BE1027237B1 - Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins - Google Patents

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Abstract

Die Erfindung veröffentlicht ein Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins, das die folgenden Schritte umfasst: (1) Herstellen eines myofibrillären Proteins: (2) Auflösen und Konzentrieren des myofibrillären Proteins, um ein Konzentrat zu erhalten; (3) Hinzufügen Pyrogallussäure zu dem Konzentrat, homogenes Mischen, und Stillstehen bei RT, um eine Lösung von gemischten Proteinen zu erhalten; (4) Vakuumverpacken der Lösung von gemischten Proteinen und Behandlung bei einem Ultrahochdruck; und (5) programmiertes Erwärmen und danach rasches Abkühlen des im Schritt (4) erhaltenen Materials, um das stark gelartigen myofibrillären Protein zu erhalten. Bei der Erfindung wird die Antioxidationsfähigkeit der Pyrogallussäure ausgenutzt, um der Oxidationsgrad des Systems von myofibrillären Proteinen zu verringern, und eine Behandlung unter Ultrahochdruck wird angewandt, um die innere Struktur der myofibrillären Proteine zu verändern und damit eine regelmäßige dreidimensionale Netzwerkstruktur zu bilden. Die Erfindung eignet sich für die Regelung der Qualität der Fischfleischprodukte im Bereich von Hilfsmitteln für Behandlung der Lebensmittel.

Description

Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins
TECHNISCHES GEBIET Die Erfindung betrifft die Herstellung eines myofibrillären Proteins, insbesondere ein Verfahren zur Herstellung eines stark gelartigen myofibrillären Proteins.
STAND DER TECHNIK Myofibrilläre Proteine sind eine Art salzlöslicher Proteine mit wichtigen biologischen Funktionen, welche den Hauptanteil der Muskelfaser bilden und 50% bis 55% des sämtlichen Inhalt der Proteine ausmachen. Dazu gehören die Proteine Myosin, Actin, Tropomyosin, Troponin usw. Die myofibrillären Proteine nehmen an die Muskelkontraktion teil und beeinflussen die Zartheit des Fleisches sowie die funktionellen Eigenschaften des Fleischprodukts, wie z. B. die Gelbildungsfähigkeit, Rheologie, Wasserhaltung, Elastizität und Beschaffenheit. Dabei hat die Gelbildungsfähigkeit der myofibrillären Proteine eine große Bedeutung bei der Behandlung des Produkts der Art Fisch-Maische. Unter Gel ist ein elastischer Halb-Festkörper zu verstehen, der einen Zustand zwischen einem Festkörper und einer Flüssigkeit einnimmt und ein regelmäßiges Aussehen sowie eine bestimmte Form aufweist. Die Gelbildung der Proteine wird durch die Spaltung der nicht kovalenten Bindungen und die Änderung in der oberflächlichen Struktur der Proteine nach einer Regelung der umgebenden Bedingungen oder einer Heizung verursacht. Insbesondere fördert die Freisetzung hydrophober Gruppen die Wechselwirkung zwischen den Proteinen, so dass die Molekülen der Proteinen unter Polymerisation ein homogenes Gel mit einer Netzwerkstruktur bilden.
Durch die Forschungen wurde gezeigt, dass während des Vorgang der Klärspülung und Ablage das Fleisch von Makrele anfällig für Oxidation war, so dass der Gehalt an Carbonylgruppen erheblich erhöht wurde (Sylvie, Carolinep et al. 2015). Bei der Regenbogenforelle wird die chemische Wirkungskraft, wie. z. B. die hydrophobe Kraft, die Schwefel-Schwefel- Bindung, und die nicht kovalente Bindung, durch die Oxidation der Proteine verändert, so dass die Konfiguration und die Aggregation der Proteinmolekülen sich ändert (Herrera and Mackie 2004). Die Oxidation der Proteine im Fischfleisch werden auch durch die radikalische Kettenreaktion hervorgerufen, wobei die freie Radikale zunächst das Peptidgerüst mit aktiven Seitenketten angriff (Sante-Lhoutellier, Aubry et al. 2007), beispielerweise Cystein, Tryptophan, und Lysin, so dass Derivate mit Carbonylgruppen erzeugt werden und die Anzahl an Mercaptogruppen verringert wird. Dies führt zu einer schlechteren Gelbildungsfähigkeit, niedrigeren Elastizität, und reduzierten Wasserhaltung der oxidierten Proteine im Fischfleisch.
INHALT DER VORLIEGENDEN ERFINDUNG Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung liegt darin, die Nachteile im Stand der Technik zu überwinden und ein Verfahren zur Herstellung eines stark gelartigen myofibrillären Proteins bereitzustellen. In der vorliegenden Erfindung werden die folgenden technischen Lösungen verwendet: 1) Herstellen eines myofibrillären Proteins Hinzufügen einer ersten Pufferlösung für Trennung zu einer zerkleinerten Fisch-Maische, Homogenisieren und Zentrifugieren, um die lôslichen Proteine abzutrennen und einen Niederschlag zu erhalten; Hinzufügen einer zweite Pufferlösung für Trennung, Homogenisieren, Filtern durch Gaze und
Zentrifugieren der Lösung, wobei der Niederschlag das myofibrilläre Protein ist. 2) Auflösen und Konzentrieren des myofibrillären Proteins Hinzufügen des ım Schritt 1) erhaltenen myofibrillären Proteins zu einer kalten Lösung für Auflösung, Homogenisieren, Stillstehen bei 0°C für 30 min, Zentrifugieren, Entnehmen des Überstands, und Konzentrieren mit einem Ultrafiltrationsrohr. 3) Antioxidation des myofibrillären Proteins Hinzufügen Pyrogallussäure zu dem im Schritt 2) erhaltenen myofibrillären Protein, homogenes Mischen, und Stillstehen für 1 - 5 Stunden, um ein Lösungssystem von gemischten Proteinen zu erhalten. 4) Behandlung bei einem Ultrahochdruck Vakuumverpacken der im Schritt 3) erhaltenen Lösung von gemischten Proteinen und Behandlung bei einem Ultrahochdruck von 100 - 600 MPa für 5-30mm. 5) thermisch induzierte Gelbildung Stellen des im Schritt (4) erhaltenen Produkts in einem Wasserbad bei 20°C, programmiertes Erwärmen bei einer Geschwindigkeit von 1°C/min bis 85°C, Halten der Temperatur von 85°C für 30 min, und Stillstehen nach raschem Abkühlen bei 0°C für 12 Stunden, um das myofibrilläre Protein zu erhalten.
Im Schritt 1) im obigen Verfahren weist die erste Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 6.9 - 7.1 auf und beinhält 0.08 - 0.12 M KCI, 1.8 - 2.2 mM MeCl,, 0.8 - 1.2 mM EGTA, 0.4 - 0.6 mM DTT und 8 - 11 mM K,HPO,. Die zweite Pufferlösung für Trennung weist einen pH-Wert von 5.9 - 6.1 auf und beinhält 0.08 - 0.12 M NaCl und 0.8 - 1.2 mM NaN:. Das Homogenisieren im Schritt (1) wird unter der Bedingung von 7000 - 10000rpm für 3 - 8 min durchgeführt.
Das Zentrifugieren wird unter den Bedingungen von 7000 - 9000rpm bei 4 - 8°C für 10 - 30min durchgeführt.
und wobei ım Schritt 2) die Lösung für Auflösung eine Lösung mit 0.5 - 1.0 M NaCl und einem pH-Wert von 7.0 - 8.0 ist. Im Schritt 3) beträgt die Konzentration der hinzugefügten Pyrogallussäure 6umol/g von Proteinen - 300umol/g von Proteinen.
Im Schritt 4) dauert beim Vakuumverpacken die Evakuierung 15 - 60 s, die thermische Verpackung 1.0 - 3.0 s; der Druck bei der Ultrahochdruckbehandlung beträgt 100 - 600 MPa, und der Druck wird für 5 - 30 min halten.
Die Erfindung weist die folgende vorteilhaften Aspekte auf: Bei der Erfindung wird die Antioxidationsfähigkeit der Pyrogallussäure ausgenutzt, um der Oxidationsgrad des Systems von myofibrillären Proteinen zu verringern, und eine Behandlung unter Ultrahochdruck wird angewandt, um die innere Struktur der myofibrillären Proteine zu verändern und damit eine regelmäßige dreidimensionale Netzwerkstruktur zu bilden. Die Erfindung eignet sich für die Regelung der Qualität der Fischfleischprodukte im Bereich von Hilfsmitteln für Behandlung der Lebensmittel.
KURZE BESCHREIBUNG DER ZEICHNUNG Figur 1 zeigt ein Ablaufdiagramm der vorliegenden Erfindung.
Figur 2 zeigt die SEM-Bilder (Scanning Electron Microscopy) der stark gelartigen myofibrillären Proteine, die unter verschiedenen Behandlungsbedingungen gemäß den Ausführungsbeispielen 1 bis 4 der Erfindung erhalten wurden.
AUSFÜHRLICHE BESCHREIBUNG Die technische Lösungen der vorliegenden Erfindung werden durch die konkreten Ausführungsbeispiele im Zusammenhang mit den Figuren näher beschrieben und darstellen.
Beispiel 1 Es ist aus Fig. 1 ein Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins ersichtlich, das die folgenden Schritte umfasst: (1) Hinzufügen einer ersten Pufferlösung für Trennung zu einer zerkleinerten 5 Fisch-Maische, Homogenisieren und Zentrifugieren, um die löslichen Proteine abzutrennen und einen ersten Niederschlag zu erhalten; Hinzufügen einer zweite Pufferlösung für Trennung zu dem ersten Niederschlag, Homogenisieren, Filtern durch drei Schichte von Gaze zur Erhaltung einer Flüssigkeit, und Zentrifugieren, um einen zweiten Niederschlag zu erhalten; wobei die erste Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 7.0 aufweist und 0.1 MKCI, 2 mM MgCh, 1 mM EGTA, 0.5 mM DTT und 10 mM K,HPO-, beinhält; und die zweite Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 6.0 aufweist und 0.1 M NaCl und 1 mM NaN; beinhält. In diesem Schritt wird das Homogenisieren unter der Bedingung von 8000rpm für 5min und das Zentrifugieren unter den Bedingungen von 8000rpm bei 4°C für 15min durchgeführt.
(2) Hinzufügen einer kalten Pufferlösung für Auflösung zu dem zweiten Niederschlag, Homogenisieren, Stillstehen bei 0°C für 30min, Entnehmen des Überstands nach Zentrifugierung, und Konzentrieren mit einem Ultrafiltrationsrohr, um ein Konzentrat mit einer Konzentration von 20 mg/mL zu erhalten; wobei die Lösung für Auflösung eine Lösung mit 0.6 M NaCl und einem pH-Wert von 8.0 ist. In diesem Schritt wird das Zentrifugieren unter den Bedingungen von 8000rpm bei 4°C für 15min durchgeführt.
(3) Hinzufügen Pyrogallussäure zu dem Konzentrat, homogenes Mischen, und Stillstehen bei RT für 2 Stunden, um eine Lösung von gemischten Proteinen zu erhalten; wobei die Konzentration der Pyrogallussäure in dem Konzentrat 300umol/g von Proteinen beträgt.
(4) Vakuumverpacken der Lösung von gemischten Proteinen für 30 s, thermisches Verpacken der Vakuumverpackung für 2.5 s und Behandlung bei einem Ultrahochdruck von 400 MPa für 15 min. (5) Stellen des im Schritt (4) erhaltenen Materials in einem Wasserbad bei 20°C, Erwärmen bei einer Geschwindigkeit von 1°C/min bis 85°C, Halten der
Temperatur für 30min, und dann sofort Stillstehen bei 0°C für 12 Stunden, um das stark gelartige myofibrilläre Protein zu erhalten.
Beispiel 2
(1) Hinzufügen einer ersten Pufferlösung für Trennung zu einer zerkleinerten Fisch-Maische, Homogenisieren und Zentrifugieren, um die löslichen Proteine abzutrennen und einen ersten Niederschlag zu erhalten; Hinzufügen einer zweite Pufferlösung für Trennung zu dem ersten Niederschlag, Homogenisieren, Filtern durch drei Schichte von Gaze zur Erhaltung einer
Flüssigkeit, und Zentrifugieren, um einen zweiten Niederschlag zu erhalten; wobei die erste Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 7.0 aufweist und 0.1 MKCI, 2 mM MgCh, 1 mM EGTA, 0.5 mM DTT und 10 mM K,HPO-, beinhält; und die zweite Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 6.0 aufweist und 0.1 M NaCl und 1 mM NaN:; beinhält.
In diesem Schritt wird das Homogenisieren unter der Bedingung von 8000rpm für 5min und das Zentrifugieren unter den Bedingungen von 8000rpm bei 4°C für 15min durchgeführt. (2) Hinzufügen einer kalten Lösung für Auflösung zu dem zweiten Niederschlag, Homogenisieren, Stillstehen bei 0°C für 30min, Entnehmen des
Überstands nach Zentrifugierung, und Konzentrieren mit einem Ultrafiltrationsrohr, um ein Konzentrat mit einer Konzentration von 20 mg/mL zu erhalten; wobei die Lösung für Auflösung eine Lösung mit 0.6 M NaCl und einem pH-Wert von 8.0 ist.
In diesem Schritt wird das
Zentrifugieren unter den Bedingungen von 8000rpm bei 4°C für 15min durchgeführt. (3) Vakuumverpacken des Konzentrats für 30 s, thermisches Verpacken der Vakuumverpackung für 2.5 s und Behandlung bei einem Ultrahochdruck von 400 MPa für 15 min. (4) Stellen des ım Schritt (3) erhaltenen Materials in einem Wasserbad bei 20°C, Erwärmen bei einer Geschwindigkeit von 1°C/min bis 85°C, Halten der Temperatur für 30min, und dann sofort Stillstehen bei 0°C für 12 Stunden, um das Produkt zu erhalten.
Beispiel 3 (1) Hinzufügen einer ersten Pufferlösung für Trennung zu einer zerkleinerten Fisch-Maische, Homogenisieren und Zentrifugieren, um die löslichen Proteine abzutrennen und einen ersten Niederschlag zu erhalten; Hinzufügen einer zweite Pufferlösung für Trennung zu dem ersten Niederschlag, Homogenisieren, Filtern durch drei Schichte von Gaze zur Erhaltung einer Flüssigkeit, und Zentrifugieren, um einen zweiten Niederschlag zu erhalten; wobei die erste Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 7.0 aufweist und 0.1 MKCI, 2 mM MgCh, 1 mM EGTA, 0.5 mM DTT und 10 mM K;HPO, beinhält; und die zweite Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 6.0 aufweist und 0.1 M NaCl und 1 mM NaN; beinhält. In diesem Schritt wird das Homogenisieren unter der Bedingung von 8000rpm für 5min und das Zentrifugieren unter den Bedingungen von 8000rpm bei 4°C für 15min durchgeführt.
(2) Hinzufügen einer kalten Lösung für Auflösung zu dem zweiten Niederschlag, Homogenisieren, Stillstehen bei 0°C für 30min, Entnehmen des Überstands nach Zentrifugierung, und Konzentrieren mit einem Ultrafiltrationsrohr, um ein Konzentrat mit einer Konzentration von 20 mg/mL zu erhalten; wobei die Lösung für Auflösung eine Lösung mit 0.6 M NaCl und einem pH-Wert von 8.0 ist. In diesem Schritt wird das Zentrifugieren unter den Bedingungen von 8000rpm bei 4°C für 15min durchgeführt.
(3) Hinzufügen Pyrogallussäure zu dem Konzentrat, homogenes Mischen, und Stillstehen bei RT für 2 Stunden, um eine Lösung von gemischten Proteinen zu erhalten; wobei die Konzentration der Pyrogallussäure in dem Konzentrat 300umol/g von Proteinen beträgt.
(4) Stellen der Lösung von gemischten Proteinen in einem Wasserbad bei 20°C, Erwärmen bei einer Geschwindigkeit von 1°C/min bis 85°C, Halten der Temperatur für 30min, und dann sofort Stillstehen bei 0°C für 12 Stunden, um das Produkt zu erhalten. Beispiel 4 (1) Hinzufügen einer ersten Pufferlösung für Trennung zu einer zerkleinerten Fisch-Maische, Homogenisieren und Zentrifugieren, um die löslichen Proteine abzutrennen und einen ersten Niederschlag zu erhalten; Hinzufügen einer zweite Pufferlösung für Trennung zu dem ersten Niederschlag, Homogenisieren, Filtern durch drei Schichte von Gaze zur Erhaltung einer Flüssigkeit, und Zentrifugieren, um einen zweiten Niederschlag zu erhalten; wobei die erste Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 7.0 aufweist und 0.1 MKCI, 2 mM MgCh, 1 mM EGTA, 0.5 mM DTT und 10 mM K,HPO-, beinhält; und die zweite Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 6.0 aufweist und 0.1 M NaCl und 1 mM NaN; beinhält. In diesem Schritt wird das Homogenisieren unter der Bedingung von 8000rpm für 5min und das Zentrifugieren unter den Bedingungen von 8000rpm bei 4°C für 15min durchgeführt.
(2) Hinzufügen einer kalten Pufferlösung für Auflösung zu dem zweiten Niederschlag, Homogenisieren, Stillstehen bei 0°C für 30min, Entnehmen des Überstands nach Zentrifugierung, und Konzentrieren mit einem Ultrafiltrationsrohr, um ein Konzentrat mit einer Konzentration von 20 mg/mL zu erhalten; wobei die Lösung für Auflösung eine Lösung mit 0.6 M NaCl und einem pH-Wert von 8.0 ist. In diesem Schritt wird das Zentrifugieren unter den Bedingungen von 8000rpm bei 4°C für 15min durchgeführt. (3) Stellen des im Schritt (2) erhaltenen Konzentrat in einem Wasserbad bei 20°C, Erwärmen bei einer Geschwindigkeit von 1°C/min bis 85°C, Halten der Temperatur für 30min, und dann sofort Stillstehen bei 0°C für 12 Stunden, um das Produkt zu erhalten. Es ist aus Fig. 2 ersichtlich, dass im Beispiel 1, in dem die myofibrillären Proteine mittels der Pyrogallussäure in Kombination mit der Behandlung unter Ultrahochdruck erhalten wurden, das Gel aus Proteine kleine Poren, feine Partikel und ein regelmäßiges, ordentliches Netzwerk aufweist. Es ist daher besser als die anderen Beispiele hinsichtlich der Eigenschaft des Gels.
Dem Fachmann sollte klar sein, dass die technischen Wirkungen gleich oder ähnlich wie in den obigen Beispielen dennoch erhalten werden können und ebenfalls im Schutzbereich der Erfindung enthalten werden sollen, solang sich die technischen Lösungen der Erfindung innerhalb des nachfolgenden Bereiches ändern: Ein Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins umfasst die folgenden Schritte: (1) Hinzufügen einer ersten Pufferlösung für Trennung zu einer zerkleinerten Fisch-Maische, Homogenisieren und Zentrifugieren, um die lôslichen
Proteine abzutrennen und einen ersten Niederschlag zu erhalten; Hinzufügen einer zweite Pufferlösung für Trennung zu dem ersten Niederschlag, Homogenisieren, Filtern und Zentrifugieren, um einen zweiten Niederschlag zu erhalten; wobei die erste Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von
6.9-7.1 aufweist und 0.08 - 0.12 M KCI, 1.8 - 2.2 mM MgC1, 0.8 - 1.2 mM EGTA, 0.4 - 0.6 mM DTT und 8 - 11 mM K,HPO-« beinhält; wobei die zweite Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 5.9 - 6.1 aufweist und 0.08 -
0.12 M NaCl und 0.8 - 1.2 mM NaN; beinhält; (2) Hinzufügen einer kalten Lösung für Auflösung zu dem zweiten Niederschlag, Homogenisieren, Stillstehen bei 1 - 2°C für 25 - 40 min, Entnehmen des Überstands nach Zentrifugierung, und Konzentrieren mit einem Ultrafiltrationsrohr, um ein Konzentrat zu erhalten; wobei die Pufferlösung für Auflösung eine Lösung mit 0.5 - 0.7 M NaCl und einem pH- Wert von 7.9 - 8.1 ist; (3) Hinzufügen Pyrogallussäure zu dem Konzentrat, homogenes Mischen, und Stillstehen bei RT für 1 - 5 Stunden, um eine Lösung von gemischten Proteinen zu erhalten; wobei die Konzentration der Pyrogallussäure in dem Konzentrat 6u - 300umol/g von Proteine beträgt; (4) Vakuumverpacken der Lösung von gemischten Proteinen und Behandlung bei einem Ultrahochdruck von 100 - 600 MPa für 5 - 25 min; und (5) Stellen des im Schritt (4) erhaltenen Materials in einem Wasserbad bei 18 - 22°C, Erwärmen bei einer Geschwindigkeit von 0.8 - 1.2°C/min bis 82- 86°C, Halten der Temperatur für 25 - 40 min, und dann sofort Stillstehen bei 0°C für 10 - 13 Stunden, um das verstärkt gelartige myofibrilläre Protein zu erhalten. das Homogenisieren im Schritt (1) unter der Bedingung von 7000 - 10000rpm für 3 - 8 min durchgeführt wird. das Zentrifugieren in den Schritte (1) und (2)
unter den Bedingungen von 7000 - 9000rpm bei 4 - 8°C für 10 - 30min durchgeführt wird.
Oben wurden nur die bevorzugten Beispiele der Erfindung beschrieben, die den Umfang der Erfindung nicht beschränken sollen.
Alle äquivalenten Veränderungen und Modifikationen, die gemäß dem Patentumfang der Erfindung und dem Inhalt der Beschreibung vorgenommen werden, sollen im bedeckten Bereich der Erfindung liegen.

Claims (1)

  1. Patentansprüche
    1. Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins, dadurch gekennzeichnet, dass das Verfahren die folgenden Schritte umfasst: (1) Hinzufügen einer ersten Pufferlôsung für Trennung zu einer zerkleinerten Fisch-Maische, Homogenisieren und Zentrifugieren, um die löslichen Proteine abzutrennen und einen ersten Niederschlag zu erhalten; Hinzufügen einer zweite Pufferlösung für Trennung zu dem ersten Niederschlag, Homogenisieren, Filtern und Zentrifugieren, um einen zweiten Niederschlag zu erhalten; wobei die erste Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von
    6.9 - 7.1 aufweist und 0.08 - 0.12 MKCI, 1.8 - 2.2 mM MgCh, 0.8 - 1.2 mM EGTA, 0.4 - 0.6 mM DTT und 8 - 11 mM K,HPO-« beinhält; wobei die zweite Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 5.9 - 6.1 aufweist und 0.08 -
    0.12 M NaCl und 0.8 - 1.2 mM NaN; beinhält; (2) Hinzufügen einer kalten Lösung für Auflösung zu dem zweiten Niederschlag, Homogenisieren, Stillstehen bei 1 - 2°C für 25 - 40 min, Entnehmen des Überstands nach Zentrifugierung, und Konzentrieren mit einem Ultrafiltrationsrohr, um ein Konzentrat zu erhalten; wobei die Lösung für Auflösung eine Lösung mit 0.5 - 0.7 M NaCl und einem pH-Wert von 7.9 -8.list; (3) Hinzufügen Pyrogallussäure zu dem Konzentrat, homogenes Mischen, und Stillstehen bei RT für 1 - 5 Stunden, um eine Lösung von gemischten Proteinen zu erhalten; wobei die Konzentration der Pyrogallussäure in dem Konzentrat 6u - 300umol/g von Proteinen beträgt; (4) Vakuumverpacken der Lösung von gemischten Proteinen und Behandlung bei einem Ultrahochdruck von 100 - 600 MPa für 5 - 25 min; und (5) Stellen des im Schritt (4) erhaltenen Materials in einem Wasserbad bei 18 - 22°C, Erwärmen bei einer Geschwindigkeit von 0.8 - 1.2°C/min bis 82-
    86°C, Halten der Temperatur für 25 - 40 min, und dann sofort Stillstehen bei 0°C für 10 - 13 Stunden, um ein Gel der verstärkt gelartigen myofibrillären Proteine zu erhalten.
    2. Verfahren zur Herstellung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass, die erste Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 7.0 aufweist und 0.1 M KCI, 2 mM MgCl,, 1 mM EGTA, 0.5 mM DTT und 10 mM K,HPO4 beinhält.
    3. Verfahren zur Herstellung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass, die zweite Pufferlösung für Trennung einen pH-Wert von 6.0 aufweist und
    0.1 M NaCl und 1 mM NaN; beinhält.
    4. Verfahren zur Herstellung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass, wobei die Lösung für Auflösung eine Lösung mit 0.6 M NaCl und einem pH- Wert von 8.0 ist.
    5. Verfahren zur Herstellung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass, das Homogenisieren im Schritt (1) unter der Bedingung von 7000 - 10000rpm für 3 - 8 min durchgeführt wird.
    6. Verfahren zur Herstellung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass, das Zentrifugieren in den Schritte (1) und (2) unter den Bedingungen von 7000 - 9000rpm bei 4 - 8°C für 10 - 30min durchgeführt wird.
    7. Verfahren zur Herstellung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass, der Schritt (4) umfasst: Vakuumverpacken der Lösung von gemischten Proteinen und Behandlung bei einem Ultrahochdruck von 400 MPa für 15 min.
    8. Verfahren zur Herstellung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet dass, der Schritt (5) umfasst: Stellen des im Schritt (4) erhaltenen Materials in einem Wasserbad bei 20°C, Erwärmen bei einer Geschwindigkeit von 1°C/min bis 85°C, Halten der Temperatur für 30min, und dann sofort
    Stillstehen bei 0°C für 12 Stunden, um ein Gel des stark gelartigen myofibrillären Proteins zu erhalten.
    9. Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins, umfassend 1) Herstellen eines myofibrillären Proteins: Hinzufügen einer ersten Pufferlösung für Trennung zu einer zerkleinerten Fisch-Maische, Homogenisieren und Zentrifugieren, um die löslichen Proteine abzutrennen und einen Niederschlag zu erhalten; Hinzufügen einer zweite Pufferlösung für Trennung, Homogenisieren, Filtern durch Gaze und Zentrifugieren der Lösung, wobei der Niederschlag das myofibrilläre Protein ist; 2) Auflösen und Konzentrieren des myofibrillären Proteins: Hinzufügen des im Schritt 1) erhaltenen myofibrillären Proteins zu einer kalten Lösung für Auflösung, Homogenisieren, Stillstehen bei 0°C für 30 min, Zentrifugieren, Entnehmen des Überstands, und Konzentrieren mit einem Ultrafiltrationsrohr; 3) Antioxidation des myofibrillären Proteins: Hinzufügen Pyrogallussäure zu dem im Schritt 2) erhaltenen myofibrillären Protein, homogenes Mischen, und Stillstehen für 1 - 5 Stunden, um ein Lôsungssystem von gemischten Proteinen zu erhalten; 4) Behandlung bei einem Ultrahochdruck Vakuumverpacken der im Schritt 3) erhaltenen Lösung von gemischten Proteinen und Behandlung bei einem Ultrahochdruck von 100 - 600 MPa für 5 - 30 min; wobei im Schritt 1) bei dem Verfahren die erste Pufferlôsung für Trennung
    0.08 - 0.12 M KCI, 1.8 - 2.2 mM MgCh, 0.8 - 1.2 MM EGTA, 0.4 - 0.6 mM DTT und 8 - 11 mM K,HPO4 beinhält und einen pH-Wert von 6.9 - 7.1 aufweist, und die zweite Pufferlösung für Trennung 0.08 - 0.12 M NaCl und
    0.8 - 1.2 mM NaN3 beinhält und einen pH-Wert von 5.9 - 6.1 aufweist; und wobei ım Schritt 2) die Lösung für Auflösung eine Lösung mit 0.5 - 1.0 M NaCl und einem pH-Wert von 7.0 - 8.0 ist.
    10. Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins nach Anspruch 9, dadurch gekennzeichnet, dass das Verfahren weiterhin umfasst: 5) thermisch induzierte Gelbildung: Stellen des im Schritt (4) erhaltenen Produkts in einem Wasserbad bei 20°C, programmiertes Erwärmen bei einer Geschwindigkeit von 1°C/min bis 85°C, Halten der Temperatur von 85°C für 30 min, und Stillstehen nach raschem Abkühlen bei 0°C für 12 Stunden, um das myofibrilläre Protein zu erhalten.
    11. Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins nach Anspruch 9 oder 10, dadurch gekennzeichnet, dass im Schritt 1) das Homogenisieren unter der Bedingung von 7000 - 10000rpm für 3 - 8 min und das Zentrifugieren unter den Bedingungen von 7000 - 9000rpm bei 4 - 8°C für 10 - 30min durchgeführt wird.
    12. Verfahren zur Herstellung eines stark gelartigen myofibrillären Proteins nach Anspruch 9 oder 10, dadurch gekennzeichnet, dass 1m Schritt 3) die Konzentration der hinzugefügten Pyrogallussäure 6umol/g von Proteinen - 300umol/g von Proteinen beträgt.
    13. Verfahren zur Herstellung eines verstärkt gelartigen myofibrillären Proteins nach Anspruch 9 oder 10, dadurch gekennzeichnet, dass im Schritt 4) beim Vakuumverpacken die Evakuierung 15 - 60 s dauert, die thermische Verpackung 1.0 - 3.0 s dauert, der Druck bei der Ultrahochdruckbehandlung 100 - 600 MPa beträgt, und der Druck für 5 - 30 min halten wird.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN113907175A (zh) * 2021-11-05 2022-01-11 青岛农业大学 一种降低肌原纤维蛋白必需氨基酸热损失的方法

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WO2019196513A1 (zh) * 2018-04-12 2019-10-17 厦门大学 一种增强凝胶性肌原纤维蛋白的制备方法

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