BG107229A - Циклопентил-заместени глутарамидни производни като инхибитори на неутрална ендопептидаза - Google Patents

Циклопентил-заместени глутарамидни производни като инхибитори на неутрална ендопептидаза Download PDF

Info

Publication number
BG107229A
BG107229A BG107229A BG10722902A BG107229A BG 107229 A BG107229 A BG 107229A BG 107229 A BG107229 A BG 107229A BG 10722902 A BG10722902 A BG 10722902A BG 107229 A BG107229 A BG 107229A
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
alkyl
amino
carbonyl
cyclopentyl
acid
Prior art date
Application number
BG107229A
Other languages
English (en)
Inventor
Christopher Barber
Andrew Cook
Graham MAW
David PRYDE
Alan Stobie
Original Assignee
Pfizer Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from GB0016684A external-priority patent/GB0016684D0/en
Priority claimed from GB0101584A external-priority patent/GB0101584D0/en
Application filed by Pfizer Inc. filed Critical Pfizer Inc.
Publication of BG107229A publication Critical patent/BG107229A/bg

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/18—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
    • C07D207/22—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/24—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D207/26—2-Pyrrolidones
    • C07D207/263—2-Pyrrolidones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms
    • C07D207/27—2-Pyrrolidones with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms directly attached to other ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals directly attached to the ring nitrogen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/196—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino group being directly attached to a ring, e.g. anthranilic acid, mefenamic acid, diclofenac, chlorambucil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4015—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. piracetam, ethosuximide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4412—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/57—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings
    • C07C233/58—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings having the nitrogen atoms of the carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/57—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings
    • C07C233/60—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C235/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms
    • C07C235/40—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by oxygen atoms having carbon atoms of carboxamide groups bound to carbon atoms of rings other than six-membered aromatic rings and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/24—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C275/00—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C275/46—Derivatives of urea, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups containing any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom, e.g. acylureas
    • C07C275/48—Y being a hydrogen or a carbon atom
    • C07C275/52—Y being a carbon atom of a ring other than a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/01—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C311/12—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing rings
    • C07C311/13—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to acyclic carbon atoms of an unsaturated carbon skeleton containing rings the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/15—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C311/16—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom
    • C07C311/18—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to hydrogen atoms or to an acyclic carbon atom to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/50—Compounds containing any of the groups, X being a hetero atom, Y being any atom
    • C07C311/51—Y being a hydrogen or a carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/10—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D207/14—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/14—Radicals substituted by nitrogen atoms, not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/40—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/64—One oxygen atom attached in position 2 or 6
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/70—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D285/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D275/00 - C07D283/00
    • C07D285/01—Five-membered rings
    • C07D285/02—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles
    • C07D285/04—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles not condensed with other rings
    • C07D285/12—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D285/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D275/00 - C07D283/00
    • C07D285/01—Five-membered rings
    • C07D285/02—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles
    • C07D285/04—Thiadiazoles; Hydrogenated thiadiazoles not condensed with other rings
    • C07D285/12—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles
    • C07D285/125—1,3,4-Thiadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-thiadiazoles with oxygen, sulfur or nitrogen atoms, directly attached to ring carbon atoms, the nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C07D285/135—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D307/78—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans
    • C07D307/79—Benzo [b] furans; Hydrogenated benzo [b] furans with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D307/81—Radicals substituted by nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D317/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D317/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3
    • C07D317/44—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D317/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms having the hetero atoms in positions 1 and 3 ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with one six-membered ring
    • C07D317/48—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring
    • C07D317/50—Methylenedioxybenzenes or hydrogenated methylenedioxybenzenes, unsubstituted on the hetero ring with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to atoms of the carbocyclic ring
    • C07D317/58—Radicals substituted by nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/02—Systems containing only non-condensed rings with a three-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/06—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring
    • C07C2601/08—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring the ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/04—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring
    • C07C2602/08—One of the condensed rings being a six-membered aromatic ring the other ring being five-membered, e.g. indane

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Compounds That Contain Two Or More Ring Oxygen Atoms (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретението се отнася до съединения с формула@@в която R1 e по избор заместен С1-6 алкил, по избор заместен С3-7 циклоалкил, по избор заместен арилили по избор заместен хетероциклил; n има стойност 0, 1 или 2, и Y означава -NR18(O)nR19 или група с формула или

Description

ЦИКЛОПЕНТИЛ-ЗАМЕСТЕНИ ГЛУТАРАМИДНИ ПРОИЗВОДНИ КАТО ИНХИБИТОРИ НА НЕУТРАЛНА ЕНДОПЕПТИДАЗА
Това изобретение се отнася до инхибитори на неутрален ендопептидазен ензим (NEP), техни използвания, процеси за получаването им, междинни съединения, използвани при тяхното получаване и състави, съдържащи тези инхибитори. Тези инхибитори имат приложение в множество терапевтични области, включително лечението на женска сексуална дисфункция (FSD), особено смущение в половото възбуждане у жени (FSAD).
Инхибитори на NEP са разкрити в WO 91/07386 и WO 91/10644.
Съгласно един първи аспект, изобретението предвижда използването на съединение с формула (I), негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в получаването на лекарствено средство за лечението на женска сексуална дисфункция:
в която
R1 е С^алкил, който може да бъде заместен с един или повече заместители, които могат да бъдат еднакви или различни, избрани от списъка: хало, хидрокси, С^алкокси, С2-бХидроксиалкокси,
С1,6алкокси(С1.6алкокси), С^циклоалкил, С3.7циклоалкенил, арил, арилокси, (С1.4алкокси)арилокси, хетероциклил, хетероциклилокси, -NR2R3, -NR4COR5, -NR4SO2R5, -CONR2R3, -S(O)pR6, -COR7 и -СОгСС-малкил); или R1 е Сз-7циклоалкил, арил или хетероциклил, всеки от които може да бъде заместен с един или повече заместители от същия списък, които заместители могат да бъдат еднакви или различни, и който списък може допълнително да включва С^алкил;
или R1 е Ci-езлкокси, -NR2R3 или -NR4SO2R5;
където
R2 и R3 са всеки независимо Н, С^алкил, С3.7циклоалкил (по избор заместен с хидрокси или С^алкокси), арил, (С1.4алкил)арил, С^алкоксиарил или хетероциклил; или R2 и R3 заедно с азота, към който те са присъединени, образуват пиролидинилова, пиперидино, морфолино, пиперазинилова или Λ/-(^.4 алкил)пиперазинилова група;
R4 е Н или С^алкил;
С R5 е Смалкил, CF3, арил, (Смалкил)арил, (Смзлкокси)арил, хетероциклил, Смалкокси или -NR2R3, където R2 и R3 са, както са дефинирани преди;
R6 е С^алкил, арил, хетероциклил или NR2R3, където R2 и R3 са, както са дефинирани преди; и
R7 е С^далкил, Сз_7циклоалкил, арил или хетероциклил; р е 0, 1, 2 или 3;
η е 0,1 или 2;
•(СН2)П- връзката е по избор заместена с С^алкил, Смалкил заместен с една или повече флуоро групи или фенил, Смалкокси, хидрокси, хидрокси^.залкил), Сз_7циклоалкил, арил или хетероциклил;
Υ е групата:
в която А е -(CH2)q-, където q е 1, 2, 3 или 4 до попълване на 3 до 7 членен карбоциклен пръстен, който може да бъде наситен или ненаситен; R8 е Н, С^алкил, -СН2ОН, фенил, фенил(С1_4алкил) или CONR11R12; R9 и R10 са всеки независимо Н, -СН2ОН, -C(O)NR11R12, Смалкил, фенил (по избор заместен с Смзлкил, хало или Смалкокси), или фенил(Смалкил) (където фениловата група е по избор заместена с Смалкил, хало или С-|.4алкокси), или R9 и R10 заедно образуват диоксолан; R11 и R12 които могат да бъдат еднакви или различни, са Н, С^алкил, R13 или S(O)rR13, където г е 0, 1 или 2 и R13 е фенил, по избор заместен с С-мЗлкил или фенилС-малкил, където фенилът е по избор заместен с С^алкил; или
Y е групата, -C(O)NR11R12, където R11 и R12 са, както са дефинирани преди освен че R11 и R12 не са и двата Н; или
Y е групата
в която R14 е Н, СН2ОН или C(O)NR11R12, където R11 и R12 са, както са дефинирани преди; когато присъства R15, който може да бъде еднакъв или различен спрямо всеки друг R15, е ОН, С^далкил, С^далкокси, хало или CF3; t е 0, 1, 2, 3 или 4; и R16 и R17 са независимо Н или C-i-далкил;
или
Y е групата
в която един или два от В, D, Е или F е азот, а другите са въглерод; и R14 до R17 и t са, както са дефинирани преди; или
Y е по избор заместен 5-7 членен хетероциклен пръстен, който може да бъде наситен, ненаситен или ароматен и съдържа азот, кислород или сяра и по избор един, два или три допълнителни азотни атома в пръстена и който може да бъде по избор бензокондензиран и евентуално заместен с:
С1_6алкокси; хидрокси; оксо; амино; моно или ди-(С1.4алкил)амино;
С^алканоиламино; или
С^алкил, който може да бъде заместен с един или повече заместители, които могат да бъдат еднакви или различни, избрани от списъка: С-|_балкокси, С-^халоалкокси, С^балкилтио, халоген, С3.7циклоалкил, хетероциклил или фенил; или
С3.7циклоалкил, арил или хетероциклил, всеки от които може да бъде заместен с един или повече заместители, които могат да бъдат еднакви или различни, избрани от списъка: С^алкил, С^алкокси, С^халоалкокси, С^алкилтио, халоген, С3.7циклоалкил, хетероциклил или фенил;
при което, когато има оксо заместване на хетероцикления пръстен, пръстенът съдържа само един или два азотни атома и оксо заместването е съседно на азотен атом в пръстена; или
Y е -NR18S(O)uR19, където R18 е Н или Смалкил; R19 е арил, арилС^алкил или хетероциклил (за предпочитане пиридил); и и е 0,1, 2 или 3.
Някои от съединенията с формула I са разкрити в WO 91/10664 и WO 91/07386, но няма инструкции, че те биха могли да бъдат полезни в лечението на женска сексуална дисфункция. Останалите съединения с формула I са нови.
Следователно, съгласно втори аспект, изобретението предоставя (ново) съединение с формула (I), негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което R1, η и Υ са, както са дефинирани в първия аспект, с ограничението, че Υ не е групата -C(O)NR11R12 и когато R1 е пропил или фенилетил, R14 не е -СН2ОН.
Съгласно трети аспект, изобретението предоставя (ново) съединение с формула (I), негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което R1, η и Υ са, както са дефинирани в първия аспект, с ограничението, че Υ не е групата -C(O)NR11R12 и R14 не е Н или -СН2ОН.
В горната дефиниция, освен ако не е отбелязано друго, алкиловите групи имащи три или повече въглеродни атоми могат да бъдат с права или разклонена верига. Терминът арил, както е използван тук, означава ароматна въглеводородна група като фенил или нафтил, който евентуално може да бъде заместен например с един или повече от OH, CN, CF3, СгСдалкил, С1-С4алкокси, хало, карбамоил, аминосулфонил, амино, моно или ди(С1-С4 алкил)амино или (С!-С4алканоил)амино групи.
Хало означава флуоро, хлоро, бромо или йодо.
В горната дефиниция, освен ако не е отбелязано друго терминът хетероциклил означава 5 или 6 членна, съдържаща азот, кислород или сяра хетероциклена група, която, освен ако не е посочено друго, може да бъде наситена, ненаситена или ароматна и която може по избор да включва допълнителен кислороден или един до три азотни атома в пръстена, и която може евентуално да бъде бензокондензирана или заместена например с, един или повече хало, С1-С4алкил, хидрокси, карбамоил, бензил, оксо, амино или моно- или ди-(С1-С4алкил)амино или (С1-С4алканоил)амино групи. Специфични примери на хетероцикли включват пиридил, пиридонил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, пиролил, имидазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, фуранил, тетрахидрофуранил, тетрахидропиранил, диоксанил, тиенил, оксазолил, изоксазолил, тиазолил, оксадиазолил, тиадиазолил, индолил, изоиндолнил, хинолил, изохинолил, хиноксалинил, хиназолинил и бензимидазолил, като всеки е евентуално заместен, както бе дефинирано преди.
Предпочитани заместители за R1 са С^алкил, С^алкокси, С^алкокси(С1.3)алкил, Ст.балкоксиС^балкоксиС^залкил или С^алкил заместен с арил.
По-предпочитани заместители за R1 са С^балкил, С^алкокси, С^алкокс^С^алкил (за предпочитане метоксиетил) или С^алкоксиС^балкоксиС^алкил (за предпочитане метоксиетоксиметил).
Още по-предпочитани заместители за R1 са С^алкил (за предпочитане пропил) или Ст-балкокс^С^алкил (за предпочитане метоксиалкил, по-предпочитано метоксиетил). Когато Y е групата
R8 и карбоцикленият пръстен е напълно наситен, тогава за предпочитане един от R9 или R10 е -СН2ОН; -C(O)NR11R12; С^алкил; фенил евентуално заместен с С-^алкил; или фенил(С1.4алкил), където фениловата група е по избор заместена с С^алкил. По-предпочитано карбоцикленият пръстен е 5, 6 или 7 членен, в който един от R9 или R10, -C(O)NR11R12, а другият е С1_6алкил; фенил евентуално заместен с С^алкил; или фенил(С1.4алкил) където фениловата група е по избор заместена с Смалкил. Попредпочитано, R9 и R10 са свързани към съседни въглеродни атоми в пръстена. По-предпочитано, R8 е СН2ОН.
Когато Y е групата -NR18S(O)UR19, за предпочитане R18 е Н. Попредпочитано, R19 е бензил или фенил. По-предпочитано и е 2.
За предпочитане, Y е по избор заместен 5-7 членен хетероциклен пръстен. По-предпочитано пръстенът е по избор заместен ароматен пръстен, специално пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксадиазолил, тиазолил, тиадиазолил, оксазолил, изоксазолил, индолил, изоиндолнил, хинолил, изохинолил, пиридонил, хиноксалинил или хиназолинил [особено оксадиазол (за предпочитане 1,2,5- или 1,3,4-оксадиазол), пиридон (за предпочитане 2пиридон) или тиадиазол (за предпочитане 1,3,4-тиадиазол), всеки от които може да бъде заместен, както е дефинирано в първия аспект. За предпочитане, хетероцикленият пръстен е заместен с един или повече Сцеалкил, фенил или фенилС^алкил, по-предпочитано с С^алкил или бензил. За предпочитане, Y е Л/-заместен пиридон, по-добре с бензил или С1_4алкил.
За предпочитане Y е лактам, свързан при азота.
За предпочитане Y е
където R14 за предпочитане е СН2ОН или C(O)NR11R12, особено C(O)NR11R12. За предпочитане R16 и R17 са водород. За предпочитане, t е 0.
Предпочитани съединения са с формулата le:
Особено предпочитани съединения от изобретението са:
2-[(1-{[(1-бензил-6-оксо-1,6-дихидро-3-пиридинил)амино]карбонил}циклопентил)-метил]-4-метоксимаслена киселина (Пример 35);
2-{[1-({[3-(2-оксо-1-пиролидинил)пропил]амино}карбонилциклопентил]метил}-4-фенилмаслена киселина (Пример 40);
(+)-2-{[1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1/-/-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}-4-фенилмаслена киселина (Пример 44);
2-[(1-{[(5-метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}циклопентил)метил]-4фенилмаслена киселина (Пример 43);
цис-3-(2-метоксиетокси)-2-[(1-{[(4-{[(фенилсулфонил)амино]карбонил}циклохексил)-амино]карбонил}циклопентил)метил]пропанова киселина (Пример 38);
(+)-2-{[1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}пентанова киселина (Пример 31);
(2/?)-2-[(1-{[(5-етил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}-циклопентил)метил]пентанова киселина или (-)-2-((1 -{[(5-етил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}циклопентил)-метил]пентанова киселина (Пример 29);
(25)-2-[(1-{[(5-етил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}циклопентил) метил]пентанова киселина или (+)-2-((1-{[(5-етил-1,3,4-тиадиазол-2ил)амино]карбонил}циклопентил)метил]пентанова киселина (Пример 30);
2-({1-[(3-бензиланилино)карбонил]циклопентил}метил)пентанова киселина (Пример 21);
2-((1-{[(1-бензил-6-оксо-1,6-дихидро-3-пиридинил)амино]карбонил}циклопентил)-метил]пентанова киселина (Пример 22);
2- {[1-({[(1Р,35,4К)-4-(аминокарбонил)-3-бутилциклохексил]амино}карбонил)- циклопентил]метил}пентанова киселина (Пример 9);
С транс-3-[1-({[2-(4-хлорофенил)циклопропил]амино}карбонил)циклопентил]2-(метоксиметил)пропанова киселина (Пример 46); транс-3-[1-({(2-(4-метоксифенил)циклопропил]амино}карбонил)циклопентил]-2-(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 47);
П7ранс-3-[1-({[2-лентилциклопропил]амино}карбонил)циклопентил]-2(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 48);
3- [1-({[5-бензил-[1,3,4]-тиадиазол-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]-2- (метоксиетил)пропанова киселина (Пример 49);
3-[1 -({[4-бутилпиридин-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]-2- (метоксиетил)пропанова киселина (Пример 50);
С 3-[1 -({[4-фенилпиридин-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]-2(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 51);
3-(1-(((1-хидроксиметил-3-фенилциклопентил]амино}карбонил)циклопентил]2-(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 52);
2-{[1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1/-/-инден-2-ил]амино}карбонил)~ циклопентил]метил}-4-метоксимаслена киселина (Пример 53);
транс-3-[1-({[2-фенилциклопропил]амино}карбонил)циклопентил]-2(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 54);
(/?)- 2-{[1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}-4-метоксимаслена киселина (Пример 55); и (3)-2-{[1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1/7-инден-2-ил]амино}карбонил) циклопентил]метил}-4-метоксимаслена киселина (Пример 56).
За избягване на съмнение, освен ако не е посочено друго, терминът заместен означава заместен с една или повече дефинирани групи. В случая, когато групите могат да бъдат избрани от множество алтернативни групи, избраните групи могат да бъдат еднакви или различни.
За избягване на съмнение, терминът независимо означава, че когато повече от един заместител е избран от множество възможни заместители, тези заместители могат да бъдат еднакви или различни.
Фармацевтично или ветеринално приемливи соли на съединенията с формула I, които съдържат основен център са например нетоксичните киселинни присъединителни соли, образувани с неорганични киселини като солна, бромоводородна, йодоводородна, сярна и фосфорна киселина, с карбоксилни киселини или органо-сулфонови киселини. Примерите включват солите на HCI, НВг, HI, сулфат или бисулфат, нитрат, фосфат или хидро-фосфат, ацетат, бензоат, сукцинат, захарат, фумарат, малеат, лактат, цитрат, тартарат, глюконат, камсилат, метансулфонат, етансулфонат, бензенсулфонат, р-толуенсулфонат и памоат. Съединенията от изобретението могат също да дадат фармацевтично или ветеринарно приемливи метални соли, по-специално нетоксични соли на алкалните метали или на алкалоземните метали, с бази. Примерите включват натриевата, калиева, алуминиева, калциева, магнезиева, цинкова, диоламинова, оламинова, етилендиаминова, трометаминова, хлоинова, мегуламинова и диетаноламинова соли. За прегледи на подходящи фармацевтични соли виж Berge et al, J. Pharm, Sci., 66, 1 - 19,1977; P L Gould, International Journal of Pharmaceutics, 33 (1986), 201 - 217; и Bighley et al. Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Marcel Dekker Inc, New York 1996, Volume 13, page 453 - 497. Предпочитана сол е натриевата сол.
Фармацевтично приемливите солвати на съединенията от изобретението включват техните хидрати.
Оттук нататък съединенията, техните фармацевтично приемливи соли, техните солвати и полиморфни форми, дефинирани в който и да е аспект от изобретението (освен междинните съединения в химичните процеси) са означени като съединенията от изобретението.
Съединенията от изобретението могат да притежават един или повече хирални центрове и така да съществуват в множество стереоизомерни форми. Всички стереоизомери и техни смеси са включени в обхвата на настоящото изобретение. Рацемичните съединения могат или да бъдат сепарирани като се използва препаративна HPLC и колона с хирална статична фаза, или разделени до получаване на индивидуалните енантиомери като се използват методи, известни на специалистите в областта. В допълнение, хиралните междинни съединения могат да бъдат разделени и използвани за получаване на хирални съединения от изобретението.
В случаите, когато съединенията от изобретението съществуват като Е и Z изомери, изобретението включва индивидуалните изомери, а така също техните смеси.
В случаите, когато съединенията от изобретението съществуват като тавтомерни изомери, изобретението включва индивидуалните тавтомери, а така също техните смеси.
В случаите, когато съединенията от изобретението съществуват като оптични изомери, изобретението включва индивидуалните изомери, а така също техните смеси.
В случаите, когато съединенията от изобретението съществуват като диастереоизомери, изобретението включва индивидуалните диастереоизомери, а така също техните смеси.
Сепарирането на диастереоизомери или Е и Z изомери, може да бъде постигнато чрез обичайни техники, напр. чрез фракционна кристализация, хроматография или HPLC (виж Примери 29 и 30 тук). Един индивидуален енантиомер на съединение от изобретението или междинно съединение, може да бъде получен от съответното оптично чисто междинно съединение или чрез разделяне, както с HPLC на съответния рацемат при използване на подходящ хирален носител, или чрез фракционна кристализация на диастереоизомерните соли, образувани чрез взаимодействие на съответния рацемат с подходяща оптично активна база, както е подходящо. Предпочитана оптично активна база е псевдоефедрин (виж Получаване 2 тук).
Съединенията от изобретението могат да съществуват в една или повече тавтомерни форми. Всички тавтомери и техни смеси са включени в обхвата на настоящото изобретение. Например, претенция за 2хидроксипиридинил би покривала също неговата тавтомерна форма, а-пиридонил.
Ще бъде оценено от специалистите в областта, че определени защитени производни на съединенията от изобретението, които могат да бъдат получени преди крайния етап на отстраняване на защитата, могат да не притежават фармакологична активност като такива, но могат в определени случаи да бъдат прилагани орално или парентерално и след това да бъдат метаболизирани в тялото до образуване на съединенията от изобретението, които са фармакологично активни. Такива производни могат следователно да бъдат описани като “пролекарствени средства”. Допълнително, някои съединения от изобретението могат да действат като пролекарствени средства на други съединения от изобретението.
Всички защитени производни и пролекарствени средства на съединенията от изобретението са включени в обхвата ма изобретението. Примери на подходящи про-лекарства за съединенията от настоящото изобретение са описани в “Drugs of Today”, Volume 19, Number 9, 1983, pp 499 - 538, в “Topics in Chemistry”, Chapter 31, pp 306 - 316 и в “Design of Prodrugs” от H. Bundgaard, Elsevier, 1985, Chapter 1 (разкритията в които документи, са включени тук чрез препратка).
По-нататък ще бъде оценено от специалистите в областта, че определени остатъци, известни на специалистите в областта като “про остатъци”, например както са описани от Н. Bundgaard в “Design of Prodrugs” (разкритието в който документ е включено тук чрез препратка), могат да бъдат поместени на подходящи функционалности, когато такива функционалности присъстват в съединенията от изобретението.
Предпочитани пролекарствени средства на съединенията от изобретението включват: естери, карбонатни естери, хеми-естери, фосфатни естери, нитро естери, сулфатни естери, сулфоксиди, амиди, карбамати, азо-съединения, фосфамиди, гликозиди, етери, ацетали и кетали.
С Изследванията на метаболизма на лекарствата са показали, че in vivo съединения с формула I могат да образуват съединения с формула XXIII, които съединения са също инхибитори на NEP но (XXIII)
По-специално ние показахме, че (2Р)-2-[(1-{[(5-етил-1,3,4-тиадиазол-2ил)амино]карбонил}циклопентил)метил]пентанова киселина (Пример 29) in vivo образува (2R)-1-(2-{[(5-eTnn-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}пентил)-циклопентанкарбоксилна киселина.
Изобретението включва също всички подходящи изотопни варианти на съединенията от изобретението. Един изотопен вариант е дефиниран като такъв, в който поне един атом е заместен с атом, имащ същият атомен номер, но атомната му маса се различава от атомната маса, обикновено срещана в природата. Примери на изотопи, които могат да бъдат включени в съединенията от изобретението включват изотопи на водорода, въглерода, азота, кислорода, фосфора, сярата, флуора и хлора, такива като
изотопни варианти на изобретението, например тези, в които е включен радиоактивен изотоп като 3Н или 14С, са полезни в изследванията на разпределението на лекарство и/или субстрат в тъкан. Тритиевите, т.е. 3Н, и въглерод-14, т.е. 14С, изотопи са особено предпочитани поради тяхната лекота на получаване и откриваемост. Допълнително, заместването с изотопи като деутерий, т.е. 2Н, може да даде някои терапевтични предимства, произтичащи от по-голямата метаболитна стабилност, например увеличен in vivo полупериод на съществуване или намалени изисквания за дозите и оттук, могат да бъдат предпочитани при някои обстоятелства. Изотопните варианти на съединенията от изобретението могат обикновено да бъдат получени чрез обичайни процедури, такива като методите или получаванията, описани в Примерите и Получаванията тук понататък, като се използват съответни изотопни варианти на подходящи реагенти.
Съединенията от изобретението са инхибитори на цинк-зависимата, неутрална ендопептидаза ЕС.3.4.24.11., и със съединенията от изобретението се възнамерява да се лекуват болестните състояния, изброени по-долу. Този ензим е въвлечен в разлагането на отделни биоактивни олигопептиди, разцепвайки пептидните връзки от амино страната на хидрофобните аминокиселинни остатъци. Метаболизираните пептиди включват атриални натрийуретични пептиди (ANP), бомбезин, брадикинин, калцитонин ген-свързан пептид, ендотелини, енкефалини, невротензин, субстанция Р и вазоактивен интестинален пептид. Някои от тези пептиди имат силни вазодилаторни и неврохормонални функции, диуретична и натрийуретична активност или медиират поведенчески ефекти. По този начин съединенията от изобретението чрез инхибиране на неутралната ендопептидаза ЕС.3.4.24.11 могат да усилят биологичните ефекти на биоактивни пептиди.
Така, по-специално съединенията имат полезност в лечението на множество разстройства, включително хипертензия, сърдечна недостатъчност, ангина, бъбречна недостатъчност, остра бъбречна недостатъчност, цикличен оток, болест на Meniere, алдостеронизъм (първичен и вторичен) и хиперкалциурия. В допълнение, поради тяхната способност да усилват ефектите на ANF (атриален натрийуретичен фактор), съединенията имат полезност в лечението на глаукома. Като допълнителен резултат от тяхната способност да инхибират неутралната ендопептидаза ЕС.3.4.24.11, съединенията от изобретението могат да имат активност в други тепрапевтични области включително например лечението на менструални смущения, преждевременно раждане, прееклампсия, ендометриоза и репродуктивни смущения (особено мъжко и женско О безплодие, синдром на поликистозен яйчник, имплантационно нарушение).
Също съединенията от изобретението би трябвало да лекуват астма, възпаление, левкемия, болка, епилепсия, афективни смущения, деменция и гериатрична обърканост, затлъстяване и стомашно-чревни смущения (особено диария и синдром на раздразнени черва), заздравяването на рани (особено диабетични и венозни язви и декубитоси), септичен шок, модулирането на секрецията на стомашна киселина, лечението на хиперренинемия, муковисцидоза, рестеноза, диабетични усложнения и атеросклероза. В предпочитано изпълнение съединенията от изобретението са полезни в лечението на женска сексуална дисфункция (FSD) за (2 предпочитане, FSAD.
Ще бъде оценено, че всички отнасяния тук към лечение включват лечебно, палиативно и профилактично обработване.
Ние намерихме, че съединенията от изобретението инхибират ензима неутрална ендопептидаза. Следователно, съгласно един допълнителен аспект, изобретението се отнася до използването на съединение от изобретението в получаването на лекарствено средство за лечението или профилактиката на състояние, за което може да бъде получен полезен терапевтичен отговор чрез инхибирането на неутрална ендопептидаза.
В съответствие с изобретението, FSD може да бъде дефиниран като трудността или неспособността на жена да намери задоволяване на сексуалното изразяване FSD е събирателен термин за няколко различни женски полови смущения (Leiblum, S.R. (1998), Definition and classification of female sexual disorders, Int. J. Impotence Res., 10, S104 - S106; Berman, J.R., Berman, L & Goldstein, I, (1999), Female sexual dysfunction: Incidence, pathophysiology, evaluations and treatment options. Urology, 54, 385 - 391). Жените могат да имат липса на желание, трудност при възбуждането или оргазма, болка при половото сношение или комбинация от тези проблеми. Различни видове заболявания, лечения, наранявания или психологични проблеми могат да причинят FSD. Лечения в развитие са цел за третиране на специфични подвидове на FSD, преимуществено смущения в желанието и възбуждането.
Категориите FSD най-добре се дефинират чрез съпоставянето им с фазите на нормалния женски сексуален отговор: желание, възбуждане и оргазъм (Leiblum, S.R. (1998), Definition and classification of female sexual disorders, Int. J. Impotence Res., 10, S104 - S106). Желанието или либидото е импулсът за сексуално изразяване. Неговите прояви често включват сексуални мисли или в компанията на интересен партньор, или при излагане на други еротични стимули. Възбуждането е васкуларен отговор на сексуалното стимулиране, важен компонент на което е гениталната хиперемия и включва увеличено вагинално смазване, удължаване на вагината и увеличено генитално усещане/чувствителност. Оргазъм е освобождаването на сексуалното напрежение, което е достигнало найвръхната си точка по време на възбуждането.
Оттук, FSD се среща когато една жена има неадекватен или незадоволителен отговор в някоя от тези фази, обикновено желание, възбуждане или оргазъм. FSD категориите включват: смущение изразяващо се в хипоактивно сексуално желание, смущение в сексуалното възбуждане, оргазмени смущения и смущения от сексуална болка. Въпреки, че съединенията от изобретението ще подобрят гениталният отговор на сексуално стимулиране (както в смущение в сексуалното възбуждане при
жени), осъществявайки това то може също да подобри свързаната с това болка, страдание и дискомфорт, свързани с половото сношение и така да лекува други женски сексуални смущения.
Така, в съответствие с един допълнителен аспект на изобретението, предоставено е използването на съединение от изобретението в получаването на лекарствено средство за лечението или профилактиката на смущение изразяващо се в хипоактивно сексуално желание, смущение в сексуалното възбуждане, оргазмено смущение и смущение от сексуална болка, по-предпочитано за лечението или профилактиката на смущение в сексуалното възбуждане, оргазмено смущение и смущение от сексуална болка, и най-предпочитано, в лечението или профилактиката на смущение в сексуалното възбуждане.
Смущение на хипоактивното сексуално желание е налице, ако една жена няма желание или има малко желание да бъде сексуална, и няма, или има недостатъчно сексуални мисли или фантазии. Този вид FSD може да бъде причинено от ниски тестостеронови нива или поради естествена менопауза, или поради хирургична менопауза. Други причини включват заболяване, лечения, изтощение, депресия и безпокойство.
Смущението в сексуалното възбуждане на жени (FSAD) се характеризира чрез неадекватен генитален отговор на сексуално стимулиране. Гениталиите не претърпяват хиперемията, която характеризира нормалното сексуално възбуждане. Вагиналните стени са незадоволително смазани, така че половото сношение е болезнено. Оргазмите могат да бъдат затруднени. Смущение на възбуждането може да бъде причинено от намален естроген при менопаузата или след раждане и по време на кърмене, а така също от заболявания с васкуларни компоненти, такива като диабет и атеросклероза. Други причини са в резултат от лечение с диуретици, антихистамини, антидепресанти напр. SSRI или антихипертензивни средства.
Смущенията от сексуални болки (включват диспареуния и вагинизъм) се характеризират с болка в резултат от проникване и могат да бъдат причинени от лечения, които намаляват смазването, ендометриоза, възпаление на тазовите органи, болест на раздразнени черва или проблеми на пикочния тракт.
Широкото разпространение на FSD е трудно да се измери точно, тъй като терминът покрива различни видове на проблема, някои от които са трудни за измерване, и тъй като интересът в лечението на FSD е относително нов. Много сексуални проблеми на жените се свързват или директно с проблемите на женското стареене, или с хронични заболявания като диабет и хипертензия.
Тъй като FSD се състои от различни подтипове, които изразяват симптоми в отделни фази на цикъла на сексуалния отговор, няма отделно лечение. Сегашното лечение на FSD се фокусира по принцип върху психологията или въпросите на връзката. Лечението на FSD се развива постепенно, тъй като по-голям брой клинични и основни научни изследвания са посветени на проучването на този медицински проблем. Женските сексуални оплаквания не са всички психологични в патофизиологията, особено за тези индивиди, които могат да имат компонент на васкулогенна дисфункция (напр. FSAD) съдействаща за общото женско сексуално оплакване. Понастоящем няма лицензирани лекарства за лечението на FSD. Емпиричната лекарствена терапия включва прилагането на естроген (локално или като хормон заместваща терапия), андрогени или психотропни лекарства като буспирон или тразодон. Тези лечебни възможности често са незадоволителни поради ниската ефикасност или неприемливи странични ефекти.
Тъй като интересът към лечението на FSD фармакологично е относително нов, терапията се състои от следното: психологично съветване, легално продавани без рецепта сексуални мазилни вещества и кандидати за изследвания, включително лекарства, одобрени за други състояния. Тези лечения се състоят от хормонални средства, както
тестостерон, така и комбинации от естроген и тестостерон и по-нови васкуларни лекарства, които са доказали ефективност при мъжка еректилна дисфункция. Никое от тези средства не е било демострирано, че е много ефективно при лечение на FSD.
Както бе обсъдено, съединенията от изобретението са особено полезни за лечението на смущение в сексуалното възбуждане на жени (FSAD).
Диагностичният и статистически наръчник (DSM) IV на Американската психиатрична асоциация дефинира смущение в сексуалното възбуждане на жена (FSAD) като:
“постоянна или повтаряща се неспособност да се постигне или да се поддържа до завършване на сексуалната активност, адекватен отговор смазване-разширение, на сексуалното възбуждане. Смущението трябва да причинява значително страдание или вътрешноличностно затруднение.”
Отговорът при възбуждането се състои от вазохиперемия в таза, вагинално смазване и уголемяване и разширяване на външните гениталии. Смущението причинява значително страдание или вътрешноличностно затруднение.
FSAD е широко разпространено сексуално смущение, засягащо жените в пред-, пери- и пост менопауза (± HRT). То се свързва със съпътстващи заболявания като депресия, сърдечно-съдови заболявания, диабет и UG разстройства.
Основните последици от FSAD са липса на хиперемия/разширение, липса на смазване и липса на приятно генитално усещане. Вторичните последици от FSAD са намалено сексуално желание, болка по време на половото сношение и затруднение в постигането на оргазъм.
Напоследък е било предположено, че има васкуларна основа за поне част от пациентите със симптоми на FSAD (Goldstein etal.. Int. J. Impot. Res., 10, S84-S90.1998) c данни при животни, подкрепящи този възглед (Park et al., Int. J. Impot. Res., 9, 27 - 37, 1997).
Лекарства, кандидати за лекуване на FSAD, които са в процес на изследване за ефикасност, са главно терапии за еректилна дисфункция, които подпомагат кръвообращението към мъжките гениталии. Те се състоят от два типа формулировки, за орални или сублингвални лечения (апоморфин, фентоламин, инхибитори на фосфодиестераза тип 5 (PDE5) напр. силденафил) и простагландин (PGE0 които се инжектират или се прилагат трансуретрално на мъже, и локално към гениталиите на жени.
Съединенията от изобретението са полезни чрез предоставянето на средство за възстановяване на нормален сексуален отговор при възбуждане - а именно увеличен генитален кръвен поток, водещ до вагинална, клиторна и лабиална хиперемия. Това ще има за резултат увеличено вагинално смазване посредством плазмена трансудация, увеличена вагинална пластичност и увеличена генитална чувствителност. Следователно, съединенията от изобретението предоставят средства за възстановяване или усилване на нормалния сексуален отговор при възбуждане.
Без обвързване с теория, ние считаме, че невропептиди като вазоактивен интестинален пептид (VIP) са главни невротрансмитерни кандидати в контрола на женски сексуален отговор при възбуждане, особено в контрола на гениталния кръвен поток. VIP и други невропептиди се разграждат/метаболизират от NEP ЕСЗ.4.24.11. Така, инхибиторите на NEP ще потенцират ендогенния съдоразширяващ ефект на VIP, освобождаван по време на възбуждането. Това ще доведе до лечение на FSAD, такова като чрез усилен генитален кръвен поток и оттук, генитална хиперемия. Ние показахме, че селективни инхибитори на NEP ЕС 3.4.24.11 усилват тазовите нервно-стимулирани и VIP-индуцирани увеличения във вагиналния и клиторален кръвен поток. В допълнение, селективни NEP инхибитори усилват VIP и нервно-медиирани отпускания на изолирана вагинална стена.
Така настоящото изобретение е полезно, тъй като то помага да се предостави средство за възстановяване на нормален сексуален отговор при възбуждане - а именно увеличен генитален кръвен поток, водещ до вагинална, клиторална и лабиална хиперемия. Това ще доведе до увеличено вагинално смазване чрез плазмена трансудация, увеличена вагинална пластичност и увеличена вагинална чувствителност. Оттук, настоящото изобретение предоставя средство за възстановяване или усилване на нормалния сексуален отговор при възбуждане.
Предшестващите доктрини за NEP са били представени от Victor А. McKusick et al., на адрес: http://www3.ncbi.nlm.nih.gov/Omim/searchomim.htm. Следващата информация относно ΝΕΡ е била извлечена от този източник:
“Общият антиген на акутна лимфоцитна левкемия (CALLA )е важен маркер на клетъчната повърхност в диагностиката на човешката акутна лимфоцитна левкемия (ALL). Той присъства на левкемийни клетки от пре -В фенотип, които представлява 85 % от случаите на ALL. Обаче CALLA не е ограничен до левкемийни клетки и е открит на множество нормални тъкани. CALLA е гликопротеин, който особено изобилства в бъбрека, където той присъства на четковия ръб на проксималните канали и на гломеруларния епител. Letarte et al. (1988) клонираха кДНК (комплементарна ДНК) кодираща за CALLA и показаха, че аминокиселинната последователност, извлечена от кДНК последователността, е идентична на тази от човешка, асоциирана с мембрана неутрална ендопептидаза (ΝΕΡ; ЕС 3.4.24.11), известна също като енкефалиназа. ΝΕΡ разцепва пептиди при амино страната на хидрофобните остатъци и прави неактивни няколко пептидни хормона
I включително глюкагон, енкефалини, субстанция Р, невротензин, окситоцин и брадикинин. Чрез кДНК трансфекционен анализ, Shipp et al. (1989) потвърдиха, че CALLA е функционална неутрална ендопептидаза от типа, които преди бе наречен енкефалиназа. Barker et al. (1989) демонстрираха, че CALLA генът, който кодира ЮО-kD тип II трансмембранен гликопротеин, съществува в единично копие от повече от 45 kb, който не е прегрупиран в зпокачествености, експресиращи клетъчно повърхностен CALLA. Генът бе намерен на човешки хромозом 3 чрез изследване на соматични клетъчни хибриди и in situ хибридизация разделена на района до 3q21 - q27. Tran-Paterson et al. (1989) също приписват гена на хромозом 3 чрез Southem-блот анализ на ДНК от човек-плъши соматични клетъчни хибриди. D'Adamio et al. (1989) демонстрираха, че CALLA генът обхваща повече от 80 kb и е съставен от 24 екзона. ”
1. Barker, Р. Е.; Shipp, М. A.; D'Adamio, L; Masteller, Е. L; Reinherz, С Е. L. The common acute lymphoblastic leukemia antigen gene maps to chromosomal region 3(q21 - q27). J. Immun. 142: 283 - 287,1989.
2. D'Adamio, L.; Shipp, M. A.; Masteller, E. L.; Reinherz, E. L.: Organization of the gene encoding common acute lymphoblastic leukemia antigen (neutral endopeptidase 24.11): multiple miniexons and separate 5-prime untranslated regions. Proc. Nat. Acad. Sci. 86: 7103-7107, 1989.
3. Letarte, M.; Vera, S.; Tran, R.; Addis, J. B. L.; Onizuka, R. J.; Quackenbush, E. J.; Jongeneel, C. V.; Mclnnes, R. R.: Common acute tymphocytic leukemia antigen is identical to neutral endopeptidase. J. Exp. Med. 168: 1247- 1253, 1988.
A. Shipp, M. A.; Vijayaraghavan, J.; Schmidt, Е. V.; Masteller, E. L; D'Adamio, L.; Hersh, L. B.; Reinherz, E. L.: Common acute lymphoblastic leukemia antigen (CALLA) is active neutral endopeptidase 24.11 ('enkephalinase'): direct evidence by cDNA transfection analysis. Proc. Nat. Acad. Sci. 86: 297-301, 1989.
5. Tran-Paterson, R.; Willard, H. F.; Letarte, M.: The common acute lymphoblastic leukemia antigen (neutral endopeptidase-3.4.24.11) gene is located on human chromosome 3. Cancer Genet. Cytogenet. 42: 129 - 134, 1989:
“Гениталните органи (на жени) се състоят от вътрешна и външна група. Вътрешните органи са разположени в таза и се състоят от яйчници, фалопиеви тръби, матка и вагина. Външните органи са повърхностни към урогениталната диафрагма и под тазовата дъга. Те включват лонното възвишение, голямата и малки срамни устни, клиторът, преддверието, луковицата на преддверието и по-големите вестибуларни жлези” (Gray's Anatomy, C.D. Clemente, 13th American Edition).
Съединенията от изобретението намират приложение в следните подгрупи популации от пациенти с FSD: младите, възрастните, предменопаузални, пери-менопаузални, пост-менопаузални жени със или без хормон заместваща терапия.
Съединенията от изобретението намират приложение при пациенти с FSD, възникнало от:
i) Васкулогенни етиологии напр. сърдечно-съдови или атеросклеротични заболявания, хиперхолестеролемия, тютюнопушене, диабет, хипертензия, радиация и перинеална травма, травматично нараняване към илиохипогастритно пудендалната съдова система.
ii) Неврогенни етиологии като увреждания на гръбначния мозък, или заболявания на централната нервна система включващи множествена склероза, диабет, Паркинсонизъм, цереброваскуларни злополуки, периферни невропатии, травма или радикална тазова хирургия.
iii) Хормонални/ендокринни етиологии като дисфункция на системата хипоталамус/хипофиза/полова жлеза или дисфункция на яйчниците, дисфункция на панкреаса, хирургична или медицинска кастрация, андрогенна недостатъчност, високи нива на пролактин в кръвообращението, напр. хиперпролактинемия, естествена менопауза, преждевременно угасване функциите на яйчниците, хипер и хипотироидизъм.
iv) Психогенни етиологии като депресии, натрапчиво компулсивно разстройство, безпокойство, постнатална депресия/’’Baby Blues”, емоционални въпроси и въпроси свързани с връзки, страх от представление, съпружески несъгласия, дисфункционални отношения, сексуални фобии, религиозна забрана или минал травматичен опит.
ν) Предизвикана от лекарства сексуална дисфункция в резултат на лечение със селективни инхибитори на обратното поемане на серотонин (SSRI) и други антидепресантни лечения (трициклици и главните транквилизатори), анти-хипертензивни лечения, симпатолитични лекарства,
хронична терапия с орални контрацептивни хапчета.
Съединенията от изобретението могат да бъдат получени по известен начин по различни пътища. В следващите реакционни схеми и оттук нататък, освен ако не е посочено друго R1, η и Υ са, както са дефинирани в първия аспект. Тези процеси образуват допълнителни аспекти на изобретението.
В цялото описание общите формули са означени с римски цифри I, II, III, IV и т.н. Подгрупи от тези общи формули са дефинирани като la, lb, lc и
т.н...... IVa, IVb, IVc и т.н.
Съединенията с обща формула I могат да бъдат получени съгласно реакционната схема 1, чрез взаимодействие на съединение с формула II (където Prot е подходяща защитна група) с първичен амин с формула III до получаване на съединението с формула IV. Отстраняването на защитата дава съединения с формула I.
Схема 1
Етапът на свързване на киселината/амина може да бъде проведен чрез взаимодействие на съединения с формула II със съединения с формула III (или тяхна амино сол) в присъствието на свързващ реагент, евентуално катализатор и излишък от киселинен акцептор, в подходящ разтворител. Типично, обработването на смес от съединения с формула II и съединения с формула III със свързващ реагент (например дициклохексилкарбодиимид (DCC), 1-(3-диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид (WSCDI), бензотриазол-1-ил диетил фосфат, фосфорен оксихлорид, титанов тетрахлорид, сулфурил хлорид флуорид, реагент на Lawesson, РРАСА, PYBOP или реагент на Mukaiyama) по избор в присъствието на третична аминова база (например триетиламин, база на Hunig, пиридин или NMM) за до 24 часа при температури между -78 и 100 °C. Предпочитаните реакционни условия включват взаимодействие на съединения с формула II (1-1.5 еквивалента) със съединения с формула III (или техни соли 1-1.5 еквивалента), в присъствието на 1-(3-диметиламинопропил)-3етилкарбодиимид хидрохлорид (WSCDI) или Ν,Ν'-дициклохексилкарбодиимид (DCC) (1.1 -1.3 еквивалента), 1-хидроксибензотриазол хидрат (НОВТ) или диметиламинопиридин (DMAP) (1.05 -1.2 еквивалента), /V-метил морфолин (NMM) или триетиламин (2.3-3 еквивалента) в диметилформамид или дихлорометан при между стайна температура и 90 °C за 16 -18 часа.
Алтернативно, етапът на свързване на киселината/амина може да протече през активирано междинно съединение (такова като ацил имидазол, смесен анхидрид или киселинен хлорид) в присъствието на излишък от киселинен акцептор в подходящ разтворител. Типичните реакционни условия включват обработване на съединения с формула II с активиращо средство (например Λ/,Λ/'-карбонилдиимидазол, Λ/,ΛΓкарбонилбис(3-метилимидазолиев)трифлат, тионилхлорид или оксалилхлорид) по избор в присъствието на третична аминова база (например триетиламин, основа на Hunig, пиридин или NMM) за до 24 часа, последвано от взаимодействие със съединения с формула III (или тяхна сол), по избор в присъствието на катализатор (например 4-диметил25 аминопиридин) или адитив (например хидроксибензотриазол) в подходящ разтворител (например дихлорометан, THF, етилацетат, ацетонитрил, DMF или толуен), по избор в присъствието на допълнителна аминобаза при температури между -78 °C и 150 °C, за до 48 часа.
Предпочитаните реакционни условия се състоят от взаимодействие на киселинния хлорид на съединенията с формула II (1-1.1 еквивалента) със съединения с формула III (или техни соли, 1 до 1.5 еквивалента) в присъствието на триетиламин или /V-метил морфолин (1.4 -10 еквивалента) в разтворител дихлорометан при стайна температура за 24 часа. Алтернативно, съединения с формула II могат да бъдат превърнати в киселинния хлорид in situ чрез обработване с оксалилхлорид в дихлорометан в присъствието на каталитично количество диметилформамид за 2 часа при стайна температура, или чрез обработване на съединения с формула II с тионилхлорид в смес от дихлорометан и пиридин при -10 °C за 3 часа, последвано от прибавянето на триетиламин,
4-диметиламинопиридин и съединението с формула III, и оставяне на сместа да взаимодейства за 48 часа при 20 °C.
Съединения с формула I могат да бъдат получени от съединения с формула IV чрез отстраняване на защитата. Методите за отстраняване на защитата на една киселинна група зависят от защитната група. За примери на методологията за защита/отстраняване на защитата, виж “Protective groups in Organic synthesis”, TW Greene and PGM Wutz.
Например, когато Prot е mpem.-бутил, условията за отстраняване на защитата се състоят във взаимодействие на IV с трифлуорооцетна киселина/дихлорометан (1:1 - 1.5 обемни), при стайна температура за 2 - 18 часа, по избор в присъствието на карбокатионен акцептор, напр. анизол (10 еквивалента). Когато Y съдържа хидрокси група, може да бъде необходима основна хидролиза на междинното съединение естер на трифлуорооцетната киселина. Алтернативна методология за отстраняване на защитата, когато Prot е трет.-бутил включва обработване на IV със солна киселина в дихлорометан при стайна температура за 3 часа. За избягване на съмнение, Prot като mpem.-бутил е даден като пример и не е предназначен да бъде ограничен до трет.-Бутил.
Алтернативно, когато Prot е mpem.-бутил, отстраняването на защитата може да бъде постигнато чрез обработване на съединения с формула IV със силна киселина (например газообразна или концентрирана солна киселина, бромоводородна киселина, фосфорна киселина, азотна киселина или сярна киселина, трифлуорооцетна киселина, хлорооцетна киселина, р-толуенсулфонова киселина, трифлуорометансулфонова киселина или ледена оцетна киселина) в количества, вариращи от каталитични до излишък, по избор в подходящ разтворител (например толуен, дихлорометан, диетилов етер, етанол, THF или хексан) и по избор в присъствието на вода, при температури между 20 °C и 150 °C, за до 48 часа.
Предпочитани условия за отстраняване на защитата, когато Prot е mpem.-бутил, са обработването на съединения с формула IV с десеткратен излишък на трифлуорооцетна киселина в дихлорометан, при стайна температура за 24 часа.
Когато Prot е бензил, условията за отстраняване на защитата се състоят във взаимодействие на IV с паладий върху въглен (5-10 %) във воден етанол (40 - 95 %) при 15-60 psi (1 psi = 6.9 kN/m2) при стайна температура за 2 часа до 3 дни.
Тези процеси представляват допълнителни аспекти на изобретението.
Съединенията с формула IV са нови и са допълнителен аспект от изобретението.
Съединения с формула la, т.е. съединенията с обща формула I, в които Y е -NHSO2R19, могат да бъдат получени съгласно реакционна схема 2. Съединения с формула V се получават първо чрез взаимодействие на съединения с формула II, със съединения с формула VI, където Prot2 е подходяща защитна група за амин. Предпочитаните реакционни условия са аналогични на тези, описани за етапа на свързване на киселината/амина в
Схема 1 по-горе. Селективното отстраняване на защитата на съединенията с формула V дава съединения с формула VII. Съединенията с формула VII взаимодействат с R19SO2CI в присъствието на киселинен акцептор в подходящ разтворител, до образуване на съединения с формула IVa. Отстраняването на защитата на съединенията с формула IVa при аналогични условия на тези, описани за етапа на отстраняване на защитата от Схема 1, дава съединенията с формула la.
Схема 2
Методите за отстраняване на защитата на една амино група зависят от защитната група. За примери на методологията за защита/отстраняване на защитата, виж “Protective groups in Organic synthesis”, TW Greene and PGM Wutz. Например, когато Prot2 е бензоилоксикарбонил, условията за отстраняване на защитата се състоят във взаимодействие на V с паладий върху въглен (10 %) в етанол, при стайна температура за 18 часа.
. Предпочитаните методи за получаване на съединенията с формула IVa включват взаимодействие на VII с R19SO2CI (1 еквивалент) в присъствието на триетиламин (1.5 - 2.5 еквивалента) в дихлорометан, при стайна температура за 2 до 3 дни.
Съединения с формула lb, т е. съединения с формула I, в които п е 0 и R9
---( 2---C(=O)NR11R12
Y е \, могат да бъдат получени съгласно реакционна Схема 3.
Съединенията с формула II взаимодействат със съединения с формула Illa при условия, аналогични на условията за свързване на киселина/амин от Схема 1 до получаване на съединенията с формула IX, където Prot3 е защитна група, която може да бъде селективно отстранена в присъствието на защитна група Prot. Една предпочитана защитна група Prot3 С е основна лабилна естерна група. Следователно, обработването на съединението с формула IX в основни условия дава съединения с формула X. Съединенията с формула X взаимодействат със съединения с формула NHR11R12 при условия, аналогични на условията за свързване на киселина/амин от Схема 1, до образуване на съединения с формула IVb. Отстраняването на защитата на съединенията с формула IVb при условия, аналогични на етапа на отстраняване на защитата в Схема 1, дава съединения с формулата lb.
Предпочитаните условия за отстраняване на защитната група Prot3 от IVb включват обработване на IVb с натриев хидроксид (1 N) в метанол при О стайна температура за 22 часа.
aft**
с.
Схема 3
Съединения с формула lllb, т.е. съединенията с обща формула III, в които η е 2 и Y е 2-оксопиперидино, могат да бъдат получени съгласно реакционна Схема 4.
Схема 4 ο
II i) NaH, THF <^NH «) Br(CH2)2OTBDMS u --o ά/ν OTBDMS f ^N^F/THF
Съединения c формула lllc, където r e 1 или 2, могат да бъдат получени съгласно реакционна схема 5. Съединения с формула XII са защитени при аминовия остатък с подходяща защитна група Prot4 до образуване на съединения с формула XIII. Една предпочитана защитна група е mpem.-бутилоксикарбонил. Съединенията с формула XIII
взаимодействат при типични условия за свързване на киселина/амин с NHR11R12 до образуване на съединения с формула XIV, които при отстраняване на защитата образуват съединения с формулата Шс.
Схема 5
co2nr11r12
условия за въвеждането на трет.реакционни бутилоксикарбонилната защитна група се състоят в обработването на съединения с формулата XII с (трет.-бутилоксикарбонил)2О в диоксан и 2 N натриев хидроксид, при стайна температура за 18 часа.
Типичните условия за свързване на киселина/амин включват обработване на съединенията с формула XIII и NHR11R12 с бензотриазол-1илокситрис(пиролидино)фосфониев хексафлуорофосфат (PYBOP), 1-хидроксибензотриазол хидрат (НОВТ), основа на Hunig, амин (напр. триетиламин), в диметилформамид при стайна температура за 2 часа. Алтернативно, съединенията с формула XIII и NHR11R12 могат да бъдат обработени с 1-(3-диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид, НОВТ, N-метил морфолин (NMM), в диметилформамид, при стайна температура за 18 часа.
Типичните реакционни условия за отстраняване на защитата, когато Prot4 е трет.-бутилоксикарбонил, включват взаимодействие на XIV със солна киселина или трифлуорооцетна киселина в дихлорометан, при стайна температура за 2 до 4 часа.
Типичните
Съединения с формула llld могат да бъдат получени съгласно реакционна схема 6. Защитната група за предпочитане е трет.-бутилоксикарбонил, който може да бъде отстранен при стандартни условия, както бе
описано преди.
Схема 6
i) EEDQ, DCM
и) ch3conhnh2
Реагент на Lawesson THF/кипене
NHProt
ДД
Y
Me
NH2 (Hid)
Съединения c формула llle могат да бъдат получени съгласно реакционна схема 7, като се използват стандартни реакции на свързване киселина/амин, както бе описано преди. Защитната група е за предпочитане бензилоксикарбонил, който може да бъде отстранен при стандартни условия, типично паладий върху въглен (5-10 %) в етанол, при стайна температура и 50 psi за 4 часа.
Схема 7
РгоГ^'— о
--------- H2NX^Y^\r11 о
(Ше)
Съединения с формула lllf могат да бъдат получени съгласно реакционна Схема 8.
Схема 8
Me
ο
Ο
NaH, THF, rt
MeMgCI, THF
NHOH.HCI, пир.
EtOH. rt, 16 h
PtO2, EtOH
60psi, rt, 18h
Me (Ulf)
Съединенията c формула Illg могат да бъдат получени в два етапа съгласно реакционната схема 9. Като първи етап, съединения с формула XV могат да бъдат получени от съединения с формула XVI като се използва стандартна методология за свързване киселина/амин, аналогично на условията за свързване на киселина/амин, описани за реакционна схема 1. Prot5 представлява подходяща отцепваща се група, за предпочитане, mpem.-бутилоксикарбонил. Вторият етап се състои в отстраняване на Prot5. Когато Prot5 е трет.-бутилоксикарбонил, то предпочитаните реакционни условия се състоят в обработване със солна киселина в диетилов етер/етилацетат, при стайна температура за 18 часа.
Схема 9
dig)
Съединения с формула lllh могат да бъдат получени в три етапа съгласно реакционната Схема 10.
Схема 10
i) nBuLi, Et2O (-70 °C) ii) бензалдехид
CuSO4,NH3
135 °C, високо налягане
OH
%Pd/C, HCI, EtOH psi, 6 h, rt
Съединения c формула lllj могат да бъдат получени чрез редукция на на нитро група съгласно реакционната Схема 11.
Схема 11
Sn/HCl о
'0 (lllj)
Допълнителни методи за получаване на съединения с формула III, са дадени в Схема 12 по-долу, където Ra е С^алкил или алкокси.
Схема 12
LiAlH4, THF, h при кипене
№Ь1Н2.ксилен 150С, 18hr
0(СОС[)2. OMF H9N\/S\^-Ra ------------т- \\ // 11)тиосемикарбазид N—N
Съединенията с обща формула I притежават хирален център при въглерода, присъединенен към R1. Индивидуалните енантиомери на общата формула I могат да бъдат получени по множество методи, известни на специалистите химици, такива като: от съответното оптично чисто междинно съединение или чрез разделяне. Предпочитан метод на разделяне е чрез (+)-псевдоефедриновата сол (виж Получаване 2 тук). Алтернативно, хирални съединения с формула I могат да бъдат получени от хирални съединения с формула II, както е обсъдено по-долу.
Множество съединения с формула II са известни в областта (виж ЕР 274 234 В1 и WO 91/13054). Други съединения с формула II могат да бъдат получени по аналогичен начин.
Хирални съединения с формула На могат да бъдат получени от съединения с формула XVI, както е показано на реакционна Схема 13.
Схема 13
(XVII) ДО
Съединения с формула II могат да бъдат получени чрез обработване на съединения с формула XVII с R1-Xz (където Xz е халоген), в силно основни условия по избор с адитив в апротен разтворител.
Типичните реакционни условия включват първо обработване на съединения с формула XVII с поне двукратен излишък от силна основа (например литиев диизопропиламид, литиев, натриев или калиев хексаметилдисилазид, алкиллитиева, алкилмагнезиева или фосфазенова база) в не-протен разтворител (например THF, диетилов етер, хексан, хептан или етилбензен, или смес от тези разтворители), по избор с адитив (например TMEDA, DMPU или НМРА) при температури между -78 °C и стайна температура, и прибавяне тогава на R1-Xz (например алилбромид, пропилбромид или метилйодид) при -78 °C и разбъркване цяла нощ, като се затопля до стайна температура. Подходяща обработка дава съединенията с формула II.
Предпочитани реакционни условия за получаване на съединения с формула II, където R1 е алил, са обработване на съединения с формула XVII (1 моларен еквивалент) с литиев диизопропиламид (2.3 еквивалента) в смес от THF, н-хептан и етилбензен при -10 °C за 4 часа. След това се прибавя алилбромид (1.2 еквивалента) при - 10 °C, реакционната смес се разбърква при - 10 °C за 2 часа и после се затопля до 20 °C в продължение на 4 часа и се разбърква допълнително 15 часа при 20 °C .
Разделянето на съединенията с формула ПЬ може да бъде осъществено директно от съединения с формула II, обаче един предпочитан процес дава амино сол с формула XIX (т.е. RZ-NH3 +), последвано от прекристализация за постигане на пречистване.
Типични соли са триетиламиновите, изопропиламинови, триетаноламинови или циклохексиламинови соли. Типичните реакционни условия включват взаимодействие на II с необходимия амин в подходящ разтворител (например хексан, хептан или толуен) при увеличени температури с охлаждане за предизвикване на кристализация в продължение на 24 часа, последвано от прекристализация от същия или различен разтворител, по избор при увеличени температури.
Предпочитана сол е цикпохексиламиновата сол. Предпочитаните реакционни условия се състоят в обработване на съединения с формула II (1 моларен еквивалент) с циклохексиламин (1 еквивалент) при 20 °C в хептан, последвано от прекристализация от етилацетат при 70 °C, преди охлаждане до 50 °C в продължение на 2 часа за предизвикване на кристализация. Сместа след това се охлажда до 20 °C в продължение на 2 часа и се разбърква 0.5 часа.
Съединения с формула XX (където RyNH3 + е хирален катион), могат да бъдат получени от съединения с формула XIX чрез подкисляване в подходяща разтворителна система, по избор включваща вода с използване на силна киселина, последвано от класическо разделяне на получената карбоксилна киселина.
Типичните реакционни условия включват обработване на съединения с формула XX в двуфазна система от вода и несмесваем органичен разтворител (например хептан, толуен, етилацетат, диетилов етер или дихлорометан) със силна киселина (например солна киселина, сярна киселина, р-толуенсулфонова киселина, трифлуорооцетна киселина или фосфорна киселина) при температури между 0 °C и 100 °C до получаване на свободната карбоксилна киселина, последвано от обработване с нерацемична хирална аминова база (например а-метилбензиламин, псевдоефедрин, ефедрин, норефедрин, хининов алкалоид, аминокиселинни естери, амино алкохоли като 2-пиролидинметанол или хинуклидин-3-ол) по избор в разтворител (например естер, алкан, ароматен въглеводород, халоалкан, етер или алкохол) при температури между 0 °C и 150 °C до Q получаване на суровата сол. Тази сол след това се прекристализира един или повече пъти от същия или различен разтворител при температури между 0 °C и 150 °C, до получаване на хиралната сол.
Предпочитана сол е псевдоефедриновата сол. Предпочитаните реакционни условия включват обработване на суспензия от съединение с формула XX във водно/н-хептанова смес с разредена солна киселина при стайна температура, докато pH на водната фаза стане pH 3 за получаване на свободната киселина, последвано от обработване на получената карбоксилна киселина с (15,2С)-(+)-псевдоефедрин (1 еквивалент) в нхептан при 80 °C, последвано от охлаждане до 45 °C в продължение на 2 £ часа за предизвикване на кристализация, след това охлаждане до 20 °C в продължение на 2 часа и разбъркване за 4 часа. След това се провежда прекристализация от н-хептан при 80 °C, последвано от охлаждане до 60 °C в продължение на 2 часа за предизвикване на кристализация, последвана от охлаждане до 20 °C в продължение на 2 часа и разбъркване за 1.5 часа.
Съединения с формула Па могат да бъдат получени от съединения с формула XX чрез подкисляване в подходяща разтворителна система, по избор включваща вода с използване на силна киселина.
Типичните реакционни условия включват обработване на съединения с формула XX в двуфазна система от вода и несмесваем органичен разтворител (например хептан, толуен, етилацетат, диетилов етер или дихлорометан) и силна киселина (например солна киселина, сярна киселина, р-толуенсулфонова киселина, трифлуорооцетна киселина или фосфорна киселина) при температури между 0 °C и 100 °C до получаване на съединенията с формула Па.
Предпочитаните реакционни условия включват обработване на суспензия от съединение с формула XX във водно/н-хептанова смес с разредена солна киселина при стайна температура, докато pH на водната фаза стане pH 3, за получаване на свободната киселина.
Съединения с формула Па могат да бъдат получени чрез хидриране на съответното съединение, където R1 е ненаситен. Типичните реакционни условия включват разбъркване в атмосфера от водород в подходящ разтворител в присъствието на катализатор (например паладий, платина, никел, иридий, родий или рутений, по избор адсорбиран на подходящ носител като въглерод, алуминиев оксид, бариев сулфат, калциев карбонат или като сол, такава като паладиев хидроксид или смеси от соли като H2PtCle и SnCI2.2H2O, или комплекс като катализатор на Wilkinson, катализатор на Crabtree, Со2(СО)8, RhH(PPh3)4, или [Co(CN)5]3*) при температури между стайна температура и 150 °C, и водородни налягания между 30 и 150 psi.
В един предпочитан процес, съединения с формула На, в които R1 е пропил, могат да бъдат получени чрез хидриране на съответното алилно съединение. Предпочитаните реакционни условия се състоят от разбъркване на етанолов разтвор на ненаситената карбоксилна киселина във водородна атмосфера с 9 % т/т от 5 % паладий върху въглен при стайна температура за 24 часа.
Съединения с формула XVIla, т.е. съединения с формула XVII, в които Prot е mpem.-бутил, могат да бъдат получени в два етапа от търговски достъпни съединения с формула XXI съгласно реакционната Схема 14.
Схема 14
о (XXI) о
рсхп)
Съединения с формула XXII могат да бъдат получени от съединения с формула XXI чрез обработване на XXI с източник на трет.-бутилов катион или трет.-бутоксид, като се използва подходящ катализатор и/или дехидратиращо средство в подходящ безводен разтворител по избор при увеличена температура, или чрез активиране на карбоксилната киселина последвано от взаимодействие стрет.-бутанол.
Типичните реакционни условия включват обработване на съединения с формула XXI с каталитични количества киселина (например фосфорна киселина, солна киселина, сярна киселина, азотна киселина, ртолуенсулфонова киселина или трифлуорооцетна киселина) в присъствието на изобутилен, трет.-бутанол, mpem.-бутилхалиди или трет.-бутилов етер в подходящ разтворител (например дихлорометан, THF или толуен) между -20 и 150 °C, за до 48 часа.
Алтернативни реакционни условия включват обработването на съединения с формула XXI с комбинация от третична аминова основа (например триетиламин, основа на Hunig, пиридин или NMM) и дехидратиращо средство (например дициклохексилкарбодиимид, алкил хлороформиат, фенилдихлорофосфат, 2-хлоро-1,3,5-тринитробензен, ди-2пиридилкарбонат, 1 ,Т-карбонилдиимидазол, (триметилсилил)етоксиацетилен, Л/,/\/-карбонилбис(3-метилимидазолиев) трифлат или диетил азодикарбоксилат) и трифенилфосфин, последвана от прибавянето на трет.бутанол, по избор с катализатор като 4-диметиламинопиридин в подходящ разтворител (например дихлорометан, THF или толуен), между -20 и 150 °C за до 48 часа.
Още по-нататък реакционните условия включват превръщане на съединения с формула XXI в киселинния хлорид като се използва тионилхлорид, оксалилхлорид или реагент на Ghosez по избор в присъствието на третична аминова основа (например триетиламин, основа на Hunig, пиридин или NMM), последвано от обработване е трет.-бутанол, по избор в присъствието на катализатор като 4-диметиламинопиридин в подходящ разтворител (например дихлорометан, THF или толуен)ь между -20 и 150 °C, за до 48 часа.
Предпочитаните реакционни условия се състоят от обработване на съединения с формула XXI с изобутилен (5 еквивалента), концентрирана сярна киселина (0.15 еквивалента) и трет.-бутанол (0.16 еквивалента) в дихлорометан, с разбъркване при -10 до 25 °C за 24 часа.
Съединения с формула XVIIa могат да бъдат получени от съединения с формула XXII, чрез обработване с циклопентанкарбоксилна киселина в силно основни условия в апротен разтворител, по избор в присъствието на адитив.
Типичните реакционни условия включват обработване на циклопентанкарбоксилна киселина с поне двукратен излишък от силна основа (например литиев диизопропиламид, литиев, натриев или калиев хексаметил-дисилазид, алкиллитиева, апкилмагнезиева или фосфазенова основа) в непротен разтворител (например THF, диетилов етер, хексан, хептан или етилбензен, или смес от тях), по избор в присъствието на адитив (например TMEDA, DMPU или НМРА) при температури, вариращи от -78 °C до 50 °C, за до 24 часа, последвано от прибавянето на съединението с формула XXII и реакция при -20 °C, за до 24 часа и подходяща обработка.
Предпочитаните реакционни условия се състоят в обработване на циклопентанкарбоксилна киселина с литиев диизопропиламид (2.15 еквивалента) в смес от THF, н-хептан и етилбензен при -15 °C за 3 часа, последвано от обработване с трет.-бутил-3-бромопропионат (1.06 еквивалента) в THF при -15 °C за 15 часа, после затопляне до стайна температура.
Други съединения с формула II са или достъпни от търговски източници, известни в областта, или могат да бъдат получени от съединения, известни в областта при използване на методи, известни в областта или с използване на методи, описани тук (виж разделите за Примери и Получавания).
Една фармацевтично приемлива сол на съединение с формулата (I) може лесно да бъде получена чрез смесване заедно разтвори на съединение с формулата (I) и желаната киселина или основа, както е подходящо. Солта може да се утаи от разтвор и да бъде събрана чрез филтруване или може да бъде възстановена чрез изпаряване на разтворителя.
Съединенията от изобретението могат също да бъдат комбинирани с едно или повече от следните, за лечението на FSD:
1) Един или повече срещащи се в природата или синтетични простагландини или техни естери. Подходящи простагландини за използване тук включват съединения като алпростадил, простагландин E1t простагландин Ео, 13^4-дихидропростагландин Ει, , простагландин Е2, епростинол, природни синтетични и полусинтетични простагландини и техни производни, включващи тези, описани в WO 00033825 и/или US 6 037 346, издаден на 14.03.2000, всички включени тук чрез препратка, PGE0, PGEt, PGA1t PGB1t PGFiOi, 19-хидрокси-РСА!, W-xnflpOKcn-PGB!, PGE2, PGB2, 19-хидрокси-РСА2, 19-xnflpOKCH-PGB2, PGE3a, карбопрост трометамин динопрост, трометамин, динопростон, липо прост, гемепрост, метенопрост, сулпростун, тиапрост и моксизилат.
2) Едно или повече съединения α-адренергични рецепторни антагонисти, известни също като α-адреноцептори или а-рецептори или а-блокери. Подходящи съединения за използване тук включват: α-адренергичните рецепторни блокери както са описани в РСТ заявка WO 99/30697, публикувана на 14.06.1998, разкритията на която, отнасящи се до α-адренергичните рецептори, са включени тук чрез препратка и включват, селективни сц-адреноцепторни или а2-адреноцепторни блокери и не-селективни адреноцепторни блокери; подходящите αι-адреноцепторни блокери включват: фентоламин, фентоламин мезилат, тразодон, алфузосин, индорамин, нафтопидил, тамсулосин, дапипразол, феноксибензамин, идазоксан, ефараксан, йохимбин, раууолфа алкалоиди, записи 15/2739, SNAP 1069, SNAP 5089, RS 17053, SL 89.0591, доксазозин, теразозин, абанокуил и празозин; а2-блокер блокери от US 6 037 346 [14.03.2000] дибенарнин, с толазолин, тримазозин и дибенарнин; α-адренергични рецептори както са описани в US патенти: 4 188 390; 4 026 894; 3 511 836; 4 315 007; 3 527 761; 3 997 666; 2 503 059; 4 703 063; 3 381 009; 4 252 721 и 2 599 000, всеки от които е включен тук чрез препратка; а2-адреноцепторните блокери включват: клонидин, папаверин, папаверин хидрохлорид, по избор в присъствието на кардиотонично средство, такова като пирксамин.
3) Едно или повече NO-донорни (NO-агонист) съединения.
Подходящи NO-донорни съединения за използване тук включват органични нитрати, такива като моно- ди или три-нитрати или С органични нитратни естери включително глицерин тринитрат (известен също като нитроглицерин), изосорбид 5-мононитрат, изосорбид динитрат, пентаеритритол тетранитрат, еритритил тетранитрат, натриев нитропрусид (SNP), 3-морфолиносиднонимин молсидомин, S-нитрозо-М-ацетил пеницилиамин (SNAP) S-HMTpo3O-Nглутатион (SNO-GLU), М-хидрокси-1_-аргинин, амилнитрат, линсидомин, линсидомин хлорохидрат, (SIN-1) З-нитрозо-И-цистеин, диазениеви диолати, (NONO-ати), 1,5-пентандинитрат, L-аргинен, женшен, zizphi fructus, молсидомин, Re - 2047, производни на нитрозилиран максизилит като NMI-678-11 и NMI-937, както са описани в публикувана РСТ заявка WO 0012075.
4) Едно или повече средства, отварящи калиеви канали или модулатори. Подходящи средства за отваряне на калиеви канали/модулатори за използване тук включват никорандил, кромокалим, левкромакалим, лемакалим, пинацидил, клиазоксид, миноксидил, чарибдотоксин, глибурид, 4«амини пиридин, ВаСЬ.
5) Едно или повече допаминергични средства, за предпочитане, апоморфин или селективен D2, D3 или D2/D3 агонист като, прамипексол и ропиринол (както е претендирай в WO 00/23056), PNU95666 (както е претендирай в WO 00/40226).
6) Едно или повече вазодилаторни средства. Подходящи вазодилаторни средства за използване тук включват нимодепин, пинацидил, цикланделат, изокссуприн, хлоропрумазин, халоперидол, Rec 15/2739, тразодон.
7) Един или повече тромбоксан А2 агонисти.
8) Едно или повече активни средства за ЦНС.
9) Един или повече ергот алкалоиди. Подходящи ергот алкалоиди са описани в US патент 6 037 346, издаден на 14.03.2000 и включват ацетергамин, бразерголин, бромергурид, цианерголин, делорготрил, дисулергин, ергоновин малеат, ерготамин тартарат, етисулергин, лерготрил, лизергид, мезулергин, метерголин, метерготамин, ницерголин, перголид, прописергид, протергурид, тергурид.
10) Едно или повече съединения, които модулират действието на натрийуретичните фактори, по-специално атриалния натрийуретичен фактор (известен също като атриален натрийуретичен пептид), В тип и С тип натрийуретични фактори такива като инхибитори или неутрална ендопептидаза.
11) Едно или повече съединения, които инхибират ангиотензинконвертиращия ензим като енаприл, и комбинирани инхибитори на ангиотензин-конвертиращия ензим и неутралната ендопептидаза като омапатрилат.
12) Един или повече ангиотензин рецепторни антагонисти като лосартан.
13) Един или повече субстрати за NO-синтаза, като L-аргинин.
14) Един или повече блокери на калциеви канали като амлодипин.
15) Един или повече антагонисти на ендотелинови рецептори и инхибитори на ендотелин-конвертиращия ензим.
16) Едно или повече средства за понижаване на холестерола като статини (напр. аторвастатин / Lipitor- търговска марка) и фибрати.
17) Едно или повече антитромбоцитни и антитромботични средства, напр. tPA, uPA, уарфарин, хирудин и други тромбинови инхибитори, хепарин, инхибитори на тромбопластиновия активиращ фактор.
18) Едно или повече инсулин сенсибилизиращи средства като резулин и хипогликемични средства като глипизид.
19) L-допа или карбидопа.
20) Един или повече ацетилхолинестеразни инхибитори като донезипил.
21) Едно или повече стероидни или нестероидни . противовъзпалителни средства.
22) Един или повече естроген рецепторни модулатори и/или естрогенови агонисти и/или естрогенови антагонисти, за предпочитане, ралоксифен или ласофоксифен, (-)-цис-6-фенил-5-[4(2-пиролидин-1-ил-етокси)-фенил]-5,6,7,8-тетрахидронафтален-2-ол и негови фармацевтично приемливи соли, получаването на което е дадено подробно в WO 96/21656.
23) Един или повече модулатори на канабиноидни рецептори.
24) Един или повече инхибитор на NPY (невропептид Y), поспециално инхибитор на NPY1 или NPY5, за предпочитане NPY1 инхибитор, за предпочитане, тези NPY инхибитори (включително NPY Y1 и NPY Y5) имат IC50 от по-малко от 100 пМ , по-предпочитано помалко от 50 пМ. Един анализ за идентифициране на NPY инхибитори е представен в W0 98/52890 (виж страница 96, редове 2 до 28).
25) Един или повече вазоактивен интестинален протеин (VIP), VIP миметик, VIP аналог, по-специално медиирани с един или повече от VIP рецепторните подтипове VPAC1, VPAC или РАСАР (хипофизен аденилат цикпазен активиращ пептид), един или повече VIР рецепторен агонист или VIP аналог (напр. Ro-125-1553) или VIP фрагмент, един или повече α-адреноцепторен антагонист с VIP комбинация (напр. инвикорп, авиптадил).
26) Един или повече меланокортинов рецепторен агонист или модулатор или меланокортинов усилвател, като меланотан II, РТ-14, РТ-141 или съединения претендирани в WO 099/64002, WO 000/74679, WO 099/55679, WO 001/05401, WO 000/58361, WO 001/14879, WO 001/13112, WO 099/54358.
27) Един или повече серотонинов рецепторен агонист, антагонист или модулатор, по-специално агонисти, антагонисти или модулатори за 5НТ1А (включително VML 670), 5НТ2А, 5НТ2С, 5НТЗ и/или 5НТ6 рецептори, включително тези, описани в WO 099/02159, WO 000/02550 и/или WO 000/28993.
28) Едно или повече тестостерон заместващи средства (вкл. дехидроандростендион), тестостернон (Тострел), дихидротестостерон или тестостеронен имплант.
29) Един или повече от естроген, естроген и медроксипрогестерон или медроксипрогестерон ацетат (МРА) (т.е. като комбинация), или естроген и средство за метил тестостерон хормон заместваща терапия (напр. HRT особено Премарин, Ценестин, Естрофеминал, Екуин, Естрас, Естрофем, Елесте Соло, Естринг, Еастрадерм TTS, Еастрадерм Матрикс, Дерместрил, Премфаз, Преемпро, Премпак, Премикве, Естратест, Естратест HS, Тиболон).
30) Един или повече модулатори на преносителите за норадреналин, допамин и/или серотонин, като бупропион, GW-320659.
31)
32)
33)
34)
Един или повече пуринергичен рецепторен агонист и/или модулатор.
Един или повече неврокининов (NK) рецепторен антагонист, включително тези, описани в WO 099/64008.
Един или повече опиоиден рецепторен агонист, антагонист или модулатор, за предпочитане, агонисти за ORL-1 рецептора.
Един или повече агонист или модулатор за окситоцин/вазо· пресинови рецептори, за предпочитане, селективен окситоцинов агонист или модулатор.
35)
Един или повече PDE инхибитор, по-специално PDE 2, 3, 4, 5, 7 или 8 инхибитор, за предпочитане, PDE2 или PDE5 инхибитор и найпредпочитано, PDE5 инхибитор (виж по-нататък), споменатите инхибитори за предпочитане имат IC50 срещу съответния ензим от по-малко от 100 пМ. Подходящи cGMP PDE5 инхибитори за използване съгласно настоящото изобретение включват: пиразоло[4,3-0]пиримидин-7-оните, разкрити в ΕΡ-ΑΌ463756; пиразоло[4,3-с!]пиримидин-7-оните, разкрити в ЕР-А-0526004; пиразоло[4,3с!]пиримидин-7-оните, разкрити в публикувана международна патентна заявка WO 93/06104; изомерните пиразоло[3,4-с!]пиримидин-4-они, разкрити в публикувана международна патентна заявка WO 93/07149; хиназолин-4-оните, разкрити в публикувана международна патентна заявка WO 93/12095; пиридо[3,2-с!]пиримидин-4-оните, разкрити в публикувана международна патентна заявка WO 94/05661; пурин-6оните, разкрити в публикувана международна патентна заявка WO 94/00453; пиразоло[4,3-с!]пиримидин-7-оните, разкрити в публикувана международна патентна заявка WO 98/49166; пиразоло[4,3фпиримидин-7-оните, разкрити в публикувана международна патентна заявка WO 99/54333; пиразоло[4,3-с!]пиримидин-4-оните, разкрити в ЕР-А-0995751; пиразоло[4,3-0]пиримидин-7-оните, разкрити в публикувана международна патентна заявка WO 00/24745;
пиразоло[4,3-б]пиримидин-4-оните, разкрити в ЕР-А-0995750; съединенията разкрити в публикувана международна заявка WO 95/19978; съединенията разкрити в публикувана международна заявка WO 99/24433 и съединенията разкрити в публикувана международна заявка WO 93/07124. Пиразоло[4,3-с!]пиримидин-7-оните разкрити в публикувана международна заявка WO 01/27112; пиразоло[4,3б]пиримидин-7-оните, разкрити в публикувана международна заявка WO 01/27113; съединенията, разкрити в ЕР-А-1092718 и съединенията разкрити в ЕР-А-1092719.
Допълнителни подходящи PDE5 инхибитори за използване съгласно настоящото изобретение включват: 5*[2-етокси-5-(4-метил-1пиперазинил-сулфонил)фенил]-1-метил-3-Н“ПропиЛ1,6“ДИХИДро-7Н“ пиразоло[4,3-с!]пиримидин-7-он (силденафил) известен също като
1-[[3-(6,7-дихидро-1-метил-7-оксо-3-пропил-1Н-пиразоло[4,3-с1]пиримидин-5-ил)-4-етоксифенил]сулфонил]-4-метилпиперазин (виж ЕР-А0463756); 5-(2-етокси-5-морфолиноацетилфенил)-1-метил-3-н-пропил-
1,6-дихидро-7Н-пиразоло[4,3-с1]пиримидин-7-он (виж ЕР-А-0526004);
3-етил-5-[5-(4-етилпиперазин-1-илсулфонил)-2-н-пропоксифенил]-2(пиридин-2-ил)метил-2,6-дихидро-7Н-пиразоло[4,3-с!]пиримидин-7-он (виж WO 98/49166); 3-етил-5-[5-(4-етилпиперазин-1-илсулфонил)-2-(2метоксиетокси)пиридин-3-ил]-2-(пиридин-2-ил)метил-2,6-дихидро-7Нпиразоло[4,3-б]пиримидин-7-он (виж WO 99/54333); (+)-3-етил-5-[5-(4етилпиперазин-1-илсулфонил)-2-(2-метокси-1(Р)-метилетокси)пиридин-3-ил]-2-метил-2,6-дихидро-7Н-пиразоло[4,3-с!]пиримидин-7-он, известен също като 3-етил-5-{5-[4-етилпиперазин-1-илсулфонил]-2([(1Р)-2-метокси-1-метилетил]окси)-пиридин-3-ил}-2-метил-2,6дихидро-7Н-пиразоло[4,3-с!]пиримидин-7-он (виж WO 99/54333); 5-[2етокси-5-(4-етилпиперазин-1-илсулфонил)пиридмн-3-ил]-3-етил-2-[2метоксиетил]-2,6-дихидро-7Н-пиразоло[4,3-б]пиримидин-7-он, известен също като 1-{6-етокси-5-[3-етил-6,7-дихидро-2-(2-метокси49 етил)-7-оксо-2Н-пиразоло[4,3-с!]пиримидин-5-ил]-3-пиридилсулфонил}-
4-етилпиперазин (виж W0 01/27113, Пример 8); 5-[2-1/зо-бутокси-5-(4етилпиперазин-1-илсулфонил)пиридин-3-ил]-3-етил-2-(1-метилпиперидин-4-ил)-2,6-дихидро-7Н-пиразоло[4,3-б]пиримидин-7-он (виж WO 01/27113, Пример 15); 5-[2-етокси-5-(4-етилпиперазин-1-илсулфонил)пиридин-3-ил]-3-етил-2-фенил-2,6-дихидро-7Н-пиразоло[4,3-с1]пиримидин-7-он (виж WO 01/27113, Пример 66); 5-(5-ацетил-2-пропокси-3пиридинил)-3-етил-2-(1-изопропил-3-азетидинил)-2,6-дихидро-7Нпиразоло[4,3-с/]пиримидин-7-он (виж WO 01/27112, Пример 124); 5-(5ацетил-2-бутокси-3-пиридинил)-3-етил-2-(1-етил-3-азетидинил)-2,6дихидро-7Н-пиразоло[4,3-Ь]пиримидин-7-он (виж WO 01/27112, Пример 132); (6R, 12aR)-2,3,6,7,12,12а-хексахидро-2-метил-6-(3,4- метилендиоксифенил)-пиразино[2',Г:6,1]пиридо[3,4-Ь]индол-1,4-дион (IC-351), т.е. съединението от Примери 78 и 95 от публикувана международна заявка WO95/19978, а така също съединението от Примери 1, 3, 7 и 8; 2-[2-етокси-5-(4-етил-пиперазин-1-ил-1-сулфонил> фенил]-5-метил-7-пропил-ЗН-имидазо[5,14][1,2,4]триазин-4-он (варденафил) известен също като 1-[[3-(3,4-дихидро-5-метил-4-оксо-7пропилимидазо[5,1-1]-а5-триазин-2-ил)-4-етоксифенил]сулфонил]-4етилпиперазин, т.е. съединението от Примери 20, 19, 337 и 336 от публикувана международна заявка WO 99/24433; и съединението от пример 11 от публикувана международна заявка WO 93/07124 (EISAI); и съединения 3 и 14 от Rotella D Р, J. Med. Chem., 2000, 43, 1257.
Още други подходящи PDE5 инхибитори включват: 4-бромо-5(пиридилметиламино)-6-[3-(4-хлорофенил)-пропокси]“3(2Н)пиридазинон; 1-[4-[(1,3-бензодиоксол-5-илметил)амино]-6-хлоро-2-хинозолинил]-4-пиперидин-карбоксилна киселина, мононатриева сол; (+)-цис5,6а,7,9,9,9а-хексахидро-2-[4-(трифлуорометил)-фенилметил-5-метилциклопент-4,5]имидазо[2,1-Ь]пурин-4(ЗН)он; фуразлоцилин; цис-2хексил-5-метил-3,4,5,6а,7,8,9,9а-октахидроциклопент[4,5]-имидазо[2,1
Ь]пурин-4-он; 3-ацетил-1-(2-хлоробензил)-2-пропилиндол-6-карбоксилат; 3-ацетил-1-(2-хлоро-бензил)-2-пропилиндол-6-карбоксилат; 4бромо-5-(3-пиридилметиламино)-6-(3-(4-хлорофенил)пропокси)-3(2Н)пиридазинон; 1-метил-5(5-морфолиноацетил-2-н-пропоксифенил)З-н-пропил-1,6-дихидро-7Н-пиразоло(4,3-б)пиримидин-7-он; 1-[4-[(1,3бензодиоксол-5-илметил)амино]-6-хлоро-2-хиназолинил]-4-пиперидинкарбоксилна киселина, мононатриева сол;
Pharmaprojects № 4516 (Glaxo Wellcome); Pharmaprojects № 5051 (Bayer); Pharmaprojects № 5064 (Kyowa Hakko; виж WO 96/26940); Pharmaprojects № 5069 (Schering Plough); GF-196960 (Glaxo Wellcome); E-8010 и E-4010 (Eisai); Bay-38-3045 & 38-9456 (Bayer) и Sch-51866.
Ако се прилага комбинация от активни средства, тогава те могат да бъдат прилагани едновременно, поотделно или последователно.
Съединенията от изобретението могат да бъдат прилагани сами, но в хуманната терапия обикновено ще бъдат прилагани в смес с подходящ фармацевтичен ексципиент, разредител или носител, избрани по отношение на планирания начин на прилагане и стандартната фармацевтична практика.
Например, съединенията от изобретението могат да бъдат прилагани орално, букално или сублингвално във формата на таблетки, капсули (включително меки желатинови капсули), овули, еликсири, разтвори или суспензии, които могат да съдържат ароматизиращи или оцветяващи средства, за приложения с незабавно-, забавено-, модифицирано-, задържано-, двойно-, контролирано- освобождаване или пулсиращо освобождаване. Съединенията от изобретението могат също да бъдат прилагани посредством бързо диспергиращи или бързо разтварящи се дозирани форми.
Дозираните форми с модифицирано освобождаване и пулсиращо освобождаване могат да съдържат ексципиенти като тези, изброени подробно за дозираните форми с незабавно освобождаване, заедно с допълнителни ексципиенти, които действат като модификатори на скоростта на освобождаване, при което те са покрити и/или включени в корпуса на устройството. Модификаторите на скоростта на освобождаване включват, но не са изключително ограничени до, хидроксипропилметилцелулоза, метилцелулоза, натриева карбоксиметилцелулоза, етилцелулоза, ацетилцелулоза, полиетиленоксид, ксантанова гума, карбомер, амонио метакрилатен съполимер, хидрирано рициново масло, карнаубов восък, парафинов восък, ацетилцелулозен фталат, хидроксипропилметилцелулозен фталат, съполимер на метакриловата киселина и техни смеси. Дозираните форми с модифицирано освобождаване и пулсиращо освобождаване могат да съдържат един или комбинация от ексципиенти за модифициране на скоростта на освобождаване. Ексципиентите за модифициране скоростта на освобождаване могат да присъстват както в дозираната форма, т.е. в матрицата, така и/или върху дозираната форма, т.е., върху повърхността или покритието.
Бързо диспергиращите се или разтварящи се дозирани формулировки (FDDF) могат да съдържат следните ингредиенти: аспартам, ацесулфам калий, лимонена киселина, натриева кроскармелоза, кросповидон, диаскорбинова киселина, етилакрилат, етилцелулоза, желатин, хидроксипропилметилцелулоза, магнезиев стеарат, манитол, метил метакрилат, ментов ароматизатор, полиетиленгликол, колоидален силициев диоксид, силициев диоксид, натриев нишестен гликолат, натриев стеарилфумарат, сорбитол, ксилитол. Термините диспергиране или разтваряне, както са използвани тук за описване на FDDF, са зависими от разтворимостта на използваната лекарствена субстанция, т.е., когато лекарствената субстанция е неразтворима, може да бъде получена бързо диспергираща се дозирана форма, а когато лекарствената субстанция е разтворима, може да бъде получена бързо разтваряща се дозирана форма.
Съставите от изобретението могат да бъдат прилагани чрез директна инжекция. Съставите могат да бъдат формулирани за парентерално, мукозно, интрамускулно, интравенозно, субкутанно, окулярно, интраокулярно или трансдермално приложение. В зависимост от необходимостта, средството може да бъде приложено в доза от 0.01 до 30 mg/kg телесно тегло, такава като от 0.1 до 10 mg/kg, по-предпочитано от 0.1 до 1 mg/kg телесно тегло.
Терминът “прилагане” включва доставяне с вирусни или не-вирусни техники. Вирусните механизми за доставяне включват, но не са ограничени до аденовирусни вектори, адено-свързани вирусни (AAV) вектори, херпес С вирусни вектори, ретровирусни вектори, лентивирусни вектори и бациловирусни вектори. Не-вирусните механизми за доставяне включват липидно медиирана трансфекция, липозоми, имунолипозоми, липофекция, катионни фациални амфифили (CFA) и техни комбинации. Пътищата за такива механизми на доставяне включват, но не са ограничени до, мукозен, назален, орален, парентерален, гастроинтестинален, локален или сублингвален път.
В допълнение, или като алтернатива, съставите (или техните части от компоненти) от настоящото изобретение могат да бъдат прилагани чрез директна инжекция. В допълнение или като алтернатива, съставите (или техните части от компоненти) от настоящото изобретение могат да бъдат прилагани локално (за предпочитане към гениталиите). В допълнение или като алтернатива, съставите (или техните части от компоненти) от настоящото изобретение могат да бъдат прилагани чрез инхалация. В допълнение или като алтернатива, съставите (или техните части от компоненти) от настоящото изобретение могат също да бъдат прилагани чрез един или повече от: мукозен начин, например, като назален спрей или аерозол за инхалация или като разтвор за поглъщане по орален път, или чрез парентерален начин, когато доставянето е с инжектируема форма, или например ректален, офталмичен (включително интравитреален или вътрешнокамерен), назален, локален (включително букален и сублингвален), вътрематочен, вагинален или парентерален (включително субкутанен, интраперитонеален, интрамускулен, интравенозен, интрадермален, интракранеален, интратрахеален и епидурален) трансдермален, интраперитонеален, интракранеален, интрацеребро-вентрикуларен, интрацеребрален, интравагинален, вътрематочен или парентерален (напр., интравенозен, интраспинален, субкутанен, трансдермален или интрамускулен) начин.
Например фармацевтичните състави от изобретението могат да бъдат прилагани в съответствие с един режим от 1 до 10 пъти на ден, като веднъж или два пъти на ден. Нивото на специфичната доза и честотата на дозиране за всеки отделен пациент могат да бъдат променяни и ще зависят от множество фактори, включително активността на специфичното съединение, което е използвано, метаболитната стабилност и продължителността на действие на това съединение, възрастта, телесното тегло, общото здраве, пола, диетата, начинът и времето на приложение, скоростта на екскретиране, лекарствената комбинация, тежестта на отделното състояние и индивидуалната терапия, на която е подложен пациента.
Следователно, терминът “прилаган” включва, но не е ограничен до, доставяне по мукозен път, например като назален спрей или аерозол за инхалация или като разтвор за поглъщане; парентерален път където доставянето е чрез инжектируема форма, като например интравенозен, интрамускулен или субкутанен начин.
Такива таблетки могат да съдържат ексципиенти като микрокристална целулоза, лактоза, натриев цитрат, калциев карбонат, двуосновен калциев фосфат и глицин, дезинтегриращи средства като нишесте (за предпочитане царевично, картофено или нишесте от тапиока), натриев нишестен гликолат, натриева кроскармелоза и определени комплексни силикати, и гранулиращи свързващи вещества като поливинилпиролидон, хидроксипропилметилцелулоза (НРМС), хидроксипропилцелулоза (НРС), захар, желатин и акация.
Допълнително, могат да бъдат включени омазняващи вещества като магнезиев стеарат, стеаринова киселина, глицерилбехенат и талк.
Твърди състави от подобен тип също могат да бъдат използвани като пълнители в желатинови капсули. Предпочитани ексципиенти в тази връзка включват лактоза, нишесте, целулоза, млечна захар или полиетиленгликоли с високо молекулно тегло. За водни суспензии и/или еликсири, съединенията от изобретението могат да бъдат комбинирани с различни подслаждащи или ароматизиращи вещества, оцветители или багрила, с емулгиращи и/или суспендиращи средства и с разредители като вода, С етанол, пропиленгликол и глицерин, и техни комбинации.
Съединенията от изобретението могат също да бъдат прилагани парентерално, например, интравенозно, интра-артериално, интраперитонеално, интратекално, интравентрикуларно, интрауретрално, интрастернално, интракранеално, интрамускулно или субкутанно, или те могат да бъдат прилагани чрез инфузионни техники. В допълнение, те могат да бъдат прилагани във формата на имплант. За такова парентерално приложение те най-добре се използват във формата на стерилен воден разтвор, който може да съдържа други субстанции, например достатъчно соли или глюкоза, за да се направи разтвора изотоничен с кръвта. Водните разтвори би трябвало да бъдат подходящо буферирани (за предпочитане w до pH от 3 до 9), ако е необходимо. Получаването на подходящи парентерални формулировки при стерилни условия е лесно осъществимо чрез стандартни фармацевтични техники, добре известни на специалистите в областта. Парентералните формулировки могат да бъдат формулирани за незабавно-, забавено-, модифицирано-, задържано-, двойно-, контролираноосвобождаване или пулсиращо доставяне.
Следващите нива на дозите и други нива на дози тук, са за среден субект човек, имащ тегло в диапазона от около 65 до 70 kg. Специалистът ще бъде способен лесно да определи нивата на дозите изисквани за субект, чието тегло попада извън този обхват, такива като деца и възрастни.
За орално и парентерално приложение на пациенти хора, дневното ниво на дозите от съединенията от изобретението или техни соли или солвати, ще бъде обикновено от 10 до 1 000 mg (в единична или разделени дози).
Така например, таблетки или капсули със съединения от изобретението или техни соли или солвати могат да съдържат от 5 до 1000 mg, такива като 5 mg до 500 mg от активното съединение за приложение еднократно или два или повече пъти през цялото време, както е подходящо. Лекарят във всеки случай ще определи действителната доза, която ще бъде най-подходяща за който и да е индивидуален пациент и тя ще варира с възрастта, теглото и отговора на отделния пациент. Горните дози са примерни за средния случай. Разбира се, може да има индивидуални случаи, когато по-високи или по-ниски обхвати на дозите са заслужени и така са в обхвата на това изобретение. Специалистът също ще оцени, че в лечението на някои състояния (включително FSD), съединенията от изобретението могат да бъдат взети като единична доза на база както се изисква” (т.е., както е необходимо или се желае).
Съединенията от изобретението могат също да бъдат прилагани интраназално или чрез инхалация и се доставят удобно във формата на инхалатор със сух прах или представяне с аерозолен спрей от контейнер под налягане, помпа, спрей или небулизатор с използването на подходящ пропелент, напр. дихлородифлуорометан, трихлорофлуорометан, дихлоротетрафлуороетан, хидрофлуороалкан като 1,1,1,2-тетрафлуороетан (HFA 134А [търговска марка] или 1,1,1,2,3,3,3-хептафлуоропропан (HFA 227ЕА [търговска марка]), въглероден диоксид или друг подходящ газ. В случая на аерозол под налягане, единичната доза може да бъде определена чрез снабдяване с клапан за доставяне на премерено количество. Контейнерът под налягане, помпата, спреят или небулизаторът могат да съдържат разтвор или суспензия на активното съединение, напр. използване на смес от етанол и пропелант като разтворител, който може допълнително да съдържа омазняващо вещество, например сорбитан триолеат. Капсули и патрони (направени например от желатин) за използване в инхалатор или инсуфлатор могат да бъдат формулирани така, че да съдържат прахообразна смес от съединение от изобретението и подходяща прахообразна основа като лактоза или нишесте.
Аерозол или сухи прахообразни формулировки са за предпочитане, оформени така, че всяка премерена доза или “пуфкане” да съдържат от 1 до 50 mg от съединение от изобретението за доставяне на пациента. Общата дневна доза с аерозол ще бъде в обхвата от 1 до 50 д, които могат да бъдат прилагани като единична доза или по-обичайно, на разделени дози през деня.
Алтернативно, съединенията от изобретението могат да бъдат прилагани във формата на супозиторий или песарий, или те могат да бъдат прилагани локално (за предпочитане към гениталиите) във формата на гел, хидрогел, лосион, разтвор, крем, мехлем или прах за посипване. Съединенията от изобретението могат също да бъдат прилагани дермално. Съединенията от изобретението също могат да бъдат прилагани трансдермално, например, посредством кожен пластир. Те могат също да бъдат прилагани по окулярен, пулмонарен или ректален пътища.
За офталмично използване, съединенията могат да бъдат формулирани като микронизирани суспензии в изотоничен, pH регулиран, стерилен физиологичен разтвор, или за предпочитане, като разтвори в изотоничен, pH регулиран, стерилен физиологичен разтвор, по избор в комбинация с консервант като бензалкониев хлорид. Алтернативно, те могат да бъдат формулирани в мазило, такова като вазелин.
За локално прилагане към кожата (за предпочитане към гениталиите), съединенията от изобретението могат да бъдат формулирани като подходящ мехлем, съдържащ активното съединение суспендирано или разтворено например в смес с едно или повече от: минерално масло, течен вазелин, бял вазелин, пропиленгликол, полиоксиетилен полиоксипропи леново съединение, емулгиращ восък и вода. Алтернативно, те могат да бъдат формулирани като подходящ лосион или крем, суспендирани или разтворени например в смес от един или повече от следните: минерално масло, сорбитан моностеарат, полиетиленгликол, течен парафин, полисорбат 60, цетилестерен восък, цетеарилов алкохол, 2-октилдодеканол, бензинов алкохол и вода.
Съединенията от изобретението могат също да бъдат използвани в комбинация с циклодекстрин. Циклодекстрините са известни, че образуват инклузионни и не-инклузионни комплекси с лекарствени молекули. Образуването на лекарство-циклодекстринов комплекс може да модифицира разтворимостта, скоростта на разтваряне, биодостъпността и/или свойствата, свързани със стабилността на лекарствената молекула. Лекарствено-циклодекстриновите комплекси обикновено са полезни за повечето дозирани форми и начини на приложение. Като алтернатива на директното комплексообразуване с лекарството, циклодекстринът може да бъде използван като спомагателен адитив, напр. като носител, разредител или солубилизатор. Алфа-, бета- и гама-циклодекстрините са най-широко използвани и подходящи примери са описани в WO 91/11172, WO 94/02518 и WO 98/55148.
В едно предпочитано изпълнение, съединенията от изобретението се доставят системно (като орално, букално и сублингвално), по-предпочитано орално. За предпочитане, такова системно (най-предпочитано орално) приложение се използва за лечение на женска сексуална дисфункция, за предпочитане FSAD.
Така, в едно особено предпочитано изпълнение се предоставя използването на съединенията от изобретението в производството на системно доставяно (за предпочитане орално доставяно) лекарствено средство за лечението или профилактиката на FSD, по-предпочитано FSAD.
Предпочитана орална формулировка използва таблетки с незабавно освобождаване; или бързо диспергиращи се или разтварящи се дозирани формулировки (FDDF).
В допълнително предпочитано изпълнение, съединенията от изобретението са прилагани локално, за предпочитане, директно към женските гениталии, особено вагината.
Тъй като NEP присъства в цялото тяло е твърде неочаквано, че съединенията от изобретението могат да бъдат прилагани системно и да се постигне терапевтичен отговор в женските гениталии, без да се провокират нетърпими (неблагоприятни) странични ефекти. Така в in vivo (заек) резултати тук понататък, съединенията от изобретението прилагани системно увеличиха гениталния кръвен поток при сексуално възбуждане (имитирано чрез стимулиране на тазовия нерв) без неблагоприятно повлияване на сърдечносъдовите параметри, такива като причиняващи значителна хипотензия или хипертензия.
За предпочитане, съединенията от изобретението са прилагани за лечението на FSD в сексуално стимулиран пациент (под сексуално стимулиране ние разбираме включване на визуално, слухово или тактилно стимулиране). Стимулирането може да бъде преди, след или по време на приложението.
Така съединенията от изобретението усилват пътищата/механизмите, които лежат в основата на сексуалното възбуждане в женските гениталии, като възстановяват или подобряват отговора на сексуално възбуждане при сексуално стимулиране.
Така едно предпочитано изпълнение предоставя използването на съединение от изобретението в получаването на лекарствено средство за лечението или профилактиката на FSD в стимулиран пациент.
За ветеринарно използване, съединение от изобретението е прилагано като подходяща приемлива формулировка в съответствие с нормалната ветеринарна практика и ветеринарният лекар ще определи режима на дозиране и пътя на приложение, които ще бъдат най-подходящи за отделното животно.
Следващите примери на формулировки са само илюстративни и не са предназначени да ограничат обхвата на изобретението. “Активен ингредиент” означава съединение от изобретението.
Формулировка 1: Приготвя се таблетка, като се използват следните ингредиенти:
тегло/mg
Активен ингредиент 250
Целулоза, микрокристална 400
Силициев диоксид, колоидален 10
Стеаринова киселина 5
Общо 665
Компонентите се смесват и пресоват до образуване на таблетки.
Формулировка 2: Една интравенозна формулировка може да бъде получена както следва:
Активен ингредиент 100 mg
Изотоничен физиологичен разтвор 1 000 ml
Типичните формулировки, полезни за прилагане на съединенията от изобретението локално към гениталиите, са както следва:
Формулировка 3: Спрей
Активен ингредиент (1.0 %) в изопропанол (30 %) и вода.
Формулировка 4: Пяна
Активен ингредиент, ледена оцетна киселина, бензоена киселина, цетилов алкохол, метилпарахидроксибензоат, фосфорна киселина, поливинилов алкохол, пропиленгликол, натриева карбоксиметилцелулоза, стеаринова киселина, диетил стеарамид, парфюм van Dyke № 6301, пречистена вода и изобутан.
Формулировка 5: Гел
Активен ингредиент, докузат натрий ВР, изопропилов алкохол ВР, пропиленгликол, натриев хидроксид, карбомер 934Р, бензоена киселина и пречистена вода.
Формулировка 6: Крем
Активен ингредиент, бензоена киселина, цетилов алкохол, лавандула, съединение 13091, метилпарабен, пропилпарабен, пропиленгликол, натриева карбоксиметилцелулоза, натриев лаурилсулфат, стеаринова киселина, триетаноламин, ледена оцетна киселина, рициново масло, калиев хидроксид, сорбинова киселина и пречистена вода.
Формулировка 7: Песарий
Активен ингредиент, цетомакрогол 1000 ВР, лимонена киселина, PEG 1500 и 1000 и пречистена вода.
Изобретението допълнително включва:
(i) Фармацевтичен състав включващ съединение от изобретението, заедно с фармацевтично приемлив ексципиент, разредител или носител.
(ίί) Съединение от изобретението за използване като медикамент.
(iii) Метод за лечение на FSD в бозайник включващ лечение на този бозайник с ефективно количество от съединение от изобретението.
(iv) Фармацевтичен състав за лечение на FSD, съдържащ съединение от изобретението заедно с фармацевтично приемлив ексципиент, разредител или носител.
(ν) Съединение от изобретението за лечение на FSD.
Изобретението е илюстрирано чрез следващите не-ограничаващи Примери, в които тук по-долу са използвани следните съкращения и дефиниции, а също из цялото описание:
Arbacel® филтърно средство
br широк
Вос mpem.-бутоксикарбонил
CDI карбонилдиимидазол
δ химично отместване
d дублет
Δ топлина
DCCI дициклохексилкарбодиимид
DCM дихлорометан
DMF Λ/,Ν-диметилформамид
DMPU 1,3-диметил-3,4,5,6-тетрахидро-2(1/-/)-пиримидинон
DMSO диметилсулфоксид
ES+ йонизация с електроспрей положително сканиране
ES' йонизация с електроспрей отрицателно сканиране
Ex пример
h часове
HMPA хексаметилфосфорамид
C HOBt 1-хидроксибензотриазол
HPLC високоефективна течна хроматография
m/z пик на масспектър
min минути
MS масспектър
NMR ядреномагнитен резонанс
Prec прекурсор
Prep получаване
q квартет
s синглет
j** t триплет
Tf трифлуорометансулфонил
TFA трифлуорооцетна киселина
THF тетрахидрофуран
TLC тънкослойна хроматография
TMEDA TS+ Ν, Ν, Ν', N -тетра метилети ленд иамин йонизация с термоспрей положително сканиране
WSCDI 1-(3-диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид
Спектрите от 1Н ядреномагнитния резонанс (NMR) бяха във всички случаи в съгласие с предложените структури. Характеристичните химични отмествания (δ) са дадени в части на милион надолу от тетраметилсилан при използване на обичайните съкращения за означаване на главните пикове; напр.: s, синглет; d, дублет; t, триплет; q, квартет; т, мултиплет; br, широк. Следващите съкращения са използвани за обичайните разтворители: CDCI3, деутерохлороформ; DMSO, диметилсулфоксид. Съкращението psi означава паунда на квадратен инч и LRMS означава мас спектрометрия с ниска разделителна способност. Където е използвана тънкослойна хроматография (TLC), тя се отнася до силикагелна TLC използваща силикагел 60 F254 плаки, Rf е разстоянието, изминавано от С съединението, разделено на разстоянието, изминавано от фронта на разтворителя на TLC плака.
Праховите рентгеноструктурни решетки (PXRD) бяха определени с използване на Siemens D5000 прахов рентгенов дифрактометър, снабен с тета-тета гониометър, процепи с автоматично отклоняване на лъча, вторичен монохроматор и сцинтилационен брояч. Пробата се въртеше докато бе облъчвана с мед К-алфа1 рентгенови лъчи (дължина на вълната = 1.5046 ангстрьома), филтрирани с графитен монохроматор (λ = 0.15405 nm) с рентгенова тръба, работеща при 40 kV/40mA. Илюстрирани са главните пикове (в градуси 2Θ) на PXRD решетките за различни твърди форми.
Пример 1
2-({ 1-1(1,3-Бензодиоксол-5-иламино)карбонил1циклопентил)- метил)пентанова киселина
Към разтвор от mpem.-бутилов естер от получаване 34 (130 mg, 0.31 mmol) в дихлорометан (5ml) бе прибавена трифлуорооцетна киселина (5ml), и разтворът бе разбъркван при стайна температура 4 часа. Реакционната смес бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с толуен и дихлорометан до получаване на съединението от заглавието като бистро масло, 112 mg. 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ 0.83 (t, ЗН), 1.22 - 1.40 (m, ЗН), 1.50 - 1.72 (m, 8H), 1.95 (m, 1 Η), 2.10 (m, 2H), 2.19 (m, 1H), 4.30 (m, 2H), 5.93 (s, 2H), 5.99 (bs, 1 Η), 6.74 (m, ЗН); LRMS: m/z 380 (MH').
Примери 2 до 9
Съединения c формула Ic, т.е. съединенията с обща формула I, в която R1 е пропил, бяха получени от съответния mpem.-бутилов естер като С се следва процедура, подобна на тази описана в Пример 1 от отбелязаното прекурсорно съединение.
(CH2)nY
Ех Ргес η Υ Данни
21 Получаване 35 0 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.81 (s, ЗН), 1.17- 2.04 (m, 14Н), 2.27 - 2.38 (m, 1 Η), 2.64 - 2.80 (m, 2H), 3.20 - 3.31 (m, 2H), 4.60 - 4.72 (m, 1H), 5.97 (d, 1H), 7.03 - 7.18 (m, 4H). LRMS : m/z 343.8 (M+).
З2'3 Получаване 36 0 Yr N—N 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.90 (t, 3H), 1.30 - 1.42 (m, 4H), 1.59 - 1.81 (m, 7H), 2.18 (m, 1H), 2.30 (m, 1H), 2.42 (m, 1H), 2.55 (m, 1H), 2.61 (s, 3H). LRMS : m/z 324 (MH). Т.т. 184 - 186° C; Анал. намерено: C, 55.50; H, 7.22; N, 12.61. C15H23N3O3S изисква C, 55.36; H, 7.14; N, 12.91 %.
Ех Ргес η Υ Данни
Получаване 37 0 Ν—N 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.92 (t, ЗН), 1.35 (t, ЗН), 1.25 - 1.80 (m, 11 Η), 2.20 - 2.50 (m, 4Η), 2.95 (q, 2Н), 12.10 (bs, 1Н); LRMS : m/z 339.8 (MH+) Анал. намерено: С, 56.46; Н, 7.46; N, 12.36. C16H25N3O3S изисква С, 56.62; Н, 7.44; N, 12.37%.
52 Получаване 38 1 чУСН1 Ν—N 1Н NMR (CDCh, 400 ΜΗζ) δ: 0.80 (t, ЗН), 1.20 - 1.70 (m, 11 Η), 1.90 - 2.20 (m, ЗН), 2.25 (m, 1 Η), 2.70 (s, ЗН), 4.75 (m, 2Н), 7.10 (bs, 1Н). LRMS : m/z 340.6 (MH+)
62 Получаване 39 2 .NHMe Ύ 0 1H NMR (CDCI3, 400MHz) δ: 0.88 (t, ЗН), 1.25 - 1.40 (m, ЗН), 1.41 - 1.70 (m, 8H), 1.92 (m, 1H), 2.00 - 2.18 (m, 2H), 2.38 (m, 1 Η), 2.42 (t, 2H), 2.80 (d, ЗН), 3.40 3.60 (m, 2H), 6.50 (bs, 1H), 6.74 (bs, 1H). LRMS : m/z 313.2 (MH+)
7 Получаване 40 0 снз та-/ 1H NMR (CDCI3, 400MHz) δ: 0.85 (t, 3H), 1.19 (d, 3H), 1.21 - 1.69 (m, 11H), 1.892.10 (m, 5H), 2.30 (m, 1H), 2.41 (m, 2H), 2.95 (m, 1H), 3.35 (m, 1H), 3.63 (m, 2H), 4.20 (m, 1H), 6.58 - 6.70 (m, 1H). LRMS: m/z 353.1 (MH+)
8 Получаване 41 0 УУ^ 1H NMR (CDCI3, 400MHz) δ: 0.81 (t, 3H), 1.20 - 1.39 (m, 3H), 1.41 - 2.10 (m, 1H), 2.80 (m, 1H), 4.35 (m, 17H), 5.81 (d, 1H), 6.30 (bs, 0.5H), 6.43 (bs, 0.5H), 7.40 (bd, 0.5H), 7.61 (bd, 0.5H). LRMS : m/z 339.8 (MH+)
9 Получаване 32 0 та\ХВи1у| У γΝΗ> 0 1H NMR (CDCI3, 400MHz) δ: 0.84 (m, 6H), 1.08 - 2.08 (m, 29H), 4.29 (m, 1H), 5.95 (d, 1H), 6.43 (s, 1H), 7.80 (d, 1H). LRMS : m/z 409.5 (MH+)
= допълнително пречистване чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат : пентан като елуент.
= допълнително пречистване чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан : метанол като елуент.
= прекристализация от етер.
Пример 10
2-{[1-({[2-(1/-/-Индол-3-ил)етил1амино)карбонил)циклопентил1метил}пентанова киселина
н
Към разтвор от шрет.-бутиловия естер от получаване 44 (482 mg, 1.13 mmol) и анизол (1.23 ml, 11.3 mmol) в дихлорометан (4 ml), бе прибавена трифлуорооцетна киселина (2.61 ml, 33.9 mmol) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 4 часа. Сместа бе промита с вода, след това солев разтвор, изсушена (MgSO4), концентрирана под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с толуен. Остатъчното кафяво масло бе пречистено чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан:метанол (95 : 5) като елуент, и повторно проуснато през колоната с използване на градиент на елуента етилацетат:пентан (30 : 70 до 50 : 50), до получаване на съединението от заглавието като прозрачна пяна, 136 mg, 32 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.82 (s, ЗН), 1.16 - 1.77 (m, 12Н), 1.78 - 2.03 (m, 2H), 2.36 (m, 1H), 2.97 (m, 2H), 3.61 (m, 2H), 5.83 (m, 1H), 7.04 (s, 1H), 7.09 - 7.23 (m, 2H), 7.39 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 8.15 (m, 1H); LRMS : m/z 371.8 (MH+).
Пример 11
2-{|1-({[(38)-1-Бензилпиролидинил1амино}карбонил)циклопентил1метил}пентанова киселина
Разтвор от mpem.-бутиловия естер от получаване 45 (70 mg, 0.16 mmol) в трифлуорооцетна киселина (1 ml) и дихлорометан (1 ml) бе разбъркван при стайна температура 2 часа. Реакционната смес бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан. Остатъкът бе разпределен между вода (1 ml) и етилацетат (5 ml), и pH на водния слой бе регулирано до 6 с разтвор на натриев бикарбонат. Слоевете бяха сепарирани, органичната фаза изсушена (Na2SO4), изпарена под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан до получаване на съединението от заглавието като бежова пяна, 45 mg, 73 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.84 (t, ЗН), 1.20 - 2.95 (m, 19H), 3.52 (m, 1H), 3.75 (m, 1H), 3.95 (m, 1H), 4.25 (m, 1H), 4.45 (m, 1H), 6.96 (bs, 1H), 7.39 (m, 5H); LRMS : m/z 387 (MH+); Анал.намерено: C, 61.11; H, 7.69; N, 6.00. C23H34N2O3; CH2CI2 изисква C, 61.14; H, 7.70; N, 5.94%.
Пример 12
2-{[ 1 -({[ 1 -(Хидроксимети л)циклопентил]амино}карбонил)циклопентил1метилУпентанова киселина
Разтвор от трет.-бутиловия естер от получаване 33 (38 mg, 0.1 mmol) в трифлуорооцетна киселина (2 ml) и дихлорометан (2 ml) бе разбъркван при стайна температура 2 часа. Реакционната смес бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с толуен и после дихлорометан до получаване на безцветна смола. Тя бе суспендирана в разтвор от калиев карбонат (50 mg, 0.3 mmol) в метанол, и сместа бе разбърквана 2 часа при стайна температура. Метанолът бе отстранен под намалено налягане, остатъчната водна смес разредена с вода (20 ml) и подкислена до pH 2 с 2 N солна киселина. Този разтвор бе екстрахиран с етилацетат (2 х 20 ml) и обединените органични разтвори изсушени (MgSO4), и изпарени под намалено налягане до получаване на бистро масло, 32 mg, 97 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.88 (t, ЗН), 1.20 1.40 (m, ЗН), 1.41 - 1.90 (m, 17H), 2.01 - 2.20 (m, 2H), 2.40 (m, 1H), 3.71 (dd, 2H), 5.80 (bs, 1H); LRMS: m/z 326.1 (MH+).
Пример 13
Цис-2-{[1-({[4-(Хидроксиметил)циклохексил1амино)карбонил)циклопентил1метил}пентанова киселина
Съединението от заглавието бе получено като безцветна смола с 68 %, от mpem.-бутиловия естер от получаване 43, като се следва процедурата £ описана в пример 12, освен че продуктът бе допълнително пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан:метанол (95 : 5) като елуент; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.87 (t, ЗН), 1.21 - 1.40 (m, 6H), 1.52 - 1.70 (m, 15H), 1.92 - 2.11 (m, ЗН), 2.39 (m, 1H), 3.55 (d, 2H), 4.01 (m, 1H), 5.90 (m, 1H); LRMS : m/z 340.3 ( MH+).
Пример 14
2Ч[1-({[2>(2-Оксо-1->пиперидинил)етил1амино}карбонил)циклрпентил1 метил}пентанова киселина
Хлороводород газ бе барботиран през леденостуден разтвор на mpem.-бутиловия естер от получаване 47 (43 mg, 0.105 mmol) в дихлорометан (10 ml) за 20 min. След това разтворът бе разбъркван при стайна температура 3 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан (Зх), до получаване на стъклоподобно вещество. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан:метанол (95 : 5 до 90 : 10) до получаване на съединението от заглавието, 6 mg; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.81 (t, ЗН), 1.20 - 1.36 (m, 4H), 1.41 - 1.69 (m, 7H), 1.79 (m, 4H), 1.90 - 2.10 (m, ЗН), 2.30 (m, 1H), 2.38 (t, 2H), 3.30 - 3.60 (m, 6H), 7.00 (bs, 1H); LRMS: m/z 351 (ΜΗ)'.
Пример 15
2-({Ч({3-[(Диметиламино)карбонил]циклохексил)амино)карбонил]·
циклопентил)метил)пентанова киселина
Съединението от заглавието бе получено като твърдо вещество с 85 % добив, от mpem.-бутиловия естер от получаване 42, като се следва метод, подобен на този описан в пример 14, освен че бяха използвани дихлорометан:метанол:оцетна киселина (95:3:2) като хроматографски елуент; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) d: 0.89 (t, ЗН), 1.09 - 1.76 (m, 12H), 1.80 -
2.17 (m, 10H), 2.37 (m, 1H), 2.68 (m, 1H), 2.95 (s, 3H), 3.04 (s, 3H), 3.83 (m,
Η), 6.06 (m, 1H); LRMS : m/z 381 (MH+); Анал.намерено: С, 63.31; Н, 9.17; N,
6.53. C21H36N2O4; Н2О изисква С, 63.29; Н, 9.61; N, 7.03 %.
Пример 16 2-{[1-({[(1Р,2Р)-2-Фенилциклопропил1амино}карбонил)циклопентил]метил)пентанова киселина
Съединението от заглавието бе получено количествено като оранжева смола от трет.-бутиловия естер от получаване 46, като се следва процедура, подобна на тази, описана в пример 14; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.90 (t, ЗН), 1.12 - 2.14 (m, 17H), 2.38 (m, 1 Η), 2.87 (m, 1 Η), 6.10 (s, 1H), 7.13 (m, ЗН), 7.25 (m, 2H); LRMS : m/z 344.3 (MH+).
Пример 17 (2Р)-2-{[1-(И5-(Циклопропилметил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил]амино}карбонил)циклопентил!метил}пентанова киселина
Разтвор от mpem.-бутиловия естер от получаване 50 (63 mg, 0.15 mmol) в трифлуорооцетна киселина (2 ml) и дихлорометан (2 ml), бе разбъркван при стайна температура 2 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан:метанол (95:5) като елуент до получаване на съединението от заглавието като бяла пяна, 46 mg, 83 %; 1Н NMR (CD3OD, 400 ΜΗζ) δ: 0.38 (m, 2Н), 0.62 (m, 2Н), 0.82 (t, ЗН), 1.12 (m,
1Н), 1.26 (m, 2Н), 1.38 (m, 1 Η), 1.52 (m, 1 Η), 1.78 - 1.78 (m, 6Η), 1.90 (m, 1Н),
2.23 (m, 4Н), 2.92 (d, 2Н); LRMS: m/z 366.0 (MH+); [a]D = -7.75° (c = 0.08, метанол).
Пример 18 (2/?)-2-{[1-({Г5-(Етоксиметил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил1амино)карбонил)циклопентил]метил}пентанова киселина
от mpem.-бутиловия естер от получаване 51, като се следва процедура, подобна на тази, описана в пример 17; 1Н NMR (CD3OD, 400 MHz) δ: 0.82 (t,
ЗН), 1.21 -1.40 (m, 7H), 1.50 (m, 1 Η), 1.60 - 1.77 (m, 7H), 1.88 (m, 1 Η), 2.23 (m,
4H), 3.62 (q, 2H); [a]D = -6.08° (c = 0.25, метанол).
Пример 19
2-({ 1 4(3-Пирид иниламино)карбонил]циклопентил}метил)пентанова
С. киселина
Смес от бензиновия естер от получаване 52 (130 mg, 0.33 mmol) и 10 % паладий върху въглен (20 mg) в 95 % воден етанол (3 ml) бе хидрирана при 15 psi и стайна температура за 2 часа. Реакционната смес бе филтрувана през Arbocel®, промита с етанол, и филтратът изпарен под намалено налягане. Остатъчната смола бе пречистена чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан:метанол (95 : 5) като елуент до получаване на съединението от заглавието, 103 mg, %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.90 (t, ЗН), 1.38 (m, 2H), 1.44 (m, 1H), 1.58
- 1.82 (m, 8H), 2.19 (m, 1H), 2.39 (m, 2H), 2.52 (m, 1 Η), 6.88 (m, 1H), 7.67 (m,
1H), 7.82 (d, 1 Η), 8.38 (d, 1H), 9.78 (s, 1H); LRMS : m/z 305 (MH+).
Пример 20
2-[(1-{[(4-Бутил-2-пиридинил)амино1карбонил}циклопентил)метил1-
Съединението от заглавието бе получено с 92 % добив от бензиновия естер от получаване 55, като се следва процедура подобна на тази, описана в пример 19; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.90 (m, 6H), 1.28 - 1.50 (m, 5H), 1.58 - 1.81 (m, 10H), 2.20 (m, 1H), 2.40 (m, 2H), 2.58 (m, 3H), 6.70 (d, 1H), 7.68 (d, 1H), 8.22 (s, 1H), 9.90 (bs, 1H).
Пример 21
2-((1 -[(3-Бензиланилино)карбонил]циклопентил)метил)пентанова киселина
Смес от бензиловия естер от получаване 53 (1.3 mg, 2.47 mmol) и 5 % паладий върху въглен (130 mg) във вода (10 ml) и етанол (40 ml) бе хидрирана при 30 psi и стайна температура за 2 часа. Реакционната смес бе филтрувана през Arbocel®, филтратът концентриран под намалено налягане и остатъкът стрит с дихлорометан. Остатъчната смола бе стрита с етер, после с хексан и изсушена при 50 °C до получаване на съединението от заглавието като твърдо вещество, 0.79 д, 81 %; 1Н NMR (CDCh, 300 ΜΗζ) δ:
0.95 (t, ЗН), 1.24- 1.51 (m, ЗН), 1.58 - 1.80 (m, 7Н), 1.88 (dd, 1 Η), 2.15 (m, 2Η),
2.24 (m, 1 Η), 2.48 (m, 1 Η), 4.00 (s, 2Η), 6.98 (d, 1 Η), 7.24 (m, 6Η), 7.40 (m, ЗН);
Анал.намерено: С, 75.48; Н, 7.76; N, 3.59. C25H31NO3; 0.25 Н2О изисква С,
75.44; Н, 7.98; N, 3.51 %.
Пример 22
2-К1-{[(1-Бензил-6-оксо-1,6-дихидро-3-пиридинил)амино1карбонил)циклопентил)-метил]пентанова киселина
Съединението от заглавието бе получено като бяла пяна с 51 % добив от бензиновия естер от получаване 56, като се следва процедура подобна на тази, описана в пример 21, освен че продуктът бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел, с използване на етилацетат като елуент; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.96 (t, ЗН), 1.28 - 1.80 (m, 12Н), 2.01 (m, 1H), 2.30 - 2.52 (m, 2H), 5.02 (dd, 2H), 6.60 (d, 1H), 7.27 (m, 5H), 7.70 (s, 1H), 8.34 (s, 1H); Анал.намерено: С, 69.52; Н, 7.41; N, 6.51. C24H30N2O4; 0.25 Н2О изисква С, 69.45; Н, 7.41; N,6.75.
Пример 23 цис-2-({1Ч({4-[(Диметиламино)карбонил]циклохексил}амино)карбонил1циклопентил}метил)пентанова киселина
о
Смес от бензиновия естер от получаване 58 (150 mg, 0.33 mmol) и 10
% паладий върху въглен (20 mg), във вода (0.3 ml) и етанол (3.5 ml), бе хидрирана при 15 psi и стайна температура за 3 дни. Реакционната смес бе филтрувана през Arbocel® и филтратът концентриран под намалено налягане. Остатъчната смола бе пречистена чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан:метанол (95 : 5) като елуент до получаване на съединението от заглавието, 85 mg, 65 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.84 (t, ЗН), 1.29 - 1.96 (m, 18H), 2.01 - 2.23 (m, 4H). 2.37 (m, 1H), 2.62 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 3.03 (s, 3H), 3.96 (m, 1H), 5.98 (m, 1H); LRMS : m/z 381.8 (MH+); Анал.намерено: C. 63.81; H, 9.58; N, 6.99. C21H36N2O4; 0.2 CH2CI2 изисква C, 64.06; H, 9.23; N, 7.05 %.
Пример 24 цис-2-((1-[({4-[(Метиламино)карбонил1циклохексил}амино)карбонил1-
Съединението от заглавието бе получено като бяло твърдо вещество с 34 % добив от бензиловия естер от получаване 59, като се следва процедурата, описана в пример 23; 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.90 (t, ЗН), 1.26 - 2.02 (m, 20H), 2.19 (m, ЗН), 2.39 (m, 1H), 2.82 (d, 3H), 4.00 (m, 1H), 5.69 (m, 1H), 6.00 (d, 1H); LRMS : m/z 365 (M-H).
Пример 25
2-1(1-{[(5-Бензил-3-пиридинил)амино1карбонил}циклопентил)метил1пентанова киселина.
Смес от бензиновия естер от получаване 54 (850 mg, 1.76 mmol) и 5 % паладий върху въглен (100 mg) в 20 % воден етанол (30 ml), бе хидрирана при 30 psi и стайна температура за 2 часа. Сместа бе филтрувана през Arbocel®, филтратът изпарен под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан до получаване на съединението от заглавието като пяна, 0.63 g; 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.92 (t, ЗН), 1.30 - 1.83 (m, 11H), 2.07 (m, 1H), 2.42 (m, 3H), 3.82 (s, 2H), 7.15 - 7.38 (5H), 7.80 (s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 8.62 (s, 1H); Анал.намерено: C, 72.29; H, 7.70; N, 6.90. C24H3ON2O3; 0.25 H2O изисква C, 72.24; H, 7.70; N, 7.02 %.
Пример 26
2-((1-(((1-Бензил-2-оксо-2-((3-пиридинилсулфонил)амино]етил}амино)карбонил]циклопентил}метил)пентанова киселина.
Смес от бензиновия естер от получаване 57 (918 mg, 1.52 mmol) и 10 % паладий върху въглен (90 mg) във вода (10 ml) и етанол (50 ml), бе хидрирана при 50 psi и стайна температура за 41/2 часа. TLC анализът показа оставащ изходен материал, така че бе добавен допълнителен катализатор (70 mg), и сместа хидрирана допълнително за още 18 часа. TLC анализът показа отново оставащ изходен материал, така че бе добавен допълнителен катализатор (70 mg), и хидрирането продължено за допълнителни 6 часа. Реакционната смес бе филтрувана през Arbocel®, филтратът изпарен под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан:оцетна киселина:етанол (99:1:0 до 79.1:0.9:20) до получаване на съединението от заглавието като бяла пяна, 271 mg, 35 %; 1Н
NMR (DMSOd6, 300 MHz) δ: 0.75 (m, ЗН), 0.96 - 1.42 (m, 11 Η), 1.61 - 1.99 (m, 4H), 2.75 - 3.02 (m, 2H), 4.45 (m, 1 Η), 7.20 (m, 6H), 7.62 (m, 1 Η), 8.24 (m, 1 Η),
8.83 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 11.98 (bs, 1H), 12.70 (bs, 1H); IR (диск от KBr) 1185, 1195 (m), 1455, 1515, 1640, 1704, 2870, 2930, 2960 (s).
Пример 27
2-({1-[({2-[(Фенилсулфонил)амино]етил}амино)карбонил]циклопентил}метилУпентанова киселина но
Смес от амина от получаване 61 (235 mg, 0.72 mmol), бензенсулфонил хлорид (127mg, 0.72mmol) и триетиламин (150 μΙ, 1.08 mmol) в дихлорометан (6 ml), бе разбърквана при стайна температура 2 дни. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат: пентан (30 : 70) като елуент до получаване на бистро масло. То бе разтворено след това в трифлуорооцетна киселина (3 ml) и дихлорометан (3 ml) и разтворът бе разбъркван при стайна температура 6 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът подложен двукратно на азеотропна дестилация с толуен. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат:пентан (30:70) до получаване на съединението от заглавието като бистро масло, 204 mg, 69 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.84 (t, ЗН),
1.22 -1.43 (m, 4H), 1.43 - 2.18 (m, 10H), 2.36 (m, 1H), 3.11 (m, 2H), 3.20 - 3.31 (m, 1H), 3.42 -3.53 (m, 1H), 6.13 - 6.24 (m, 1H), 7.42 - 7.59 (m, 3H), 7.84 (m, 2H); LRMS : m/z 411.8 (MH+); Анал.намерено: C, 57.26; H, 7.40; N, 6.61. C20H30N2O5S изисква C, 57.18; H, 7.22; N, 6.62 %.
Пример 28
2-((1-[({24(Бензилсулфонил)амино1етил)амино)карбонил1циклопентил}метил)пентанова киселина
Съединението от заглавието бе получено като бистро масло с 97 % добив, от амина от получаване 61 като се следва процедурата, описана в пример 27,1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.87 (t, ЗН), 1.19 -1.72 (m, 11Н), 1.80 - 1.96 (m, 1H), 2.00-2.16 (m, 2H), 2.27-2.38 (m, 1H), 2.92-3.21 (m, ЗН), 3.233.39 (m, 1 Η), 4.25 (s, 2H), 5.80 - 6.06 (m, 1H), 6.38 (m, 1 Η), 7.29 - 7.43 (m, 5H); LRMS : m/z 425.8 (MH+).
Пример 29 (2R)-2-[(1 -И(5-Етил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}циклопентил)метил]пентанова киселина
Пример 30 (25)-2-[(1-([(5-Етил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}циклопентил) метил1пентанова киселина
L). Получената смес бе дестилирана при атмосферно налягане с едновременно заместване с изопропилацетат, докато температурата на разтвора достигна 87 °C. Нагряването бе спряно и разтворът бе оставен да се охлади до температура на околната среда, с разбъркване за 14 часа, до получаване на мътнокафяв разтвор. След това скоростта на разбъркване бе увеличена и започна кристализация. Суспензията после бе оставена да се гранулира за 12 часа при температура на околната среда. Получената суспензия след това бе охладена до 0 °C за 3.5 часа и после твърдото вещество бе събрано чрез филтруване. Филтърният кейк бе промит с с изопропилацетат (2 х 185 ml, после 2 х 90 ml) и твърдото вещество изсушено под вакуум при 40 - 45 °C за 18 часа до получаване на съединението от заглавието (602 д, 0.18 mol, 70 % добив) като кремаво оцветено, кристално вещество; т.т.: 130 - 136 °C; LRMS (отрицателен APCI): m/z [M-H]' 338; 1H-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.92 (t, 3H), 1.27 - 1.52 (m, 7H), 1.52 - 1.89 (m, 8H), 2.11 - 2.27 (m, 1H), 2.27 - 2.37 (m, 1H), 2.42 - 2.55 (m, 1H), 2.65 (dd, 2H), 3.00 (q, 2H), 12.25 (bs, 1H).
Съединението от Пример 29 може да бъде пречистено както следва: Продуктът от заглавието от Пример 29 бе разтворен в метанол. Към този разтвор бе прибавен натриев метоксид (1 еквивалент) в метанол (1 -де*» ml/g от пример 29) и сместа бе разбърквана при стайна температура 20 min. Разтворителят бе отстранен in vacuo и остатъкът бе подложен на азеотропна дестилация с етилацетат до получаване на кафяв остатък. Добавен бе етилацетат и разтворът бе филтруван до получаване на кафяво твърдо вещество, което бе промито с mpem.-бутилметилов етер до получаване на суровата натриева сол от пример 29. Суровият продукт (35 д) бе разпределен между вода (200 ml) и етилацетат (350 ml). Добавена бе концентрирана солна киселина (~7 ml), докато pH на водния слой стана pH 2. Водната фаза бе промита с етилацетат (2 х 100 ml). Обединените слоеве бяха изсушени с магнезиев сулфат. Разтворителят бе отстранен in vacuo до получаване на светлокафяво твърдо вещество (31 д). Добавени бяха етилацетат (64 ml, 2 ml/g) и диизопропилов етер (155 ml, 5 ml/g) и сместа бе нагрята до 68 °C, докато бе получен прозрачен разтвор (~30 min). При охлаждане до стайна температура, настъпи кристализация на свободната киселина. След 30 min разбъркване при стайна температура, продуктът бе събран чрез филтруване и промит с диизопропилов етер. Продуктът бе изсушаван във вакуумна сушилня при 50 °C една нощ. (20.2 д, 61 % възстановяване от натриевата сол); т.т. 135 °C (определено с Perkin Elmer DSC7 при скорост на нагряване от 20 °C/min).
Главните пикове (от 2 до 40 градуса 2Θ) в PXRD решетката са както следва. PXRD бе осъществена без отнасяне към вътрешен стандарт (напр. силициев прах). Позициите на пиковете са следователно предмет на възможното нагласяване на нулата на устройството и височината на грешките на пробата.
Ъгъл Интензив- Ъгъл Интензив- Ъгъл Интензив-
0 2-Тета ност % 0 2-Тета ност % 0 2-Тета ност %
6.701 59.8 20.121 36.1 28.539 17.3
8.908 11.2 20.425 7.1 30.092 56.0
9.305 8.6 21.104 8.9 31.236 8.8
9.590 4.5 21.326 5.7 32.010 12.8
10.039 25.3 21.733 100.0 32.810 8.0
10.206 59.3 22.150 18.7 33.106 6.6
10.578 11.3 22.816 10.2 33.720 8.0
10.984 12.2 23.327 46.2 34.033 9.2
12.075 10.3 23.681 6.4 34.388 12.4
13.054 5.5 23.960 9.5 34.646 8.5
14.256 8.2 24.248 14.0 34.821 8.2
15.695 45.2 24.722 9.4 35.806 7.3
16.316 17.1 25.505 15.5 36.272 13.5
16.418 8.5 25.779 10.5 36.633 12.1
Ъгъл Интензив- Ъгъл Интензив- Ъгъл Интензив-
0 2-Тета ност % 0 2-Тета ност % ° 2-Тета ност %
16.698 24.1 26.267 7.0 37.500 7.8
17.129 16.5 26.724 20.4 37.862 11.7
17.605 20.9 26.890 70.4 38.281 6.5
18.575 23.6 27.663 7.2 39.975 11.8
19.296 14.0 28.158 16.8
Соли на съединението от Пример 29
С Натриеви соли
а) Нискотопяща форма
Продуктът от заглавието от Пример 29 бе разтворен в метанол (80 mg в 2.5 ml - 33 ml/g). Добавен бе натриев хидроксид (0.024 ml като 10 N разтвор). При изпарение на метанола настъпи кристализация на натриевата сол, която бе използвана без допълнително пречистване. Солта бе изсушена във висок вакуум за 5 часа, до получаване на 85 mg количествен добив; т.т. 214 °C (определяне с използване на ТА устройство DSC2910 при скорост на нагряване 10 °C/min).
Главните пикове (от 2 до 40 градуса 2Θ) в PXRD решетката са както С следва. PXRD бе осъществен без отнасяне към вътрешен стандарт (напр. силициев прах). Позициите на пиковете са следователно предмет на възможното нагласяване на нулата на устройството и височината на грешките на пробата.
Ъгъл ° 2-Тета Интензивност % Ъгъл 0 2-Тета Интензивност % Ъгъл 0 2- Тета Интензивност %
7.748 92.8 15.814 14.0 25.995 15.4
8.380 17,8 16.496 43.9 26.753 18.4
8.950 14.3 17.349 40.9 28.085 20.4
Ъгъл 0 Интензив- Ъгъл Интензив- Ъгъл 0 2- Интензив-
2-Тета ност % 0 2-Тета ност % Тета ност %
9.515 8.9 17.687 100.0 28.883 19.9
10.043 11.7 18.229 35.3 29.737 19.7
11.000 13.2 18.736 40.9 30.227 21.6
11.829 17.5 19.754 37.5 31.204 28.1
12.258 17.3 20.258 50.3 31.729 20.6
13.087 19.0 20.498 93.1 34.825 19.7
13.464 22.3 21.719 47.4 35.394 24.2
13.808 13.4 22.499 35.5 36.018 22.9
14.840 14.3 23.310 29.9 37.722 24.5
15.197 27.1 24.111 19.5 39.304 20.6
15.489 21.4 25.165 19.1
Високотопяща форма
Продуктът от заглавието от Пример 29 бе разтворен в метанол (450 mg в 15 ml - 33 ml/g). Добавен бе натриев хидроксид (1.33 ml като 1 N разтвор). Метанолът бе дестилиран при използване на ротавап (въртящ се изпарител) in vacuo до получаване на смола. Смолата бе дестилирана азеотропно веднъж с изопропилов алкохол (8 ml) до отстраняване на остатъчния метанол и водата, преди да бъде добавена допълнителна порция от изопропилов алкохол (15 ml). Сместа бе нагрявана докато се получи хомогенна смес. При охлаждане на натриевата сол настъпи кристализация. Сместа бе държана при стайна температура 10 min. Солта бе отфилтрувана, промита с изопропилов алкохол и изсушена във вакуумна сушилня при 60 °C за 30 min; възстановени бяха 200 mg натриева сол; т.т. 252 °C (определяне с използване на ТА устройство DSC2910 при скорост на нагряване 10 °C/min).
Главните пикове (от 2 до 40 градуса 2Θ) в PXRD решетката са както следва. PXRD бе осъществен без отнасяне към вътрешен стандарт (напр.
силициев прах). Позициите на пиковете са следователно предмет на възможното нагласяване на нулата на устройството и височината на грешките на пробата.
Ъгъл Интензив- Ъгъл Интензив- Ъгъл Интензив-
0 2-Тета ност % 0 2-Тета ност % 0 2-Тета ност %
3.419 0.8 20.682 1.5 30.090 1.1
6.674 100.0 20.758 1.7 30.735 0.9
7.394 0.4 20.841 1.4 31.360 1.4
8.200 1.7 21.058 1.0 32.025 3.5
11.465 0.4 21.462 0.5 32.742 0.7
13.010 1.5 21.935 2.0 33.072 0.7
13.337 0.8 22.965 0.6 33.723 1.2
16.414 0.7 23.585 1.1 34.261 0.7
17.288 2.8 24.868 1.4 35.946 1.8
18.165 0.9 25.387 1.1 36.839 0.7
18.987 1.4 25.733 1.8 37.484 0.7
19.330 0.5 26.124 0.9 38.519 1.4
19.687 0.8 26.826 0.9 38.801 1.3
20.069 1.8 28.719 1.8
Съединението от заглавието от пример 29 метаболизира до образуване на (2И)-1-(2-{[(5-етил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}пентил)циклопентан-карбоксилна киселина.
Съединението бе получено както следва:
Продуктът от получаване 102 (430 mg, 1 mmol) бе поет в етанол (5 ml) и метанол (1 ml) и хидриран при 30 psi водородно налягане при стайна температура за 2 h. Сместа след това бе филтрувана през тампон от Arbocel® и изпарена до жълто масло. Това масло бе пречистено чрез колонна хроматография с използване първо на 19:1, после 9:1 от DCM:MeOH като елуент до получаване на продукта като бистро масло (120 mg, 35 %); 1Н NMR (400 MHz, (CDCI3) 0.88 (t, ЗН), 1.20 - 1.88 (m, 13Н), 1.90 2.03 (m, 1Н), 2.24 - 2.38 (m, 1Н), 2.43 - 2.72 (m, 2Н), 2.95 (q, 2Н); LRMS m/z 340.2 (M+H).
C Пример 31 (/?)-2-{[1-Ш2-(Хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил1амино}карбонил)-циклопентил]метил}пентанова киселина
и
Пример 32
С (5)-2-П1-({[2-(Хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил1амино)карбонил)циклопентил]метил)пентанова киселина
2-{[1-({[2-(Хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}пентанова киселина (WO 9110644, Пример 8) бе пречистена допълнително с HPLC с използване на AD колона и хексан:изопропанол:трифлуорооцетна киселина (90 : 10 : 0.1) като елуент, до получа84 ване на съединението от заглавието от пример 31, 99 % ее, [a]D= +10.4° (с = 0.067, етанол) и съединението от заглавието от пример 32, 99 % ее, [a]D= 10.9° (с = 0.046, етанол).
Пример 33 (2/?)-2-К1-{[(1-Бензил-6-оксо-1,6-дихидро-3-пиридинил)амино1карбонил}циклопентил)метил]пентанова киселина
1-(3-Диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (191 mg, 1.0 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (135 mg, 01.0 mmol), N-метилморфолин (165 μΙ, 1.5 mmol) и накрая аминът от получаване 28 (150 mg, 0.69 mmol) бяха прибавени към разтвор от киселината от получаване 2 (284 mg, 1.0 mmol) в Ν,Ν-диметилформамид (8 ml) и реакционната смес бе разбърквана 18 часа при 90 °C. Охладеният разтвор бе разреден с етилацетат (90 ml), промит с вода (4 х 50ml) и солев разтвор (50 ml), после изсушен (MgSO4) и изпарен под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез хроматография върху силикагел, като се използва етилацетат:пентан (30 : 70) до получаване на жълто масло, 191 mg. Това междинно съединение бе разтворено в дихлорометан (3 ml) и трифлуорооцетна киселина (3 ml), и разтворът бе разбъркван при стайна температура 5 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан:метанол (95 : 5) като елуент до получаване на съединението от заглавието като пяна, 77 mg, 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.86 (t, ЗН), 1.20 - 1.76 (m, 12H), 1.93 - 2.02 (m, 1H), 2.20 - 2.46 (m, 3H), 4.95 (d, 1H), 5.04 (d, 1H), 6.61 (d, 1H), 7.21 (m, 1 H), 7.50 (s, 1 H), 8.23 (s, 1 H); LRMS: m/z 411.6 (MH)+; [a]D = -3.8° (c = 0.052, етанол).
Пример 34 (2/?)-2-[(1-П(4-Бутил-2-пиридинил)амино1карбонил}циклопентил)метил1пентанова киселина
Съединението от заглавието бе получено с 43 % добив от киселината от получаване 2 и амина от получаване 30, като се следва процедура подобна на тази, описана в Пример 33, 1Н NMR (CDCh, 400 ΜΗζ) δ: 0.80 1.00 (m, 6Н), 1.22 1.84 (m, 18Н), 2.03 - 2.56 (m, ЗН), 2.77 (m, 1 Η), 7.14 (d, 1H), 8.08 (d, 1H), 8.23 (s, 1H), 11.71 (brs, 1H); LRMS : m/z 361.7 (MH)+ [a]D = 1.4° (c = 0.14, етанол).
Пример 35
2-К1-Щ1-Бензил-6-оксо-1,6-дихидро-3-пиридинил)амино1карбонил}циклопентил)метил1-4-метоксимаслена киселина
Смес от бензиловия естер от получаване 62 (850 mg, 1.64 mmol) и 5 % паладий върху въглен (250 mg) в 40 % воден етанол (21 ml), бе хидрирана при 30 psi и стайна температура за 30 min. Реакционната смес бе филтрувана през Hyflo® и филтратът изпарен под намалено налягане. Получената пяна бе пречистена чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан:метанол (97:3) като елуент до получаване на съединението от заглавието като бяла пяна, 550 mg, 79 %; 1Н NMR (DMSO-de, 300 ΜΗζ) δ: 1.24 - 2.17 (m, 12H), 2.18 - 2.31 (m, 1H), 3.07 (s,
ЗН), 3.21 (t, 2Н), 5.08 (s, 2Н), 6.63 (d, 1Н), 7.23 - 7.41 (m, 5Н), 7.72 (d, 1 Η), 8.24 (s, 1H); Анал.намерено: С, 67.46; Н, 7.18; N, 6.24. C24H30N2O5, изисква С,
67.58; Н, 7.09; N, 6.57 %.
Пример 36
3-{1-[(Циклопентиламино)карбонил]циклопентил}-2-Г(2-метоксиетокси)метил!пропанова киселина
Разтвор от mpem.-бутиловия естер от получаване 64 (320 mg, 0.80 mmol) в трифлуорооцетна киселина (2 ml) и дихлорометан (2 ml) бе разбъркван при стайна температура 8 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът подложен двукратно на азеотропна дестилация с толуен. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан:метанол (95 : 5) до получаване на съединението от заглавието като бистро масло, 171 mg, 62 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.29 - 1.40 (m, 2Н), 1.42 - 1.69 (m, 10Н), 1.75 (dd, 1H), 1.87 - 2.03 (m, 5H), 2.64 (m, 1H), 3.34 (s, ЗН), 3.43 - 3.52 (m, ЗН), 3.57 (m, 2H), 3.61 (m, 1 Η), 4.08 - 4.20 (m, 1 Η), 5.89 (d, 1H); LRMS : m/z 340 (MH).
Пример 37
3-(2-Метоксиетокси)-2-{[ 1 -({[3-(2-оксо-1 -пиролид инил)пропил1амино)карбонил)-циклопентил]метил}пропанова киселина
Съединението от заглавието бе получено като бистро масло с 57 % добив от mpem.-бутиловия естер от получаване 65, като се следва процедурата, описана в пример 36, 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 1.56 - 1.78 (m, 8H), 1.94 - 2.17 (m, 6H), 2.44 (m, 2H), 2.68 - 2.76 (m, 1H), 3.10 - 3.21 (m, 1 Η), 3.22 - 3.31 (m, 1 Η), 3.37 (s, ЗН), 3.40 (m, 2H), 3.44 - 3.56 (m, 5H), 3.60 (m, 2H), 3.68 (m, 1 Η), 6.91 - 7.01 (m, 1H); LRMS : m/z 398.7 (M+).
Пример 38 цис-3-(2-Метоксиетокси)-2-[(1-{[(4-Щфенилсулфонил)амино1карбонил} циклохексил)амино!карбонил}циклопентил)метил]пропанова киселина
Разтвор от mpem.-бутиловия естер от получаване 66 (446 mg, 0.75 mmol) в дихлорометан (5 ml) и трифлуорооцетна киселина (5 ml) бе разбъркван при стайна температура 18 часа. Реакционната смес бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан, после толуен и накрая етер, до получаване на съединението от заглавието като бяла пяна, 385 mg, 95 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 1.48 - 2.17 (m, 18H), 2.40 (s, 1H), 2.66 (s, 1H), 3.37 (s, 3H), 3.50 88
3.70 (m, 6H), 3.94 (s, 1H), 6.10 (d, 1H), 6.59 (s, 1H), 7.55 (t, 2H), 7.61 (m, 1H),
8.02 (d, 2H), 9.11 (s, 1H); Анал.намерено: C, 54.88; H, 6.90; N, 5.04. C26H38N2O6S; 1.7 H2O изисква C, 57.97; H, 7.11; N, 5.20 %.
Пример 39
2-{[1-({ГЗ-(Метиламино)-3-оксопропил]амино}карбонил)циклопентил1метил}-4-фенилмаслена киселина
Смес от бензиновия естер от получаване 68 (160 mg, 0.34 mmol) и 10 % паладий върху въглен (100 mg) в етанол (30 ml), бе хидрирана при стайна температура и 60 psi за 18 часа. Сместа бе филтрувана през Arbocel®, а филтратът концентриран под намалено налягане и подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан:метанол:оцетна киселина (95:5:0 до 95:5:0.5) до получаване на съединението от заглавието като бяла пяна, 100 mg, 79 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.40 - 1.70 (m, 8Н), 1.95 (m, ЗН), 2.10 (m, 1 Η), 2.35 (d, ЗН), 2.59 (m, 2Н), 2.75 (t, ЗН), 3.42 (m, 2Н), 6.25 (bs, 1 Η), 6.70 (bs, 1 Η), 7.13 - 7.25 (m, 5H); и LRMS: m/z 375.0 (МН+).
Пример 40
2-{[1-({ГЗ-(2-Оксо-1-пиролидинил)пропил]амино}карбонилциклопентил1· метил}-4-Фенилмаслена киселина.
Смес от бензиновия естер от получаване 67 (780 mg, 1.55 mmol) и 10 % паладий върху въглен (100 mg) в етанол:вода (90:10 обемни; 30 ml) бе хидрирана при стайна температура под налягане от 60 psi Н2 за 1.5 часа. Катализаторът бе отфилтруван и филтратът изпарен под намалено налягане до получаване на съединението от заглавието като бяла пяна, 473 mg, 74 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 1.26 - 1.77 (m, 10H), 1.78 - 2.46 (m, 11H), 2.49 - 2.70 (m, 2H), 2.95 - 3.36 (m, 4H), 6.92 -7.38 (m, 5H); Анал. намерено: C, 64.05; H, 7.73; N, 6.22. C24H34N2O4; 0.75 H2O изисква C, 65.88; H, 7.83; N, 6.40 %.
Пример 41
4-Фенил-2-({1-[(3-пиридиниламино)карбонил]циклопентил}метил)маслена киселина
Смес от бензиновия естер от получаване 71 (700 mg, 1.53 mmol) и 5 % паладий върху въглен (70 mg) в етанол:вода (90 : 10 обемни, 50 ml) бе хидрирана при стайна температура под налягане 30 psi Н2 за 5 часа. Катализаторът бе филтруван през Arbocel®, промит добре с етанол и филтратът изпарен под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан : метанол (95 : 5) като елуент до получаване на съединението от заглавието като бяла пяна, 510 mg, 91 %; т.т. 80 - 85 °C (спадаща до смола); 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 1.40 - 2.78 (m, 15H), 6.93 - 7.39 (m, 5H), 7.93 (m, 1H), 8.59 (d, 1H), 9.17 (d, 1H), 9.41 (s, 1H); Анал.намерено: C, 70.83; H, 7.10; N, 7.64. C22H26N2O3; 0.3 H2O изисква C, 70.94; H, 7.22; N, 7.52 %.
Пример 42 2-П1-Ш1-(Хидроксиметил)циклопентил1амино)карбонил)циклопентил1метил}-4-фенилмаслена киселина
Смес от бензиновия естер от получаване 69 (118 mg, 0.25 mmol) и 10 % паладий върху въглен (100 mg) в етанол (20 ml) бе хидрирана при стайна температура и 60 psi за 18 часа. Сместа бе филтрувана през Arbocel®, филтратът концентриран под намалено налягане и дестилиран азеотропно с дихлорометан до получаване на съединението от заглавието като безцветна смола, 95 mg, 98 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 1.41 - 1.80 (m, 17H), 1.90 (m, 1H), 1.92 - 2.20 (m, 3H), 2.40 (m, 1H), 2.60 (m, 2H), 3.60 (d, 1H),
3.71 (d, 1H), 5.80 (bs, 1H), 7.15 - 7.30 (m, 5H); LRMS : m/z 388.1 (MH+).
Пример 43
2-[(1-П(5-Метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино1карбонил}циклопентил)метил]-4-фенилмаслена киселина
Смес от бензиновия естер от получаване 70 (187 mg, 0.39 mmol) и 10 % паладий върху въглен (80 mg) в етанол (20 ml) бе хидрирана при 60 psi за 18 часа. TLC анализът показа оставащ изходен материал, така че бе добавен допълнителен 10 % паладий върху въглен (100 mg) и реакцията продължена за допълнителни 5 часа. TLC анализът отново показа оставащ изходен материал, така че бе добавен допълнителен катализатор (100 mg) и хидрирането продължено с 18 часа. Сместа бе филтрувана през Arbocel®, а филтратът концентриран под намалено налягане и дестилиран азеотропно с дихлорометан. Суровият продукт бе пречистен чрез хроматография върху силикагел с използване на колона Biotage® и дихлорометан:метанол (95:5) като елуент до получаване на съединението от заглавието като бистро масло, 80 mg, 53 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 1.51 -1.89 (m, 9H), 2.03 (m, 1H), 2.20 (m, 1H), 2.40 (m, 2H), 2.60 (m, 5H), 7.15 - 7.30 (m, 5H); LRMS : m/z 387.8 (MH+).
Пример 44 (/?)-2-{[1-(П2-(Хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил1амино}карбонил)циклопентил]метил}-4-фенилмаслена киселина
Пример 45 (8)-2-{[1-Щ2-(Хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил1амино}карбонил)циклопентил]метил}-4-Фбнилмаслена киселина
2-{[1-({[2-(Хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}-4”Фенилмаслена киселина (W0 91/10644, Пример 9) бе пречистена чрез стандартни HPLC процедури с използване на AD колона и хексан:изопропанол:трифлуорооцетна киселина (70 : 30 : 0.2) като елуент, до получаване на съединението от заглавието от пример 44,
99.5 % ее; [a]D = +9.1° (с = 1.76 в етанол); и съединението от заглавието от пример 45, 99.5 % ее; [a]D= -10.5° (с = 2.2 в етанол).
Пример 46 транс-3-[1-(([2-(4-Хлорофенил)циклопропил]амино}карбонил)циклопентил1-2-(метоксиметил)пропанова киселина
Продуктът от получаване 72 (160 mg, 0.39 mmol) бе поет в 50 ml DCM и охладен до 0 °C. След това през разтвора бе барботиран хлороводород газ за 15 min и после оставен да се разбърква при стайна температура за 16 h. Реакционната смес бе концентрирана in vacuo и после пречистена чрез колонна хроматография с използване на 5:95 MeOH:DCM като елуент до получаване на съединението от заглавието (18 mg, 12 %); Rf 5 : 95 (DCM :
MeOH) 0.2; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) 1.04 - 1.18 (m, 2H), 1.20 - 1.36 (m, 2H),
1.36 - 1.79 (m, 7H), 1.83 - 2.08 (m, 4H), 2.57 - 2.66 (m, 1H), 2.73 - 2.83 (m, 1H),
3.27 (s, 3H, OMe), 3.32 - 3.41 (m, 1H), 3.48 (прив. dd, 1H, CHOMe), 6.21 (s,
NH), 7.03 (d, 2H, Ar), 7.18 (d, 2H, Ar); LRMS : m/z, M-H 378; HRMS Намерено
MH+ 380, 1622. Изчислено MH+ 380.1623.
Пример 47 транс-3-[1-({[2-(4-Метоксифенил)циклопропил1амино)карбонил)циклопентил]-2-(метоксиетил)пропанова киселина
ОМе
НО ,ОМе
Продуктът от получаване 81 (113 mg, 0.25 mmol) бе поет в 4 М разтвор на хлороводород в диоксан (10 ml) и бе разбъркван 3 h. Сместа бе концентрирана in vacuo и пречистена чрез колонна хроматография с използване на 5 : 95 (MeOH:DCM) като елуент до получаване на киселината като безцветен филм (45 mg, 44 %); Rf 95 : 5 (DCM : MeOH) 0.2; LRMS : m/z, M-H, 388; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) 1.01 - 1.22 (m, 2H), 1.40 - 2.22 (m, 15H), 2.42 - 2.57 (m, 1H), 2.73 - 2.82 (m, 1H), 3.23 (s, 3H, OMe), 3.27 - 3.44 (m, 2H),
3.72 (s, 3H, OMe), 6.12 (s, 1H, NH), 6.78 (d, 2H, Ar), 7.06 (d, 2H, Ar).
Съединенията c формула Id, т.е. съединения c формула I, в която R1 е метоксиетил, бяха получени или от: а) посоченият mpem.-бутилов естер като се следва процедура, подобна на тази, описана в Пример 47, или Ь) посоченият бензилов естер като се следва процедура, подобна на тази, описана в Пример 42.
(CH2)nY
Ex Prec -(CH2)nY Данни
48 Получаване 89 1Η NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.50 0.63 (m, ЗН), 0.82 (t, ЗН, Me), 0.77 0.84 (m, 1H), 1.01 - 1.18 (m, 1H), 1.20 - 1.78 (m,), 1.82 - 2.08 (m, 2H), 3.27 (s, 3H, OMe), 3.33 - 3.41 (m, 2H), 5.92 (s, 1H, NH). LRMS : m/z 352 (M-H)
49 Получаване 95 Ν—Ν 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.62 2.57 (m, 13H), 3.07 (s, 3H, OMe), 2.96 - 3.44 (m, 2H), 4.09 (s, 2H), 7.20 (brs, 5H). HRMS: Намерено m/z 418.1796. C2iH27N3O4S изисква m/z 418.1795.
50 Получаване 91 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.92 (t, 3H, Me), 1.24 - 2.60 (m, 19H), 3.25 (s, 3H, OMe), 3.39 (t, 2H, CH2OMe), 6.68 - 6.71 (m, 1H, Ar), 7.63 - 7.70 (m, 1H, Ar), 8.21 (s, 1H, Ar), 9.77 (brs, NH). LRMS : m/z 376 (M+).
Ex Prec -(СН2)ПУ Данни
51 Получаване 92 'wPh 1Н NMR (CDCI3 400 ΜΗζ) δ: 1.24 2.34 (m, 10Н), 2.37 - 2.54 (m, 1 Η), 2.54 - 2.73 (m, 2H), 3.33 (s, ЗН, OMe), 3.38 - 4.49 (m, 2Н), 7.00 (d, 1Н, Ar), 7.38 7.56 (m, ЗН), 7.59 - 7.69 (m, 2H), 7.80 (t, 1H, Ar), 8.66 (s, 1H, Ar), 9.77 - 9.93 (m, NH). LRMS : m/z 395 (M-H).
52 Получаване 88 гО‘ НО 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.84 (br. t, 3H), 1.20 - 2.20 (m, 19H), 2.24 - 2.58 (m, 2H), 3.07 - 3.33 (m, 1H), 3.60 - 3.96 (m, 2H), 5.82 - 5.98 (m, 1H), 7.14 - 7.36 (m, 5H). LRMS m/z M-H 400
53 Получаване 93 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 1.43 1.76 (m, 7H), 1.80 - 2.24 (m, 4H), 2.57 2.68 (m, 2H), 3.06 (d, 1H), 3.12 (d, 1H), 3.27 (d, 1H), 3.32 (s, 3H), 3.36 - 3.48 (m, 2H), 3.80 (d, 1H), 3.87 (d, 1H), 6.04 (s, 1H), 7.16-7.22 (m,4H).
54 Получаване 81а 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ : 1.02 1.26 (m, 2H), 1.37 - 1.84 (m, 7H), 1.85 2.16 (m, 4H), 2.62 (br.s, 1H), 2.80 2.93 (m, 1H), 3.29 (s, 3H, Me), 3.22 3.58 (m, 2H), 6.21 (br.s, 1H), 7.03 7.34 (m, 5H). LRMS m/z M+H 346 HRMS m/z M+H Намерено 346.2011. C20H27NO4 изисква 346.2013.
Ех Ргес -(CH2)nY Данни
55 Получаване 96 4Ό 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ : 1.45 1.67 (m, 8Н), 1.85 - 2.00 (m, 4Н), 2.05 (m, 1H), 2.46 (bs, 1H), 2.90 (dd, 1H), 3.30 (s, ЗН), 3.35 (m, 2H), 3.40 (m, 2H), 3.70 (bm, 1H), 4.90 (bs, 1 Η), 6.25 (bs, 1H), 6.75 (d, 1H), 6.81 (t, 1H), 7.10 (d, 1H), 7.15 (t, 1H); LRMS m/z M-H 374; HRMS m/z M+H Намерено 376.2118. C20H27NO4 изисква 376.2123.
Пример 56 (/?)-2-{П-({Г2-(Хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2ИЛ]амино}· карбонил)циклопентил1метил)-4“Метоксимаслена киселина
Пример 57 ($)-2-{[1-({[2’(Хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил]амино>
карбонил)циклопентил]метил)-4-метоксимаслена киселина
он
Продуктът от Пример 53 бе пречистен с HPLC с използване на Chiralcel OD колона (250*20 mm) при температура на околната среда, със смес от 70 % хексан съдържащ 0.3 % TFA и 0.2 % DEA и 30 % IPA съдържащ 0.3 % TFA и 0.2 % DEA при скорост на потока от 10 ml/min. Пример 55 е R енантиомерът, който се елуира първи след 6 min (aD 11.00 d mg/ml в EtOH). Пример 56 е S енантиомерът, който се елуира втори след 7 min (aD-8.62 d.07 mg/ml в EtOH).
Пример 58
3-Метокси-2-П1-Щ(транс)-2-фенилциклопропил]амино}карбонил)- циклопентил]-метил}пропанова киселина
Съединението от заглавието бе получено съгласно процедурата от пример 47 от продукта от заглавието на получаване 82; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 1.2 (m, 2H), 1.5 (m, ЗН), 1.6 (bs, ЗН), 1.8 (d, 1H), 2.0 (m, 4H), 2.6 (bs,
Η), 2.9 (bs, 1 Η), 3.3 (s, ЗН), 3.4 (t, 1 Η), 3.5 (t, 1 Η), 6.4 (s, 1 Η), 7.1 (m, ЗН), 7.3 (t, 2H); LRMS 344 (M-H).
Следните Получавания описват приготовлението на някои междинни съединения използвани в предшестващите Примери.
Получаване 1:
1-[2-(шре/77.-Бутоксикарбонил)-4-пентил1-циклопентан-карбоксилна киселина
Смес от 1-[2-(л?рет.-бутоксикарбонил)-4-пентенил]-циклопентанкарбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 44) (23 д, 81.5 mmol) и 10 % паладий върху въглен (2 д) в сух етанол (200 ml) бе хидрирана при 30 psi и стайна температура за 18 часа. Реакционната смес бе филтрувана през Arbocel® и филтратът изпарен под намалено налягане до получаване на жълто масло. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат:пентан (40 : 60) като елуент, до получаване на съединението от заглавието като бистро масло, 21 д, 91 %; 1Н NMR (CDCI3, 0.86 (t, ЗН), 1.22 - 1.58 (m, 15Н), 1.64 (т, 4Н), 1.78 (dd, 1Н), 2.00 - 2.18 (т, ЗН), 2.24 (т, 1Н); LRMS : m/z 283 (М-Н)'.
Получаване 2
1-[(2Р)-2-(трет.-Бутоксикарбонил)-4-пентил]-циклопентанкарбоксилна киселина сн.
он
Смес от (Я)-1-[2-(трет.-бутоксикарбонил)-4-пентенил]-циклопентанкарбоксилна киселина (WO 9113054, Пример 10) (10 д, 35.4 mmol) и 10 % паладий върху въглен (600 mg) в сух етанол (25 ml) бе хидрирана при 1 atm. и стайна температура за 18 часа. Реакционната смес бе филтрувана през Arbocel® и филтратът изпарен под намалено налягане до получаване на съединението от заглавието като жълто масло, 9.6 д, 95 %; 1Н NMR (CDCI3, 0.86 (t, ЗН), 1.22 - 1.58 (m, 15Н), 1.64 (т, 4Н), 1.78 (dd, 1Н), 2.00 - 2.18 (т, ЗН), 2.24 (т, 1Н); [a]D = -3.3° (с = 0.09, етанол).
Алтернативно продуктът от заглавието от получаване 2 може да бъде получен както следва:
Разтвор от продукта от етап f) по-долу (1.12 kg, 4.0 mol) в етанол (6.5 L) бе разделен на две равни части, които и двете бяха подложени на следните реакционни условия. Към разтвор от продукта от етап f) по-долу (561 д, 2.0 mol) в етанол (3.25 L) бе прибавен катализатор за хидриране (50.5 g от 5 % Pd върху въглен - 50 % влажен) и реакционния съд бе
подложен на налягане с водород газ (30 psi). Реакционната смес бе разбърквана 18 часа при стайна температура преди повторното смесване на двете порции и отстраняване на катализатора чрез филтруване. Филтърният кейк бе промит с етанол (2 х 450 ml) и обединените филтрати след това бяха концентрирани под вакуум. Получената суспензия после бе филтрувана и бе добавен н-хептан (1 L). Разтворителят бе отстранен чрез дестилация под вакуум и бе добавен н-хептан (1 L). Разтворителят бе отстранен чрез дестилация под вакуум до получаване на съединението от заглавието (1.1 kg, 3.86 mol, 97 % добив) като жълто масло, което бе използвано директно в следващия етап; LRMS (отрицателен APCI): m/z [МНГ283; 1H-NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.79 - 0.98 (t, ЗН), 1.24 - 1.39 (m, ЗН), 1.42 - 1.50 (s, 9H), 1.50 - 1.61, (m, ЗН), 1.61 - 1.74 (m, 4H), 1.74 - 1.84 (m, 1 Η), 2.02 -
2.23 (m, ЗН), 2.23-2.35 (m,1H).
Получаване на изходните материали
а) треш.-Бутил-З-бромопропионат н9с
Вг
Към разтвор от 3-бромопропионова киселина (6.0 kg, 39.2 mol) в дихлорометан (60 L) при 0 °C бе прибавен mpem.-бутанол (0.6 L) и конц. сярна киселина (0.33 L). Полученият разтвор бе охладен до -15 °C и през него бе барботиран изобутилен (11 kg, 196 mol). След това реакционната смес бе разбърквана 3 часа при -5 °C преди да се затопли до 20 °C в продължение на 4 часа и после бе разбърквана при тази температура 15 часа. Реакцията бе прекъсната чрез внимателно прибавяне в наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (0.6 М, 72 L, 43.2 mol). Слоевете след това бяха разделени и органичният слой бе промит с наситен воден разтвор на натриев бикарбонат (2 х 48 L) последван от дейонизирана вода (48 L). Този промивен цикъл бе повторен и pH на водния слой бе измерен и бе показано,
100 че е над pH 7. Към органичния слой бе прибавен калиев карбонат (90 д, 1.5 % т/т) преди концентриране на разтвора до обем от 9 L чрез дестилация при атмосферно налягане. Прибавен бе тетрахидрофуран (40 L) и остатъкът от дихлорометана бе отстранен чрез дестилация при атмосферно налягане до получаване на разтвор (12 L) от съединението от заглавието (5.27 kg, 25.2 mol, 64 % добив) в тетрахидрофуран, което бе използвано директно в следващия етап; 1H-NMR (CDCI3, 300 MHz,) δ: 1.45 (s, 9Η), 2.80 (t, 2Н), 3.53 (t, 2Н); LRMS (El); m/z [MH+] 209 (79Br).
b) 1-(3-трет.-Бутокси-3-оксопропил)циклопентанкарбоксилна киселина
OH
Към разтвор от търговски доставен литиев диизопропиламид (20.2 kg от 2 М разтвор в тетрахидрофуран/н-хептан/етилбензен, 51.0 mol) при -15 °C бе прибавен разтвор от циклопентанкарбоксилна киселина (2.7 kg, 23.7 mol) в безводен тетрахидрофуран (8.1 L), внимателно в продължение на 1, час с разбъркване в азотна атмосфера. Полученият разтвор бе разбъркван 3 часа при 0 °C, през което време се образува утайка. Тази суспензия след това бе прибавена към разтвор от продукта от етап а) по-горе (5.24 kg, 25.1 mol) в тетрахидрофуран (52 L), при -15 °C в продължение на 1.25 часа. След завършване на прибавянето, реакционната смес бе разбърквана 1 час при 0 °C и после затоплена до 20 °C в продължение на 4 часа, и оставена да се разбърква при тази температура 13.5 часа. Реакционната смес след това бе охладена до -15 °C и към нея бе прибавен н-хептан (27 L) и 5 М водна солна киселина (23.7 L, 118.5 mol), внимателно с разбъркване. Слоевете след това бяха разделени и водната фаза бе екстрахирана с н-хептан (13.5 L). Обединените органични фази бяха екстрахирани с 5 % воден разтвор на натриев бикарбонат (3 х 30 L) и после с 10 % воден разтвор на калиев
101 карбонат (3 х 30 L). Водните екстракти бяха държани отделно и анализирани за съдържанието на продукта. Трите водни калиево-карбонатни екстракта бяха обединени и бе прибавен н-хептан (27 L) преди pH на тази смес да се регулира до pH 7-8 с 5 М водна солна киселина (10,5 L), с разбъркване.
Слоевете след това бяха разделени и бе прибавен още н-хептан (40.5 L). pH на сместа после бе регулирано допълнително до pH 3 с 5 М водна солна киселина (19.5 L). След това слоевете бяха разделени и органичната фаза бе промита с дейонизирана вода (2 х 27 L). Органичната фаза бе изсушена азеотропно чрез дестилация под вакуум и обемът на разтворителя бе С намален приблизително до 4 L. Разтворът след това бе охладен до 0 °C с разбъркване, за да се позволи настъпването на кристализация.
Разбъркването бе продължено 5 часа при 0 °C, след което продуктът бе събран чрез филтруване. Полученото твърдо вещество бе изсушено под вакуум при 50 °C за 22.5 часа до получаване на съединението от заглавието (1.17 kg, 4.8 mol, 20 % добив) като бяло кристално вещество; т.т.: 89 - 92 °C;
LRMS (отрицателен APCI): m/z [М-Н]' 241; 1H-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 1.47 (s, 9H), 1.50 - 1.60 (m, 2H), 1.60 - 1.82 (m, 4H), 1.69 - 2.0 (m, 2H), 2.08 - 2.23 (m, 2H), 2.23 -2.34 (m, 2H).
c) 1-[2-(трет.-Бутоксикарбонил)-4-пентенил]циклопентанw карбоксилна киселина
Към разтвор от търговски доставен литиев диизопропиламид (7.63 kg от 2 М разтвор в тетрахидрофуран/н-хептан/етилбензен, 19.3 mol) в безводен тетрахидрофуран (18.3 L) при -10 °C бе прибавен разтвор от продукта от етап Ь) по-горе (2.0 kg, 8.25 mol) в безводен тетрахидрофуран (10 L) с разбъркване в продължение на 4 часа и поддържане на реакционната температура при -10 °C. Към получения разтвор бе прибавен
102 разтвор от алилбромид (1.2 кд, 9.9 mol) в тетрахидрофуран (10 L) в продължение на 2 часа преди реакционната смес да бъде затоплена до 20 °C в продължение на 4 часа. След разбъркване при тази температура 9.5 часа, реакцията бе прекъсната чрез добавяне на вода (40 L) и двете фази бяха сепарирани. Органичната фаза после бе екстрахирана последователно с вода (20 L) и 0.3 М воден разтвор на калиев хидроксид (12 L). Към обединените органични фази след това бе прибавен н-хептан (20 L) и 5 М водна солна киселина (7.5 L), докато pH на водния слой стана pH 2. Слоевете след това бяха разделени и водните фази бяха екстрахирани с нV хептан (20 .L). Обединените органични фази бяха промити после с наситен солев разтвор (2 х 8.0 L) и концентрирани под вакуум до получаване на суровия продукт (2.22 kg, 7.86 mol, 95 % добив) като разтвор в н-хептан (12.5 kg общо тегло на разтвора), което бе използвано директно в следващия етап; LRMS (El): [М+ -С4Н8] 226, [М+ HO'Bu] 208, [208-СО] 180; 1H-NMR (CDCI3, 300 MHz), δ: 1.45 (s, 9Η), 1.48 - 1.60 (m, 2Н), 1.60 - 1.76 (m, 4Н), 1.80 (dd, 1Н), 2.03 - 2.27 (m, 4Н), 2.27 - 2.45 (m, 2Н), 5.06 (dd, 2Н), 5.75 (ddt, 1Н).
d) Циклохексанаминиев 142-(/7?/?ет.-бутоксикарбонилМПент§нил] циклопентанкарбоксилат
Към разтвор от суровия продукт от етап с) по-горе (3.83 kg, 13.6 mol) в н-хептан (23 L), бе прибавен циклохексиламин (1.35 kg, 13.8 mol) в н-хептан (7.0 L,), в продължение на 0.5 часа. Входящите тръбопроводи бяха промити с н-хептан (0.7 L, 0.2 ml/g) и тези течности прибавени към реакционната смес. Получената суспензия бе гранулирана при 20 °C за 2 часа и след това твърдото вещество бе събрано чрез филтруване. Филтърният кейк бе промит с н-хептан (2 х 1.9 L) и бе изсушен под вакуум при 50 °C за 23 часа. Полученото бяло твърдо вещество (4.42 kg, 11.6 mol, 85 % добив) бе
103 разтворено в етилацетат (24 L, 5.4 ml/g) и бе нагрято до 70 °C до образуване на бистър разтвор. Полученият разтвор след това бе охладен до 50 °C и бяха прибавени кристални зародиши от истинското съединение (1 д). Суспензията след това бе охладено от 50 °C до 20 °C в продължение на 4 часа. Суспензията бе гранулирана при 20 °C за 0.5 часа и твърдото вещество бе събрано чрез филтруване. Филтърният кейк бе промит с етилацетат (2 х 1.8 L) и твърдото вещество изсушено под вакуум при 45 °C за 14.5 часа, до получаване на съединението от заглавието (3.76 kg, 9.85 mol, 85 % възстановяване) като бяло кристално вещество; т.т.: 129.5 - 131.0 Си °C; Анал.намерено: С, 69.28; Н, 10.31; N, 3.60. C22H39NO4 изисква С, 69.25; Н,
10.30; N, 3.67 %; 1H-NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 1.05 - 1.35 (m, 6H), 1.35 - 1.53 (m, 10H), 1.53- 1.69 (m, 5H), 1.69- 1.89 (m, 3H), 1.89- 2.02 (m, 3H), 2.02-2.18 (m, 2H), 2.18 - 2.31 (m, 2H), 2.31 - 2.44 (m, 1H), 2.71 - 2.94 (m, 1H), 5.03 (dd, 2H), 5.73 (ddt, 1H), 6.4 (bs, 3H).
e) (1S, 23)-1-Хидрокси-/\/-метил-1-фенил-2-пропанаминиев 14(2/?)-
2-(трет.“бутоксикарбонил)-4-пентенил]циклопентанкарбоксилат
Към смес от вода (22.6 L) и н-хептан (22.6 L) бе прибавен продуктът от етап d) по-горе (3.76 kg, 9.85 mol), с разбъркване. Прибавена бе 5 М водна солна киселина (2.2 L, 11.0 mol), докато pH на водната фаза стана pH 3. Слоевете бяха сепарирани и водната фаза бе екстрахирана допълнително с н-хептан (2 х 22.6 L). Обединените органични екстракти после бяха промити с наситен солев разтвор (3.8 L, 10 ml/g) и след това бяха концентрирани под вакуум до обем от 20.3 L (общ обем на разтвора). Към този разтвор бе прибавен (1S, 2$)-(+)-псевдоефедрин (1.63 kg, 9.86 mol, 1.0 екв.) с разбъркване и суспензията бе нагрята до 80 °C, при което настъпи пълно разтваряне. Полученият разтвор бе държан при тази температура 20 min
104
преди охлаждане до 45 °C. След това бе прибавена проба от зародишни кристали (0.2 д) и суспензията бе охладена до 20 °C в продължение на 2 часа. Полученият шлам бе гранулиран за период от 4 часа и после твърдото вещество бе събрано чрез филтруване. Филтърният кейк бе промит с нхептан (3 х 0.5 L) и бе изсушен под вакуум при 40 - 45 °C за 23 часа до получаване на бяло твърдо вещество (2.15 kg, 4.8 mol, 49 % добив). Суспензия от този материал (2.15 kg, 4.8 mol) в н-хептан (10.8 L) бе нагрята до 80 °C, до получаване на бистър разтвор. След задържане на тази температура за 10 min разтворът бе охладен до 60 °C и бе прибавена проба от зародишни кристали (1 д). Получената суспензия след това бе охладена до 20 °C в продължение на 2 часа и после бе гранулирана 1.5 часа при тази температура. Твърдото вещество след това бе събрано чрез филтруване, промито с н-хептан (2 х 0.59 L) и бе изсушено под вакуум при 50 °C за 17.5 часа до получаване на съединението от заглавието (1.80 kg, 4.0 mol, 84 % възстановяване) като бяло кристално вещество; т.т.; 109 - 110 °C; Анал.намерено: С, 69.48; Н, 9.25; N, 3.17. C26H4iNO5 изисква С, 69.77; Н, 9.23; Ν, 3.17 %; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3) δ: 1.05 (d, ЗН), 1.34 - 1.55 (m, 2Н),
1.44 (s, 9Н), 1.55 - 1.73 (m, 4Н), 1.82 - 2.03 (m, 2Н), 2.03 - 2.21 (m, 2Н), 2.21 2.35 (m, 2Н), 2.35 - 2.41 (m, 1 Η), 2.60 (s, ЗН), 3.03 (пент, 1Н), 4.52 (d, 1Н), 5.03 (dd, 2Н), 5.76 (ddt, 1Н), 7.21 - 7.45 (m, 5Н).
f) 14(2R)-2-(n7oem.-5vTOKCHKap6oHHn)-4-neHTeHHn1uHKnoneHTaHкарбоксилна киселина
Към смес от дейонизирана вода (10.8 L) и н-хептан (10.8 L), бе прибавен продуктът от етап е) по-горе (1.80 kg, 4.0 mol) и 5 М водна солна киселина (1.3 L, 6.5 mol), докато pH на водния слой стана pH 3. Слоевете след това бяха разделени и водният слой бе екстрахиран с н-хептан (2 х
105
10.8 L).Обединените органични слоеве бяха промити със солев разтвор (1.8 L) и след това бяха концентрирани чрез дестилация при атмосферно налягане до обем от 6.4 L. След това бе прибавен етанол (18.0 L) и разтворът отново бе концентриран чрез дестилация при атмосферно налягане, до получаване на съединението от заглавието (1.14 kg, 4.0 mol, 100 % възстановяване) като разтвор в етанол (6.4 L общ обем на разтвора), което бе използвано директно в следващия етап (виж по-горе); LRMS (El): [М+-С4Н8] 226, [М+-НО'Ви] 208, [208-СО] 180; 1H-NMR (300 MHz, CDCI3) δ: 1.45 (s, 9Η), 1.48 - 1.60 (m, 2Н), 1.60 - 1.76 (m, 4Н), 1.80 (dd, 1 Η), 2.03 - 2.27 (m, c 4H), 2.27 - 2.45 (m, 2H), 5.06 (dd, 2H), 5.75 (ddt, 1H).
Получаване 3
Бензилов 2-И1 -(хлорокарбонил)циклопентил!метил}пентаноат
CH,
Към охладен в лед разтвор от 1-{2-[(бензилокси)карбонил]пентил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274 234, Пример 16) (2.0 д, 6.3 mmol) в сух дихлорометан (20 ml), бе прибавен оксалилхлорид (1.15 ml, 13.2 mmol) и разтворът бе разбъркван при стайна температура 2 часа. Реакционната смес бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът бе подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан (Зх), до получаване на съединението от заглавието като златисто масло, 2.1 g; 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.88 (t, ЗН), 1.28 (m, 2H), 1.43 (m, 2H), 1.63 (m, 6H), 2.00 (m, 1H), 2.08 - 2.35 (m, ЗН), 2.44 (m, 1H), 5.15 (s, 2H), 7.28 (m, 5H).
Получаване 4
-(2-Птрет.-Бутил(диметил)силил]окси}етил)-2-пиперидинон
106
Натриев хидрид (807 mg, 60 % дисперсия в минерално масло, 20.18 mmol) бе прибавен на порции към разтвор от d-валеролактам (2.0 д, 20.2 mmol) в тетрахидрофуран (100 ml) под азот. На порции бе прибавен (2бромоетокси)(трет.-бутил)диметилсилан (ex Aldrich Chemical Co.) (4.33 ml, 20.2 mmol) и реакционната смес бе нагрявана 18 часа при 70 °C. Прибавена бе вода (50 ml) към охладената реакционна смес, сместа концентрирана in vacuo за отстраняване на тетрахидрофурана и екстрахирана с етилацетат (200 ml). Органичният разтвор бе изсушен (MgSO4) и изпарен под намалено налягане до получаване на жълто масло. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан : метанол (98 : 2 до 97 : 3), до получаване на съединението от заглавието, 3.25 g; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.00 (s, 6H), 0.83 (s, 9H), 1.75 (m, 4H), 2.35 (m, 2H), 3.39 (m, 4H), 3.75 (t, 2H); LRMS : m/z 257.9 (M+).
Получаване 5 r·*· 1-(2-Хидроксиетил)-2-пиперидинон o
Тетра-н-бутиламониев флуорид (14 ml, 1 M разтвор в тетрахидрофуран, 14 mmol) бе прибавен към разтвор от лактама от получаване 4 (3.3 д, 12.8 mmol) в тетрахидрофуран (50 ml), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 2 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане, остатъкът дестилиран азеотропно с дихлорометан и пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан : метанол (97 : 3 до 95 : 5) до получаване на
107 съединението от заглавието като масло; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 1.80 (m, 4H), 2.40 (t, 2H), 3.38 (t, 2H), 3.42 (t, 1H), 3.56 (t, 2H), 3.80 (t, 2H).
Получаване 6
2-Г2-(2-Оксо-1-пиперидинил)етил1-1/-/-изоиндол-1,3(2/-/)-дион
Към разтвор от продукта от получаване 5 (842 mg, 5.88 mmol) в С тетрахидрофуран (30 ml) бе прибавен фталимид (952 mg, 6.47 mmol) и сместа подложена на звукова обработка до получаване на разтвор. Добавени бяха трифенилфосфин на полимерна подложка (2.5 д, 7.5 mmol) и диетилазодикарбоксилат (1.15 ml, 7.31 mmol) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Сместа бе филтрувана през Arbocel®, филтратът концентриран под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента етилацетат : пентан (70 : 30 до 100 : 0), до получаване на съединението от заглавието като бяла пяна, 1.6 g (съдържащо малко С- онечиствания); 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 1.60 - 1.80 (m, 4H), 2.17 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.60 (m, 2H), 3.83 (m, 2H), 7.62 (m, 2H), 7.79 (m, 2H); LRMS : m/z 273.2 (MH+).
Получаване 7 (15,ЗР)-3-Аминоциклопентан-карбоксилна киселина ο
Към разтвор от (1/?,4$)-4-амино-циклопент-2-ен карбоксилна киселина (Taylor etal., J. Chem. Soc., Chem. Commun. (1990), (16), 1120 - 1) (5.3 g, 41.7 mmol) във вода (70 ml) бе прибавен платинов оксид (1 g), и сместа бе
108 хидрирана при 45 psi и стайна температура за 18 часа. Сместа бе филтрувана през Arbocel®, филтратът изпарен под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с толуен до получаване на съединението от заглавието като мръснобяло твърдо вещество; 1Н NMR (D2O, 400 MHz) δ: 1.70 - 1.92 (m, ЗН), 2.00 (m, 2H), 2.18 (m, 1H), 2.77 (m, 1 Η), 3.68 (m, 1H); LRMS : m/z 129.8 (MH+).
Получаване 8 (18,3/?)-3-[(трет.-Бутоксикарбонил)амино1циклопентан-карбоксилна киселина
Ди-трет.-бутилдикарбонат (10 g, 45.8 mmol) бе прибавен към охладен в лед разтвор от продукта от получаване 7 (5.4 д, 41.8 mmol) в диоксан (42.5 ml) и разтвор на натриев хидроксид (42.5 ml, 1 N, 42.5 mmol), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Реакционната смес бе концентрирана под намалено налягане за отстраняване на диоксана, после подкислена до pH 2 с използване на 2 N солна киселина. Водният разтвор бе екстрахиран с етилацетат (5 х 100 ml), а обединените органични екстракти бяха изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане до получаване на бяло твърдо вещество. То бе стрито с хексан до получаване на продукта от заглавието, 8.0 д, 83 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.41 (s, 9Н), 1.58 - 2.06 (m, 5Н), 2.21 (m, 1 Η), 2.84 (m, 1 Η), 4.01 (m, 1 Η), 4.84 (m, 1H); LRMS: m/z 228 (M-H)’.
Получаване 9
34(трет.-Бутоксикарбонил)амино]циклохексан-карбоксилна киселина ο
Съединението от заглавието бе получено като бяло твърдо вещество
109 с 81 % добив, от 3-аминоциклохексан-карбоксилна киселина, като се следва процедурата, описана в получаване 8; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.04 (m, 1Н), 1.19-1.50 (m, 13Н), 1.83 (m, 1H), 1.97 (m, 2H), 2.24 (m, 1H), 2.40 (m, 1H), 3.44 (bs, 1 Η), 4.42 (bs, 1H).
Получаване 10 mpem.-Бутил (1 /?,3$)-3-(аминокарбонил)циклопентилкарбамат
Бензотриазол-1-илокситрис(пиролидино)фосфониев хексафлуорофосфат (3.4 д, 6.54 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (883 mg, 6.54 mmol), амониев хлорид (467 mg, 8.72 mmol) и N-етилдиизопропиламин (3.04 ml, 17.5 mmol), бяха прибавени последователно към разтвор от киселината от получаване 8 (1.0 д, 4.37 mmol) в Ν,Ν-диметилформамид (16 ml) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 2 часа. Сместа бе разредена с етилацетат (100 ml), промита с вода (Зх) и солев разтвор, и после изсушена (MgS04) и изпарена под намалено налягане. Остатъчната смола бе пречистена с хроматография върху силикагел с използване на колона Biotage® и градиент на елуента дихлорометан : метанол (98 : 2 до 95 : 5). Продуктът бе стрит с етер до получаване на съединението от заглавието като бяло твърдо вещество, 438 mg, 44 %; 1Н NMR (DMSOd6, 400 ΜΗζ) δ: 1.34 (s, 9H), 1.40 (m, 2H), 1.64 (m, ЗН), 1.90, (m, 1H), 2.55 (m, 1H), 3.70 (m, 1 Η), 6.70 (bs, 1H), 6.80 (d, 1 Η), 7.22 (bs, 1H).
Получаване 11 mpem.-Бутилов 3-[(диметиламино)карбонил]циклохексилкарбамат
1-(3-Диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (1.19 д,
6.19 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (840 mg, 6.19 mmol), N
110 метилморфолин (1.1 ml, 10.1 mmol) и накрая 33 % етанолен дим етила мин (1.5 ml), бяха добавени към разтвор от киселината от получаване 9 (1.37 д, 5.6 mmol) в Ν,Ν-диметилформамид (30 ml), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане, остатъкът разреден с етилацетат и промит с вода (2х). Сместа бе изсушена (MgSO4) и изпарена под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента метанол : дихлорометан (5 : 95 до 10 : 90), до получаване на съединението от заглавието, 998 mg, 66 %;
1Н NMR (CDCl3, 300 ΜΗζ) δ: 1.12 (m, 1Н), 1.40 (m, 11Н), 1.70 (m, 2H), 1.85 (m,
Η), 2.00 (m, 2H), 2.62 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), 3.05 (s, 3H), 3.50 (m, 1H), 4.50 (m,
1H).
Получаване 12 mpem.-Бутилов 2-(2-ацетилхидразино)-2-оксоетилкарбамат сн.
2-Етокси-1-етоксикарбонил-1,2-дихидрохинолин (7.06 g, 28.5 mmol) бе прибавен към разтвор от N-mpem.-бутоксикарбонилглицин (5.0 д, 28.6 mmol) в дихлорометан (75 ml) и разтворът бе разбъркван 15 min. Добавен бе оцетен хидразид (2.6 д, 35.1 mmol) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Получената утайка бе филтрувана и изсушена in vacuo, до получаване на бяло кристално вещество, 2.42 д. Филтратът бе концентриран под намалено налягане, разреден с етер и получената утайка филтрувана и изсушена in vacuo, до получаване на допълнителен продукт като бяло твърдо вещество, 4.4 д, 67 % общо; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ:
1.41 (s, 9H), 2.02 (s, ЗН), 3.87 (d, 2H), 5.22 (bs, 1H), 8.27 (bs, 1H), 8.84 (bs, 1H); LRMS: m/z 249.2 (MNH4 +); Анал.намерено: C, 46.41; H, 7.36; N, 17.98, C9H17N3O4 изисква C, 46.66; H, 7.41; N, 18.13 %.
111
Получаване 13
Бензилов 3-(метиламино)-3-оксопропилкарбамат сн3
Смес от И-[(бензилокси)карбонил]-р-аланил (10 д, 44.8 mmol), метиламин хидрохлорид (3.33 g, 49.28 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (6.05 д, 44.8 mmol), 1-(3-диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (10.3 д, 53.76 mmol) и N-метилморфолин (11.33 ml, 103 mmol) в дихлорометан (200 ml), бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Получената утайка бе отфилтрувана до получаване на желания продукт като безцветна пяна и филтратът изпарен под намалено налягане. Остатъкът бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента етилацетат : хексан (90 : 10 до 100 : 0) до получаване на допълнителен продукт, 7.96 д, 75 % общо; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 2.42 (t, 2H), 2.80 (s, ЗН), 3.50 (m, 2H), 5.21 (s, 2H), 5.49 (bs, 1 Η), 5.63 (bs, 1H), 7.36 (m, 5H); Анал.намерено: С, 60.68; Н, 7.00; N, 11.95. Ci2H16N2O3 изисква С, 61.00; Н, 6.83; N,11.86 %.
Получаване 14 трет.-Бутилов (5-метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)метилкарбамат
сн.
Към разтвор от хидразида от получаване 12 (500 mg, 2.16 mmol) в тетрахидрофуран (40 ml) бе прибавен реагент на Lawesson (960 mg, 2.38 mmol) и реакционната смес бе нагрявана под обратен хладник 3 часа, после разбърквана при стайна температура 18 часа. Сместа бе изпарена под намалено налягане и остатъкът пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента етилацетат:пентан (70 : 30 до 80 : 20), до получаване на масло. Прибавени бяха етилацетат
112 (100 ml) и въглен (2 g), и сместа бе разбърквана 10 min, после , ..лтрувана.
Филтратът бе концентриран под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан до получаване на съединението от заглавието като кристално вещество, 441 mg, 89 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 1.45 (s, 9H), 2.77 (s, ЗН), 4.66 (d, 2H), 5.22 (bs, 1H); LRMS : m/z 230.1 (MH+).
Получаване 15
А/-Метокси-А/-метил-2-(2-оксо-1-пиролидинил)ацетамид
2-Хлоро-М-метокси-М-метилацетамид (ex Aldrich Chemical Co.) (3.2 g, 23.3 mmol) бе прибавен към суспензия от 2-пиролидинон (2.0 д, 23.5 mmol) и натриев хидрид (940 mg, 60 % дисперсия в минерално масло, 23.5 mmol) в тетрахидрофуран (60 ml), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 48 часа. Сместа бе угасена с вода (150 ml) и екстрахирана е етилацетат (200 ml) и дихлорометан (200 ml). Обединените органични екстракти бяха изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане. Остатъкът бе стрит с хексан, после с етер до получаване на съединението от заглавието като бели кристали, 1.8 д, 41 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 2.02 (m, 2H), 2.40 (t, 2H), 3.17 (s, ЗН), 3.48 (t, 2H), 3.72 (s, 3H), 4.19 (s, 2H); LRMS: m/z 186.9 (MH+).
Получаване 16
-(2-Оксопропил)-2-пиролидинон
Метилмагнезиев хлорид (2.7 ml, 3 М в тетрахидрофуран, 8.1 mmol) бе прибавен към охладен (-20 °C) разтвор на амида от получаване 15 (1.5 д, 8.1
113 mmol) в тетрахидрофуран (50 ml), и реакцията оставена да се затопли до стайна температура, после разбърквана един час. Сместа бе угасена чрез добавяне на воден разтвор на амониев хлорид, после екстрахирана с етилацетат (3 х 50 ml). Обединените органични разтвори бяха изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане до получаване на съединението от заглавието като масло, 645 mg, 56 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 2.07 (m, 2H), 2.17 (s, ЗН), 2.42 (t, 2H), 3.42 (t, 2H), 4.10 (s, 2H).
Получаване 17
1-[2-(Хидроксиимино)пропил1-2-пиролидинон о
сн3
Хидроксиламин хидрохлорид (316 mg, 4.55 mmol) и после пиридин (370 μΙ, 4.58 mmol) бяха добавени към разтвор от амида от получаване 16 (643 mg, 4.55 mmol) в етанол (30 ml), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Сместа бе изпарена под намалено налягане и остатъкът пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан : метанол (97 q : 3 до 90 :10). Продуктът бе стрит с етер до получаване на съединението от заглавието като бяло твърдо вещество, 375 mg, 53 %; 1Н NMR (DMSOds, 400 MHz) δ: 1.60 (s, ЗН), 1.87 (m, 2H), 2.20 (t, 2H), 3.19 (t, 2H), 3.78 (s, 2H), 10.77 (s, 1H); LRMS : m/z 157.4 (MH+).
Получаване 18 mpem.-Бутилов 1-бензил-2-оксо-2-Г(3-пиридинилсулфонил)амино1етилкарбамат
114
1-(3-Диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (939 mg, 4.9 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (562 mg, 4.15 mmol) и N-метилморфолин (952 mg, 9.42 mmol) бяха добавени към леденостуден разтвор от М-трет.-бутоксикарбонил-Ьфенилаланил (1.0 д, 3.77 mmol) в дихлорометан (20 ml), и сместа бе разбърквана 15 min. Прибавен бе 3-пиридинсулфонамид (Mon. fur Chemie; 72; 77; 1938) (596 mg, 3.77 mmol) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 24 часа. Сместа бе изпарена под намалено налягане и остатъкът разпределен между етилацетат (50 ml) и вода (50 ml) и слоевете сепарирани. Водният слой бе екстрахиран с етилацетат, после с дихлорометан, обединените органични екстракти бяха изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен двукратно чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента етилацетат : етанол (100:0 до 90:10) до получаване на желания продукт като бяла пяна, 1.01 д, 66; 1Н NMR (DMSOd6, 300 MHz) δ: 1.30 (s, 9H), 2.77 (m, 1H), 2.97 (m, 1 Η),
3.84 (m, 1H), 5.95 (bs, 1H), 6.96 (m, 2H), 7.08 (m, 3H), 7.42 (m, 1H), 8.05 (d, 1H), 8.60 (d, 1H), 8.84 (m, 1H); [cc]D = -10° (0.1 % разтвор в метанол).
Получаване 19 (5-Бромо-3-пиридинил)(фенил)метанол
он
Вг· н-Бутиллитий (17 ml, 2.5 М в хексани, 42.5 mmol) бе прибавен на капки към охладен (-78 °C) разтвор от 3,5-дибромопиридин (10 д, 42.2 mmol) в етер (200 ml), така че да се поддържа вътрешна температура < -70 °C. Сместа след това бе разбърквана 15 min и бе прибавен на капки разтвор от бензалдехид (4.5 д, 42.5 mmol) в етер (20 ml), отново поддържайки температурата < -70 °C. Сместа бе разбърквана 15 min, после оставена да се затопли до стайна температура в продължение на един час. Реакцията бе прекъсната чрез добавяне на 0.9 М разтвор на амониев хлорид (200 ml),
115 слоевете сепарирани, и водната фаза екстрахирана с етер. Обединените органични екстракти бяха изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане. Остатъчното жълто масло бе пречистено чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан:етер (95 : 5 до 80 : 20), до получаване на съединението от заглавието като жълто масло, 7.6 д, 68 %; 1Н NMR (D2O, 300 ΜΗζ) δ: 5.80 (s, 1 Η), 7.37 (m, 5H), 7.90 (s, 1H), 8.40 (s, 1 Η), 8.44 (s, 1H).
Получаване 20 (15,3/?)-3-Аминоциклопентанкарбоксамид хидрохлорид
о
Хлороводород газ бе барботиран през охладен с лед разтвор на амида от получаване 10 (438 mg, 1.92 mmol) в дихлорометан (50 ml) за 10 min, и получената суспензия бе разбърквана при стайна температура 2 часа. Сместа бе продухана с азот, после изпарена под намалено налягане. Остатъкът бе стрит с етер до получаване на съединението от заглавието като твърдо вещество; 1Н NMR (D2O, 400 ΜΗζ) δ: 1.63 - 1.82 (m, ЗН), 1.92 2.07 (m, 2H), 2.19 (m, 1H), 2.82 (m, 1H), 3.62 (m, 1H).
Получаване 21
3-Амино-Л/,Л/-диметилциклохексанкарбоксамид
Разтвор от амида от получаване 11 (997 mg, 3.69 mmol) в трифлуорооцетна киселина (8 ml) и дихлорометан (8 ml) бе разбъркван при стайна температура 4 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът разпределен между дихлорометан (25 ml) и разтвор на натриев бикарбонат (25 ml). pH бе регулирано до 9 с разтвор на натриев хидроксид, слоевете сепарирани и водната фаза изпарена под намалено
116 налягане. Полученото вещество бе стрито с горещ етилацетат, суспензията филтрувана и филтратът концентриран под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан : метанол : 0.88 амоняк (84 : 14 : 2) до получаване на съединението от заглавието като безцветно масло, 346 mg, 55 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 1.08 (m, 1H), 1.25 - 1.54 (m, 6H), 1.72 (m, 1H), 1.86 (m, 2H), 2.53 - 2.75 (m, 2H), 2.96 (s, 3H), 3,03 (s, 3H).
Получаване 22 (5-Метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)метиламин хидрохлорид
н.
HCI
Ν—Ν
Хлороводород газ бе барботиран през охладен с лед разтвор на тиадиазола от получаване 14 (425 mg, 1.85 mmol) в дихлорометан (50 ml) за 15 min и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 1 час. Сместа бе продухана с азот, после изпарена под намалено налягане до получаване на съединението от заглавието като бяло твърдо вещество; 1Н NMR (DMSOd6, 400 ΜΗζ) δ: 2.75 (s, ЗН), 4.48 (m, 2H), 8.80 (bs, ЗН).
Получаване 23
З-Амино-М-метилпропанамид хидрохлорид
HCI
Смес от бензилкарбамата от получаване 13 (7.92 д, 33.5 mmol) и 5 % паладий върху въглен (800 mg) в етанол (300 ml) бе хидрирана при 50 psi и стайна температура за 4 часа. Реакционната смес бе филтрувана през Arbocel®, промита с етанол и към обединения филтрат бе прибавена 1 N солна киселина (36.9 ml, 36.9 mmol). Този разтвор бе изпарен под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан до получаване на съединението от заглавието, 4.66 g, 1Н NMR (DMSOd6) 300 ΜΗζ) δ: 2.46 (t, 2H), 2.60 (s, ЗН), 2.95 (m, 2H), 7.98 - 8.16 (m, 2H).
117
Получаване 24
1-(2-Аминопропил)-2-пиролидинон
Смес от оксима от получаване 17 (375 mg, 2.40 mmol) и платинов оксид (300 mg) в етанол (20 ml), бе хидрирана при 60 psi и стайна температура за 18 часа. TLC анализът показа оставащ изходен материал, така че бе прибавен допълнителен платинов оксид (100 mg) и реакцията продължена за още 4 часа. Сместа бе филтрувана през Arbocel® и филтратът изпарен под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан : метанол : 0.88 амоняк (95 : 5 : 0.5 до 90 : 10 : 1), до получаване на съединението от заглавието като бистро масло, 170 mg, 50 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 1.02 (d, ЗН), 1.36 (bs, 2H), 2.00 (m, 2H), 2.38 (t, 2H), 3.00 - 3.16 (m, 2H), 3.21 (m, 1 Η), 3.35 - 3.45 (m, 2H); LRMS : m/z 143 (MH+).
Получаване 25
Л/-(2-Амино-3-фенилпропаноил)-3-пиридинсулфонамид дихидрохлорид
Наситена етерирана солна киселина (40 ml) бе прибавена към леденостуден разтвор от сулфонамида от получаване 18 (959 mg, 2.37 mmol) в етилацетат (30 ml) и етер (10 ml), и разтворът бе разбъркван при стайна температура 18 часа. Реакционната смес бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с
118 дихлорометан (Зх), до получаване на съединението от заглавието като бяло твърдо вещество, 959 mg; 1Н NMR (DMSOd6, 300 MHz) δ: 3.23 - 3.50 (m, 1H), 3.70 - 3.98 (m, 1H), 4.13 (m, 1H), 7.05 (m, 2H), 7.20 (m, ЗН), 7.78 (m, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.44 (bs, 2H), 8.95 (d, 1H), 9.02 (s, 1H); [a]D = +138° (0.5 % разтвор в метанол).
Получаване 26 (5-Амино-3-пиридинил)(фенил)метанол
Смес от бромида от получаване 19 (2.0 д, 7.60 mmol) и меден (II) сулфат пентахидрат (350 mg, 1.40 mmol) в 0.88 амоняк (18 ml), бе нагрята при 135 °C в херметичен съд за 24 часа. Към охладения разтвор бе прибавен разтвор на натриев хидроксид (1 N, 10 ml) и сместа после бе екстрахирана с етер (6х). Обединените органични екстракти бяха изсушени (MgSO4) и концентрирани под намалено налягане. Получената утайка бе филтруване, промита с етер и изсушена до получаване на съединението от заглавието като твърдо вещество, 1.25 д, 83 %; т.т. 92 - 94 °C; 1Н NMR (DMSOde, 300 MHz) δ: 5.22 (s, 2H), 5.59 (d, 1H), 5.86 (d, 1H), 6.83 (s, 1H), 7.20 (m, 1 Η), 7.34 (m, 4H), 7.78 (m, 2H).
Получаване 27
5-Бензил-З-пиридиниламин
Смес от алкохола от получаване 26 (700 mg, 3.5 mmol) и 5 % паладий върху, въглен (70 mg) в солна киселина (5 ml, 1 N) и етанол (20 ml), бе хидрирана при 30 psi и стайна температура за 6 часа. Сместа бе филтрувана през Arbocel® и филтратът концентриран под намалено налягане. Остатъкът бе направен основен с воден разтвор на натриев
119 бикарбонат, екстрахиран с дихлорометан (Зх) и обединените органични екстракти изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан : метанол : 0.88 амоняк (92 : 8 : 0.4) като елуент, до получаване на съединението от заглавието като твърдо вещество, 500 mg, 78 %; т.т. 107 - 109°С; 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 3.61 (bs, 2H), 3.94 (s, 2H), 6.78 (s, 1H), 7.24 (m, 5H), 7.98 (s, 2H).
Получаване 28
5-Амино-1 -бензил-2( 1 Н)-пирид инон
h2n
Смес от 1-бензил-5-нитро-1Н-пиридин-2-он (Justus Liebigs Ann. Chem. 484; 1930; 52) (1.0 g, 4.35 mmol) и гранулиран калай (3.5 g, 29.5 mmol) в концентрирана солна киселина (14 ml), бе нагрявана 1.5 часа при 90 °C. Охладеният разтвор бе разреден с вода, неутрализиран с разтвор на натриев карбонат и екстрахиран с етилацетат (250 ml общо). Обединените органични екстракти бяха филтрувани, изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане до получаване на съединението от заглавието като бледозелено твърдо вещество, (което се превърна в синьо с течение на времето), 440 mg, 51 %; 1Н NMR (CDCI3, 250 MHz) δ: 4.12 - 4.47 (bs, 2H), 5.00 (s, 2H), 6.31 (d, 1H), 6.86 (s, 1 Η), 7.07 (m, 1H), 7.14-7.42 (m, 5H).
Получаване 29
Цис-(4-Аминоциклохексил)метанол „ХГ
Литиево-алуминиев хидрид (14 ml, 1 М разтвор в тетрахидрофуран, 14 mmol) бе прибавен на капки към охладен в лед разтвор от цис-4-аминоциклохексан-карбоксилна киселина (1.33 д, 9.29 mmol) в тетрахидрофуран (50 ml), и веднага щом прибавянето завърши, реакционната смес бе нагрята
120 под обратен хладник за 6 часа. Получената суспензия бе охладена до 5 °C и последователно бяха прибавени вода (0.6 ml), воден разтвор на натриев хидроксид (1.1 ml, 2М) и после вода (0.6 ml). Получената суспензия бе филтрувана и филтратът изпарен под намалено налягане до получаване на масло, което бе използвано без допълнително пречистване; 1Н NMR (CDCI3,
300 ΜΗζ) δ: 1.40 - 1.80 (m, 12Н), 3.00 (m, 1 Η), 3.55 (d, 2H); LRMS : m/z 130.2 (MH+).
Получаване 30
2-Амино-4-бутилпиридин
Смес от 4-бутилпиридин (5.0 g, 37.0 mmol) и 95 % натриев амид (1.7 д,
40.7 mmol) в ксилен (10 ml) бе нагрявана 18 часа при 150 °C. Охладената смес бе разредена с етер (100 ml) и екстрахирана с 2 N солна киселина (двукратно). Водните екстракти бяха направени основни с разтвор на натриев хидроксид и повторно екстрахирани с етер. Тези обединени органични екстракти бяха изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане. Остатъчното масло бе пречистено чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан : метанол : 0.88 амоняк (97 : 3 : 0.15) като елуент, до получаване на съединението от заглавието като кристално вещество, 2.1 д, 38 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.96 (t, ЗН), 1.38 (m, 2Н), 1.60 (m, 2Н), 2.52 (t, 2Н), 4.38 (bs, 2Н), 6.38 (s, 1 Η), 6.55 (d, 1 Η), 7.98 (d, 1Н); Анал.намерено: С, 72.01; Н, 9.47; N, 18.53. CgH14N2 изисква С, 71.96; Н, 9.39; N, 18.65%.
Получаване 31
5-(Циклопропилметил)-1,3,4-тиадиазол-2-амин
Оксалилхлорид (3.13 ml, 35.9 mmol) и Ν,Ν-диметилформамид (1 капка)
121 бяха добавени към разтвор от циклопропилоцетна киселина (3 д, 29.9 mmol) в дихлорометан (30 ml), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и дестилирана азеотропно с дихлорометан до получаване на кафяво масло. Смес от този междинен киселинен хлорид (887 mg, 7.48 mmol) и тиосемикарбазид (455 mg, 4.99 mmol) бе нагрята при 70 °C за 18 часа, после бе прибавена охладена вода, сместа направена основна до pH 9 с 50 % воден разтвор на натриев хидроксид, и получената утайка филтрувана и изсушена до получаване на продукта от заглавието, 410 mg, 53 %; 1Н NMR
С (CD3OD, 400 ΜΗζ) δ: 0.28 (m, 2Н), 0.60 (m, 2Н), 1.02 (m, 1Н), 2.77 (d, 2Н);
LRMS: m/z 155.2 (MH+).
Получаване 32 (1£?,2/?.4$)-4-[({1-Г2-(т£>елг-Бутоксикарбонил)пентил1циклопентил)карбонил)амино]-2-бутилциклохексанкарбоксамид
СН.
Продуктът от получаване 49 (65 mg, 0.14 mmol) бе поет в DCM (2 ml) и на една порция бе добавен 1,1'-карбонилдиимидазол (23 mg, 0.15 mmol). Прибавен бе 0.88 воден амонячен разтвор (0.5 ml) и сместа бе разбърквана 16 h. Летливите вещества бяха отстранени под намалено налягане и получената суспензия обработена с наситен воден разтвор на NaHCO3 (5 ml). Органичните вещества бяха екстрахирани с EtOAc (2х), изсушени (MgSO4) и изпарени до получаване на масло, което бе пречистено чрез колонна хроматография с 19 :1 (DCM : МеОН) като елуент до получаване на съединението от заглавието (43 mg); 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.81 (t, 6Н), 1.02 - 1.28 (m, 37Н), 2.22 (m, 1H), 4.13 (m, 1H), 5.42 - 5.97 (m,3H).
122
Получаване 33 mpem.-Бутилов 2-{[ 1 -({[1 -(хид роксиметил)циклопенти л1амино)карбонил)циклопентил]метил}пентаноат
1-(3-Диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (41 mg, 0.21 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (27 mg, 0.2 mmol), Nметилморфолин (35 μΙ, 0.31 mmol) и накрая 1-амино-1-циклопентанметанол (ex Aldrich Chemical Co.) (25 mg, 0.22 mmol), бяха добавени към разтвор от киселината от получаване 1 (150 mg, 0.53 mmol) в Ν,Ν-диметилформамид (3 ml) и реакционната смес бе разбърквана 18 часа при 90 °C. Охладеният разтвор бе разреден с етилацетат (90 ml), промит с вода (3 х 25 ml) и солев разтвор (25 ml), после изсушен (MgSO4) и изпарен под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез хроматография върху силикагел с използване на етилацетат : пентан (30 : 70) като елуент до получаване на съединението от заглавието, 38 mg, 57 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.88 (t, ЗН), 1.29 (m, ЗН), 1.41 -1.78 (m, 26H), 1.78- 1.98 (m, 4H), 2.04 (m, 1H), 2.26 (m, 1H), 3.59 (dd, 1H), 3.70 (dd, 1H), 4.80 (t, 1H), 5.81 (s, 1H); LRMS : m/z 380 (MH).
Получавания 34 до 43
Съединения c формула IVc, т.е. съединенията с обща формула IV, в която Prot е трет.-бутил и R1 е пропил, бяха получени от продукта от заглавието на получаване 1 и посочения амин, като се следва процедура, подобна на тази описана в Получаване 33.
123
(IVc)
Получ. -(CH2)nY Предходен амин Данни
34 ХО Пиперониламин (ех Aldrich Chemical Co.) 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.85 (t, ЗН), 1.26 (m, 4H), 1.42 (s, 9H), 1.46 (m, 2H), 1.59 - 1.75 (m, 5H), 1.95 (m, 2H), 2.06 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 4.26 (dd, 1H), 4.39 (dd, 1H), 5.95 (m, ЗН), 6.78 (m, ЗН). LRMS: m/z 418.3 (MH+)
351 2-аминоиндан хидрохлорид (ex Aldrich Chemical Co.) 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.87 (t, 3H), 1.25 (m, 3H)( 4H), 1.42 (m, 12H), 1.56 - 1.70 (m, 4H), 1.90 (m, 2H), 2.02 (m, 1H), 2.22 (m, 1H), 2.80 (m, 2H), 3.35 (m, 2H), 4.76 (m, 1H), 5.86 (d, 1H), 7.19 (m, 4H). LRMS : m/z 400.3 (MH+)
362 ЧУ“· N—N 2-амино-5метил-1,3,4тиадиазол (ех Lancaster) 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.82 (t, 3H), 1.20 - 1.85 (m, 20H), 2.18 (m, 4H), 2.67 (s, 3H), 9.80 (bs, 1H). LRMS : m/z 382.3 (MH+)
372 ЧХ Ν—N 2-амино-5етил-1,3,4тиадиазол (ех Lancaster) 1H NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.82 (t, 3H), 1.20 - 1.80 (m, 22H), 1.84 (m, 1H), 2.20 (m, 4H), 3.04 (q, 2H), 9.10 (bs, 1H). LRMS : m/z 396.2 (MH+)
124
Получ. -(CH2)nY Предходен амин Данни
38 N—N Получаване 22 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.84 (t, ЗН), 1.20 - 1.38 (m, 4Н), 1.42 (s, 9Н), 1.44 - 1.76 (m, 7Н), 1.95 - 2.12 (m, ЗН), 2.20 (m, 1Н), 2.76 (s, ЗН), 4.74 (dd, 1Н), 4.82 (dd, 1Н), 6.54 (bs, 1Н). LRMS : m/z 396.2 (MH+)
391·2 0 Получаване 23 1H NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.88 (t, ЗН), 1.21 - 1.38 (m, ЗН), 1.40 - 1.70 (m, 17H), 1.88 - 2.04 (m, ЗН), 2.20 (m, 1H), 2.39 (t, 2H), 2.80 (d, 3H), 3.53 (m, 2H), 6.13 (bs, 1H), 6.40 (m, 1H). LRMS : m/z 369.5 (MH+)
402 0 γΑ сн3 Получаване 24 1H NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.82 (m, 3H), 1.16 (2xd, 3H), 1.20 - 1.72 (m, 21H), 1.83 (m, 1H), 1.98 (m, 3H), 2.17 (m, 1H), 2.38 (m, 2H), 1.96 (m, 1H), 3.34 (m, 1H), 3.54 - 3.62 (m, 2H), 4.15 - 4.20 (m, 1H), 6.21 - 6.35 (2xbd, 1H). LRMS : m/z 409.3 (MH+).
412 χΑ·. Получаване 20 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.82 (t, 3H), 1.19 - 1.38 (m, 4H), 1.42 (m, 12H), 1.60 (m, 3H), 1.74 - 2.02 (m, 10H), 2.18 (m,1H), 2.78 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 5.32 (bs, 1H), 5.57 (bs, 1H), 7.28 (bs. 1H). LRMS : m/z 395 (MH+)
125
Получ. -(CH2)nY Предходен амин Данни
422 oV Получаване 21 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.86 (t, ЗН), 1.18 - 1.78 (m, 25Н), 1.84 - 2.03 (m, 6H), 2.22 (m, 1H), 2.68 (m, 1 Η), 2.96 (s, ЗН), 3.03 (s, ЗН), 3.84 (m, 1 Η), 5.78 (m, 1H). LRMS : m/z 437.7 (MH+)
432 Χυ Получаване 29 1H NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.85 (t, 3H), 1.20 - 1.79 (m, 30H), 1.90 (m, 2H), 2.05 (m, 1H), 2.24 (m, 1H), 3.56 (m, 2H), 4.04 (m, 1H), 5.82 (bd, 1H). LRMS : m/z 396.4 (MH+)
= реакция, проведена при стайна температура = изпозлзван бе метанол:дихлорометан като елуент в колоната
Получаване 44 mpem.-Бутилов 2-{И-Щ2-(1Н-индол-3-ил)етил]амино}карбонил)циклопентил!метил)пентаноат
Съединението от заглавието бе получено като бледожълто масло с 80 % добив от киселината от получаване 1 и триптамин, като се следва процедура, подобна на тази описана в получаване 33, освен че реакцията бе проведена в дихлорометан при стайна температура; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.86 (t, ЗН), 1.26 (m, ЗН), 1.42 (m, 11 Η), 1.50 - 1.69 (m, 6H), 1.83 (m, 1H), 1.90 - 2.05 (m, 2H), 2.22 (m, 1H), 2.99 (t, ЗН), 3.60 (m, 2H), 5.78 (m, 1H),
126
7.06 (s, 1 Η), 7.14 (m, 1H), 7.20 (m, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.63 (d, 1H), 8.02 (bs, 1H); LRMS : m/z 427.5 (MH+).
Получаване 45 mpem.-Бутилов 2-1(1 -([(3S)-1 -бензилпиролидинил1амино}циклопентил) метил!пентаноат сн.
Съединението от заглавието бе получено количествено от киселината от получаване 1 и (Зв)-1-бензил-3-аминопиролидин (ex. Aldrich Chemical Co.), като се следва процедура, подобна на тази, описана в получаване 44; 1Н NMR (CDCl3, 300 ΜΗζ) δ: 0.84 (t, ЗН), 1.10 - 1.76 (m, 21 Η), 1.90 - 2.05 (m, ЗН), 2.20 - 2.38 (m, ЗН), 2.58 (m, 2Н), 2.84 (m, 1Н), 3.62 (s, 2Н), 4.45 (m, 1 Η), 6.02 (m, 1Н), 7.33 (m, 5Н).
Получаване 46 mpem.-Бутилов 2-Л1-Щцис-2-фенилциклопропил1амино)карбонил)циклопентил]метил}пентаноат сн.
1-(3-Диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (81 mg, 0.42 mmol), N-метилморфолин (0.15 ml, 1.06 mmol) и 1-8-амино-2-/?-фенил циклопропан хидрохлорид (J. Med. Chem., 1986, 29, 2044) (60 mg, 0.35 mmol) бяха добавени към разтвор от киселината от получаване 1 (100 mg, 0.35 mmol) в дихлорометан (10 ml), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Реакционната смес бе изпарена под намалено налягане и остатъкът пречистен чрез колонна хроматография върху
127 силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан : метанол (98 : 2 до 95 : 5), до получаване на съединението от заглавието като жълто масло, 85 mg, 55 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ : 0.88 (t, ЗН), 1.16 (m, 1H),
1.20 - 1.58 (m, 16H), 1.63 (m, 5H), 1.90 - 2.14 (m, 4H), 2.23 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 6.00 (m, 1H), 7.19 (m, 3H), 7.24 (m, 2H); LRMS : m/z 400 (MH+).
Получаване 47 mpem.-Бутил QB 2-(И-Ш2-(2-оксо-1-пиперидинил)етил]амино)карбонил)циклопентил!метил)пентаноат
Към разтвор от съединението от получаване 6 (171 mg, 0.63 mmol) в етанол (10 ml) бе прибавен хидразин монохидрат (34 μΙ, 0.70 mmol) и реакционната смес бе нагрявана под обратен хладник 5 часа. Охладената смес бе филтрувана, филтратът концентриран под намалено налягане, остатъкът суспендиран в дихлорометан и суспензията повторно филтрувана. Полученият филтрат бе концентриран под намалено налягане, и остатъкът пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан : метанол : 0.88 амоняк (90 : 10 : 1) като елуент до получаване на амина, 16 mg. Киселината от получаване 1 (32 mg, 0.11 mmol), 1-(3-диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (25 mg, 0.13 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (17 mg, 0.13 mmol) и Nметилморфолин (25 μ|, 0.23 mmol), бяха добавени към разтвор от този амин в Ν,Ν-диметилформамид (2 ml) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Сместа бе разпределена между етилацетат и вода, и слоевете сепарирани. Органичната фаза бе промита с вода (2х), изсушена (MgSO4) и изпарена под намалено налягане. Остатъчното масло бе пречистено чрез колонна хроматография върху силикагел с използване
128 на градиент на елуента дихлорометан : метанол (98.5 : 1.5 до 95 : 5) до , получаване на съединението от заглавието като масло, 43 mg, 17 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.82 (t, ЗН), 1.22 (m, ЗН), 1.38 - 1.65 (m, 17Н), 1.58 (m, 4H), 1.95 (m, ЗН), 2.17 (m, 1H), 2.37 (m, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.38 (m, 2H), 3.50 (m, 2H), 6.76 (m, 1H); LRMS : m/z 409.2 (MH+)
Получаване 48
Етилов (1/?,2/?,43)-4-К{1-[2-(трел?.-бутоксикарбонил)пентил1циклопентил}карбонил)-амино]-2-бутилциклохексанкарбоксилат сн.
сн.
о
Смес от киселината от получаване 1 (109 mg, 0.38 mmol), етилов * естер на (1Я,2Я45)-4-амино-2-бутил-циклохексанкарбоксилна киселина хидрохлорид (WO 90/09374), (101 mg, 0.38 mmol), 1-(3-диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (95 mg, 0.50 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (60 mg, 0.40 mmol) и триетиламин (0.12 ml, 0.87 mmol) в дихлорометан (3 ml), бе разбърквана при стайна температура 16 часа. Сместа бе изпарена под намалено налягане, остатъкът обработен с разтвор на натриев бикарбонат и екстрахиран с етилацетат. Обединените органични екстракти бяха изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане до получаване на смола. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат : пентан (50 : 50) като елуент, и дестилиран азеотропно с дихлорометан до получаване на съединението от заглавието, 190 mg; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.88 (m, 6H), 1.20 - 1.40 (m, 13H), 1.40 - 2.10 (m, 25H), 2.16 - 2.30 (m, 2H), 4.18 (m, 3H), 5.83 (d,1H).
129
Получаване 49 (1/?,2/?,48)-4-[({1-[2-(п7ре/7?.-Бутоксикарбонил)пентил]циклопентил}карбонил)амино1-2-бутилциклохексан-карбоксилна киселина сн.
Смес от етиловия естер от получаване 48 (190 mg, 0.39 mmol) и 1 N разтвор на натриев хидроксид (0.85 ml, 0.85 mmol) в метанол (1.5 ml) бе разбърквана при стайна температура 22 часа. Реакционната смес бе подкислена до pH 1 с използване на солна киселина (2 N), после разпределена между етилацетат и вода. Слоевете бяха сепарирани и органичната фаза бе изсушена (MgSO4), и изпарена под намалено налягане до получаване на съединението от заглавието, 130 mg, 72 %; 1Н NMR (CDCI3, 300MHz) δ: 0.86 (m, 6Н), 1.20 - 2.12 (m, 36Н), 2.24 (m, 2Н), 4.18 (m, 1 Η), 5.82 (d, 1H); LRMS : m/z 464 (Μ-Η)λ
Получаване 50 moem.-Бутилов (2/?)-2-{[1-({[5-(циклопропилметил)-1,3,4-тиадиазол-2ил1амино}карбонил)циклопентил]метил}пентаноат сн.
Съединението от заглавието бе получено от киселината от получаване 2 и амина от получаване 31, с 65 % добив, като се следва процедурата описана в получаване 33; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ : 0.35 (m, 2Н), 0.63 (m, 2Н), 0.80 (m, ЗН), 1.10 (m, 1 Η), 1.20 -1.94 (m, 20Η), 2.19 (m, 4H),
130
2.93 (t, 2H). 3.50 (s, 1H); LRMS : m/z 422.4 (MH+); [a]D= -14.15° (c = 0.082, метанол).
Получаване 51 mpem.-Бутилов (2/?)-2-{Г1-({[5-(етоксиметил)-1,3,4-тиадиазол-2-ил1амино}карбонил)циклопентил!метил)пентаноат
Съединението от заглавието бе получено от киселината от получаване 2 и продукта от заглавието от получаване 97, с 51 % добив, като се следва процедурата описана в получаване 33; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ : 1.10 - 1.78 (m, 25H), 1.82 (m, 1H), 2.19 (m, 5H), 3.48 (s, 1H), 4.82 (s, 2H), 10.16 (br s, 1H); LRMS : m/z 426.4 (MH+); [a]D = -12.50° (c = 0.08, метанол).
Получаване 51а п7рет.-Бутил-(2/?)-2-[(1-{[(5-етил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбо· нил}циклопентил)метил!пентаноат
Към смес от дихлорометан (2.39 L) и пиридин (2.39 L) при -14 °C бе прибавен тионилхлорид (135 ml, 1.85 mol, 1.1 екв.) с разбъркване в продължение на 1 час в азотна атмосфера. След разбъркване на получения оранжев разтвор в продължение на 5 min, в продължение на 45 min бе прибавен разтвор от продукта от получаване 2 (477 д, 1.67 mol) в
131 дихлорометан (477 ml), което доведе до това, че реакционната смес стана мътна. След разбъркване на реакционната смес 3 часа бе прибавен триетиламин (424 д, 4.19 mol) в продължение на 20 min, последван от 4диметиламинопиридин (20.5 д, 168 mmol). Към получената смес след това бе прибавен 2-амино-5-етил-1,3,4-тиадиазол (ex. Lancaster (282 g, 2.18 mol) на 3 порции в продължение на 10 min. След това реакционната смес бе оставена да се затопли до температурата на околната среда и бе разбърквана 43 часа. Към реакционната смес после бяха прибавени нхептан (2.4 L) и дейонизирана вода (1 L). След това с разбъркване в продължение на 0.5 часа бе прибавена концентрирана солна киселина (3.56 L), като същевременно бе охлаждано в баня лед-вода. После слоевете бяха разделени и към органичния слой бе прибавена дейонизирана вода (2 L) и концентрирана солна киселина (250 ml) с разбъркване. Слоевете отново бяха сепарирани и към органичният слой бе прибавена дейонизирана вода (2 L) и концентрирана солна киселина (250 ml) с разбъркване. Към органичния слой след това бе прибавен наситен воден разтвор на калиев карбонат (1 L) с разбъркване. Органичната фаза бе събрана и после бе промита с наситен солев разтвор (2x1 L). Полученият разтвор след това бе концентриран под вакуум до получаване на съединението от заглавието (546 д, 1.38 mol, 85 % добив) като вискозно тъмнокафяво масло, което бе използвано в следващия етап без допълнително пречистване; LRMS (отрицателен APCI): m/z [М-Н]’ 394; 1H-NMR (CDCI31 300 MHz) δ: 0.76 (t, ЗН), 1.08 - 1.23 (m, ЗН), 1.23 - 1.27 (m, 2H), 1.32 (s, 9H), 1.34 - 1.42 (m, 2H), 1.42
1.53 (m, 4H), 1.53 - 1.68 (m, 2H), 1.87 (dd, 1 Η), 1.95 - 2.06 (m, 1 Η), 2.06 - 2.24 (m, ЗН), 2.98 (q, 2H), 12.15 (bs, 1H).
Получаване 52
Бензинов 2-({1-КЗ-пиридиниламино)карбонил1циклопентил)метил)пентаноат
132
Към смес от киселинния хлорид от получаване 3 (200 mg, 0.60 mmol) и
2-аминопиридин (61 mg, 0.65 mmol) в дихлорометан (3 ml) бе прибавен триетиламин (0.11 ml, 0.78 mmol) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 16 часа. Сместа бе изпарена под намалено налягане, остатъкът разпределен между разтвор на натриев бикарбонат (5 ml) и етилацетат (20 ml), и слоевете сепарирани. Органичната фаза бе изсушена (MgSO4) и изпарена под намалено налягане до получаване на смола. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат като елуент, до получаване на съединението от заглавието, 130 mg; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ : 0.82 (t, ЗН), 1.21 (m, ЗН), 1.40 (m, 1 Η), 1.43 - 1.72 (m, 6H), 1.81 (d, 1H), 1.98 (m, 1H),
2.18 (m, 1 Η), 2.24 (m, 1H), 2.46 (m, 1 Η), 4.98 (m, 2H), 7.20 - 7.38 (m, 6H), 7.42 (s, 1 Η), 8.06 (d, 1 Η), 8.35 (d, 1 Η), 8.56 (s, 1 Η).
Получавания 53 до 56
Съединения с формула IVd, т.е. съединенията с обща формула IV, в която Prot е бензил и R1 е пропил, бяха получени от киселинния хлорид от получаване 3 и посочения амин, като се следва процедура подобна на тази, описана в получаване 52.
о
133
Полу чава не -(CH2)nY Предшестващ амин Данни
531 ex Trans World Chemicals 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.84 (t, ЗН), 1.24 (m, 2Н), 1.40 - 1.76 (m, 7Н), 1.84 (dd, 1Н), 1.98 (m, 1Н), 2.19 (dd, 1 Η), 2.28 (m, 1 Η), 2.56 (m, 1 Η), 3.98 (s, 2Η), 4.99 (dd, 2Н), 6.98 (d, 1Н), 7.197.42 (m, 15Н).
54 ΊΓΟ Получаване 27 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.85 (t, ЗН), 1.24 (m, ЗН), 1.39 - 1.78 (m, 6H), 1.82 (dd, 1H), 1.98 (m, 2H), 2.20 (dd, 1H), 2.25 (m, 1H), 2.50 (m, 1H), 3.98 (s,2H), 4.98 (dd, 2H), 7.18 - 7.40 (m, 10H), 7.45 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.42 (s, 1H).
55 ν' J > н,с Получаване 30 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 0.80 (t, 3H), 0.92 (t, 3H), 1.21 (m, 2H), 1.30 - 1.70 (m, 12H), 1.82 (dd, 1H), 2.04 (m, 1H), 2.20 (m, 2H), 2.50 (m, 1H), 2.58 (t, 2H), 4.98 (dd, 2H), 6.83 (d, 1H), 7.30 (m, 5H), 7.90 (s, 1H), 8.08(s, 1H),8.15(d, 1H).
562 Получаване 28 1H NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.84 (t, 3H), 1.25 (m, 2H), 1.27 - 1.99 (m, 10H), 2.07 - 2.30 (m, 2H), 2.47 (m, 1H), 4.99 (s,2H), 5.10 (dd, 2H), 6.59 (d, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.34 (m, 11H),8.10(s,1H).
134 = дихлорометан използван като елуент в колоната = N-метилморфолин бе използван като база
Получаване 57
Бензилов 2-({1-[({1-бензил-2-оксо-2-КЗ-пиридинилсулфонил)амино1етил}амино)карбонил!циклопентил}метил)пентаноат
Амин хидрохлоридът от получаване 25 (828 mg, 2.19 mmol) и N-метилморфолин (2.21 g, 21.9 mmol) бяха добавени към леденостуден разтвор от киселинния хлорид от получаване 3 (737 mg, 2.19 mmol) в дихлорометан (50 ml) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 24 часа. Реакционната смес бе изпарена под намалено налягане, остатъкът разпределен между етилацетат (50 ml) и вода (50 ml), и слоевете сепарирани. Органичната фаза бе промита със солев разтвор (25 ml), изсушена (MgSO4) и изпарена под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента етилацетат : метанол (100 : 0 до 95 : 5) до получаване на съединението от заглавието като кремава пяна, 975 mg, 73 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 0.72 (m, ЗН), 0.94 - 2.20 (m, 17Н), 2.84 (m, 1H), 3.00 (m, 1H), 4.18 (m, 1H), 5.00 (m, 2H), 6.95 (m, 2H), 7.02 (m, ЗН), 7.38 (m, 6H), 8.06 (m, 1 Η), 8.60 (m, 1H), 8.87 (s, 1H).
Получаване 58 цис-Бензилов 2-({1-[({4-[(диметиламино)карбонил1циклохексил}амино)карбонил1циклопентил}метил)пентаноат
135
Смес от цис-4-{[(1-{2-[(бензилокси)карбонил]пентил}циклопентил)карбонил]амино}циклохексанкарбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 310) (200 mg, 0.45 mmol), 1-(3-диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (112 mg, 0.58 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (70 mg, 0.46 mmol) и диметиламин (0.56 ml, 2 М в тетрахидрофуран, 1.12 mmol) в дихлорометан (5 ml), бе разбърквана при стайна температура 16 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът разпределен между разтвор на натриев бикарбонат и етилацетат, и слоевете сепарирани. Органичната фаза бе изсушена (MgSO4) и изпарена под намалено налягане до получаване на смола. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат като елуент до получаване на съединението от заглавието, 150 mg; 1Н NMR (CDCI3, 300 MHz) δ: 0.82 (t, ЗН), 1.22 (m, ЗН), 1.32 - 1.88 (m, Η),
2.00 (m, 4H), 2.40 (m, 1 Η), 2.60 (m, 1 Η), 2.97 (s, ЗН), 3.04 (s, ЗН), 4.04 (m, 1 Η),
5.12 (s, 2H), 5.80 (bd, 1 Η), 7.37 (m, 5H).
Получаване 59 uuc-Бензилов 2-({1-[({4-Г(метиламино)карбонил1циклохексил}амино)карбонил]циклопентил}метил)пентаноат
о о
136
Съединението от заглавието бе получено с 49 % добив от цис-4-{[(1{2-[(бензилокси)карбонил]пентил}циклопентил)карбонил]амино}циклохексанкарбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 310) и метиламин (2 М в тетрахидрофуран), като се следва процедурата, описана в получаване 58; 1Н NMR (CDCIs, 300 ΜΗζ) δ: 0.82 (t, ЗН), 1.17 - 2.12 (m, 22Н), 2.21 (m, 1H),
2.41 (m, 1 Η), 2.80 (d, ЗН), 4.00 (m, 1H), 5.12 (s, 2H), 5.61 (m, 1H), 5.79 (d, 1H), 7.38 (m, 5H).
Получаване 60 mpem.-Бутилов 2-((1 -{((2-{((бензилокси)карбонил]амино)етил)амино1 карбонил}циклопентил)метил!пентаноат сн,
Съединението от заглавието бе получено като жълто масло с 55 % добив, от киселината от получаване 1 и М-бензилоксикарбонил-1,2-диаминоетан (ex. Aldrich Chemical Co.) като се следва процедура подобна на тази, описана в получаване 33; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ : 0.84 (t, ЗН), 1.20 -1.38 (m, ЗН), 1.40 - 1.74 (m, 17Н), 1.90 (m, 2H), 2.04 (m, 1H), 2.20 (m, 1H), 3.32 (m, ЗН), 3.44 (m, 1H), 5.10 (s, 2H), 5.61 (m, 1H), 6.20 (m, 1 Η), 7.36 (m, 5H).
Получаване 61 mpem.-Бутилов 24(1-Л(2-аминоетил)амино]карбонил)циклопентил)· метил]пентаноат
Смес от карбамата от получаване 60 (1.43 д, 3.10 mmol) и 10 %
137
паладий върху въглен (200 mg) в етанол (8 ml), бе хидрирана при стайна температура и 1 atm за 18 часа. Реакционната смес бе филтрувана през Arbocel® и филтратът изпарен под намалено налягане до получаване на съединението от заглавието, 920 mg, 92 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.84 (t, ЗН), 1.20 - 1.38 (m, ЗН), 1.40 - 1.54 (m, 12Н), 1.61 (m, 5H), 1.92 - 2.12 (m, ЗН), 2.20 (m, 1H), 2.98 (m, 2H), 3.38 (m, 1H), 3.42 (m, 1H), 3.97 (m, 2H), 6.65 (m, 1H); LRMS: m/z 326.8 (M+).
Получаване 62
Бензилов 2-[( 1 -{[(1 -бензил-6-оксо-1,6-дихидро-3-пиридинил)амино!карбонил)циклопентил)-метил1-4-метоксибутаноат
Към охладен в лед разтвор от 1-{2-[(бензилокси)карбонил]-4-метоксибутил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 15) (1.0 д, 3.0 mmol) и Ν,Ν-диметилформамид (2 капки) в дихлорометан (20 ml) бе прибавен оксалилхлорид (0.26 ml, 3.0 mmol) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 2 часа. Разтворът бе концентриран под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с дихлорометан (3x10 ml). Продуктът бе разтворен в дихлорометан (20 ml), после охладен в ледена баня. Добавени бяха аминът от получаване 28 (600 mg, 3 mmol) и N-метилморфолин (0.6 ml, 5.45 mmol) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Реакционната смес бе концентрирана под намалено налягане и разпределена между вода и етер. Органичният слой бе промит със солна киселина (2 N), разтвор на натриев бикарбонат, после вода, изсушен (MgSO4) и изпарен под намалено налягане. Остатъчното зелено вещество бе пречистено с колонна хроматография със средно налягане върху силикагел, с използване на
138 етилацетат : хексан (90 : 10) като елуент до получаване на съединението от заглавието, 880 mg, 57 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 1.37 - 2.28 (m, 12H), 2.46 - 2.64 (m, 1H), 3.20 (s, 3H), 3.31 (m, 2H), 4.97 (dd, 2H), 5.08 (dd, 2H), 6.57 (d, 1H), 7.12 (m, 1H), 7.18 - 7.48 (m, 10H), 8.08 (d, 1H).
Получаване 63
4-(Г(1-{3-П70е/п.-Бутокси-2-Г(2-метоксиетокси)метил]-3-оксопропил}циклопентил)карбонил!амино}циклохексан-карбоксилна киселина
Смес от бензилов 4-{[(1-{3-п7рел?.-бутокси-2-[(2-метоксиетокси)метил]-
3-оксопропил}циклопентил)карбонил]амино}циклохексанкарбоксилат (ЕР 274234, Пример 96) и 10 % паладий върху въглен (250 mg) във вода (10 ml) и етанол (50 ml), бе хидрирана при 50 psi и стайна температура за 18 часа. Реакционната смес бе филтрувана през Solkafloc®, филтратът концентриран под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с толуен (Зх) и после с дихлорометан (Зх), до получаване на съединението от заглавието, 2.0 д, 96 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ : 1.48 (s, 9H), 1.53 - 1.84 (m, 14H), 1.94 - 2.10 (m, 5H), 2.60 (m, 2H), 3.40 (s, 3H), 3.41 - 3.63 (m, 5H), 3.96 (m, 1H), 5.90 (bd, 1H).
Получаване 64 mpem.-Бутилов 3-{1-[(циклопентиламино)карбонил1циклопентил)-2-((2метоксиетокси)метил]-пропаноат
139
1-(3-Диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (197 mg, 1.07 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (139 mg, 1.07 mmol), Nметилморфолин (0.18 ml, 1.64 mmol) и циклопентиламин (101 μΙ, 1.07 mmol) бяха добавени към разтвор от 1-{3-трет.-бутокси-2-[(2-метоксиетокси)метил]-3-оксопропил}-циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 42) (400 mg, 1.07 mmol) в дихлорометан (5 ml) и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 22 часа. Реакцията бе прекъсната чрез добавяне на вода, сместа екстрахирана с дихлорометан (Зх) и обединените органични екстракти изсушени (MgSO4) и изпарени под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат : пентан (30 : 70) като елуент до получаване на съединението от заглавието като бистро масло, 320 mg, 78 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.22 - 2.02 (m, 27H), 2.58 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.40 (m, 1H), 3.46 (m, 2H), 3.57 (m, 3H), 4.10 - 4.20 (m, 1H), 5.80 (bs, 1H).
Получаване 65 mpem.-Бутилов 3-(2-метоксиетокси)-2-{[1-({[3-(2-оксо-1-пиролидинил)пропил1амино}карбонил)циклопентил1метил)пропаноат
140
Съединението от заглавието бе получено като бистро масло с 97 % добив от 1 -{3-трет.-бутокси-2-[(2-метоксиетокси)метил]-3-оксопропил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 42) и 1-(3аминопропил)-2-пиролидинон пиролидинон (Ex. Aldrich Chemical Co.), като се следва процедура, подобна на тази, описана в получаване 64, освен че бе използван дихлорометан : метанол (95 : 5) като елуент в колоната, 'Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.41 (s, 9H), 1.50 (m, 2H), 1.60 -1.70 (m, 7H), 1.78 (m, 1H), 1.90 (m, 1H), 2.20 (m, 4H). 2.40 (m, 2H), 2.58 (m, 1H), 3.14 (m, 1H),
3.20 (m, 1H), 3.38 (m, 6H), 3.42 - 3.60 (m, 6H), 7.00 (m, 1 Η).
Получаване 66 цас-mpem.-Бутилов 3-(2-метоксиетокси)-2-[(1-(К4-Щфенилсулфонил)амйно1карбонил)циклохексил)амино!карбонил)циклопентил)метил1пропаноат
Ν,Ν'-Дициклохексилкарбодиимид (199 mg, 0.97 mmol), 4диметиламинопиридин (118 mg, 0.97 mmol) и бензенсулфонамид (152 mg, 0.97 mmol) бяха добавени към охладен в лед разтвор от киселината от
141 получаване 63 (400 mg, 0.878 mmot) в дихлорометан (12 ml) и Ν,Νдиметилформамид (0.5 ml), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 20 часа. Сместа бе концентрирана под намалено налягане и остатъкът суспендиран в студен етилацетат. Полученият неразтворим материал бе отфилтруван, филтратът промит със солна киселина (1 N) и вода, после изсушен (MgSO4) и изпарен под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на градиент на елуента дихлорометан : метанол (95 : 5 до 90 : 10), до получаване на съединението от заглавието като бяла пяна, 480 mg, 92 %; 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) δ : 1.44 (s, 9H), 1.63 (m, 13H), 1.80 (m, 2H), 1.88 (m, 1H), 1.98 (m, 2H), 2.36 (m, 1H), 2.57 (m, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.40 (m, 1H), 3.51 (t, 2H), 3.58 (m, 3H), 3.95 (m, 1H), 5.92 (d, 1H), 7.56 (m, 2H), 7.62 (m, 1H), 8.05 (d, 2H), 8.75 (bs, 1H); LRMS : m/z 618 (MNa*).
Получаване 67
Бензинов 2-{[1-ЩЗ-(2-оксо-1-пиролидинил)пропил]амино}карбонилциклопентил]метил}-4-фенилбутаноат
1-(3-Диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (1.06 д,
5.53 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (0.60 д, 4.44 mmol) и 4-метилморфолин (0.56 д, 5.54 mmol) бяха прибавени последователно към охладен разтвор от 1 -{2-[(бензилокси)карбонил]-4-фенилбутил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234 Пример 17) (1.5 д, 3.94 mmol) в сух дихлорометан (15 ml) при стайна температура, последван от М-(3-аминопропил)-2пиролидинон (Ex. Aldrich Chemical Co.) (0.56 g, 3.94 mmol), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Сместа бе промита с
142 вода, 2 N солна киселина, наситен воден разтвор на натриев бикарбонат и после изсушена (MgSO4), и изпарена под намалено налягане. Остатъчното жълто масло бе пречистено чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат : пентан (50 : 50) като елуент до получаване на съединението от заглавието като прозрачна смола, 800 mg, 40 %; 1Н NMR (CDCI3, 300 ΜΗζ) δ: 1.37 - 2.20 (m, 16Н), 2.34 - 2.58 (m, 5H), 2.92 - 3.46 (m, 6H), 5.07 (d, 1H), 5.18 (d, 1H), 6.98 - 7.47 (m, 10H).
Получаване 68
Бензинов 2-{[1-(ЯЗ-(метиламино)-3-оксопропил1амино}карбонил)циклопентил1метил}-4-Фенилбутаноат
1-(3-Диметиламинопропил)-3-етилкарбодиимид хидрохлорид (122 mg, 0.64 mmol), 1-хидроксибензотриазол хидрат (86 mg, 0.64 mmol) и 4-метилморфолин (173 μΙ, 1.59 mmol) бяха прибавени последователно към охладен разтвор от 1 -{2-[(бензилокси)карбонил]-4-фенилбутил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 17) (202 mg, 0.53 mmol) в Ν,Ν-диметилформамид (5 ml) при стайна температура, последвана от амин хидрохлорида от получаване 23 (146 mg, 1.06 mmol), и реакционната смес бе разбърквана 18 часа при 90 °C. Охладеният разтвор бе концентриран под намалено налягане и остатъкът разпределен между вода (20 ml) и етилацетат (100 ml). Слоевете бяха сепарирани, органичната фаза промита с вода (3 х 30 ml), солев разтвор (25 ml), изсушена (MgSO4) и изпарена под намалено налягане до получаване на бистро масло. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на дихлорометан : метанол (98 : 2) като елуент до получаване на съединението
143 от заглавието като безцветно масло, 162 mg, 67 %; 1Н NMR (CDCI3, 400
ΜΗζ) δ : 1.38 - 1.53 (m, 2Н), 1.53 - 1.96 (m, 8Н), 2.02 (m, 2Н), 2.27 (t, 2Н), 2.46 (m, ЗН), 2.76 (d, ЗН), 3.44 (m, 2Н), 5.13 (s, 2Н), 5.79 (bs, 1 Η), 6.38 (m, 1 Η), 7.06 (d, 2Η), 7.18 (m, 1 Η), 7.22 (m, 2Η), 7.38 (m, 5H); LRMS : m/z 465.5 (MH+).
Получаване 69
Бензилов 2-((1-({(1-(хидроксиметил)циклопентил1амино)карбонил )циклопентил]метил}-4-фенилбутаноат
Съединението от заглавието бе получено като кристално вещество (48 %) от 1-{2-[(бензилокси)карбонил]-4-фенилбутил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 17) и 1-амино-1-циклопентанметанол, като се следва процедура подобна на тази, описана в получаване 68, освен че реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа и суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат : пентан като елуент; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.38 (m, 2Н), 1.50 - 1.95 (m, 16Н), 2.01 (m, 2H), 2.45 (m, ЗН), 3.49 (dd, 1H), 3.60 (dd, 1H), 4.58 (m, 1H), 5.10 (s, 2H), 5.67 (s, 1H), 7.01 (d, 2H), 7.14 (m, 1H), 7.20 (m, 2H), 7.36 (m, 5H); LRMS : m/z 478.3 (MH+).
Получаване 70
Бензилов 2-(( 1 -{[(5-метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил)циклопентил)метил!-4-фенилбутаноат
144
Съединението от заглавието бе получено като бистро масло със 74 % добив от 1 -{2-[(бензилокси)карбонил]-4-фенилбутил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 17) и 2-амино-5-метил-1,3,4-тиадиазол w (ex Lancaster), като се следва процедура подобна на тази, описана в получаване 68; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.58 -1.76 (m, 7Н), 1.83 -1.98 (m, ЗН), 2.03 (m, 1Н), 2.20 (m, 1Н), 2.35 (m, 1Н), 2.44 (m, ЗН), 2.65 (s, ЗН), 5.02 (dd, 2Н), 7.00 (d, 2Н), 7.15 (m, 1Н), 7.19 (m, 2Н), 7.35 (m, 5Н); LRMS : m/z
478.7 (ΜΗ*).
Получаване 71
Бензилов 4-фенил-2-({-Г(3-пиридиниламино)карбонил1циклопентил}метил)бутаноат
Към разтвор от 1-{2-[(бензилокси)карбонил]-4-фенилбутил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 17) (5.0 д, 13.14 mmol) и Ν,Ν-диметилформамид (2 капки) в дихлорометан (25 ml) бе прибавен оксалилхлорид (2.29 ml, 26.3 mmol) и разтворът бе разбъркван 2.5 часа. Сместа бе изпарена под намалено налягане, а остатъкът дестилиран азеотропно с дихлорометан до получаване на жълто масло. След това то бе разтворено в дихлорометан (50 ml) и разтвор от този киселинен хлорид (10
145 ml, 2.45 mmol) бе прибавен към охладен в лед разтвор от триетиламин (248 mg, 2.45 mmol) и 3-аминопиридин (253 mg, 2.70 mmol) в сух дихлорометан (10 ml), и реакционната смес бе разбърквана при стайна температура 18 часа. Разтворът бе промит с вода (Зх), изсушен (MgSO4) и изпарен под намалено налягане. Суровият продукт бе пречистен чрез колонна хроматография върху силикагел с използване на етилацетат.хексан (40 : 60) като елуент, и повторена с използване на градиент на елуента етер : хексан (90 : 10 до 100 : 0). Продуктът бе кристализиран из етилацетат:хексан до получаване на съединението от заглавието, 740 mg, 66 %; 1Н NMR (CDCI3, С 300 ΜΗζ) δ: 1.38 - 2.07 (m, 10Н), 2.10 - 2.37 (m, 2H), 2.42 - 2.63 (m, ЗН), 5.02 (s, 2H), 6.94 - 7.44 (m, 10H), 7.50 (s, 1H), 8.03 (d, 1H), 8.36 (d, 1H), 8.52 (s, 1H). Получаване 72 /77ранс-л?рет.-Бутил-3-П-({|2-(4-хлорофенил)циклопропил1амино)карбонил)-циклопентил!-2-(метоксиметил)пропаноат
Продуктът от получаване 94 (286 mg, 1 mmol), продуктът от получаване 76 (203 mg, 1 mmol), 1-(3-диметиламинопропил)-3етилкарбодиимид (211 mg, 1.1 mmol), триетиламин (1 ml) и HOBt (148 mg,
1.1 mmol) в DCM (5 ml) бяха разбърквани при стайна температура 16 h. Реакционната смес бе промита с вода (20 ml), изсушена над MgSO4 и пречистена чрез колонна хроматография с използване на 1 : 8, после 1 : 5 EtOAc : пентан като елуент до получаване на съединението от заглавието като безцветен филм (122 mg, 40 %); Rf 1 : 5 (EtOAc : пентан) 0.2; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.05 - 1.2 (m, 2Η), 1.4 (s, 9Н), 1.55 - 1.75 (m, 4Н), 1.9 - 2.0 (m, 4Н), 2.4 - 2.5 (m, 1 Η), 2.75 - 2.85 (m, 1 Η), 3.3 (s, ЗН), 3.4 - 3.5 (m, 1 Η), 6.3 (m, 1Η), 7.05 (d, 2Н), 7.2 (d, 2Н); HRMS : m/z М+Н. Намерено 436.2242. C24H35NP4CI изисква 436.2249.
146
Получаване 73
Етил-2-(4-хлорофенил)циклопропанкарбоксилат
Смес от 4-хлоростирен (10.1 ml, 96 mmol) и родиев ацетат димер (1 д,
4.5 mmol) в толуен (50 ml) бе нагрята до 85 °C преди да се прибави етилов диазоацетат (11.3 ml, 94 mmol) в продължение на 30 min и после всичко бе нагрявано при 80 °C още един час, преди да се концентрира in vacuo. След това остатъкът бе пречистен чрез колонна хроматография с 1 : 2 DCM : пентан като елуент до получаване на продукта от заглавието като безцветно масло (7.8 д, 37 %); Rf 1 : 2 (DCM : пентан) 0.35; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ 1.15-1.3 (m, 4Н), 1.5-1.7 (m, 1Н), 1.8-1.9 (m, 1Н), 2.4-3.55 (m, 1Н), 4.2 (q, 2Н), 6.95 (d, 2H), 7.20 - 7.28 (m, 2H); и LRMS : m/z, M+NH4 + 242.
Получаване 74 п?ранс-2-(4-Хлорофенил)циклопропан-карбоксилна киселина
Продуктът от получаване 73 (7.8 д, 37 mmol) бе разтворен в EtOH (75 ml) при стайна температура под азот и на порции в продължение на 15 min бе прибавен натриев метоксид (8.1 д, 150 mmol). След завършване на прибавянето сместа бе подложена на кипене под обратен хладник за 18 h. Реакционната смес бе концентрирана in vacuo и полученият остатък разреден с DCM и вода (150 ml, 2 : 1 смес). Органичният слой бе отстранен и водният слой повторно екстрахиран с DCM (2 х 50 ml). Обединените органични екстракти бяха изсушени над MgSO4 и изпарени до получаване на транс естера (4.96 д, 62 %). Подкисляването на водния слой с
147 концентрирана HCI до pH 1 доведе до бяла утайка, която бе филтрувана и изсушена под вакуум до получаването на хидролизния продукт (съответната киселина) като бял прах (1.95 д, 27 %). Разтварянето на естера в МеОН (50 ml), вода (50 ml) и LiOH (1.34 g, 32 mmol) даде бистър разтвор, който бе нагряван при приблизително 70 °C цяла нощ. Реакционната смес бе охладена, концентрирана in vacuo и подкислена с концентрирана HCI до pH 1. Получената бяла утайка бе екстрахирана с EtOAc (3 х 50 ml) и обединените органични екстракти бяха изсушени над MgSO4 и изпарени до сухо, до получаване на киселината (4 д, 96 %). Тази киселина бе обединена с хидролизирания продукт от предишния етап, до получаване на общо 5.95 g; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.3-1.4 (m, 1Н), 1.6-1.7 (m, 1Η), 1.8-1.9 (m, 1 Η), 2.5 - 2.6 (m, 1 Η), 7.00 (d, 2Η), 7.26 (d, 2Н); LRMS : m/z, M-H 195.
Получаване 75 транс-трет.-Бутил-2-(4-хлорофенил)циклопропилкарбамат
Cl
Продуктът от получаване 74 (1.5 g, 7.65 mmol), DPPA (1.8 ml, 8.4 mmol) и триетиламин (1.25 ml, 12 mmol) в mpem.-бутанол (20 ml) бяха нагряти при прибл. 90 °C под азот за 48 h. Когато изстина, сместа бе разредена с EtOAc (20 ml) и наситен разтвор на Na2CO3 (20 ml), и органичният слой после бе отстранен. Водният слой повторно бе екстрахиран с EtOAc (20 ml) и обединените органични слоеве бяха изсушени над MgSO4, филтрувани и изпарени. Полученият остатък бе пречистен чрез колонна хроматография като се използва 1 : 10, после 1 : 2 EtOAc : пентан като елуент, до получаване на съединението от заглавието като бяло твърдо вещество (1.7 д, 83 %); Rf 1 : 2 (EtOAc : пентан) 0.9; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.2 -1.3 (m, 1Н), 1.4 (s, 10Н), 1.9-2.0 (m, 1H), 2.6 (br s, 1H), 4.8 (br s, 1H), 7.0 (d, 2H), 7.2 (d, 2H); HRMS : m/z M+Na. Намерено 290.0923. Ci4H18NO2CINa изисква 290.0918.
148
Получаване 76
2-(4-Хлорофенил)циклопропиламин
Продуктът от получаване 75 бе поет в EtOAc, охладен до 0 °C и хлороводород газ бе барботиран през разтвора за 30 min. Разтворът след това бе концентриран in vacuo до получаване на продукта от заглавието (1.29 д, 6.3 mmol); Rf 1 : 3 (EtOAc : пентан) 0; 1Н NMR (400 MHz, CD3OD) δ :
1.3-1.4 (m, 1H), 1.4 - 1.5 (m, 1H), 2.3 - 2.4 (m, 1H), 2.8 - 2.9 (m, 1H), 7.15 (d, 2H), 7.3 (d, 2H).
Получаване 77
Етил-2-(4-метоксифенил)-циклопропан-карбоксилат
- Смес от 4-метоксистирен (25.5 ml, 192 mmol), родиев ацетат димер (2 д, 4.5 mmol) и толуен (100 ml) бе разбърквана при стайна температура под азот за 20 min и после бе нагрята до 85 °C. В продължение на 50 min на капки при скорост от една капка на всеки 2 до 3 секунди, бе прибавен етилов диазоацетат (19.8 ml, 188 mmol), за поддържане на вътрешната реакционна температура при около 95 °C. След като прибавянето завърши сместа бе нагрята за 1 h при 85 °C и после бе охладена до стайна температура. Сместа бе филтрувана през Arbocel® и изпарена до масло, което бе пречистено чрез колонна хроматография с използване на DCM : пентан (1 : 2) като елуент, до получаване на съединението от заглавието (13 д, 31 %) което бе 3 : 1 смес от транс : цис изомерите; Rf 0.22 (ОСМ:пентан) 1 : 2; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.20 - 1.38 (m, 5Н), 1.83 (ddd, 1 Η), 2.50 (ddd, 1Η),
3.80 (s, ЗН), 4.16 (q, 2Н), 6.82 (d, 2Н), 7.03 (d, 2Н).
149
Получаване 78 транс-2-(4-Метоксифенил)-циклопропан-карбоксилна киселина
Към разтвор от продукта от получаване 77 (13 д, 59 mmol) в ЕЮН (135 ml), с разбъркване при стайна температура, в азотна атмосфера, бе прибавен натриев метоксид (14.8 д, 273.8 mmol). След завършване на прибавянето сместа внимателно бе подложена на кипене под обратен хладник за 1 h, след което TLC анализ показа, че няма останал цис изомер. Реакционната смес бе охладена до стайна температура и на една порция бе прибавена вода (100 ml). След това всичко бе разбърквано при стайна температура 63 h и после изпарено до отстраняване на МеОН преди подкисляване с концентрирана HCI до pH 1. Суспензията бе екстрахирана с EtOAc (2 х 100 ml) и екстрактите изсушени (MgSO4), и изпарени до получаване на жълто твърдо вещество, което бе пречистено чрез колонна хроматография с използване на 1:1 EtOAc : пентан до получаване на съединението от заглавието (8.9 д, 78 %); Rf 1:1 (EtOAc:пентан) 0.4; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.30 - 1.41 (m, 1 Η), 1.58 - 1.69 (m, 1 Η), 1.79 - 1.90 (m, 1 Η),
2.53 - 2.62 (m, 1Η), 6.83 (d, 2Н), 7.04 (d, 2H).
Получаване 79
Транс-mpem.-Бутил-2-(4-метоксифенил)-циклопропилкарбамат
Към разбърквана смес от продукта от получаване 78 (8.9 д, 46.3 mmol), триетиламин (10.1 ml, 72.7 mmol) и трет.-ВиОН (75 ml) бе прибавен DPPA (11 ml, 50.9 mmol). Сместа бе нагрявана 43 h при 90 °C. Когато бе охладена, трет.-ВиОН бе отстранен чрез изпаряване и полученият маслен остатък обработен с наситен К2СО3 (120 ml) и после екстрахиран с EtOAc (2
150 х 100 ml). Обединените органични екстракти след това бяха изпарени под намалено налягане до получаване на кафяво твърдо вещество, което бе пречистено чрез колонна хроматография с използване на DCM : МеОН (98 : 2) като елуент, до получаване на съединението от заглавието (5.8 д, 48 %); 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.07 - 1.14 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.93 - 2.06 (m, 1 Η), 2.62 - 2.71 (m, 1H), 3.80 (s, ЗН), 4.72 - 4.88 (m, 1H), 6.80 (d, 2H), 7.08 (d, 2H).
Получаване 80 траис-2-(4-Метоксифенил)-циклопропиламин
Към разбърквана смес от продукта от получаване 79 (5.8 д, 22.0 mmol) и DCM (15 ml) бе прибавена TFA (20 ml) при стайна температура под азот. Реакционната смес бе разбърквана 16 h, след което време разтворителят бе отстранен под намалено налягане и полученото масло бе обработено с наситен воден К2СО3, докато бе постигнато pH 10 (необходими бяха около 150 ml). Този непрозрачен разтвор бе екстрахиран с EtOAc (2 х 150 ml) и после екстрактите бяха изсушени над MgSO4 и изпарени до получаване на бежово твърдо вещество. Това вещество бе пречистено чрез колонна хроматография като се използва 99 : 1, 95 : 5 DCM : МеОН като елуент до получаване на продукта от заглавието като бяло твърдо вещество (3.2 д, 89 %); Rf DCM : МеОН (19 : 1) 0.18; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 0.87 - 1.04 (m, 2H), 1.79 - 1.90 (m, 1H), 2.43 - 2.54 (m, 1H), 3.80 (s, ЗН), 6.80 (d, 2H), 6.98 (d, 2H).
Получаване 81 трет.-Бутил-4-метокси-2-([1-({[2-(4-метоксифенил)циклопропил1амино}карбонил)циклопентил]метил)бутаноат
151
Продуктът от получаване 99 (210 mg, 0.66 mmol), триетиламин (1 ml), HOBt (140 mg, 0.73 mmol) и продуктът от получаване 80 (107 mg, 0.66 mmol) бяха обединени последователно в DCM при стайна температура под азот. След това към сместа бе прибавен WSCDI (98 mg, 0.73 mmol) и всичко бе разбърквано цяла нощ за повече от 16 h. Реакционната смес бе разредена с вода, органичният слой бе сепариран и после промит със солев разтвор, изсушен над MgSO4, филтруван и изпарен до жълто масло. То бе пречистено чрез колонна хроматография с използване на 1 : 3 EtOAc : пентан като елуент, до получаване на съединението от заглавието (113 mg, 38 %); Rf 1 : 10 (EtOAc : пентан) 0.2; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.0 -1.10 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.35 - 1.45 (m, 2H), 1.50 - 1.80 (m, 7H), 1.85 - 2.10 (m, 4H), 2.25 - 2.35 (m, 1H), 2.70 - 2.80 (m, 1H), 3.2 (s, ЗН), 3.25 - 3.35 (m, 2H), 3.7 (s, ЗН), 6.05 (br.s, 1H), 6.70 (d, 2H), 7.05 (d, 2H); LRMS: m/z 446 (M+H).
Получаване 81a трет.-Бутил-4-метокси-2-([1-(([2-фенилциклопропил]амино}карбонил)циклопентил!метил}бутаноат
Продуктът от заглавието бе получен по аналогичен начин на Получаване 81, като се замества продуктът от получаване 80 с 1-8-амино-2R-фенилциклопропан (J. Med. Chem., 1986, 29, 2044); 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.1 (m, 1Η), 1.2 (m, 1Н), 1.4 (s, 9Н), 1.6 (m, 8Н), 1.7, (m, 1 Η), 1.9 (m, 2Η), 2.1 (m, 2Н), 2.4 (q, 1 Η), 2.8 (q, 1 Η), 3.2 (s, ЗН), 3.3 (q, 2H), 6.1 (bs, 1 Η), 7.1
152 (d, ЗН), 7.2 (d, 2H).; LRMS: m/z 416 (M+H); HRMS m/z Намерено 416.2794. C25H32NO4 изисква 416.2796.
Получаване 82 трет.-Бутил-3-метокси-2-[(1-(((2-фенилциклопропил)амино1карбонил}циклопентил)метил!пропаноат
МеО
Продуктът от получаване 94 (200 mg, 0.66 mmol), триетиламин (1 ml), HOBt (98 mg, 0.73 mmol) и 1-5-амино-2-/?-фенилциклопропан (J. Med. Chem., 1986, 29, 2044) (123 mg, 0.73 mmol), бяха обединени последователно в DCM (6 ml) при стайна температура под азот. Към сместа след това бе прибавен WSCDI (98 mg, 0.73 mmol) и всичко бе разбърквано цяла нощ за повече от 16 h. Реакционната смес бе разредена с вода, органичният слой бе сепариран и после промит със солев разтвор, изсушен над MgSO4, филтруван и изпарен до жълто масло. То бе пречистено чрез колонна хроматография с 1 : 3 EtOAc : пентан като елуент до получаване на съединението от заглавието (164 mg, 62 %); Rf 1:10 (EtOAc:пентан) 0.2; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.0-1.1 (m, 2Η), 1.4 (s, 9Н), 1.5-1.8 (m, 6Н), 1.8 2.05 (m, 4Н), 2.3 - 2.4 (m, 1Н), 2.7 - 2.8 (m, 1 Η), 3.2 (s, ЗН), 3.25 - 3.35 (m, 1 Η),
3.7 (s, ЗН), 6.05 (s, 1 Η), 6.7 (d, 2Η), 7.05 (d, 2Н); LRMS : m/z M+H, 446.
Получаване 83
З-Фенилциклопентанон
Фенилмагнезиев бромид (0.27 mol) бе поет в сух диетилов етер (200 ml) и охладен до 0 °C в азотна атмосфера. На една порция бе прибавен меден(1) йодид (25.5 д, 0.13 mol) и суспензията бе разбърквана 20 min при
153
Ο °C. След това бе прибавен на капки в продължение на 10 - 15 min циклопентен-2-он и полученият разтвор бе разбъркван 10 min при 0 °C, и после оставен да се затопли до стайна температура в продължение на 1 h. Реакционната смес бе прибавена към 100 ml смес от наситен разтвор на амониев хлорид и концентриран амоняк, pH на която първоначално бе измерена на 9. Всичко бе разбърквано при стайна температура 30 min и после филтрувано, а слоевете на филтрата бяха сепарирани. Водният слой бе екстрахиран с етер (2 х 70 ml) и екстрактите обединени с първоначалния органичен слой. Събраните етерни слоеве след това бяха промити със солев разтвор, изсушени над MgSO4, филтрувани и изпарени до бледожълто масло. Това масло после бе хроматографирано с използване на 1 : 3 етер/пентан до получаване на продукта от заглавието (2.9 д, 14 %); Rf ЕЮАс:пентан (1:2) 0.65; 1Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 1.91 - 2.10 (m, 1H),
2.18 - 2.59 (m, 4H), 2.67 (dd, 1 Η), 3.38 - 3.52 (m, 1H), 7.19 - 7.47 (m, 5H).
Получаване 84
7-Фенил-1,3-диазаспиро[4.4]нонан-2,4-дион
Ph
Продуктът от получаване 83 (5.8 д), калиев цианид (2.75 д) и амониев карбонат (9.1 д) бяха нагрети в 80 ml от 50 % воден EtOH за 7 h, и после при стайна температура за 48 h. Сместа бе филтрувана и твърдото вещество промито грижливо с вода (3 х 50 ml). Филтратът бе концентриран, pH регулирано до 2 с използване на концентрирана HCI и получената суспензия отфилтрувана и промита с вода (3 х 50 ml). Обединените твърди вещества бяха прекристализирани от EtOH и вода (300 ml: 100 ml) до получаване на продукта от заглавието като 1:1 смес на диастереоизомерни двойки (6.32 д); Rf 0.6 в EtOAc; 1Н NMR (300 MHz, CDCI3) δ : 1.60 - 2.58 (m, 6H), 3.08 - 3.37 (m,
154
Η), 6.83 - 7.44 (m, 5Η), 8.33 (d, 1H), 10.60 (s, 1H); Анал.намерено: С, 68.09;
Н, 6.21; N, 12.25%. C13H14N2O2 изисква С, 67.81; Н, 6.13; N, 12.17%.
Получаване 85
-Амино-З-фенил-циклопентан-карбоксилна киселина он
Ph
Продуктът от заглавието от получаване 84 (6.2 д), бариев хидроксид октахидрат (17.2 д) и вода (100 ml), бяха нагрети заедно в автоклав при 160 °C за 7 h, и после оставени да престоят в продължение на една нощ при стайна температура. Реакционната смес бе подкислена до pH 1 с използване на концентрирана H2SO4. Получената суспензия след това бе филтрувана и твърдото вещество бе промито с вода (100 ml). Филтратът после бе направен основен до pH приблизително 6 с концентриран амонячен разтвор, суспензията охладена в ледена баня и филтрувана. Твърдото вещество бе промито с вода и изсушено под вакуум до получаване на продукта от заглавието (2.9 д); т.т. 265 °C (с разлагане); Rf 0.5 в метил изобутилов кетон : оцетна киселина : вода (2:1 : 1); 1Н NMR (300
MHz, CDCI3) δ: 2.06 - 3.14 (m, 6Н), 3.42 - 3.73 (m, 1Н), 7,12 - 7.44 (m, 5Н); Анал.намерено С, 69.54; Н, 7.26; N, 6.73 %. Ci2H15NO2 изисква С, 70.22; Н, 7.37; N, 6.82 %.
Получаване 86
Етил-1-амино-З-фенил-циклопентанкарбоксилат
OEt
Ph
Продуктът от заглавието от получаване 85 (500 mg, 2.4 mmol) бе поет
155 в EtOH, наситен с хлороводород (70 ml) при 0 °C и после разбъркван при стайна температура 16 h. След това през разтвора бе барботиран азот газ за 10 min и разтворителят изпарен до получаване на бежово твърдо вещество. То бе обработено с наситен воден разтвор на NaHCO3 (10 ml) и екстрахирано с EtOAc (2 х 10 ml). Обединените органични екстракти бяха изсушени и изпарени до получаване на продукта от заглавието (360 mg, 63 %); Rf DCM : MeOH (97 : 3) 0.23; 1H NMR (400 MHz, CDCI3) δ : 1.31 (t, 3H), 1.50 - 2.37 (m, 4H), 2.38 - 2.44 (m, 1H), 2.63 (dd, 1H), 3.22 - 3.36 and 3.43 - 3.57 (m, 1H), 4.20 (q, 2H), 7.20 - 7.35 (m, 5H).
Получаване 87 (1 -Амино-3-фенилциклопентил)метанол
он
Ph
Към разбъркван разтвор от продукта от получаване 86 (390 mg, 1.67mmol) в 8 ml от 50 % разтвор от воден EtOH бе прибавен на порции натриев борохидрид (190 mg) и после нагряван 3 h при 50 °C. Реакционната смес след това бе изпарена до получаване на суспензия от масло във вода. Това масло бе екстрахирано с EtOAc (20 ml) и изпарено под намалено налягане до получаване на съединението от заглавието (295 mg); Rf (1 :2 етер/пентан) 0.65; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 1.30 - 2.36 (m, 6H), 3.02 - 3.17 (m, 1 Η), 3.33 - 3.50 (m, 2H), 7.14 - 7.37 (m, 5H).
Получаване 88 трет.-Бутил-2-П 1 -({[ 1 -(хид роксиметил)-3-фенилциклопентил1амино}карбонил)-циклопентил1метил}-4-метоксибутаноат
156
Ph
Продуктът от заглавието бе получен чрез метод подобен на този, описан в получаване 33, от продукта от получаване 99 и продукта от заглавието от получаване 87; Rf ЕЮАс.пентан (1:4) 0.25; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 0.80 - 0.88 (m, ЗН), 1.16 - 2.60 (m, 21 Η), 1.42 (s, 9Η), 3.04 3.32 (m, 1 Η), 3.57 - 3.84 (m, 2Η), 4.56 - 4.77 (m, 1 Η), 5.94 (br.t, 1 Η), 7.16 - 7.28 (m, 5Η).
Получаване 89 трет.-Бутил-4-метокси-2-[( 1 -И(2-пентилциклопропил)амино]карбонил}-циклопентил)-метил1бутаноат
Продуктът от заглавието от получаване 99 (105 mg, 0.33 mmol), триетиламин (0.5 ml), HOBt (49 mg, 0.36 mmol) и 1-амино-2-пентилциклопропан (100 mg, 0.33 mmol) бяха обединени последователно в DCM при стайна температура под азот. Към сместа след това бе прибавен WSCDI (70 mg, 0.36 mmol) и сместа бе разбърквана цяла нощ в продължение на 16 h. Реакционната смес бе разредена с вода, органичният слой бе сепариран и после промит със солев разтвор, изсушен над MgSO4, филтруван и изпарен до жълто масло. То бе пречистено чрез колонна хроматография с използване на 1:3 EtOAc : пентан като елуент до получаване на продукта от заглавието (96 mg, 71 %); Rf 1 : 6 (EtOAc : пентан) 0.2; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 0.4 - 0.6 (m, 2H), 0.7 - 0.9 (m, 4H),
157
1.05-1.15 (m, 1H), 1.2-1.3 (m, 4H), 1.3-1.5 (m, 14H), 1.5-2.0 (m, 10H), 2.2-
2.4 (m, 2H), 3.2 - 3.35 (m, 5H), 5.7 - 5.9 (br.s, 1H); LRMS : m/z, M+H, 410.
Получаване 90
4-Бутилпиридин сн.
Литиев диизопропиламид бе образуван чрез прибавянето на нбутиллитий (43 ml от 2.5М разтвор в хексани) към разбъркван разтвор от диизопропиламин (10.9 д) в сух THF (100 ml) при -30 °C под азот. След 1 h разбъркване при тази температура, разтворът бе охладен до -78 °C и бе прибавен разтвор от 4-метилпиридин (10 д) в сух THF (20 ml), последвано от продължаване на разбъркването при -78 °C за 1 h. На капки в продължение на 45 min бе прибавен йодопропан (20 д) като разтвор в 20 ml сух THF, последвано от продължаване на разбъркването на цялата смес за 1 h. Прибавен бе наситен воден разтвор на амониев хлорид (20 ml) и реакционната смес после бе екстрахирана с етер (2 х 100 ml). Обединените етерни екстракти бяха промити с вода (75 ml), изсушени над MgSO4 и изпарени до получаване на бистро масло. Това масло бе пречистено чрез дестилация под вакуум, създаван чрез аспириране с вода (около 30 mm Hg) и продуктът от заглавието бе събран като фракция, която дестилира при 84 - 90 °C; 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) δ: 0.93 (t, ЗН, Me), 1.30 - 1.42 (m, 2H), 1.57 1.66 (m, 2H), 2.60 (t, 2H), 7.06 (d, 2H), 8.46 (d, 2H).
Получаване 90a
2-Амино-4-бутилпиридин сн.
Продуктът от заглавието бе получен от продукта от получаване 90 съгласно метода, описан в Journal of the Chemical Society, 1946, p 936.
158
Получаване 91
Бензил-2-[(1-Щ4-бутил-2-пиридинил)-амино]карбонил}циклопентил)метил]-4-метокси-бутаноат
Продуктът от заглавието бе получен с подобна процедура на тази, .Q описана в получаване 62 от 1-{2-[(бензилокси)карбонил]-4-метоксибутил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 15) и продукта от получаване 90а; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.89 (t, ЗН, Me), 1.36 (q, 2H, CH2), 1,47 - 2.26 (m, 14H), 2.55 - 2.68 (m, 3H), 3.17 (s, 3H, OMe), 3.24 (t, 2H, CH2OMe), 4.91 (d, 1H, CHPh), 5.00 (d, 1H, CHPh), 6.83 (d, 1H, Ar), 7.27-7.35 (m, 5H), 7.94 (br s, 1H, NH), 8.07 (s, 1H, Ar), 8.13 (d, 1H, Ar).
Получаване 92
Бензил-24(1-{Г(4-фенил-2-пиридинил)-амино]карбонил}циклопентил)· метил]-4-метокси-бутаноат
Продуктът от заглавието бе получен с подобна процедура на тази, описана в получаване 62 от 1-{2-[(бензилокси)карбонил]-4-метоксибутил}циклопентан-карбоксилна киселина (ЕР 274234, Пример 15) и 2-амино-4фенилпиридин (виж Journal of Medicinal Chemistry, 1978, p 874); 1H NMR (CDCI3, 400 MHz) δ: 1.43- 2.34 (m, 10H), 2.60-2.68 (m, 1H), 3.17 (s, 3H, OMe), 3.26 (t, 2H, CH2), 4.93 (d, 1H, CHPh), 5.02 (d, 1H, CHPh), 7.18 - 7.32 (m, 5H, Ph), 7.38 - 7.46 (m, 3H), 7.61 - 7.69 (m, 2H), 8.02 (brs, 1H, NH), 8.29 (d, 1H, Ar),
159
8.57 (s, 1H, Ar).
Получаване 93 трет.-Бутил-2-{[1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2ил1амино)карбонил)циклопентил1метил}-4-метоксибутаноат он
Продуктът от заглавието бе получен с подобна процедура на тази, описана в получаване 33, от продукта от получаване 99 и 2-амино-2хидроксиметил-2,3-дихидроинден (WO 91/10644; Пример 8а); 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.40 (s, 9Н), 1.44 - 2.00 (m, 12Н), 2.37 - 2.43 (m, 1H), 2.99 (d, 1H), 3.08 (d, 1 Η), 3.20 - 3.38 (m, 7H), 3.65 (dd, 1H), 3.84 (dd, 1H), 4.40 (t, 1H), 6.00 (s, 1H), 7.10 - 7.18 (m, 4H).
Получаване 94 mpem.-Бутилов естер на 3-(1-карбоксициклопентил)-2-(метоксиметил)пропанова киселина он
Продуктът от заглавието от получаване 2, етап Ь) (10 д, 41.3 mmol) бе поет в THF при -78 °C и на капки бе прибавен литиев диизопропиламид (43 ml, 86.7 mmol, 2М разтвор в THF). Сместа бе разбърквана 40 min при -78 °C, след което на капки бе прибавен хпорометил метилов етер (4.7 ml, 62 mmol). Разтворът после бе оставен да се затопли бавно до стайна температура една ноиц и реакцията прекъсната чрез добавяне на 2 N HCI (100 ml). Органичните вещества бяха екстрахирани с EtOAc (2 х 100ml), изсушени (MgSO4) и пречистени чрез колонна хроматография с използване на 2 %, после 3 %, и след това 5 % МеОН в DCM до получаване на
160 съединението от заглавието като жълто масло (6.2 д, 53 %); 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.40 (9Н, s), 1.40 - 1.50 (4Н, m), 1.20 - 1.80 (1Н, m), 1.80 - 1.90 (1 Η, m), 2.00 (1 Η, dd), 2.00 - 2.05 (ЗН, m), 2.20 (1Н, dd), 2.50 - 2.60 (1 Η, m), 3.30 (1 Η, s), 3.30 - 3.40 (1 Η, m), 3.40 (1Η, t); LRMS: m/z, MNH4 + 304.
Получаване 95 трет.-Бутил-2-К1-([(5-бензил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино1карбонил}циклопентил)метил]-4-метоксибутаноат
продукта от заглавието от получаване 99, като се използва процедура подобна на тази, описана в Получаване 33, до получаване на амида като бяла пяна; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 0.80 (t, ЗН), 1.20 - 1.35 (m, 2H), 1.37 (s, 9H), 1.40 - 2.20 (m, 13H), 4.30 (s, 2H), 7.30 (m, 5H); LRMS m/z 459 (M+H).
Получаване 96 трет.-Бутил-2-[(1-{[(2,3-дихидро-1-бензофуран-2-илметил)амино1карбонил)циклопентил)метил1-4-метоксибутаноат
Съединението от заглавието бе получено от 2-аминометил-2,3дихидробензофуран (J. Med. Chem., 1968, 11 (4), р. 844) и продукта от заглавието от получаване 99 с използване на процедура подобна на тази, описана в Получаване 33; 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.4 (s, 10H), 1.45 2.00 (m, 12H), 2.05 (m, 1H), 2.30 (m, 1H), 2.90 (m, 1H), 3.05 (m, 5H), 3.30 (m,
161
2Н), 3.55 - 3.65 (m, 1H), 4.80 (m, 1H), 6.15 (m, 1H), 6.70 (d, 1H), 6.80 (t, 1H), 7.00 (d, 1 Η), 7.05 (m, 1H); LRMS m/z 432 (M+H).
Получаване 97
5-(Етоксиметил)-1,3,4-тиадиазол-2-а1У1ин
N—N
Получен като се следва процедура подобна на тази от получаване 31, от етоксиоцетна киселина.
Получаване 98
5-Бензил-1,3,4-тиадиазол-2-амин
Съединението от заглавието бе получено като се следва процедура, подобна на тази от получаване 31 от фенилоцетна киселина; 1Н NMR (CDCl3, 400 ΜΗζ) δ: 4.10 (m, 2Н), 7.30 (m, 5Н); Анал.намерено С, 56.73; Н, 4.72; N, 21.67 %. C9H9N3S изисква С, 56.62; Н, 4.74; N, 21.97 %.
Получаване 99
1-[2-(трепг-Бутоксикарбонил)-4-метоксибутил]циклопентан· карбоксилна киселина
Разтвор от продукта от заглавието от получаване 2, етап Ь) в сух тетрахидрофуран (100 ml) бе прибавен към разбъркван разтвор от литиев диизопропиламид (130 ml) в смес от хексан (52 ml) и тетрахидрофуран (200 ml) при -78 °C под азот. След 1 час бе прибавен разтвор от 2-бромоетил метилов етер в тетрахидрофуран (100 ml), при поддържане на температурата при -78 °C. Реакционната смес бе оставена да се затопли до стайна
162
температура цяла нощ. Сместа бе угасена с вода (100 ml) и подкислена до pH 1 с 2 М солна киселина, и екстрахирана с етилацетат (2 х 150 ml). Обединените органични екстракти бяха изсушени над магнезиев сулфат и концентрирани in vacuo до получаване на суровата киселина, която бе хроматографирана върху силициев диоксид. Елуиране с увеличаващи се пропорции на метанол в дихлорометан (неразреден дихлорометан до 1 : 50) даде масло (7.7 д, 25.6 mmol, 52 %). Rf 0.3 метанол, дихлорометан 1 : 20. 1Н NMR (CDCI3, 400 ΜΗζ) δ: 1.4 (s, 9Н), 1.4-1.7 (m, 7Н), 1.75 - 1.95 (m, 2Н), 2.0 -
2.15 (m, ЗН), 2.3 - 2.4 (m, 1 Η), 3.3 (s, ЗН), 3.3 - 3.4 (m, 2Н). LRMS: m/z 299 (MH+).
Получаване 100
Бензил-1-(2-(трет.-бутоксикарбонил)пентил]циклопентанкарбоксилат
Продуктът от получаване 2 (513 mg, 1.80 mmol) бе разтворен в метанол (5 ml от 75 % воден метанол) и на една порция бе прибавен цезиев карбонат (300 mg, 0.95 mmol) при стайна температура. След 5 min разтворителите бяха отстранени под намалено налягане и остатъкът подложен на азеотропна дестилация с толуен (2x5 ml) и после разтворен отново в 7 ml сух DMF в азотна атмосфера. Бензилов бромид бе поет в 3 ml сух DMF и прибавен бавно с разбъркване, преди реакционната смес да бъде разбърана при стайна температура за 3 h. Сместа бе излята в етилацетат (40 ml) и промита с вода (40 ml), 1 N HCI (20 ml) и вода (2 х 20 ml). Органичният слой бе изсушен (MgSO4) и изпарен до гъсто масло, което бе пречистено чрез колонна хроматография с използване на 1 : 2 DCM : пентан, после 1 : 2 EtOAc : пентан като елуент, до получаване на съединението от заглавието (430 mg, 64 %); 1Н NMR (CDCI3, 400 MHz) 0.83 (t, ЗН), 1.17-1.32 (m, ЗН), 1.42 (s, 9Н), 1.36- 1.68 (m, 7Н), 1.80 (dd, 1 Η), 1.97163
2.12 (m, 4H), 5.10 (прив. q, 2Н), 7.36 (m, 5Н).
Получаване 101
2-(( 1 -|(Бензилокси)карбонил]циклопентил}метил)пентанова киселина
Продуктът от получаване 100 (430 mg, 1.15 mmol) бе поет в TFA (2 ml) в азотна атмосфера и разбъркван 16 h. Сместа бе изпарена до сухо и след това остатъкът пречистен чрез колонна хроматография с използване на 95 : 5 DCM : МеОН до получаване на съединението от заглавието (353, 97 %); 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) 0.82 (t, ЗН), 1.20 - 1.74 (m, 10Н), 1.80 (dd, 1 Η), 2.04 - 2.13 (m, ЗН), 2.24 - 2.41 (m, 1 Η), 5.10 (app q„ 2H), 7.36 (m, 5H).
Получаване 102
Бензил-1-(2-(Г(5-етил-1,3,4-тиадиазоп-2-ил)амино1карбонил}пентил)циклопентанкарбоксилат
Продуктът от получаване 101 (353 mg, 1.11 mmol), 2-амино-5-етил-
1,3,4-тиадиазол (ex Lancaster) (150 mg, 1.15 mmol), WSCDI (255 mg, 1.20 mmol), HOBt (173 mg, 1.20 mmol) и 4-метилморфолин (0.24 ml, 1.20 mmol) бяха смесени всички заедно в 5 ml ацетонитрил и разбърквани под азот 16 h при стайна температура. След това време сместа бе затоплена до 50 °C за 3 h, и после при 80 °C за 3 h. Сместа бе охладена до стайна температура, изпарена, разтворена в EtOAc (10 ml) и промита с NaHCO3 (10 ml). Органичният слой бе изсушен (MgSO4) и изпарен до получаване на смола, която бе пречистена чрез колонна хроматография до получаване на
164 продукта от заглавието (430 mg, 90 %); 1Н NMR (400 MHz, CDCI3) 0.79 (t, ЗН),
1.15 - 1.24 (m, ЗН), 1.37 (t, ЗН), 1.42 - 1.63 (m, 7Н), 1.83 (dd, 1 Η), 2.00 - 2.20 (m, ЗН), 2.42 - 2.51 (m, 1 Η), 2.97 (q, 2Η), 5.01 (прив. q, 2Н), 7.30 (m, 5Н).
Анализ на NEP
Получаване и анализ на разтворима неутрална ендопептидаза (NEP) от бъбречна кора на куче, плъх, заек и човек
Получена е разтворима NEP от бъбречната кора и е изследвана активността чрез измерване скоростта на разцепване на NEP субстрата С Abz-D-Arg-Arg-Leu-EDDnp, до създаването на неговия флуоресцентен продукт, Abz-D-Arg-Arg.
Експериментална процедура:
Материали
Всичката вода е двойно дейонизирана.
1.1 Тъкани:
Човешки бъбрек Плъши бъбрек Заешки бъбрек Кучешки бъбрек
НАМ (Pennsylvania, USA)
Вътрешно тъканно снабдяване
Вътрешно тъканно снабдяване
Вътрешно тъканно снабдяване
1.2 Среда за хомогенизиране:
100 тМ манитол и 20тМ Трие @ pH 7.1
2.42 g Трие (Fisher Т/Р630/60) е разреден в 1 литър вода и pH е регулирано до 7.1 с използване на 6 М HCI при стайна температура. Към него е прибавен 18.22 д манитол (Sigma М-
9546).
1.3 Трис буфер (NEP буфер):
ml от 50 тМ Трие pH 7.4 (Sigma Т2663) е разреден в 950 ml вода.
1.4 Субстрат (Abz-D-Arg-Arg-Leu-EDDnp):
165
Приготвен по поръчка от SNPE и съхранен като прах при -20 °C. Приготвен е 2 тМ изходен разтвор чрез внимателно повторно суспендиране на субстрата в Трие буфер, който не трябва да бъде завихрян или обработван със звук. Аликвотни части от по 600 μΙ от 2 тМ изходния разтвор се съхраняват при -20 за до един месец. (Medeiros, M.A.S., Franca, M.S.F. et al., (1997), Brazilian Journal of Medical and Biological Research, 30, 1157 1162).
1.5 Общ продукт:
Проби, съответстващи на 100 % конверсия на субстрат в продукт са включени на плака, за да се позволи определянето на % превръщане на субстрата. Общият продукт се създава чрез инкубиране на 1 ml от 2 тМ субстрат с 20 μΙ от ензимния изходен разтвор за 24 часа при 37 °C.
1.6 Изходен разтвор:
300 μΜ изходен разтвор от Фосфорамидон (Sigma R7385) е допълнен в NEP буфер и съхранен в 50 μ! аликвотни части при -20.
1.7 Диметил сулфоксид (DMSO).
1.8 Магнезиев хлорид - MgCI2.6H2O (Fisher М0600/53).
1.9 Черни 96 ямкови плоскодънни анализни плаки (Costar 3915).
1.10 Topseal A (Packard 6005185).
1.11 Центрофужни епруветки.
2 Специфично оборудване
2.1 Центрофуга Sorvall RC-5B (SS34 GSA ротор, предварително охладен до 4 °C).
2.2 Смесител Braun miniprimer.
2.3 Центрофуга Beckman CS-6R.
2.4 Устройство за флуориметрично разчитане Fluostar galaxy.
166
2.5 Разклащащ инкубатор Wesbart 1589.
Методи
3.1 Получаване на тъкан
3.2 Кучешка, от плъх, заешка и човешка NEP е получена от бъбречната кора с използване на метод, пригоден от Booth, A.G. & Kenny, A.J. (1974) Biochem. J. 142, 575 - 581.
3.3 Замразени бъбреци са оставени да се разтопят при стайна температура и кората е отделена чрез дисекция от медулата.
3.4 Кората е фино насечена и хомогенизирана в приблизително 10 обема хомогенизационен буфер (1.2) с използване на миксер Braun miniprimer (2.2).
3.5 Към хомогената е прибавен магнезиев хлорид (1.8) (20.3 mg/g тъкан) и разбъркан в баня лед-вода за 15 min.
3.6 Хомогенатът е центрофугиран при 1 500 g (3 820 об/мин) за 12 min центрофуга Beckman (2.3) преди отстраняването на супернатантата в нова центрофугална епруветка и разтоварване на пелетата.
3.7 Супернатантата се центрофугира при 15 000 g (12 100 об/мин) за 12 min в центрофуга Soval (2.1) и супернатантата се разтоварва.
3.8 Бледорозовият слой в горната част на оставащата пелета се отстранява и се суспендира отново в хомогенизационен буфер, съдържащ магнезиев хлорид (9 mg MgCI в 5 ml буфер на 1 g тъкан).
3.9 Суспензията се центрофугира при 2 200 g (4 630 об/мин) за 12 min в центрофуга Beckman (2.3) преди разтоварване на пелетата.
3.10 Супернатантата се центрофугира при 15 000 g (12 100 об/мин) за 12 min с използване на центрофуга Soval (2.1) и
167 супернатантата се разтоварва.
3.11 Крайната пелета се хомогенизира в хомогенизационен буфер съдържащ магнезиев хлорид (0.9 mg MgCI в 0.5 ml буфер на 1 g тъкан). Получава се хомогенна суспензия с използване на миксер Braun miniprimer (2.2). След това тя се замразява в аликвотни части от 100 μΙ, за да бъде анализирана за ΝΕΡ активност.
Определяне на ΝΕΡ активност
Активността на разделената преди на аликвотни части ΝΕΡ се определя чрез нейната способност да разцепва ΝΕΡ специфичния пептиден субстрат.
4.1 Приготвен е 4 % DMSO/ΝΕΡ буферен разтвор (4 ml DMSO в 96 ml NEP буфер).
4.2 Изходни разтвори от субстрат, общ продукт, ензим и Фосфорамидон се оставят да се разтопят върху лед.
4.3 Към всяка ямка бяха прибавени 50 μΙ от 4 % DMSO/NEP буферен разтвор.
4.4 2 тМ субстратният изходен разтвор се разрежда 1 : 40 за приготвяне на 50 μΜ разтвор. Към всяка ямка се прибавят 100 μΙ от 50 μΜ субстрат (крайна концентрация 25 μΜ).
4.5 Добавят се 50 μΙ от обхват от ензимни разреждания за иницииране на реакцията (обикновено се използват 1 : 100, 1 : 200, 1 : 400, 1 : 800, 1 : 1600 и 1 : 3200). Към ямките за празни проби се прибавят 50 μΙ ΝΕΡ буфер.
4.6 2 mM общият продукт се разрежда 1 : 80 за да се приготви 25 μΜ разтвор. Прибавят се 200 μΙ от 25 μΜ продукт към първите четири ямки на нова плака.
4.7 Плаките се инкубират при 37 °C в разклащащ инкубатор за 60 min.
168
4.8 300 μΜ Фосфорамидонови; τ изходен разтвор се разрежда 1 :
100 до 300 пМ. Реакцията се спира чрез добавяне на 100 μΙ 300 пМ Фосфорамидон и се инкубира при 37 °C в разклащащ инкубатор за 20 min преди да се разчете на Fluostar (ех 320/ет 420).
Анализ на NEP инхибиране
5.1 Изходни разтвори от субстрат, общ продукт, ензим и Фосфорамидон бяха оставени върху лед да се разтопят.
5.2 Изходни разтвори от съединенията бяха допълнени в 100 % DMSO и разредени 1 : 25 в NEP буфер до получаване на 4 % DMSO разтвор. Всички допълнителни разреждания се провеждат в 4 % DMSO разтвор (4 ml DMSO в 96 ml NEP буфер).
5.3 50 μΙ от съединение, в по две проби за съединение, се прибавят към 96 ямкова плака и се добавят 50 μΙ от 4 % DMSO/ΝΕΡ буфер към ямките за контролни и празни проби (виж приложението за разполагането върху плаката). Алтернативно виж приложение за разрежданията с използване на робот.
5.4 2 тМ субстратният изходен разтвор се разрежда 1 : 40 в ΝΕΡ буфер, за да се направи 50 μΜ разтвор (275 μΙ 2 тМ субстрат към 10.73 ml буфер е достатъчно за 1 плака).
5.5 Ензимният изходен разтвор се разрежда в NEP буфер (определен от проверките за активност).
5.6 2 тМ изходният разтвор на общия продукт се разрежда 1 : 80 в NEP буфер, за да се направи 25 μΜ разтвор. Прибавят се 200 μΙ към първите четири ямки на отделна плака.
5.7 300 μΜ Фосфорамидоновият изходен разтвор се разрежда 1 : 1000, за да се направи 300 пМ изходен разтвор (11 μΙ Фосфорамидон към 10.99 ml NEP буфер.
5.8 Към всяка ямка на 96 ямкова плака се прибавят следните:
169
Таблица: Реагенти, които се добавят в 96 ямкова плака.
Съединение/ DMSO Трие буфер Субстрат NEP ензим Общ продукт
Проби 2 μΙ съедине- ние 50 μΙ 100 μΙ 50 μΙ Няма
Контролни проби 2 μΙ DMSO 50 μΙ 100 μΙ 50 μΙ Няма
Празни проби 2 μΙ DMSO 100 μΙ 100 μΙ Няма Няма
Общи проби 2 μΙ DMSO Няма Няма Няма 200 μΙ
5.9 Реакцията се инициира чрез добавяне на NEP ензима преди инкубиране при 37 °C за 1 час в разклащащ инкубатор.
5.10 Реакцията се спира със 100 μΙ 300 пМ Фосфорамидон и се инкубира при 37 °C за 20 min в разклащащ инкубатор преди да се разчете на Fluostar (ех 320/ет 420).
Изчисления
Активността на NEP ензима се определя в присъствието и отсъствието на съединение и се изразява като процент.
% Контролна активност (превръщане на ензим) =
Средни FU на контролни проби - Средни FU на празни проби X 100
Средни FU на общи проби - Средни FU на празни проби % Активност с инхибитор =
Средни FU на съединение - Средни FU на празни проби X 100
Средни FU на общи проби - Средни FU на празни проби
170
Активност, изразена като % от контролната = % Активност с инхибитор Х100 % Контролна активност
S-образна крива доза-отговор е построена за % активност (% от контролната) в зависимост от концентрацията на съединението и 1С50 стойностите са изчислени с използване на програма за изглаждане на криви LabStats в Excel.
АСЕ Анализ
С Получаване и анализ на разтворим ангиотензин конвертиращ ензим (АСЕ) от свинска и човешка бъбречна кора
Разтворим АСЕ е получен от бъбречната кора и анализиран чрез измерване на скоростта на разцепване на АСЕ субстрата Abz-Gly-p-HHTpo-Phe-Pro-OH до създаване на флуоресцентен продукт, Abz-Gly.
Материали
Всичката вода е двойно дейонизирана.
1.1 Човешки бъбрек: НАМ (Pennsylvania, USA) или UK
Human Tissue Bank (UK HTB)
1.2 ACE от свински бъбрек Sigma (A2580)
1.3 Хомогенизационен буфер-1
100 mM Манитол и 20 mM Трие @ pH 7.1
2.42 g Трие (Fisher Т/Р630/60) е разреден в 1 литър вода и pH е регулирано до 7.1 е използване на 6 М HCI при стайна температура. Към него е прибавен 18.22 g манитол (Sigma М9546).
1.4 Хомогенизационен буфер-2
100 тМ Манитол, 20тМ Трие @ pH 7.1 и 10 тМ MgCI2.6H2O (Fisher М0600/53). Към 500 ml от хомогенизационния буфер 1 (1.4) са прибавени 1.017 д МдС12.
171
1.5 Трие буфер (АСЕ буфер).
тМ Трие и 300 тМ NaCI @ pH 7.4 ml от 50 тМ Трие pH 7.4 (Sigma Т2663) и 17.52g NaCI (Fisher S/3160/60) са допълнени до 1000 ml във вода.
1.6 Субстрат (Abz-D-Gly-p-HUTpo-Phe-Pro-OH) (Bachem М-1100)
АСЕ субстратът се съхранява като прах при -20 °C. Приготвя се 2 тМ изходен разтвор чрез внимателно повторно суспендиране на субстрата в АСЕ буфер, който не трябва да бъде завихрян или подлаган на обработка със звук. 400 μΙ аликвотни части от 2 тМ изходния разтвор се съхраняват при -20 °C за до един месец.
1.7 Общ продукт
Проби, съответстващи на 100 % конверсия на субстрат в продукт са включени на плаката, за да се позволи определянето на % превръщане на субстрата (виж изчисленията). Общият продукт се създава чрез инкубиране на 1 ml от 2 тМ субстрат с 20 μΙ от ензимния изходен разтвор за 24 часа при 37 °C.
1.8 Стоп разтвор.
0.5М EDTA (Promega CAS[6081/92/6]) се разрежда 1 : 250 в АСЕ буфер за приготвяне на 2 тМ разтвор.
1.9 Диметил сулфоксид (DMSO).
1.10 Магнезиев хлорид - MgCI2.6H2O (Fisher М0600/53).
1.11 Черни 96 ямкови плоскодънни анализни плаки (Costar 3915 или Packard).
1.12 Topseal A (Packard 6005185).
1.13 Центрофужни епруветки.
Специфично оборудване
2.1 Центрофуга Sorvall RC-5B (SS34 GSA ротор, предварително охладен до 4 °C).
172
2.2
2.3
2.4
2.5
3.1
3.2
3.3
3.4
3.5 . 3.6
Г*
3.7
3.8
3.9
3.10
Смесител Braun miniprimer.
Центрофуга Beckman CS-6R.
BMG Fluostar Galaxy.
Разклащащ инкубатор Wesbart 1589.
Методи
Получаване на тъкан
Човешки АСЕ се получава от бъбречната кора с използване на метод, пригоден от Booth, A.G. & Kenny, A.J. (1974) Biochem. J. 142,575-581.
Замразени бъбреци са оставени да се разтопят при стайна температура и кората е отделена чрез дисекция от медулата.
Кората е фино насечена и хомогенизирана в приблизително 10 обема хомогенизационен буфер -1 (1.4) с използване на миксер Braun miniprimer (2.2).
Към хомогената е прибавен магнезиев хлорид (1.11) (20.3 mg/g тъкан) и е разбъркван в баня лед-вода 15 min.
Хомогенатът е центрофугиран при 1 500 g (3 820 об/мин) за 12 min в центрофуга Beckman (2.3), преди отстраняването на супернатантата в нова центрофугална епруветка и разтоварване на пелетата.
Супернатантата се центрофугира при 15 000 g (12 100 об/мин) за 12 min в центрофуга на Soval (2.1) и супернатантата се разтоварва.
Бледорозовият слой в горната част на оставащата пелета се отстранява и Суспендира отново в хомогенизационен буфер-2 (1.5) (5 ml буфер на 1 g тъкан).
Суспензията се центрофугира при 2 200 g (4 630 об/мин) за 12 min в центрофуга Beckman преди разтоварване на пелетата.
Супернатантата се центрофугира при 15 000 g (12 100 об/мин)
173 за 12 min с използване на центрофугата Sorvall и супернатантата се разтоварва.
3.11 Крайната пелета се суспендира отново в хомогенизационен буфер-2 (0.5 ml буфер на 1 g тъкан). Получава се хомогенна суспензия с използване на миксер Braun miniprimer. След това тя се замразява в 100 μΙ аликвотни части за анализиране за ΝΕΡ активност.
Определяне на АСЕ активност
Активността на предварително разделен на аликвотни части АСЕ се измерва чрез неговата способност да разцепва АСЕ специфичния пептиден субстрат.
Свински АСЕ (1.2) е размразен и повторно суспендиран в АСЕ буфер (1.6) при 0.004 U/μΙ, който е замразен в 50 μΙ аликвотни части.
4.1 Приготвен е 4 % DMSO/АСЕ буферен разтвор (4 ml DMSO в 96 ml АСЕ буфер).
-4.2 Субстрат (1.7), общ продукт (1.8) и ензим (1.1, 1.2, 1.3), се оставят върху лед да се разтопят.
4.3 Към всяка ямка се прибавят 50 μΙ от 4 % DMSO/АСЕ буферен разтвор.
4.4 2 тМ субстратният изходен разтвор се разрежда 1 : 100, за да се направи 20 μΜ разтвор. Към всяка ямка се прибавят 100 μΙ от 20 μΜ субстрат (крайна концентрация в анализа 10 μΜ).
4.5 За иницииране на реакцията се прибавят 50 μ| от обхват от ензимни разреждания (обикновено са използвани 1 : 100, 1 : 200, 1 : 400, 1 : 800, 1 : 1 600 и 1 : 3 200). Към ямките за празни проби се прибавят 50 μΙ от АСЕ буфер.
4.6 2 тМ общият продукт се разрежда 1 : 200, за да се направи 10 μΜ разтвор. Прибавят се 200 μΙ от 10 μΜ продукт към първите
174 четири ямки на нова плака.
4.7 Плаките се инкубират при 37 °C в разклащащ инкубатор за 60 min.
4.8 Ензимната реакция се спира чрез добавяне на 100 μΙ от 2тМ EDTA в АСЕ буфер и се инкубира при 37 °C в разклащащ инкубатор за 20 min преди да се разчете на BMG Fluostar Galaxy (ex 320/em 420).
Анализ за АСЕ инхибиране
5.1 Изходните разтвори за субстрат, общ продукт и ензим се оставят върху лед да се разтопят.
5.2 Изходни разтвори от съединенията се допълват в 100 % DMSO и се разреждат 1 : 25 в АСЕ буфер до получаване на 4 % DMSO разтвор. Всички допълнителни разреждания се провеждат в 4 % DMSO/АСЕ буферен разтвор (4 ml DMSO в 96 ml АСЕ буфер).
5.3 50 μΙ от съединение, дублирани, се прибавят към 96 ямкова плака и към контролните и празни ямки се прибавят 50 μΙ от 4 % DMSO/АСЕ буфер (виж приложение-1 за разположението на плаката).
5.4 Етапи 5.2 и 5.3 могат да бъдат осъществени или ръчно или с използване на роботите Packard multiprobe (виж приложение-2 за подробности)
5.5 2 тМ субстратен изходен разтвор се разрежда 1 : 100 в АСЕ буфер за приготвяне на 20 μΜ разтвор (10 μΜ крайна концентрация в анализа) (110 μΙ от 2 тМ субстрат прибавен към 10.89 ml буфер е достатъчен за 1 плака).
5.6 Ензимният изходен разтвор е разреден в АСЕ буфер, както е определен от проверките за активност (4.0).
5.7 2 тМ изходният разтвор на общия продукт се разрежда 1 : 200 в АСЕ буфер за приготвяне на 10 μΜ разтвор. Добавят се 200 μΙ
175 към първите четири ямки на отделна плака.
5.8 0.5 mM EDTA изходен разтвор се разрежда 1 : 250 за приготвяне на 2 тМ изходен разтвор (44 μΙ EDTA към 10.96 ml АСЕ буфер).
5.9 Към всяка ямка на 96 ямковата плака са прибавени следните реагенти:
Таблица 1: Реагенти, добавени към 96 ямкова плака.
Съединение/ DMSO Трие буфер Субстрат АСЕ ензим Общ продукт
Проби 2 μΙ съединение 50 μΙ 100 μΙ 50 μΙ Няма
Контролни проби 2 μΙ DMSO 50 μΙ 100 μΙ 50 μΙ Няма
Съединение/ DMSO Трие буфер Субстрат АСЕ ензим Общ продукт
Празни проби 2 μΙ DMSO 100 μΙ 100 μΙ Няма Няма
Общи проби 2 μΙ DMSO Няма Няма Няма 200 μΙ
5.10 50 μΙ от най-високата концентрация на всяко съединение, използвано в анализа, са прибавени, дублирано, към същата 96 ямкова плака както общите проби (5.7). За определяне флуоресценцията на всяко съединение са прибавени 150 μΙ от АСЕ буфер.
5.11 Реакцията се инициира чрез добавяне на АСЕ ензима преди инкубирането при 37 °C за 1 час, в разклащащ инкубатор.
5.12 Реакцията се спира чрез добавяне на 100 μΙ 2 mM EDTA и се инкубира при 37 °C за 20 min в разклащащ инкубатор, преди да се разчете на BMG Fluostar Galaxy (ex 320/em 420).
176
Изчисления
Активността на АСЕ ензима се определя в присъствието и отсъствието на съединение и се изразява като процент. (FU = Флуоресцентни единици) (ί) % Контролна активност (превръщане на ензим) =
Средни FU на контролни проби - Средни FU на празни проби X 100 Средни FU на общи проби - Средни FU на празни проби (Н) % Активност с инхибитор =
Средни FU на съединение - Средни FU на празни проби X 100
Средни FU на общи проби - Средни FU на празни проби (Hi) Активност, изразена като % от контролната = % Активност с инхибитор X100 % Контролна активност или Средни FU на съединение - Средни FU на празни проби X 100 Средни FU на контролни проби - Средни FU на празни проби (iv) % Инхибиране = 100- % контрола (v) За флуоресцентни съединения средните FU на празни проби, съдържащи съединение (5.10) се изваждат от средните FU на стойностите на съединение, използвани за изчисляване на % Активност.
S-образна крива доза-отговор е построена за % активности (% от контролната) срещу концентрация на съединение и 1С5о стойностите са изчислени с използване на програма за изглаждане на криви LabStats в Excel.
Специфичните примери тук имаха IC50 срещу NEP от по-малко от
177
000 пМ.
В допълнение, много от изследваните Примери имаха селективност за NEP над АСЕ от поне 300 пъти.
Животински модел на отговор при възбуждане
Ние развихме един животински модел, който имитира физиологичния отговор при възбуждане, наблюдаван по време на женско сексуално възбуждане и директно отразява клиничните данни, получени при хора доброволци. Моделът използва лазерни Доплерови технологии за С записване на малки промени във вагиналния и клиторален кръвен поток предизвикан чрез стимулиране на тазовия нерв или вазоактивни невротрансмитери. По време на сексуалното възбуждане има увеличаване в гениталния кръвен поток като резултат от увеличената инервация от тазовия нерв. Това увеличение в гениталния кръвен поток води до увеличено генитално смазване и генитална чувствителност, които са свързани със сексуалното възбуждане. Главната причина за FSAD е пониженият генитален кръвен поток и това се проявява като намалена вагинална, лабиална и клиторална хиперемия. Лекуването на жени с FSAD е постижимо чрез възстановяване на нормалния сексуален отговор при С възбуждане. Това може да бъде постигнато чрез повишаване на гениталния кръвен поток.
Увеличаването в резултат от стимулирането на тазовия нерв, във вагиналния и клиторален кръвен поток, наблюдавано в животинския модел, представя ендогенните васкуларни ефекти, наблюдавани по време на женско сексуално възбуждане. Следователно този модел може да бъде използван първо, за идентифициране механизмите, въвлечени в регулирането на вагиналния и клиторален кръвен поток и второ, използване на модела за потвърждаване на нови подходи за повишаването на гениталния кръвен поток.
Продуктът от заглавието от Пример 29 бе приложен с използване на
178 този животински модел съгласно следния протокол за разкриване на едно покачване в увеличенията в резултат на стимулиране на тазовия нерв, в гениталния кръвен поток в заека.
Два пътя на приложение бяха изследвани: а) интравенозно приложение и Ь) локално приложение. И двете изследвания използваха анестезирания заешки модел съгласно следния протокол.
Методи
Протокол за анестезиране
С Женски новозеландски зайци (—2.5kg) бяха лекувани предварително с комбинация от Медетомидин (Domitor®) 0.5 ml/kg i.m., и Кетамин (Vetalar®) 0.25 ml/kg i.m., c поддържане на кислородното поемане чрез лицева маска. Зайците бяха трахеотомирани с използване на Portex™ безманшетна ендотрахеална тръба 3 ID, свързана към вентилатор и поддържаща скорост на дишане от 30 - 40 вдишвания на min, с приблизителен приливно-отливен обем от 18 - 20 ml, и максимално налягане на въздушния път от 10 cm Н2О. След това анестезията беше превключена на изофлуран и вентилирането продължено с О2 при 2 l/min. Дясната маргинална ушна вена бе катетризирана с използване на 23G или 24G катетър, и лактатен Рингеров С разтвор бе перфузиран с 0.5 ml/min. Заекът бе поддържан при 3 % изофлуран по време на инвазивната хирургия, намалявайки до 2 % за поддържане на анестезията.
Стимулиране на тазовия нерв
Направен бе коремен среднолинеен разрез в абдоминалната кухина. Разрезът бе около 5 cm в дължина точно над пубиса. Мазнината и мускула бяха направо отстранени за разкриване на подчревния нерв, който се простира надолу в телесната кухина. Той беше важно да се държи близо до страничната крива на пубисната стена, за да се избегне увреждането на феморалната вена и артерия, които лежат над пубиса. Седалищният и тазов нерви лежат по-дълбоко и бяха локализирани след по-нататъшна
179
дисекция на дорзалната страна на заека. Веднъж след като седалищният нерв бе идентифициран, тазовият нерв лесно бе локализиран. Терминът тазов нерв е използван широко; книгите по анатомия по въпроса пропускат да идентифицират нервите с достатъчно подробности. Обаче, стимулирането на нерва причинява увеличаване във вагиналния и клиторален кръвен поток, и инервация на тазовата област. Тазовият нерв бе освободен от заобкалящата го тъкан и около нерва бе поставен Harvard биполярен стимулиращ електрод. Нервът бе леко повдигнат до получаване на някакво напрежение, после електродът бе закрепен в позиция. Приблизително 1 ml светло парафиново масло бе поставен около нерва и електрода. То действа като защитно смазващо вещество към нерва и предотвратява замърсяването с кръв на електрода. Електродът бе свързан към Grass S88 Stimulator. Тазовият нерв бе стимулиран като се използват следните параметри: - 5V, ширина на импулса 0.5 ms, продължителност на стимулите 10 sec и честотен обхват от 2 до 16 Hz. Възпроизводими отговори бяха получени, когато нервът бе стимулиран на всеки 15-20 min.
Кривата на отговора на честотата бе определяна в началото на всеки експеримент, за да се определи оптималната честота за използване, като под-максимален отговор, нормално 4 Hz. Съединението(ята) за изследване бяха инфузирани през феморалната вена, с използване на Harvard 22 инфузионна помпа, позволяваща непрекъснат 15 min цикъл на стимулиране.
Позициониране на лазерните Доплерови преби
Направен бе коремен среднолинеен разрез, при каудалния край на пубиса, за да се разкрие пубисната област. Отстранява се всякаква свързваща тъкан и се разкрива обвивката на клитора, като се осигурява стената да е свободна от малки кръвоносни съдове. Външната вагинална стена също бе разкрита чрез отстраняване на всякаква свързваща тъкан. Една лазерна Доплерова течна проба бе вмъкната на 3 cm във вагината, така че половината дръжка на пробата все още да се вижда. Втора проба бе разположена така, че да лежи точно над външната клиторна стена.
180
Позициите на тези проби после бе регулирана докато бе получен сигнал. Една втора проба бе поставена точно над повърхността на кръвоносен съд на външната вагинална стена. И двете проби бяха фиксирани в позиция.
Вагиналния и клиторален кръвен поток бе записан или като сума директно от Flowmeter с използване на Po-ne-mah софтуер за събиране на данни (Ponemah Physiology Platform, Gould Instrument Systems Inc), или индиректно от Gould диаграма на следата на записващото устройство. Калибрирането е нагласено в началото на експеримента (0 -125 ml/min/100 g тъкан).
Приложение на инхибитори
а) Интравенозно приложение
Катетризиране на кръвоносни съдове
Лявата слабинна област на заека бе обръсната и бе направен вертикален рарез на дължина приблизително 5 cm покрай бедрото. Разкрити бяха феморалната вена и артерия, изолирани и после катетризирани с ПВС катетър (17G) за инфузия на лекарствата и съединения. Катетризирането бе повторено за феморалната артерия, като катетърът бе вмъкнат на дълбочина от 10 cm, за да е сигурно, че катетърът ще достигне абдоминалната аорта. Този артериален катетър бе свързан към Gould система за записване на кръвно налягане. Проби за кръвногазов анализ също бяха взети чрез артериалния катетър. Измерени бяха систоличното и диастолично налягания, и средното артериално налягане бе изчислено с използване на формулата (диастолично х2 + систолично) 4- 3. Честотата на сърдечните съкращения бе измерена чрез пулсационния оксихемометър и Po-ne-mah софтуерна система за събиране на данни (Ponemah Physiology Platform, Gould Instrument Systems Inc).
Съединението от заглавието от Пример 29 бе допълнено във физиологичен разтвор или 5 % глюкозен разтвор (200 μΙ 50 % глюкоза в 1.8 ml вода за инжекция). Инхибиторът и контролите с пълнител бяха
181 инфузирани с използване на помпа Harvard 22, като бе инфузирано при 500 μΙ/min чрез трипътен кран във феморалната вена. След инфузията, катетърът бе промит с хепаринизиран физиологичен разтвор (Hepsaline), така че в катетъра не остана NEP инхибитор.
Ь) Локално приложение на инхибитори
Приготвена бе локална формулировка чрез смесване на продукта от Пример 29 при 90 % поглъщане в 50 % пропилен гликол/50 % вода. Сместа бе направена вискозна с карбоксиметилцелулоза (СМС), което даде крайна концентрация от приблизително 2.5 mg/ml. Приложението на 0.2 ml дава максимална доза от 0.5 mg.
Тази формулировка бе приложена локално към вътрешната вагинална стена чрез апликатор с домашно предназначение. По същество, парчета от тръбичка (вътрешен диаметър 3 mm, външен диаметър 4 mm) с дължина 10 cm бяха нарязани и прикачени към спринцовки от 1 ml. Всяка спринцовка бе напълнена с контролен гел (не съдържащ активен ингредиент) или формулировката, описана по-горе. Тръбичката бе вмъкната на 2 cm във вагината и внимателно бяха инжектирани 0.2 ml от гела, за да се избегне разстройването на лазерната Доплерова проба. Прибавянето на гел не причини голямо разширение към вагината и нямаше излишно изливане на теловете от вътре на вагината по време на не-стимул и раните или стимулирани периоди.
Резултати и обсъждане
Животински модел на сексуално възбуждане
Ние развихме ясен възпроизводим модел на физиологията на сексуално възбуждане. С използването на този анестезиран заешки модел, ние сме в състояние да измерим малки промени в гениталния кръвен поток с използване на лазерна Доплерова технология. Използвано е стимулиране на тазовия нерв за симулиране на невронните ефекти на сексуално
182 възбуждане. FSAD е свързано с и може да е резултат от намален генитален кръвен поток.
Нашите резултати демонстрират, че съединението от заглавието от пример 29 значително усили стимулираните чрез тазовия нерв увеличения в гениталния кръвен поток при клинично релевантни дози. Това усилване е видно и с интравенозно, и с локално приложение.
Фигура 1 показва ефекта върху вагиналния и клиторален кръвен поток от интравенозното приложение на продукта от заглавието на Пример 29. Интравенозното приложение увеличи стимулираните чрез тазовия нерв (PNS) увеличения в гениталния кръвен поток в анестезирания заешки модел на сексуално възбуждане. Повтаряни PNS на интервали от 15 min предизвикаха възпроизводими увеличения в гениталния кръвен поток (защрихованите ивици). Интравенозното приложение на продукта от заглавието от Пример 29 (сивата ивица) усили пиковото увеличение в клиторалния и вагинален кръвен поток, предизвикано от подмаксимални честоти на стимулиране (напр. 4 Hz), сравнено с увеличенията, наблюдавани по време на подобни контролни стимулирания или контроли с пълнители (защрихована ивица).
Следните едновременни увеличения бяха наблюдавани след 1.0 mg/kg i.v. голяма инфузия - увеличение от 131 % в клиторалния и увеличение от 92 % във вагиналния кръвен поток (п=3). Данните бяха изразени като средни ± sem; всички промени бяха проследявани с използване на лазерни Доплерови технологии.
Фигура 2 показва ефекта върху вагиналния кръвен поток с течение на времето от прилагането на продукта от заглавието на Пример 29 локално. Нямаше наблюдаваща се промяна на нестимулирания/основен вагинален кръвен поток, нито бяха наблюдавани каквито и да било промени на стимулирания вагинален кръвен поток след първоначалното въвеждане на тръбичката или прилагането на 0.2 ml от гела пълнител.
Повтарящото се стимулиране на тазовия нерв при подмаксимални
183 честоти на стимулиране на 15 min интервали предизвика възпроизводими увеличения във вагиналния кръвен поток (запълнения кръг). Интравагиналното приложение на установена концентрация от продукта от заглавието на Пример 29 (0.2 mg/ml) усили пиковото увеличаване във вагиналния кръвен поток (отворените кръгове) сравнени със средните контролни увеличения в потока. Продуктът от заглавието от Пример 29 нямаше ефект върху основния (нестимулиран) вагинален кръвен поток (отворените квадрати) сравнен с контролния поток (запълнения квадрат). Всички промени бяха следени с използване на лазерни Доплерови технологии и данните са изразени като средна + средноквадратична средна (п=4), *** Р<0.001 в теста на Стюдент.
Това изследване показа, че продукта от заглавието на Пример 29, когато е приложен локално към вагината значително усилва увеличенията чрез стимулиране на тазовия нерв във вагиналния кръвен поток. Степента на усилване е сравнима с увеличенията, наблюдавани след интравенозна инфузия на съединението. По интересен начин усилването настъпва при свободна плазмена концентрация на продукта от заглавието на Пример 29, което не е било очаквано, че причинява потенциране на вагиналния кръвен поток.
В заключение, това изследване показва, че интравагиналното, локално приложение на съединенията от изобретението усилва увеличенията чрез стимулиране на тазовия нерв във вагиналния кръвен поток.

Claims (2)

ПАТЕНТНИ ПРЕТЕНЦИИ
1. Използване на съединение с формула (I), негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в получаването на лекарствено средство за лечението на женска сексуална дисфункция;
IL в която
R1 е Сцеалкил, който може да бъде заместен с един или повече заместители, които могат да бъдат еднакви или различни, избрани от списъка: хало, хидрокси, Сцеалкокси, С2. ехидроксиалкокси, С1_балкокси(С1_балкокси), С3-7циклоалкил, Сз. уциклоалкенил, арил, арилокси, (С1.4алкокси)арилокси, хетероциклил, хетероциклилокси, -NR2R3, -NR4COR5, -NR4SO2R5, -CONR2R3, -S(O)PR6, -COR7 и -СО2(Смалкил); или R1 е Сз.7циклоалкил, арил или хетероциклил, всеки от които може да бъде заместен с един или повече заместители от същия списък, които заместители могат да бъдат еднакви или различни, и който списък може допълнително да включва С^ еалкил; или R1 е С^балкокси, -NR2R3 или ~NR4SO2R5;
където
R2 и R3 са всеки независимо Н, С^алкил, С3.7циклоалкил (по избор заместен с хидрокси или С^алкокси), арил, (С1_4алкил)арил, Cv 6алкоксиарил или хетероциклил; или R2 и R3 заедно с азота, към който те са присъединени, образуват пиролидинилова, пиперидино, морфолино, пиперазинилова или АЦС^алкил)пиперазинилова група;
185
R4 е Н или С^алкил;
R5 е С^алкил, CF3, арил, (С^алкил)арил, (С^алкокси)арил, хетероциклил, С^алкокси или -NR2R3 където R2 и R3 са, както са дефинирани преди;
R6 е С^алкил, арил, хетероциклил или NR2R3 където R2 и R3 са, както са дефинирани преди; и
R7 е С^алкил, С3.7циклоалкил, арил или хетероциклил; р е 0, 1, 2 ил> 3;
η е 0,1 или 2;
-(СН2)П- връзката е по избор заместена с Смалкил, С^алкил заместен с една или повече флуоро групи или фенил, С^алкокси, хидрокси, хидрокси(С1.3алкил), С3.7циклоалкил, арил или хетероциклил;
Υ е групата
R8 в която А е -(CH2)q-, където q е 1, 2, 3 или 4 до попълване на 3 до 7 членен карбоциклен пръстен, който може да бъде наситен или ненаситен; R8 е Н, С^алкил, -СН2ОН, фенил, фенил(С1.4алкил) или CONR11R12; R9 и R10 са всеки независимо Н, -СН2ОН, -C(O)NR11R12, Сц6алкил, фенил (по избор заместен с Смалкил, хало или С^алкокси или фенил^^алкил) където фениловата група е по избор заместена с С^алкил, хало или С1_4алкокси, или R9 и R10 заедно образуват диоксолан; R11 и R12 които могат да бъдат еднакви или различни, са Н, С1.4алкил, R13 или S(O)rR13, където г е 0, 1 или 2 и R13 е фенил, по избор заместен с С^алкил или фенилС1.4алкил, където фенилът е по избор заместен с С^алкил; или
Y е групата, -С(О) NR11R12, където R11 и R12 са, както са дефинирани
186 преди, освен, че R11 и R12 не са и двата Н; или Y е групата,
Y е групата /
R16 където R14 е Н, СН2ОН или C(O)NR11R12, където R11 и R12 са, както са дефинирани преди; когато присъства R15, който може да бъде еднакъв или различен спрямо всеки друг R15 е ОН, С^алкил, 4алкокси, хало или CF3; t е 0, 1, 2, 3 или 4; и R16 и R17 са независимо Н или С^алкил; или
Y е групата
14 / R16 в която един или два от В, D, Е или F е азот, а другите са въглерод; и
R14 до R17 и t са, както са дефинирани преди; или
Y е по избор заместен 5-7 членен хетероциклен пръстен, който може да бъде наситен, ненаситен или ароматен и съдържа азот, кислород или сяра и по избор един, два или три допълнителни азотни атома в пръстена, и който може да бъде допълнително бензокондензиран и евентуално заместен с:
С^алкокси; хидрокси; оксо; амино; моно или ди-(С1.4алкил)амино; С^алканоиламино; или ' С^алкил, който може да бъде заместен с един или повече заместители, които могат да бъдат еднакви или различни, избрани от списъка: С^валкокси, С^халоалкокси, С^еалкилтио,
187 халоген, С3.7циклоалкил, хетероциклил или фенил; или
Сз-уциклоалкил, арил или хетероциклил, всеки от които може да бъде заместен с един или повече заместители, които могат да бъдат еднакви или различни, избрани от списъка: С^алкил, Сц 6алкокси, С^бХзлоалкокси, С1.6алкилтио, халоген, С3-7Циклоалкил, хетероциклил или фенил;
при което, когато има оксо заместване на хетероцикления пръстен, пръстенът съдържа само един или два азотни атома и оксо заместването е съседно на азотен атом в пръстена; или
Y е -NR18S(O)UR19, където R18 е Н или С-малкил; R19 е арил, арилС^алкил или хетероциклил; и и е 0, 1,2 или 3.
2. Съединение с формула (I), негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, където R1, η и Y са, както са дефинирани в претенция 1, с ограничението, че Υ не е групата -C(O)NR11R12, и когато R1 е пропил или фенилетил, R14 не е -СН2ОН.
. 3. Съединение с формула (I), негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, където R1, η и Y са, както са дефинирани в претенция 1, с ограничението, че Υ не е групата -C(O)NR11R12 и R14 не е Н или -СН2ОН.
4. Съединение съгласно претенции 2 или 3, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, където R1 е С^алкил, С^алкокси, С1.6алкокси(С1.3)алкил, Сц еалкоксиСцбалкоксиСцзалкил или С^алкил заместен с арил.
5. Съединение съгласно претенция 4, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, където R1 е С^алкил, С^алкокси, С^алкоксиСС^алкил или Ci.
188 6а л коксиС 1 .ба л коксиС 1 .Зал ки л.
6. Съединение съгласно претенция 5, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, където R1 е Смалкил или С^алкоксиСС^алкил.
7. Съединение съгласно всяка една от претенции 2 до 6, или негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което, когато Y е групата ,9 ло и карбоцикленият пръстен е напълно наситен, тогава за предпочитане един от R9 или R10 е -СН2ОН; -C(O)NR11R12; С^алкил; фенил евентуално заместен с С^алкил; или фенил(С1_4алкил), където фениловата група е по избор заместена с С^алкил.
8. Съединение съгласно претенция 7, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което карбоцикленият пръстен е 5, 6 или 7 членен, в който един от R9 или R10, е -C(O)NR11R12, а другият е Сгеалкил; фенил евентуално заместен с С1.4алкил; или фенил(С1.4алкил), където фениловата група е по избор заместена с С^алкил.
9. Съединение съгласно претенции 7 или 8, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което R9 и R10 са присъединени към съседни въглеродни атоми в пръстена.
10. Съединение съгласно всяка една от претенции 7 до 9, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или
189 пролекарствени средства, в което R® е СН2ОН.
11. Съединение съгласно всяка една от претенции 2 до 6, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което, когато Y е групата -NR18S(O)UR19, за предпочитане R18 е Н.
12. Съединение съгласно всяка една от претенции 2 до 6 или 11, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или
С пролекарствени средства, където R19 е бензил или фенил.
13 Съединение съгласно всяка една от претенции 2 до 6 или 11, или 12, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което и е 2.
14 Съединение съгласно всяка една от претенции 2 до 6, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което Y е по избор заместен 5-7 членен хетероциклен пръстен.
15. Съединение съгласно претенция 14, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което 5-7 членният хетероциклен пръстен е по избор заместен ароматен пръстен.
16. Съединение съгласно претенция 15, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което ароматният пръстен е пиридил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, пиразолил, триазолил, тетразолил, оксадиазолил, тиазолил, тиадиазолил, оксазолил, изоксазолил, индолил, изоиндолнил, хинолил,
190 изохинолил, пиридонил, хиноксалинил или хиназолинил, всеки от които може да бъде заместен както е дефинирано в претенция 1.
17. Съединение съгласно претенция 16, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което ароматният пръстен е оксадиазол, пиридон или тиадиазол, всеки от които може да бъде заместен както е дефинирано в претенция 1.
С 18. Съединение съгласно претенция 17, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което ароматният пръстен е 1,2,5-оксадиазол, 1,3,4-оксадиазол,
2-пиридон или 1,3,4-тиадиазол, всеки от които може да бъде заместен както е дефинирано в претенция 1.
19. Съединение съгласно всяка една от претенции 14 до 18, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което 5-7 членният хетероциклен пръстен е заместен с един или повече С^алкил, фенил или фенилС^алкил.
20. Съединение съгласно претенция 19, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което 5-7 членният хетероциклен пръстен е заместен с Сгдалкил или бензил.
21. Съединение съгласно всяка една от претенции 17 до 20, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което, когато Y е пиридон, този пиридон е /Vзаместен пиридон.
191
22 Съединение съгласно претенция 14, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което Y е лактам, свързан при азота.
23 Съединение съгласно всяка една от претенции 2 до 6, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което Y е rU / R16 където R14 е СН2ОН или C(O)NR1’R’2.
24. Съединение съгласно всяка една от претенции 2 до 6 или 23, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което R16 и R17ca водород.
25. Съединение съгласно всяка една от претенции 2 до 6, 23 или 24, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, в което t е 0.
26. Съединение с формула le, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, но· (le)
192 където R1, Y и η са дефинирани във всяка една от претенции 2 до 25.
27. Съединение, негови фармацевтично приемливи соли, солвати, полиморфни форми или пролекарствени средства, избрано от групата, състояща се от:
2-[(1-{[(1-бензил-6-оксо-1,6-дихидро-3-пиридинил)амино]карбонил}циклопентил)метил]-4-метоксимаслена киселина (Пример 35);
2-{[1-({[3-(2-оксо-1-пиролидинил)пропил]амино}карбонилциклопентил]метил}-4-фенилмаслена киселина (Пример 40);
С (+)-2-((1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1 Н-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}-4-Фенилмаслена киселина (Пример 44);
2-((1-{[(5-метил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}циклопентил)метил]-4-фенилмаслена киселина (Пример 43);
цис-3-(2-метоксиетокси)-2-[( 1 -{[(4-{[(фенилсулфонил)амино]карбонил}циклохексил)амино]карбонил}циклопентил)метил]-пропанова киселина (Пример 38);
(+)-2-{[1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}пентанова киселина (Пример 31);
(2/?)-2-[(1-{[(5-етил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}V циклопентил)метил]пентанова киселина или (-)-2-((1-{[(5-етил-1,3,4тиадиазол-2-ил)амино]карбонил}циклопентил)метил]пентанова киселина (Пример 29);
(25)-2-[(1-{[(5-етил-1,3,4-тиадиазол-2-ил)амино]карбонил)циклопентил)метил]пентанова киселина или (+)-2-((1-{[(5-етил-1,3,4тиадиазол-2-ил)амино]карбонил]циклопентил)метил]пентанова киселина (Пример 30);
2-({1-[(3-бензиланилино)карбонил]циклопентил}метил)пентанова киселина (Пример 21);
2-[(1-{((1-бензил-6-оксо-1,6-дихидро-3-пиридинил)амино]карбонил}циклопентил)метил]пентанова киселина (Пример 22);
193
2- {[1-({[(1П,38,4П)-4-(аминокарбонил)-3-бутилциклохексил]амино}карбонил)циклопентил]метил}пентанова киселина (Пример 9);
транс-3-[1-({[2-(4-хлорофенил)циклопропил]амино}карбонил)циклопентил]-2-(метоксиметил)пропанова киселина (Пример 46);
транс-3-[1-({[2-(4-метоксифенил)циклопропил]амино)карбонил)циклопентил]-2-(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 47);
транс-3-[1-({[2-пентилциклопропил]амино}карбонил)циклопентил]-2(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 48);
3- [1-({[5-бензил-[1,3,4]-тиадиазол-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]-
2-(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 49);
3-[1-({[4-бутилпиридин-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]-2-(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 50);
3-[1-({[4-фенилпиридин-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]-2-(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 51);
3-[1-({[1-хидроксиметил-3-фенилциклопентил]амино}карбонил)циклопентил]-2-(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 52);
2-{[1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1/-/-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}-4-метоксимаслена киселина (Пример 53);
транс-3-[1-(([2-фенилциклопропил]амино}карбонил)циклспентил]-2(метоксиетил)пропанова киселина (Пример 54);
(Р)-2-{[1-({[2-(хиДР°ксиметил)'2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}-4-метоксимаслена киселина (Пример 55); и (S)-2{[1-({[2-(хидроксиметил)-2,3-дихидро-1Н-инден-2-ил]амино}карбонил)циклопентил]метил}-4-метоксимаслена киселина (Пример 56).
28. Използване съгласно претенция 1, в което лекуваната женска сексуална дисфункция включва поне дисфункция на женското сексуално възбуждане (FSAD).
29. Използване съгласно претенции 1 или 28, в което лекарственото
194 средство се прилага системно.
30. Използване съгласно претенция 29, в което лекарственото средство се прилага орално.
31. Използване на съединение както е дефинирано във всяка една от претенции 2 до 27 в получаването на лекарствено средство за лечението или профилактиката на състояние, за което може да бъде получен полезен терапевтичен отговор чрез инхибирането на неутрална ендопептидаза.
32. Съединение както е дефинирано във всяка една от претенции 2 до 27 за използване в медицината.
33. Фармацевтична формулировка включваща съединение, както е дефинирано във всяка една от претенции 2 до 27, заедно с фармацевтично приемлив ексципиент.
.·· 34. Метод за лечението или профилактиката на женска сексуална дисфункция включително прилагането на пациента, на терапевтично ефективно количество от съединение както е дефинирано във всяка една от претенции 1 до 27.
35. Фармацевтична формулировка за женска сексуална дисфункция включваща терапевтично ефективно количество от съединение както е дефинирано във всяка една от претенции 2 до 27, заедно с фармацевтично приемлив ексципиент.
36. Процес за получаване на съединение с формула I или негови соли
195 (CH2)nY (D където R1, n и Y са, както са дефинирани във всяка една от претенции
2 до 27, съдържащ етапите на:
а) взаимодействие на съединение с формула II (ϋ) в която Prot е подходяща защитна група, със съединение с формула Y(CH2)nNH2 (III), до получаване на съединението с формула IV, (CH2)nY след което
b) взаимодействие на съединението с формула IV при подходящи условия за отстраняване на защитата, до получаване на съединението с формула I; и след това
c) по избор образуване на сол.
37. Съединение с формула IV
196 (CH2)nY (IV) където R1, n, и Y са, както са дефинирани във всяка една от претенции
2 до 27 и където Prot е защитна група.
BG107229A 2000-07-06 2002-10-29 Циклопентил-заместени глутарамидни производни като инхибитори на неутрална ендопептидаза BG107229A (bg)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB0016684A GB0016684D0 (en) 2000-07-06 2000-07-06 Pharmaceutical composition
GB0101584A GB0101584D0 (en) 2001-01-22 2001-01-22 Pharmaceutical composition
PCT/IB2001/001205 WO2002002513A1 (en) 2000-07-06 2001-07-02 Cyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BG107229A true BG107229A (bg) 2003-05-30

Family

ID=26244612

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG107229A BG107229A (bg) 2000-07-06 2002-10-29 Циклопентил-заместени глутарамидни производни като инхибитори на неутрална ендопептидаза

Country Status (32)

Country Link
US (1) US20020052370A1 (bg)
EP (1) EP1296938A1 (bg)
JP (1) JP2004502670A (bg)
KR (1) KR20030017611A (bg)
CN (1) CN1438991A (bg)
AP (1) AP2001002205A0 (bg)
AR (1) AR029696A1 (bg)
AU (1) AU2001267770A1 (bg)
BG (1) BG107229A (bg)
BR (1) BR0112370A (bg)
CA (1) CA2414881A1 (bg)
CZ (1) CZ20024167A3 (bg)
DO (1) DOP2001000205A (bg)
EA (1) EA200201071A1 (bg)
HN (1) HN2001000145A (bg)
HR (1) HRP20030007A2 (bg)
HU (1) HUP0301683A3 (bg)
IL (1) IL152784A0 (bg)
IS (1) IS6601A (bg)
MA (1) MA26925A1 (bg)
MX (1) MXPA03000066A (bg)
NO (1) NO20026262D0 (bg)
NZ (1) NZ522368A (bg)
OA (1) OA12303A (bg)
PA (1) PA8521801A1 (bg)
PE (1) PE20020145A1 (bg)
PL (1) PL361699A1 (bg)
SK (1) SK18182002A3 (bg)
SV (1) SV2002000519A (bg)
TN (1) TNSN01100A1 (bg)
UY (1) UY26820A1 (bg)
WO (1) WO2002002513A1 (bg)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL139455A0 (en) * 1999-11-08 2001-11-25 Pfizer Compounds for the treatment of female sexual dysfunction
US20020065286A1 (en) * 2000-08-21 2002-05-30 Davies Michael John Treatment of wounds
WO2002079143A1 (en) * 2001-03-28 2002-10-10 Pfizer Limited N-phenpropylcyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as nep inhibitors for fsad
US6660756B2 (en) 2001-03-28 2003-12-09 Pfizer Inc. N-phenpropylcyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase
UA78974C2 (en) 2001-10-20 2007-05-10 Boehringer Ingelheim Pharma Use of flibanserin for treating disorders of sexual desire
US10675280B2 (en) 2001-10-20 2020-06-09 Sprout Pharmaceuticals, Inc. Treating sexual desire disorders with flibanserin
DE60303441T2 (de) 2002-02-08 2006-09-21 Merck & Co., Inc. N-biphenylmethylaminocycloalkancarboxamid-derivative
AR038377A1 (es) 2002-02-08 2005-01-12 Merck & Co Inc Derivados de n-bifenil-aminocicloalcancarboxamida (con sustitucion con metilo)
JP2005538047A (ja) * 2002-05-03 2005-12-15 ワーナー−ランバート・カンパニー、リミテッド、ライアビリティ、カンパニー ボンベシンアンタゴニスト
BR0314872A (pt) * 2002-10-18 2005-08-02 Pfizer Prod Inc Ligandos do receptor canabinóide e usos dos mesmos
GB0230036D0 (en) * 2002-12-23 2003-01-29 Pfizer Ltd Novel pharmaceuticals
JP2007516949A (ja) * 2003-07-16 2007-06-28 ファイザー・インク 性機能不全の治療
US7649002B2 (en) 2004-02-04 2010-01-19 Pfizer Inc (3,5-dimethylpiperidin-1yl)(4-phenylpyrrolidin-3-yl)methanone derivatives as MCR4 agonists
US20050267072A1 (en) * 2004-05-14 2005-12-01 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Pharmaceutical compositions containing dually acting inhibitors of neutral endopeptidase for the treatment of sexual dysfunction
US20050267124A1 (en) * 2004-05-14 2005-12-01 Solvay Pharmaceuticals Gmbh Pharmaceutical compositions comprising NEP-inhibitors, inhibitors of the endogenous producing system and PDEV inhibiitors
UA90690C2 (ru) * 2004-10-12 2010-05-25 Гленмарк Фармасьютикалс С.А. Ингибиторы дипептидилпептидазы iv, процесс их получения и фармацевтическая композиция, которая их содержит (варианты)
EP1799639B1 (en) 2004-10-12 2013-09-04 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Novel dipeptidyl peptidase iv inhibitors, pharmaceutical compositions containing them, and process for their preparation
US8227476B2 (en) 2005-08-03 2012-07-24 Sprout Pharmaceuticals, Inc. Use of flibanserin in the treatment of obesity
ES2336719T3 (es) 2006-06-30 2010-04-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh Flibanserina para el tratamiento de la incontinencia urinaria y las enfermedades relacionadas.
CN101563316A (zh) * 2006-12-21 2009-10-21 艾博特公司 1-氨基,3-取代的苯基环戊烷羧酸酯的各立体异构体的制备和分离方法
UY31335A1 (es) 2007-09-12 2009-04-30 Tratamiento de sintomas vasomotores
CA2686480A1 (en) 2008-12-15 2010-06-15 Boehringer Ingelheim International Gmbh New salts
WO2011026917A1 (en) * 2009-09-04 2011-03-10 Novartis Ag Heteroaryl compounds as kinase inhibitors
EP2545037A1 (en) * 2010-03-10 2013-01-16 Ingenium Pharmaceuticals GmbH Inhibitors of protein kinases
BR112012027062B8 (pt) * 2010-04-20 2021-05-25 Fond Ieo composto, processo para a preparação de um composto e usos do mesmo
CN107257789B (zh) * 2015-02-13 2021-06-29 牛津药物设计有限公司 作为氨酰-trna合成酶抑制剂的新型n-酰基-芳基磺酰胺衍生物
GB201617064D0 (en) 2016-10-07 2016-11-23 Inhibox Limited And Latvian Institute Of Organic Synthesis The Compounds and their therapeutic use
WO2024119075A1 (en) * 2022-12-01 2024-06-06 ATAI Life Sciences AG Crystalline forms of n,n-dimethyltryptamine and methods of using the same

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH075530B2 (ja) * 1989-11-21 1995-01-25 シェリング・コーポレーション カルボキシアルキルカルボニルアミノ酸エンドペプチダーゼ阻害剤
GB9000725D0 (en) * 1990-01-12 1990-03-14 Pfizer Ltd Therapeutic agents
DE19510566A1 (de) * 1995-03-23 1996-09-26 Kali Chemie Pharma Gmbh Benzazepin-, Benzoxazepin- und Benzothiazepin-N-essigsäurederivate sowie Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
US6486207B2 (en) * 1998-12-10 2002-11-26 Nexmed (Holdings), Inc. Compositions and methods for amelioration of human female sexual dysfunction
IL139455A0 (en) * 1999-11-08 2001-11-25 Pfizer Compounds for the treatment of female sexual dysfunction

Also Published As

Publication number Publication date
UY26820A1 (es) 2002-01-31
AP2001002205A0 (en) 2001-09-30
HUP0301683A2 (hu) 2003-09-29
EP1296938A1 (en) 2003-04-02
AU2001267770A1 (en) 2002-01-14
BR0112370A (pt) 2003-06-17
JP2004502670A (ja) 2004-01-29
HRP20030007A2 (en) 2004-02-29
CZ20024167A3 (cs) 2004-03-17
TNSN01100A1 (fr) 2005-11-10
NZ522368A (en) 2004-12-24
AR029696A1 (es) 2003-07-10
CN1438991A (zh) 2003-08-27
NO20026262L (no) 2002-12-27
IL152784A0 (en) 2003-06-24
WO2002002513A1 (en) 2002-01-10
HUP0301683A3 (en) 2004-11-29
OA12303A (en) 2003-11-17
PE20020145A1 (es) 2002-02-23
EA200201071A1 (ru) 2003-04-24
PA8521801A1 (es) 2002-09-17
MA26925A1 (fr) 2004-12-20
CA2414881A1 (en) 2002-01-10
SV2002000519A (es) 2002-12-02
SK18182002A3 (sk) 2004-04-06
MXPA03000066A (es) 2003-10-15
DOP2001000205A (es) 2002-12-15
HN2001000145A (es) 2002-01-14
PL361699A1 (en) 2004-10-04
KR20030017611A (ko) 2003-03-03
NO20026262D0 (no) 2002-12-27
US20020052370A1 (en) 2002-05-02
IS6601A (is) 2002-10-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG107229A (bg) Циклопентил-заместени глутарамидни производни като инхибитори на неутрална ендопептидаза
JP4018545B2 (ja) Ｆｓａｄのためのｎｅｐ阻害剤としてのｎ−フェンプロピルシクロペンチル−置換グルタルアミド誘導体
US6660756B2 (en) N-phenpropylcyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase
CA2414112A1 (en) Treatment of male sexual dysfunction
WO2006027680A1 (en) 3-(1-carbamoylcyclohexyl) propionic acid derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase enzyme
RU2382029C2 (ru) Новые производные циклогексана
MXPA04001607A (es) Ciclohexilsulfonas novedosas.
EA005369B1 (ru) Новые соединения и композиции в качестве ингибиторов протеазы
MX2010012896A (es) Derivados de imidazolidina.
US20030105097A1 (en) Alkylamide compounds
ZA200300121B (en) Cyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as inhibitors of neutral endopeptidase.
JP2003012626A (ja) アルキルアミド化合物
AU2002241201A1 (en) N-phenpropylcyclopentyl-substituted Glutaramide Derivatives as NEP Inhibitors for FSAD
ZA200305721B (en) N-phenpropylcyclopentyl-substituted glutaramide derivatives as NEP inhibitors for FSAD.
UA74630C2 (en) Derivatives of n-fenpropylcyclopentylsubstituted glutamide as nep inhibitors for treatment of sexual dysfunction