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"Nouvelles compositions coamétiquoa pour eoaba''o 3,c chute des cheveux et procéda de pr6p(ti tic OOG compositions".
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rigine est due 4 des oaraotères génétiques s, il e#aii"40 un certain nombre de cas où. le chute dos oheveus psu être évitée et compensée par 1Ul repousse.
On sait également, à le. sui-co d'un <;4;#1=?,i:1, nombre de recherches qui ont été effectuées pa? divans auteurs, que la repousse des cheveux set :?oncti# 12 fois d'une bonne irrigation des follio-alos pilc1 c-o, do
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la. présence dens le cuir chevelu, au cours des premiers
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iJ>biiié<; de la croinzance des follicules pileux, de certains facteurs n6)aboliquos spécifiques indispensables' La. présente invention vise à apporter au cuir chvell\ ces facteuru qui lui sont indisponsabies pour lutter contre la chute des cheveux.
Selon l'invention, Ion facteurs en question sont apporta par des extraira biologiques qui on été sé-
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lootloniieis après de nombrauses expériences pour leur offi- cacité toute particulière dans le domaine considère.
La présente invention a pour objet le produit industriel nouveau que constitue une composition cognât!-'
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que p; ;m>S%am3 de lutter contre la chute des cheveux, cette 6tant essentiellecient caractérisée par le fait q;>.iéll.1 aonlicn.% comme produit actif dos extraits de peau prl:Uvés sur des ioetua de bovinés d'un poids de 0,8 à Yrz ou. t31.'Ll' des foetus divines dtun poids de 500 à 900
Les compositions selon l'invention peuvent se présenter sous forme de lotions, de crèmes ou de gela qui-
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peuven'a également contenir d'autres substances connues pour lutter contre la chute des cheveux, ainsi que tous les ingrédients généralement utilisés en cosmétique.
Les produits actifs entrant dans les compositions selon l'invention sont prélevés sur des foetus de
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boi;inôJ, dù prôfôroii<o snt. des foetus femelles qui pèsent do 0,8 à 2 kg et mesurent de 24 à 35 cm de long, ce qui correspond à une période de gestation de 110 à 150 jours.
Les produits actifs entrant dans les composi- tions selon l'invention peuvent être également prélevés sur des foetus d'ovinés pesant de 500 à 900 grammes et
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ayant une longueur de 23 à 29 emi ce qui. c=*#-.># >vnù "1 temps de gestation de 75 à 100 jours.
Dans les deux cas indiquas ci<"des dos bo%"1nés et des ovines, le moment ou l'on pr61.r'o le icotuc pour préparer les compositions selon l'invention correcpond au moment où. commence la formation des follicules pileux, mais où. on ne peut encore observer sur la pesu aucun poil ou aucune lanosité marquée.
La présente invention a également pour objet un procédé de préparation du produit actif entrant dans des compositions cosmétiques précitées, ce procéda étant essentiellement caractérisé par le fait que l'on préleva dans des conditions aseptiques la peau des foetus présen-
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tant les caractéristiques indiquées oi-doesus, qu'on refroidit cette peau à une température comprise entre envi-ron 0 et 40 0- puis qu'on la broie à cette tempupatuyc dans une certaine quantité d'eau diatil160 Dt6rilo, qu'on sépare l'extrait aqueux ainsi obtenu par eontrifutio ou filtration et qu'on procède enfin à la lyophilisation de cet extrait.
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Dans une première variante du proc6d6 selea l'invention, on procède à la congélation dos pex 4à.> foetus puis à leur broyage à sec en prsc,.ioc de ,jlc-o# carbonique.
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Dans une seconde variante du proo±lô adon l'invention, on procède à la lyopidlin?;ivn dic j,c;j=jr embryonnaires, puis on prépare l'extrait Z\oJj;lZ [,10 à;ril:1:a du lyophilisât.
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Pour préparer les produits actifs sela ?.'ir."vontion, on commence par examiner les batoc s,bag.àioeo -¯.jir,
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de ne retenir que les foetus provenant de bêtes en bonne . santé,qui présentent notamment des matrices saines, et sur lesquelles on ne peut relever aucun symptôme pa- thologique, On évite aussi de prélever des peaux foetales qui ont subi des traumatismes.
Il ne semble pas que la race bovine ou ovine ait une importance sur la qualité du produit actif pré- paré selon l'invention. Toutefois, il est préférable de prélever la peau sur des foetus de bovinés de sexe féminin.
Immédiatement après l'abattage de l'animal gestant on prélevé la matrice dans des conditions rigou- reuses d'asepsie classique.
La matrice est ensuite ouverte dans des condi- , fions stériles sous rayons UV. Le foetus est alors prélevé et on ligature le cordon ombilical de manière à éviter de polluer la peau avec le sang.
On procède ensuite au prélèvement de la peau du foetus en prenant soin de ne pas prélever également de tissu sous-cutanée qui à certains endroits tels qu'aux aisselles et aux flancs, adhère à la peau.
On lave ensuite la peau dans deux bains suc- cessifs de sérum physiologique et on la met dans des bocaux stériles. Puis on la congèle à des températures d'environ -70 0.
Les peaux ainsi congelées peuvent être oonser- vées d'une manière satisfaicante pendant plusieurs se- mainec si on les place dans une enceinte réfrigérée 11 -20 O. environ.
En opérant dans les conditions les plus
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aseptiques possible , on dÓOOl1Bèlc la poau u c #.,= . sa température entre 0 et 4 C. environ.
On procéda ensuite au. broJ"bü t10 1>z p:#:,i# ii l'aide d''un broyeur à iaâohoiree ou à 11f:'.1Jt/J,):" . ;,;. "; , -i j.-; de deux parties en poids d'eau distilla #.':àz.;l.l',<i 1,....:=.. port au poids de peau* On conduit le broyage de ai#::LL:"i b, t;s .1## ' . subsiste dano la suspension aucun zo;Tuo;;ig d#; Í:' '7:: veillant toutefois à éviter tC11t ôahi:iit±T>;:o##15 1#h.l# .:Fi ,: :'',:!. est en effet nécessaire de maintenir le. %--ùi.j;±:: =#Jli;#.:= dessous de 4 0. au coure du broyage poux' ëvitox* 't<; ;3, ; altération enz1matique Dans une variant9, on gr-ntt proc: .¯;#i loe>:i;j.: . de la puau à à l'état console ot on pi;-5aii;+i; <ii Lce carboniquop ce qui pf3rmot dl obtauir Tma po.a<L:#r .' 7 "rpeut mettre ensuite dans de l'eau distilla. #àp>t.#, . on termine le broyage à 1 'aide de broye3'3 pim= i#;.,;¯=, mâchoires ou à palettes.
On évite ainsi d'ii?<.:l.:.> i# .-/ - tuer un broyage trop long, risquant dé prn=vcq<#n:#< \1!l échauffement indésirable.
On ajoute ensuite à la préparation obtonuo comme il vient d'être dit, un antiseptique puissant et atoxique,, tel que du merthiolate à une conùonbz'ai;ic:n 'lc 2/100 000.
On abandonne alors les suspensions aqueuu dans des récipients stériles placés dans une -iiii:z froide pendant quelques heures.
On procède.ensuite à la séparation d:> ylzl -,tie aqueuse de ces suspensions en aen.tri±w=>1;?5c pc-.r exemple pendant une heure à 4 000 tours/minute on en
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filtrat sur plaquée clarifismtce filtrantes, par exemple teileu que celles connues sous la dénomination de "typo C<5 C0l SZITZ"1
On compile l'extraction du produit actif en reprenant avec -une partie enpoids par rapport au poids
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;l'.:1 peau, d'eau les culots de contrifugation un Io e,'3t3i(lu yastant sur le filtre, puis on prooède l ;:"nc <iiu;1.éwoù oentrifuation oa à uno deuxiôms yiltya- tion.
Les deux extraits aqueux ainsi obtenus sont
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61ar:.3ÓI3/Ji Ils sont très troubles et légèrement pigmen- tés.
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A titre de 00%1tr010,. on vérifie par examen oiiu o!#t;opiqito qaT eee extraits ne présentent pas de particules en sv,op+nmion>
L'extrait aqueux ainsi obtenu constitue le produit actif entrant dans les compositions selon l'in-
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vention4 Il peut être oonser-eé à l'état lyophilisé et place en flacons stériles bouchés à 11 é- merl dans une chambre froide.
Il peut être dans certains cas avantageux
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d'ajou+.er au milieu aqueux dans lequel on effectue l'extraction, des agents complexants, tels que le citrate trisodique à des concentrations de 0104 à 0,05 mole/li- tre, de manière à éviter certaines actions enzymatiques nuisibles à l'activité biologique de l'extrait,
De même, il est également intéressant d'ajouter au milieu aqueux à partir duquel on effectue l'ex-
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teactîone des corps réducteurs tels que le chloitydrate de cystéine à une dose de 10 g/litre par exemple.
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Il est bien. entendu que le produit selon l'invention peut être employé seul ou en mélange avec d'en- tres produits cosmétiques tels que antiséborrhéiques, antipelliculaires, etc...
Dans le but de mieux faire comprendre l'invention, on va décrire maintenant à titre d'illustration, et sans aucun caractère ].imitatif, plusieurs modos do r6ali- sation des compositions cosmétiques selon l'invention.
EXEMPLE 1
Sur 3 vaches gestantes de 4 mois, no présentant aucun symptôme pathologique, on prélevé les matrices à l'abattage. Ces matrices sont convenablement nettoyées à l'eau, puis à l'aide d'une solution d'ammoniums quatornaires.
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On place chaque matrice ù##ns un bac (le éicrt.ù-. tion et on les ouvre, dans une chambre s'çô=ilq, nsaj ultra-violet, à l'aide de matériel stdrilo. 01=. pi16?,b-.<> alors chaque foetus, Le cordon ombilical e>.l d'a,bc#<à 3" ,za>twô elG i3eotiorJ..!'lé. On a isolé ailloi im oUL. #nF11 r ,,.>. sant 1,300 kg, mesurant 30 cm et deux fo<3tpj .i'<;1.i?t,z. ;i 1 ,?00 Jzep mesurait 50 CE et 1,100 kg ixoùiwiy;>Yà S (;k, j On suspend les foetus à des .#:.Jélacl:i: ;.t;J , ii.. et on prélève les peaux à l'aide de i>i#>n o-ù .r t:/ =is=-= ris atbrileo, en preimnl bien coin do no lX).:J n".--' de fragments de tissu sous-cutané.
L'ensemble dec troin p;a>3z 1;bi* 300 ,' On passe les peaux dans 5 f1'dN" [,:,\r,,1,>:' j ::') e,-, solution de Na. al à 9 g p 1 000, puis <m i ec; },3aeo dr un bocal ctêrilc hermétiquement ferme joui; lao iiniiij=;#,
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à -70 C dans un bac à carboglace.
Les peaux sont ainsi conservées µ -70 C jus- qutau moment de leur traitement pour extraire le produit actif.
Les peaux sont alors ramonées à la température de 0 0 et broyées dans des tubes stériles, plongeant dans un bain de glace, en présence de 400 ml d'eau distil- lée stérile, contenant 2 p 100 000 de merthiolate de so- dium. Nous avons utilisé pour cette opération un broyeur Ultraturrax dont la tige a été préalablement stérilisée.
30 à 40 secondes de broyage par tube de 100 ml suffisent en général pour obtenir une suspension parfaitement homo- ., gène, où. ne subsiste aucun morceau de peau.
Après broyage, on bouche les tubes, on les pla- ce sur agitateur en chambre froide pendant une nuit, puis on les centrifuge pendant 1 h à une vitesse de 4 000 tours/minute.
La partie surnageante est ensuite prélevée stérilement et le culot remis en suspension dans 200 ml d'eau contenant 2 p 100 000 de merthiolate de sodium.
Après une nouvelle centrifugation, la partie surnageante est prélevée et mélangée avec la précédente.
Ces parties surnageantes sont ensuite lyophi- lisées.
Après lyophilisation, la poudre obtenue est conservée dans des flacons hermétiquement bouchés, en chambre froide.
On obtient 6,4 g d'extrait correspondant à
90 % du produit sec. La teneur en protéines est de l'or- dro de 58 %.
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EXEMPLE 2
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On a procédé d'une manière c-n tour;: oinf- #.=i- ;=* tiquo à celle décrite dans l'exemple p>;±ciJùsnii, i;<;, 1:=- =¯-. tant les peaux de deux foetus ovins de C50 C flà ;li, ',.'5 29 cm de longueur, donnant 95 g de peau qui cii>1 j?c#=#.## 2,8 g d'extrait à 56 % de protéine.
±J1#lIa'LE On prélève des peaux et on les ccnle -.?OS comme dans l'exemple i. Ces peaux sont ensuite broiY6u'" ?> sec$ en présence do oarooglace, de façon à obtenir Ur-0 poudre fine qui est ensuite dispersée dans 1'eo.u à rai son de 2 parties d'eau contenant 2 je 100 000 do ;or.9iiiolata de sodium pour une partie de peau, et la àspennion est homogénéisée au mixer. Apres un repos de quelques heures, on filtre la suspension sur filtre C Cotres Seitz.
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Le résidu déposé sur le filtre est coiwe#i;;ÎJlx<- ment rincé avec 1 volume d'eau contenant 2 p 100 CCO de merthiolate de sodium. Les filtrats sont ensuite rassemblés et lyophilisés comme dans l'exemple 1.
EXEMPLE 4
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On prépare l'extrait lyophilisé d'U3 nK'.niye identique à celle de l'exemple 1 en rumplaoMTb contenant 2 p 100 000 de merthiolate de sodium ppy do l'ca.''.i contenant 0,02 mole/litre de citrate trisomique et 2 p 100 000 de merthiolate de sodium
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EXBî-TPLB A L'extrait préparé selon l'exemple 1, 2 ou
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aîuqouc dî,èctemeiit dans du. gel carbopol amené à pH t1" Cû dernier est préparé en dissolvent du carbopol 940 ià ac 1 G pour 100 ml d'eau distillée, à 700 0, jUÎl obtaut1on <le= gel homogène* Après refroidissement, le c&1 oct amené à pH St à l'aide d'une solution d'ammoon triturant au mortier pour bien homogénéiser, et ni% Mditionn6 de rierthiolate de sodium à 2 p 100 000.
Dans le gel ainsi formé on ajoute directement l'extrait
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lyoph:t1isé Ù raison do 2 g pour 1 000 g de gel,, une quantit6 suffisante de parfum, et on triture jusqp'à complote dissolution. Cette préparation est ensuite répartie en tubes de 15 g.
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BBÎ-TPI.E.B
On réalise la préparation suivante :
Extrait lyophilisé selon l'exemple 1, 2 ou 3 ... 2 g
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- Cystéine chlorhydrate ..*....*.........*...*:.. 10 g Gel carbopol'ph 8 préparé selon l'exemple A q.s.p. l ooo g
Le chlorhydrate de cystéine étant incorporé et% gel en même tempe que l'extrait lyophilisé..
EXEMPLE C
On réalise la préparation suivante :
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- extrait lyophilisé selon l'exemple 4 . ....... 3g - Gel carbopol pH 8 préparé selon l'exemple A q.s.p. 1 000-g
EXEMPLE D
On réalise la préparation suivante :
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- Extrait lyophilisé selon l'exemple 4.....*... 3g cystéine chlorhydrate ........................ 10 g .- gel carbopol pH 8 préparé selon l'exemple A q.s.p. 1 000 g
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EXEMPLE E
On réalise la préparation suivante :
Extrait lyophilisé selon l'exemple 1 , 2 ou 3 .... 2 g
LB 23 lyophilisé (produit contenant du liquide amniotique prélevé sur un bovidé à une période de gestation inférieure à 40 la du temps complet de gestation .................................... 10 g selon le brevet français N 1 440 616 du 18
Aout 1964.
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- Parfum wssvevrwsswewowswswsaw.ewexswsr C,..r3v - Gel carbopol pH 8 préparé selon l'exemple A ....1 000 G
Le LB 23 est incorporé au gel en même temps que l'extrait embryonnaire lyophilisé.
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EXEï TP1E F
On réalise la préparation suivante
Extrait lyophilisé embryonnaire selon l'exem-
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ple 1, 2 ou 3 e s w r . a s f - Parfum fleRf .11...s..ee...!!st.!! q.o.
- Solution alcoolique à 20 % "..".,.,,'t........1 000 iàl EXEMPLE G On réalise la préparation suivante:
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.. Extrait lyophilisé embryonnaire selon l'exoEpla 4 1 t:; {J dl-méthionine, S1V.4 s e . e w a y e s 4 w s t i s i t . s ! °'±d p - Parfum wwsewawsw.ylswassssaras.ersvs '3.tC< Solution alcoolique 20% .......................1 000 s, EXEMPLE H
On réalise la préparation suivante
Extrait lyophilisé selon l'exemple 1, 2 ou 3 ... 2 C
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- LD ;, "22hiJ:io6 f i 1 W s . y t W 1 s y v i i . 3 W ! s s 1 fi j; ee ,svswss.elewvs.ssoowrxssasos..e .o.
Eau diatillt" . t ... " ........ " .. " . " , ... " ... " .. " ".1 0Ci% 1 On 'l3,:i :'-...:+!'J \'130"ficnt faire U(1úGo do cpc
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préparations en observant le mode d'emploi suivant :
Une petite noisette de gel ou 2 à 3 ml de solution aqueuse ou alcoolique est appliquée quotidiennement sur le cuir chevelu sec. Le cuir chevelu sera conscien- cieusement massé avec le bout des doigts après l'application en insistant sur les régions où les cheveux ont le plus -tendance 4 tomber.
Au cours du traitement, les cheveux peuvent être lavés une fois parsemaine, ou plus, avec un shampooing doux. lies examens effectués sur les composés actifs entrant dans les compositions selon l'invention ont montré que l'extrait sec correspond 4 entre 2,5 et 3,5 % du poids de la peau do foetus à partir de laquelle cet ex- trait a été obtenu.
De plus, on a également pu constater que 55 à 65 % en poids de cet extrait soc sont constitués par des protéines.
On a également pu constater que l'extrait sec contient environ 1,7 % de phosphore, 1/3 environ de cette quantité étant dialysable et soluble en milieu acide.
La Société demanderesse a effectué des essais de toxicité sur des animaux.
A cet effet, un lot de 30 souriceaux âgés de 48 heures a été divisé en doux groupes de 15 animaux chacun. Tous les souriceaux ont continua à être allaités par leur mère. Le premier groupe a reçu, pendant 10 jours, une injection sous-cutanée quotidienne de 16 mg par kilo d'animal, do l'extrait ses lyophilisé dissous dans du sérum physiologique,
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Les anima= du dou:;:H1Í;) r;':;î}Y.o :;t':1..ù..:?. ds,nt la mOrne période, ot dnn3 100 H31ô:.;n t'v:1.,1 :;,;(. " :;. m-âme volume de serusi p?.a..c.# ; s¯¯r4¯ ;ry:. , ¯.. ro. j- à;prés oette période, les animzwxt ont ëtff- s,fr5s::T:' ¯:
. - 8,u,près de 14ur mère, iueiqulau oV'ra-:.;o Cf',l:) '.1..1' :-;12.-,;" injection ne leur solo appliqua. p's#3 bzz -lOt,...... il '1'1'1'1 >±4-# #-=".I=.-.. ( , ..., . telît6 et on nif, obc:-;:""'V'G aucun !!l6n{p:::'!',J de ':Ù'.'êJ R:: croissance des ania.aux, dans les deus ODC: 3'-.'.', poursuivie normalement et aucune différence n'te 6' at 4üJ.GYG entre les animaux traités avec â.'o.V.n4'"$ ces bzz ph11iaé et les animaux témoins.
Par ailleurs, on ce ffctu6 doc =.x..=v: -¯ quotidieïines du produit actif en solution Gn0 C': ' des souriceaux à partir de leur a-aissanco c'ë ,')::l ":";'; .'" jours, à la dose de 0,05 ml par B(;"':''::d..(;t,:,Ut Ù;t':..l .¯4¯ tion contenant 12 mg/ml de produit actif, ainsi 311 mu des rats mâles Wistar, âgés d'environ 6 t::i=:Q m" f pliquant le produit sur une aire dorsale de 15 ea? T'"-' ' lablement tondue, ceci pendant 20 jours à la dozo do 0,5 ml pour chaque rat d'une solution aquCtHJC:1 12 f!:.:::/ ml de produit actif.
Dans aucun cas il n'a été possible de relever le moindre symptôme toxique local ou. général.
L'activité cosmétique des compositions selon l'invention a été testée initialement sur deux lets de 100 jeunes rats mâles, chacun pesant environ 100 grames.
Tous les rats ont été tondus sur une aira dorsale de 15 cm2.
Chaque rat du lot témoin a reçu pendant 22
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ou.ï-3 ,ne application quotiù1cnne d ' <J.oen dictillée à ranison d;) .of5 rea par rat, tandis qs chaque rat de l'autre lot "-"<Jcov;;,it égülero:nt 11011ert-nt 22 jours, une application (la 0,5 ml d'une solution aqueuse contenant le composé actif selon l'invontion présent dans la solution
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?<ju#i,ii;a raison de 12 tRg/s!l* Apya cha"u.e application, les rats étaient isolas :tndJ.r:tdu.oJ.le:r."nt <1::11113 des box où il ne leur était pas pssible de ne lâcher sur l'aire dorsale tondue qui avait reçu l'application*
Après un séjour de deux heures dans ces box individuels, les rats étaient remis dans les cages qui
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lour sarvc;t'1:
!; d t habi tation..
Des observations cliniques concernant la repousse des poils ont été pratiquées sur chacun des animaux au septième et au quatorzième jours. Après quoi les animaux ont subi une deuxième tonte sur la zone dorsale de 15 cm2 qui avait été tondue avant le début de l'expérimentation. Puis les animaux ont subi un examen clinique deux fois par semaine pendant 45 jours.
Tendait les 14 premiers jours, c'est-à-dire entre la première et la. deuxième tonteon n'a pu observer de différence entre le lot témoin et le lot .ayant subi l'application du composé selon l'invention.
Cet état de fait ;résulte de ce que le produit actif doit 8tre présent dans la peau avant et au cours de la phase pilogène.
Il a été constaté au moment où l'on a effectua la deuxième tonte, que les animaux des deux groupes possèdaient leur pelage normal.
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L'examen, de la pousse des poils après la deuxième tonte a montré que dans le lot des animaux traitas selon l'invention, l'apparition des poils avait environ sept jours d'avance pax rapport à l'apparition dos poila chez les animaux du lot témoin.
Cette différence entre les animais: du lot té- moin et ceux du lot traité selon l'invention s'est !Bain- tenue jusqu'à ce que tous les animaux aient retrouvé leur pilosité normale.