BG113485A - Synbiotic formulation and method for the preparation of lyophilized cultures of lactic acid bacterial strains - Google Patents
Synbiotic formulation and method for the preparation of lyophilized cultures of lactic acid bacterial strains Download PDFInfo
- Publication number
- BG113485A BG113485A BG113485A BG11348522A BG113485A BG 113485 A BG113485 A BG 113485A BG 113485 A BG113485 A BG 113485A BG 11348522 A BG11348522 A BG 11348522A BG 113485 A BG113485 A BG 113485A
- Authority
- BG
- Bulgaria
- Prior art keywords
- temperature
- bulgaricus
- lactobacillus
- bioreactor
- lyophilized
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 70
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 54
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 47
- 235000019722 synbiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 35
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title claims abstract description 27
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- 238000009472 formulation Methods 0.000 title abstract 3
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 claims abstract description 49
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 claims abstract description 48
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 claims abstract description 48
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 claims abstract description 41
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims abstract description 22
- 235000020254 sheep milk Nutrition 0.000 claims abstract description 22
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 claims abstract description 18
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 claims abstract description 18
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 claims abstract description 16
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 claims abstract description 16
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 claims abstract description 16
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims abstract description 14
- 241000237858 Gastropoda Species 0.000 claims abstract description 13
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 12
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 claims abstract description 12
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 claims abstract description 12
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 claims abstract description 12
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 claims abstract description 11
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 239000007858 starting material Substances 0.000 claims abstract description 11
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims abstract description 4
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims abstract description 4
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 27
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 22
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical group [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 16
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 13
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 claims description 13
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 11
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 11
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 9
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 9
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 9
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 claims description 8
- 241000186012 Bifidobacterium breve Species 0.000 claims description 8
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 claims description 8
- 241000186015 Bifidobacterium longum subsp. infantis Species 0.000 claims description 8
- 229940004120 bifidobacterium infantis Drugs 0.000 claims description 8
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 8
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 claims description 8
- 241001134770 Bifidobacterium animalis Species 0.000 claims description 7
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 7
- 229940118852 bifidobacterium animalis Drugs 0.000 claims description 7
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 claims description 7
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 claims description 7
- 235000013406 prebiotics Nutrition 0.000 claims description 7
- 244000290333 Vanilla fragrans Species 0.000 claims description 6
- 235000009499 Vanilla fragrans Nutrition 0.000 claims description 6
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 6
- 238000007710 freezing Methods 0.000 claims description 6
- 230000008014 freezing Effects 0.000 claims description 6
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 6
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 4
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-CBPJZXOFSA-N D-Gulose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-CBPJZXOFSA-N 0.000 claims description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 3
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 claims description 3
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 claims description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 3
- 239000008240 homogeneous mixture Substances 0.000 claims description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 claims description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 3
- JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N lactulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N 0.000 claims description 3
- 229960000511 lactulose Drugs 0.000 claims description 3
- PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N lactulose keto form Natural products OCC(=O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 claims description 3
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 claims description 3
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 3
- 241000894007 species Species 0.000 claims 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 abstract description 3
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 abstract description 2
- 235000020939 nutritional additive Nutrition 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 21
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 8
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 7
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 5
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 5
- QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N vitamin D3 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-YRZJJWOYSA-N 0.000 description 5
- 235000005282 vitamin D3 Nutrition 0.000 description 5
- 239000011647 vitamin D3 Substances 0.000 description 5
- 229940021056 vitamin d3 Drugs 0.000 description 5
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 4
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 239000008371 vanilla flavor Substances 0.000 description 4
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 3
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 206010010774 Constipation Diseases 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 2
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 2
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 2
- 230000002730 additional effect Effects 0.000 description 2
- POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N allantoin Chemical compound NC(=O)NC1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 2
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 2
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 2
- 230000007366 host health Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 2
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- LQIAZOCLNBBZQK-UHFFFAOYSA-N 1-(1,2-Diphosphanylethyl)pyrrolidin-2-one Chemical compound PCC(P)N1CCCC1=O LQIAZOCLNBBZQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010000060 Abdominal distension Diseases 0.000 description 1
- 208000002874 Acne Vulgaris Diseases 0.000 description 1
- POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N Allantoin Natural products NC(=O)N[C@@H]1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N 0.000 description 1
- 229920000189 Arabinogalactan Polymers 0.000 description 1
- 239000001904 Arabinogalactan Substances 0.000 description 1
- 206010003805 Autism Diseases 0.000 description 1
- 208000020706 Autistic disease Diseases 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- 241000186018 Bifidobacterium adolescentis Species 0.000 description 1
- 241000901051 Bifidobacterium animalis subsp. animalis Species 0.000 description 1
- 241000901050 Bifidobacterium animalis subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 206010012689 Diabetic retinopathy Diseases 0.000 description 1
- 208000036649 Dysbacteriosis Diseases 0.000 description 1
- 208000027244 Dysbiosis Diseases 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 208000007882 Gastritis Diseases 0.000 description 1
- 206010017964 Gastrointestinal infection Diseases 0.000 description 1
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 1
- 208000007514 Herpes zoster Diseases 0.000 description 1
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 1
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 1
- 241000451147 Lacon Species 0.000 description 1
- 206010023648 Lactase deficiency Diseases 0.000 description 1
- 244000199885 Lactobacillus bulgaricus Species 0.000 description 1
- 235000013960 Lactobacillus bulgaricus Nutrition 0.000 description 1
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 description 1
- 240000002605 Lactobacillus helveticus Species 0.000 description 1
- 235000013967 Lactobacillus helveticus Nutrition 0.000 description 1
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 1
- 241000544657 Larix gmelinii Species 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 208000031888 Mycoses Diseases 0.000 description 1
- 206010051606 Necrotising colitis Diseases 0.000 description 1
- 201000009053 Neurodermatitis Diseases 0.000 description 1
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 1
- 244000193463 Picea excelsa Species 0.000 description 1
- 235000008124 Picea excelsa Nutrition 0.000 description 1
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 206010000496 acne Diseases 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 229960000458 allantoin Drugs 0.000 description 1
- 239000013566 allergen Substances 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000019312 arabinogalactan Nutrition 0.000 description 1
- 235000019568 aromas Nutrition 0.000 description 1
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 208000024330 bloating Diseases 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000037182 bone density Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 230000007140 dysbiosis Effects 0.000 description 1
- 201000006549 dyspepsia Diseases 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 206010016766 flatulence Diseases 0.000 description 1
- 239000011888 foil Substances 0.000 description 1
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 210000001156 gastric mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 208000024798 heartburn Diseases 0.000 description 1
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 1
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 1
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 229940088592 immunologic factor Drugs 0.000 description 1
- 239000000367 immunologic factor Substances 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 1
- 210000004347 intestinal mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229940012969 lactobacillus fermentum Drugs 0.000 description 1
- 229940054346 lactobacillus helveticus Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 210000002346 musculoskeletal system Anatomy 0.000 description 1
- 208000004995 necrotizing enterocolitis Diseases 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 description 1
- 239000006072 paste Substances 0.000 description 1
- 201000006195 perinatal necrotizing enterocolitis Diseases 0.000 description 1
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 210000004694 pigment cell Anatomy 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000008261 resistance mechanism Effects 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 238000005728 strengthening Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
- 210000001215 vagina Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 210000001835 viscera Anatomy 0.000 description 1
- 230000036642 wellbeing Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
СИНБИОТИЧЕН СЪСТАВ И МЕТОД ЗА ПОЛУЧАВАНЕ НАSYNBIOTIC COMPOSITION AND METHOD OF OBTAINING
ЛИОФИЛИЗИРАНИ КУЛТУРИ ОТ БАКТЕРИАЛНИ ЩАМОВЕLYOPHILIZED CULTURES OF BACTERIAL STRAINS
МЛЕЧНОКИСЕЛИ БАКТЕРИИLACTIC ACID BACTERIA
Област на техникатаField of technique
Изобретението се отнася до синбиотичен състав, който ще намери приложение като профилактичен и терапевтичен препарат за запазване и подобряване на общото здравословно състояние на гостоприемника, както и за превенция и/или лечение на заболявания на стомашно-чревния тракт, предназначен за хора. Освен това, изобретението се отнася до метод за получаване на лиофилизирани култури от бактериалните щамове млечнокисели бактерии, който намира приложение при получаване на синбиотичния състав и може да бъде приложен при получаване на биомаса, пробиотични стартерни култури, хранителни добавки и фармацевтични препарати.The invention relates to a synbiotic composition that will find application as a prophylactic and therapeutic preparation for preserving and improving the general health of the host, as well as for the prevention and/or treatment of diseases of the gastrointestinal tract intended for humans. Furthermore, the invention relates to a method for obtaining lyophilized cultures of the bacterial strains of lactic acid bacteria, which finds application in the preparation of the synbiotic composition and can be applied in the preparation of biomass, probiotic starter cultures, nutritional supplements and pharmaceutical preparations.
Предшестващо състояние на техникатаPrior art
Млечнокиселите бактерии са разнообразна група от грам-положителни, неспорулиращи бактерии, анаероби или факултативни анаероби, изискващи специфична хранителна среда, и чийто краен метаболитен продукт е млечната киселина. В днешно време млечно киселите бактерии са микроорганизми с индустриално значение поради тяхната ферментационна активност, както и заради техните здравни и хранителни предимства. Млечно киселите бактерии, които заемат важни ниши в стомашно чревния тракт се разглеждат като предлагащи множество пробиотични предимства за общото здравословно състояние и за доброто физическо състояние. Тези предимства включват положително влияние върху естествената микрофлора, конкурентно изключване на патогени, стимулиране и модулация на мукозния имунитет. В тази връзка си заслужава да се обърне особено внимание на това, че предимствата за здравето, дължащи се на пробиотичните бактерии, са щам специфични и зависят от особеностите на отделните щамове (Shah NP. Functional cultures and health benefits. Int. Dairy J. 2007; 17:1262-1277}.Lactic acid bacteria are a diverse group of Gram-positive, non-sporulating bacteria, anaerobes or facultative anaerobes, requiring a specific nutrient medium, and whose end metabolic product is lactic acid. Nowadays, lactic acid bacteria are microorganisms of industrial importance due to their fermentation activity as well as their health and nutritional benefits. Lactic acid bacteria, which occupy important niches in the gastrointestinal tract, are considered to offer numerous probiotic benefits for general health and well-being. These advantages include a positive influence on the natural microflora, competitive exclusion of pathogens, stimulation and modulation of mucosal immunity. In this regard, it is worth paying special attention to the fact that the health benefits due to probiotic bacteria are strain specific and depend on the characteristics of individual strains (Shah NP. Functional cultures and health benefits. Int. Dairy J. 2007 ; 17:1262-1277}.
Международна заявка за патент WO2008141240 разкрива пробиотични храни и състави за пробиотични добавки с имунологична активност. Съставите съдържат жизнеспособни микробни клетки от най-малко един пробиотик в комбинация с поне един естествен полизахарид (пребиотик) и други добавки, под формата на капсули или таблетки.International patent application WO2008141240 discloses probiotic foods and probiotic supplement compositions with immunological activity. The compositions contain viable microbial cells of at least one probiotic in combination with at least one natural polysaccharide (prebiotic) and other additives, in the form of capsules or tablets.
От патентна публикация BG67244B1 е известен имуномодулиращ синбиотичен състав, съдържащ активна формула на основата на пробиотик от живи клетки на биологически чиста култура от бактериален щам, избран от групата на Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus и Lactobacillus fermentum или техни комбинации, пребиотик - арабиногалактан от кора на сибирска лиственица (Larix gmelinii) и млечен продукт във вид на коластра при описани количества в mg. Съставите от BG67244B1 са предназначени за получаване на хранителна добавка и/или фармацевтичен продукт за профилактика и/или за терапията на възпалителни и имунни заболявания на гастроинтестиналния тракт.From patent publication BG67244B1 is a known immunomodulating synbiotic composition containing an active formula based on a probiotic from living cells of a biologically pure culture of a bacterial strain selected from the group of Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus helveticus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus rhamnosus and Lactobacillus fermentum or their combinations, prebiotic - arabinogalactan from the bark of Siberian larch (Larix gmelinii) and a dairy product in the form of colostrum in the amounts described in mg. The compositions of BG67244B1 are intended for obtaining a food supplement and/or a pharmaceutical product for the prevention and/or the therapy of inflammatory and immune diseases of the gastrointestinal tract.
Техническа същност на изобретениетоTechnical essence of the invention
Задача на настоящото изобретение е да се създаде нова форма на синбиотичен състав, който да спомага запазването и подобряването на общото здравословно състояние на гостоприемника и да служи за превенция и/или лечение на заболявания на стомашно чревния тракт.The task of the present invention is to create a new form of synbiotic composition that helps preserve and improve the general health of the host and serves for the prevention and/or treatment of diseases of the gastrointestinal tract.
Друга задача на настоящото изобретение е да се предложи нова технология за получаване на лиофилизирани култури от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus.Another task of the present invention is to propose a new technology for obtaining lyophilized cultures from the bacterial strains of lactic acid bacteria Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus.
Едната задача на настоящото изобретение е решена като е създаден синбиотичен състав, включващ пребиотик, млечен продукт и пробиотик. Пробиотикът включва смес от живи клетки на бактериални щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus.One object of the present invention has been solved by creating a synbiotic composition comprising a prebiotic, a dairy product and a probiotic. The probiotic includes a mixture of living cells of bacterial strains of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus.
Съгласно настоящото изобретение, сместа от живи клетки съдържа също поне един щам представител от род Bifidobacterium. Живите клетки на всеки един от бактериалните щамове Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium ca лиофилизирани култури на тези щамове. Всеки един бактериален щам в сместа от живи клетки има активност в диапазона от 109 до 1011 CFU/g от сместа. Пребиотикът в синбиотичния състав е инулин със степен на полимеризация до 10 единици, която за предпочитане е избрана да бъде от 5 до 8 единици. Млечният продукт е сухо овче мляко, и/или лиофилизирана овча коластра и/или смес от тях. Компонентите на синбиотичния състав са в количество, изразено в тегл. %, както следва:According to the present invention, the live cell mixture also contains at least one strain representative of the genus Bifidobacterium. The living cells of each of the bacterial strains Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium ca lyophilized cultures of these strains. Each bacterial strain in the live cell mixture had an activity in the range of 10 9 to 10 11 CFU/g of the mixture. The prebiotic in the synbiotic composition is inulin with a degree of polymerization of up to 10 units, which is preferably chosen to be from 5 to 8 units. The dairy product is dry sheep's milk and/or lyophilized sheep's colostrum and/or a mixture thereof. The components of the synbiotic composition are in an amount expressed in weight. %, as follows:
смес от живи клетки -от 30 до 35;a mixture of living cells - from 30 to 35;
инулин -от 28 до 33;inulin - from 28 to 33;
млечен продукт - от 30 до 35, като до 100 тегл. % е избран поне един компонент от групата на витамини, аромати и/или добавки.dairy product - from 30 to 35, such as up to 100 wt. % at least one component is selected from the group of vitamins, flavors and/or additives.
В предпочитано изпълнение на синбиотичния състав, съгласно изобретението, живите клетки от род Bifidobacterium са от поне едни щам, избран от групата на Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis или комбинация от тях.In a preferred embodiment of the synbiotic composition according to the invention, the living cells of the genus Bifidobacterium are from at least one strain selected from the group of Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis or a combination thereof.
В друго предпочитано изпълнение на синбиотичния състав, съгласно изобретението, бактериалните щамове в сместа от живи клетки са в количество в тегл.%, както следва: Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus - от 45 до 55;In another preferred embodiment of the synbiotic composition according to the invention, the bacterial strains in the live cell mixture are in the amount in wt.% as follows: Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus - from 45 to 55;
Lactobacillus acidophilus - от 25 до 30;Lactobacillus acidophilus - from 25 to 30;
Bifidobacterium - от 20 до 25.Bifidobacterium - from 20 to 25.
Във вариантни изпълнения на синбиотичния състав, съгласно настоящото изобретение, сухото овче мляко и/или лиофилизираната овча коластра са от домашна овца, избрана между породи „Лакон, „Асаф и/или „Аваси.In variant embodiments of the synbiotic composition, according to the present invention, the dry sheep's milk and/or the lyophilized sheep's colostrum are from a domestic sheep selected from the Lakon, Assaf and/or Avasi breeds.
В един предпочитан вариант, съгласно настоящото изобретение, синбиотичният състав допълнително включва лиофилизиран екстракт от охлюви, който може да бъде слуз от охлюви в количество от 40 mg до 60 mg, което за предпочитане е избрано да бъде 50 mg.In a preferred embodiment, according to the present invention, the synbiotic composition further comprises a lyophilized snail extract, which may be snail mucus in an amount of 40 mg to 60 mg, which is preferably chosen to be 50 mg.
Във вариантни изпълнения на синбиотичния състав, съгласно настоящото изобретение, общото количество витамини може да е от 0,04 до 0,08 mg, като за предпочитане в крайния продукт количеството е 0,05 mg, а като предпочитан витамини е избран витамин D3. Ароматите е желателно да бъдат в количество от 40 mg до 60 mg, което за предпочитане в крайния продукт е 50 mg, а предпочитан аромат е бурбонска ванилия (Vanilia planifolia). Количеството на добавките е от 15 mg до 25 mg, като за предпочитане в крайния продукт количеството е 20 mg, а като предпочитана добавка е избран магнезиев стеарат.In variant embodiments of the synbiotic composition according to the present invention, the total amount of vitamins can be from 0.04 to 0.08 mg, preferably in the final product the amount is 0.05 mg, and as a preferred vitamin, vitamin D3 is chosen. The flavors are desirably in the amount of 40 mg to 60 mg, which is preferably 50 mg in the final product, and the preferred flavor is bourbon vanilla (Vanilia planifolia). The amount of additives is from 15 mg to 25 mg, preferably in the final product the amount is 20 mg, and magnesium stearate is chosen as the preferred additive.
Друг аспект на настоящото изобретение се отнася до метод за получаване на лиофилизирани култури от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus, при който всеки от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus се култивира и лиофилизира по отделно, като култивирането се извършва в биореактор с подходяща за вида хранителна среда на основата на мляко, последвано от лиофилизиране.Another aspect of the present invention relates to a method for preparing lyophilized cultures of the bacterial strains of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus, wherein each of the bacterial strains Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus were cultured and lyophilized separately, culturing in a bioreactor with species-appropriate milk-based medium followed by lyophilization.
Съгласно настоящото изобретение, методът за получаване на лиофилизирани култури от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus протича на следните етапи:According to the present invention, the method for obtaining lyophilized cultures of the bacterial strains of lactic acid bacteria Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus occurs in the following stages:
• Получаване на посевен материал, при който се прави посев с чиста култура на щама Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus или Lactobacillus acidophilus в сухо обезмаслено овче мляко, което е предварително стерилизирано в автоклав и възстановено до 10% сухо вещество. Чистата култура на всеки от щамовете се култивира в термостатен шкаф до постигане на коагулация за време между 6 и 8 часа при температура 42°С ± 1°С за щам Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и за време до 16 часа при температура 37°С ± 1°С за щам Lactobacillus acidophilus, при което се получава посевен материал от активна стартерна култура.• Preparation of inoculum, in which inoculum is made with a pure culture of the strain Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus or Lactobacillus acidophilus in dry skimmed sheep's milk that has been pre-sterilized in an autoclave and reconstituted to 10% solids. The pure culture of each of the strains was cultivated in a thermostatic cabinet until coagulation was achieved for a time between 6 and 8 hours at a temperature of 42°C ± 1°C for a strain of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and for a time of up to 16 hours at a temperature of 37°C ± 1°C for Lactobacillus acidophilus strain, in which an inoculum is obtained from an active starter culture.
• Преди култивирането се подготвя хранителна среда, при което в смесител се изсипва сухо обезмаслено овче мляко в количество 12% от обема на биореактора и се разбърква до хомогенизиране. Хомогенизираното сухо обезмаслено овче мляко се прехвърля в биореактора, където първоначално се добавя вода до запълване на 50% от работния обем на биореактора и се разбърква за период до 30 минути. След това се добавя останалото количество вода до запълване на целия работен обем на биореактора и отново се разбърква до получаване на хомогенна смес. Температурата се увеличава до 121°С ± 1°С и се поддържа в продължение на 20 -г 30 минути при налягане в биореактора от 0,1 МРа. Следва охлаждане на биореактора до температура 42°С ± 1°С за Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus или до температура 37°С ± 1°С за Lactobacillus acidophilus. Преди посев с активната стартерна култура се добавя стерилен 10% разтвор на дрождев екстракт до достигане на съдържание от 0,4% суха маса от обема на течната маса в биореактора. Така получената хранителна среда е със съдържание на 12% сухо обезмаслено овче мляко, 0,4% дрождев екстракт и вода.• Before cultivation, a nutrient medium is prepared, in which dry skimmed sheep's milk is poured into a mixer in an amount of 12% of the volume of the bioreactor and mixed until homogenized. The homogenized dry skimmed sheep's milk is transferred to the bioreactor, where water is initially added to fill 50% of the working volume of the bioreactor and stirred for a period of up to 30 minutes. Then add the remaining amount of water until the entire working volume of the bioreactor is filled and mix again until a homogeneous mixture is obtained. The temperature was increased to 121°C ± 1°C and maintained for 20 -h 30 min at a bioreactor pressure of 0.1 MPa. The bioreactor is then cooled to a temperature of 42°C ± 1°C for Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus or up to a temperature of 37°C ± 1°C for Lactobacillus acidophilus. Prior to inoculation with the active starter culture, a sterile 10% yeast extract solution was added to a content of 0.4% dry mass by volume of liquid mass in the bioreactor. The nutrient medium thus obtained contains 12% dry skimmed sheep's milk, 0.4% yeast extract and water.
• Култивирането на микроорганизмите в биореактора започва като към хранителната среда в биореактора се добавя полученият посевен материал от активна стартерна култура в количество 1% t 3% от работния обем на биореактора. Култивирането на микроорганизмите се провежда при постоянно разбъркване 50 rpm и при температура 42°С ± ГС за Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и при температура 37°С ± 1°С за• Cultivation of the microorganisms in the bioreactor begins by adding the seed material obtained from an active starter culture to the nutrient medium in the bioreactor in an amount of 1% t 3% of the working volume of the bioreactor. Cultivation of the microorganisms was carried out under constant stirring at 50 rpm and at a temperature of 42°C ± HS for Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and at a temperature of 37°С ± 1°С for
Lactobacillus acidophilus. Със стерилен 20% разтвор на NaOH за щама Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus при достигане на pH 5,0 се правят три до пет последователни корекции до pH 5,7 на активната киселинност, докато за щама Lactobacillus acidophilus при достигане на pH 4,7 със стерилния 20% разтвор на NaOH се правят две последователни корекции до pH 5,7 на активната киселинност. За двата щама преди лиофилизация при достигане на pH 5,0 се прави една допълнителна корекция до pH 6,2 на активната киселинност. Получената културална среда се охлажда до 22°С и към нея при постоянно разбъркване се подава 20% разтвор на стерилно обезмаслено мляко в количество 2% от работният обем на биореактора. Следва охлаждане до 12°С за период до 30 минути и престой при същата температура за период от 30 минути до 1 час.Lactobacillus acidophilus. With a sterile 20% NaOH solution for the strain Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus when pH 5.0 is reached, three to five consecutive adjustments are made to pH 5.7 of the active acidity, while for the Lactobacillus acidophilus strain, when pH 4.7 is reached with the sterile 20% NaOH solution, two consecutive pH adjustments are made 5.7 of active acidity. For both strains, before lyophilization, when pH 5.0 was reached, one additional adjustment to pH 6.2 was made for the active acidity. The resulting culture medium is cooled to 22°C and, with constant stirring, a 20% solution of sterile skimmed milk is added to it in an amount of 2% of the working volume of the bioreactor. This is followed by cooling to 12°C for a period of up to 30 minutes and staying at the same temperature for a period of 30 minutes to 1 hour.
• Лиофилизирането се провежда като културалната среда от биореактора се подава към лиофилизатор с тави, в които културалната среда се разпределя на слой с дебелина 10 ъ 11 mm. Лиофилизаторът се стартира под дълбок вакуум. Следва постепенно охлаждане до температура -40°С и задържане за замразяване при температура -40 °C. След замразяването следва сушене, при което замразената културална среда постепенно се загрява до температура 35°С, която се поддържа до получаване на лиофилизат от изсушени лиофилизирани култури на всеки един от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus. Лиофилизатът има концентрация на живи клетки в диапазона от 109 до 1011 cfu/g и съдържа още лактоза в количество до 40 mg/g и лактулоза в диапазона от 2,5 до 5 mg/g.• Lyophilization is carried out by feeding the culture medium from the bioreactor to a lyophilizer with trays in which the culture medium is distributed in a layer with a thickness of 10 x 11 mm. The lyophilizer is started under deep vacuum. This is followed by gradual cooling to a temperature of -40°C and holding for freezing at a temperature of -40°C. Freezing is followed by drying, in which the frozen culture medium is gradually heated to a temperature of 35°C, which is maintained until a lyophilizate is obtained from dried lyophilized cultures of each of the bacterial strains of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus. The lyophilizate has a live cell concentration in the range of 10 9 to 10 11 cfu/g and also contains lactose in an amount of up to 40 mg/g and lactulose in the range of 2.5 to 5 mg/g.
В предпочитано изпълнение на метода за получаване на лиофилизирани култури от бактериалните щамове млечнокисели бактерии, съгласно настоящето изобретение, охлаждането при лиофилизирането започва за период от 1 час при температурата от 3°С, след което следва постепенно охлаждане за 1,5 часа до температурата от -40°С, като задържането за замразяване продължава за 1 час при температурата от -40°С.In a preferred embodiment of the method for obtaining lyophilized cultures of the bacterial strains of lactic acid bacteria, according to the present invention, the cooling during lyophilization starts for a period of 1 hour at the temperature of 3°C, followed by gradual cooling for 1.5 hours to the temperature of - 40°C, with freezing holding lasting for 1 hour at -40°C.
В друго предпочитано изпълнение на метода за получаване на лиофилизирани култури от бактериалните щамове млечнокисели бактерии, съгласно настоящето изобретение, постепенното загряването до температурата от 35°С за получаването на лиофилизата от изсушените лиофилизирани култури на всеки един от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus протича при следните условия: за период от 300 минути при температура 0°С и под вакуум от 66,66 Ра; следващ период от 250 минути при температура 10°С и под вакуум от 39,99 Ра, следващ период от 250 минути при температура 20°С и под вакуум от 33,33 Ра, следващ период от 250 минути при температура 25°С и под вакуум от 26,66 Ра, следващ период от 120 минути при температура 30°С и под вакуум от 13,33 Ра, следващ период от 100 минути при температура 30°С и под вакуум от 6,66 Ра и процесът продължава при температура 35°С и под вакуум от 6,66 Ра.In another preferred embodiment of the method for obtaining lyophilized cultures of the bacterial strains of lactic acid bacteria, according to the present invention, the gradual heating to the temperature of 35°C to obtain the lyophilization of the dried lyophilized cultures of each of the bacterial strains of lactic acid bacteria Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus takes place under the following conditions: for a period of 300 minutes at a temperature of 0°C and under a vacuum of 66.66 Pa; a further period of 250 minutes at a temperature of 10°C and under a vacuum of 39.99 Pa, a further period of 250 minutes at a temperature of 20°C and under a vacuum of 33.33 Pa, a further period of 250 minutes at a temperature of 25°C and below a vacuum of 26.66 Pa, a subsequent period of 120 minutes at a temperature of 30°C and under a vacuum of 13.33 Pa, a subsequent period of 100 minutes at a temperature of 30°C and under a vacuum of 6.66 Pa and the process continues at a temperature of 35 °C and under a vacuum of 6.66 Pa.
Синбиотичният състав има изключителна комплексност и висока активност. Всички комбинирани съставки на продукта имат сходно действие и се допълват, като внасят нови и допълнителни ефекти на въздействие върху човешкия организъм. Чрез метода за получаване на лиофилизирани култури от бактериалните щамове млечнокисели бактерии се получава лиофилизат с висока концентрация на живи клетки на съответните микроорганизми, които запазват своята жизнеспособност и висок титър при продължително съхраняване.The synbiotic composition has exceptional complexity and high activity. All the combined ingredients of the product have a similar effect and complement each other, bringing new and additional effects of impact on the human organism. By the method of obtaining lyophilized cultures from the bacterial strains of lactic acid bacteria, a lyophilisate with a high concentration of living cells of the relevant microorganisms is obtained, which retain their viability and high titer during long-term storage.
Примери за изпълнение на изобретениетоExamples of implementation of the invention
Синбиотичният състав, съгласно настоящото изобретение, е представен със следните примерни изпълнения, които ще постигнат желаните ефекти, чрез разкритите признаци в описанието и претенциите и които влизат в обхвата на настоящото изобретение, определен от претенциите, както следва:The synbiotic composition according to the present invention is presented with the following exemplary embodiments which will achieve the desired effects by the features disclosed in the description and claims and which fall within the scope of the present invention as defined by the claims as follows:
Пример 1Example 1
Синбиотичен състав, включващ смес от лиофилизирани култури на живи клетки от бактериалните щамове Lactobacillus delbrueckiissp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus и поне един щам от род Bifidobacterium, за предпочитане например Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis или други подходящи от рода, както и инулин, лиофилизирана овча коластра, лиофилизиран екстракт от охлюви (слуз), витамини, аромати и добавки под формата на саше със следното съдържание:A synbiotic composition comprising a mixture of lyophilized live cell cultures of the bacterial strains Lactobacillus delbrueckiissp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus and at least one strain of the genus Bifidobacterium, preferably e.g. Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis or other suitable genera, as well as inulin, lyophilized sheep colostrum, lyophilized snail extract (mucus) , vitamins, flavors and supplements in the form of sachets with the following content:
Смес от живи клетки (лиофилизат от бактериални щамове) -1300 mgMixture of living cells (lyophilisate of bacterial strains) - 1300 mg
Инулин -930 mgInulin - 930 mg
Лиофилизирана овча коластра -1000 mgLyophilized sheep colostrum - 1000 mg
Лиофилизиран екстракт от охлюви (слуз) - 50 mgLyophilized extract of snails (mucus) - 50 mg
Витамин D3 - 0,05 mg (50 pg)Vitamin D3 - 0.05 mg (50 pg)
Аромат бурбонска ванилия -50 mgBourbon vanilla flavor - 50 mg
Добавка магнезиев стеарат mgAdditive magnesium stearate mg
ИнулинInulin
Сухо овче млякоDry sheep's milk
Лиофилизиран екстракт от охлюви (слуз)Lyophilized snail extract (mucus)
Витамин D3Vitamin D3
Аромат бурбонска ванилияBourbon vanilla flavor
Добавка магнезиев стеаратMagnesium stearate additive
Пример 2Example 2
Синбиотичен състав, включващ смес от лиофилизирани култури на живи клетки от бактериалните щамове Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus и поне един щам от род Bifidobacterium, за предпочитане например Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis или други подходящи от рода, както и инулин, сухо овче мляко, лиофилизиран екстракт от охлюви (слуз), витамини, аромати и добавки под формата на саше със следното съдържание:A synbiotic composition comprising a mixture of lyophilized live cell cultures of the bacterial strains Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus and at least one strain of the genus Bifidobacterium, preferably e.g. Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis or other suitable genera, as well as inulin, sheep's milk powder, lyophilized snail extract (mucus) , vitamins, flavors and supplements in the form of sachets with the following contents:
Смес от живи клетки (лиофилизат от бактериални щамове) - 1300 mgMixture of living cells (lyophilisate of bacterial strains) - 1300 mg
- 930 mg- 930 mg
-1000 mg-1000 mg
- 50 mg- 50 mg
- 0,05 mg (50 pg)- 0.05 mg (50 pg)
- 50 mg- 50 mg
- 20 mg- 20 mg
Пример 3Example 3
Синбиотичен състав, включващ смес от лиофилизирани култури на живи клетки от бактериалните щамове Lactobacillus delbrueckiissp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus и поне един щам от род Bifidobacterium, за предпочитане например Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis или други подходящи от рода, както и инулин, лиофилизирана овча коластра, витамини, аромати и добавки под формата на саше със следното съдържание:A synbiotic composition comprising a mixture of lyophilized live cell cultures of the bacterial strains Lactobacillus delbrueckiissp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus and at least one strain of the genus Bifidobacterium, preferably for example Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis or other suitable genera, as well as inulin, lyophilized sheep colostrum, vitamins, flavors and additives in the form per sachet with the following content:
Смес от живи клетки (лиофилизат от бактериални щамове) - 1300 mgMixture of living cells (lyophilisate of bacterial strains) - 1300 mg
Инулин -930 mgInulin - 930 mg
Лиофилизирана овча коластра - 1000 mgLyophilized sheep colostrum - 1000 mg
Витамин D3 - 0,05 mg (50 pg)Vitamin D3 - 0.05 mg (50 pg)
Аромат бурбонска ванилия -50 mgBourbon vanilla flavor - 50 mg
Добавка магнезиев стеарат - 20 mgAdditive magnesium stearate - 20 mg
Пример 4Example 4
ИнулинInulin
Сухо овче млякоDry sheep's milk
Витамин D3Vitamin D3
Аромат бурбонска ванилияBourbon vanilla flavor
Добавка магнезиев стеаратMagnesium stearate additive
Пример 5Example 5
Синбиотичен състав, включващ смес от лиофилизирани култури на живи клетки от бактериалните щамове Lactobacillus delbrueckiissp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus и поне един щам от род Bifidobacterium, за предпочитане например Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis или други подходящи от рода, както и инулин, сухо овче мляко, витамини, аромати и добавки под формата на саше със следното съдържание:A synbiotic composition comprising a mixture of lyophilized live cell cultures of the bacterial strains Lactobacillus delbrueckiissp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus and at least one strain of the genus Bifidobacterium, preferably for example Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis or other suitable genera, as well as inulin, sheep's milk powder, vitamins, flavors and additives in the form per sachet with the following contents:
Смес от живи клетки (лиофилизат от бактериални щамове) - 1300 mgMixture of living cells (lyophilisate of bacterial strains) - 1300 mg
- 930 mg- 930 mg
- 1000 mg- 1000 mg
-0,05 mg (50 pg)-0.05 mg (50 pg)
- 50 mg - 20 mg- 50 mg - 20 mg
Лиофилизат (смес от живи клетки) от бактериални щамове, включващ два щама млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, един щам млечнокисела бактерия Lactobacillus acidophilus и един щам пробиотична бактерия и поне един щам от род Bifidobacterium, за предпочитане например Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis или други подходящи от рода със следното съдържание:A lyophilizate (mixture of live cells) of bacterial strains comprising two strains of lactic acid bacteria Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, one strain of lactic acid bacteria Lactobacillus acidophilus and one strain of probiotic bacteria and at least one strain of the genus Bifidobacterium, preferably for example Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium longum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium animalis, Bifidobacterium infantis or other suitable genera with the following content:
щама Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus - 650 mg щам Lactobacillus acidophilus - 350 mgthe strain Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus - 650 mg Lactobacillus acidophilus strain - 350 mg
Поне 1 щам представител на род Bifidobacterium - 300 mgAt least 1 strain representative of the genus Bifidobacterium - 300 mg
В следващо важно примерно изпълнение, съгласно настоящото изобретение, е представен метод за получаване на лиофилизирани култури от живи клетки от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus, което ще постигне желаните ефекти, чрез разкритите признаци в описанието и претенциите и които влизат в обхвата на настоящото изобретение, определен от претенциите. За реализация на метода, всички суровини с изключение на щамовете млечнокисели бактерии и водата постъпват в складовото стопанство със придружаващи документи и се съхраняват при условия описани от производителя. Завеждат се в дневник за входящ контрол. Лиофилизираните щамове млечнокисели бактерии се получават, поддържат и съхраняват в лаборатория, съгласно инструкция, водата подлежи на периодичен контрол.In another important exemplary embodiment, according to the present invention, a method for obtaining lyophilized cultures of live cells from the bacterial strains of lactic acid bacteria Lactobacillus delbrueckii ssp is presented. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus, which will achieve the desired effects by the features disclosed in the description and claims and which fall within the scope of the present invention as defined by the claims. For the implementation of the method, all raw materials except the strains of lactic acid bacteria and water enter the warehouse with accompanying documents and are stored under conditions described by the manufacturer. They are entered in an incoming control log. Lyophilized strains of lactic acid bacteria are obtained, maintained and stored in the laboratory, according to instructions, the water is subject to periodic control.
При метода за получаване на лиофилизирани култури от живи клетки от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus, всеки от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus се култивира по отделно в подходяща за вида хранителна среда на основата на мляко. Преди култивиране се започва с получаване на посевен материал като се прави посев с чиста култура на щама Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus или Lactobacillus acidophilus в сухо обезмаслено овче мляко, което е предварително стерилизирано в автоклав и възстановено до 10% сухо вещество, като чистата култура на всеки от щамовете се култивира в термостатен шкаф до постигане на коагулация за време между 6 и 8 часа при температура 42°С ± 1°С за щам Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и за време до 16 часа при температура 37°С ± ГС за щам Lactobacillus acidophilus, при което се получава посевен материал от активна стартерна култура.In the method for obtaining lyophilized cultures from living cells of the bacterial strains Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus, each of the bacterial strains Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus were cultured separately in species-appropriate milk-based medium. Before cultivation, start with obtaining inoculum by inoculating with a pure culture of the strain Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus or Lactobacillus acidophilus in dry skimmed sheep's milk that has been pre-sterilized in an autoclave and reconstituted to 10% dry matter, and the pure culture of each strain is cultivated in a thermostatic cabinet until coagulation is achieved for between 6 and 8 hours at a temperature of 42 °C ± 1°C for strain Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and for a time of up to 16 hours at a temperature of 37°С ± HS for a strain of Lactobacillus acidophilus, in which an inoculum is obtained from an active starter culture.
Преди култивирането се подготвя хранителна среда, за която е необходим стерилен 10% разтвор на дрождев екстракт. Стерилният 10% разтвор на дрождев екстракт се получава като във вода се разтваря дрождев екстракт в количество 100 g/l, което се претегля на везна за предпочитане с точност до 0,1 g. Полученият разтвор се стерилизира при 121°С за 15 минути и се охлажда до стайна температура. Подготовката на хранителната среда започва като в смесител се изсипва сухо обезмаслено овче мляко в количество 12% от работния обем на биореактора и се разбърква до хомогенизиране. Хомогенизираното сухо обезмаслено овче мляко се прехвърля в биореактора, където първоначално се добавя вода до запълване на 50% от работния обем на биореактора и се разбърква за период до 30 минути. След това се добавя останалото количество вода до запълване на целия работен обем на биореактора и отново се разбърква до получаване на хомогенна смес. Температурата се увеличава до 121°С ± 1°С и се поддържа в продължение на 20 ч- 30 минути при налягане в биореактора от 0,1 МРа. Следва охлаждане на биореактора до температура 42°С ± 1°С за Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus или до температура 37°С ± 1°С за Lactobacillus acidophilus. Преди посев с активната стартерна култура, се добавя стерилният 10% разтвор на дрождев екстракт до достигане на съдържание от 0,4% суха маса от обема на течната маса в биореактора. Така получената хранителна среда в биореактора е със съдържание на 12% сухо обезмаслено овче мляко, 0,4% дрождев екстракт и вода.Before cultivation, a culture medium is prepared, which requires a sterile 10% solution of yeast extract. The sterile 10% yeast extract solution is prepared by dissolving yeast extract in water in an amount of 100 g/l, which is weighed on a balance preferably to the nearest 0.1 g. The resulting solution was sterilized at 121°C for 15 minutes and cooled to room temperature. The preparation of the nutrient medium begins by pouring dry skimmed sheep's milk into a mixer in an amount of 12% of the working volume of the bioreactor and stirring until homogenization. The homogenized dry skimmed sheep's milk is transferred to the bioreactor, where water is initially added to fill 50% of the working volume of the bioreactor and stirred for a period of up to 30 minutes. Then add the remaining amount of water until the entire working volume of the bioreactor is filled and mix again until a homogeneous mixture is obtained. The temperature was increased to 121°C ± 1°C and maintained for 20 h-30 min at a bioreactor pressure of 0.1 MPa. The bioreactor is then cooled to a temperature of 42°C ± 1°C for Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus or up to a temperature of 37°C ± 1°C for Lactobacillus acidophilus. Prior to inoculation with the active starter culture, the sterile 10% yeast extract solution was added to a content of 0.4% dry mass by volume of liquid mass in the bioreactor. The nutrient medium thus obtained in the bioreactor has a content of 12% dry skimmed sheep's milk, 0.4% yeast extract and water.
За култивирането на микроорганизмите в биореактора е необходим стерилен 20% разтвор на NaOH. Стерилният 20% разтвор на NaOH се получава като във вода се разтваря NaOH в количество 200 g/l, което се претегля на везна за предпочитане с точност до 0,1 g. Полученият разтвор се стерилизира при 12ГС за 15 минути и се охлажда до стайна температура. Култивирането на микроорганизмите в биореактора започва като към хранителната среда в биореактора се добавя полученият посевен материал от активна стартерна култура в количество 1% ч- 3% от работния обем на биореактора. Култивирането на микроорганизмите се провежда при постоянно разбъркване 50 rpm и при температура 42°С ± 1°С за Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и при температура 37°С ± 1°С за Lactobacillus acidophilus. Със стерилния 20% разтвор на NaOH за щама Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus при достигане на pH 5,0 се правят три до пет последователни корекции до pH 5,7 на активната киселинност, докато за щама Lactobacillus acidophilus при достигане на pH 4,7 със стерилния 20% разтвор на NaOH се правят две последователни корекции до pH 5,7 на активната киселинност. За двата щама преди лиофилизация при достигане на pH 5,0 се прави една допълнителна корекция до pH 6,2 на активната киселинност. Получената културална среда се охлажда до 22°С и към нея при постоянно разбъркване се подава 20% разтвор на стерилно обезмаслено мляко в количество 2% от работният обем на биореактора. Следва охлаждане до 12°С за период до 30 минути и престой при същата температура за период от 30 минути до 1 час.A sterile 20% NaOH solution is required to cultivate the microorganisms in the bioreactor. The sterile 20% NaOH solution is prepared by dissolving NaOH in water in an amount of 200 g/l, which is weighed on a balance preferably to the nearest 0.1 g. The resulting solution was sterilized at 12°C for 15 minutes and cooled to room temperature. Cultivation of the microorganisms in the bioreactor begins by adding the seed material obtained from an active starter culture to the nutrient medium in the bioreactor in an amount of 1% h- 3% of the working volume of the bioreactor. Cultivation of the microorganisms was carried out under constant stirring at 50 rpm and at a temperature of 42°C ± 1°C for Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and at a temperature of 37°C ± 1°C for Lactobacillus acidophilus. With the sterile 20% NaOH solution for the strain Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus when pH 5.0 is reached, three to five consecutive adjustments are made to pH 5.7 of the active acidity, while for the Lactobacillus acidophilus strain, when pH 4.7 is reached with the sterile 20% NaOH solution, two consecutive pH adjustments are made 5.7 of active acidity. For both strains, before lyophilization, when pH 5.0 was reached, one additional adjustment to pH 6.2 was made for the active acidity. The resulting culture medium is cooled to 22°C and, with constant stirring, a 20% solution of sterile skimmed milk is added to it in an amount of 2% of the working volume of the bioreactor. This is followed by cooling to 12°C for a period of up to 30 minutes and staying at the same temperature for a period of 30 minutes to 1 hour.
Лиофилизирането се провежда като културалната среда от биореактора се подава към лиофилизатор с тави, в които културалната среда се разпределя на слой с дебелина 10 ч-11 mm. Л иофилизаторът се стартира под дълбок вакуум. Следва постепенно охлаждане до температура -40°С и задържане за замразяване при температура -40°С. След замразяването следва сушене, при което замразената културална среда постепенно се загрява до температура 35°С, която се поддържа до получаване на лиофилизат от изсушени лиофилизирани култури на всеки един от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus. Лиофилизатът има концентрация на живи клетки в диапазона от 109 до 1011 cfu/g и съдържа още лактоза в количество до 40 mg/g и лактулоза в диапазона от 2,5 до 5 mg/g.Lyophilization is carried out by feeding the culture medium from the bioreactor to a lyophilizer with trays, in which the culture medium is distributed in a layer with a thickness of 10 x 11 mm. The lyophilizer is started under deep vacuum. This is followed by gradual cooling to a temperature of -40°C and retention for freezing at a temperature of -40°C. Freezing is followed by drying, in which the frozen culture medium is gradually heated to a temperature of 35°C, which is maintained until a lyophilizate is obtained from dried lyophilized cultures of each of the bacterial strains of Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus. The lyophilizate has a live cell concentration in the range of 10 9 to 10 11 cfu/g and also contains lactose in an amount of up to 40 mg/g and lactulose in the range of 2.5 to 5 mg/g.
В предпочитано примерно изпълнение на метода за получаване на лиофилизирани култури от бактериалните щамове млечнокисели бактерии, съгласно настоящето изобретение, охлаждането при лиофилизирането започва за период от 1 час при температурата от 3°С, след което следва постепенно охлаждане за 1,5 часа до температурата от -40°С, като задържането за замразяване продължава за 1 час при температурата от -40°С.In a preferred exemplary embodiment of the method for obtaining lyophilized cultures of the bacterial strains of lactic acid bacteria according to the present invention, the cooling of the lyophilization starts for a period of 1 hour at the temperature of 3°C, followed by gradual cooling for 1.5 hours to the temperature of -40°C, with the freeze retention lasting for 1 hour at the temperature of -40°C.
В друго предпочитано примерно изпълнение на метода за получаване на лиофилизирани култури от бактериалните щамове млечнокисели бактерии, съгласно настоящето изобретение, постепенното загряване до температурата от 35°С за получаването на лиофилизата от изсушените лиофилизирани култури на всеки един от бактериалните щамове млечнокисели бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus и Lactobacillus acidophilus протича при следните условия: за период от 300 минути при температура 0°С и под вакуум от 66,66 Ра (500 тТогг); следващ период от 250 минути при температура 10°С и под вакуум от 39,99 Ра (300 тТогг), следващ период от 250 минути при температура 20°С и под вакуум от 33,33 Ра (250 тТогг), следващ период от 250 минути при температура 25°С и под вакуум от 26,66 Ра (200 тТогг), следващ период от 120 минути при температура 30°С и под вакуум от 13,33 Ра (100 тТогг), следващ период от 100 минути при температура 30°С и под вакуум от 6,66 Ра (50 тТогг) и процесът продължава при температура 35°С и под вакуум от 6,66 Ра (50 тТогг).In another preferred exemplary embodiment of the method for obtaining lyophilized cultures of the bacterial strains of lactic acid bacteria, according to the present invention, the gradual heating to the temperature of 35°C to obtain the lyophilization of the dried lyophilized cultures of each of the bacterial strains of lactic acid bacteria Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus and Lactobacillus acidophilus takes place under the following conditions: for a period of 300 minutes at a temperature of 0°C and under a vacuum of 66.66 Pa (500 tTog); a further period of 250 minutes at a temperature of 10°C and under a vacuum of 39.99 Pa (300 tTogg), a further period of 250 minutes at a temperature of 20°C and under a vacuum of 33.33 Pa (250 tTogg), a further period of 250 minutes at a temperature of 25°C and under a vacuum of 26.66 Pa (200 tTogg), a subsequent period of 120 minutes at a temperature of 30°C and under a vacuum of 13.33 Pa (100 tTogg), a subsequent period of 100 minutes at a temperature of 30 °C and under a vacuum of 6.66 Pa (50 tTogg) and the process continues at a temperature of 35°C and under a vacuum of 6.66 Pa (50 tTogg).
След приключване на процеса, готовият лиофилизат се смесва с предварително дозираните спомагателни материали и се пакетира в двукомпонентно алуминиево фолио. Съхранява се при температура под -18°С до две години.After completion of the process, the finished lyophilizate is mixed with pre-dosed auxiliary materials and packaged in two-component aluminum foil. It is stored at a temperature below -18°C for up to two years.
За получаването на синбиотичния състав се претеглят необходимите количества от всяка съставка, като процент от общото количество смес, необходима за получаване на партидата. Всички компоненти се пресяват през сито с размер на отвора 0,5 mm. Всички компоненти, с изключение на магнезиевия стеарат, се подават към смесител, в който се смесват в продължение на 30 минути. Към сместа се прибавя магнезиевият стеарат и се провежда повторно смесване в продължение на допълнителни 10 минути. Готовата смес се опакова под подходяща форма като таблети, капсули, гранули, течни бактериални суспензии, паста, прах или за предпочитане саше. Синбиотичният състав може да се съхранява в хладилни условия от 2 до 3 години, а при стайна температура от 12 до 24 месеца.For the preparation of the synbiotic composition, the necessary amounts of each ingredient are weighed as a percentage of the total amount of mixture required to prepare the batch. All components are sieved through a sieve with an opening size of 0.5 mm. All components, except for magnesium stearate, were fed to a mixer where they were mixed for 30 minutes. The magnesium stearate was added to the mixture and mixed again for an additional 10 minutes. The finished mixture is packaged in a suitable form such as tablets, capsules, granules, liquid bacterial suspensions, paste, powder or preferably sachets. The synbiotic composition can be stored in refrigerated conditions for 2 to 3 years, and at room temperature for 12 to 24 months.
Независимо от това, че настоящото изобретение е описано във връзка с предпочитаното примерно изпълнение, трябва да се отбележи, че са възможни и други вариантни изпълнения, очевидни за специалиста в областта, които ще постигнат желаните ефекти чрез разкритите признаци в настоящото описание и които не излизат от обхвата на настоящото изобретение, определен от претенциите.Although the present invention has been described in connection with the preferred embodiment, it should be noted that other alternative embodiments are possible, obvious to those skilled in the art, which will achieve the desired effects by the features disclosed in the present description and which do not arise from the scope of the present invention as defined by the claims.
Приложение на изобретениетоApplication of the invention
Синбиотичният състав представлява полезен и комплексен продукт, в състава на който влизат смес от лиофилизирани живи клетки на бактериалните щамове Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus и поне един щам от рода Bifidobacterium, суха овча коластра и/или сухо овче мляко, инулин със степен на полимеризация по-малка от 10 единици (за предпочитане между 5 и 8), лиофилизиран екстракт от охлюви (слуз) и витамин Оз, естествени овкусители и аромати. Всички комбинирани съставки на продукта имат сходно действие, но едновременно с това се допълват и внасят нови и допълнителни ефекти на въздействие върху човешкия организъм.The synbiotic composition is a useful and complex product, which includes a mixture of lyophilized living cells of the bacterial strains Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus and at least one strain of the genus Bifidobacterium, dry sheep colostrum and/or dry sheep milk, inulin with a degree of polymerization of less than 10 units (preferably between 5 and 8), lyophilized snail extract (mucus) and vitamin Oz, natural flavors and aromas. All the combined ingredients of the product have a similar effect, but at the same time complement each other and bring new and additional effects on the human body.
Комплексният характер на продуктът идва от специално подбраните щамове пробиотични бактерии Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus и Bifidobacterium, които поддържат и регулират бактериалния баланс на микрофлората на стомашно-чревния тракт при дисбактериози, диарии, стомашно-чревни инфекции, след лечение с антибиотици, а също така и при профилактика на усложнения вследствие прием на антибиотици, при нарушени функции на храносмилателната система (като подуване и киселини в стомаха, метеоризъм и запек, увреждане на чревната лигавица, лактазна недостатъчност). При редовна употреба продуктът нормализира имунната система, понижава алергичните реакции, потиска гнилостните бактерии, намалява повишеното газообразуване в червата; понижава нивата на „лошия холестерол при деца и възрастни.The complex nature of the product comes from specially selected strains of probiotic bacteria Lactobacillus delbrueckii ssp. bulgaricus, Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium, which support and regulate the bacterial balance of the microflora of the gastrointestinal tract in dysbacteriosis, diarrhea, gastrointestinal infections, after treatment with antibiotics, and also in the prevention of complications due to taking antibiotics, in disturbed functions of the digestive system (such as bloating and heartburn, flatulence and constipation, damage to the intestinal mucosa, lactase deficiency). With regular use, the product normalizes the immune system, reduces allergic reactions, suppresses putrefactive bacteria, reduces increased gas formation in the intestines; lowers levels of "bad cholesterol" in children and adults.
Родът Bifidobacterium включва различни грам-положителни, неподвижни анаеробни бактерии. Те са ендосимбиотични обитатели на стомашно-чревния тракт и вагината на бозайници, включително хора. Щамовете от рода Bifidobacterium често се използват като пробиотични бактерии, тъй като са известни със своето разнообразие от механизми на резистентност към жлъчните соли, което е важно, тъй като полезните ефекти на пробиотичните бактерии трябва да се генерират в присъствието на жлъчна сол. Щамове на Bifidobacteria, включително: Bifidobacterium infantis, В. adolescentis, В. animalissubsp. animalis, B. animalis subsp. lactis, B. bifidum, B. longum, B. breve се използват най-често като пробиотици. Доказано е, че видовете Bifidobacterium в комбинация с другите пробиотици лекуват запек, пътническа диария, диария, свързана с антибиотици, поддържат ремисия на болестната активност на възпаление на червата и умерен улцерозен колит, превенция, както и лечение на некротизиращ ентероколит при новородени, намаляване на радиационна диария, намаляване на развитието на риска от заболяване от екзема, хранителни алергии, способности за понижаване на холестерола.The genus Bifidobacterium includes a variety of Gram-positive, non-motile anaerobic bacteria. They are endosymbiotic inhabitants of the gastrointestinal tract and vagina of mammals, including humans. Strains of the genus Bifidobacterium are often used as probiotic bacteria because they are known for their variety of bile salt resistance mechanisms, which is important because the beneficial effects of probiotic bacteria must be generated in the presence of bile salt. Bifidobacteria strains including: Bifidobacterium infantis, B. adolescentis, B. animalissubsp. animalis, B. animalis subsp. lactis, B. bifidum, B. longum, B. breve are most commonly used as probiotics. Bifidobacterium species in combination with other probiotics have been shown to treat constipation, traveler's diarrhea, antibiotic-associated diarrhea, maintain remission of inflammatory bowel disease and moderate ulcerative colitis, prevent as well as treat neonatal necrotizing enterocolitis, reduce radiation diarrhea, reducing the risk of developing eczema, food allergies, cholesterol-lowering abilities.
Поради наличието на лиофилизиран екстракт от охлюви (слуз), продуктът оказва благоприятно влияние върху опорно-двигателния апарат, като укрепва ставните хрущяли и сухожилия, стимулира имунната система и има антиоксидантно и тонизиращо действие. Ще влияе благоприятно на подвижността на ставите и общото функционално състояние на организма. В екстракта от охлюви се съдържат регенеративни компоненти, като алантоин, колаген и еластин, които са доста близки до тези в човешката кожа. Така се стимулира образуването на нови еластинови, колагенови и пигментни клетки. Екстрактът на охлюва има специфични антимикробни свойства. Унищожава бактериите - Escherichia coli, Staphylococcus aureus и други, които често предизвикват възпаления. Поради наличието на редица пептиди, проявяващи антибактериални свойства, екстрактът от охлюви може успешно да се прилага в комбинация с антибиотична терапия срещу инфекции, причинени от Helicobacter pylori. Той действа като естествен антибиотик, и за разлика от лекарствата към него не се развива резистентност. Оказва благоприятен ефект върху храносмилателния тракт и стимулира имунната система. По този начин предлаганият продукт може успешно да се използва при стомашно-чревни проблеми.Due to the presence of lyophilized extract of snails (mucus), the product has a beneficial effect on the musculoskeletal system, strengthening joint cartilage and tendons, stimulating the immune system and having an antioxidant and toning effect. It will favorably affect the mobility of the joints and the general functional state of the body. Snail extract contains regenerative components, such as allantoin, collagen and elastin, which are quite close to those in human skin. Thus, the formation of new elastin, collagen and pigment cells is stimulated. Snail extract has specific antimicrobial properties. Destroys bacteria - Escherichia coli, Staphylococcus aureus and others, which often cause inflammation. Due to the presence of a number of peptides exhibiting antibacterial properties, snail extract can be successfully used in combination with antibiotic therapy against infections caused by Helicobacter pylori. It acts as a natural antibiotic, and unlike drugs, resistance to it does not develop. It has a beneficial effect on the digestive tract and stimulates the immune system. Thus, the proposed product can be successfully used for gastrointestinal problems.
Наличието на пребиотика инулин с ниска степен на полимеризация до 10 единици, която за предпочитане е между 5 и 8 единици, в продукта подпомага развитието на полезните бактерии от рода Bifidobacterium в дебелото черво, благоприятства за намаляване на нивото на кръвната захар и повишаване на физиологическата ефективност на инсулина; предотвратява развитието на диабетични ретинопатии, понижава вероятността за развитието на сърдечносъдови заболявания; нормализира въглехидратната и мастна обмяна при затлъстяване и помага за намаляването на излишната телесна маса, по естествен начин намалява чувството на глад.The presence of the prebiotic inulin with a low degree of polymerization of up to 10 units, which is preferably between 5 and 8 units, in the product supports the development of the beneficial bacteria of the Bifidobacterium genus in the colon, favors the reduction of the blood sugar level and the increase of physiological efficiency of insulin; prevents the development of diabetic retinopathies, reduces the likelihood of the development of cardiovascular diseases; normalizes carbohydrate and fat metabolism in obesity and helps to reduce excess body mass, naturally reduces the feeling of hunger.
Съдържащата се коластра (от елитната порода овце Лакон) в продукта доставя ценни елементи не само на подрастващия организъм, но и на всички останали. Доказано успокоява стомашната лигавица при гастрит и язва, стимулира възстановяването при херпес зостер, грип. Подпомага функциите на вътрешните органи и по-специално на тези, от които зависи състоянието на пациентите с диабет, хашимото. Лечебно въздействие оказва и при псориазис, невродермит и акне. Безспорен факт е, че коластрата е най-ценна за имунитета при хората. Тя е богата на антитела, които помагат на имунната система да се бори с различни алергени, „лоши бактерии, гъби и вируси. По този начин тя потушава възпалителните процеси и намалява интензитета на симптомите. Коластрата стимулира секрецията на секреторния имуноглобулин IgA, чийто нива са понижени при хора, страдащи от Синдрома на раздразнените черва, Синдрома на пропускливите черва, болест на Крон, улцерозен колит, кандида, аутизъм. Коластрата засилва регенериращите функции на чревния тракт и балансира имунния отговор, като намалява нивата на цитокините (протеини, предаващи на имунните клетки информация за настъпило възпаление). Растежните и имунните фактори в коластрата оказват надеждно съдействие в битката против рака. Счита се, че тя е способна да предотврати растежа на тези клетки и да ограничи разпространението им в тялото. Наличието на коластра от елитна порода овце в продукта заедно в комбинация с останалите съставки ще повлияе благоприятно при:The contained colostrum (from the elite breed of Lacon sheep) in the product supplies valuable elements not only to the growing organism, but also to everyone else. Proven to soothe the gastric mucosa in gastritis and ulcers, stimulate recovery in herpes zoster, flu. It supports the functions of the internal organs and in particular those on which the condition of patients with diabetes, Hashimoto's depends. It also has a therapeutic effect on psoriasis, neurodermatitis and acne. It is an indisputable fact that colostrum is most valuable for human immunity. It is rich in antibodies that help the immune system fight various allergens, “bad bacteria, fungi and viruses. In this way, it suppresses inflammatory processes and reduces the intensity of symptoms. Colostrum stimulates the secretion of the secretory immunoglobulin IgA, the levels of which are reduced in people suffering from irritable bowel syndrome, leaky bowel syndrome, Crohn's disease, ulcerative colitis, candida, autism. Colostrum strengthens the regenerative functions of the intestinal tract and balances the immune response by reducing the levels of cytokines (proteins that transmit information about inflammation to immune cells). The growth and immune factors in colostrum provide reliable assistance in the fight against cancer. It is believed to be able to prevent the growth of these cells and limit their spread in the body. The presence of colostrum from an elite breed of sheep in the product together with other ingredients will have a beneficial effect on:
• ревматиоден артрит - може да намали възпалението.• rheumatoid arthritis - can reduce inflammation.
• остеопороза и остеоартроза - спомага за изграждане плътността на костите.• osteoporosis and osteoarthritis - helps build bone density.
• трансплантация - имуноглобулините биха могли да помогнат за намаляване на гъбичните и бактериални инфекции.• transplant - immunoglobulins could help reduce fungal and bacterial infections.
• рак помагат цитокините в коластрата, защото притежават мощни интерлевкини.• cytokines in colostrum help cancer because they have powerful interleukins.
• вируса СПИН - намаляване на инфекциозните патогенни, които причиняват състоянията свързани с вируса.• the AIDS virus - reduction of infectious pathogens that cause conditions related to the virus.
• затлъстяване - може да помогне на тялото да усвои по-добре храната.• obesity - can help the body digest food better.
• възстановяване на кожата и намаляване последиците от стареенето.• restore the skin and reduce the effects of aging.
Claims (12)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BG113485A BG113485A (en) | 2022-02-24 | 2022-02-24 | Synbiotic formulation and method for the preparation of lyophilized cultures of lactic acid bacterial strains |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| BG113485A BG113485A (en) | 2022-02-24 | 2022-02-24 | Synbiotic formulation and method for the preparation of lyophilized cultures of lactic acid bacterial strains |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BG113485A true BG113485A (en) | 2023-08-31 |
Family
ID=89119782
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BG113485A BG113485A (en) | 2022-02-24 | 2022-02-24 | Synbiotic formulation and method for the preparation of lyophilized cultures of lactic acid bacterial strains |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| BG (1) | BG113485A (en) |
-
2022
- 2022-02-24 BG BG113485A patent/BG113485A/en unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20110165127A1 (en) | Dairy-derived probiotic compositions and uses thereof | |
| Kopp-Hoolihan | Prophylactic and therapeutic uses of probiotics: a review | |
| CN101616680B (en) | Agent for reducing visceral fat | |
| WO2007140621A1 (en) | Probiotic compositions and uses thereof | |
| EP0555618B1 (en) | Dietetic and/or pharmaceutical compositions containing lyophilized lactic bacteria | |
| CN109929779B (en) | Probiotic preparation containing bioactive peptide and preparation method and application thereof | |
| CN105535030A (en) | Lactobacillus rhamnosus and weight control | |
| CN110141585A (en) | A kind of composite probiotics ferment microbial inoculum and preparation method thereof for adjusting intestinal flora | |
| Araújo et al. | Probiotics in dairy fermented products | |
| Solomon et al. | Substantiation of the technology for fermented sour-milk desserts with bifidogenic properties | |
| Pandiyan et al. | Development of synbiotic ice cream incorporating Lactobacillus acidophilus and Saccharomyces boulardii. | |
| US20050106132A1 (en) | Growth promoting prebiotic for lactobacillus dietary supplements | |
| KR101707551B1 (en) | Method for Preparing Chocolates Containing Viable Preparations of Lactic Acid Bacteria | |
| CN106954673A (en) | A kind of dairy products comprising probiotics and preparation method thereof | |
| RU2426438C2 (en) | Synbiotic composition for correction of intestinal tract microbiocenosis abnormalities and enhancement of organism general resistivity and its production methods (versions) | |
| CN106879739A (en) | A kind of microbial fermentation lactic acid formulation for containing four class viable bacterias and preparation method thereof | |
| JP2013518573A (en) | Improvement of immunomodulatory properties of Lactobacillus strains | |
| EP2076139B1 (en) | Probiotic strain lactobacillus delbrueckii subsp . bulgaricus | |
| BG113485A (en) | Synbiotic formulation and method for the preparation of lyophilized cultures of lactic acid bacterial strains | |
| RU2130269C1 (en) | Method of preparing symbiotic fermented-milk product "bifacyl" | |
| CN106234590A (en) | A kind of preparation method of symphysis unit milk beverage | |
| BG4273U1 (en) | Synbiotic composition | |
| RU2225438C2 (en) | Consortium of microorganisms mbi-4 consisting of bifidobacterium bifidum b-2, bifidobacterium infantis bi-7, bifidobacterium longum bl-5, bifidobacterium adolescentis mc-42 used for preparing fermented-milk foodstuffs | |
| RU2752891C1 (en) | Consortium of bifidobacterium used to prepare bifidobacterium products and strains that are part of consortium | |
| CN106135410A (en) | Honey acidophilus milk and preparation method thereof |