BG63033B1

BG63033B1 - Бикомпонентна ваксина против пастьорелоза и хеморагична болест по зайците

Info

Publication number: BG63033B1
Application number: BG101173A
Authority: BG
Inventors: Марин Петков; Мария Никифорова; Райко Пешев; Бойко Митов; Хараламби Хараламбиев
Original assignee: Научно-Изследов. Произв. Ветеринарно-Медицински Институт По Имунология
Priority date: 1997-01-27
Filing date: 1997-01-27
Publication date: 2001-02-28
Also published as: BG101173A

Abstract

Ваксината се използва във ветеринарната медицина за предпазване на зайците от хеморагична болест и пастьорелоза. Ваксиналните антигени на ваксината са активирани и стабилизирани чрез третирането им с0,1-0,2% трипсин.

Description

(54) БИКОМПОНЕНТНА ВАКСИНА ПРОТИВ ПАСТЬОРЕЛОЗА И ХЕМОРАГИЧНА БОЛЕСТ ПО ЗАЙЦИТЕ

Област на техниката

Изобретението се отнася до биопрепарат за предпазване на зайците от пастьорелоза и хеморагична болест, който ще намери приложение във ветеринарната медицина.

Предшестващо състояние на техниката

Известни са няколко ваксини, насочени поотделно срещу вирусната хеморагична болест (ВХБ) и пастьорелозата, които предизвикват огромни щети на зайцевъдството в много страни. Срещу пастьорелозата, предизвикана от бактериални щамове на Раз1еиге11а гаЪЬк, се използват антибиотици и различни инактивирани с химически средства ваксини с несигурен резултат. Широкото и бързо разпространение на вирусната хеморагична болест по зайците (ВХБЗ) предизвиква разработването и прилагането на инактивирани с химически вещества моноваксини в Китай (1), Русия (2) и България (3). Освен това у нас е разработена и приложена термоинактивирана ваксина против вирусната хеморагична болест “Хебовак 88-Т” /авт.свидетелство 87106/.

Независимо от положителните резултати от приложението им, тези ваксини имат и недостатъци. Много стопанства са засегнати и от двете най-актуални заразни болести ХБЗ и пастьорелозата и се налага ваксиниране с отделни моноваксини. Повечето от ваксините представляват нестабилни течни суспензии, които за кратко време се разслояват. Това създава опасност за неравномерно разпределение на имуногенните субстанции в отделните дози. Необходимо е ваксиниране на зайците с възможно по-малък обем, но по-силно имуногенни ваксини.

Техническа същност на изобретението

Задачата на изобретението е да се създаде ваксина едновременно срещу пастьорелоза и хеморагична болест по зайците, с подобрена стабилност на ваксиналната суспензия, която се прилага в по-малки дози и предизвиква силен имунен отговор във ваксинираните животни.

Задачата се решава с бикомпонентната ваксина Рабигард за предпазване на зайците от хеморагична болест и пастьорелоза, която след разтварянето си има по-добра физическа стабилност и висока имуногенност, предизвикана от третирането на ваксиналните антигени с протеолитичен ензим. Високата имуногенност на ваксината позволява апликацията и в по-малки дози.

Ваксината Рабигард се приготвя, като към 10 части чернодробна тъкан, получена от заразени с вируса на хеморагичната болест (ХБ) зайци, се добавя 90 т1 бактериална култура от щамове Раз1еиге11а гаЬЬИ с бактериален титьр 10” в т1, както и 0,2-0,1 £ трипсин “Дифко” и 0,8-0,5 £ сапонин. Сместа се хомогенизира в миксер за 15-30 πιΐη, прецежда се и се разлива в стъкла, които се подлагат на термоинактивиране във водна баня за 100 тт при 66-68°С. Получената инактивирана ваксинална суспензия се лиофилизира в пеницилинови флакони.

Ваксината се прилага, като лиофилизираното съдържание във флаконите се разтваря в

5-кратно по-голям обем буфериран физиологичен разтвор и се амплицира мускулно по 0,5 т1 за предпазване на всички застрашени зайци, независимо от живото им тегло.

Предимствата на ваксината са, че предизвиква имунен отговор както срещу хеморагична болест, така и срещу пастьорелозата, има добра физическа дисперсност, не се утаява и разслоява бързо и е високо имуногенна поради ензимното активиране на антигените, което позволява амплицирането й в малки дози.

Изобретението може да се илюстрира със следните примери.

Пример 1. Като изходен материал за получаване на антиген на хеморагичната болест се използва тъкан от черен дроб от изкуствено заразени с теренен щам на вируса на ХБЗ зайци, която показва хемаглутиниращ титьр над 1:4096. Пастьорелният антиген се приготвя от теренни щамове на РакГеигеПа гаЬЬк, които се култивират във ферментатори и периодично се пасират през зайци. Двата антигена на ХБЗ и пастьорелозата се смесват в съотношение 1:9, като към 100 т1 от сместа се добавят 0,1 £ трипсин и 0,7 £ сапонин. Сместа се хомогенизира 30 тт на миксер, а след това се прецежда, разлива се в бурканчета от 200 ш1 и се инактивира на водна баня с циркулираща вода за 100 тш при 68°С. Инактивираната вирусна суспензия се разлива по 2 т1 в пеницилинови флакони и се лиофилизира.

Пример 2. Ваксината се прилага, като съдържанието на флакона се разтваря с 10 ш1 буфериран физиологичен разтвор и се аплицира мускулно еднократно по 0,5 ш1 на разстрашени зайци от 2-месечна възраст нагоре, независимо от живото им тегло и физиологичното им състояние. До 10-ия ден след ваксинацията имунизираните зайци реагират с изграждане на постваксинални антитела с титър по реакция за задържане на хемаглутинацията (РЗХА) от 1:128 до 1:1024 срещу ХБЗ и с титър 1:2-1:8 срещу пастьорелоза по реакция аглутинация (РА) срещу обработен корпускулярен пастьорелен антиген.

Пример 3. При изкуствено заразяване на ваксинираните зайци с 10⁵ летални дози 50 (ЬО₅₀) вирулентен щам на вируса на хеморагичната болест те остават живи, без клинични смущения, докато контролните неваксинирани зайци умират в течение на 48-120 Ь след провокацията.

Пример 4. Една доза от разтворената ваксина съдържа: вирусен антиген 0,012 8 чернодробна тъкан, с вирусен титър=или > от 64 -128 хемоаглутиниращи единици, пастьорелен антиген около 10* инактивирани бактериални тела, сапонин -0,0006-0,0008 трипсин 0,0001-0,0002 буфериран физислогачен разтвор - до 0,5 т!.

Claims

Патентни претенции

1. Бикомпонентна ваксина срещу пастьорелоза и хемарагична болест по зайците, характе5 ризираща се с това, че ваксиналните антигени на вируса на ХБЗ и бактериалната инфекция пастьорелоза са ензим активирани и стабилизирани чрез третирането им с 0,1-0,2% трипсин.