BG107843A - Ефективно антитуморно лечение - Google Patents

Ефективно антитуморно лечение Download PDF

Info

Publication number
BG107843A
BG107843A BG107843A BG10784303A BG107843A BG 107843 A BG107843 A BG 107843A BG 107843 A BG107843 A BG 107843A BG 10784303 A BG10784303 A BG 10784303A BG 107843 A BG107843 A BG 107843A
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
hours
doxorubicin
followed
administration
combination
Prior art date
Application number
BG107843A
Other languages
English (en)
Inventor
Naoto Takahashi
Steve Weitman
Maurizio D'incalci
Glynn T. Faircolth
Rafaella Giavazzi
Andreas Gescher
Original Assignee
Pharma Mar, S.A.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27399908&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BG107843(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Pharma Mar, S.A. filed Critical Pharma Mar, S.A.
Publication of BG107843A publication Critical patent/BG107843A/bg

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Description

ЕФЕКТИВНО АНТИТУМОРНО ЛЕЧЕНИЕ Област на техниката
Настоящото изобретение се отнася до методи за ефективно антитуморно лечение.
Екгеинасцидин 743, ЕТ-743, представлява противораково средство, получено от морски организъм.
Предшестващо състояние на техниката
Настоящото изобретение е свързано с W00069441, публикуван на 23.11.
2000 г. за информация относно състави и приложение на ЕТ-743 при лечение на рак. Този текст е даден за сравнение.
·· ···· • · ··?:— :
• ··· i · ; : : ’ · · »· ··· ··
Техническа същност на изобретението
Съгласно един аспект, настоящото изобретение се отнася до методи за ефективно комбинирано лечение на базата на екгеинасцидин 743, ET-743, при използване на други лекарства.
Предпочитани аспекти
Другите лекарства могат да представляват част от същия състав или да се прилагат като отделен състав, който да бъде администриран по същото или по друго време. Същността на другото лекарство не е особено ограничена, като подходящите лекарства могат да включват:
(а) лекарства с антимитотични ефекти, особено такива, които са насочени към цитоскелетни елементи, включително микротубулни модулатори, като таксанови лекарства (като таксол, паклитаксел, таксотер, доцетаксел), подофилотоксини или vinca алкалоиди (винкристин, винбластин);
(б) антиметаболитни лекарства, като 5-флуорурацил, цитарабин, гемцитабин, пуринови аналози, като пентостатин, метотрексат);
(в) алкилиращи агенти, като азотни мустарди (като циклофосфамид или ифосфамид);
(г) лекарства, насочени към деоксирибонуклеиновата киселина, като антрациклиновите лекарства адриамицин, доксорубицин, фарморубицин или епирубицин;
(д) лекарства, насочени към топоизомеразите, като етопозид;
(в) хормони и хормонни агонисти или антагонисти, като ветрогони, антиестрогени (тамоксифен и съответни съединения) и андрогени, флутамид, леупрорелин, госерелин, ципротрон или октреотид;
(ж) лекарства, насочени към пренасяне на сигнал в туморни клетки, включително производни на антитела, като херцептин;
····
···· ·· (з) алкилиращи лекарства, като платинови лекарства (цис-платина, карбоплатина, оксалиплатина, параплатина) или нитрозокарбамиди;
(и) лекарства, които силно действат на метастази на тумори, като инхибитори на матрична металопротеиназа;
(й) генна терапия и антисензорни средства;
(к) антитела - терапевтици;
(л) други биоактивни съединения с морски произход, особено дидемнини, като аплидин;
(м) стероидни аналози, в частност, дексаметазон;
(н) противовъзпалителни лекарства, в частност, дексаметазон; и (о) антиеметични лекарства, в частност, дексаметазон.
Като част от настоящата патентна спесификация са включени серии от примери, които следват. Тези примери показват повишената ефективност на ЕТ-743, когато е използван в комбинация с други лекарства, както и се отнасят до различни комбинации, при които се използва ЕТ-743.
Пример 1 се отнася до ефективни комбинации на ЕТ-743 и доксорубицин за инхибиране на туморен растеж при миша и човешка саркома на мишки без тимус.
В Пример 2 е показано, че ектеинасцидин 743 (ЕТ-743) и доксорубицин проявяват синергични цитотоксични ефекти саркома клетъчните линии НТ-1080 и HS-18 в меки тъкани.
Тези два примера показват повече от адитивни ефекти на комбинацията от ЕТ-743 с антрациклини (в частност, доксорубицин), която е по-ефективна от самостоятелно прилаганите агенти спрямо тумори при човека (при настоящите специфични експерименти - саркома), които ефекти се проявяват независимо от последователността на администриране. Тези резултати показват ясна перспектива за лечение на пациенти.
В Пример 3 е показан синергичен цитотоксичен ефект на Ет-743 и цис платина.
•«4 ···· • · · • · · · · • · ·
„ _ ···· ·· ·
В Пример 4 е направена оценка химиотерапевтични средства спрямо панел на ЕТ-743 в комбинация от човешки туморни клетъчни линии, в частност, ЕТ-743 комбинации с доксорубицин, таксол, SN-38, цис платина и гемцитабин.
Тези двата показват повече от адитивни ефекти на комбинацията от ЕТ743 с платинови антитуморни съединения (в частност, цис-платина) с нуклеозидния аналог гемцитабин и с инхибитор на топоизомераза II (SN-38, който представлява активен агент, получен от прекурсора СРТ-11, лекарство от групата на камптотецина). Тези комбинации са по-ефективни от самостоятелно
взетите лекарства спрямо човешки тумори (при настоящите специфични експерименти - спрямо различни туморни клетки, като клетки на яйчник, колон, бял дроб, гърда, саркома на кости), които ефекти зависят от последователността на прилагане. Това е перспектива за лечение на пациенти.
Интересно е, че синергичното действие не е ясно предсказуемо: В Пример 4 е показано, че в повечето от тестваните комбинации не се наблюдава синергизъм (фактически, в някои случаи се наблюдава антагонизъм.
Пример 5 се отнася до оценка на комбинациите от ЕТ-743 с доксорубицин или триметрексат или паклитаксел.
Той показва повече от адитивни ефекти на комбинацията от ЕТ-743 с антрациклини (в частност, доксорубицин), която е по-ефективна от самостоятелно взетите лекарства спрямо човешки тумори (при настоящите специфични експерименти - спрямо саркома), които ефекти се проявяват независимо от последователността на администриране. Тези резултати показват ясна перспектива за лечение на пациенти.
Примери от 6 до 8 подсилват и допълват предишните примери и, поспециално, показват синергизма на ЕТ-743 и доксорубицин и, също така, на ЕТ743 и цис-платина.
·♦ ···· .-δ·— .·.··* • · · · · : :···;· : :.
• · - · · · ·· ·· ··· ·· • *··*
В Пример 9 е показан различен вид ефективност на комбинациите, съгласно настоящото изобретение, където висока доза дексаметазон защитава срещу хепатотоксичност на ЕТ-743.
С други думи, настоящото изобретение се отнася до състави, методи за лечение, методи за получаване на съставите и съответните съединения.
Настоящото изобретение се отнася и до приложение на съединенията, съгласно настоящото изобретение, в метод за лечение и до приложение на
съединенията за получаване на състав за лечение на рак.
Следователно, настоящото изобретение се отнася до метод за лечение на бозайник, по-специално, човек, засегнат от рак, характеризиращ се с това, че включва администриране върху засегнатия индивид на терапевтични ефективно количество съединение, съгласно настоящото изобретение, или на негов фармацевтичен състав.
Настоящото изобретение се отнася и до фармацевтични състави, включващи фармацевтично приемлив носител, които съдържат като активен ингредиент съединение или съединения, съгласно настоящото изобретение, както и до методи за тяхното получаване.
Примерите за фармацевтични състави включват твърди форми (таблетки, хапчета, капсули, гранули и т.н.) или течни форми (разтвори, суспензии или емулсии) с подходящ състав за орално, локално или парентерално администриране, и могат да съдържат чистото съединение или в комбинация с носител или други фармакологично активни съединения. Тези състави трябва да бъдат стерилни, когато се администрират парентерално.
Администрирането на съединенията или съставите, съгласно настоящото изобретение, може да се осъществи по кой да е подходящ метод, като интравенозна инфузия, орално приемане, интраперитонеално и интравенозно администриране. Предпочита се, времето за инфузия да бъде до 24, повече се предпочита, от 2 до 12 часа, като най-много се предпочита, от 2 до 6 часа. Кратките времена за инфузия, които позволяват лечението да се провежда без
···· ·· пренощуване в болница, особено се предпочитат. Ако е необходимо, обаче, времето за инфузия може да бъде от 12 до 24 часа и даже по-дълго. Инфузията може да се провежда на подходящи интервали от 2 до 4 седмици. Фармацевтичните състави, съдържащи съединенията, съгласно настоящото изобретение, могат да бъдат доставяни под форма на липозоми или наносфери в състави за задържано освобождаване или по други стандартни начини за доставяне.
Коректната дозировка на съединенията варира в зависимост от отделния състав, начина на прилагане и отделните situs, приемника и лекувания тумор. Под внимание се взимат и други фактори, като възраст, телесно тегло, пол, хранителен режим, време за администриране, скорост на отделяне, състояние на пациента, лекарствена комбинация, реакции на чувствителност и тежест на заболяването. Администрирането може да се провежда непрекъснато или периодично в рамките на максималната поносима доза.
Комбинациите, съгласно настоящото изобретение могат да бъдат прилагани върху пациенти с упорито заболяване. Читателят може да се отнесе до W00069441 за информация относно дозичните схеми за ЕТ-743 и за друга информация за приложение в комбинираното лечение, съгласно настоящото изобретение.
Примери за изпълнение на изобретението
Пример 1
Ефективни комбинации на ЕТ-743 и доксорубицин за инхибиране на туморен растеж при миша и човешка саркома в мишки без тимус
ЕТ-743 е потвърдил клинична активност при пациенти със саркома на меките тъкани и костите, трудно лечима с химиотерапия, включваща ·♦·· • 4··
99?9999
99 • ·9 9 · • ··
9·
99···
9·
9·
9·
999 доксорубицин (Dx) и изосфамид. От гледна точка на потенциална клинична
999·9· *
9· • 999 стойност при комбиниране на ЕТ-743 с доксорубицин, установено е действие на тази комбинация спрямо миша фибросаркома UV2237, нейна mdr-устойчива подлиния UV2237/ADR и човешки зенографт на рабдомиосаркома ТЕ671. И ЕТ743 и доксорубицинът поотделно са ефективни спрямо миша фибросаркома UV2237, докато всеки от тях не е активен или е крайно активен както спрямо mdr-устойчивата подлиния UV2237/ADR, така и спрямо човешкия зенографт на рабдомиосаркома ТЕ671. Комбинацията на ЕТ-743 и доксорубицин, обаче, е ефективна във всичките три модела. Синергизмът е особено забележим в
човешка рабдомиосаркома ТЕ671 и изглежда независим от последователността на лекарствата или комбинацията.
След единични интравенозни процедури, приложени, когато понижението на теглото на тумора (TWI) ТЕ671 е приблизително 100 mg и стойностите на Log 10 Cell Kill (LCK) са съответно 46% и 0.132 за ЕТ-743 (0.1 mg/kg) самостоятелно, 50% и 0.33 за доксорубицин (10 mg/kg) самостоятелно, 77% и 0.924 за ЕТ-743 (0.1 mg/kg) и доксорубицин (10 mg/kg), прилагани едновременно, 82% и 1.12 за комбинация на ЕТ-743 (0.1 mg/kg), давана един час преди доксорубицин (10 mg/kg) и 75% и 0.85 за комбинация на ЕТ-743 (0.1 mg/kg), давана един час след доксорубицин (10 mg/kg).
Посредством тези данни се предполага, че комбинацията на ЕТ-743 и доксорубицин може да бъде ефективна и при тумори, които не са чувствителни или са крайно чувствителни към тези лекарства, прилагани самостоятелно, което води до ясна обосновка на клиничните изпитания при използване на тази комбинация.
Пример 2
Ектеинасцидин 743 (ЕТ-743) и доксорубицин продуцират синергични цитотоксични ефекти при линии НТ-1080 и HS-18 на саркома в меки тъкани
4» ·· ··♦· ···· ♦ · · • · • · • · ·
Две клетъчни линии“ на ♦ · · • · · · · • · · t • · · ·· ·♦· саркома, • · • · • · • · · • а ··
НТ-1080, клетъчна линия на фибросаркома, чувствителна на ЕТ-743 (ICso=10 pm) и HS, клетъчна линия на липосаркома, по-малко чувствителна на ЕТ-743 (IC50=270 pm) се изследват за токсичност от ЕТ-743 в комбинация с доксорубицин, триметрексат или паклитаксел. Когато ЕТ-743 се използва в комбинация с всяко от тези лекарства в постоянно молно съотношение и се анализира по метода на Chou и Talalay, при комбинацията ЕТ-743-доксорубицин се получават синергични ефекти (72 часа инкубиране), които не се получават при комбинациите на ЕТ743 с триметрексат или паклитаксел. Когато клетките се излагат на ЕТ-743 в продължение на 72 часа и на доксорубицин, триметрексат или таксол в продължение на 48 часа инкубиране, спрямо двете клетъчни линии на саркома също се получават синергични ефекти с доксорубицин. Интересно е, че последователността паклитаксел, последван от ЕТ-743, е по-ефективна от обратната последователност. Тези резултати поощряват клиничните опити на доксорубицин в комбинация с ЕТ-743 за лечение на пациенти със саркома на меките тъкани, като и двете лекарства показват активност спрямо тази болест.
Пример 3
Синергичен цитотоксичен ефект на Ектеинасцидин 743 (ЕТ-743) и цис- платина
Ектеинасцидин 743 (ЕТ-743) показва забележителна антитуморна активност в различни предклинични системи и многообещаваща клинична активност. Ектеинасцидин 743 (ЕТ-743) свързва азотни гуанини в минимално количество и действа за регулиране на възпроизвеждането (Minuzzo et al., PNAS, Vol. 97, 6780-84, 2000).
Предишни изследвания показват, че лошо изградените (MMR) дефицитни клетки са еднакво чувствителни на ЕТ-743, както и нормалните клетки. NER дефицитните клетки, силно чувствителни към цис-платина, са от 6 ··»· ·· ···· ·····* ·· ··· до 8 пъти по-чувствителни към ЕТ-743. На база на различните механизми, включени в изграждането на ЕТ-743 и цис-платина и поради големия клиничен интерес към тази комбинация, са проведени изследвания за оценка на цитотоксичните ефекти на ЕТ-743 и цис-платината в различни човешки туморни клетъчни линии. В това изследване са използвани клетъчна линия на рак на яйчник при човек lgrove-1, подлиния, резистентна към ЕТ-743 (IG/PSC/ET), клетъчни линии на рак на колона при човек НСТ 116 (дефицит на MMR) и HCT11-ch3 (нормални MMR).
Клетките се третират в продължение на 1 или 24 часа с различни концентрации ЕТ-743 или цис-DDP, поотделно или в комбинации и се измерва цитотоксичността при използване на колориметричен анализ след оцветяване със сулфородамин В. Във всички клетъчни линии се наблюдава синергичен ефект при третиране, както един, така и 24 часа. Интересно е, че в НСТ116, резистентни на цис-DDP, ЕТ-743 очевидно е способен да обърне чувствителността даже при концентрации на ЕТ-743, които самостоятелно са крайно ефективни. Взети заедно, данните са рационални за извършване на клинични изследвания комбинирайки ЕТ-743 с цис-DDP.
Пример 4
Комбинации на Ектеинасцидин 743 (ЕТ-743) с доксорубицин, таксол, Sn-38, цис-платина и гемцитабин
ЕТ-743 се оценява в комбинация с доксорубицин, таксол, Sn-38, цисплатина и гемцитабин спрямо панел от човешки туморни клетъчни линии. Посредством тези изследвания се определя вида на лекарственото взаимодействие между ЕТ-743 и стандартните химиотерапевтични средства и влиянието на последователността на прилагане върху антитуморната активност. Използвани са различни комбинации на ЕТ-743 със стандартни цитотоксични средства (Laska, et al., Biometrics 50:50:834, 1994) за описание на eeee • е • е •
• _
99999
99
99 ♦ ·· • · <·
999999
9
999
9 99 лекарственото взаимодействие.·Тези изелеИВанияТюййзват, че независимо от последователността на прилагане, най-често се наблюдава адитивен ефект на лекарствено взаимодействие.
Синергично лекарствено взаимодействие се наблюдава, когато ЕТ-743 се комбинира за да въздейства върху клетъчните линии на тумори на бял дроб (предварително прилагане на SN-38), остеосаркома (предварително прилагане на ЕТ-743 последвано от цис-платина), на гърда (предварително прилагане на ЕТ-743 последвано от гемцитабин), на дебело черво (предварително прилагане на ЕТ-743 последвано от SN-38 и конкурентно прилагане на SN-38). Наблюдава
се адитивен/синергичен (предварително прилагане на ЕТ-743 последвано от SN-38 спрямо NSCL; предварително прилагане на SN-38 спрямоколон и NSCL; конкурентно прилагане на цис-платина спрямо остеосаркома, и на SN-38 спрямо NSCL линии) ефект на лекарствено взаимодействие. Доказателство за антагонизъм се забелязва, когато ковкурентно се прилага таксол спрямо две NSCL линии и доксорубицин спрямо клетъчната линия на рабдомиосаркома.
Тези изследвания показват, че ЕТ-743, който е във Фаза II на клиничните изследвания, може да се комбинира с различни цитотоксични агенти и да влияе на широк спектър от туморни видове.
Материали и методи
Клетъчна култура
Туморни клетъчни линии на човешка гърда (MDA-435, MDA-231, Т-470), бял дроб (NCI-H522, NC1-H226, NCI-H23), колон (НСТ-116, НТ-29, Colo-320), остеосаркома (HOS, U-2, OS, SaOS-2), рабдомиосаркома (RH1, RH-30, RD) се отглеждат в RPMI-1640, обогатена с 10% ембрионален волски серум 2 mM Lглутамин. Всички изходни култури се държат в колби от 75 cm'2 при 37°С във влажни инкубатори в атмосфера на 5% въглероден двуокис - 95% въздух.
··♦·
Ювд анализ
Предварително определен брой експоненциално нарастващи туморни клетки се инкубират в в плочки с 96 гнезда с тьканна култура и се оставят да се стабилизират в продължение на 24 часа. След това, лекарствена плочка,
съдържаща серия от различни концентрации на ЕТ-743 или стандартни химиотерапевтични средства се прибавя към клетките. Клетките се инкубират като 24-часово излагане в продължение на 3 дни, последвано от прибавяне на МТТ в продължение на 4 часа. Получените формазанови кристали след това се солюбилизират с киселина/алкохол при поглъщане (570 nm - получено/630 nm за сравнение), определено при използване на записвач. Резултатите се представят като процент умъртвени туморни клетки по отношение на контролната среда.
Изследвания на комбинациите
За изследванията на комбинациите се използва показаната по-долу концентрационна схема (показана като процент от IC^ на отделните агенти) за охарактеризирано на вида на взаимодействието:
Лекарствена концентрация (показана като процент от 1С5о)
ЕТ-743 Стандартни агенти
100 0
75 25
60 40
50 50
40 60
25 75
0 100
0 0
• · · ·
Статистически анализ на изследванията на комбинациите
За всяка изследвана комбинация (75:25 ЕТ-743/стандартни агенти), както и за крайните случаи (100:0 ЕТ-743 и 0:100 стандартни агенти) се правят статистически сравнения. При статистическото наблюдение се установява, че съществува разлика между стойността на поглъщане на комбинацията (ЕТ-743 и стандартни агенти) и двете крайни стойности (ЕТ-743 и стандартните агенти поотделно). Ако болшинството {>3 от 5) стойности са статистически над или под линията, тогава съществува, съответно, антагонизъм или синергизъм. Иначе ефектът повече се доближава до адитивно взаимодействие. Интерпретирането е много трудно, ако съществува значителен наклон към линията, свързваща крайните положения. Ако наклонът на кривите на IC50 за отделните агенти е идентичен (малко вероятно), понякога, се определя видът на взаимодействието.
Последователност на комбинациите на ЕТ-743 с химиотерапевтични средства
Вид на тумора/ Условия на прилагане/Средства Наблюдавано
Клетъчна линия лекарствено взаимодействие
Остеосаркома
NOS 24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа цис-платина Синергично
24 часа цисплатина, последвана от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/цис-платина Адитивно
U2-OS 24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа цис-платина Адитивно
24 часа цисплатина, последвана от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/цис-платина Адитивно
• ζ .. ·
.. ··
Sa06 часа ET-743, последван от 24 часа
Адитивно цис-платина часа цисплатина, последвана от Адитивно часа ЕТ-743
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/цис-платина Адитивно/ Синергично
Клетки на бял дроб NCB-H226 24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа таксол Адитивно
9 24 часа таксол, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/таксол Антагонистично
24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа SN38 Адитивно/ Синергично
24 часа SN38, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно/ Синергично
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/ SN38 Адитивно
е NCB-N522 24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа таксол Адитивно
24 часа таксол, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/таксол Антагонистично
24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа SN38 Адитивно/ Синергично
24 часа SN38, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно/ Синергично
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/ SN38 Адитивно
NCB-N23 24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа Таксол Адитивно/ Антагонистично
*· ··*! ...... .··.:··· : : < • : : 1»·“· ·: :. · . · · t · ··..·· . ·..· ..... ···· ··
24 часа таксол, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/таксол Антагонистично
24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа SN38 Адитивно
24 часа SN38, последван от 24 часа ЕТ-743 Синергично
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/ SN38 Адитивно/ Синергично
MDA-435 24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа гемцитабин Адитивно
24 часа гемцитабин, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/гемцитабин Адитивно
MDA-231 24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа гемцитабин Адитивно
24 часа гемцитабин, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/гемцитабин Адитивно
• Т47-8 24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа гемцитабин Адитивно
24 часа гемцитабин, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/гемцитабин Адитивно
Дебело черво
МСТ-116 часа ЕТ-743, последван от 24 часа Синергично
SN38 часа SN38, последван от часа ЕТ-743
Адитивно
NT-29
Colo-320 ·♦··
24 часа конкурентно прилагане на ET-743/SN38 Адитивно
24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа SN38 Адитивно
24 часа SN38, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ET-743/SN38 Адитивно
24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа SN38 Адитивно
Рабдомиосаркома
RN1
RD
RN30 часа SN38, последван от часа ЕТ-743 часа конкурентно прилагане на ET-743/SN38
Адитивно/ Синергично
Синергично
24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа доксорубицин Адитивно
24 часа доксорубицин, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/доксорубицин Антагонистично
24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа доксорубицин Адитивно
24 часа доксорубицин, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/доксорубицин Адитивно/ Антагонистично
24 часа ЕТ-743, последван от 24 часа доксорубицин Адитивно
24 часа доксорубицин, последван от 24 часа ЕТ-743 Адитивно
24 часа конкурентно прилагане на ЕТ-743/доксорубицин Антагонистично
····
Изводи-обобщение ·· ·· .
• * .· ··. ·
Тези изследвания показват, че независимо от послеователността на прилагане на ЕТ-743 и стандартните химиотерапевтични агенти, най-често се наблюдава адитивен ефект на лекарствено взаимодействие. Доказателство за синергизъм се наблюдава, когато на NCI-H522 и NCI-H23 NSCL клетъчните линии предварително се прилага SN-38, предварително се прилага ЕТ-743 с цис-платина спрямо HOS туморна клетъчна линия на остеосаркома, Т-470 клетъчна линия на гърда с гемцитабин, SN-38 спрямо НСТ-116 туморна клетъчна линия на колон и конкурентно прилагане на SN-38 спрямо Colo-320 туморна клетъчна линия на колон.
Доказателство за антагонизъм се наблюдава, когато се прилага конкурентно таксол спрямо NC1-H226 и NC1-H23 NSCL клетъчните линии и доксорубицин спрямо RHI туморна клетъчна линия на рабдомиосаркома
Пример 5
Взаимодействие между ЕТ-743 и други антинеопластични агенти
Въпреки че ЕТ-743 се прилага в клинични опити върху рак при човека, механизмите на антитуморната активност на ЕТ-743 не са напълно изяснени. Целта на настоящото изоледване е, да се прецени природата на взаимодействието между ЕТ-743 и други антинеопластични агенти (доксорубицин; DXR, триметрексат; ТМТХ и пакситаксел; таксол), прилагани в индексния (CI) метод на Chou-Talalay. За по-добро изясняване на клиничното приложение на ЕТ-743, при настоящото изследване се използва SRB анализи за определяне на цитотоксичността, която е следствие на комбинирането на ЕТ-743 с три други антинеопластични агента при администриране в две клетъчни линии на саркома на меките тъкани, НТ-1080 и HS-18, in vitro. Доксорубицинът е единствен агент, който води до независим от последователността синергизъм, когато се комбинира с ЕТ-743. Конкурентното
прилагане на ЕТ-743 и доксорубицин води до синергични взаимодействия в
двете клетъчни линии.
Индексът на комбиниране CI (средно) е 0.86, 0.83, 0.84 и 0.85 съответно за 50, 75, 90 и 95% умъртвяване на клетки в НТ-1080 клетки и 0.89, 0.74, 0.64 и 0.60 съответно за 50, 75, 90 и 95% умъртвяване на клетки в HS-18 клетки. Прилагане на ЕТ-743 в продължение на 24 часа преди доксорубицина е най-ефективния режим спрямо двете клетъчни линии; това води до много нисък индекс на комбиниране CI на до около 90% ниво на умъртвяване на клетки за двете клетъчни линии. Прилагане на таксол преди ЕТ-743 също е ефективен режим. Тези резултати показват, че в клиничните опити при лечение на саркома на меките тъкани трябва да се използва комбинацията на ЕТ-743 и доксорубицин.
Материали и методи
Химикали
ЕТ-743 се доставя от Pharma-Mar S.A (Tres Cantos, Madrid, Spain) и се получава като 2 тМ изходен разтвор в диметилсулфоксид. Паклитаксел и доксорубицин се доставят от Sigma chemical Co. (St. Louis, МО). Триметрексат TMTX се доставя от Warner-Lambert (Parke-Davis, Ann Arbor, Mich).
Клетъчна култура
Клетъчните линии на саркома на меките тъкани, НТ-1080 и HS-18, се държат като многослойни култури в RP<l-1640, съдържаща 10% ембрионален волски серум.
SRB анализ за цитотоксичност
Цитотоксичността към лекарства се определя посредством SRB анализ за цитотоксичност, провеждан в описаните по-горе микротитьрни плочки с 96 гнезда. Клетките се поставят в дублирани гнезда (5000 клетки/гнездо) и се излагат на въздействието на лекарства в различни концентрации. Клетките се
фиксират с 50% ТСА разтвор в продължение на час и към всяко гнездо се прибавя 0.4% SRB (Sigma). След инкубиране в продължение на 30 минути, плочката се промива с 1% оцетна киселина и се отчитат 570 nm с помощта на
Biowhitaker записвач 2001. Гнездата с клетки, несъдържащи лекарства, и тези, със среда плюс лекарства, но без клетки, се използват, съответно, за положителен и отрицателен контрол.
Конкурентно прилагане на ЕТ-743 и доксорубицин, триметрексат или паклитаксел
Клетките се посаждат в плочки с 96 гнезда, както е описано по-горе. Клетките се третират със смеси със седем различни концентрации на единични лекарства или комбинации при молно съотношение 1:100 (ЕТ743:други лекарства). След въздействие на лекарствата в продължение на 72 часа се измерва подтискането на растежа посредством SRB анализ.
Последователно прилагане на ЕТ-743 и доксорубицин. триметрексат или паклитаксел
При използване на експерименталното разработване, описано по-горе, клетките се подлагат на действието на три различни концентрации лекарства, които представят IC25, IC50. 1С75, съответно на ЕТ-743 и доксорубицин, триметрексат или паклитаксел. След предварително третиране в продължение на 24 часа с ЕТ-743 или с комбинирано лекарство, към съответните гнезда се прибавят вторите лекарства в продължение на 48 часа. Подтискането на растежа се определя посредством SRB анализ.
Клетъчен цикличен анализ
Експоненциално порасналите клетки се третират със или без лекарства в продължение на няколко часа. След това клетките се събират и се фиксират с леденостуден 70% метанол. Деоксирибонуклеиновата киселина се оцветява с ····
пропидиев йодид, както е описано преди. Десет хиляди оцветени клетки се анализират с помощта на Becton Dickinson флуоресцентно-активиран клетъчен сортировач (FACS).
Определяне на синергизъм и антагонизъм и конструиране на изоболограми
Индексът на комбиниране CI се изчислява по уравнението на ChouTalalay, при което се взима пред вид както потенциала (Dm или IC50), така и формата на кривата на дозичния ефект (стойността на т). Общото уравнение на класическата изоболограма (Cl= 1) е:
(А) където (Dx)1 и (Dx)2 в знаменателите са дозите (или концентрациите) за Dt (ЕТ743) и D2 (друго лекарство) самостоятелно, които дават Х% инхибиране, при което (D)i и (D)2 в числителите на дози на ЕТ-743 и друго лекарство в комбинация, които също подтискат Х% (т.е. изоефективни). С1<1, С1*1, С1>1 показват съответно, синергизъм, адитивен ефект и антагонизъм.
(Dx)i и (Dx)2 могат лесно да бъдат изчислени от уравнението за среден ефект на Chou и Chou et al.:
(В) където Dm е средната доза, която се получава от антилогаритъма на Xпресечната точка на кривата, в графиката на X-log (D) спрямо Y-log [fa / (1 - fa)] или Dm=10‘(Ynpece4Hara точка) z m и m е наклона на кривата. С компютърна програма на Chou и Chou могат автоматично да бъдат изчислени стойностите на m, Dm, Dx и Cl. От (Dm)!, (Dx)2, и D1+D2, лесно се конструират изоболограми на базата на уравнение (А).
За изоболограми на два агента, към уравнение (А) се прибавя трети член (D1) (D2) /(DX)! (DX)2 (С)
За простота, третият член обикновено се пропуска и така се получава класическа изоболограма. В Резултат 2 и 3 са дадени стойностите на CI, получени при класическото изчисление.
··♦·
Резултат 1
Цитотоксичност на четири лекарства спрямо НТ-1080 и HS-18
IC50 за човешки клетки на саркома на меки тъкани
НТ-1080 HS-18
ЕТ-743 (nm) 0.01 0.27
Доксорубицин (nm) 25 225
Триметрексат (nm) 6 70000
Паклитаксел (nm) 1.3 10
Тази таблица показва, че и двете клетъчни линии НТ-1080 и HS-18 са почувствителни към ЕТ-743 от други антинеопластични агенти.
Ефект на всеки агент върху клетъчното циклично разпределение спрямо HS-18 клетки часа и 72 часа след третиране с приблизителна 1С50 доза
Лекарства Доза Час %G1 %S фаза %G2M
Контрола 76.3 11.2 12.5
ЕТ-743 270 рМ 24 32.4 47.6 20.0
72 86.7 8.4 4.9
Доксорубицин 225 nm 24 10.1 64.9 25.0
72 1.3 63.8 34.9
Триметрексат 70 uM 24 44.2 53.8 1.9
72 35.5 57.6 7.0
Паклитаксел 10 nm 24 32.8 52.5 15.5
72 23.5 58.7 26.2
Ефект на всеки агент върху клетъчното циклично разпределение спрямо НТ-1080 клетки часа и 72 часа след третиране с приблизителна 1С50 доза
·< • • ·· • · ··· . · ·· ·· •4···...· ·. • • • ··
Лекарства Доза Час %G1 %S фаза %G2M
Контрола 47.5 35.8 16.7
ЕТ-743 10 рМ 24 42.6 36.1 21.3
72 83.1 10.2 6.7
Доксорубицин 25 nm 24 36.1 17.5 46.4
72 46.2 5.3 48.5
Триметрексат 6 пМ 24 31.9 56.8 11.3
72 32.0 53.7 14.4
Паклитаксел 1.3 nm 24 45.4 37.3 17.3
72 86.0 9.0 5.0
Резултат 2 показва CI съответно за НТ-1080 и HS-18 клетките, на които
едновременно се прилагат ЕТ-743 и едно от антинеопластичните лекарства, като доксорубицин, триметрексат или паклитаксел в молно съотношение на комбинираната смес от 1 до 100. Когато клетките се третират с ЕТ-743 и доксорубицин, всички стойности на CI са по-малки от 1, което показва синергичен ефект и в двете клетъчни линии. CI (средна стойност) с тази схема е 0.86, 0.83, 0.84 и 0.85, съответно при 50, 75, 90 и 95% умъртвяване на клетки в НТ-1080 и 0.89, 0.74, 0.64 и 0.60, съответно при 50, 75, 90 и 95% умъртвяване на клетки в HS-18. Този резултат показва, че при конкурентното лечение на с ЕТ743 и доксорубицин се получава синергичен цитотоксичен ефект. Обратно, когато клетките се третират с ЕТ-743 и триметрексат или паклитаксел, се наблюдава антагонистичен цитотоксичен ефект.
Построява се графика на CI за двете клетъчни линии, на които първоначално се прилага ЕТ-743 в продължение на 24 часа, последван от доксорубицин в продължение на 48 часа. И в двете клетъчни линии, лечението с ЕТ-743, последван от доксорубицин, показва синергичен цитотоксичен ефект, стойността на CI за НТ-1080 при 80% ниво на умъртвени клетки е 0.64+0.12 и стойността на CI за HS-18 при 88% ниво на умъртвени клетки е 0.24+0.06. Обратно, лечението с доксорубицин, последван от ЕТ-743 (Резултат За, по• · ··
долната фигура) показва на пръв поглед добра стойност на CI, обаче, стойността на CI за НТ-1080 при 80% ниво на умъртвени клетки е 1.00±0.03, което показва, че ефектът на двата агента е адитивен, и CI при най-високата степен на умъртвяване е с по-лоша стойност, отколкото при средна степен на
умъртвяване, и за двете клетъчни линии.
Когато клетките се третират с ЕТ-743, последван от триметрексат, стойностите на CI за НТ-1080 са близки до единица или над нея, което показва, че ефектът на двата агента е антагонистичен или адитивен. Обратно, всички тези стойности за HS-18 са под 0.6, което показва, че двете лекарства имат синергично действие. Когато клетките се третират с триметрексат, последван от ЕТ-743 се наблюдава адитивен ефект и за двете НТ-1080 и HS-18 клетъчни линии.
При прилагане на паклитаксел, последван от ЕТ-743 се наблюдава синергичен цитотоксичен ефект. Когато клетките се третират с паклитаксел, последван от ЕТ-743, стойността на CI за НТ-1080 при 89% ниво на умъртвени клетки е 0.92+0.06 и стойността на CI за HS-18 при 78% ниво на умъртвени клетки е 0.38+0.13.
Резюме
ЕТ-743 е силно активен спрямо клетки на саркома на меки тъкани при човек, особено спрямо клетъчна линия НТ-1080 на злокачествена фибросаркома.
Когато се комбинира с ЕТ-743, доксорубицинът показва независим от последователността на прилагане синергизъм, обаче, прилагането на ЕТ-743, последван от доксорубицин е по-ефективно по отношение и на двете клетъчни линии.
Прилагането на паклитаксел, последван от ЕТ-743, също е ефективна схема спрямо клетки на саркома на меки тъкани при човек, докато едновременното им прилагане е антагонистично.
• · ·· ····
Пример 6
In vivo комбинации на химиотерапевтични агенти с ектеинасцидин
743 (ЕТ-743) спрямо твърди тумори
За ЕТ-743 са описани няколко уникални механизма на действие, включително свързване към минимални вдлъбнатини на деоксирибонуклеиновата киселина, алкилиране на азота на гуанина, транскрибиращо подтискане на MDR1 гена (Jin et al., PNAS 97, 6775, 2000; Minuzzo et al., PNAS 97, 6780, 2000) и противодействие на действието на нуклеарния рецептор SXR (Synold et al., Nature Med. 7, 584, 2001). Като самостоятелен агент, ЕТ-743 инхибира in vivo туморния растеж като се постига пълна ремисия (CR) по отношение на някои човешки туморни щамове (Hendriks et al., Ann. Oncol. 10, 1233, 1999) включващи меланома (MEXF 989), NSCL (LXFL 529), карцином на яйчник (HOC 22) и гърда (МХ-1). Ефективността на ЕТ-743 в комбинация с лекарства, които работят по редуващи се механизми, може да доведе до възможност за понижаване на токсичността на лекарството или до засилване на ефективността на лекарството при резистентен или рецидивиращ рак.
За тази цел, няколко агента, включително доксорубицин (DOX; 8 mg/kg), цис-платина (DDP; 12 mg/kg) и винбластин (VINB; 6 mg/kg) се администрират преди/след ЕТ-743 (0.2 mg/kg) при едночасово предварително третиране, qdx5, върху един или повече от следните тумори: хондросаркома (CSHA), остеосаркома (OSA-FH), фибросаркома (SW684), тумор на яйчник (MRI-H-1834), NSCL (LX-1) и тумор на бъбрек (MRI-H-121) при дефинирана активност <50% Т/С. При модел на кухи фибри (HF), последователността на прилагане на доксорубицин 1 час след ЕТ-743 е значително по-ефективна, от самостоятелното прилагане на ЕТ-743 в хондросаркома (6% спрямо 10%), фибросаркома (33% спрямо 48%) и остеосаркома (20% спрямо 34%). При остеосаркома ксенографти се получават същите резултати от 17% спрямо 43%.
♦ ft··
•••ft ··
Изследванията на кухите фибри (HF) с DDP показват, че прилагането на ЕТ-743 след DDP е по-ефективно от самостоятелното прилагане на ЕТ-743 при рак на яйчник (28% спрямо 100%) и хондросаркома (15% спрямо 19%) и еквивалентно действие при остеосаркома (36% Т/С). Данните за ксенографта потвърждават последователността на прилагане на ЕТ-743 след DDP като по-ефективна от самостоятелното прилагане на ЕТ-743 (35% спрямо 66%). Изключение прави NSCL, при който самостоятелното прилагане на ЕТ-743 не е активно (62% Т/С), но при DPP, последван от ЕТ-743, се получава CR (<1% Т/С). При реналните ксенографти, самостоятелното прилагане на ЕТ-743 е много активно (22% Т/С), но при прилагането на ЕТ-743, последвано от винбластин, също се постига пълна ремисия (CR) (<1% Т/С). Правят се отделни изследвания с други стандартни агенти в туморни ксенографти на гърда, бъбрек, меланома и стомах.
Пример 7
Предклинична активност и биоразпределение на комбинации на ектеинасцидин (ЕТ-743) и доксорубицин (DOX) при човешка рабдомиосаркома
ЕТ-743 е първият от нов клас антитуморни средства, които показват антитуморна активност. ЕТ-743 показва активност при пациенти със саркома, която не се поддава на лечение с доксорубицин и ифосфамид. От гледна точка на потенциала му като ефективно лекарство, ние сме изследвали (1) предклиничната антитуморна активност на комбинацията ЕТ-743/доксорубицин спрямо човешката рабдомиосаркома ТЕ 671 и (2) възможните взаимодействия между лекарствата и тяхното биоразпределение в голи мишки и туморни ксенографти.
·· ···♦
In vitro: Ефектът на всяко лекарство или комбинация 1 час след прилагане се преценява посредством клоногенен анализ. Самостоятелното прилагане на ЕТ-743 или доксорубицин показва антитуморна активност спрямо ТЕ 671 клетки. Комбинацията, съгласно изоболограмния анализ и индекса на комбинация, е поне адитивна в някои туморни клетъчни линии, включително ТЕ 671.
In vivo: Когато ксенографтните тумори достигнат тегло приблизително 100 mg, в голи мишки еднократно интравенозно се администрират ЕТ-743 (0.1 mg/kg) и доксорубицин (10 mg/kg). Стойностите на понижаване на теглото на тумора/Log 10 клетъчно умъртвяване са: 46%/0.132 за ЕТ-743, 50%/0.33 за доксорубицин, 77%/0.924 за едновременно прилагане на ЕТ-743 и доксорубицин, 82%/1.12 за комбинация на ЕТ-743, администриран 1 час преди доксорубицина и 75%/0.85, когато ЕТ-743 се администрира 1 час след доксорубицина. Наблюдава се, също така, синергичен ефект по отношение на мишата фибросаркома UV2237 и по отношение на подлинията UV2237/ADR, резистентна на множество лекарства.
Тези данни показват синергичен ефект на комбинацията ЕТ-743 и доксорубицин, който изглежда е независим от последователността на лекарствата или комбинацията в изследваните случаи. Нито концентрациите на доксорубицин в плазмата, нито концентрациите на доксорубицин в тумора се различават значително, когато доксорубицинът се прилага самостоятелно или в комбинация с ЕТ-743. Изучава се фармакокинетичната (РК) преценка на ЕТ-743, прилаган самостоятелно или в комбинация с доксорубицин. Комбинацията на ЕТ-743 с доксорубицин изглежда адитивна in vitro и синергична in vivo при рабдомиосаркома ТЕ 671. Фармакокинетичният профил на доксорубицина не се влияе от съпътстващото третиране с ЕТ-743. Тези данни са рационални за използване на тази комбинация при ранни клинични опити.
• е··
•е ·♦·· • : .
·«*« ··
Пример 8
ЕТ-743 и цис-платина показват in vitro и in vivo синергизъм по отношение на клетъчни линии на човешка саркома и карцином на яйчник
В настоящото изобретение е установено, че ЕТ-743 подобрява активността на цис-платината in vitro и in vivo. При някои ракови клетъчни линии, включващи човешки чревен карцином (НСТ116), карцином на яйчник (lgrov-1/A2780), техни резистентни подлинии (съответно, lgrov-1/PSC-ET и 1А9) и рабдомиокарцинома (ТЕ671), прилаганите по-ниски концентрации на ЕТ-743, използван самостоятелно, засилват активността на цис-платината поне два пъти. При концентрации, съответстващи на IC30/IC50 на ЕТ-743. се получават или адитивни, или синергични ефекти. Тези резултати водят до in vivo изследвания при използване на ксенографтни модели за изучаване на ефективните лекарствени комбинации с ЕТ-743.
В подкожно трансплантирани клетки ТЕ671, частично чувствителни или към ЕТ-743 или към цис-платина, при комбинацията от двете лекарства се получава много по-голям антитуморен ефект от този, постигнат при използването на всяко лекарство в съответните му MTD нива. Яйчниковият 1А9 тумор, който обикновено е резистентен и към ЕТ-743 и към цис-платина като самостоятелни агенти, при използване на комбинации, подтискането на туморния растеж е по-голямо от 50%. Ортолокално трансплантиран карцином на яйчник при човек НОС8, продуциращ туморни възелчета в перитонеалната кухина с асцитис, който е резистентен и към ЕТ-743 и частично чувствителен към цис-платина, в комбинация се получава драматично повишаване на оживяването, даже при доза ЕТ-743 от 0.05 mg/kg (1/4 MTD) и не се причинява значителна токсичност. Доза ЕТ-743 от 0.15 mg/kg забележимо повишава оживяването, но има, също така, и повишение на токсичността, показано ···· ·· τ?·· , · ··· ···· посредством загубата на тегло, която е значително по-висока от тази.
наблюдавана след третиране с всяко лекарство поотделно.
Установените факти позволяват ясно да се конструират клиничните опити при използване на комбинация от ЕТ-743 и цис-платина в саркоми и рак на яйчниците. In vitro и in vivo изследванията са в прогрес на изясняване на механизмите, подчертаващи синергизма между от ЕТ-743 и цис-платината в тези видове рак.
Пример 9
Висока доза дексаметазон (dex) предпазва от хепатотоксичност на ектеинасцидин 743 (ЕТ-743) при плъхове
ЕТ-743, агент, получен от морско водорасло, понастоящем е във фаза II на клиничните опити. Той показва клинична активност спрямо саркоми, а предварителните данни показват активност спрямо карциноми на гърда и яйчник. Обаче, в повечето третирани пациенти се проявява хепатотоксичност, характеризирана с обратим трансаминитис, а в останалите пациенти се появява холестазис. В най-чувствителния от животинските видове, плъха, токсичността на ЕТ-743 се характеризира с чернодробна некроза и възпаление на жлъчния канал. В светлината на противовъзпалителната активност на дексаметазона, установено е неговото действие върху увреждането на черния дроб, индуцирано от ЕТ-743, при плъхове. Женски Wistar плъхове получават единична интравенозна доза ЕТ-743 от 40 цд/kg. Някои плъхове предварително се третират с единична орална доза дексаметазон при 1,5, 10 или 20 mg/kg 24 часа преди третирането с ЕТ-743. До 3 дни след администрирането на ЕТ-743 се оценяват чернодробната патология и плазмените концентрации на алкална фосфатаза (ALP), аспартат аминотрансфераза (GOT) и общ билирубин (ТВ). Конвенционални хистологични срезове на черния дроб са изследвани с помощта на оптична микроскопия.
..2»··· • ·· • 9999 • 9·
9·
--999
9999
9999 • ’·· ···
Два дни след третирането с ЕТ-743, черните дробове на плъховете, които ·· • · • 9 · са третирани само с ЕТ-743, показват възпаление на жлъчния канал, поразителни дегенеративни промени в жлъчните епителиални клетки и зони на чернодробна некроза. Плазмените нива на алкална фосфатаза (ALP) и аспартат аминотрансфераза (GOT) значително се повишават след два дни. Холестазисът се проявява в драматично повишение на плазмените концентрации на общ билирубин (ТВ), което започва на втория ден след третирането с ЕТ-743. Индуцираните от ЕТ-743 хистопатологични промени и повишаване на плазмените нива на алкална фосфатаза (ALP), аспартат аминотрансфераза (GOT) и общ билирубин (ТВ) тотално се анулират в плъхове, предварително третирани с 10 или 20 mg/kg дексаметазон.
Докато при 1 mg/kg дексаметазон се наблюдава ниска защита, 5 mg/kg дексаметазон защитават умерено. Плазмените нива на ЕТ-743 в плъховете, които са получавали 50 mg/kg дексаметазон дневно в продължение на 3 дни преди ЕТ-743, не се понижават в сравнение с тези в плъхове, приели само ЕТ743. Още повече, активността на ЕТ-743 спрямо В16 меланома, имплантирана в мишки, не се възпрепятства от дексаметазона. Следователно, схемата на прибавяне на висока доза дексаметазон към ЕТ-743 може облекчава хепатотоксичността при болните от рак пациенти.

Claims (10)

  1. ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ
    1. Приложение на ЕТ-743 в състав за медикамент за ефективно лечение на тумор посредством комбинирана терапия, характеризиращо се с това, че ЕТ-743 се използва заедно с друго лекарство.
  2. 2. Приложение на лекарство в състав за медикамент за ефективно лечение на тумор посредством комбинирана терапия, характеризиращо се с това, че лекарството се използва заедно с ЕТ-743.
  3. 3. Приложение, съгласно претенции 1 или 2, характеризиращо се с това, че комбинацията на ЕТ-743 и лекарството е синергична.
  4. 4. Приложение, съгласно претенции 1, 2 или 3, характеризиращо се с това, че ЕТ-743 може да бъде част от същия медикамент или да се прилага като отделен медикамент за администриране по същото време или по друго време, различно от това на лекарството.
  5. 5. Приложение, съгласно коя да е от предишните претенции, характеризиращо се с това, че при комбинираната терапия се прилагат ЕТ-743 и антрациклин.
  6. 6. Приложение, съгласно претенция 5, характеризиращо се с това, че при комбинираната терапия се прилагат ЕТ-743 и доксорубицин.
  7. 7. Приложение, съгласно коя да е от претенции от 1 до 4, характеризиращо се с това, че при комбинираната терапия се прилагат ЕТ-743 и платиново антитуморно съединение.
  8. 8. Приложение, съгласно претенция 7, характеризиращо се с това, че при комбинираната терапия се прилагат ЕТ-743 и цис-платина.
  9. 9. Приложение, съгласно коя да е от предишните претенции, характеризиращо се с това, че при комбинираната терапия се прилагат ЕТ-743 и дексаметазон.
  10. 10. ЕТ-743 и антитуморно лекарство, характеризиращо се с това, че е синергично с ЕТ-743 при администриране върху пациент с тумор.
BG107843A 2000-11-06 2003-05-23 Ефективно антитуморно лечение BG107843A (bg)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US24623300P 2000-11-06 2000-11-06
US24809500P 2000-11-13 2000-11-13
US34598201P 2001-10-19 2001-10-19
PCT/GB2001/004902 WO2002036135A2 (en) 2000-11-06 2001-11-06 Compositions for antitumour treatment containing ecteinascidin 743

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BG107843A true BG107843A (bg) 2004-06-30

Family

ID=27399908

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG107843A BG107843A (bg) 2000-11-06 2003-05-23 Ефективно антитуморно лечение

Country Status (25)

Country Link
US (3) US20040108086A1 (bg)
EP (1) EP1365808B1 (bg)
JP (2) JP4391083B2 (bg)
KR (1) KR100718946B1 (bg)
CN (1) CN100374162C (bg)
AT (1) ATE495793T1 (bg)
AU (2) AU2002212499B2 (bg)
BG (1) BG107843A (bg)
BR (1) BR0115162A (bg)
CA (1) CA2428160C (bg)
CY (1) CY1112361T1 (bg)
CZ (1) CZ20031327A3 (bg)
DE (1) DE60143911D1 (bg)
DK (1) DK1365808T3 (bg)
EA (1) EA005564B1 (bg)
HK (1) HK1060067A1 (bg)
HU (1) HUP0400648A3 (bg)
IL (1) IL155781A0 (bg)
MX (1) MXPA03003975A (bg)
NO (1) NO329981B1 (bg)
NZ (1) NZ525730A (bg)
PL (1) PL361389A1 (bg)
PT (1) PT1365808E (bg)
SK (1) SK287901B6 (bg)
WO (1) WO2002036135A2 (bg)

Families Citing this family (25)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MY164077A (en) 1999-05-13 2017-11-30 Pharma Mar Sa Compositions and uses of et743 for treating cancer
MXPA02011319A (es) 2000-05-15 2003-06-06 Pharma Mar Sa Analogos antitumorales de ecteinascidina 743.
IL155781A0 (en) * 2000-11-06 2003-12-23 Pharma Mar Sa Effective antitumor treatments
GB0117402D0 (en) * 2001-07-17 2001-09-05 Pharma Mar Sa New antitumoral derivatives of et-743
BR0213424A (pt) * 2001-10-19 2004-12-14 Pharma Mar Sa Uso aperfeiçoado de composto antitumoral na terapia contra câncer
GB0202544D0 (en) 2002-02-04 2002-03-20 Pharma Mar Sa The synthesis of naturally occuring ecteinascidins and related compounds
US20050043233A1 (en) * 2003-04-29 2005-02-24 Boehringer Ingelheim International Gmbh Combinations for the treatment of diseases involving cell proliferation, migration or apoptosis of myeloma cells or angiogenesis
GB0312407D0 (en) * 2003-05-29 2003-07-02 Pharma Mar Sau Treatment
GB0324201D0 (en) * 2003-10-15 2003-11-19 Pharma Mar Sau Improved antitumoral combinations
WO2005049031A1 (en) * 2003-11-13 2005-06-02 Pharma Mar, S.A.U. Combination
JP2007511509A (ja) * 2003-11-14 2007-05-10 ファルマ・マール・ソシエダード・アノニマ Ｅｔ−７４３およびパクリタキセルの使用を含むガンの併用療法
GB0326486D0 (en) * 2003-11-14 2003-12-17 Pharma Mar Sau Combination treatment
US20080293725A1 (en) * 2004-07-09 2008-11-27 Rafael Rosell Costa Prognostic Molecular Markers
AU2005288696A1 (en) * 2004-09-28 2006-04-06 Pharma Mar S.A., Sociedad Unipersonal Ecteinascidin compounds as anti -inflammatory agents
BRPI0518250A2 (pt) * 2004-10-26 2008-11-11 Pharma Mar Sa tratamentos anticÂncer
NZ554761A (en) 2004-10-29 2010-01-29 Pharma Mar Sa Formulations comprising ecteinascidin and a disaccharide
GB0522082D0 (en) * 2005-10-31 2005-12-07 Pharma Mar Sa Formulations
ATE499098T1 (de) * 2005-11-25 2011-03-15 Pharma Mar Sa Verwendung von parp-1-hemmern
US20100267732A1 (en) * 2007-10-19 2010-10-21 Pharma Mar, S.A. Prognostic Molecular Markers for ET-743 Treatment
KR20170096224A (ko) * 2010-11-12 2017-08-23 파르마 마르 에스.에이. 항종양 알칼로이드를 이용한 병용요법
GB201217439D0 (en) * 2012-09-28 2012-11-14 Topotarget As Combination therapy
WO2014165818A2 (en) 2013-04-05 2014-10-09 T Cell Therapeutics, Inc. Compositions and methods for preventing and treating prostate cancer
JOP20190254A1 (ar) 2017-04-27 2019-10-27 Pharma Mar Sa مركبات مضادة للأورام
US10537585B2 (en) 2017-12-18 2020-01-21 Dexcel Pharma Technologies Ltd. Compositions comprising dexamethasone
CN109276719A (zh) * 2018-11-01 2019-01-29 中山万汉制药有限公司 含有奥利司他纳米粒与蛋白激酶抑制剂的组合物

Family Cites Families (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5149804A (en) * 1990-11-30 1992-09-22 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 736 and 722
US5089273A (en) * 1986-06-09 1992-02-18 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins 729, 743, 745, 759A, 759B and 770
US5256663A (en) * 1986-06-09 1993-10-26 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Compositions comprising ecteinascidins and a method of treating herpes simplex virus infections therewith
DE3635711A1 (de) * 1986-10-21 1988-04-28 Knoll Ag 5-nitrobenzo(de)isochinolin-1,3-dione, ihre herstellung und verwendung
FR2697752B1 (fr) * 1992-11-10 1995-04-14 Rhone Poulenc Rorer Sa Compositions antitumorales contenant des dérivés du taxane.
US5478932A (en) * 1993-12-02 1995-12-26 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Ecteinascidins
US20040059112A1 (en) * 1994-02-18 2004-03-25 Rinehart Kenneth L. Ecteinascidins
GB9508195D0 (en) * 1995-04-20 1995-06-07 Univ British Columbia Novel biologically active compounds and compositions,their use and derivation
US5721362A (en) * 1996-09-18 1998-02-24 President And Fellows Of Harvard College Process for producing ecteinascidin compounds
US5985876A (en) * 1997-04-15 1999-11-16 Univ Illinois Nucleophile substituted ecteinascidins and N-oxide ecteinascidins
EP0983082A1 (en) * 1997-05-21 2000-03-08 Genentech, Inc. Novel administration of thrombopoietin
WO1999051238A1 (en) * 1998-04-06 1999-10-14 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Semi-synthetic ecteinascidins
JP4583598B2 (ja) * 1998-05-11 2010-11-17 ファルマ・マール・ソシエダード・アノニマ エクテイナシジン７４３の代謝産物
JP2000081438A (ja) * 1998-06-25 2000-03-21 Sekisui Chem Co Ltd 被験者の癌化学療法による免疫機能低下の測定方法
US6124292A (en) * 1998-09-30 2000-09-26 President And Fellows Of Harvard College Synthetic analogs of ecteinascidin-743
MY164077A (en) * 1999-05-13 2017-11-30 Pharma Mar Sa Compositions and uses of et743 for treating cancer
MY130271A (en) * 1999-05-14 2007-06-29 Pharma Mar Sa Hemisynthetic method and new compounds
US7247892B2 (en) * 2000-04-24 2007-07-24 Taylor Geoff W Imaging array utilizing thyristor-based pixel elements
MXPA02011319A (es) * 2000-05-15 2003-06-06 Pharma Mar Sa Analogos antitumorales de ecteinascidina 743.
US7420051B2 (en) * 2000-05-15 2008-09-02 Pharma Mar, S.A. Synthetic process for the manufacture of an ecteinaschidin compound
EP1356097A2 (en) * 2000-08-11 2003-10-29 City of Hope The anti-neoplastic agent et-743 inhibits trans activation by sxr
IL155781A0 (en) * 2000-11-06 2003-12-23 Pharma Mar Sa Effective antitumor treatments
KR20030081496A (ko) * 2001-03-06 2003-10-17 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 테가푸르, 우라실, 폴린산, 파클리탁셀 및 카르보플라틴투여를 통한 종양 치료 방법 및 이들의 투여 형태
JP4391038B2 (ja) * 2001-05-10 2009-12-24 パナソニック株式会社 電気炊飯器
BR0213424A (pt) * 2001-10-19 2004-12-14 Pharma Mar Sa Uso aperfeiçoado de composto antitumoral na terapia contra câncer
US20040019027A1 (en) * 2002-04-12 2004-01-29 Barry Forman Method of treating cerebrotendinous xanthomatosis
GB0312407D0 (en) * 2003-05-29 2003-07-02 Pharma Mar Sau Treatment
GB0324201D0 (en) * 2003-10-15 2003-11-19 Pharma Mar Sau Improved antitumoral combinations
WO2005049031A1 (en) * 2003-11-13 2005-06-02 Pharma Mar, S.A.U. Combination
JP2007511509A (ja) * 2003-11-14 2007-05-10 ファルマ・マール・ソシエダード・アノニマ Ｅｔ−７４３およびパクリタキセルの使用を含むガンの併用療法
GB0326486D0 (en) * 2003-11-14 2003-12-17 Pharma Mar Sau Combination treatment
US20080293725A1 (en) * 2004-07-09 2008-11-27 Rafael Rosell Costa Prognostic Molecular Markers
AU2005288696A1 (en) * 2004-09-28 2006-04-06 Pharma Mar S.A., Sociedad Unipersonal Ecteinascidin compounds as anti -inflammatory agents
BRPI0518250A2 (pt) * 2004-10-26 2008-11-11 Pharma Mar Sa tratamentos anticÂncer
NZ554761A (en) * 2004-10-29 2010-01-29 Pharma Mar Sa Formulations comprising ecteinascidin and a disaccharide
ATE499098T1 (de) * 2005-11-25 2011-03-15 Pharma Mar Sa Verwendung von parp-1-hemmern
CA2652035A1 (en) * 2006-05-12 2007-11-22 Pharma Mar, S.A. Anticancer treatments

Also Published As

Publication number Publication date
CZ20031327A3 (cs) 2003-11-12
WO2002036135A2 (en) 2002-05-10
CN100374162C (zh) 2008-03-12
CA2428160C (en) 2009-10-13
US20090324744A1 (en) 2009-12-31
JP2004517056A (ja) 2004-06-10
HUP0400648A2 (hu) 2004-06-28
HUP0400648A3 (en) 2012-09-28
PT1365808E (pt) 2011-04-08
US20120107417A1 (en) 2012-05-03
EA200300544A1 (ru) 2003-08-28
MXPA03003975A (es) 2004-02-12
IL155781A0 (en) 2003-12-23
JP2009114212A (ja) 2009-05-28
NO20032027L (no) 2003-07-04
AU2002212499B2 (en) 2006-11-02
DK1365808T3 (da) 2011-05-16
JP4391083B2 (ja) 2009-12-24
US20040108086A1 (en) 2004-06-10
SK5492003A3 (en) 2004-03-02
ATE495793T1 (de) 2011-02-15
HK1060067A1 (en) 2004-07-30
EP1365808B1 (en) 2011-01-19
KR100718946B1 (ko) 2007-05-16
KR20030048127A (ko) 2003-06-18
EA005564B1 (ru) 2005-04-28
WO2002036135A3 (en) 2003-04-10
CN1486193A (zh) 2004-03-31
NZ525730A (en) 2004-12-24
NO329981B1 (no) 2011-01-31
SK287901B6 (sk) 2012-03-02
AU1249902A (en) 2002-05-15
PL361389A1 (en) 2004-10-04
CA2428160A1 (en) 2002-05-10
NO20032027D0 (no) 2003-05-06
DE60143911D1 (de) 2011-03-03
CY1112361T1 (el) 2015-12-09
EP1365808A2 (en) 2003-12-03
BR0115162A (pt) 2003-10-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG107843A (bg) Ефективно антитуморно лечение
RU2429838C2 (ru) Комбинированная химиотерапия
AU2002212499A1 (en) Compositions for antitumour treatment containing ecteinascidin 743
CA2995025C (en) Combination therapy with an antitumor alkaloid
RU2391101C2 (ru) Комбинированное применение эктеинасцидина-743 и содержащих платину противоопухолевых соединений
JP2007511498A (ja) Ｅｔ−７４３とドキソルビシンとを使用することを含むガンの併用療法
CZ301482B6 (cs) Prostredky a použití ET743 k lécbe rakoviny
US20100009906A1 (en) Anticancer Treatments
US7622458B2 (en) Combination of ET-743 and a 5-fluorouracil pro-drug for cancer treatment
US20080255132A1 (en) Combination Therapy Comprising the Use of Et-743 and Paclitaxel for Treating Cancer
ES2358787T3 (es) Composiciones para tratamiento antitumoral que contienen ecteinascidina 743.
RU2284818C2 (ru) Комбинированная химиотерапия
MXPA06005359A (en) Combination therapy comprising the use of et-743 and paclitaxel for treating cancer