RU2104706C1 - Method of bifido-containing preparation making - Google Patents

Method of bifido-containing preparation making Download PDF

Info

Publication number
RU2104706C1
RU2104706C1 RU96117937A RU96117937A RU2104706C1 RU 2104706 C1 RU2104706 C1 RU 2104706C1 RU 96117937 A RU96117937 A RU 96117937A RU 96117937 A RU96117937 A RU 96117937A RU 2104706 C1 RU2104706 C1 RU 2104706C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
milk
bifidobacteria
concentrate
cfu
nutrient medium
Prior art date
Application number
RU96117937A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU96117937A (en
Inventor
В.И. Байбаков
А.В. Молокеев
Л.Г. Никулин
Т.Л. Карих
Ю.Н. Мистюрин
Original Assignee
Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор" filed Critical Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии "Вектор"
Priority to RU96117937A priority Critical patent/RU2104706C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2104706C1 publication Critical patent/RU2104706C1/en
Publication of RU96117937A publication Critical patent/RU96117937A/en

Links

Images

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

FIELD: medicine, food industry, veterinary science. SUBSTANCE: method involves addition of bacterium culture Bifidobacterium bifidum sowing dose to nutrient medium containing base nutrient medium with additions of cysteine hydrochloride, baker's yeast autolyzate, D-(-)-lactose, ascorbic acid and milk pancreatic hydrolyzate. Sterile milk at dry residue content 11-14% is used as nutrient medium base. Culturing is carried out to biological titer of bifidobacteria concentrate (0.8-1.0) x 1010 CFU/ml, not less, at acidity 100-120 degrees T followed by cooling and package of ready product. For bifidokefir preparing milk is subjected for thermic treatment, cooled to fermentation point; kefir ferment and bifidobacterium biomass were added successively to milk followed by fermentation, cooling and package of ready product. For bifidomilk preparing milk is subjected for thermic treatment, cooled to 18-25 C and bifidobacterium biomass is added to milk followed by stirring, cooling and package of ready product. Bacterium concentrate of Bifidobacterium bifidum at biotiter (0.8-1.0) x 1010 CFU/ml is used as bifidobacterium biomass at the following ratio of components, wt.-%: bifidobacterium concentrate 0.05-0.2, and milk - the rest to 100%. EFFECT: improved method of preparing. 4 cl, 3 tbl

Description

Изобретение относится к технологии получения бифидосодержащих препаратов, в частности бифидоконцентрата, бифидокефира и бифидомолока, и может быть использовано в медицине, ветеринарии и пищевой промышленности. The invention relates to a technology for producing bifid-containing preparations, in particular bifidoconcentrate, bifidokefir and bifidomolok, and can be used in medicine, veterinary medicine and the food industry.

Известен способ получения концентрата бифидобактерий, включающий введение посевной дозы культуры бактерий Bifidobacterium bifidum в питательную среду, содержащую основу (стерильное молоко), панкреатический гидролизат молока, пептон, хлористый натрий, лактозу, цистин солянокислый и агар с последующим выращиванием культуры Bifidobacterium bifidum при температуре 38oC до получения концентрата биомассы бифидобактерий, фасовку и лиофильную сушку готового продукта (Фармстатья ФС 42-132 ВС-94) [1]. Доза сухого бифидумбактерина содержит 107 - 108 живых клеток. Препарат обладает определенными иммунобиологическими свойствами и его рекомендуют применять в сухой форме.A method of obtaining a concentrate of bifidobacteria comprising administering an inoculum culture of bacteria Bifidobacterium bifidum in a nutrient medium containing the substrate (sterile milk), pancreatic hydrolyzate of milk, peptone, sodium chloride, lactose, cystine hydrochloride, and agar, followed by cultivation of culture Bifidobacterium bifidum at 38 o C to obtain a biomass concentrate of bifidobacteria, packing and freeze drying of the finished product (Pharmaceutical article FS 42-132 BC-94) [1]. The dose of dry bifidumbacterin contains 10 7 - 10 8 living cells. The drug has certain immunobiological properties and is recommended for use in dry form.

Однако лиофильно высушенные бифидобактерии в этом препарате находятся в состоянии анабиоза, обладают пониженной адгезионной способностью к эпителию пищеварительного тракта. Процесс перехода лиофильно высушенных бактерий в активную физиологическую форму занимает 6 - 8 ч. За это время кишечный тракт, как правило, частично или полностью очищается естественным путем, что снижает лечебный эффект препарата. При приготовлении кисломолочных продуктов на основе сухого бифидоконцентрата необходимо осуществление стадии "оживления" лиофильно высушенных бактерий, что занимает до 8 ч и усложняет технологический процесс приготовления продукта. However, lyophilized dried bifidobacteria in this preparation are in a state of suspended animation, have a reduced adhesive ability to the epithelium of the digestive tract. The process of transition of lyophilized dried bacteria into an active physiological form takes 6-8 hours. During this time, the intestinal tract, as a rule, is partially or completely cleaned naturally, which reduces the therapeutic effect of the drug. When preparing fermented milk products based on dry bifidoconcentrate, it is necessary to carry out the stage of “revitalization” of freeze-dried bacteria, which takes up to 8 hours and complicates the process of preparing the product.

Известен способ получения бифидокефира, включающий стадию "оживления" в течение 8 ч клеток бифидобактерий, находящихся в анабиозе в сухой форме, термическую обработку и охлаждение молока до температуры заквашивания, одновременное или последовательное введение в молоко кефирной закваски и биомассы живых клеток бифидобактерий с последующим сквашиванием биомассы до кислотности 60 - 70oT, охлаждением и фасовкой готового продукта. Перед термической обработкой в молоко вносят лимоннокислые соли натрия и/или калия в количестве 0,01 - 0,05% от массы молока (пат. РФ N 2011352, кл. A 23 C 9/127, опубл. 30.04.94) [2].A known method for producing bifidokephir, comprising the stage of “revitalizing” bifidobacteria cells in dry form for 8 hours, heat treatment and cooling the milk to the fermentation temperature, simultaneous or sequential introduction of kefir fermentation and biomass of living bifidobacteria cells into the milk, followed by fermentation of the biomass to acidity 60 - 70 o T, cooling and packaging of the finished product. Before heat treatment, sodium citrate and / or potassium salts are added to milk in an amount of 0.01-0.05% by weight of milk (US Pat. RF N 2011352, class A 23 C 9/127, publ. 30.04.94) [2 ].

Недостатками данного способа [2] являются сложность технологии получения бифидокефира, недостаточный срок его хранения вследствие низкой кислотности продукта [1] (не более 60 - 70oT) и более слабая устойчивость продукта к контаминации извне.The disadvantages of this method [2] are the complexity of the technology for producing bifidokefir, insufficient shelf life due to the low acidity of the product [1] (not more than 60 - 70 o T) and weaker resistance of the product to external contamination.

Известен способ получения бифидосодержащего молочного продукта (бифидомолока) - антацидного бифилакта (Значение дефицита бифидофлоры при гастроэнтерологических заболеваниях у детей и коррекция ее антацидным бифалактом. В кн. : Бифидобактерии и их использование в клинике, медицинской промышленности и сельском хозяйстве. М., 1986, с. 122 - 127) [3]. Способ предусматривает пастеризацию молока, внесение лактозы и кукурузного крахмала из расчета 30 г на 1 л молока, стерилизацию этой смеси, которую затем охлаждают до температуры 37oC и вносят лизоцим (0,5 г на 1 л) и по 50 г рабочих заквасок лакто- и бифидобактерий. После тщательного перемешивания продукт разливают и выдерживают в термостате в течение 18 - 20 ч с последующим охлаждением до температуры хранения. Рабочую закваску бифидобактерий готовят из сухого бифидумбактерина (1,25 дозы на 1 л) путем пересадок. Полученный продукт обладает пониженной кислотностью (27 - 32oT, pH 5,8 - 6,0), содержит до 108 живых бифидобактерий в 1 мл продукта и может использоваться в профилактических и лечебно-диетических целях.A known method for producing a bifid-containing dairy product (bifidomolok) - antacid bifylact (The value of bifidoflora deficiency in gastroenterological diseases in children and correction of its antacid bifalact. In the book: Bifidobacteria and their use in the clinic, medical industry and agriculture. M., 1986, p. . 122 - 127) [3]. The method involves pasteurization of milk, the introduction of lactose and corn starch at a rate of 30 g per 1 liter of milk, sterilization of this mixture, which is then cooled to a temperature of 37 o C and make lysozyme (0.5 g per 1 liter) and 50 g of working starter cultures - and bifidobacteria. After thorough mixing, the product is poured and kept in a thermostat for 18 to 20 hours, followed by cooling to storage temperature. Working starter culture of bifidobacteria is prepared from dry bifidumbacterin (1.25 doses per 1 liter) by transplant. The resulting product has a low acidity (27 - 32 o T, pH 5.8 - 6.0), contains up to 10 8 live bifidobacteria in 1 ml of the product and can be used for preventive and therapeutic dietary purposes.

Недостатками способа являются технологическая сложность и трудоемкость его реализации, т.к. использование сухого бифидопрепарата предполагает приготовление рабочей закваски путем пересадок и проведение процесса заквашивания, предъявляющего высокие санитарно-эпидемиологические требования к технологии изготовления продукта. The disadvantages of the method are the technological complexity and the complexity of its implementation, because the use of dry bifidopreparation involves the preparation of working starter culture by transplantation and the conduct of the fermentation process, presenting high sanitary and epidemiological requirements for the technology of product manufacturing.

Наиболее близким аналогом (прототипом) является способ получения биомассы бифидобактерий, включающий глубинное выращивание культуры бифидобактерий на питательной среде, содержащей основу, панкреатический гидролизат казеина, автолизат пекарских дрожжей, глюкозу, калий фосфорнокислый однозамещенный, аммоний лимоннокислый трехзамещенный, натрий хлористый, магний сернокислый семиводный и цистин, выращивание культуры бифидобактерий до получения концентрата биомассы с последующим ее обезвоживанием в присутствии защитной среды и сушку продукта (пат. РФ N 2005119, кл. C 12 N 1/20, опубл. 30.12.93) [4]. Целевой продукт имеет более высокую биологическую активность по сравнению с аналогом [1] . На основе указанного концентрата бифидобактерий могут быть приготовлены такие молочные продукты, как бифидокефир или бифидомолоко. The closest analogue (prototype) is a method for producing biomass of bifidobacteria, including the deep cultivation of a culture of bifidobacteria on a nutrient medium containing a base, casein pancreatic hydrolyzate, baker's yeast autolysate, glucose, potassium phosphate monosubstituted, ammonium citrate, sodium sulfate, and sodium sulfate. growing a culture of bifidobacteria to obtain a biomass concentrate, followed by dehydration in the presence of a protective environment and drying product (US Pat. RF N 2005119, class C 12 N 1/20, publ. 30.12.93) [4]. The target product has a higher biological activity compared to the analogue [1]. Based on said bifidobacterium concentrate, dairy products such as bifidokephir or bifidomoloko can be prepared.

Однако данный способ сложен с реализации, т.к. может быть осуществлен только в условиях глубинного культивирования в ферментере с непрерывным перемешиванием среды, приборным отслеживанием и корректировкой ряда параметров культуральной среды. При применении препарата в сухом виде он имеет недостаточно высокую эффективность действия, т.к. лиофильно высушенные бифидобактерии в этом препарате находятся в состоянии анабиоза, обладают пониженной адгезионной способностью к эпителию пищеварительного тракта. Процесс перехода лиофильно высушенных бактерий в активную физиологическую форму занимает 6 - 8 ч. За это время кишечный тракт, как правило, частично или полностью очищается естественным путем, что снижает лечебный эффект препарата. Кроме того, при приготовлении кисломолочных продуктов на основе сухого бифидумбактерина необходимо осуществление стадии "оживления" лиофильно высушенных бактерий, что занимает от 8 ч и усложняет технологический процесс приготовления продукта. However, this method is difficult to implement, because can be carried out only under conditions of deep cultivation in a fermenter with continuous mixing of the medium, instrument tracking and adjustment of a number of parameters of the culture medium. When using the drug in dry form, it does not have a sufficiently high effectiveness, because freeze-dried bifidobacteria in this preparation are in a state of suspended animation, have a reduced adhesive ability to the epithelium of the digestive tract. The process of transition of lyophilized dried bacteria into an active physiological form takes 6-8 hours. During this time, the intestinal tract, as a rule, is partially or completely cleaned naturally, which reduces the therapeutic effect of the drug. In addition, when preparing fermented milk products based on dry bifidumbacterin, it is necessary to carry out the stage of “revitalization” of freeze-dried bacteria, which takes 8 hours and complicates the technological process of preparing the product.

Задачей предлагаемого изобретения является создание такого способа получения бифидосодержащих продуктов, который мог бы быть реализован более простыми техническими средствами, а приготовляемые препараты обладали бы более высокой активностью и длительностью хранения в жидкой форме без значительного изменения биологического титра. The objective of the invention is the creation of such a method for producing bifid-containing products, which could be implemented by simpler technical means, and the prepared preparations would have higher activity and longer storage in liquid form without a significant change in biological titer.

Указанная задача решается тем, что в способе получения бифидосодержащих продуктов, включающем введение посевной дозы культуры бактерий Bifidobacterium bifidum в питательную среду, содержащую основу питательной среды с добавками цистина солянокислого и автолизата пекарских дрожжей, и выращивание культуры Bifidobacterium bifidum при температуре (37 - 38) ± 0,5oC до получения концентрата биомассы бифидобактерий, охлаждение и фасовку готового продукта, согласно изобретению в питательную среду дополнительно вводят D(-)-лактозу, аскорбиновую кислоту, панкреатический гидролизат молока, в качестве основы питательной среды используют стерильное молоко с содержанием сухого остатка молока (СОМО) 11 - 14% при следующем соотношении компонентов питательной среды, мас.%:
панкреатический гидролизат молока - 7,0 - 9,0
D(-)-лактоза - 0,05 - 0,15
цистин солянокислый - 0,001 - 0,007
аскорбиновая кислота - 0,003 - 0,009
автолизат пекарских дрожжей - 0,5 - 2,0
стерильное молоко (основа) - до 100%
Причем посевную дозу культуры бактерий Bifidobacterium bifidum вносят в объеме 5 - 7% от объема питательной среды с титром (5•107 - 5•108) КОЕ/мл, а культивирование осуществляют в течение времени, достаточного для получения концентрата бифидобактерий с биологическим титром не менее (0,8 - 1,0)•1010 КОЕ/мл и кислотностью 100 - 120oT.
This problem is solved by the fact that in the method for producing bifid-containing products, including the introduction of a sowing dose of a culture of Bifidobacterium bifidum bacteria in a nutrient medium containing the basis of a nutrient medium with the addition of cystine hydrochloride and baker's yeast autolysate, and growing a Bifidobacterium bifidum culture at a temperature of (37 - 38) ± 0.5 o C to obtain a biomass concentrate of bifidobacteria, cooling and packaging of the finished product, according to the invention, D (-) - lactose, ascorbic acid, pancreatic acid are additionally introduced into the nutrient medium milk hydrolyzate, sterile milk with a dry milk content (SOMO) of 11-14% is used as the basis of the nutrient medium in the following ratio of the components of the nutrient medium, wt.%:
pancreatic hydrolyzate of milk - 7.0 - 9.0
D (-) - lactose - 0.05 - 0.15
hydrochloric cystine - 0.001 - 0.007
ascorbic acid - 0.003 - 0.009
baker's yeast autolysate - 0.5 - 2.0
sterile milk (base) - up to 100%
Moreover, the inoculum dose of the culture of bacteria Bifidobacterium bifidum contribute in the amount of 5 - 7% of the volume of the nutrient medium with the titer (5 • 10 7 - 5 • 10 8 ) CFU / ml, and the cultivation is carried out for a time sufficient to obtain a concentrate of bifidobacteria with biological titer not less than (0.8 - 1.0) • 10 10 CFU / ml and acidity 100 - 120 o T.

В качестве культуры бактерий Bifidobacterium bifidum используют штамм N 791 (ЦМПМ "ВНИИ Генетика" В-3300), а культивирование осуществляют в течение 18 - 24 ч. As a culture of bacteria Bifidobacterium bifidum, strain N 791 (TsMPM VNII Genetika B-3300) was used, and cultivation was carried out for 18-24 hours.

Культивирование бифидобактерий на предлагаемой молочной среде позволяет реализовать технологию без корректировки pH в обычном термостате без использования дорогостоящих ферментов, перемешивающих устройств и контрольно-измерительного оборудования. The cultivation of bifidobacteria on the proposed dairy medium allows you to implement the technology without adjusting the pH in a conventional thermostat without the use of expensive enzymes, mixing devices and instrumentation.

Более высокий процент (11 - 14%) сухого остатка молока (СОМО) по сравнению со стандартным (8 - 9%) обеспечивает усиление антибиотических (антагонистических) свойств бифидобактерий, а также позволяет получать более плотный и устойчивый гомогенный сгусток биомассы с более высокой концентрацией бифидобактерий (Костина Я.И. Сборник научных трудов. М.: Агропромиздат, 1986, с. 38 - 40) [5]. A higher percentage (11 - 14%) of milk dry residue (SOMO) compared to the standard (8 - 9%) provides an increase in the antibiotic (antagonistic) properties of bifidobacteria and also allows for a denser and more stable homogeneous biomass clot with a higher concentration of bifidobacteria (Kostina Y.I. Collection of scientific works. M: Agropromizdat, 1986, p. 38 - 40) [5].

Введение в основу среды панкреатического гидролизата белков молока обеспечивает обогащение ее смесью высокомолекулярных и низкомолекулярных пептидов, которые являются более эффективными стимуляторам роста бифидобактерий, чем используемые в прототипе [4] пептиды гидролизата казеина (Т.М. Эрвольдер, А. В. Гудков и Л.П. Семенова. Воздействие ферментативных гидролизатов на накопление биомассы бифидобактерий. Журн. "Молочная промышленность", N 12, 1980, с. 15 - 17) [6]. The introduction of the medium of pancreatic hydrolyzate of milk proteins into the medium ensures its enrichment with a mixture of high molecular weight and low molecular weight peptides, which are more effective stimulators of growth of bifidobacteria than the casein hydrolyzate peptides used in the prototype [4] (TM Ervolder, A. V. Gudkov and L. P. Semenova. The effect of enzymatic hydrolysates on the accumulation of biomass of bifidobacteria. Journal of Dairy Industry, N 12, 1980, pp. 15-17) [6].

Автолизат пекарских дрожжей содержит витамины и стимулирующие факторы роста бифидобактерий Bifidobacterium bifidum. Baker's yeast autolysate contains vitamins and stimulating growth factors for Bifidobacterium bifidum bifidobacteria.

D(-)-лактоза является для клеток бифидобактерий стрессовым фактором и обеспечивает инициацию полиморфности клеток бифидобактерий (палочкообразные, коккоидные и переходные между ними формы). Полиморфность клеток в популяции придает ей дополнительную устойчивость к неблагоприятным факторам внешней среды, т.е. обеспечиваются более длительные сроки хранения препарата бифидобактерий в жидкой форме без потери активности (Лазарева Г.И. Автореферат дисс. к.б.н. Изучение физиологических свойств и структурно-функциональной организации бифидобактерий. Минск, 1991, 25 с.) [7]. D (-) - lactose is a stress factor for bifidobacteria cells and provides the initiation of polymorphism of bifidobacteria cells (rod-shaped, coccoid and transitional forms between them). The polymorphism of cells in a population gives it additional resistance to adverse environmental factors, i.e. provides longer shelf life of the preparation of bifidobacteria in liquid form without loss of activity (Lazareva GI Abstract of dissertation, Ph.D. Study of the physiological properties and structural-functional organization of bifidobacteria. Minsk, 1991, 25 pp.) [7].

Аскорбиновая кислота в питательной среде обеспечивает более быстрое создание анаэробных условий культивирования клеток и более высокую устойчивость бифидобактерий к повреждающим факторам. Ascorbic acid in a nutrient medium provides faster creation of anaerobic conditions for cell cultivation and higher resistance of bifidobacteria to damaging factors.

Предлагаемая питательная среда, используемая для получения концентрата бифидобактерий, имеет более простой состав по сравнению с известными питательными средами того же назначения, используемыми в прототипе и аналогах. The proposed nutrient medium used to obtain a concentrate of bifidobacteria has a simpler composition compared to known nutrient media of the same purpose used in the prototype and analogues.

Снижение количественного содержания компонентов питательной среды ниже нижнего предела ведет к ухудшению качества бифидоконцентрата, т.е. к снижению его биотитра, антагонистических свойств и срока хранения. Увеличение количественного содержания компонентов питательной среды выше верхнего предела их концентрации ведет к удорожанию концентрата бифидобактерий без существенного улучшения качества продукта. A decrease in the quantitative content of nutrient components below the lower limit leads to a deterioration in the quality of bifidoconcentrate, i.e. to reduce its biotitre, antagonistic properties and shelf life. An increase in the quantitative content of nutrient medium components above the upper limit of their concentration leads to an increase in the cost of bifidobacteria concentrate without a significant improvement in product quality.

Для получения бифидокефира к концентрату бифидобактерий Bifidobacterium bifidum с биотитром (0,8 - 1,0)•1010 КОЕ/мл добавляют термически обработанное и охлажденное молоко и кефирную закваску при следующем количественном соотношении компонентов смеси, мас.%:
концентрат бифидобактерий - 0,1 - 0,5
кефирная закваска - 4,0 - 6,0
молоко - остальное,
сквашивают материал до кислотности 80 - 100oT и концентрации бифидобактерий не менее (1 - 5)•107 КОЕ/мл с последующими охлаждением и фасовкой готового продукта.
To obtain bifidokefir to the concentrate of bifidobacteria Bifidobacterium bifidum with biotiter (0.8 - 1.0) • 10 10 CFU / ml add heat-treated and chilled milk and kefir starter in the following quantitative ratio of the components of the mixture, wt.%:
bifidobacteria concentrate - 0.1 - 0.5
kefir sourdough - 4.0 - 6.0
milk - the rest
ferment the material to an acidity of 80 - 100 o T and a concentration of bifidobacteria of not less than (1 - 5) • 10 7 CFU / ml, followed by cooling and packaging of the finished product.

Использование в способе получения бифидосодержащих продуктов предлагаемого концентрата бифидобактерий, содержащего полиморфные клетки Bifidobacterium bifidum, смесь высокомолекулярных и низкомолекулярных пептидов гидролизата молока, витамины и стимулирующие факторы роста бифидобактерий автолизата пекарских дрожжей, позволяет снизить посевную дозу бифидобактерий по сравнению с аналогом [2] в 4 - 8 раз, т.е. в процессе сквашивания продукта (получения бифидокефира) обеспечивается конкурентная устойчивость бифидобактерий по отношению к доминирующим кефирным микроорганизмам даже при соотношении бифидобактерий и кефирных микроорганизмов 1:4 - 8 (в аналоге [2] это соотношение составляет 1:1 - 1:2). The use of the proposed bifidobacterium concentrate containing polymorphic Bifidobacterium bifidum cells, a mixture of high molecular weight and low molecular weight peptides of milk hydrolyzate, vitamins and stimulating growth factors of bifidobacterium autolysate of baker's yeast in the method for producing bifidobacteria products allows to reduce the inoculum dose of bifidobacteria 2 compared to 4 bifidobacteria times i.e. in the process of acidification of the product (production of bifidokefir), the competitive stability of bifidobacteria against the dominant kefir microorganisms is ensured even when the ratio of bifidobacteria and kefir microorganisms is 1: 4–8 (in the analogue of [2], this ratio is 1: 1 - 1: 2).

Кроме того, полиморфность бифидобактерий и более высокая кислотность бифидокефира позволяют увеличить срок хранения бифидокефира до 3 - 5 сут. без инактивации в нем бифидобактерий и повысить устойчивость продукта к внешним контаминирующим факторам. In addition, the polymorphism of bifidobacteria and the higher acidity of bifidokephir can increase the shelf life of bifidokephir to 3-5 days. without inactivating bifidobacteria in it and increase the resistance of the product to external contaminating factors.

Увеличение количества концентрата бифидобактерий в молоке выше верхнего пределах концентрации его в молоке приводит к значительному удорожанию получаемого бифидокефира (более чем на 10%), что делает его неконкурентноспособным на рынке. При уменьшении количества бифидоконцентрата в молоке ниже 0,1 мас. % значительно снижается концентрация бифидобактерий в кефире, т.е. ухудшается качество готового продукта. An increase in the amount of bifidobacteria concentrate in milk above the upper limits of its concentration in milk leads to a significant increase in the cost of bifidokephir obtained (by more than 10%), which makes it uncompetitive in the market. With a decrease in the amount of bifidoconcentrate in milk below 0.1 wt. % the concentration of bifidobacteria in kefir is significantly reduced, i.e. the quality of the finished product is deteriorating.

Для получения бифидомолока к концентрату бифидобактерий Bifidobacterium bifidum с биотитром (0,8 - 1,0)•1010 КОЕ/мл добавляют термически обработанное и охлажденное молоко при следующем количественном соотношении компонентов смеси, мас.%:
концентрат бифидобактерий - 0,05 - 0,2
молоко - остальное до 100%
с последующими перемешиванием, охлаждением и фасовкой готового продукта.
To obtain bifidomolk, bifidobacterium bifidum concentrate of bifidobacteria with biotiter (0.8 - 1.0) • 10 10 CFU / ml add heat-treated and chilled milk in the following quantitative ratio of the components of the mixture, wt.%:
bifidobacteria concentrate - 0.05 - 0.2
milk - the rest is up to 100%
with subsequent mixing, cooling and packaging of the finished product.

Увеличение количества концентрата бифидобактерий выше верхнего предела концентрации его в молоке приводит к значительному удорожанию получаемого бифидомолока, что делает его неконкурентноспособным на рынке. При уменьшении количества бифидоконцентрата в молоке ниже 0,05 мас.% значительно снижается концентрация бифидобактерий в продукте, т.е. ухудшается его качество, и при этом слабо проявляется лечебно-профилактический эффект. An increase in the amount of bifidobacteria concentrate above the upper limit of its concentration in milk leads to a significant increase in the cost of the obtained bifidobacteria, which makes it uncompetitive in the market. With a decrease in the amount of bifidoconcentrate in milk below 0.05 wt.%, The concentration of bifidobacteria in the product significantly decreases, i.e. its quality is deteriorating, and at the same time, the therapeutic effect is weakly manifested.

Концентрат бифидобактерий вводят в организм человека или животных с пищей в дозе (2 - 4)•109 КОЕ/кг веса в сутки или перорально в дозе (1 - 2)•109 КОЕ/кг веса в сутки в течение 21 - 30 сут.The bifidobacteria concentrate is introduced into the human or animal body with food at a dose of (2 - 4) • 10 9 CFU / kg of weight per day or orally at a dose of (1 - 2) • 10 9 CFU / kg of weight per day for 21 - 30 days .

Бифидокефир вводят в организм в дозе 150 - 300 мл в сутки и концентрации в нем бифидобактерий не менее (1 - 5)•107 КОЕ/мл в течение 15 - 21 сут.Bifidokefir is introduced into the body at a dose of 150 - 300 ml per day and the concentration of bifidobacteria in it is at least (1 - 5) • 10 7 CFU / ml for 15 - 21 days.

Причем концентрат бифидобактерий и бифидокефир могут вводиться в организм одновременно в течение 10 - 15 сут. или вначале применяют бифидоконцентрат в течение 15 сут., а затем - бифидокефир в течение 15 сут. Moreover, the bifidobacteria concentrate and bifidokefir can be introduced into the body at the same time within 10 - 15 days. or first use bifidoconcentrate for 15 days., and then bifidokephir for 15 days.

Бифидомолоко вводят в организм человека перорально в дозе (0,5 - 2,0)•107 КОЕ/кг веса в сутки в течение 15 - 30 сут.Bifidomolok is orally administered to the human body at a dose of (0.5 - 2.0) • 10 7 CFU / kg of body weight per day for 15 to 30 days.

Концентрат бифидобактерий и бифидокефир, изготовленные предлагаемыми способами, обладают более высокой антагонистической активностью по сравнению с известными аналогами, что позволяет проводить иммунокоррекцию организма, лечить дисбактериозы, диспепсию и дизентерию без применения антибиотиков. Бифидомолоко позволяет более эффективно проводить профилактику заболеваний кишечника. The bifidobacterium concentrate and bifidokephir made by the proposed methods have a higher antagonistic activity compared to the known analogues, which allows immunocorrection of the body, treatment of dysbiosis, dyspepsia and dysentery without the use of antibiotics. Bifidomoloko allows for more effective prevention of intestinal diseases.

Обоснование лечебных доз концентрата бифидобактерий, бифидокефира и бифидомолока, а также длительности их применения проведено экспериментально на животных и на основе анализа литературных данных, касающихся применения указанных продуктов. Более низкие дозы препаратов снижают эффективность лечения организма и значительно увеличивают сроки приема препаратов. Более высокие дозы препаратов не влияют существенно на сроки и эффективность лечения. The rationale for therapeutic doses of a concentrate of bifidobacteria, bifidokefir and bifidomolok, as well as the duration of their use, was carried out experimentally in animals and based on an analysis of the literature on the use of these products. Lower doses of drugs reduce the effectiveness of treatment of the body and significantly increase the timing of taking the drugs. Higher doses of drugs do not significantly affect the timing and effectiveness of treatment.

Пример 1. Технология приготовления концентрата бифидобактерий
Вначале приготавливают питательную среду следующего состава:
стерильное обезжиренное молоко с содержанием СОМО не менее 12 - 14% - 9000 г
панкреатический гидролизат молока - 815 г
D(-)-лактоза - 10,5 г
цистин солянокислый - 0,1 г
аскорбиновая кислота - 0,5 г
автолизат пекарских дрожжей - 120 мл
В питательную среду вводят посевную дозу культуры бифидобактерий Bifidobacterium bifidum штамм N 791 в количестве 500 мл с титром 7•107 КОЕ/мл и культивируют в термостате при температуре 37,5oC в течение 18 - 24 ч до образования плотного равномерного сгустка. Кислотность полученной биомассы концентрата бифидобактерий находится в пределах 100 - 120oT, а биологический титр клеток составляет 1•1010 КОЕ/мл. Концентрат имеет срок хранения до 2 месяцев (в условиях холодильника), что значительно больше, чем у кисломолочного бифидумбактерина.
Example 1. The technology of preparation of bifidobacteria concentrate
First, prepare a nutrient medium of the following composition:
sterile skim milk with a SOMO content of at least 12 - 14% - 9000 g
pancreatic hydrolyzate of milk - 815 g
D (-) - lactose - 10.5 g
hydrochloric cystine - 0.1 g
ascorbic acid - 0.5 g
baker's yeast autolysate - 120 ml
A seed dose of a culture of bifidobacteria Bifidobacterium bifidum strain N 791 in an amount of 500 ml with a titer of 7 · 10 7 CFU / ml is introduced into the nutrient medium and cultivated in an incubator at a temperature of 37.5 ° C for 18-24 hours until a dense uniform clot forms. The acidity of the obtained biomass of the bifidobacteria concentrate is in the range of 100 - 120 o T, and the biological titer of the cells is 1 • 10 10 CFU / ml. The concentrate has a shelf life of up to 2 months (in a refrigerator), which is significantly longer than that of fermented milk bifidumbacterin.

Пример 2. Технология приготовления бифидокефира
Способ получения бифидокефира включает термическую обработку и охлаждение молока до температуры заквашивания. Далее в молоко вводят кефирную закваску и концентрат бифидобактерий Bifidobacterium bifidum штамм N 791 с биотитром (0,8 - 1,0)•1010 КОЕ/мл, полученный по примеру 1, при следующем количественном соотношении вносимых в молоко компонентов:
концентрат бифидобактерий - 50 мл
кефирная закваска - 500 мл
молоко - 9450 мл
Исходный титр бифидобактерий после внесения их в молоко составляет (1 - 5)•106 КОЕ/мл. Полученную смесь сквашивают до кислотности (80 - 100)oT и концентрации бифидобактерий не менее (1 - 5)•107 КОЕ/мл. Готовый продукт охлаждают и фасуют в тару.
Example 2. The technology of preparation of bifidokefir
A method for producing bifidokephir involves heat treatment and cooling milk to a fermentation temperature. Next, kefir starter and bifidobacterium concentrate Bifidobacterium bifidum strain N 791 with biotiter (0.8 - 1.0) are introduced into milk • 10 10 CFU / ml obtained according to Example 1, with the following quantitative ratio of the components introduced into milk:
bifidobacteria concentrate - 50 ml
kefir sourdough - 500 ml
milk - 9450 ml
The initial titer of bifidobacteria after adding them to milk is (1 - 5) • 10 6 CFU / ml. The resulting mixture is acidified to an acidity of (80 - 100) o T and a concentration of bifidobacteria of not less than (1 - 5) • 10 7 CFU / ml. The finished product is cooled and packaged in containers.

Пример 3. Технология приготовления бифидомолока
Способ получения бифидомолока включает термическую обработку (пастеризацию или стерилизацию) и охлаждение молока до температуры 18 - 25oC. Далее в молоко вводят концентрат бифидобактерий Bifidobacterium bifidum штамм N 791 с биотитром (0,8 - 1,0)•1010 КОЕ/мл, полученный по примеру 1, при следующем количественном соотношении компонентов:
концентрат бифидобактерий - 1,0 мл
молоко - 999,0 мл
Смесь тщательно перемешивают. Титр бифидобактерий после внесения их в молоко составляет (1 - 5)•106 КОЕ/мл. Готовый продукт охлаждают до температуры 8 - 10oC и фасуют в тару. Срок хранения бифидомолока составляет не более 24 ч с момента изготовления.
Example 3. The technology of preparation of bifidomolok
The method for producing bifidomolk includes heat treatment (pasteurization or sterilization) and cooling the milk to a temperature of 18 - 25 o C. Next, a concentrate of bifidobacteria Bifidobacterium bifidum strain N 791 with a biotiter (0.8 - 1.0) • 10 10 CFU / ml is introduced into the milk. obtained in example 1, in the following quantitative ratio of components:
bifidobacteria concentrate - 1.0 ml
milk - 999.0 ml
The mixture is thoroughly mixed. The titer of bifidobacteria after adding them to milk is (1 - 5) • 10 6 CFU / ml. The finished product is cooled to a temperature of 8 - 10 o C and packaged in containers. The shelf life of bifidomol is not more than 24 hours from the date of manufacture.

Пример 4. Применение концентрата бифидобактерий для коррекции микрофлоры кишечника животных
Использованный вид бифидобактерий B. bifidum доминирует главным образом в нормофлоре кишечника человека в раннем возрасте. Имеются данные о иммунобиологических свойствах этого вида и для лабораторных и сельскохозяйственных животных при использовании сухого бифидумбактерина. Вид B. bifidum в основном не характерен для нормофлоры животных, в частности лабораторных мышей. Однако потенциальная способность бифидобактерий этого вида по предупреждению вирусных инфекций у человека позволила разработать технологию применения бифидоконцентрата и для лабораторных животных.
Example 4. The use of a concentrate of bifidobacteria for the correction of intestinal microflora of animals
The used species of B. bifidum bifidobacteria dominates mainly in the normal flora of the human intestine at an early age. There is evidence of immunobiological properties of this species for laboratory and farm animals using dry bifidumbacterin. Species B. bifidum is generally not characteristic of animal flora, in particular laboratory mice. However, the potential ability of bifidobacteria of this species to prevent viral infections in humans has allowed the development of technology for the use of bifidoconcentrate for laboratory animals.

Концентрат бифидобактерий давался в корм животным (с момента рождения) в дозе 0,1 мл на голову в сутки (т.е. 2•109 КОЕ/кг веса в сутки) в течение 21 - 30 дней.Bifidobacteria concentrate was given to animals (from the moment of birth) at a dose of 0.1 ml per head per day (ie 2 • 10 9 CFU / kg of body weight per day) for 21-30 days.

Как правило, в питомниках от смешанных бактериально-вирусных инфекций больше всего погибают молодняк и новорожденные. Индикатором развития инфекционного заболевания и ослабления иммунитета животных являются обсемененность кишечника животных патогенными микроорганизмами и обедненность его полезной микрофлорой, участвующей в формировании иммунитета, - бифидо- и лактобактериями, бактероидами. Полученные результаты применения предлагаемого бифидоконцентрата представлены в табл. 1. As a rule, in nurseries from mixed bacterial-viral infections, youngsters and newborns die most of all. An indicator of the development of an infectious disease and a weakening of the immunity of animals are the colonization of the intestines of animals by pathogenic microorganisms and the depletion of its beneficial microflora, which is involved in the formation of immunity, by bifidobacteria, lactobacilli, and bacteroids. The results obtained using the proposed bifidoconcentrate are presented in table. one.

Таким образом, из табл. 1 видно, что в контрольной группе в кишечнике присутствует пейзаж посторонней патогенной микрофлоры (стафилококк, протей, клостридии, грибы), чего не наблюдается в опытной группе, получавшей концентрат бифидобактерий. Thus, from the table. 1 shows that in the control group in the intestine there is a landscape of extraneous pathogenic microflora (staphylococcus, proteus, clostridia, fungi), which is not observed in the experimental group treated with bifidobacteria concentrate.

Результаты, представленные в табл. 2, характеризуют заметное падение уровня эмбриональной смертности в опытной группе от инфекционных заболеваний при скармливании бифидоконцентрата беременным самкам. The results presented in table. 2, characterize a marked drop in the level of embryonic mortality in the experimental group from infectious diseases when feeding bifidoconcentrate to pregnant females.

Таким образом, применение препаратов, изготовленных предлагаемым способом, приводит к активизации неспецифического иммунитета животных, делает их устойчивыми к инфицированию, снижает смертность. Thus, the use of drugs manufactured by the proposed method leads to the activation of non-specific immunity of animals, makes them resistant to infection, reduces mortality.

Пример 5. Применение концентрата бифидобактерий для иммунокоррекции организма человека
У бифидобактерий B. bifidum обнаружено наличие некоторых иммуностимулирующих и противовирусных свойств при вирусной (гриппозной) инфекции у детей дошкольного возраста. Снижение заболеваемости острой вирусной диареей (ротавирусы) также было отмечено у грудных детей в США после обогащения пищи бифидобактериями вида B. bifidum (Biotechnol. News, 1994, N 14, с. 3) [9].
Example 5. The use of a concentrate of bifidobacteria for immunocorrection of the human body
Bifidobacteria B. bifidum revealed the presence of certain immunostimulating and antiviral properties in case of viral (influenza) infection in preschool children. A decrease in the incidence of acute viral diarrhea (rotaviruses) has also been observed in infants in the United States after food fortification with bifidobacteria of the species B. bifidum (Biotechnol. News, 1994, N 14, p. 3) [9].

В этой связи применение предлагаемых препаратов в условиях клиники на волонтерах проводилось в отделениях раннего детского возраста и эндокринном отделении Областной больницы г. Новосибирска. Концентрат бифидобактерий назначался не только с целью нормализации микрофлоры кишечника, но также в качестве иммуномодулятора. In this regard, the use of the proposed drugs in the clinic on volunteers was carried out in departments of early childhood and the endocrine department of the Regional Hospital of Novosibirsk. Bifidobacteria concentrate was prescribed not only to normalize the intestinal microflora, but also as an immunomodulator.

Курс лечения составлял 4 недели. Бифидоконцентрат вводили перорально в организм детей в дозе 1•109 КОЕ/кг веса.The course of treatment was 4 weeks. Bifidoconcentrate was administered orally into the body of children at a dose of 1 • 10 9 CFU / kg of body weight.

У 80% больных отделения раннего детского возраста наблюдалась ликвидация дистрофического синдрома (10 человек из 15). У 60% больных отмечена тенденция увеличения содержания альбумина в сыворотке крови на 10 - 13%. Это свидетельствует о нормализации работы печени и селезенки, усилении их защитных функций. In 80% of patients of the department of early childhood, the elimination of dystrophic syndrome was observed (10 people out of 15). In 60% of patients, a tendency to an increase in serum albumin in the blood by 10 - 13%. This indicates the normalization of the liver and spleen, strengthening their protective functions.

Таким образом, способ иммунокоррекции организма животных и человека бифидоконцентратом оказался достаточно эффективным, относительно дешевым (в 10 - 100 раз по сравнению с сухим бифидумбактерином) и доступным вследствие относительной несложности его изготовления. Thus, the method of immunocorrection of animals and humans with bifidoconcentrate turned out to be quite effective, relatively cheap (10-100 times compared with dry bifidumbacterin) and affordable due to the relative simplicity of its manufacture.

Пример 6. Применение бифидокефира
Проведено лечение бифидокефиром группы из 30 детей самого раннего возраста (от 2 месяцев до 9 месяцев), страдающих дисбактериозом и диспепсией. Бифидокефир вводили перорально в организм детей в дозе 150 мл в сутки и концентрации в нем бифидобактерий не менее 1•107 КОЕ/мл в течение двух недель.
Example 6. The use of bifidokefir
Bifidokefir was treated with a group of 30 children of the very youngest age (from 2 months to 9 months) suffering from dysbiosis and dyspepsia. Bifidokefir was administered orally into the body of children at a dose of 150 ml per day and the concentration of bifidobacteria in it was not less than 1 • 10 7 CFU / ml for two weeks.

Результаты использования бифидокефира показали, что у 60% больных полностью устранен дисбактериоз, а у остальных наблюдается значительное улучшение клинических показателей, т.е. полное купирование болевого синдрома от диспепсии и нормализация стула. The results of the use of bifidokefir showed that in 60% of patients dysbiosis was completely eliminated, while in the rest there was a significant improvement in clinical indicators, i.e. complete relief of pain from dyspepsia and normalization of stool.

Пример 7. Совместное применение концентрата бифидобактерий и бифидокефира
Известно, что одной из причин возникновения сахарного диабета могут явиться перенесенные вирусные болезни (эпидемический паротит, краснуха, корь, энцефаломиокардит). Перенесенные или медленнотекущие неявные вирусные заболевания нарушают работу β-клеток поджелудочной железы. В результате нарушается обмен веществ в целом и, в частности, гликолитический обмен сахаров в организме (сахарный диабет) (В кн. Э.П. Касаткиной "Сахарный диабет у детей". М.: Медицина. 1990, с. 18 - 19) [10].
Example 7. The combined use of a concentrate of bifidobacteria and bifidokefir
It is known that one of the causes of diabetes can be transferred viral diseases (mumps, rubella, measles, encephalomyocarditis). Postponed or slow-flowing implicit viral diseases disrupt the function of pancreatic β-cells. As a result, the metabolism as a whole and, in particular, the glycolytic metabolism of sugars in the body (diabetes mellitus) are disturbed (In the book by EP Kasatkina “Diabetes mellitus in children.” M .: Medicine. 1990, p. 18 - 19) [ten].

В эндокринном отделении в группе из 12 больных проведен курс лечения бифидоконцентратом в течение 15 сут. путем перорального введения препарата в концентрации 2•109 КОЕ/кг веса в сутки, а затем бифидокефиром - в течение 15 сут. в дозе 200 мл в сутки и концентрации в нем бифидобактерий не менее 3•107 КОЕ/мл.In the endocrine department in a group of 12 patients, a course of treatment with bifidoconcentrate was carried out for 15 days. by oral administration of the drug at a concentration of 2 • 10 9 CFU / kg of body weight per day, and then with bifidokefir for 15 days. at a dose of 200 ml per day and a concentration of bifidobacteria in it of at least 3 • 10 7 CFU / ml.

У одной больной из 12 наступила полная нормализация иммунологических показателей (по IgG) крови. Снижение уровня гликемии от 5,0 до 9,6 ммоль/л наблюдалось у всех больных. У 6 больных из 12 отмечена нормализация общего количества кишечных палочек. У 4 больных из 12 уменьшалось количество лактозонегативных энтеробактерий. У 8 больных из 12 нормализовалось количество бифидобактерий. One patient out of 12 had a complete normalization of immunological parameters (for IgG) of blood. A decrease in glycemia from 5.0 to 9.6 mmol / L was observed in all patients. In 6 of 12 patients, normalization of the total number of Escherichia coli was noted. In 4 patients out of 12, the number of lactose-negative enterobacteria decreased. In 8 patients out of 12, the number of bifidobacteria returned to normal.

Пример 8. Применение бифидомолока
Бифидомолоко представляет собой лечебно-профилактический продукт. Он предназначен для лечения и профилактики заболеваний желудочно-кишечного тракта как человека, так и животных, например профилактика дизентерии, сальмонеллеза, диареи у молодняка сельскохозяйственных животных во время молочного их вскармливания.
Example 8. The use of bifidomol
Bifidomoloko is a therapeutic and prophylactic product. It is intended for the treatment and prevention of diseases of the gastrointestinal tract of both humans and animals, for example, the prevention of dysentery, salmonellosis, diarrhea in young farm animals during their milk feeding.

Приготовленное в соответствии с примером 3 бифидомолоко с содержанием бифидобактерий (1 - 5)•106 КОЕ/мл выпаивают группе молодняка морских свинок из 10 голов течение 2 недель. Доза на одного сосунка морской свинки составляет 2 - 5 мл 1 раз в сутки. Контрольной группе животных дают одно молоко без бифидобактерий.Prepared in accordance with example 3 bifidomoloko containing bifidobacteria (1 - 5) • 10 6 CFU / ml is fed to a group of young guinea pigs from 10 goals for 2 weeks. The dose per one sucker of a guinea pig is 2 - 5 ml once a day. The control group of animals was given one milk without bifidobacteria.

По истечении 2 недель анализируют нормофлору кишечника обеих групп животных. Полученные данные приведены в табл. 3. After 2 weeks, the intestinal normoflora of both groups of animals is analyzed. The data obtained are given in table. 3.

Анализ табл. 3 показывает, что в опытной группе животных по сравнению с контрольной после профилактики кишечника бифидомолоком увеличилось содержание бифидобактерий в 100 раз (до 109 КОЕ), что предохраняет животных от обсемененности их кишечника патогенными бактериями. При этом содержание в кишечнике условнопатогенных бактерий Proteus, Clostridium, Candida уменьшалось на 4 - 6 порядков.Table analysis 3 shows that in the experimental group of animals, as compared to the control after intestinal prophylaxis with bifidomol, the content of bifidobacteria increased 100-fold (up to 10 9 CFU), which protects the animals from the colonization of their intestines by pathogenic bacteria. At the same time, the content of conditionally pathogenic bacteria Proteus, Clostridium, and Candida in the intestine decreased by 4–6 orders of magnitude.

Таким образом, экспериментальные исследования на животных, профилактика и лечение больных людей в условиях стационара и амбулаторно показывают, что концентрат бифидобактерий, бифидокефир и бифидомолоко, изготовленные предлагаемым способом, обладают более высокой антагонистической активностью, чем известные аналоги [1 - 4], что позволяет проводить иммунокоррекцию организма, лечить дисбактериозы, диспепсию и дизентерию без применения антибиотиков. Продукты, изготовляемые предлагаемыми способами, имеют более длительные сроки хранения. Thus, experimental studies on animals, prevention and treatment of sick people in a hospital and on an outpatient basis show that the concentrate of bifidobacteria, bifidokefir and bifidomolok made by the proposed method have a higher antagonistic activity than the known analogues [1 - 4], which allows immunocorrection of the body, treat dysbiosis, dyspepsia and dysentery without the use of antibiotics. Products manufactured by the proposed methods have longer shelf life.

Claims (4)

1. Способ получения бифидосодержащих препаратов, включающий введение посевной дозы культуры бактерий Bifidobacterium bifidum в питательную среду, содержащую основу питательной среды с добавками цистина солянокислого и автолизата пекарских дрожжей и выращивание культуры Bifidobacterium bifidum при (37 38) ± 0,5oС до получения концентрата бифидобактерий, охлаждение и фасовку готового продукта, отличающийся тем, что в питательную среду дополнительно вводят D(-)-лактозу, аскорбиновую кислоту, панкреатический гидролизат молока, в качестве основы питательной среды используют стерильное молоко с содержанием сухого остатка молока (СОМО) 11 14% при следующем соотношении компонентов питательной среды, мас.1. A method for producing bifid-containing preparations, including the introduction of a seeding dose of a bacterial culture of Bifidobacterium bifidum in a nutrient medium containing the basis of a nutrient medium with additives of cystine hydrochloride and baker's yeast autolysate and growing a culture of Bifidobacterium bifidum at (37 38) ± 0.5 o С to obtain a concentrate bifidobacteria, cooling and packaging of the finished product, characterized in that D (-) - lactose, ascorbic acid, pancreatic milk hydrolyzate are additionally introduced into the nutrient medium as the basis of the nutrient medium and polzujut sterile milk with a milk solids (SNF) on November 14% at the following ratio of the components of the nutrient medium, wt. Панкреатический гидролизат молока 7 9
D(-)-лактоза 0,05 0,15
Цистин солянокислый 0,001 0,007
Аскорбиновая кислота 0,003 0,009
Автолизат пекарских дрожжей 0,5 2,0
Стерильное молоко (основа) До 100%
причем посевную дозу культуры бактерий Bifidobacterium bifidum вносят в объеме 5 7% от объема питательной среды с титром (5 • 107 5 • 108) КОЕ/мл, а культивирование осуществляют в течение времени, достаточного для получения концентрата бифидобактерий с биологическим титром не менее (0,8 1,0) • 1010 КОЕ/мл и кислотностью 100 - 120oТ.
Pancreatic milk hydrolyzate 7 9
D (-) - lactose 0.05 0.15
Cystine hydrochloride 0.001 0.007
Ascorbic acid 0.003 0.009
Baker's yeast autolysate 0.5 2.0
Sterile milk (base) Up to 100%
moreover, the inoculated dose of the culture of bacteria Bifidobacterium bifidum contribute 5 7% of the volume of the nutrient medium with the titer (5 • 10 7 5 • 10 8 ) CFU / ml, and the cultivation is carried out for a time sufficient to obtain a concentrate of bifidobacteria with a biological titer of at least (0.8 1.0) • 10 1 0 CFU / ml and acidity 100 - 120 o T.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве культуры бактерий Bifidobacterium bifidum используют штамм N 791 (ЦМПМ "ВНИИ Генетика" В-3300), а культивирование осуществляют в течение 18 24 ч. 2. The method according to claim 1, characterized in that the strain N 791 (TsMPM VNII Genetika B-3300) is used as a culture of Bifidobacterium bifidum bacteria, and the cultivation is carried out for 18 24 hours 3. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что для получения бифидокефира к концентрату бифидобактерий Bifidobacterium bifidum с биотитром (0,8 1,0) • 1010 КОЕ/мл добавляют термически обработанное и охлажденное молоко и кефирную закваску при следующем соотношении компонентов, мас.3. The method according to claims 1 and 2, characterized in that to obtain bifidokefir to a concentrate of bifidobacteria Bifidobacterium bifidum with biotiter (0.8 1.0) • 10 1 0 CFU / ml add heat-treated and chilled milk and kefir starter in the following the ratio of components, wt. Концентрат бифидобактерий 0,1 0,5
Кефирная закваска 4 6
Молоко Остальное
сквашивают материал до кислотности (80 100)oТ и концентрации бифидобактерий не менее (1 5) • 107 КОЕ/мл с последующим охлаждением и фасовкой готового продукта.
Bifidobacteria Concentrate 0.1 0.5
Kefir sourdough 4 6
Milk Else
ferment the material to an acidity of (80,100) o T and a concentration of bifidobacteria of not less than (1 5) • 10 7 CFU / ml, followed by cooling and packaging of the finished product.
4. Способ по пп.1 и 2, отличающийся тем, что для получения бифидомолока к концентрату бифидобактерий Bifidobacterium bifidum с биотитром (0,8 1,0) • 1010 КОЕ/мл добавляют термически обработанное и охлажденное молоко при следующем количественном соотношении компонентов, мас.4. The method according to claims 1 and 2, characterized in that to obtain bifidomol to the concentrate of bifidobacteria Bifidobacterium bifidum with biotiter (0.8 1.0) • 10 1 0 CFU / ml add heat-treated and chilled milk in the following quantitative ratio of components wt. Концентрат бифидобактерий 0,05 0,2
Молоко Остальное до 100%
с последующим перемешиванием, охлаждением и фасовкой готового продукта.
Bifidobacteria Concentrate 0.05 0.2
Milk The rest is up to 100%
followed by mixing, cooling and packaging of the finished product.
RU96117937A 1996-09-10 1996-09-10 Method of bifido-containing preparation making RU2104706C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU96117937A RU2104706C1 (en) 1996-09-10 1996-09-10 Method of bifido-containing preparation making

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU96117937A RU2104706C1 (en) 1996-09-10 1996-09-10 Method of bifido-containing preparation making

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2104706C1 true RU2104706C1 (en) 1998-02-20
RU96117937A RU96117937A (en) 1998-03-20

Family

ID=20185251

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU96117937A RU2104706C1 (en) 1996-09-10 1996-09-10 Method of bifido-containing preparation making

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2104706C1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009051509A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-23 Obschestvo S Ogranichennoy Otvetstvennostyu 'sibbiosan' Milk culture medium for producing probiotic bacteria biomass
WO2009051511A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-23 Obschestvo S Ogranichennoy Otvetstvennostyu 'sibbiosan' Method for producing a liquid or dried bifidobacteria concentrate or a starter

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Бифидобактерии и их использование в клинике, медицинской промышленности и сельском хозяйстве. -М., 1986, с. 122 - 127. *
Фармстатья ФС 42-132 ВС-94. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009051509A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-23 Obschestvo S Ogranichennoy Otvetstvennostyu 'sibbiosan' Milk culture medium for producing probiotic bacteria biomass
WO2009051511A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-23 Obschestvo S Ogranichennoy Otvetstvennostyu 'sibbiosan' Method for producing a liquid or dried bifidobacteria concentrate or a starter

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2061392C1 (en) Method of kvass producing
US5716615A (en) Dietary and pharmaceutical compositions containing lyophilized lactic bacteria, their preparation and use
EP0555618B1 (en) Dietetic and/or pharmaceutical compositions containing lyophilized lactic bacteria
RU2303058C2 (en) Agent "biobalans-k" for treatment of intestine infections complicated with dysbacteriosis
RU2326938C2 (en) Consortium of lactobacteria strains and method of receiving preparation on its basis, which is used as dietary supplement or ferment for production of sour milk products
CN115068591B (en) Probiotic composition containing osteopontin
RU2104706C1 (en) Method of bifido-containing preparation making
RU2142234C1 (en) Method for producing age-specified bifidopreparations
JPS63291579A (en) Proliferation-promoting agent for bifidobacterium
US5077063A (en) Process for preparing lactic-acid products
RU2273662C2 (en) Consortium of microorganisms with probiotic effect
EA000283B1 (en) Consortium of bifidobacterium
RU2120762C1 (en) Method of preparing a liquid or dry bacterial ferment for fermented-milk foodstuffs production
RU2257408C1 (en) Curative-prophylactic biopreparation based on dry biomass of bifidum bacteria and lactic acid bacteria, biologically active food supplement based on dry biomass of bifidum bacteria and lactic acid bacteria, dry biomass of bifidum bacteria and lactic acid bacteria and method for its preparing
RU2202609C2 (en) Nutrient medium for isolation of lactobacillus
RU2225438C2 (en) Consortium of microorganisms mbi-4 consisting of bifidobacterium bifidum b-2, bifidobacterium infantis bi-7, bifidobacterium longum bl-5, bifidobacterium adolescentis mc-42 used for preparing fermented-milk foodstuffs
WO2006115430A1 (en) Irilis biopreparation based on bacillus-strain bacteria, bacillus subtilis and bacillus licheniformis contained therein
RU2196174C2 (en) Consortium of bifidobacterium strains for preparing fermented-milk, nonfermented foodstuffs, biologically active supplements and bacterial preparations
RU2067994C1 (en) Consortium of lactic acid bacterium lactobacillus acidophilus used for preparing lactic acid products and bacterial preparations, method of preparing dry acidophilic lactic acid bacteria ferment and method of lactic acid product making
RU2280465C2 (en) Method for preparing probiotic
RU2196173C2 (en) Consortium of bifidobacterium strains for preparing fermented-milk foodstuffs, biologically active supplements and bacterial preparations
RU2517734C1 (en) Method to prepare medicated product from live strains and microorganisms of lactobacilli and bifidobacteria "lb-complex plus"
RU2101020C1 (en) Preparation showing immunostimulating effect
RU2296797C1 (en) Bifidum bacterium strain consortium to produce sour-milk, fermented and non-fermented foodstuffs, ferments, bioactive supplements, bacterium preparations, and cosmetic agents
RU2230564C2 (en) Method for treatment of dysbacteriosis of different etiology, among them, acute intestinal infections

Legal Events

Date Code Title Description
HK4A Changes in a published invention
QZ4A Changes in the licence of a patent

Effective date: 20040728

QC41 Official registration of the termination of the licence agreement or other agreements on the disposal of an exclusive right

Free format text: LICENCE FORMERLY AGREED ON 20040728

Effective date: 20110301

PD4A Correction of name of patent owner
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20140911