2,00 mmols) em diclorometano (25 mL). A solução de reação foi agitada a 0°C por 0,5 hora. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (30 mL) e extraída com diclorometano (20 mL x 3). A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada (20 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e concentrada sob pressão redu-zida para liberar 2-(3,7-dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)etilmetanossulfonato (650 mg, óleo amarelo), rendimento de 100%. Etapa 3 1-(2-((1-Hidroxiciclobutil)metóxi)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00224] Carbonato de potássio (414 mg, 3,00 mmol) e iodeto de potássio (16,0 mg, 0,100 mmol) foram adicionados a uma solução de uma mistura de 1-(hidroximetil)ciclobutanol (102 mg, 1,00 mmol) e 2-(3,7- dimetil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purina-1-il)etilmetanossulfonato (450 mg, 1,50 mmol) em N,N-dimetilformamida (5 mL). A reação foi aquecida a 60°C e agitada durante a noite. Em seguida a mistura de reação foi lentamente arrefecida em temperatura ambiente, saciada por adição de água (20 mL). A mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3) e a fase orgânica foi lavada com solução salina saturada (20 mL x 3) e secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentra-do sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia lí-quida de alta performance preparativa para liberar 1-(2-((1- hidroxiciclobutil)metóxi)etil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (50,0 mg, sólido branco), rendimento: 16%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,88 (s, 1H), 4,57-4,59 (m, 2H), 4,21-4,24 (m, 2H), 3,98 (s, 3H), 3,80 (s, 2H), 3,54 (s, 3H), 2,07-1,95 (m, 4H), 1,52-1,54 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 309, encontrado 309. Modalidade 40 (S)-1-(2-((2-Hidroxipropil)amino)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(3-Cloropropil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00225] 3,7-Dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (1,00 g, 5,56 mmols) foi dissolvido em metanol (20 mL), 30% de metóxido de sódio (9,64 g, 49,9 mmols) foi adicionado e a reação foi refluxada por uma hora. Em seguida 1-bromo-2-cloroetano (47,2 g, 299 mmols) foi adici-onado e a reação foi agitada por mais 16 horas. A reação foi saciada por adição de água (30 mL), extraída com diclorometano (20 mL x 3), o fase orgânica foi lavada com solução salina saturada (20 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cro- matografia de coluna (1:2 éter de petróleo/acetato de etila) para liberar 1-(3-cloropropil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (230 mg, sólido branco), rendimento: 17%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,50 (s, 1H), 4,36 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,75 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,56 (s, 3H). Etapa 2 (S)-1-(2-((2-Hidroxipropil)amino)etil)-3,7-dimetil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00226] Carbonato de potássio (138 mg, 1,03 mmol) e iodeto de potássio (86,3 mg, 0,517 mmol) foram adicionados a uma solução de uma mistura de 1-(3-cloropropil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona (62,4 mg, 0,826 mmol) e (S)-1-aminopropan-2-ol (50,0 mg, 0,207 mmol) em acetonitrila (2 mL) a 25°C. A solução de reação foi agitada a 90°C por 4 horas. A reação foi saciada por adição de água (10 mL) e extraída com acetato de etila (20 mLx 3). A fase orgânica foi lavada com solução salina saturada (20 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi isolado e purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar (S)-1-(2-((2-hidroxipropil)amino)etil)-3,7-dimetil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (10,0 mg, sólido branco), rendimento: 17%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,86 (s, 1H), 4,16 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,97 (s, 3H), 3,84 (m, 1H), 3,56 (s, 3H), 3,93 (m, 2H), 2,64 (m, 2H), 1,14 (d, J = 6,4 Hz, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 282, encontra- do 282. Modalidade 41 Etapa 1 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7-(difluorometil)-3-metil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-9-(difluorometil)-3-metil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona
[00227] Uma mistura de 7-(difluorometil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona e 9-(difluorometil)-3-metil-2,6(3H,7H)-diona (200 mg, 0,930 mmol) foi dissolvida em N,N-dimetilformamida (20 mL), meta- nossulfonato de 1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetila (245 mg, 1,10 mmol), iodeto de potássio (183 mg, 1,10 mmol) e carbonato de potássio (303 mg, 2,20 mmol) foram adicionados à solução de reação a temperatura ambiente. A solução de reação foi aquecida a 100°C e agitada por duas horas. A solução de reação foi diluída com acetato de etila (30 mL) e a fase orgânica foi lavada com água (20 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada para liberar uma mistura de 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7-(difluorometil)-3- metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona e 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8- ilmetil)-9-(difluorometil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (234 mg, óleo amarelo), rendimento: 68%. MS-ESI calculada para [M+H]+371, encontrado 371. Etapa 2 7-(Difluorometil)-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona 9-(Difluorometil)-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00228] Uma mistura de 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7- (difluorometil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona e 1-(1,4- dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-9-(difluorometil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (230 mg, 0,750 mmol) foi dissolvida em tetra- hidrofurano (15 mL), 10% ácido clorídrico (5 mL) foi adicionado em temperatura ambiente e a reação foi aquecida a 50°C por uma hora. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, acetato de etila (20 mL) foi adicionado e a fase orgânica foi lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (20 mL x 2), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (2:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar uma mistura de 7-(difluorometil)-3-metil-1-((4-oxociclo- hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona e 9-(difluorometil)-3-metil-1- ((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (200 mg, sólido branco), rendimento: 81%. MS-ESI calculada para [M+H]+327, encon- trado 327. Etapa 3 7-(Difluorometil)-1-(4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3- metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona 9-(Difluorometil)-1-(4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3- metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00229] Uma mistura de 7-(difluorometil)-3-metil-1-((4-oxociclo- hexil) metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona e 9-(difluorometil)-3-metil-1- ((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (168 mg, 0,515 mmol) foi dissolvida em tetra-hidrofurano (30 mL), trifluorometiltrimetil- silano (109 mg, 0,773 mmol) e fluoreto de césio (15,7 mg, 0,103 mmol) foram adicionados em temperatura ambiente. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente por 12 horas, fluoreto tetrabutilamô- nio (50,0 mg, 0,207 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos, em seguida foi diluída por acetato de etila (20 mL) e a fase orgânica foi lavada com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (20 mL x 2 ), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance para liberar 7-(difluorometil)-1-(4-hidróxi-4- (trifluorometil) ciclo-hexil)metil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (54 mg, sólido branco), rendimento: 23%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,46 (s, 1H), 7,89-7,74 (m, 1H), 4,06 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,59 (s, 3H), 2,19-2,17 (m, 1H), 2,05-1,99 (m, 2H), 1,88-1,81 (m, 2H), 1,61-1,58 (m, 2H), 1,51-1,47 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 397, encontrado 397.
[00230] E 9-(difluorometil)-1-(4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil) metil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (12 mg, sólido branco), rendimento: 10%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,49 (s, 1H), 7,937,89 (m, 1H), 4,07 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,59 (s, 3H), 2,20-2,19 (m, 1H), 2,05-1,99 (m, 2H), 1,88-1,85 (m, 2H), 1,61-1,58 (m, 2H), 1,51-1,48 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 397, encontrado 397. Modalidade 42 7-Etil-1-(5-etil-5-hidroxiheptil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 7-Etil-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00231] 3-Metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (500 mg, 3,00 mmols), carbonato de potássio (414 mg, 3,00 mmols) e iodeto de potássio (4,0 mg, 0,300 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (15 mL). A solução de reação foi aquecida a 80°C por meia hora. Iodeto de etila (470 mg, 4,50 mmols) foi adicionado. A reação foi continuado por 5 horas. A reação foi saciada derramando solução de reação na solução aquosa de hidróxido de sódio (50 mL) e extraindo com acetato de etila (20 mL x 3). o valor de pH da fase aquosa foi ajustado para 7 com ácido clorídrico diluído 1 N (10 mL), em seguida a mistura foi filtrada, o o bolo de filtração foi secado para liberar 7-etil-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (500 mg, pale sólido amarelo), rendimento: 86%. 1H RMN: (400 MHz, DMSO-d6): δ 8,05 (s, 1H), 4,25-4,19 (m, 2H), 3,34 (s, 3H), 1,37 (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 195, encontrado 195. Etapa 2 5-(7-Etil-3-metil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1-il)valerato de etila
[00232] 7-Etil-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (0,300 g, 1,55 mmol), bromovalerato de etila (480 mg, 2,32 mmols), carbonato de po-tássio (430 mg, 3,10 mmols) e iodeto de potássio (26,0 mg, 0,155 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (4 mL). A solução de reação foi aquecida a 110°C por duas horas. A reação foi saciada vertendo a solução de reação em água (20 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e concentradas sob pressão reduzida para liberar 5-(7-etil-3-metil-2,6-dioxo-2,3,6,7- tetra-hidro-1H-purin-1-il)valerato de etila (320 mg, sólido amarelo), rendimento: 62%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 323, encontrado 323. Etapa 3 7-Etil-1-(5-etil-5-hidroxiheptil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00233] 5-(7-Etil-3-metil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)valerato de etila (0,100 g, 0,310 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano anidroso (10 mL) e mometo de etil magnésio (solução de tetra-hidrofurano a 3 M, 0,62 mL, 1,86 mmol) foi lentamente adicionado gota a gota a -78°C. A solução de reação foi reagida a -78°C por 0,5 hora e lentamente aquecido a 0°C e reagida por 0,5 hora. Após a reação estar completa, a solução de reação foi vertida em água (20 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL x 3). A fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica- gel para liberar 7-etil-1-(5-etil-5-hidroxiheptil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (30,0 mg, óleo incolor), rendimento: 30%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3): δ 7,56 (s, 1H), 4,37-4,32 (m, 2H), 4,05 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,60 (s, 3H), 1,68-1,37 (m, 13H), 0,86 (t, J = 7,2 Hz, 6H). MS- ESI calculada para [M+H]+ 337, encontrado 337. Modalidade 43 7-Etil-3-metil-1-(6,6,6-triflúor-5-hidróxi-5-metilhexil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 7-Etil-3-metil-1-(5-oxoexil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00234] 7-Etil-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (0,100 g, 0,515 mmol), 6-cloro-2-pentanona (90,0 mg, 0,670 mmol), carbonato de potássio (140 mg, 1,03 mmol) e iodeto de potássio (8,5 mg, 0,0155 mmol) foram dissolvidos em DMF (2 mL), mistura de reação resultante foi aquecida a 110oC por duas horas. A mistura de reação foi vertida em água e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas, filtradas, concentradas e lavadas com t-butil metil éter, o sólido foi secado para liberar o composto alvo 7-etil-3-metil-1-(5-oxoexil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (100 mg, sólido branco), rendimento: 70%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 293, encontrado 293. Etapa 2 7-Etil-3-metil-1-(6,6,6-triflúor-5-hidróxi-5-metilhexil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00235] 7-Etil-3-metil-1-(5-oxoexil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (100 mg, 0,340 mmol) foi dissolvido em 1 mL tetra-hidrofurano, trifluorome- tiltrimetilsilano (53,0 mg, 0,370 mmol) e fluoreto de césio (10,0 mg, 0,0340 mmol) foram adicionados sucessivamente, e colocados para reagir a 30°C por 3 horas. A solução de reação foi vertida em ácido clorídrico diluído (10%, 10 mL) e agitada por meia hora. Em seguida a mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas, concentradas e o resíduo foi purificado por coluna preparativa para liberar o composto alvo 7-etil-3-metil-1- (6,6,6-triflúor-5-hidróxi-5-metilhexil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (20,0 mg, sólido branco), rendimento: 79%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3): δ 7,95 (s, 1H), 4,39-4,33 (m, 2H), 4,04-4,00 (m, 2H), 3,53 (s, 3H), 1,711,64 (m, 4H), 1,50-1,46 (m, 5H), 1,28 (s, 3H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 363, encontrado 363. Modalidade 44 1-((4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3-metil-7-(2,2,2- trifluoroetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-3-metil-7-(2,2,2-trifluoroetil)- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00236] Metanossulfonato de 1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetila (200 mg, 0,800 mmol), 3-metil-7-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (200 g, 0,800 mmol) e carbonato de potássio (334 mg, 2,42 mmols), iodeto de potássio (14,0 mg, 0,0800 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (3 mL), a solução de reação foi aquecida a 130°C e agitada por 3,5 horas. A solução de reação foi imediatamente filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter um produto bruto 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)- 3-metil-7-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona. MS-ESI calculada para [M+H]+403, encontrado 403. Etapa 2 3-Metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-7-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00237] 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-3-metil-7-(2,2,2- trifluoroetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (2,50 g, 6,00 mmols) foi dis-solvido em acetona (18 mL) e solução aquosa de ácido clorídrico (4 N, 2,5 mL) foi adicionada. A reação foi agitada a 30°C durante a noite, água (50 mL) foi adicionada e a mistura resultante foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:3 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar o produto 3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-7-(2,2,2-trifluoroetil)- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (220 mg, sólido branco), rendimento: 11%,1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,68 (s, 1H), 5,08-4,99 (m, 2H), 4,00 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 3,61 (s, 3H), 2,46-2,24 (m, 5H), 2,04-1,96 (m, 2H), 1,63-1,56 (m, 2H).MS-ESI calculada para [M+H]+359, encontrado 359. Etapa 3 1-((4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3-metil-7-(2,2,2- trifluoroetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00238] 3-Metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-7-(2,2,2-trifluoroetil)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (128 mg, 0,360 mmol) e fluoreto de césio (6,0 mg, 0,0360 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (3 mL). Sob atmosfera de gás hidrogênio, trifluorometiltrimetilsilano (77,0 mg, 0,540 mmol) foi lentamente adicionado. A solução de reação foi agitada a 30°C por 3 horas. A solução de reação foi resfriada para temperatura ambiente, solução aquosa de ácido clorídrico 4 N (2,5 mL) foi adicionada, e a mistura resultante foi agitada a 25°C por meia hora, o valor de pH foi ajustado para 7 e a mistura foi diluída com água e extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, concentradas sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1-((4- hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3-metil-7-(2,2,2-trifluoroetil)- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (14,0 mg, sólido branco), rendimento: 10%. 1H RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 8,09 (s, 1H), 5,27-5,20 (m, 2H), 4,08-3,91 (m, 2H), 3,58 (s, 3H), 2,07-1,98 (m, 2H), 1,89-1,80 (m, 2H), 1,62-1,46 (m, 5H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 429, encontrado 429. Modalidade 45
[00239] 1-((4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3-metil-7- (2,2,2-trifluoroetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (500 mg, 1,17 mmol) foram separados por SFC preparativa para liberar dois isômeros. Condições de separação: Coluna: AD 250 mm x 30 mm, 10 μm; Fase móvel: A: Dióxido de carbono supercrítico, B: Etanol (0,05% amônia), A: B = 550:45; taxa de fluxo: 80 mL/min; comprimento de onda: 220 nm.
[00240] Produto 1 (isômero 1, o primeiro pico) (300 mg, sólido branco), rendimento: 90%. 1H RMN: (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,23 (s, 1H), 5,64 (s, 1H), 5,31-5,24 (m, 2H), 3,89 (d, J = 3,6 Hz, 2H), 3,43(s, 3H), 2,06-2,05 (m, 1H), 1,87-1,81 (m, 2H), 1,73-1,61 (m, 2H), 1,49-1,45 (m, 2H), 1,33-1,31 (m, 2H). MS ESI calculada para [M+H]+ 429, encontrado 429.
[00241] Produto 2 (isômero 2, o segundo pico) (150 mg, sólido branco), rendimento: 90%. 1H RMN: (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,22 (s, 1H), 5,63 (s, 1H), 5,29-5,23 (m, 2H), 3,74 (d, J = 3,6 Hz, 2H), 3,42 (s, 3H), 1,68-1,66 (m, 3H), 1,45-1,31 (m, 6H). MS ESI calculada para [M+H]+ 429, encontrado 429. Modalidade 46 Etapa 1 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-3-metil-7-(2,2,2-trifluoroetil)- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00242] Metanossulfonato de 1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetila (603 mg, 2,41 mmols), 3-metil-7-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)- diona (500 mg, 2,01 mmols) e iodeto de potássio (33,3 mg, 0,201 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (8 mL), carbonato de potássio (555 mg, 4,02 mmol) foi adicionado e a reação foi aquecida a 130°C por 4 horas. A solução de reação foi resfriada para temperatura ambiente, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto bruto 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-3-metil-7-(2,2,2- trifluoroetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (980 mg, óleo amarelo). MS- ESI calculada para [M+H]+403, encontrado 403. Etapa 2 3-Metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-7-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00243] 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-3-metil-7-(2,2,2- trifluoroetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (980 mg, 1,51 mmol) foi dis-solvido em acetona (8 mL), solução aquosa de ácido clorídrico 4 N (2 mL) foi adicionada. A reação foi agitada em temperatura ambiente du-rante a noite, água (20 mL) foi adicionado e em seguida a mistura foi extraída com acetato de etila (30 mL x 3), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o produto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar o produto 3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-7-(2,2,2- trifluoroetil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (78,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 15%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 359, encontrado 359.
[00244] 3-Metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-7-(2,2,2-trifluoroetil)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (66,0 mg, 0,184 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (2 mL). Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, reagente de metil Grignard (solução de éter a 3 M, 0,184 mL, 0,552 mmol) foi len-tamente adicionado a -78°C, a mistura resultante foi agitada a -78°C por meia hora, seguido por reação a 0°C por duas horas. Água (10 mL) foi adicionada, em seguida a mistura foi extraída com acetato de etila (30 mL x 3), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para para liberar o produto bruto, que foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1 (8,00 mg, sólido branco), rendimento: 12%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,08 (s, 1H), 5,27-5,19 (m, 2H), 3,92 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,58 (s, 3H), 1,71-1,62 (m, 4H), 1,46-1,38 (m, 2H), 1,32-1,18 (m, 6H). MS-ESI: calculada para [M+H-H2O]+ 357, encontrado 357.
[00245] Produto 2 (12,0 mg, sólido branco) (isômero 2, o segundo pico), rendimento: 17%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,08 (s, 1H), 5,27-5,21 (m, 2H), 3,91 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,57 (s, 3H), 1,69-1,66 (m, 2H), 1,49-1,44 (m, 3H), 1,37-1,28 (m, 4H), 1,17 (s, 3H).MS-ESI: calculada para [M+H-H2O]+ 357, encontrado 357. Modalidade 47 7-Ciclopropil-3-metil-1-(6,6,6-triflúor-5-hidróxi-5-metilexil)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 6-Amino-5-bromo-1-metilpirimidina-2,4(1H, 3H)-diona
[00246] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, a solução de uma mistura de 6-amino-1-metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona (5,46 g, 40,0 mmols) e bromossuccinimida (7,56 g, 42,0 mmols) em acetonitrila (100 mL) foi aquecida a refluxo por 1,5 horas. A solução de reação foi resfriada para temperatura ambiente, filtrada e o solvente foi removido, e o sólido resultante foi lavado com água (20 mL) e secado para liberar 6-amino-5-bromo-1-metilpirimidina-2,4(1H, 3H)-diona (8,6 g, sólido branco), rendimento: 98%. 1H RMN: (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,90 (s, 1H), 7,04 (s, 2H), 3,28 (s, 3H). Etapa 2 6-Amino-5-(ciclopropilamina)-1-metilpirimidina-2,4(1H, 3H)-diona
[00247] 6-Amino-5-bromo-1-metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona (2,19 g, 10,0 mmols) foi dissolvido em uma solvente de uma mistura de ci- clopropilamina (20 mL) e água (5 mL). A solução de reação foi aquecida a refluxo por 5 horas. A solução de reação foi filtrada para remover o solvente para liberar o produto bruto 6-amino-5-(ciclopropilamina)-1- metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona, o qual foi utilizado imediatamente na etapa seguinte. Etapa 3 7-Ciclopropil-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00248] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, 6-amino-5- (ciclopropilamina)-1-metilpirimidina-2,4(1H,3H)-diona (1,96 g, 10,0 mmols), ortoformato de trimetila (2,12 g, 20,0 mmols) e ácido p- toluenossulfônico (86,0 mg, 0,500 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida anidroso (20 mL). A solução de reação foi aquecida a 100°C durante a noite. A solução de reação foi filtrada e o solvente foi removido para liberar o produto bruto 7-ciclopropil-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona, o qual foi usado imediatamente na etapa seguinte. Etapa 4 7-Ciclopropil-3-metil-1-(5-oxohexano)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00249] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, 7-ciclopropil-3-metil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (100 mg, 0,480 mmol), 6-cloroexan-2-ona (97,0 mg, 0,730 mmol) e carbonato de potássio (132 mg, 0,960 mmol) foram dissolvidos em N, N-dimetilformamida (5 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C por 3 horas. Após arrefecimento a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com água (20 mL) e acetato de eti- la (10 mL), extraída com acetato de etila (30 mL x 2), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e concentrada para liberar o produto bruto7-ciclopropil-3-metil-1-(5-oxohexano)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona, o qual foi usado imediatamente na etapa seguinte. MS-ESI calculada para [M+H]+ 305, encontrado 305. Etapa 5 7-Ciclopropil-3-metil-1-(6,6,6-triflúor-5-hidróxi-5-metilhexil)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona
[00250] Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, 7-ciclopropil-3-metil-1- (5-oxohexano)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (200 mg, 0,660 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidroso (3 mL), trifluorometiltrimetilsi- lano (0,2 mL, 0,990 mmol) e fluoreto de césio (20,0 mg, 0,130 mmol) foram em seguida adicionados sucessivamente. A solução de reação resultante foi reagida a 30°C por duas horas. A mistura de reação foi diluida com água (30 mL) e extraída com acetato de etila (30 mL x 2), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso e filtrada, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por placa TLC preparativa (1:2 éter de petróleo/etil éster, Rf = 0,3) para liberar 7-ciclopropil-3-metil-1-(6,6,6-triflúor-5-hidróxi-5-metilhexil)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (150 mg, sólido branco), rendimento: 61%, 1H-RMN: (400 MHz, CDCl3) δ 7,55 (s, 1H), 4,13-4,02 (m, 2H), 3,633,61 (m, 1H), 3,55 (s, 3H), 2,96 (s, 1H), 1,90-1,68 (m, 2H), 1,67-1,64 (m, 2H), 1,47-1,45 (m, 2H), 1,28 (s, 3H), 1,18-1,16 (m, 2H), 1,06-1,04 (m, 2H ). MS-ESI calculada para [M+H]+ 375, encontrado 375. Modalidade 48 7-(Ciclopropilmetil)-1-((4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)- 3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7-isopropil-3-metil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona
[00251] Metanossulfonato de 1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetila (250 mg, 1,00 mmol), 7-isopropil-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (208 mg, 1,00 mmol), iodeto de potássio (15,8 mg, 0,100 mmol) e carbonato de potássio (276 mg, 2,00 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida anidroso (8 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A reação foi resfriada para 20°C e a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto bruto 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7- isopropil-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (300 mg, óleo branco), rendimento: 83%. MS-ESI calcd. [M+H]+ 362, encontrado 362. Etapa 2 7-Isopropil-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00252] 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7-isopropil-3-metil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (300 mg, 0,828 mmol) foi dissolvido em acetona (10 mL), ácido clorídrico (0,5 mL) foi adicionado. A solução de reação foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos. Água foi adicionada à solução de reação, cujo valor de pH foi ajustado para 7 com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 mL), e a mistura foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução aquosa de cloreto de sódio saturado (20 mL x 3), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 7-isopropil-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (180 mg, óleo branco), rendimento: 68%. MS- ESI calculada para [M+H]+ 319, encontrado 319. Etapa 3 7-Isopropil-3-metil-1-((4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00253] 7-Isopropil-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (122 mg, 0,382 mmol) e fluoreto de césio (11,5 mg, 0,0763 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano anidroso (3 mL), Sob atmosfera de nitrogênio gasoso, trifluorometiltrimetilsilano (95,0 mg, 0,640 mmol) foi adicionado. A solução de reação foi aquecida a 30°C e agitada por 12 horas. Em seguida a solução aquosa de ácido clorídrico (1 N, 5 mL) foi adicionada e agitada por mais 30 minutos. Água foi adicionada à solução de reação, cujo valor de pH foi ajustado para 7 com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas e lavadas com solução aquosa de cloreto de sódio saturado (20 mL x 3 ), secadas sobre sulfato de sódio anidro- so, filtradas, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, e o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 7-isopropil-3-metil-1-((4-hidróxi-4-(trifluorometil) ci- clo-hexil)metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (80,0 mg, sólido branco), rendimento: 53%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,10 (s, 1H), 5,065,00 (m, 1H), 4,08-3,91 (m, 2H), 3,55 (s, 3H), 2,17-2,00 (m, 2H), 1,881,84 (m, 2H), 1,61-1,40 (m, 6H), 1,59-1,57 (m, 5H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 389, encontrado 389. Modalidade 49 7-(Ciclopropilmetil)-1-((4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)- 3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7-(ciclopropilmetil)-3-metil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00254] (Ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (220 mg, 1,00 mmol), metanossulfonato de 1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8- ilmetila (250 mg, 1,00 mmol), iodeto de potássio (15,8 mg, 0,100 mmol) e carbonato de potássio(276 mg, 2,00 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida anidroso (8 mL), a solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A reação foi resfriada para 20°C e a mistura foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para liberar o produto bruto 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7- (ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (300 mg, óleo branco), rendimento: 80%. MS-ESI calcd.for [M+H]+ 375, encontrado 375. Etapa 2 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00255] 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7-(ciclopropilmetil)-3- metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (300 mg, 0,802 mmol) foi dissolvido em acetona (10 mL), ácido clorídrico (0,5 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos. Água (30 mL) foi adicionada à solução de reação, cujo valor de pH foi ajustado para 7 com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 mL), em seguida a mistura foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio ani- droso, filtradas, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia de coluna em sílica- gel (acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar 7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1- ((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (180 mg, óleo branco), rendimento: 75%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 331, encontrado 331. Etapa 3 7-(Ciclopropilmetil)-1-((4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)- 3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00256] 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (126 mg, 0,382 mmol) e fluoreto de césio (11,5 mg, 0,0763 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano anidro- so (3 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, trifluorometiltrimetilsi- lano (95,0 mg, 0,640 mmol) foi adicionado. A mistura foi agitada a 30°C por 12 horas. Em seguida solução aquosa de ácido clorídrico 1 N (5 mL) foi adicionado e a agitação foi continuada por mais 30 min. Água (30 mL) foi adicionada à solução de reação, cujo valor de pH foi ajustado para 7 com solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (10 mL) e extraída com acetato de etila (10 mL x 3), as fases orgânicas foram combinadas e lavadas com solução aquosa de cloreto de sódio saturada (30 mL x 2), secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 7-(ciclopropilmetil)-1-((4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo- hexil) metil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (80,0 mg, sólido branco), rendimento: 53%,1H-RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,16-8,15 (m, 1H), 4,24-4,22 (m, 2H), 4,08-3,91 (m, 2H), 3,57 (s, 3H), 2,18-2,07 (m, 2H), 1,85-1,82 (m, 2H), 1,61-1,47 (m, 6H), 0,64-0,60 (m, 2H), 0,50-0,48 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 401, encontrado 401. Modalidade 50
[00257] 7-(Ciclopropilmetil)-1-((4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil) metil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (900 mg, 2,25 mmols) foi separada por SFC preparativa para liberar dois isômeros. Condições de separação: Coluna: AD 250 mm x 30 mm, 5 μm; Fase móvel: A: Dióxido de carbono supercrítico, B: Metanol (0,05% amônia), A: B = 55:45; Taxa de fluxo: 40 mL/min; Comprimento de onda: 220 nm. Produto 1 (isômero 1, o primeiro pico) (600 mg, sólido branco), rendimento: 100%. 1H RMN: (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,11 (s, 1H), 5,62 (s, 1H), 4,08 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,88 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,43 (s, 3H), 2,052,04 (m, 1H), 1,85-1,82 (m, 2H), 1,48-1,45 (m, 2H), 1,33-1,32 (m, 2H), 1,30-1,28 (m, 3H), 0,48-0,46 (m, 2H), 0,41-0,39 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 401, encontrado 401.
[00258] Produto 2 (isômero 2, o segundo pico) (300 mg, sólido branco), rendimento: 100%,1H RMN: (400 MHz, DMSO-d6)δ 8,11 (s, 1H), 5,62 (s, 1H), 4,09 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,74 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,42 (s, 3H), 1,69-1,45 (m, 3H), 1,45-1,29 (m, 7H), 0,48-0,46 (m, 2H), 0,41-0,39 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 401, encontrado 401. Modalidade 51 Etapa 1 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil-7-(ciclopropilmetil)-3-metil- 1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00259] Metanossulfonato de 1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetila (682 mg, 2,72 mmols), 7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (500 mg, 2,27 mmols) e iodeto de potássio (37,7 mg, 0,227 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (10 mL), car-bonato de potássio (627 mg, 4,54 mmols) foi adicionado e a reação foi aquecida a 130°C por 4 horas. A solução de reação foi resfriada para temperatura ambiente, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto bruto 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8- ilmetil-7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (1,10 g, óleo amarelo). MS-ESI calculada para [M+H]+ 375, encontrado 375. Etapa 2 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina- 2,6-(3H,7H)-diona
[00260] 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil-7-(ciclopropilmetil)-3- metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (1,20 g, 2,09 mmols) foi dissolvido em acetona (12 mL), solução aquosa de ácido clorídrico 4 N (3 mL) foi adicionado. A reação foi agitada em temperatura ambiente durante a noite, água (20 mL) foi adicionada e a mistura foi extraída com acetato de etila (30 mL x 3), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o produto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica- gel (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar o produ- to7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (52,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 8%. MS-ESI cal-culada para [M+H]+ 331, encontrado 331. Etapa 3
[00261] 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H- purina-2,6-(3H,7H)-diona (100 mg, 0,303 mmol) foi dissolvido em tetra- hidrofurano (5 mL), sob atmosfera de nitrogênio gasoso, reagente de metila Grignard (solução de éter a 3 M, 0,600 mL, 1,81 mmol) foi len-tamente adicionado a -78°C, a mistura de reação foi agitada a -78°C por meia hora, em seguida reagida a 0°C por duas horas. Água (10 mL) foi adicionada, em seguida a mistura foi extraída com acetato de etila (30 mL x 3), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, para liberar o produto bruto, o qual foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1 (26,0 mg, sólido branco) (isômero 1, o primeiro pico), rendimento: 25%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,99 (s, 1H), 4,19 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,90 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,54 (s, 3H), 1,90-1,79 (m, 1H), 1,70-1,61 (m, 4H), 1,45-1,36 (m, 3H), 1,27-1,16 (m, 5H), 0,65-0,55 (m, 2H), 0,49-0,42 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H-H2O]+ 329, encontrado 329.
[00262] Produto 2 (42,0 mg, sólido branco) (isômero 2, o segundo pico), rendimento: 40%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,99 (s, 1H), 4,19 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,89 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,54 (s, 3H),1,81-1,70 (m, 1H), 1,69-1,62 (m, 2H), 1,51-1,41 (m, 4H), 1,39-1,25 (m, 3H), 1,15 (s, 3H), 0,63-0,56 (m, 2H), 0,48-0,42 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H-H2O]+ 329, encontrado 329. Modalidade 52 1-((4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-((4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-3,7-dimetil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00263] metilmetanossulfonato de (4-Hidróxi-1-(metoximetil)-4- (trifluorometil)ciclo-hexila) (100 mg, 0,349 mmol), 7-(ciclopropilmetil) -3- metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (76,9 mg, 0,349 mmol), iodeto de potássio (5,8 mg, 0,0349 mmol) e carbonato de potássio (149 mg, 1,05 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida anidroso (5 mL). A solução de reação foi aquecida a 150°C por micro-ondas e reagida por duas horas. A solução de reação foi resfriada para 20°C, filtrada, e o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 1-((4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo- hexil)metil)-3,7-dimetil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (10,0 mg, sólido branco), rendimento: 6%. 1H RMN: (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,13 (s, 1H), 4,12 (s, 2H), 3,94 (s, 1H), 3,43-3,38 (m, 4H), 3,31 (s, 3H) 3,19 (s, 3H), 1,56-1,45 (m, 8H), 1,43-1,31 (m, 1H), 0,51-0,49 (m, 2H), 0,44-0,42 (m, 2H).MS-ESI calculada para [M+H]+ 445, encontrado 445. Modalidade 53 7-(Ciclopropilmetil)-1-((4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo- hexil)-3-metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 7-(Ciclopropilmetil)-1-((4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo- hexil)-3-metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00264] Metanossulfonato de (4-Hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil) ci- clo-hexil)metil (100 mg, 0,344 mmol), 7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H- purina-2,6-(3H,7H)-diona (75,9 mg, 0,344 mmol), iodeto de potássio (5,70 mg, 0,0344 mmol) e carbonato de potássio (47,6 mg, 0,344 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida anidroso (5 mL). A solução de reação foi aquecida a 150°C e a reação no micro-ondas durou 4 horas. A solução de reação foi resfriada para 20°C, filtrada, concentrada e em seguida o resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 7-(ciclopropilmetil)- 1-((4-hidróxi-1-metil-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)-3-metil-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (10,0 mg, sólido branco), rendimento: 7%. 1H-RMN: (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,13 (s, 1H), 4,13-4,09 (m, 2H), 3,83 (s, 1H), 3,43 (s, 3H), 3,34 (s, 2H),1,67-1,53 (m, 6H), 1,23-1,20 (m, 3H), 0,88 (s, 3H), 0,50-0,42 (m, 4H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 415, encontrado 415. Modalidade 54 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((5-metil-2-(1,1,1-triflúor-2- hidroxipropan-2-il)tiazol-4-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(4-(Bromometil)-5-metiltiazol-2-il)etanona
[00265] 1-(4,5-Dimetilpiridin-2-il)etanona (200 mg, 1,29 mmol), N- bromossuccinimida (229 mg, 1,29 mmol), azobisisobutironitrila (21,2 mg, 0,129 mmol) foram dissolvidos em tetracloreto de carbono (20 mL), que foi reagida a 80°C por 12 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (30 mL). A mistura de reação foi extraída com diclorometano (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 1-(4-(bromometil)-5-metiltiazol-2- il)etanona(200 mg, óleo amarelo), rendimento: 46%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 234, 236, encontrado 234, 236. Etapa 2 1-((2-Acetil-5-metiltiazol-4-il)metil)-7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H- purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00266] 1-(4-(Bromometil)-5-metiltiazol-2-il)etanona(200 mg, 0,598 mmol), 7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (132 mg, 0,598 mmol), iodeto de potássio (19,8 mg, 0,119 mmol) e carbonato de potássio (248 mg, 1,79 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (1:1 éter de petróleo/acetato de etila, valor Rf = 0,4) para liberar 1-((2- acetil-5-metiltiazol-4-il)metil)-7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina-2,6- (3H,7H)-diona (100 mg, sólido amarelo), rendimento: 45%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,02 (s, 1H), 5,35 (s, 2H), 4,21 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,56 (s, 3H), 2,66 (s, 3H), 2,60 (s, 3H), 1,46-1,41 (m, 1H), 0,650,61 (m, 2H), 0,60-0,48 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 374, encontrado 374. Etapa 3 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((5-metil-2-(1,1,1-triflúor-2- hidroxipropan-2-il)tiazol-4-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00267] 1-((2-Acetil-5-metiltiazol-4-il)metil)-7-(ciclopropilmetil)-3- metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (100 mg, 0,267 mmol), fluoreto de césio (40,6 mg, 0,267 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil-trifluorometil-silano (114 mg, 0,803 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitada por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL). Em seguida a mistura de reação foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi em seguida purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 7-(ciclopropilmetil)-3-metil- 1-((5-metil-2-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2-il)tiazol-4-il)metil)-1H- purina-2,6-(3H,7H)-diona (50,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 42%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,11 (s, 1H), 5,33 (s, 2H), 4,23 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,57 (s, 3H), 2,64 (s, 3H), 1,81 (s, 3H), 1,45-1,41 (m, 1H), 0,65-0,61 (m, 2H), 0,60-0,49 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 444, encontrado 444. Modalidade 55 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((6-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2- il)piridin-3-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-[5-(Bromometil)-2-piridil]etanona
[00268] 1-(5-Metil-2-piridil)etanona (500 mg, 3,70 mmols), N- bromossuccinimida (658 mg, 3,70 mmols), azobisisobutironitrila (182 mg, 1,11 mmol) foram dissolvidos em tetracloreto de carbono (20 mL), que foi reagida a 90°C por 12 horas. A reação foi saciada por adição de solução aquosa de tiossulfato de sódio saturada (30 mL). Em seguida a mistura de reação foi extraída com diclorometano (10 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar 1-[5-(bromometil)-2- piridil]etanona (125 mg, óleo amarelo), rendimento: 16%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 214 e 216, encontrado 214 e 216. Etapa 2 1-[(6-Acetil-3-piridil)metil]-7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina- 2,6-(3H,7H)-diona
[00269] 1-[5-(Bromometil)-2-piridil]etanona (100 mg, 0,467 mmol), 7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina-2,6-diona (103 mg, 0,467 mmol), iodeto de potássio (15,5 mg, 0,0934 mmol) e carbonato de potás- sio(193 mg, 1,40 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. Em seguida A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar 1-[(6-acetil-3-piridil)metil-7-(ciclopropilmetil)- 3-metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (50,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 30%. MS-ESI calculada para [M+H]+354, encontrado 354. Etapa 3 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((6-(1,1,1-triflúor-2-hidroxipropan-2- il)piridin-3-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00270] 1-[(6-Acetil-3-piridil)metil]-7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H- purina-2,6--(3H,7H)-diona (100 mg, 0,283 mmol), fluoreto de césio (43,0 mg, 0,283 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil-trifluorometil-silano (60,4 mg, 0,424 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitada por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL). Em seguida a mistura de reação foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1-((6-(1,1,1- triflúor-2-hidroxipropan-2-il)piridin-3-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)- diona (40,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 32%, 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 9,00 (s, 1H), 8,80-8,72 (m, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,358,29 (m, 1H), 5,43 (s, 2H ), 4,28 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,58 (s, 3H), 1,95 (s, 3H), 1,50-1,46 (m, 1H), 0,68-0,64 (m, 2H), 0,53-0,51 (m, 2H). MS- ESI calculada para [M+H]+ 424, encontrado 424. Modalidade 56 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((5-metil-2-(1,1,1-triflúor-2- hidroxipropan-2-il)tiazol-4-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona Etapa 1 1-[(5-Acetil-2-piridil)metil]-7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina- 2,6--(3H,7H)-diona
[00271] 1-[6-(Bromometil)-3-piridil]etanona (100 mg, 0,467 mmol), 7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (103 mg, 0,467 mmol), iodeto de potássio (15,5 mg, 0,0934 mmol) e carbonato de po-tássio (193 mg, 1,40 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 120°C e agitada por 3 horas. A mistura de reação foi resfriada para a temperatura ambiente, filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 1-((5-acetil-2-piridil)metil)-7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H- purina-2,6--(3H,7H)-diona (50,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 30%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 354, encontrado 354. Etapa 2 7-(Ciclopropilmetil)-3-metil-1-((5-metil-2-(1,1,1-triflúor-2- hidroxipropan-2-il)tiazol-4-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona
[00272] 1-[(5-Acetil-2-piridil)metil]-7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1H- purina-2,6--(3H,7H)-diona (100 mg, 0,283 mmol), fluoreto de césio (43,0 mg, 0,283 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (10 mL), trimetil-trifluorometil-silano (60,4 mg, 0,424 mmol) foi adicionado em temperatura ambiente e agitada por 12 horas. A reação foi saciada por adição de água (20 mL). A mistura de reação foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, lavadas com solução salina saturada, secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar 7-(ciclopropilmetil)-3-metil-1-((5-metil-2-(1,1,1-triflúor-2- hidroxipropan-2-il)tiazol-4-il)metil)-1H-purina-2,6-(3H,7H)-diona (10,0 mg, sólido amarelo), rendimento: 8%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,92 (s, 1H), 8,75 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,97 (s, 1H), 5,54 (s, 1H), 4,21 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,58 (s, 3H), 1,45-1,42 (m, 1H), 0,64-0,59 (m, 2H), 0,50-0,46 (m, 2H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 424, encontrado 424. Modalidade 57 1-((4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-7-isobutil-3-metil- 1H-purina-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7-isobutil-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00273] Metanossulfonato de 1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetila (1,07 g, 4,81 mmols), 7-isobutil-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (1,00 g, 4,01 mmols) e carbonato de potássio (647 mg, 4,81 mmols) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (14 mL), iodeto de potássio (66,5 mg, 0,401 mmol) foi adicionado e a reação foi aquecida a 130°C e agitados a refluxo por 3 horas. A solução de reação foi imediatamente filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para liberar o produto bruto 1-(1,4-dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7-isobutil- 3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (produto bruto 2,56 g, óleo marrom). MS-ESI calculada para [M+H]+ 377, encontrado 377. Etapa 2 7-Isobutil-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)- diona
[00274] 1-(1,4-Dioxaspiro[4,5]decan-8-ilmetil)-7-isobutil-3-metil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (2,50 g, 6,00 mmols) foi dissolvido em acetona (12 mL), solução aquosa de ácido clorídrico 4 N (2 mL) foi adicionada. A reação foi agitada a 30°C durante a noite e o pH foi ajustado para 7 por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (8 mL). Água (100 mL) foi adicionado na solução de reação, que foi em seguida extraída com acetato de etila (150 mL x 3), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, o produto resultante foi purificado por cromatografia de coluna em sílica-gel (1:2 éter de petróleo/acetato de etila, Rf = 0,3) para liberar o produto7-isobutil-3-metil-1-((4-oxociclo- hexil)metil)-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (150 mg, sólido branco), rendimento: 13%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,94 (s, 1H), 4,14 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,99 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,55 (s, 3H), 2,29-2,38 (m, 5H), 2,20-2,13 (m, 1H), 2,03-1,98 (m, 2H), 1,53-1,47 (m, 2H), 0,92 (d, J = 6,4 Hz, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+333, encontrado 333. Etapa 3 1-((4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-7-isobutil-3-metil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona
[00275] 7-Isobutil-3-metil-1-((4-oxociclo-hexil)metil)-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (150 mg, 0,450 mmol) e fluoreto de césio (8,0 mg, 0,0450 mmol) foram dissolvidos em tetra-hidrofurano (3 mL), sob at-mosfera de nitrogênio gasoso, trifluorometiltrimetilsilano (950 mg, 0,640 mmol) foi adicionado. A reação foi agitada a 30°C por 16 horas. Solução aquosa de ácido clorídrico 4 N (3 mL) foi adicionada, e após agitar a 25°C por meia hora, o valor de pH da mistura de reação foi ajustado para 7 por adição de solução aquosa de bicarbonato de sódio saturado (15 mL), água (50 mL) foi adicionada, e extraída com acetato de etila (50 mLx 3), a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso e concentrada sob pressão reduzida para liberar o produto bruto, que foi purificado por cromatografia líquida de alta performance preparativa para liberar o produto 1-((4-hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo- hexil)metil)-7-isobutil-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (86,0 mg, sólido branco), rendimento: 48%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,93 (s, 1H), 4,15-4,04 (m, 2H), 3,89 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 3,54 (s, 3H), 2,20-1,98 (m, 3H), 1,86-1,79 (m, 2H), 1,61-1,42 (m, 5H), 0,92 (d, J = 6,4 Hz, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 403, encontrado 403. Modalidade 58
[00276] 1-((4-Hidróxi-4-(trifluorometil)ciclo-hexil)metil)-7-isobutil-3- metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (900 mg, 2,24 mmols) foi separado por SFC preparativa para liberar dois isômeros. Condições de separação por isômero 1: Coluna: AD 250 mm x 30 mm, 5 μm Fase móvel: A: Dióxido de carbono supercrítico, B: Etanol (0,05% amônia), A: B = 80:20 Taxa de fluxo: 50 mL/min Comprimento de onda: 220 nm. Condições de separação por isômero 2: Coluna: WEEK-1 300 mm x 25 mm, 5 μm; Fase móvel: A: dióxido de carbono supercrítico, B: etanol (0,05% amônia), A: B = 60:40, taxa de fluxo: 60 mL/min, comprimento de onda: 220 nm.
[00277] Produto 1 (isômero 1, o primeiro pico) (216 mg, sólido branco), rendimento: 36%,1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,09 (s, 1H), 5,65 (s, 1H), 4,07 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,90 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,43 (s, 3H), 2,14-2,00 (m, 2H), 1,92-1,80 (m, 2H), 1,77-1,66 (m, 2H), 1,52-1,44 (m, 2H), 1,37-1,30 (m, 2H), 0,84 (d, J = 6,4 Hz, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 403, encontrado 403.
[00278] Produto 2 (isômero 2, o segundo pico) (101 mg, sólido branco), rendimento de 37%. 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,07 (s, 1H), 5,64 (s, 1H), 4,05 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,75 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,42 (s, 3H), 2,16-2,03 (m, 1H), 1,71-1,66 (m, 3H), 1,48-1,30 (m, 6H), 0,83 (d, J = 6,4 Hz, 6H).MS-ESI calculada para [M+H]+ 403, encontrado 403. Modalidade 59 7-(2,3-Di-hidroxipropil)-1-(5-etil-5-hidroxiheptil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 7-((2,2-Dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00279] 3-Metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (200 mg, 1,20 mmol), carbonato de sódio (128 mg, 1,20 mmol), 4-(clorometil)-2,2-dimetil-1,3- dioxalano (217 mg, 1,44 mmol) e iodeto de potássio (20,0 mg, 0,120 mmol) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 110°C e reagida por 36 horas. A reação foi saciada por adição de água (10 mL), em seguida a mistura de reação foi extraída com acetato de etila (10 mL x 3) e a fase orgânica foi lavada com solução salina saturada (5 mL), secada sobre sulfato de sódio anidroso, concentrada sob pressão reduzida e purificada por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 7-((2,2-dimetil- 1,3-dioxolan-4-il)metil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (169 mg, sólido amarelo), rendimento: 50%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 281, encontrado 281. Etapa 2 5-(7-((2,2-Dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metil)-3-metil-2,6-dioxo-2,3,6,7- tetra-hidro-1H-purinan-1-il) valerato de etila
[00280] 7-((2,2-Dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (169 mg, 0,604 mmol), bromovalerato de etila(178 mg, 0,906 mmol), carbonato de potássio (167 mg, 1,21 mmol) e iodeto de potássio (20,0 mg, 0,0600 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 130°C, reagida por 3 horas, em seguida mistura de reação foi filtrada e con-centrada, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,4) para liberar 5-(7-((2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4- il)metil)-3-metil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purinan-1-il)valerato de etila (124 mg, sólido amarelo), rendimento: 50%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 409, encontrado 409. Etapa 3 7-((2,2-Dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metil)-1-(5-etil-5-hidroxiheptil)-3- metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00281] 5-(7-((2,2-Dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metil)-3-metil-2,6-dioxo- 2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purinan-1-il)valerato de etila (30,0 mg, 0,0750 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidroso (1 mL), brometo de etilmagnésio (solução de tetra-hidrofurano a 3 M, 0,15 mL, 0,450 mmol) foi lentamente adicionado gota a gota a -65°C. A reação foi reagida a -65°C por 0,5 hora e em seguida reagida a 0°C por 0,5 hora. A reação foi saciada vertendo a solução de reação em água (5 mL), que foi em seguida extraída com acetato de etila (5 mL x 3), secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, concentrada sob pressão reduzida e purificado por placa TLC preparativa (acetato de etila, Rf = 0,5) para liberar 7-((2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metil)-1-(5-etil-5-hidroxiheptil)-3- metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (20,0 mg, óleo amarelo), rendimento: 63%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 423, encontrado 423. Etapa 4 7-(2,3-Di-hidroxipropil)-1-(5-etil-5-hidroxiheptil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00282] 7-((2,2-Dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metil)-1-(5-etil-5-hidroxiheptil)- 3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (20,0 mg, 0,0470 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidroso (1 mL) e ácido clorídrico diluído (0,3 mL) e reagido a 25°C por 36 horas. Após a reação completar, a mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida e purificado por placa TLC preparativa (8:1 acetato de etila/metanol, Rf = 0,3) para liberar 7-(2,3-di-hidroxipropil)-1-(5-etil-5-hidroxiheptil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona (5,0 mg, sólido branco), rendimento: 28%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,90 (s, 1H), 4,57-4,53 (m, 1H), 4,26-4,22 (m, 1H), 4,03-3,96 (m, 3H), 3,58-3,55 (m, 2H), 3,54 (s, 3H), 1,66-1,61 (m, 2H), 1,48-1,44 (m, 6H), 1,34-1,29 (m, 2H), 0,85 (t, J = 8,0 Hz, 6H). MS- ESI calculada para [M+H]+ 383, encontrado 383. Modalidade 60 1-(5-Etil-5-hidroxiheptil)-7-(2-hidroxietil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 7-(2-Hidroxietil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona
[00283] 3-Metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (1,00 g, 6,00 mmols), carbonato de potássio (830 mg, 6,00 mmols) foram dissolvidos em N,N-dimetilformamida (10 mL). A solução de reação foi aquecida a 80°C por 0,5 hora e 2-bromoetanol (900 mg, 7,20 mmols) foi adicionado. A solução de reação foi aquecida a 130°C e reagida durante a noite. A solução de reação foi concentrada para liberar o bruto 7-(2- hidroxietil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona, o qual foi usado imediatamente na etapa seguinte. Etapa 2 5-(7-(2-hidroxietil)-3-metil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)valerato de etila
[00284] 7-(2-Hidroxietil)-3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (1,05 g, 5,00 mmols), 5-bromovalerato etila (1,25 g, 6,00 mmols) e carbonato de potássio (1,66 g, 12,0 mmols) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (3 mL). A solução de reação foi aquecida a 130°C por 3 horas. A reação foi saciada vertendo a solução de reação em água (20 mL) e a mistura foi então extraída com acetato de etila (20 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas, concentradas sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por placa TLC preparativa para liberar 5- (7-(2-hidroxietil)-3-metil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purin-1- il)valerato de etila (700 mg, óleo amarelo), rendimento: 35%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 339, encontrado 339. Etapa 3 1-(5-Etil-5-hidroxiheptil)-7-(2-hidroxietil)-3-metil-1H-purina- 2,6(3H,7H)-diona
[00285] 5-(7-(2-Hidroxietil)-3-metil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H- purin-1-il)valerato de etila (700 mg, 2,07 mmols) foi dissolvido em tetra- hidrofurano anidroso (7 mL), brometo de etilmagnésio (solução de tetra- hidrofurano a 3 M, 7 mL, 2,10 mmols) foi lentamente adicionado gota a gota a -78°C. A solução de reação foi reagida a -78°C por uma hora. A reação foi saciada vertendo a solução de reação em água (20 mL) e a mistura foi extraída com acetato de etila (20 mL x 3). A fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, concentrada sob pressão reduzida, o resíduo foi isolado e purificado por cromatografia líquida de alta performance para liberar 1-(5-etil-5-hidroxiheptil)-7-(2-hidroxietil)- 3-metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (110 mg, sólido branco), rendimento: 15%. 1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4): δ 7,90 (s, 1H), 4,41 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 4,00 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,87 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 1,68-1,59 (m, 2H), 1,50-1,42 (m, 5H), 1,39-1,29 (m, 3H), 0,95-0,77 (m, 6H). MS-ESI calcula-da para [M+H-H2O]+ 335, encontrado 335. Modalidade 61 1-(5-Etil-5-hidroxiheptanol)-7-(2-hidróxi-3-((2- hidroxietil)(metil)amino)propil)-3-metil-1H-2,6(3H,7H)-diona Etapa 1 1-Bromo-3-((2-hidroxietil)(metil)amino)propan-2-ol
[00286] 2-(Metilamino)etanol (135 mg, 1,80 mmol) foi dissolvido em N,N-dimetilformamida (5 mL), 2-(bromometil)oxirano (206 mg, 1,51 mmol) foi adicionado e reagido a temperatura ambiente por 1,5 horas. Após a reação estar completa, a solução de reação foi imediatamente usada na etapa seguinte. Etapa 2 7-(2-Hidróxi-3-((2-hidroxietil)(metil)amino)propil)-3-metil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona
[00287] 3-Metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona (100 mg, 0,602 mmol), carbonato de sódio (64,0 mg, 0,602 mmol) e iodeto de potássio (10,0 mg, 0,0600 mmol) foram adicionados a uma solução de 1-bromo-3-((2- hidroxietil)(metil)amino)propan-2-ol. A solução de reação foi aquecida a 80°C e reagida por 10 horas. Após a reação estar completa, a mistura de reação foi filtrada e concentrada sob pressão reduzida para liberar o produto bruto 7-(2-hidróxi-3-((2-hidroxietil)(metil)amino)propil)-3- metil-1H-purina-2,6(3H,7H)-diona, o qual foi usado imediatamente na etapa seguinte. MS-ESI calculada para [M+H]+ 298, encontrado 298. Etapa 3 5-(7-(2-Hidróxi-3-((2-hidroxietil)(metil)amino)propil)-3-metil-2,6- dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purinan-1-il)valerato de etila
[00288] 7-(2-Hidróxi-3-((2-hidroxietil)(metil)amino)propil)-3-metil-1H- purina-2,6(3H,7H)-diona (170 mg, 0,572 mmol), bromovalerato de etila (169 mg, 0,858 mmol), carbonato de potássio (158 mg, 1,14 mmol) e iodeto de potássio (10,0 mg, 0,0570 mmol) foram dissolvidos em N,N- dimetilformamida (5 mL). A solução de reação foi aquecida a 130°C e reagida por 3 horas. A solução de reação foi saciada vertendo água (5 mL), extraída com acetato de etila (10 mL x 3). As fases orgânicas foram combinadas, secadas sobre sulfato de sódio anidroso, filtradas e concentradas, isoladas e purificadas por placa TLC preparativa (8:1 diclorometano/metanol, Rf = 0,4) para liberar 5-(7-(2-hidróxi-3-((2- hidroxietil)(metil)amino)propil)-3-metil-2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H- purinan-1-il)valerato de etila (118 mg, óleo amarelo), rendimento: 49%. MS-ESI calculada para [M+H]+ 426, encontrado 426. Etapa 4 1-(5-Etil-5-hidroxiheptolol)-7-(2-hidróxi-3-((2- hidroxietil)(metil)amino)propil)-3-metil-1H-2,6(3H,7H)-diona
[00289] 5-(7-(2-Hidróxi-3-((2-hidroxietil)(metil)amino)propil)-3-metil- 2,6-dioxo-2,3,6,7-tetra-hidro-1H-purinan-1-il)valerato de etila (100 mg, 0,235 mmol) foi dissolvido em tetra-hidrofurano anidroso (4 mL) e brometo de etil magnésio (solução de tetra-hidrofurano a 3 M, 0,47 mL, 1,41 mmol) foi lentamente adicionado gota a gota a -65°C. A reação foi reagida a -65°C por 0,5 hora e em seguida reagida a 0°C por 0,5 hora. Após a reação estar completa, a solução de reação foi saciada vertendo água (5 mL), extraída com acetato de etila (5 mL x 3), que foi em seguida secada sobre sulfato de sódio anidroso, filtrada, concentrada sob pressão reduzida, isolada e purificada por placa TLC preparativa (6:1 acetato de etila/metanol, Rf = 0,3) para liberar 1-(5-etil-5- hidroxiheptanol)-7-(2-hidróxi-3-((2-hidroxietil)(metil)amino)propil)-3- metil-1H-2,6(3H,7H)-diona (3,0 mg, sólido branco), rendimento: 3%,1H RMN: (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,92 (s, 1H), 4,91-4,59 (m, 2H), 4,524,39 (m, 3H), 4,30-4,25 (m, 2H), 4,03-3,99 (m, 2H), 3,88-3,84 (m, 2H), 3,55 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 1,68-1,59 (m, 4H), 1,48-1,45 (m, 6H), 0,880,84 (m, 6H). MS-ESI calculada para [M+H]+ 440, encontrado 440.
[00290] Exemplo experimental 1: Avaliação da atividade inibitória da fosfodiesterase PDE2 in vitro.
[00291] Objetivo experimental: o corante fluorescente Alexa Fluor 633 substituído nos anticorpos AMP/GMP foi detectado pela análise de polarização de fluorescência para determinar a concentração de AMP/GMP produzida no sistema reacional, que foi utilizada para calcular os valores de IC50 dos compostos de ensaio contra fosfodiesterase PDE2..
Materiais experimentais:
[00292] A solução tampão medida: 10 mM Tris-HCl, pH 7,5, 5 mM MgCl2, 0,01% Brij 35, 1 mM DTT, e 1% DMSO.
[00293] Enzima: expressão da proteína PDE2A de comprimento total recombinante em células Sf9 de inseto utilizando etiqueta GST N- terminal com baculovírus.
[00294] Substrato: 1 μM cGMP.
[00295] Método de detecção: Transcreener® AMP2/GMP2 anticorpo, corante fluorescente AlexaFluor 633 AMP2/GMP2.
Operações experimentais:
[00296] A solução de enzima foi preparada utilizando uma solução de tampão recém preparada, e depois adicionada aos orifícios de reação, as soluções de DMSO dos compostos de teste foram adicionados pelo sis-tema de pipetagem acústica sem contato Nanoliter Echo550, e depois pré-incubadas a temperatura ambiente por 10 minutos, a reação foi inici- ada por adição do substrato (1 μM cGMP), e então reagiu a temperatura ambiente por uma hora. Adicionou-se então o sistema de detecção (Anti-corpo Transcreener® AMP2/GMP2, corante fluorescente AMP2/GMP2 Ale- xaFluor 633), reagiu-se à temperatura ambiente durante 90 minutos e a polarização de fluorescência foi detectada utilizando Ex/Em 620/688.
[00297] A intensidade de polarização de fluorescência foi convertida para a concentração de nM por curva padrão de AMP/GMP, calculada a atividade enzimática relativa em relação ao DMSO em branco, os valores de IC50 e as curvas foram calculadas utilizando pacotes Prismsoftware (GraphPad Software, San Diego, Califórnia, EUA ). Resultados experimentais: Tabela 1 Resultados dos testes da atividade inibitória da fosfodi- esterase PDE2. Note: 10 uM≦"+" < 50 μM, 1 μM ≦ "++" < 10 μM, "+ + +" < 1 μM; -- N/A. Conclusão: os compostos de uma presente invenção têm atividade inibidora de protease de PDE2A significativa ou mesmo inesperada.
[00298] Exemplo experimental 2: Avaliação do efeito de compostos sobre TNF-α em sangue de ratos induzido por LPS in vitro
[00299] Objetivo experimental: Detectar os efeitos dos compostos sobre TNF-α em sangue induzido por LPS de ratos in vitro, avaliar o efeito inibitório dos compostos sobre TNF-α em sangue de ratos induzido por LPS.
Materiais experimentais:
[00300] Ratos Sprague Dawley (machos, 210-260 g, 8 a 10 semanas de idade, Shanghai Slack); TNF-alfa de rato Quantikine ELISA Kit (R&D, #SRTA00).
Operações experimentais:
[00301] Foram preparadas soluções de compostos de teste com uma concentração de 1 mM, dos quais 40 μL (a concentração final do composto era 100 μM) foram respectivamente adicionados a placas de cultura de células de 48 cavidades. Os ratos foram anestesiados com isoflurano e foi colhido sangue cardíaco (a heparina foi utilizada para anticoagulação). O sangue foi adicionado às placas de 48 cavidades que continham os compostos de teste, 320 μL por orifício. As placas de 48 cavidades foram colocadas num incubador de células e incubadas durante 30 minutos, adicionou-se 40 μL de solução de LPS (100 μg/mL), misturou-se e foi colocado na incubadora e continuado a incubar. As placas de 48 cavidades foram removidas após 5 horas, as amostras de sangue foram transferidas para tubos de centrífuga de 1,5 mL, centrifugadas numa centrífuga (4.500 rpm, 4°C, 5 minutos), o plasma superior foi separado, congelado após armazenamento e armazenado num frigorífico a -80°C. Os níveis de TNF-α em amostras de plasma foram medidos utilizando o kit R & D ELISA de acordo com as instruções do kit, o dia de ninho. Resultados experimentais: Tabela 2 Resultados testes de atividade inibidora de TNF-a. Nota: 60% ≦ "+" ＜ 80%; 80% ≦ "＋＋" ＜ 100%; -- N/A Conclusão: os compostos de uma presente invenção têm atividade inibidora significativa ou mesmo inesperada de TNF-a.
[00302] Exemplo experimental 3: avaliação farmacocinética de compostos.
[00303] Objetivo experimental: A farmacocinética dos compostos de teste em ratos SD.
Materiais experimentais:
[00304] Ratos Sprague Dawley (machos, 200 a 300 g, 7 a 9 semanas de idade, Shanghai Slack).
Operações experimentais:
[00305] As características farmacocinéticas de roedores após ad-ministração intravenosa e oral dos compostos foram testadas de acordo com o protocolo padrão, no experimento, o composto candidato foi formulado numa solução límpida, e os ratos receberam uma única in- jeção intravenosa e administração oral. Os solventes intravenosos e orais apresentam uma certa proporção de solução aquosa de hidroxi- propil β ciclodextrina ou solução fisiológica salina. As amostras de sangue ao longo de 24 horas foram recolhidas, centrifugadas (3000 g) durante 15 minutos, o sobrenadante foi separado para obter as amostras de plasma, a proteína foi precipitada adicionando um volume de 4 vezes a solução de acetonitrila que continha o padrão interno, centrifugou-se e o sobrenadante foi centrifugado após adição de igual volume de água, depois o sobrenadante foi injetado, a concentração plas- mática foi analisada quantitativamente por análise de LC-MS/MS, e parâmetros farmacocinéticos tais como concentração de pico, tempo de pico, taxa de depuração, meia-vida, área de fármaco sob a curva, biodisponibilidade, etc., são calculados. Resultados experimentais: Tabela 3. Resultados de testes de farmacocinéticos.
[00306] Conclusão: os compostos da presente invenção podem aumentar significativamente um único ou parte do índice de farmaco- cinéticas de ratos.

Claims (9)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta uma estrutura de fórmula (I), um (R)-isômero ou (S)-isômero do mesmo ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que, opcionalmente, a unidade estrutural pode ser substituída por L11 é selecionado de ausência, ou C(R)(R'); cada um de R e R' é independentemente selecionado de H, um halogênio, OH, NH2, CN, ou uma alquila opcionalmente substituída de 1 a 6 membros; opcionalmente, R, R' podem formar uma cicloalquila de 3 a 6 membros por ciclização; A é selecionado de cada um dos quais é opcionalmente substituído; L12 é selecionado de metileno, R1 é selecionado de uma C1-C6 alquila opcionalmente subs tituída de 1 a 6 membros; os substituintes em R1 são selecionados a partir de átomos de halogênio, C1-C6 alquila e ciclopropila; os substituintes nos R, R' e A são selecionados indepen dentemente a partir de halogênio, CF3, OH, NH2, CN, , alquila ou heteroalquila de 1 a 6 membros, o número do substituinte em cada grupo é selecionado independentemente de 1, 2 ou 3.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que os substituintes nos R, R' e A são independentemente selecionados do halogênio, CF3, CN, OH, Me, Et, n-propila, iso- propila, ciclopropila, ou
3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, carac-terizado pelo fato de que os R e R’ são independentemente selecionados de H, Me, CF3, ou Et.
4. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, carac- 'V V vFs terizado pelo fato de que o L11 é selecionado de ,
5. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o A é selecionado de , ,
6. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, carac- terizado pelo fato de que o R1 é selecionado de Me, CHF2, CF3, Et, CH2CF3, isopropila, , ciclopropila ou
7. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado do grupo que consiste
8. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto é selecionado do grupo consistindo em:
9. Uso do composto, do (R)-isômero ou (S)-isômero do mesmo ou do sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 8, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um inibidor de PDE2 e um inibidor de TNF-α.
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