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Verfahren zur Gewinnung und Trennung der in männlichen Keimdrüsen enthaltenen physiologisch wirksamen Substanzen.
In der Patentschrift Nr. 86428 ist ein Verfahren beschrieben zur Gewinnung von zwei Körpern von verschiedener physiologischer Wirksamkeit aus weiblichen innersekretorischen Organen, wie Corpora lutea, Ovarien, Placenta usw., von denen der eine wasserlöslich, der andere lipoidlöslieh ist.
Ferner ist es bekannt, dass sich aus männlichen Keimdrüseneinerseitsmitwasserlöslichen, andrerseits mit wasserunlöslichen Lösungsmitteln wirksame Extra1. -te erhalten lassen. Jedoch werden auf diesem Wege keine einheitlichen Fraktionen erhalten, indem im einen Falle lipoidlösliche Stoffe in die wässerige Fraktion, im andern Falle wasserlösliche Stoffe in das wasserunlösliche Lösungsmittel übergehen.
Es wurde nun die überraschende Beobachtung gemacht, dass sich auch die in männlichen Keim- drüsen enthaltenen physiologisch wirksamen Substanzen in vollkommener Weise gleichzeitig in eine wasserlösliche und eine lipoidlösliche Fraktion trennen lassen, indem man geeignet vorbereitete männliche Keimdrüsen in beliebiger Reihenfolge mit wasserfreien oder wasserhaltigen wasserlöslichen und mit
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durch Zusatz von Wasser, in zwei Schichten trennt.
Dabei geht die wasserlösliche Fraktion der physiologisch wirksamen Stoffe vollständig in die wässerige, die lipoidlösliche Fraktion in die durch das wasserunlösliche Losungsmittel gebildete Schicht.
Beide Fraktionen können gewünschtenfalls nach üblichen Methoden getrennt weiter gereinigt werden. Die wasserlösliche therapeutisch wirksame Fraktion gewinnt man durch Eindampfen der wässerigen Schicht, die lipoidlösliche durch Eindampfen der organischen Schicht.
Beispiel 1. 500 im Vakuum getrocknete und fein pulverisierte Stierhodensubstanz werden in Soxleth mit Äther gut extrahiert ; der Organrückstand wird hierauf wiederholt mit Alkohol ausgekocht, die vereinigten Spritlösungen werden auf ein kleines Volumen eingedampft. Die so erhaltene Lösung wird mit der Ätherlösung vereinigt, das Ganze mit Wasser vermischt, durchgeschüttelt und stehen gelassen.
Die hiebei gebildete wässerige und die ätherische Schicht werden voneinander getrennt.
Die Ätherlösung hinterlässt beim Eindampfen als Rückstand eine gelbe fettartige Masse von
Vaselinkonsistenz, die analoge Wirkungen zeigt, wie das ipoidlösliche Hormon aus weiblichen Keimdrüsen.
Die wässerige Lösung wird bei schwach essigsaurer Reaktion erwärmt, von ausgeschiedenen Eiweis- stoffen abfiltriert und nach dem Vertreiben der überschüssigen Essigsäure im Vakuum eingetrocknet.
Das zurückbleibende gelbe zerfliessliche Pulver zeigt u. a. eine stimulierende Wirkung auf den intermediären
Stoffwechsel und einen tonisierenden Einfluss auf das Nervensystem.
Beispiel 2.1200 g frische Stierhoden werden in der Fleischhackmaschine zerkleinert und dreimal mit je 2'5 l Alkohol ausgekocht. Der unlösliche Teil wird getrocknet und fein pulverisiert, dann mit Äther extrahiert. Die alkoholischen Auszüge werden vereinigt, der Alkohol durch Destillation im Vakuum unter Zufluss von Wasser vollständig vertrieben und die zurückbleibende Emulsion wird mit der bei der
Extraktion des Troekenpulvers erhaltenen Ätherlösung durchgeschüttelt.
Wie bei Beispiel 1 wird auf diese Weise eine wässerige und eine Ätherlösung erhalten, die, wie dort angegeben, weiter verarbeitet werden. Sie liefern zwei Substanzen, die in ihren Eigenschaften mit den entsprechenden Produkten aus Beispiel 1 übereinstimmen.
Beispiel 3. 1 kg frische Stierhoden werden fein gehackt, mit Kohlensäureschnee vermischt und gemahlen. Das Mahlgut wird zweimal mit ganz schwach angesäuertem 60% igem, dann mehrmals mit 95%item" Alkohol kalt ausgezogen, getrocknet, fein gepulvert und schliesslich mit Äther extrahiert. Alle alkoholischen Lösungen werden vermischt, neutralisiert, vom Alkohol wie bei Beispiel 1 befreit und die erhaltene Emulsion mit Äther ausgeschüttelt.
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Process for the extraction and separation of the physiologically active substances contained in male gonads.
Patent specification No. 86428 describes a process for obtaining two bodies of different physiological activity from female internal secretory organs, such as corpora lutea, ovaries, placenta, etc., one of which is water-soluble, the other lipoid-soluble.
It is also known that male gonads are formed on the one hand with water-soluble and on the other hand with water-insoluble solvents effective Extra1. -te get it. In this way, however, no uniform fractions are obtained, in that in one case lipoid-soluble substances pass into the aqueous fraction, in the other case water-soluble substances pass into the water-insoluble solvent.
The surprising observation has now been made that the physiologically active substances contained in male gonads can also be completely separated simultaneously into a water-soluble and a lipoid-soluble fraction by appropriately prepared male gonads in any order with anhydrous or water-containing water-soluble and With
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by adding water, separates into two layers.
The water-soluble fraction of the physiologically active substances goes completely into the aqueous, the lipoid-soluble fraction into the layer formed by the water-insoluble solvent.
If desired, the two fractions can be further purified separately by customary methods. The water-soluble therapeutically active fraction is obtained by evaporation of the aqueous layer, the lipoid-soluble fraction by evaporation of the organic layer.
Example 1. 500 bull testicles dried and finely pulverized in vacuo are extracted well in Soxleth with ether; the organ residue is then repeatedly boiled with alcohol and the combined fuel solutions are evaporated to a small volume. The resulting solution is combined with the ethereal solution, mixed with water, shaken and left to stand.
The watery and ethereal layers thus formed are separated from one another.
The ether solution leaves a yellow, fatty mass of as residue on evaporation
Vaseline inconsistency, which shows effects analogous to that of the ipoid-soluble hormone from female gonads.
The aqueous solution is heated in a weakly acetic acid reaction, the precipitated proteins are filtered off and, after the excess acetic acid has been driven off, dried in vacuo.
The remaining yellow deliquescent powder shows u. a. a stimulatory effect on the intermediate
Metabolism and a toning effect on the nervous system.
Example 2.1200 g of fresh bull testicles are chopped up in the meat chopper and boiled three times with 2.5 l of alcohol each time. The insoluble part is dried and finely pulverized, then extracted with ether. The alcoholic extracts are combined, the alcohol is completely driven off by distillation in vacuo with the inflow of water and the remaining emulsion is mixed with the
Extraction of the dry powder obtained ether solution shaken.
As in Example 1, an aqueous and an ether solution are obtained in this way, which, as indicated there, are further processed. They deliver two substances which have the same properties as the corresponding products from Example 1.
Example 3. 1 kg of fresh bull testicles are finely chopped, mixed with carbonated snow and ground. The grist is extracted twice with very weakly acidified 60% alcohol, then several times with 95% item "alcohol, dried, finely powdered and finally extracted with ether. All alcoholic solutions are mixed, neutralized, freed from alcohol as in Example 1 and the obtained emulsion shaken out with ether.
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