BR112016006682B1 - método para suplementar nutricionalmente com minerais vestigiais a dieta de animais - Google Patents

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Abstract

MÉTODO E COMPOSIÇÃO PARA SUPLEMENTAR NUTRICIONALMENTE COM MINERAIS VESTIGIAIS A DIETA DE ANIMAIS É descrito o uso de complexos de metais de diaminetileno, preferencialmente de cobre, zinco, ferro e manganês em formatos altamente absorvíveis para a nutrição de animais.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO
[0001] O campo da invenção é o suprimento nutricional animal de minerais vestigiais em formato altamente absorvível e biodisponível.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
[0002] A presença de metais essenciais, às vezes chamados metais vestigiais, em quantidade suficiente e em formato biologicamente disponível na dieta é necessária para a manutenção da saúde e do bem-estar de aves e animais domésticos. Dado que metais essenciais como cobre, ferro, manganês e zinco costumam ser deficientes em ingredientes alimentares comuns, quantidades suplementares destes nutrientes são frequentemente adicionadas à alimentação de aves e animais domésticos. Muitos aditivos alimentares comerciais foram desenvolvidos para fornecer os metais essenciais nos formatos que são prontamente biologicamente utilizáveis. O grau de disponibilidade biológica de nutrientes costuma ser chamado “biodisponibilidade”. A biodisponibilidade de metais essenciais depende das propriedades químicas e físicas do formato em que o metal está presente na dieta. O aumento da biodisponibilidade de metais suplementares é benéfico porque permite a utilização de concentrações menores dos metais na dieta para atender às necessidades nutricionais dos animais, ao mesmo tempo em que reduz os efeitos potencialmente prejudiciais de altas concentrações destes metais tanto nos animais quanto no meio ambiente.
[0003] Há diversos produtos comerciais disponíveis em que os elementos vestigiais são mais biodisponíveis do que a fonte inorgânica do metal correspondente. A biodisponibilidade melhorada é atribuída à associação do metal com uma molécula orgânica, geralmente chamada ligante. Esta associação ou ligação resulta na disponibilidade aumentada do metal para utilização por animais, isto é, biodisponibilidade melhorada. A biodisponibilidade aumentada dos elementos essenciais nestes produtos é o resultado de solubilidade aumentada, maior estabilidade no intestino, absorção aumentada na circulação e/ou utilização metabólica melhorada.
[0004] Há diferentes tipos de produtos comercialmente disponíveis contendo algum elemento vestigial com um ligante orgânico. Estes podem ser classificados em diferentes grupos com base na natureza do ligante utilizado na fabricação do produto. Em uma categoria de produtos, aminoácidos são utilizados com ligantes que formam complexos ou quelatos com o metal. Exemplos destes produtos são descritos nas patentes US 3.941.818; 3.950.372; 4.067.994; 4.863.898 4.900.561; 4.948.594; 4.956.188; 5.061.815; 5.278.329; 5.583.243; e 6.166.071. Um segundo grupo de aditivos alimentares inclui os sais de metais de ácido carboxílicos de cadeia curta tais como ácido propiônico (ver patentes US 5.591.878, 5.707.679, 5.795.615 e 5.846.581). Um terceiro grupo de aditivos de elementos vestigiais é classificado pelo American Feed Control Officials como Proteinato de Metal e definido como “o produto resultante da quelação de um sal solúvel com aminoácidos e/ou proteína parcialmente hidrolisada”. Exemplos destes produtos são descritos nas patentes US 3.440.054, 3.463.858, 3.775.132, 3.969.540, 4.020.158, 4.076.803, 4.103.003, 4.172.072 e 5.698.724.
[0005] O depositante comum do presente pedido de patente sintetizou e patenteou, no passado, complexos de metais de aminoácidos como uma fonte mais biodisponível dos elementos essenciais. Os seguintes são exemplos destas patentes: US 3.941.818; 3.950.372; 4.021.569; 4.039.681; e 4.067.994, os quais divulgam complexos 1:1 de aminoácidos alpha, preferencialmente DL-metionina com os metais de transição zinco, cromo, manganês e ferro. A formação de complexos similares com L-metionina é divulgada nas patentes US 5.278.329, US 4.900.561 e 4.948.594, as quais divulgam complexos de cobre de aminoácidos alfa contendo grupos amino terminais. Complexos de cobre, manganês, zinco e ferro com ácidos alfa-hidroxi-alifático carboxílicos são divulgados nas patentes US 4.956.88 e 5.583.243. As patentes US 4.670.269 e 4.678.854 divulgam complexos de cobalto com ácido poli-hidroxi carboxílico tal como ácido glucoheptônico. Complexos do aminoácido L-lisina com elementos vestigiais são divulgados na patente US 5.061.815. A eficácia dos compostos divulgados nestas patentes foi demonstrada pelos dados fornecidos por algumas destas patentes e por várias publicações científicas e relatórios técnicos.
[0006] As patentes acima descrevem a utilização deaminoácidos sintéticos ou naturais puros. Na patente US 5.968.724, o depositante do presente pedido de patente divulgou a síntese de complexos de elementos essenciais com aminoácidos naturais obtidos pela hidrólise de proteínas. Desde que esta patente foi concedida, um grande número de estudos de campo tem demonstrado que os metais destes complexos são mais biodisponíveis do que os metais de fontes inorgânicas.
[0007] A diaminetileno (EDA) é bem conhecida na esfera daquímica e é um componente essencial para muitos compostos e polímeros. Ele também é um importante ligante para a complexação metálica. Assim sendo, ele foi quimicamente modificado para produzir um dos melhores e mais bem conhecidos agentes quelantes, o EDTA (ácido etilenodiaminotetracético). Encontrar um bom ligante para a complexação química de metais é completamente diferente de encontrar um bom ligante para o fornecimento nutricional do metal a animais para desempenho animal. Há muitos fatores que determinam se um ligante será eficiente para fornecer um mineral a um animal. Muitas vezes pode ser difícil avaliar a eficácia de determinado ligante de metal, uma vez que o mineral inorgânico é uma fonte nutricionalmente viável do mineral. Muitos fatores determinam se as fontes de metal orgânico são adequadas para o fornecimento de uma fonte biodisponível de materiais vestigiais. Um bom veículo para o mineral vestigial deve ser uma molécula orgânica, que proporciona solubilidade em condições fisiológicas e estabilidade no ácido estomacal; ele deve poder ser absorvido intacto através da parede intestinal, e deve liberar o mineral vestigial no corpo do animal para sua utilização, e não para sua excreção.
[0008] O aumento no desempenho ou eficácia de um mineralvestigial orgânico deve ser determinado através da seleção cuidadosa do estudo a fim de assegurar que você esteja identificando a resposta de desempenho versus a resposta mineral. Normalmente, a comparação dos mesmos níveis de metais versus um controle inorgânico é exigida. A absorção do complexo ligante-metal intacto é exigida para que seja considerado um mineral vestigial orgânico. Se a dissociação ocorrer antes da absorção, diferenças de desempenho em relação a minerais inorgânicos não devem ser esperadas.
[0009] Com tudo isto em mente, um mineral vestigial orgânico deve ser solúvel e estável em condições fisiológicas, e os minerais devem ser absorvidos intactos. Ligantes comuns que tenham sido utilizados na área de nutrição animal são o ácido propiônico, aminoácidos, hidroxi ácidos, proteinatos, etc.
[0010] Consequentemente, um objetivo primário da presente invenção é proporcionar um ligante de molécula pequena preferencial dos metais cobre, ferro, zinco e manganês em um formato que seja altamente absorvível, solúvel em condições fisiológicas, estável no ácido estomacal, absorvido intacto e capaz de liberar o mineral para o animal ao invés de excretá- lo.
[0011] Outro objetivo da presente invenção é proporcionar os ligantes de metais acima de forma facilmente processável, e que seja fácil de fazer, e fácil de utilizar para a suplementação.
[0012] O método e modo de realização dos objetivos acima, assim como outros, tornar-se-ão evidentes pela descrição detalhada da invenção.SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[0013] Utilização de complexos de metais de diaminetileno, preferencialmente cobre, zinco, ferro e manganês, em formatos altamente absorvíveis, para a nutrição animal.
BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS
[0014] A Figura 1 mostra um gráfico da permeabilidadecelular para o Cu-EDA.
[0015] A Figura 2 mostra um gráfico dos resultadoscomparativos das aves de domésticas para o Zn-EDA, e ZnO e areia.
[0016] A Figura 3 mostra um gráfico dos dados comparativosdas ovelhas para o Exemplo 20.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA FORMAS DE REALIZAÇÃO PREFERIDAS
[0017] É importante observar que a meação orgânica doligante desta invenção é somente o diaminetileno, e não o ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) ou outras moléculas grandes. Isto é importante, pois moléculas menores significam menos volume e aumentam as chances de um alto índice de sucesso de absorção através do intestino e de assimilação pelo sistema biológico do animal, ao invés de simplesmente passar através do sistema como excremento. Naturalmente, se ela faz este último, é simplesmente desperdiçada sem qualquer benefício nutricional ao animal.
[0018] Até onde o inventor sabe, o EDA não foi utilizado como ligante de fornecimento para metais, apesar de ser bem conhecido como agente complexante de metais. Ela possui várias vantagens sobre alguns dos ligantes de metais orgânicos da arte anterior previamente listados. Ela é um complexo estável enquanto alguns dos outros ligantes orgânicos formam complexos muito fracos tais como hidroxi ácidos e ácidos retos (straight acids). A diaminetileno supera estes problemas. É difícil prever qual será um mineral vestigial orgânico eficiente. É fácil saber qual não funcionaria devido a questões de solubilidade e de estabilidade, mas só através de experimentos é possível determinar se um complexo pode ou não ser absorvido. Devido ao tamanho, solubilidade e absorção pequenos, ela atende a todos os requisitos para um complexo mineral vestigial orgânico. A estrutura geral destes complexos é como a seguir:
Figure img0001
Figure img0002
[0019] O contraíon irá variar dependendo de qual material demetal foi utilizado para a formação. Por exemplo, ZnCl2 terá os contraíons do cloreto e ZnSO4 terá os do sulfato. Os metais preferenciais são Zn, Fe, Mn, Cu. Dependendo das condições sintéticas, o complexo pode ser feito a partir de três aminas livres assim como da amina protonada. Estas estruturas mostram a amina protonada (II, IV e V) que também funcionará. O contraíon pode ser qualquer íon utilizado para balancear as cargas e proporcionar um ligante neutro. Contudo, o mais provável e preferencial é o ânion de cloreto ou de bisulfato(na estrutura V semelhante à amina). A expressão “contraíon”tal como aqui utilizada refere-se tanto ao contraíon para o metal quanto ao contraíon para o nitrogênio se for protonado.
[0020] Os produtos podem ser utilizados na forma livre deveículo ou com um veículo atóxico. Os veículos adequados incluem: fosfato de hidrogênio de cálcio, carbonato de cálcio,sílica, espigas de milho moídas, soro de leite, celulose e outras fibras de madeira, e açúcar em pó, ou uma mistura de qualquer um destes.
[0021] Nos exemplos a seguir, a preparação e utilizaçãonutricional são demonstradas para os ligantes EDA de zinco, cobre, ferro e manganês, e estes são comparados com fontes inorgânicas para demonstrar a biodisponibilidade para moléculas pequenas.
[0022] Os exemplos devem ser considerados ilustrativos enão-limitantes. Embora o requerente utilizou apenas a EDA com os quatro metais aqui citados, outro podem ser feitos e utilizados, tal como cromo, etc.
EXEMPLOS Exemplo 1: EDA Cloreto de Zinco1,2 diaminoetano dicloridrato - cloreto de zinco(II)
[0023] EDA (100ml, 1,5 mols) foi dissolvido em 1l de águadeionizada e aquecido a 50°C. A esta solução, adicionou-se ácido hidroclorídrico concentrado (437,5ml, 5,25 mols), e elafoi agitada por 15 minutos. Adicionou-se óxido de zinco (50,3g, 1,5 mols) em uma parte agitou-se por 45 minutos ou atéque a suspensão se tornasse uma solução. Após completa, a reação foi seca em um forno a vácuo até um sólido branco (314g).ICP: 27% Zn1H NMR (D2O, 300 MHz) δ 3,23 (amplo s, 4H) IR (KBr): 1.598, 1.574, 1.493, 1.444 cm-1Análise: C, 9,79; H, 3,73; N, 11,13; Cl, 51,24.
Exemplo 2:EDA Cloreto de Zinco1,2 diaminoetano dicloridrato - cloreto de zinco(II)
[0024] O dicloridrato de EDA (22g, 0,16 mols) foi dissolvidoem 200ml de água deionizada e aquecido a 40°C. A esta solução, adicionou-se cloreto de zinco (23,6ml, 0,16 mols) que haviasido dissolvido em um recipiente separado. Esta solução foi aquecida por duas horas a 40°C, continuamente agitada. Após completa, a reação foi seca em um forno a vácuo até um sólido branco (34g).ICP: 26% Zn1H NMR (D2O, 300 MHz) δ 3,40 (amplo s, 4H)IR (KBr): 1.581, 1.486, 1.465 cm-1Análise: C, 8,97; H, 3,55; N, 10,21; Cl, 52,36.
Exemplo 3:EDA Sulfato de Zinco1,2 diaminoetano hidrosulfúrico - sulfato de zinco(II)
[0025] EDA (33ml, 0,5 mols) foi dissolvido em 250ml de águadeionizada e aquecido a 50°C. ZnSO4 Heptahidrato (143g, 0,5 mols) foi suspenso em 50ml de água deionizada em um recipiente separado e agitado por 5 minutos com uma barra magnética de agitação. A suspensão foi adicionada em uma parte do recipiente da reação. A suspensão foi clareada com a adição de H2SO4 concentrado (36N, 28ml). A solução foi então aquecidapor 1,5 horas a 50°C e então evaporada dentro de um forno a vácuo até um sólido branco (127g).ICP: 20,9% Zn1H NMR (D2O, 300 MHz) δ 3.39 (s, 4H) IR (KBr): 1.595, 1.573, 1.490, 1.473 cm-1Análise: C, 7,55; H, 3,07; N, 8,64; S, 19,37.
Exemplo 4:EDA Cloreto de Cobre1,2 diaminoetano dicloridrato - cloreto de cobre(II)
[0026] EDA (33ml, 0,5 mols) foi dissolvido em 250ml de águadeionizada e aquecido a 50°C. Dihidrato de cloreto de cobre (85,24g, 0,5 mols) foi suspenso em 50ml de água deionizada emum recipiente separado e agitado com uma barra magnética de agitação. A suspensão foi adicionada em uma parte do recipiente da reação. A suspensão foi clareada com a adição de HCl concentrado (12M, 83ml). A solução foi então aquecida por1,5 horas a 50°C e então evaporada em um forno a vácuo até um sólido azul esverdeado (100g).ICP: 21,4% Cu1H NMR (D2O, 300 MHz) δ 3,24 (amplo s, 4H)IR (KBr): 1.573, 1.493 cm-1Análise: C, 10,42; H, 3,89; N, 11,76; Cl, 53,40.
Exemplo 5:EDA Cloreto de Cobre1,2 diaminoetano dicloridrato - cloreto de cobre(II)
[0027] O dicloridrato de EDA (100g, 0,76 mols) foidissolvido em 600ml de água deionizada e aquecido a 40°C. A esta solução, adicionou-se cloreto de cobre (100,76g, 0,76 mols) que havia sido dissolvido em um recipiente separado. Esta solução foi aquecida por duas horas a 60°C, continuamente agitada. Após completa, a reação foi seca em um forno a vácuo até um sólido branco (178g).ICP: 23,54% cu1H NMR (D2O, 300 MHz) δ 3,17 (s, 4H)IR (KBr): 1.576, 1.502 cm-1Análise: C, 9,12; H, 3,77; N, 10,36; Cl, 52,73.
Exemplo 6:EDA Cloreto de Cobre - CuO1,2 diaminoetano dicloridrato - cloreto de zinco(II)
[0028] EDA (33ml, 0,5 mols) foi dissolvido em 250ml de águadeionizada e aquecido a 50°C. Adicionou-se óxido de cobre (39,8ml, 0,5 mols) em uma parte do recipiente da reação. Asuspenção foi clareada com a adição de HCl concentrado (12M, 166ml). A solução foi então aquecida por 2,5 horas a 50°C e então evaporada em um forno a vácuo até um sólido amarelo claro (143g).ICP: 23,68% CuIR (KBr): 1.571, 1.495 cm-1Análise: C, 8,16; H, 3,53; N, 10,18; Cl, 51,73.
Exemplo 7:EDA Sulfato de Cobre1,2 diaminoetano sulfato de dihidrogênio - sulfato de cobre(II)
[0029] EDA (33ml, 0,5 mols) foi dissolvido em 250ml de águadeionizada e aquecido a 50°C. Sulfato de cobre pentahidratado (124,9g, 0,5 mols) que havia sido suspenso em 50ml de águadeionizada em um recipiente separado e agitado por 5 minutos com uma barra magnética de agitação. Esta suspensão foi adicionada em uma parte do recipiente da reação. A suspensão foi clareada com a adição de H2SO4 concentrado (36N, 28ml). Asolução foi então aquecida por 1,5 horas a 50°C e então evaporada em um forno a vácuo até um sólido azul (180g).ICP: 17,9% Cu1H NMR (D2O, 300 MHz) δ 3,22 (amplo s, 4H) IR (KBr): 1.616, 1.545, 1.507, 1.486 cm-1Análise: C, 6,09; H, 4,22; N, 6,81; S, 15,89.
Exemplo 8:EDA Sulfato de Ferro1,2 diaminoetano sulfato de dihidrogênio - sulfato de ferro(II)
[0030] EDA (33ml, 0,5 mols) foi dissolvido em 250ml de águadeionizada e aquecido a 50°C. Heptahidrato de FeSO4 (139,01g,0,5 mols) foi suspenso em 50ml de água deionizada em um recipiente separado e agitado por 5 minutos com uma barra magnética de agitação. A suspensão foi clareada com a adição de H2SO4 concentrado (36N, 28ml). A solução foi então aquecidapor 1,5 horas a 50°C e então evaporada em um forno a vácuo até um sólido verde claro (153,74g).ICP: 16,1% FeIR (KBr): 1.611, 1.530, 1.509 cm-1Análise: C, 6,45; H, 3,50; N, 7,24; S, 20,09.
Exemplo 9:EDA Cloreto de Ferro1,2 diaminoetano dicloridrato - cloreto de ferro(II)
[0031] EDA (33ml, 0,5 mols) foi dissolvido em 250ml de águadeionizada e aquecido a 50°C. Tetrahidrato de cloreto de ferro (99,4g, 0,5 mols) foi suspenso em 50ml de água deionizada emum recipiente separado e agitado por 5 minutos com uma barramagnética de agitação. A suspensão foi adicionada em uma partedo recipiente da reação. A suspensão foi clareada com a adiçãode HCl concentrado (12M, 83ml). A solução foi então aquecidapor 1,5 horas a 50°C e então evaporada em um forno a vácuo atéum sólido verde claro (111g).ICP: 22,7% FeIR (KBr): 1.617, 1.509 cm-1Análise: C, 8,72; H, 3,62; N, 9,88; Cl, 50,44.
Exemplo 10:EDA Cloreto de Manganês1,2 diaminoetano dicloridrato - cloreto de manganês(II)
[0032] EDA (33ml, 0,5 mols) foi dissolvido em 250ml de águadeionizada e aquecido a 50°C. Tetrahidrato de cloreto de manganês (90g, 0,5 mols) foi suspenso em 50ml de águadeionizada em um recipiente separado e agitado por 5 minutos com uma barra magnética de agitação. A suspensão foi adicionada em uma parte do recipiente da reação. A suspensão foi clareada com a adição de HCl concentrado (12M, 83ml). Asolução foi então aquecida por 1,5 horas a 50°C e então evaporada em um forno a vácuo até um sólido rosa claro (119g).ICP: 21,7% Mn IR (KBr): 1.620, 1.616, 1.511, 1.505 cm-1Análise: C, 9,12; H, 3,85; N, 10,42; Cl, 53,65.
Exemplo 11:EDA Cloreto de Manganês - MnO1,2 diaminoetano dicloridrato - cloreto de manganês(II)
[0033] EDA (33ml, 0,5 mols) foi dissolvido em 250ml de águadeionizada e aquecido a 50°C. Óxido de manganês (43,5g, 0,5 mols) foi adicionado em uma parte do recipiente da reação. A suspensão foi clareada com a adição de HCl concentrado (12M,166ml). A solução foi então aquecida por 2,5 horas a 50°C e então evaporada em um forno a vácuo até um sólido rosa claro(131g).ICP: 25,08% MnIR (KBr): 1.617, 1.590, 1.509 cm-1Análise: C, 8,57; H, 3,61; N, 9,57; Cl, 48,51.
Exemplo 12:EDA Sulfato de Manganês1,2 diaminoetano sulfato de dihidrogênio - sulfato de manganês(II)
[0034] EDA (33ml, 0,5 mols) foi dissolvido em 250ml de águadeionizada e aquecido a 50°C. MnSO4 monohidratado (84,5g, 0,5 mols) foi suspenso em 50ml de água deionizada em um recipiente separado e agitado por 5 minutos com uma barra magnética de agitação. A suspensão foi adicionada em uma parte do recipiente da reação. A suspensão foi clareada com a adição de H2SO4 concentrado (36N, 28ml). A solução foi então aquecida por 1,5 horas a 50°C e então evaporada em um forno a vácuo até um sólido rosa claro (146g).ICP: 16,5% MnIR (KBr): 1.675, 1.638, 1.609, 1.532 cm-1Análise: C, 7,09; H, 3,30; N, 8,10; S, 19,78.
Exemplo 13:EDA Cloreto de Zinco - (MeOH)1,2 diaminoetano - cloreto de zinco(II)
[0035] Cloreto de Zinco(II) (102g 0,75 mols) foi dissolvidoem 800ml de metanol a 80°C para formar uma solução transparente. Etilenodiamina (50ml, 0,75 mols) foi adicionadalentamente devido à natureza exotérmica extrema da reação. Um sólido branco claro imediatamente se precipitou da solução a esta suspensão foi agitada por mais uma hora. O sólido branco (115g) foi filtrado e seco em um forno a vácuo.1H NMR (D2O, 300 MHz) δ 3,01 (d, 4H)IR (KBr): 1.620, 1.616, 1.511, 1.505 cm-1ICP: 32,7% ZnAnálise: C, 12,34; H, 4,19; N, 14,2; Cl, 35,83.
Exemplo 14:EDA Cloreto de Cobre (MeOH)1,2 diaminoetano - cloreto de cobre(II)
[0036] Cloreto de cobre(II) dihidratado (56g, 0,33 mols) foidissolvido em 500ml de metanol a 60°C para formar uma solução verde esmeralda. Etilenodiamina (22ml, 0,33 mols) foiadicionada lentamente devido à natureza exotérmica da reação. Um sólido azul claro imediatamente se precipitou da solução e esta suspensão foi agitada por mais uma hora. O sólido azul claro (61g) foi filtrado e seco em um forno a vácuo.1H NMR (D2O, 300 MHz) δ 3,16 (s, 4H)IR (KBr): 1.570 cm-1ICP: 33,4% CuAnálise: C, 12,44; H, 4,13; N, 14,14; Cl 36,16
Exemplo 15:EDA Cloreto de Manganês (MeOH)1,2 diaminoetano - cloreto de manganês(II)
[0037] Cloreto de Manganês(II) (55g, 0,44 mols) foidissolvido em 500ml de metanol a 60°C para formar uma solução marrom claro. Etilenodiamina (29,4ml, 0,44 mols) foiadicionada lentamente devido à natureza exotérmica da reação. Um sólido castanho claro (light tan) imediatamente se precipitou da solução e esta suspensão foi agitada por mais uma hora. O sólido castanho claro (67g) foi filtrado e seco em um forno a vácuo antes da análise.IR (KBr): 1.591, 1.510 cm-1ICP: 22% MnAnálise: C, 15,08; H, 4,84; N, 13,28; Cl 30,77
Exemplo 16:EDA Cloreto de Ferro - (MeOH)1,2 diaminoetano - cloreto de ferro(II) (20788 - 115) - MeOH
[0038] Tetrahidrato de Cloreto de Ferro(II) (50g, 0,25 mols)foi dissolvido em 500ml de C metanol a 60°C para formar uma solução verde escura. Etilenodiamina (16,8ml, 0,25 mols) foiadicionada lentamente devido à natureza exotérmica da reação. Um sólido verde escuro imediatamente se precipitou na solução e esta suspensão foi agitada por mais uma hora. O sólido verde escuro se tornou vermelho escuro (38g) após filtrado e seco em um forno a vácuo.1H NMR (D2O, 300 MHz) δ 3,17 (amplo s, 4H)IR (KBr): 1.510 cm-1 ICP: 26,5% FeAnálise: C, 12,16; H, 5,03; N, 10,89; Cl 32,31
Exemplo 17:Sulfato de EDA Cloreto de Zinco1,2 diaminoetano dicloridrato - sulfato de zinco(II)
[0039] EDA Hidrocloreto (22g, 0,16 mols) foi dissolvido em100ml de água deionizada e aquecido a 50°C. A esta solução, adicionou-se heptahidrato Sulfato de Zinco (50,3g, 0,17 mols).A solução foi agitada a 50°C por mais 2 horas. Após completa, a solução foi seca em um forno a vácuo até um sólido branco (58g).ICP: 22,5% ZnIR (KBr): 1.595, 1.574, 1.491, 1.474 cm-1
Exemplo 18:
[0040] O Cu2+ foi transportado em uma Solução SalinaBalanceada de Hanks (HBSS) do pH 5,5 ao 7,4 a 37°C. A concentração foi de 100 μg/ml de Cu2+. Cada ponto de dadosrepresenta a média de três determinações. O modelo de cultura de células Caco-2 (adenocarcinoma colorretal epitelial humano heterogêneo) foi utilizado, o qual é reconhecido pelo FDA para caracterizar padrões de absorção de medicamentos. A solução de teste com as concentrações adequadas do produto foi carregada no lado apical (doador). Amostras de doador (2.500 μl) e amostras de receptor foram adquiridas a 0, 3 e 6 horas,seguidas pela adição de 2.500 μl de novas soluções de doador para o lado doador ou 2.500 μl de novos tampões ao lado para olado receptor. O teor de metal foi medido por ICP-OES.
[0041] A Figura 1 mostra graficamente os resultados e demonstra a clara superioridade do Cu-EDA sobre o CuSO4.
Exemplo 19:Ovelhas
[0042] Foram dadas a ovelhas bolos alimentares (bolus) de250 mg de zinco de ZnSO4 no momento 0. Então, às 6 horas foram dadas a elas outros bolos alimentares seja de óxido de zinco sem zinco (areia) ou Zn-EDA. Os níveis séricos de zinco foram os mais altos e maiores para uma duração maior com o Zn-EDA do que nos outros tratamentos. Os resultados são mostrados na Figura 2.
Exemplo 20:Testes com aves domésticas
[0043] Os animais foram frangos de corte machos Cobb. Aexperiência começou com animais de 1 dia de idade. ZnSO4 foi utilizado como um exemplo comparativo utilizando-se 80 ppm de zinco de ZnSO4. Zn-EDA substituiu 40 ppm do zinco, logo, havia 40 ppm de Zn de ZnSO4 e 40 ppm de Zn de Zn-EDA, e foram comparados a 80 ppm de Zn de ZnSO4. Foram utilizadas dietas integradoras reais de frangos de corte. Elas contêm 500 ftu de fitase e uma enzima NSP (enzima degradante de amido não polissacárido). O plano nutricional está voltado para o 75° percentil AgriStat. A experiência foi de projeto completamente aleatório. Houve 12 repetições por tratamento e 21 aves por repetição.
[0044] A seguinte Tabela 1 mostra os dados representados para os testes de aves domésticas com frangos de corte machos Cobb. Ela demonstra de maneira estatisticamente significativa a conversão alimentar melhorada e a menor mortalidade quando a invenção é exercida.
Figure img0003
a Zinco suplementar da dieta = 80 ppmb Substituiu 40 ppm de Zn da fonte de Sulfatoc O teor de Zn para o ZnEDA foi de 24,1
[0045] Nos exemplos seguintes, foram dados às ovelhasinjeções de bolos alimentares como no Exemplo 19, e então a captação no sangue foi medida em vários intervalos. Por algum motivo, os níveis da 30a hora aparentam ser o melhor momento observado para a diferenciação com base em experiências passadas com EDA.
Exemplo 21:
[0046] O Fe-EDA (Exemplo 9) e o Fe-EDA (Exemplo 16) foramtestados para a captação de ferro no sangue em comparação com a injeção de bolos alimentares de FeSO4. Como se pode ver na Fig. 3, as amostras de Fe-EDA foram melhores do que o sulfato de ferro inorgânico em todos os intervalos, mais notoriamente na 30a hora.
Exemplo 22:
[0047] Testes como no Exemplo 19 e 21 foram realizados comMnSO4 em comparação com o Mn-EDA do Exemplo 10. Em todos os pontos a captação de Manganês no sangue das ovelhas estava comníveis menores do que nos outros ligantes testados. Esta podeser uma característica do próprio Mn. Contudo, os dados da 30a hora mostraram uma diferença significativa em comparação com o MnSO4 inorgânico.30a horaMnSO4 24Mn-EDA (Exemplo 10) 33
[0048] Pelo que se vê acima, a invenção atinge pelo menostodos os objetivos declarados.

Claims (5)

1. Método para suplementar nutricionalmente com minerais vestigiais a dieta de animais, caracterizado por:• alimentar o animal com uma quantidade efetiva suplementar pequena, mas vestigial, de um ligante de metal de diaminetileno (EDA) de fórmula:M(EDA)X,em que M é um metal selecionado a partir de um grupo que consiste em zinco, ferro, cobre e manganês, EDA é o diaminetileno ligado ao metal, e X representa contraíons selecionados para proporcionar um metal e/ou ligante neutros.
2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado poro animal ser um animal de criação de gado ou ave doméstica.
3. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado poro ligante neutro de diaminetileno de metal ser misturado com um veículo atóxico antes da alimentação.
4. Método de acordo com a reivindicação 3, caracterizado por o veículo ser selecionado a partir do grupo que consiste em açúcares, solúveis de fermentação, cereais forrageiros, farinha de espiga de milho, celulose, e soro de leite.
5. Método de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pora quantidade suplementar do referido complexo metal ligante na dieta ser suficiente para atender às necessidades diárias dos animais para os metais selecionados.
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