BR102012029737B1

BR102012029737B1 - complexo obtido de ácido hialurônico ou um sal do mesmo e misturas de sulfato de condroitina

Info

Publication number: BR102012029737B1
Application number: BR102012029737-0A
Authority: BR
Inventors: Julian Sanchez Agut; Carlos Navarro Fernandez; Joan Trullas Cos; Laura Safont Ocaña
Original assignee: Quimera Ingenieria Biomedica, S.L.
Priority date: 2011-11-24
Filing date: 2012-11-22
Publication date: 2020-10-27
Also published as: EP2596796A1; ES2444145T3; BR102012029737A2; CO6590210A1; US8980866B2; EP2596796B1; DK2596796T3; US20130143838A1; CL2012003287A1; PL2596796T3; PE20130728A1; RS53135B; AR088963A1; MX2012013610A

Abstract

COMPLEXO OBTIDO DE ÁCIDO HIALURÔNICO OU UM SAL DO MESMO E MISTURAS DE SULFATO DE CONDROITINA. A presente invenção refere-se a um complexo novo, obtenível por misturar ácido hialurônico ou um sal do mesmo e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo, e formar uma solução aquosa da mistura, que é adicionalmente submetida a um processo de secagem. A invenção também se refere a várias composições e formulações compreendendo o complexo da invenção, processo para obter o complexo e usos do mesmo.

Description

Campo técnico da invenção

[001] A presente invenção refere-se a um complexo obtenível por misturar ácido hialurônico ou um sal do mesmo e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo, e formar uma solução aquosa da mistura, que é adicionalmente submetida a um processo de secagem. A invenção também se refere a várias composições e formulações compreendendo o complexo da invenção, processo para obter o complexo e usos dos mesmos.

Antecedentes da invenção

[002] Ácido hialurônico e sulfato de condroitina desempenham um papel importante no organismo biológico especialmente como um componente principal da matriz intercelular e suporte mecânico para muitos tipos de células, como aqueles da pele, tendões, músculos e cartilagem. Ácido hialurônico e sulfato de condroitina também desempenham outras partes importantes nos processos biológicos, como umedecimento de tecidos, lubrificação e carga mecânica.

[003] Materiais de formação de gel solúveis em água compreendendo ácido hialurônico ou sais do mesmo são bem conhecidos e amplamente utilizados no setor de cuidados com a saúde, por exemplo, em oftalmologia, no tratamento de osteoartrite, bem como nas indústrias farmacêutica e cosmética.

[004] Diversas composições de hialuronato/sulfato de condroitina são conhecidas como agentes viscosos ou viscoelásticos para uso cirúrgico oftálmico. Devido a suas características fisicas especificas, certos agentes viscoelásticos serão mais bem apropriados para aspectos específicos do procedimento cirúrgico. Por exemplo, em cirurgia de catarata, é comumente utilizada a combinação de sulfato de condroitina e hialuronato de sódio com peso molecular relativamente baixo. Entretanto, agentes com peso molecular elevado tendem a ser elevadamente coesos e, em geral, soluções muito viscosas contendo agentes com peso molecular relativamente elevado, incluindo hialuronato de sódio com peso molecular elevado, são mais eficazes em manter o espaço intra-ocular do que soluções menos viscosas contendo agentes com peso molecular relativamente mais baixo.

[005] Viscoat (Alcon Laboratories, Inc.) é uma solução viscoelástica que contém aproximadamente 3% de hialuronato de sódio e 4% de sulfato de condroitina em um tampão fisiológico de 40.000 ± 20.000 cps (em taxa de cisalhamento de 2 s-1 e 25°C) , em que o hialuronato de sódio utilizado tem um peso molecular de 500.000 Daltons.

[006] US 2011/0015151 revela composições viscoelásticas aquosas para uso em procedimentos cirúrgicos oftálmicos, compreendendo uma combinação de ácido hialurônico e sulfato de condroitina, em que o ácido hialurônico tem um peso molecular de 1.500.000 a 1.900.000 Daltons e está presente em uma concentração de 1,7% peso/volume. O sulfato de condroitina ou sal oftalmicamente aceitável do mesmo utilizado tem um peso molecular de 20.000 a 100.000 Daltons e está presente em uma concentração de 4% peso/volume.

[007] Composições viscoelásticas também foram utilizadas em outros procedimentos cirúrgicos. US 6.632.423 descreve um agente viscoelástico caracterizado por uma viscosidade de pelo menos 30 Pa.s, compreendendo hialuronato de sódio e sulfato de condroitina, que é utilizado como um material de vedação em cirurgia de ouvido médio. O hialuronato de sódio tem um peso molecular médio de aproximadamente 2,2 milhão Daltons e está presente em uma concentração de aproximadamente 1,6% em peso. 0 sulfato de condroitina utilizado tem um peso molecular médio de aproximadamente 50.000 Daltons e está presente em uma concentração de aproximadamente 4% em peso.

[008] Misturas de hialuronato/sulfato de condroitina de sódio menos viscosas são apropriadas para outros usos, como o tratamento de osteoartrite, em que o peso molecular de hialuronato de sódio é normalmente menor do que 1.000.000 daltons. Um tratamento convencional de osteoartrite envolve a aplicação intra-articular de hialuronato ou misturas de hialuronato/sulfato de condroitina. Entretanto, o efeito desse tratamento com hialuronato convencional é normalmente temporal porque o hialuronato permanece compreendido na câmara articular por curto período de tempo antes de ser absorvido e/ou metabolizado.

[009] WO 03/041724 revela aplicação intra-articular de uma mistura de 30 mg/mL de hialuronato de sódio e 40 mg/mL de sulfato de condroitina de sódio para o controle de lesões osteocondrais do indutor de joelho de condrogênese, para regenerar a cartilagem destruída por osteoartrite. O hialuronato de sódio tem um peso molecular de 500.000 a 1.000.000 Daltons e a composição revelada na mesma tem uma viscosidade de 20.000 a 60.000 mPa.s (cps).

[0010] WO 2009/138843 revela uma composição oral de glicosaminoglicano compreendendo (a) de 80 mg a 200 mg de ácido hialurônico ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo tendo um peso molecular médio não menor do que 10.000 Daltons; e (b) de 150 mg a 500 mg de sulfato de condroitina ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo tendo um peso molecular médio de 5.000 a 50.000 Daltons; em uma mistura com um veículo farmacêutico.

[0011] Além disso, EP0136782 revela uma composição aquosa contendo sulfato de condroitina e hialuronato de sódio para uso como um material terapêutico ativo. A solução de hialuronato de sódio/sulfato de condroitina é preparada em um tampão contendo 5,3 g de sulfato de condroitina e 4,2 g de hialuronato de sódio em 100 mL de água, que tem uma viscosidade a 25°C de 71.500 mPa.s.

[0012] De forma interessante, a adição de sulfato de condroitina a hialuronato de sódio em solução aquosa aumenta acentuadamente a viscosidade de mistura (Nishimura e outros, Biochimica et Biothphysica Acta 1380, 1-9 (1998)). Esse aumento em viscosidade parece ser principalmente devido ao aumento em peso molecular em vez de aumento de concentração de soluto.

[0013] Sulfato de condroitina tem propriedades biológicas interessantes para o tratamento de articulações e ossos. A administração de sulfato de condroitina exógeno pode aumentar a produção de componentes ECM recentemente sintetizados, ácido hialurônico endógeno e proteoglicanos ((J. Y. Reginster e outros., Drugs aging 24(7), 573-580, (2007)) . Pode suprimir a produção e atividade de mediadores proinflamatórios e proteases, e há evidência que mostra que sulfato de condroitina evita a degradação de cartilagem e pode promover sua regeneração (J. Y. Reginster e outros., Mini Rev. Med. 7(10), 1051-1061 (2007) e Wildi e outros., Ann. Rheum. Dis. 70(6), 982-989 (2011)).

[0014] Fluido sinovial é composto principalmente de hialuronato de sódio com peso molecular elevado, a concentração de hialuronato de sódio no fluido de articulação sinovial humano normal é aproximadamente 3 mg/mL. Em pacientes com osteoartrite, a concentração e peso molecular de hialuronato de sódio em fluido sinovial diminui, resultando na capacidade diminuída dos fluidos em proteger a cartilagem. Adicionalmente, formulações de ácido hialurônico com elevado peso molecular estimulam a sintese de ácido hialurônico mais do que as formulações com peso molecular mais baixo (MM. Smith e outros., Rheumatol. Int. 7(3), 113-22 (1987)), reduzem a produção e atividade de mediadores pró-inflamatórios e metaloproteinases de matriz e mantém articulações em boa condição (H. Matsuno, e outros., Inflamm. Res. 48, 154-159 (1999), M. Goto e outros., Clin. Exp. Rheumatol 19, 377-383 (2001) e L. Morelans e outros., Arthritis Res. Ther. 5, 54-67 (2003)).

[0015] Portanto, espera-se que misturas ou formulações mais concentradas compreendendo hialuronatos de sódio com elevados pesos moleculares sejam mais eficazes porém também altamente viscosas e conseqüentemente inadequadas para algumas vias de administração ou aplicações como injeção intra-articular. Por exemplo, formulações atuais para o tratamento de osteoatrite são genericamente administradas em 2 a 6 doses durante 1 a 3 meses em intervalos de 7-20 dias para atingir um efeito terapêutico aceitável. 0 evento adverso relatado principal desse tratamento é dor no local de injeção, causado principalmente pela viscosidade elevada das formulações injetadas. Esse problema limita inevitavelmente o peso molecular do ácido hialurônico utilizado e/ou a quantidade de ácido hialurônico e sulfato de condroitina a ser injetada.

[0016] Em vista do acima, há ainda necessidade de desenvolver novas composições farmacêuticas compreendendo ácido hialurônico e sulfato de condroitina, apresentando uma viscosidade mais baixa enquanto mantém seus efeitos terapêuticos conhecidos, desse modo permitindo um aperfeiçoamento no tratamento de pacientes. Explicação da invenção

[0017] Após pesquisa completa, os inventores verificaram surpreendentemente que os problemas acima mencionados podem ser resolvidos utilizando o complexo de acordo com os aspectos e modalidades da presente invenção e caracterizado aqui abaixo nos exemplos e reivindicações apensas.

[0018] A presente invenção refere-se a um complexo obtenível por misturar ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo, essa mistura é primeiramente dissolvida em um solvente aquoso para formar uma solução, que é adicionalmente submetida à atomização de acordo com a reivindicação 1.

[0019] O complexo reivindicado resolve o problema técnico acima mencionado por fornecer composições novas contendo hialuronatos de peso molecular novo ou concentrações mais elevadas de sulfato de condroitina e hialuronato de sódio, que permitem novas aplicações e tratamentos eficazes com uma incidência mais baixa de eventos adversos.

[0020] Realmente, o complexo da presente invenção provê por um lado, composições mais concentradas contendo sulfato de condroitina de sódio e hialuronato de sódio com um aumento limitado em viscosidade da composição concentrada resultante, mesmo com hialuronatos com peso molecular elevado.

[0021] Por outro lado, composições compreendendo o complexo da presente invenção foram formuladas em concentrações tipicas de produtos comerciais disponíveis no mercado porém tendo uma viscosidade considerável inferior.

[0022] Sem desejar ser limitado por qualquer teoria acredita-se que o processo descrito aqui forme um complexo no qual o acido hialurônico, ou um sal do mesmo, é ligado a sulfato de condroitina ou um sal do mesmo sem alterar significativamente o caráter quimico do ácido hialurônico, ou um sal do mesmo, ou o sulfato de condroitina ou um sal do mesmo. O processo de atomização de acordo com a presente invenção faz com que a mistura associe e forme um complexo com uma alteração de conformação significativa.

[0023] Portanto, como utilizado aqui o complexo da presente invenção se refere ao produto seco resultante formado após atomizar uma solução aquosa contendo uma mistura de ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo. Além disso, o complexo obtido pelo processo descrito aqui é estruturalmente diferente de uma mistura simples de ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo e não pode ser portanto, considerado como uma mistura simples dos dois compostos. Entretanto, o processo não muda o caráter quimico do hialuronato de sódio ou sulfato de condroitina, como a análise de cromatografia liquida de alto desempenho (HPLC) mostra. Realmente, enquanto uma mistura preparada por misturar simplesmente ácido hialurônico ou um sal do mesmo com sulfato de condroitina ou um sal do mesmo pode ser separado, esse não é caso para o complexo descrito na presente invenção onde o sulfato de condroitina ou um sal do mesmo e ácido hialurônico ou um sal do mesmo são intrinsecamente ligados.

[0024] O complexo de acordo com a invenção pode ser caracterizado e diferenciado de misturas fisicas utilizando ferramentas analíticas padrão que analisam diferenças em propriedades fisico-quimicas ou por métodos conhecidos na técnica por si, como espectros Infravermelhos por transformada de Fourier (FT-IR) e Microscopia de força atômica. O complexo possui propriedades fisico-quimicas totalmente diferentes em comparação com ácido hialurônico individual ou um sal do mesmo, ou sulfato de condroitina ou misturas dos mesmos.

[0025] De forma surpreendente, os inventores verificaram que o complexo revelado obtido pelo processo descrito acima, apresenta propriedades fisico-quimicas aperfeiçoadas como viscosidade reduzida e estabilidade e solubilidade aumentadas quando dissolvido ou disperso em água, que diferem de uma solução contendo misturas preparadas por simplesmente misturar os dois compostos. Esse resultado é totalmente inesperado em que, como dito anteriormente, a adição simples de sulfato de condroitina a hialuronato de sódio em solução aquosa é conhecida como aumentando acentuadamente a viscosidade da mistura. Entretanto, os inventores provaram que o complexo da presente invenção apresenta viscosidade de solução aperfeiçoada em relação à viscosidade de uma mistura simples compreendendo ácido hialurônico e sulfato de condroitina da mesma concentração.

[0026] Por conseguinte, em seu aspecto mais amplo, a presente invenção se refere a um complexo obtenível por: a) misturar ácido hialurônico ou um sal do meso com sulfato de condroitina ou um sal do mesmo, b) formar uma solução aquosa da mistura, e c) atomizar a solução aquosa resultante, em que o ácido hialurônico ou um sal do mesmo tem um peso molecular médio maior do que 1.000.000 Daltons, e o sulfato de condroitina ou um sal do mesmo tem um peso molecular médio de 5.000 a 50.000 Daltons.

[0027] Em uma modalidade preferida, a invenção provê um complexo obtenível pelo processo descrito e definido acima, em que o ácido hialurônico ou um sal do mesmo tem um peso molecular médio maior do que 1.200.000 Daltons.

[0028] Em outra modalidade preferida, a invenção provê um complexo obtenível pelo processo descrito e definido acima, em que a razão em peso de ácido hialurônico ou um sal do mesmo, para sulfato de condroitina ou um sal do mesmo está compreendida na faixa compreendida em 1:1 a 10:1 ou de 1:1 a 1:10. Preferivelmente, a razão em peso de ácido hialurônico ou um sal do mesmo, para sulfato de condroitina ou um sal do mesmo é 1:1. Mais preferivelmente, a razão em peso de ácido hialurônico ou um sal do mesmo, para sulfato de condroitina ou um sal do mesmo é 1:10.

[0029] A presente invenção provê adicionalmente soluções, dispersões ou suspensões estáveis compreendendo o complexo obtenível pelo processo descrito e definido acima.

[0030] Em outro aspecto, a presente invenção provê uma composição farmacêutica que compreende o complexo obtenível pelo processo descrito e definido acima a ser administrado por uma via selecionada do grupo que consiste em administração parenteral, administração oral e administração tópica.

[0031] Em uma modalidade preferida, a composição farmacêutica compreendendo o complexo da presente invenção pode ser administrada por via parenteral na forma de solução ou suspensão, ou em forma liofilizada capaz de conversão em uma solução ou forma de suspensão antes do uso. Em tais formulações, diluentes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis como água estéril e tampão de solução salina fisiológica podem ser utilizados. Outros solventes convencionais, tampões de pH, estabilizadores, agentes antibactérias, tensoativos, e antioxidantes podem ser todos incluídos. Por exemplo, componentes úteis incluem coreto de sódio, acetatos, citratos ou tampões de fosfato, glicerina, dextrose, óleo fixos, metil parabens, polietileno glicol, propileno glicol, bissulfato de sódio, álcool de benzila, ácido ascórbico e similares. As formulações parentais podem ser armazenadas em quaisquer recipientes convencionais como frascos, ampolas e seringas pré-cheias.

[0032] Em outra modalidade preferida da invenção, a composição farmacêutica compreendendo o complexo reivindicado pode ser administrado por via parenteral, em que a concentração do complexo é igual ou maior do que 20 mg/mL. Preferivelmente, a composição farmacêutica compreendendo o complexo é formulada na forma de uma solução aquosa ou dispersão para administração intraarticular em uma concentração maior do que 20 mg/mL.

[0033] Desse modo, em uma modalidade, a composição farmacêutica compreendendo o complexo da presente invenção pode ser especialmente adaptado para uso intra-articular na forma de soluções estéreis ou suspensões. Além dos agentes ativos acima mencionados, pode ser reconhecido por uma pessoa versada na técnica que as composições farmacêuticas compreendendo o complexo da invenção adaptado para uso intra-articular podem também compreender conservantes, veículos farmaceuticamente ativos, excipientes, estabilizadores, tampões, inibidores de crescimento antimicrobiano e similares e o uso de tal é considerado pela invenção. Em particular, a composição farmacêutica é adaptada ou formulação para injeção intra-articular, aplicação intra-articular ou uso sistêmico. Preferivelmente, a composição farmacêutica é apropriada para injeção intra-articular. Em outra modalidade preferida, a composição farmacêutica para injeção intra- articular compreende um ácido hialurônico com elevado peso molecular ou um sal do mesmo.

[0034] De acordo outro aspecto, a presente invenção se refere a um artigo sanitário, médico ou cirúrgico compreendendo a composição farmacêutica como descrito acima. Preferivelmente, o artigo é uma seringa pré-cheia para aplicação intra-articular compreendendo a composição farmacêutica como definido acima. Em outra modalidade preferida, a composição farmacêutica utilizada na seringa pré-cheia para aplicação intra-articular compreende um ácido hialurônico com elevado peso molecular ou um sal do mesmo.

[0035] Em outro aspecto, a invenção refere-se a uma matriz artificial para implantação intra-articular compreendendo a composição farmacêutica como descrito acima. Em uma modalidade preferida, a composição farmacêutica utilizada na matriz artificial para implantação intra-articular compreende um ácido hialurônico com elevado peso molecular ou um sal do mesmo.

[0036] Em outra modalidade preferida, a composição farmacêutica compreendendo o complexo obtenível pelo processo descrito e definido acima é formulado ou adaptado para irrigação intra-articular. Preferivelmente, a composição farmacêutica é formulada na forma de uma solução aquosa útil como liquido de lavagem intra-articular. Em outra modalidade preferida, a composição farmacêutica compreendendo o complexo reivindicado para irrigação intra- articular compreende um ácido hialurônico com elevado peso molecular ou um sal do mesmo.

[0037] Por conseguinte, em outra modalidade preferida, a invenção provê uma composição farmacêutica que compreende o complexo obtenível pelo processo descrito e definido acima, para recuperar elasticidade de fluido sinovial e lubrificação biológica. Preferivelmente, a composição farmacêutica para recuperar elasticidade de fluido sinovial e lubrificação biológica compreende um ácido hialurônico com elevado peso molecular ou um sal do mesmo.

[0038] Em uma modalidade preferida, a composição farmacêutica compreendendo o complexo da presente invenção pode ser administrada por via oral. Para distribuição oral, o composto seco pode ser incorporado em uma formulação que poderia incluir veiculos aceitáveis como aglutinantes (por exemplo, gelatina, celulose, goma tragacanto), excipientes (por exemplo, amido, lactose), lubrificantes (por exemplo, estearato de magnésio, dióxido de silicio), agentes desintegrantes (por exemplo, alginato, Primogel e amido de milho) e agentes aromatizantes ou edulcorantes (por exemplo, glicose, sacarose, sacarina, salicilato de metila e hortelã pimenta). A formulação pode ser fornecida por via oral na forma de cápsulas de gelatina encerrada ou tabletes comprimidos. Cápsulas e tabletes podem ser preparados em quaisquer técnicas convencionais. As cápsulas e tabletes também podem ser revestidas com vários revestimentos conhecidos na técnica para modificar os aromas, sabores, cores, e formatos das cápsulas e tabletes. Além disso, veiculos liquidos como óleo graxo também podem ser incluídos em cápsulas. Formulações orais apropriadas também podem estar na forma de suspensão, xarope, goma de mascar, pastilha, elixir e similar. Se desejado, agentes convencionais para modificar aromas, sabores, cores e formatos das formas especiais também podem ser incluídas. Além disso, para administração conveniente por tubo de alimentação enteral em pacientes incapazes de engolir, os compostos ativos podem ser dissolvidos em um veiculo de óleo vegetal lipofilico aceitável como azeite, óleo de milho e óleo de açafrão.

[0039] Em outra modalidade preferida, a composição farmacêutica compreendendo o complexo da presente invenção pode ser administrado por via tópica. Vias de administração tópica incluem aplicações nasal, bucal, de mucosa, retal ou vaginal. Para administração tópica, a composição farmacêutica pode ser formulada em loções, cremes, ungüentos, géis, pós, pastas, pulverizações, suspensões, gotas e aerossóis. Desse modo, um ou mais agentes espessantes, umectantes, e agentes de estabilização podem ser incluídos nas formulações. Os exemplos de tais agentes incluem, porém não são limitados a, polietileno glicol, sorbitol, goma xantana, petrolato, cera de abelha, ou óleo mineral, lanolina, squalene e similares. Uma forma especial de administração tópica é distribuição por um adesivo transdérmico. Os métodos para preparar adesivos transdérmicos são revelados, por exemplo, em Brown e outros., Ann. Rev. Med. 39, 221-229 (1988) que é incorporado aqui a titulo de referência.

[0040] Implantação subcutânea para liberação controlada dos compostos ativos também pode ser uma via de administração apropriada. Isso abrange procedimentos cirúrgicos para implantar um composto ativo em qualquer formulação apropriada em um espaço subcutâneo, por exemplo, embaixo da parede abdominal anterior. Vide, por exemplo, Wilson e outros., J. Clin. Psych. 45, 242-247 (1984). Hidrogeis podem ser utilizados como veiculo para a liberação controlada dos compostos ativos. Hidrogeis são geralmente conhecidos na técnica. São tipicamente feitos por reticular polímeros biocompativeis com elevado peso molecular em uma rede, que intumesce em água para formar um material semelhante a gel. Preferivelmente hidrogeis são biodegradáveis ou biossorviveis. Para fins da presente invenção, hidrogeis feitos de polietileno glicois, colágeno ou poli(glicólico-co-L-ácido lático) podem ser úteis. Vide, por exemplo, Phillips e outros., J. Pharmaceut. Set. 73, 1718-1720 (1984) .

[0041] Por conseguinte, a composição farmacêutica compreendendo o complexo da presente invenção pode ser administrada a um indivíduo por qualquer via de administração conveniente, quer sistêmica/perifericamente ou no local de ação desejada, incluindo porém não limitado a ou mais de: oral (por exemplo, como tablete, cápsula, ou como uma solução ingerivel), tópica (por exemplo, transdérmica, intranasal, ocular, bucal e sublingual) e parenteral (por exemplo, utilizando técnicas de injeção ou técnicas de infusão, e incluindo, por exemplo, por injeção, por exemplo, subcutânea, intradérmica, intramuscular, intravenosa, intra-arterial, intracardiaca, intratecal, intra-espinhal, intracapsular, subcapsular, intra-orbital, intraperitoneal, intra-traqueal, subcuticular, intraarticular, subaracnóide, ou intra-esternal, por exemplo, por implante de um depósito, por exemplo, por via subcutânea ou intramuscular).

[0042] Em uma modalidade preferida da invenção, a quantidade de complexo em uma composição farmacêutica para administração oral é igual ou maior do que 220 mg.

[0043] Em outra modalidade preferida da invenção, a concentração do complexo em uma composição farmacêutica para administração tópica é igual ou maior do que 70 mg/mL. Preferivelmente, a composição farmacêutica para administração tópica compreende um complexo em uma concentração maior do que 100 mg/mL.

[0044] Adicionalmente, a invenção provê uma composição farmacêutica que compreende o complexo da invenção e um veiculo farmaceuticamente aceitável, para uso no tratamento e/ou reparo de doença ou lesões de articulações, tendões e tecido conectivo. Os exemplos de tal doença ou lesão de articulações, tendões ou tecido conectivo incluem, sem limitação, dano à articulação, tendões lesionados, artrite, lesões osteocondrais, osteoartrite, tendinite, tenosinovite, bursite e lesões de ligamento.

[0045] A invenção provê ainda uma composição farmacêutica compreendendo o complexo da invenção e um veiculo farmaceuticamente aceitável, para reduzir dor e desconforto associados à doença ou lesões em articulações, tendões e tecido conectivo.

[0046]

[0047] Adicionalmente, a invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo o complexo da invenção e um veiculo farmaceuticamente aceitável, para uso no tratamento de doença ou lesões de pele. Os exemplos de tal doença ou lesões de pele incluem, sem limitação, cicatrização de ferimentos, úlceras, queimaduras e pele seca.

[0048] Em outra modalidade preferida, a composição farmacêutica compreendendo o complexo da presente invenção é formulada ou adaptada para uso oftálmico. Preferivelmente, a composição farmacêutica é adaptada ou formulação para administração ocular tópica no campo de oftalmologia (por exemplo, colirio, inserções oculares, lubrificantes oculares, gel de lágrima, lenços para pálpebra, lenços estéreis de limpeza para os olhos, lenços de limpeza para os olhos e ungüento para os olhos).

[0049] Como anteriormente discutido, misturas de ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e sulfato de condroitina são conhecidos como tendo utilidade em terapia de articulação e oftalmológica. Aqueles versados na técnica reconhecerão, entretanto, que tais misturas terão outra utilidade além desses usos. Por conseguinte, a composição farmacêutica compreendendo o complexo da invenção pode ser formulada ou adaptada para outros usos incluindo, porém não limitado à distribuição de droga, (por exemplo, distribuição de anti-fibróticos, antibióticos antiinflamatórios esteroidais e não esteroidais, anestésicos, analgésicos e outros medicamentos ou terapias de gene a tecidos doentes ou traumatizados em necessidade do mesmo) e cosméticos (por exemplo, a composição farmacêutica pode ser formulada ou adaptada para injeção para reduzir rugas ou tratar veias varicosas).

[0050] De acordo com outro aspecto, a invenção provê ainda uma composição compreendendo o complexo como definido aqui acima para uso cosmético.

[0051] Similarmente, a composição farmacêutica compreendendo o complexo da presente invenção pode ser utilizada em combinação com outras terapias conhecidas, compostos ou formulações. Por exemplo, a composição farmacêutica pode ser administrada em combinação com um ou mais outros agentes selecionados de antiinflamatórios, anti-reumáticos, esteróides e fatores que estimulam condrogênicos, separadamente ou em uma formulação única.

[0052] A presente invenção também se refere a um processo para a preparação de complexos.

[0053] Por conseguinte, em outro aspecto, a invenção refere-se a um processo para obter um complexo, compreendendo as etapas de: A) misturar ácido hialurônico ou um sal do mesmo com sulfato de condroitina ou um sal do mesmo, B) formar uma solução aquosa da mistura, e C) atomizar a solução aquosa resultante, em que o ácido hialurônico ou sal do mesmo tem um peso molecular maior do que 1.000.000 Daltons, e o sulfato de condroitina ou um sal do mesmo tem um peso molecular médio de 5.000 a 50.000 Daltons.

[0054] As modalidades descritas acima são consideradas como sendo ilustrativas em todos os aspectos e não restritivas, o âmbito da invenção sendo indicado pelas reivindicações anexas em vez de pela descrição acima.

Breve descrição das figuras

[0055] Para fins de ilustrar melhor as vantagens e propriedades dos complexos objeto da invenção, vários gráficos e imagens são anexados como exemplos não limitadores:

[0056] A figura 1 mostra o espectro de Infravermelho por transformada de Fourier (FT-IR) de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina.

[0057] A figura 2 mostra o espectro FT-IR de uma mistura 1:1 de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina e do complexo de acordo com a invenção.

[0058] A figura 3 mostra imagens de microscopia de força atômica de uma mistura de 1:1 de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina e de um complexo.

[0059] A figura 4 mostra cromatografia liquida de alto desempenho (HPLC) de uma mistura 1:1 de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina e o complexo.

Explicação detalhada da invenção

[0060] Os termos "hialuronano", "hialuronato" ou "ácido hialurônico" como utilizado aqui, se referem a um polissacarideo ácido com pesos moleculares diferentes constituídos por residues de ácidos D-glucurônico e N- acetil-D-glucosamina, que ocorrem naturalmente em superficies de célula, nas substâncias extracelulares básicas do tecido conectivo de vértebras, no fluido sinovial das articulações, no fluido endobulbar do olho, no tecido do cordão umbilical humano em cristas de galo. Pode ser reconhecido por uma pessoa versada na técnica que o ácido hialurônico pode ser selecionado entre qualquer de diversas fontes comercialmente disponíveis.

[0061] Os termos "ácido hialurônico de elevado peso molecular", "hialuronano com elevado peso molecular" ou "hialuronato com elevado peso molecular", se referem a "hialuronano", "hialuronato" ou "ácido hialurônico" como definido acima, tendo um peso molecular não menor do que aproximadamente 1.000.000 Daltons (Mw 106 Da ou 1 MDa).

[0062] Todos os números aqui expressando "peso molecular" de ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo devem ser entendidos como indicando o peso molecular médio (Mw) em Daltons.

[0063] Sais de ácido hialurônico incluem, sem limitação, hialuronato de sódio, hialuronato de potássio, hialuronato de magnésio, hialuronato de cálcio e combinações dos mesmos.

[0064] O termo "sulfato de condroitina" se refere a uma glicosaminoglicano constituída por seqüências de dissacarideo alternadas de residues diferentemente sulfatados de ácido D-glurucônico e de N-acetil-D- galactosamina. Dependendo da natureza de dissacarideo, sulfatos de condroitina com espinhas dorsais de carboidrato diferentes são conhecidos, a saber, condroitina 4-sulfato, condroitina 6-sulfato e misturas dos mesmos, opcionalmente na presença de outras formas existentes de sulfato de condroitina conhecidas no estado da técnica. O sulfato de condroitina preferido é rico em condroitina 4-sulfato dissacarideos.

[0065] Os sais de sulfato de condroitina incluem, sem limitação, sulfato de condroitina de sódio, sulfato de condroitina de potássio, sulfato de condroitina de magnésio, sulfato de condroitina de cálcio, sulfato de condroitina de litio e combinações dos mesmos.

[0066] O termo "complexo" como utilizado aqui, se refere a uma estrutura que consiste em uma molécula fracamente conectada a átomo (s) ou molécula (s) em volta, em que a(s) molécula(s) ou átomo(s) são interconectadas entre si de forma não covalente por quaisquer forças conectivas. O termo abrange qualquer entidade molecular formada por associação frouxa envolvendo ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo; desse modo a estrutura apresenta pelo menos uma propriedade fisico-quimica de componentes individuais ou misturas dos mesmos.

[0067] O termo "formar uma solução" ou "solução" significa obter uma solução de uma substância (por exemplo, o complexo da presente invenção) em um solvente em qualquer modo. Abrange soluções parciais.

[0068] Como explicado acima, o complexo da presente invenção é estruturalmente diferente de uma mistura simples de hialuronato de sódio (HA) e sulfato de condroitina (CS) e portanto não é uma mistura simples dos dois compostos. O complexo da presente invenção pode ser identificado e diferenciado de uma mistura simples de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina por espectroscopia FT-IR. Espectroscopia FT-IR foi realizada utilizando um instrumento ABB FTLA 2000 acoplado a um microscópio Spectratech. As amostras foram analisadas com divisor KBr, fonte Glowbr e detector MCT. A faixa espectral foi de 4000 - 720 cm-1 com uma resolução de 4 cm-1. Controles de HA e CS, uma mistura HA:CS e o complexo atomizado foram triturados e comprimidos em uma célula de diamante para análise.

[0069] O espectro FT-IR de sulfato de condroitina (figura 1) exibe uma faixa distinta a 1240 cm-1, correspondendo ao grupo C-O-SO3-. Essa faixa intensa a 1240 cm-1 também pode ser vista no espectro FT-IR de uma mistura 1:1 de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina (figura 2) . Entretanto, o espectro do complexo 1:1 obtido por atomização como descrito no exemplo 1 abaixo não exibe tal faixa intensa característica do grupo C-O-SO3- presente em condroitina, a faixa é significativamente reduzida no complexo obtido por atomização, indicando uma alteração em conformação dos componentes.

[0070] Além disso, análises de potencial-z foram realizados para caracterizar a carga de superfície do complexo da presente invenção. Os resultados mostram que o potencial-z de uma mistura simples de 1:1 HA;CS é significativamente diferente de uma obtida com o complexo, confirmando que são entidades estruturalmente diferentes com carga superficial diferente (tabela 1).

[0071] As amostras foram pesadas e suspensas em álcool de isopropila a uma concentração final de 20 mg/mL. Os experimentos foram feitos em um zetasizer Nano-Z (Malvern Instruments) a 25°C utilizando uma célula Zeta descartável clara. Potencial-Z de amostras suspensas foi analisado para simular uma medição de estado sólido. Tabela 1:

[0072] Outra propriedade relacionada à carga de superfície e mobilidade de ion de polieletrólitos é condutividade. Condutividade em solução foi obtida dissolvendo as amostras em água em uma concentração final de 10 mg/mL. A condutividade do complexo em solução é significativamente mais baixa do que a condutividade de uma mistura simples, indicando uma alteração em conformação devido a diferenças em condutividade elétrica e mobilidade de ions (tabela 2). Tabela 2:

[0073] Além disso, a determinação quantitativa de uma mistura de 1:1 de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina e um complexo 1:1 obtido por atomização foi realizado por HPLC. As amostras foram reconstituídas em água Mili-Q em uma concentração final de 1 mg/mL. 30 ul de amostras foi injetado em um HPLC Agilent 1200, equipado com um detector DAD utilizando uma coluna de cromatografia de exclusão por tamanho Ultrahydrogel 2000 (tamanho de poro de 12 um, 77, 8 x 300 mm, Waters) mantido em 45°C. Amostras foram eluidas utilizando um tampão de fosfato 50 mM, pH 5,5 fase móvel em uma taxa de fluxo de 0,8 mL/min. O detector foi ajustado em 200 nm. A figura 4 mostra os cromatogramas antes e após atomização. As duas amostras mostram dois picos correspondendo a HA e CS com tempos de retenção de 8,57 e 12,8 min. respectivamente. Após atomização nenhuma alteração significativa em peso molecular e tempos de retenção são observados, indicando que os dois compostos mantêm seu caráter quimico individual em comparação com HA e CS individualmente.

[0074] Além disso, o complexo foi analisado sob Microscopia de força atômica. Imagens AFM foram adquiridas em um microscópio AFM Dimenison 3100 com um controlador eletrônico Nanoscope IV em Modo de semi-contato, utilizando uma ponta Vistaprobe AFM com uma constante de mola 40 nN/nm. O complexo HA:CS 1:1 obtido de acordo com a invenção e uma mistura de hialuronato de sódio/sulfato de condroitina 1:1 foram dissolvidos em água a 20 mg/mL, incubados durante a noite (4°C) e então diluídos a uma concentração final de 20 ug/mL. A seguir, 20 ul foram depositados sobre Grafite pirolitico altamente ordenado (HOPG) recentemente clivado por 60-180 segundos, rinsados com água Milli-Q e suavemente seco sob um fluxo de nitrogênio. A figura 3 (B) mostra que o complexo tem uma rede intricada altamente densa de cadeias de polimero de interação em comparação com uma mistura simples de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina (figura 3(A)) que exibe uma estrutura não ordenada com cadeias poliméricas de não interação. Isso indica que o complexo da presente invenção tem uma conformação molecular diferente do que uma mistura simples de sulfato de condroitina ou um sal do mesmo e ácido hialurônico ou um sal do mesmo.

[0075] Os resultados acima demonstram que o processo de atomização afeta a conformação das moléculas, obtendo um complexo com propriedades fisico-quimicas diferentes do que uma mistura simples de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina.

[0076] Além disso, os inventores verificaram que o complexo obtido pelo processo descrito e definido acima têm propriedades fisico-quimicas aperfeiçoadas, inesperadas com relação a uma mistura simples. Por exemplo, medições de viscosidade por técnicas reológicas mostram que o processo de atomização causa uma diminuição em viscosidade do complexo obtido, que indica uma alteração de conformação na ultra-estrutura complexa.

[0077] Soluções aquosas de misturas de HA:CS (controle) e complexos atomizados em razões de peso diferentes de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina foram preparadas para caracterização reológica. Seu perfil reológico foi determinado utilizando um reômetro RS300 HAAKE RheoStress em modo controlado por tensão. Um cone Io e placa com 35 mm de diâmetro foi utilizada.

[0078] Controles e complexos de 1:1 e 1:10 foram reconstituídos em água Milli-Q. Concentrações de amostras são resumidas na tabela 3. Tabela 3:

[0079] Com base em uma tensão de cisalhamento aplicada, viscosidade das amostras foi medida a 25°C. Todas as amostras adaptadas em um modelo Cross, que permitiu comparar os resultados obtidos.

[0080] Os perfis de viscosidade para cada composição são mostrados na tabela 4. Tabela 4: viscosidades aparentes obtidas para amostras em taxas de cisalhamento diferentes

y=taxa de cisalhamento s 1 *Diferença em viscosidade de uma amostra com relação a seu controle

[0081] Dados de reometria mostram que em taxa de cisalhamento de 1 s-1 a viscosidade aparente dos produtos atomizados (HA, complexo (1:1) e complexo (1:10)) fornecem uma diminuição significativa em viscosidade (30,8%, 22,2% e 13,3% respectivamente) comparado com seus controles não atomizados correspondentes (misturas simples).

[0082] Realmente, um complexo atomizado 1:1 em solução tem uma queda de 22,2% em viscosidade com relação a uma solução aquosa de uma mistura simples HA:CS da mesma concentração e razão em peso. Essa redução em viscosidade permite formulações baseadas em um complexo 1:1 com até um aumento de concentração de 25% dos dois compostos em solução com relação a formulações convencionais compreendendo misturas simples de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina.

[0083] Isso é de interesse considerável porque permite aumentar a concentração de peso molecular dos dois compostos em uma formulação enquanto mantém as propriedades reológicas ótimas para algumas aplicações como injeção intra-articular.

[0084] Além disso, o complexo reivindicado obtenível pelo processo descrito na presente invenção, apresenta uma viscosidade em solução aquosa (por exemplo, solubilização do produto obtido na etapa c) mais baixa do que a viscosidade de uma solução aquosa contendo uma mistura simples de ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo da mesma concentração (por exemplo, a solução aquosa da etapa b) . A queda em viscosidade obtida com o complexo em solução é maior do que 5%, mesmo maior do que 10%, com relação a uma solução aquosa de uma mistura de ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo da mesma concentração (vide a tabela 4).

[0085] No processo da presente invenção, as composições a serem atomizadas ou alimentação (ou estoque de alimentação) pode ser qualquer solução, suspensão grossa, pasta, mistura aquosa, dispersão coloidal, ou pasta compreendendo ácido hialurônico ou um sal do mesmo, e sulfato de condroitina ou um sal do mesmo, que pode ser atomizado utilizado um aparelho de secagem por pulverização selecionado. Tipicamente, a alimentação é pulverizada em uma corrente de ar quente que evapora o solvente e transporta o produto seco para um coletor. O atomizador pode ser, por exemplo, um atomizador giratório ou um bocal de mistura de dois fluidos. Aqueles versados na técnica reconhecerão que vários tipos diferentes de aparelho podem ser utilizados para fornecer o produto desejado. Com a condição de que complexos compreendendo a morfologia e/ou composição correta sejam produzidos, a escolha do aparelho não é critica e seria evidente para o técnico especializado em vista dos ensinamentos da presente invenção.

[0086] A última etapa do processo reivindicado, a saber, a etapa de atomização, é normalmente realizada em uma temperatura compreendida entre 80°C e 150°C (temperatura de entrada), preferivelmente entre 100°C e 150°C. No exemplo a seguir, a etapa de atomização foi realizada em uma temperatura de entrada de 120°C.

[0087] Os seguintes exemplos são fornecidos para ilustrar adicionalmente o complexo de acordo com a presente invenção e várias composições compreendendo o complexo obtido de acordo com o exemplo 1 abaixo. Os exemplos fornecidos abaixo são ilustrativos e não pretendem limitar o escopo da invenção reivindicada. Exemplo 1: preparação de um complexo

[0088] Soluções de hialuronato de sódio (HA) de origem biotecnológica (Mw >1200 KDa, obtido da CPN) e sulfato de condroitina (CS) de origem bovina (Mw 5-50 KDa, Mw médio 20 KDa de Derquimina) foram preparados por misturar os dois componentes em razões 1:1 e 1:10 (peso/peso, HA:CS). A mistura resultante foi então dissolvida em água Milli-Q autoclavada e agitada a 500 rpm por 4 h em temperatura ambiente. Amostras foram mantidas por 12 horas a 4°C, antes da evaporação da água por atomização.

[0089] As amostras foram primeiramente diluídas para obter uma viscosidade < 2000 mPa.s e então submetidas à atomização em um secador de Spray Mini Buchi B-290 sob as seguintes condições: volume 140-170 mL, aspiração 90%, temperatura de entrada 120°C, e temperatura de saida 73°C. Amostras secas HA:CS foram mantidas a 4°C para análise adicional. Exemplo 2: composição viscoelástica para injeção intra- articular

[0090] Diversos produtos compreendendo hialuronato de sódio e sulfato de condroitina são disponíveis no mercado. Por exemplo, Arthromac® é um gel injetável indicado para o tratamento de osteoartrite (AO) contendo 21 mg/mL de hialuronato de sódio e 28 mg/mL de sulfato de condroitina. Outros produtos comerciais sem sulfato de condroitina contêm hialuronato em concentrações entre 8 e 25 mg/mL (por exemplo, Jointex®, Ostenil®, Suplasyn®, Hyalgan®, Coxarthrum®).

[0091] Os inventores da presente invenção foram capazes de formular uma composição viscoelástica para injeção intra-articular compreendendo o complexo da presente invenção com uma concentração de 60 mg/mL, que representa uma concentração substancialmente mais elevada de hialuronato de sódio e sulfato de condroitina em comparação com formulações conhecidas disponíveis no mercado.

[0092] Portanto, uma composição compreendendo o complexo da presente invenção pode produzir um efeito terapêutico de longa duração aperfeiçoado implicando menos injeções. Isso permite tratamento em um modo muito eficiente de doenças articulares ou lesões sem a desvantagem de injetar várias doses por dia. Exemplo 3: Formulação Oral

Exemplo 4: gel tópico

Claims

1. Complexo caracterizadopor ser obtenível por: a) mistura de ácido hialurônico ou um sal deste com sulfato de condroitina ou um sal deste, b) formação de uma solução aquosa da referida mistura, e c) atomização da solução aquosa resultante, em que o ácido hialurônico ou um sal deste tem um peso molecular médio maior do que 1.000.000 Daltons e o sulfato de condroitina ou um sal deste tem um peso molecular médio de 5.000 a 50.000 Daltons.

2. Complexo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que o ácido hialurônico ou um sal deste tem um peso molecular médio maior do que 1.200.000 Daltons.

3. Complexo, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizadopelo fato de que a razão em peso de ácido hialurônico ou um sal deste para sulfato de condroitina ou um sal deste é de 1:1 a 1:10.

4. Complexo, de acordo com a reivindicação 3, caracterizadopelo fato de que a razão em peso de ácido hialurônico ou um sal deste para sulfato de condroitina ou um sal deste é 1:1.

5. Composição farmacêutica caracterizadapor compreender o complexo conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, para ser administrada por uma via selecionada do grupo que consiste em administração parenteral, administração oral e administração tópica.

6. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 5, caracterizadapelo fato de que a concentração do complexo a ser administrado por via parenteral é igual ou superior a 20 mg/mL.

7. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 ou 6, caracterizadapelo fato de que a referida composição é administrada por injeção intra-articular.

8. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 5, caracterizadapelo fato de que a quantidade de complexo a ser administrado por via oral é igual ou superior a 220 mg.

9. Composição farmacêutica, de acordo com a reivindicação 5, caracterizadapelo fato de que a concentração do complexo a ser administrado topicamente é igual ou superior a 70 mg/mL.

10. Seringa pré-cheia para aplicação intra- articular caracterizadapor compreender a composição farmacêutica conforme definida em qualquer uma das reivindicações 5 a 7.

11. Matriz artificial para implantação intra- articular caracterizadapor compreender a composição farmacêutica conforme definida em qualquer uma das reivindicações 5 ou 6.

12. Composição farmacêutica, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 7, caracterizada pelo fato de ser para uso na recuperação de fluido sinovial ou para irrigação intra-articular.

13. Composição farmacêutica compreendendo o complexo conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de ser para uso no tratamento e/ou reparo de articulações, tendões e doença ou lesões no tecido conectivo.

14. Composição cosmética caracterizadapor compreender o complexo conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4.

15. Processo para preparar o complexo conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 compreendendo as etapas de: a) misturar ácido hialurônico ou um sal deste com sulfato de condroitina ou um sal deste, e b) formar uma solução aquosa da referida mistura, o processo sendo caracterizadopelo fato de que compreende adicionalmente a etapa de: c) atomizar a solução aquosa resultante, em que o ácido hialurônico ou um sal deste tem um peso molecular maior do que 1.000.000 Daltons, e o sulfato de condroitina ou um sal deste tem um peso molecular médio de 5.000 a 50.000 Daltons.