BR112016029589B1

BR112016029589B1 - Método para a detecção de câncer de pulmão

Info

Publication number: BR112016029589B1
Application number: BR112016029589-7A
Authority: BR
Inventors: Hiroko SUDO; Hitoshi Nobumasa; Satoko Kozono; Satoshi Kondou; Junpei KAWAUCHI; Atsushi Ochiai; Motohiro Kojima
Original assignee: Toray Industries, Inc.; National Cancer Center
Priority date: 2014-06-18
Filing date: 2015-06-18
Publication date: 2023-05-30

Abstract

KIT, DISPOSITIVO, MÉTODO E MARCADOR PARA A DETECÇÃO DE CÂNCER DE PULMÃO. A invenção pretende oferecer um kit ou um dispositivo para a detecção do câncer de pulmão e um método para a detecção do câncer de pulmão. A presente invenção provê um kit ou um dispositivo para a detecção do câncer de pulmão, compreendendo um ácido nucleico capaz de ligar especificamente a um miRNA em uma amostra de um sujeito, e um método para a detecção do câncer de pulmão compreendendo a medição in vitro do miRNA.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] A presente invenção diz respeito a um kit ou dispositivo para a detecção do câncer de pulmão, que compreende um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a um determinado miRNA, que é usado para a análise da presença ou ausência do câncer de pulmão em um sujeito, e um método para a detecção do câncer de pulmão, que compreende a medição de um nível de expressão de miRNA usando o ácido nucleico.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[0002] Os pulmões têm funções importantes de fornecimento de oxigênio para o corpo através da respiração e eliminação do dióxido de carbono. O ar captado pela boca ou nariz passa através da traqueia e brônquio, em seguida, entra separadamente no pulmão esquerdo e pulmão direito e se espalha por todo o pulmão através dos brônquios mais finos. Por fim, o oxigênio é levado para o sangue nos alvéolos enquanto o dióxido de carbono é eliminado (literatura não patentária 1).

[0003] De acordo com estatísticas de 2012 de tipos de câncer no Japão divulgadas pelo Center for Cancer Control and Information Services, National Cancer Center, o número de pessoas afetadas pelo câncer de pulmão foi de 107.241 pessoas. Ou seja, estima-se que um em cada 10 homens e uma a cada 22 mulheres sofrerão de câncer de pulmão. O número de casos deste tipo de câncer entre outros tipos de câncer leva o 3° lugar. Os homens são duas vezes mais propensos do que as mulheres para desenvolver o câncer de pulmão. O número de mortes por câncer de pulmão em homens e mulheres juntos sobe para 71.518 pessoas e leva o primeiro no lugar entre os outros tipos de câncer. O número estimado de indivíduos americanos afetados pelo câncer de pulmão subiu para 224.210 pessoas em 2014, entre os quais cerca de 159.260 pessoas supostamente morreram (literatura não patentária 1).

[0004] O câncer de pulmão tem diversos tipos histológicos. O câncer de pulmão de células pequenas ocupa aproximadamente 15% dos casos, enquanto que os tipos histológicos restantes são denominados de câncer pulmonar de células não pequenas. O câncer pulmonar de células não pequenas é amplamente classificado em três subtipos; adenocarcinoma, carcinoma de células escamosas e carcinoma de grandes células. Estes tipos histológicos diferem grandemente quanto ao local de origem, forma e velocidade de progressão, sintomas, etc., e, portanto, diferem quanto aos métodos de tratamento.

[0005] As fases de progressão (estadiamento) do câncer de pulmão são classificadas em estádios de 0 a 4 de acordo com os graus de disseminação do tumor (T0, Tis e T1 até T4), metástase linfonodal (N0 a N3) e metástases à distância (M0 e M1). Particularmente, quanto a propagação do tumor, T1 indica um tumor de 3 cm ou menos em seu diâmetro maior; T2 indica a tumor de mais de 3 cm, mas com menos de 7 cm; T3 indica um tumor com mais de 7 cm de diâmetro ou que invadiu locais adjacentes; e T4 indica um tumor que invadiu locais adjacentes de forma mais ampla, independentemente de seu tamanho.

[0006] A taxa de sobrevida para o câncer de pulmão difere dependendo das fases de progressão. De acordo com o relatório da literatura não patentária 1, a taxa de sobrevida em 5 anos para pacientes com câncer de pulmão de células não pequenas é de 45 a 49% para estádio 1, 30 a 31% para estádio 2, 5 a 14% para estádio 3, e 1% para estádio 4. Assim, a detecção e tratamento do câncer de pulmão em um estádio inicial faz uma contribuição significativa para a melhora na taxa de sobrevida.

[0007] O tratamento do câncer de pulmão é realizado principalmente pela ressecção cirúrgica, radioterapia e tratamento com drogas anticâncer. Particularmente, no câncer de pulmão precoce, a cirurgia é aplicável e o câncer é susceptível de ser completamente curado (literatura não patentária 1). Para o câncer de pulmão precoce, há algumas opções terapêuticas, por exemplo, um tratamento que coloca menos fardo sobre os pacientes, como cirurgia torácica, Radioterapia Estereotáxica Corporal (SBRT), terapia fotodinâmica, tratamento a laser e braquiterapia, que proporciona radiação de dentro o corpo, também podem ser aplicados para o tratamento do câncer de pulmão (literatura não patentária 1).

[0008] Conforme descrito na literatura não patentária 1, testes diagnósticos de câncer de pulmão são exames médicos e exame físico, bem como o exame de raio-X do tórax que é mais comumente realizado. Quando há resultados indicando suspeita de câncer de pulmão pelo exame de raios-X do tórax, diagnósticos por imagem mais precisos como CT, MRI, ou PET são realizados. Alternativamente, são realizados testes utilizando amostras, citologia de escarro, análise do líquido pleural, ou exame patológico envolvendo a inserção de uma agulha na lesão e a coleta de células ou tecidos que são examinados sob um microscópio. Além disso, os marcadores CEA e CYFRA21-1 são conhecidos como marcadores tumorais para a detecção do câncer de pulmão.

[0009] Conforme mostrado nas Literaturas Patentárias 1 e 2, existem relatos, embora em fase de investigação, de determinação do câncer de pulmão utilizando níveis de expressão de microRNAs (miRNAs), ou combinações dos níveis de expressão de miRNAs e níveis de expressão de marcadores proteicos adicionais em amostras biológicas, incluindo o sangue.

[0010] A literatura patentária 1 revela um método para a detecção do câncer de pulmão ou de outras doenças pulmonares utilizando miR-19b (miR-19b-3p) e similares em amostras de soro.

[0011] A literatura patentária 2 revela um método para a detecção do câncer de pulmão utilizando miR-1268 e miR-1228 em amostras de soro ou plasma.

[0012] A literatura patentária 3 revela um método para a detecção do câncer de pulmão utilizando miR-1307 e similares em células sanguíneas. LISTA DE CITAÇÕES LITERATURA PATENTÁRIA - Literatura patentária 1: Publicação de Patente JP (Kohyo) N° 2013-502931 A (2013) - Literatura patentária 2: Pedido Internacional WO 2011/146937 - Literatura patentária 3: Pedido de Patente US 13/376281 LITERATURA NÃO PATENTÁRIA - Literatura não patentária 1: American Cancer Society, “Lung Cancer (Non-Small Cell)”, 2013, p. 2 a 7 e 37 a 56 - Literatura não patentária 2: Sobin, L. et al., “TNM Classification of Malignant Tumours, the 7th edition”, 2010, p. 129-134 - Literatura não patentária 3: Okamura, K. et al, Lung Cancer, 2013, Vol. 80 (1), p. 45-9

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO PROBLEMA TÉCNICO

[0013] Um objeto da presente invenção é o de encontrar um novo marcador tumoral para o câncer de pulmão e proporcionar um método que pode detectar eficazmente o câncer de pulmão utilizando um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente ao marcador. O exame de raios-X do tórax está sendo comumente praticado como um teste para o câncer de pulmão. Entretanto, o número de mortes por câncer de pulmão está aumentando anualmente e leva o primeiro lugar por tipo de câncer. Por estas razões, nem sempre é verdade que o exame de raios-X funcione como um impedimento para o câncer do pulmão. Embora a CT e MRI sejam capazes de detectar o câncer de pulmão com alto desempenho, estes testes não são adequados para uso difundido como 1° teste devido a necessidade de seus aparatos especiais e ao alto custo do exame.

[0014] Por exemplo, CEA e CYFRA21-1 são conhecidos como marcadores tumorais no sangue para a detecção do câncer de pulmão (literatura não patentária 3). No entanto, a utilidade dos mesmos ainda não foi estabelecida. Assim, o guia de câncer de pulmão fornecido pela American Cancer Society não faz nenhuma menção sobre estes marcadores (literatura não patentária 1). De acordo com o relatório da literatura não patentária 3, estes marcadores tumorais no sangue têm uma sensibilidade de detecção geral para o câncer de pulmão de 69% (CEA) e 43% (CYFRA21-1). Os níveis dos marcadores tumorais, como CEA e CYFRA21-1, podem estar elevados por outras razões além do câncer de pulmão e, portanto, não conseguem alegadamente determinar a presença ou ausência do câncer de pulmão. O falso diagnóstico de outros tipos de câncer como sendo câncer de pulmão desperdiça a oportunidade terapêutica adequada e dá lugar a ônus econômicos e físicos desnecessários aos pacientes devido à aplicação da terapêutica equivocada.

[0015] Tal como descrito abaixo, há relatos, embora em fase de investigação, de determinação do câncer de pulmão utilizando níveis de microRNAs (miRNAs) em amostras biológicas, incluindo sangue, nenhum dos quais, no entanto, foi posto em uso prático.

[0016] A literatura patentária 1 revela um método para a detecção do câncer de pulmão ou de outras doenças pulmonares utilizando miR-19b (miR-19b-3p) e similares em amostras de soro. No entanto, o número de amostras de sujeitos saudáveis utilizados como controles negativos foi tão pequeno como uma dúzia. Portanto, a universalidade do marcador para a diferença entre os sujeitos não é segurada. Assim, este método tem baixa fiabilidade como um método para a detecção do câncer de pulmão.

[0017] A literatura patentária 2 revela um método para a detecção do câncer de pulmão utilizando miR-1268 e miR-1228 em amostras de soro ou plasma. No entanto, esses marcadores foram validados em apenas 3 casos de mesotelioma como um câncer que não é o câncer de pulmão. Assim, a possibilidade de que estes marcadores tenham uma elevada taxa de falsos positivos e que sejam capazes de detectar outros tipos de câncer além do câncer de pulmão não pode ser excluída.

[0018] A literatura patentária 3 revela um método para a detecção do câncer de pulmão utilizando miR-1307 e similares em células sanguíneas. No entanto, um marcador obtido utilizando um grupo caso não foi validado em outro grupo caso independente. Assim, este método tem baixa fiabilidade como um método para exame do câncer de pulmão.

[0019] Conforme mencionado acima, os marcadores tumorais existentes exibem baixo rendimento na detecção de câncer de pulmão, ou nem o desempenho nem métodos de detecção são especificamente mostrados para os marcadores em uma fase de investigação. Portanto, o uso destes marcadores poderia levar à imposição de exames adicionais desnecessários devido à falsa detecção de sujeitos saudáveis como pacientes com câncer de pulmão, ou pode desperdiçar a oportunidade terapêutica devido à subestimação de pacientes com câncer de pulmão. Além disso, a medição de várias dezenas a várias centenas de miRNAs aumenta os custos do exame e, por esse motivo, é de difícil uso no rastreio em larga escala, tal como em um exame médico. Além disso, a coleta de tecidos do pulmão para mensurar os marcadores tumorais é altamente invasiva para os pacientes e não é favorável. Portanto, existe a procura de um marcador para o câncer de pulmão altamente preciso que seja detectável a partir do sangue, que pode ser coletado com limitada invasividade, e que seja capaz de determinar corretamente um paciente com câncer de pulmão como um paciente com câncer de pulmão e um sujeito saudável como sujeito saudável. Particularmente, a detecção precoce do câncer de pulmão pode aumentar a aplicabilidade de cirurgia e melhorar drasticamente as taxas de sobrevida. Para o câncer de pulmão precoce, existem várias opções terapêuticas. Existe a possibilidade de que tratamentos que colocam menos fardo sobre os pacientes, tal como a cirurgia toracoscópica ou radioterapia estereotáxica corporal, também possam ser aplicadas a tal câncer de pulmão. Portanto, um marcador de câncer de pulmão altamente sensível que pode detectar o câncer de pulmão, mesmo em uma fase precoce da progressão, é desejado.

SOLUÇÃO DO PROBLEMA

[0020] Os presentes inventores conduziram estudos diligentes para atingir o objetivo e, consequentemente, concluíram a presente invenção, encontrando múltiplos genes utilizáveis como marcadores para a detecção do câncer de pulmão a partir do sangue, que pode ser coletado com invasividade limitada, e encontraram que o câncer de pulmão pode ser significativamente detectado usando ácido(s) nucleico(s) capaz(es) de ligar especificamente a qualquer um desses marcadores.

DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO

[0021] Especificamente, a presente invenção tem as seguintes características: (1) Um kit para a detecção do câncer de pulmão, compreendendo um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo dos marcadores de câncer de pulmão miR-6768-5p, miR-6836-3p, miR-6782-5p, miR-3663-3p, miR-1908-3p, miR-6726-5p, miR-4258, miR-1343- 3p, miR-4516, miR-6875-5p, miR-4651, miR-6825-5p, miR-6840-3p, miR- 6780b-5p, miR-6749-5p, miR-8063, miR-6784-5p, miR-3679-5p, miR-3184-5p, miR-663b, miR-6880-5p, miR-1908-5p, miR-92a-2-5p, miR-7975, miR-7110- 5p, miR-6842-5p, miR-6857-5p, miR-5572, miR-3197, miR-6131, miR-6889- 5p, miR-4454, miR-1199-5p, miR-1247-3p, miR-6800-5p, miR-6872-3p, miR- 4649-5p, miR-6791-5p, miR-4433b-3p, miR-3135b, miR-128-2-5p, miR-4675, miR-4472, miR-6785-5p, miR-6741-5p, miR-7977, miR-3665, miR-128-1-5p, miR-4286, miR-6765-3p, miR-4632-5p, miR-365a-5p, miR-6088, miR-6816-5p, miR-6885-5p, miR-711, miR-6765-5p, miR-3180, miR-4442, miR-4792, miR- 6721-5p, miR-6798-5p, miR-3162-5p, miR-6126, miR-4758-5p, miR-2392, miR-486-3p, miR-6727-5p, miR-4728-5p, miR-6746-5p, miR-4270, miR-3940- 5p, miR-4725-3p, miR-7108-5p, miR-3656, miR-6879-5p, miR-6738-5p, miR- 1260a, miR-4446-3p, miR-3131, miR-4463, miR-3185, miR-6870-5p, miR- 6779-5p, miR-1273g-3p, miR-8059, miR-4697-5p, miR-4674, miR-4433-3p, miR-4257, miR-1915-5p, miR-4417, miR-1343-5p, miR-6781-5p, miR-4695-5p, miR-1237-5p, miR-6775-5p, miR-7845-5p, miR-4746-3p, miR-7641, miR-7847- 3p, miR-6806-5p, miR-4467, miR-4726-5p, miR-4648, miR-6089, miR-1260b, miR-4532, miR-5195-3p, miR-3188, miR-6848-5p, miR-1233-5p, miR-6717-5p, miR-3195, miR-6757-5p, miR-8072, miR-4745-5p, miR-6511a-5p, miR-6776- 5p, miR-371a-5p, miR-1227-5p, miR-7150, miR-1915-3p, miR-187-5p, miR- 614, miR-1225-5p, miR-451a, miR-939-5p, miR-223-3p, miR-125a-3p, miR- 92b-5p, miR-22-3p, miR-6073, miR-6845-5p, miR-6769b-5p, miR-4665-3p, miR-1913, miR-1228-3p, miR-940, miR-296-3p, miR-4690-5p, miR-548q, miR- 663a, miR-1249, miR-1202, miR-7113-3p, miR-1225-3p, miR-4783-3p, miR- 4448 e miR-4534; (2) O kit de acordo com (1), em que miR-6768-5p é hsa-miR- 6768-5p, miR-6836-3p é hsa-miR-6836-3p, miR-6782-5p é hsa-miR-6782-5p, miR-3663-3p é hsa-miR-3663-3p, miR-1908-3p é hsa-miR-1908-3p, miR- 6726-5p é hsa-miR-6726-5p, miR-4258 é hsa-miR-4258, miR-1343-3p é hsa-miR-1343-3p, miR-4516 é hsa-miR-4516, miR-6875-5p é hsa-miR- 6875-5p, miR-4651 é hsa-miR-4651, miR-6825-5p é hsa-miR-6825-5p, miR-6840-3p é hsa-miR-6840-3p, miR-6780b-5p é hsa-miR-6780b-5p, miR-6749-5p é hsa-miR-6749-5p, miR-8063 é hsa-miR-8063, miR-6784-5p é hsa-miR-6784-5p, miR-3679-5p é hsa-miR-3679-5p, miR-3184-5p é hsa- miR-3184-5p, miR-663b é hsa-miR-663b, miR-6880-5p é hsa-miR-6880- 5p, miR-1908-5p é hsa-miR-1908-5p, miR-92a-2-5p é hsa-miR-92a-2-5p, miR-7975 é hsa-miR-7975, miR-7110-5p é hsa-miR-7110-5p, miR-6842-5p é hsa-miR-6842-5p, miR-6857-5p é hsa-miR-6857-5p, miR-5572 é hsa- miR-5572, miR-3197 é hsa-miR-3197, miR-6131 é hsa-miR-6131, miR- 6889-5p é hsa-miR-6889-5p, miR-4454 é hsa-miR-4454, miR-1199-5p é hsa-miR-1199-5p, miR-1247-3p é hsa-miR-1247-3p, miR-6800-5p é hsa- miR-6800-5p, miR-6872-3p é hsa-miR-6872-3p, miR-4649-5p é hsa-miR- 4649-5p, miR-6791-5p é hsa-miR-6791-5p, miR-4433b-3p é hsa-miR- 4433b-3p, miR-3135b é hsa-miR-3135b, miR-128-2-5p é hsa-miR-128-2- 5p, miR-4675 é hsa-miR-4675, miR-4472 é hsa-miR-4472, miR-6785-5p é hsa-miR-6785-5p, miR-6741-5p é hsa-miR-6741-5p, miR-7977 é hsa-miR- 7977, miR-3665 é hsa-miR-3665, miR-128-1-5p é hsa-miR-128-1-5p, miR- 4286 é hsa-miR-4286, miR-6765-3p é hsa-miR-6765-3p, miR-4632-5p é hsa-miR-4632-5p, miR-365a-5p é hsa-miR-365a-5p, miR-6088 é hsa-miR- 6088, miR-6816-5p é hsa-miR-6816-5p, miR-6885-5p é hsa-miR-6885-5p, miR-711 é hsa-miR-711, miR-6765-5p é hsa-miR-6765-5p, miR-3180 é hsa-miR-3180, miR-4442 é hsa-miR-4442, miR-4792 é hsa-miR-4792, miR-6721-5p é hsa-miR-6721-5p, miR-6798-5p é hsa-miR-6798-5p, miR- 3162-5p é hsa-miR-3162-5p, miR-6126 é hsa-miR-6126, miR-4758-5p é hsa-miR-4758-5p, miR-2392 é hsa-miR-2392, miR-486-3p é hsa-miR-486- 3p, miR-6727-5p é hsa-miR-6727-5p, miR-4728-5p é hsa-miR-4728-5p, miR-6746-5p é hsa-miR-6746-5p, miR-4270 é hsa-miR-4270, miR-3940-5p é hsa-miR-3940-5p, miR-4725-3p é hsa-miR-4725-3p, miR-7108-5p é hsa- miR-7108-5p, miR-3656 é hsa-miR-3656, miR-6879-5p é hsa-miR-6879- 5p, miR-6738-5p é hsa-miR-6738-5p, miR-1260a é hsa-miR-1260a, miR- 4446-3p é hsa-miR-4446-3p, miR-3131 é hsa-miR-3131, miR-4463 é hsa- miR-4463, miR-3185 é hsa-miR-3185, miR-6870-5p é hsa-miR-6870-5p, miR-6779-5p é hsa-miR-6779-5p, miR-1273g-3p é hsa-miR-1273g-3p, miR-8059 é hsa-miR-8059, miR-4697-5p é hsa-miR-4697-5p, miR-4674 é hsa-miR-4674, miR-4433-3p é hsa-miR-4433-3p, miR-4257 é hsa-miR- 4257, miR-1915-5p é hsa-miR-1915-5p, miR-4417 é hsa-miR-4417, miR- 1343-5p é hsa-miR-1343-5p, miR-6781-5p é hsa-miR-6781-5p, miR-4695- 5p é hsa-miR-4695-5p, miR-1237-5p é hsa-miR-1237-5p, miR-6775-5p é hsa-miR-6775-5p, miR-7845-5p é hsa-miR-7845-5p, miR-4746-3p é hsa- miR-4746-3p, miR-7641 é hsa-miR-7641, miR-7847-3p é hsa-miR-7847- 3p, miR-6806-5p é hsa-miR-6806-5p, miR-4467 é hsa-miR-4467, miR- 4726-5p é hsa-miR-4726-5p, miR-4648 é hsa-miR-4648, miR-6089 é hsa- miR-6089, miR-1260b é hsa-miR-1260b, miR-4532 é hsa-miR-4532, miR- 5195-3p é hsa-miR-5195-3p, miR-3188 é hsa-miR-3188, miR-6848-5p é hsa-miR-6848-5p, miR-1233-5p é hsa-miR-1233-5p, miR-6717-5p é hsa- miR-6717-5p, miR-3195 é hsa-miR-3195, miR-6757-5p é hsa-miR-6757- 5p, miR-8072 é hsa-miR-8072, miR-4745-5p é hsa-miR-4745-5p, miR- 6511a-5p é hsa-miR-6511a-5p, miR-6776-5p é hsa-miR-6776-5p, miR- 371a-5p é hsa-miR-371a-5p, miR-1227-5p é hsa-miR-1227-5p, miR-7150 é hsa-miR-7150, miR-1915-3p é hsa-miR-1915-3p, miR-187-5p é hsa-miR- 187-5p, miR-614 é hsa-miR-614, miR-1225-5p é hsa-miR-1225-5p, miR- 451a é hsa-miR-451a, miR-939-5p é hsa-miR-939-5p, miR-223-3p é hsa- miR-223-3p, miR-125a-3p é hsa-miR-125a-3p, miR-92b-5p é hsa-miR- 92b-5p, miR-22-3p é hsa-miR-22-3p, miR-6073 é hsa-miR-6073, miR- 6845-5p é hsa-miR-6845-5p, miR-6769b-5p é hsa-miR-6769b-5p, miR- 4665-3p é hsa-miR-4665-3p, miR-1913 é hsa-miR-1913, miR-1228-3p é hsa-miR-1228-3p, miR-940 é hsa-miR-940, miR-296-3p é hsa-miR-296-3p, miR-4690-5p é hsa-miR-4690-5p, miR-548q é hsa-miR-548q, miR-663a é hsa-miR-663a, miR-1249 é hsa-miR-1249, miR-1202 é hsa-miR-1202, miR-7113-3p é hsa-miR-7113-3p, miR-1225-3p é hsa-miR-1225-3p, miR- 4783-3p é hsa-miR-4783-3p, miR-4448 é hsa-miR-4448, e miR-4534 é hsa-miR-4534; (3) O kit de acordo com (1) ou (2), em que o ácido nucleico é um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (a) a (e): (a) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (b) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578; (c) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (d) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (e) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (a) a (d); (4) O kit de acordo com qualquer um de (1) a (3), em que o kit compreende ainda um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de outros marcadores do câncer de pulmão miR-19b-3p, miR-1228-5p, e miR-1307-3p; (5) O kit de acordo com (4), em que miR-19b-3p é hsa-miR- 19b-3p, miR-1228-5p é hsa-miR-1228-5p, e miR-1307-3p é hsa-miR-1307- 3p; (6) O kit de acordo com (4) ou (5), em que o ácido nucleico é um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (f) a (j): (f) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (g) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOS: 126, 131 e 579; (h) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (i) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (j) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (f) a (i); (7) O kit de acordo com qualquer um de (1) a (6), em que o kit compreende ainda um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de outros marcadores do câncer de pulmão miR-4271, miR-642b-3p, miR-6075, miR-6125, miR-887-3p, miR-6851-5p, miR-6763- 5p, miR-3928-3p, miR-4443, miR-3648, miR-149-3p, miR-4689, miR-4763- 3p, miR-6729-5p, miR-3196, miR-8069, miR-1268a, miR-4739, miR-1268b, miR-5698, miR-6752-5p, miR-4507, miR-564, miR-4497, miR-6877-5p, miR-6087, miR-4731-5p, miR-615-5p, miR-760, miR-6891-5p, miR-6887- 5p, miR-4525, miR-1914-3p, miR-619-5p, miR-5001-5p, miR-6722-3p, miR-3621, miR-4298, miR-675-5p e miR-4655-5p; (8) O kit de acordo com (7), em que miR-4271 é hsa-miR- 4271, miR-642b-3p é hsa-miR-642b-3p, miR-6075 é hsa-miR-6075, miR- 6125 é hsa-miR-6125, miR-887-3p é hsa-miR-887-3p, miR-6851-5p é hsa- miR-6851-5p, miR-6763-5p é hsa-miR-6763-5p, miR-3928-3p é hsa-miR- 3928-3p, miR-4443 é hsa-miR-4443, miR-3648 é hsa-miR-3648, miR-149- 3p é hsa-miR-149-3p, miR-4689 é hsa-miR-4689, miR-4763-3p é hsa-miR- 4763-3p, miR-6729-5p é hsa-miR-6729-5p, miR-3196 é hsa-miR-3196, miR-8069 é hsa-miR-8069, miR-1268a é hsa-miR-1268a, miR-4739 é hsa- miR-4739, miR-1268b é hsa-miR-1268b, miR-5698 é hsa-miR-5698, miR- 6752-5p é hsa-miR-6752-5p, miR-4507 é hsa-miR-4507, miR-564 é hsa- miR-564, miR-4497 é hsa-miR-4497, miR-6877-5p é hsa-miR-6877-5p, miR-6087 é hsa-miR-6087, miR-4731-5p é hsa-miR-4731-5p, miR-615-5p é hsa-miR-615-5p, miR-760 é hsa-miR-760, miR-6891-5p é hsa-miR-6891- 5p, miR-6887-5p é hsa-miR-6887-5p, miR-4525 é hsa-miR-4525, miR- 1914-3p é hsa-miR-1914-3p, miR-619-5p é hsa-miR-619-5p, miR-5001-5p é hsa-miR-5001-5p, miR-6722-3p é hsa-miR-6722-3p, miR-3621 é hsa- miR-3621, miR-4298 é hsa-miR-4298, miR-675-5p é hsa-miR-675-5p, e miR-4655-5p é hsa-miR-4655-5p; (9) O kit de acordo com (7) ou (8), em que o ácido nucleico é um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (k) a (o): (k) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (l) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOS: 135 a 174; (m) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (n) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (o) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (k) a (n); (10) O kit de acordo com qualquer um de (1) a (9), em que o kit compreende pelo menos dois ou mais ácidos nucleicos capazes de se ligar especificamente a pelo menos dois ou mais polinucleotídeos, respectivamente, selecionados a partir do grupo consistindo de todos os marcadores de câncer de pulmão de acordo com (1) ou (2); (11) Um dispositivo para a detecção do câncer de pulmão, compreendendo um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo dos marcadores de câncer de pulmão miR-6768-5p, miR-6836-3p, miR-6782-5p, miR-3663-3p, miR-1908-3p, miR-6726-5p, miR-4258, miR-1343-3p, miR-4516, miR-6875-5p, miR-4651, miR-6825- 5p, miR-6840-3p, miR-6780b-5p, miR-6749-5p, miR-8063, miR-6784-5p, miR-3679-5p, miR-3184-5p, miR-663b, miR-6880-5p, miR-1908-5p, miR- 92a-2-5p, miR-7975, miR-7110-5p, miR-6842-5p, miR-6857-5p, miR-5572, miR-3197, miR-6131, miR-6889-5p, miR-4454, miR-1199-5p, miR-1247- 3p, miR-6800-5p, miR-6872-3p, miR-4649-5p, miR-6791-5p, miR-4433b- 3p, miR-3135b, miR-128-2-5p, miR-4675, miR-4472, miR-6785-5p, miR- 6741-5p, miR-7977, miR-3665, miR-128-1-5p, miR-4286, miR-6765-3p, miR-4632-5p, miR-365a-5p, miR-6088, miR-6816-5p, miR-6885-5p, miR- 711, miR-6765-5p, miR-3180, miR-4442, miR-4792, miR-6721-5p, miR- 6798-5p, miR-3162-5p, miR-6126, miR-4758-5p, miR-2392, miR-486-3p, miR-6727-5p, miR-4728-5p, miR-6746-5p, miR-4270, miR-3940-5p, miR- 4725-3p, miR-7108-5p, miR-3656, miR-6879-5p, miR-6738-5p, miR-1260a, miR-4446-3p, miR-3131, miR-4463, miR-3185, miR-6870-5p, miR-6779- 5p, miR-1273g-3p, miR-8059, miR-4697-5p, miR-4674, miR-4433-3p, miR- 4257, miR-1915-5p, miR-4417, miR-1343-5p, miR-6781-5p, miR-4695-5p, miR-1237-5p, miR-6775-5p, miR-7845-5p, miR-4746-3p, miR-7641, miR- 7847-3p, miR-6806-5p, miR-4467, miR-4726-5p, miR-4648, miR-6089, miR-1260b, miR-4532, miR-5195-3p, miR-3188, miR-6848-5p, miR-1233- 5p, miR-6717-5p, miR-3195, miR-6757-5p, miR-8072, miR-4745-5p, miR- 6511a-5p, miR-6776-5p, miR-371a-5p, miR-1227-5p, miR-7150, miR- 1915-3p, miR-187-5p, miR-614, miR-1225-5p, miR-451a, miR-939-5p, miR-223-3p, miR-125a-3p, miR-92b-5p, miR-22-3p, miR-6073, miR-6845- 5p, miR-6769b-5p, miR-4665-3p, miR-1913, miR-1228-3p, miR-940, miR- 296-3p, miR-4690-5p, miR-548q, miR-663a, miR-1249, miR-1202, miR- 7113-3p, miR-1225-3p, miR-4783-3p, miR-4448 e miR-4534; (12) O dispositivo de acordo com (11), em que miR-6768-5p é hsa-miR-6768-5p, miR-6836-3p é hsa-miR-6836-3p, miR-6782-5p é hsa- miR-6782-5p, miR-3663-3p é hsa-miR-3663-3p, miR-1908-3p é hsa-miR- 1908-3p, miR-6726-5p é hsa-miR-6726-5p, miR-4258 é hsa-miR-4258, miR-1343-3p é hsa-miR-1343-3p, miR-4516 é hsa-miR-4516, miR-6875-5p é hsa-miR-6875-5p, miR-4651 é hsa-miR-4651, miR-6825-5p é hsa-miR- 6825-5p, miR-6840-3p é hsa-miR-6840-3p, miR-6780b-5p é hsa-miR- 6780b-5p, miR-6749-5p é hsa-miR-6749-5p, miR-8063 é hsa-miR-8063, miR-6784-5p é hsa-miR-6784-5p, miR-3679-5p é hsa-miR-3679-5p, miR- 3184-5p é hsa-miR-3184-5p, miR-663b é hsa-miR-663b, miR-6880-5p é hsa-miR-6880-5p, miR-1908-5p é hsa-miR-1908-5p, miR-92a-2-5p é hsa- miR-92a-2-5p, miR-7975 é hsa-miR-7975, miR-7110-5p é hsa-miR-7110- 5p, miR-6842-5p é hsa-miR-6842-5p, miR-6857-5p é hsa-miR-6857-5p, miR-5572 é hsa-miR-5572, miR-3197 é hsa-miR-3197, miR-6131 é hsa- miR-6131, miR-6889-5p é hsa-miR-6889-5p, miR-4454 é hsa-miR-4454, miR-1199-5p é hsa-miR-1199-5p, miR-1247-3p é hsa-miR-1247-3p, miR- 6800-5p é hsa-miR-6800-5p, miR-6872-3p é hsa-miR-6872-3p, miR-4649- 5p é hsa-miR-4649-5p, miR-6791-5p é hsa-miR-6791-5p, miR-4433b-3p é hsa-miR-4433b-3p, miR-3135b é hsa-miR-3135b, miR-128-2-5p é hsa- miR-128-2-5p, miR-4675 é hsa-miR-4675, miR-4472 é hsa-miR-4472, miR-6785-5p é hsa-miR-6785-5p, miR-6741-5p é hsa-miR-6741-5p, miR- 7977 é hsa-miR-7977, miR-3665 é hsa-miR-3665, miR-128-1-5p é hsa- miR-128-1-5p, miR-4286 é hsa-miR-4286, miR-6765-3p é hsa-miR-6765- 3p, miR-4632-5p é hsa-miR-4632-5p, miR-365a-5p é hsa-miR-365a-5p, miR-6088 é hsa-miR-6088, miR-6816-5p é hsa-miR-6816-5p, miR-6885-5p é hsa-miR-6885-5p, miR-711 é hsa-miR-711, miR-6765-5p é hsa-miR- 6765-5p, miR-3180 é hsa-miR-3180, miR-4442 é hsa-miR-4442, miR-4792 é hsa-miR-4792, miR-6721-5p é hsa-miR-6721-5p, miR-6798-5p é hsa- miR-6798-5p, miR-3162-5p é hsa-miR-3162-5p, miR-6126 é hsa-miR- 6126, miR-4758-5p é hsa-miR-4758-5p, miR-2392 é hsa-miR-2392, miR- 486-3p é hsa-miR-486-3p, miR-6727-5p é hsa-miR-6727-5p, miR-4728-5p é hsa-miR-4728-5p, miR-6746-5p é hsa-miR-6746-5p, miR-4270 é hsa- miR-4270, miR-3940-5p é hsa-miR-3940-5p, miR-4725-3p é hsa-miR- 4725-3p, miR-7108-5p é hsa-miR-7108-5p, miR-3656 é hsa-miR-3656, miR-6879-5p é hsa-miR-6879-5p, miR-6738-5p é hsa-miR-6738-5p, miR- 1260a é hsa-miR-1260a, miR-4446-3p é hsa-miR-4446-3p, miR-3131 é hsa-miR-3131, miR-4463 é hsa-miR-4463, miR-3185 é hsa-miR-3185, miR-6870-5p é hsa-miR-6870-5p, miR-6779-5p é hsa-miR-6779-5p, miR- 1273g-3p é hsa-miR-1273g-3p, miR-8059 é hsa-miR-8059, miR-4697-5p é hsa-miR-4697-5p, miR-4674 é hsa-miR-4674, miR-4433-3p é hsa-miR- 4433-3p, miR-4257 é hsa-miR-4257, miR-1915-5p é hsa-miR-1915-5p, miR-4417 é hsa-miR-4417, miR-1343-5p é hsa-miR-1343-5p, miR-6781-5p é hsa-miR-6781-5p, miR-4695-5p é hsa-miR-4695-5p, miR-1237-5p é hsa- miR-1237-5p, miR-6775-5p é hsa-miR-6775-5p, miR-7845-5p é hsa-miR- 7845-5p, miR-4746-3p é hsa-miR-4746-3p, miR-7641 é hsa-miR-7641, miR-7847-3p é hsa-miR-7847-3p, miR-6806-5p é hsa-miR-6806-5p, miR- 4467 é hsa-miR-4467, miR-4726-5p é hsa-miR-4726-5p, miR-4648 é hsa- miR-4648, miR-6089 é hsa-miR-6089, miR-1260b é hsa-miR-1260b, miR- 4532 é hsa-miR-4532, miR-5195-3p é hsa-miR-5195-3p, miR-3188 é hsa- miR-3188, miR-6848-5p é hsa-miR-6848-5p, miR-1233-5p é hsa-miR- 1233-5p, miR-6717-5p é hsa-miR-6717-5p, miR-3195 é hsa-miR-3195, miR-6757-5p é hsa-miR-6757-5p, miR-8072 é hsa-miR-8072, miR-4745-5p é hsa-miR-4745-5p, miR-6511a-5p é hsa-miR-6511a-5p, miR-6776-5p é hsa-miR-6776-5p, miR-371a-5p é hsa-miR-371a-5p, miR-1227-5p é hsa- miR-1227-5p, miR-7150 é hsa-miR-7150, miR-1915-3p é hsa-miR-1915- 3p, miR-187-5p é hsa-miR-187-5p, miR-614 é hsa-miR-614, miR-1225-5p é hsa-miR-1225-5p, miR-451a é hsa-miR-451a, miR-939-5p é hsa-miR- 939-5p, miR-223-3p é hsa-miR-223-3p, miR-125a-3p é hsa-miR-125a-3p, miR-92b-5p é hsa-miR-92b-5p, miR-22-3p é hsa-miR-22-3p, miR-6073 é hsa-miR-6073, miR-6845-5p é hsa-miR-6845-5p, miR-6769b-5p é hsa- miR-6769b-5p, miR-4665-3p é hsa-miR-4665-3p, miR-1913 é hsa-miR- 1913, miR-1228-3p é hsa-miR-1228-3p, miR-940 é hsa-miR-940, miR-296- 3p é hsa-miR-296-3p, miR-4690-5p é hsa-miR-4690-5p, miR-548q é hsa- miR-548q, miR-663a é hsa-miR-663a, miR-1249 é hsa-miR-1249, miR- 1202 é hsa-miR-1202, miR-7113-3p é hsa-miR-7113-3p, miR-1225-3p é hsa-miR-1225-3p, miR-4783-3p é hsa-miR-4783-3p, miR-4448 é hsa-miR- 4448, e miR-4534 é hsa-miR-4534; (13) O dispositivo de acordo com (11) ou (12), em que o ácido nucleico é um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (a) a (e): (a) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (b) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578; (c) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (d) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (e) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (a) a (d); (14) O dispositivo de acordo com qualquer um de (11) a (13), em que o dispositivo compreende ainda um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de outros marcadores do câncer de pulmão miR-19b-3p, miR-1228-5p, e miR-1307-3p; (15) O dispositivo de acordo com (14), em que miR-19b-3p é hsa-miR-19b-3p, miR-1228-5p é hsa-miR-1228-5p, e miR-1307-3p é hsa- miR-1307-3p; (16) O dispositivo de acordo com (14) ou (15), em que o ácido nucleico é um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (f) a (j): (f) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (g) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOS: 126, 131 e 579; (h) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (i) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (j) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (f) a (i); (17) O dispositivo de acordo com qualquer um de (11) a (16), em que o dispositivo compreende ainda um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de outros marcadores do câncer de pulmão miR-4271, miR-642b-3p, miR-6075, miR-6125, miR- 887-3p, miR-6851-5p, miR-6763-5p, miR-3928-3p, miR-4443, miR-3648, miR-149-3p, miR-4689, miR-4763-3p, miR-6729-5p, miR-3196, miR-8069, miR-1268a, miR-4739, miR-1268b, miR-5698, miR-6752-5p, miR-4507, miR-564, miR-4497, miR-6877-5p, miR-6087, miR-4731-5p, miR-615-5p, miR-760, miR-6891-5p, miR-6887-5p, miR-4525, miR-1914-3p, miR-619- 5p, miR-5001-5p, miR-6722-3p, miR-3621, miR-4298, miR-675-5p e miR- 4655-5p; (18) O dispositivo de acordo com (17), em que miR-4271 é hsa-miR-4271, miR-642b-3p é hsa-miR-642b-3p, miR-6075 é hsa-miR- 6075, miR-6125 é hsa-miR-6125, miR-887-3p é hsa-miR-887-3p, miR- 6851-5p é hsa-miR-6851-5p, miR-6763-5p é hsa-miR-6763-5p, miR-3928- 3p é hsa-miR-3928-3p, miR-4443 é hsa-miR-4443, miR-3648 é hsa-miR- 3648, miR-149-3p é hsa-miR-149-3p, miR-4689 é hsa-miR-4689, miR- 4763-3p é hsa-miR-4763-3p, miR-6729-5p é hsa-miR-6729-5p, miR-3196 é hsa-miR-3196, miR-8069 é hsa-miR-8069, miR-1268a é hsa-miR-1268a, miR-4739 é hsa-miR-4739, miR-1268b é hsa-miR-1268b, miR-5698 é hsa- miR-5698, miR-6752-5p é hsa-miR-6752-5p, miR-4507 é hsa-miR-4507, miR-564 é hsa-miR-564, miR-4497 é hsa-miR-4497, miR-6877-5p é hsa- miR-6877-5p, miR-6087 é hsa-miR-6087, miR-4731-5p é hsa-miR-4731- 5p, miR-615-5p é hsa-miR-615-5p, miR-760 é hsa-miR-760, miR-6891-5p é hsa-miR-6891-5p, miR-6887-5p é hsa-miR-6887-5p, miR-4525 é hsa- miR-4525, miR-1914-3p é hsa-miR-1914-3p, miR-619-5p é hsa-miR-619- 5p, miR-5001-5p é hsa-miR-5001-5p, miR-6722-3p é hsa-miR-6722-3p, miR-3621 é hsa-miR-3621, miR-4298 é hsa-miR-4298, miR-675-5p é hsa- miR-675-5p, e miR-4655-5p é hsa-miR-4655-5p; (19) O dispositivo de acordo com (17) ou (18), em que o ácido nucleico é um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (k) a (o): (k) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (l) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOS: 135 a 174; (m) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (n) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (o) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (k) a (n); (20) O dispositivo de acordo com qualquer um de (11) a (19), em que o dispositivo é um dispositivo para a medição por uma técnica de hibridização; (21) O dispositivo de acordo com (20), em que a técnica de hibridização é uma técnica de matriz de ácido nucleico (array); (22) O dispositivo de acordo com qualquer um de (11) a (21), em que o dispositivo compreende pelo menos dois ou mais ácidos nucleicos capazes de ligar especificamente a pelo menos dois ou mais polinucleotídeos, respectivamente, selecionados a partir de todos os marcadores de câncer de pulmão de acordo com (11) ou (12); (23) Um método para a detecção do câncer de pulmão, compreendendo a medição de um nível de expressão de um ácido nucleico alvo em uma amostra de um sujeito utilizando um kit de acordo com qualquer exemplo dentre (1) a (10) ou um dispositivo de acordo com qualquer exemplo dentre (11) a (22), e a avaliação in vitro para determinar se o sujeito possui ou não o câncer de pulmão utilizando tanto o nível de expressão mensurado quanto um nível de expressão de controle obtido em uma amostra de um sujeito saudável mensurado da mesma maneira; (24) O método de acordo com (23), em que o sujeito é um ser humano; (25) O método de acordo com (23) ou (24), em que a amostra é sangue, soro, ou plasma;

DEFINIÇÃO DOS TERMOS

[0022]Os termos utilizados na presente divulgação são definidos os seguintes.

[0023]As abreviaturas ou termos como “nucleotídeo”, “polinucleotídeo”, “DNA”, e “RNA” respeitam as “Diretrizes para a elaboração de relatório descritivo contendo sequências de nucleotídeos e/ou aminoácidos (Guidelines for the preparation of specification which contain nucleotide and/or amino acid sequences)” (editado pelo Japan Patent Office) e o uso comum no estado da técnica.

[0024] O termo “polinucleotídeo”, utilizado na presente invenção é usado para se referir a um ácido nucleico incluindo qualquer RNA, DNA e RNA/DNA (quimera). O DNA inclui qualquer DNA, seja cDNA, DNA genômico, e DNA sintético. O RNA inclui qualquer RNA, como RNA total, mRNA, rRNA, miRNA, siRNA, snoRNA, snRNA, RNA não codificante e RNA sintético. No presente relatório, “DNA sintético” e “RNA sintético” referem-se ao DNA e RNA artificialmente preparados utilizando, por exemplo, um sintetizador automático de ácidos nucleicos, com base em sequências nucleotídicas pré-determinadas (que podem ser quaisquer sequências, naturais e não naturais). A expressão “sequência não natural” destina-se a ser utilizada em um sentido amplo e inclui, por exemplo, uma sequência que compreende a substituição, deleção, inserção e/ou adição de um ou mais nucleotídeos (ou seja, uma sequência variante) e uma sequência que compreende um ou mais nucleotídeos modificados (ou seja, uma sequência modificada), que são diferentes da sequência natural. Na presente invenção, o termo “polinucleotídeo” é utilizado de maneira alternada com o termo “ácido nucleico”.

[0025] O termo “fragmento” utilizado na presente invenção é um polinucleotídeo possuindo uma sequência nucleotídica que consiste de uma porção consecutiva de um polinucleotídeo e, desejavelmente, tem um comprimento de 15 ou mais nucleotídeos, de preferência 17 ou mais nucleotídeos, mais preferencialmente 19 ou mais nucleotídeos.

[0026] O termo “gene” utilizado na presente invenção destina- se a incluir não apenas RNA e DNA de fita dupla, como também cada DNA de fita simples, tal como uma fita positiva (ou uma fita sense) ou uma fita complementar (ou uma fita antisense) constituindo o duplexo. O gene não é particularmente limitado pelo seu comprimento.

[0027] Assim, o termo “gene” utilizado na presente invenção inclui qualquer DNA de fita dupla incluindo o DNA genômico humano, DNA de fita simples (fita positiva), DNA de fita simples possuindo uma sequência complementar da fita positiva (fita complementar), incluindo cDNA, microRNA (miRNA), e seus fragmentos, e seus transcritos, salvo quando indicação de outra forma. O “gene” inclui não apenas um “gene” representado por uma sequência nucleotídica específica (ou SEQ ID NO), mas também “ácidos nucleicos” que codificam RNA possuindo funções biológicas equivalentes a um RNA codificado pelo gene, por exemplo, um congênere (ou seja, um homólogo ou ortólogo), uma forma variante (por exemplo, polimorfo genético), e um derivado do mesmo. Exemplos específicos de tal “ácido nucleico” que codifica um congênere, um variante, ou derivado pode incluir um “ácido nucleico” que possui uma sequência de nucleotídeos que hibridiza sob condições estringentes descritas mais adiante com uma sequência complementar à sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 618 ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência nucleotídica pela substituição de U por T. O “gene” não é particularmente limitado pela sua região funcional e pode conter, por exemplo, uma região reguladora da expressão, uma região codificante, um éxon ou um íntron. O “gene” pode estar contido em uma célula, ou pode existir sozinho após ser libertado para o exterior de uma célula. Alternativamente, o “gene” pode estar em um estado fechado em uma vesícula denominada exossomo.

[0028] O termo “exossomo” conforme utilizado na presente invenção é uma vesícula que é encapsulada por uma bicamada lipídica e secretada a partir de uma célula. O exossomo é derivado a partir de um endossomo multivesicular e pode incorporar biomateriais, tal como um “gene” (por exemplo, RNA ou DNA) ou uma proteína quando liberado em um ambiente extracelular. O exossomo é conhecido por estar contido em um fluido corporal tal como sangue, soro, plasma, soro ou linfa.

[0029] O termo “transcrito” utilizado na presente invenção refere-se a um RNA sintetizado com a sequência de DNA de um gene como um molde. A RNA polimerase se liga a um local denominado promotor localizado a montante do gene e adiciona ribonucleotídeos complementares na sequência de nucleotídeos do DNA na extremidade 3' para sintetizar RNA. Este RNA contém não apenas o próprio gene, com também toda a sequência de um sítio de iniciação da transcrição até o fim de uma sequência poliA, incluindo uma região de controle da expressão, uma região codificante, um éxon ou um íntron.

[0030] O termo “microRNA (miRNA)” utilizado na presente invenção pretende designar um RNA não codificante de 15 a 25 nucleotídeos que está envolvido na supressão da tradução do mRNA, e que é transcrito como um RNA precursor possuindo uma estrutura similar a um grampo de cabelo (hairpin-like), clivado por uma enzima de clivagem de dsRNA que possui atividade de clivagem de RNAase III, e integrado em um complexo de proteínas denominado RISC, a menos que especificado de outra forma. O termo “miRNA” utilizado na presente invenção, inclui não apenas um “miRNA” representado por uma sequência nucleotídica específica (ou SEQ ID NO), como também um “miRNA” precursor (pré-miRNA ou pri-miRNA), e miRNAs possuindo funções biológicas equivalentes ao mesmo, por exemplo, um congênere (ou seja, um homólogo ou ortólogo), uma forma variante (por exemplo, um polimorfo genético), e um derivado do mesmo. Tal precursor, congênere, variante ou derivado pode ser especificamente identificado utilizando a miRBase Release 20 (http://www.mirbase.org/), e os seus exemplos podem incluir um “miRNA” com uma sequência de nucleotídeos que hibridiza sob condições estringentes descritas mais adiante a uma sequência complementar de qualquer sequência de nucleotídeos particular, representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 618. O termo “miRNA” utilizado na presente invenção pode ser um produto gênico de um gene miR. Tal produto gênico inclui um miRNA maduro (por exemplo, de 15 a 25- nucleotídeos ou 19 a 25 nucleotídeos de RNA não codificante envolvidos na supressão da tradução de mRNA, tal como descrito acima) ou um miRNA precursor (por exemplo, pré- miRNA ou pri-miRNA conforme descrito acima).

[0031] O termo “sonda” utilizado na presente invenção inclui um polinucleotídeo que é usado para detectar especificamente um RNA resultante da expressão de um gene ou polinucleotídeo derivado do RNA, e/ou um polinucleotídeo complementar aos mesmos.

[0032] O termo “primer” utilizado na presente invenção inclui um polinucleotídeo que reconhece e amplifica especificamente um RNA resultante da expressão de um gene ou polinucleotídeo derivado do RNA, e/ou um polinucleotídeo complementar aos mesmos.

[0033] Neste contexto, o polinucleotídeo complementar (fita complementar ou fita reversa) significa um polinucleotídeo em uma relação complementar dos pares de bases A:T (U) e G:C, com a sequência de comprimento total de um polinucleotídeo consistindo de uma sequência de nucleotídeos definida por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 618 ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, ou uma sequência parcial (aqui, esta sequência de comprimento total ou parcial é referida como fita positiva por uma questão de conveniência). No entanto, tal fita complementar não está limitada a uma sequência totalmente complementar da sequência de nucleotídeos alvo de fita positiva e pode ter uma relação de complementaridade que permite a hibridização sob condições estringentes com a fita positiva alvo.

[0034] O termo “condições estringentes” utilizado na presente invenção refere-se às condições sob as quais uma sonda de ácido nucleico hibridiza com a sua sequência alvo em uma extensão maior (por exemplo, valores de medição iguais ou maiores do que uma média dos valores de medição de fundo + um desvio padrão dos valores de medição do fundo x 2”) do que com outras sequências. As condições estringentes são dependentes de uma sequência e diferem dependendo de um ambiente em que a hibridização é realizada. Uma sequência alvo que é 100% complementar à sonda de ácido nucleico pode ser identificada pelo controle da estringência das condições de hibridização e/ou lavagem. Os exemplos específicos de “condições estringentes” serão mencionados mais adiante.

[0035] O termo “valor Tm” utilizado na presente invenção significa uma temperatura na qual a porção de fita dupla de um polinucleotídeo é desnaturada em fitas simples de modo a existir fitas duplas e fitas simples na proporção de 1:1.

[0036] O termo “variante” utilizado na presente invenção significa, no caso de um ácido nucleico, uma forma variante natural atribuída a polimorfismo, mutação, ou semelhantes; uma variante contendo a deleção, substituição, adição ou inserção de um, dois, três ou mais nucleotídeos de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 618 ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, ou uma sequência parcial da mesma; uma variante contendo a deleção, substituição, adição ou inserção de 1 ou 2 ou mais nucleotídeos de uma sequência de nucleotídeos de um miRNA prematuro de uma sequência representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 618 ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, ou uma sequência parcial da mesma; uma variante que exibe uma % de identidade de aproximadamente 90% ou mais, cerca de 95% ou mais, cerca de 97% ou mais, cerca de 98% ou mais, cerca de 99% ou mais para cada uma destas sequências nucleotídicas ou sequências parciais das mesmas; ou um ácido nucleico que hibridiza sob condições estringentes definidas acima a um polinucleotídeo ou oligonucleotídeo compreendendo cada uma destas sequências nucleotídicas ou sequências parciais das mesmas.

[0037] Os termos “vários” ou “diversos” utilizados na presente invenção indicam um número inteiro de aproximadamente 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3 ou 2.

[0038] O termo “variante” usado na presente invenção pode ser preparado pelo uso de uma técnica bem conhecida, tal como a mutagênese sítio-dirigida ou mutagênese baseada em PCR.

[0039] O termo “identidade” utilizado na presente invenção pode ser determinado com ou sem a introdução de lacunas (gaps), utilizando um sistema de pesquisa de proteína ou gene baseado no BLAST ou FASTA descrito acima (Zheng Zhang et al., 2000, J. Comput. Biol., Vol. 7, p. 203-214; Altschul, S.F. et al., 1990, Journal of Molecular Biology, Vol. 215, p. 403-410; e Pearson, W.R. et al., 1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, vol. 85, p. 24442448).

[0040] O termo “derivado” utilizado na presente invenção pretende abranger um ácido nucleico modificado, por exemplo, um derivado marcado com um fluoróforo ou similar, um derivado contendo um nucleotídeo modificado (por exemplo, um nucleotídeo contendo um grupo como halogêneo, alquila, tais como metila, alcóxi tal como metóxi, tio, ou carboximetilcelulose, e um nucleotídeo que foi submetido ao rearranjo de bases, saturação de dupla ligação, desaminação, substituição de uma molécula de oxigênio por um átomo de enxofre, etc.), PNA (ácido nucleico peptídico; Nielsen, P.E. et al, 1991, Science, Vol 254, p 1497-500), e LNA (ácido nucleico bloqueado (LNA - Locked Nucleic Acid); Obika, S. et al, 1998, Tetrahedron Lett., Vol 39, p 5401-5404) sem limitar o escopo da invenção.

[0041] Tal como utilizado na presente invenção, o “ácido nucleico” capaz de se ligar especificamente a um polinucleotídeo selecionado a partir dos miRNAs marcadores de câncer de pulmão descritos acima é um ácido nucleico sintetizado ou preparado e inclui especificamente uma “sonda de ácido nucleico” ou “primer”. O “ácido nucleico” é utilizado diretamente ou indiretamente para a detecção da presença ou ausência do câncer de pulmão em um sujeito, para o diagnóstico da presença ou ausência de câncer de pulmão, para a gravidade do câncer de pulmão, a presença ou ausência de melhora ou grau de melhora do câncer de pulmão, ou a sensibilidade do câncer de pulmão frente a um tratamento, ou para o rastreio de uma substância candidata útil na prevenção, melhora ou tratamento do câncer de pulmão. O “ácido nucleico” inclui um nucleotídeo, um oligonucleotídeo, e um polinucleotídeo capaz de reconhecer especificamente e de se ligar a um transcrito representado por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 618 ou um ácido nucleico de cDNA in vivo sintético das mesmas, particularmente, em uma amostra tal como um fluido corporal (por exemplo, sangue ou urina), em relação ao desenvolvimento do câncer de pulmão. O nucleotídeo, oligonucleotídeo, e polinucleotídeo podem ser eficazmente usados como sondas para detectar o gene supramencionado expresso in vivo em tecidos, células, ou similar, com base nas propriedades descritas acima, ou como primers para amplificar o gene supramencionado expresso in vivo.

[0042] O termo “detecção” utilizado na presente invenção é utilizado de maneira alternada com os termos “exame”, “medição”, “detecção”, ou “apoio à decisão”. Conforme utilizado na presente invenção, o termo “avaliação” é utilizado para designar o diagnóstico ou apoio à avaliação com base nos resultados do exame ou resultados da medição.

[0043] O termo “sujeito” utilizado na presente invenção significa um mamífero, tal como um primata, incluindo humano e chimpanzé, um animal de estimação, incluindo o cão e gato, um animal de rebanho incluindo gado, cavalo, ovelha, cabra e um roedor, incluindo um rato e camundongo. O termo “sujeito saudável” também significa tal mamífero sem o câncer a ser detectado.

[0044] O termo “P” ou “valor de P” utilizado na presente invenção refere-se a uma probabilidade em que uma estatística mais extrema quanto àquela efetivamente calculada a partir de dados sob a hipótese nula é observada em um teste estatístico. Assim, um “P” menor ou “valor de P” menor indica uma diferença mais significativa entre os sujeitos sendo comparados.

[0045] O termo “sensibilidade” utilizado na presente invenção significa um valor de (o número de verdadeiros positivos)/(número de verdadeiros positivos + o número de falsos negativos). Alta sensibilidade permite que o câncer de pulmão seja detectado precocemente, levando à ressecção completa dos locais com câncer e redução da taxa de recorrência.

[0046] O termo “especificidade” utilizado na presente invenção significa um valor (do número de verdadeiros negativos) / (número de verdadeiros negativos + o número de falsos positivos). Uma alta especificidade previne a realização de exame adicional desnecessário para sujeitos saudáveis mal interpretados como sendo pacientes com câncer de pulmão, levando à redução de ônus sobre os pacientes e redução de despesas médicas.

[0047] O termo “acurácia” utilizado na presente invenção significa um valor do (número de verdadeiros positivos + número de verdadeiros negativos) / (número total de casos). A acurácia indica a proporção de amostras corretamente identificadas nos resultados discriminantes para todas as amostras, e serve como um indicador primário para avaliar o desempenho de detecção.

[0048] Tal como utilizado na presente invenção, “amostra” que é submetida a determinação, detecção ou diagnóstico refere-se a um tecido e material biológico, em que a expressão do gene da presente invenção varia quando o câncer de pulmão se desenvolve, quando o câncer de pulmão progride, ou quando efeitos terapêuticos sobre o câncer de pulmão são exercidos. Especificamente, a “amostra” refere-se a um tecido pulmonar, um canal vascular peripulmonar, um linfonodo, e órgão, um órgão com suspeita de ter metástase, pele, fluido corporal tal como o sangue, urina, saliva, suor, ou exsudados teciduais, soro ou plasma a partir do sangue, fezes, cabelo, e similares. A “amostra” refere-se ainda a uma amostra biológica extraída dela, especificamente, um gene, tal como RNA ou miRNA.

[0049] O termo “gene hsa-miR-6768-5p” ou “hsa-miR-6768-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6768-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027436) descrito na SEQ ID NO: 1, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6768-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6768” (n° de acesso miRBase: MI0022613, SEQ ID NO: 175) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6768-5p”.

[0050] O termo “gene hsa-miR-6836-3p” ou “hsa-miR-6836-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6836-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027575) descrito na SEQ ID NO: 2, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6836-3p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6836” (n° de acesso miRBase: MI0022682, SEQ ID NO: 176) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6836-3p”.

[0051] O termo “gene hsa-miR-6782-5p” ou “hsa-miR-6782-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6782-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027464) descrito na SEQ ID NO: 3, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6782-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6782” (n° de acesso miRBase: MI0022627, SEQ ID NO: 177) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6782-5p”.

[0052] O termo “gene hsa-miR-3663-3p” ou “hsa-miR-3663-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3663-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0018085) descrito na SEQ ID NO: 4, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 3663-3p pode ser obtido por um método descrito em Liao JY et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e10563. Além disso, “hsa-mir-3663” (n° de acesso miRBase: MI0016064, SEQ ID NO: 178) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 3663-3p”.

[0053] O termo “gene hsa-miR-1908-3p” ou “hsa-miR-1908-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1908-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0026916) descrito na SEQ ID NO: 5, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1908-3p pode ser obtido por um método descrito em Bar M et al., 2008, Stem Cells, Vol. 26, p. 2496-2505. Além disso, “hsa-mir-1908” (n° de acesso miRBase: MI0008329, SEQ ID NO: 179) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1908-3p”.

[0054] O termo “gene hsa-miR-6726-5p” ou “hsa-miR-6726-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6726-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027353) descrito na SEQ ID NO: 6, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6726-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6726” (n° de acesso miRBase: MI0022571, SEQ ID NO: 180) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6726-5p”.

[0055] O termo “gene hsa-miR-4258” ou “hsa-miR-4258” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4258 (n° de acesso miRBase: MIMAT0016879) descrito na SEQ ID NO: 7, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4258 pode ser obtido por um método descrito em Goff LA et al., 2009, PLoS One, Vol. 4, e7192. Além disso, “hsa-mir-4258” (n° de acesso miRBase: MI0015857, SEQ ID NO: 181) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4258”.

[0056] O termo “gene hsa-miR-1343-3p” ou “hsa-miR-1343-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1343-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019776) descrito na SEQ ID NO: 8, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1343-3p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-1343” (n° de acesso miRBase: MI0017320, SEQ ID NO: 182) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1343-3p”.

[0057] O termo “gene hsa-miR-4516” ou “hsa-miR-4516” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4516 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019053) descrito na SEQ ID NO: 9, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4516 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4516” (n° de acesso miRBase: MI0016882, SEQ ID NO: 183) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4516”.

[0058] O termo “gene hsa-miR-6875-5p” ou “hsa-miR-6875-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6875-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027650) descrito na SEQ ID NO: 10, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6875-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6875” (n° de acesso miRBase: MI0022722, SEQ ID NO: 184) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6875-5p”.

[0059] O termo “gene hsa-miR-4651” ou “hsa-miR-4651” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4651 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019715) descrito na SEQ ID NO: 11, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4651 pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4651” (n° de acesso miRBase: MI0017279, SEQ ID NO: 185) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin- like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4651”.

[0060] O termo “gene hsa-miR-6825-5p” ou “hsa-miR-6825-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6825-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027550) descrito na SEQ ID NO: 12, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6825-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6825” (n° de acesso miRBase: MI0022670, SEQ ID NO: 186) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6825-5p”.

[0061] O termo “gene hsa-miR-6840-3p” ou “hsa-miR-6840-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6840-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027583) descrito na SEQ ID NO: 13, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6840-3p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6840” (n° de acesso miRBase: MI0022686, SEQ ID NO: 187) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6840-3p”.

[0062] O termo “gene hsa-miR-6780b-5p” ou “hsa-miR-6780b- 5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6780b-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027572) descrito na SEQ ID NO: 14, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa- miR-6780b-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6780b” (n° de acesso miRBase: MI0022681, SEQ ID NO: 188) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6780b-5p”.

[0063] O termo “gene hsa-miR-6749-5p” ou “hsa-miR-6749-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6749-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027398) descrito na SEQ ID NO: 15, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6749-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6749” (n° de acesso miRBase: MI0022594, SEQ ID NO: 189) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6749-5p”.

[0064] O termo “gene hsa-miR-8063” ou “hsa-miR-8063” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-8063 (n° de acesso miRBase: MIMAT0030990) descrito na SEQ ID NO: 16, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-8063 pode ser obtido por um método descrito em Wang HJ et al., 2013, Shock, Vol. 39, p. 480-487. Além disso, “hsa-mir-8063” (n° de acesso miRBase: MI0025899, SEQ ID NO: 190) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-8063”.

[0065] O termo “gene hsa-miR-6784-5p” ou “hsa-miR-6784-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6784-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027468) descrito na SEQ ID NO: 17, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6784-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6784” (n° de acesso miRBase: MI0022629, SEQ ID NO: 191) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6784-5p”.

[0066] O termo “gene hsa-miR-3679-5p” ou “hsa-miR-3679-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3679-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0018104) descrito na SEQ ID NO: 18, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 3679-5p pode ser obtido por um método descrito em Creighton CJ et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9637. Além disso, “hsa-mir-3679” (n° de acesso miRBase: MI0016080, SEQ ID NO: 192) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 3679-5p”.

[0067] O termo “gene hsa-miR-3184-5p” ou “hsa-miR-3184-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3184-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0015064) descrito na SEQ ID NO: 19, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 3184-5p pode ser obtido por um método descrito em Stark MS et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9685. Além disso, “hsa-mir-3184” (n° de acesso miRBase: MI0014226, SEQ ID NO: 193) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3184-5p”.

[0068] O termo “gene hsa-miR-663b” ou “hsa-miR-663b” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-663b (n° de acesso miRBase: MIMAT0005867) descrito na SEQ ID NO: 20, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-663b pode ser obtido por um método descrito em Takada S et al., 2008, Leukemia, Vol. 22, p. 1274-1278. Além disso, “hsa-mir-663b” (n° de acesso miRBase: MI0006336, SEQ ID NO: 194) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-663b”.

[0069] O termo “gene hsa-miR-6880-5p” ou “hsa-miR-6880-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6880-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027660) descrito na SEQ ID NO: 21, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6880-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6880” (n° de acesso miRBase: MI0022727, SEQ ID NO: 195) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6880-5p”.

[0070] O termo “gene hsa-miR-1908-5p” ou “hsa-miR-1908-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1908-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0007881) descrito na SEQ ID NO: 22, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1908-5p pode ser obtido por um método descrito em Bar M et al., 2008, Stem Cells, Vol. 26, p. 2496-2505. Além disso, “hsa-mir-1908” (n° de acesso miRBase: MI0008329, SEQ ID NO: 179) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1908-5p”.

[0071] O termo “gene hsa-miR-92a-2-5p” ou “hsa-miR-92a-2-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-92a-2-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004508) descrito na SEQ ID NO: 23, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 92a-2-5p pode ser obtido por um método descrito em Mourelatos Z et al., 2002, Genes Dev, Vol. 16, p. 720-728. Além disso, “hsa-mir-92a-2” (n° de acesso miRBase: MI0000094, SEQ ID NO: 196) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-92a-2-5p”.

[0072] O termo “gene hsa-miR-7975” ou “hsa-miR-7975” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-7975 (n° de acesso miRBase: MIMAT0031178) descrito na SEQ ID NO: 24, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-7975 pode ser obtido por um método descrito em Velthut-Meikas A et al., 2013, Mol Endocrinol, online. Além disso, “hsa-mir-7975” (n° de acesso miRBase: MI0025751, SEQ ID NO: 197) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-7975”.

[0073] O termo “gene hsa-miR-7110-5p” ou “hsa-miR-7110-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-7110-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0028117) descrito na SEQ ID NO: 25, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 7110-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-7110” (n° de acesso miRBase: MI0022961, SEQ ID NO: 198) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-7110-5p”.

[0074] O termo “gene hsa-miR-6842-5p” ou “hsa-miR-6842-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6842-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027586) descrito na SEQ ID NO: 26, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6842-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6842” (n° de acesso miRBase: MI0022688, SEQ ID NO: 199) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6842-5p”.

[0075] O termo “gene hsa-miR-6857-5p” ou “hsa-miR-6857-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6857-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027614) descrito na SEQ ID NO: 27, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6857-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6857” (n° de acesso miRBase: MI0022703, SEQ ID NO: 200) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6857-5p”.

[0076] O termo “gene hsa-miR-5572” ou “hsa-miR-5572” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-5572 (n° de acesso miRBase: MIMAT0022260) descrito na SEQ ID NO: 28, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-5572 pode ser obtido por um método descrito em Tandon M et al., 2012, Oral Dis, Vol. 18, p. 127-131. Além disso, “hsa-mir-5572” (n° de acesso miRBase: MI0019117, SEQ ID NO: 201) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-5572”.

[0077] O termo “gene hsa-miR-3197” ou “hsa-miR-3197” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3197 (n° de acesso miRBase: MIMAT0015082) descrito na SEQ ID NO: 29, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3197 pode ser obtido por um método descrito em Stark MS et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9685. Além disso, “hsa-mir-3197” (n° de acesso miRBase: MI0014245, SEQ ID NO: 202) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3197”.

[0078] O termo “gene hsa-miR-6131” ou “hsa-miR-6131” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6131 (n° de acesso miRBase: MIMAT0024615) descrito na SEQ ID NO: 30, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6131 pode ser obtido por um método descrito em Dannemann M et al., 2012, Genome Biol Evol, Vol. 4, p. 552-564. Além disso, “hsa-mir-6131” (n° de acesso miRBase: MI0021276, SEQ ID NO: 203) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6131”.

[0079] O termo “gene hsa-miR-6889-5p” ou “hsa-miR-6889-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6889-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027678) descrito na SEQ ID NO: 31, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6889-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6889” (n° de acesso miRBase: MI0022736, SEQ ID NO: 204) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6889-5p”.

[0080] O termo “gene hsa-miR-4454” ou “hsa-miR-4454” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4454 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018976) descrito na SEQ ID NO: 32, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4454 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4454” (n° de acesso miRBase: MI0016800, SEQ ID NO: 205) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4454”.

[0081] O termo “gene hsa-miR-1199-5p” ou “hsa-miR-1199-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1199-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0031119) descrito na SEQ ID NO: 33, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1199-5p pode ser obtido por um método descrito em Salvi A et al., 2013, Int J Oncol, Vol. 42, p. 391-402. Além disso, “hsa-mir-1199” (n° de acesso miRBase: MI0020340, SEQ ID NO: 206) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1199-5p”.

[0082] O termo “gene hsa-miR-1247-3p” ou “hsa-miR-1247-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1247-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0022721) descrito na SEQ ID NO: 34, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1247-3p pode ser obtido por um método descrito em Morin RD et al., 2008, Genome Res, Vol. 18, p. 610-621. Além disso, “hsa-mir-1247” (n° de acesso miRBase: MI0006382, SEQ ID NO: 207) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1247-3p”.

[0083] O termo “gene hsa-miR-6800-5p” ou “hsa-miR-6800-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6800-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027500) descrito na SEQ ID NO: 35, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6800-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6800” (n° de acesso miRBase: MI0022645, SEQ ID NO: 208) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6800-5p”.

[0084] O termo “gene hsa-miR-6872-3p” ou “hsa-miR-6872-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6872-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027645) descrito na SEQ ID NO: 36, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6872-3p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6872” (n° de acesso miRBase: MI0022719, SEQ ID NO: 209) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6872-3p”.

[0085] O termo “gene hsa-miR-4649-5p” ou “hsa-miR-4649-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4649-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019711) descrito na SEQ ID NO: 37, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4649-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4649” (n° de acesso miRBase: MI0017276, SEQ ID NO: 210) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4649-5p”.

[0086] O termo “gene hsa-miR-6791-5p” ou “hsa-miR-6791-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6791-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027482) descrito na SEQ ID NO: 38, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6791-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6791” (n° de acesso miRBase: MI0022636, SEQ ID NO: 211) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6791-5p”.

[0087] O termo “gene hsa-miR-4433b-3p” ou “hsa-miR-4433b- 3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4433b-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0030414) descrito na SEQ ID NO: 39, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa- miR-4433b-3p pode ser obtido por um método descrito em Ple H et al., 2012, PLoS One, Vol. 7, e50746. Além disso, “hsa-mir-4433b” (n° de acesso miRBase: MI0025511, SEQ ID NO: 212) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4433b-3p”.

[0088] O termo “gene hsa-miR-3135b” ou “hsa-miR-3135b” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3135b (n° de acesso miRBase: MIMAT0018985) descrito na SEQ ID NO: 40, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 3135b pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-3135b” (n° de acesso miRBase: MI0016809, SEQ ID NO: 213) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 3135b”.

[0089] O termo “gene hsa-miR-128-2-5p” ou “hsa-miR-128-2-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-128-2-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0031095) descrito na SEQ ID NO: 41, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 128-2-5p pode ser obtido por um método descrito em Lagos-Quintana M et al., 2002, Curr Biol, Vol. 12, p. 735-739. Além disso, “hsa-mir-128-2” (n° de acesso miRBase: MI0000727, SEQ ID NO: 214) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-128-2-5p”.

[0090] O termo “gene hsa-miR-4675” ou “hsa-miR-4675” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4675 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019757) descrito na SEQ ID NO: 42, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4675 pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4675” (n° de acesso miRBase: MI0017306, SEQ ID NO: 215) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4675”.

[0091] O termo “gene hsa-miR-4472” ou “hsa-miR-4472” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4472 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018999) descrito na SEQ ID NO: 43, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4472 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4472-1 e hsa-mir-4472-2” (nos de acesso miRBase: MI0016823 e MI0016824, SEQ ID NOs: 216 e 217) possuindo estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) são conhecidos como precursores de “hsa-miR-4472”.

[0092] O termo “gene hsa-miR-6785-5p” ou “hsa-miR-6785-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6785-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027470) descrito na SEQ ID NO: 44, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6785-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6785” (n° de acesso miRBase: MI0022630, SEQ ID NO: 218) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6785-5p”.

[0093] O termo “gene hsa-miR-6741-5p” ou “hsa-miR-6741-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6741-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027383) descrito na SEQ ID NO: 45, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6741-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6741” (n° de acesso miRBase: MI0022586, SEQ ID NO: 219) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6741-5p”.

[0094] O termo “gene hsa-miR-7977” ou “hsa-miR-7977” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-7977 (n° de acesso miRBase: MIMAT0031180) descrito na SEQ ID NO: 46, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-7977 pode ser obtido por um método descrito em Velthut-Meikas A et al., 2013, Mol Endocrinol, online. Além disso, “hsa-mir-7977” (n° de acesso miRBase: MI0025753, SEQ ID NO: 220) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-7977”.

[0095] O termo “gene hsa-miR-3665” ou “hsa-miR-3665” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3665 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018087) descrito na SEQ ID NO: 47, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3665 pode ser obtido por um método descrito em Xie X et al., 2005, Nature, Vol. 434, p. 338345. Além disso, “hsa-mir-3665” (n° de acesso miRBase: MI0016066, SEQ ID NO: 221) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3665”.

[0096] O termo “gene hsa-miR-128-1-5p” ou “hsa-miR-128-1-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-128-1-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0026477) descrito na SEQ ID NO: 48, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 128-1-5p pode ser obtido por um método descrito em Lagos-Quintana M et al., 2002, Curr Biol, Vol. 12, p. 735-739. Além disso, “hsa-mir-128-1” (n° de acesso miRBase: MI0000447, SEQ ID NO: 222) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-128-1-5p”.

[0097] O termo “gene hsa-miR-4286” ou “hsa-miR-4286” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4286 (n° de acesso miRBase: MIMAT0016916) descrito na SEQ ID NO: 49, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4286 pode ser obtido por um método descrito em Goff LA et al., 2009, PLoS One, Vol. 4, e7192. Além disso, “hsa-mir-4286” (n° de acesso miRBase: MI0015894, SEQ ID NO: 223) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4286”.

[0098] O termo “gene hsa-miR-6765-3p” ou “hsa-miR-6765-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6765-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027431) descrito na SEQ ID NO: 50, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6765-3p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6765” (n° de acesso miRBase: MI0022610, SEQ ID NO: 224) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6765-3p”.

[0099] O termo “gene hsa-miR-4632-5p” ou “hsa-miR-4632-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4632-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0022977) descrito na SEQ ID NO: 51, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4632-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4632” (n° de acesso miRBase: MI0017259, SEQ ID NO: 225) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4632-5p”.

[0100] O termo “gene hsa-miR-365a-5p” ou “hsa-miR-365a-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-365a-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0009199) descrito na SEQ ID NO: 52, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 365a-5p pode ser obtido por um método descrito em Xie X et al., 2005, Nature, Vol. 434, p. 338-345. Além disso, “hsa-mir-365a” (n° de acesso miRBase: MI0000767, SEQ ID NO: 226) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 365a-5p”.

[0101] O termo “gene hsa-miR-6088” ou “hsa-miR-6088” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6088 (n° de acesso miRBase: MIMAT0023713) descrito na SEQ ID NO: 53, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6088 pode ser obtido por um método descrito em Yoo JK et al., 2012, Stem Cells Dev, Vol. 21, p. 2049-2057. Além disso, “hsa-mir-6088” (n° de acesso miRBase: MI0020365, SEQ ID NO: 227) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6088”.

[0102] O termo “gene hsa-miR-6816-5p” ou “hsa-miR-6816-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6816-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027532) descrito na SEQ ID NO: 54, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6816-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6816” (n° de acesso miRBase: MI0022661, SEQ ID NO: 228) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6816-5p”.

[0103] O termo “gene hsa-miR-6885-5p” ou “hsa-miR-6885-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6885-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027670) descrito na SEQ ID NO: 55, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6885-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6885” (n° de acesso miRBase: MI0022732, SEQ ID NO: 229) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6885-5p”.

[0104] O termo “gene hsa-miR-711” ou “hsa-miR-711” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-711 (n° de acesso miRBase: MIMAT0012734) descrito na SEQ ID NO: 56, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-711 pode ser obtido por um método descrito em Artzi S et al., 2008, BMC Bioinformatics, Vol. 9, p. 39. Além disso, “hsa-mir-711” (n° de acesso miRBase: MI0012488, SEQ ID NO: 230) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-711”.

[0105] O termo “gene hsa-miR-6765-5p” ou “hsa-miR-6765-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6765-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027430) descrito na SEQ ID NO: 57, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6765-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6765” (n° de acesso miRBase: MI0022610, SEQ ID NO: 224) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6765-5p”.

[0106] O termo “gene hsa-miR-3180” ou “hsa-miR-3180” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3180 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018178) descrito na SEQ ID NO: 58, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3180 pode ser obtido por um método descrito em Creighton CJ et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9637. Além disso, “hsa-mir-3180-4 e hsa-mir-3180-5” (nos de acesso miRBase: MI0016408 e MI0016409, SEQ ID NOs: 231 e 232) possuindo estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) são conhecidos como precursores de “hsa-miR-3180”.

[0107] O termo “gene hsa-miR-4442” ou “hsa-miR-4442” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4442 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018960) descrito na SEQ ID NO: 59, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4442 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4442” (n° de acesso miRBase: MI0016785, SEQ ID NO: 233) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4442”.

[0108] O termo “gene hsa-miR-4792” ou “hsa-miR-4792” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4792 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019964) descrito na SEQ ID NO: 60, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4792 pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4792” (n° de acesso miRBase: MI0017439, SEQ ID NO: 234) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4792”.

[0109] O termo “gene hsa-miR-6721-5p” ou “hsa-miR-6721-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6721-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0025852) descrito na SEQ ID NO: 61, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6721-5p pode ser obtido por um método descrito em Li Y et al., 2012, Gene, Vol. 497, p. 330-335. Além disso, “hsa-mir-6721” (n° de acesso miRBase: MI0022556, SEQ ID NO: 235) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6721-5p”.

[0110] O termo “gene hsa-miR-6798-5p” ou “hsa-miR-6798-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6798-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027496) descrito na SEQ ID NO: 62, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6798-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6798” (n° de acesso miRBase: MI0022643, SEQ ID NO: 236) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6798-5p”.

[0111] O termo “gene hsa-miR-3162-5p” ou “hsa-miR-3162-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3162-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0015036) descrito na SEQ ID NO: 63, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 3162-5p pode ser obtido por um método descrito em Stark MS et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9685. Além disso, “hsa-mir-3162” (n° de acesso miRBase: MI0014192, SEQ ID NO: 237) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3162-5p”.

[0112] O termo “gene hsa-miR-6126” ou “hsa-miR-6126” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6126 (n° de acesso miRBase: MIMAT0024599) descrito na SEQ ID NO: 64, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6126 pode ser obtido por um método descrito em Smith JL et al., 2012, J Virol, Vol. 86, p. 5278-5287. Além disso, “hsa-mir-6126” (n° de acesso miRBase: MI0021260, SEQ ID NO: 238) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6126”.

[0113] O termo “gene hsa-miR-4758-5p” ou “hsa-miR-4758-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4758-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019903) descrito na SEQ ID NO: 65, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4758-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4758” (n° de acesso miRBase: MI0017399, SEQ ID NO: 239) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4758-5p”.

[0114] O termo “gene hsa-miR-2392” ou “hsa-miR-2392” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-2392 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019043) descrito na SEQ ID NO: 66, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-2392 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-2392” (n° de acesso miRBase: MI0016870, SEQ ID NO: 240) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-2392”.

[0115] O termo “gene hsa-miR-486-3p” ou “hsa-miR-486-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-486-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004762) descrito na SEQ ID NO: 67, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 486-3p pode ser obtido por um método descrito em Fu H et al., 2005, FEBS Lett, Vol. 579, p. 3849-3854. Além disso, “hsa-mir-486 e hsa-mir-486-2” (nos de acesso miRBase: MI0002470 e MI0023622, SEQ ID NOs: 241 e 242) possuindo estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) são conhecidos como precursores de “hsa-miR-486-3p”.

[0116] O termo “gene hsa-miR-6727-5p” ou “hsa-miR-6727-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6727-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027355) descrito na SEQ ID NO: 68, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6727-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6727” (n° de acesso miRBase: MI0022572, SEQ ID NO: 243) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6727-5p”.

[0117] O termo “gene hsa-miR-4728-5p” ou “hsa-miR-4728-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4728-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019849) descrito na SEQ ID NO: 69, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4728-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4728” (n° de acesso miRBase: MI0017365, SEQ ID NO: 244) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4728-5p”.

[0118] O termo “gene hsa-miR-6746-5p” ou “hsa-miR-6746-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6746-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027392) descrito na SEQ ID NO: 70, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6746-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6746” (n° de acesso miRBase: MI0022591, SEQ ID NO: 245) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6746-5p”.

[0119] O termo “gene hsa-miR-4270” ou “hsa-miR-4270” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4270 (n° de acesso miRBase: MIMAT0016900) descrito na SEQ ID NO: 71, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4270 pode ser obtido por um método descrito em Goff LA et al., 2009, PLoS One, Vol. 4, e7192. Além disso, “hsa-mir-4270” (n° de acesso miRBase: MI0015878, SEQ ID NO: 246) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4270”.

[0120] O termo “gene hsa-miR-3940-5p” ou “hsa-miR-3940-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3940-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019229) descrito na SEQ ID NO: 72, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 3940-5p pode ser obtido por um método descrito em Liao JY et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e10563. Além disso, “hsa-mir-3940” (n° de acesso miRBase: MI0016597, SEQ ID NO: 247) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 3940-5p”.

[0121] O termo “gene hsa-miR-4725-3p” ou “hsa-miR-4725-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4725-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019844) descrito na SEQ ID NO: 73, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4725-3p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4725” (n° de acesso miRBase: MI0017362, SEQ ID NO: 248) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4725-3p”.

[0122] O termo “gene hsa-miR-7108-5p” ou “hsa-miR-7108-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-7108-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0028113) descrito na SEQ ID NO: 74, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 7108-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-7108” (n° de acesso miRBase: MI0022959, SEQ ID NO: 249) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-7108-5p”.

[0123] O termo “gene hsa-miR-3656” ou “hsa-miR-3656” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3656 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018076) descrito na SEQ ID NO: 75, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3656 pode ser obtido por um método descrito em Meiri E et al., 2010, Nucleic Acids Res, Vol. 38, p. 6234-6246. Além disso, “hsa-mir-3656” (n° de acesso miRBase: MI0016056, SEQ ID NO: 250) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3656”.

[0124] O termo “gene hsa-miR-6879-5p” ou “hsa-miR-6879-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6879-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027658) descrito na SEQ ID NO: 76, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6879-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6879” (n° de acesso miRBase: MI0022726, SEQ ID NO: 251) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6879-5p”.

[0125] O termo “gene hsa-miR-6738-5p” ou “hsa-miR-6738-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6738-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027377) descrito na SEQ ID NO: 77, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6738-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6738” (n° de acesso miRBase: MI0022583, SEQ ID NO: 252) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6738-5p”.

[0126] O termo “gene hsa-miR-1260a” ou “hsa-miR-1260a” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1260a (n° de acesso miRBase: MIMAT0005911) descrito na SEQ ID NO: 78, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1260a pode ser obtido por um método descrito em Morin RD et al., 2008, Genome Res, Vol. 18, p. 610-621. Além disso, “hsa-mir-1260a” (n° de acesso miRBase: MI0006394, SEQ ID NO: 253) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1260a”.

[0127] O termo “gene hsa-miR-4446-3p” ou “hsa-miR-4446-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4446-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0018965) descrito na SEQ ID NO: 79, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4446-3p pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4446” (n° de acesso miRBase: MI0016789, SEQ ID NO: 254) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4446-3p”.

[0128] O termo “gene hsa-miR-3131” ou “hsa-miR-3131” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3131 (n° de acesso miRBase: MIMAT0014996) descrito na SEQ ID NO: 80, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3131 pode ser obtido por um método descrito em Stark MS et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9685. Além disso, “hsa-mir-3131” (n° de acesso miRBase: MI0014151, SEQ ID NO: 255) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3131”.

[0129] O termo “gene hsa-miR-4463” ou “hsa-miR-4463” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4463 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018987) descrito na SEQ ID NO: 81, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4463 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4463” (n° de acesso miRBase: MI0016811, SEQ ID NO: 256) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4463”.

[0130] O termo “gene hsa-miR-3185” ou “hsa-miR-3185” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3185 (n° de acesso miRBase: MIMAT0015065) descrito na SEQ ID NO: 82, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3185 pode ser obtido por um método descrito em Stark MS et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9685. Além disso, “hsa-mir-3185” (n° de acesso miRBase: MI0014227, SEQ ID NO: 257) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3185”.

[0131] O termo “gene hsa-miR-6870-5p” ou “hsa-miR-6870-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6870-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027640) descrito na SEQ ID NO: 83, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6870-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6870” (n° de acesso miRBase: MI0022717, SEQ ID NO: 258) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6870-5p”.

[0132] O termo “gene hsa-miR-6779-5p” ou “hsa-miR-6779-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6779-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027458) descrito na SEQ ID NO: 84, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6779-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6779” (n° de acesso miRBase: MI0022624, SEQ ID NO: 259) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6779-5p”.

[0133] O termo “gene hsa-miR-1273g-3p” ou “hsa-miR-1273g- 3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1273g-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0022742) descrito na SEQ ID NO: 85, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa- miR-1273g-3p pode ser obtido por um método descrito em Reshmi G et al., 2011, Genomics, Vol. 97, p. 333-340. Além disso, “hsa-mir-1273g” (n° de acesso miRBase: MI0018003, SEQ ID NO: 260) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-1273g-3p”.

[0134] O termo “gene hsa-miR-8059” ou “hsa-miR-8059” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-8059 (n° de acesso miRBase: MIMAT0030986) descrito na SEQ ID NO: 86, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-8059 pode ser obtido por um método descrito em Wang HJ et al., 2013, Shock, Vol. 39, p. 480-487. Além disso, “hsa-mir-8059” (n° de acesso miRBase: MI0025895, SEQ ID NO: 261) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-8059”.

[0135] O termo “gene hsa-miR-4697-5p” ou “hsa-miR-4697-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4697-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019791) descrito na SEQ ID NO: 87, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4697-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4697” (n° de acesso miRBase: MI0017330, SEQ ID NO: 262) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4697-5p”.

[0136] O termo “gene hsa-miR-4674” ou “hsa-miR-4674” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4674 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019756) descrito na SEQ ID NO: 88, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4674 pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4674” (n° de acesso miRBase: MI0017305, SEQ ID NO: 263) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4674”.

[0137] O termo “gene hsa-miR-4433-3p” ou “hsa-miR-4433-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4433-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0018949) descrito na SEQ ID NO: 89, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4433-3p pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4433” (n° de acesso miRBase: MI0016773, SEQ ID NO: 264) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4433-3p”.

[0138] O termo “gene hsa-miR-4257” ou “hsa-miR-4257” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4257 (n° de acesso miRBase: MIMAT0016878) descrito na SEQ ID NO: 90, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4257 pode ser obtido por um método descrito em Goff LA et al., 2009, PLoS One, Vol. 4, e7192. Além disso, “hsa-mir-4257” (n° de acesso miRBase: MI0015856, SEQ ID NO: 265) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4257”.

[0139] O termo “gene hsa-miR-1915-5p” ou “hsa-miR-1915-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1915-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0007891) descrito na SEQ ID NO: 91, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1915-5p pode ser obtido por um método descrito em Bar M et al., 2008, Stem Cells, Vol. 26, p. 2496-2505. Além disso, “hsa-mir-1915” (n° de acesso miRBase: MI0008336, SEQ ID NO: 266) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1915-5p”.

[0140] O termo “gene hsa-miR-4417” ou “hsa-miR-4417” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4417 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018929) descrito na SEQ ID NO: 92, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4417 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4417” (n° de acesso miRBase: MI0016753, SEQ ID NO: 267) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin- like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4417”.

[0141] O termo “gene hsa-miR-1343-5p” ou “hsa-miR-1343-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1343-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027038) descrito na SEQ ID NO: 93, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1343-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-1343” (n° de acesso miRBase: MI0017320, SEQ ID NO: 182) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1343-5p”.

[0142] O termo “gene hsa-miR-6781-5p” ou “hsa-miR-6781-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6781-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027462) descrito na SEQ ID NO: 94, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6781-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6781” (n° de acesso miRBase: MI0022626, SEQ ID NO: 268) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6781-5p”.

[0143] O termo “gene hsa-miR-4695-5p” ou “hsa-miR-4695-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4695-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019788) descrito na SEQ ID NO: 95, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4695-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4695” (n° de acesso miRBase: MI0017328, SEQ ID NO: 269) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4695-5p”.

[0144] O termo “gene hsa-miR-1237-5p” ou “hsa-miR-1237-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1237-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0022946) descrito na SEQ ID NO: 96, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1237-5p pode ser obtido por um método descrito em Berezikov E et al., 2007, Mol Cell, Vol. 28, p. 328-336. Além disso, “hsa-mir-1237” (n° de acesso miRBase: MI0006327, SEQ ID NO: 270) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1237-5p”.

[0145] O termo “gene hsa-miR-6775-5p” ou “hsa-miR-6775-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6775-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027450) descrito na SEQ ID NO: 97, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6775-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6775” (n° de acesso miRBase: MI0022620, SEQ ID NO: 271) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6775-5p”.

[0146] O termo “gene hsa-miR-7845-5p” ou “hsa-miR-7845-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-7845-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0030420) descrito na SEQ ID NO: 98, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 7845-5p pode ser obtido por um método descrito em Ple H et al., 2012, PLoS One, Vol. 7, e50746. Além disso, “hsa-mir-7845” (n° de acesso miRBase: MI0025515, SEQ ID NO: 272) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-7845-5p”.

[0147] O termo “gene hsa-miR-4746-3p” ou “hsa-miR-4746-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4746-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019881) descrito na SEQ ID NO: 99, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4746-3p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4746” (n° de acesso miRBase: MI0017385, SEQ ID NO: 273) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4746-3p”.

[0148] O termo “gene hsa-miR-7641” ou “hsa-miR-7641” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-7641 (n° de acesso miRBase: MIMAT0029782) descrito na SEQ ID NO: 100, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-7641 pode ser obtido por um método descrito em Yoo JK et al., 2013, Arch Pharm Res, Vol. 36, p. 353-358. Além disso, “hsa-mir-7641-1 e hsa-mir-7641-2” (nos de acesso miRBase: MI0024975 e MI0024976, SEQ ID NOs: 274 e 275) possuindo estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) são conhecidos como precursores de “hsa-miR-7641”.

[0149] O termo “gene hsa-miR-7847-3p” ou “hsa-miR-7847-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-7847-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0030422) descrito na SEQ ID NO: 101, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 7847-3p pode ser obtido por um método descrito em Ple H et al., 2012, PLoS One, Vol. 7, e50746. Além disso, “hsa-mir-7847” (n° de acesso miRBase: MI0025517, SEQ ID NO: 276) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-7847-3p”.

[0150] O termo “gene hsa-miR-6806-5p” ou “hsa-miR-6806-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6806-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027512) descrito na SEQ ID NO: 102, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6806-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6806” (n° de acesso miRBase: MI0022651, SEQ ID NO: 277) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6806-5p”.

[0151] O termo “gene hsa-miR-4467” ou “hsa-miR-4467” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4467 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018994) descrito na SEQ ID NO: 103, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4467 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4467” (n° de acesso miRBase: MI0016818, SEQ ID NO: 278) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4467”.

[0152] O termo “gene hsa-miR-4726-5p” ou “hsa-miR-4726-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4726-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019845) descrito na SEQ ID NO: 104, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4726-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4726” (n° de acesso miRBase: MI0017363, SEQ ID NO: 279) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4726-5p”.

[0153] O termo “gene hsa-miR-4648” ou “hsa-miR-4648” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4648 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019710) descrito na SEQ ID NO: 105, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4648 pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4648” (n° de acesso miRBase: MI0017275, SEQ ID NO: 280) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4648”.

[0154] O termo “gene hsa-miR-6089” ou “hsa-miR-6089” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6089 (n° de acesso miRBase: MIMAT0023714) descrito na SEQ ID NO: 106, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6089 pode ser obtido por um método descrito em Yoo JK et al., 2012, Stem Cells Dev, Vol. 21, p. 2049-2057. Além disso, “hsa-mir-6089-1 e hsa-mir-6089-2” (nos de acesso miRBase: MI0020366 e MI0023563, SEQ ID NOs: 281 e 282) possuindo estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) são conhecidos como precursores de “hsa-miR-6089”.

[0155] O termo “gene hsa-miR-1260b” ou “hsa-miR-1260b” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1260b (n° de acesso miRBase: MIMAT0015041) descrito na SEQ ID NO: 107, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1260b pode ser obtido por um método descrito em Stark MS et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9685. Além disso, “hsa-mir-1260b” (n° de acesso miRBase: MI0014197, SEQ ID NO: 283) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1260b”.

[0156] O termo “gene hsa-miR-4532” ou “hsa-miR-4532” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4532 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019071) descrito na SEQ ID NO: 108, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4532 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4532” (n° de acesso miRBase: MI0016899, SEQ ID NO: 284) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4532”.

[0157] O termo “gene hsa-miR-5195-3p” ou “hsa-miR-5195-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-5195-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0021127) descrito na SEQ ID NO: 109, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 5195-3p pode ser obtido por um método descrito em Schotte D et al., 2011, Leukemia, Vol. 25, p. 1389-1399. Além disso, “hsa-mir-5195” (n° de acesso miRBase: MI0018174, SEQ ID NO: 285) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 5195-3p”.

[0158] O termo “gene hsa-miR-3188” ou “hsa-miR-3188” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3188 (n° de acesso miRBase: MIMAT0015070) descrito na SEQ ID NO: 110, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3188 pode ser obtido por um método descrito em Stark MS et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9685. Além disso, “hsa-mir-3188” (n° de acesso miRBase: MI0014232, SEQ ID NO: 286) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3188”.

[0159] O termo “gene hsa-miR-6848-5p” ou “hsa-miR-6848-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6848-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027596) descrito na SEQ ID NO: 111, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6848-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6848” (n° de acesso miRBase: MI0022694, SEQ ID NO: 287) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6848-5p”.

[0160] O termo “gene hsa-miR-1233-5p” ou “hsa-miR-1233-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1233-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0022943) descrito na SEQ ID NO: 112, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1233-5p pode ser obtido por um método descrito em Berezikov E et al., 2007, Mol Cell, Vol. 28, p. 328-336. Além disso, “hsa-mir-1233-1 e hsa-mir-1233-2” (nos de acesso miRBase: MI0006323 e MI0015973, SEQ ID NOs: 288 e 289) possuindo estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) são conhecidos como precursores de “hsa-miR-1233-5p”.

[0161] O termo “gene hsa-miR-6717-5p” ou “hsa-miR-6717-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6717-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0025846) descrito na SEQ ID NO: 113, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6717-5p pode ser obtido por um método descrito em Li Y et al., 2012, Gene, Vol. 497, p. 330-335. Além disso, “hsa-mir-6717” (n° de acesso miRBase: MI0022551, SEQ ID NO: 290) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6717-5p”.

[0162] O termo “gene hsa-miR-3195” ou “hsa-miR-3195” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3195 (n° de acesso miRBase: MIMAT0015079) descrito na SEQ ID NO: 114, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3195 pode ser obtido por um método descrito em Stark MS et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9685. Além disso, “hsa-mir-3195” (n° de acesso miRBase: MI0014240, SEQ ID NO: 291) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3195”.

[0163] O termo “gene hsa-miR-6757-5p” ou “hsa-miR-6757-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6757-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027414) descrito na SEQ ID NO: 115, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6757-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6757” (n° de acesso miRBase: MI0022602, SEQ ID NO: 292) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6757-5p”.

[0164] O termo “gene hsa-miR-8072” ou “hsa-miR-8072” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-8072 (n° de acesso miRBase: MIMAT0030999) descrito na SEQ ID NO: 116, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-8072 pode ser obtido por um método descrito em Wang HJ et al., 2013, Shock, Vol. 39, p. 480-487. Além disso, “hsa-mir-8072” (n° de acesso miRBase: MI0025908, SEQ ID NO: 293) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-8072”.

[0165] O termo “gene hsa-miR-4745-5p” ou “hsa-miR-4745-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4745-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019878) descrito na SEQ ID NO: 117, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4745-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4745” (n° de acesso miRBase: MI0017384, SEQ ID NO: 294) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4745-5p”.

[0166] O termo “gene hsa-miR-6511a-5p” ou “hsa-miR-6511a- 5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6511a-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0025478) descrito na SEQ ID NO: 118, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6511a-5p pode ser obtido por um método descrito em Joyce CE et al., 2011, Hum Mol Genet, Vol. 20, p. 4025-4040. Além disso, “hsa-mir- 6511a-1, hsa-mir-6511a-2, hsa-mir-6511a-3, e hsa-mir-6511a-4” (nos de acesso miRBase: MI0022223, MI0023564, MI0023565, e MI0023566, SEQ ID NOs: 295, 296, 297, e 298) possuindo estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) são conhecidos como precursores de “hsa-miR-6511a-5p”.

[0167] O termo “gene hsa-miR-6776-5p” ou “hsa-miR-6776-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6776-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027452) descrito na SEQ ID NO: 119, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6776-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6776” (n° de acesso miRBase: MI0022621, SEQ ID NO: 299) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6776-5p”.

[0168] O termo “gene hsa-miR-371a-5p” ou “hsa-miR-371a-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-371a-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004687) descrito na SEQ ID NO: 120, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 371a-5p pode ser obtido por um método descrito em Suh MR et al., 2004, Dev Biol, Vol. 270, p. 488-498. Além disso, “hsa-mir-371a” (n° de acesso miRBase: MI0000779, SEQ ID NO: 300) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-371a-5p”.

[0169] O termo “gene hsa-miR-1227-5p” ou “hsa-miR-1227-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1227-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0022941) descrito na SEQ ID NO: 121, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1227-5p pode ser obtido por um método descrito em Berezikov E et al., 2007, Mol Cell, Vol. 28, p. 328-336. Além disso, “hsa-mir-1227” (n° de acesso miRBase: MI0006316, SEQ ID NO: 301) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1227-5p”.

[0170] O termo “gene hsa-miR-7150” ou “hsa-miR-7150” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-7150 (n° de acesso miRBase: MIMAT0028211) descrito na SEQ ID NO: 122, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-7150 pode ser obtido por um método descrito em Oulas A et al., 2009, Nucleic Acids Res, Vol. 37, p. 3276-3287. Além disso, “hsa-mir-7150” (n° de acesso miRBase: MI0023610, SEQ ID NO: 302) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-7150”.

[0171] O termo “gene hsa-miR-1915-3p” ou “hsa-miR-1915-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1915-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0007892) descrito na SEQ ID NO: 123, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1915-3p pode ser obtido por um método descrito em Bar M et al., 2008, Stem Cells, Vol. 26, p. 2496-2505. Além disso, “hsa-mir-1915” (n° de acesso miRBase: MI0008336, SEQ ID NO: 266) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1915-3p”.

[0172] O termo “gene hsa-miR-187-5p” ou “hsa-miR-187-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-187-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004561) descrito na SEQ ID NO: 124, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 187-5p pode ser obtido por um método descrito em Lim LP et al., 2003, Science, Vol. 299, p. 1540. Além disso, “hsa-mir-187” (n° de acesso miRBase: MI0000274, SEQ ID NO: 303) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-187-5p”.

[0173] O termo “gene hsa-miR-614” ou “hsa-miR-614” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-614 (n° de acesso miRBase: MIMAT0003282) descrito na SEQ ID NO: 125, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-614 pode ser obtido por um método descrito em Cummins JM et al., 2006, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 103, p. 3687-3692. Além disso, “hsa-mir-614” (n° de acesso miRBase: MI0003627, SEQ ID NO: 304) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-614”.

[0174] O termo “gene hsa-miR-19b-3p” ou “hsa-miR-19b-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-19b-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0000074) descrito na SEQ ID NO: 126, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 19b-3p pode ser obtido por um método descrito em Lagos-Quintana M et al., 2001, Science, Vol. 294, p. 853-858. Além disso, “hsa-mir-19b-1 e hsa-mir- 19b-2” (nos de acesso miRBase: MI0000074 e MI0000075, SEQ ID NOs: 305 e 306) possuindo estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) são conhecidos como precursores de “hsa-miR-19b-3p”.

[0175] O termo “gene hsa-miR-1225-5p” ou “hsa-miR-1225-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1225-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0005572) descrito na SEQ ID NO: 127, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1225-5p pode ser obtido por um método descrito em Berezikov E et al., 2007, Mol Cell, Vol. 28, p. 328-336. Além disso, “hsa-mir-1225” (n° de acesso miRBase: MI0006311, SEQ ID NO: 307) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1225-5p”.

[0176] O termo “gene hsa-miR-451a” ou “hsa-miR-451a” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-451a (n° de acesso miRBase: MIMAT0001631) descrito na SEQ ID NO: 128, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-451a pode ser obtido por um método descrito em Altuvia Y et al., 2005, Nucleic Acids Res, Vol. 33, p. 2697-2706. Além disso, “hsa-mir-451a” (n° de acesso miRBase: MI0001729, SEQ ID NO: 308) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 451a”.

[0177] O termo “gene hsa-miR-939-5p” ou “hsa-miR-939-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-939-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004982) descrito na SEQ ID NO: 129, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 939-5p pode ser obtido por um método descrito em Lui WO et al., 2007, Cancer Res, Vol. 67, p. 6031-6043. Além disso, “hsa-mir-939” (n° de acesso miRBase: MI0005761, SEQ ID NO: 309) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-939- 5p”.

[0178] O termo “gene hsa-miR-223-3p” ou “hsa-miR-223-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-223-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0000280) descrito na SEQ ID NO: 130, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 223-3p pode ser obtido por um método descrito em Lim LP et al., 2003, Science, Vol. 299, p. 1540. Além disso, “hsa-mir-223” (n° de acesso miRBase: MI0000300, SEQ ID NO: 310) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-223-3p”.

[0179] O termo “gene hsa-miR-1228-5p” ou “hsa-miR-1228-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1228-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0005582) descrito na SEQ ID NO: 131, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1228-5p pode ser obtido por um método descrito em Berezikov E et al., 2007, Mol Cell, Vol. 28, p. 328-336. Além disso, “hsa-mir-1228” (n° de acesso miRBase: MI0006318, SEQ ID NO: 311) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1228-5p”.

[0180] O termo “gene hsa-miR-125a-3p” ou “hsa-miR-125a-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-125a-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004602) descrito na SEQ ID NO: 132, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 125a-3p pode ser obtido por um método descrito em Lagos-Quintana M et al., 2002, Curr Biol, Vol. 12, p. 735-739. Além disso, “hsa-mir-125a” (n° de acesso miRBase: MI0000469, SEQ ID NO: 312) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 125a-3p”.

[0181] O termo “gene hsa-miR-92b-5p” ou “hsa-miR-92b-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-92b-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004792) descrito na SEQ ID NO: 133, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 92b-5p pode ser obtido por um método descrito em Cummins JM et al., 2006, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 103, p. 3687-3692. Além disso, “hsa-mir-92b” (n° de acesso miRBase: MI0003560, SEQ ID NO: 313) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-92b-5p”.

[0182] O termo “gene hsa-miR-22-3p” ou “hsa-miR-22-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-22-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0000077) descrito na SEQ ID NO: 134, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 22-3p pode ser obtido por um método descrito em Lagos-Quintana M et al., 2001, Science, Vol. 294, p. 853-858. Além disso, “hsa-mir-22” (n° de acesso miRBase: MI0000078, SEQ ID NO: 314) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-22- 3p”.

[0183] O termo “gene hsa-miR-4271” ou “hsa-miR-4271” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4271 (n° de acesso miRBase: MIMAT0016901) descrito na SEQ ID NO: 135, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4271 pode ser obtido por um método descrito em Goff LA et al., 2009, PLoS One, Vol. 4, e7192. Além disso, “hsa-mir-4271” (n° de acesso miRBase: MI0015879, SEQ ID NO: 315) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4271”.

[0184] O termo “gene hsa-miR-642b-3p” ou “hsa-miR-642b-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-642b-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0018444) descrito na SEQ ID NO: 136, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 642b-3p pode ser obtido por um método descrito em Witten D et al., 2010, BMC Biol, Vol. 8, p. 58. Além disso, “hsa-mir-642b” (n° de acesso miRBase: MI0016685, SEQ ID NO: 316) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-642b-3p”.

[0185] O termo “gene hsa-miR-6075” ou “hsa-miR-6075” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6075 (n° de acesso miRBase: MIMAT0023700) descrito na SEQ ID NO: 137, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6075 pode ser obtido por um método descrito em Voellenkle C et al., 2012, RNA, Vol. 18, p. 472-484. Além disso, “hsa-mir-6075” (n° de acesso miRBase: MI0020352, SEQ ID NO: 317) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6075”.

[0186] O termo “gene hsa-miR-6125” ou “hsa-miR-6125” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6125 (n° de acesso miRBase: MIMAT0024598) descrito na SEQ ID NO: 138, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6125 pode ser obtido por um método descrito em Smith JL et al., 2012, J Virol, Vol. 86, p. 5278-5287. Além disso, “hsa-mir-6125” (n° de acesso miRBase: MI0021259, SEQ ID NO: 318) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6125”.

[0187] O termo “gene hsa-miR-887-3p” ou “hsa-miR-887-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-887-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004951) descrito na SEQ ID NO: 139, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 887-3p pode ser obtido por um método descrito em Berezikov E et al., 2006, Genome Res, Vol. 16, p. 1289-1298. Além disso, “hsa-mir-887” (n° de acesso miRBase: MI0005562, SEQ ID NO: 319) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-887- 3p”.

[0188] O termo “gene hsa-miR-6851-5p” ou “hsa-miR-6851-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6851-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027602) descrito na SEQ ID NO: 140, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6851-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6851” (n° de acesso miRBase: MI0022697, SEQ ID NO: 320) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6851-5p”.

[0189] O termo “gene hsa-miR-6763-5p” ou “hsa-miR-6763-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6763-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027426) descrito na SEQ ID NO: 141, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6763-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6763” (n° de acesso miRBase: MI0022608, SEQ ID NO: 321) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6763-5p”.

[0190] O termo “gene hsa-miR-3928-3p” ou “hsa-miR-3928-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3928-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0018205) descrito na SEQ ID NO: 142, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 3928-3p pode ser obtido por um método descrito em Creighton CJ et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9637. Além disso, “hsa-mir-3928” (n° de acesso miRBase: MI0016438, SEQ ID NO: 322) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 3928-3p”.

[0191] O termo “gene hsa-miR-4443” ou “hsa-miR-4443” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4443 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018961) descrito na SEQ ID NO: 143, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4443 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4443” (n° de acesso miRBase: MI0016786, SEQ ID NO: 323) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4443”.

[0192] O termo “gene hsa-miR-3648” ou “hsa-miR-3648” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3648 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018068) descrito na SEQ ID NO: 144, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3648 pode ser obtido por um método descrito em Meiri E et al., 2010, Nucleic Acids Res, Vol. 38, p. 6234-6246. Além disso, “hsa-mir-3648” (n° de acesso miRBase: MI0016048, SEQ ID NO: 324) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3648”.

[0193] O termo “gene hsa-miR-149-3p” ou “hsa-miR-149-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-149-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004609) descrito na SEQ ID NO: 145, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 149-3p pode ser obtido por um método descrito em Lagos-Quintana M et al., 2002, Curr Biol, Vol. 12, p. 735-739. Além disso, “hsa-mir-149” (n° de acesso miRBase: MI0000478, SEQ ID NO: 325) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-149- 3p”.

[0194] O termo “gene hsa-miR-4689” ou “hsa-miR-4689” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4689 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019778) descrito na SEQ ID NO: 146, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4689 pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4689” (n° de acesso miRBase: MI0017322, SEQ ID NO: 326) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4689”.

[0195] O termo “gene hsa-miR-4763-3p” ou “hsa-miR-4763-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4763-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019913) descrito na SEQ ID NO: 147, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4763-3p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4763” (n° de acesso miRBase: MI0017404, SEQ ID NO: 327) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4763-3p”.

[0196] O termo “gene hsa-miR-6729-5p” ou “hsa-miR-6729-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6729-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027359) descrito na SEQ ID NO: 148, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6729-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6729” (n° de acesso miRBase: MI0022574, SEQ ID NO: 328) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6729-5p”.

[0197] O termo “gene hsa-miR-3196” ou “hsa-miR-3196” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3196 (n° de acesso miRBase: MIMAT0015080) descrito na SEQ ID NO: 149, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3196 pode ser obtido por um método descrito em Stark MS et al., 2010, PLoS One, Vol. 5, e9685. Além disso, “hsa-mir-3196” (n° de acesso miRBase: MI0014241, SEQ ID NO: 329) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3196”.

[0198] O termo “gene hsa-miR-8069” ou “hsa-miR-8069” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-8069 (n° de acesso miRBase: MIMAT0030996) descrito na SEQ ID NO: 150, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-8069 pode ser obtido por um método descrito em Wang HJ et al., 2013, Shock, Vol. 39, p. 480-487. Além disso, “hsa-mir-8069” (n° de acesso miRBase: MI0025905, SEQ ID NO: 330) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-8069”.

[0199] O termo “gene hsa-miR-1268a” ou “hsa-miR-1268a” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1268a (n° de acesso miRBase: MIMAT0005922) descrito na SEQ ID NO: 151, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1268a pode ser obtido por um método descrito em Morin RD et al., 2008, Genome Res, Vol. 18, p. 610-621. Além disso, “hsa-mir-1268a” (n° de acesso miRBase: MI0006405, SEQ ID NO: 331) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1268a”.

[0200] O termo “gene hsa-miR-4739” ou “hsa-miR-4739” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4739 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019868) descrito na SEQ ID NO: 152, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4739 pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4739” (n° de acesso miRBase: MI0017377, SEQ ID NO: 332) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4739”.

[0201] O termo “gene hsa-miR-1268b” ou “hsa-miR-1268b” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1268b (n° de acesso miRBase: MIMAT0018925) descrito na SEQ ID NO: 153, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1268b pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-1268b” (n° de acesso miRBase: MI0016748, SEQ ID NO: 333) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1268b”.

[0202] O termo “gene hsa-miR-5698” ou “hsa-miR-5698” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-5698 (n° de acesso miRBase: MIMAT0022491) descrito na SEQ ID NO: 154, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-5698 pode ser obtido por um método descrito em Watahiki A et al., 2011, PLoS One, Vol. 6, e24950. Além disso, “hsa-mir-5698” (n° de acesso miRBase: MI0019305, SEQ ID NO: 334) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-5698”.

[0203] O termo “gene hsa-miR-6752-5p” ou “hsa-miR-6752-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6752-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027404) descrito na SEQ ID NO: 155, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6752-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6752” (n° de acesso miRBase: MI0022597, SEQ ID NO: 335) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6752-5p”.

[0204] O termo “gene hsa-miR-4507” ou “hsa-miR-4507” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4507 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019044) descrito na SEQ ID NO: 156, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4507 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4507” (n° de acesso miRBase: MI0016871, SEQ ID NO: 336) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4507”.

[0205] O termo “gene hsa-miR-564” ou “hsa-miR-564” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-564 (n° de acesso miRBase: MIMAT0003228) descrito na SEQ ID NO: 157, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-564 pode ser obtido por um método descrito em Cummins JM et al., 2006, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 103, p. 3687-3692. Além disso, “hsa-mir-564” (n° de acesso miRBase: MI0003570, SEQ ID NO: 337) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-564”.

[0206] O termo “gene hsa-miR-4497” ou “hsa-miR-4497” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4497 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019032) descrito na SEQ ID NO: 158, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4497 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4497” (n° de acesso miRBase: MI0016859, SEQ ID NO: 338) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4497”.

[0207] O termo “gene hsa-miR-6877-5p” ou “hsa-miR-6877-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6877-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027654) descrito na SEQ ID NO: 159, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6877-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6877” (n° de acesso miRBase: MI0022724, SEQ ID NO: 339) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6877-5p”.

[0208] O termo “gene hsa-miR-6087” ou “hsa-miR-6087” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6087 (n° de acesso miRBase: MIMAT0023712) descrito na SEQ ID NO: 160, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6087 pode ser obtido por um método descrito em Yoo JK et al., 2012, Stem Cells Dev, Vol. 21, p. 2049-2057. Além disso, “hsa-mir-6087” (n° de acesso miRBase: MI0020364, SEQ ID NO: 340) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6087”.

[0209] O termo “gene hsa-miR-4731-5p” ou “hsa-miR-4731-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4731-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019853) descrito na SEQ ID NO: 161, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4731-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4731” (n° de acesso miRBase: MI0017368, SEQ ID NO: 341) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4731-5p”.

[0210] O termo “gene hsa-miR-615-5p” ou “hsa-miR-615-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-615-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004804) descrito na SEQ ID NO: 162, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 615-5p pode ser obtido por um método descrito em Cummins JM et al., 2006, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 103, p. 3687-3692. Além disso, “hsa-mir-615” (n° de acesso miRBase: MI0003628, SEQ ID NO: 342) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-615-5p”.

[0211] O termo “gene hsa-miR-760” ou “hsa-miR-760” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-760 (n° de acesso miRBase: MIMAT0004957) descrito na SEQ ID NO: 163, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-760 pode ser obtido por um método descrito em Berezikov E et al., 2006, Genome Res, Vol. 16, p. 1289-1298. Além disso, “hsa-mir-760” (n° de acesso miRBase: MI0005567, SEQ ID NO: 343) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-760”.

[0212] O termo “gene hsa-miR-6891-5p” ou “hsa-miR-6891-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6891-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027682) descrito na SEQ ID NO: 164, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6891-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6891” (n° de acesso miRBase: MI0022738, SEQ ID NO: 344) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6891-5p”.

[0213] O termo “gene hsa-miR-6887-5p” ou “hsa-miR-6887-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6887-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027674) descrito na SEQ ID NO: 165, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6887-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6887” (n° de acesso miRBase: MI0022734, SEQ ID NO: 345) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6887-5p”.

[0214] O termo “gene hsa-miR-4525” ou “hsa-miR-4525” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4525 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019064) descrito na SEQ ID NO: 166, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4525 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4525” (n° de acesso miRBase: MI0016892, SEQ ID NO: 346) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4525”.

[0215] O termo “gene hsa-miR-1914-3p” ou “hsa-miR-1914-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1914-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0007890) descrito na SEQ ID NO: 167, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1914-3p pode ser obtido por um método descrito em Bar M et al., 2008, Stem Cells, Vol. 26, p. 2496-2505. Além disso, “hsa-mir-1914” (n° de acesso miRBase: MI0008335, SEQ ID NO: 347) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1914-3p”.

[0216] O termo “gene hsa-miR-619-5p” ou “hsa-miR-619-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-619-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0026622) descrito na SEQ ID NO: 168, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 619-5p pode ser obtido por um método descrito em Cummins JM et al., 2006, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 103, p. 3687-3692. Além disso, “hsa-mir-619” (n° de acesso miRBase: MI0003633, SEQ ID NO: 348) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-619-5p”.

[0217] O termo “gene hsa-miR-5001-5p” ou “hsa-miR-5001-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-5001-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0021021) descrito na SEQ ID NO: 169, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 5001-5p pode ser obtido por um método descrito em Hansen TB et al., 2011, RNA Biol, Vol. 8, p. 378-383. Além disso, “hsa-mir-5001” (n° de acesso miRBase: MI0017867, SEQ ID NO: 349) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 5001-5p”.

[0218] O termo “gene hsa-miR-6722-3p” ou “hsa-miR-6722-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6722-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0025854) descrito na SEQ ID NO: 170, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6722-3p pode ser obtido por um método descrito em Li Y et al., 2012, Gene, Vol. 497, p. 330-335. Além disso, “hsa-mir-6722” (n° de acesso miRBase: MI0022557, SEQ ID NO: 350) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6722-3p”.

[0219] O termo “gene hsa-miR-3621” ou “hsa-miR-3621” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-3621 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018002) descrito na SEQ ID NO: 171, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-3621 pode ser obtido por um método descrito em Witten D et al., 2010, BMC Biol, Vol. 8, p. 58. Além disso, “hsa-mir-3621” (n° de acesso miRBase: MI0016012, SEQ ID NO: 351) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-3621”.

[0220] O termo “gene hsa-miR-4298” ou “hsa-miR-4298” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4298 (n° de acesso miRBase: MIMAT0016852) descrito na SEQ ID NO: 172, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4298 pode ser obtido por um método descrito em Goff LA et al., 2009, PLoS One, Vol. 4, e7192. Além disso, “hsa-mir-4298” (n° de acesso miRBase: MI0015830, SEQ ID NO: 352) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4298”.

[0221] O termo “gene hsa-miR-675-5p” ou “hsa-miR-675-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-675-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004284) descrito na SEQ ID NO: 173, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 675-5p pode ser obtido por um método descrito em Cai X et al., 2007, RNA, Vol. 13, p. 313-316. Além disso, “hsa-mir-675” (n° de acesso miRBase: MI0005416, SEQ ID NO: 353) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-675-5p”.

[0222] O termo “gene hsa-miR-4655-5p” ou “hsa-miR-4655-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4655-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019721) descrito na SEQ ID NO: 174, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4655-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4655” (n° de acesso miRBase: MI0017283, SEQ ID NO: 354) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4655-5p”.

[0223] O termo “gene hsa-miR-6073” ou “hsa-miR-6073” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6073 (n° de acesso miRBase: MIMAT0023698) descrito na SEQ ID NO: 561, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6073 pode ser obtido por um método descrito em Voellenkle C et al., 2012, RNA, Vol. 18, p. 472-484. Além disso, “hsa-mir-6073” (n° de acesso miRBase: MI0020350, SEQ ID NO: 580) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6073”.

[0224] O termo “gene hsa-miR-6845-5p” ou “hsa-miR-6845-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6845-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027590) descrito na SEQ ID NO: 562, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 6845-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-6845” (n° de acesso miRBase: MI0022691, SEQ ID NO: 581) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6845-5p”.

[0225] O termo “gene hsa-miR-6769b-5p” ou “hsa-miR-6769b- 5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-6769b-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0027620) descrito na SEQ ID NO: 563, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-6769b-5p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir- 6769b” (n° de acesso miRBase: MI0022706, SEQ ID NO: 582) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-6769b-5p”.

[0226] O termo “gene hsa-miR-4665-3p” ou “hsa-miR-4665-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4665-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019740) descrito na SEQ ID NO: 564, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4665-3p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4665” (n° de acesso miRBase: MI0017295, SEQ ID NO: 583) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4665-3p”.

[0227] O termo “gene hsa-miR-1913” ou “hsa-miR-1913” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1913 (n° de acesso miRBase: MIMAT0007888) descrito na SEQ ID NO: 565, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-1913 pode ser obtido por um método descrito em Bar M et al., 2008, Stem Cells, Vol. 26, p. 2496-2505. Além disso, “hsa-mir-1913” (n° de acesso miRBase: MI0008334, SEQ ID NO: 584) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-1913”.

[0228] O termo “gene hsa-miR-1228-3p” ou “hsa-miR-1228-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1228-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0005583) descrito na SEQ ID NO: 566, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1228-3p pode ser obtido por um método descrito em Berezikov E et al., 2007, Mol Cell, Vol. 28, p. 328-336. Além disso, “hsa-mir-1228” (n° de acesso miRBase: MI0006318, SEQ ID NO: 311) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1228-3p”.

[0229] O termo “gene hsa-miR-940” ou “hsa-miR-940” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-940 (n° de acesso miRBase: MIMAT0004983) descrito na SEQ ID NO: 567, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-940 pode ser obtido por um método descrito em Lui WO et al., 2007, Cancer Res, Vol. 67, p. 6031-6043. Além disso, “hsa-mir-940” (n° de acesso miRBase: MI0005762, SEQ ID NO: 585) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-940”.

[0230] O termo “gene hsa-miR-296-3p” ou “hsa-miR-296-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-296-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0004679) descrito na SEQ ID NO: 568, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 296-3p pode ser obtido por um método descrito em Houbaviy HB et al., 2003, Dev Cell, Vol. 5, p. 351-358. Além disso, “hsa-mir-296” (n° de acesso miRBase: MI0000747, SEQ ID NO: 586) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-296- 3p”.

[0231] O termo “gene hsa-miR-4690-5p” ou “hsa-miR-4690-5p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4690-5p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019779) descrito na SEQ ID NO: 569, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4690-5p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4690” (n° de acesso miRBase: MI0017323, SEQ ID NO: 587) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4690-5p”.

[0232] O termo “gene hsa-miR-548q” ou “hsa-miR-548q” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-548q (n° de acesso miRBase: MIMAT0011163) descrito na SEQ ID NO: 570, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-548q pode ser obtido por um método descrito em Wyman SK et al., 2009, PLoS One., Vol. 4, e5311. Além disso, “hsa-mir-548q” (n° de acesso miRBase: MI0010637, SEQ ID NO: 588) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-548q”.

[0233] O termo “gene hsa-miR-663a” ou “hsa-miR-663a” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-663a (n° de acesso miRBase: MIMAT0003326) descrito na SEQ ID NO: 571, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-663a pode ser obtido por um método descrito em Cummins JM et al., 2006, Proc Natl Acad Sci USA, Vol. 103, p. 3687-3692. Além disso, “hsa-mir-663a” (n° de acesso miRBase: MI0003672, SEQ ID NO: 589) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-663a”.

[0234] O termo “gene hsa-miR-1249” ou “hsa-miR-1249” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1249 (n° de acesso miRBase: MIMAT0005901) descrito na SEQ ID NO: 572, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-1249 pode ser obtido por um método descrito em Morin RD et al., 2008, Genome Res, Vol. 18, p. 610-621. Além disso, “hsa-mir-1249” (n° de acesso miRBase: MI0006384, SEQ ID NO: 590) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-1249”.

[0235] O termo “gene hsa-miR-1202” ou “hsa-miR-1202” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1202 (n° de acesso miRBase: MIMAT0005865) descrito na SEQ ID NO: 573, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-1202 pode ser obtido por um método descrito em Marton S et al., 2008, Leukemia, Vol. 22, p. 330-338. Além disso, “hsa-mir-1202” (n° de acesso miRBase: MI0006334, SEQ ID NO: 591) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-1202”.

[0236] O termo “gene hsa-miR-7113-3p” ou “hsa-miR-7113-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-7113-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0028124) descrito na SEQ ID NO: 574, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 7113-3p pode ser obtido por um método descrito em Ladewig E et al., 2012, Genome Res, Vol. 22, p. 1634-1645. Além disso, “hsa-mir-7113” (n° de acesso miRBase: MI0022964, SEQ ID NO: 592) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-7113-3p”.

[0237] O termo “gene hsa-miR-1225-3p” ou “hsa-miR-1225-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1225-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0005573) descrito na SEQ ID NO: 575, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1225-3p pode ser obtido por um método descrito em Berezikov E et al., 2007, Mol Cell, Vol. 28, p. 328-336. Além disso, “hsa-mir-1225” (n° de acesso miRBase: MI0006311, SEQ ID NO: 307) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1225-3p”.

[0238] O termo “gene hsa-miR-4783-3p” ou “hsa-miR-4783-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4783-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0019947) descrito na SEQ ID NO: 576, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 4783-3p pode ser obtido por um método descrito em Persson H et al., 2011, Cancer Res, Vol. 71, p. 78-86. Além disso, “hsa-mir-4783” (n° de acesso miRBase: MI0017428, SEQ ID NO: 593) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 4783-3p”.

[0239] O termo “gene hsa-miR-4448” ou “hsa-miR-4448” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4448 (n° de acesso miRBase: MIMAT0018967) descrito na SEQ ID NO: 577, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4448 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4448” (n° de acesso miRBase: MI0016791, SEQ ID NO: 594) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4448”.

[0240] O termo “gene hsa-miR-4534” ou “hsa-miR-4534” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-4534 (n° de acesso miRBase: MIMAT0019073) descrito na SEQ ID NO: 578, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR-4534 pode ser obtido por um método descrito em Jima DD et al., 2010, Blood, Vol. 116, e118-e127. Além disso, “hsa-mir-4534” (n° de acesso miRBase: MI0016901, SEQ ID NO: 595) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpinlike) é conhecido como um precursor de “hsa-miR-4534”.

[0241] O termo “gene hsa-miR-1307-3p” ou “hsa-miR-1307-3p” utilizado na presente invenção inclui o gene hsa-miR-1307-3p (n° de acesso miRBase: MIMAT0005951) descrito na SEQ ID NO: 579, um homólogo ou ortólogo de um organismo de espécie diferente, e similares. O gene hsa-miR- 1307-3p pode ser obtido por um método descrito em Morin RD et al., 2008, Genome Res, Vol. 18, p. 610-621. Além disso, “hsa-mir-1307” (n° de acesso miRBase: MI0006444, SEQ ID NO: 596) possuindo uma estrutura semelhante a um grampo (hairpin-like) é conhecido como um precursor de “hsa-miR- 1307-3p”.

[0242] Um miRNA maduro pode tornar-se um variante devido à sequência clivada de maneira mais curta ou mais longa por uma a várias substituições de nucleotídeos quando cortado como o miRNA maduro a partir de seu RNA precursor possuindo uma estrutura similar a um grampo (hairpinlike). Este variante é denominado isomiR (Morin RD. et al., 2008, Genome Res., Vol. 18, p. 610-621). O miRBase Release 20 mostra as sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 174 e 561 a 579, bem como um grande número das sequências nucleotídicas variantes e fragmentos representados pelas SEQ ID NOs: 355 a 650 e 597 a 618, denominados isomiRs. Estas variantes podem também ser obtidas como miRNAs possuindo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 e 174 e 561 a 579. Especificamente, entre as variantes de polinucleotídeos consistindo da sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 5, 8, 9, 11, 18, 20, 22, 23, 24, 28, 29, 30, 32, 34, 37, 40, 41, 47, 48, 49, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 60, 61, 63, 64, 65, 66, 67, 69, 72, 73, 75, 78, 79, 80, 81, 82, 85, 88, 89, 91, 92, 95, 96, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 112, 113, 114, 117, 118, 120, 123, 124, 125, 126, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 138, 139, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 149, 151, 152, 153, 154, 156, 157, 158, 160, 161, 162, 163, 166, 167, 168, 169, 172, 173, 174, 565, 566, 567, 568, 569, 571, 572, 573, 576, 577, 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, exemplos das variantes mais longas registradas na base de dados miRBase Release 20 incluem polinucleotídeos possuindo representados pelas SEQ ID NOs: 355, 357, 359, 361, 363, 365, 367, 369, 371, 373, 375, 377, 379, 381, 383, 385, 387, 389, 391, 393, 395, 397, 399, 401, 403, 405, 407, 409, 411, 413, 415, 417, 419, 421, 423, 425, 427, 429, 431, 433, 435, 437, 439, 441, 443, 445, 447, 449, 451, 453, 455, 457, 459, 461, 463, 465, 467, 469, 471, 473, 475, 477, 479, 481, 483, 485, 487, 489, 491, 493, 495, 497, 499, 501, 503, 505, 507, 509, 511, 513, 515, 517, 519, 521, 523, 525, 527, 529, 531, 533, 535, 537, 539, 541, 543, 545, 547, 549, 551, 553, 555, 557, 559, 597, 599, 601, 603, 605, 607, 609, 611, 613, 615 e 617, respectivamente.

[0243] Além disso, entre as variantes de polinucleotídeos consistindo de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 5, 8, 9, 11, 18, 20, 22, 23, 24, 28, 29, 30, 32, 34, 37, 40, 41, 47, 48, 49, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 60, 61, 63, 64, 65, 66, 67, 69, 72, 73, 75, 78, 79, 80, 81, 82, 85, 88, 89, 91, 92, 95, 96, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 112, 113, 114, 117, 118, 120, 123, 124, 125, 126, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 138, 139, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 149, 151, 152, 153, 154, 156, 157, 158, 160, 161, 162, 163, 166, 167, 168, 169, 172, 173, 174, 565, 566, 567, 568, 569, 571, 572, 573, 576, 577, 579 ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T na sequência, exemplos das variantes mais curtas registradas na base de dados miRBase Release 20 incluem polinucleotídeos possuindo as sequências representadas pelas SEQ ID NOs: 356, 358, 360, 362, 364, 366, 368, 370, 372, 374, 376, 378, 380, 382, 384, 386, 388, 390, 392, 394, 396, 398, 400, 402, 404, 406, 408, 410, 412, 414, 416, 418, 420, 422, 424, 426, 428, 430, 432, 434, 436, 438, 440, 442, 444, 446, 448, 450, 452, 454, 456, 458, 460, 462, 464, 466, 468, 470, 472, 474, 476, 478, 480, 482, 484, 486, 488, 490, 492, 494, 496, 498, 500, 502, 504, 506, 508, 510, 512, 514, 516, 518, 520, 522, 524, 526, 528, 530, 532, 534, 536, 538, 540, 542, 544, 546, 548, 550, 552, 554, 556, 558, 560, 598, 600, 602, 604, 606, 608, 610, 612, 614, 616 e 618, respectivamente.

[0244] Além destas variantes e fragmentos, os exemplos incluem um grande número de polinucleotídeos isomiR de SEQ ID NOs: 1 a 174 e 561 a 579 registrados na base de dados miRBase.

[0245] Exemplos de polinucleotídeos compreendendo uma sequência nucleotídica representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 174 e 561 a 579 incluem um polinucleotídeo representado por qualquer uma das SEQ ID NOs: 175 a 354 e 579 a 596, que são os seus respectivos precursores.

[0246] Os nomes e números de acesso miRBase (números de registro) dos genes representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 618 estão apresentados na Tabela 1.

[0247] Conforme utilizado na presente invenção, o termo “capaz de se ligar especificamente” significa que a sonda de ácido nucleico ou primer utilizado na presente invenção se liga a um ácido nucleico alvo específico e pode não se ligar substancialmente a outros ácidos nucleicos.

[0248] O presente relatório descritivo abrange os conteúdos descritos no relatório descritivo e/ou desenhos do Pedido de Patente Japonesa 2014-125561, no qual a prioridade do presente pedido está baseada.

EFEITOS VANTAJOSOS DA INVENÇÃO

[0249] De acordo com a presente invenção, o câncer de pulmão pode ser detectado de maneira fácil e acurada.

[0250] Por exemplo, a presença ou ausência do câncer de pulmão em um paciente pode ser facilmente detectada utilizando, como um índice, os valores de medição do nível de expressão de diversos miRNAs no sangue, soro e/ou plasma do paciente, que pode ser coletado a partir do paciente com invasividade limitada.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[0251] Figura 1 - Esta figura mostra a relação entre as sequências nucleotídicas de hsa-miR-1908-5p representada pela SEQ ID NO: 22 e hsa-miR-1908-3p representada pela SEQ ID NO: 5, que são produzidos a partir de um precursor hsa-mir-1908 representado pela SEQ ID NO: 179.

[0252] Figura 2 - Diagrama da esquerda: os valores de medição do nível de expressão de hsa-miR-6768-5p (SEQ ID NO: 1) em sujeitos saudáveis (100 pessoas) e pacientes com câncer de pulmão (17 pessoas) selecionados como uma coorte de desenvolvimento foram plotados nas ordenadas. A linha horizontal no diagrama representa um limiar (10,08) que foi otimizado por meio de análise discriminante de Fisher e discriminado entre os dois grupos. Diagrama da direita: os valores de medição do nível de expressão de hsa-miR-6768-5p (SEQ ID NO: 1) em sujeitos saudáveis (50 pessoas) e pacientes com câncer de pulmão (8 pessoas) selecionados como uma coorte de validação foram plotados nas ordenadas. A linha horizontal no diagrama representa um limiar (10,08) que foi estabelecido na coorte de desenvolvimento e discriminado entre os dois grupos.

[0253] Figura 3 - Diagrama da esquerda: os valores de medição do nível de expressão de hsa-miR-6768-5p (SEQ ID NO: 1) em sujeitos saudáveis (100 pessoas, círculos) e pacientes com câncer de pulmão (17 pessoas, triângulos) selecionados como uma coorte de desenvolvimento foram plotados na abscissa contra os seus valores de medição do nível de expressão de hsa-miR-6836-3p (SEQ ID nO: 2) na ordenada. A linha horizontal no diagrama representa uma função discriminante (0 = -1,42x + y + 4,7) que foi otimizada por meio de análise discriminante de Fisher e discriminou entre os dois grupos. Diagrama da direita: os valores de medição do nível de expressão de hsa-miR-6768-5p (SEQ ID NO: 1) em sujeitos saudáveis (50 pessoas, círculos) e pacientes com câncer de pulmão (8 pessoas, triângulos) selecionados como uma coorte de validação foram plotados na abscissa contra os seus valores de medição do nível de expressão de hsa-miR-6836-3p (SEQ ID NO: 2) na ordenada. A linha horizontal no diagrama representa um limiar (0 = -1,42x + y + 4,7) que foi estabelecido na coorte de desenvolvimento e discriminado entre os dois grupos.

[0254] Figura 4 - Diagrama superior: uma discriminante (-1,86 x hsa-miR-6768-5p - 0,68 x hsa-miR-19b-3p + 0,43 x hsa-miR-6073 - 0,87 x hsa-miR-6717-5p + 25,68) foi preparada pela utilização de análise discriminante de Fisher a partir dos valores de medição do nível de expressão de hsa-miR-6768-5p (SEQ ID NO: 1), hsa-miR-6717-5p (SEQ ID NO: 113), hsa-miR-19b-3p (SEQ ID NO: 126), e hsa-miR-6073 (SEQ ID NO: 561) em 17 pacientes com câncer de pulmão, 99 sujeitos saudáveis, 75 pacientes com câncer pancreático, 62 pacientes com câncer de trato biliar, 32 pacientes com câncer colorretal, 35 pacientes com câncer de estômago, 32 pacientes com câncer de esôfago, 33 pacientes com câncer de fígado e 13 pacientes com doença pancreatobiliar benigna selecionados como uma coorte de desenvolvimento, e escores discriminantes obtidos a partir da análise discriminatória foram plotados na ordenada contra os grupos de amostras na abscissa. A linha pontilhada no diagrama representa um limite discriminatório que oferecia um escore discriminante de 0 e discrimina entre os dois grupos. Figura 4B: escores discriminantes obtidos a partir da análise discriminatória preparada a partir da coorte de desenvolvimento para os valores de medição do nível de expressão de hsa-miR-6768-5p (SEQ ID NO: 1), hsa-miR-6717-5p (SEQ ID NO: 113), hsa-miR-19b-3p (SEQ ID NO: 126), e hsa-miR-6073 (SEQ ID NO: 561) em 8 pacientes com câncer de pulmão, 51 sujeitos saudáveis, 23 pacientes com câncer pancreático, 38 pacientes com câncer de trato biliar, 18 pacientes com câncer colorretal, 15 pacientes com câncer de estômago, 18 pacientes com câncer de esôfago, 19 pacientes com câncer de fígado e 8 pacientes com doença pancreatobiliar benigna selecionados como uma coorte de validação foram plotados na ordenada contra os grupos de amostras na abscissa. A linha pontilhada no diagrama representa o limite discriminatório que oferecia um escore discriminante de 0 e discrimina entre os dois grupos.

DESCRIÇÃO DE EXEMPLOS DE REALIZAÇÃO

[0255] Daqui em diante, a presente invenção será descrita de maneira mais específica.

1. ÁCIDO NUCLEICO ALVO PARA O CÂNCER DE PULMÃO

[0256] Um ácido nucleico alvo primário utilizado como um marcador de câncer de pulmão para a detecção da presença e/ou ausência de câncer de pulmão ou de células de câncer de pulmão utilizando a sonda de ácido nucleico ou o primer para a detecção do câncer de pulmão definido acima de acordo com a presente invenção pode ser pelo menos um ou mais miRNA(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-6782-5p, hsa-miR-3663-3p, hsa-miR-1908-3p, hsa-miR-6726-5p, hsa-miR-4258, hsa-miR-1343-3p, hsa-miR-4516, hsa-miR- 6875-5p, hsa-miR-4651, hsa-miR-6825-5p, hsa-miR-6840-3p, hsa-miR-6780b- 5p, hsa-miR-6749-5p, hsa-miR-8063, hsa-miR-6784-5p, hsa-miR-3679-5p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR-663b, hsa-miR-6880-5p, hsa-miR-1908-5p, hsa- miR-92a-2-5p, hsa-miR-7975, hsa-miR-7110-5p, hsa-miR-6842-5p, hsa-miR- 6857-5p, hsa-miR-5572, hsa-miR-3197, hsa-miR-6131, hsa-miR-6889-5p, hsa-miR-4454, hsa-miR-1199-5p, hsa-miR-1247-3p, hsa-miR-6800-5p, hsa- miR-6872-3p, hsa-miR-4649-5p, hsa-miR-6791-5p, hsa-miR-4433b-3p, hsa- miR-3135b, hsa-miR-128-2-5p, hsa-miR-4675, hsa-miR-4472, hsa-miR-6785- 5p, hsa-miR-6741-5p, hsa-miR-7977, hsa-miR-3665, hsa-miR-128-1-5p, hsa- miR-4286, hsa-miR-6765-3p, hsa-miR-4632-5p, hsa-miR-365a-5p, hsa-miR- 6088, hsa-miR-6816-5p, hsa-miR-6885-5p, hsa-miR-711, hsa-miR-6765-5p, hsa-miR-3180, hsa-miR-4442, hsa-miR-4792, hsa-miR-6721-5p, hsa-miR- 6798-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR-6126, hsa-miR-4758-5p, hsa-miR-2392, hsa-miR-486-3p, hsa-miR-6727-5p, hsa-miR-4728-5p, hsa-miR-6746-5p, hsa- miR-4270, hsa-miR-3940-5p, hsa-miR-4725-3p, hsa-miR-7108-5p, hsa-miR- 3656, hsa-miR-6879-5p, hsa-miR-6738-5p, hsa-miR-1260a, hsa-miR-4446-3p, hsa-miR-3131, hsa-miR-4463, hsa-miR-3185, hsa-miR-6870-5p, hsa-miR- 6779-5p, hsa-miR-1273g-3p, hsa-miR-8059, hsa-miR-4697-5p, hsa-miR-4674, hsa-miR-4433-3p, hsa-miR-4257, hsa-miR-1915-5p, hsa-miR-4417, hsa-miR- 1343-5p, hsa-miR-6781-5p, hsa-miR-4695-5p, hsa-miR-1237-5p, hsa-miR- 6775-5p, hsa-miR-7845-5p, hsa-miR-4746-3p, hsa-miR-7641, hsa-miR-7847- 3p, hsa-miR-6806-5p, hsa-miR-4467, hsa-miR-4726-5p, hsa-miR-4648, hsa- miR-6089, hsa-miR-1260b, hsa-miR-4532, hsa-miR-5195-3p, hsa-miR-3188, hsa-miR-6848-5p, hsa-miR-1233-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-3195, hsa- miR-6757-5p, hsa-miR-8072, hsa-miR-4745-5p, hsa-miR-6511a-5p, hsa-miR- 6776-5p, hsa-miR-371a-5p, hsa-miR-1227-5p, hsa-miR-7150, hsa-miR-1915- 3p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-1225-5p, hsa-miR-451a, hsa- miR-939-5p, hsa-miR-223-3p, hsa-miR-125a-3p, hsa-miR-92b-5p, hsa-miR- 22-3p, hsa-miR-6073, hsa-miR-6845-5p, hsa-miR-6769b-5p, hsa-miR-4665- 3p, hsa-miR-1913, hsa-miR-1228-3p, hsa-miR-940, hsa-miR-296-3p, hsa- miR-4690-5p, hsa-miR-548q, hsa-miR-663a, hsa-miR-1249, hsa-miR-1202, hsa-miR-7113-3p, hsa-miR-1225-3p, hsa-miR-4783-3p, hsa-miR-4448 e hsa- miR-4534. Além disso, pelo menos um ou mais miRNA(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de outros marcadores de câncer de pulmão que podem ser combinados com estes miRNAs, ou seja, hsa-miR-19b-3p, hsa- miR-1228-5p, e hsa-miR-1307-3p também podem ser preferencialmente usados como ácido nucleico alvo. Além disso, pelo menos um ou mais miRNA(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de outros marcadores de câncer de pulmão podem ser combinados com estes miRNAs, ou seja, hsa-miR-4271, hsa-miR-642b-3p, hsa-miR-6075, hsa-miR-6125, hsa-miR- 887-3p, hsa-miR-6851-5p, hsa-miR-6763-5p, hsa-miR-3928-3p, hsa-miR- 4443, hsa-miR-3648, hsa-miR-149-3p, hsa-miR-4689, hsa-miR-4763-3p, hsa- miR-6729-5p, hsa-miR-3196, hsa-miR-8069, hsa-miR-1268a, hsa-miR-4739, hsa-miR-1268b, hsa-miR-5698, hsa-miR-6752-5p, hsa-miR-4507, hsa-miR- 564, hsa-miR-4497, hsa-miR-6877-5p, hsa-miR-6087, hsa-miR-4731-5p, hsa- miR-615-5p, hsa-miR-760, hsa-miR-6891-5p, hsa-miR-6887-5p, hsa-miR- 4525, hsa-miR-1914-3p, hsa-miR-619-5p, hsa-miR-5001-5p, hsa-miR-6722- 3p, hsa-miR-3621, hsa-miR-4298, hsa-miR-675-5p e hsa-miR-4655-5p também podem ser preferencialmente utilizados como um ácido nucleico alvo.

[0257] Estes miRNAs incluem, por exemplo, um gene humano, compreendendo uma sequência nucleotídica representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 174 e 561 a 579 (ou seja, hsa-miR-6768-5p, hsa-miR- 6836-3p, hsa-miR-6782-5p, hsa-miR-3663-3p, hsa-miR-1908-3p, hsa-miR- 6726-5p, hsa-miR-4258, hsa-miR-1343-3p, hsa-miR-4516, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR-4651, hsa-miR-6825-5p, hsa-miR-6840-3p, hsa-miR-6780b-5p, hsa- miR-6749-5p, hsa-miR-8063, hsa-miR-6784-5p, hsa-miR-3679-5p, hsa-miR- 3184-5p, hsa-miR-663b, hsa-miR-6880-5p, hsa-miR-1908-5p, hsa-miR-92a-2- 5p, hsa-miR-7975, hsa-miR-7110-5p, hsa-miR-6842-5p, hsa-miR-6857-5p, hsa-miR-5572, hsa-miR-3197, hsa-miR-6131, hsa-miR-6889-5p, hsa-miR- 4454, hsa-miR-1199-5p, hsa-miR-1247-3p, hsa-miR-6800-5p, hsa-miR-6872- 3p, hsa-miR-4649-5p, hsa-miR-6791-5p, hsa-miR-4433b-3p, hsa-miR-3135b, hsa-miR-128-2-5p, hsa-miR-4675, hsa-miR-4472, hsa-miR-6785-5p, hsa-miR- 6741-5p, hsa-miR-7977, hsa-miR-3665, hsa-miR-128-1-5p, hsa-miR-4286, hsa-miR-6765-3p, hsa-miR-4632-5p, hsa-miR-365a-5p, hsa-miR-6088, hsa- miR-6816-5p, hsa-miR-6885-5p, hsa-miR-711, hsa-miR-6765-5p, hsa-miR- 3180, hsa-miR-4442, hsa-miR-4792, hsa-miR-6721-5p, hsa-miR-6798-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR-6126, hsa-miR-4758-5p, hsa-miR-2392, hsa-miR- 486-3p, hsa-miR-6727-5p, hsa-miR-4728-5p, hsa-miR-6746-5p, hsa-miR- 4270, hsa-miR-3940-5p, hsa-miR-4725-3p, hsa-miR-7108-5p, hsa-miR-3656, hsa-miR-6879-5p, hsa-miR-6738-5p, hsa-miR-1260a, hsa-miR-4446-3p, hsa- miR-3131, hsa-miR-4463, hsa-miR-3185, hsa-miR-6870-5p, hsa-miR-6779- 5p, hsa-miR-1273g-3p, hsa-miR-8059, hsa-miR-4697-5p, hsa-miR-4674, hsa- miR-4433-3p, hsa-miR-4257, hsa-miR-1915-5p, hsa-miR-4417, hsa-miR- 1343-5p, hsa-miR-6781-5p, hsa-miR-4695-5p, hsa-miR-1237-5p, hsa-miR- 6775-5p, hsa-miR-7845-5p, hsa-miR-4746-3p, hsa-miR-7641, hsa-miR-7847- 3p, hsa-miR-6806-5p, hsa-miR-4467, hsa-miR-4726-5p, hsa-miR-4648, hsa- miR-6089, hsa-miR-1260b, hsa-miR-4532, hsa-miR-5195-3p, hsa-miR-3188, hsa-miR-6848-5p, hsa-miR-1233-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-3195, hsa- miR-6757-5p, hsa-miR-8072, hsa-miR-4745-5p, hsa-miR-6511a-5p, hsa-miR- 6776-5p, hsa-miR-371a-5p, hsa-miR-1227-5p, hsa-miR-7150, hsa-miR-1915- 3p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR-1225-5p, hsa- miR-451a, hsa-miR-939-5p, hsa-miR-223-3p, hsa-miR-1228-5p, hsa-miR- 125a-3p, hsa-miR-92b-5p, hsa-miR-22-3p, hsa-miR-6073, hsa-miR-6845-5p, hsa-miR-6769b-5p, hsa-miR-4665-3p, hsa-miR-1913, hsa-miR-1228-3p, hsa- miR-940, hsa-miR-296-3p, hsa-miR-4690-5p, hsa-miR-548q, hsa-miR-663a, hsa-miR-1249, hsa-miR-1202, hsa-miR-7113-3p, hsa-miR-1225-3p, hsa-miR- 4783-3p, hsa-miR-4448 e hsa-miR-4534, hsa-miR-1307-3p, hsa-miR-4271, hsa-miR-642b-3p, hsa-miR-6075, hsa-miR-6125, hsa-miR-887-3p, hsa-miR- 6851-5p, hsa-miR-6763-5p, hsa-miR-3928-3p, hsa-miR-4443, hsa-miR-3648, hsa-miR-149-3p, hsa-miR-4689, hsa-miR-4763-3p, hsa-miR-6729-5p, hsa- miR-3196, hsa-miR-8069, hsa-miR-1268a, hsa-miR-4739, hsa-miR-1268b, hsa-miR-5698, hsa-miR-6752-5p, hsa-miR-4507, hsa-miR-564, hsa-miR-4497, hsa-miR-6877-5p, hsa-miR-6087, hsa-miR-4731-5p, hsa-miR-615-5p, hsa- miR-760, hsa-miR-6891-5p, hsa-miR-6887-5p, hsa-miR-4525, hsa-miR-1914- 3p, hsa-miR-619-5p, hsa-miR-5001-5p, hsa-miR-6722-3p, hsa-miR-3621, hsa- miR-4298, hsa-miR-675-5p e hsa-miR-4655-5p, respectivamente), um congênere dos mesmos, um transcrito dos mesmos, e/ou um variante ou derivado dos mesmos. Neste contexto, o gene, congênere, transcrito, variante, e derivado são conforme definido anteriormente.

[0258] O ácido nucleico alvo é de um modo preferido um gene humano, compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 618 ou um transcrito do mesmo, mais preferencialmente, o transcrito, ou seja, um miRNA ou seu RNA precursor (pri-miRNA ou pré-miRNA ).

[0259] O primeiro gene alvo é o gene hsa-miR-6768-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0260] O segundo gene alvo é o gene hsa-miR-6836-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0261] O terceiro gene alvo é o gene hsa-miR-6782-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0262] O quarto gene alvo é o gene hsa-miR-3663-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0263] O quinto gene alvo é o gene hsa-miR-1908-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0264] O sexto gene alvo é o gene hsa-miR-6726-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0265] O sétimo gene alvo é o gene hsa-miR-4258, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0266] O oitavo gene alvo é o gene hsa-miR-1343-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0267] O nono gene alvo é o gene hsa-miR-4516, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0268] O 10° gene alvo é o gene hsa-miR-6875-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0269] O 11° gene alvo é o gene hsa-miR-4651, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0270] O 12° gene alvo é o gene hsa-miR-6825-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0271] O 13° gene alvo é o gene hsa-miR-6840-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0272] O 14° gene alvo é o gene hsa-miR-6780b-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0273] O 15° gene alvo é o gene hsa-miR-6749-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0274] O 16° gene alvo é o gene hsa-miR-8063, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0275] O 17° gene alvo é o gene hsa-miR-6784-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0276] O 18° gene alvo é o gene hsa-miR-3679-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0277] O 19° gene alvo é o gene hsa-miR-3184-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0278] O 20° gene alvo é o gene hsa-miR-663b, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0279] O 21° gene alvo é o gene hsa-miR-6880-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0280] O 22° gene alvo é o gene hsa-miR-1908-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0281] O 23° gene alvo é o gene hsa-miR-92a-2-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0282] O 24° gene alvo é o gene hsa-miR-7975, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0283] O 25° gene alvo é o gene hsa-miR-7110-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0284] O 26° gene alvo é o gene hsa-miR-6842-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0285] O 27° gene alvo é o gene hsa-miR-6857-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0286] O 28° gene alvo é o gene hsa-miR-5572, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0287] O 29° gene alvo é o gene hsa-miR-3197, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0288] O 30° gene alvo é o gene hsa-miR-6131, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0289] O 31° gene alvo é o gene hsa-miR-6889-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0290] O 32° gene alvo é o gene hsa-miR-4454, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0291] O 33° gene alvo é o gene hsa-miR-1199-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0292] O 34° gene alvo é o gene hsa-miR-1247-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0293] O 35° gene alvo é o gene hsa-miR-6800-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0294] O 36° gene alvo é o gene hsa-miR-6872-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0295] O 37° gene alvo é o gene hsa-miR-4649-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0296] O 38° gene alvo é o gene hsa-miR-6791-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0297] O 39° gene alvo é o gene hsa-miR-4433b-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0298] O 40° gene alvo é o gene hsa-miR-3135b, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0299] O 41° gene alvo é o gene hsa-miR-128-2-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0300] O 42° gene alvo é o gene hsa-miR-4675, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0301] O 43° gene alvo é o gene hsa-miR-4472, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0302] O 44° gene alvo é o gene hsa-miR-6785-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0303] O 45° gene alvo é o gene hsa-miR-6741-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0304] O 46° gene alvo é o gene hsa-miR-7977, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0305] O 47° gene alvo é o gene hsa-miR-3665, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0306] O 48° gene alvo é o gene hsa-miR-128-1-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0307] O 49° gene alvo é o gene hsa-miR-4286, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0308] O 50° gene alvo é o gene hsa-miR-6765-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0309] O 51° gene alvo é o gene hsa-miR-4632-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0310] O 52° gene alvo é o gene hsa-miR-365a-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0311] O 53° gene alvo é o gene hsa-miR-6088, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0312] O 54° gene alvo é o gene hsa-miR-6816-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0313] O 55° gene alvo é o gene hsa-miR-6885-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0314] O 56° gene alvo é o gene hsa-miR-711, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0315] O 57° gene alvo é o gene hsa-miR-6765-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0316] O 58° gene alvo é o gene hsa-miR-3180, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0317] O 59° gene alvo é o gene hsa-miR-4442, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0318] O 60° gene alvo é o gene hsa-miR-4792, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0319] O 61° gene alvo é o gene hsa-miR-6721-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0320] O 62° gene alvo é o gene hsa-miR-6798-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0321] O 63° gene alvo é o gene hsa-miR-3162-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0322] O 64° gene alvo é o gene hsa-miR-6126, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0323] O 65° gene alvo é o gene hsa-miR-4758-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0324] O 66° gene alvo é o gene hsa-miR-2392, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0325] O 67° gene alvo é o gene hsa-miR-486-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0326] O 68° gene alvo é o gene hsa-miR-6727-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0327] O 69° gene alvo é o gene hsa-miR-4728-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0328] O 70° gene alvo é o gene hsa-miR-6746-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0329] O 71° gene alvo é o gene hsa-miR-4270, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0330] O 72° gene alvo é o gene hsa-miR-3940-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0331] O 73° gene alvo é o gene hsa-miR-4725-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0332] O 74° gene alvo é o gene hsa-miR-7108-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0333] O 75° gene alvo é o gene hsa-miR-3656, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0334] O 76° gene alvo é o gene hsa-miR-6879-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0335] O 77° gene alvo é o gene hsa-miR-6738-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0336] O 78° gene alvo é o gene hsa-miR-1260a, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0337] O 79° gene alvo é o gene hsa-miR-4446-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0338] O 80° gene alvo é o gene hsa-miR-3131, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0339] O 81° gene alvo é o gene hsa-miR-4463, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0340] O 82° gene alvo é o gene hsa-miR-3185, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0341] O 83° gene alvo é o gene hsa-miR-6870-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0342] O 84° gene alvo é o gene hsa-miR-6779-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0343] O 85° gene alvo é o gene hsa-miR-1273g-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0344] O 86° gene alvo é o gene hsa-miR-8059, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0345] O 87° gene alvo é o gene hsa-miR-4697-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0346] O 88° gene alvo é o gene hsa-miR-4674, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0347] O 89° gene alvo é o gene hsa-miR-4433-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0348] O 90° gene alvo é o gene hsa-miR-4257, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0349] O 91° gene alvo é o gene hsa-miR-1915-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0350] O 92° gene alvo é o gene hsa-miR-4417, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0351] O 93° gene alvo é o gene hsa-miR-1343-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0352] O 94° gene alvo é o gene hsa-miR-6781-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0353] O 95° gene alvo é o gene hsa-miR-4695-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0354] O 96° gene alvo é o gene hsa-miR-1237-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0355] O 97° gene alvo é o gene hsa-miR-6775-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0356] O 98° gene alvo é o gene hsa-miR-7845-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0357] O 99° gene alvo é o gene hsa-miR-4746-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0358] O 100° gene alvo é o gene hsa-miR-7641, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0359] O 101° gene alvo é o gene hsa-miR-7847-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0360] O 102° gene alvo é o gene hsa-miR-6806-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0361] O 103° gene alvo é o gene hsa-miR-4467, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0362] O 104° gene alvo é o gene hsa-miR-4726-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0363] O 105° gene alvo é o gene hsa-miR-4648, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0364] O 106° gene alvo é o gene hsa-miR-6089, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0365] O 107° gene alvo é o gene hsa-miR-1260b, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0366] O 108° gene alvo é o gene hsa-miR-4532, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0367] O 109° gene alvo é o gene hsa-miR-5195-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0368] O 110° gene alvo é o gene hsa-miR-3188, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0369] O 111° gene alvo é o gene hsa-miR-6848-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0370] O 112° gene alvo é o gene hsa-miR-1233-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0371] O 113° gene alvo é o gene hsa-miR-6717-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0372] O 114° gene alvo é o gene hsa-miR-3195, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0373] O 115° gene alvo é o gene hsa-miR-6757-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0374] O 116° gene alvo é o gene hsa-miR-8072, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0375] O 117° gene alvo é o gene hsa-miR-4745-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0376] O 118° gene alvo é o gene hsa-miR-6511a-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0377] O 119° gene alvo é o gene hsa-miR-6776-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0378] O 120° gene alvo é o gene hsa-miR-371a-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0379] O 121° gene alvo é o gene hsa-miR-1227-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0380] O 122° gene alvo é o gene hsa-miR-7150, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0381] O 123° gene alvo é o gene hsa-miR-1915-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0382] O 124° gene alvo é o gene hsa-miR-187-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0383] O 125° gene alvo é o gene hsa-miR-614, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0384] O 126° gene alvo é o gene hsa-miR-19b-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. O relatório conhecido anteriormente mostra que alterações na expressão do gene ou de seu transcrito podem servir como um marcador para o câncer de pulmão (Literatura Patentária 1).

[0385] O 127° gene alvo é o gene hsa-miR-1225-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0386] O 128° gene alvo é o gene hsa-miR-451a, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0387] O 129° gene alvo é o gene hsa-miR-939-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0388] O 130° gene alvo é o gene hsa-miR-223-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0389] O 131° gene alvo é o gene hsa-miR-1228-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. O relatório conhecido anteriormente mostra que alterações na expressão do gene ou de seu transcrito podem servir como um marcador para o câncer de pulmão (Literatura Patentária 2).

[0390] O 132° gene alvo é o gene hsa-miR-125a-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0391] O 133° gene alvo é o gene hsa-miR-92b-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0392] O 134° gene alvo é o gene hsa-miR-22-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0393] O 135° gene alvo é o gene hsa-miR-4271, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0394] O 136° gene alvo é o gene hsa-miR-642b-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0395] O 137° gene alvo é o gene hsa-miR-6075, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0396] O 138° gene alvo é o gene hsa-miR-6125, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0397] O 139° gene alvo é o gene hsa-miR-887-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0398] O 140° gene alvo é o gene hsa-miR-6851-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0399] O 141° gene alvo é o gene hsa-miR-6763-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0400] O 142° gene alvo é o gene hsa-miR-3928-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0401] O 143° gene alvo é o gene hsa-miR-4443, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0402] O 144° gene alvo é o gene hsa-miR-3648, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0403] O 145° gene alvo é o gene hsa-miR-149-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0404] O 146° gene alvo é o gene hsa-miR-4689, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0405] O 147° gene alvo é o gene hsa-miR-4763-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0406] O 148° gene alvo é o gene hsa-miR-6729-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0407] O 149° gene alvo é o gene hsa-miR-3196, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0408] O 150° gene alvo é o gene hsa-miR-8069, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0409] O 151° gene alvo é o gene hsa-miR-1268a, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão (Literatura Patentária 2).

[0410] O 152° gene alvo é o gene hsa-miR-4739, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0411] O 153° gene alvo é o gene hsa-miR-1268b, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0412] O 154° gene alvo é o gene hsa-miR-5698, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0413] O 155° gene alvo é o gene hsa-miR-6752-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0414] O 156° gene alvo é o gene hsa-miR-4507, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0415] O 157° gene alvo é o gene hsa-miR-564, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0416] O 158° gene alvo é o gene hsa-miR-4497, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0417] O 159° gene alvo é o gene hsa-miR-6877-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0418] O 160° gene alvo é o gene hsa-miR-6087, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0419] O 161° gene alvo é o gene hsa-miR-4731-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0420] O 162° gene alvo é o gene hsa-miR-615-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0421] O 163° gene alvo é o gene hsa-miR-760, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0422] O 164° gene alvo é o gene hsa-miR-6891-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0423] O 165° gene alvo é o gene hsa-miR-6887-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0424] O 166° gene alvo é o gene hsa-miR-4525, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0425] O 167° gene alvo é o gene hsa-miR-1914-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0426] O 168° gene alvo é o gene hsa-miR-619-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0427] O 169° gene alvo é o gene hsa-miR-5001-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0428] O 170° gene alvo é o gene hsa-miR-6722-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0429] O 171° gene alvo é o gene hsa-miR-3621, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0430] O 172° gene alvo é o gene hsa-miR-4298, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0431] O 173° gene alvo é o gene hsa-miR-675-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0432] O 174° gene alvo é o gene hsa-miR-4655-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0433] O 175° gene alvo é o gene hsa-miR-6073, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0434] O 176° gene alvo é o gene hsa-miR-6845-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0435] O 177° gene alvo é o gene hsa-miR-6769b-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0436] O 178° gene alvo é o gene hsa-miR-4665-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0437] O 179° gene alvo é o gene hsa-miR-1913, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0438] O 180° gene alvo é o gene hsa-miR-1228-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0439] O 181° gene alvo é o gene hsa-miR-940, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0440] O 182° gene alvo é o gene hsa-miR-296-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0441] O 183° gene alvo é o gene hsa-miR-4690-5p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0442] O 184° gene alvo é o gene hsa-miR-548q, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0443] O 185° gene alvo é o gene hsa-miR-663a, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0444] O 186° gene alvo é o gene hsa-miR-1249, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0445] O 187° gene alvo é o gene hsa-miR-1202, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0446] O 188° gene alvo é o gene hsa-miR-7113-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0447] O 189° gene alvo é o gene hsa-miR-1225-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0448] O 190° gene alvo é o gene hsa-miR-4783-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0449] O 191° gene alvo é o gene hsa-miR-4448, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0450] O 192° gene alvo é o gene hsa-miR-4534, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. Nenhum dos relatórios anteriormente conhecidos mostra que alterações na expressão do gene ou transcrito desse gene podem servir como um marcador para o câncer de pulmão.

[0451] O 193° gene alvo é o gene hsa-miR-1307-3p, um congênere do mesmo, um transcrito do mesmo, ou um variante ou derivado do mesmo. O relatório conhecido anteriormente mostra que alterações na expressão do gene ou de seu transcrito podem servir como um marcador para o câncer de pulmão (Literatura Patentária 3).

2. SONDA DE ÁCIDO NUCLEICO OU PRIMER PARA A DETECÇÃO DO CÂNCER DE PULMÃO

[0452] Na presente invenção, um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a qualquer um dos ácidos nucleicos alvo como os marcadores de câncer de pulmão descritos acima pode ser usado como um ácido nucleico, por exemplo, uma sonda de ácido nucleico ou um primer, para a detecção ou diagnóstico do câncer de pulmão.

[0453] Na presente invenção, a sonda de ácido nucleico ou o primer que pode ser usado para a detecção do câncer de pulmão ou para o diagnóstico do câncer de pulmão permite a medição qualitativa e/ou quantitativa da presença, o nível de expressão, ou abundância de qualquer um dos ácidos nucleicos alvo, como os marcadores do câncer de pulmão descritos acima, por exemplo, os genes hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-6782-5p, hsa-miR-3663-3p, hsa-miR-1908-3p, hsa-miR-6726-5p, hsa-miR-4258, hsa-miR-1343-3p, hsa-miR-4516, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 4651, hsa-miR-6825-5p, hsa-miR-6840-3p, hsa-miR-6780b-5p, hsa-miR-6749- 5p, hsa-miR-8063, hsa-miR-6784-5p, hsa-miR-3679-5p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR-663b, hsa-miR-6880-5p, hsa-miR-1908-5p, hsa-miR-92a-2-5p, hsa- miR-7975, hsa-miR-7110-5p, hsa-miR-6842-5p, hsa-miR-6857-5p, hsa-miR- 5572, hsa-miR-3197, hsa-miR-6131, hsa-miR-6889-5p, hsa-miR-4454, hsa- miR-1199-5p, hsa-miR-1247-3p, hsa-miR-6800-5p, hsa-miR-6872-3p, hsa- miR-4649-5p, hsa-miR-6791-5p, hsa-miR-4433b-3p, hsa-miR-3135b, hsa- miR-128-2-5p, hsa-miR-4675, hsa-miR-4472, hsa-miR-6785-5p, hsa-miR- 6741-5p, hsa-miR-7977, hsa-miR-3665, hsa-miR-128-1-5p, hsa-miR-4286, hsa-miR-6765-3p, hsa-miR-4632-5p, hsa-miR-365a-5p, hsa-miR-6088, hsa- miR-6816-5p, hsa-miR-6885-5p, hsa-miR-711, hsa-miR-6765-5p, hsa-miR- 3180, hsa-miR-4442, hsa-miR-4792, hsa-miR-6721-5p, hsa-miR-6798-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR-6126, hsa-miR-4758-5p, hsa-miR-2392, hsa-miR- 486-3p, hsa-miR-6727-5p, hsa-miR-4728-5p, hsa-miR-6746-5p, hsa-miR- 4270, hsa-miR-3940-5p, hsa-miR-4725-3p, hsa-miR-7108-5p, hsa-miR-3656, hsa-miR-6879-5p, hsa-miR-6738-5p, hsa-miR-1260a, hsa-miR-4446-3p, hsa- miR-3131, hsa-miR-4463, hsa-miR-3185, hsa-miR-6870-5p, hsa-miR-6779- 5p, hsa-miR-1273g-3p, hsa-miR-8059, hsa-miR-4697-5p, hsa-miR-4674, hsa- miR-4433-3p, hsa-miR-4257, hsa-miR-1915-5p, hsa-miR-4417, hsa-miR- 1343-5p, hsa-miR-6781-5p, hsa-miR-4695-5p, hsa-miR-1237-5p, hsa-miR- 6775-5p, hsa-miR-7845-5p, hsa-miR-4746-3p, hsa-miR-7641, hsa-miR-7847- 3p, hsa-miR-6806-5p, hsa-miR-4467, hsa-miR-4726-5p, hsa-miR-4648, hsa- miR-6089, hsa-miR-1260b, hsa-miR-4532, hsa-miR-5195-3p, hsa-miR-3188, hsa-miR-6848-5p, hsa-miR-1233-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-3195, hsa- miR-6757-5p, hsa-miR-8072, hsa-miR-4745-5p, hsa-miR-6511a-5p, hsa-miR- 6776-5p, hsa-miR-371a-5p, hsa-miR-1227-5p, hsa-miR-7150, hsa-miR-1915- 3p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-1225-5p, hsa-miR-451a, hsa- miR-939-5p, hsa-miR-223-3p, hsa-miR-125a-3p, hsa-miR-92b-5p, hsa-miR- 22-3p, hsa-miR-6073, hsa-miR-6845-5p, hsa-miR-6769b-5p, hsa-miR-4665- 3p, hsa-miR-1913, hsa-miR-1228-3p, hsa-miR-940, hsa-miR-296-3p, hsa- miR-4690-5p, hsa-miR-548q, hsa-miR-663a, hsa-miR-1249, hsa-miR-1202, hsa-miR-7113-3p, hsa-miR-1225-3p, hsa-miR-4783-3p, hsa-miR-4448, e hsa- miR-4534 derivados de humanos; ou uma combinação dos mesmos, congêneres dos mesmos, transcritos dos mesmos, ou variantes ou derivados dos mesmos; e, opcionalmente em combinação com estes, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR-1228-5p e hsa-miR-1307-3p ou uma combinação dos mesmos, congêneres dos mesmos, transcritos dos mesmos, ou variantes ou derivados dos mesmos; e, opcionalmente em combinação com estes hsa-miR-4271, hsa-miR-642b-3p, hsa-miR-6075, hsa-miR-6125, hsa-miR-887-3p, hsa-miR- 6851-5p, hsa-miR-6763-5p, hsa-miR-3928-3p, hsa-miR-4443, hsa-miR-3648, hsa-miR-149-3p, hsa-miR-4689, hsa-miR-4763-3p, hsa-miR-6729-5p, hsa- miR-3196, hsa-miR-8069, hsa-miR-1268a, hsa-miR-4739, hsa-miR-1268b, hsa-miR-5698, hsa-miR-6752-5p, hsa-miR-4507, hsa-miR-564, hsa-miR-4497, hsa-miR-6877-5p, hsa-miR-6087, hsa-miR-4731-5p, hsa-miR-615-5p, hsa- miR-760, hsa-miR-6891-5p, hsa-miR-6887-5p, hsa-miR-4525, hsa-miR-1914- 3p, hsa-miR-619-5p, hsa-miR-5001-5p, hsa-miR-6722-3p, hsa-miR-3621, hsa- miR-4298, hsa-miR-675-5p e hsa-miR-4655-5p ou uma combinação dos mesmos, congêneres dos mesmos, transcritos dos mesmos, ou variantes ou derivados dos mesmos.

[0454] O nível de expressão do ácido nucleico alvo descrito acima está aumentado ou diminuído (daqui em diante referido como “aumentado/diminuído”), de acordo com o tipo de ácido nucleico alvo em um sujeito que tem câncer de pulmão quando comparado com um sujeito saudável. Assim, o ácido nucleico da presente invenção pode ser eficazmente utilizado para medir o nível de expressão do ácido nucleico alvo em um fluido corporal derivado de um sujeito (por exemplo, um humano) que é suspeito de ter câncer de pulmão e um fluido corporal derivado de um sujeito saudável e detectando o câncer de pulmão pela da comparação dos mesmos.

[0455] A sonda de ácido nucleico ou o primer que pode ser utilizado na presente invenção é uma sonda de ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por, pelo menos, uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou um primer para a amplificação de um polinucleotídeo que consiste em uma sequência de nucleotídeos representada por, pelo menos, uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578.

[0456] A sonda de ácido nucleico ou o primer que pode ser adicionalmente utilizado na presente invenção pode compreender adicionalmente uma sonda de ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por, pelo menos, uma das SEQ ID NOs: 126, 131, e 579, ou um primer para a amplificação de um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por, pelo menos, uma das SEQ ID NOs: 126, 131, e 579.

[0457] A sonda de ácido nucleico ou o primer que pode ser adicionalmente utilizado na presente invenção pode compreender adicionalmente uma sonda de ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por, pelo menos, uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou um primer para a amplificação de um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por, pelo menos, uma das SEQ ID NOs: 135 a 174.

[0458] Especificamente, estas sondas de ácidos nucleicos ou primers compreendem uma combinação de um ou mais polinucleotídeos selecionados dentre um grupo de polinucleotídeos compreendendo as sequências nucleotídicas representadas por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 618 ou sequências nucleotídicas derivadas dessas sequências nucleotídicas pela substituição de U por T, e um grupo de polinucleotídeos complementares, um grupo de polinucleotídeos que hibridizam sob condições estringentes (mencionado mais adiante) aos DNAs que consistem das sequências nucleotídicas complementares a estas sequências, e um grupo de polinucleotídeos complementares às mesmas, e um grupo polinucleotídeo compreendendo 15 ou mais, de preferência 17 ou mais nucleotídeos consecutivos das sequências nucleotídicas destes grupos de polinucleotídeos. Estes polinucleotídeos podem ser utilizados como sondas de ácidos nucleicos e primers para a detecção dos marcadores de câncer de pulmão como ácidos nucleicos-alvo.

[0459] Mais especificamente, exemplos de sonda de ácidos nucleicos ou primer que podem ser utilizados na presente invenção incluem um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo que consiste dos polinucleotídeo(s) (a) a (e): (a) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (b) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578; (c) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (d) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (e) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (a) a (d).

[0460] Além do pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir dos polinucleotídeos de (a) a (e), a sonda de ácidos nucleicos ou primer que podem ser utilizados na presente invenção podem compreender os polinucleotídeos selecionados a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (f) a (j): (f) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (g) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOS: 126, 131 e 579; (h) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (i) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (j) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (f) a (i).

[0461] Além do pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir dos polinucleotídeos de (a) a (j), a sonda de ácidos nucleicos ou primer que podem ser utilizados na presente invenção podem compreender os polinucleotídeos selecionados a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (k) a (o): (k) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, um variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (l) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOS: 135 a 174; (m) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (n) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (o) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (k) a (n).

[0462] Para estes polinucleotídeos o “fragmento deste compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos” pode conter o número de nucleotídeos no intervalo de, por exemplo, a partir de 15 nucleotídeos consecutivos até menos do que o número total de nucleotídeos da sequência, a partir de 17 nucleotídeos consecutivos até menos do que o número total de nucleotídeos da sequência, a partir de 19 nucleotídeos consecutivos até menos do que o número total de nucleotídeos da sequência, na sequência nucleotídica de cada polinucleotídeo, embora o fragmento não seja limitado aos mesmos.

[0463] Estes polinucleotídeos ou os seus fragmentos utilizados na presente invenção podem ser DNA ou RNA.

[0464] Cada um dos polinucleotídeos que pode ser utilizado na presente invenção pode ser preparado pelo uso de uma técnica geral, tal como uma técnica de recombinação de DNA, um método de PCR, ou um método que utiliza um sintetizador de DNA/RNA automático.

[0465] A técnica de recombinação de DNA e o método de PCR podem empregar uma técnica descrita, por exemplo, em Ausubel et al, Current Protocols in Molecular Biology, John Willey & Sons, EUA (1993); e Sambrook et al, Molecular Cloning - A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, EUA (1989).

[0466] Os genes hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6836-3p, hsa-miR- 6782-5p, hsa-miR-3663-3p, hsa-miR-1908-3p, hsa-miR-6726-5p, hsa-miR- 4258, hsa-miR-1343-3p, hsa-miR-4516, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR-4651, hsa-miR-6825-5p, hsa-miR-6840-3p, hsa-miR-6780b-5p, hsa-miR-6749-5p, hsa-miR-8063, hsa-miR-6784-5p, hsa-miR-3679-5p, hsa-miR-3184-5p, hsa- miR-663b, hsa-miR-6880-5p, hsa-miR-1908-5p, hsa-miR-92a-2-5p, hsa-miR- 7975, hsa-miR-7110-5p, hsa-miR-6842-5p, hsa-miR-6857-5p, hsa-miR-5572, hsa-miR-3197, hsa-miR-6131, hsa-miR-6889-5p, hsa-miR-4454, hsa-miR- 1199-5p, hsa-miR-1247-3p, hsa-miR-6800-5p, hsa-miR-6872-3p, hsa-miR- 4649-5p, hsa-miR-6791-5p, hsa-miR-4433b-3p, hsa-miR-3135b, hsa-miR-128- 2-5p, hsa-miR-4675, hsa-miR-4472, hsa-miR-6785-5p, hsa-miR-6741-5p, hsa- miR-7977, hsa-miR-3665, hsa-miR-128-1-5p, hsa-miR-4286, hsa-miR-6765- 3p, hsa-miR-4632-5p, hsa-miR-365a-5p, hsa-miR-6088, hsa-miR-6816-5p, hsa-miR-6885-5p, hsa-miR-711, hsa-miR-6765-5p, hsa-miR-3180, hsa-miR- 4442, hsa-miR-4792, hsa-miR-6721-5p, hsa-miR-6798-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR-6126, hsa-miR-4758-5p, hsa-miR-2392, hsa-miR-486-3p, hsa-miR- 6727-5p, hsa-miR-4728-5p, hsa-miR-6746-5p, hsa-miR-4270, hsa-miR-3940- 5p, hsa-miR-4725-3p, hsa-miR-7108-5p, hsa-miR-3656, hsa-miR-6879-5p, hsa-miR-6738-5p, hsa-miR-1260a, hsa-miR-4446-3p, hsa-miR-3131, hsa- miR-4463, hsa-miR-3185, hsa-miR-6870-5p, hsa-miR-6779-5p, hsa-miR- 1273g-3p, hsa-miR-8059, hsa-miR-4697-5p, hsa-miR-4674, hsa-miR-4433-3p, hsa-miR-4257, hsa-miR-1915-5p, hsa-miR-4417, hsa-miR-1343-5p, hsa-miR- 6781-5p, hsa-miR-4695-5p, hsa-miR-1237-5p, hsa-miR-6775-5p, hsa-miR- 7845-5p, hsa-miR-4746-3p, hsa-miR-7641, hsa-miR-7847-3p, hsa-miR-6806- 5p, hsa-miR-4467, hsa-miR-4726-5p, hsa-miR-4648, hsa-miR-6089, hsa-miR- 1260b, hsa-miR-4532, hsa-miR-5195-3p, hsa-miR-3188, hsa-miR-6848-5p, hsa-miR-1233-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-3195, hsa-miR-6757-5p, hsa- miR-8072, hsa-miR-4745-5p, hsa-miR-6511a-5p, hsa-miR-6776-5p, hsa-miR- 371a-5p, hsa-miR-1227-5p, hsa-miR-7150, hsa-miR-1915-3p, hsa-miR-187- 5p, hsa-miR-614, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR-1225-5p, hsa-miR-451a, hsa- miR-939-5p, hsa-miR-223-3p, hsa-miR-1228-5p, hsa-miR-125a-3p, hsa-miR- 92b-5p, hsa-miR-22-3p, hsa-miR-6073, hsa-miR-6845-5p, hsa-miR-6769b-5p, hsa-miR-4665-3p, hsa-miR-1913, hsa-miR-1228-3p, hsa-miR-940, hsa-miR- 296-3p, hsa-miR-4690-5p, hsa-miR-548q, hsa-miR-663a, hsa-miR-1249, hsa- miR-1202, hsa-miR-7113-3p, hsa-miR-1225-3p, hsa-miR-4783-3p, hsa-miR- 4448 e hsa-miR-4534, hsa-miR-1307-3p, hsa-miR-4271, hsa-miR-642b-3p, hsa-miR-6075, hsa-miR-6125, hsa-miR-887-3p, hsa-miR-6851-5p, hsa-miR- 6763-5p, hsa-miR-3928-3p, hsa-miR-4443, hsa-miR-3648, hsa-miR-149-3p, hsa-miR-4689, hsa-miR-4763-3p, hsa-miR-6729-5p, hsa-miR-3196, hsa-miR- 8069, hsa-miR-1268a, hsa-miR-4739, hsa-miR-1268b, hsa-miR-5698, hsa- miR-6752-5p, hsa-miR-4507, hsa-miR-564, hsa-miR-4497, hsa-miR-6877-5p, hsa-miR-6087, hsa-miR-4731-5p, hsa-miR-615-5p, hsa-miR-760, hsa-miR- 6891-5p, hsa-miR-6887-5p, hsa-miR-4525, hsa-miR-1914-3p, hsa-miR-619- 5p, hsa-miR-5001-5p, hsa-miR-6722-3p, hsa-miR-3621, hsa-miR-4298, hsa- miR-675-5p e hsa-miR-4655-5p derivados de humano, representados pelas SEQ ID NOs: 1 a 174 e 561 a 579 são conhecidos no estado da técnica, e seus métodos de aquisição também são conhecidos conforme mencionado acima. Portanto, cada polinucleotídeo que pode ser utilizado como sonda de ácido nucleico ou primer na presente invenção pode ser preparado pela clonagem do gene.

[0467] Tais sondas de ácidos nucleicos ou primers podem ser sintetizados quimicamente utilizando um aparato de síntese de DNA automático. Em geral, nesta síntese é utilizado um método de fosforamidita, e um DNA de fita simples de até cerca de 100 nucleotídeos pode ser sintetizado automaticamente por este método. O aparato de síntese de DNA automático está comercialmente disponível a partir, por exemplo, Polygen GmbH, ABI, ou Applied Biosystems, Inc.

[0468] Alternativamente, o polinucleotídeo da presente invenção também pode ser preparado por métodos de clonagem de cDNA. A técnica de clonagem de cDNA pode empregar, por exemplo, o Kit de Clonagem de microRNA da Wako.

[0469] Neste contexto, as sequências da sonda de ácido nucleico e do primer para a detecção do polinucleotídeo consistindo de uma sequência nucleotídica representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 174 e 561 a 579 não existem como miRNAs ou seus precursores in vivo. Por exemplo, as sequências nucleotídicas representadas pela SEQ ID NO: 5 e SEQ ID NO: 22 são produzidas a partir do precursor representado pela SEQ ID NO: 179. Este precursor tem uma estrutura similar a um grampo (hairpinlike) tal como é ilustrado na Figura 1, e as sequências nucleotídicas representadas pela SEQ ID NO: 5 e SEQ ID NO: 22 têm sequências com pareamento incorreto (mismatch) entre si. Da mesma forma, uma sequência nucleotídica totalmente complementar com a sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 5 ou SEQ ID NO: 22 não é produzida naturalmente in vivo. Portanto, a sonda de ácido nucleico e o primer para a detecção da sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 174, e 561 a 579 tem uma sequência de nucleotídeo artificial que não existe in vivo.

3. KIT OU DISPOSITIVO PARA A DETECÇÃO DO CÂNCER DE PULMÃO

[0470] A presente invenção também proporciona um kit ou um dispositivo para a detecção do câncer de pulmão, que compreende um ou mais de polinucleotídeo(s) (que pode incluir uma variante, um fragmento, e um derivado, a seguir, também referido como polinucleotídeo para a detecção) que pode ser utilizado como sonda de ácido nucleico ou primer na presente invenção para a medição de um ácido nucleico alvo como um marcador do de pulmão.

[0471] O ácido nucleico alvo como um marcador de câncer de pulmão de acordo com a presente invenção é preferencialmente selecionado a partir do grupo 1: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-6782-5p, hsa-miR-3663-3p, hsa-miR-1908-3p, hsa-miR-6726-5p, hsa-miR-4258, hsa- miR-1343-3p, hsa-miR-4516, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR-4651, hsa-miR- 6825-5p, hsa-miR-6840-3p, hsa-miR-6780b-5p, hsa-miR-6749-5p, hsa-miR- 8063, hsa-miR-6784-5p, hsa-miR-3679-5p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR-663b, hsa-miR-6880-5p, hsa-miR-1908-5p, hsa-miR-92a-2-5p, hsa-miR-7975, hsa- miR-7110-5p, hsa-miR-6842-5p, hsa-miR-6857-5p, hsa-miR-5572, hsa-miR- 3197, hsa-miR-6131, hsa-miR-6889-5p, hsa-miR-4454, hsa-miR-1199-5p, hsa-miR-1247-3p, hsa-miR-6800-5p, hsa-miR-6872-3p, hsa-miR-4649-5p, hsa-miR-6791-5p, hsa-miR-4433b-3p, hsa-miR-3135b, hsa-miR-128-2-5p, hsa-miR-4675, hsa-miR-4472, hsa-miR-6785-5p, hsa-miR-6741-5p, hsa-miR- 7977, hsa-miR-3665, hsa-miR-128-1-5p, hsa-miR-4286, hsa-miR-6765-3p, hsa-miR-4632-5p, hsa-miR-365a-5p, hsa-miR-6088, hsa-miR-6816-5p, hsa- miR-6885-5p, hsa-miR-711, hsa-miR-6765-5p, hsa-miR-3180, hsa-miR-4442, hsa-miR-4792, hsa-miR-6721-5p, hsa-miR-6798-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa- miR-6126, hsa-miR-4758-5p, hsa-miR-2392, hsa-miR-486-3p, hsa-miR-6727- 5p, hsa-miR-4728-5p, hsa-miR-6746-5p, hsa-miR-4270, hsa-miR-3940-5p, hsa-miR-4725-3p, hsa-miR-7108-5p, hsa-miR-3656, hsa-miR-6879-5p, hsa- miR-6738-5p, hsa-miR-1260a, hsa-miR-4446-3p, hsa-miR-3131, hsa-miR- 4463, hsa-miR-3185, hsa-miR-6870-5p, hsa-miR-6779-5p, hsa-miR-1273g-3p, hsa-miR-8059, hsa-miR-4697-5p, hsa-miR-4674, hsa-miR-4433-3p, hsa-miR- 4257, hsa-miR-1915-5p, hsa-miR-4417, hsa-miR-1343-5p, hsa-miR-6781-5p, hsa-miR-4695-5p, hsa-miR-1237-5p, hsa-miR-6775-5p, hsa-miR-7845-5p, hsa-miR-4746-3p, hsa-miR-7641, hsa-miR-7847-3p, hsa-miR-6806-5p, hsa- miR-4467, hsa-miR-4726-5p, hsa-miR-4648, hsa-miR-6089, hsa-miR-1260b, hsa-miR-4532, hsa-miR-5195-3p, hsa-miR-3188, hsa-miR-6848-5p, hsa-miR- 1233-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-3195, hsa-miR-6757-5p, hsa-miR-8072, hsa-miR-4745-5p, hsa-miR-6511a-5p, hsa-miR-6776-5p, hsa-miR-371a-5p, hsa-miR-1227-5p, hsa-miR-7150, hsa-miR-1915-3p, hsa-miR-187-5p, hsa- miR-614, hsa-miR-1225-5p, hsa-miR-451a, hsa-miR-939-5p, hsa-miR-223-3p, hsa-miR-125a-3p, hsa-miR-92b-5p, hsa-miR-22-3p, hsa-miR-6073, hsa-miR- 6845-5p, hsa-miR-6769b-5p, hsa-miR-4665-3p, hsa-miR-1913, hsa-miR-1228- 3p, hsa-miR-940, hsa-miR-296-3p, hsa-miR-4690-5p, hsa-miR-548q, hsa- miR-663a, hsa-miR-1249, hsa-miR-1202, hsa-miR-7113-3p, hsa-miR-1225- 3p, hsa-miR-4783-3p, hsa-miR-4448 e hsa-miR-4534.

[0472] Um ácido nucleico alvo adicional que pode ser opcionalmente utilizado na medição é selecionado a partir do grupo 2: hsa- miR-19b-3p, hsa-miR-1228-5p e hsa-miR-1307-3p.

[0473] Um ácido nucleico alvo adicional que pode ser opcionalmente utilizado na medição é selecionado a partir do grupo 3: hsa- miR-4271, hsa-miR-642b-3p, hsa-miR-6075, hsa-miR-6125, hsa-miR-887-3p, hsa-miR-6851-5p, hsa-miR-6763-5p, hsa-miR-3928-3p, hsa-miR-4443, hsa- miR-3648, hsa-miR-149-3p, hsa-miR-4689, hsa-miR-4763-3p, hsa-miR-6729- 5p, hsa-miR-3196, hsa-miR-8069, hsa-miR-1268a, hsa-miR-4739, hsa-miR- 1268b, hsa-miR-5698, hsa-miR-6752-5p, hsa-miR-4507, hsa-miR-564, hsa- miR-4497, hsa-miR-6877-5p, hsa-miR-6087, hsa-miR-4731-5p, hsa-miR-615- 5p, hsa-miR-760, hsa-miR-6891-5p, hsa-miR-6887-5p, hsa-miR-4525, hsa- miR-1914-3p, hsa-miR-619-5p, hsa-miR-5001-5p, hsa-miR-6722-3p, hsa-miR- 3621, hsa-miR-4298, hsa-miR-675-5p e hsa-miR-4655-5p.

[0474] O kit ou o dispositivo da presente invenção compreende um ácido nucleico capaz de ligar especificamente a qualquer ácido nucleico alvo, tal como os marcadores de câncer de pulmão descritos acima, de um modo preferido um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) dentre as sondas de ácido nucleico ou primers descritos na Seção 2 precedente, especificamente, os polinucleotídeos descritos na Seção 2 precedente ou variante(s) do(s) mesmo(s).

[0475] Especificamente, o kit ou o dispositivo da presente invenção pode compreender pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) compreendendo (ou consistindo de) uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578 ou uma sequência de nucleotídeos derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, polinucleotídeo(s) compreendendo (ou consistindo de) uma sua sequência complementar, polinucleotídeo(s) que hibridiza(m) sob condições estringentes com qualquer um destes polinucleotídeos, ou variante(s) ou fragmento(s) compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos de qualquer uma destas sequências de polinucleotídeos.

[0476] O kit ou o dispositivo da presente invenção pode compreender adicionalmente pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) compreendendo (ou consistindo de) uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126 a 131 ou uma sequência de nucleotídeos derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, polinucleotídeo(s) compreendendo (ou consistindo de) uma sequência complementar das mesmas, polinucleotídeo(s) que hibridiza(m) sob condições estringentes com qualquer um destes polinucleotídeos, ou variante(s) ou fragmento(s) compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos de qualquer uma destas sequências de polinucleotídeos.

[0477] O kit ou o dispositivo da presente invenção pode compreender adicionalmente pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) compreendendo (ou consistindo de) uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174 ou uma sequência de nucleotídeos derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, polinucleotídeo(s) compreendendo (ou consistindo de) uma sequência complementar das mesmas, polinucleotídeo(s) que hibridiza(m) sob condições estringentes com qualquer um destes polinucleotídeos, ou variante(s) ou fragmento(s) compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos de qualquer uma destas sequências de polinucleotídeos.

[0478] O fragmento que pode estar compreendido no kit ou dispositivo da presente invenção é, por exemplo, um ou mais, de preferência dois ou mais, polinucleotídeos selecionados a partir do grupo que consiste dos seguintes polinucleotídeos de (1) a ( 3): (1) um polinucleotídeo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos em uma sequência nucleotídica derivada de uma sequência nucleotídica representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578 pela substituição de U por T, ou uma sequência complementar às mesmas; (2) um polinucleotídeo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos em uma sequência nucleotídica derivada de uma sequência nucleotídica representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579 pela substituição de U por T, ou uma sequência complementar às mesmas; e (3) um polinucleotídeo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos em uma sequência nucleotídica derivada de uma sequência nucleotídica representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174 pela substituição de U por T, ou uma sequência complementar às mesmas.

[0479] Em um exemplo de realização preferido, o polinucleotídeo é um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134 e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, um polinucleotídeo que consiste de uma sequência complementar às mesmas, um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um destes polinucleotídeos, ou variante dessas sequências compreendendo 15 ou mais, de preferência 17 ou mais, mais preferencialmente 19 ou mais nucleotídeos consecutivos.

[0480] Em um exemplo de realização preferido, o polinucleotídeo é um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 134 e 579 , ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, um polinucleotídeo que consiste de uma sequência complementar às mesmas, um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um destes polinucleotídeos, ou variante dessas sequências compreendendo 15 ou mais, de preferência 17 ou mais, mais preferencialmente 19 ou mais nucleotídeos consecutivos.

[0481] Em um exemplo de realização preferido, o polinucleotídeo é um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, um polinucleotídeo que consiste de uma sequência complementar às mesmas, um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um destes polinucleotídeos, ou variante dessas sequências compreendendo 15 ou mais, de preferência 17 ou mais, mais preferencialmente 19 ou mais nucleotídeos consecutivos.

[0482] Em um exemplo de realização preferido, o fragmento pode ser um polinucleotídeo que compreende 15 ou mais, de preferência 17 ou mais, mais preferencialmente 19 ou mais nucleotídeos consecutivos.

[0483] Na presente invenção, o tamanho do fragmento de polinucleotídeo é o número de bases no intervalo de, por exemplo, a partir de 15 nucleotídeos consecutivos, até menos do que o número total de bases da sequência, a partir de 17 nucleotídeos consecutivos, até menos do que o número total de bases da sequência, ou a partir de 19 nucleotídeos consecutivos, até menos do que o número total de nucleotídeos da sequência, na sequência de nucleotídeos de cada polinucleotídeo.

[0484] Os exemplos específicos da combinação mencionada acima dos polinucleotídeos constituindo o kit ou o dispositivo da presente invenção podem incluir os polinucleotídeos com combinações das SEQ ID NOs mostradas na Tabela 1 (SEQ ID NOs: 1 a 174 e 561 a 579 correspondendo aos miRNAs marcadores na Tabela 1). Entretanto, estes são dados meramente para fins ilustrativos, e outras combinações possíveis estão incluídas na presente invenção.

[0485] A combinação mencionada acima constituindo o kit ou o dispositivo para discriminar um paciente com câncer de pulmão a partir de um sujeito saudável de acordo com a presente invenção é desejavelmente, por exemplo, uma combinação de dois ou mais dos polinucleotídeos mencionados acima consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs mostradas na Tabela 1. Normalmente, uma combinação de dois destes polinucleotídeos pode produzir um desempenho adequado.

[0486] A combinação de dois polinucleotídeos que consistem das sequências de nucleotídeos ou sequências complementares das mesmas, para discriminar especificamente um paciente com câncer de pulmão a partir de um sujeito saudável é de preferência uma combinação que compreende pelo menos um ou mais dos polinucleotídeos recentemente encontrados consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs : 1 a 125, 127 a 130, 132 a 174, e 561 a 578, entre as combinações constituídas por dois dos polinucleotídeos que consistem das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 174, e 561 a 579.

[0487] A combinação de polinucleotídeos com especificidade para o tipo de câncer capaz de discriminar um paciente com câncer de pulmão não apenas de um sujeito saudável, como também a partir de outros pacientes com outros tipos de cânceres é preferencialmente, por exemplo, uma combinação de vários polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo dos polinucleotídeos de SEQ ID NOs: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9, 10, 11, 19, 21, 26, 29, 31, 52, 53, 63, 65, 69, 72, 87, 90, 113, 124, 125, 126, 128, 130, 143, 148, 160, 162, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578 e 579 (daqui em diante, este grupo é referido como “grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos”), com qualquer um dos polinucleotídeos das outras SEQ ID NOs.

[0488] A combinação de polinucleotídeos com especificidade para o tipo de câncer capaz de discriminar um paciente com câncer de pulmão não apenas de um sujeito saudável, como também a partir de outros pacientes é mais preferencialmente uma combinação de vários polinucleotídeos selecionados a partir do grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específico.

[0489] A combinação de polinucleotídeos com especificidade para o tipo de câncer capaz de discriminar um paciente com câncer de pulmão não só a partir de um sujeito saudável, mas também a partir de pacientes com outros cânceres é mais preferivelmente uma combinação que compreende pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo dos polinucleotídeos de SEQ ID NOs: 1, 2, 3, 10, 63, 113, 124, 125, 126, 128, 130, 143, 160, 561, 568, 573 e 578 (daqui em diante este grupo é referido como “grupo 2 de polinucleotídeos tipo de câncer- específicos”) incluídos no grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer- específicos, entre as combinações de múltiplos polinucleotídeos selecionados a partir do grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos.

[0490] O número dos polinucleotídeos mencionados acima com especificidade para o tipo de câncer na combinação pode ser de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ou mais para a combinação e é preferencialmente uma combinação de 4 ou mais. Normalmente, a combinação de 4 destes polinucleotídeos pode produzir um desempenho adequado.

[0491] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 1 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 53, 113, e 125 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6088, hsa-miR-6717- 5p, e hsa-miR-614); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 63, e 113 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 3162-5p, e hsa-miR-6717-5p); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 19, 113, e 143 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-4443); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 126 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-19b-3p); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 2, 10, e 113 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6836-3p, hsa-miR- 6875-5p, e hsa-miR-6717-5p).

[0492] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 2 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 19, 53, e 113 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 6088, e hsa-miR-6717-5p); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 72, 113, e 125 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-3940-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-614); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 19, 72, e 113 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 3940-5p, e hsa-miR-6717-5p); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 19, 113, e 579 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-1307-3p); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 2, 19, e 113 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6836-3p, hsa-miR- 3184-5p, e hsa-miR-6717-5p).

[0493] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 3 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 3, 125, 128, e 568 (marcadores: hsa-miR-6782-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-451a, e hsa-miR-296-3p); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 3, 10, e 113 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6782-5p, hsa-miR- 6875-5p, e hsa-miR-6717-5p); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 3, 113, 125, e 126 (marcadores: hsa-miR-6782-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-19b-3p); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 3, 126, e 573 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6782-5p, hsa-miR- 19b-3p, e hsa-miR-1202); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 3, 126, 130, e 561 (marcadores: hsa-miR-6782-5p, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR- 223-3p, e hsa-miR-6073).

[0494] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 10 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 143 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-4443); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 569 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-4690-5p); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 562 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-6845-5p); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, hsa-miR-4534); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 7, 10, e 113 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-4258, hsa-miR-6875- 5p, e hsa-miR-6717-5p).

[0495] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 63 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 63, 567, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR- 940, e hsa-miR-4534); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 53, 63, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6088, hsa-miR-3162- 5p, e hsa-miR-4534); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 63, 162, e 573 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR- 615-5p, e hsa-miR-1202); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 63, 162, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR- 615-5p, e hsa-miR-4534); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 63, 576, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR- 4783-3p, e hsa-miR-4534).

[0496] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 113 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 567 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-940); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 53, 63, e 113 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6088, hsa-miR-3162- 5p, e hsa-miR-6717-5p); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 53, 113, e 143 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6088, hsa-miR-6717- 5p, e hsa-miR-4443); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 19, 113, e 125 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-614); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 10, 113, e 130 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-223-3p).

[0497] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 124 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 113, 124, 125, e 126 (marcadores: hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-19b-3p); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 124, 125, 128, e 568 (marcadores: hsa-miR-187-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-451a, e hsa-miR-296-3p); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 113, 124, 125, e 162 (marcadores: hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-615-5p); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 52, 124, 126, e 561 (marcadores: hsa-miR-365a-5p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR- 19b-3p, e hsa-miR-6073); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 19, 113, 124, e 126 (marcadores: hsa-miR-3184-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 187-5p, e hsa-miR-19b-3p).

[0498] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 125 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, 125, e 160 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-6087); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 31, 113, 125, e 568 (marcadores: hsa-miR-6889-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-296-3p); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 53, 113, e 125 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-6088, hsa-miR-6717- 5p, e hsa-miR-614); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 125 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-614); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, 125, e 143 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-4443).

[0499] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 126 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 126, 561, e 573 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR- 6073, e hsa-miR-1202); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 113, 125, 126, e 568 (marcadores: hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-19b- 3p, e hsa-miR-296-3p); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 113, 125, 126, e 561 (marcadores: hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-19b- 3p, e hsa-miR-6073); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, 125, e 126 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-19b-3p); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 52, 126, e 561 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-365a-5p, hsa-miR- 19b-3p, e hsa-miR-6073).

[0500] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 128 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 26, 113, 125, e 128 (marcadores: hsa-miR-6842-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-451a); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, 125, e 128 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-451a); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 128 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-451a); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 31, 113, 125, e 128 (marcadores: hsa-miR-6889-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-451a); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 19, 113, e 128 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-451a).

[0501] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 130 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 3, 130, e 143 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6782-5p, hsa-miR- 223-3p, e hsa-miR-4443); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 130 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-223-3p); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 63, 130, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR- 223-3p, e hsa-miR-4534); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 124, 125, 130, e 568 (marcadores: hsa-miR-187-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-223-3p, e hsa-miR-296-3p); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 19, 113, e 130 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-223-3p).

[0502] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 143 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 3, 126, e143 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6782-5p, hsa-miR- 19b-3p, e hsa-miR-4443); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 63, 130, e 143 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR- 223-3p, e hsa-miR-4443); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 52, e 143 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 365a-5p, e hsa-miR-4443); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 19, 113, e 143 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-4443); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 63, 124, 130, e 143 (marcadores: hsa-miR-3162-5p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR- 223-3p, e hsa-miR-4443).

[0503] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 160 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 10, 113, e 160 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-6087); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 7, 113, 125, e 160 (marcadores: hsa-miR-4258, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-614, e hsa-miR-6087); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, 160, e 567 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 6087, e hsa-miR-940); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, 160, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 6087, e hsa-miR-4534); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 2, 19, 113, e 160 (marcadores: hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-6087).

[0504] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 561 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 113, 125, 130, e 561 (marcadores: hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-223- 3p, e hsa-miR-6073); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 7, 126, 143, e 561 (marcadores: hsa-miR-4258, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR-4443, e hsa-miR-6073); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, e 126, 561 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 19b-3p, e hsa-miR-6073); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 126, 561, e 568 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR- 6073, e hsa-miR-296-3p); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 7, 113, 126, e 561 (marcadores: hsa-miR-4258, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-19b- 3p, e hsa-miR-6073).

[0505] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 568 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 7, 125, 126, e 568 (marcadores: hsa-miR-4258, hsa-miR-614, hsa-miR-19b-3p, e hsa-miR-296-3p); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 124, 125, 126, e 568 (marcadores: hsa-miR-187-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-19b-3p, e hsa-miR-296-3p); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 7, 113, 125, e 568 (marcadores: hsa-miR-4258, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-614, e hsa-miR-296-3p); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, 125, e 568 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-296-3p); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 113, 125, 128, e 568 (marcadores: hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-451a, e hsa-miR-296-3p).

[0506] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 573 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 113, 125, 126, e 573 (marcadores: hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-19b- 3p, e hsa-miR-1202); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, 125, e 573 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-1202); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 53, 113, e 573 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6088, hsa-miR-6717- 5p, e hsa-miR-1202); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 124, 126, e 573 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR- 19b-3p, e hsa-miR-1202); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 63, 130, e 573 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR- 223-3p, e hsa-miR-1202).

[0507] Exemplos não limitantes da combinação do polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 578 ou uma sequência complementar a esta, com os polinucleotídeos consistindo de sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs de cinco polinucleotídeos selecionados dentre o grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos ou sequências complementares a estas sequências serão listadas abaixo. (1) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 126, 567, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR- 940, e hsa-miR-4534); (2) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 19, 113, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR- 6717-5p, e hsa-miR-4534); (3) uma combinação das SEQ ID NOs: 31, 126, 561, e 578 (marcadores: hsa-miR-6889-5p, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR- 6073, e hsa-miR-4534); (4) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 126, 160, e 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR- 6087, e hsa-miR-4534); e (5) uma combinação das SEQ ID NOs: 1, 113, 125, 578 (marcadores: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR- 614, e hsa-miR-4534).

[0508] O kit ou o dispositivo da presente invenção também pode compreender também um polinucleotídeo que já é conhecido ou que será descoberto no futuro, para permitir a detecção do câncer de pulmão, além do(s) polinucleotídeo(s) (que pode(m) incluir variante(s), fragmento(s), e derivado(s)) de acordo com a presente invenção descrita acima.

[0509] O kit da presente invenção também pode conter um anticorpo para medir um marcador para exame do câncer de pulmão conhecido no estado da técnica, tal como CEA ou CYFRA21-1, além do(s) polinucleotídeo(s) de acordo com a presente invenção descrito(s) acima.

[0510] Estes polinucleotídeos contidos no kit da presente invenção podem ser embalados em recipientes diferentes, individualmente ou em qualquer combinação.

[0511] O kit da presente invenção pode conter um kit para a extração de ácidos nucleicos (por exemplo, RNA, total) a partir de fluidos corporais, células, ou tecidos, um material fluorescente para a marcação, uma enzima e um meio para a amplificação do ácido nucleico, um manual de instruções, etc.

[0512] O dispositivo da presente invenção é um dispositivo para a medição do marcador de câncer, em que os ácidos nucleicos, tais como os polinucleotídeos de acordo com a presente invenção descritos acima, são ligados ou anexados a, por exemplo, uma fase sólida. Exemplos do material para a fase sólida incluem plástico, papel, vidro e silício. O material para a fase sólida é preferencialmente um material plástico a partir do ponto de vista de fácil processabilidade. A fase sólida tem qualquer forma e é, por exemplo, quadrada, redonda, em forma de palheta, ou forma de película. O dispositivo da presente invenção inclui, por exemplo, um dispositivo para a medição por uma técnica de hibridização. Exemplos específicos dos mesmos incluem dispositivos de blotting e matrizes de ácidos nucleicos (por exemplo, microarrays, chips de DNA e chips de RNA).

[0513] A técnica de matriz de ácido nucleico é uma técnica que envolve a ligação ou fixação dos ácidos nucleicos, um a um, pela utilização de um método [por exemplo, um método para detectar ácidos nucleicos utilizando um dispensador de alta densidade denominado spotter ou arrayer sobre a superfície da fase sólida com superfície tratada, se necessário, por revestimento com L-lisina ou introdução de um grupo funcional, tal como um grupo amino ou grupo carboxila, um método de pulverização dos ácidos nucleicos na fase sólida utilizando um jato que injeta gotículas muito pequenas de líquido por um elemento piezoelétrico ou semelhante a partir de um bocal injetor, ou um método de síntese sequencial de nucleotídeos na fase sólida] para preparar uma matriz tal como um chip e a medição do ácido nucleico-alvo pelo uso da hibridização usando essa matriz.

[0514] O kit ou o dispositivo da presente invenção compreende os ácidos nucleicos capazes de se ligar especificamente aos polinucleotídeos de, pelo menos, um ou mais, de um modo preferido, pelo menos, dois ou mais, mais preferencialmente, pelo menos, três ou mais, mais preferivelmente pelo menos cinco ou mais até todos miRNAs marcadores do câncer de pulmão, respectivamente, do grupo 1 descrito acima. O kit ou o dispositivo da presente invenção pode compreender adicionalmente os ácidos nucleicos capazes de se ligar especificamente aos polinucleotídeos de, pelo menos, um ou mais, de um modo preferido, pelo menos, dois ou mais, mais preferencialmente, pelo menos, três ou mais, mais preferivelmente pelo menos cinco ou mais até todos miRNAs marcadores do câncer de pulmão, respectivamente, do grupo 2 descrito acima. O kit ou o dispositivo da presente invenção pode compreender adicionalmente os ácidos nucleicos capazes de se ligar especificamente aos polinucleotídeos de, pelo menos, um ou mais, de um modo preferido, pelo menos, dois ou mais, mais preferencialmente, pelo menos, três ou mais, mais preferivelmente pelo menos cinco ou mais até todos miRNAs marcadores do câncer de pulmão, respectivamente, do grupo 3 descrito acima.

[0515] O kit ou o dispositivo da presente invenção pode ser utilizado para a detecção do câncer de pulmão, tal como descrito na Seção 4 abaixo.

4. MÉTODO PARA DETECTAR O CÂNCER DE PULMÃO

[0516] A presente invenção provê ainda um método para a detecção do câncer de pulmão, compreendendo o uso do kit ou do dispositivo da presente invenção (incluindo o(s) ácido(s) nucleico(s) mencionado(s) acima que pode(m) ser utilizado(s) na presente invenção) descrito na seção 3 para mensurar o(s) nível(eis) de expressão de um(alguns) gene(s) derivado(s) do câncer de próstata representado por um nível de expressão do(s) gene(s) derivado(s) do câncer de próstata selecionado(s) a partir do seguinte grupo A: hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6836-3p, hsa-miR-6782-5p, hsa-miR-3663-3p, hsa-miR-1908-3p, hsa-miR-6726-5p, hsa-miR-4258, hsa-miR-1343-3p, hsa- miR-4516, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR-4651, hsa-miR-6825-5p, hsa-miR- 6840-3p, hsa-miR-6780b-5p, hsa-miR-6749-5p, hsa-miR-8063, hsa-miR-6784- 5p, hsa-miR-3679-5p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR-663b, hsa-miR-6880-5p, hsa-miR-1908-5p, hsa-miR-92a-2-5p, hsa-miR-7975, hsa-miR-7110-5p, hsa- miR-6842-5p, hsa-miR-6857-5p, hsa-miR-5572, hsa-miR-3197, hsa-miR- 6131, hsa-miR-6889-5p, hsa-miR-4454, hsa-miR-1199-5p, hsa-miR-1247-3p, hsa-miR-6800-5p, hsa-miR-6872-3p, hsa-miR-4649-5p, hsa-miR-6791-5p, hsa-miR-4433b-3p, hsa-miR-3135b, hsa-miR-128-2-5p, hsa-miR-4675, hsa- miR-4472, hsa-miR-6785-5p, hsa-miR-6741-5p, hsa-miR-7977, hsa-miR- 3665, hsa-miR-128-1-5p, hsa-miR-4286, hsa-miR-6765-3p, hsa-miR-4632-5p, hsa-miR-365a-5p, hsa-miR-6088, hsa-miR-6816-5p, hsa-miR-6885-5p, hsa- miR-711, hsa-miR-6765-5p, hsa-miR-3180, hsa-miR-4442, hsa-miR-4792, hsa-miR-6721-5p, hsa-miR-6798-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR-6126, hsa- miR-4758-5p, hsa-miR-2392, hsa-miR-486-3p, hsa-miR-6727-5p, hsa-miR- 4728-5p, hsa-miR-6746-5p, hsa-miR-4270, hsa-miR-3940-5p, hsa-miR-4725- 3p, hsa-miR-7108-5p, hsa-miR-3656, hsa-miR-6879-5p, hsa-miR-6738-5p, hsa-miR-1260a, hsa-miR-4446-3p, hsa-miR-3131, hsa-miR-4463, hsa-miR- 3185, hsa-miR-6870-5p, hsa-miR-6779-5p, hsa-miR-1273g-3p, hsa-miR-8059, hsa-miR-4697-5p, hsa-miR-4674, hsa-miR-4433-3p, hsa-miR-4257, hsa-miR- 1915-5p, hsa-miR-4417, hsa-miR-1343-5p, hsa-miR-6781-5p, hsa-miR-4695- 5p, hsa-miR-1237-5p, hsa-miR-6775-5p, hsa-miR-7845-5p, hsa-miR-4746-3p, hsa-miR-7641, hsa-miR-7847-3p, hsa-miR-6806-5p, hsa-miR-4467, hsa-miR- 4726-5p, hsa-miR-4648, hsa-miR-6089, hsa-miR-1260b, hsa-miR-4532, hsa- miR-5195-3p, hsa-miR-3188, hsa-miR-6848-5p, hsa-miR-1233-5p, hsa-miR- 6717-5p, hsa-miR-3195, hsa-miR-6757-5p, hsa-miR-8072, hsa-miR-4745-5p, hsa-miR-6511a-5p, hsa-miR-6776-5p, hsa-miR-371a-5p, hsa-miR-1227-5p, hsa-miR-7150, hsa-miR-1915-3p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR-614, hsa-miR- 1225-5p, hsa-miR-451a, hsa-miR-939-5p, hsa-miR-223-3p, hsa-miR-125a-3p, hsa-miR-92b-5p, hsa-miR-22-3p, hsa-miR-6073, hsa-miR-6845-5p, hsa-miR- 6769b-5p, hsa-miR-4665-3p, hsa-miR-1913, hsa-miR-1228-3p, hsa-miR-940, hsa-miR-296-3p, hsa-miR-4690-5p, hsa-miR-548q, hsa-miR-663a, hsa-miR- 1249, hsa-miR-1202, hsa-miR-7113-3p, hsa-miR-1225-3p, hsa-miR-4783-3p, hsa-miR-4448 e hsa-miR-4534, e opcionalmente, um nível de expressão de gene(s) derivado(s) do câncer de pulmão selecionado(s) a partir do seguinte grupo B: hsa-miR-19b-3p, hsa-miR-1228-5p, e hsa-miR-1307-3p, e opcionalmente, um nível de expressão de gene(s) derivado(s) do câncer de pulmão selecionado(s) a partir do seguinte grupo C: hsa-miR-4271, hsa-miR- 642b-3p, hsa-miR-6075, hsa-miR-6125, hsa-miR-887-3p, hsa-miR-6851-5p, hsa-miR-6763-5p, hsa-miR-3928-3p, hsa-miR-4443, hsa-miR-3648, hsa-miR- 149-3p, hsa-miR-4689, hsa-miR-4763-3p, hsa-miR-6729-5p, hsa-miR-3196, hsa-miR-8069, hsa-miR-1268a, hsa-miR-4739, hsa-miR-1268b, hsa-miR- 5698, hsa-miR-6752-5p, hsa-miR-4507, hsa-miR-564, hsa-miR-4497, hsa- miR-6877-5p, hsa-miR-6087, hsa-miR-4731-5p, hsa-miR-615-5p, hsa-miR- 760, hsa-miR-6891-5p, hsa-miR-6887-5p, hsa-miR-4525, hsa-miR-1914-3p, hsa-miR-619-5p, hsa-miR-5001-5p, hsa-miR-6722-3p, hsa-miR-3621, hsa- miR-4298, hsa-miR-675-5p em uma amostra in vitro, comparando adicionalmente, por exemplo, o nível de expressão dos genes supramencionados na amostra (por exemplo, sangue, soro, ou plasma) coletados de um sujeito com suspeita de ter câncer de pulmão com um nível de expressão de controle a partir de uma amostra coletada de um sujeito saudável (incluindo um paciente com câncer que não é o câncer de pulmão), e avaliando se o sujeito tem câncer de pulmão quando o nível de expressão dos ácidos nucleicos alvo é diferente entre as amostras.

[0517] Este método da presente invenção permite um diagnóstico limitadamente invasivo, no início do câncer com elevada sensibilidade e especificidade e, desse modo, promove o tratamento precoce e um melhor prognóstico. Além disso, a exacerbação da doença ou a eficácia cirúrgica, radioterapêutica, e quimioterápica podem ser monitoradas.

[0518] O método de extração do gene derivado do câncer de pulmão a partir da amostra, tal como sangue, soro, ou plasma de acordo com a presente invenção é preferencialmente preparado pela adição de um reagente para a extração de RNA pelo kit de extração de RNA em amostras líquidas “3D-Gene™ RNA extraction reagent from liquid sample kit” (Toray Industries, Inc.). Um método de fenol ácido geral (ácido guanidínio-fenol- clorofórmio (AGPC)) pode ser usado, ou pode ser usado Trizol™ (Life Technologies Corp.). O gene derivado de câncer de pulmão pode ser preparado pela adição de um reagente para a extração de RNA contendo fenol acídico, tal como Trizol (Life Technologies Corp.) ou Isogen (Nippon Gene Co., Ltd). Alternativamente, pode ser usado um kit tal como miRNeasy™ Mini Kit (Qiagen NV), embora o método não seja limitado a apenas estes.

[0519] A presente invenção também proporciona a utilização do kit ou dispositivo da presente invenção para a detecção in vitro de produto(s) da expressão de gene(s) miRNA(s) derivado(s) do câncer de pulmão em uma amostra derivada de um sujeito.

[0520] No método da presente invenção, um kit ou dispositivo compreendendo, cada um isoladamente ou em cada composição possível, os polinucleotídeos que podem ser utilizados na presente invenção conforme descrito acima é utilizado como o kit ou dispositivo.

[0521] Na detecção ou diagnóstico (genético) do câncer de pulmão de acordo com a presente invenção, cada polinucleotídeo contido no kit ou no dispositivo da presente invenção pode ser utilizado como uma sonda ou primer. No caso de se utilizar o polinucleotídeo como um primer, ensaios TaqMan™ microRNA da Life Technologies Corp., sistema de PCR miScript PCR System da Qiagen N.V., ou métodos similares, podem ser utilizados, embora o método da presente invenção não seja limitado a apenas estes.

[0522] O polinucleotídeo contido no kit ou no dispositivo da presente invenção pode ser usado como um primer ou sonda de acordo com um método rotineiro em um método conhecido no estado da técnica para detectar especificamente o gene específico, por exemplo, uma técnica de hibridização como o Northern blot, Southern blot, hibridização in situ, hibridização Northern, hibridização Southern ou uma técnica de amplificação quantitativa, tal como a RT-PCR quantitativa. Um fluido corporal, tal como sangue, soro, plasma ou urina de um sujeito é coletado como uma amostra a ser analisada de acordo com o tipo de método de detecção utilizado. Alternativamente, pode ser utilizado o RNA total preparado a partir de tal fluido corporal através do método descrito acima, e podem ser usados vários polinucleotídeos incluindo cDNA preparado a partir do RNA.

[0523] O kit ou o dispositivo da presente invenção é útil para o diagnóstico do câncer de pulmão ou para a detecção da presença ou ausência do câncer de pulmão. Especificamente, a detecção do câncer de pulmão utilizando o kit ou o dispositivo pode ser realizada pela detecção in vitro do nível de expressão de um gene usando a sonda de ácido nucleico ou o primer contido no kit ou dispositivo em uma amostra, tal como sangue, soro, plasma ou urina a partir de um sujeito com suspeita de ter câncer de pulmão. O sujeito com suspeita de ter câncer de pulmão pode ser avaliado como tendo câncer de pulmão quando o nível de expressão do miRNA marcador alvo mensurado utilizando polinucleotídeo(s) (incluindo qualquer variante, qualquer fragmento, e qualquer derivado dos mesmos) consistindo das sequências nucleotídicas representadas por pelo menos uma ou mais das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134 e 561 a 578, ou uma sequência complementar a estas, opcionalmente, uma sequência nucleotídica representada por uma ou mais das SEQ ID NOs: 126 a 131, ou uma sequência complementar a estas, e opcionalmente uma sequência nucleotídica representada por uma ou mais das SEQ ID NOs: 135 a 174 ou uma sequência complementar a estas, na amostra, tal como no sangue, soro, plasma ou urina do sujeito, é estatisticamente diferente de maneira significante quando comparado com o nível de expressão do mesmo na amostra, tal como sangue, soro, plasma ou urina, de um sujeito saudável.

[0524] O método da presente invenção pode ser combinado com o exame de raios-X do tórax, bem como um método de imagiologia diagnóstica, como tomografia computadorizada, ressonância magnética ou tomografia computadorizada por emissão de pósitrons. O método da presente invenção é capaz de detectar especificamente o câncer de pulmão e pode discriminar substancialmente o câncer de pulmão de outros cânceres.

[0525] O método para detectar a ausência de um produto da expressão de gene(s) derivado(s) de câncer de pulmão, ou a presença do produto da expressão de gene(s) derivado(s) de câncer de pulmão em uma amostra utilizando o kit ou o dispositivo da presente invenção compreende a coleta de um fluido corporal tal como sangue, soro, plasma ou urina do sujeito, e a medição do nível de expressão do(s) gene(s) -alvo contido(s) na amostra utilizando um ou mais polinucleotídeo(s) (incluindo variante, fragmento, ou derivado) selecionado(s) a partir dos grupos de polinucleotídeos da presente invenção, para avaliar a presença ou ausência do câncer de pulmão ou detectar o câncer de pulmão. Utilizando o método para detectar o câncer de pulmão de acordo com a presente invenção, por exemplo, a presença ou ausência de melhora da doença ou grau de melhora da doença em um paciente com câncer de pulmão recebendo uma droga terapêutica para melhorar a doença também pode ser avaliada ou diagnosticada.

[0526] O método da presente invenção pode compreender, por exemplo, as seguintes etapas (a), (b), e (c): (a) uma etapa de fazer o contato in vitro de uma amostra derivada de um sujeito com o(s) polinucleotídeo(s) contido(s) no kit ou dispositivo da presente invenção; (b) uma etapa de medição do nível de expressão do ácido nucleico -alvo na amostra usando o polinucleotídeo como sonda de ácidos nucleicos ou primer; e (c) uma etapa de avaliação da presença ou ausência do câncer de pulmão (células) no sujeito com base na etapa (b).

[0527] Especificamente, a presente invenção provê um método para detectar o câncer de pulmão, compreendendo a medição do nível de expressão de ácidos nucleicos alvo em uma amostra de um sujeito utilizando ácidos nucleicos capazes de ligar especificamente a pelo menos um ou mais (de um modo preferido, pelo menos dois ou mais) polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de miR-6768-5p, miR-6836-3p, miR-6782-5p, miR-3663-3p, miR-1908-3p, miR-6726-5p, miR-4258, miR- 1343-3p, miR-4516, miR-6875-5p, miR-4651, miR-6825-5p, miR-6840-3p, miR-6780b-5p, miR-6749-5p, miR-8063, miR-6784-5p, miR-3679-5p, miR- 3184-5p, miR-663b, miR-6880-5p, miR-1908-5p, miR-92a-2-5p, miR-7975, miR-7110-5p, miR-6842-5p, miR-6857-5p, miR-5572, miR-3197, miR-6131, miR-6889-5p, miR-4454, miR-1199-5p, miR-1247-3p, miR-6800-5p, miR- 6872-3p, miR-4649-5p, miR-6791-5p, miR-4433b-3p, miR-3135b, miR-128-2- 5p, miR-4675, miR-4472, miR-6785-5p, miR-6741-5p, miR-7977, miR-3665, miR-128-1-5p, miR-4286, miR-6765-3p, miR-4632-5p, miR-365a-5p, miR- 6088, miR-6816-5p, miR-6885-5p, miR-711, miR-6765-5p, miR-3180, miR- 4442, miR-4792, miR-6721-5p, miR-6798-5p, miR-3162-5p, miR-6126, miR- 4758-5p, miR-2392, miR-486-3p, miR-6727-5p, miR-4728-5p, miR-6746-5p, miR-4270, miR-3940-5p, miR-4725-3p, miR-7108-5p, miR-3656, miR-6879- 5p, miR-6738-5p, miR-1260a, miR-4446-3p, miR-3131, miR-4463, miR-3185, miR-6870-5p, miR-6779-5p, miR-1273g-3p, miR-8059, miR-4697-5p, miR- 4674, miR-4433-3p, miR-4257, miR-1915-5p, miR-4417, miR-1343-5p, miR- 6781-5p, miR-4695-5p, miR-1237-5p, miR-6775-5p, miR-7845-5p, miR-4746- 3p, miR-7641, miR-7847-3p, miR-6806-5p, miR-4467, miR-4726-5p, miR- 4648, miR-6089, miR-1260b, miR-4532, miR-5195-3p, miR-3188, miR-6848- 5p, miR-1233-5p, miR-6717-5p, miR-3195, miR-6757-5p, miR-8072, miR- 4745-5p, miR-6511a-5p, miR-6776-5p, miR-371a-5p, miR-1227-5p, miR-7150, miR-1915-3p, miR-187-5p, miR-614, miR-1225-5p, miR-451a, miR-939-5p, miR-223-3p, miR-125a-3p, miR-92b-5p, miR-22-3p, miR-6073, miR-6845-5p, miR-6769b-5p, miR-4665-3p, miR-1913, miR-1228-3p, miR-940, miR-296-3p, miR-4690-5p, miR-548q, miR-663a, miR-1249, miR-1202, miR-7113-3p, miR- 1225-3p, miR-4783-3p, miR-4448 e miR-4534, e avaliação in vitro para determinar se o sujeito tem ou não câncer de pulmão utilizando o nível mensurado de expressão e um nível de expressão de controle a partir de um sujeito saudável mensurado da mesma maneira.

[0528] Tal como utilizado na presente invenção, o termo “avaliação” é o suporte de avaliação baseado nos resultados do exame in vitro, e não no julgamento do médico.

[0529] Como descrito acima, e relação aos ácidos nucleicos alvo em um exemplo de realização preferido do método da presente invenção, especificamente, miR-6768-5p é hsa-miR-6768-5p, miR-6836-3p é hsa-miR- 6836-3p, miR-6782-5p é hsa-miR-6782-5p, miR-3663-3p é hsa-miR-3663-3p, miR-1908-3p é hsa-miR-1908-3p, miR-6726-5p é hsa-miR-6726-5p, miR-4258 é hsa-miR-4258, miR-1343-3p é hsa-miR-1343-3p, miR-4516 é hsa-miR- 4516, miR-6875-5p é hsa-miR-6875-5p, miR-4651 é hsa-miR-4651, miR- 6825-5p é hsa-miR-6825-5p, miR-6840-3p é hsa-miR-6840-3p, miR-6780b-5p é hsa-miR-6780b-5p, miR-6749-5p é hsa-miR-6749-5p, miR-8063 é hsa-miR- 8063, miR-6784-5p é hsa-miR-6784-5p, miR-3679-5p é hsa-miR-3679-5p, miR-3184-5p é hsa-miR-3184-5p, miR-663b é hsa-miR-663b, miR-6880-5p é hsa-miR-6880-5p, miR-1908-5p é hsa-miR-1908-5p, miR-92a-2-5p é hsa-miR- 92a-2-5p, miR-7975 é hsa-miR-7975, miR-7110-5p é hsa-miR-7110-5p, miR- 6842-5p é hsa-miR-6842-5p, miR-6857-5p é hsa-miR-6857-5p, miR-5572 é hsa-miR-5572, miR-3197 é hsa-miR-3197, miR-6131 é hsa-miR-6131, miR- 6889-5p é hsa-miR-6889-5p, miR-4454 é hsa-miR-4454, miR-1199-5p é hsa- miR-1199-5p, miR-1247-3p é hsa-miR-1247-3p, miR-6800-5p é hsa-miR- 6800-5p, miR-6872-3p é hsa-miR-6872-3p, miR-4649-5p é hsa-miR-4649-5p, miR-6791-5p é hsa-miR-6791-5p, miR-4433b-3p é hsa-miR-4433b-3p, miR- 3135b é hsa-miR-3135b, miR-128-2-5p é hsa-miR-128-2-5p, miR-4675 é hsa- miR-4675, miR-4472 é hsa-miR-4472, miR-6785-5p é hsa-miR-6785-5p, miR- 6741-5p é hsa-miR-6741-5p, miR-7977 é hsa-miR-7977, miR-3665 é hsa- miR-3665, miR-128-1-5p é hsa-miR-128-1-5p, miR-4286 é hsa-miR-4286, miR-6765-3p é hsa-miR-6765-3p, miR-4632-5p é hsa-miR-4632-5p, miR- 365a-5p é hsa-miR-365a-5p, miR-6088 é hsa-miR-6088, miR-6816-5p é hsa- miR-6816-5p, miR-6885-5p é hsa-miR-6885-5p, miR-711 é hsa-miR-711, miR- 6765-5p é hsa-miR-6765-5p, miR-3180 é hsa-miR-3180, miR-4442 é hsa- miR-4442, miR-4792 é hsa-miR-4792, miR-6721-5p é hsa-miR-6721-5p, miR- 6798-5p é hsa-miR-6798-5p, miR-3162-5p é hsa-miR-3162-5p, miR-6126 é hsa-miR-6126, miR-4758-5p é hsa-miR-4758-5p, miR-2392 é hsa-miR-2392, miR-486-3p é hsa-miR-486-3p, miR-6727-5p é hsa-miR-6727-5p, miR-4728- 5p é hsa-miR-4728-5p, miR-6746-5p é hsa-miR-6746-5p, miR-4270 é hsa- miR-4270, miR-3940-5p é hsa-miR-3940-5p, miR-4725-3p é hsa-miR-4725- 3p, miR-7108-5p é hsa-miR-7108-5p, miR-3656 é hsa-miR-3656, miR-6879- 5p é hsa-miR-6879-5p, miR-6738-5p é hsa-miR-6738-5p, miR-1260a é hsa- miR-1260a, miR-4446-3p é hsa-miR-4446-3p, miR-3131 é hsa-miR-3131, miR-4463 é hsa-miR-4463, miR-3185 é hsa-miR-3185, miR-6870-5p é hsa- miR-6870-5p, miR-6779-5p é hsa-miR-6779-5p, miR-1273g-3p é hsa-miR- 1273g-3p, miR-8059 é hsa-miR-8059, miR-4697-5p é hsa-miR-4697-5p, miR- 4674 é hsa-miR-4674, miR-4433-3p é hsa-miR-4433-3p, miR-4257 é hsa- miR-4257, miR-1915-5p é hsa-miR-1915-5p, miR-4417 é hsa-miR-4417, miR- 1343-5p é hsa-miR-1343-5p, miR-6781-5p é hsa-miR-6781-5p, miR-4695-5p é hsa-miR-4695-5p, miR-1237-5p é hsa-miR-1237-5p, miR-6775-5p é hsa- miR-6775-5p, miR-7845-5p é hsa-miR-7845-5p, miR-4746-3p é hsa-miR- 4746-3p, miR-7641 é hsa-miR-7641, miR-7847-3p é hsa-miR-7847-3p, miR- 6806-5p é hsa-miR-6806-5p, miR-4467 é hsa-miR-4467, miR-4726-5p é hsa- miR-4726-5p, miR-4648 é hsa-miR-4648, miR-6089 é hsa-miR-6089, miR- 1260b é hsa-miR-1260b, miR-4532 é hsa-miR-4532, miR-5195-3p é hsa-miR- 5195-3p, miR-3188 é hsa-miR-3188, miR-6848-5p é hsa-miR-6848-5p, miR- 1233-5p é hsa-miR-1233-5p, miR-6717-5p é hsa-miR-6717-5p, miR-3195 é hsa-miR-3195, miR-6757-5p é hsa-miR-6757-5p, miR-8072 é hsa-miR-8072, miR-4745-5p é hsa-miR-4745-5p, miR-6511a-5p é hsa-miR-6511a-5p, miR- 6776-5p é hsa-miR-6776-5p, miR-371a-5p é hsa-miR-371a-5p, miR-1227-5p é hsa-miR-1227-5p, miR-7150 é hsa-miR-7150, miR-1915-3p é hsa-miR- 1915-3p, miR-187-5p é hsa-miR-187-5p, miR-614 é hsa-miR-614, miR-1225- 5p é hsa-miR-1225-5p, miR-451a é hsa-miR-451a, miR-939-5p é hsa-miR- 939-5p, miR-223-3p é hsa-miR-223-3p, miR-125a-3p é hsa-miR-125a-3p, miR-92b-5p é hsa-miR-92b-5p, miR-22-3p é hsa-miR-22-3p, miR-6073 é hsa- miR-6073, miR-6845-5p é hsa-miR-6845-5p, miR-6769b-5p é hsa-miR-6769b- 5p, miR-4665-3p é hsa-miR-4665-3p, miR-1913 é hsa-miR-1913, miR-1228- 3p é hsa-miR-1228-3p, miR-940 é hsa-miR-940, miR-296-3p é hsa-miR-296- 3p, miR-4690-5p é hsa-miR-4690-5p, miR-548q é hsa-miR-548q, miR-663a é hsa-miR-663a, miR-1249 é hsa-miR-1249, miR-1202 é hsa-miR-1202, miR- 7113-3p é hsa-miR-7113-3p, miR-1225-3p é hsa-miR-1225-3p, miR-4783-3p é hsa-miR-4783-3p, miR-4448 é hsa-miR-4448, e miR-4534 é hsa-miR-4534.

[0530] Em um exemplo de realização preferido do método da presente invenção, especificamente, o ácido nucleico (especificamente, sonda ou primer) é selecionado a partir do grupo que consiste dos seguintes polinucleotídeos de (a) a (e): (d) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (e) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578; (f) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (g) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (h) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (a) a (d).

[0531] O método da presente invenção pode empregar mais de um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de miR- 19b-3p, miR-1228-5p e miR-1307-3p.

[0532] Quanto a tais ácidos nucleicos, especificamente, miR- 19b-3p é hsa-miR-19b-3p, miR-1228-5p é hsa-miR-1228-5p, e miR-1307-3p é hsa-miR-1307-3p.

[0533] Em um exemplo de realização preferido, o ácido nucleico é especificamente selecionado a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (f) a (j): (i) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (j) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOS: 126, 131 e 579; (k) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (l) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (m) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (f) a (i).

[0534] O ácido nucleico adicionalmente utilizado no método da presente invenção pode compreender o ácido nucleico capaz de ligar especificamente a pelo menos um ou mias polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de miR-4271, miR-642b-3p, miR-6075, miR-6125, miR-887-3p, miR-6851-5p, miR-6763-5p, miR-3928-3p, miR-4443, miR-3648, miR-149-3p, miR-4689, miR-4763-3p, miR-6729-5p, miR-3196, miR-8069, miR-1268a, miR-4739, miR-1268b, miR-5698, miR-6752-5p, miR-4507, miR- 564, miR-4497, miR-6877-5p, miR-6087, miR-4731-5p, miR-615-5p, miR-760, miR-6891-5p, miR-6887-5p, miR-4525, miR-1914-3p, miR-619-5p, miR-5001- 5p, miR-6722-3p, miR-3621, miR-4298, miR-675-5p e miR-4655-5p.

[0535] Quanto a tais ácidos nucleicos, especificamente, miR- 4271 é hsa-miR-4271, miR-642b-3p é hsa-miR-642b-3p, miR-6075 é hsa- miR-6075, miR-6125 é hsa-miR-6125, miR-887-3p é hsa-miR-887-3p, miR- 6851-5p é hsa-miR-6851-5p, miR-6763-5p é hsa-miR-6763-5p, miR-3928-3p é hsa-miR-3928-3p, miR-4443 é hsa-miR-4443, miR-3648 é hsa-miR-3648, miR-149-3p é hsa-miR-149-3p, miR-4689 é hsa-miR-4689, miR-4763-3p é hsa-miR-4763-3p, miR-6729-5p é hsa-miR-6729-5p, miR-3196 é hsa-miR- 3196, miR-8069 é hsa-miR-8069, miR-1268a é hsa-miR-1268a, miR-4739 é hsa-miR-4739, miR-1268b é hsa-miR-1268b, miR-5698 é hsa-miR-5698, miR- 6752-5p é hsa-miR-6752-5p, miR-4507 é hsa-miR-4507, miR-564 é hsa-miR- 564, miR-4497 é hsa-miR-4497, miR-6877-5p é hsa-miR-6877-5p, miR-6087 é hsa-miR-6087, miR-4731-5p é hsa-miR-4731-5p, miR-615-5p é hsa-miR- 615-5p, miR-760 é hsa-miR-760, miR-6891-5p é hsa-miR-6891-5p, miR-6887- 5p é hsa-miR-6887-5p, miR-4525 é hsa-miR-4525, miR-1914-3p é hsa-miR- 1914-3p, miR-619-5p é hsa-miR-619-5p, miR-5001-5p é hsa-miR-5001-5p, miR-6722-3p é hsa-miR-6722-3p, miR-3621 é hsa-miR-3621, miR-4298 é hsa-miR-4298, miR-675-5p é hsa-miR-675-5p, e miR-4655-5p é hsa-miR- 4655-5p.

[0536] Em um exemplo de realização preferido, o ácido nucleico é especificamente um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (k) a (o): (n) um polinucleotídeo que consiste de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, um variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (o) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOS: 135 a 174; (p) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T, um variante do mesmo, derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (n) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T ; e (o) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (k) a (n).

[0537] Exemplos das amostras utilizadas no método da presente invenção podem incluir amostras preparadas a partir de tecidos vivos (preferencialmente tecido do pulmão) ou fluido corporal, tal como sangue, soro, plasma ou urina do sujeito. Especificamente, por exemplo, uma amostra contendo RNA preparado a partir do tecido, uma amostra contendo o polinucleotídeo adicionalmente preparado a partir deste, um fluido corporal tal como sangue, soro, plasma ou urina, uma porção ou a totalidade de um tecido vivo coletado a partir do sujeito por biópsia ou método de coleta similar, ou um tecido excisado por cirurgia pode ser utilizado, e a amostra para medição pode ser preparada a partir dele.

[0538] Conforme utilizado no presente, o sujeito refere-se a um mamífero, por exemplo, um ser humano, um macaco, um camundongo e um rato, sem qualquer limitação, e é preferencialmente um ser humano.

[0539] As etapas do método da presente invenção podem ser alteradas de acordo com o tipo de amostra a ser ensaiada.

[0540] No caso de se utilizar RNA como um analito, a detecção do câncer de pulmão (células) pode compreender, por exemplo, as seguintes etapas (a), (b), e (c): (a) uma etapa de ligação do RNA preparado a partir da amostra do sujeito ou um polinucleotídeo (cDNA) complementar transcrito dele a um polinucleotídeo no kit ou dispositivo da presente invenção; (b) uma etapa de medição do RNA derivado da amostra ou do cDNA sintetizado a partir do RNA, ligado ao polinucleotídeo por hibridização usando o polinucleotídeo como sonda de ácido nucleico ou por RT-PCR quantitativa utilizando o polinucleotídeo como primer; e (c) uma etapa de avaliação da presença ou ausência do câncer de pulmão (ou expressão do gene derivado do câncer de pulmão) com base nos resultados de medição da etapa (b).

[0541] Por exemplo, diversos métodos de hibridização podem ser utilizados para detectar, examinar, avaliar, ou diagnosticar o câncer de pulmão (ou expressão do gene derivado do câncer de pulmão) de modo in vitro de acordo com a presente invenção. Por exemplo, os métodos de Northern blot, Southern blot, RT-PCR, análise usando chip de DNA, hibridização in situ, hibridização Northern ou hibridização Southern podem ser utilizados como tal método de hibridização.

[0542] No caso de se utilizar o Northern blot, a presença ou ausência da expressão de cada gene ou o nível de expressão deste em RNA pode ser detectada ou mensurada pelo uso da sonda de ácido nucleico que pode ser utilizada na presente invenção. Os exemplos específicos dos mesmos podem incluir um método que envolve a marcação da sonda de ácido nucleico (ou de uma fita complementar) com um radioisótopo (P32, P33, S35, etc.), um material fluorescente, ou similar, que hibridiza ao produto marcado com o RNA derivado do tecido vivo de um sujeito transferido para uma membrana de nylon ou semelhante, de acordo com um método de rotina, e, em seguida, a realização da detecção e medição de um sinal obtido a partir do marcador (radioisótopo ou material fluorescente) no duplexo DNA/RNA formado usando um detector de radiação (exemplos podem incluir BAS-1800 II (Fujifilm Corp., Japão)) ou um detector de fluorescência (exemplos podem incluir STORM 865 (GE Healthcare Japan Corp.)).

[0543] No caso de se utilizar a RT-PCR quantitativa, a presença ou ausência da expressão de cada gene ou o nível de expressão deste em RNA pode ser detectada ou mensurada pelo uso do primer que pode ser utilizado na presente invenção. Os exemplos específicos dos mesmos podem incluir um método que envolve a preparação do cDNA a partir do RNA derivado de tecido vivo de um sujeito de acordo com um método de rotina, a hibridização de um par de primers (consistindo de uma fita positiva e uma fita reversa de ligação ao cDNA) da presente invenção com o cDNA de tal modo que a região de cada um dos genes alvo pode ser amplificada com o cDNA como um molde, e realizando a PCR de acordo com um método rotineiro para detectar o DNA de fita dupla obtido. O método para detectar o DNA de fita dupla pode incluir um processo de realizar a PCR utilizando os primers marcados com antecedência, com um radioisótopo ou material fluorescente, um método de eletroforese do produto da PCR em gel de agarose e coloração do DNA de fita dupla com brometo de etídio, ou métodos semelhantes, para a detecção, e um método de transferência do DNA de fita dupla produzido para uma membrana de nylon ou similar, de acordo com um método rotineiro e hibridizar o DNA de fita dupla com uma sonda de ácido nucleico marcada para a detecção.

[0544] No caso de se utilizar a análise de ácido nucleico em matriz, é usado um chip de RNA ou chip de DNA na qual as sondas de ácido nucleico (fita dupla ou fita simples) da presente invenção são ligadas a um substrato (fase sólida). As regiões com as sondas de ácidos nucleicos ligadas são referidas como spots de sonda, e as regiões que não possuem a sonda de ácido nucleico ligada são referidas spots em branco. Um grupo de genes imobilizados em um substrato de fase sólida é geralmente denominado de chip de ácido nucleico, uma matriz de ácido nucleico é denominado de microarray, ou similar. A matriz de DNA ou RNA inclui um macroarranjo (macroarray) de DNA ou RNA e um microarranjo (microarray) de DNA ou RNA. O termo “chip” utilizado na presente invenção inclui todas essas. O chip “3D-Gene™ Human miRNA Oligo chip” (Toray Industries, Inc.) pode ser utilizado como o chip de DNA, embora o chip de DNA não se limita apenas a estes.

[0545] Exemplos de medição usando o chip de DNA podem incluir, mas não estão limitados a, um método de detecção e medição de um sinal obtido a partir do marcador sobre as sondas de ácido nucleico utilizando um detector de imagem (exemplos podem incluir Typhoon 9410 (GE Healthcare Japan) e 3D-Gene™ scanner (Toray Industries, Inc.)).

[0546] O termo “condições estringentes” utilizado na presente invenção, conforme mencionado acima, sob as quais uma sonda de ácido nucleico hibridiza com a sua sequência alvo em uma extensão maior (por exemplo, valores de medição iguais ou maiores do que (uma média dos valores de medição de fundo) + (um desvio padrão dos valores de medição do fundo) x 2) do que com outras sequências.

[0547] As condições estringentes são definidas pela hibridização e subsequentes condições de lavagem. As condições de hibridização não são limitadas e são condições envolvendo, por exemplo, 30 °C a 60 °C durante 1 a 24 horas em uma solução contendo SSC, um agente tensoativo, formamida, sulfato de dextrano, agente de bloqueio, etc. Neste contexto, SSC 1 x é uma solução aquosa (pH 7,0) contendo 150 mM de cloreto de sódio e 15 mM de citrato de sódio. O tensoativo inclui, por exemplo, SDS (dodecilsulfato de sódio), Triton, ou Tween. As condições de hibridização envolvem mais preferivelmente 3 a 10 x SSC e 0,1 a 1% de SDS. Exemplos das condições da lavagem, após a hibridização, que é outra condição para definir as condições de estringência, podem incluir condições que envolvem a lavagem contínua a 30 °C em uma solução contendo SSC 0,5x e 0,1% de SDS, a 30 °C em uma solução contendo SSC 0,2x e 0,1% de SDS, e a 30 °C em uma solução de SSC 0,05x. É desejável que a fita complementar mantenha o seu estado hibridizado com uma fita positiva alvo mesmo pela lavagem sob tais condições. Especificamente, exemplos de tal fita complementar podem incluir uma fita constituída por uma sequência nucleotídica em uma relação completamente complementar com a sequência nucleotídica da fita positiva alvo e uma fita constituída por uma sequência nucleotídica possuindo pelo menos 80%, de preferência pelo menos 85%, mais preferencialmente pelo menos 90% ou pelo menos 95%, por exemplo, pelo menos 98% ou pelo menos 99% de identidade com a fita.

[0548] Outros exemplos de “condições estringentes” para hibridização estão descritos em, por exemplo, Sambrook, J. e Russel, D., Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, publicado em 15 de Janeiro de 2001, Vol. 1, 7,42-7,45 e Vol. 2, 8,98,17, e podem ser utilizado na presente invenção.

[0549] Exemplos das condições para a realização da PCR utilizando um fragmento de polinucleotídeo no kit da presente invenção como primer incluem o tratamento durante aproximadamente 15 segundos a 1 minuto, a 5 a 10 °C mais um valor Tm calculado a partir da sequência do primer, utilizando um tampão de PCR com uma composição como 10 mM de Tris-HCl (pH 8,3), 50 mM de KCl, e 1 a 2 mM de MgCl2. Os exemplos do método para calcular tal valor Tm incluem valor Tm = 2 x (o número de resíduos de adenina + o número de resíduos de timina) + 4 x (o número de resíduos de guanina + o número de resíduos de citosina).

[0550] No caso de se utilizar a RT-PCR quantitativa, pode ser utilizado um kit comercialmente disponível para a medição especialmente concebido para a medição quantitativa de miRNA, tal como TaqMan™ MicroRNA Assay (Life Technologies Corp.), PCR de microRNA baseado em LNA (LNA™-based MicroRNA PCR) (Exiqon) , ou o kit Ncode™ miRNA qRT-PCT (Invitrogen Corp.).

[0551] Para o cálculo dos níveis de expressão gênica, o tratamento estatístico descrito, por exemplo, em Statistical analysis of gene expression microarray data (Speed T., Chapman e Hall/CRC), e A beginner's guide Microarray gene expression data analysis (Causton H.C. et al. , Blackwell) pode ser utilizado na presente invenção, embora o método de cálculo não seja limitado a estes. Por exemplo, duas vezes, de preferência 3 vezes, mais preferivelmente 6 vezes o desvio padrão dos valores de medição dos spots em branco é adicionado ao valor de medição médio dos spots brancos no chip de DNA, e spots de sonda com valor de sinal igual ou maior do que o valor resultante podem ser considerados como spots de detecção. Alternativamente, o valor médio da medição dos spots em brancos é considerado como fundo e pode ser subtraído dos valores de medição dos spots de sonda para determinar os níveis de expressão gênica. Um valor ausente para um nível de expressão do gene pode ser excluído do analito, de preferência substituído pelo menor valor do nível de expressão do gene em cada chip de DNA, ou mais preferencialmente substituído por um valor obtido pela subtração de 0,1 a partir de um valor logarítmico do menor valor do nível de expressão do gene. A fim de eliminar genes de baixo sinal, apenas um gene possuindo um nível de expressão de 26, de preferência 28, mais preferencialmente 210 ou mais em 20% ou mais, de preferência 50% ou mais, mais preferivelmente 80% ou mais do número de amostras de medição pode ser selecionado como analito. Exemplos da normalização do nível de expressão de genes incluem, mas não estão limitados a, normalização global e normalização por quantil (Bolstad, B.M. et al., 2003, Bioinformatics, Vol. 19, p. 185-193).

[0552]A presente invenção também provê um método que compreende a medição de gene alvo ou do nível de expressão do gene em uma amostra de um sujeito utilizando o polinucleotídeo, kit ou dispositivo (por exemplo, chip) para a detecção da presente invenção, ou uma combinação dos mesmos, a preparação de uma discriminante (função discriminante) com níveis de expressão gênica em uma amostra derivada de um paciente com câncer de pulmão e uma amostra de um sujeito saudável como amostras de supervisão, e a determinação ou a avaliação da presença e/ou ausência do gene derivado do câncer de pulmão na amostra.

[0553] Especificamente, a presente invenção provê ainda o método compreendendo: uma primeira etapa de medição de um nível de expressão in vitro de um gene alvo (ácido nucleico alvo) em múltiplas amostras conhecidas para determinar ou avaliar a presença e/ou ausência de genes derivados do câncer de pulmão nas amostras, usando o polinucleotídeo, kit ou dispositivo (por exemplo, chip) para detecção da presente invenção, ou uma combinação destes; uma segunda etapa de construção de uma discriminante com os valores de medição do nível de expressão de genes alvo (ácidos nucleicos alvos) que foram obtidos na primeira etapa como amostras de supervisão da expressão; uma terceira etapa de medição do nível de expressão in vitro dos genes-alvo em uma amostra derivada de um sujeito, da mesma forma como na primeira etapa; e uma quarta etapa de atribuição de valores de medição do nível de expressão de genes alvo obtidos na terceira etapa para a discriminante obtida na segunda etapa de expressão, e a determinação ou avaliação da presença e/ou ausência dos genes derivados do câncer de pulmão na amostra com base nos resultados obtidos a partir da função discriminante, em que o gene alvo pode ser detectado usando o polinucleotídeo, ou usando um polinucleotídeo para a detecção, que estava contido no polinucleotídeo, kit ou dispositivo (por exemplo, chip). Neste contexto, a discriminante pode ser preparada pelo uso da análise discriminante de Fisher, análise discriminante linear com base na distância de Mahalanobis, rede neural, máquina de vetores de suporte (SVM, do inglês: Support Vector Machine), ou semelhantes, embora o método não esteja limitado a estes.

[0554]Quando um limite de agrupamento (clustering) é uma linha reta ou um hiperplano, a análise discriminante linear é um método para determinar a associação de um grupo (cluster) usando a Fórmula 1 como discriminante. Na Fórmula 1, x representa uma variável explicativa, w representa um coeficiente da variável explicativa, e w0 representa um termo constante.

[0555]Os valores obtidos a partir da função discriminante são referidos com escores discriminantes. Os valores de medição de um conjunto de dados recém oferecido podem ser atribuídos como variáveis explicativas para a discriminante para determinar conjuntos ou agrupamentos (clusters) pelos sinais dos escores discriminantes.

[0556]A análise discriminante de Fisher, um tipo de análise discriminante linear, é um método de redução da dimensionalidade para a seleção de uma dimensão adequada para discriminação de classes, e constrói uma variável sintética altamente discriminante concentrando-se na variância das variáveis sintéticas e minimizando a variância de dados possuindo o mesmo rótulo (Venables, W.N. et al., Modern Applied Statistics with S. quarta edição. Springer, 2002). Na análise discriminante linear de Fisher, a direção w de projeção é determinada a fim de maximizar a Fórmula 2. μ representa uma entrada média, ng representa o número de dados associados com a classe g, e μg representa uma entrada média dos dados associados com a classe g. O numerador e denominador são a variância interclasse e variância intraclasse, respectivamente, quando cada dado é projetado na direção do vetor w. O coeficiente discriminante wi é determinado pela maximização desta relação (Takafumi Kanamori et al., “Pattern Recognition”, Kyoritsu Shuppan Co., Ltd. (2009); e Richard O. et al., Pattern Classification Segunda Edição., Wiley-Interscience, 2000).

[0557]A distância de Mahalanobis é calculada de acordo com a Fórmula 3 na consideração de correlação de dados e pode ser usada como análise discriminante não linear para a determinação de um grupamento (cluster) que exibe uma distância de Mahalanobis mais próxima a partir de cada grupamento. Nessa Fórmula 3, μ representa um vetor central de cada cluster, e S-1 representa uma matriz inversa da matriz de covariância do grupamento (cluster). O vetor central é calculado a partir de variáveis explicativas X, e um vetor médio, um vetor de valor mediano, ou similar pode ser utilizado.

[0558]SVM é um método de análise discriminante concebido por V. Vapnik (The Nature of Statistical Leaning Theory, Springer, 1995). Pontos de dados específicos de um conjunto de dados com classes conhecidas são definidos como variáveis explicativas, e as classes são definidas como variáveis objetivas. Um plano limite denominado hiperplano para classificar corretamente os dados estabelecidos para as classes conhecidas é determinado, e uma discriminante para a classificação de dados é determinada usando o plano limite. Em seguida, os valores de medição de um conjunto de dados recém oferecidos podem ser atribuídos como variáveis explicativas para a discriminante para determinar classes. A este respeito, os resultados da análise discriminante podem ser classes, podem ser uma probabilidade de dados a serem classificados em classes corretas, ou podem ser a distância a partir do hiperplano. No SVM, um método de conversão não linear de um vetor característico de alta dimensão e execução da discriminante linear no espaço é conhecido como método para abordar problemas não lineares. Uma expressão na qual um produto interno de dois fatores em um espaço não linearmente mapeado é expresso apenas pelas entradas em seus espaços originais é denominada kernel (núcleo). Exemplos do kernel (núcleo) podem incluir um kernel linear, um kernel RBF (Função de Base Radial (do inglês ”Radial Basis Function”)), e um kernel gaussiano. Embora o mapeamento altamente dimensional seja realizado de acordo com o kernel, a discriminante ótima, ou seja, uma discriminante, pode ser realmente construída por mero cálculo de acordo com o kernel, o que evita cálculos característicos no espaço mapeado (por exemplo, Hideki Aso et al., Frontier of Statistical Science 6 “Statistics of pattern recognition and learning - New concepts and approaches”, Iwanami Shoten, Publishers, (2004); Nello Cristianini et al., Introduction to SVM, Kyoritsu Shuppan Co., Ltd., (2008)).

[0559]A classificação por vetor suporte - C (C-SVC), um tipo de SVM, envolve a preparação de um hiperplano pela supervisão com as variáveis explicativas de dois grupos e classificação de um conjunto de dados desconhecidos em qualquer um dos grupos (C. Cortes et al. de 1995, Machine Learning, Vol. 20, p. 273-297).

[0560] Exemplos de cálculo de C-SVC discriminante que podem ser utilizados no método da presente invenção serão fornecidos a seguir. Em primeiro lugar, todos os sujeitos são divididos em dois grupos, ou seja, um grupo de pacientes com câncer de pulmão e um grupo de sujeitos saudáveis. Por exemplo, o exame do tecido de pulmão pode ser utilizado para obter uma referência sob o qual cada sujeito é confirmado como um paciente com câncer de pulmão ou como um sujeito saudável.

[0561] Em seguida, é preparado um conjunto de dados consistindo de níveis de expressão de genes completos de amostras derivadas de soro dos dois grupos divididos (daqui em diante este conjunto de dados é referido como coorte de desenvolvimento), e uma C- SVC discriminante é determinada usando genes que foram encontrados por diferirem claramente em seus níveis de expressão entre os dois grupos como variáveis explicativas e utilizando este agrupamento como variáveis objetivas (por exemplo, -1 e +1). Uma função objetiva de otimização é representada pela Fórmula 4, em que e representa todos os vetores de entrada, y representa uma variável objetiva, a representa um vetor multiplicador de Lagrange indeterminado, Q representa uma matriz definida positiva, e C representa um parâmetro para ajustar as condições restritas.

[0562]A fórmula 5 é uma discriminante finalmente obtida, e um grupo associado pode ser determinado com base no sinal de um valor obtido de acordo com a discriminante. Nessa fórmula, x representa um vetor de suporte, y representa um marcador que indica a associação a um determinado grupo, a representa o coeficiente correspondente, b representa um termo constante, e K representa uma função do núcleo (kernel).

[0563] Por exemplo, um kernel RBF definido pela Fórmula 6 pode ser usado como a função de kernel. Nessa Fórmula, X representa um vetor de suporte, e Y representa um parâmetro de kernel para ajustar a complexidade do hiperplano.

[0564] Além disso, abordagens como rede neural, algoritmos k-vizinhos mais próximos, árvores de decisões, ou análise de regressão logística podem ser selecionadas como um método para a determinação ou avaliação da presença e/ou ausência de expressão de gene(s) alvo derivado(s) do câncer de pulmão em uma amostra derivada de um sujeito, ou para avaliar o nível de expressão do mesmo pela comparação com um controle derivado de um sujeito saudável.

[0565] O método da presente invenção pode compreender, por exemplo, as seguintes etapas (a), (b), e (c): (a) uma etapa de medição de um nível de expressão de gene(s)- alvo em tecidos contendo genes derivados do câncer de pulmão derivados de pacientes com câncer de pulmão e/ou amostras que já são sabidas por não conterem genes derivados do câncer de pulmão a partir de sujeitos saudáveis, utilizando o polinucleotídeo, kit ou dispositivo (por exemplo, chip de DNA) para a detecção de acordo com a presente invenção; (b) uma etapa de preparação dos discriminantes de Fórmulas 1 a 3, 5, 6 e descritos acima a partir dos valores de medição do nível de expressão mensurados na etapa (a); e (c) uma etapa de medição de um nível de expressão do(s) gene(s)-alvo em uma amostra derivada de um sujeito utilizando o polinucleotídeo, kit, ou dispositivo (por exemplo, chip de DNA) para a detecção de acordo com a presente invenção, atribuindo o valor de medição obtido nas discriminantes preparadas na etapa (b), e determinando ou avaliando a presença e/ou ausência de expressão do gene- alvo derivado do câncer de pulmão na amostra, ou avaliando os níveis de expressão do gene pela comparação com um controle derivado de um sujeito saudável, com base nos resultados obtidos.

[0566] Neste contexto, nos discriminantes de Fórmulas 1 a 3, 5, e 6, x representa uma variável explicativa e inclui um valor obtido pela medição de um polinucleotídeo selecionado a partir dos polinucleotídeos descritos na Seção 2 acima, ou um fragmento destes, etc. Especificamente, a variável explicativa para discriminar um paciente com câncer de pulmão a partir de um sujeito saudável de acordo com a presente invenção é(são) o(s) nível(eis) de expressão gênica selecionado(s) a partir de, por exemplo, os seguintes níveis de expressão de (1) a (3): (1) um nível de expressão gênica no soro de um paciente com câncer de pulmão ou de um sujeito saudável mensurado por qualquer DNA compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134 e 561 a 578 ou um sequência complementar, e (2) um nível de expressão gênica no soro de um paciente com câncer de pulmão ou de um sujeito saudável mensurado por qualquer DNA compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579 ou um sequência complementar, e (3) um nível de expressão gênica no soro de um paciente com câncer de pulmão ou de um sujeito saudável mensurado por qualquer DNA compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos de uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174 ou um sequência complementar a estas.

[0567] Tal como descrito acima, para o método de determinação ou avaliação da presença e/ou ausência de um gene derivado de câncer de pulmão em uma amostra derivada de um sujeito, a preparação de uma discriminante requer uma discriminante preparada em uma coorte de desenvolvimento. Para melhorar a acurácia da discriminante, é necessário que a discriminante utilize genes que exibam clara diferença entre dois grupos na coorte de desenvolvimento.

[0568] Cada gene que é utilizado para uma variável explicativa em uma discriminante é preferencialmente determinado da seguinte forma. Em primeiro lugar, os níveis de expressão de genes abrangentes de um grupo de pacientes com câncer de pulmão e os níveis de expressão de genes abrangentes de um grupo de sujeitos saudáveis em uma coorte de desenvolvimento, são usados como conjunto de dados, o grau de diferença no nível de expressão de cada gene entre os dois grupos é determinado pelo uso, por exemplo, do valor P do teste t, que é a análise paramétrica, ou o valor P do teste U de Mann-Whitney ou teste de Wilcoxon, que são análises não paramétricas.

[0569] O gene pode ser considerado como sendo estatisticamente significativo quando a taxa crítica (nível de significância) do valor P obtido pelo teste é menor do que, por exemplo, 5%, 1%, ou 0,01%.

[0570] A fim de corrigir um aumento da probabilidade de erro tipo I atribuído à repetição de um teste, um método conhecido no estado da técnica, por exemplo, método de Bonferroni ou de Holm, pode ser utilizado para a correção (por exemplo, Yasushi Nagata et al., “Basics of statistical multiple comparison methods”, Scientist Press Co., Ltd. (2007). Como um exemplo da correção de Bonferroni, por exemplo, o valor de P obtido por um teste é multiplicado pelo número de repetições do teste, ou seja, o número de genes utilizados na análise, e valor obtido pode ser comparado com um nível desejado de significância para suprimir uma probabilidade de causar erros do tipo I em todo o teste.

[0571] Em vez do teste estatístico, o valor absoluto (mudança em vezes) de uma taxa de expressão de um valor mediano de cada nível de expressão do gene entre os níveis de expressão de um grupo de pacientes com câncer de pulmão e os níveis de expressão de um grupo de sujeitos saudáveis pode ser calculado para selecionar um gene que é usado para uma variável explicativa em uma discriminante. Alternativamente, as curvas ROC podem ser preparadas utilizando os níveis de um grupo de pacientes com câncer de pulmão e um grupo de sujeitos saudáveis, e um gene que é utilizado para uma variável explicativa em uma discriminante pode ser selecionado com base em um valor AUROC.

[0572] Em seguida, uma discriminante que pode ser calculada por vários métodos descritos acima é preparada utilizando qualquer número de genes que possui grande diferença em seus níveis de expressão aqui determinado. Exemplos do método para a construção de uma discriminante que produz a maior acurácia discriminatória incluem um método de construção de uma discriminante em cada combinação de genes que satisfaça o nível de significância de valor P, e um método de avaliação repetitiva dos genes para utilização na construção de uma discriminante enquanto aumenta o número de genes para uso, um por um, em uma ordem descendente de diferença no nível de expressão gênica (Furey T.S. et al., 2000, Bioinformatics., Vol. 16, p. 906-14). Um nível de expressão do gene de outro paciente com câncer de pulmão independente ou sujeito saudável é atribuído como variável explicativa a esta discriminante para calcular os resultados discriminantes do grupo ao qual este paciente com câncer de pulmão independente ou sujeito saudável está associado. Especificamente, o conjunto de genes encontrados para o diagnóstico e a discriminante construída utilizando o gene definido para diagnóstico pode ser avaliado em um grupo de amostras independentes para encontrar um conjunto de genes mais universal para o diagnóstico capaz de detectar o câncer de pulmão e um método mais universal para a discriminação do câncer de pulmão.

[0573] O método split-sample (amostras divididas) é preferencialmente utilizado para avaliar o desempenho discriminante (generalidade) da discriminante. Especificamente, um conjunto de dados é dividido em uma coorte de desenvolvimento e uma coorte de validação, e a seleção do gene por um teste estatístico e preparação da discriminante são realizados utilizando a coorte de desenvolvimento. A acurácia, sensibilidade e especificidade são calculadas utilizando resultados da discriminação de uma coorte de validação de acordo com a discriminante, e um grupo verdadeiro ao qual a coorte de validação está associada, para avaliar o desempenho da discriminante. Por outro lado, em vez de dividir um conjunto de dados, a seleção do gene por um teste estatístico e preparação da discriminante podem ser realizadas utilizando todas as amostras, e a acurácia, sensibilidade e especificidade podem ser calculadas pela discriminante de amostras recém preparadas de acordo com a discriminante para avaliar o desempenho da discriminante.

[0574] A presente invenção provê polinucleotídeos para a detecção e para o diagnóstico de doença úteis no diagnóstico e tratamento do câncer de pulmão, um método para detectar o câncer de pulmão utilizando o polinucleotídeo, e um kit e um dispositivo para a detecção do câncer de pulmão, compreendendo o polinucleotídeo. Particularmente, a fim de selecionar um gene para o diagnóstico e preparar uma discriminante de modo a exibir acurácia que é superior a um método diagnóstico do câncer de pulmão que utiliza marcadores tumorais CEA existentes, um conjunto de genes para o diagnóstico e uma discriminante para o método da presente invenção podem ser construídos, exibindo acurácia superior ao do CEA, por exemplo, pela comparação de genes expressos no soro derivados de um paciente confirmado como negativo utilizando o marcador CEA, mas que finalmente foi diagnosticado com câncer de pulmão por exame mais detalhado, tal como por tomografia computadorizada utilizando um meio de contraste, com genes expressos no soro derivado de um paciente que não tem câncer de pulmão.

[0575] Por exemplo, o conjunto de genes para o diagnóstico é definido como qualquer combinação selecionada a partir de um ou dois ou mais polinucleotídeos com base em uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência complementar a estas sequências conforme descrito acima, opcionalmente, um ou dois ou mais dos polinucleotídeos com base em uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131 e 579, ou uma sequência complementar a estas sequências, e, opcionalmente, um ou dois ou mais dos polinucleotídeos com base em uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência complementar a estas sequências. Além disso, uma discriminante é construída utilizando os níveis de expressão do conjunto de genes para o diagnóstico em amostras derivadas de pacientes com câncer de pulmão classe I e amostras derivadas de sujeitos saudáveis de classe II como um resultado de diagnóstico feito com o tecido. Como resultado, a presença ou ausência de genes derivados do câncer de pulmão em uma amostra desconhecida pode ser determinada com uma acurácia de 100% no máximo pela medição dos níveis de expressão do conjunto de genes para o diagnóstico na amostra desconhecida.

EXEMPLOS

[0576] A seguir, a presente invenção será adicionalmente descrita de forma específica com referência aos exemplos. Entretanto, não é pretendido que o escopo da presente invenção se limite a estes Exemplos. EXEMPLO DE REFERÊNCIA 1 COLETA DE AMOSTRAS DE PACIENTE COM CÂNCER DE PULMÃO E SUJEITOS SAUDÁVEIS

[0577] O soro foi coletado usando o tubo para coleta de sangue a vácuo VENOJECT II VP-AS109K60 (Terumo Corp.) de cada um dos 100 sujeitos saudáveis e 17 pacientes com câncer de pulmão (8 casos de adenocarcinoma de pulmão envolvendo 6 casos T2N0M0, 1 caso T2N1M0, e 1 caso T2N2M0 e 8 casos de câncer de células escamosas envolvendo 5 casos T2N0M0, 1 caso T4N0M0, 1 caso T2N1M0, e 1 caso T4N2M0) confirmados como não tendo outro câncer primário além do câncer de pulmão após a aquisição do consentimento informado, e utilizados como uma coorte de desenvolvimento. Da mesma forma, o soro foi coletado usando o tubo para coleta de sangue a vácuo VENOJECT II VP-AS109K60 (Terumo Corp.) de cada um dos 50 sujeitos saudáveis e 8 pacientes com câncer de pulmão (5 casos de adenocarcinoma de pulmão envolvendo 3 casos com T2N0M0, 1 caso com T3N0M0, e 1 caso com T4N2M0; e 3 casos de câncer de células escamosas envolvendo 5 casos com T2N0M0, 1 caso com T4N0M0, 1 caso com T2N1M0, e 1 caso com estadiamento T4N2M0) confirmados como não tendo outro câncer primário além do câncer de pulmão após a aquisição do consentimento informado, e foram usados como uma coorte de validação. Os tipos histológicos e os estádios destas amostras de câncer de pulmão encontram-se resumidos nas Tabelas 2-1 e 2-2.

EXTRAÇÃO DE RNA TOTAL

[0578] O RNA total foi obtido a partir de 300 μL da amostra de soro obtida de cada uma dos 175 sujeitos no total de 150 sujeitos saudáveis e 25 pacientes com câncer de pulmão incluídos na coorte de desenvolvimento e coorte de validação, utilizando um reagente para a extração do kit de extração de RNA ‘3D-Gene RNA®’ a partir de amostras líquidas (Toray Industries, Inc.) seguindo o protocolo fornecido pelo fabricante.

MEDIÇÃO DO NÍVEL DE EXPRESSÃO GÊNICA

[0579] miRNAs no RNA total obtido a partir das amostras de soro de cada uma das 175 pessoas em um total de 150 sujeitos saudáveis e 25 pacientes com câncer de pulmão incluídos na coorte de desenvolvimento e coorte de validação foram marcados com fluorescência utilizando o kit de marcação de miRNA “3D-Gene® miRNA Labeling kit” (Toray Industries, Inc.) de acordo com o protocolo (versão 2.20) fornecido pelo fabricante. O chip de oligo DNA utilizado foi o 3D-Gene™ Human miRNA Oligo (Toray Industries, Inc.) com sondas ligadas possuindo sequências complementares aos 2.555 miRNAs entre os miRNAs registrados na miRBase Release 20. A hibridização entre miRNAs no RNA total e as sondas sobre o chip de DNA sob condições estringentes e lavagem após a hibridização foram realizadas de acordo com o protocolo fornecido pelo fabricante. O chip de DNA foi digitalizado usando um 3D-Gene™ Scanner (Toray Industries, Inc.) para obter as imagens. A intensidade de fluorescência foi digitalizada utilizando o 3D-Gene™ Extraction (Toray Industries, Inc.). As intensidades de fluorescência digitalizadas foram convertidas para um valor logarítmico possuindo base 2 e usadas como nível de expressão gênica, a partir das quais o valor de branco foi subtraído. Valores ausentes foram substituídos por um valor obtido pela subtração de 0,1 a partir de um a valor logarítmico do menor valor do nível de expressão gênica em cada chip de DNA. Como resultado, os níveis de expressão compreensivos dos miRNAs no soro foram obtidos para os 25 pacientes com câncer de pulmão e 150 sujeitos saudáveis. O cálculo e análise estatística, utilizando os níveis de expressão gênica digitalizados a partir dos miRNAs foram realizados utilizando os programas R language 3.0.2 (R Development Core Team (2013) R: A language and environment for statistical computing. R Foundation for Statistical Computing, URL http://www.R-project.org/.) e MASS package 7.3-30 (Venables, W. N. & Ripley, B. D. (2002) Modern Applied Statistics with S. Quarta Edição. Springer, Nova Iorque. ISBN 0-387-95457-0).

EXEMPLO DE REFERÊNCIA 2 COLETA DE AMOSTRAS DE PACIENTES COM OUTROS CÂNCERES QUE NÃO O CÂNCER DE PULMÃO

[0580] O soro foi coletado usando o tubo de coleta de sangue a vácuo VENOJECT II VP-AS109K60 (Terumo Corp.) de cada um dos 75 pacientes com câncer de pâncreas, 62 pacientes com câncer do trato biliar, 32 pacientes com câncer colorretal, 35 pacientes com câncer de estômago, 32 pacientes com câncer de esôfago, 33 pacientes com câncer de fígado e 13 pacientes com doença pancreatobiliar benigna que foram confirmados como sendo pacientes que não possuem câncer em outros órgãos após a obtenção do consentimento informado, e usados como uma coorte de desenvolvimento juntamente com as amostras de 17 pacientes com câncer de pulmão e 99 sujeitos saudáveis do Exemplo de Referência 1. Da mesma forma, foi coletado o soro usando tubo de coleta de sangue a vácuo VENOJECT II VP- AS109K60 (Terumo Corp.) de cada um dos 28 pacientes com câncer de pâncreas, 38 pacientes com câncer do trato biliar, 18 pacientes com câncer colorretal, 15 pacientes com câncer de estômago, 18 pacientes com câncer de esôfago e 19 pacientes com câncer de fígado e 8 pacientes com doença pancreatobiliar benigna que foram confirmados como sendo pacientes não possuindo outros cânceres após a obtenção do consentimento informado, e usados como uma coorte de validação juntamente com as amostras de 8 pacientes com câncer de pulmão confirmados como sendo pacientes que não possuem câncer em outros órgãos exceto o câncer de pulmão e 51 sujeitos saudáveis do Exemplo de Referência 1. As operações subsequentes foram realizadas da mesma forma que no Exemplo de Referência 1. TABELA 2-1: COORTE DE DESENVOLVIMENTO TABELA 2-2: COORTE DE VALIDAÇÃO EXEMPLO 1 SELEÇÃO DE GENE MARCADOR UTILIZANDO AMOSTRAS NA COORTE DE DESENVOLVIMENTO E MÉTODO PARA AVALIAÇÃO DO DESEMPENHO DISCRIMINANTE DO CÂNCER DE PULMÃO DE UM ÚNICO GENE MARCADOR USANDO AMOSTRAS DA COORTE DE VALIDAÇÃO

[0581] Neste exemplo, um gene marcador para discriminar um paciente com câncer de pulmão a partir de um sujeito saudável foi selecionado a partir da coorte de desenvolvimento e estudado nas amostras da coorte de validação independente da coorte de desenvolvimento, para um método para avaliar o desempenho discriminante do câncer de pulmão de cada gene marcador selecionado sozinho.

[0582] Especificamente, em primeiro lugar, os níveis de expressão de miRNA na coorte de desenvolvimento e coorte de validação obtidos nos exemplos de referência anteriores foram combinados e normalizados por normalização quantil.

[0583] Em seguida, os genes para diagnóstico foram selecionados na coorte de desenvolvimento. Aqui, a fim de adquirir marcadores diagnósticos com maior fiabilidade, foram selecionados apenas os genes possuindo um nível de expressão gênica de 26 ou mais em 50% ou mais das amostras no grupo de pacientes com câncer de pulmão ou grupo de sujeitos saudáveis da coorte de desenvolvimento foram selecionados da coorte de desenvolvimento. A fim de adquirir mais genes estatisticamente significativos para discriminar um grupo de pacientes com câncer de pulmão do grupo de sujeitos saudáveis, o valor P obtido pelo teste t bicaudal assumindo variâncias iguais como para cada nível de expressão gênica foi corrigido pelo método de Bonferroni, e os genes cujo p satisfez um valor < 0,01 foram adquiridos como genes marcadores para utilização em variáveis explicativas de uma discriminante. O resultado está descrito na Tabela 3.

[0584] Dessa forma, hsa-miR-6768-5p, hsa-miR-6836-3p, hsa- miR-6782-5p, hsa-miR-3663-3p, hsa-miR-1908-3p, hsa-miR-6726-5p, hsa- miR-4258, hsa-miR-1343-3p, hsa-miR-4516, hsa-miR-6875-5p, hsa-miR- 4651, hsa-miR-6825-5p, hsa-miR-6840-3p, hsa-miR-6780b-5p, hsa-miR-6749- 5p, hsa-miR-8063, hsa-miR-6784-5p, hsa-miR-3679-5p, hsa-miR-3184-5p, hsa-miR-663b, hsa-miR-6880-5p, hsa-miR-1908-5p, hsa-miR-92a-2-5p, hsa- miR-7975, hsa-miR-7110-5p, hsa-miR-6842-5p, hsa-miR-6857-5p, hsa-miR- 5572, hsa-miR-3197, hsa-miR-6131, hsa-miR-6889-5p, hsa-miR-4454, hsa- miR-1199-5p, hsa-miR-1247-3p, hsa-miR-6800-5p, hsa-miR-6872-3p, hsa- miR-4649-5p, hsa-miR-6791-5p, hsa-miR-4433b-3p, hsa-miR-3135b, hsa- miR-128-2-5p, hsa-miR-4675, hsa-miR-4472, hsa-miR-6785-5p, hsa-miR- 6741-5p, hsa-miR-7977, hsa-miR-3665, hsa-miR-128-1-5p, hsa-miR-4286, hsa-miR-6765-3p, hsa-miR-4632-5p, hsa-miR-365a-5p, hsa-miR-6088, hsa- miR-6816-5p, hsa-miR-6885-5p, hsa-miR-711, hsa-miR-6765-5p, hsa-miR- 3180, hsa-miR-4442, hsa-miR-4792, hsa-miR-6721-5p, hsa-miR-6798-5p, hsa-miR-3162-5p, hsa-miR-6126, hsa-miR-4758-5p, hsa-miR-2392, hsa-miR- 486-3p, hsa-miR-6727-5p, hsa-miR-4728-5p, hsa-miR-6746-5p, hsa-miR- 4270, hsa-miR-3940-5p, hsa-miR-4725-3p, hsa-miR-7108-5p, hsa-miR-3656, hsa-miR-6879-5p, hsa-miR-6738-5p, hsa-miR-1260a, hsa-miR-4446-3p, hsa- miR-3131, hsa-miR-4463, hsa-miR-3185, hsa-miR-6870-5p, hsa-miR-6779- 5p, hsa-miR-1273g-3p, hsa-miR-8059, hsa-miR-4697-5p, hsa-miR-4674, hsa- miR-4433-3p, hsa-miR-4257, hsa-miR-1915-5p, hsa-miR-4417, hsa-miR- 1343-5p, hsa-miR-6781-5p, hsa-miR-4695-5p, hsa-miR-1237-5p, hsa-miR- 6775-5p, hsa-miR-7845-5p, hsa-miR-4746-3p, hsa-miR-7641, hsa-miR-7847- 3p, hsa-miR-6806-5p, hsa-miR-4467, hsa-miR-4726-5p, hsa-miR-4648, hsa- miR-6089, hsa-miR-1260b, hsa-miR-4532, hsa-miR-5195-3p, hsa-miR-3188, hsa-miR-6848-5p, hsa-miR-1233-5p, hsa-miR-6717-5p, hsa-miR-3195, hsa- miR-6757-5p, hsa-miR-8072, hsa-miR-4745-5p, hsa-miR-6511a-5p, hsa-miR- 6776-5p, hsa-miR-371a-5p, hsa-miR-1227-5p, hsa-miR-7150, hsa-miR-1915- 3p, hsa-miR-187-5p, hsa-miR-614, hsa-miR-19b-3p, hsa-miR-1225-5p, hsa- miR-451a, hsa-miR-939-5p, hsa-miR-223-3p, hsa-miR-1228-5p, hsa-miR- 125a-3p, hsa-miR-92b-5p, e hsa-miR-22-3p genes, e polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas de SEQ ID NOs: 1 a 134 relacionadas com o mesmo foram encontrados.

[0585] Entre eles, os genes recentemente encontrados como marcadores para analisar a presença ou ausência do câncer de pulmão são polinucleotídeos que consistem das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, e 132 a 134.

[0586] Uma discriminante para a determinação da presença ou ausência do câncer de pulmão foi adicionalmente preparada pela análise discriminante de Fisher com os níveis de expressão destes genes como um índice. Especificamente, qualquer polinucleotídeo recém-descoberto consistindo de uma sequência nucleotídica representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 1 a 134 encontrada na coorte de desenvolvimento foi aplicado à Fórmula 2 acima para construir uma discriminante. A acurácia, sensibilidade e especificidade calculadas estão apresentadas na Tabela 4. A este respeito, um coeficiente discriminante e um termo constante são mostrados na Tabela 5.

[0587] A acurácia, sensibilidade e especificidade na coorte de validação foram calculadas utilizando a discriminante assim preparada, e o desempenho discriminante dos polinucleotídeos selecionados foi validado usando amostras independentes (Tabela 4). Por exemplo, o valor de medição do nível de expressão da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 1 foi comparado entre os sujeitos saudáveis (100 pessoas) e os pacientes com câncer de pulmão (17 pessoas) na coorte de desenvolvimento. Como resultado, os valores de medição do nível de expressão gênica foram encontrados como sendo significativamente menores no grupo de pacientes com câncer de pulmão do que no grupo de sujeitos saudáveis (vide o diagrama da esquerda da Figura 2). Estes resultados também foram reprodutíveis para os sujeitos saudáveis (50 pessoas) e pacientes com câncer de pulmão (8 pessoas) na coorte de validação (vide o diagrama da direita da Figura 2). Da mesma forma, os resultados obtidos sobre os outros polinucleotídeos mostrados nas SEQ ID NOs: 2 a 134 mostraram que os valores de medição do nível de expressão gênica foram significativamente menores (-) ou maiores (+) no grupo de pacientes com câncer de pulmão do que no grupo de sujeitos saudáveis (Tabela 3). Estes resultados puderam ser validados na coorte de validação. Por exemplo, como para esta sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 1, o número de amostras corretamente identificadas na detecção do câncer de pulmão foi calculado usando o limiar (10,08) que foi definido na coorte de desenvolvimento e discriminado entre os dois grupos. Como resultado, foram obtidos 7 verdadeiros positivos, 50 verdadeiros negativos, 0 falso positivo e 1 falso negativo. A partir destes valores, foram obtidos 98,3% de acurácia, 87,5% de sensibilidade, e 100% de especificidade de detecção. Desta forma, o desempenho da detecção foi calculado para todos os polinucleotídeos apresentados nas SEQ ID NOs: 1 a 134, e descritos na Tabela 4.

[0588] Por exemplo, 33 polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1, 2, 3, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 26, 27, 28, 29, 33, 34, 38, 41, 42, 44, 65, 124, 125, e 133 exibiram sensibilidade de 87,5%, 100%, 100%, 75%, 75%, 75%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 100%, 75%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 87,5%, 75%, 87,5%, 75%, 75%, 75%, 75%, 75%, 75% e 75% respectivamente, na coorte de validação (Tabela 4). Neste contexto, os marcadores tumorais CEA e CYFRA21-1 no sangue para câncer de pulmão supostamente têm uma sensibilidade geral para a detecção do câncer de pulmão de 69% e 43%, respectivamente (literatura não patentária 3). Estes resultados demonstraram que os 33 polinucleotídeos que consistem das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1, 2, 3, 5, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 22, 26, 27, 28, 29, 33, 34, 38, 41, 42, 44, 65, 124, 125 e 133 podem discriminar, sozinhos, o câncer de pulmão na coorte de validação com sensibilidade superior ao dos marcadores existentes, CEA e CYFRA21-1.

[0589] Por exemplo, 10 polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 2, 3, 11, 13, 20, 21, 22, 30, 31, e 37 foram capazes de determinar corretamente o câncer de pulmão em todas as 4 amostras de adenocarcinoma de pulmão ou câncer de células escamosas com um tamanho de tumor inferior a 7 cm e não possuindo metástases em linfonodos, contidas na coorte de validação. Deste modo, estes polinucleotídeos podem detectar o câncer de pulmão mesmo relativamente precoce, e contribui para o diagnóstico precoce do câncer de pulmão. TABELA 3 EXEMPLO 2 MÉTODO PARA AVALIAR O DESEMPENHO DISCRIMINANTE DO CÂNCER DE PULMÃO PELA COMBINAÇÃO DE MÚLTIPLOS GENES MARCADORES UTILIZANDO AMOSTRAS NA COORTE DE VALIDAÇÃO

[0590] Neste Exemplo, foi estudado um método para avaliar o desempenho discriminante do câncer de pulmão por uma combinação dos genes marcadores selecionados no Exemplo 1. Especificamente, a análise discriminante de Fisher foi realizada de forma que 8.910 combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um ou mais dos valores de medição do nível de expressão de qualquer um dos polinucleotídeos recentemente encontrados consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, e 132 a 134, entre os polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 134 selecionados no Exemplo 1, para construir um discriminante para a determinação da presença ou ausência do câncer de pulmão. Em seguida, a acurácia, sensibilidade e especificidade na coorte de validação foram calculadas utilizando a discriminante assim preparada, e o desempenho discriminante dos polinucleotídeos selecionados foi validado usando as amostras independentes.

[0591] Por exemplo, os valores de medição do nível de expressão da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NO: 2 foram comparados entre os sujeitos saudáveis (100 pessoas) e os pacientes com câncer de pulmão (17 pessoas) na coorte de desenvolvimento. Como resultado, um diagrama de dispersão que separou significativamente os valores de medição do nível de expressão gênica do grupo de pacientes com câncer pulmão a partir do grupo de sujeitos saudáveis foi obtido (veja o diagrama esquerdo da Figura 3). Estes resultados também foram reprodutíveis para os sujeitos saudáveis (50 pessoas) e pacientes com câncer de pulmão (8 pessoas) na coorte de validação (vide o diagrama da direita da Figura 3). Do mesmo modo, um diagrama de dispersão que se separou significativamente os valores de medição do nível de expressão gênica do grupo de pacientes com câncer de próstata a partir do grupo de sujeitos saudáveis também foi obtido para as outras combinações de valores de medição do nível de expressão compreendendo, pelo menos, um ou mais dos valores de medição do nível de expressão de qualquer um dos polinucleotídeos recentemente encontrados consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 125, 127 a 130, e 132 a 134 entre os polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 134. Estes resultados puderam ser validados na coorte de validação. Por exemplo, para estas sequências nucleotídicas representadas pela SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NO: 2, o número de amostras corretamente identificadas na detecção do câncer de pulmão foi calculado usando a função (0 = -1,42x + y + 4,7) que foi estabelecida na coorte de desenvolvimento e discriminou entre os dois grupos. Como resultado, foram obtidos 7 verdadeiros positivos, 50 verdadeiros negativos, 0 falso positivo e 1 falso negativo. A partir destes valores, foram obtidos 98,3% de acurácia, 87,5% de sensibilidade, e 100% de especificidade de detecção. Desta forma, o desempenho da detecção foi calculado como para todas as combinações de dois valores de medição de nível de expressão compreendendo pelo menos um ou mais dos valores de medição do nível de expressão de qualquer um dos polinucleotídeos recentemente encontrados consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 1 a 125, 127 to 130, e 132 a 134 entre os polinucleotídeos que consistem das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 134. Dentre estas, 133 combinações compreendendo o valor de medição do nível de expressão do polinucleotídeo que consiste da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 1 e a eficácia de detecção desta foram descritas na Tabela 6 como um exemplo. Por exemplo, todas as 9 combinações dos valores de medição do nível de expressão dos polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 e 6, SEQ ID NOs: 1 e 11, SEQ ID NOs: 1 e 19, SEQ ID NOs: 1 e 34, SEQ ID NOs: 1 e 38, SEQ ID NOs: 1 e 52, SEQ ID NOs: 1 e 53, SEQ ID NOs: 1 e 56, e SEQ ID NOs: 1 e 113 exibiram sensibilidade de 100% na coorte de validação. Da mesma forma, todas as 133 combinações de dois polinucleotídeos consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 1 e uma sequência nucleotídica representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 2 a 134 exibiram uma sensibilidade de 75% ou maior. Estes valores de sensibilidade foram maiores do que a sensibilidade dos marcadores tumorais existentes CEA (69%) e CYFRA21-1 (43%) no sangue (literatura não patentária 3). Da mesma forma, 5.742 combinações dos valores de medição dos polinucleotídeos possuindo sensibilidade superior aos dos marcadores existentes CEA e CYFRA21-1 foram obtidos na coorte de validação. Todas as sequências de nucleotídeos de 1 a 134 descritas na Tabela 3, obtidas no Exemplo 1 foram utilizadas pelo menos uma vez nessas combinações. Assim, as combinações de dois polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 134 também produziram excelente sensibilidade de detecção do câncer de pulmão.

[0592] Marcadores para a detecção do câncer de pulmão com excelente sensibilidade são obtidos mesmo pela combinação adicional de 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ou mais valores de medição dos níveis de expressão dos polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 134. Por exemplo, os polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 134 selecionados no Exemplo 1 foram mensurados para obter os níveis de expressão entre o grupo sujeitos saudáveis e grupo de pacientes com câncer de pulmão na coorte de validação. Todos os polinucleotídeos foram classificados em ordem decrescente de seus valores de P com base em teste t de Student indicando a significância estatística de uma diferença entre os grupos (ou seja, aquele que possui um valor P inferior foi classificado em primeiro lugar), e a sensibilidade de detecção do câncer de pulmão foi avaliada utilizando combinações de um ou mais polinucleotídeos em que os polinucleotídeos foram adicionados um por um a partir do topo para baixo de acordo com a classificação. Em resumo, a ordem na qual os polinucleotídeos foram combinados nesta avaliação está no sentido inverso em termos de SEQ ID NOs a partir da SEQ ID NO: 134 a SEQ ID NOs: 133, 132, ..., conforme exibido na Tabela 3. Como resultado, a sensibilidade na coorte de validação foi de 62,5% para um polinucleotídeo (SEQ ID NO: 134), 75% para 3 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 132 a 134), 87,5% para 5 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 130 a 134), 100% para 6 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 129 a 134), 100% para 10 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 125 a 134), 100% para 20 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 115 a 134), 100% para 30 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 105 a 134), 100% para 50 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 85 a 134), 100% para 80 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 55 a 134), 100% para 120 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 15 a 134), e 100% para 134 polinucleotídeos (SEQ ID NOs: 1 a 134).

[0593] Estes resultados demonstraram que uma combinação de vários polinucleotídeos pode produzir um melhor desempenho discriminante do câncer de pulmão do que o uso individual de cada polinucleotídeo ou uma combinação de um menor número de polinucleotídeos. Neste contexto, as combinações de vários polinucleotídeos não estão limitadas às combinações dos polinucleotídeos adicionados na ordem de diferenças estatisticamente significativas, tal como descrito acima, e qualquer combinação de vários polinucleotídeos pode ser usada na detecção do câncer de pulmão.

[0594]A partir destes resultados, pode se concluir que todos os polinucleotídeos consistindo das sequências de nucleotídeos representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 134 servem como excelentes marcadores para a detecção do câncer de pulmão. EXEMPLO 3: SELEÇÃO DE GENE MARCADOR UTILIZANDO TODAS AS AMOSTRAS E MÉTODO PARA AVALIAR O DESEMPENHO DISCRIMINANTE DE CÂNCER DE PULMÃO DO GENE MARCADOR ADQUIRIDO

[0595] Neste Exemplo, as amostras na coorte de desenvolvimento e coorte de validação utilizadas nos Exemplos 1 e 2 foram integradas, e a seleção de um marcador e a avaliação do seu desempenho discriminante para o câncer de pulmão foram conduzidas utilizando todas as amostras.

[0596] Especificamente, os níveis de expressão de miRNA no soro de 25 pacientes com câncer de pulmão e 150 sujeitos saudáveis obtidos nos Exemplos de Referência acima foram normalizados pela normalização quantil. A fim de adquirir marcadores de diagnóstico com maior fiabilidade, apenas os genes possuindo o nível de expressão gênica de 26 ou mais em 50% ou mais das amostras no grupo de pacientes com câncer de pulmão ou grupo de sujeitos saudáveis foram selecionados na seleção dos genes marcadores. A fim de adquirir mais significância estatística para discriminar o grupo de pacientes com câncer de pulmão do grupo de sujeitos saudáveis, o valor P obtido pelo teste t bicaudal assumindo variâncias iguais como para cada nível de expressão gênica foi corrigido pelo método de Bonferroni, e os genes cujo p satisfaziam um valor P < 0,01 foram selecionados como genes marcadores para utilização em variáveis explicativas de uma discriminante. Os genes adquiridos estão descritos na Tabela 7. Dessa forma, os genes hsa-miR-4271, hsa-miR-642b-3p, hsa-miR-6075, hsa- miR-6125, hsa-miR-887-3p, hsa-miR-6851-5p, hsa-miR-6763-5p, hsa- miR-3928-3p, hsa-miR-4443, hsa-miR-3648, hsa-miR-149-3p, hsa-miR- 4689, hsa-miR-4763-3p, hsa-miR-6729-5p, hsa-miR-3196, hsa-miR-8069, hsa-miR-1268a, hsa-miR-4739, hsa-miR-1268b, hsa-miR-5698, hsa-miR- 6752-5p, hsa-miR-4507, hsa-miR-564, hsa-miR-4497, hsa-miR-6877-5p, hsa-miR-6087, hsa-miR-4731-5p, hsa-miR-615-5p, hsa-miR-760, hsa- miR-6891-5p, hsa-miR-6887-5p, hsa-miR-4525, hsa-miR-1914-3p, hsa- miR-619-5p, hsa-miR-5001-5p, hsa-miR-6722-3p, hsa-miR-3621, hsa- miR-4298, hsa-miR-675-5p e hsa-miR-4655-5p e as sequências nucleotídicas de SEQ ID NOs: 153 a 174 relacionadas com estes genes foram encontrados além dos genes descritos na Tabela 3. Tal como acontece com as sequências de nucleotídeos de SEQ ID NOs: 1 a 134, os resultados obtidos sobre os polinucleotídeos apresentados nas SEQ ID NOs: 135 a 174, também mostraram que os valores de medição foram significativamente menores (-) ou maiores (+) no grupo de pacientes com câncer de pulmão do que no grupo de sujeitos saudáveis (Tabela 7). Estes resultados puderam ser validados na coorte de validação. Assim, a presença ou ausência de câncer de pulmão nas amostras recentemente obtidas pôde ser determinada pelos métodos descritos nos Exemplos 1 e 2, utilizando os valores de medição do nível de expressão dos genes descritos na Tabela 7 sozinhos ou em combinação com os valores de medição do nível de expressão dos genes descritos na tabela 3. TABELA 7 EXEMPLO 4 “MÉTODO PARA AVALIAR O DESEMPENHO DISCRIMINANTE ESPECÍFICO PARA O CÂNCER DE PULMÃO PELA COMBINAÇÃO DE MÚLTIPLOS GENES MARCADORES UTILIZANDO AMOSTRAS NA COORTE DE VALIDAÇÃO”

[0597] Neste Exemplo, genes marcadores para diagnóstico foram selecionados pela comparação dos níveis de expressão de miRNAs no soro de pacientes com câncer de pulmão com um grupo de controle consistindo de sujeitos saudáveis, pacientes com câncer pancreático, pacientes com câncer de trato biliar, pacientes com câncer colorretal, pacientes com câncer de estômago, pacientes com câncer de fígado, e pacientes com doença pancreatobiliar benigna da mesma maneira como o método descrito no Exemplo 1, utilizando os genes marcadores selecionados no Exemplo 1 visando a coorte de desenvolvimento como grupo de amostra descrito no Exemplo de Referência 2. Os polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 561 a 579, assim selecionados foram combinados adicionalmente com ao mesmo para estudar um método para avaliar o desempenho discriminante específico do câncer de pulmão.

[0598] Especificamente, em primeiro lugar, os níveis de expressão de miRNA na coorte de desenvolvimento e coorte de validação obtidos no exemplo de referência 2 mencionado acima foram combinados e normalizados por normalização quantil. Em seguida, foi efetuada a análise discriminante de Fisher para combinações de 1 a 4 valores de medição do nível de expressão compreendendo pelo menos um ou mais dos valores de medição do nível de expressão dos polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1 a 174 e 561 a 579, para construir uma discriminante para a determinação da presença ou ausência do câncer de pulmão. Em seguida, a acurácia, sensibilidade e especificidade na coorte de validação foram calculadas utilizando a discriminante assim preparada, com o grupo de pacientes do câncer de pulmão como grupo de amostras positivas e, por outro lado, o grupo de sujeitos saudáveis, grupo de pacientes com câncer de pâncreas, grupo de pacientes com câncer do trato biliar, grupo de pacientes com câncer colorretal, grupo de pacientes com câncer de estômago, grupo de pacientes com câncer de fígado, e grupo de paciente com doença pancreatobiliar benigna como grupo de amostras negativas. O desempenho discriminante dos polinucleotídeos selecionados foi validado usando as amostras independentes.

[0599] A maioria dos polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas por estas SEQ ID NOs (SEQ ID NO: 1 a 174, 561 a 579 que correspondem aos miRNA marcadores da Tabela 1), ou sequências complementares às mesmas mencionadas acima, foram capazes de fornecer acurácia, sensibilidade e especificidade relativamente altas na determinação da presença ou ausência do câncer de pulmão, e, além disso, foram capazes de discriminar especificamente o câncer de pulmão de outros cânceres. Por exemplo, entre as combinações de múltiplos polinucleotídeos selecionados a partir do grupo consistindo dos polinucleotídeos que consistem das sequências de nucleotídeos representadas pelas SEQ ID NOs: 1, 2, 3, 4, 5, 7, 9, 10, 11, 19, 21, 26, 29, 31, 52, 53, 63, 65, 69, 72, 87, 90, 113, 124, 125, 126, 128, 130, 143, 148, 160, 162, 561, 562, 563, 564, 565, 566, 567, 568, 569, 570, 571, 572, 573, 574, 575, 576, 577, 578 e 579; ou sequências complementares a estas (grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos) como polinucleotídeos capazes de ligar especificamente aos marcadores alvo, combinações que compreendem pelo menos um ou mais polinucleotídeo(s) selecionado(s) a partir do grupo consistindo de polinucleotídeos consistindo das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1, 2, 3, 10, 63, 113, 124, 125, 126, 128, 130, 143, 160, 561, 568, 573 e 578 ou sequências complementares a estas (grupo 2 de polinucleotídeos tipo de câncer-específicos) incluídos no grupo 1 de polinucleotídeos tipo de câncer- específicos foram capazes de discriminar especificamente o câncer de pulmão de outros tipos de cânceres com alta acurácia.

[0600] O número dos polinucleotídeos com especificidade para o tipo de câncer na combinação pode ser de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ou mais para a combinação. As combinações de 4 ou mais desses polinucleotídeos foram capazes de exibir uma acurácia discriminante de 90% ou mais.

[0601] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 1 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-1. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 1 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 94,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 91,4% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 1 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 98,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 97,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 1 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 1 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação.

[0602] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 2 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-2. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 2 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 94,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 92,4% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 2 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 97,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 96,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 2 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 2 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 100% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,0% na coorte de validação.

[0603] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 3 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-3. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 3 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 85,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 84,3% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 3 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 97,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 97,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 3 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 3 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 100% na coorte de validação.

[0604] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 10 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-4. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 10 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 64,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 61,6% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 10 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 94,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 92,4% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 10 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 10 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,5% na coorte de validação.

[0605] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 63 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-5. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 63 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 79,4% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 80,8% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 63 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 95,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 97,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 63 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 98,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 63 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 97,5% na coorte de validação.

[0606] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 113 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-6. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 113 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 67,8% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 69,2% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 113 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 97,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 95,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 113 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 113 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação.

[0607] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 124 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-7. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 124 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 79,6% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 76,8% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 124 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 95,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 91,4% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 124 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 98,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 97,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 124 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação.

[0608] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 125 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-8. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 125 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 77,6% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 73,7% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 125 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 94,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 93,4% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 125 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 96,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 125 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação.

[0609] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 126 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-9. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 126 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 90,4% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 92,4% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 126 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 96,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 95,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 126 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 126 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação.

[0610] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 128 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-10. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 128 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 81,4% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 81,3% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 128 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 96,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 94,9% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 128 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 98,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 97,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 128 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,5% na coorte de validação.

[0611] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 130 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-11. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 130 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 83,4% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 87,4% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 130 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 96,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 94,4% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 130 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 130 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,5% na coorte de validação.

[0612] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 143 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-12. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 143 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 64,6% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 66,2% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 143 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 96,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 93,9% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 143 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 98,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 143 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,0% na coorte de validação.

[0613] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 160 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-13. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 160 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 70,9% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 67,2% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 160 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 96,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 92,4% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 160 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 160 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação.

[0614] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 561 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-14. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 561 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 84,9% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 81,8% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 561 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 96,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 97,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 561 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 98,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 561 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 100% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação.

[0615] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 568 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-15. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 568 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 60,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 67,2% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 568 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 97,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 96,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 568 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 96,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 568 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,5% na coorte de validação.

[0616] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 573 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-16. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 573 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 53,0% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 53,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 573 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 96,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 95,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 573 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 98,7% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,0% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 573 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 98,5% na coorte de validação.

[0617] Especificamente, a acurácia discriminante da medição usando o polinucleotídeo consistindo da sequência nucleotídica representada pela SEQ ID NO: 578 ou uma sequência complementar a esta é mostrada na Tabela 8-17. Por exemplo, a medição usando a combinação de um polinucleotídeo compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 578 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 52,8% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 53,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de dois polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 578 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 96,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 94,9% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de três polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 578 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 98,5% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 96,5% na coorte de validação. Além disso, por exemplo, a medição utilizando combinações de quatro polinucleotídeos compreendendo pelo menos um polinucleotídeo consistindo da sequência de nucleotídeos representada pela SEQ ID NO: 578 ou uma sequência complementar a esta exibiu acurácia de 99,2% na coorte de desenvolvimento e acurácia de 99,0% na coorte de validação.

[0618] Os valores de medição do nível de expressão das sequências nucleotídicas representadas pelas SEQ ID NOs: 1, 113, 126 e 561 foram comparados entre os 17 pacientes de câncer de pulmão, 99 sujeitos saudáveis, 75 pacientes com câncer pancreático, 62 pacientes com câncer de trato biliar, 32 pacientes com câncer colorretal, 35 pacientes com câncer de estômago, 32 pacientes com câncer de esôfago, 33 pacientes com câncer de fígado e 13 pacientes com doença pancreatobiliar benigna na coorte de desenvolvimento. Como resultado, um diagrama de dispersão que separou significativamente o escore discriminante do grupo de pacientes com câncer de pulmão dos escores discriminantes de outros grupos foi obtido na coorte de desenvolvimento (vide a Figura 4A). Estes resultados também foram reprodutíveis para a coorte de validação (vide a Figura 4B).

APLICABILIDADE INDUSTRIAL

[0619] De acordo com a presente invenção, o câncer de pulmão pode ser eficazmente detectado por um método simples e barato. Isso permite uma detecção, diagnóstico e tratamento precoces do câncer de pulmão. O método da presente invenção pode detectar o câncer de pulmão com invasividade limitada usando o sangue de um paciente e, portanto, permite que o câncer de pulmão seja detectado de maneira conveniente e rápida.

[0620] Todas as publicações, patentes e pedidos de patente citados no presente são integralmente incorporados ao presente pela referência.

Claims

1. MÉTODO PARA A DETECÇÃO DE CÂNCER DE PULMÃO, caracterizado por compreender a medição de um nível de expressão de um ácido nucleico alvo em uma amostra de um sujeito utilizando um kit ou um dispositivo para detecção de câncer de pulmão compreendendo um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a um polinucleotídeo de um marcador de câncer de pulmão miR-6768-5p, e a avaliação in vitro para determinar se o sujeito possui ou não o câncer de pulmão utilizando o nível de expressão mensurado e o nível de expressão de controle obtido em uma amostra de um sujeito saudável mensurada da mesma maneira.

2. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo ácido nucleico ser um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo nos seguintes polinucleotídeos de (a) a (e): (a) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência de nucleotídeos representada por SEQ ID NO: 1, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; uma variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (b) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por SEQ ID NO: 1; (c) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por SEQ ID NO: 1, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; uma variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (d) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por SEQ ID NO: 1, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; e (e) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (a) a (d).

3. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 2, caracterizado pelo kit ou dispositivo adicionalmente compreender um ácido nucleico capaz de se ligar especificamente a um ou mais polinucleotídeos(s) selecionado(s) a partir do grupo que consiste em outros marcadores de câncer de pulmão: miR-6836-3p, miR-6782-5p, miR- 3663-3p, miR-1908-3p, miR-6726-5p, miR-4258, miR-1343-3p, miR-4516, miR-6875-5p, miR-4651, miR-6825-5p, miR-6840-3p, miR-6780b-5p, miR- 6749-5p, miR-8063, miR-6784-5p, miR-3679-5p, miR-3184-5p, miR-663b, miR-6880-5p, miR-1908-5p, miR-92a-2-5p, miR-7975, miR-7110-5p, miR- 6842-5p, miR-6857-5p, miR-5572, miR-3197, miR-6131, miR-6889-5p, miR- 4454, miR-1199-5p, miR-1247-3p, miR-6800-5p, miR-6872-3p, miR-4649-5p, miR-6791-5p, miR-4433b-3p, miR-3135b, miR-128-2-5p, miR-4675, miR-4472, miR-6785-5p, miR-6741-5p, miR-7977, miR-3665, miR-128-1-5p, miR-4286, miR-6765-3p, miR-4632-5p, miR-365a-5p, miR-6088, miR-6816-5p, miR-6885- 5p, miR-711, miR-6765-5p, miR-3180, miR-4442, miR-4792, miR-6721-5p, miR-6798-5p, miR-3162-5p, miR-6126, miR-4758-5p, miR-2392, miR-486-3p, miR-6727-5p, miR-4728-5p, miR-6746-5p, miR-4270, miR-3940-5p, miR-4725- 3p, miR-7108-5p, miR-3656, miR-6879-5p, miR-6738-5p, miR-1260a, miR- 4446-3p, miR-3131, miR-4463, miR-3185, miR-6870-5p, miR-6779-5p, miR- 1273g-3p, miR-8059, miR-4697-5p, miR-4674, miR-4433-3p, miR-4257, miR- 1915-5p, miR-4417, miR-1343-5p, miR-6781-5p, miR-4695-5p, miR-1237-5p, miR-6775-5p, miR-7845-5p, miR-4746-3p, miR-7641, miR-7847-3p, miR-6806- 5p, miR-4467, miR-4726-5p, miR-4648, miR-6089, miR-1260b, miR-4532, miR-5195-3p, miR-3188, miR-6848-5p, miR-1233-5p, miR-6717-5p, miR-3195, miR-6757-5p, miR-8072, miR-4745-5p, miR-6511a-5p, miR-6776-5p, miR- 371a-5p, miR-1227-5p, miR-7150, miR-1915-3p, miR-187-5p, miR-614, miR- 1225-5p, miR-451a, miR-939-5p, miR-223-3p, miR-125a-3p, miR-92b-5p, miR- 22-3p, miR-6073, miR-6845-5p, miR-6769b-5p, miR-4665-3p, miR-1913, miR- 1228-3p, miR-940, miR-296-3p, miR-4690-5p, miR-548q, miR-663a, miR- 1249, miR-1202, miR-7113-3p, miR-1225-3p, miR-4783-3p, miR-4448 e miR- 4534, e/ou miR-19b-3p, miR-1228-5p, miR-1307-3p, miR-4271, miR-642b-3p, miR-6075, miR-6125, miR-887-3p, miR-6851-5p, miR-6763-5p, miR-3928-3p, miR-4443, miR-3648, miR-149-3p, miR-4689, miR-4763-3p, miR-6729-5p, miR-3196, miR-8069, miR-1268a, miR-4739, miR-1268b, miR-5698, miR- 6752-5p, miR-4507, miR-564, miR-4497, miR-6877-5p, miR-6087, miR-4731- 5p, miR-615-5p, miR-760, miR-6891-5p, miR-6887-5p, miR-4525, miR-1914- 3p, miR-619-5p, miR-5001-5p, miR-6722-3p, miR-3621, miR-4298, miR-675- 5p e miR-4655-5p.

4. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo ácido nucleico ser um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo que consiste nos seguintes polinucleotídeos (a’) a (e’): (a’) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 2 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; uma variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (b’) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 2 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578; (c’) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 2 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; uma variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (d’) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 2 a 125, 127 a 130, 132 a 134, e 561 a 578, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; e (e’) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (a’) a (d’); e/ou um polinucleotídeo selecionado a partir do grupo consistindo dos seguintes polinucleotídeos de (f) a (o): (f) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131, e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; uma variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (g) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131, e 579; (h) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131, e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; uma variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (i) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 126, 131, e 579, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; (j) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (f) a (i); (k) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; uma variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (l) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174; (m) um polinucleotídeo que consiste em uma sequência nucleotídica complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; uma variante do mesmo, um derivado do mesmo, ou um fragmento do mesmo compreendendo 15 ou mais nucleotídeos consecutivos; (n) um polinucleotídeo compreendendo uma sequência de nucleotídeos complementar a uma sequência de nucleotídeos representada por qualquer uma das SEQ ID NOs: 135 a 174, ou uma sequência nucleotídica derivada da sequência de nucleotídeos pela substituição de U por T; e (o) um polinucleotídeo que hibridiza sob condições estringentes com qualquer um dos polinucleotídeos de (k) a (n).

5. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo sujeito ser um humano.

6. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pela amostra ser sangue, soro ou plasma.