Dérivés de céphalosporine administrables par voie orale,et leur
application thérapeutique.
La présente invention est relative à de nouveaux esters de céphalosporine, plus particulièrement à des
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méthyle, à un procédé pour leur préparation ainsi qu'à des compositions pharmaceutiques les contenant \ titre de principe actif.
Sauf en cas d'urgence, où une dose importante d'antibiotique doit être très rapidement introduite dans la circulation sanguine, la voie d'administration préférée pour les antibiotiques et, en fait, pour la plupart des médicaments sinon tous, est la voie orale, car elle permet d'administrer des doses précises du médicament, simplement, sans danger et de façon hygiénique et, en outre, sans aide ou surveillance médicale. Toutefois, parmi la multitude d'antibiotiques de type pénicilline et céphalosporine qui ont été mis au point depuis plusieurs décennies, et dont certains présentent une excellente activité antibiotique, très peu sont efficacement absorbés par le tube digestif.
En fait, parmi les antibiotiques de type céphalosporine, seuls des composés de nature très particulière, comme la céphalexine et ses analogues, ont été accessibles en pratique aux fins d'administration par voie orale. En fait, leur médiocre absorption après administration par voie orale a conduit à abandonner les travaux sur de nombreux composés, bien que ces composés puissent par ailleurs
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tentatives ont été effectuées pour améliorer l'absorption par le tube digestif en estérifiant le groupe acide 3-carboxylique de pénicillines ou le groupe acide 4-carboxylique de céphalosporines et, à ce jour, un ou deux composés de pénicilline ont été mis au point aux fins d'utilisation clinique.A la connaissance de la Demanderesse, on n'a pas obtenu de succès de cet ordre avec les composés de céphalosporine.
Après des études considérables visant l'amélioration de l'absorption des composés de céphalosporine par le tube digestif, ainsi que l'amélioration de leur concentration dans le sang après administration par voie orale, par modification chimique de composés de céphalosporine, la Demanderesse a découvert que ces propriétés sont fonction de la structure chimique totale du composé et que, même si un type de modification chimique (par exemple une estérification) s'avère couronnée de succès pour une classe particulière de dérivés de céphalosporine, il est impossible de prévoir si une modification similaire sera couronnée de succès avec d'autres classes de dérivés de cépha-
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tres parties de la molécule.
Un autre problème dont il faut tenir compte est que, même si une modification particulière rend effectivement un dérivé de céphalosporine absorbable par le tube digestif, le composé résultant peut présenter une activité antibiotique très réduite.
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méthyl-3-céphème-4-carboxylique sont respectivement décrits dans le brevet belge n[deg.] 856.045 (correspondant à la
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53-34794) et dans Tetrahedron, 34, 2733 (1978). Ces deux acides se sont avérés avoir une excellente activité antibactérienne vis-à-vis une gamme étendue de bactéries, tant Gram-positives que Gram-négatives. Toutefois, comme mis en évidence ci-après, ces deux acides sont très mal absorbés par le tube digestif et, ainsi, même s'ils étaient considérés comme suffisamment intéressants pour justifier le travail considérable et les énormes frais impliqués par leur production à l'échelle industrielle et leur utilisation pratique, leur utilisation serait confinée au domaine relativement limité de l'administration par voie parentérale.
De façon surprenante, la Demanderesse a découvert que certains esters acyloxyméthyliques très particuliers de ces acides sont très bien absorbés par le tube digestif. En outre, bien que ces esters par eux-mêmes aient une activité relativement faible vis-à-vis de nombreuses bactéries, ils sont aisément convertis par les enzymes du sang en les acides dont ils dérivent qui, comme déjà indiqué, ont d'excellentes activités vis-à-vis d'une gamme étendue de bactéries. Il s'ensuit que, grâce à la présente invention, il s'est avéré possible d'associer une très bonne absorption par le tube digestif avec une excellente activité antibiotique.
Les esters suivant la présente invention sont des composés répondant à la formule (I), et présentent tous la configuration syn:
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dans laquelle: R représente un groupe alcoyle en Cl à C7 et R2 représente un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle; ainsi que leurs sels.
L'invention vise également une composition pharmaceutique comprenant, à titre de principe actif, un ou plusieurs composés suivant l'invention, en association avec un véhicule ou diluant nharmaceutiauement acceptable.
Comme on le décrira de façon plus détaillée ci-après, les composés suivant la présente invention peuvent être préparés par les procédés suivants:
(a) en faisant réagir un 7-aminodésacétoxycéphalosporanate d'acyloxyméthyle ou un de ses sels d'addition avec un acide avec de l'acide 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(hydro-
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et/ou le groupe hydroxy sont éventuellement protégés) ou un de ses dérivés actifs puis, si nécessaire, en éliminant le(s) groupe(s) protecteur(s);
(b) en estérifiant l'acide 7-L2-(2-aminothiazol-4-yl)-2- <EMI ID=9.1>
4-carboxylique de formule (II):
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ses dérivés actifs, avec un alcool ou un de ses dérivés actifs correspondant au groupe ester qu'on souhaite introduire en position 4; ou
(c) en convertissant un autre groupe acylamino en position 7 du système céphème en le groupe 7-L2-(2-amino- <EMI ID=12.1>
haité.
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groupe alcoyle en Cl à C7 et, mieux, un groupe alcoyle en C2 à C5. Comme exemples de ces groupes alcoyle, on citera les groupes éthyle, propyle, isopropyle, butyle, t.butyle, pentyle, néopentyle et t.pentyle parmi lesquels les groupes éthyle, isopropyle, t.butyle et néopentyle sont particulièrement préférables.
Les composés de formule (I) peuvent donner des sels d'addition avec par exemple des acides minéraux (coince l'acide chlorhydrique, sulfurique, nitrique ou phosphorique) ou des acides organiques (comme l'acide maléi-
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nique, éthane sulfonique ou p.toluène sulfonique et ces sels d'addition avec des acides entrent également dans le cadre de la présente invention. Les sels d'addition avec des acides peuvent être préparés à partir des composés de formule (I) par des modes opératoires bien connus dans la technique, par exemple en mettant simplement le composé de formule (I) en contact avec l'acide choisi, en présence ou en l'absence d'un solvant approprié.
Les composés particulièrement préférés suivant l'invention sont indiqués dans la liste suivante, et les numé-
<EMI ID=15.1> pour les identifier ci-après. Les composer sont tous en la configuration syn.
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amido7-3-méthyl-3-céphème-4-carboxylate de pivaloyloxyméthyle.
2. Le 7-L2-(2-aminothiazol-4-yl)2-méthoxyiminoacét-
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amido7-3-mëthyl-3-céphème-4-carboxylate de 3,3-diméthylbutyryloxyméthyle.
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amid27-3-méthyl-3-céphème-4-carboxylate de pivaloyloxy-méthyle.
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d'addition avec des acides sont aisément absorbés par le tube digestif et atteignent rapidement une concentration efficace dans le sang. Cette propriété, ainsi que les activités antibactériennes de certains des composés suivant l'invention sont mises en évidence par les tests suivants.
Taux de récupération dans l'urine
On administre certains des composés suivant l'inven-
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50 mg/kg et on recueille l'urine des souris pendant les
24 heures suivant l'administration. On analyse l'urine et on dose la quantité du composé initial administré (ou de ses produits métaboliques) présente dans l'urine. Les résultats obtenus sont rapportés au tableau 1 ci-après, en pourcentage de la quantité initiale de composé administrée.
A titre comparatif, on effectue le même test, mais en en administrant l'un des composés suivants: <EMI ID=21.1> <EMI ID=22.1>
la formule (IIa) :
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Il s'agit là de l'acide libre correspondant aux composés suivant l'invention indiqués ici comme composes 1 à 4. Pour des raisons de commodité, on désignera ci-après cet acide libre comme "Acide (IIa)".
<EMI ID=24.1> céphème-4-carboxylate de pi valoyloxyméthyle, qui répond à la formule:
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Ce composé a précisément la même structure que celle du
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que le groupe méthyle en position 3 a été remplacé par un
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composé est identifié au tableau 1 suivant comme le "composé tétrazolique".
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acétamido7-3-méthyl-3-céphème-4-carboxylique répondant à la formule (IIb):
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Ce composé est désigne,- ci-après "Acide (IIb) et est l'acide libre dont le composé n[deg.]5 suivant l'invention est un ester.
Les résultats de tous ces tests sont rapportés au Tableau 1. Afin de démontrer que les résultats obtenus indiquent bien l'effet de tdux d'absorption différents par le tube digestif, on répète les essais, mais en administrant les composés par injection sous-cutanée. Ces résultats sont également rapportés au tableau 1.
TABLEAU 1
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Les résultats mettent nettement en évidence que le taux de récupération des composés suivant l'invention est d'au moins un ordre de grandeur supérieur au taux de récupération des acides libres dont ils proviennent. En
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5 fois supérieur à celui du composé tétrazolique dont il est très similaire d'un point de vue structurel. Les taux de récupération uniformément élevés obtenus après injection sous-cutanée démontrent que les différences substantielles mises en évidence après administration par voie orale sont significatives et ne sont pas dues, par exemple à des erreurs d'analyse ou à une rétention exceptionnelle de n'importe lequel des composés dans l'organisme. Concentrations dans le sang
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rats, en une dose unique de 50 mg/kg. A intervalles de temps réguliers après l'administration, on détermine la concentration du composé dans le sang. Les résultats obtenus sont rapportés dans le tableau 2 suivant.
TABLEAU 2
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Il ressort de ces résultats que le composé atteint une concentration très élevée dans le sang, presque la concentration maximale obtenue, en un laps de temps très court (15 minutes) mais qu'il y a persistance de concentrations significatives et efficaces dans le sang pendant au moins 3 heures.
Concentrations inhibitrices minimales
On soumet les composés suivant l'invention à des tests in vitro pour mettre en évidence leur efficacité vis-à-vis d'une gamme étendue de bactéries. Les résultats exprimés en concentrations inhibitrices minimales (ug/ml) sont rapportés au tableau 3 suivant. Comme on sait que les composés suivant l'invention sont hydrolyses par les enzymes du sang, en donnant (on le suppose) les acides libres, une indication plus fiable de l'efficacité des composés suivant l'invention est fournie par le produit de cette hydrolyse. De ce fait, les composés suivant l'invention sont tous traités par des enzymes sériques et les produits de cette hydrolyse sont également testés vis-à-vis des mêmes bactéries.
Les résultats de ces tests sont indiqués entre parenthèse au-dessous des valeurs indiquées pour les composés dont ils proviennent.
Sont également indiquées les concentrations inhibitrices minimales des deux acides libres, vis-à-vis des mêmes bactéries.
TABLEAU 3
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pneumonlae 806 (0,8)
KlebsIeUa > 200
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enteritidis Gaertner (0,8) Les résultats ci-dessus indiquent que les composés suivant l'invention sont des antibiotiques précieux utilisables en thérapeutique. Ils peuvent être associés à des véhicules ou diluants pharmaceutiquement acceptables classiques et administrés par toute voie classique pour les antibiotiques de type céphalosporine bien que, comme mis en évidence ci-dessus, ils conviennent particulièrement à l'administration par voie orale.
Pour l'administration par voie orale, ils peuvent être présentés, par exemple, sous forme de gélules, de poudres, de granulés ou de comprimés. On peut les asso-
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tose, le sucre, le carbonate de calcium ou le phosphate de calcium; des liants comme la gomme d'acacia, la carboxy méthylcellulose ou l'hydroxypropylcellulose; des lubrifiants comme le stéarate de magnésium ou le talc; ou des
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par exemple; il est bien entendu qu'on peut utiliser toute association de deux ou plus de ces adjuvants. La dose du composé suivant l'invention varie suivant l'âge, le poids et l'état du malade mais, chez l'adulte, la posologie journalière est de préférence de 0,2 à 5 g et, mieux, de
1 à 3 g; la composition peut être administrée en une seule dose ou, mieux, en 3 ou 4 prises.
Les composés suivant l'invention peuvent être prépa-
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Procédé A
Suivant ce procédé, on fait réagir un 7-aminodésacétoxy-céphalosporanate d'acyloxyméthyle de formule (III):
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sels d'addition avec un acide, avec un acide carboxylique de formule (IV):
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dans laquelle R représente un groupe amino ou un groupe
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groupe hydroxy ou un groupe hydroxy protégé; ou avec un de ses dérivés réactifs, obtenant ainsi un composé de formule (V):
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<EMI ID=56.1> d'obtenir le composé de formule (I) cherché.
Les groupes protecteurs qu'il est préférable d'uti-
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aisément éliminables pour donner un groupe amino libre. Comme exemples de groupes protecteurs appropriés, on citera: le groupe trityle, le groupe formyle, le groupe t-
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nyle qui peut être éliminé par réduction; le groupe 2méthylsulfonyléthyloxycarbonyle qui peut être éliminé par traitement à l'aide d'un alcali; et le groupe chloracétyle qui peut être éliminé par traitement à l'aide de thiourée.
Les groupes protecteurs préférés utilisés dans le groupe hydroxy protégé R 4 sont les groupes qui peuvent être aisément éliminés en laissant un groupe hydroxy. Comme exemples de ces groupes protecteurs, on citera le groupe trityle et le groupe dichloroacétyle qui peuvent tous deux être éliminés par traitement à l'aide d'un acide.
Au stade d'acylation, dans lequel on fait réagir le céphalosporanate de formule (III) avec l'acide carboxylique de formule (IV), l'acide (IV) peut être utilisé sous la forme d'acide libre ou sous la forme d'un de ses dérivés réactifs. Lorsqu'on utilise l'acide libre, il est préférable d'effectuer la réaction en présence d'un agent de condensation approprié. Comme exemples de ces agents de condensation, on citera: des carbodiimides disubstituës comme le dicyclohexylcarbodiimide: des imidazolides comme le carbonyldiimidazole ou le thionyldiimidazole; la N-
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réactif de Vilsmeier préparé à partir de diméthylformamide et, par exemple, d'oxychlorure de phosphore ou de chlorure de thionyle.
Comme exemples de dérivés réactifs de l'acide (IV) on citera l'halogénure d'acide, l'anhydride d'acide, des anhydrides d'acides mixtes, des esters réactifs, des amides réactifs et l'azide d'acide.
Comme exemples d'anhydrides d'acides mixtes, on citera des anhydrides mixtes avec: des esters mono(alcoyliques inférieurs) d'acide carbonique comme le carbonate de monométhyle ou le carbonate de monoisobutyle; ou avec des acides alcanoiques inférieurs comme l'acide pivalique ou l'acide trichloracétique. Les esters réactifs préférés sont les esters p-nitrophényliques, les esters pentachlorophényliques et les esters N-hydroxyphtalimidiques,
Il est préférable d'effectuer la réaction d'acylation
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particulièrement critique, tant qu'il n'affecte pas défavorablement la réaction. Comme exemples de solvants organiques inertes appropriés, on citera: l'acétone, la méthyl éthyl cétone, le tétrahydrofuranne, le dioxanne, l'acétate d'éthyle, le chloroforme, le dichlorométhane, l'acétonitrile, le diméthylformamide ou le diméthylsulfoxyde. On peut utiliser un seul de ces solvants, ou un mélange de deux de ces solvants ou plus. Il est également possible d'utiliser un mélange d'un ou plusieurs de ces solvants et d'eau.
Suivant la nature du dérivé réactif à utiliser, il peut être préférable d'effectuer la réaction en présence d'une base. Comme exemples de bases appropriées, on peut citer: des carbonates de métaux alcalins comme le carbonate de sodium ou le carbonate de potassium; des bicarbonates de métaux alcalins comme le bicarbonate de sodium ou le bicarbonate de potassium; ou des bases aliphatiques, aromatiques ou azotées comme, par exemple, la triéthyl amine, la dimêthylaniline, la N-méthylpipéridine, la Nméthylpyrrolidine, la pyridine, la collidine ou la lutidine.
La température de réaction n'est pas particulièrement limitée et c'est pourquoi la Demanderesse préfère normalement opérer à température ambiante ou en refroidissant. Le temps nécessaire à la réaction varie dans une large gamme, dépendant principalement de la nature des réactifs, du mode d'acylation et de la température de réaction,
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laps de temps de 10 minutes à 30 heures.
Une fois la réaction terminée, on peut séparer le composé de formule (V) du mélange réactionnel par des moyens classiques. Par exemple, si on effectue la réaction en présence d'un solvant miscible à l'eau, il est préférable d'éliminer le solvant par distillation sous pression réduite, puis de dissoudre le résidu dans un solvant non miscible à l'eau; puis il est préférable de
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obtenant ainsi le composé de formule (V). Si on utilise un solvant non miscible à l'eau, il est seulement nécessaire, normalement, de laver le mélange réactionnel à l'aide d'un acide ou d'une base, après quoi on sèche le mélange et on distille le solvant. Si nécessaire, on peut ensuite purifier le composé ainsi obtenu par des moyens classiques, par exemple par chromatographie. Toutefois, on peut normalement utiliser le composé sans purification intermédiaire si on doit ensuite le faire réagir ou le sou-mettre à des réactions d'élimination des groupes protecteurs.
Pour éliminer les groupes protecteurs, on peut faire appel à des réactions classiques, comme indiqué ci-dessus, suivant la nature du groupe protecteur. Le produit brut résultant peut ensuite être purifié afin d'obtenir le composé cherché de formule (I). Par exernple, le composé de formule (V) fourni par la réaction d'acylation peut être mis en contact avec un acide fort (comme l'acide trifluoracétique ou l'acide formique aqueux). Une fois la réaction terminée, il est préférable de concentrer le mélange réactionnel, par évaporation sous pression réduite, et de dissoudre le résidu dans un solvant non miscible à l'eau. Après lavage de la solution résultante à l'aide d'une base, on distille le solvant afin d'obtenir le composé de formule (I) cherché.
Procédé B
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do7-3-méthyl-3-céphème-4-carboxylique ou un de ses dérivés dans lequel le groupe amino et/ou le groupe hydroxy a été protégé, c'est-à-dire un composé de formule (VI):
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dans lequel R3 et R4 ont les significations précitées, ou un de ses dérivés réactifs, avec un composé hydroxylique répondant à la formule (VII):
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de ses dérivés réactifs; lorsque R <3> et/ou R4 représente un groupe protégé, on élimine le (s) groupe (s) protecteur (s) du produit résultant.
Dans cette réaction, les deux substances de départ, c'est-à-dire les composés de formule (VI) et (VII) peuvent être utilisées sous forme libre; mais la Demanderesse préfère utiliser l'un et/ou l'autre sous la forme d'un dérivé réactif. Dans le cas de l'acide de formule (VI),
le groupe à convertir en groupe réactif est le groupe acide 4-carboxylique. Comme exemples de dérivas réactifs de ce groupe acide 4-carboxylique, on citera: des sels avec des métaux (comme le sodium ou le potassium); des sels avec des amines organiques (comme la triéthylamine); l'halogénure d'acide, par exemple le chlorure d'acide ou le bromure d'acide; l'anhydride d'acide; ou l'anhydride d'acide mixte avec un carbonate, comme le carbonate d'éthyle ou le carbonate d'isobutyle.
Dans le cas du composé de formule (VII), c'est le groupe hydroxy qui doit être converti en un dérivé réactif. Comme exemples de dérivés réactifs de ce groupe hydroxy, on citera: des esters sulfonyliques comme le méthanesulfonate ou le p-toluênesulfonate; ou un dérivé halo-substitué dans lequel le groupe hydroxy a été remplacé par un atome de chlore, de brome ou d'iode. Dans cette réaction, une association d'un sel de métal alcalin de l'acide
(VI) avec un dérivé halo-substitué du composé (VII) est particulièrement préférable, car les réactions secondaires sont ainsi réduites.
Il est préférable d'effectuer la réaction en présence d'un solvant. La nature du solvant n'est pas particulièrement critique tant qu'il n'affecte pas défavorablement la réaction. Comme exemples de solvants appropriés, on citera le diméthylformamide, le diméthylacétamide, le diméthyl sulfoxyde, le triamide hexaméthylphosphorique ou l'acétonitrile.
La température de réaction n'est pas, non plus, particulièrement critique et, de ce fait, on opère normalement à la température ambiante, ou en refroidissant. Le temps nécessaire à la réaction dépend de la nature des réactifs et de la température de réaction, mais la réaction est normalement menée à bonne fin en un laps de temps de 10 minutes à 20 heures.
Une fois la réaction terminée, on peut séparer le produit du mélange réactionnel en diluant ce dernier à l'aide d'un solvant non miscible à l'eau, en lavant le mélange résultant successivement à l'aide d'une solution aqueuse de bisulfate de potassium et d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium, et en séchant le mélange, après quoi on élimine le solvant par distillation, afin d'obtenir le produit cherché. Si le groupe amino et/ou le groupe hydroxy présent dans le produit est (ou sont) protégé (5), on
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mode opératoire décrit pour le procédé A à propos du composé de formule (V).
On peut éventuellement purifier ensuite le composé résultant, de façon classique, par exemple par chromatographie.
Procédé C
Suivant ce procédé, on soumet à une nitrosation
un composé de formule (VIII):
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dans laquelle R a la signification précitée et X représente un atome d'halogène, de préférence un atome de chlore ou un atome de brome, afin d'obtenir un composé hydroxyimino de formule (IX):
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puis on fait réagir ce composé hydroxyimino avec de la thiourée afin d'obtenir un composé de formule (I) dans <EMI ID=73.1>
un composé de formule (I) dans lequel R2 représente un groupe méthyle, on éthérifie le composé de formule (IX)
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groupe hydroxy, de façon classique.
On peut effectuer la nitrosation du composé de formule (VIII) en faisant appel à des modes opératoires bien connus pour la nitrosation des /^-dicétones. Par exemple, on peut effectuer la réaction en faisant réagir le composé de formule (VIII) en milieu acide avec un nitrite, par exemple un sel d'acide nitreux (comme le nitrite de sodium ou le nitrite de potassium) ou un ester d'acide nitreux
(comme le nitrite d'amyle ou le nitrite de butyle) . La température de réaction n'est pas critique et, pour des raisons de commodité, la Demanderesse préfère opérer à une température égale ou inférieure à la température ambiante. Le temps nécessaire à la réaction varie suivant la nature de l'agent de nitrosation, mais la réaction est normalement menée à bonne fin en un laps de temps de 10 minu.tes à 5 heures. Cette nitrosation produit préférentiellement l'isomère syn.
Une fois la réaction terminée, on peut séparer le composé de formule (IX) du mélange réactionnel par des moyens classiques. Par exemple, on peut le recueillir en distillant simplement le solvant sous pression réduite. On peut éventuellement purifier le composé résultant, de façon classique, par exemple par chromatographie.
La réaction du composé résultant de formule (IX) avec de la thiourée est une réaction courante d'un composé
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tuée simplement en mettant les deux réactifs en contact dans un solvant approprié. La nature du solvant utilisé n'est pas particulièrement critique, tant qu'il n'affecte pas défavorablement la réaction. Comme exemples de solvants préférables, on citera le diméthylformamide, l'acétamide ou l'acétonitrile. Le présence d'une base permet de mener la réaction à bonne fin; les bases préférées sont des carbonates ou bicarbonates de métaux alcalins, comme le bicarbonate de sodium ou le bicarbonate de potassium. La température de réaction n'est pas critique et, comme la réaction s'effectue bien à température ambiante, c'est à cette température qu'il est préférable d'effectuer la réaction.
Le temps-nécessaire à la réaction dépend des réactifs et de la température de réaction, mais la réaction est normalement menée à bonne fin en un laps de temps de 10 minutes à 5 heures.
Une fois la réaction terminée, on peut séparer le composé résultant de formule (I) dans lequel R <2> représente un atome d'hydrogène du mélange réactionnel, par des moyens classiques. Par exemple, une fois la réaction terminée, on concentre le mélange réactionnel par évaporation sous pression réduite et on dissout le résidu résultant dans un solvant organique approprié. On lave cette
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solvant afin d'obtenir le produit cherché. On peut ensuite purifier ce produit de façon classique, par exemple par chromatographie.
Avant ou après réaction du composé de formule (IX) avec de la thiourée, on peut éthérifier le groupe hydroxyimino de façon classique, afin de le convertir en groupe méthoxyimino, obtenant ainsi un composé de formule (I) dans lequel R2 représente un groupe méthyle.
<EMI ID=77.1> titre d'illustration de l'invention.
EXEMPLE 1
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(a) A une solution de 145 mg d'acide 2-(chloroacétamidothiazol-4-yl)-2-méthoxyiminoacétique (isomère syn) dans
10 ml de tétrahydrofuranne anhydre on ajoute 0,074 ml de triéthylamine'et 0,068 ml de chloroformiate d'isobutyle, tout en refroidissant sur de la glace et en agitant. Après avoir agité le mélange pendant une heure, on ajoute 191mg <EMI ID=80.1>
pivaloyloxyméthyle et 0,074 ml de triêthylamine. On agite le mélange résultant à température ambiante pendant 20 heures, après quoi on distille le tétrahydrofuranne sous pression réduite. On dissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on lave la solution résultante, successivement, à l'acide chlorhydrique dilué, à l'eau, à l'aide d'une solution aqueuse à 5% pds/vol de bicarbonate de sodium et à l'eau, et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre; puis on concentre par évaporation sous pression réduite. On purifie le résidu par chromatographie préparative en couche mince en utilisant une couche de gel de silice (F-254, fournie par Merck & Co.) de 20x20x0,5 cm et en développant à l'aide d'un mélange 1/2 en volume de benzène et d'acétate d'éthyle. On obtient 72 mg du 7-L2-
<EMI ID=81.1>
(isomère syn) cherché sous la forme d'une substance amorphe jaune (Rf: environ 0,5).
<EMI ID=82.1>
<EMI ID=83.1>
(b) On dissout 72 mg du composé obtenu au stade (a) et
19 mg de thiourée dans 2 ml de diméthylacétamide et on agite la solution à température ambiante pendant 24 heures. On verse la solution réactionnelle sur une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 5% pds/vol et on extrait le mélange résultant à l'acétate d'éthyle. On sèche l'extrait sur sulfate de magnésium anhydre et on concentre par évaporation sous pression réduite. On purifie le résidu par chromatographie en couche mince (CCM) prêparative en utilisant une couche de gel de silice (F-254, fourni par Merck & Co.) de 20x10x0,05 cm, en développant à l'aide d'acétate d'éthyle, obtenant ainsi 46 mg du produit cherché, sous la forme d'une poudre rose pâle (Rf: environ 0,43) .
<EMI ID=84.1>
<EMI ID=85.1>
EXEMPLE 2
Cet exemple illustre un autre mode de préparation du
<EMI ID=86.1>
oxyméthyle, qui est la substance de départ utilisée au stade (b) de l'exemple 1.
On ajoute 500 mg de 7-/2-(2-chloroacétamidothiazol-
<EMI ID=87.1>
carboxylate de sodium (isomère syn) et 230 mg de pivalate de bromométhyle à 5 ml de diméthyl sulfoxyde et on agite la solution à température ambiante pendant 15 minutes.
On dilue le mélange réactionnel à l'aide de 20 ml d'acétate d'éthyle, on lave successivement à l'aide d'une solution aqueuse saturée de bisulfate de potassium et d'une solution aqueuse à 5% pds/vol de bicarbonate de sodium, et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre.
On élimine le solvant par distillation sous pression réduite. On purifie le résidu par CCM préparative en <EMI ID=88.1>
l'exemple 1, obtenant ainsi 250 mg de 7-/2-(2-chloro-
<EMI ID=89.1>
méthyl-3-céphème-4-carboxylate de pivaloyloxyméthyle
(isomère syn).
EXEMPLE 3
<EMI ID=90.1>
<EMI ID=91.1>
On ajoute 500 mg de 7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-
<EMI ID=92.1>
de sodium (isomère syn) et 220 mg de pivalate de bromométhyle à 5 ml d'un mélange 1/1 en volume d'acétate d'éthyle et de diméthyl sulfoxyde. On agite le mélange à température ambiante pendant 15 minutes, après quoi on dilue à l'aide de 20 ml d'acétate d'éthyle, on lave successivement à l'aide d'une solution aqueuse saturée de bisulfate de potassium et d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 5% pds/vol, et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre. On élimine le solvant par distillation. On purifie le résidu par CCM préparative en utilisant du gel de silice comme décrit au stade (b) de l'exemple 1, obtenant ainsi 100 mg de 7-L2-(2-aminothiazol-
<EMI ID=93.1>
carboxylate de pivaloyloxyméthyle (isomère syn). EXEMPLE 4
<EMI ID=94.1>
(isomère syn); (Composé n[deg.]5)
(a) On dissout 0,55 ml de dicétène distillé dans 5 ml de <EMI ID=95.1>
On ajoute goutte à goutte à cette solution une solution de 0,36 ml de brome dans 5 ml de chlorure de méthylène
à -30[deg.]C, en 20 minutes. Une fois l'addition terminée,
on continue à agiter pendant 10 minutes. On porte ensuite la température du mélange à 5[deg.]C et on ajoute goutte à goutte une solution de 1,82 g de chlorhydrate de 7-amino-désacétoxycéphalosporanate de pivaloyloxyméthyle et 1,12 ml de diéthylaniline dans 40 ml de chlorure de mé-
<EMI ID=96.1>
puis on distille le solvant sous pression réduite. On dissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle et on lave la solution résultante, successivement, à l'acide chlorhydrique dilué, à l'eau, à l'aide d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 5% pds/vol et à l'eau, et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre. On élimine le solvant par distillation sous pression réduite, obtenant ainsi un résidu amorphe marron qu'on purifie par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant à l'aide d'un mélange 1/1 en volume de benzène et d'acétate d'éthyle, ce qui fournit 1,95 g de 7-(4-bromo-3-oxobutyryl-
<EMI ID=97.1>
méthyle sous la forme d'une substance amorphe marron pâle.
CCM sur gel de silice. Développement à l'aide d'un mélange benzène/acétate d'éthyle 1/1 en volume. Rf: 0,6.
<EMI ID=98.1>
<EMI ID=99.1>
(b) On dissout 915 mg du composé obtenu ci-dessus dans 5 ml d'acide acétique cristallisable. On ajoute. 130 mg de
<EMI ID=100.1>
on agite le mélange à température ambiante pendant une heure. On élimine le solvant par distillation sous pression réduite et on dissout le résidu dans de l'acétate d'éthyle. On lave la solution résultante à l'aide d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium et on sèche ' sur sulfate de magnésium anhydre. On concentre la solution par évaporation sous pression réduite et on purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant à l'aide d'un mélange 3/1 en volume de benzène et d'acétate d'éthyle, obtenant ainsi 770 mg de 7-.(4bromo-3-oxo-2-hydroxyiminobutyrylamino)-3-méthyl-3-
<EMI ID=101.1>
syn) sous la forme d'une substance amorphe marron pâle. CCM sur gel de silice. Développement à l'aide d'un mélange benzène/acétate d'éthyle 3/1 en volume. Rf: 0,32.
<EMI ID=102.1>
<EMI ID=103.1>
(c) On dissout 770 mg du composé obtenu au stade (b) et
112 mg de thiourée dans 5 ml de diméthylformamide et on agite la solution à température ambiante pendant 1,5 heure. On additionne la solution de 125 mg de bicarbonate de sodium et on agite le mélange résultant pendant 30 minutes. On élimine le solvant par distillation sous pression réduite. On ajoute 40 ml d'eau et 40 ml d'acétate d'éthyle au résidu et on agite le mélange résultant. On sépare la couche d'acétate d'éthyle qu'on lave à l'aide d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium et sèche sur sulfate de magnésium anhydre. On élimine le solvant de la solution par distillation sous pression réduite.
On purifie le résidu résultant par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant à l'aide d'un mélange 10/1 en volume de chloroforme et de méthanol, obtenant ainsi 740 mg de 7-/2-(2-aminothiazol-4-yl)-2- <EMI ID=104.1>
de pivaloyloxyméthyle sous la forme d'une poudre jaune pâle.
<EMI ID=105.1>
<EMI ID=106.1>
EXEMPLE 5
<EMI ID=107.1>
<EMI ID=108.1>
On dissout 1,7 g d'acide 2-(2-tritylaminothiazol-4yl) - 2 -tri ty lhydroxyiminoacétique (Tetrahedron, 34, page
2233 (1978)) dans 20 ml de chlorure de méthylène. On ajou-
<EMI ID=109.1>
agite le mélange pendant une heure. On additionne le mélange de 0,8 g de 7-aminodésacétoxycéphalosporanate de
<EMI ID=110.1>
mélange à la même température pendant 2 heures. On sépare l'insoluble par filtration et on lave le mélange, succes. sivement, à l'acide chlorhydrique IN, à !;eau, à l'aide d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 5% pds/ vol et à l'eau, et on sèche sur sulfate de sodium anhydre.
On débarrasse la solution du solvant, par distillation sous pression réduite. On additionne le résidu de 5 ml d'acide trifluoracétique et on agite à température ambiante pendant 30 minutes. On dilue ensuite le mélange réactionnel à l'aide de 50 ml d'éther diisopropylique et on recueille le précipité résultant sur un filtre. On dissout le précipité dans 10 ml de tétrahydrofuranne; on ajoute 5 ml d'une solution aqueuse d'acide formique à 50% pds/vol et on agite le mélange à 50[deg.]C pendant 15 minutes. On distille le solvant sous pression réduite. On additionne le résidu de 20 ml d'acétate d'éthyle et d'une solution aqueuse de bicarbonate de sodium à 5% pds/vol, on secoue, puis on sépare la couche organique.
On distille le solvant sous pression réduite et on purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice en éluant à l'aide d'un mélange 10/1 en volume de chloroforme et de méthanol, obtenant ainsi 400 mg du 7-L2-(2-
<EMI ID=111.1>
cherché, sous la forme d'une poudre jaune pale. Le produit. obtenu a les mêmes propriétés physico-chimiques que le produit de l'exemple 4.
EXEMPLE 6
<EMI ID=112.1>
méthyl-3-céphème-4-carboxylate de pivaloyloxyméthyle, isomère syn (Composé n[deg.]5)
<EMI ID=113.1>
de sodium (isomère syn) et 220 mg de pivalate de bromométhyle dans 5 ml d'un mélange 1/1 en volume d'acétate d'éthyle et de diméthylsulfoxyde, puis on agite le mélange à température ambiante pendant 30 minutes. Puis on dilue le mélange réactionnel à l'aide de 20 ml d'acétate d'éthyle, on lave successivement à l'aide d'une solution aqueuse saturée de bisulfate de potassium et d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre. On distille le solvant sous pression réduite, et on purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice, en éluant
à l'aide d'un mélange 10/1 en volume de chloroforme et de méthanol, obtenant ainsi 150 mg du 7-L2-(2-aminothia-
<EMI ID=114.1>
carboxylate de pivaloyloxyméthyle (isomère syn) cherché. EXEMPLE 7
<EMI ID=115.1>
méthyl-3-céphème-4-carboxylate d'isobutyryloxyméthyle , isomère syn, (Composé n[deg.]2)
(a) On agite à température ambiante, pendant 14 heures, <EMI ID=116.1>
carboxylique (isomère syn), 316,8 mg d'isobutyrate de chlorométhyle et 244 mg de fluorure de potassium dans
10 ml de diméthyl sulfoxyde. On dilue le mélange réac-
<EMI ID=117.1>
successivement à l'eau, à l'aide d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium, à l'aide d'une solution aqueuse saturée de bisulfate de potassium et à l'aide d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, et on sèche sur sulfate de magnésium anhydre. On distille ensuite le solvant sous pression réduite et on purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice
(Wakogel C-200, produit de Wakojunyaku Co., Ltd.) en éluart à l'aide d'un mélange 1/1 en volume de chloroforme et d'acétate d'éthyle, obtenant ainsi 308 mg de 7-/2-(2-
<EMI ID=118.1>
(isomère syn) sous la forme d'une substance amorphe jaune.
<EMI ID=119.1>
<EMI ID=120.1>
(b) On dissout 308 mg du composé obtenu au stade (a) et
61 mg de thiourée dans 3 ml de diméthylacétamide et on agite le mélange à température ambiante pendant 14 heures. On verse ensuite le mélange réactionnel sur 10 ml d'une solution aqueuse saturée de bicarbonate de sodium et on extrait à l'aide de 30 ml d'acétate d'éthyle. On lave l'extrait, successivement, à l'aide d'une solution aqueuse saturée de bisulfate de potassium et d'une solution aqueuse saturée de chlorure de sodium, on sèche sur sulfate de magnésium anhydre et on concentre par évaporation sous pression réduite. On purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice (Wakogel C-200, produit de Wakojunyaku Co., Ltd.) en éluant à
<EMI ID=121.1>
cherché, sous la forme d'une poudre incolore.
<EMI ID=122.1>
<EMI ID=123.1>
EXEMPLE 8
<EMI ID=124.1>
méthyl-3-céphème-4-carboxylate de propionyloxyméthyle,
<EMI ID=125.1>
(a) On agite à température ambiante, pendant une heure, <EMI ID=126.1>
4-carboxylique (isomère syn), 194 mg de propionate de bromométhyle et 122 mg de fluorure de potassium dans 5 ml de diméthylsulf oxyde. On traite ensuite le mélange réactionnel comme décrit pour le stade (a) de l'exemple 7,
<EMI ID=127.1>
carboxylate de propionyloxyméthyle (isomère syn) sous la forme d'une substance amorphe jaune pâle.
<EMI ID=128.1>
1,17 (3H, triplet, J=7,0 Hz)
<EMI ID=129.1>
(b) On dissout 300 mg du composé obtenu au stade (a) et
61 mg de thiourée dans 3 ml de diméthylacétamide. On reprend ensuite le mélange comme décrit au stade (b) de <EMI ID=130.1>
sous la forme d'une poudre incolore.
<EMI ID=131.1>
<EMI ID=132.1>
EXEMPLE 9 <EMI ID=133.1> méthyle, isomère syn (Composé n[deg.]4)
(a) On agite à température ambiante, pendant une heure, <EMI ID=134.1>
xylate de sodium (isomère syn) et 240 mg de 3,3-diméthyl butyrate de bromométhyle dans 5 ml d'un mélange 1/1 en volume de diméthylsufoxyde et d'acétonitrile. On dilue ensuite le mélange réactionnel à l'aide de 50 ml d'acétate d'éthyle, on lave successivement à l'aide d'une solu-tion aqueuse saturée de bicarbonate de sodium et d'une solution aqueuse saturée de bisulfate de potassium, on sèche sur sulfate de magnésium anhydre et on concentre par évaporation sous pression réduite. On purifie le résidu par chromatographie sur colonne de gel de silice, en éluant à l'aide d'un mélange 1/1 en volume de chloroforme et d'acétate d'éthyle, obtenant ainsi 258 mg de 7-L2-(2-
<EMI ID=135.1>
méthyle (isomère syn) sous la forme d'une substance amorphe jaune pâle.
<EMI ID=136.1>
<EMI ID=137.1>
(b) On dissout 258 mg du composé obtenu au stade (a) et
97 mg de thiourée dans 2 ml de diméthylacétamide et on reprend la solution résultante comme décrit au stade (b) <EMI ID=138.1>
<EMI ID=139.1>
<EMI ID=140.1>
<EMI ID=141.1>
REVENDICATIONS
1. Dérivés de céphalosporine utilisables notamment comme antibiotiques, caractérisés en ce qu'ils sont des composés répondant à la formule (I),dans la configuration syn:
<EMI ID=142.1>
<EMI ID=143.1>
en Cl à C7; et R<2> représente un atome d'hydrogène ou un groupe méthyle;
ainsi que leurs sels.