BE622212A

BE622212A -

Info

Publication number: BE622212A
Authority: BE

Description


   <Desc/Clms Page number 1> 
 



  Vaccins et leur préparation. 



   La présente invention concerne des vaccins qui confèrent   l'immunité   contre des .maladies à virus, ainsi que leur préparation* 
On sait qu'un individu non   Immunisé   peut être protégé      contre une maladie à virus en   l'immunisant   par un vaccin contenant un virus vivant, ayant une relation immunologique avec le virus   vi-          rulent,   maisanon pathogène lui-même. Un tel vaccin peut contenir une souche atténuée provenant du virus virulent- L'efficacité du vaccin dépend de la viabilité du virus qu'il contient.

   (La   viabili-   té est la proportion de virus capable de recommencer à croître et à se reproduire dans un milieu   convenable}.'   
La rougeole est une maladie à virus et l'homme peut   être   protège contre la rougeole par une vaccination à l'aide d'un virus 

 <Desc/Clms Page number 2> 

 
 EMI2.1 
 de la rougeole atténué. La préparation d'un vaccin de virus atténua de la rougeole ayant une durée de conservation satisfaisante notait guère possible jusqu'à présent en raison do l'instabilité du virus. l 9 virus est Instable dans des milieux aqueux ne contenant pas de protéine, et il perd sa viabilité par conservation non seulement raz 4*C, mais même à -70'C. 



  On z découvert à présent qu'il est} possible d'obtenir par lyophilisation un Vaccin de virus atténué de la rougeole ayjafit une stabilité satisfaisante, à partir d'un ulllieu aqueux en présence d sorbitol comme stabilisant  Une certaine perte de viabilité peut s produire au cours de la lyophilisation, 'mais elle est beaucoup plus petite en présence de sorbitol qu'en son absence* Li fret avantageux semble spécifique du sorbitol, étant donné que d'autres hydrates de carbone sont beaucoup moins efficaces comme stabili- santal Il en est ainsi de sucres réducteurs coiuae le glucose ou le lactose, de sucres non réducteurs comme 'le saccharose, due polysaccharides comme le dextrane at même d'autres alcools-gueren comme le mannitol* La concentration en sorbitol dans 'le vaccin humidje aven la lyophilisation,

   est dje préférence d'au inoino 1* et des dnceent tiona de 4 a 6> sont convenables, bien qu'on puisse en utiliser q atteignent 10*. ào vaccin humide peut contenir d'autres additifs outre le sorbitols l'utilisation du sorbitol et du dextranoi par exemple, conduit à un vaccin lyophilisé moifis hygroscopique ayant un meilleur aspect que celui obtenu en utilisant le sorti toi seul LOOZeu4ils suivent illustre 'invention. p ,aorvtra I& rug,6eol On fait proliférer un virus atténué de la rougeole (soue knatra) dans une culture a* tissus d'embryons de poulets.

   Les cel t- les obtenues par traitement par la trypsine d'embryons de poulets décapités, de 7 à 11 Jours, sont aises en suspension dans un nili nutritif contenant du sérum et introduites dans des fioles de cul re de houx* Les cultures sont Incubées à 37*C jusqu#à la formation d'une couche continue de cellules puis sont infectées de virus de 

 <Desc/Clms Page number 3> 

 la rougeole. Chaque culture est lavée avec une solution   saline   
 EMI3.1 
 --équilibrée* deux iavant l'inoculation du virus et deux rois après que le virus ait été en contact avec les cellules pendant 1      heure.

   Les cultures sont entretenues à l'aide du milieu SM 199 et 
 EMI3.2 
 incubée* à 320C pendant 7 à 14 jours* Wout le liquide d'un lot de cultures est recueilli et les débris cellulaires grossiers sont sé- parés par oentrifugation.   e   vaccin numide   récolté     ainsi,   contenant 
 EMI3.3 
 le virus de la rougeole en milieu M 1'J1J, est conservé à * 4 C jusqu'au moment de la lyophilisation* 
A 700   ci* 3   de vaccin humides on ajoute 100 cm3de solution 
 EMI3.4 
 de sorbitol à 40J dans le milieu SI.\ 199.

   Ce mélange contenant 5 de sorbitol est conditionné en ampoules à raison de 0,5   car 3   par ampoule et lyophilisé pour obtenir un vaccin contre la rougeole 
 EMI3.5 
 stable, La lyophilisation est exécutée en deux temps'#' le premier en utilisant un condenseur à neige carbon1qu...aJ.coolj et le second en utilisant de l'anhydride   phosphorique   comme desséchant. 



  On prépare des vaccins   analogues   contre la rougeolé, qui 
 EMI3.6 
 sont stables, par lyopliilisation de vaccins humldea contenant (a) 5it de kiorbitol plus 6 de dextrane, (b) > ce sorbitol  et (4) li de sorbitoi pns 6> de dextrane. a b v e a D I.C A T:I 0 N 8 
1.- Procédé pour obtenir un vaccin de   virus   atténué de la rougeole, d'une stabilité   satisfaisante,     Caractérisé   en ce   qu'on   obtient le virus atténué de la   rougeole   par lyophilisation d'un   mi-   lieu aqueux contenant du sorbitol.

Claims

2.- Procédé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que la concentration ou sorbitoi est comprise entre 1 et 10.

3.- Procédé suivant là revendication 1, caractérisé en ce que la concentration du sorbitoi est comprise entre 4 et 6..

4.- Procédé pour obtenir un vaccin de virus atténué de la rougeole, d'une stabilité satisfaisante, en substance comme décrit ci-dessus avec référehce à l'exemple* . EMI3.7 5.- Vaccin dt virus atténué de la rougeole d'une stabi- lité satisfaisante, préparé par un procédé suivant l*une ou <Desc/Clms Page number 4> l'autre des revendications 1 à 4. atténué 6.- Vaccin lyophilisé comprenant un virus atténué de la rougeole et du sorbitol*