BR112012028726B1 - Método para preparar uma composição farmacêutica com baixo teor de cloreto - Google Patents

Abstract

métodos de complexação de ciclodextrina para a formulação de inibidores de proteassoma de peptídeos. a presente divulgação fornece métodos para a formulação de composições que compreendem um ou mais inibidores de proteassoma de peptídeo e uma ciclodextrina,com particularidade uma ciclodextrina substituída. estes métodos aumentam substancialmente a solubilidade e estabilidade destes inibidores de proteassoma e facilitam tanto a sua fabricação quanto a sua administração.

Description

Referência Remissiva a Pedido Relacionado

[001] O presente pedido reivindica o benefício do pedido de patente provisório dos Estados Unidos N° 61/644.122, depositado em 8 de maio de 2012, o qual está incorporado neste contexto por referência na sua totalidade.

Campo Técnico

[002] Esta exposição proporciona métodos de complexação de ciclodextrina para formulação de composições que compreende um ou mais inibidores de proteassoma de peptídeos e uma ciclodextrina, ou uma mistura de ciclodextrinas, com particularidade uma ciclodextrina(s) substituída. Tais métodos aumentam substancialmente a solubilidade e a estabilidade destes inibidores de proteassoma e facilitam tanto a sua fabricação quanto a administração.

Antecedentes

[003] O proteassoma foi validado como um alvo terapêutico, como foi demonstrado pela aprovação do FDA de bortezomibe, um inibidor de proteassoma de ácido borônico, para o tratamento de várias indicações de câncer, incluindo mieloma múltiplo. Não obstante, outros inibidores altamente mais específicos de proteassoma que poderiam ter efeitos colaterais menos tóxicos foram descritos recentemente. Estes compostos incluem cetonas de epóxido peptídicas, tais como epoxomicina, descrita na patente U.S. N° 6.831.099, cujos conteúdos estão incorporados neste contexto por referência, e aquelas descritas na patente U.S. N° 7.232.818, cujos conteúdos estão incorporados neste contexto por referência. Não obstante, a baixa solubilidade aquosa de alguns destes compostos dificultam formular composições sob concentração suficientemente alta para permitir a administração da prática com efeitos antineoplásticos ou outros efeitos farmacológicos desejados. Desta forma, são necessários métodos adicionais para a formulação de cetonas de epóxido peptídicas.

Sumário

[004] Proporcionam-se neste contexto métodos de complexação de ciclodextrina para formulação de um inibidor de proteassoma de peptídeo (por exemplo, um composto da fórmula (1) - (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) com uma ciclodextrina. Muitos inibidores de proteassoma de peptídeo foram expostos para ter baixa solubilidade na água. Esta baixa solubilidade pode ser superada através da complexação do composto com uma ciclodextrina utilizando-se os métodos proporcionados neste contexto. Por exemplo, soluções homogêneas de um composto da fórmula (5) (Carfilzomibe) podem ser obtidas sob um pH farmaceuticamente útil (por exemplo, cerca de 3,5 mg/mL) e sob concentrações mais altas (por exemplo, cerca de 5 mg/mL) do que poderiam ser obtidas sem ciclodextrina e os processos de complexação entre o composto e a ciclodextrina proporcionados neste contexto. Adicionalmente ao aumento da solubilidade de um inibidor de proteassoma peptídico na solução, as formulações preparadas pelos métodos proporcionados neste contexto resultam em soluções farmacêuticas que são dotadas de estabilidade surpreendente. A estabilidade de um inibidor complexado é refletida na ausência de precipitação a partir da solução de inibidor complexado homogêneo sobre períodos de tempo e tensões térmicas prolongados. Por exemplo, o inibidor complexado pode permanecer solúvel durante períodos de tempo e sob tensões térmicas que excedem aqueles típicos para o uso prático de produtos farmacêuticos injetáveis manufaturados de forma asséptica. Embora as altas concentrações alcançadas pelos métodos de processamento proporcionados neste contexto possam não ser esperadas para serem termodinamicamente estáveis, a estabilidade física das soluções mostrou não ser afetada pela temperatura de armazenamento (por exemplo, as soluções podem ser estáveis desde -20°C até 25°C), ciclos de congelamento e descongelamento, e liofilização e reconstituição. A estabilidade das soluções supersaturadas de inibidor de proteassoma peptídico e ciclodextrina complexadas é suficiente para tolerar ajustes de pH em seguida à complexação sem precipitação. Por exemplo, a realização da complexação na faixa de pH de 2,5 - 3, em seguida a titulação do pH com solução de hidróxido de sódio para pH 3,5. Esta estabilidade física da solução permite o uso do material complexado em um faixa de pH aceitável para injeção e outros propósitos farmacêuticos, da mesma forma que a estabilidade de exibição em uma faixa de pH onde é obtida estabilidade química e validade adequada. Por essa razão, as composições farmacêuticas preparadas pelos métodos proporcionados neste contexto podem ser soluções supersaturadas que não se precipitam ou diminuem na concentração para uma extensão significativa durante o seu uso em qualquer número de aplicações medicinais (por exemplo, uma solução a granel durante a fabricação de produto estéril pode não se precipitar durante vários dias após filtragem estéril enquanto é mantida em um tanque de contenção estéril de enchimento de frascos. De uma forma assemelhada, as composições farmacêuticas reconstituídas finais podem ser estáveis durante uma faixa de horas até dias facilitando o seu uso como agentes medicinais).

[005] Adicionalmente à produção estável, as soluções altamente concentradas de um inibidor de proteassoma peptídico, as formulações preparadas pelos métodos de complexação proporcionados neste contexto podem ser alcançados sem a degradação química e as limitações de estabilidade de outros métodos de formulação. Por exemplo, os métodos proporcionados neste contexto evitam o uso de ácidos fortes (por exemplo, HCl) para diminuir o pH durante a complexação. Muito embora a diminuição do pH da formulação para um valor menor do que 2 possa facilitar a dissolução do inibidor de proteassoma peptídico e produzir uma solução homogênea antes da complexação, a acidez da solução pode resultar em degradação do inibidor de proteassoma peptídico. Por exemplo, no caso do inibidor de proteassoma peptídico carfilzomibe, o uso de um ácido forte tal como HCl pode resultar em hidrólise do epóxido farmacológico, e através de ataque nucleofílico com íons de cloreto, resultar na formação de um adutor de clorohidrina degradante (CDP):

[006] Com base na sua estrutura, o degradante é classificado como um agente de alquilação, que é uma classe de composto considerada pelo FDA como sendo uma impureza potencialmente genotóxica. Sob um aspecto importante, a partir de um ponto de vista de segurança do produto regulamentado, a utilização dos métodos proporcionados neste contexto evita esses ácidos fortes e por essa razão as reações de degradação do inibidor de proteassoma peptídico para esses compostos podem ser reduzidas de forma significativa e, em alguns casos, podem ser até eliminadas.

[007] Em um aspecto, são apresentados métodos para a preparação de uma composição farmacêutica que incluem: (i) proporcionar uma primeira combinação que inclui: (a) um (ou mais) inibidores de proteassoma de peptídeo (por exemplo, um composto da fórmula (1) - (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo); (b) uma ou mais ciclodextrinas (“CDs”); e (c) água; em que a primeira combinação é heterogênea e o composto ou sal tem uma baixa solubilidade na primeira combinação; e (ii) contactar a primeira combinação com um ácido para formar uma segunda combinação, em que o composto é mais solúvel na segunda combinação do que na primeira combinação.

[008] Em outro aspecto, são apresentados métodos para preparar uma composição farmacêutica, os quais incluem: (i) proporcionar uma primeira combinação que inclui: (a) um composto:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; (b) uma ou mais ciclodextrinas (“CDs”); e (c) água; em que a primeira combinação é heterogênea e o composto ou sal tem uma baixa solubilidade na primeira combinação; e (ii) contactar a primeira combinação com um ácido para formar uma segunda combinação, em que o composto é mais solúvel na segunda combinação do que na primeira combinação.

[009] Em um aspecto adicional, expõem-se métodos para preparar uma composição farmacêutica que incluem: (i) proporcionar uma primeira combinação que inclui: (a) um composto:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; (b) SBECD; e (c) água para injeção; em que a primeira combinação é heterogênea e o composto ou sal tem uma baixa solubilidade na primeira combinação; e (ii) contactar a primeira combinação com uma solução aquosa de ácido cítrico para formar uma segunda combinação, em que o composto é mais solúvel na segunda combinação do que na primeira combinação.

[010] Em um aspecto, são apresentadas composições farmacêuticas, as quais são preparadas por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[011] Em um aspecto, são apresentados métodos para o tratamento de câncer (por exemplo, mieloma múltiplo, por exemplo, mieloma múltiplo que é reincidente e/ ou refratário) em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[012] Em outro aspecto, expõem-se métodos para o tratamento de doença autoimune em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[013] Em outro aspecto, são expostos métodos para tratar uma condição relacionada com enxerto ou transplante em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[014] Em outro aspecto, são expostos métodos para o tratamento de doença neurodegenerativa em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica que é preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[015] Em outro aspecto, são expostos métodos para o tratamento de uma condição fibrótica associada em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[016] Em outro aspecto, são expostos métodos para o tratamento de uma condição fibrótica associada em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[017] Em outro aspecto, são expostos métodos para o tratamento de uma condição isquêmica relacionada em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparadas por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[018] Em outro aspecto, são expostos métodos para o tratamento de uma infecção em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[019] Em outro aspecto, são expostos métodos para o tratamento de uma infecção em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[020] Em outro aspecto, são expostos métodos para o tratamento de doença associada com a perda óssea em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[021] Em outro aspecto, são expostos métodos para o tratamento de uma infecção em um paciente, que incluem administrar ao paciente uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição farmacêutica preparada por qualquer um dos métodos descritos neste contexto.

[022] As concretizações podem incluir um ou mais dos seguintes aspectos.

[023] A primeira combinação não inclui quantidades apreciáveis de quaisquer solvente(s) orgânico(s). Em algumas concretizações, a primeira combinação não inclui qualquer quantidade ou espécie de solvente(s) orgânico(s) descritos na patente U.S. 7.232.818 e/ou 7.417.042 e/ou 7.737.112 e/ou US-2009-0105156 e/ou US-2011 0236428, cada um dos quais é incorporado neste contexto por referência. Em algumas concretizações, a primeira combinação é isenta de qualquer solvente orgânico (por exemplo, contém menos do que 5%, menos do que 4%, menos do que 3%, menos do que 2%, menos do que 1% (p/p ou p/v) de qualquer solvente orgânico). Em algumas concretizações, a primeira combinação é substancialmente isenta de qualquer solvente orgânico (por exemplo, contém menos do que 0,5%, menos do que 0,2, menos do que 0,1, menos do que 0,05% (p/p ou p/v) de qualquer solvente orgânico). Em determinadas concretizações, a primeira combinação não inclui uma quantidade detectável de qualquer solvente orgânico.

[024] A primeira combinação não inclui quantidades apreciáveis de qualquer tampão. Em algumas concretizações, a primeira combinação não inclui qualquer quantidade ou espécie de qualquer tampão(ões) descrito(s) na patente U.S. 7.232.818 e/ou 7.417.042 e/ou 7.737.112 e/ou US-2009-0105156 e/ou US-2011-0236428, cada um dos quais é incorporado neste contexto por referência. Em algumas concretizações, a primeira combinação é isenta de qualquer tampão(ões) (por exemplo, contém menos do que 5%, menos do que 4%, menos do que 3%, menos do que 2%, menos do que 1% (p/p ou p/v) de qualquer tampão). Em algumas concretizações, a primeira combinação é substancialmente isenta de qualquer tampão(ões) (por exemplo, contém menos do que 0,5%, menos do que 0,2, menos do que 0,1, menos do que 0,05% (p/p ou p/v) de qualquer tampão(ões)). Em algumas concretizações, a primeira combinação não inclui uma quantidade detectada de qualquer tampão(ões).

[025] A segunda combinação inclui um complexo do composto e uma ou mais ciclodextrinas.

[026] O ácido é adicionado na forma de uma solução aquosa.

[027] Pelo menos uma ou mais ciclodextrinas é HPBCD ou SBECD (por exemplo, SBECD).

[028] Os inventores descobriram que pode ser vantajoso minimizar a quantidade de íon cloreto (ou outros ânions nucleofílicos) nos métodos e composições farmacêuticas descritos neste contexto.

[029] Em algumas concretizações, pelo menos uma ou mais ciclodextrinas (adicionadas à primeira combinação) é uma ciclodextrina de baixo teor de cloreto. Como utilizada neste contexto, uma “ciclodextrina de baixo teor de cloreto” refere-se a uma ciclodextrina que é dotada de menos do que ou igual a 0,05% p/p de cloreto de sódio, ou se estiver(em) presente(s) uma fonte(s) de cloreto que não seja (ou adicionalmente ao) cloreto de sódio, uma “ciclodextrina de baixo teor de cloreto” refere-se a uma ciclodextrina que é dotada de um teor de íon cloreto que é menor do que ou igual à quantidade de cloreto que estaria presente em uma ciclodextrina que é dotada de 0,05% p/p de cloreto de sódio. Em algumas concretizações, a ciclodextrina de baixo teor de cloreto é uma SBECD de baixo teor de cloreto. A determinação de concentração de cloreto pode ser realizada por uma variedade de métodos conhecidos na técnica (por exemplo, para ciclodextranas obtidas comercialmente a partir da especificação de produto do fabricante, por exemplo, por técnicas gravimétricas, por exemplo, por técnicas potenciométricas).

[030] Em algumas concretizações, a quantidade de íons cloreto presentes (por exemplo, a razão molar de íons cloreto para o composto) é suficientemente baixa de modo a proporcionar uma validade de 2 anos quando armazenado sob 2-8°C.

[031] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 2,0.

[032] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 1.5.

[033] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 1,2.

[034] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 1,0.

[035] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 0,9.

[036] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 0,8.

[037] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 0,7.

[038] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 0,6.

[039] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 0,5.

[040] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 0,4.

[041] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 0,3.

[042] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 0,2.

[043] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação não é maior do que 0,1.

[044] Em algumas concretizações, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação varia desde 0,2 até 1,2 (por exemplo, 0,3 até 1,2,por exemplo, 0,2 até 0,4, por exemplo, 0,3 até 0,4, por exemplo, 0,32).

[045] Nas concretizações, as razões molares dos íons cloreto para o composto descritos neste contexto também podem estar presentes na segunda e/ou terceira combinações.

[046] A título de exemplo, a razão molar de íons cloreto para o composto na primeira combinação pode ser calculada tal como ilustrada adiante utilizando um frasco de pó seco de carfilzomibe (“CFZ”) como a base para o cálculo: Massa de conteúdo do frasco = 3,212 g Massa de CFZ = 61,8 mg Massa máxima de cloreto (sob 0,03% p/p de íons de cloreto) = 0,0009636 g Massa molar máxima de cloreto = 2,714 x 10-5 (massa atômica de Cl = 35,5) Massa molar de CFZ = 8,584 x 10-5 (MW CFZ = 719,9)

[047] Razão molar de Cl/CFZ no estado sólido em um frasco = 0,32 Este cálculo pode ser também determinado para a primeira combinação utilizando-se, por exemplo, o teor de cloreto da ciclodextrina (e qualquer outra fonte de íon cloreto) e a massa do composto que são adicionados para preparar a primeira combinação.

[048] Como aquele versado na técnica pode apreciar, é de se esperar que esta razão seja a mesma na solução de precursor a granel usada para preencher o frasco (pré-liofilização) da mesma forma que quando o teor do frasco de pó seco é reconstituído em água estéril para administração ao paciente.

[049] A provisão de uma primeira combinação (etapa (i)) inclui adicionar o composto a uma solução de uma ou mais ciclodextrinas e a água.

[050] O composto é um sólido cristalino. Nas concretizações, a forma cristalina do composto tem um padrão de difração de pó ao raios-X que compreende de 2 até 8 picos característicos expressos em graus 2θ sob 6,10; 9,32; 10,10; 12,14; 13,94; 18,44; 20,38; e 23,30.

[051] O método inclui ainda misturar a primeira combinação antes de contactar a primeira combinação com um ácido.

[052] As etapas (i) e (ii) são ambas realizadas em um único vaso.

[053] O método inclui ainda misturar a segunda combinação durante um tempo suficiente para alcançar uma terceira combinação homogênea.

[054] A concentração dissolvida e complexada do composto na terceira combinação varia desde 1 mg/mL até 20 mg/mL.

[055] A concentração dissolvida e complexada do composto na terceira combinação varia desde 4 até 8 mg/mL.

[056] O pH da terceira combinação varia desde 2 até 4.

[057] O método inclui ainda a filtragem da terceira combinação.

[058] O método compreende ainda liofilizar a terceira combinação para proporcionar um liofilizado.

[059] O método compreende ainda misturar o liofilizado com um portador farmaceuticamente aceitável.

[060] O portador farmaceuticamente aceitável compreende água estéril para injeção. Nas concretizações, o portador farmaceuticamente aceitável inclui ainda ácido cítrico.

[061] A não ser que de outro modo definido, todos os termos técnicos e científicos usados neste contexto têm o mesmo significado que é comumente compreendido por aquele normalmente versado na técnica com a qual a presente descrição se relaciona. Os métodos e materiais encontram-se descritos neste contexto para o uso na presente exposição; outros métodos e materiais adequados conhecidos na técnica também poderão ser usados. Os materiais, métodos, e exemplos são somente ilustrativos e não se destinam a ser limitativos. Todas as publicações, pedidos de patentes, patentes, sequências, entradas de base de dados, e outras referências mencionadas neste contexto são incorporadas por referência na sua totalidade. No caso de divergência, o presente relatório, incluindo definições, irá controlar.

[062] Outros aspectos e vantagens essenciais da exposição serão evidentes a partir da descrição detalhada seguinte e das figuras, e a partir das reivindicações.

Descrição dos Desenhos

[063] A Figura 1 é um gráfico de linhas que mostra a complexação de CFZ- API por SBECD sobre tempo.

[064] A Figura 2 ilustra a independência das composições farmacêuticas preparadas neste contexto nas propriedades fisioquímicas (por exemplo, dimensão de partícula) do inibidor de proteassoma.

[065] A Figura 3 é um gráfico de linhas que mostra um aumento na solubilização de CFZ-API com concentração de SBECD crescente.

[066] A Figura 4 ilustra a independência da solubilidade do complexo CFZ- API/SBECD na temperatura de processamento ou armazenamento.

[067] A Figura 5 ilustra a correlação entre os níveis do produto de degradação de clorohidrina (CDP) e a interação de dois fatores de água e teor de cloreto sob pH 3,5.

[068] A Figura 6 ilustra a solubilidade de carfilzomibe em SBECD sob pH 1,5 e pH 3,5, 25°C e 5°C, (5,9 mg/mL de ácido cítrico).

Descrição Detalhada

[069] Proporcionam-se neste contexto métodos de complexação de ciclodextrina da formulação de um inibidor de proteassoma peptídico (por exemplo, um composto da fórmula (1) - (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) com uma ciclodextrina. Igualmente proporcionadas neste contexto encontram-se composições farmacêuticas que compreendem um inibidor de proteassoma peptídico e uma ciclodextrina, em que a composição tem um íon cloreto tal como descrito anteriormente neste contexto (por exemplo, a composição é preparada utilizando-se uma ciclodextrina de baixo teor de cloreto; por exemplo, uma razão molar de íons cloreto para o composto é de 0,32). Em algumas concretizações, as formulações que são dotadas de baixo teor de íons cloreto tais como descritas neste contexto podem resultar em formação diminuída de produtos de degradação indesejáveis.

Definições

[070] O termo “alquila Cx-y” refere-se a grupos de hidrocarbonetos saturados substituídos ou não substituídos, incluindo grupos de alquila de cadeia normal e grupos de alquila de cadeia ramificada que contêm desde x até y carbonos na cadeia, incluindo grupos haloalquila tais como trifluorometila e 2,2,2-trifluoroetila, e assemelhados. Os termos “alquenila C2-y” e “alquinila C2-y” referem-se aos grupos alifáticos saturados substituídos ou não substituídos análogos em comprimento e substituição possível às alquilas descritas anteriormente, mas que contêm pelo menos uma ligação dupla ou tripla, respectivamente.

[071] O termo “alcóxi” refere-se a um grupo alquila que é dotado de um oxigênio vinculado ao mesmo. Grupos alcóxi que são representativos incluem metóxi, etóxi, propóxi, terc-butóxi e assemelhados. Um “éter” é dois hidrocarbonetos covalentemente ligados por um oxigênio. Por essa razão, o substituinte de uma alquila que torna esse alquila um éter é ou assemelha-se a um alcóxi.

[072] O termo “alcoxialquila C1-6” refere-se a um grupo alquila C1-6 substituído com um grupo alcóxi, formando deste modo um éter.

[073] O termo “aralquila C1-6”, como utilizado neste contexto, refere-se a um grupo alquila C1-6 substituído com um grupo arila.

[074] Os termos “amina” e “amino” são reconhecidos na técnica e referem-se a aminas tanto não substituídas quanto substituídas e os seus sais, por exemplo, um radical que pode ser representado pelas fórmulas gerais:

em que R9, R10e R10’ cada um independentemente representa um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila, —(CH2)m—R8, ou R9e R10tomado em conjunto com o átomo N ao qual eles estão vinculados completam um heterociclo que é dotado de 4 até 8 átomos na estrutura de anel; R8representa uma arila, uma cicloalquila, uma cicloalquenila, uma heterociclila ou uma policiclila; e m é zero ou um inteiro a partir de 1 até 8. Em algumas concretizações, somente um de R9ou R10é uma carbonila, por exemplo, R9, R10, e o nitrogênio em conjunto não forma uma imida. Em algumas concretizações, R9e R10(e opcionalmente R10^ cada um independentemente representa um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila, ou —(CH2)m—R8. Em determinadas concretizações, um grupo amino é básico, significando que a sua forma protonada tem um pKa acima de 7,00.

[075] Os termos “amida” e “amido” são reconhecidos na técnica como uma carbonila substituída por amino e incluem um radical que pode ser representado pela fórmula geral:

em que R9, R10são como definidos anteriormente. Em algumas concretizações, a amida não incluirá imidas que podem ser instáveis.

[076] O termo “arila” como utilizado neste contexto inclui grupos aromáticos de anel simples substituído ou não substituído de 5, 6, e 7 elementos em que cada átomo do anel é carbono. O termo “arila” também inclui sistemas de anéis policíclicos que são dotados de dois ou mais anéis cíclicos em que dois ou mais carbonos são comuns a dois anéis adjacentes em que pelo menos um dos anéis é aromático, por exemplo, os outros anéis cíclicos podem ser cicloalquilas, cicloalquenilas, cicloalqunilas, arilas, heteroarilas, e/ou heterociclilas. Os grupos arila incluem benzeno, naftaleno, fenantreno, fenol, anilina, e assemelhados.

[077] O termo “tampão” é uma substância que pela sua presença na solução aumenta a quantidade de ácido ou álcali que deve ser adicionada para causar uma mudança de unidade no pH. Desta forma, um tampão é uma substância que auxilia na regulagem do pH da composição. Tipicamente, um tampão é escolhido com base no pH desejado e na compatibilidade com outros componentes da composição. Em geral, um tampão tem um pKa que não é mais do que 1 unidade menor do que ou maior do que o pH desejado da composição (ou que a composição irá produzir na dissolução).

[078] O termo “água” da forma que é utilizado neste contexto refere-se a uma solução líquida de H2O que é dotada de um pH de aproximadamente 7,0.

[079] Os termos “carbociclo” e “carbociclila”, da forma que são utilizados neste contexto, referem-se a um anel não aromático, substituído ou não substituído, em que cada átomo do anel é constituído por carbono. Os termos “carbociclo” e “carbociclicla” também incluem sistemas de anéis policíclicos que são dotadas de dois ou mais anéis cíclicos em que dois ou mais carbonos são comuns a dois anéis adjacentes em que pelo menos um dos anéis é carbocíclico, por exemplo, os outros dois anéis podem ser cicloalquilas, cicloalquenilas, cicloalquinilas, arilas, heteroarilas, e/ou heterociclilas.

[080] O termo “carbonila” é reconhecido na técnica e inclui tais radicais, como podem ser representadas pelas fórmulas gerais:

em que X é uma ligação ou representa um oxigênio ou um enxofre, e R11 representa um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila, —(CH2)m—R8ou um sal farmaceuticamente aceitável, R11’ representa um hidrogênio, uma alquila, uma alquenila ou —(CH2)m—R8, em que m e R8são como definidos anteriormente. Onde X é um oxigênio e R11ou R11’ não é hidrogênio, a fórmula representa um “éster”. Onde X é um oxigênio, e R11é um hidrogênio, a fórmula representa um “ácido carboxílico”.

[081] O termo “heteroaralquila C1-6”, como utilizado neste contexto, refere-se a um grupo alquila C1-6 substituído com um grupo heteroarila.

[082] O termo “heteroarila” inclui estruturas de anel de 5 até 7 elementos aromáticos substituídos ou não substituídos, por exemplo, anéis de 5 até 6 elementos, cujas estruturas de anel incluem de um até quatro heteroátomos. O termo “heteroarila” também inclui sistemas de anel policíclicos que são dotadas de dois ou mais anéis cíclicos em que dois ou mais carbonos são comuns a dois anéis adjacentes em que pelo menos um dos anéis é heteroaromático, por exemplo, os outros anéis cíclicos podem ser cicloalquilas, cicloalquenilas, cicloalquinilas, arilas, heteroarilas, e/ou heterociclilas. Os grupos heteroarila incluem, por exemplo, pirrol, furano, tiofeno, imidazol, oxazol, tiazol, triazol, pirazol, piridina, pirazina, piridazina e pirimidina, e assemelhados.

[083] O termo “heteroátomo” como utilizado neste contexto significa um átomo de qualquer elemento que não seja carbono ou hidrogênio. Por exemplo, heteroátomos incluem nitrogênio, oxigênio, fósforo, e enxofre.

[084] O termo “heterociclila” ou “grupo heterocíclico” refere-se a estruturas de anel de 3 até 10 elementos não aromáticos substituídos ou não substituídos, por exemplo, anéis de 3 até 7 elementos, cujas estruturas de anel incluem de um até quatro heteroátomos. O termo “heterociclila” ou “grupo heterocíclico” também inclui sistemas de anel policíclicos que são dotadas de dois ou mais anéis cíclicos em que dois ou mais carbonos são comuns a dois anéis adjacentes em que pelo menos um dos anéis é heterocíclico, por exemplo, dos outros anéis cíclicos podem ser cicloalquilas, cicloalquenilas, cicloalquinilas, arilas, heteroarilas, e/ou heterociclilas. Os grupos heterociclila incluem, por exemplo, piperidina, piperazina, pirrolidina, morfolina, lactonas, lactamas, e outras assemelhadas.

[085] O termo “hidroxialquila C1-6” refere-se a um grupo alquila C1-6 substituído com um grupo hidróxi.

[086] O termo “tioéter” refere-se a um grupo alquila, tal como definido anteriormente, que é dotado de um radical de enxofre vinculado ao mesmo. Em algumas concretizações, o “tioéter” é representado por —S—alquila. Os grupos tioéter representativos incluem metiltio, etiltio, e outros assemelhados.

[087] O termo “substituído” refere-se aos radicais que são dotadas de substituintes que substituem um hidrogênio em um ou mais átomos de não hidrogênio da molécula. Será compreendido que “substituição” ou “substituído com” inclui a condição implícita de que essa substituição está de acordo com a valência permitida do átomo substituído e o substituinte, e que a substituição resulta em um composto estável, por exemplo, que não é submetido espontaneamente a transformação, tal como por rearranjo, ciclização, eliminação, etc.. Como utilizado neste contexto, o termo “substituído” é considerado como incluindo todos os substituintes permissíveis de compostos orgânicos. Em um aspecto amplo, os substituintes permissíveis incluem os substituintes acíclicos e cíclicos, ramificados e não ramificados, carbocíclicos e heterocíclicos, aromáticos e não aromáticos de compostos orgânicos. Os substituintes permissíveis podem ser um ou mais e o mesmo ou diferentes para os compostos orgânicos apropriados. Para os propósitos desta exposição, os heteroátomos tais como nitrogênio podem ser dotados de substituintes de hidrogênio e/ou quaisquer substituintes permissíveis dos compostos orgânicos descritos neste contexto que satisfazem as valências dos heteroátomos. Os substituintes podem incluir, por exemplo, um halogênio, uma hidroxila, uma carbonila (tal como uma carboxila, uma alcoxicarbonila, uma formila, ou uma acila), uma tiocarbonila (tal como um tioéster, um tioacetato, ou um tioformato), uma alcoxila, uma fosforila, um fosfato, um fosfonato, um fosfinato, um amino, um amido, uma amidina, uma imina, um ciano, um nitro, um azido, uma sulfidrila, um alquiltio, um sulfato, um sulfonato, uma sulfamoíla, um sulfonamido, uma sulfonila, uma heterociclila, uma aralquila, ou um radical aromático ou heteroaromático. Será compreendido por aqueles versados na técnica que os radicais substituídos na cadeia de hidrocarbonetos podem eles mesmos ser substituídos, se for apropriado.

[088] Em algumas concretizações, os compostos proporcionados neste contexto, ou os seus sais, são substancialmente isolados ou purificados. Por “isolados substancialmente” fica entendido que o composto é pelo menos parcialmente ou substancialmente separados do ambiente no qual ele foi formado ou detectado. A separação parcial pode incluir, por exemplo, uma composição enriquecida nos compostos proporcionados neste contexto. A separação substancial pode incluir composições que contêm pelo menos cerca de 50%, pelo menos cerca de 60%, pelo menos cerca de 70%, pelo menos cerca de 80%, pelo menos cerca de 90%, pelo menos cerca de 95%, pelo menos cerca de 97%, ou pelo menos cerca de 99%, em peso, dos compostos, ou do seu sal. Os métodos para isolar os compostos e os seus sais são rotina na técnica.

[089] Como utilizado neste contexto, o termo “peptídeo” refere-se a uma cadeia de aminoácidos que é cerca de dois até cerca de dez aminoácidos de comprimento.

[090] Como utilizado neste contexto, o termo aminoácido “natural” ou “que se apresenta naturalmente” refere-se a um dos vinte aminoácidos mais comuns de se apresentarem. Os aminoácidos naturais são referidos pelas suas abreviaturas padrão de uma ou de três letras.

[091] O termo “aminoácido não natural” ou “não natural” refere-se a qualquer derivado ou análogo estrutural de um aminoácido natural que inclui as formas D, e os derivados de aminoácidos β e Y.Observa-se neste contexto que determinados aminoácidos, por exemplo, hidroxiprolina, que são classificados como um aminoácido não natural neste contexto, pode ser encontrado na natureza dentro de um determinado organismo ou uma proteína específica. Exemplos não limitativos de aminoácidos não naturais incluem: β-Alanina (β-Ala), Ácido y-Aminobutírico (GABA), Ácido 2-Aminobutírico (2-Abu), Ácido α,β-Dehidrodro-2-aminobutirico (Δ-Abu), ácido 1-Aminociclopropano-1-carboxílico (ACPC), ácido Aminoisobutírico (Aib), ácido 2- Amino-tiazolina-4-carboxílico, ácido 5-Aminovalérico (5-Ava), ácido 6- Aminohexanóico (6-Ahx), ácido 8-Aminooctanóico (8-Aoc), ácido 11- Aminoundecanóico (11-Aun), ácido 12-Aminododecanóico (12-Ado), ácido 2- Aminobenzóico (2-Abz), ácido 3-Aminobenzóico (3-Abz), ácido 4-Aminobenzóico (4- Abz), ácido 4-Amino-3-hidróxi-6-metilheptanóico (Statina, Sta), ácido Aminooxiacético (Aoa), ácido 2-Aminotetralina-2-carboxílico (Atc), ácido 4-Amino-5-ciclohexila-3- hidroxipentanóico (ACHPA), para-Aminofenilalanina (4-NH2-Phe), Bifenilalanina (Bip), para-Bromofenilalanina (4-Br-Phe), orto-Clorofenilalanina (2-Cl-Phe), meta- Clorofenilalanina (3-Cl-Phe), para-Clorofenilalanina (4-Cl-Phe), meta-Clorotirosina (3- Cl-Tyr), para-Benzoilfenilalanina (Bpa), terc-Butilglicina (Tle), Ciclohexilalanina (Cha), Ciclohexilglicina (Chg), ácido 2,3-Diaminopropiônico (Dpr), ácido 2,4-Diaminobutírico (Dbu), 3,4-Diclorofenilalanina (3,4-Cl2-Phe), 3,4-Diflurorfenilalanina (3,4-F2-Phe), 3,5- Diiodotirosina (3,5-12-Tyr), orto-Fluorofenilalanina (2-F-Phe), meta-Fluorofenilalanina (3-F-Phe), para-Fluorofenilalanina (4-F-Phe), meta-fluorotirosina (3-F-Tyr), Homoserina (Hse), Homofenilalanina (Hfe), Homotirosina (Htyr), 5-Hidroxitriptofano (5-OH-Trp), Hidroxiprolina (Hyp), para-Iodofenilalanina (4-1-Phe), 3-iodotirosina (3-I- Tyr), ácido Indolina-2-carboxílico (Idc), ácido Isonipecótico (Inp), meta-metiltirosina (3- Me-Tyr), I-Naftilalanina (1-Nal), 2 Naftilalanina (2-Nal), para-Nitrofenilalanina (4-NO2- Phe), 3-Nitrotirosina (3-NO2-Tyr), Norleucina (Nle), Norvalina (Nva), Omitina (Orn), orto-Fosfotirosina (H2PO3-Tyr), ácido Octahidroindol-2-carboxílico (Oic), Penicilamina (Pen), Pentafluorofenil alanina (F5-Phe), Fenilglicina (Phg), ácido Pipecólico (Pip), Propargilglicina (Pra), ácido Piroglutâmico (pGlu), Sarcosina (Sar), ácido Tetrahidroisoquinolina-3-carboxílico (Tic), e ácido Tiazolidina-4-carboxílico (Tioprolina, Th). A estereoquímica dos aminoácidos pode ser designada pela precedência do nome ou abreviatura com a designação “D” ou “d” ou “L” ou “l” conforme for apropriado. Alternativamente, os centros quirais podem ser representados com as designações (S)-, ou (R)- convencionais. Além disso, podem ser empregados aminoácidos αN-alquilados, da mesma forma que aminoácidos que são dotados de cadeias laterais que contêm aminas (tais como Lys e Orn) em que a amina foi acilada ou alquilada. Vide, por exemplo, “Peptides and Mimics, Design of Conformationally Constrained” by Hruby e Boteju, in Molecular Biology e Biotechnology: A Comprehensive Desk Reference, ed. Robert A. Meyers, VCH Publishers (1995), pp. 658-664, que fica incorporado neste contexto por referência.

[092] O termo “complexação” como utilizado neste contexto refere-se à formação de um complexo de inclusão intermolecular, ou uma associação intermolecular, em solução e entre um ou mais inibidores de proteassoma de peptídeo e uma ou mais moléculas de ciclodextrina. A inclusão e/ou a associação proporciona utilidade como um mecanismo que aumenta substancialmente a concentração do(s) inibidor(s) que pode ser alcançada em solução aquosa comparada com a dissolução de fase aquosa em uma faixa de pH similar sem o agente de complexação (ou seja, uma ou mais moléculas de ciclodextrina).

[093] O termo tratamento “profilático ou terapêutico” é reconhecido na técnica e inclui a administração ao hospedeiro de uma ou mais composições em apreço. Se for administrado antes da manifestação clínica da condição indesejável (por exemplo, doença ou outro estado indesejável do animal hospedeiro), então o tratamento é profilático, (ou seja, ele protege o hospedeiro contra o desenvolvimento da condição indesejável), enquanto que se ele for administrado depois da manifestação da condição indesejável, o tratamento é terapêutico, (ou seja, ele destina-se a diminuir, melhorar, ou estabilizar a condição indesejável existente ou os seus efeitos colaterais).

[094] O termo “proteassoma” como utilizado neste contexto é entendido no sentido de incluir proteassomas imunológicos e constitutivos.

[095] Como utilizado neste contexto, o termo “inibidor” é entendido no sentido de descrever um composto que bloqueia ou reduz uma atividade de uma enzima ou sistema de enzimas, receptores, ou outro alvo farmacológico (por exemplo, inibição da clivagem proteolítica de substratos de peptídeos fluorogênicos padrão, tais como suc-LLVY-AMC, Box-LLR-AMC e Z-LLE-AMC, inibição de várias atividades catalíticas do proteassoma 20S). Um inibidor pode atuar com inibição competitiva, não competitiva, ou incapaz de ser competitiva. Um inibidor pode ligar-se reversívelmente ou irreversívelmente, e por essa razão o termo inclui compostos que são substratos suicidas de uma enzima. Um inibidor pode modificar um ou mais locais no ou próximo do local ativo da enzima, ou pode causar uma mudança de conformação em outro lugar na enzima. O termo inibidor é usado mais amplamente neste contexto do que na literatura científica de maneira a também abranger outras classes dos agentes farmacologicamente ou terapeuticamente úteis, tais como agonistas, antagonistas, estimulantes, cofatores, e outros assemelhados.

[096] Da forma que é utilizado neste contexto, “baixa solubilidade” refere-se a ser moderadamente solúvel, levemente solúvel, muito levemente solúvel, praticamente insolúvel, ou insolúvel em, por exemplo, água ou outra solução (por exemplo, uma primeira combinação); os termos “moderadamente solúvel, levemente solúvel, muito levemente solúvel, praticamente insolúvel, ou insolúvel” corresponde no significado aos termos gerais da United States Pharmacopeia (USP) para a expressão de solubilidade aproximada. Vide, por exemplo, DeLuca e Boylan em Pharmaceutical Dosage Forms: Parenteral Medications, vol. 1, Avis, K.E., Lackman, L. and Lieberman, H.A., eds; Marcel Dekkar: 1084, páginas 141-142:

[097] “Heterogêneo”, como utilizado neste contexto, refere-se a uma solução que é dotada de uma composição não uniforme (multifase). Por exemplo, uma solução heterogênea pode incluir uma suspensão de partículas sólidas em um líquido (por exemplo, uma pasta).

[098] “Homogêneo”, como utilizado neste contexto, refere-se a uma solução que é consistente ou uniforme em todo o seu volume (fase única, observada como uma solução clara).

[099] Uma “quantidade terapeuticamente eficaz” de um composto, com relação ao método de tratamento em apreço, refere-se a uma quantidade do(s) composto(s) em um preparado que, quando administrado como parte de um regime de dosagem desejada (para um paciente, por exemplo, um ser humano), alivia um sintoma, melhora uma condição, ou retarda o aparecimento de condições de doença, de acordo com padrões clinicamente aceitáveis para o distúrbio ou condição a ser tratada ou para propósito cosmético, por exemplo, sob uma razão risco/benefício razoável aplicável a qualquer tratamento médico.

[0100] Como utilizado neste contexto, o termo “tratar” ou “tratamento” inclui reverter, reduzir, ou controlar os sintomas, sinais clínicos, e patologia subjacente de uma condição de uma maneira a aperfeiçoar ou estabilizar uma condição do paciente.

Compostos

[0101] Proporcionados neste contexto encontram-se métodos para preparar formulações de inibidores de proteassoma de peptídeo que tem características de baixa solubilidade na água. Os inibidores de proteassoma de peptídeo compreendem um radical que contém epóxido ou aziridina, que contém grupos próximos aos anéis de três elementos, que contêm heteroátomos, de forma tal que é facilitada uma reação de abertura de anel do anel de três elementos que contém heteroátomos. Esses grupos incluem, por exemplo, grupos de remoção de elétrons tais como uma carbonila. Em algumas concretizações, um inibidor de proteassoma peptídico é um inibidor de proteassoma epóxido peptídico. Como utilizado neste contexto, o “inibidor de proteassoma epóxido peptídico” compreende um radical cetona que é dotado de um grupo epóxi em um lado da cetona com um peptídeo no outro.

[0102] O peptídeo de um inibidor de proteassoma peptídico inclui de 2 até 10 aminoácidos. Por exemplo, o peptídeo pode ter de 2 até 8 aminoácidos; 2 até 6 aminoácidos; 2 até 5 aminoácidos; 2 até 4 aminoácidos; 3 até 10 aminoácidos; 4 até 10 aminoácidos; 6 até 10 aminoácidos; 8 até 10 aminoácidos; 3 até 4 aminoácidos; 3 até 5 aminoácidos; e 4 até 6 aminoácidos. Em algumas concretizações, o peptídeo tem de 3 ou 4 aminoácidos.

[0103] Em algumas concretizações, um inibidor de proteassoma peptídico é um composto da fórmula (1):

em que: X é oxigênio, NH ou N(alquila C1-6); W é um peptídeo que compreende de dois até dez aminoácidos, em que os aminoácidos podem ser naturais, não naturais, ou uma combinação dos mesmos; e R é um átomo de hidrogênio ou um grupo alquila C1-4, que pode ser substituído com um ou mais de uma funcionalidade de hidróxi, halogênio, amino, carbóxi, carbonila, tio, sulfeto, éster, amida ou éter; ou um sal farmaceuticamente aceitável dos mesmos.

[0104] Em algumas concretizações, X é configurado para facilitar a interação com um grupo nucleofílico N-terminal em uma hidrolase Ntn. Por exemplo, interações irreversíveis de inibidores de enzimas com a subunidade β5/Pre2 de proteassoma 20S que conduz à inibição parecem ser facilitadas pela configuração ilustrada anteriormente. No caso de outras hidrolases Ntn, a estereoquímica oposta do carbono α dos epóxidos de peptídeos ou aziridinas de peptídeos pode ser de utilidade. Em algumas concretizações, X é oxigênio.

[0105] A estereoquímica do carbono α‘ (aquele carbono que forma uma parte do anel de epóxido ou aziridina) pode ser (R) ou (S). Observe-se que um composto pode ter um número de estereocentros que são dotados do up-down indicado (ou β- α, onde β como traçado neste contexto está acima do plano da página) ou relação (R)-(S) (ou seja, não é necessário que cada estereocentro no composto se conforme às preferências estabelecidas). Em algumas concretizações, a estereoquímica do carbono α‘ é (R), ou seja, o átomo X é β, ou acima do plano da molécula, quando traçado como na fórmula (1).

[0106] No caso de um composto da fórmula (1), o carbono β‘ é substituído com dois átomos de hidrogênio. Com relação à estereoquímica, o carbono α‘ quiral é indicado com uma estrela, e são seguidas as regras Cahn-Ingold-Prelog para a determinação da estereoquímica absoluta. Estas regras encontram-se descritas, por exemplo, em Organic Chemistry, Fox e Whitesell; Jones e Bartlett Publishers, Boston, Mass. (1994); Section 5-6, pp 177-178, seção essa que está incorporada neste contexto por referência. A estereoquímica do carbono α‘ é (R) quando o oxigênio ou nitrogênio tem a prioridade mais alta, o grupo peptídeo-cetona tem a segunda prioridade mais alta, e o grupo —CH2—X— tem a terceira prioridade mais alta. Se as prioridades relativas dos grupos de peptídeo-cetona, —CH2—X—, e R mudam, a estereoquímica nominal pode mudar, mas a configuração essencial dos grupos pode permanecer a mesma, para algumas concretizações. Ou seja, com referência à estrutura geral imediatamente acima, o peptídeo-cetona é unido ao carbono a’ quiral a partir da esquerda, R é unido ao carbono a’ quiral a partir da direita, e o(s) átomo(s) X projeta-se(s) a partir do plano da página. O átomo de nitrogênio do anel de aziridina também pode, em princípio, ser quiral, tal como discutido em March, Advanced Organic Chemistry, 4th Ed. (1992) Wiley-Interscience, New York, pp. 98-100, páginas estas que estão incorporadas neste contexto por referência.

[0107] W é um peptídeo que compreende de dois a dez aminoácidos, em que os aminoácidos podem ser naturais, não naturais, ou uma combinação dos mesmos. Por exemplo, o peptídeo pode ter de 2 até 8 aminoácidos; de 2 até 6 aminoácidos; de 2 até 5 aminoácidos; de 2 até 4 aminoácidos; de 3 até 10 aminoácidos; de 4 até 10 aminoácidos; de 6 até 10 aminoácidos; de 8 até 10 aminoácidos; de 3 até 4 aminoácidos; de 3 até 5 aminoácidos; e de 4 até 6 aminoácidos. Em algumas concretizações, o peptídeo tem de 3 ou 4 aminoácidos. Em algumas concretizações de utilidade para a inibição da atividade semelhante à quimiotripsina (CT-L) do proteassoma, entre quatro e oito aminoácidos estão presentes, e de acordo com algumas concretizações para a inibição de CT-L, entre quatro e seis aminoácidos estão presentes. Em outras concretizações de utilidade para a inibição da atividade de PGPH do proteassoma, entre dois e oito aminoácidos estão presentes, e de acordo com algumas concretizações para inibição do PGPH, entre três e seis aminoácidos estão presentes. A ligação entre W e o radical cetona na fórmula (1) pode ser feita entre qualquer um dos términos do peptídeo. Por exemplo, de acordo com algumas concretizações, a cetona é ligada ao término carbóxi do peptídeo. Alternativamente, a cetona pode ser ligada ao término amino do peptídeo. Em algumas concretizações, a cetona pode ser ligada a uma cadeia lateral do peptídeo.

[0108] Exemplos de um composto da fórmula (1) podem ser encontrados na patente U.S. N° 7.737.112, que é incorporada por referência na sua totalidade neste contexto. Em algumas concretizações, um composto da fórmula (1) tem uma baixa solubilidade em água.

[0109] O inibidor de proteassoma peptídico para a inibição de atividade semelhante à quimiotripsina (CT-L) de Ntn pode incluir um peptídeo que tem pelo menos quatro aminoácidos. Em algumas concretizações de inibidor de CT-L, o inibidor tem um peptídeo que é dotado de pelo menos quatro aminoácidos e um radical cetona α‘,β‘-epóxi ou cetona α‘,β‘-aziridina (cetonas epóxi de tetrapeptídeo ou cetonas aziridina de tetrapeptídeo).

[0110] Em algumas concretizações, um inibidor de proteassoma peptídico que é dotado de baixa solubilidade em água pode ser um composto da fórmula (II):

em que: cada A é selecionado independentemente a partir de C=O, C=S, e SO2; ou A é opcionalmente uma ligação covalente quando adjacente a uma ocorrência de Z; L está ausente ou é selecionado a partir de C=O, C=S, e SO2; M está ausente ou é alquila C1-12; Q está ausente ou é selecionado a partir de O, NH e N(alquila C1-6); X é selecionado a partir de O, NH e N(alquila C1-6); Y está ausente ou é selecionado a partir de O, NH, N(alquila C1-6), S, SO, SO2, CHOR10, e CHCO2R10; cada Z é selecionado independentemente a partir de O, S, NH e N(alquila C1 6); ou Z é opcionalmente uma ligação covalente quando adjacente a uma ocorrência de A; R1, R2, R3, e R4são cada um selecionado independentemente a partir de alquila C1-6, hidroxilalquila C1-6, alcoxialquila C1-6, arila, e aralquila C1-6, qualquer um dos quais é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes de amida, amina, ácido carboxílico (ou um sal do mesmo), éster, tiol, ou tioéter; R5é N(R6)LQR7; R6é selecionado a partir de hidrogênio, OH, e alquila C1-6; R7é selecionado a partir de hidrogênio, alquila C1-6, alquenila C1-6, alquinila C1-6, arila, aralquila C1-6, heteroarila, heteroaralquila C1-6, R8ZAZ-alquila C1-8-, R11Z- alquila C1-8-, (R8O)(R9O)P(=O)O—alquila Ci-8-ZAZ-alquila C1-6-, R8ZAZ-alquila C1-8- ZAZ-alquila C1-8-, heterociclilMZAZ-alquila C1-8-, (R8O)(R9O)P(=O)O—alquila C1-8-, (R10)2N—alquila C1-12-, (R10)3N+-alquila C1-12-, heterociclilM-, carbociclilM-, R11SO2alquila C1-8-, e R11SO2NH; ou R6e R7em conjunto são alquila C1-6-Y—alquila C1-6, alquila C1-6-ZAZ-alquila C1-6, ZAZ-alquila C1-6-ZAZ-alquila C1-6, ZAZ-alquila C1-6-ZAZ, ou alquila C1-6-A, formando desse modo um anel; R8e R9são selecionados independentemente a partir de hidrogênio, cátion de metal, alquila C1-6, alquenila C1-6, alquinila C1-6, arila, heteroarila, aralquila C1-6, e heteroaralquila C1-6, ou R8e R9em conjunto são alquila C1-6, formando desse modo um anel; cada R10é selecionado independentemente a partir de hidrogênio e alquila C1 6; e R11é selecionado independentemente a partir de hidrogênio, alquila C1-6, alquenila C1-6, alquinila C1-6, carbociclila, heterociclila, arila, heteroarila, aralquila C1-6, e heteroaralquila C1-6, fornecido a partir do momento em que quando R6é H ou CH3e Q está ausente, LR7 não é hidrogênio, alquila Ci-6C=O não substituído, uma cadeia adicional de aminoácidos, t-butoxicarbonila (Boc), benzoíla (Bz), fluoren-9-ilmetoxicarbonila (Fmoc), trifenilmetila (tritila), benziloxicarbonila (Cbz), tricloroetoxicarbonila (Troc); ou arila ou heteroarila substituída ou não substituída; e em qualquer ocorrência da sequência ZAZ, pelo menos um elemento da sequência deve ser outro que não uma ligação covalente; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0111] De acordo com determinadas concretizações, quando R6é H, L é C=O, e Q está ausente, R7não é hidrogênio, C1-6 alquila, ou arila ou heteroarila substituído ou não substituído. De acordo com determinadas concretizações, quando R6é H e Q está ausente, R7não é um grupo de proteção tais como aqueles que se encontram descritos em Greene, T. W. e Wuts, P. G. M., “Protective Groups in Organic Synthesis”, John Wiley & Sons, 1999 ou Kocienfski, P. J., “Protecting Groups”, Georg Thieme Verlag, 1994.

[0112] De acordo com algumas concretizações, R1, R2, R3, e R4são selecionados a partir de C1-6 alquila ou C1-6 aralquila. Por exemplo, R2 e R4 são C1-6 alquila e R1 e R3 são C1-6 aralquila. De acordo com algumas concretizações, R2 e R4 são isobutila, R1 é 2-feniletila, e R3 é fenilmetila.

[0113] De acordo com algumas concretizações, L e Q estão ausentes e R7 é selecionado a partir de C1-6 alquila, C1-6 alquenila, C1-6 alquinila, C1-6 aralquila, e C1-6 heteroaralquila. Por exemplo, R6é C1-6 alquila e R7é selecionado a partir de butila, alila, propargila, fenilmetila, 2-piridila, 3-piridila, e 4-piridila.

[0114] De acordo com algumas concretizações, L é SO2, Q está ausente, e R7é selecionado a partir de C1-6 alquila e arila. Por exemplo, R7 pode ser selecionado a partir de metila e fenila.

[0115] De acordo com algumas concretizações, L é C=O e R7 é selecionado a partir de C1-6 alquila, C1-6 alquenila, C1-6 alquinila, arila, C1-6 aralquila, heteroarila, C1-6heteroaralquila, R8ZA-Ci-8 alquila-R11Z-Ci-8 alquila-, (R8O)(R9O)P(=O)O—Ci-8 alquila-, (R8O)(R9O)P(=O)O—C1-8 alquila-ZAZ-C1-8 alquila-, (R8O)(R9O)P(=O)O—C1-8 alquila-Z-C1-8alquila-, R8ZA-C1-8 alquila-ZAZ-C1-8alquila-, heterociclila MZAZ-C1-8 alquila-, (R10)2N—C1-8 alquila-, (R10)3N+—C1-8 alquila-, heterociclila-M carbociclila M-, R11SO2C1-8 alquila-, e R11SO2NH-, em que cada ocorrência de Z e A é independentemente outra que não seja uma ligação covalente. De acordo com algumas concretizações, L é compreendido por C=O, Q está ausente, e R7 é H.

[0116] De acordo com algumas concretizações, R6é C1-6 alquila, R7é C1-6 alquila, Q está ausente, e L é C=O. De acordo com algumas dessas concretizações, R7é etila, isopropila, 2,2,2-trifluoroetila, ou 2-(metilsulfonila)etila.

[0117] De acordo com algumas concretizações, L é C=O, Q está ausente, e R7 é C1-6 aralquila. Por exemplo, R7 pode ser selecionado a partir de 2-feniletila, fenilmetila, (4-metoxifenil)metila, (4-clorofenil)metila, e (4-fluorofenil) metila.

[0118] De acordo com algumas concretizações, L é C=O, Q está ausente, R6 é C1-6 alquila, e R7 é arila. Por exemplo, R7 pode ser um fenila substituído ou não substituído.

[0119] De acordo com algumas concretizações, L é C=O, Q está ausente ou O, n é 0 ou 1, e R7é —(CH2)ncarbociclila. Por exemplo, R7pode ser ciclopropila ou cicloexila.

[0120] De acordo com algumas concretizações, L e A são C=O, Q está ausente, Z é O, n é um inteiro que varia desde 1 até 8 (por exemplo, 1), e R7é selecionado a partir de R8ZA-C1-8alquila-, R11Z-C1-8 alquila-, R8ZA-C1-8 alquila-ZAZ-C1- 8 alquila-, (R8O)(R9O)P(=O)O—C1-8alquila-ZAZ-C1-8alquila-, (R8O)(R9O)P(=O)O—C1- 8 alquila-Z-C1-8 alquila-, e heterociclila MZAZ-C1-8 alquila-, em que cada ocorrência de A é independentemente outra que não uma ligação covalente. Por exemplo, R7pode ser heterociclila MZAZ-C1-8 alquila- em que heterociclila é um oxodioxolenila substituído ou não substituído ou N(R12)(R13), em que R12e R13em conjunto são C1-6 alquila-Y—C1-6 alquila, tal como C1-3 alquila-Y—C1-3 alquila, formando deste modo um anel.

[0121] De acordo com algumas concretizações, L é C=O, Q está ausente, n é um inteiro que varia desde 1 até 8, e R7é selecionado a partir de (R8O)(R9O)P(=O)O—Ci-8alquila-, (R10)2NCi-8alquila, (R10)3N+(CH2)n-, e heterociclila- M-. De acordo com algumas dessas concretizações, R7é —C1-8 alquila N(R10)2 ou - C1-8 alquila N+(R10)3, em que R10é C1-6 alquila. Por exemplo, R7é heterociclila M-, em que heterociclila é selecionado a partir de morfolino, piperidino, piperazino e pirrolidino.

[0122] De acordo com algumas concretizações, L é C=O, R6 é C1-6 alquila, Q é selecionado a partir de O e NH e R7é selecionado a partir de C1-6alquila, cicloalquila- M, C1-6 aralquila, e C1-6 heteroaralquila. De acordo com algumas concretizações, L é C=O, R6é C1-6 alquila, Q é selecionado a partir de O e NH, e R7 é C1-6 alquila, em que C1-6 alquila é selecionado a partir de metila, etila e isopropila. De acordo com algumas concretizações, L é C=O, R6é C1-6 alquila, Q é selecionado a partir de O e NH e R7 é C1-6 aralquila, em que aralquila é fenilmetila. De acordo com algumas concretizações, L é C=O, R6é C1-6 alquila, Q é selecionado a partir de O e NH, e R7 é C1-6 heteroaralquila, em que heteroaralquila é (4-piridila)metila.

[0123] De acordo com algumas concretizações, L está ausente ou é C=O, e R6e R7em conjunto são C1-6 alquila-Y—C1-6 alquila, C1-6 alquila-ZA-C1-6 alquila, ou C1 6alquila-A, em que cada ocorrência de Z e A é independentemente outra que não seja uma ligação covalente, formando desse modo um anel. De acordo com algumas concretizações, L é C=O, Q e Y estão ausentes, e R6e R7 em conjunto são C1-3alquila- Y-C1-3 alquila. De acordo com algumas concretizações, L e Q estão ausentes, e R6e R7em conjunto são C1-3 alquila-Y—C1-3 alquila. De acordo com algumas concretizações, L é C=O, Q está ausente, Y é selecionado a partir de NH e N—C1-6 alquila, e R6e R7em conjunto são C1-3 alquila-Y—C1-3 alquila. De acordo com algumas concretizações, L é C=O, Y está ausente, e R6e R7 em conjunto são Ci-3alquila-Y— C1-3 alquila. De acordo com algumas concretizações, L e A são C=O, e R6e R7 em conjunto são C1-2alquila-ZA-C1-2 alquila. De acordo com algumas concretizações, L e A são C=O e R6e R7 em conjunto são C2-3alquila-A.

[0124] Um composto da fórmula (2) pode ser dotado da seguinte estereoquímica:

[0125] Outros exemplos não limitativos de um composto da fórmula (2) podem ser encontrados, por exemplo, na patente U.S. N° 7.232.818, que é incluída por referência neste contexto na sua totalidade. De acordo com algumas concretizações, um composto da fórmula (2) é dotado de uma baixa solubilidade na água.

[0126] De acordo com algumas concretizações, um inibidor de proteassoma peptídico pode ser um composto da fórmula (3:

em que: X é oxigênio, NH ou N(C1-6 alquila); Y é NH, N(C1-6 alquila), O, ou C(R9)2; Z é O ou C(R9)2; R1, R2, R3, e R4são todos hidrogênio; cada um R5, R6, R7, R8, e R9é selecionado independentemente a partir de hidrogênio, C1-6 alquila, C1-6 hidroxilalquila, C1-6 alcoxialquila, arila, e C1-6 aralquila, cada um dos quais é opcionalmente substituído com um ou mais de um alquila, amida, amina, ácido carboxílico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, éster de carboxila, tiol, e tioéter; m é um inteiro desde 0 até 2; e n é um inteiro desde 0 até 2; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0127] De acordo com algumas concretizações, X é O. De acordo com algumas outras concretizações, Y é N(C1-6 alquila), O, ou C(R9)2. De acordo com algumas concretizações, Z é C(R9)2. De acordo com algumas outras concretizações, R5, R6, R7, e R8são selecionados independentemente a partir de C1-6 alquila, C1-6 hidroxilalquila, e C1-6 aralquila e cada um R9é compreendido por hidrogênio. Por exemplo, R6e R8são independentemente C1-6alquila, R5e R7são independentemente C1-6 aralquila e cada um R9é H. De acordo com algumas concretizações, n é 0 ou 1.

[0128] De acordo com algumas concretizações, X é O e R5, R6, R7, e R8são selecionados independentemente a partir de C1-6 alquila, C1-6 hidroxilalquila, e C1-6 aralquila. Por exemplo, R6e R8são independentemente C1-6 alquila e R5e R7são independentemente C1-6 aralquila.

[0129] De acordo com algumas concretizações, X é O, R6e R8são os dois isobutila, R5 é feniletila, e R7 é fenilmetila.

[0130] De acordo com algumas concretizações, R5, R6, R7, e R8 são selecionados independentemente a partir de hidrogênio, C1-6 alquila, C1-6 hidroxilalquila, C1-6 alcoxialquila, arila, e C1-6 aralquila, cada um dos quais é opcionalmente substituído com um grupo selecionado a partir de alquila, amida, amina, ácido carboxílico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, éster carboxílico, tiol, e tioéter. De acordo com algumas concretizações, pelo menos um de R5 e R7 é C1-6 aralquila substituído com alquila tal como per-haloalquila. Por exemplo, R7 é C1-6 aralquila substituído com trifluorometila.

[0131] De acordo com algumas concretizações, Y é selecionado a partir de N - alquila, O, e CH2. De acordo com algumas dessas concretizações, Z é CH2, e m e n são os dois 0. De acordo com algumas concretizações, Z é CH2, m é 0, e n é 2 ou 3. De acordo com algumas concretizações, Z é O, m é 1, e n é 2.

[0132] De acordo com algumas concretizações, um composto da fórmula (3) é compreendido por um composto da fórmula (4:

em que: X é O, NH, ou N - alquila, de preferência O; R1, R2, R3, e R4são todos eles hidrogênio; e R5, R6, R7, e R8são selecionados independentemente a partir de hidrogênio, C1-6 alquila, C1-6 hidroxilalquila, C1-6 alcoxialquila, arila, e C1-6 aralquila, cada um dos quais é opcionalmente substituído com um grupo selecionado a partir de amida, amina, ácido carboxílico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, éster carboxílico, tiol, e tioéter, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0133] De acordo com algumas concretizações, R5, R6, R7, e R8são selecionados independentemente a partir de C1-6 alquila, C1-6 hidroxilalquila, e C1-6 aralquila. Por exemplo, R6e R8são independentemente C1-6 alquila e R5e R7são independentemente C1-6 aralquila.

[0134] De acordo com algumas concretizações, X é O e R5, R6, R7, e R8são selecionados independentemente a partir de C1-6 alquila, C1-6 hidroxilalquila, e C1-6 aralquila. Por exemplo, R6 e R8 são independentemente C1-6 alquila e R5 e R7 são independentemente C1-6 aralquila.

[0135] De acordo com algumas concretizações, X é O, R6 e R8 são os dois isobutila, R5 é feniletila, e R7 é fenilmetila.

[0136] De acordo com algumas concretizações, um composto da fórmula III é dotado da seguinte estereoquímica:

[0137] Exemplos não limitativos de um composto das fórmulas (3) e (4) podem ser encontrados, por exemplo, na patente U.S. N° 7.417.042, a qual fica incorporada neste contexto na sua totalidade por referência. De acordo com algumas concretizações, um composto das fórmulas (3) ou (4) é dotado de uma baixa solubilidade na água.

[0138] De acordo com algumas concretizações, a inibidor de proteassoma peptídico é um composto da fórmula (5):

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. O composto da fórmula (5) também é conhecido como carfilzomibe.

[0139] Qualquer um dos compostos descritos neste contexto pode ser isolado em uma condição amorfa ou forma cristalina. A preparação e purificação de compostos cristalinos tais como aqueles que são proporcionados neste contexto pode ser realizada tal como é conhecido na técnica, por exemplo, tal como se encontra descrito na publicação US N°. 2009/0105156, a qual fica incorporada neste contexto por referência na sua totalidade.

[0140] De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é substancialmente puro. De acordo com algumas concretizações, o ponto de fusão do composto cristalino da fórmula (5) está situado na faixa de cerca de 200°C até cerca de 220°C, cerca de 205°C até cerca de 215°C, cerca de 211 °C até cerca de 213°C, ou mesmo cerca de 212°C. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) pode ser dotado de um ponto de fusão de cerca de 205°C até cerca de 215°C. Por exemplo, o composto pode ser dotado de um ponto de fusão de cerca de 211°C até cerca de 213°C. De acordo com algumas concretizações, o DSC de um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de uma temperatura máxima endotérmica sob cerca de 212° C, por exemplo, resultante da fusão e decomposição da forma cristalina do composto.

[0141] Um padrão de difração de pó ao raios-X de um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de picos de difração característicos expressos em graus 2 teta (2θ). Por exemplo, um composto cristalino da fórmula (5) pode ser dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob 6,10. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob 9,32. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de a pico característico expresso em graus 2θ sob 10,10. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob 12,14. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob 13,94. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob 18,44. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob 20,38. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob 23,30. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um padrão de difração de pó ao raios-X que compreende de 2 até 8 picos característicos expressos em graus 2θ sob 6,10; 9,32; 10,10; 12,14; 13,94; 18,44; 20,38; e 23,30. Por exemplo, um composto cristalino da fórmula (5) pode ser dotado de um padrão de difração de pó ao raios-X que compreende picos característicos expressos em graus 2θ sob 6,10; 9,32; 10,10; 12,14; 13,94; 18,44; 20,38; e 23,30.

[0142] De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob cerca de 6,1. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob cerca de 9,3. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob cerca de 10,1. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob cerca de 12,1. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob cerca de 13,9. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob cerca de 18,4. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob cerca de 20,4. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um pico característico expresso em graus 2θ sob cerca de 23,3. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um padrão de difração de pó ao raios-X que compreende de 2 até 8 picos característicos expressos em graus 2θ sob cerca de 6,1; 9,3; 10,1; 12,1; 13,9; 18,4; 20,4; e 23,3. De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um padrão de difração de pó ao raios-X que compreende picos característicos expressos em graus 2θ sob cerca de 6,1; 9,3; 10,1; 12,1; 13,9; 18,4; 20,4; e 23,3.

[0143] De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um padrão de difração de pó ao raios-X que é dotado de picos característicos expressos em graus 2θ sob 6,10; 8,10; 9,32; 10,10; 11,00; 12,14; 12,50; 13,64; 13,94; 17,14; 17,52; 18,44; 20,38; 21,00; 22,26; 23,30; 24,66; 25,98; 26,02; 27,84; 28,00; 28,16; 29,98; 30,46; 32,98; 33,22; 34,52; e 39,46.

[0144] De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um padrão de difração de pó ao raios-X que é dotado de picos característicos expressos em graus 2θ sob 6,1; 8,1; 9,3; 10,1; 11,0; 12,1; 12,5; 13,6; 13,9; 17,1; 17,5; 18,4; 20,4; 21,0; 22,3; 23,3; 24,7; 25,9; 26,0; 27,8; 28,0; 28,2; 30,0; 30,5; 33,0; 33,2; 34,5; e 39,5.

[0145] Realizou-se a análise de difração de pó de raio-X (XRPD) utilizando-se um difratômetro de pó de raio-X Shimadzu XRD-6000 utilizando-se radiação de Cu Kα. O instrumento é equipado com um tubo de raio-X de foco fino longo. A voltagem e amperagem do tubo foram ajustadas para 40 kV e 40 mA, respectivamente. As ranhuras de divergência e dispersão foram ajustadas sob 1° e a ranhura receptora foi ajustada sob 0,15 mm. A radiação difratada foi detectada por meio de detector de cintilação NAI. Utilizou-se uma varredura contínua de θ-2θ sob 3°/min. (0,4 seg./0,02°) a partir de 2,5 até 40° 2θ. Analisou-se um padrão de silício para verificar o alinhamento do instrumento. Os dados foram coletados e analisados utilizando-se XRD-6100/7000 v.5,0. As amostras foram preparadas para análise pela colocação das mesmas em um suporte de alumínio com inserto de silício.

[0146] De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é um sal cristalino de um composto da fórmula (5). Por exemplo, um sal cristalino de um composto da fórmula (5) pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em: sais de citrato, tartarato, trifluoroacetato, metanossulfonato, toluenossulfonato, cloridrato, e bromidrato. De acordo com algumas concretizações, um sal cristalino de um composto da fórmula (5) é um sal de citrato. De acordo com algumas concretizações, o sólido cristalino pode existir na forma de um co-cristal.

[0147] De acordo com algumas concretizações, um sal de citrato cristalino de um composto da fórmula (5) é substancialmente puro. De acordo com algumas concretizações, o ponto de fusão do sal de citrato cristalino de um composto da fórmula (5) está situado na faixa de cerca de 180 até cerca de 190°C, por exemplo, cerca de 184 até cerca de 188°C. De acordo com algumas concretizações, o DSC de um sal de citrato cristalino de um composto da fórmula (5) é dotado de um máximo endotérmico acentuado sob cerca de 187°C., por exemplo, resultante da fusão e decomposição da forma cristalina.

[0148] De acordo com algumas concretizações, um composto cristalino da fórmula (5) é dotado de um padrão de difração de pó de raio-X que compreende dois ou mais picos característicos expressos em graus 2θ sob 4,40; 7,22; 9,12; 12,36; 13,35; 14,34; 15,54; 16,14; 16,54; 17,00; 18,24; 18,58; 19,70; 19,90; 20,30; 20,42; 21,84; 22,02; 23,34; 23,84; 24,04; 24,08; 24,48; 24,76; 25,48; 26,18; 28,14; 28,20; 28,64; 29,64; 31,04; 31,84; 33,00; 33,20; 34,06; 34,30; 34,50; 35,18; 37,48; 37,90; e 39,48. Por exemplo, um sal de citrato cristalino de um composto da fórmula (5) pode ser dotado de um padrão de difração de pó de raio-X que é dotado de picos característicos expressos em graus 2θ sob 4,40; 7,22; 9,12; 12,36; 13,35; 14,34; 15,54; 16,14; 16,54; 17,00; 18,24; 18,58; 19,70; 19,90; 20,30; 20,42; 21,84; 22,02; 23,34; 23,84; 24,04; 24,08; 24,48; 24,76; 25,48; 26,18; 28,14; 28,20; 28,64; 29,64; 31,04; 31,84; 33,00; 33,20; 34,06; 34,30; 34,50; 35,18; 37,48; 37,90; e 39,48.

Composições Farmacêuticas

[0149] Os métodos proporcionados neste contexto incluem a manufatura e uso de composições farmacêuticas as quais incluem qualquer um dos compostos proporcionados neste contexto. Igualmente incluídas encontram-se as próprias composições farmacêuticas.

[0150] De acordo com algumas concretizações, os compostos proporcionados neste contexto podem ser formulados tais como se encontram descritos na patente U.S. N° 7.737.112.

[0151] Igualmente proporcionados neste contexto encontram-se os métodos de complexação de ciclodextrina para preparar uma composição farmacêutica de um inibidor de proteassoma peptídico (por exemplo, um composto da fórmula (1) - (5) ou um sal, solvato, hidrato, co-cristal, ou polimorfo do mesmo farmaceuticamente aceitável). O método compreende proporcionar uma primeira combinação que é dotada de um inibidor de proteassoma peptídico, uma ciclodextrina, e água, em que a primeira combinação é heterogênea e o inibidor de proteassoma peptídico ou sal é dotado de uma baixa solubilidade na primeira combinação. O método compreende ainda alterar o pH da primeira combinação para formar uma segunda combinação, em que a solubilidade do inibidor de proteassoma peptídico na segunda combinação é maior do que a solubilidade do inibidor de proteassoma peptídico na primeira combinação. Por exemplo, o método pode incluir contactar a primeira combinação com um ácido para formar a segunda combinação. A segunda combinação pode ser ainda heterogênea, podendo ainda facilitar um aumento suficiente na solubilidade de forma tal que o processo de complexação pode ser iniciado e progredir. Isto pode permitir uma maior parte do inibidor seja complexada, enquanto em uma forma de mistura heterogênea através de complexação parcial, ou completar a complexação formando uma solução homogênea. No caso de uma mistura complexada heterogênea, uma vez que tenha sido alcançada uma extensão desejada de solubilização e complexação, os sólidos excedentes podem ser removidos por meio de filtragem para proporcionar uma solução homogênea.

[0152] O termo “complexação” da forma que é utilizado neste contexto refere- se à formação de um complexo de inclusão intermolecular, ou uma associação intermolecular, em solução e entre um ou mais inibidores de proteassoma de peptídeo e uma ou mais moléculas de ciclodextrina. A inclusão e ou a associação proporciona utilidade como um mecanismo para aumentar substancialmente a concentração do(s) inibidor(s) que pode ser alcançada na solução aquosa em comparação com a dissolução de fase aquosa em uma faixa de pH similar sem o agente de complexação (ou seja, uma ou mais moléculas de ciclodextrina).

[0153] Um estado complexado ou associado é evidenciado quando uma concentração dissolvida do(s) inibidor(s) é mensurável, por intermédio de um método analítico convencional tal como HPLC, e a concentração excede substancialmente aquela que pode ser obtida por intermédio de dissolução do(s) inibidor(s) em água sem a(s) ciclodextrina(s) presente(s). A solução complexada ou associada do(s) inibidor(s) e ciclodextrina(s) pode ser preparada de forma tal a exceder a concentração na solução aquosa onde a(s) ciclodextrina(s) se encontram ausentes que é de utilidade para a formulação de um composto medicinal de volume de injeção e dose distribuída convenientes. Além disso, a solução complexada ou associada de inibidor(s) exibe estabilidade física (ou de outro modo descrita como sendo metaestabilidade) em que o inibidor permanece em uma solução homogênea (sem precipitação ou cristalização das partículas sólidas) durante períodos de tempo mais longos do que os que são típicos das soluções do inibidor sem a presença de uma ciclodextrina. Em decorrência desta duração prolongada de uma solução límpida remanescente, não ocorre qualquer nucleação de cristal e esgotamento subsequente de super saturação para todas as condições práticas de uso como uma formulação medicinal.

[0154] Muitos fármacos de compostos orgânicos de pequenas moléculas são dotados de solubilidade dependente de pH. É frequente que uma faixa de pH apropriada para a administração de um fármaco (tal como por meio de injeção em que a faixa de pH tolerável é de um modo geral considerada como sendo de 3 - 10,5 para administração intravenosa) não seja o mesmo pH onde solubilidade suficiente do fármaco pode ser encontrada na solução aquosa (por exemplo sob pH 2 ou inferior). Para permitir um nível de concentração farmaceuticamente útil de fármaco na solução sob uma faixa de pH aceitável e tolerável para administração (por exemplo, por meio de injeção), a complexação ou associação do fármaco com ciclodextrina(s) tal como reivindicada neste contexto constitui um método prático. Ela pode aumentar a concentração na solução que pode ser alcançada dentro da faixa de pH tolerável para administração. Esse aumento poderá ser, por exemplo, a partir de inicialmente 1 - 100 microgramas por mililitro sem ciclodextrina(s), aumentado até 500 - 10.000 microgramas por mililitro com ciclodextrina(s). A complexação ou associação constitui, desse modo, uma tecnologia que permite que um composto de outro modo dificilmente solúvel na água seja suficientemente solubilizado e desenvolvido como um composto farmaceuticamente útil. Aqueles versados na técnica compreendem que a quantidade de ciclodextrina(s) requerida(s) para se conseguir uma concentração e estado de estabilidade física desejadas pode variar. Por essa razão, a quantidade de ciclodextrina pode ser determinada em uma base de combinação individual utilizando- se métodos amplamente conhecidos.

[0155] Para as moléculas dos fármacos básicos, a solubilidade é usualmente aumentada sob pH mais baixo. Isto também apresenta desafios de estabilidade e de vida de prateleira em alguns casos se forem usadas sem agentes de complexação ou associação tais como ciclodextrina(s). Por exemplo, solubilidade suficiente pode ser conseguida através da diminuição do pH de uma solução com um ácido, não obstante essa diminuição do pH pode conduzir a reações de degradação a partir das condições ácidas. Vide a Tabela 1 para dados de solubilidade aquosa intrínseca para carfilzomibe, que mostra certo aumento moderado na solubilidade com a diminuição do pH. Tabela 1: Solubilidade aquosa de carfilzomibe como uma função de pH, sem ciclodextrinas

[0156] Existem numerosos caminhos de reação de degradação mediada por ácido para fármacos de pequenas moléculas e moléculas biológicas, tais como hidrólise de amidas em fragmentos de peptídeos inativos menores, ou abertura hidrolítica de metades de epóxidos funcionais. Aos produtos de degradação mediada por ácido pode faltar atividade farmacológica, e podem ser compostos tóxicos ou genotóxicos mesmo sob níveis residuais. Os compostos de complexação ou associação sob condições de pH em que é evitada degradação significativa expandem ainda mais a utilidade das ciclodextrinas para facilitar o desenvolvimento clínico e comercial de compostos que são dotados de pH dependente de características de estabilidade.

[0157] Com a finalidade de equilibrar as necessidades conflitantes de evitar reações colaterais de degradação mediada por ácido que ocorrem sob baixo pH com aumento da taxa de complexação por meio da diminuição do pH, encontrou-se uma condição de pH única. Surpreendentemente, o pH de uma solução aquosa obtida por meio da adição de determinadas concentrações de ácidos, por exemplo, ácido cítrico (em torno de pH 2,5 até 3,0), constatou-se ser suficiente para diminuir o pH para iniciar a complexação sem iniciar níveis significativos de reações colaterais de degradação. Neste estado, o inibidor foi parcialmente solubilizado por meio da condição do pH, mas não inteiramente. Como um resultado, existia uma mistura heterogênea (por exemplo, uma pasta fluida) do inibidor parcialmente dissolvido na solução aquosa de ciclodextrina e de ácido cítrico, e parcialmente existente como partículas sólidas (cristais) do inibidor. Ao longo do tempo (tipicamente desde várias horas até um dia), a fração de inibidor dissolvido tornar-se-á complexa ou será associada com a ciclodextrina. Este processo possibilitará que mais das partículas sólidas do inibidor se dissolvam e então se tornem complexadas. Com o passar do tempo, pode ocorrer transferência de massa a partir do inibidor de fase inicialmente sólido, para o inibidor de fase dissolvido, para um estado complexado dissolvido do inibidor - ciclodextrina. Mais comumente, a complexação da ciclodextrina é obtida por meio da formação de uma solução homogênea do composto a ser complexado. Para a carfilzomibe, a formação de uma solução homogênea irá requerer um pH muito baixo onde ocorrerão reações de degradação, tais como aquelas com cloreto de hidrogênio ácido forte que formam impurezas genotóxicas potenciais. Neste caso, foi prático e de utilidade realizar o processo de complexação em um estado heterogêneo sob a condição de pH mais suave de 2,5 - 3,0 utilizando-se ácido cítrico, um ácido carboxílico fraco. Uma vez que seja alcançada a concentração visada de inibidor complexado. O processo de complexação de pasta fluida foi concluído por meio de remoção por filtragem de quaisquer partículas sólidas não dissolvidas do inibidor. A solução homogênea resultante pode ser então ajustada para o pH tal como necessário para uma faixa de pH adequada para administração intravenosa (por exemplo, pH 3,5, utilizando-se hidróxido de sódio aquoso). Além disso, a solução complexada com pH ajustado homogênea pôde ser diluída com água para a concentração exata desejada para a etapa seguinte da manufatura de produto e para assegurar a força do rótulo do produto medicinal era precisa.

[0158] O efeito combinado de concentração de ciclodextrina e pH na complexação tem uma capacidade de solubilização maior do que se cada técnica fosse usada isoladamente. As extensões de solubilização são relativamente independentes da temperatura que é conveniente para a manufatura manter condições frias de maior preferência para a manufatura de produto estéril e reduzir ao mínimo quaisquer reações de degradação aceleradas por temperatura.

[0159] A segunda combinação inclui complexos de um inibidor de proteassoma peptídico e ciclodextrina(s). Esses complexos são dotados de solubilidade na água aperfeiçoada sobre o inibidor de proteassoma peptídico isoladamente. Por exemplo, soluções homogêneas de um composto da fórmula (5) (carfilzomibe) podem ser obtidas sob um pH farmaceuticamente útil (por exemplo, cerca de 3,5) e sob concentrações mais altas (por exemplo, cerca de 5 mg/ml) do que poderiam ser obtidas sem a ciclodextrina e os processos de complexação entre o composto e a ciclodextrina proporcionados neste contexto.

[0160] Adicionalmente ao aumento da solubilidade de um inibidor de proteassoma peptídico na solução, as formulações preparadas por meio dos métodos proporcionados neste contexto resultam em soluções farmacêuticas que são dotadas de estabilidade surpreendente. Muito embora as altas concentrações de inibidor de proteassoma alcançadas por meio dos métodos processamento proporcionados neste contexto não possam ser esperadas como sendo termodinamicamente estáveis, as soluções mostraram não ser afetadas pela temperatura de armazenamento (por exemplo, as soluções podem ser estáveis desde -20°C até 25°C), ciclagem de congelamento e descongelamento, e liofilização e reconstituição. A estabilidade do inibidor de proteassoma peptídico e ciclodextrina complexados é suficiente para tolerar ajustagens para o pH em seguida à complexação sem precipitação. Esta estabilidade da solução permite o uso do material complexado em uma gama de pH aceitável para injeção, estabilidade do produto e outros propósitos farmacêuticos. Por essa razão, as composições farmacêuticas preparadas por meio dos métodos proporcionados neste contexto podem, para usos farmacêuticos, ser consideradas soluções supersaturadas que não se precipitam ou diminuem na concentração em uma extensão significativa durante o seu uso em qualquer número de aplicações medicinais (por exemplo, uma composição farmacêutica final poderá ser estável para uma faixa de pelo menos 1-5 dias, e potencialmente mais longa).

[0161] Uma primeira combinação pode ser preparada por meio da adição de uma forma sólida do inibidor de proteassoma peptídico a uma solução aquosa de uma ou mais ciclodextrinas. De acordo com algumas concretizações, quando o inibidor de proteassoma peptídico é um composto da fórmula (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a concentração da uma ou mais ciclodextrinas na solução varia desde menos do que cerca de 1% até potencialmente tanto quanto o limite de solubilidade da(s) ciclodextrinas(s), por exemplo, cerca de 40%. De acordo com algumas concretizações, para propósitos de manufatura, a concentração da uma ou mais ciclodextrinas na solução varia desde cerca de 15% até cerca de 30%. De acordo com algumas concretizações, para propósitos de reconstituição do produto de fármaco acabado como uma solução para administração terapêutica ou pronta para diluição adicional antes da administração, a concentração da uma ou mais ciclodextrinas na solução varia desde cerca de 5% até cerca de 15%, por exemplo, aproximadamente 10%. Quando da diluição adicional, esta concentração poderá ser ainda mais reduzida tal como possa ser considerado apropriado para injeção ou outros caminhos de distribuição do fármaco. A relação molar da uma ou mais ciclodextrinas na solução para o composto da fórmula (5) varia desde cerca de 0,5 até cerca de 100. De acordo com algumas concretizações, esta relação existe como um excesso molar de ciclodextrina para deslocar o equilíbrio de complexação de estabilidade a preferir o estado complexado em vez do estado não complexado. Por exemplo, a relação molar (mols de ciclodextrina divididos por mols de inibidor de proteassoma) varia desde cerca de 10 até cerca de 20. De acordo com algumas concretizações, a relação peso/peso de ciclodextrina para inibidor de proteassoma varia desde cerca de 30 até cerca de 60. A formação excessiva de espuma das soluções de ciclodextrina soluções pode ser uma complicação para os processos de manufatura. Surpreendentemente, a adição do inibidor de proteassoma peptídico à solução aquosa de ciclodextrina(s) pode controlar a formação de espuma da solução na primeira combinação.

[0162] De acordo com algumas concretizações, uma primeira combinação consiste essencialmente de um inibidor de proteassoma peptídico, uma ciclodextrina, e água.

[0163] A forma sólida do inibidor de proteassoma peptídico adicionada à solução de ciclodextrina e água pode ser uma forma cristalina do composto tal como descrita neste contexto (por exemplo, o composto pode ser polimórfico ou um polimorfo específico tal descrito neste contexto). De acordo com algumas concretizações, a forma sólida do inibidor de proteassoma peptídico é amorfa.

[0164] A primeira combinação é heterogênea (por exemplo, uma suspensão ou pasta fluida). Essa solução pode ser caracterizada pela percentagem em peso total de sólidos e distribuição de dimensão de partícula da solução. Por exemplo, quando o inibidor de proteassoma peptídico é um composto da fórmula (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a primeira combinação pode ser dotada de uma percentagem em peso total de sólidos desde cerca de 1% até cerca de 45% (por exemplo, desde cerca de 1% até cerca de 40%; desde cerca de 1% até cerca de 35%; desde cerca de 1% até cerca de 30%; desde cerca de 1% até cerca de 25%; desde cerca de 1% até cerca de 20%; desde cerca de 1% até cerca de 15%; desde cerca de 1% até cerca de 10%; desde cerca de 5% até cerca de 45%; desde cerca de 10% até cerca de 45%; desde cerca de 12% até cerca de 45%; desde cerca de 15% até cerca de 45%; desde cerca de 20% até cerca de 45%; desde cerca de 25% até cerca de 45%; desde cerca de 30% até cerca de 45%; desde cerca de 35% até cerca de 45%; desde cerca de 5% até cerca de 35%; desde cerca de 10% até cerca de 40%; desde cerca de 15% até cerca de 37%; e desde cerca de 18% até cerca de 36%). De acordo com algumas concretizações, a primeira combinação pode ser dotada de uma percentagem em peso de sólidos desde cerca de 20% até cerca de 33%. De acordo com algumas concretizações, a primeira combinação pode ser dotada de uma percentagem em peso de sólidos desde cerca de 30% até cerca de 33 %. Ao longo do tempo de fabricação a proporção dos sólidos que são dissolvidos contra a proporção não dissolvida pode variar na dependência da solubilidade e extensão da complexação. Inicialmente, a uma ou mais ciclodextrinas são muito solúveis na água, e o inibidor é moderadamente solúvel, permanecendo desse modo na sua maior parte como uma mistura heterogênea ou pasta fluida.

[0165] De acordo com algumas concretizações, a primeira combinação é dotada de uma distribuição de dimensão de partículas com partículas primárias de diâmetro variável desde menos do que cerca de 1 micrômetro até cerca de 300 micrômetros ou mais (por exemplo, desde cerca de 1 μm até cerca de 200 μm; desde cerca de 1 μm até cerca de 150 μm; desde cerca de 1 μm até cerca de 125 μm; desde cerca de 1 μm até cerca de 100 μm; desde cerca de 1 μm até cerca de 50 μm; desde cerca de 1 μm até cerca de 10 μm; desde cerca de 5 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 25 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 50 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 60 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 75 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 100 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 125 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 150 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 200 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 225 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 250 μm até cerca de 300 μm; desde cerca de 5 μm até cerca de 150 μm; desde cerca de 25 μm até cerca de 200 μm; desde cerca de 50 μm até cerca de 125 μm; desde cerca de 10 μm até cerca de 100 μm; desde cerca de 75 μm até cerca de 225 μm; e desde cerca de 100 μm até cerca de 200 μm). Partículas primárias podem existir na forma de partículas distintas ou na forma de aglomerados compreendidos de uma ou muitas partículas primárias. Aglomerados de partículas primárias podem ser dotadas de dimensões substancialmente maiores do que as partículas primárias. Dessa forma é de utilidade incluir um dispositivo de misturar de alta energia, tal como um misturados de alto cisalhamento (frequentemente configurado como um misturador de estator rotor), adicionalmente a um misturador de impulsor de suspensão geral. O misturador de alta energia com o correr do tempo de cerca de 5 minutos até cerca de 90 minutos (por exemplo, cerca de 5 minutos até cerca de 80 minutos; cerca de 5 minutos até cerca de 75 minutos; cerca de 5 minutos até cerca de 60 minutos; cerca de 5 minutos até cerca de 45 minutos; cerca de 5 minutos até cerca de 30 minutos; cerca de 10 minutos até cerca de 90 minutos; cerca de 15 minutos até cerca de 90 minutos; cerca de 30 minutos até cerca de 90 minutos; cerca de 45 minutos até cerca de 90 minutos; cerca de 50 minutos até cerca de 90 minutos; cerca de 75 minutos até cerca de 90 minutos; cerca de 15 minutos até cerca de 75 minutos; cerca de 20 minutos até cerca de 70 minutos; cerca de 30 minutos até cerca de 70 minutos; cerca de 45 minutos até cerca de 75 minutos; e cerca de 10 minutos até cerca de 45 minutos), por exemplo, no decurso do tempo de cerca de 60 minutos irá quebrar aglomerados grandes em partículas primárias dispersas na solução of ciclodextrina. Mistura adicional pode auxiliar no rompimento de partículas primárias em fragmentos menores de partículas primárias. Esta concepção de processo facilita um método robusto em que o(s) sistema(s) de mistura consegue(m) partículas primárias essencialmente dispersas de distribuição de dimensão variável entre menos do que cerca de 1 micrômetro até cerca de 30 micrômetros, por exemplo, até cerca de 10 micrômetros independente da distribuição de dimensão e graus de aglomeração dos sólidos inibidores de proteassoma. Por essa razão a variação de carga para carga da distribuição de dimensão de partículas do inibidor de proteassoma não é de grande importância para o desempenho do processo uma vez que o(s) sistema(s) de mistura reduz os aglomerados e partículas primárias tipicamente dentro da faixa de distribuição de dimensão de partículas preferível. Por exemplo, a primeira combinação pode ser dotada de uma distribuição de dimensão de partículas inicialmente menor do que cerca de 1 micrômetro até cerca de 10.000 micrômetros para uma distribuição de dimensão de menos do que cerca de 1 micrômetro até cerca de 30 micrômetros depois da aplicação da etapa de mistura de alta energia.

[0166] De acordo com algumas concretizações, a primeira combinação é substancialmente isenta de solvente orgânico. Por exemplo, a água na primeira combinação pode ser água para injeções (WFI). De acordo com algumas concretizações, a primeira combinação é substancialmente isenta de tampão (por exemplo, a primeira combinação é desprovida de um ácido de tampão ou base de tampão).

[0167] O método pode compreender ainda misturar a primeira combinação antes de alterar o pH da primeira combinação tal como por meio do uso de um misturador de alto cisalhamento e um impulsor regular. O misturador geral pode ser operado, por exemplo, sob qualquer velocidade de rotação suficiente para manter a suspensão de partículas fora do fundo do tanque de mistura. A velocidade de mistura é uma função da geometria do tanque e do impulsor entre outros fatores e é suficientemente determinada por aqueles versados na técnica por meio de aparência visual da mistura de pasta fluida ou solução. De forma assemelhada, a velocidade do misturador de alto cisalhamento é dependente, por exemplo, do diâmetro do elemento de misturar, da geometria do estator, da largura do intervalo e de outros fatores. A entrada de energia para a pasta fluida pode ser determinada por meio de cálculos teóricos ou por meio de medições empíricas. De uma maneira alternativa, a velocidade de mistura de cisalhamento de alta velocidade e duração da operação de alta velocidade necessárias podem ser determinadas por aqueles versados na técnica por meio de observação microscópica das amostras de pasta fluida em seguida a combinações de várias velocidades de mistura e tempo. Uma vez que a desaglomeração e partículas primárias tenham sido reduzidas, poderão ser aplicados excesso de velocidade e tempo de mistura de cisalhamento de alta velocidade sem prejuízo para o processo. Por exemplo, de acordo com algumas concretizações, a mistura pode incluir submeter a agitação a primeira combinação sob uma velocidade desde cerca de 500 rpm até cerca de 10.000 rpm. Por exemplo, a mistura de alto cisalhamento pode ser realizada sob uma velocidade de cerca de 2.000 rpm até cerca de 3.500 rpm. Para diâmetros de tanques e misturadores menores e maiores, as velocidades relevantes podem variar de forma significativa.

[0168] A mistura da primeira combinação pode ser realizada sob uma temperatura desde cerca de 0° C até cerca de 30° C (por exemplo, desde cerca de 5° C até cerca de 25° C; desde cerca de 10° C até cerca de 30° C; desde cerca de 15°C até cerca de 25° C; desde cerca de 5° C até cerca de 20° C; desde cerca de 2° C até cerca de 22° C; e desde cerca de 20° C até cerca de 30° C). De acordo com algumas concretizações, a mistura da primeira combinação é realizada durante um espaço de tempo suficiente para se conseguir uma distribuição de dimensão de partículas variável desde menos do que cerca de 1 micrômetro até cerca de 30 micrômetros na primeira combinação. A mistura da primeira combinação é realizada durante um período de tempo variável desde cerca de 30 minutos até cerca de 90 minutos, por exemplo, 60 minutos.

[0169] Alterar o pH da primeira solução pode incluir aumentar ou diminuir o pH da primeira solução por meio da adição de um ácido ou uma base. De acordo com algumas concretizações, quando o inibidor de proteassoma peptídico é compreendido por um composto da fórmula (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, o pH da primeira combinação varia em cerca de 4 até cerca de 7. De acordo com algumas concretizações, um ácido é adicionado para alterar o pH, tal como um ácido inorgânico ou um ácido orgânico. Exemplos não limitativos de ácidos incluem ácido lático, ácido acético, ácido fórmico, ácido cítrico, ácido oxálico, ácido úrico, ácido succínico, ácido maléico, ácido fumárico, ácido benzóico, ácido tartárico, cloridrato de glicina, bissulfato (existente, por exemplo, na forma de um sal de sódio, potássio, ou amônio), e ácido fosfórico ou sais de fosfato. De acordo com algumas concretizações, o ácido é compreendido por um ácido orgânico. De acordo com algumas concretizações, o ácido é compreendido por ácido cítrico. Um ácido adequado pode ser dotado de um ou mais valores de pKa, com um primeiro pKa que varia desde cerca de -6 até cerca de +5. Por exemplo, o ácido é dotado de um primeiro pKa situado na faixa de cerca de +1 até cerca de +4,5. De acordo com algumas concretizações, o ácido é dotado de um primeiro pKa situado na faixa de cerca de +1,5 até cerca de +3,5. Vide, por exemplo, Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, e Use, Eds. P. Heinrich Stahl e Camille G. Wermuth, Verlag Helvetica Chimica Acta (Switzerland) 2002, 336-341, que fica incorporado por referência na sua totalidade neste contexto.

[0170] De acordo com algumas concretizações, para compostos em que a solubilidade e complexação é com efeito aumentada por intermédio do aumento do pH, o pH é alterado por meio da adição de uma base, por exemplo, uma base inorgânica ou orgânica. Exemplos não limitativos de bases inorgânicas incluem hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de amônio, hidróxido de cálcio, hidróxido de magnésio, e sais de carbonato ou bicarbonato de sódio, potássio ou amônio. Exemplos não limitativos de bases orgânicas incluem piridina, metil amina, trietil amina, imidazol, benzimidazol, histidina, e uma base de fosfazeno. Uma base orgânica pode ser dotada de um pKb ou um primeiro pKb variável desde cerca de -6 até cerca de +10. O pKa ou pKb relevante do ácido ou base respectivamente precisa estar situado em uma faixa suficiente para conseguir um determinado aumento na solubilidade do inibidor. De acordo com algumas concretizações, o ácido ou base é adicionado na forma de uma solução aquosa (por exemplo, uma solução aquosa de um ácido).

[0171] A alteração do pH da primeira solução resulta na formação de uma segunda combinação em que o inibidor de proteassoma peptídico é mais solúvel do que na primeira combinação. Por exemplo, um inibidor de proteassoma peptídico pode ser pelo menos cerca de 10% mais solúvel (por exemplo, pelo menos cerca de 100%, pelo menos cerca de 150%, pelo menos cerca de 200%, pelo menos cerca de 250%, pelo menos cerca de 400%, pelo menos cerca de 500%, pelo menos cerca de 1000%, pelo menos cerca de 1250%, pelo menos cerca de 1500%, pelo menos cerca de 2000%, pelo menos cerca de 2500%, pelo menos cerca de 3000%, pelo menos cerca de 4000%, pelo menos cerca de 5000%, pelo menos cerca de 5500%, pelo menos cerca de 6000%, pelo menos cerca de 7500%, pelo menos cerca de 8000%, pelo menos cerca de 9000%, e pelo menos cerca de 10,000% mais solúvel) na segunda combinação quando comparado com a solubilidade do inibidor na primeira combinação.

[0172] Sem com isso se pretender ficar delimitado pela teoria, a alteração do pH da primeira combinação inicia a complexação da uma ou mais ciclodextrinas e do inibidor de proteassoma peptídico. O aumento da complexação altera o equilíbrio da solução, provocando uma complexação adicional e por último resultando na solubilização de o inibidor de proteassoma peptídico. Em seguida à adição do aditivo, a segunda combinação pode ser misturada durante um tempo suficiente para se conseguir seja uma mistura heterogênea suficientemente solubilizada e com inibidor que foi levado à condição complexa, ou uma terceira combinação homogênea em que a totalidade do inibidor foi complexado e nenhum permanece na forma de sólidos não dissolvidos. Por exemplo, a concentração de o inibidor de proteassoma na terceira combinação pode variar desde cerca de 1 até cerca de 18 mg/ml, por exemplo, cerca de 2 até cerca de 8 mg/ml, cerca de 4 até cerca de 6 mg/ml, ou cerca de 5 até cerca de 6 mg/ml. De acordo com algumas concretizações, o pH da terceira combinação varia desde cerca de 1,5 até cerca de 4, por exemplo, cerca de 2 até cerca de 3,5 ou cerca de 2,5 até cerca de 3,5. Considerando-se os casos em que complexação suficiente pode ser alcançada sem necessariamente se dissolver e complexar a totalidade da massa do inibidor presente na forma de uma pasta fluida, poderá ser de utilidade terminar-se o processo de complexação uma vez que tenha sido alcançada uma concentração pretendida. Nestes casos, pode ser alcançada uma solução homogênea da concentração desejada do inibidor por intermédio de filtragem do excesso de teor de sólidos do inibidor. Isto deixa o inibidor que foi levado à condição complexa e a(s) ciclodextrina(s) na forma de uma solução funcionalmente estável, mesmo que o equilíbrio dinâmico da complexação e solubilização possa implicar em um estado termodinamicamente não estável.

[0173] A complexação do inibidor de proteassoma peptídico na terceira combinação é de pelo menos cerca de 50% (por exemplo, pelo menos cerca de 55%, pelo menos cerca de 60%, pelo menos cerca de 65%, pelo menos cerca de 70%, pelo menos cerca de 75%, pelo menos cerca de 80%, pelo menos cerca de 85%, pelo menos cerca de 90%, pelo menos cerca de 92%, pelo menos cerca de 94%, pelo menos cerca de 95%, pelo menos cerca de 96%, pelo menos cerca de 97%, pelo menos cerca de 98%, pelo menos cerca de 99%). De acordo com algumas concretizações, a complexação do inibidor de proteassoma peptídico na terceira combinação é de pelo menos cerca de 99%. Conceitualmente, para algumas combinações da concentração de ciclodextrina, concentração de inibidor, pH, e tempo de complexação, pode ser preparada uma solução 100% complexa do inibidor, em que a mistura se torna homogênea.

[0174] De acordo com algumas concretizações, o método descrito anteriormente é realizado em um único vaso. Por exemplo, a mistura da pasta fluida de complexação no método pode ser realizada utilizando-se um misturador de alto cisalhamento do tipo sonda (por exemplo, a homogeneizador) dentro de um tanque de mistura encamisado de temperatura controlada.

[0175] Proporcionado neste contexto encontra-se um método para preparar uma composição farmacêutica de um composto da fórmula (5) ou uma forma de sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, com o método compreendendo proporcionar- se uma primeira combinação de um composto da fórmula (5), uma ciclodextrina, e água, em que a primeira combinação é heterogênea e o composto ou sal é dotado de uma solubilidade que é baixa na primeira combinação. De acordo com algumas concretizações, a ciclodextrina é SBECD e a água é compreendido por WFI. O método compreende ainda contactar a primeira combinação com um ácido para formar uma segunda combinação, em que o composto é mais solúvel na segunda combinação do que na primeira combinação. De acordo com algumas concretizações, o ácido é compreendido por um ácido cítrico (por exemplo, uma solução aquosa de ácido cítrico).

[0176] Um exemplo não limitativo do método inclui proporcionar uma primeira combinação que inclui água (por exemplo, WFI), SBECD, e o composto da fórmula (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo em um vaso. De acordo com algumas concretizações, a água e SBECD são misturados antes da adição ao composto. A primeira combinação pode ser misturada até ser obtida uma solução heterogênea (por exemplo, desde cerca de 30 até cerca de 90 minutos, desde cerca de 40 até cerca de 80 minutos, e desde cerca de 50 até cerca de 70 minutos). De acordo com algumas concretizações, a primeira combinação é misturada durante cerca de 60 minutos. Na eventualidade de o composto se aglomerar na primeira combinação, a dimensão de partícula para qualquer composto aglomerado pode ser reduzida. Uma vez que seja obtida uma mistura heterogênea (por exemplo, uma pasta fluida), adiciona-se um ácido (por exemplo, um ácido orgânico, tal como ácido cítrico) à primeira combinação para se preparar a segunda combinação. De acordo com algumas concretizações o ácido é adicionado na forma de uma solução aquosa. Pode- se então continuar com a mistura até ser preparada uma terceira combinação homogênea, ou durante períodos de tempo menores permanecer na forma de uma mistura heterogênea, com uma extensão de complexação e solubilização desejadas sendo obtida. De acordo com algumas concretizações, a mistura da segunda combinação é conduzida durante um período de tempo variável desde cerca de 1 até cerca de 48 horas, por exemplo, até 18 horas. De acordo com algumas concretizações, a mistura da segunda combinação é conduzida durante cerca de 12 horas. Por exemplo, a mistura pode ser conduzida durante cerca de seis horas. De acordo com algumas concretizações, a concentração do composto na terceira combinação varia desde cerca de 1 até cerca de 15 mg/ml (por exemplo, desde cerca de 3 até cerca de 12 mg/ml, desde cerca de 4 até cerca de 8 mg/ml, cerca de 5 mg/ml). De acordo com algumas concretizações, o método é usado para preparar uma solução do composto para injeção. De acordo com outras concretizações, o método é usado para preparar uma solução para liofilização na forma de um produto farmacêutico asséptico concluído que pode ser armazenado, transportado, e reconstituído com água ou outro veículo quando pronto para a injeção em um paciente.

[0177] As composições farmacêuticas obtidas na forma de produtos estéreis utilizando-se os procedimentos descritos neste contexto são manufaturadas tipicamente aplicando-se técnicas assépticas e filtragem estéril antes do enchimento dentro da unidade de acondicionamento principal (por exemplo, frascos de vidro), a não ser que a preparação tenha envolvido uma etapa de esterilização e nenhuma contaminação ocorra antes do uso.

[0178] A composição do inibidor de proteassoma peptídico dissolvida em tampão aquoso ou em solução aquosa, por exemplo, em seguida à filtragem estéril pode opcionalmente ser liofilizada (em um recipiente isento de contaminante e à prova de contaminante) e reconstituído em diluente aquoso apropriado exatamente antes do uso. De acordo com algumas concretizações, o diluente é compreendido por água estéril para injeção (WFI). De acordo com algumas concretizações, o diluente é compreendido por um tampão estéril (por exemplo, um tampão de citrato). De acordo com algumas concretizações, o diluente compreende ácido cítrico.

[0179] Nas composições proporcionadas neste contexto, uma fonte de controle de pH é compreendida por um tampão. Tipicamente, um tampão encontra-se presente na forma de um ácido ou uma base e sua base ou ácido conjugado, respectivamente. De acordo com uma concretização, a faixa de sal de tampão é de 1 100 mM. Por exemplo, a faixa de sal de tamponamento pode ser da ordem de 5-50 mM (por exemplo, cerca de 10 mM (em formulações sólidas, a quantidade de tampão é selecionada de forma a produzir esta concentração depois da reconstituição / diluição)). A concentração de tampão e o pH da solução podem ser escolhidos de modo a proporcionarem equilíbrio de solubilidade e estabilidade que seja ótimo.

[0180] Exemplos de tampões que são adequados incluem as misturas de ácidos fracos e sais de metais alcalinos (por exemplo, sódio, potássio) da base conjugada de ácidos fracos tais como tartarato de sódio e citrato de sódio. De acordo com algumas concretizações, o tampão é compreendido por citrato de sódio /ácido cítrico.

[0181] A solubilização de fármacos fracamente solúveis em água por meio de complexação de ciclodextrina tem sido extensamente estudada. As ciclodextrinas são compreendidas por oligossacarídeos cíclicos que consistem em 6, 7, ou 8 unidades de glicose (α-CD, β-CD, e Y—CD) unidas por meio de ligações α-1,4. Os diâmetros internos de α-CD, β-CD, e Y-CDsão aproximadamente 5A, 6A, e 8A, respectivamente. A cavidade interior é relativamente hidrófoba devido ao CH2 e grupos éter, enquanto o exterior, que consiste em grupos hidroxila primários e secundários, é mais polar. A água dentro da cavidade tende a ser substituída por mais moléculas não polares. A capacidade das ciclodextrinas formarem complexos de inclusão não covalentes com moléculas que cabem parcialmente dentro da sua cavidade não polar conduz à solubilização do fármaco.

[0182] Dois derivados de β-CD solúveis em água de interesse farmacêutico são sulfobutil éter beta-ciclodextrina (SBECD) e beta-ciclodextrina de hidroxipropila (HPCD), os quais mostraram ser seguros e bem tolerados. Tanto o SBECD (nome de marca Captisol®) quanto o HPCD (nome de marca Kleptose®) são usados em produtos intravenosos disponíveis comercialmente.

[0183] As ciclodextrinas, tais como proporcionados neste contexto, incluem alfa-, beta- e gama-ciclodextrina. De acordo com uma concretização, a uma ou mais ciclodextrinas são compreendidas por uma β-ciclodextrina substituídos ou non- substituída, presente, por exemplo, sob de 5-35% (p/v). De acordo com algumas concretizações, a quantidade da ciclodextrina é cerca de 25% (p/v). de acordo com uma determinada concretização, a quantidade de uma ciclodextrina em uma formulação adequada para injeção é cerca de 10% (p/v). de acordo com outra concretização, a uma ou mais ciclodextrinas são compreendidas por uma β- ciclodextrina substituídos. As ciclodextrinas substituídas aumentam a solubilidade da ciclodextrina e diminuem os efeitos tóxicos associados com as ciclodextrinas não substituídas. Exemplos de β-ciclodextrinas substituídas incluem aquelas substituído com um ou mais grupos hidrófilos, tais como monossacáridos (por exemplo, glicosil, maltosil), carboxialquila (por exemplo, carboxilmetila, carboxietila), hidroxialquila- substituído (por exemplo, hidroxietila, 2-hidroxipropila) e beta-ciclodextrina sulfoalquiléter substituído. Com particularidade as beta-ciclodextrinas que são adequadas incluem hidroxipropil beta-ciclodextrina (HPBCD) e sulfobutil éter beta- ciclodextrina (SBECD). De acordo com algumas concretizações, a ciclodextrina é SBECD. Não obstante, fica entendido que tipicamente qualquer substituição para a ciclodextrina, incluindo substituição por meio dos grupos hidrófobos, tais como alquilas, irão aperfeiçoar a sua solubilidade aquosa pelo rompimento da rede de ligação de hidrogênio dentro da estrutura de cristal da ciclodextrina sólida, abaixando desta forma a energia de estrutura do sólido. Acredita-se que o grau de substituição não seja de grande importância; não obstante, de acordo com algumas concretizações, o grau de substituição é de pelo menos 1% e tipicamente de 2% até 10%, tal como de 3% até 6%.

[0184] De acordo com algumas concretizações, poderão ser usadas uma ou mais ciclodextrinas. Por exemplo, pode ser usada uma mistura de duas ou mais ciclodextrinas para complexar um inibidor de proteassoma peptídico proporcionado neste contexto. De acordo com algumas concretizações, captisol e kleptose podem ser usados para complexar um inibidor de proteassoma peptídico, tal como carfilzomibe.

[0185] Os inventores descobriram que pode ser vantajoso reduzir ao mínimo a quantidade de íon de cloreto (ou outros ânions nucleófilos) nos métodos e composições farmacêuticas descritos neste contexto.

[0186] De acordo com algumas concretizações, pelo menos uma da uma ou mais ciclodextrinas (adicionadas à primeira combinação) é compreendida por uma ciclodextrina de baixo teor de cloreto. Da forma que é utilizado neste contexto, uma “ciclodextrina de baixo teor de cloreto” refere-se a uma ciclodextrina que é dotada de menos do que ou igual a ,05% p/p cloreto de sódio, ou se uma fonte de cloreto que não seja (ou adicionalmente a) cloreto de sódio estiver/estiverem presentes, uma “ciclodextrina de baixo teor de cloreto” refere-se a uma ciclodextrina que é dotada de um teor de íons de sódio que menor do que ou igual a uma quantidade de cloreto que estaria presente em uma ciclodextrina que é dotada de 0,05% p/p de cloreto de sódio. De acordo com algumas concretizações, a ciclodextrina de baixo teor de cloreto é uma SBECD de baixo teor de cloreto. A determinação da concentração de cloreto pode ser realizada por meio de uma variedade de métodos que são conhecidos na técnica (por exemplo, para ciclodextranas obtidas comercialmente a partir da especificação de produto do fabricante, por exemplo, por meio de técnicas gravimétricas, por exemplo, por meio de técnicas potentiométricas).

[0187] De acordo com algumas concretizações, a quantidade de íon de cloreto presente é suficientemente baixa de modo a proporcionar uma vida de prateleira de 2 anos quando armazenada sob 2-8 graus C.

[0188] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 2,0.

[0189] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 1,5.

[0190] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 1,2.

[0191] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 1,0.

[0192] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 0,9.

[0193] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 0,8.

[0194] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 0,7.

[0195] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 0,6.

[0196] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 0,5.

[0197] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 0,4.

[0198] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 0,3.

[0199] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 0,2.

[0200] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação é não maior do que 0,1.

[0201] De acordo com algumas concretizações, a relação molar de íons de cloreto para o composto na primeira combinação varia desde cerca de 0,2 até 1,2 (por exemplo, 0,3 até 1,2, por exemplo, 0,2 até 0,4, por exemplo, 0,3 até 0,4, por exemplo, 0,32).

[0202] Nas concretizações, as relações molares de íon de cloreto para o composto descritas neste contexto também podem estar na segunda e/ ou terceira combinação.

[0203] Nos métodos descritos neste contexto, as composições proporcionadas neste contexto (por exemplo, soluções de ciclodextrina, primeiras combinações, segundas combinações, terceiras combinações, e composições farmacêuticas) são dotadas de baixas concentrações de qualquer íon nucleofílico forte (por exemplo, íon de cloreto, íon de brometo, íons de fluoreto, e íon de iodeto). Por exemplo, a solução pode ser dotada de uma concentração de íons nucleofílicos de até e incluindo 8,5x10-3 M. De acordo com algumas concretizações, soluções que são dotadas de baixo íon nucleofílico podem ser adquiridas comercialmente ou podem ser preparadas utilizando-se tecnologia que é conhecida na técnica, incluindo, por exemplo, nanofiltragem, ultrafiltragem, diafiltragem, cromatografia de permute iônica, osmose inversa, e eletrólise.

[0204] De acordo com algumas concretizações, uma composição farmacêutica, na forma que é proporcionada neste contexto compreende até e incluindo 8,5x10-3 M de um íon nucleofílico. De acordo com algumas concretizações, o íon nucleofílico encontra-se presente na forma de um sal, por exemplo, um sal de sódio, sendo que o sal nucleofílico poderá existir na solução com outros cátions diferentes de sódio (por exemplo, cátions de hidrogênio, potássio, magnésio e cálcio). De acordo com algumas concretizações, a composição farmacêutica, da forma que é proporcionada neste contexto compreende até 8,5x10-3 M de um íon nucleofílico. Por exemplo, a composição farmacêutica, compreende menos do que 8,5x10-3 M de um íon nucleofílico.

[0205] Nos métodos descritos neste contexto, as composições que são proporcionadas neste contexto (por exemplo, soluções de ciclodextrina, primeiras combinações, segundas combinações, terceiras combinações, e composições farmacêuticas) são dotadas de baixas concentrações de íon de cloreto. Por exemplo, uma solução pode ser dotada de uma concentração de íon de cloreto de até e incluindo 0,03% (p/v) (por exemplo, 0 até 0,03%; 0,01 até 0,03%; 0,015 até 0,03%; 0,02 até 0,03%; 0,025 até 0,03%; 0 até 0,025%; 0 até 0,2%; 0 até 0,01%; 0,005% até 0,025%; e 0,015% até 0,025%). De acordo com algumas concretizações, soluções que são dotadas de baixo teor de íon de cloreto pode ser adquiridas comercialmente ou podem ser preparadas utilizando-se tecnologia que é conhecida na técnica, incluindo, por exemplo, nanofiltragem, ultrafiltragem, diafiltragem, cromatografia de permuta iônica, osmose inversa, e eletrólise.

[0206] De acordo com algumas concretizações, a composição farmacêutica, tais como proporcionadas neste contexto compreende até e incluindo 0,03% (p/v) de um íon de cloreto. De acordo com algumas concretizações, o íon de cloreto encontra- se presente na forma de um sal, por exemplo, cloreto de sódio, sendo que o sal de cloreto poderá existir na solução com outros cátions diferentes de sódio (por exemplo, cátions de hidrogênio, potássio, magnésio e cálcio). De acordo com algumas concretizações, a composição farmacêutica, da forma que é proporcionada neste contexto compreende até 0,03% (p/v) de um íon de cloreto. Por exemplo, a composição farmacêutica, compreende menos do que 0,03% (p/v) de um íon de cloreto.

[0207] Nos métodos descritos neste contexto, as composições que são proporcionadas neste contexto (por exemplo, soluções de ciclodextrina, primeiras combinações, segundas combinações, terceiras combinações, e composições farmacêuticas) são dotadas de baixas concentrações de cloreto de sódio. Por exemplo, uma solução pode ser dotada de uma concentração de cloreto de sódio de até e incluindo 0,05% (p/v) (por exemplo, 0 até 0,05%; 0,01 até 0,05%; 0,015 até 0,05%; 0,02 até 0,05%; 0,025 até 0,05%; 0,03 até 0,05%; 0,04 até 0,05%; 0 até 0,045%; 0 até 0,04%; 0 até 0,035%; 0 até 0,03%; 0 até 0,025%; 0 até 0,2%; 0 até 0,01%; 0,01% até 0,04%; 0,025% até 0,045%; e 0,02% até 0,03%). De acordo com algumas concretizações, soluções que são dotadas de baixo teor de cloreto de sódio pode ser adquiridas comercialmente ou podem ser preparadas utilizando-se tecnologia que é conhecida na técnica, incluindo, por exemplo, nanofiltragem, ultrafiltragem, diafiltragem, cromatografia de permuta iônica, osmose inversa, e eletrólise.

[0208] De acordo com algumas concretizações, uma composição farmacêutica, tal como proporcionada neste contexto compreende até e incluindo 0,05% (p/v) de cloreto de sódio. De acordo com algumas concretizações, uma composição farmacêutica tal como proporcionada neste contexto compreende até 0,5% (p/v) de cloreto de sódio. Por exemplo, uma composição farmacêutica compreende menos do que 0,05% (p/v) de cloreto de sódio.

[0209] De acordo com algumas concretizações, uma solução de uma ciclodextrina que é dotada de uma baixa concentração de qualquer íon nucleofílico forte (por exemplo, íon de cloreto, íon de brometo, íon de fluoreto, e íon de iodeto) é usada para formular um inibidor de proteassoma peptídico (por exemplo, um composto da fórmula (1) até (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) proporcionado neste contexto. Por exemplo, soluções de ciclodextrinas usadas para formular um inibidor de proteassoma peptídico podem ser dotadas de uma concentração de íons nucleofílicos de até e incluindo 8,5x10-3 M. Essas soluções podem ser adquiridas comercialmente ou podem ser preparadas utilizando-se tecnologia que é conhecida na técnica, incluindo, por exemplo, nanofiltragem, ultrafiltragem, diafiltragem, cromatografia de permuta iônica, osmose inversa, e eletrólise.

[0210] De acordo com algumas concretizações, uma solução de uma ou mais ciclodextrinas usada para formular um inibidor de proteassoma peptídico compreende até e incluindo 8,5x10-3 M de um íon nucleofílico. De acordo com algumas concretizações, o íon nucleofílico encontra-se presente na forma de um sal, por exemplo, um sal de sódio, sendo que o sal nucleofílico poderá existir na solução com outros cátions que não sejam de sódio (por exemplo cátions de hidrogênio, potássio, magnésio e cálcio). De acordo com algumas concretizações, uma composição farmacêutica, tal como proporcionada neste contexto compreende até 8,5x10-3 M de um íon nucleofílico. Por exemplo, uma composição farmacêutica compreende menos do que 8,5x10-3 M de um íon nucleofílico.

[0211] De acordo com algumas concretizações, uma solução de uma ciclodextrina que é dotada de uma baixa concentração de íon de cloreto é usada para formular um inibidor de proteassoma peptídico (por exemplo, um composto da fórmula (1) até (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) proporcionados neste contexto. Por exemplo, soluções de ciclodextrinas usadas para formular um inibidor de proteassoma peptídico pode ser dotada de uma concentração de íons de cloreto de até e incluindo 0,03% (p/v) (por exemplo, 0 até 0,03%; 0,01 até 0,03%; 0,015 até 0,03%; 0,02 até 0,03%; 0,025 até 0,03%; 0 até 0,025%; 0 até 0,2%; 0 até 0,01%; 0,005% até 0,025%; e 0,015% até 0,025%). Essas soluções podem ser adquiridas comercialmente ou podem ser preparadas utilizando-se tecnologia que é conhecida na técnica, incluindo, por exemplo, nanofiltragem, ultrafiltragem, diafiltragem, cromatografia de permuta iônica, osmose inversa, e eletrólise.

[0212] De acordo com algumas concretizações, uma solução de uma ou mais ciclodextrinas usada para formular um inibidor de proteassoma peptídico compreende até e incluindo 0,03% (p/v) de um íon de cloreto. De acordo com algumas concretizações, o íon de cloreto encontra-se presente na forma de um sal, por exemplo, cloreto de sódio, sendo que o sal de cloreto poderá existir na solução com outros cátions que não sejam de sódio (por exemplo, cátions de hidrogênio, potássio, magnésio e cálcio). De acordo com algumas concretizações, uma composição farmacêutica, da forma que é proporcionada neste contexto compreende até 0,03% (p/v) de um íon de cloreto. Por exemplo, uma composição farmacêutica compreende menos do que 0,03% (p/v) de um íon de cloreto.

[0213] De acordo com algumas concretizações, uma solução de uma ciclodextrina que é dotada de uma baixa concentração of cloreto de sódio é usada para formular um inibidor de proteassoma peptídico (por exemplo, um composto da fórmula (1) até (5) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo) proporcionado neste contexto. Por exemplo, soluções de ciclodextrinas usadas para formular um inibidor de proteassoma peptídico podem ser dotadas de uma concentração de cloreto de sódio de até e incluindo 0,05% (p/v) (por exemplo, 0 até 0,05%; 0,01 até 0,05%; 0,015 até 0,05%; 0,02 até 0,05%; 0,025 até 0,05%; 0,03 até 0,05%; 0,04 até 0,05%; 0 até 0,045%; 0 até 0,04%; 0 até 0,035%; 0 até 0,03%; 0 até 0,025%; 0 até 0,2%; 0 até 0,01%; 0,01% até 0,04%; 0,025% até 0,045%; e 0,02% até 0,03%). Essas soluções podem ser adquiridas comercialmente ou podem ser preparadas utilizando-se tecnologia que é conhecida na técnica, incluindo, por exemplo, nanofiltragem, ultrafiltragem, diafiltragem, cromatografia de permuta iônica, osmose inversa, e eletrólise.

[0214] De acordo com algumas concretizações, uma solução de uma ou mais ciclodextrinas usada para formular um inibidor de proteassoma peptídico compreende até e incluindo 0,05% (p/v) de cloreto de sódio. De acordo com algumas concretizações, uma composição farmacêutica, tal como proporcionada neste contexto compreende até 0,03% (p/v) de cloreto de sódio. Por exemplo, uma composição farmacêutica compreende menos do que 0.03% (p/v) de cloreto de sódio.

[0215] Adicionalmente à produção de soluções estáveis, altamente concentradas, de um inibidor de proteassoma peptídico, as formulações preparadas por meio dos métodos proporcionados neste contexto podem ser obtidas sem a degradação química e limitações de estabilidade dos outros métodos de complexação e formulação. Por exemplo, os métodos proporcionados neste contexto evitam o uso de ácidos fortes (por exemplo, HCl) para baixar o pH durantes a complexação. Muito embora a diminuição do pH da formulação para um valor menor do que 2 possa facilitar a dissolução do inibidor de proteassoma peptídico e produzir uma solução homogênea antes da complexação, a acidez da solução pode resultar em degradação do inibidor de proteassoma peptídico. Além disso, o inibidor de proteassoma peptídico contém um grupo funcional ceto epóxido, e o inibidor é suscetível à hidrólise por íons nucleofílicos fortes, tais como íons de cloreto. A hidrólise do anel de epóxido e abertura nucleofílica catalisada por ácido da metade de epóxido é um caminho de degradação de composto. Por exemplo, a degradação de um composto da fórmula (5) resulta na formação de uma impureza de produto de degradação de cloroidrina (CDP). Com base na sua estrutura, este produto de degradação é classificado como um alquilador, por essa razão as autoridades de regulamentação globais consideram a mesma como uma impureza potencialmente genotóxica. Além disso, de acordo com algumas concretizações, o íon de cloreto também pode degradar o epóxido resultando na formação de um adutor de cloroidrina. Tal como ilustrado no Exemplo 2, a redução dos níveis de íons de cloreto em uma formulação de um composto da fórmula (5) pode reduzir ao mínimo ou eliminar esses caminhos de hidrólise resultando em estabilidade e qualidade de produto aperfeiçoado. Não obstante, na utilização dos métodos proporcionados neste contexto, a utilização desses ácidos fortes e íons nucleofílicos é evitada e por essa razão a degradação do inibidor de proteassoma peptídico por esses produtos de degradação pode ser reduzida de forma significativa e, em alguns casos, pode ser inclusive eliminada.

[0216] As composições farmacêuticas que são adequadas para injeção podem incluir soluções aquosas estéreis (onde solúveis em água) ou dispersões e pós estéreis para a preparação extemporânea de soluções ou dispersões injetáveis estéreis. Para a administração intravenosa, os portadores que são adequados incluem água estéril para injeção, tampões estéreis, tais como tampão de citrato, água bacteriostática, e Cremophor EL™ (BASF, Parsippany, NJ). Em todos os casos, a composição deve ser estéril e deverá ser fluida na extensão de que existe fácil aplicação por seringa. A composição deverá ser estável sob condições de manufatura e armazenamento e deve ser preservada contra a ação de contaminação de microrganismos tais como bactérias e fungos. O portador pode ser um solvente ou meio de dispersão que contém, por exemplo, água, etanol, poliol (por exemplo, glicerol, glicol de propileno, glicol de polietileno líquido, e outros assemelhados), e suas misturas adequadas. A fluidez apropriada pode ser mantida, por exemplo, por meio do uso de um revestimento tal como lecitina, por meio da manutenção da dimensão de partícula requerida no caso de dispersão e por meio do uso de agentes tensoativos. A prevenção da ação de microrganismos pode ser alcançada por meio de vários agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabeno, clorobutanol, fenol, ácido ascórbico, timerosal, e outros assemelhados. Em muitos casos, será preferível incluir agentes isotônicos, por exemplo, açúcares, polialcoóis tais como manitol, sorbitol, e cloreto de sódio na composição. Absorção prolongada das composições injetáveis pode ser proporcionada por meio da inclusão de um agente que retarda a absorção nas soluções injetáveis, por exemplo, monostearato de alumínio e gelatina.

[0217] As soluções injetáveis estéreis podem ser preparadas por meio da inclusão do composto ativo na quantidade requerida em um solvente apropriado com um ou uma combinação de ingredientes enumerados anteriormente, tal como requerido, seguido por esterilização filtrada. De uma maneira geral, as dispersões são preparadas por meio da inclusão do composto ativo em um veículo estéril, que contém um meio de dispersão básico e os outros ingredientes requeridos a partir daqueles enumerados anteriormente. No caso de pós estéreis para a preparação de soluções injetáveis estéreis, os métodos de preparação preferidos compreendem secagem por congelação ou criodessecagem (liofilização), que proporciona um pó do ingrediente ativo mais qualquer ingrediente desejado adicional a partir de uma solução previamente filtrada estéril do mesmo.

[0218] As composições orais de uma maneira geral incluem um diluente inerte ou um portador comestível. Para o propósito de administração terapêutica oral, o composto ativo pode ser incorporado com excipientes e usado na forma de comprimidos, pastilhas, ou cápsulas, por exemplo, cápsulas de gelatina. As composições orais também podem ser preparadas utilizando-se um portador fluido para o uso como um desinfetante bucal. Agentes de ligação farmaceuticamente compatíveis, e/ ou materiais adjuvantes podem ser incluídos como parte da composição. Os comprimidos, pílulas, cápsulas, pastilhas e assemelhados podem conter qualquer um dos ingredientes seguintes, ou compostos de uma natureza assemelhada: um ligante tal como celulose micro cristalina, goma de tragacanto ou gelatina; um excipiente tal como amido ou lactose, um agente de desintegração tais como ácido algínico, Primogel, ou amido de milho; um lubrificante tal como estearato de magnésio ou Sterotes; a agente deslizante tal como dióxido de silício coloidal; um agente adoçante tal como sacarose e ou sacarina; ou um agente aromatizante, tal como hortelã pimenta, salicilato de metila, ou aromatizante de laranja.

[0219] Para administração por meio de inalação, os compostos podem ser distribuídos na forma de um spray de aerossol a partir de um recipiente ou distribuidor pressurizado que contém um propelente adequado, por exemplo, um gás, tal como dióxido de carbono, ou um nebulizador. Esses métodos incluem aqueles que se encontram descritos na patente U.S. N° 6.468.798.

[0220] A administração sistêmica de um composto terapêutico tal como descrito neste contexto também pode ser por meio de meios transmucosais ou transdérmicos. Para administração transmucosal ou transdérmica, agentes de penetração que são apropriados para a barreira a ser permeada são usados na formulação. Esses agentes de penetração são de uma maneira geral conhecidos na técnica e incluem, por exemplo, para a administração transmucosal, detergentes, sais de bílis, e derivados de ácido fusídico. A administração transmucosal pode ser realizada através do uso de sprays nasais ou de supositórios. Para a administração transdérmica, os compostos ativos são formulados em unguentos, bálsamos, géis, ou cremes tais como são de uma maneira geral conhecidos na técnica.

[0221] As composições farmacêuticas também podem ser preparadas na forma de supositórios (por exemplo, com bases de supositórios normais, tais como manteiga de cacau e outros glicéridas) ou enemas de retenção para distribuição retal.

[0222] Além disso, é possível a distribuição intranasal, tal como descrita, inter alia, em Hamajima et al., Clin. Immunol. Immunopathol., 88(2), 205-10 (1998). Também podem ser usados lipossomas (por exemplo, tais como descritos na patente U.S. N° 6.472.375) e microencapsulamento. Também podem ser usados sistemas de distribuição de micropartículas segmentáveis biodegradáveis (por exemplo, tais como descritos na patente U.S. N° 6.471.996).

[0223] De acordo com uma concretização, os compostos terapêuticos são preparados com portadores que protegerão os compostos terapêuticos contra eliminação rápida em relação ao corpo, tais como uma formulação de liberação controlada, incluindo implantes e sistemas de distribuição micro encapsulados. Podem ser usados polímeros biocompatíveis, biodegradáveis, tais como acetato de vinila e etileno, polianidridos, ácido poliglicólicos, colágeno, poliorto ésteres, e ácido polilático. Essas formulações podem ser preparadas utilizando-se técnicas padrão, ou obtidas comercialmente, por exemplo, a partir da Alza Corporation e Nova Pharmaceuticals, Inc. Suspensões lipossômicas (incluindo lipossomas visados para células selecionadas com anticorpos monoclonais para antígenos celulares) também podem ser usadas como portadores farmaceuticamente aceitáveis. Estas podem ser preparadas de acordo com métodos conhecidos daqueles versados na técnica, por exemplo, tais como se encontram descritos na patente U.S. N° 4.522.811.

[0224] A composição farmacêutica pode ser administrada de uma vez, ou pode ser dividida em um número de doses menores para serem administradas em intervalos de tempo. Fica compreendido que a dosagem precisa e duração de tratamento é uma função da enfermidade que está sendo tratada e pode ser determinada empiricamente utilizando-se protocolos de teste conhecidos ou por meio de extrapolação a partir de dados de teste in vivo ou in vitro. Deve ser observado que as concentrações e valores de dosagem também podem variar de acordo com a gravidade da condição a ser aliviada. Deve ser compreendido ainda que para qualquer paciente particular, regimes de dosagens específicas deverão ser ajustados com o tempo de acordo com a necessidade individual e o critério profissional da pessoa que administra ou supervisiona a administração das composições, e que as faixas de concentração expostas neste contexto são meramente exemplificativas e não se destinam a limitar o escopo ou prática das composições reivindicadas.

[0225] As formas de dosagem ou composições que contêm um composto tal como descrito neste contexto na faixa de 0,005% até 100% com o equilíbrio constituído do portador não tóxico podem ser preparadas. Os métodos para a preparação destas composições são conhecidos daqueles versados na técnica. As composições consideradas podem conter de 0,001%-100% de ingrediente ativo, de acordo com uma concretização 0,1-95%, de acordo com outra concretização 75-85%.

[0226] As composições farmacêuticas podem ser incluídas em um recipiente, pacote, ou distribuidor em conjunto com instruções para administração.

Métodos de Uso

[0227] As consequências biológicas da inibição de proteassoma são numerosas. A inibição de proteassoma foi sugerida como uma prevenção e/ ou tratamento de uma multiplicidade de enfermidades que incluem, sendo que não se fica limitado às mesmas, enfermidades proliferantes, enfermidades neurotóxicas/ degenerativas, doença de Alzheimer, condições isquêmicas, inflamação, enfermidades auto-imunológicos, HIV, cânceres, rejeição de enxerto de órgãos, choque séptico, inibição de apresentação de antígenos, diminuição de expressão de gene viral, infecções parasíticas, condições associadas com acidose, degeneração macular, condições pulmonares, enfermidades de debilitação muscular, enfermidades fibróticas, enfermidades de crescimento dos ossos e cabelos. Por essa razão, formulações farmacêuticas para compostos específicos de proteassoma muito potentes, tais como a classe de moléculas de cetona epóxida, proporcionam um meio de administração de um fármaco a um paciente e tratamento destas condições.

[0228] Sob o nível celular, o acúmulo de proteínas poliubiquitinadas, mudanças morfológicas celulares, e apoptose foram reportadas no tratamento de células com vários inibidores de proteassoma. A inibição de proteassoma também foi sugerida como uma possível estratégia terapêutica antitumor. O fato de que epoxomicina foi inicialmente identificada em uma tela para compostos antitumor valida o proteassoma como um alvo quimioterapêutico antitumor. Por essa razão, estas composições são de utilidade para o tratamento de câncer.

[0229] Os modelos tanto in vitro quanto in vivo mostraram que as células malignas, de um modo geral, são suscetíveis à inibição de proteassoma. Com efeito, a inibição de proteassoma já foi validada como uma estratégia terapêutica para o tratamento de mieloma múltiplo. Isto pode ser devido, em parte, à dependência das células malignas altamente proliferantes no sistema de proteassoma em remover rapidamente proteínas (Rolfe et al., J. Mol. Med. (1997) 75:5-17; Adams, Nature (2004) 4: 349-360). Por essa razão, encontra-se proporcionado neste contexto um método para o tratamento de cânceres que compreende administrar a um paciente com necessidade desse tratamento uma quantidade terapeuticamente efetiva de um inibidor de proteassoma peptídico tal como proporcionado neste contexto.

[0230] Da forma que é utilizado neste contexto, o termo “câncer” inclui, sendo que não se fica limitado aos mesmos, tumores sólidos e transmissíveis pelo sangue. Câncer refere-se a enfermidade do sangue, ossos, órgãos, tecido da pele e do sistema vascular, que incluem, sendo que não se fica limitado aos mesmos, cânceres da bexiga, sangue, ossos, cérebro, mama, colo, peito, cólon, endométrio, esôfago, olho, cabeça, rim, fígado, pulmão, gânglios linfáticos, boca, pescoço, ovários, pâncreas, próstata, reto, renal, pele, estômago, testículos, garganta, e útero. Cânceres específicos incluem, sendo que não se fica limitado aos mesmos, leucemia (leucemia linfocítica aguda (ALL), leucemia mielóide aguda (AML), leucemia linfocítica crônica (CLL), leucemia mielóide crônica (CML), leucemia de células pilosas, neoplasias de células B maduras, linfoma linfocítico de pequenas células, leucemia prolinfocítica de células B, linfoma linfoplasmacítico (tal como macroglobulinemia de Waldenstrom), linfoma da zona marginal esplênica, mieloma das células plasmáticas, plasmacitoma, enfermidades de deposição de imunoglobulina monoclonal, doenças de cadeia pesada, linfoma das células B da zona marginal extranodal (linfoma MALT), linfoma das células B da zona marginal nodal (NMZL), linfoma folicular, linfoma de células do manto, linfoma de células B difusas, linfoma de grandes células B mediastinais (tímicas), linfoma de grandes células B intravasculares, linfoma de efusão primária e linfoma /leucemia de Burkitt, neoplasias de células assassinas (NK) naturais e células T maduras, leucemia prolinfocítica de células T, leucemia linfocítica granular de grandes células T, leucemia de células NK agressivas, leucemia /linfoma de células T adultas, linfoma de células T / NK extranodais, linfoma de células T do tipo enteropatia, linfoma de células T hepatosplênicas, linfoma de células NK blásticas, micose fungóide (síndrome de Sezary), linfoma de grandes células anaplásicas cutâneas primárias, papulose linfomatóide, linfoma de células T angioimunoblásticas, linfoma de células T periféricas não especificadas e linfoma anaplásico de grandes células, linfoma de Hodgkin (esclerose nodular, celularidade mista, linfócitos ricos, esgotados ou não esgotados, linfócitos predominantes nodulares), mieloma (mieloma múltiplo, mieloma indolente, mieloma latente), doença mieloproliferante crônica, enfermidade mielodisplásica /mieloproliferante, síndromes mielodisplásicas, distúrbios linfoproliferantes associados com imunodeficiência, neoplasmas de células histiocíticas e dendríticas, mastocitose, condrossarcoma, sarcoma de Ewing, fibrossarcoma, tumor maligno de células gigantes, doenças do mieloma ósseo, osteossarcoma, câncer de mama (dependente de hormônios, independente de hormônios), cânceres ginecológicos (cervical, endométrio, trompa de Falópio, enfermidade trofoblástica gestacional, ovariana, peritoneal, uterina, vaginal e vulvar), carcinoma de células basais (BCC), carcinoma de células escamosas (SCC), melanoma maligno, dermatofibrossarcoma protuberante, carcinoma de células de Merkel, sarcoma de Kaposi, astrocitoma, astrocitoma pilocítico, tumor neuroepitelial disembrioplásico, oligodendrogliomas, ependimoma, glioblastoma multiforme, gliomas mistos, oligoastrocitomas, meduloblastoma, retinoblastoma, neuroblastoma, germinoma, teratoma, mesotelioma maligno (mesotelioma peritoneal, mesotelioma Peri cardial, mesotelioma pleural), tumor gastro-entero-pancreático ou neuroendócrino gastroenteropancreático (GEP-NET), carcinóide, tumor endócrino pancreático (PET), adenocarcinoma colorretal, carcinoma colorretal, tumor neuroendócrino agressivo, adenocarcinoma leiomiossarcoma mucinoso, adenocarcinoma de Signet Ring, carcinoma hepatocelular, colangiocarcinoma, hepatoblastoma, hemangioma, adenoma hepático, hiperplasia nodular focal (hiperplasia nodular regenerativa, hamartoma), carcinoma de pulmão de células não pequenas (NSCLC) (carcinoma de pulmão de células escamosas, adenocarcinoma, carcinoma de pulmão de grandes células), carcinoma de pulmão de pequenas células, carcinoma de tireóide, câncer de próstata (refratário a hormônios, independente, andrógeno independente, andrógeno dependente, insensível a hormônios), e sarcomas de tecido macio (fibrossarcoma, histiocitoma fibroso maligno, dermatofibrossarcoma, lipossarcoma, rabdomiossarcoma leiomiossarcoma, hemangiossarcoma, sarcoma sinovial, tumor maligno da bainha dos nervos periférica / neurofibrossarcoma, osteossarcoma extraesqueletal).

[0231] De acordo com algumas concretizações, um inibidor de proteassoma peptídico tal como proporcionado neste contexto, ou composição farmacêutica que compreende o mesmo, pode ser administrado para tratar mieloma múltiplo em um paciente. Por exemplo, o mieloma múltiplo pode incluir o mieloma refratário e/ou refratário múltiplo.

[0232] Muitos tumores dos tecidos hematopoiéticos e linfóides são caracterizados por um aumento na proliferação de células, ou de um tipo particular de célula. As enfermidades mieloproliferantes crônicas (CMPDs) são distúrbios de células troncos hematopoiéticas caracterizados por proliferação na medula espinal de uma ou mais das linhagens mielóides, resultando em números aumentados de granulócitos, células vermelhas do sangue e/ou plaquetas no sangue periférico. Dessa forma, o uso de um inibidor de proteassoma para o tratamento dessas enfermidades é atraente e está sendo examinado (Cilloni et al., Haematologica (2007) 92: 1124-1229). As CMPD podem incluir leucemia mielóide crônica, leucemia eosinofílica crônica, policitemia vera, mielofibrose idiopática crônica, trombocitemia essencial e enfermidade mieloproliferativa crônica inclassificável. Proporcionado encontra-se exposto um método de tratamento de CMPD que compreende administrar a um paciente com necessidade desse tratamento uma quantidade efetiva do composto inibidor de proteassoma exposto neste contexto.

[0233] As enfermidades mielodisplásicas/ mieloproliferantes, tais como leucemia mielomonocítica crônica, leucemia mielóide crônica atípica, leucemia mielomonocítica juvenil e enfermidade mielodisplásica /mieloproliferante não classificável, são caracterizadas por hipercelularidade da medula óssea devido à proliferação em uma ou mais das linhagens mielóides. A inibição do proteassoma com uma composição descrita neste contexto, pode servir para tratar estas enfermidades mielodisplásicas /mieloproliferantes por meio da provisão de uma quantidade efetiva da composição para um paciente com necessidade de tal tratamento.

[0234] As síndromes mielodisplásicas (MDS) referem-se a um grupo de distúrbios de células troncos hematopoiéticos caracterizados por displasia e haematopoiesia ineficaz em uma ou mais das linhas de células mielóides principais. O direcionamento de NF-kB com um inibidor de proteassoma nestas malignidades hematológicas induz a apoptose, exterminando desse modo a célula malígna (Braun et al. Cell Death e Differentiation (2006) 13:748-758). Proporcionado ainda neste contexto está previsto um método para tratar MDS que compreende administrar a um paciente com necessidade desse tratamento uma quantidade efetiva de um composto proporcionado neste contexto. A MDS inclui anemia refratária, anemia refratária com sideroblastos encadeados, citopenia refratária com displasia multilinhagem, anemia refratária com excesso de blastos, síndrome mielodisplásicas não classificável e síndrome mielodisplásica associada com anormalidade de cromossoma de (5q) isolado.

[0235] A mastocitose é uma proliferação de mastócitos e seu acúmulo subsequente em um ou mais sistemas orgânicos. A mastocitose inclui, sendo que não se fica limitado às mesmas, mastocitose cutânea, mastocitose sistêmica indolente (ISM), mastocitose sistêmica com doença de linhagem celular não mastocitósica hematológica associada (SM-AHNMD), mastocitose sistêmica agressiva (ASM), leucemia mastocitósica (MCL), sarcoma mastocitósico (MCS) e mastocitoma extra cutâneo. Ainda proporcionado neste contexto está exposto um método para tratar mastocitose que compreende administrar uma quantidade efetiva do composto exposto neste contexto a um paciente diagnosticado com mastocitose.

[0236] O proteassoma regula o NF-KB, que por sua vez regula os genes envolvidos na resposta imunológica e inflamatória. Por exemplo, NF-KB é requerido para a expressão do gene K de cadeia leve de imunoglobulina, o gene de cadeia α do receptor IL-2, o gene complexo de histocompatibilidade principal de classe I, e um número de genes de citoquina que codificam, por exemplo, o fator de estimulação de colônia de granulócitos IL-2, IL-6, , e IFN-β (Palombella et al., Cell (1994) 78:773-785). Desta forma, proporcionados neste contexto encontram-se métodos para afetar o nível de expressão de IL-2, MHC-I, IL-6, TNFα, IFN-β ou qualquer uma das outras proteínas anteriormente mencionadas, com cada método compreendendo administrar a um paciente uma quantidade efetiva de uma composição inibidora de proteassoma exposta neste contexto.

[0237] Igualmente proporcionado neste contexto está previsto um método de tratamento de uma enfermidade auto-imunológica em um paciente que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente efetiva do composto descrito neste contexto. Uma “enfermidade auto-imunológica” neste contexto é uma enfermidade ou distúrbio que decorre de e dirigido contra um tecido do próprio indivíduo. Exemplos de enfermidades ou distúrbios auto-imunológicos incluem, sendo que não se fica limitado aos mesmos, respostas inflamatórias tais como enfermidades inflamatórias da pele que incluem psoríase e dermatite (por exemplo, dermatite atópica); escleroderma sistêmico e esclerose; respostas associadas com doenças inflamatórias do intestino (tais como doença de Crohn e colite ulcerosa); síndrome do desconforto respiratório (incluindo síndrome do desconforto respiratório de adultos; ARDS); dermatite; meningite; encefalite; uveite; colite; glomerulonefrite; condições alérgicas tais como eczema e asma e outras condições que envolvem infiltração das células T e respostas inflamatórias crônicas; aterosclerose; deficiência de adesão de leucócitos; artrite reumatóide; lúpus sistêmico eritematoso (SLE); diabetes mellitus (por exemplo, diabetes mellitus do Tipo I ou diabetes mellitus dependente de insulina); esclerose múltipla; síndrome de Reynaud; tiroidite autoimunológica; encefalomielite alérgica; síndrome de Sjorgen; diabetes juvenil; e respostas imunológicas associadas com hipersensibilidade aguda e retardada mediadas por citoquinas e linfócitos T tipicamente encontrados em tuberculose, sarcoidose, polimiosite, granulomatose e vasculite; anemia perniciosa (doenças de Addison); doenças que envolvem diapedese de leucócitos; distúrbio inflamatório do sistema nervoso central (CNS); síndrome de lesão de múltiplos órgãos; anemia hemolítica (que inclui, sendo que não se fica limitado aos mesmos, crioglobinemia ou anemia positiva de Coombs); miastenia grave; doenças mediadas por complexo de antígeno - anticorpo; doença da membrana basal anti-glomerular; síndrome antifosfolipídeos; neurite alérgica; doença de Graves; síndrome miastênica de Lambert-Eaton; penfigóide bulhoso; pênfigo; poliendocrinopatias auto-imunes; doença de Reiter; síndrome do homem-duro; doença de Beheet; arterite de células gigantes; nefrite do complexo imunológico; nefropatia de IgA; polineuropatias de IgM; púrpura trombocitopênica imunológica (ITP) ou trombocitopenia auto-imunológica.

[0238] O sistema imunológico peneira as células autólogas que são infectadas de forma viral, foram submetidas a transformação oncogênica ou apresentam peptídeos estranhos na sua superfície. A proteólise intracelular gera pequenos peptídeos para apresentação aos linfócitos T para induzir respostas imunológicas mediadas por I da classe MHC. Desta forma, proporcionado neste contexto encontra- se um método de utilização de um inibidor de proteassoma que é proporcionado como um agente imunomodulador para inibir ou alterar a apresentação de antígenos em uma célula, que compreende expor a célula (ou administrar a um paciente) ao composto descrito neste contexto. Concretizações específicas incluem um método de tratamento de enfermidades relacionadas com enxerto ou transplante, tais como doença de enxerto versus hospedeiro ou doença de hospedeiro versus enxerto em um paciente, que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente efetiva do composto descrito este contexto. O termo “enxerto” da forma que é utilizado neste contexto refere-se ao material biológico derivado de um doador para transplante em um receptor. Enxertos incluem materiais diversos tais como, por exemplo, células isoladas, tais como células ilha; tecido tal como a membrana amniótica de um a recém nascido, medula óssea, células precursoras hematopoiéticas, e tecido ocular, tal como tecido corneano; e órgãos tais como pele, coração, fígado, baço, pâncreas, lóbulo tireóide, pulmão, rim, órgãos tubulares (por exemplo, intestino, vasos sanguíneos, ou esôfago). Os órgãos tubulares podem ser usados para substituir partes danificadas do esôfago, vasos sanguíneos, ou conduto biliar. Os enxertos de pele podem ser usados não só para queimaduras, mas também como um penso para intestino lesado ou para fechar determinados defeitos tais como hérnia do diafragma. O enxerto é derivado de qualquer fonte originária de mamífero, incluindo ser humano, seja a partir de cadáveres ou de doadores vivos. Em alguns casos, o doador e o receptor compreendem o mesmo paciente. De acordo com algumas concretizações, o enxerto é compreendido por medula óssea ou um órgão tal como o coração e o doador do enxerto e o hospedeiro são pareados por antígenos HLA de classe II.

[0239] Neoplasias de células histiocíticas e dendríticas são derivadas de fagócitos e de células acessórias, que têm funções importantes no processamento e apresentação de antígenos aos linfócitos. O esgotamento do teor de proteassoma nas células dendríticas mostrou alterar as suas respostas induzidas por antígenos (Chapatte et al. Cancer Res. (2006) 66:5461-5468). De acordo com algumas concretizações, a composição proporcionada neste contexto pode ser administrada a um paciente com neoplasma de células histiocíticas ou dendríticas. Os neoplasmas de células histiocíticas e dendríticas incluem sarcoma histiocítico, histiocitose de células de Langerhans, sarcoma de células de Langerhans, sarcoma / tumor de células dendríticas interdigitantes, sarcoma /tumor de células dendríticas foliculares e sarcoma de células dendríticas não especificadas.

[0240] A inibição do proteassoma mostrou ser benéfica para tratar enfermidades pelas quais um tipo de célula está proliferando e distúrbios imunológicos; deste modo, de acordo com algumas concretizações, proporciona-se o tratamento de enfermidades linfoproliferantes (LPD) associadas com distúrbios imunológicos primários (PID) que compreende administrar uma quantidade efetiva do composto exposto a um paciente com necessidade do mesmo. As definições clínicas mais comuns de imunodeficiência associadas com uma incidência crescente de distúrbios linfo proliferantes, incluindo neoplasmas e linfomas de células B e células T, são síndromes de imunodeficiência primária e outros distúrbios imunológicos primários, infecção com o vírus de imunodeficiência humana (HIV), imunossupressão iatrogênica em pacientes que receberam alo enxertos de órgãos sólidos ou medula óssea, e imunossupressão iatrogênica associada com o tratamento de metotrexato. Outros PIDs comumente associados com os LPDs, sendo que não se fica limitado aos mesmos, são ataxia telangiectasia (AT), síndrome de Wiskott-Aldrich (WAS), imunodeficiência variável comum (CVID), imunodeficiências combinada grave (SCID), distúrbio linfoproliferante ligado ao X (XLP), síndrome de rompimento de Nijmegen (NBS), síndrome hiper IgM, e síndrome linfoproliferante autoimunológica (ALPS).

[0241] A inibição de proteassoma também foi associada com a inibição de ativação de NF-KB e estabilização de níveis de p53. Desta forma, as composições proporcionadas neste contexto também podem ser usadas para inibir a ativação de NF-kB, e estabilizas níveis de p53 na cultura de células. Uma vez que o NF-kB é um regulador chave da inflamação, ele constitui um alvo atrativo para a intervenção terapêutica anti-inflamatória. Desta forma, as composições proporcionados neste contexto podem ser de utilidade para o tratamento de condições associadas com inflamação, que incluem, sendo que não se fica limitado às mesmas, COPD, psoríase, asma, bronquite, enfisema, e fibrose cística.

[0242] As composições expostas podem ser usadas para tratar condições mediadas diretamente pela função proteolítica do proteassoma, tais como perda de massa muscular, ou mediadas indiretamente por meio de proteínas que são processadas por meio do proteassoma, tais como NF-KB. O proteassoma participa na rápida eliminação e processamento pós-translacional de proteínas (por exemplo, enzimas) envolvidas na regularização celular (por exemplo, ciclo de células, transcrição de genes, e vias metabólicas), comunicação intercelular, e a resposta imunológica (por exemplo, apresentação de antígenos). Exemplos específicos discutidos adiante incluem a proteína β-amil0ide e proteínas reguladoras, tais como ciclinas e fator de transcrição NF-kB.

[0243] De acordo com algumas concretizações, uma composição proporcionada neste contexto é de utilidade para o tratamento de enfermidades e condições neurodegenerativas, que incluem, sendo que não se fica limitado às mesmas, derrame cerebral, lesão isquêmica do sistema nervoso, trauma neural (por exemplo, lesão cerebral percussiva, lesão da medula espinal, e lesão traumática ao sistema nervoso), esclerose múltipla e outras neuropatias imuno-mediadas (por exemplo, síndrome de Guillain-Barre e its variantes, neuropatia axonal motora aguda, polineuropatia desmielinizante inflamatória aguda, e Síndrome de Fisher), complexo de demência HIV/AIDS, axonomiay, neuropatia adiabética, doença de Parkinson, doença de Huntington, esclerose múltipla, meningite bacteriana, parasítica, fungica, e viral, encefalite, demência vascular, demência multi-enfarte, demência corpórea de Lewy, demência do lóbulo frontal, tal como doença de Pick, demências subcorticais (tais como paralisia supranuclear de Huntington ou progressiva), síndromes de atrofia cortical focal (tais como afasdia primária), demências tóxicas metabólicas (tais como hipotireoidismo crônico oi deficiência de B12), e demências causadas por infecções (tais como sífilis ou meningite crônica).

[0244] A doença de Alzheimer é caracterizada por depósitos extracelulares de proteína β-amil0ide (β-AP) nas placas senis e vasos cerebrais. A β-AP é um fragmento de peptídeo de 39 a 42 aminoácidos derivado de um precursor de proteína amilóide (APP). São conhecidas pelo menos três isoformas de APP (aminoácidos 695, 751, e 770). Junção alternativa de mRNA gera as isoformas; o processamento normal afeta uma parte da sequência β-AP, prevenindo deste modo a geração de β-AP. Acredita- se que o processamento de proteína anormal por meio do proteassoma contribui para a abundância de β-AP no cérebro Alzheimer. A enzima de processamento APP em ratos contém cerca de dez diferentes subunidades (22 kDa-32 kDa). A subunidade 25 kDa é dotada de uma sequência N-terminal de X-Gln-Asn-Pro-Met-X-Thr-Gly-Thr-Ser, que é idêntica à β-subunidade de macropain humana (Kojima, S. et al., Fed. Eur. Biochem. Soc., (1992) 304:57-60). A enzima de processamento APP cliva na ligação Gln15--Lys16; na presença do íon de cálcio, a enzima também cliva na ligação Met- 1--Asp1, e as Asp1--Ala2 ligam-se para liberar o domínio extracelular de β-AP.

[0245] Uma concretização, por essa razão, é um método de tratar doença de Alzheimer, que inclui administrar a um paciente uma quantidade efetiva da composição proporcionada neste contexto. Esse tratamento inclui reduzir a taxa de processamento de β-AP, reduzindo-se a taxa de formação de placas de β-AP, reduzindo-se a taxa de geração de β-AP, e reduzindo-se os sinais clínicos da doença de Alzheimer.

[0246] Também proporcionados neste contexto estão previstos métodos de tratamento de doenças de caquexia e de perda de massa muscular. O proteassoma degrada muitas proteínas nos reticulócitos em maturação e nos fibroblastos em crescimento. Nas células desprovidas de insulina ou soro, a taxa de proteólise praticamente é duplicada. A inibição do proteassoma reduz a proteólise, reduzindo desse modo tanto a perda de proteína muscular, quanto a carga nitrogenosa nos rins ou no fígado. Os inibidores de proteassoma de peptídeo tais como proporcionados neste contexto são de utilidade para o tratamento de condições tais como câncer, enfermidades infecciosas crônicas, febre, desuso muscular (atrofia) e desnervação, lesão dos nervos, abstinência, disfunção renal associada com acidose, e deficiência hepática. Vide, por exemplo, Goldberg, U.S. Pat. No. 5,340,736. Os métodos de tratamento incluem: redução da taxa de degradação de proteína do músculo em uma célula; redução da taxa de degradação peoteínica intracelular; redução da taxa de degradação da proteína p53 em uma célula; e inibição do crescimento de cânceres relacionados com p53. cada um destes métodos inclui contactar uma célula (in vivo ou in vitro, por exemplo, um músculo em um paciente) com uma quantidade efetiva de uma composição farmacêutica exposta neste contexto

[0247] Fibrose é a formação excessiva e persistente de tecido cicatricial resultante do crescimento hiperproliferante de fibroblastos e está associada com a ativação do caminho de sinalização de TGF-β. A fibrose envolve a extensa deposição de matriz extracelular e pode ocorrer dentro de virtualmente qualquer tecido ou através de vários tecidos diferentes. Normalmente, o nível de proteína de sinalização intracelular (Smad) que ativa a transcrição de genes alvo no estímulo de TGF-β é regulado por meio de atividade de proteassoma. Não obstante, a degradação acelerada dos componentes de sinalização de TGF-β foi observada em cânceres e outras condições hiperproliferantes. Desta forma, de acordo com determinadas concretizações, proporciona-se um método para tratar condições hiperproliferantes, tais como retinopatia diabética, degeneração macular, nefropatia diabética, glomerulosclerose, nefropatia de IgA, cirrose, atresia das vias biliares, falha cardíaca congestiva, escleroderma, fibrose induzida por radiação, e fibrose pulmonar (fibrose pulmonar idiopática, enfermidade vascular de colágeno, sarcoidose, enfermidades pulmonares intersticiais e distúrbios pulmonares extrínsecos). O tratamento de vítimas de queimaduras é frequentemente prejudicado pela fibrose; desta forma, de acordo com algumas concretizações um inibidor proporcionado neste contexto pode ser administrado por meio de administração tópica ou sistêmica para tratar queimaduras. O fechamento de feridas em seguida à cirurgia é frequentemente associado com cicatrizes desfigurantes, que podem ser impedidas pela inibição da fibrose. Desta forma, de acordo com determinadas concretizações, é proporcionado neste contexto um método para a prevenção ou redução de cicatrizes

[0248] Outra proteína processada por meio do proteassoma é NF-KB, um membro da família da proteína Rel. A família Rel de proteínas ativadoras transcricionais pode ser dividida em dois grupos. Um primeiro grupo requer processamento proteolítico, e inclui p50 (NF-kB1, 105 kDa) e p52 (NF-k2, 100 kDa). O segundo grupo não requer processamento proteolítico e inclui p65 (RelA, Rel (c- Rel), e RelB). Tanto o homo- quanto heterodímero podem ser formados por membros da família Rel; NF-kB, por exemplo, é um heterodímero p50-p65. Depois da fosforilação e ubiquitinação de IkB e p105, as duas proteínas são degradadas e processadas, respectivamente, para produzir a NF-kB ativa que efetua a translocação do cictoplasma para o núcleo. O p105 ubiquitinado também é processado por meio de proteassomas purificados (Palombella et al., Cell (1994) 78:773-785). A NF-kB ativa forma um complexo intensificador estereoespecífico com outros ativadores de transcrição e, por exemplo, HMG I(Y), induzindo a expressão seletiva de um gene particular.

[0249] A NF-kB regula genes envolvidos na resposta imune e inflamatória, e eventos mitóticos. Por exemplo, a NF-kB é requerida para a expressão do gene k da cadeia leve da imunoglobulina, o gene de cadeia α receptor de IL-2, o gene de complexo de histocompatibilidade principal da classe I, e um número de genes de citoquina que codificam, por exemplo, IL-2, IL-6, fator estimulador de colônia de granulócitos, e IFN-β (Palombella et al., Cell (1994) 78:773-785). Algumas concretizações incluem métodos para afetar o nível de expressão de IL-2, MHC-I, IL- 6, TNFα, IFN-β, ou qualquer uma das outras proteínas mencionadas anteriormente, com cada método incluindo administrar a um paciente uma quantidade efetiva de uma composição exposta neste contexto. Os complexos que incluem p50 são mediadores rápidos de respostas inflamatórias agudas e imunes (Thanos, D. e Maniatis, T., Cell (1995) 80:529-532).

[0250] A NF-KBtambém participa na expressão dos genes de adesão de células que codificam a seletina E, a seletina P, ICAM, e VCAM-1 (Collins, T., Lab. Invest. (1993) 68:499-508). De acordo com algumas concretizações, proporciona-se um método para inibir a adesão de células (por exemplo, a adesão de células mediada por seletina E, seletina P, ICAM, ou VCAM-1), que inclui contactar uma célula com (ou administrar a um paciente) uma quantidade efetiva de uma composição farmacêutica exposta neste contexto.

[0251] A isquemia e a lesão por reperfusão resultam em hipoxia, uma condição em que ocorre uma deficiência de oxigênio atingindo os tecidos do corpo. Esta condição causa uma degradação aumentada da Ik-Bα, resultando desse modo na ativação de NF-kB. Foi demonstrado que a seriedade da lesão que resulta em hipoxia pode ser reduzida com a administração de um inibidor de proteassoma. Desta forma, proporciona-se neste contexto um método de tratamento de uma condição isquêmica ou lesão por reperfusão que compreende administrar a um paciente com necessidade desse tratamento uma quantidade efetiva de um composto exposto neste contexto. Exemplos de tais condições ou lesões incluem, sendo que não se fica limitado aos mesmos, síndrome aguda das coronárias (placas vulneráveis), enfermidade arterial oclusiva (co-oclusões cardíaca, cerebral, arterial periférica e vascular), aterosclerose (esclerose das coronárias, enfermidade arterial das coronárias), infartos, insuficiência cardíaca, pancreatite, hipertrofia do miocárdio, estenose, e restenose.

[0252] A NF-kB também se liga especificamente ao potenciador /promotor de HIV. Quando comparada à Nef de mac239, a proteína reguladora de HIV, Nef de pbj14, difere por dois aminoácidos na região que controla a ligação de quinase de proteína. Acredita-se que a quinase de proteína assinala a fosforilação de IKB, disparando a degradação de IKB através do caminho ubiquitina - proteassoma. Depois da degradação, a NF-KB é liberada dentro do núcleo, potenciando desta forma a transcrição de HIV (Cohen, J., Science, (1995) 267:960). Proporciona-se neste contexto um método para inibir ou reduzir a infecção por HIV em um paciente, e um método para aumentar o nível de expressão de genes virais, com cada método incluindo administrar ao paciente uma quantidade efetiva de uma composição tal como exposta neste contexto.

[0253] As infecções virais contribuem para a patologia de muitas enfermidades. Condições cardíacas tais como miocardite em curso e cardiomiopatia dilatada têm estado vinculadas ao coxsackievirus B3. Em uma análise de micro arranjo de genoma inteiro comparativo de corações de camundongos infectados, subunidades de proteassoma específicas foram uniformemente reguladas nos corações de camundongos que desenvolveram miocardite crônica (Szalay et al, Am J Pathol 168:1542-52, 2006). Alguns vírus utilizam o sistema ubiquitinas - proteassoma na etapa de entrada viral onde o vírus é libertado a partir do endossoma para o citosol. O vírus da hepatite do camundongo (MHV) pertence à família Coronaviridae, que também inclui o coronavírus da síndrome respiratória aguda grave (SARS). Yu e Lai (J Virol 79:644-648, 2005) demonstraram que o tratamento de células infectadas com MHV com um inibidor de proteassoma resultaram em uma diminuição na replicação viral, correlacionando com título viral reduzido em comparação com aquela das células não tratadas. O vírus B da hepatite humana (HBV), um membro da família do vírus Hepadnaviridae, de forma assemelhada requer proteínas de envoltório codificadas viralmente para se propagar. A inibição do caminho de degradação de proteassoma causa uma redução significativa na quantidade de proteínas de envoltório segregadas (Simsek et al, J Virol 79:12914-12920, 2005). Adicionalmente ao HBV, outros vírus de hepatite (A, C, D e E) também podem utilizar o caminho de degradação de ubiquitina - proteassoma para a segregação, morfogênese e patogênese. Por essa razão, de acordo com determinadas concretizações, proporciona-se um método para o tratamento de infecção viral, tais como SARS ou hepatite A, B, C, D e E, que compreende contactar uma célula com (ou administrar a um paciente) uma quantidade efetiva do composto exposto neste contexto.

[0254] A superprodução de citoquinas induzidas por polissacáridas (LPS) tais como TNFα é considerada como sendo central para os processos associados com choque séptico. Além disso aceita-se de um modo geral que a primeira etapa na ativação de células por meio de LPS é a ligação do LPS a receptores de membrana específicos. As subunidades α- e β- do complexo de proteassoma 20S foram identificadas como proteínas de ligação de LPS, sugerindo que a transdução de sinal induzido por LPS pode ser um alvo terapêutico importante no tratamento ou prevenção de septicemia (Qureshi, N. et al., J. Immun. (2003) 171: 1515-1525). Por essa razão, de acordo com determinadas concretizações, as composições tais como proporcionadas neste contexto podem ser usadas para a inibição de TNFα para prevenir e/ ou tratar choque séptico.

[0255] A proteólise intracelular gera pequenos peptídeos para apresentação aos linfócitos T para induzir respostas imunológicas mediadas por I da classe MHC. O sistema imunológico peneira as células autólogas que estão viralmente infectadas ou foram submetidas a transformação oncogênica. Uma concretização é compreendida por um método para inibir apresentação de antígeno em uma célula, que inclui a exposição da célula a uma composição descrita neste contexto. Outra concretização é compreendida por um método para suprimir o sistema imunológico de um paciente (por exemplo, inibir a rejeição de transplante, alergia, asma), que inclui administrar ao paciente uma quantidade efetiva de uma composição descrita neste contexto. As composições proporcionadas neste contexto também podem ser usadas para tratar enfermidades auto-imunológicas, tais como lúpus, artrite reumatóide, esclerose múltipla, e enfermidades inflamatórias do intestino tais como colite ulcerosa e doença de Crohn.

[0256] Outra concretização é compreendida por um método para alterar o repertório de peptídeos antigênicos produzidos pelo proteassoma ou outro Ntn com atividade multicatalítica. Por exemplo, se a atividade PGPH do proteassoma 20S for inibida seletivamente, um conjunto diferente de peptídeos antigênicos será produzido pelo proteassoma e apresentado nas moléculas MHC nas superfícies das células diferente do que seria produzido e apresentado seja sem qualquer inibição de enzima, ou com, por exemplo, inibição seletiva de atividade semelhante a quimiotripsina do proteassoma.

[0257] Determinados inibidores de proteassoma bloqueiam tanto a degradação quanto o processamento da NF-KBubiquitinada in vitro e in vivo. Os inibidores de proteassoma também bloqueiam a degradação da IKB-α e ativação da NF-kB (Palombella, et al. Cell (1994) 78:773-785; e Traenckner, et al., EMBO J. (1994) 13:5433-5441). De acordo com algumas concretizações, proporciona-se um método para inibir a degradação da IkB-α, que inclui contactar a célula com uma composição descrita neste contexto. Outra concretização é compreendida por um método para redução do teor celular da NF-kB em uma célula, músculo, órgão, ou paciente, que inclui contactar a célula, músculo, órgão ou paciente com uma composição descrita neste contexto.

[0258] Outros fatores de transcrição eucariótica que requerem processamento proteolítico incluem o fator de transcrição geral TFIIA, proteína acessória VP16 de vírus simplex de herpes (fator de célula hospedeira), proteína de fator 2 reguladora de IFN induzível por vírus, e a proteína 1 de ligação de elemento regulador de esterol de ligação de membrana.

[0259] Proporcionam-se ainda neste contexto são métodos para afetar ciclos de células eucarióticas dependentes de ciclina, que incluem expor uma célula (in vitro ou in vivo) a uma composição tal como exposta neste contexto. As ciclinas são proteínas envolvidas no controle de ciclos celular. O proteassoma participa na degradação das ciclinas. Exemplos de ciclinas incluem ciclinas mitóticas, ciclinas G1, e ciclina B. A degradação das ciclinas permite que uma célula saia de um estágio de ciclo celular (por exemplo, mitose) e entre em outro (por exemplo, divisão). Acredita- se que todas as ciclinas estão associadas com a quinase de proteína p34cdc2 ou com quinases relacionadas. O sinal de direcionamento de proteólise é localizado para aminoácidos 42-RAALGNISEN-50 (caixa de destruição). Existe evidência de que a ciclina é convertida para uma forma vulnerável a uma ligase de ubiquitina ou que uma ligase específica de ciclina é ativada durante a mitose (Ciechanover, A., Cell, (1994) 79:13-21). A inibição do proteassoma inibe a degradação da ciclina, e por essa razão inibe a proliferação celular, por exemplo, em cânceres relacionados com ciclina (Kumatori et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1990) 87:7071-7075). Proporciona-se neste contexto um método para o tratamento de uma enfermidade proliferante em um paciente (por exemplo, câncer, psoríase ou restenose), que inclui administrar ao paciente uma quantidade efetiva de uma composição exposta neste contexto. Proporciona-se também neste contexto um método para tratar inflamação relacionada com ciclina em um paciente, que inclui administrar a um paciente uma quantidade terapeuticamente efetiva de uma composição descrita neste contexto.

[0260] Concretizações adicionais incluem métodos for afetar a regulagem dependente de proteassoma de oncoproteínas e métodos de tratamento ou inibição de crescimento de câncer, com cada método incluindo expor uma célula (in vivo, por exemplo, em um paciente, ou in vitro) a uma composição tal como exposta neste contexto. As proteínas E6 derivadas de HPV-16 e HPV-18 estimulam a conjugação de ATP- e dependente de ubiquitina e a degradação de p53 em lisados de reticulócitos brutos. O oncogene recessivo p53 mostrou acumular sob a temperatura não permissiva em uma linha celular com um E1 termo lábil mutante. Níveis elevados de p53 podem conduzir a apoptose. Exemplos de proto-oncoproteínas degradadas por meio do sistema de ubiquitina incluem c-Mos, c-Fos, e c-Jun. Uma concretização é compreendida por um método para tratar apoptose relacionada com p53, que inclui administrar a um paciente uma quantidade efetiva da composição exposta neste contexto.

[0261] De acordo com outra concretização, as composições expostas são de utilidade para o tratamento de uma infecção parasitária, tais como as infecções causadas por parasitas protozoários. O proteassoma destes parasitas é considerado como estando envolvido principalmente em atividades de diferenciação e de replicação celular (Paugam et al., Trends Parasitol. 2003, 19(2): 55-59). Além disso, espécies de Entamoeba mostraram perder a capacidade de encistação quando são expostas a inibidores de proteassoma (Gonzales, et al., Arch. Med. Res. 1997, 28, Spec No: 139-140). De acordo com algumas dessas concretizações, expõem-se composições que são de utilidade para o tratamento de infecções parasíticas em seres humanos causadas por meio de um parasita protozoário selecionado a partir de Plasmodium sps. (que inclui P. falciparum, P. vivax, P. malariae, e P. ovale, que são causadores da malária), Trypanosoma sps. (que inclui T. cruzi, que é causador da doença de Chagas, e T. brucei que é causador da doença do sono africana), Leishmania sps. (que inclui L. amazonesis, L. donovani, L. infantum, L. mexicana, e assemelhados), Pneumocystis carinii (um protozoário conhecido como causador de penumonia em AIDS e outros pacientes imunossuprimidos), Toxoplasma gondii, Entamoeba histolytica, Entamoeba invadens, e Giardia lamblia. De acordo com determinadas concretizações, as composições expostas são de utilidade para o tratamento de infecções parasíticas em animais e em gado causadas por um parasita protozoário selecionado a partir de Plasmodium hermani, Cryptosporidium sps., Echinococcus granulosus, Eimeria tenella, Sarcocystis neurona, e Neurospora crassa. Outros compostos de utilidade como inibidores de proteassoma no tratamento de enfermidades parasitárias encontram-se descritos em WO 98/10779, que fica incorporada neste contexto na sua totalidade.

[0262] De acordo com determinadas concretizações, as composições expostas inibem a atividade de proteassoma de forma irreversível em um parasita. Essa inibição irreversível mostrou induzir encerramento na atividade enzimática sem recuperação nas células vermelhas do sangue e nas células brancas do sangue. De acordo com algumas dessas concretizações, a semi-vida longa das células do sangue pode proporcionar proteção prolongada com relação à terapia contra exposições reincidentes a parasitas. De acordo com determinadas concretizações, a semi-vida longa das células do sangue pode proporcionar proteção prolongada com relação à quimioprofilaxia contra infecção futura.

[0263] Os procariotes são dotados do que é equivalente à partícula de proteassoma 20S do eucarioto. Se bem que, a composição de subunidade da partícula 20S de procarioto é mais simples do que aquela dos eucariotos, ela tem a capacidade de hidrolisar ligações de peptídeo de uma maneira assemelhada. Por exemplo, o ataque nucleofílico da ligação de peptídeo ocorre através do resíduo de treonina no término N das subunidades β. De acordo com algumas concretizações, proporciona-se um método de tratamento de infecções procarióticas, que compreende administrar a um paciente uma quantidade efetiva da composição inibidora de proteassoma exposta neste contexto. As infecções procarióticas podem incluir enfermidades causadas por seja micobactérias (tais como tuberculose, lepra ou Buruli Ulcer) ou arqueobactérias.

[0264] Também foi demonstrado que inibidores que se ligam ao proteassoma 20S estimulam a formação óssea em culturas de órgãos de ossos. Além disso, quando esses inibidores foram administrados a camundongos sistemicamente, determinados inibidores de proteassoma aumentaram o volume ósseo e as taxas de formação de ossos em mais de 70% (Garrett, I. R. et al., J. Clin. Invest. (2003) 111: 1771-1782), sugerindo desse modo que o mecanismo de ubiquitina - proteasoma regula a diferenciação de osteoblastos e formação óssea. Por essa razão, as composições expostas podem ser de utilidade para o tratamento e/ ou prevenção de enfermidades associadas com a perda óssea, tal como osteoporose.

[0265] Proporcionado neste contexto está exposto um método para o tratamento de uma enfermidade ou condição selecionada a partir de câncer, enfermidade auto-imunológica, enxerto ou condição relacionada com transplante, enfermidade neurodegenerativa, condição fibrótica associada, condições relacionadas com isquemia, infecção (viral, parasítica ou procariótica) e enfermidades associadas com perda óssea, que compreende administrar um inibidor de proteassoma tal como proporcionado neste contexto. Por exemplo, um composto da fórmula (5).

[0266] O tecido ósseo é uma fonte excelente para fatores que são dotados da capacidade para estimularem as células ósseas. Desta forma, os extratos do tecido ósseo bovino contêm não apenas proteínas estruturais que são responsáveis para manterem a integridade estrutural do osso, mas também fatores de crescimento ósseo biologicamente ativos que podem estimular a proliferação das células ósseas. Entre estes últimos fatores estão uma família recentemente descrita de proteínas chamadas proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs). Todos estes fatores de crescimento têm efeitos nos outros tipos de células, da mesma forma que nas células ósseas, incluindo Hardy, M. H., et al., Trans Genet (1992) 8:55-61 descreve a evidência de que as proteínas morfogenéticas ósseas (BMPs), são diferencialmente expressas nos folículos capilares durante o desenvolvimento. Harris, S. E., et al., J Bone Miner Res (1994) 9:855-863 descreve os efeitos do TGF-β na expressão de BMP-2 e outras substâncias nas células ósseas. A expressão de BMP-2 em folículos maduros também ocorre durante a maturação e depois do período da proliferação celular (Hardy, et al. (1992, supra). Desta forma, os compostos proporcionados neste contexto também podem ser de utilidade para o estímulo do crescimento de folículos capilares.

[0267] Finalmente, as composições expostas também são de utilidade como agentes de diagnóstico (por exemplo, em kits de diagnóstico ou para o uso em laboratórios clínicos) para peneiramento de proteínas (por exemplo, enzimas, fatores de transcrição) processadas por hidrolases de Ntn, incluindo o proteassoma. As composições expostas também são de utilidade como reagentes de pesquisa para ligarem especificamente a subunidade X/MB1 ou cadeia α e inibirem as atividades proteolíticas associadas com a mesma. Por exemplo, a atividade de (e os inibidores específicos de) outras subunidades do proteassoma pode ser determinada.

[0268] A maior parte das proteínas celulares são submetidas a processamento proteolítico durante a maturação ou ativação. Os inibidores de enzimas expostos neste contexto podem ser usados para determinar se um processo celular, de desenvolvimento, ou fisiológico ou rendimento é regulado pela atividade proteolítica de uma hidrolase de Ntn particular. Um método desses inclui a obtenção de um organismo, a preparação de uma célula intacta, ou um extrato de célula, expor o organismo, preparação de célula, ou extrato de célula para um sinal, e monitorar o processo ou rendimento. A alta seletividade dos compostos expostos neste contexto permite a eliminação rápida e precisa ou implicação do Ntn (por exemplo, o proteassoma 20S) em um determinado processo celular, de desenvolvimento, ou fisiológico.

Administração

[0269] As composições preparadas tais como descritas neste contexto podem ser administradas em várias formas, na dependência do distúrbio a ser tratado e da idade, condição e peso corpóreo do paciente, tal como é conhecido na técnica. Por exemplo, onde as composições se destinam a ser administradas oralmente, elas podem ser formuladas como comprimidos, cápsulas, grânulos, pós, ou xaropes; ou para administração parenteral, elas podem ser formuladas como injeções (intravenosas, intramusculares, ou subcutâneas), preparados de infusão, gotas, ou supositórios. Para aplicação por via de membrana mucosa oftálmica, elas podem ser formuladas como colírios ou unguentos oculares. Estas formulações podem ser preparadas por meios convencionais em conjunto com os métodos descritos neste contexto, e, se desejado, o ingrediente ativo pode ser misturado com qualquer aditivo ou excipiente convencional, tais como um ligante, um agente de desintegração, um lubrificante, um corretivo, um agente de solubilização, um auxiliar de suspensão, um agente emulsionador, ou um agente de revestimento adicionalmente a uma ciclodextrina e um tampão. Muito embora a dosagem possa variar na dependência dos sintomas, idade e peso corpóreo do paciente, a natureza e gravidade dos distúrbio a ser tratado ou prevenido, a via de administração e a forma do fármaco, de uma maneira geral, uma dosagem diária variável desde 0,01 até 2000 mg do composto é recomendada para um paciente humano adulto, e esta pode ser administrada em uma única dose ou em doses divididas. A quantidade de ingrediente ativo que pode ser combinada com um material portador para produzir uma forma de dosagem única será de um modo geral aquela quantidade do composto que produz um efeito terapêutico. De uma maneira geral, as composições pretendidas para o uso parenteral (por exemplo, injeção intravenosa, subcutânea) incluem uma ciclodextrina substituída. As composições administradas por meio de outras vias, com particularidade a via oral, incluem uma ciclodextrina substituída ou não substituída.

[0270] O tempo preciso de administração e/ ou quantidade da composição que irá proporcionar os resultados mais efetivos em termos de eficácia de tratamento em um determinado paciente será dependente da atividade, farmacocinética, e biodisponibilidade de um composto particular, condição fisiológica do paciente (incluindo idade, sexo, tipo de enfermidade e estágio, condição física geral, capacidade de resposta a uma determinada dosagem, e tipo de medicação), via de administração, e outras. Não obstante, as diretrizes expostas acima podem ser usadas como a base para o tratamento de sintonia fina, por exemplo, determinação do tempo ótimo e/ ou quantidade de administração, que irá requerer não mais do que experimentação de rotina que consiste na monitoração do paciente e ajustagem da dosagem e /ou calendário.

[0271] A frase “farmaceuticamente aceitável” é empregada neste contexto para referir-se àqueles ligantes, materiais, às composições, e/ ou formas de dosagem que são, dentro do escopo de julgamento médico saudável, adequadas para o uso em contacto com os tecidos dos seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, comensurado com uma relação benefício/ risco razoável.

[0272] A frase “portador farmaceuticamente aceitável” da forma que é utilizado neste contexto significa um material, composição, ou veículo farmaceuticamente aceitável, tais como um enchimento sólido ou líquido, diluente, excipiente, solvente ou material de encapsulação. Cada portador deve ser “aceitável” no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação e não prejudiciais para o paciente. Alguns exemplos de materiais que podem servir como portadores farmaceuticamente aceitáveis incluem: (1) açúcares, tais como lactose, glicose, e sacarina; (2) amidos, tais como amido de milho, amido de batata, e β-ciclodextrina substituída ou não substituída; (3) celulose, e os seus derivados, tais como carboximetil celulose de sódio, etil celulose, e acetato de celulose; (4) tragacanto pulverizado; (5) mal; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, tais como manteiga de cacau e ceras para supositórios; (9) óleos, tais como óleo de amendoim, óleo de caroço de algodão, óleo de açafroa, óleo de gergelim, óleo de oliva, óleo de milho, e óleo de soja; (10) glicóis, tais como propileno glicol; (11) polióis, tais como glicerina, sorbitol, manitol, e poletileno glicol; (12) ésteres, tais como oleato de etila e laurato de etila; (13) ágar; (14) agentes de tamponagem, tais como hidroxido de magnésio e hidróxido de alumínio; (15) ácido algínico; (16) água isenta de pirógeno; (17) isotônico salino; (18) solução de Ringer; (19) álcool etílico; (20) soluções tampão de fosfato; e (21) outras substâncias compatíveis não tóxicas empregadas em formulações farmacêuticas. De acordo com determinadas concretizações, as composições farmacêuticas proporcionadas neste contexto são não pirogênicas, ou seja, não induzem elevações de temperatura significativas quando administradas a um paciente.

[0273] O termo “sal farmaceuticamente aceitável” refere-se aos sais de adição ácida relativamente não tóxicos, inorgânicos e orgânicos do(s) inibidor(s). Estes sais podem ser preparados in situ durante o isolamento final e purificação do(s) inibidor(s), ou por meio de reação separadamente de um inibidor de proteassoma peptídico purificado na sua forma de base livre com um ácido orgânico ou inorgânico adequado, e isolamento do sal que é formado desta maneira. Os sais que são representativos incluem os sais de bromidrato, cloridrato, sulfato, bissulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartarato, naftilato, mesilato, glicoeptonato, lactobionato, laurilsulfonato, e sais de aminoácido, e assemelhados. (Vide, por exemplo, Berge et al. (1977) “Pharmaceutical Salts”, J. Pharm. Sci. 66: 1-19.)

[0274] De acordo com algumas concretizações, os inibidores de proteassoma de peptídeo proporcionados neste contexto podem conter um ou mais grupos funcionais ácidos e, desta forma, são capazes de formar sais farmaceuticamente aceitáveis com bases farmaceuticamente aceitáveis. O termo “sais farmaceuticamente aceitáveis” nestes casos referem-se aos sais de adição de base inorgânicos e orgânicos relativamente não tóxicos de um inibidor(s). De forma assemelhada, estes sais podem ser preparados in situ durante o isolamento final e purificação do(s) inibidor(s), ou por meio da reação separadamente do(s) inibidor(s) purificado(s) na sua forma de ácido livre com uma base adequada, tais como o hidróxido, carbonato, ou bicarbonato de um cátion de metal farmaceuticamente aceitável, com amônia, ou com uma amina orgânica primária, secundária, ou terciária farmaceuticamente aceitável. Sais alcalinos ou alcalino-terrosos representativos incluem os sais de lítio, sódio, potássio, cálcio, magnésio, e alumínio, e outros assemelhados. As aminas orgânicas representativas de utilidade para a formação dos sais de adição de base incluem etilamina, dietilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, e outros assemelhados (vide, por exemplo, Berge et al., supra).

[0275] Agentes de umedecimento, emulsionadores, e lubrificantes, tais como sulfato laurílico de sódio e estearato de magnésio, da mesma forma que agentes de coloração, agentes de desprendimento, agentes de revestimento, adoçantes, aromatizantes, e agentes perfumantes, preservativos e antioxidantes também podem estar presentes nas composições.

[0276] Exemplos de antioxidantes farmaceuticamente aceitáveis incluem: (1) antioxidantes solúveis em água, tais como ácido ascórbico, cloridrato de cisteína, bissulfato de sódio, metabissulfito de sódio, sulfito de sódio, e assemelhados; (2) antioxidantes solúveis em óleo, tais como palmitato de ascorbil, hidroxianisol butilado (BHA), hidroxitolueno butilado (BHT), lecitina, galato de propila, alfa-tocoferol, e outros assemelhados; e (3) agentes de quelação de metal, tais como ácido cítrico, ácido tetra acético de etilenodiamina (EDTA), sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico, e assemelhados.

[0277] As formulações que são adequadas para administração oral podem estar na forma de cápsulas, hóstias, pílulas, comprimidos, pastilhas (utilizando-se uma base aromatizada, usualmente sacarina e acácia ou tragacanto), pós, grânulos, ou como uma solução ou uma suspensão em um líquido aquoso ou não aquoso, ou como uma emulsão líquida de óleo em água ou de água em óleo, ou na forma de um elixir ou xarope, ou na forma de pastilhas (utilizando-se uma matriz inerte, tais como gelatina e glicerina, ou sacarina e acácia) e/ ou na forma de colutórios, e outros assemelhados, cada um contendo uma quantidade predeterminada de um inibidor(s) como um ingrediente ativo. A composição também pode ser administrada na forma de um bolus, electuario ou pasta.

[0278] Nas formas de dosagem sólida para administração oral (cápsulas, comprimidos, pílulas, drágeas, pós, granulados e outros assemelhados), o ingrediente ativo é misturado com um ou mais portadores farmaceuticamente aceitáveis, tais como citrato de sódio ou fosfato de sódio dicálcico, e/ ou qualquer um dos seguintes: (1) enchimentos ou extensores, tais como amidos, ciclodextrinas, lactose, sacarina, glicose, manitol, e/ ou ácido silícico; (2) ligantes, tais como, por exemplo, carboximetil celulose, alginatos, gelatina, polivinil pirrolidona, sacarina, e/ ou acácia; (3) umectantes, tais como glicerol; (4) agentes de desintegração, tais como ágar-ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou tapioca, ácido algínico, determinados silicatos, e carbonato de sódio; (5) agentes de retardamento de solução, tais como parafina; (6) aceleradores de absorção, tais como compostos de amônio quaternário; (7) agentes de umedecimento, tais como, por exemplo, álcool acetílico e monostearato de glicerol; (8) absorventes, tais como caulim e argila de bentonita; (9) lubrificantes, tais como talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, glicóis de polietileno sólidos, sulfato laurílico de sódio, e as suas misturas; e (10) agentes de coloração. No caso de cápsulas, comprimidos, e pílulas, as composições farmacêuticas também podem compreender agentes de tamponamento. Composições sólidas de um tipo assemelhado também podem ser empregadas como enchimentos em cápsulas de gelatina macia e dura utilizando-se excipientes tais como açúcares de lactose ou leite, da mesma forma que glicóis de polietileno de alto peso molecular, e assemelhados.

[0279] Um comprimido pode ser preparado por compressão ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos preparados por compressão podem ser preparados utilizando-se ligante (por exemplo, gelatina ou hidroxipropilmetil celulose), lubrificante, diluente inerte, preservativo, desintegrante (por exemplo, glicolato amido de sódio ou carboximetil celulose de sódio reticulado), agente de dispersão ou de superfície ativa. Os comprimidos moldados podem ser preparados por moldagem em uma máquina adequada da mistura do(s) inibidor(s) pulverizado(s) umedecido(s) com um diluente líquido inerte.

[0280] Os comprimidos e outras formas de dosagem sólida, tais como drágeas, cápsulas, pílulas, e grânulos, podem ser opcionalmente marcados ou preparados com revestimentos e conchas, tais como revestimentos entéricos e outros revestimentos amplamente conhecidos na técnica de formulação farmacêutica. Eles também podem ser formulados de maneira a proporcionar liberação lenta ou controlada do ingrediente ativo previsto nos mesmos utilizando-se, por exemplo, hidroxipropilmetil celulose em proporções variáveis para proporcionarem o perfil de liberação desejado, outras matrizes de polímeros, lipossomas, e/ ou microesferas. Eles podem ser esterilizados, por exemplo, por filtragem através de um filtro de retenção de bactérias, ou por meio de inclusão de agentes de esterilização na forma de sólido estéril como composições que podem ser dissolvidas em água estéril, ou algum outro meio injetável estéril imediatamente antes do uso. Estas composições também podem conter opcionalmente agentes de opacificação e podem ser de uma composição capaz de liberar o(s) ingrediente(s) ativo(s) somente, ou preferencialmente, em uma determinada parte do trato gastrointestinal, opcionalmente, de uma maneira retardada. Exemplos de incorporação das composições que podem ser usados incluem substâncias poliméricas e ceras. O ingrediente ativo também pode estar na forma micro-encapsulada, se for apropriado, com um ou mais dos excipientes descritos anteriormente.

[0281] As formas de dosagem líquida para administração oral incluem emulsões farmaceuticamente aceitáveis, micro emulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires. Adicionalmente ao ingrediente ativo, as formas de dosagem líquida podem conter diluentes inertes comumente usados na técnica, tais como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes de solubilização, e emulsionadores, tais como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etila, acetato de etila, álcool benzílico, benzoato de benzila, glicol de propileno, 1,3-butileno glicol, óleos (com particularidade, óleos de semente de algodão, amendoim, milho, gérmen, oliva, rícino, e gergelim), glicerol, álcool de tetraidrofurila, glicóis de polietileno, e ésteres de sorbitano de ácido graxo, e as suas misturas.

[0282] Além dos diluentes inertes, as composições orais também podem incluir adjuvantes tais como agentes de umedecimento, agentes de emulsionamento e de suspensão, agentes adoçantes, aromatizantes, corantes, perfumantes e preservativos.

[0283] As suspensões, adicionalmente aos inibidores ativos podem conter agentes de suspensão, tais como, por exemplo, alcoóis de isostearila etoxilados, ésteres de polioxietileno sorbitol e sorbitano, celulose microcristalina, metaidróxido de alumínio, bentonita, ágar-ágar e tragacanto, bem como as suas misturas.

[0284] As formulações para administração retal ou vaginal podem ser apresentadas na forma de um supositório, que pode ser preparado por meio da mistura de um ou mais inibidores com um ou mais excipientes ou portadores não irritantes adequados que compreendem, por exemplo, manteiga de cacau, polietileno glicol, uma cera ou salicilato para supositório, que é sólido sob temperatura ambiente, mas líquido sob a temperatura do corpo e, por essa razão, será fundido no reto ou na cavidade vaginal e liberará o agente ativo.

[0285] As formulações que são adequadas para administração vaginal também incluem pessários, tampões, cremes, géis, pastas, espumas, ou formulações de spray que contêm esses portadores tais como são conhecidos na técnica como sendo apropriados.

[0286] As formas de dosagem para a administração tópica ou transdérmica de um inibidor incluem pós, sprays, unguentos, pastas, cremes, loções, géis, soluções, emplastros e inalantes. O componente ativo pode ser misturado sob condições estéreis com um portador farmaceuticamente aceitável, e com quaisquer preservativos, tampões, ou propelentes que possam ser requeridos.

[0287] Os unguentos, pastas, cremes, e géis podem conter, adicionalmente ao(s) inibidor(s), excipientes, tais como gorduras de origem animal e vegetal, óleos, ceras, parafinas, amido, tragacanto, derivados de celulose, glicóis de polietileno, silicones, bentonitas, ácido silícico, talco, e óxido de zinco, ou as suas misturas.

[0288] Os pios e sprays podem conter, adicionalmente a um ou mais inibidores, excipientes tais como lactose, talco, ácido silícico, hidróxido de alumínio, silicatos de cálcio, e pó de poliamida, ou misturas destas substâncias. Os sprays podem conter adicionalmente propelentes convencionais, tais como clorofluoroidrocarbonetos e hidrocarbonetos voláteis não substituídos, tais como butano e propano.

[0289] Um inibidor de proteassoma peptídico pode ser administrado por meio de aerossol. Isto é realizado pela preparação de um aerossol aquoso, preparação lipossomal, ou partículas sólidas que contêm a composição. Poderá ser usada uma suspensão não aquosa (por exemplo, propelente de fluoro carboneto). De acordo com algumas concretizações, nebulizadores sônicos são preferidos porque eles reduzem ao mínimo a exposição do agente ao cisalhamento, que pode resultar em degradação do composto.

[0290] Normalmente, um aerossol aquoso é preparado pela formulação de uma solução ou suspensão aquosa do agente em conjunto com os portadores e estabilizadores convencionais farmaceuticamente aceitáveis. Os portadores e estabilizadores variam com os requisitos da composição particular, mas tipicamente incluem agentes tensoativos não iônicos (Tweens, Pluronics, ésteres de sorbitano, lecitina, Cremophors), co-solventes farmaceuticamente aceitáveis, tais como glicol de polietileno, proteínas inócuas semelhantes a albumina de soro, ésteres de sorbitano, ácido oléico, lecitina, aminoácidos tais como glicina, tampões, sais, açúcares, ou alcoóis de açúcar. Os aerossóis de uma maneira geral são preparados a partir de soluções isotônicas.

[0291] Os emplastros transdérmicos têm a vantagem adicional de proporcionarem distribuição controlada de um inibidor(s) ao corpo. Essas formas de dosagem podem ser preparadas por meio do dissolvimento ou dispersão do agente no meio apropriado. Intensificadores de absorção também podem ser usados para aumentar o fluxo do(s) inibidor(s) através da pele. A taxa desse fluxo pode ser controlada seja pela provisão de uma membrana de controle de taxa ou dispersando- se o(s) inibidor(s) em uma matriz de polímero ou gel.

[0292] As composições farmacêuticas que são adequadas para administração parenteral compreendem um ou mais inibidores de proteassoma de peptídeo em combinação com uma ou mais soluções, dispersões, suspensões ou emulsões aquosas ou não aquosas, estéreis, farmaceuticamente aceitáveis, ou pós estéreis que podem ser reconstituídos em soluções ou dispersões injetáveis exatamente antes do uso, que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostatos, solutos que tornam a formulação isotônica com o sangue do receptor pretendido ou agentes de suspensão ou espessamento.

[0293] Exemplos de portadores aquosos e não aquosos adequados que podem ser empregados nas composições farmacêuticas proporcionados neste contexto incluem água para injeção (por exemplo, água estéril para injeção), etanol, polióis (tais como glicerol, glicol de propileno, glicol de polietileno, e assemelhados), tampão (tal como tampão de citrato), e suas misturas adequadas, óleos vegetais, tais como óleo de oliva, e ésteres orgânicos injetáveis, tais como oleato de etila. a fluidez apropriada pode ser mantida, por exemplo, por meio do uso de materiais de revestimento, tais como lecitina, por meio da manutenção da dimensão de partícula requerida no caso de dispersões, e pelo uso de agentes tensoativos.

[0294] As composições farmacêuticas incluem tipicamente um portador farmaceuticamente aceitável. Da forma que é utilizado neste contexto a expressão “portador farmaceuticamente aceitável” inclui tampão, água estéril para injeção, solventes, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes de retardamento de absorção e isotônicos, e assemelhados, compatíveis com administração farmacêutica. De acordo com algumas concretizações, um portador farmaceuticamente aceitável é um tampão (por exemplo, tampão de citrato). De acordo com algumas concretizações, um portador farmaceuticamente aceitável é compreendido por água estéril para injeção. De acordo com algumas concretizações, um portador farmaceuticamente aceitável compreende ácido cítrico.

[0295] Estas composições também podem conter adjuvantes tais como preservativos, agentes de umedecimento, agentes emulsionadores e agentes de dispersão. Prevenção da ação dos microrganismos também pode ser assegurada por meio da inclusão de vários agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, parabeno, clorobutanol, ácido sórbico de fenol, e assemelhados. Pode ser igualmente desejável incluir agentes de ajuste de tonicidade, tais como açúcares e assemelhados dentro das composições. Além disso, absorção prolongada da forma farmacêutica injetável pode ser proporcionada por meio da inclusão de agentes que retardam a absorção, tais como mono estearato de alumínio e gelatina.

[0296] Em alguns casos, com a finalidade de prolongar o efeito de um fármaco, é desejável retardar a absorção do fármaco de uma injeção subcutânea ou intramuscular. Por exemplo, a absorção retardada de uma forma de fármaco administrada de forma parenteral é obtida por meio do dissolvimento ou suspensão da droga em um veículo oleoso.

[0297] Formas de depósito injetáveis são preparadas pela formação de matrizes de micro encapsulas de inibidor(s) em polímeros biodegradáveis tais como polilactida-poliglicolida. Na dependência da relação de fármaco para polímero, e da natureza do polímero particular empregado, a taxa de liberação de fármaco pode ser controlada. Exemplos de outros polímeros biodegradáveis incluem poli(ortoésteres) e poli(anidridos). Formulações de depósito injetáveis também podem ser preparadas por meio do aprisionamento do fármaco em lipossomas ou micro emulsões que são compatíveis com o tecido corpóreo.

[0298] As preparações de agentes podem ser administradas de forma oral, parenteral, tópica ou retal. Elas são administradas, naturalmente, por meio de formas adequadas para cada via de administração. Por exemplo, elas são administradas na forma de comprimidos ou de cápsulas, por meio de injeção, inalação, loção para os olhos, unguento, supositório, infusão; topicamente por meio de loção e retalmente por meio de supositórios. De acordo com algumas concretizações, a administração é oral.

[0299] As frases “administração parenteral” e “administrado de forma parenteral”, da forma que são utilizadas neste contexto, significam modalidades de administração diferentes da administração entérica e tópica, usualmente por meio de injeção, e incluem, sem limitação, injeção intravenosa, intramuscular, intra-artérias, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardíaca, intradérmica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutânea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnóide, intraspinal e intrasternal, e infusão.

[0300] As frases “administração sistêmica”, “administrada de forma sistêmica”, “administração periférica” e “administrada perifericamente”, da forma que são utilizadas neste contexto significam a administração de um ligante, fármaco ou outro material que não seja diretamente dentro do sistema nervoso central, de forma tal que ele entra no sistema do paciente e desta forma, é submetido ao metabolismo ou outros processos assemelhados, por exemplo, administração subcutânea.

[0301] Os inibidores de proteassoma de peptídeo descritos neste contexto podem ser administrados aos seres humanos e outros animais para a terapia por quaisquer vias de administração adequadas, incluindo de forma oral, de forma nasala, tal como, por exemplo, por meio de um spray, de forma retal, de forma intravaginal, de forma parenteral, de forma intracistêmica, e de forma tópica, tais como por meio de pós, unguentos ou gotas, incluindo de forma bucal e de forma sublingual.

[0302] Independentemente da via de administração selecionada, um inibidor de proteassoma peptídico, que pode ser usado em uma forma hidratada adequada, e/ ou as composições farmacêuticas proporcionados neste contexto, é formulado em uma forma de dosagem farmaceuticamente aceitável por meio de métodos convencionais conhecidos daqueles versados na técnica.

[0303] Os níveis de dosagem reais dos ingredientes ativos nas composições farmacêuticas proporcionadas neste contexto podem ser variados de maneira a obter uma quantidade do ingrediente ativo que é efetiva para se conseguir a resposta terapêutica desejada para um paciente particular, composição, e modalidade de administração, sem ser tóxico para o paciente.

[0304] A concentração de um composto exposto em uma mistura farmaceuticamente aceitável será variável na dependência de vários fatores, que incluem a dosagem do composto a ser administrado, das características farmacocinéticas do(s) composto(s) empregado(s), e da via de administração. De uma maneira geral, as composições proporcionadas neste contexto podem ser proporcionadas em uma solução aquosa que contêm cerca de 0,1-10% p/v de um composto exposto neste contexto, entre outras substâncias, para administração parenteral. Faixas de dosagens típicas variam desde cerca de 0,01 até cerca de 50 mg/kg de peso corpóreo por dia, administradas divididas em 1-4 doses. Cada dose dividida pode conter os mesmos ou compostos diferentes. A dosagem será de uma quantidade efetiva dependente de vários fatores que incluem a saúde geral de um paciente, e da formulação e via de administração do(s) composto(s) selecionado(s).

[0305] De acordo com outra concretização, o a composição farmacêutica é uma solução oral ou uma solução parenteral. Outra concretização é compreendida por um preparado liofilizado que pode ser reconstituído antes da administração. Na forma de um sólido, esta formulação também pode incluir comprimido, cápsulas ou pós.

[0306] Também proporcionado neste contexto está prevista uma terapia conjunta em que um ou mais outros agentes terapêuticos são administrados com um inibidor de proteassoma peptídico ou Composição farmacêutica, que compreende um inibidor de proteassoma peptídico. Esse tratamento conjunto pode ser obtido por meio da dosagem simultânea, sucessiva, ou separada dos componentes individuais do tratamento.

[0307] De acordo com determinadas concretizações, a composição que se proporciona neste contexto é administrada em conjunto com um ou mais outro(s) inibidor(s) de proteassoma.

[0308] De acordo com determinadas concretizações, a composição proporcionados neste contexto é administrada em conjunto com uma quimioterapêutica. Agentes quimio terapêuticos que são adequados podem incluir, produtos naturais, tais como vinca alcalóides (ou seja, vinblastina, vincristina, e vinorelbina), paclitaxel, epidipodofilotoxinas (ou seja, etoposida, teniposida), antibióticos (dactinomicina (actinomicina D) daunorubicina, doxorubicina e idarubicina), antraciclinas, mitoxantrona, bleomicinas, plicamicina (mitramicina) e mitomicina, enzimas (L-asparaginase que metaboliza sistemicamente L-asparagina e retira células que não têm a capacidade para sintetizar sua própria asparagina); agentes antiplaquetas; agentes de alquilação antiproliferantes /antimitóticos tais como mostardas de nitrogênio (mecloretamina, ciclofosfamida e análogos, melfalan, clorambucil), etilenoiminas e metilmelaminas (hexametil melamina e tiotepa), sulfonatos de alquila (busulfan), nitrosouréias (carmustina (BCNU) e análogos, streptozocina), trazenos-dacarbazinina (DTIC); antimetabólitos antiproliferantes/antimitóticos, tais como análogos de ácido fólico (metotrexato), análogos de pirimidina (fluorouracil, floxuridina, e citarabina), análogos de purina e inibidores relacionados (mercaptopurina, tioguanina, pentostatin e 2- clorodeoxiadenosina); inibidores de aromatase (anastrozol, exemestano, e letrozol); e complexos de coordenação de platina (cisplatina, carboplatina), procarbazina, hidroxiuréia, mitotana, aminoglutetimida; inibidores de histone deacetilase (HDAC) (tricostatina, butirato de sódio, apicidan, ácido hidroâmico de anilida suberoil); hormônios (ou seja, estrogênio) e agonistas hormonais, tais como agonistas de hormônios liberadores de hormônio de leutinização (LHRH) (goserelin, leuprolida e triptorelin). Outros agentes quimioterapêuticos podem incluir mecloretamina, camptotecina, ifosfamida, tamoxifen, raloxifeno, gemcitabina, navelbina, ou qualquer análogo ou variante derivada dos precedentes.

[0309] De acordo com determinadas concretizações, a composição farmacêutica, tal como proporcionada neste contexto é administrada em conjunto com uma citoquina. As citoquinas incluem, sendo que não se fica limitado aos mesmos, Interferon-Y, -α, e -β, Interleucinas 1-8, 10 e 12, fator Granulocyte Monocyte Colony Stimulating (GM-CSF), TNF-α e -β, e TGF-β.

[0310] De acordo com determinadas concretizações, a composição farmacêutica proporcionada neste contexto é administrada em conjunto com um esteróide. Os esteróides que são adequados podem incluir, sendo que não se fica limitado aos mesmos, 21-acetoxipregnenolona, alclometasona, algestona, amcinonida, beclometasona, betametasona, budesonida, cloroprednisona, clobetasol, clocortolona, cloprednol, corticosterona, cortisona, cortivazol, deflazacort, desonide, desoximetasona, dexametasona, diflorasona, diflucortolona, difuprednate, enoxolona, fluazacort, flucloronide, flumetasona, flunisolida, acetonida de fluocinolona, fluocinonida, butil fluocortin, fluocortolona, fluorometolona, acetato de fluperolona, acetato de fluprednideno, fluprednisolona, flurandrenolida, fluticasona propionato, formocortal, halcinonida, propionato de halobetasol, halometasona, hdrocortisona, etabonato de loteprednol, mazipredona, medrisona, meprednisona, metilprednisolona, furoato de mometasona, parametasona, prednicarbato, prednisolona, prednisolona 25-dietilaminoacetato, fosfato prednisolona de sódio, prednisona, prednival, prednilideno, rimexolona, tixocortol, triamcinolona, acetonida de triamcinolona, benetonida de triamcinolona, hexacetonida de triamcinolona, e sais e/ ou os seus derivados.

[0311] De acordo com algumas concretizações, a composição farmacêutica proporcionada neste contexto é administrada em conjunto com um agente imunoterapêutico. Agentes imunoterapêuticos que são adequados podem incluir, sendo que não se fica limitado aos mesmos, moduladores de MDR (verapamil, valspordar, biricodar, tariquidar, laniquidar), ciclosporina, talidomida, e anticorpos monoclonais. Os anticorpos monoclonais põem ser ou nus ou conjugados, tais como rituximab, tositumomab, alemtuzumab, epratuzumab, ibritumomab tiuxetan, gemtuzumab ozogamicin, bevacizumab, cetuximab, erlotinib e trastuzumab.

EXEMPLOS Exemplo 1. Preparação de uma suspensão de ingrediente farmacêutico carfilzomibe-ativo (CFZ-API) em sulfobutil éter beta-ciclodextrina (SBECD)

[0312] Este Exemplo descreve a preparação de uma suspensão de CFZ-API em SBECD sob tamanhos de lotes de 400 L. Tamanhos de lotes menores foram realizados em proporções equivalentes dos constituintes, tais como sob tamanhos de lotes de 290 L, 90 L, e 1-3 L.

[0313] Em um tanque refrigerado revestido com camisa de aço inoxidável de 525 L controlado para 2°C - 8°C, foi preparada uma suspensão de 2,0 kg de carfilzomibe-API (CFZ-API), 246 kg de água para injeção (WFI), e 100 kg de sulfobutil éter beta-ciclodextrina (SBECD). Especificamente, no tanque refrigerado revestido com camisa de aço inoxidável de 525 L controlado para 2°C - 8°C, dissolveram-se 100 kg de SBECD em 246 kg de WFI. A suspensão de Carfilzomibe foi então preparada utilizando-se 2,0 kg de CFZ-API. A mistura foi realizada utilizando-se um misturador de impulsor para manter a suspensão dos sólidos CFZ-API e dissolver o SBECD. No mesmo vaso utilizou-se um misturador de alto cisalhamento de rotor- estator do estilo sonda (homogeneizador) bem como o impulsor de baixo cisalhamento. O misturador de alto cisalhamento foi operado durante aproximadamente 1 hora proporcionando uma suspensão uniforme e redução de dimensão de partícula para quaisquer partículas primárias maiores ou API aglomerado. Depois de ser obtida uma suspensão, adicionaram-se 1,96 kg de ácido cítrico na forma de uma solução aquosa a 16%. O pH da solução foi então abaixado induzindo solubilização parcial do CFZ-API seguido por complexação devido à presença de SBECD. Continuou-se com a mistura durante mais 24 horas com o impulsor e o misturador de alto cisalhamento e conseguiu-se uma concentração dissolvida de CFZ-API maior do que 5,1 mg/ml. A suspensão contendo mais do que 5,1 mg/ml de CFZ-API complexado dissolvido foi filtrada com um filtro de clarificação de 0,45 micrômetro, então diluído com precisão para uma concentração dissolvida de 5,0 mg/ml e pH ajustado com solução de hidróxido de sódio 1 N para conseguir o pH 3,5. A solução foi filtrada estéril, com dois filtros de esterilização de 0,22 micrômetro sequenciais, então vazada em frascos de 12,36 ml cada um, contendo 61,8 mg por frasco de CFZ-API. Os frascos foram parcialmente tapados e carregados em um liofilizador e secos por congelamento durante 103 horas utilizando-se uma temperatura de congelamento de -45°C, temperatura de secagem principal de -15 oC, e secagem secundária de +30°C. Os frascos liofilizados foram rolhados plenamente, e tampados, então armazenados sob a temperatura de estabilidade de produto de 2°C - 8°C durante até dois anos antes do uso. Quando do uso, o frasco foi reconstituído com água estéril para injeção para produzir 2 mg/ml de uma solução reconstituída para injeção, que são dotados de pH 3,5 e tonicidade aceitável para injeção direta em pacientes. Alternativamente, a solução reconstituída foi ainda diluída em uma bolsa intravenosa para maior diluição e infusão sem induzir precipitação.

[0314] Tal como se encontra ilustrado na Figura 1, o processo de complexação baseado em pasta fluida resulta em solubilização aumentada do CFZ- API com o passar do tempo (maior do que 5 miligramas por mililitro, que é substancialmente mais alta do que a solubilidade aquosa intrínseca do CFZ-API, que é menor do que 10 microgramas por mililitro). Além disso, o processo é menos dependente de propriedades físico-químicas do CFZ-API (por exemplo, dimensão de partícula, área de superfície, grau de aglomeração, forma polimórfica, e outras). Diferente da maior parte da produção ou teste farmacêutico, a taxa de dissolução (ou taxa de solubilização) neste processo é efetivamente independente da dimensão de partícula do API (vide, por exemplo, a Figura 2) uma vez que o processo distribui uma extensão equivalente de solubilização sobre o período de tempo de 24 horas para a complexação ocorrer independentemente de se o API inicialmente tinha uma dimensão de partícula de API grande ou pequena (21,1 micrômetros, e 7,5 micrômetros respectivamente). Foi ainda determinado que no processo descrito anteriormente, concentrações mais altas de SBECD aumentaram a solubilidade do CFZ-API (vide Figura 3). Finalmente, observou-se que a solubilidade complexada do CFZ/SBECD foi efetivamente independente do processamento ou temperatura de armazenamento (vide, por exemplo, a Figura 4 em que a extensão solubilizada está ilustrada como uma função da concentração de SBECD sob pH 3,5 para duas temperaturas 5oC e 25oC não mostrando qualquer diferença aparente). Por essa razão são preferidas temperaturas de processamento mais baixas (2oC - 8oC) para reduzir ao mínimo o potencial para quaisquer reações de degradação induzidas termicamente que possam ocorrer. Em outros processos, mais comumente são necessárias temperaturas mais altas para aumentar a solubilidade, não obstante neste processo, a solubilidade mais alta é alcançada por meio do aumento da concentração de ciclodextrina e/ ou do pH em vez de pelo aumento de temperatura e isto permite que degradações térmicas do produto sejam reduzidas ao mínimo neste processo. Exemplo 2. Efeito do Íon de cloreto na estabilidade de Carfilzomibe

[0315] Conduziu-se um delineamento estatístico multivariado de experimentos para avaliar fatores que controlam o nível de produto de degradação de cloroidrina como uma função dos parâmetros de processamento e tempo de armazenamento durante seis meses. A complexação foi realizada na proporção e parâmetros dados no Exemplo 1, com as seguintes modificações: (i) o processo de complexação foi realizado sob tamanho de lote de 2 L; (ii) o pH final da solução antes do vazamento nos frascos foi submetido a variações para propósitos de experimentação desde 3,0, até 4,0; (iii) cloreto de sódio foi enriquecido em SBECD em alguns experimentos para criar uma condição de alto teor de cloreto de sódio; (iv) o teor de água do produto final liofilizado nos frascos rolhados foi produzido sob condições de alto e baixo teor de cloreto de sódio por meio do término antecipado e rolhamento dos frascos para criar uma condição de teor de água residual mais alto. Materiais. Tabela 2. Materiais

Métodos. Processo de Complexação:

[0316] A solução de Carfilzomibe complexado para pré-liofilização da solução a granel para injeção incluiu 5 mg/ml de carfilzomibe aquoso, 250 mg/ml de Captisol® (SBECD) e 4,86 mg/ml de ácido cítrico, pH ajustado com hidróxido de sódio aquoso. A composição das soluções a granel para liofilização seguiu o procedimento detalhado no Exemplo 1 com as seguintes manipulações para criar soluções com diferentes atributos específicos: 1. pH foi ajustado para 3,0 e 4,0 2. Cloreto de sódio foi enriquecido no Captisol® para crier uma condição de “Alto Teor de Cloreto”

[0317] Captisol® manufaturado pela Cydex, uma subsidiária da Ligand, tem uma faixa de análise de produto padrão para cloreto de sódio que vai de 0,05% até 0,2% (p/v). Um lote de Captisol® foi disponibilizado para experimentação que tinha um baixo teor de cloreto de apenas 0,05% (p/v) como cloreto de sódio. Foram requeridos 400 g deste Captisol® por batelada para o processo ser realizado sob bateladas de escala de 2 L de processamento de complexação (nas mesmas proporções e parâmetros gerais usados para o Exemplo 1). Para crier a condição de “alto teor de cloreto”, adicionou-se 0,6 g de NaCl a 399,4 g de Captisol® que, desta forma, imitou do que uma batelada contendo 0,2% de cloreto Captisol® seria compreendida.

Liofilização:

[0318] Com a finalidade de gerar duas (2) condições de teor de umidade nos frascos liofilizados finais, liofilizaram-se dois (2) conjuntos de amostras de 61,8 mg/frasco (de CFZ-API). O primeiro ciclo gerou o conjunto de amostra “seca” de frascos que continham aproximadamente 0,6% de água residual para os parâmetros de liofilização do Exemplo 1. Para o segundo conjunto de amostras, a liofilização foi concluída e os frascos rolhados mais cedo na fase de secagem secundária para gerar os frascos na condição “úmida”, com umidade residual de aproximadamente 2,4% de água por cada frasco inicialmente.

[0319] Um (1) lote de placebo foi preparado como um controle que continha 250 mg/ml de Captisol® e 4,86 mg/ml de ácido cítrico, ajustado para pH 3,5 com NaOH.

Teste Analítico:

[0320] A maior parte da solução de carfilzomibe complexado foi analisada durante a manufatura por meio de Cromatografia Líquida de Alto Desempenho (HPLC) para quantificar com exatidão a concentração da substância medicamentosa Carfilzomibe dissolvida e complexada. Subsequentemente, acrescentou-se água adicional para diluir cuidadosamente a solução complexada a granel. Depois desta etapa de diluição, utilizou-se a HPLC novamente para assegurar que foi obtida uma concentração visada de 5,0 mg/ml. Amostras das três (3) soluções a granel finais foram analisadas quanto a potência e pureza confirmadas por meio do teste de HPLC. A estabilidade das amostras foi analisada depois de seis meses de armazenamento sob 5oC e 25oC por meio de HPLC quanto a potência e pureza. Utilizou-se o método Karl Fischer Coulometry para a determinação do teor de água no medicamento liofilizado.

Tratamento de Dados:

[0321] Utilizou-se Stat-Ease DX7 para analisar os resultados.

Resultados.

[0322] Os resultados para a formação de um produto de degradação de cloroidrina (CDP) em 6 meses para 5°C e 25°C estão sumariados na Tabela 3 adiante. Tabela 3. Resultados para formação de CDP depois de 6 meses sob 5°C e 25°C

[0323] As análises ANOVA adiante (Tabela 4 e 5) para CDP mostra que o teor de cloreto é o fator principal na formação de CDP. O teor de cloreto mais alto conduz a maiores níveis de CDP. Mesmo sob o baixo nível de teor de cloreto (0,05% (p/v)), é ainda observada a formação de cloroidrina, mas sob uma concentração aceitavelmente baixa em comparação com o 0,2% de cloreto. Além disso, medicamento contendo baixos níveis de íon de cloreto mostrou a formação inaceitável de cloroidrina sob 25°C depois de 6 meses de armazenamento. A Figura 5 ilustra a relação entre CDP e a interação de dois fatores de teor de água e cloreto. A linha de topo é um alto teor de cloreto e a linha de fundo é um baixo teor de cloreto. O eixo x representa o teor de água, com 0,7% na esquerda e 2% à direita. Sob níveis de cloreto mais altos, os níveis da produção de CDP aumentam. Este aumento é ainda mais evidente sob condições de teor de água mais alto, tal como pode ser visto a partir da inclinação da curva de topo. Sob baixos níveis de cloreto, existe pouca diferença observada entre as condições de teor de água baixo ou alto. Tabela 4. Análise ANOVA - CDP (RRT 0,86) em 6 Meses, 5°C

Tabela 5. Análise ANOVA - CDP (RRT 0,86) em 6 Meses, 25°C

xemplo 3. Efeito de ácidos clorídrico e cítrico no produto de degradação de cloroidrinas

[0324] Conduziu-se um estudo para se determinar o impacto da utilização de ácido clorídrico no processo de complexação por comparação dos níveis de impureza de produto de degradação CDP sobre tempo de armazenamento para lote produzido sem HCl, e armazenado durante o mesmo período de tempo. Durante a produção, o pH de todos os lotes foi ajustado ao final do processo para 3,5 utilizando-se hidróxido de sódio.

[0325] Tal como apresentado na Tabela 6, lotes produzidos com a adição de HCl (2, 3, e 4) mostraram uma formação clara do produto de degradação de cloroidrina (CDP) no decorrer do tempo de armazenamento, enquanto que sob a temperatura de armazenamento recomendada de 5°C, o CDP ficou na maior parte abaixo do limite reportado de HPLC (0,1%) ou não detectado (ND) nos lotes 1 e 5 (em que nenhum HCl foi usado). Claramente, maior teor de cloreto proveniente do HCl como o ad para iniciar a complexação resultou em maior formação (e níveis inaceitáveis de formação de) de CDP. Por essa razão, a utilização de ácido cítrico mais fraco isoladamente para iniciar a complexação em SBECD reduziu ao mínimo a formação de CDP. Tabela 6. Resultados para formação de CDP (% Área) sob 5°C e 25°C

Exemplo 4.

[0326] A solubilidade de Carfilzomibe como uma função de concentração de ciclodextrina SBECD foi determinada em soluções aquosas que continham ácido cítrico (30 mM), sob pH 1,5 e pH 3,5, e sob temperaturas que incluíam 5°C e 25°C. o perfil de solubilidade está ilustrado na Figura 6. Nenhuma diferença significativa na solubilidade foi observada entre as temperaturas baixa e alta que foram testadas. Os experimentos foram realizados nas condições ácidas abaixo dos valores de pH visados e titulados para pH 1,5 ou 3,5 utilizando-se solução de hidróxido de sódio aquoso. Medições da concentração solubilizada foram aquelas provenientes das amostras analisadas depois de 24 horas de tempo para equilibrar.

Outras Concretizações

[0327] Deve ser compreendido que muito embora a exposição seja realizada em conjunto com a sua descrição detalhada, a descrição precedente destina-se a ilustrar e não limitar o escopo da invenção, que é definida pelo escopo das reivindicações em anexo. Outros aspectos, vantagens, e modificações encontram-se dentro do escopo das reivindicações expostas em seguida..

Claims (16)

1. Método para preparar uma composição farmacêutica com baixo teor de cloreto, o método CARACTERIZADO por: (i) fornecer uma primeira combinação que compreende: (a) um composto:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; (b) uma sulfobutil éter beta-ciclodextrina (SBECD) com baixo teor de cloreto tendo um teor de íon cloreto de 0,05% p/p ou menos; e (c) água; em que a primeira combinação é heterogênea e o composto ou sal tem uma baixa solubilidade na primeira combinação; e (ii) contatar a primeira combinação com ácido cítrico para formar uma segunda combinação.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que a segunda combinação compreende um complexo do composto e da SBECD com baixo teor de cloreto.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que fornecer uma primeira combinação (etapa (i)) compreende adicionar o composto a uma solução de SBECD com baixo teor de cloreto e água.

4. Método, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende: (i) fornecer uma primeira combinação que compreende: (a) um composto:

ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; (b) SBECD com baixo teor de cloreto; e (c) água para injeção; em que a primeira combinação é heterogênea e o composto ou sal tem uma baixa solubilidade na primeira combinação; e (ii) contatar a primeira combinação com uma solução aquosa de ácido cítrico para formar uma segunda combinação.

5. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 4, CARACTERIZADO pelo fato de que a primeira combinação contém menos que 0,5% p/p ou p/v de solvente orgânico.

6. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 4, CARACTERIZADO pelo fato de que a primeira combinação contém menos que 0,5% p/p ou p/v de tampão.

7. Método, de acordo com a reivindicação 4, CARACTERIZADO pelo fato de que a segunda combinação compreende um complexo do composto e da SBECD com baixo teor de cloreto.

8. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 4, CARACTERIZADO pelo fato de que a razão molar de íon cloreto para o composto na primeira combinação é menor que 1,5.

9. Método, de acordo com a reivindicação 8, CARACTERIZADO pelo fato de que a razão molar de íon cloreto para o composto na primeira combinação é até 0,32.

10. Método, de acordo com a reivindicação 4, CARACTERIZADO pelo fato de que fornecer uma primeira combinação (etapa (i)) compreende adicionar o composto a uma solução de SBECD com baixo teor de cloreto e água.

11. Método, de acordo com a reivindicação 3 ou 10, CARACTERIZADO pelo fato de que o composto é um sólido cristalino.

12. Método, de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que a forma cristalina do composto tem um padrão de difração de pó de raio-X que compreende picos característicos expressos em graus 2θ em 6,10, 9,32, 10,10, 12,14, 13,94, 18,44, 20,38 e 23,30.

13. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 4, CARACTERIZADO pelo fato de que o método compreende adicionalmente misturar a primeira combinação antes de contatar a primeira combinação com ácido.

14. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 4, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende adicionalmente misturar a segunda combinação para alcançar uma terceira combinação homogênea.

15. Método, de acordo com a reivindicação 14, CARACTERIZADO pelo fato de que a concentração dissolvida e complexada do composto na terceira combinação é de 4 a 8 mg/mL.

16. Método, de acordo com a reivindicação 14, CARACTERIZADO pelo fato de que o pH da terceira combinação é de 2 a 4.

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