AR090029A1 - Moleculas de acido nucleico reguladoras para una expresion genica confiable en las plantas - Google Patents

Abstract

Métodos y medios para mejorar la confiabilidad de la expresión en plantas transgénicas reduciendo el coeficiente de variación de la expresión y/o la cantidad de plantas de baja o ninguna expresión en la población de plantas. Reivindicación 1: Un método para reducir el coeficiente de variación de la expresión en una población de plantas, caracterizado porque comprende las siguientes etapas: a) proporcionar un ácido nucleico recombinante que comprende al menos una molécula de ácido nucleico potenciador de la confiabilidad (RENA) seleccionada del grupo que consiste en: i) una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia definida en SEQ ID Nº 1 a 16 ó 94 a 116666, o ii) una molécula de ácido nucleico que tiene una secuencia con una identidad de al menos 80% con SEQ ID Nº 1 a 16 o 94 a 116666, o iii) un fragmento de al menos 100 bases consecutivas de una molécula de ácido nucleico de i) o ii) que tiene actividad potenciadora de la confiabilidad como la molécula de ácido nucleico correspondiente que tiene la secuencia de SEQ ID Nº 1 a 16 ó 94 a 116666, o iv) una molécula de ácido nucleico que se hibrida en condiciones equivalentes a la hibridación en 7% de dodecilsulfato de sodio (SDS), NaPO₄ 0,5 M, 1 mM de EDTA a 50ºC con lavado en 2 x SSC, 0,1% de SDS a 50ºC, a una molécula de ácido nucleico que comprende al menos 50 nucleótidos consecutivos del complemento de una secuencia de nucleótidos potenciadora de la confiabilidad descrita en SEQ ID Nº 1 a 16 ó 94 a 116666, o v) una molécula de ácido nucleico que es el complemento o complemento inverso de cualquiera de las moléculas de ácido nucleico mencionadas previamente en i) a iv); b) ligar funcionalmente la molécula RENA definida en i) a v) a un promotor y/o una molécula de ácido nucleico de interés, en donde al menos el promotor es heterólogo con respecto al menos a la molécula RENA, c) integrar la molécula RENA ligada funcionalmente a un promotor y/o una molécula de ácido nucleico de interés en el genoma de células vegetales, plantas o partes de estas, y d) regenerar una población de plantas de las células vegetales transgénicas, plantas transgénicas o partes de estas producidas en la etapa c), en donde las moléculas definidas en ii) a v) reducen la variación de la expresión en al menos 10% de las moléculas de ácido nucleico correspondientes que tienen la secuencia de SEQ ID Nº 1 a 16 ó 94 a 116666, y en donde la población de plantas transformantes primarias independientes muestra al menos 10% menos de coeficiente de variación de la expresión de la molécula de ácido nucleico de interés, en comparación con una población de plantas transformantes primarias independientes que comprende en su genoma un constructo de ácido nucleico recombinante respectivo que no comprende la molécula RENA respectiva definida en i) a v).