BR112013025022B1 - Método e utilização de um composto para promover crescimento de planta - Google Patents

Método e utilização de um composto para promover crescimento de planta Download PDF

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BR112013025022B1
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(54) Título: MÉTODO E UTILIZAÇÃO DE UM COMPOSTO PARA PROMOVER CRESCIMENTO DE PLANTA (73) Titular: SUMITOMO CHEMICAL COMPANY, LIMITED, Japonesa. Endereço: 27-1, SHINKAWA 2-CHOME, CHUO-KU, ΤΟΚΥΟ 104-8260,, JAPÃO(JP), Japonesa (72) Inventor: YUTAKA MATSUSHIMA; HIROAKI TAMAKI
Prazo de Validade: 20 (vinte) anos contados a partir de 28/03/2012, observadas as condições legais
Expedida em: 02/10/2018
Assinado digitalmente por:
Liane Elizabeth Caldeira Lage
Diretora de Patentes, Programas de Computador e Topografias de Circuitos Integrados
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Relatório Descritivo da Patente de Invenção para MÉTODO E UTILIZAÇÃO DE UM COMPOSTO PARA PROMOVER CRESCIMENTO DE PLANTA
Campo Técnico
A presente invenção refere-se a um método para promover o desenvolvimento de plantas.
Técnica Antecedente
Algumas substâncias químicas são conhecidas mostrar uma promoção do efeito no desenvolvimento de plantas, quando as plantas são tratadas com uma tal substância (Veja, por exemplo, Aplicado Microbial Biotecnologia, vol.58, pp.23-29 (2002)).
Descrição da Invenção
Um objetivo da presente invenção é fornecer um excelente método para promover o desenvolvimento de plantas, entre outros.
A presente invenção é com base na descoberta de que tratamento de uma planta com um composto particular resulta em promoção do desenvolvimento da planta.
Mais especificamente, a presente invenção fornece:
[1] Um método para promover o desenvolvimento de uma planta, compreendendo tratamento da planta com uma quantidade eficaz de um composto representado pela seguinte fórmula (1) (aqui a seguir pode ser referido como o composto presente):
Figure BR112013025022B1_D0001
em que X1 representa um grupo metila, grupo difluorometila ou grupo etila; X2 representa um grupo metóxi ou, grupo metilamino; e X3 representa um grupo fenila, grupo 2-metilfenila ou grupo 2,5-dimetilfenila;
[2] O método de acordo com [1], em que a planta foi ou deve ser exposta a um estresse abiótico;
[3] O método de acordo com [1] ou [2], em que o composto presente é um composto selecionado do seguinte grupo de composto A:
10/05/2018, pág. 8/28
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Grupo de composto A (1) N-metil-2-[2-(2,5-dimetilfenóxi)metiljfenil-2-metoxiacetamida, e (2) N-metil-2-[2-(2,5-dimetilfenóxi)metil]fenil-(2R)-2metoxiacetamida;
[4] O método de acordo com qualquer um de [1] a [3], em que o tratamento da planta é tratamento por pulverização, tratamento do solo, tratamento de sementes ou tratamento hidropônico;
[5] O método de acordo com qualquer um de [1] a [3], em que o tratamento da planta é tratamento de sementes;
[6] O método de acordo com [5], em que o tratamento de sementes é para tratar sementes com 10 g ou mais e 50 g ou menos do composto presente por 100 kg de sementes;
[7] O método de acordo com qualquer um de [1] a [6], em que a planta é arroz, milho, óleo de semente de colza, trigo, manjericão, soja, sorgo ou feijão comum;
[8] O método de acordo com qualquer um de [1] a [7], em que a planta é uma planta transgênica;
[9] O método de acordo com qualquer um de [2] a [8], 5 em que o estresse abiótico é estresse de alta temperatura;
[10] O método de acordo com qualquer um de [2] a [8], em que o estresse abiótico é estresse de baixa temperatura;
(Aqui a seguir, os métodos descritos em [1] a [10] podem ser coletivamente referidos como o método da presente invenção.) e [11] Uso do composto presente para promover o desenvolvimento de uma planta.
O método da presente invenção permite provisão de um excelente método para promover desenvolvimento de planta.
Modo para Realização da Invenção
Na presente invenção, promoção de desenvolvimento de uma planta (aqui a seguir pode ser referido como promoção de desenvolvimento) refere-se a um aumento na taxa de estabelecimento de muda, número
3/38 de folhas saudáveis, tamanho da planta, peso corporal da planta, área da folha, número ou peso de sementes ou frutas, ou número de flores ou frutas estabelecidas.
Promoção de desenvolvimento pode ser quantificada usando os seguintes parâmetros:
(1) Taxa de estabelecimento de semeadura.
Sementes de plantas são semeadas, por exemplo, no solo, em um papel de filtro, em um meio de cultura de ágar ou em areia, e em seguida deixadas passar por cultivo durante um dado período de tempo. Durante o período de cultivo inteiro ou parcial, estresse por temperatura é aplicado, e a porcentagem de mudas sobreviventes é examinada.
(2) Número (ou relação) de folhas saudáveis
Com respeito a cada uma das plantas, o número de folhas saudáveis é contado e o número total de folhas saudáveis é examinado. Alternativamente, a relação do número de folhas saudáveis para o número de folhas totais de plantas é examinada.
(3) Tamanho da planta
Com respeito a cada uma das plantas, o tamanho da base do caule da parte acima do solo aos ramos e folhas na ponta é medido.
(4) Peso corporal da planta
A parte acima do solo de cada uma das plantas é cortada e o peso é medido para determinar um peso fresco de plantas. Alternativamente, a amostra cortada é secada e o peso é medido para determinar um peso seco de plantas.
(5) Área da folha
Uma fotografia de plantas é tirada por uma câmera digital e a área de uma porção verde na fotografia é determinada por software de análise de imagem, por exemplo, Win ROOF (produzido por MITANI CORPORATION) para obter uma área da folha de plantas.
(6) Cor da folha
Depois de amostragem de folhas de plantas, o conteúdo de clorofila é medido usando um medidor de clorofila (por exemplo, SPAD-502,
4/38 produzido por Konica Minolta Holdings, Inc.) para determinar a cor da folha. As plantas são fotografadas com uma câmera digital e a área verde na fotografia é medida por extração de cor para quantificação e utilização do software de análise de imagem, tal como Win ROOF (produzido por MITANI CORPORATION).
(7) Número ou peso de sementes ou frutas
Plantas são desenvolvidas até que elas alcancem frutificação ou amadurecimento de sementes ou frutas, e em seguida o número de frutas por planta é contado ou o peso total de frutas por planta é medido. Depois do cultivo de plantas até que as sementes passassem por amadurecimento, elementos constitutindo o rendimento, tal como o número de espigas, taxa de amadurecimento e peso da semente em milhar são examinados.
(8) Taxa de parâmetro de flor, taxa de parâmetro de fruta, taxa de parâmetro de semente e taxa de carga de semente
Depois do cultivo de plantas até que elas produzissem frutas, o número de parâmetro de flor e o número de parâmetro de fruta são contados para calcular a % da taxa de parâmetro de fruta (100 * número de parâmetro de fruta/número de parâmetro de flor). Depois que as sementes estão amadurecidas, os números de sementes estabelecidas e sementes carregadas são contados para calcular a taxa de parâmetro de semente (%) ((Número de sementes estabelecidas/Número de flores estabelecidas) * 100) e a taxa de carga de semente (%) ((Número de sementes carregadas /Número de sementes estabelecidas) * 100).
No método da presente invenção, quando uma planta é tratada com o composto presente, a planta pode ser uma planta inteira ou parte desta (por exemplo, caule e folha, broto, flor, fruta, panícula, semente, bulbo, tubérculo e raiz). Também, a planta pode ser em qualquer dos vários estágios de desenvolvimento da planta (por exemplo, o período de germinação, incluindo tempo pré-semeadura, tempo de semeadura, e o período antes e depois da emergência de muda depois da semeadura; o período de desenvolvimento vegetativo, incluindo o período de sementeira, o tempo de transplante de muda, o tempo de cortes de plantio ou semeadura e o período de
5/38 desenvolvimento depois do plantio em campo; o período de desenvolvimento reprodutivo, incluindo os períodos antes, durante e depois da floração, imediatamente antes espigamento ou o período de espigamento; e o período de colheita, incluindo um período antes da data de colheita esperada, um período antes da data de amadurecimento esperada e o tempo de iniciação de coloração de fruta). Tal como usado aqui, o termo bulbo refere-se a um bulbo escamoso, cormo, rizoma, raiz tubérculo e rizóforo. As mudas podem incluir cortes e cortes de caule de cana de açúcar.
O composto presente usado na presente invenção é um composto representado pela seguinte fórmula (1):
Figure BR112013025022B1_D0002
em que X1 representa um grupo metila, grupo difluorometila ou grupo etila; X2 representa um grupo metóxi ou grupo metilamino; e X3 representa um grupo fenila, grupo 2-metilfenila ou grupo 2,5-dimetilfenila.
Por exemplo, modalidades dos compostos presentes representados pela fórmula (1) incluem os seguintes compostos:
Um composto da fórmula (1), em que X1 é um grupo metila, difluorometila ou etila;
Um composto da fórmula (1), em que X1 é um grupo metila;
Um composto da fórmula (1), em que X2 é um grupo metóxi ou metilamino;
Um composto da fórmula (1), em que X1 é um grupo metila e X2 é um grupo metóxi;
Um composto da fórmula (1), em que X1 é um grupo metila e X2 é um grupo metilamino;
Um composto da fórmula (1), em que X3 é um grupo fenila, 2metilfenila ou 2,5-dimetilfenila;
Um composto da fórmula (1), em que X3 é um grupo fenila ou 2,5-dimetilfenila;
Um composto da fórmula (1), em que X1 é um grupo metila, X2 é
6/38 um grupo metóxi, e X3 é um grupo 2,5-dimetilfenila;
Um composto da fórmula (1), em que X1 é um grupo metila, X2 é um grupo metilamino, e X3 é um grupo fenila; e
Um composto da fórmula (1), em que X1 é um grupo metila, X2 é um grupo metilamino, e X3 é um grupo 2,5-dimetilfenila.
Exemplos específicos do composto representado pela fórmula (1) são mostrados abaixo.
Nos compostos da fórmula (1), X1, X2 e X3 são qualquer uma das combinações dos substituintes mostrados na Tabela 1.
Tabela 1
X1 X2 X3
ch3 och3 Ph
ch3 och3 2-CH3Ph
ch3 och3 2,5- (CH3)2Ph
ch3 nhch3 Ph
ch3 nhch3 2-CH3Ph
ch3 nhch3 2,5-(CH3)2Ph
chf2 och3 Ph
chf2 och3 2-CH3Ph
chf2 och3 2,5-(CH3)2Ph
chf2 nhch3 Ph
chf2 nhch3 2-CH3Ph
chf2 nhch3 2,5-(CH3)2Ph
c2h5 och3 Ph
c2h5 och3 2-CH3Ph
c2h5 och3 2,5-(CH3)2Ph
c2h5 nhch3 Ph
c2h5 nhch3 2-CH3Ph
C2H5 nhch3 2,'5-(CH3)2Ph
O composto representado pela fórmula (1) pode possuir estereoisômeros tais como isômeros ópticos com base nos átomos de carbono assimétricos, e isômeros tais como tautômeros. Na presente invenção, quaisquer isômeros podem ser contidos e usados, ou sozinhos ou em qual15 quer relação de isômero.
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O composto representado pela fórmula (1) pode tomar a forma de um solvato (por exemplo, um hidrato). Na presente invenção, o composto pode ser usado na forma de um solvato.
O composto representado pela fórmula (1) pode tomar a forma de um cristal e/ou um material amorfo. Na presente invenção, o composto pode ser usado em qualquer forma.
Os compostos da fórmula (1) são aqueles descritos no WO 95/27.693. Estes compostos podem ser sintetizados usando, por exemplo, o método descrito no panfleto.
Especificamente, exemplos do composto representado pela fórmula (1) incluem aqueles representados pelas fórmulas (1a) e (1b), que são preferíveis em termos de promoção eficaz do desenvolvimento das plantas tratadas.
O composto (Ia) é N-metil-2-[2-(2,5-dimetilfenóxi)metil]fenil-(2R)2-metoxiacetamida (No. de Registro de CAS 394657-24-0), um composto da fórmula (1) em que X1 é um grupo metila, X2 é um grupo metilamino, e X3é um grupo 2,5-dimetilfenila. Este composto é representado pela seguinte fórmula (Ia):
Figure BR112013025022B1_D0003
O composto (1b) é N-metil-2-[2-(2,5-dimetilfenoxi)metil]fenil-2metoxiacetamida racêmica (No. de Registro de CAS 173662-97-0), um composto da fórmula (1) em que X1 é um grupo metila, X2 é um grupo metilamino, e X3 é um grupo 2,5-dimetilfenila. Este composto é representado pela seguinte fórmula (1b):
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Figure BR112013025022B1_D0004
Quando usado no método da presente invenção, o composto presente pode ser usado sozinho ou formulado com vários componentes inertes, tal como descrito abaixo.
Exemplos do portador sólido usado na formulação incluem pós ou grânulos finos tais como minerais, tais como argila de caulim, argila de atapulgita, bentonita, montmorilonita, argila branca ácida, pirofilito, talco, terra diatomácea e calcita; materiais orgânicos naturais tais como pó de ráquis de milho e pó de palha de noz; materiais orgânicos sintéticos tais como uréia; sais tais como carbonato de cálcio e sulfato de amônio; e materiais inorgânicos sintéticos tais como óxido de silício hidratado sintético; e como um portador líquido, hidrocarbonetos aromáticos tais como xileno, alquilbenzeno e metilnaftaleno; álcoois tais como 2-propanol, etileno glicol, propileno glicol, e éter de monoetila de etileno glicol; cetonas tais como acetona, ciclohexanona e isoforona; óleo vegetal tal como óleo de soja e óleo de semente de algodão; hidrocarbonetos alifáticos de petróleo, ésteres, dimetilsulfóxido, acetonitrila e água.
Exemplos do tensoativo incluem tensoativos aniônicos tais como sais de éster de sulfato de alquila, sais de sulfonato de alquilarila, sais de sulfosucinato de dialquila, sais de éster de fosfato de éter de alquilarila de polioxietileno, sais de lignosulfonato e policondensados de formaldeído de sulfonato de naftaleno; tensoativos não iônicos tais como éteres de arila de alquila de polioxietileno, copolímeros de bloco alquilpolioxipropileno de polioxietileno e ésteres de ácido graxo de sorbitano; e tensoativos catiônicos tais como sais de alquiltrimetilamônio.
Exemplos dos outros agentes auxiliares de formulação incluem polímeros solúveis em água tais como álcool de polivinila e polivinilpirrolidona, polisacarídeos tais como Goma arábica, ácido algínico e o sal deste,
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CMC (carboximetil-celulose), Goma xantana, materiais inorgânicos tais como silicato de magnésio de alumínio e sol de alumina, conservantes, agentes corantes e agentes de estabilização tais como PAP (isopropila de fosfato de ácido) e BHT.
Quando as plantas são tratadas com o composto presente no método da presente invenção, o tratamento é desempenhado por tratamento das plantas ou suas áreas de cultivo com uma quantidade eficaz do composto presente. No tratamento de plantas ou suas áreas de cultivo, o composto presente é aplicado em uma aplicação única ou aplicações múltiplas.
Especificamente, exemplos das aplicações no método da presente invenção incluem tratamento de folhagem, órgãos florais ou panículas, tal como pulverização de folhagem; tratamento de solo (áreas de cultivo) antes ou depois do plantio; tratamento de sementes, tais como esterilização, imersão ou cobertura de semente; tratamento de mudas; e tratamento de bulbos.
Especificamente, exemplos dos tratamentos de folhagem, órgãos florais ou panículas no método da presente invenção incluem tratamento da superfície de plantas, tal como pulverização de folhagem e pulverização de tronco. Também, exemplos dos tratamentos incluem tratamento por spray de órgãos florais ou plantas inteiras no estágio de floração incluindo antes, durante e depois da floração. Para plantas de safra e outros mais, exemplos dos tratamentos incluem tratamento por spray de panículas ou plantas inteiras no estágio de espigamento.
Exemplos do método de tratamento do solo no método da presente invenção incluem pulverização no solo, incorporação de solo, e perfusão de um líquido químico no solo (irrigação de líquido químico, injeção no solo, e gotejamento de líquido químico). Exemplos do local a ser tratado incluem buraco de plantio, sulco, em torno de um buraco de plantio, em torno de um sulco, superfície inteira de terras de cultivo, as partes entre o solo e a planta, área entre raízes, área debaixo do tronco, sulco principal, solo de desenvolvimento, caixa de crescimento de muda, bandeja de crescimento de muda e sementeira. Exemplos do período de tratamento incluem antes da
10/38 semeadura, no momento da semeadura, imediatamente depois da semeadura, período de crescimento, antes do plantio depositado, no momento do plantio depositado, e período de desenvolvimento depois do plantio depositado. No tratamento do solo, um fertilizante sólido, tal como um fertilizante em pasta, contendo o composto presente pode ser aplicado ao solo. Também, o composto presente pode ser misturado em um líquido de irrigação, e, exemplos deste incluem injeção a aparatos de irrigação (tubo de irrigação, cano de irrigação, borrifador, etc.), misturação no líquido de inundação entre sulcos, misturação em um meio hidropônico e outros mais. Alternativamente, um líquido de irrigação pode ser misturado com o composto presente de antemão e, por exemplo, usado para tratamento por um método de irrigação apropriado incluindo o método de irrigação mencionado acima e os outros métodos tal como irrigação e inundação.
O tratamento de sementes no método da presente invenção refere-se a um processo para tratamento de sementes, bulbos e outros mais de plantas de interesse com o composto presente; exemplos específicos do tratamento incluem um tratamento por pulverização pelo qual uma suspensão do composto presente é atomizado para ser pulverizado na superfície de sementes ou bulbos; um tratamento de esfregaço pelo qual o composto presente na forma de um pó umectável, uma emulsão, um agente fluível ou outros mais é aplicado, diretamente ou depois de ser adicionado com uma pequena quantidade de água, em sementes ou bulbos; um tratamento de imersão em que sementes são imersas em uma solução do composto presente durante um certo período de tempo; um tratamento de cobertura por película; e um tratamento de cobertura por pélete.
Exemplos do tratamento de mudas no método da presente invenção incluem tratamento por pulverização de pulverização às mudas inteiras de uma diluição possuindo uma concentração adequada de ingredientes ativos preparados por diluição do composto presente com água, tratamento de imersão de imersão de mudas na diluição, e tratamento de cobertura aderindo o composto presente formulado em uma formulação em pó às mudas inteiras. Exemplos do método de tratamento do solo antes ou depois da se11/38 meadura de mudas incluem um método de pulverização de uma diluição possuindo uma concentração adequada de ingredientes ativos preparados por diluição do composto presente com água às mudas ou ao solo em torno das mudas depois da semeadura de mudas, e um método de pulverização do composto presente formulado em uma formulação sólida tal como um grânulo ao solo em torno de mudas depois da semeadura de mudas.
O composto presente pode ser misturado com um meio hidropônico em hidropônicos, e pode também ser usado como um dos componentes de meio de cultura em cultura de tecido. Quando o composto presente é usado para hidropônicos, ele pode ser dissolvido ou suspenso em um meio de cultura convencionalmente usado para hidropônicos, tal como fórmula ENSHI, em uma concentração dentro de uma faixa de 3 ppm a 30 ppm. Quando o composto presente é usado no tempo de cultura de tecido ou cultura celular, ele pode ser dissolvido ou suspenso em um meio de cultura convencionalmente usado para cultura de tecido de planta, tal como um meio de cultura MS, em uma concentração dentro de uma faixa de 3 ppm a 30 ppm. Neste caso, de acordo com um método usual, sacarídeos como uma fonte de carbono, vários fitohormônios e outros mais podem ser apropriadamente adicionados.
Quando o composto presente é usado para tratamento de plantas ou sítios de desenvolvimento de plantas, a quantidade de tratamento pode variar de acordo com o tipo de plantas a ser tratado, forma da formulação, período de tratamento e condições meteorológicas, mas está geralmente dentro de uma faixa de 0,1 g a 1.000 g e de preferência de 100 g a 250 g, em termos de uma quantidade de ingrediente ativo, por 10.000 m2. Quando o composto presente é incorporado no solo inteiro, a quantidade de tratamento está geralmente dentro de uma faixa de 0,1 g a 1.000 g, e de preferência de 100 g a 250 g, em termos de uma quantidade de ingrediente ativo, por 10.000 m2.
Neste tempo, uma emulsão, um pó umectável, um agente fluível e uma microcápsula são geralmente usados para o tratamento por pulverização depois de diluição com água. Neste caso, a concentração do ingredi12/38 ente ativo está geralmente dentro de uma faixa de 0,01 ppm a 10.000 ppm, e de referência de 10 ppm a 100 ppm. Uma formulação em pó e um grânulo são geralmente usados para o tratamento quando eles estão sem diluição.
No tratamento de sementes, a quantidade de tratamento do composto presente é geralmente 5 g a 1.000 g e de preferência 10 g a 50 g por 100 kg de sementes. Por exemplo, a quantidade de tratamento do composto presente é de preferência 25 pg a 125 pg por um grão de milho.
As plantas às quais o método da presente invenção pode ser aplicado incluem as seguintes:
Culturas: milho, arroz, trigo, cevada, centeio, aveia, sorgo, algodão, soja, amendoim, trigo sarraceno, beterraba, óleo de semente de colza, girassol, cana de açúcar, tabaco, lúpulo, etc.;
Vegetais: vegetais solanáceos (berinjela, tomate, batata, pimenta, pimentão, etc.), vegetais cucurbitáceos (pepino, abóbora, abobrinha, melancia, melão, melão oriental, etc.), vegetais crucíferos (rabanete Japonês, nabo, rábano picante, couve-rábano, repolho Chinês, repolho, mostarda em folha, brócolis, couve-flor, etc.), vegetais asteráceos (bardana, margarida de coroa, alcachofra, alface, etc.), vegetais liliáceous (cebola verde, cebola, aIho, aspargo, etc.), vegetais apiáceos (cenoura, salsa, aipo, cherivia, etc.), vegetais quenopodiáceos (espinafre, acelga, etc.), vegetais labiados (manjericão Japonês, hortelã, manjericão, etc.), vegetais leguminosos (ervilha, feijão comum, feijão azúqui, feijão-fava, feijão chik, etc.), morango, batata doce, inhame Japonês, inhame, batata konjac amorfofalus, gengibre, quiabo, etc.;
Frutas: frutas pomáceas (maçã, pera, pera Japonesa, marmelo Chinês, marmelo, etc.), frutas carnudas com caroço (pêssego, ameixa, nectarina, umê, cereja, damasco, ameixa seca, etc.), frutas cítricas (tangerina unshiu cítrica, laranja, limão, rima, toranja, etc.), nozes (castanhas, nozes, avelãs, amêndoa, pistache, castanhas de caju, nozes de macadâmia, etc.), bagas (mirtilo, oxicoco, amora preta, framboesa, etc.), uva, caqui, azeitona, ameixa Japonesa, banana, café, tâmara, côcos, palma de óleo, etc.;
Árvores exceto árvores de fruta: chá, amoreira, árvores de flora13/38 ção (Rododendro indicum, camélia, hidrângea, sasanqua, skimmia, cereja, magnólia, murta crepe, osmantus laranja, etc.), árvores de beira de estrada (árvore de freixo, bétula, corniso, eucalipto, ginkgo biloba, lilás, bordo, carvalho, álamo, olaia norte-americana, âmbar líquido, sicamore, zelcova, arborvitae Japonês, abeto, abeto de cicuta, zimbro, pinheiro, espruce, teixo, olmo, castanheiro, etc.), Viburnum awabuki, Podocarpus macrophyllus, cedro, cipreste, cróton, eixo Japonês, fotinia Japonês, etc.;
Gramados: gramados Zoysia (Z. japonica, Z. pacifica, etc.), gramados bermuda (gramado Bermuda, etc.), capins-panasco (topo vermelho, vergado rasteiro, vergado colonial, etc.), capins-do-campo (capim-do-campo de Kentucky, capim-do-campo áspero), fetuscas (fetusca alta, fetusca de mascar, fetusca vermelho rasteiro), gramados de centeio (joio, gramado de centeio, etc.), gramado de pomar, gramado de, etc.; e
Outras plantas: flores ornamentais (rosa, cravo, crisântemo, eustoma, gipsofila, gérbera, cravo-de-defunto, sálvia, petúnia, verbena, tulipa, áster, genciana, lírio, amor-perfeito, ciclâmen, orquídea, lírio-do-vale, alfazema, cepo, repolho ornamental, prímula, poinsetia, gladíolo, catleia, margarida-dos-campos, cimbídio, begônia, etc.), plantas biocombustíveis (Jatrofa, açafroa, camélias, gramado de desvio, miscantus, alpiste de junco, bambu gigante, kenaf, mandioca, salgueiro, etc.), plantas ornamentais, etc.
De preferência, exemplos das plantas às quais o método da presente invenção podem ser aplicadas incluem: chá, maçã, pêra, uva, cereja, pêssego, nectarina, caqui, ameixa Japonesa, ameixa, soja, alface, repolho, tomate, berinjela, pepino, melancia, feijão comum, ervilha, feijão azúqui, gramado, óleo de semente de colza, morango, amêndoa, milho, sorgo, feijão-fava, repolho Chinês, batata, amendoim, arroz, trigo, inhame, batata konjac amorfofalus, inhame Japonês, rabanete Japonês, nabo, salsa, melão oriental, quiabo, gengibre, limão, laranja, toranja, lima, mirtilo, castanha, lúpulo, e manjericão. Mais preferivelmente, exemplos das plantas incluem arroz, milho, óleo de semente de colza, trigo, manjericão, soja, sorgo e feijão comum.
As plantas descritas acima incluem plantas às quais a resis14/38 tência aos seguintes agentes é conferida usando um método de reprodução clássico ou uma técnica de engenharia genética: inibidores de 4hidroxifenilpiruvato-dioxigenase, tais como isoxaflutol; inibidores de acetolactato sintetase (aqui a seguir referido como ALS), tais como imazetapir e tifensulfuron-metila; 5-enolpiruvilchiquimato-3-fosfato sintase (aqui a seguir referido como EPSPS) inibidores tais como glifosato; inibidores de glutamina sintetase, tais como glifosinato; inibidores de acetil-CoA carboxilase, tais como setoxidim; inibidores de protoporfirinogênio oxidase, tal como flumioxazina; dicamba; herbicidas auxinas, tais como 2,4-D; e herbicidas tais como bromoxinila.
Exemplos de uma planta em que resistência foi conferida por um método de reprodução clássico incluem óleo de semente de colza, trigo, girassol e arroz resistente a herbicidas inibitórios de ALS de imidazolinona tais como imazetapir, que já estão comercialmente disponíveis sob um nome de produto de Clearfield (marca registrada). Similarmente, nesse sentido é a soja em cuja resistência a herbicidas inibitórios de ALS de sulfoniluréia tal como tifensulfuron-metila foi conferida por um método de reprodução clássico, que já é comercialmente disponível sob um nome de produto de soja STS. Similarmente, exemplos em cuja resistência aos inibidores de acetilCoA carboxilase tais como oxima de triona ou herbicidas de ácido fenoxipropiônico de arilóxi foi conferida por um método de reprodução clássico incluem milho SR.
A planta em cuja resistência aos inibidores de acetil-CoA carboxilase foi conferida é descrita em Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America (Proc. Natl. Acad. Sei. USA, vol.87, pp.7175-7179 (1990).
Exemplos de uma planta em cuja resistência foi conferida por técnica de engenharia genética incluem variedades resistentes a glifosato de milho, soja, algodão, óleo de semente de colza, beterraba açucareira que possuem um gene EPSPS resistente ao inibidor de EPSPS. Estas variedades já estão comercialmente disponíveis sob os nomes de produto de RoundupReady (marca registrada), Agrisure (marca registrada) GT, Gly-Tol, etc.
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Similarmente, nesse sentido são milho, soja, algodão e óleo de semente de colza que são produzidos resistentes a glifosinato por técnica de engenharia genética, que já é comercialmente disponível sob um nome de produto de LibertyLink (marca registrada). Um algodão produzido resistente a bromoxinila por técnica de engenharia genética já é comercialmente disponível sob um nome de produto de BXN também. Similarmente, há variedades de milho e soja que são resistentes tanto ao glifosato quanto aos inibidores de ALS, e elas foram divulgadas entrar no mercado sob o nome de Optimum (marca registrada) GAT (marca registrada). Também, uma variedade de soja de resistência a imazapir produzida por técnica de engenharia genética foi anunciada entrar no mercado sob o nome de Cultivance (marca registrada).
Acetila CoA carboxilases mutantes que são resistentes aos inibidores de acetil-CoA carboxilase são relatadas, por exemplo, em Weed Science, Vol. 53, pp. 728-746 (2005). Uma planta com resistência aos inibidores de acetil-CoA carboxilase pode ser produzida por introdução de tal gene de acetil-CoA carboxilase mutante na planta por técnica de engenharia genética ou por introdução de uma mutação associada com a resistência em uma acetil-CoA carboxilase de safra. Além disso, uma planta com resistência aos inibidores de acetil-CoA carboxilase e/ou inibidores de ALS pode ser produzida por introdução de mutagênese direcionada por sítio para substituições de aminoácido no gene de acetil-CoA carboxilase de planta e/ou gene de ALS, por meio de introdução de um ácido nucléico mutante possuindo substituições de nucleotídeo em uma célula de planta por utilização de uma técnica representada por técnica de quimeraplastia (Science vol.285, pp.316318(1999)).
Uma planta de safra, tal como soja, com resistência a dicamba pode ser produzida por introdução de um gene codificando uma enzima degradante de dicamba, incluindo dicamba monooxigenase isolada de Pseudomonas maltophilia (Science vol.316, pp.1185-1188 (2007)).
Uma planta de safra com resistência aos sistemas de herbicida de fenóxi, ácido oxiacético de piridina, e ácido ariloxifenoxipropiônico mencionados abaixo pode ser produzida por introdução de um gene codificando
16/38 ariloxialcanoato dioxigenase: herbicidas de fenóxi, tais como 2,4-D, MCPA, diclorprop e mecoprop, herbicidas de ácido oxiacético de piridina, tais como fluroxipir e triclopir, e herbicidas de ácido ariloxifenoxipropiônico, tais como quizalofop-P-etila, haloxifop-P-metila, fluazifop-P-butila, diclofop, fenoxapropP-etila, metamifop, cihalofop-butila e clodinafop-propargila (WO 05/107437, WO 07/053482, WO 08/141154). A planta de safra resultante é chamada uma planta de safra DHT.
Uma planta de safra com resistência aos inibidores de HPPD pode ser produzida por introdução de um gene codificando HPPD que mostra resistência aos inibidores de HPPD (US2004/0058427). Por introdução de genes que permite síntese de ácido homogentísico, que é produzido de HPPD até outra trilha metabólica mesmo quando HPPD é inibido por um inibidor de HPPD, uma planta de safra resistente a inibidores de HPPD pode ser produzida (WO 02/036787). Uma planta com resistência a inibidores de HPPD pode ser produzida por introdução de um gene para superexpressão de HPPD de modo que HPPD possa ser produzido em um nível suficiente para desenvolvimento de planta até na presença de inibidores de HPPD (WO 96/38567). Por introdução de um gene codificando prefenato desidrogenase para aumentar a produção de p-hidroxifenilpiruvato, um substrato de HPPD, além da introdução de um gene para superexpressão de HPPD, uma planta com resistência aos inibidores de HPPD pode ser produzida (Plant Physiol., vol.134, pp.92-100 (2004)).
As plantas descritas acima incluem plantas a cuja resistência a nematódeos e afídios é conferida usando um método de reprodução clássico. Exemplos de tais plantas incluem a planta de soja em que o gene RAG1 (Gene de Afídio de Resistência 1), que confere resistência ao afídio, é introduzido.
As plantas acima mencionadas incluem plantas geneticamente planejadas produzidas usando tais técnicas de engenharia genética, que, por exemplo, são capazes de sintetizar toxinas seletivas como conhecido em gênero Bacillus.
Exemplos de toxinas expressadas em tais plantas geneticamen17/38 te planejadas incluem: proteínas inseticidas derivadas de Bacillus cereus ou Bacillus popilliae; 5-endotoxinas tais como CrylAb, CrylAc, Cry1F, Cry1Fa2, Cry2Ab, Cry3A, Cry3Bb1 ou Cry9C, derivadas de Bacillus thuringiensis; proteínas inseticidas tais como V1P1, VIP2, VIP3, ou VIP3A; proteínas inseticidas derivadas de nematódeos; toxinas geradas por animais, tais como toxina de escorpião, toxina de aranha, toxina de abelha, ou neurotoxinas específicas por inseto; toxinas de fungos de mofo; lectina de planta; aglutinina; inibidores de protease tais como um inibidor de tripsina, um inibidor de serine protease, patatina, cistatina, ou um inibidor de papaína; proteínas inativadoras de ribossoma (RIP) tais como licina, RIP de milho, abrina, lufina, saporina, ou briodina; enzimas metabolizantes de esteroide tais como 3hidroxiesteroide oxidase, ecdiesteroide-UDP-glicosila transferase, ou colesterol oxidase; um inibidor de ecdisona; HMG-COA redutase; inibidores de canal de íons tais como um inibidor de canal de sódio ou inibidor de canal de cálcio; esterase de hormônio juvenil; um receptor de hormônio diurético; estilbeno sintase; bibenzila sintase; quitinase; e glicanase.
Exemplos de toxinas expressadas em tais plantas geneticamente planejadas também incluem: toxinas híbridas de proteínas de óendotoxina tal como CrylAb, CrylAc, Cry1F, Cry1Fa2, Cry2Ab, Cry3A, Cry3Bb1, Cry9C, Cry34Ab ou Cry35Ab e proteínas inseticidas tais como VIP1, VIP2, VIP3 ou VIP3A; toxinas parcialmente deletadas; e toxinas modificadas. Tais toxinas híbridas são produzidas de uma nova combinação dos diferentes domínios de tais proteínas, usando uma técnica de engenharia genética. Como uma toxina parcialmente deletada, CrylAb compreendendo uma deleção de uma porção de uma seqüência de aminoácido tem sido conhecido. Uma toxina modificada é produzida por substituição de um ou múltiplos aminoácidos de toxinas naturais.
Exemplos de tais toxinas e plantas geneticamente planejadas capazes de sintetização de tais toxinas são descritos em EP-A-0 374 753, WO 93/07278, WO 95/34656, EP-A-0 427 529, EP-A-451 878, WO 03/052073, etc.
Toxinas contidas em tais plantas geneticamente planejadas são
18/38 capazes de conferir às plantas resistência particularmente a pestes de inseto pertencentes a Coleópteros, Hemípteros, Dípteros, Lepidópteros e Nematódeos.
Plantas geneticamente planejadas, que compreendem um ou múltiplos genes resistentes à peste inseticidas e que expressam uma ou múltiplas toxinas, já tem sido conhecidas, e algumas de tais plantas geneticamente planejadas já estiveram no mercado. Exemplos de tais plantas geneticamente planejadas incluem YieldGard (marca registrada) (uma variedade de milho para expressão de toxina CrylAb), YieldGard Rootworm (marca registrada) (uma variedade de milho para expressão de toxina Cry3Bb1), YieldGard Plus (marca registrada) (uma variedade de milho para expressão de toxinas CrylAb e Cry3Bb1), Herculex I (marca registrada) (uma variedade de milho para expressão de N-acetila transferase de fosfinotricina (PAT) a fim de conferir resistência a toxina Cry1Fa2 e glifosinato), NuCOTN33B (marca registrada) (uma variedade de algodão para expressão de toxina CrylAc), Bollgard I (marca registrada) (uma variedade de algodão para expressão de toxina CrylAc), Bollgard II (marca registrada) (uma variedade de algodão para expressão de toxinas CrylAc e Cry2Ab), VIPCOT (marca registrada) (uma variedade de algodão para expressão de toxina VIP), NewLeaf (marca registrada) (uma variedade de batata para expressão de toxina Cry3A), NatureGard (marca registrada) Agrisure (marca registrada) GT Advantage (característica resistente a glifosato GA21), Agrisure (marca registrada) CB Advantage (característica broca do milho (CB) Bt11), e Protecta (marca registrada).
As plantas acima mencionadas também incluem plantas geneticamente construídas, usando uma técnica de engenharia genética, que possuem a capacidade de gerar substâncias antipatogênicas possuindo ação seletiva.
Uma proteína PR e similares foram conhecidas, tais como substâncias antipatogênicas (PRPs, EP-A-0 392 225). Tais substâncias antipatogênicas e plantas geneticamente planejadas que as geram são descritas nos EP-A-0 392 225, WO 95/33818, EP-A-0 353 191, etc.
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Exemplos de tais substâncias antipatogênicas expressadas em plantas geneticamente planejadas incluem: inibidores de canal de íons tais como um inibidor de canal de sódio ou um inibidor de canal de cálcio (toxinas de KP1, KP4 e KP6, etc., que são produzidas por vírus, têm sido conhecidos); estilbeno sintase; bibenzila sintase; quitinase; glicanase; uma proteína PR; e substâncias antipatogênicas geradas por microorganismos, tais como um antibiótico de peptídeo, um antibiótico possuindo um hetero anel, um fator de proteína associado com resistência a doenças de planta (que é chamado um gene resistente à doença de planta e é descrito em WO 03/000906). Estas substâncias antipatogênicas e plantas geneticamente planejadas produzindo tais substâncias são descritas nos EP-A-0392225, WO95/33818, EP-A-0353191, etc. Uma variedade de mamão recombinante produzida por introdução do gene de proteína de cobertura de vírus da mancha anelar de mamão (PRSV) já é comercialmente disponível sob o nome de produto de Rainbow Papaya (marca registrada).
A planta mencionada acima inclui plantas em que caracteres vantajosos tais como caracteres melhorados em ingredientes de matéria oleosa ou caracteres possuindo conteúdo de aminoácido reforçado têm sido conferidos por tecnologia de engenharia genética. Exemplos destas incluem VISTIVE (marca registrada) (soja linolênica baixa possuindo conteúdo linôlenico reduzido) ou milho de lisina alta (óleo alto) (milho com teor de óleo ou lisina aumentado).
Variedades sobrepostas são também incluídas em que uma pluralidade de caracteres vantajosos tais como os caracteres herbicidas clássicos mencionados acima ou genes de tolerância a herbicida, genes de resistência a inseto nocivo, genes produtores de substância antipatogênica, caracteres melhorados em ingredientes de matéria oleosa ou caracteres possuindo conteúdo de aminoácido reforçado são combinados.
O método da presente invenção permite a promoção melhorada do desenvolvimento de uma planta tratada com o composto presente, mesmo que a planta tenha sido ou deva ser exposta a um estresse abiótico. Tal como usado aqui, um estresse abiótico é definido como um estresse que
20/38 resulta em inibição de desenvolvimento de uma planta, quando a planta é exposta a uma condição de estresse, devido à função fisiológica reduzida das células da planta e deterioração do estado fisiológico da planta. Tal estresse pode ser quantificado como intensidade de estresse de acordo com a equação mostrada abaixo. O valor de intensidade pode ser 105 a 200, de preferência 110 a 180, e mais preferivelmente 120 a 160.
Equação (I): Intensidade de estresse = 100 * qualquer um dos fenótipos de planta em plantas não sendo expostas a um estresse abiótico/um dos fenótipos de planta em plantas sendo expostas ao estresse abiótico
Estresse abiótico pode ser estresse por temperatura, isto é, estresse de alta ou baixa temperatura, estresse de sal, estresse de água, isto é, estresse de seca ou estresse de umidade excessiva. O estresse de alta temperatura refere-se a um estresse que as plantas experimentam quando elas são expostas a uma temperatura excedendo a temperatura adequada para seu desenvolvimento ou germinação. Especificamente, o estresse de alta temperatura pode ser causado sob condições em que a temperatura de desenvolvimento média é 25°C ou maior, mais severamente 30°C ou maior, e até mais severamente 35°C ou maior no ambiente em que as plantas são cultivadas. O estresse de baixa temperatura refere-se a um estresse que as plantas experimentam quando elas são expostas a uma temperatura menor do que a temperatura adequada para seu desenvolvimento ou germinação. Especificamente, o estresse de baixa temperatura pode ser causado sob condições em que a temperatura de desenvolvimento média é 15°C ou menor, mais severamente 10°C ou menor, e até mais severamente 5°C ou menor no ambiente em que as plantas são cultivadas. O estresse de seca refere-se a um estresse que as plantas experimentam quando elas são expostas a um ambiente de umidade que retarda seu desenvolvimento por prevenção de absorção de água devido a uma redução no conteúdo de água do solo causado por uma escassez de chuva ou irrigação. Especificamente, o estresse de seca pode ser causado sob condições em que o conteúdo de água no solo em que as plantas são desenvolvidas é 15% em peso ou menos,
21/38 mais severamente 10% em peso ou menos, e até mais severamente 7,5% em peso ou menos, ainda que estes valores, possam variar dependendo do tipo do solo, ou em que o valor de pF do solo em que as plantas são desenvolvidas é 2,3 ou mais, mais severamente 2,7 ou mais, e até mais severamente 3,0 ou mais, ainda que estes valores possam variar dependendo do tipo do solo. O estresse de umidade excessiva refere-se a um estresse que as plantas experimentam quando elas são expostas a um ambiente de umidade em que o conteúdo de água no solo é excessivamente alto, de modo que o desenvolvimento das plantas é inibido. Especificamente, o estresse de umidade excessivo pode ser causado sob condições em que o conteúdo de água no solo em que as plantas são desenvolvidas é 30% em peso ou mais, mais severamente 40% em peso ou mais, e até mais severamente 50% em peso ou mais, ainda que estes valores possam variar dependendo do tipo do solo, ou em que o valor de pF do solo em que as plantas são desenvolvidas é 1,7 ou menos, mais severamente 1,0 ou menos, e até mais severamente 0,3 ou menos, ainda que estes valores possam variar dependendo do tipo do solo. O valor de pF do solo pode ser determinado de acordo com o Método para Medição de Valor de pF nas páginas 61 e 62 de Dojyo, Shokubutsu Eiyo, Kankyo Jiten (Enciclopédia of Soil, Plant Nutrition and Environment) (TAIYOSHA Co., Ltd., 1994, Matsuzaka e outros). O estresse de sal referese a um estresse que as plantas experimentam quando elas são expostas a um ambiente que retarda seu desenvolvimento por prevenção de absorção de água devido a um aumento na pressão osmótica causado por acúmulo de sais contidos no solo ou solução hidropônica em que as plantas são cultivadas. Especificamente, o estresse de sal pode ser causado sob condições em que o potencial de pressão osmótica devido aos sais contido no solo ou solução hidropônica é 0,2 MPa (concentração de NaCI de 2.400 ppm) ou maior, severamente 0,25 MPa ou maior, e mais severamente 0,30 MPa ou maior. A pressão osmótica em solo pode ser calculada de acordo com equação de Raoult, mostrada abaixo, por diluição do solo com água e análise do sobrenadante para concentração de sal:
Equação de Raoult: π (atm) = cRT
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R = 0,082 (L«atm/mol-K)
T = Temperatura absoluta (K) c = Concentração molar de íons (mol/L) atm =0,1 MPa
Exemplos
Embora a presente invenção seja mais especificamente descrita por meio de exemplos de formulação, exemplos de tratamento de sementes, e exemplos de teste no seguinte, a presente invenção não é limitada aos seguintes exemplos. Nos seguintes exemplos, a parte representa parte por peso a não ser que de outra forma especificado.
Exemplo de Formulação 1
Totalmente misturados são 3,75 partes de composto (1b), 14 partes de éter de estirilfenila de polioxietileno, 6 partes de sulfonato de benzeno de dodecila de cálcio e 76,25 partes de xileno, a fim de obter emulsões. Exemplo de Formulação 2
Uma suspensão pulverizada por umidade é obtida por misturação de 75 partes de composto (1b), 15 partes de propileno glicol (produzido por Nacalai Tesque) , 15 partes de Soprophor FLK (produzido por Rhodia Nicca), 0,6 parte de Emulsão de Anti-espuma C (produzido por Dow Corning) e 120 partes de água de permuta de íons, seguido por pulverização por umidade da suspensão. Uma solução aquosa espessante é obtida por misturação de 0,3 parte de Kelzan S (produzido por Kelco), 0,6 parte de grânulos Veegum (produzido por R.T. Vanderbilt) e 0,6 parte de Proxel GXL (produzido por Archchemicals) com 72,9 partes de água de permuta de íons. Uma formulação fluível é obtida por misturação de 75,2 partes da suspensão pulverizada por umidade e 24,8 partes da solução aquosa espessante.
Exemplo de Formulação 3
Quinze (15) partes de composto (1b), 1,5 parte de trioleato de sorbitano e 28,5 partes de uma solução aquosa contendo 2 partes de álcool de polivinila são misturadas, e a mistura é submetida à moagem fina de acordo com um método de moagem por umidade. Depois disso, 45 partes de uma solução aquosa contendo 0,05 parte de Goma xantan e 0,1 parte de
23/38 silicato de magnésio de alumínio são adicionados à mistura resultante, e 10 partes de propileno glicol são também adicionados a esta. A mistura obtida é combinada por agitação, a fim de obter formulações fluíveis.
Exemplo de Formulação 4
Quarenta e cinco (45) partes de composto (1b), 5 partes de propileno glicol (produzido por Nacalai Tesque), 5 partes de Soprophor FLK (produzido por Rhodia Nikka), 0,2 parte de uma emulsão anti-espuma C (produzido por Dow Corning), 0,3 parte de proxel GXL (produzido por Arch Chemicals) e 49,5 partes de água de permuta de íons são misturados a fim de obter uma suspensão de carga. Uma centena e cinquenta (150) partes de contas de vidro (diâmetro = 1 mm) são colocadas em 100 partes da suspensão, e a suspensão é moída durante 2 horas enquanto sendo resfriada com água de resfriamento.
Depois de moída, a resultante é filtrada para remover as contas de vidro e formulações fluíveis são obtidas.
Exemplo de Formulação 5
Misturadas para obter uma pré-mistura Al são 50,5 partes de composto. (1b), 38,5 partes de argila de caulim NN (produzido por Takehara Chemical Industrial), 10 partes de Morwet D425 e 1,5 partes de Morwer EFW (produzido por Akzo Nobel Corp.). Esta pré-mistura é moída com um moinho a jato a fim de obter formulações em pó.
Exemplo de Formulação 6
Cinco (5) partes de composto (1b), 1 parte de óxido de silício hidratado sintético, 2 partes de sulfonato de lignina de cálcio, 30 partes de bentonita e 62 partes de argila de caulim são totalmente moídas e misturadas, e a mistura resultante é adicionada com água e totalmente amassada, e em seguida submetida à granulação e secagem a fim de obter formulações de grânulo.
Exemplo de Formulação 7
Formulações em pó são obtidas por misturação de 3 partes de composto (1b), 87 partes de argila de caulim e 10 partes de talco.
Exemplo de Formulação 8
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Vinte e duas (22) partes de composto (1b), 3 partes de sulfonato de lignina de cálcio, 2 partes de lauril sulfato de sódio e 73 partes de óxido de silício hidratado sintético são totalmente moídas e misturadas a fim de obter pós umectáveis.
Exemplo de Tratamento de Sementes 1
Uma emulsão preparada como no Exemplo de Formulação 1 é usada para tratamento de esfregaço em uma quantidade de 100 ml por 10 kg de sementes de sorgo secadas usando uma máquina de tratamento de sementes giratória (embaladora de semente, produzida por Hans-UIrich Hege GmbH) a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 2
Uma formulação fluível preparada como no Exemplo de Formulação 2 é usada para tratamento de esfregaço em uma quantidade de 5 ml por 10 kg de sementes de soja secadas usando uma máquina de tratamento de sementes giratória (embaladora de semente, produzida por Hans-UIrich Hege GmbH) a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 3
Uma formulação fluível preparada como no Exemplo de Formulação 3 é usada para tratamento de esfregaço em uma quantidade de 20 ml por 10 kg de sementes de milho secadas usando uma máquina de tratamento de sementes giratória (embaladora de semente, produzida por HansUIrich Hege GmbH) a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 4
Cinco (5) partes de uma formulação fluível preparada como no Exemplo de Formulação 4, 5 partes de pigmento BPD6135 (produzido por Sun Chemical) e 35 partes de água são misturados para preparar uma mistura. A mistura é usada para tratamento de esfregaço em uma quantidade de 60 ml por 10 kg de sementes de algodão secadas usando uma máquina de tratamento de sementes giratória (embaladora de semente, produzida por Hans-UIrich Hege GmbH) a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 5
Uma formulação em pó preparada como no Exemplo de Formu25/38 lação 5 é usada para tratamento de cobertura em pó em uma quantidade de 5 g por 10 kg de sementes de milho secadas a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 6
Uma formulação em pó preparada como no Exemplo de Formulação 7 é usada para tratamento de cobertura em pó em uma quantidade de 400 g por 100 kg de sementes de arroz secadas a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 7
Uma formulação fluível preparada como no Exemplo de Formulação 2 é usada para tratamento de esfregaço em uma quantidade de 5 ml por 10 kg de sementes de soja secadas usando uma máquina de tratamento de sementes giratória (embaladora de semente, produzida por Hans-UIrich Hege GmbH) a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 8
Uma formulação fluível preparada como no Exemplo de Formulação 3 é usada para tratamento de esfregaço em uma quantidade de 20 ml por 10 kg de sementes de trigo secadas usando uma máquina de tratamento de sementes giratória (embaladora de semente, produzida por Hans-UIrich Hege GmbH) a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 9
Cinco (5) partes de uma formulação fluível preparada como no
Exemplo de Formulação 4, 5 partes de pigmento BPD6135 (produzido por Sun Chemical) e 35 partes de água são misturadas e a mistura resultante é usada para tratamento de esfregaço em uma quantidade de 70 ml por 10 kg de pedaços de tubérculo de batata usando uma máquina de tratamento de sementes giratória (embaladora de semente, produzida por Hans-UIrich Hege GmbH) a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 10
Cinco (5) partes de uma formulação fluível preparada como no
Exemplo de Formulação 4, 5 partes de pigmento BPD6135 (produzido por Sun Chemical) e 35 partes de água são misturadas e a mistura resultante é
26/38 usada para tratamento de esfregaço em uma quantidade de 70 ml por 10 kg de sementes de girassol usando uma máquina de tratamento de sementes giratória (embaladora de semente, produzida por Hans-UIrich Hege GmbH) a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Tratamento de Sementes 11
Uma formulação em pó preparada como no Exemplo de Formulação 5 é usada para tratamento de cobertura em pó em uma quantidade de 4 g por 10 kg de sementes de beterraba açucareira secadas a fim de obter sementes tratadas.
Exemplo de Teste 1
Uma solução de suspensão absoluta contendo cobertura colorida vermelha (Becker Underwood, Inc.) a 5% (V/V), CF-Clear (Becker Underwood, Inc.) a 5% (V/V) e Maxim XL (Syngenta) a 0,4% foi preparada. Uma solução de suspensão foi preparada por dissolução de composto (1b) na solução de suspensão absoluta de modo que 10 a 50 g de composto 1b é aplicado a cada 100 kg de sementes de milho (cultivar: Kuromochi). Em um tubo de centrífuga de 50 ml (produzido por BD Japan), 0,48 ml da solução de suspensão foi colocado para cada 20 g de sementes de milho (cultivar: Kuromochi) e agitado até que a solução fosse secada, desse modo cobrindo as sementes. Como um controle, as sementes foram cobertas com a solução de suspensão absoluta e usadas como sementes para um grupo não tratado.
Duas sementes de milho tratadas foram semeadas no solo de cultura (AISAI) em cada pote plástico (55 mm de diâmetro x 58 mm de altura) e desenvolvidas durante 18 dias sob as seguintes condições: temperatura, 27°C; iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia, 16 horas. O peso fresco da parte acima do solo das plantas foi medido. O experimento foi desempenhado em quatro replicações para cada condição de tratamento e o peso médio por indivíduo foi calculado.
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Tabela 2
Quantidade de Composto (g/10 kg de sementes) Peso fresco médio de parte acima do solo (g) Valor relativo (%)
Composto (1b) 0 4,2 100
10 4,4 105
12,5 4,4 105,
25 5,0 119
50 4,5 107
Como um resultado, o peso fresco da parte acima do solo foi aumentado no grupo tratado com composto (1b) (dentro da quantidade variando de 10 g a 50 g por 100 kg de sementes), quando comparado com o grupo de controle.
Exemplo de Teste 2
Sementes de milho (cultivar: Hughes 5813) foram separadamente tratadas com 25 pg ou 125 pg de composto (1b) para cada semente. A quantidade do composto requerido para o tratamento foi determinada por cálculo assumindo 4.000 grãos por kg de sementes. As sementes foram cobertas usando máquina de tratamento de sementes HEGE11 (produzida por Hans-UIrich Hege). Todos os tratamentos de sementes incluíram Maxim XL (0,167 onça/100 libras), Thiram 42S (2,5 onças/libra), e Cruiser (contendo 0,25 mg/semente de tiametoxam) e polímero CF-Clear em uma concentração de 0,5 onça/libra.
As sementes tratadas foram semeadas e desenvolvidas durante 226 dias, e as plantas de milho foram colhidas para obter grãos. O grupo onde as sementes tratadas do mesmo modo, exceto que a solução de cobertura não contém composto (1b), foram semeadas, foi usado como o grupo não tratado. Durante o teste, nenhuma doença foi observada que afetasse o rendimento no grupo tratado pelo composto presente e o grupo não tratado.
Quando comparado com o grupo não tratado, a quantidade dos grãos colhidos em cada grupo tratado foi aumentada em 11% e 9%, respectivamente, nos grupos semeados com as sementes tratadas com 25 pg e
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125 pg de composto (1b).
Exemplo de Teste 3
Cada uma das soluções de dimetilsulfóxido concentrado a 1.000 vezes (DMSO) de composto (1b) foi diluído 1.000 vezes com água para preparar uma solução de composto (1b) na concentração de teste. A solução foi dispensada em alíquotas de 30 ml em placas de Petri de 90 cm de diâmetro, em que sementes de plantas de milho (cultivar: Koshu) foram imersas e incubadas durante 16 horas em 24°C no escuro. As sementes de milho (cultivar: Koshu) foram semeadas no solo de cultura (AISAI) nos potes plásticos (55 mm de diâmetro x 58 mm de altura), e mudas de milho foram desenvolvidas durante 18 dias sob as seguintes condições: temperatura, 27°C; iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia, 16 horas. Como um controle, uma solução de DMSO aquosa a 0,1% foi preparada, e as sementes foram imersas nesta solução e em seguida semeadas e desenvolvidas em mudas do mesmo modo tal como descrito acima. Este grupo foi usado como o grupo não tratado.
O peso fresco da parte acima do solo das mudas de milho obtidas acima foi medido. O experimento foi desempenhado em quatro replicações para cada planta individual em cada concentração de tratamento e o peso médio por indivíduo foi calculado. Como um resultado, o peso fresco da parte acima do solo foi aumentado no grupo tratado com composto (1b) em uma concentração de 3 ppm, quando comparado com o grupo não tratado.
Tabela 3
Concentração Peso fresco médio de parte acima do solo (g)
Composto (1b) 0 ppm (Grupo não tratado) 4,47
3 ppm 6,60
Exemplo de Teste 4
Sementes de milho (cultivar: DeKalb 61-69) foram semeadas em
33.684 sementes por acre e desenvolvidas. Cada plotagem no campo para tratamento mediu 10 pés de largura e 15,5 pés de comprimento. Os tratamentos foram arranjados usando o método de Projeto de Bloco Completo Aleatorizado com oito replicações para cada tratamento. Grupos tratados
29/38 com a formulação sem composto (1b) foram usados como os grupos não tratados, em que milho foi cultivado da mesma maneira como nos grupos tratados pelo composto presentes. A formulação fluível preparada tal como descrito no Exemplo de Formulação 2 foi aplicada por pulverização de folhagem 111 dias depois da semeadura, em estágio de desenvolvimento R3 de milho.
A porcentagem de folhas verdes entre as folhas mais altas à espiga de milho mais baixa foi determinada para cada grupo tratado por formulação 143 dias depois da semeadura, em estágio de desenvolvimento R6 de milho. Como um resultado, as porcentagens foram 41,3% e 45,6% em média, respectivamente, nos grupos tratados com 100 g e 300 g por hectare de composto (1b), enquanto a porcentagem foi 23,8% em média nos grupos não tratados.
Exemplo de Teste 5
Sementes de óleo de semente de colza (Brasicca napus) foram semeadas e desenvolvidas. No dia 253 depois da semeadura, em estágio de desenvolvimento 65, de acordo com a escala Biologische Bundesanstalt, Bundessortenamt e Chemical industry (BBCH), a formulação fluível preparada tal como descrito no Exemplo de Formulação 2 contendo composto (1b) foi aplicada em uma quantidade de 250 g por hectare. Uma plotagem para o tratamento mediu 6 m x 10 m. Esta plotagem foi o grupo tratado pelo presente composto. Uma plotagem tratada com a formulação sem composto (1b) foi usada como o grupo não tratado, em que plantas foram cultivadas da mesma maneira como no grupo tratado pelo composto presente.
No dia 323 depois da semeadura, quando quase todas as plantas entraram no estágio de desenvolvimento 85, de acordo com a escala BBCH, a porcentagem de vagens restantes verdes entre as vagens das plantas foi examinada e determinada em tanto os grupos tratados pelo presente composto, quanto aos não tratados.
Como um resultado, a porcentagem de vagens verdes no grupo tratado pelo composto presente foi 22,25%, enquanto ela foi 12,75% no grupo não tratado.
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Exemplo de Teste 6
Uma solução de suspensão absoluta contendo cobertura colorida vermelha (Becker Underwood, Inc.) a 5% (V/V), CF-Clear (Becker Underwood, Inc.) a 5% (V/V) e Maxim XL (Syngenta) a 0,4% foi preparada. Uma solução de suspensão foi preparada por dissolução de Composto (1b) na solução de suspensão absoluta de modo que 10 g a 50 g de composto (1b) seja aplicado a cada 100 kg de sementes de milho (cultivar: Kuromochi). Em um tubo de centrífuga de 50 ml (produzido por BD Japan), 0,48 ml da solução de suspensão foi colocado para cada 20 g de sementes de milho (cultivar: Kuromochi) e agitado até que a solução foi secada, desse modo cobrindo as sementes. Como um controle, sementes foram cobertas com a solução de suspensão absoluta e usadas para um grupo não tratado.
Duas sementes de milho tratadas foram semeadas no solo de cultura (AISAI) em cada pote plástico (55 mm de diâmetro x 58 mm de altura) e desenvolvidas durante 4 dias sob as seguintes condições: temperatura, 27°C; iluminância, 5.000 lux; duração do dia, 16 horas. Estas foram submetidas ao teste.
Os potes no dia 4 depois da semeadura foram colocados em um fitotron sob as seguintes condições a fim de expor as plantas ao estresse de baixa temperatura durante 7 dias. Condições: temperatura, 3 ± 2°C; duração do dia, 16 horas; iluminância, cerca de 5.000 lux; umidade, 35 a 80%
As plantas foram desenvolvidas durante outros 7 dias sob as seguintes condições: temperatura, 27°C; umidade, 50 a 75%, iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia, 16 horas. Em seguida, o peso fresco da parte acima do solo das plantas foi medido. O experimento foi desempenhado em quatro replicações para cada condição de tratamento e o peso médio por indivíduo foi calculado.
Como um resultado, um aumento no peso fresco da parte acima do solo foi também observado nas plantas expostas a estresse de baixa temperatura no grupo tratado com composto (1b) (dentro da quantidade variando de 10 g a 50 g por 100 kg de sementes), quando comparado com o grupo de controle.
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Tabela 4
Quantidade de Composto (g/10 kg de sementes) Peso fresco médio de parte acima do solo (g) Valor relativo (%)
Composto (1b) 0 1,18 100
10 1,33 113
12,5 1,34 114
25 1,30 110
50 1,29 109
Exemplo de Teste 7
Em uma placa de Petri, um pedaço de esponja hidropônica (1 cm x 1 cm x 0,2 cm) foi imergido com uma semiconcentração de meio Mura5 shige-e-Skoog (meio de cultura MS: contendo MES a 2,5 mM, sacarose a 1% e solução de vitamina Gamborg a 0,1% G1019 (Sigma-Aldrich)). Neste pedaço de esponja, 4 a 5 sementes de Arabidopsis thaliana (ecotipo Columbia) foram assepticamente semeadas. Depois do tratamento de baixa temperatura (em 4°C durante 2 a 4 dias), as plantas foram desenvolvidas durante 6 dias sob as seguintes condições para obter mudas de Arabidopsis: temperatura, 23°C; umidade, 45%; iluminância, 3.500 lux; duração do dia, 16 horas.
Cada 0,5 ml de uma semi concentração de meio MS foi dispensada em uma placa de 24 cavidades (SUMILON MS-80240; produzido por Sumitomo Bakelite), em que 5 μΙ de uma solução de DMSO concentrado a
1.000 vezes de composto (1b) foi adicionado para preparar meio contendo composto (1b) em uma concentração de 30 ppm. Depois da redução das mudas de Arabidopsis a 2 plantas por esponja, as mudas foram transplantadas no meio contendo composto (1b) em cada cavidade do placa de 24 cavidades, junto com o pedaço de esponja e em seguida desenvolvida durante a noite. Como um controle, uma semiconcentração de meio MS suplementado com DMSO a 0,1% foi preparada e usada como o grupo não tratado.
Subsequentemente, a placa de 24 cavidades em que mudas de Arabidopsis foram colocadas foi selada com parapelícula, colocada em banho de água em 45°C durante 60 minutos para expor as plantas a estresse de alta temperatura.
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As plantas foram desenvolvidas durante outros 8 dias sob as seguintes condições: temperatura, 23°C; iluminância, 3.500 lux; duração do dia, 16 horas. Cada cavidade foi fotografada com uma câmera digital e a área verde na fotografia foi medida usando software de análise de imagem Win ROOF (produzido por MITANI CORPORATION), desse modo quantificando as áreas de folha das plantas.
Um dia depois da exposição ao estresse de alta temperatura, a fluorescência de clorofila (Fv/Fm) em cada cavidade foi medida usando um fluorômetro de clorofila de modulação de pulso (IMAGING-PAM; produzido por WALZ).
Tabela 5
Concentração Área da folha média de plantas
Composto (1b) 0 ppm (Grupo não tratado) 3,4 mm2
30 ppm 12,6 mm2
Exemplo de Teste 8
Sementes de milho (cultivar: PIONEER 31N27) foram semeadas no solo de cultura (AISAI) em potes plásticos (55 mm de diâmetro x 58 mm de altura) e desenvolvidas durante uma semana sob as seguintes condições para obter mudas de milho: temperatura, 20 a 25°C; umidade, 50 a 75%; iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia, 16 horas.
Uma formulação fluível do composto (1b) foi obtida por adição de 120 mg de uma mistura de carbono branco e um sal de amônio de sulfato de éter de alquila de polioxietileno (relação de peso de 1:1) e 300 pl de água a 0,5 mg de composto (1b), seguido por moagem fina por um método de moagem por umidade. Esta formulação fluível foi diluída com 50 ml de água, a qual RINO (produzido por NIHON NOHYAKU) foi adicionado como um espessante à diluição de 5.000 vezes, por meio do que uma solução de spray foi obtida. Uma quantidade suficiente da solução de spray foi aplicada às mudas de milho por utilização de uma máquina de pulverização automática. Como um controle, uma formulação fluível sem composto (1b) foi preparada e em seguida pulverizada ao grupo não tratado.
Subsequentemente, as mudas de milho tratadas com a solução
33/38 de spray foram colocadas, em um fitotron sob as seguintes condições a fim de expor as plantas a estresse de baixa temperatura durante 5 dias.
Condições: temperatura, 2 ± 2°C; hora de iluminação, 16 horas; iluminância, cerca de 5.000 lux; umidade, 35 a 80%
As plantas foram em seguida desenvolvidas durante outros 4 dias sob as seguintes condições: temperatura, 25 a 28°C; umidade, 50 a 75%, iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia, 16 horas. Em seguida, o peso fresco da parte acima do solo das plantas foi medido. O experimento foi desempenhado em quatro replicações para cada condição de tratamento e o peso médio por indivíduo foi calculado.
O peso fresco da parte acima do solo foi aumentado nas plantas expostas a estresse de baixa temperatura no grupo tratado com composto (1b) (dentro da faixa de concentração de 10 ppm a 100 ppm), quando comparado com o grupo não tratado.
Tabela 6
Concentração Peso fresco médio de parte acima do solo (g)
Composto (1b) 0 ppm (Grupo não tratado) 0,79
10 ppm 0,89
30 ppm 0,94
100 ppm 0,90
Exemplo de Teste 9
Cada uma das soluções de dimetilsulfóxido (DMSO) concentrado a 1.000 vezes de composto (1b) foi diluído 1.000 vezes com água para preparar uma solução de composto (1b) na concentração de teste. A solução foi dispensada em alíquotas de 30 ml em placas de Petri de 90 cm de diâmetro, em cujas sementes de plantas de milho (cultivar: Koshu) foram imersas e incubadas durante 16 horas em 24°C no escuro. As sementes de milho foram semeadas no solo de cultura (AISAI) nos potes plásticos (55 mm de diâmetro x 58 mm de altura), e mudas de milho foram desenvolvidas durante 4 dias sob as seguintes condições: temperatura, 27°C; iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia, 16 horas. Como um controle, uma solução de DMSO aquosa a 0,1% foi preparada, e sementes foram imersas nesta solu34/38 ção e em seguida semeadas e desenvolvidas em mudas do mesmo modo tal como descrito acima. Este grupo foi usado como o grupo não tratado.
As mudas de milho foram colocadas em um fitotron sob as seguintes condições a fim de expor as plantas a estresse de baixa temperatura durante 7 dias.
Condições: temperatura, 3 ± 2°C; duração do dia, 16 horas; iluminância, cerca de 5.000 lux; umidade, 35 a 80%
As plantas foram em seguida desenvolvidas durante outros 7 dias sob as seguintes condições: temperatura, 27°C; umidade, 50 a 75%, iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia, 16 horas. Em seguida, o peso fresco da parte acima do solo das plantas foi medido. O experimento foi desempenhado em quatro replicações para cada planta individual para cada condição de tratamento e o peso médio por indivíduo foi calculado.
Como um resultado, o peso fresco da parte acima do solo foi aumentado nas plantas expostas ao estresse de baixa temperatura no grupo tratado com composto (1b) dentro da faixa de concentração de 3 ppm a 30 ppm, quando comparado com o grupo não tratado.
Tabela 7
Concentração Peso fresco médio de parte acima do solo (g)
Composto (1b) 0 ppm (Grupo não tratado) 1,18
3 ppm 1,49
10 ppm 2,25
30 ppm 1,35
Exemplo de Teste 10
Sementes de manjericão (cultivar: Manjericão Doce; Takii) foram semeadas no solo de cultura (AISAI) em potes plásticos (55 mm de diâmetro x 58 mm de altura) e desenvolvidas durante 24 dias sob as seguintes condições para obter uma semeadura de manjericão por pote: temperatura, 27°C; umidade, 50 a 75%; iluminância, cerca de 6.000 lux; duração do dia, 16 horas.
Composto (1b) foi dissolvido em dimetilsulfóxido (DMSO) para obter uma solução de DMSO de composto (1b) em uma concentração de
35/38
1.000 vezes relativa à concentração de teste. Esta solução de DMSO de composto (1b) foi diluída 1.000 vezes com água. Em seguida, Triton X-100 foi adicionado como um tensoativo a uma concentração final de 0,1%. A solução de spray desta forma preparada foi aplicada em uma quantidade suficiente (15 ml por 3 potes) por meio de um spray de mão.
Como um controle, uma solução de spray sem composto (1b) foi preparada e em seguida pulverizada ao grupo não tratado. As plantas foram também desenvolvidas durante 1 dia sob as seguintes condições: temperatura, 27°C; umidade, 50 a 75%; iluminância, cerca de 6.000 lux; duração do dia, 16 horas.
Subseqüentemente, as mudas de manjericão foram colocadas em um fitotron sob as seguintes condições, para expor as plantas a estresse de baixa temperatura.
Condições: temperatura, 3.0°C; iluminância, 800 lux; umidade, a 80%
As plantas foram também desenvolvidas durante outros 2 dias sob as seguintes condições: temperatura, 27°C; umidade, 50 a 75%, iluminância, cerca de 6.000 lux; duração do dia, 16 horas.
A porcentagem da área da folha das porções de folhagens das mudas de manjericão que sobreviveram sem ser danificadas foi classificada como segue: completamente morta com 0% da área da folha sobrevivida à área da folha total: 0; sobrevivida sem qualquer lesão com 100% da área da folha sobrevivida à folha total: 100; e classificada de 0 a 100 por incremento de 1 por observação visual. As classificações de três plantas foram rateadas para determinar o escore de lesão. A parte aérea das mudas de manjericão foi removida para medir o peso fresco da parte acima do solo. O peso médio de três indivíduos foi registrado como o peso fresco da parte acima do solo.
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Tabela 8
Concentração Peso fresco de parte acima do solo (g) Escore de lesão
Grupo não tratado 0 ppm 0,34 17 30
Composto (1b) 10 ppm 0,62
30 ppm 0,72 38
100 ppm 0,92 81
250 ppm 0,94 68
Exemplo de Teste 11
Sementes de óleo de semente de colza (Brasicca napus) foram semeadas em 5,5 kg de sementes por hectare e desenvolvidas. No dia 240 depois da semeadura, no estágio de desenvolvimento 63, de acordo com a escala Biologische Bundesanstalt, Bundessortenamt e Chemical industry (BBCH), a formulação fluível preparada tal como descrito no Exemplo de Formulação 2 contendo composto (1b) foi aplicada em uma quantidade de 250 g por hectare. Um grupo para o tratamento mediu 2 m x 12 m. Este grupo foi o grupo tratado pelo composto presente. Um grupo tratado com a formulação sem composto (1b) foi usado como o grupo não tratado, em que plantas foram cultivadas da mesma maneira como no grupo tratado.
No dia 334 depois da semeadura, o rendimento das sementes foi avaliado. Como um resultado, o rendimento calculado presumindo 9% de conteúdo de água de semente foi 4,55 tons/hectare no grupo tratado pelo composto presente, enquanto ele foi 4,25 tons/hectare no grupo não tratado. Durante o teste, nenhuma doença foi observada que afetasse o rendimento seja no grupo tratado pelo composto presente ou não tratado.
Exemplo de Teste 12
Uma solução de suspensão absoluta contendo cobertura colorida vermelha (Becker Underwood, Inc.) a 5% (V/V), CF-Clear (Becker Underwood, Inc.) a 5% (V/V) e Maxim XL (Syngenta) a 0,4% é preparada. Uma solução de suspensão é preparada por dissolução de Composto (1b) na solução de suspensão absoluta de modo que 0,05 a 0,25 mg de composto (1b) é aplicado por 1 g de sementes (cultivar: Apogee). Máquina de tratamento de sementes HEGE11 (produzida por Hans-UIrich Hege) é usada para mis37/38 turar 1,3 ml da solução de suspensão por 50 g de sementes de trigo para cobrir as sementes. Em seguida, as sementes são secadas. Como um controle, sementes são cobertas com a solução de suspensão absoluta e usadas para um grupo não tratado. Cinco sementes de trigo cobertas são semeadas no solo de cultura (AISAI) em cada pote plástico (55 mm de diâmetro x 58 mm de altura) e desenvolvida durante 3 semanas em 18°C. As plantas são reduzidas para slecionar 3 mudas mostrando bom desenvolvimento.
Na semana 3 depois da semeadura, as mudas são desenvolvidas durante 7 dias sob as seguintes condições para expor as plantas a estresse de alta temperatura: temperatura, 36°C (dia)/32°C (noite), umidade, 60 a 70%; iluminância, cerca de 6.000 lux; duração do dia: 12 horas. Depois da exposição ao estresse de alta temperatura, as plantas são desenvolvidas durante uma semana sob as condições de uma temperatura de 18°C, uma iluminância de cerca de 6.000 lux e uma duração do dia de 16 dias. O peso fresco da parte acima do solo das plantas de teste é examinada em 8 replicações de 3 mudas/pote.
Exemplo de Teste 13
Sementes de milho (cultivar: PIONEER 120 31P41) são semeadas no solo de cultura (AISAI) em potes plásticos (55 mm de diâmetro x 58 mm de altura) e desenvolvidas durante 7 dias sob as seguintes condições: temperatura, 20 a 25°C; umidade, 50 a 75%; iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia, 16 horas.
Uma solução de DMSO de composto (1b) em uma concentração de 1.000 vezes relativa a cada concentração de teste é diluída com água destilada para preparar uma solução de teste. Vinte (20) ml da solução de teste obtida são aplicados em torno da base de cada planta por irrigação de solo, e em seguida as plantas são desenvolvidas durante dois dias sob as seguintes condições: temperatura, 27°C, umidade, 50 a 75%; iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia 16 horas. Este grupo é o grupo tratado pelo composto presente. O grupo ao qual 20 ml de uma solução de DMSO aquosa a 0,1% são aplicados por irrigação de solo em local da solução de DMSO de composto (1b) é usado como o grupo não tratado.
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As plantas submetidas à irrigação de solo são desenvolvidas durante 5 dias sob as seguintes condições, para expor as plantas a estresse de baixa temperatura: temperatura, 2 a 4°C; umidade, 40 a 70%, iluminância, cerca de 5.000 lux; duração do dia, 16 horas em um fitotron. Depois da exposição a estresse de baixa temperatura, as plantas são desenvolvidas durante 4 dias sob as condições de uma temperatura de 20 a 25°C, uma umidade de 50 a 75%, uma iluminância de cerca de 5.000 lux, e uma duração do dia de 16 horas. Em seguida, o peso de planta e o tamanho de folhagens são medidos. Também, depois da exposição a estresse de baixa temperatura, as plantas são desenvolvidas durante 1 dia sob as condições de uma temperatura de 20 a 25°C, uma umidade de 50 a 75%, uma iluminância de cerca de 5.000 lux, e uma duração do dia de 16 horas. Em seguida a fluorescência de clorofila (Fv/Fm) é medida usando um fluorômetro de clorofila de modulação de pulso (MAXI-IMAGING-PAM, WALZ) . O conteúdo de clorofila é medido usando um medidor de clorofila (SPAD-502; produzido por KONICA MINOLTA).
Quando comparado com o grupo não tratado, o tamanho de folhagens e o peso de planta são aumentados nos grupos tratados pelo composto presentes, e promoção de desenvolvimento na parte aérea das plantas é observada. Também, quando comparado com o grupo não tratado, aumentos na fluorescência de clorofila e no conteúdo de clorofila são observados nos grupos tratados pelo composto presentes.
Aplicabilidade Industrial
Utilização do método da presente invenção permite promoção eficaz de desenvolvimento de planta.
1/2

Claims (10)

    REIVINDICAÇÕES
  1. (1) em que X1 representa um grupo metila, grupo difluorometila ou grupo etila; X2 representa um grupo metóxi ou grupo metilamino; e X3 representa um grupo fenila, grupo 2-metilfenila ou grupo 2,5-dimetilfenila; caracterizado pelo fato de que é para promover o desenvolvimento de uma planta.
    1. Método para promover o desenvolvimento de uma planta, caracterizado pelo fato de que compreende tratamento da planta com uma quantidade eficaz de um composto representado pela seguinte fórmula (1):
    em que X1 representa um grupo metila, grupo difluorometila ou grupo etila; X2 representa um grupo metóxi ou grupo metilamino; e X3 representa um grupo fenila, grupo 2-metilfenila ou grupo 2,5-dimetilfenila.
  2. 2/2 em que X representa um grupo metila, grupo difluorometila ou grupo etila; X2 representa um grupo metóxi ou grupo metilamino; e X3 representa um grupo fenila, grupo 2-metilfenila ou grupo 2,5-dimetilfenila.
    2. Método de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo 10 fato de que a planta tem sido ou deve ser exposta a um estresse abiótico.
  3. 3. Método de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o composto representado pela fórmula (1) é um composto selecionado do seguinte grupo de composto A:
    Grupo de composto A (1) N-metil-2-[2-(2,5-dimetilfenóxi)metil]fenil-2-metoxiacetamida, e (2) N-metil-2-[2-(2,5-dimetilfenóxi)metil]fenil-(2R)-2-metoxiacetamida.
  4. 4. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o tratamento da planta é tratamento por
    20 pulverização, tratamento do solo, tratamento de sementes ou tratamento hidropônico.
  5. 5. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o tratamento da planta é tratamento de sementes.
    25 6. Método de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que o tratamento de sementes é tratar sementes com 10 g ou mais e 50 g ou menos por 100 kg de sementes, de um composto representado pela seguinte fórmula, (1):
    Petição 870180038578, de 10/05/2018, pág. 9/28
  6. 6, caracterizado pelo fato de que a planta é arroz, milho, óleo de semente de colza, trigo, manjericão, soja, sorgo ou feijão comum.
  7. 7, caracterizado pelo fato de que a planta é uma planta transgênica.
    7. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a
  8. 8, caracterizado pelo fato de que o estresse abiótico é estresse de alta temperatura.
    10. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que o estresse abiótico é estresse de baixa temperatura.
    11. Utilização de um composto representado pela seguinte fórmula (1):
    8. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a
  9. 9. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a
  10. 10/05/2018, pág. 10/28

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