SK283924B6

SK283924B6 - Indazolkarboxamidy

Info

Publication number: SK283924B6
Application number: SK1242-97A
Authority: SK
Inventors: John T. Catlow; Marlene L. Cohen; Michael J. Martinelli; John M. Schaus; Steven P. Swanson; Dennis C. Thompson; Thomas M. Wilson
Original assignee: Eli Lilly And Company
Priority date: 1995-03-16
Filing date: 1996-03-14
Publication date: 2004-05-04
Also published as: PL183867B1; GR3037029T3; NZ315971A; EP0732333A1; NO974221D0; CN1112923C; IL117438A0; EP0732333B1; ATE203748T1; HUP9801386A3; DK0732333T3; RO119617B1; AU700842B2; HU223973B1; TR199700956T1; US5817676A; DE69614164D1; EA000699B1; MX9706967A; HUP9801386A2

Abstract

Indazolkarboxamidy všeobecného vzorca (I) sa použili ako antagonisty a čiastočné agonisty serotonínového receptora 5-HT4 na liečbu porúch spôsobených alebo ovplyvnených dysfunkciou receptora 5-HT4.ŕ

Description

Oblasť techniky

Predkladaný vynález, patriaci do oblasti farmakológie a syntetickej organickej chémie, poskytuje sériu indazolkarboxamidov, ktoré sú čiastočnými agonistami a antagonistami serotonínového receptora 5-HT₄.

Doterajší stav techniky

Procesy v mozgu a ďalších orgánoch, ktoré využívajú vo funkcii neurotransmitera serotonín, zaujímajú už niekoľko desaťročí popredné miesto vo farmakologickom výskume. Identifikoval sa veľký počet procesov, ktoré závisia od serotonínu a existuje množstvo terapeutických látok, ktoré sa používajú na ovplyvnenie týchto procesov. Identifikovalo sa viac ako tucet receptorov, ktoré pôsobia na serotonín. Identifikovali sa fyziologické mechanizmy niektorých receptorov, ale ďalšie sú ešte stále predmetom širokého a aktívneho výskumu.

Jeden z nedávno identifikovaných serotonínových receptorov predstavuje 5-HT₄. Použitie terapeutických metód využívajúcich 5-HT₄ receptor zaostávalo z dôvodu nedostatku zlúčenín, ktoré ovplyvňujú 5-HT₄ receptor a sú bez podstatného vplyvu na ostatné receptory. Súčasný vynález poskytuje sériu nových farmaceutických látok, ktoré sa vyznačujú vysokou afinitou a selektivitou k 5-HT₄ receptoru.

Podstata vynálezu

Predkladaný vynález poskytuje zlúčeniny s nasledovným vzorcom:

Rž _Rl __ďj]---[J^-C0 - NH- (CHz)n- (C H)_m - (CH₂)₀ ~ΧΑ_ν^^ν

R (I) kde:

R je vodík, C]-C₆ alkyl, C₃-C₆ cykloalkyl,

R¹ je vodík, halogén, C_rC₄ alkyl, hydroxy, C_rC₄ alkoxy alebo alkyltio, kyano, trifluórmetyl, karboxamid, mono- alebo di(C, -C₄ alkyl) karboxamid;

m, n a o sú nezávisle 0-5, za predpokladu, že súčet m, n a o je 2-5;

R² je vodík alebo C_rC₄ alkyl;

R³ a R⁴ sú spojené cez atóm dusíka, na ktorý sú naviazané, čím vytvárajú 1 -pyrolidinyl, I-piperazinyl, 1,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolinyl, 2,3-dihydro-l-indolinyl, 4-morfolinyl, 1-pipendinyl alebo 1 -hexametyléniminyl substituovaný fenylom, naftylom, (fenyl alebo naftyl)(CrC3 alkylom), (fenyl alebo naftyl)(C!-C3 alkanoylom), amínom, mono- alebo di(C]-C4 alkyl) amínom, alebo skupinou so vzorcom NH-Y-R⁵; za predpokladu, že piperazinylová alebo morfolinylová skupina nebude substituovaná amínom, mono- alebo di(CrC₄ alkyl) amínom, alebo -NH-Y-R⁵;

kde fenylová alebo naftylová skupina je nesubstituovaná, alebo substituovaná 1-3 halogénom, C,-C₃ alkylom alebo C_rC₃ alkoxy skupinami;

Y je karbonyl, sulfonyl, aminokarbonyl alebo oxykarbonyl; R⁵ je C_rC₆ alkyl, C₃-C₈ cykloalkyl, C_Ď-C_n bicyklo- alebo tricykloalkyl, (fenyl alebo naftyl)(C_rC₃ alkyl), fenyl alebo naftyl;

kde cykloalkyl, bicyklo- alebo tricykloalkyl, fenylová alebo naftylová skupina sú nesubstituované, alebo substituované

1-3 hydroxy, halogénom, C,-C₃ alkylom alebo C,-C₃ alkoxy skupinami;

alebo farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.

Tento vynález ďalej poskytuje farmaceutické zmesi, ktoré pozostávajú z uvedených zlúčenín a farmaceutický prijateľného nosiča, a taktiež poskytuje farmaceutické metódy umožňujúce využitie zlúčenín vzorca (I), ako aj ďalších zlúčenín, kde heterocyklická skupina, vytvorená spojením R³ a R⁴ s atómom dusíka, ku ktorému sú viazané, je nesubstituovaná.

Farmaceutické metódy predkladaného vynálezu obsahujú metódu na ovplyvnenie 5-HT₄ receptora, a to predovšetkým na poskytnutie čiastočne agonistickej a antagonistickej aktivity proti receptoru. V súlade s tým, vynález poskytuje metódy na liečbu alebo profylaxiu ochorení spôsobených alebo ovplyvnených dysfunkciou 5-HT₄ receptora, ako aj využitie zlúčenín podľa vzorca (I), na tieto účely. 0chorenia, na ktoré predkladané zlúčeniny pôsobia terapeuticky alebo profylaktický, zahŕňajú patologické stavy centrálneho nervového systému ako napríklad stavy úzkosti, bolesť, depresia, schizofrénia, poruchy pamäte a demencia; patologické stavy gastrointestinálneho traktu ako napríklad syndróm dráždivého tračníka, nauzea, gastroezofageálny reflux, dyspepsia, poruchy gastrointestinálnej motility a zápcha; kardiovaskulárne poruchy ako napríklad atriálna fibrilácia, arytmie a tachykardie a urogenitálne poruchy ako napríklad retencia moča, inkontinencia moča a bolesť pri močení.

Vynález ďalej uvádza metódu prípravy týchto zlúčenín so vzorcom (I), kde

R³ a R⁴ sú spojené cez atóm dusíka, na ktorý sú naviazané, čím vytvárajú 1-pyrolidinyl, 1,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolinyl, 2,3-dihydro-l-indolinyl, 1-piperidinyl alebo 1-hexametyléniminyl substituovaný skupinou so vzorcom -NH-Y-R⁵;

Y je karbonyl;

R⁵ jc C₃-C_g cykloalkyl, C₆-Cn bicyklo- alebo tricykloalkyl, (fenyl alebo naftyl)(C|-C₃ alkyl), fenyl alebo naftyl;

kde cykloalkyl, bicyklo- alebo tricykloalkyl, fenylová alebo naftylová skupina sú substituované I -3 hydroxy skupinami; alebo farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín;

ktorá pozostáva z reakcie zlúčeniny so vzorcom (I), kde R³a R⁴ sú spojené cez atóm dusíka, na ktorý sú naviazané, čím vytvárajú aminosubstituovaný 1-pyrolidinyl, 1,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolinyl, 2,3-dihydro-l-indolinyl, 1-piperidinyl alebo 1-hexametyléniminyl, so zlúčeninou so vzorcom

HO₂C-R^s v prítomnosti väzobného činidla pre reakcie poskytujúce amidy.

V predkladanom dokumente sú všetky vyjadrenia koncentrácie, percent, pomeru a pod. vyjadrené v jednotkách hmotnosti, pokiaľ nie je uvedené inak, s výnimkou zmesí rozpúšťadiel, ktoré sú vyjadrené v objemových jednotkách. Všetky teploty, pokiaľ nie je uvedené inak, sú vyjadrené v stupňoch Celzia.

Zlúčeniny

V uvedenom všeobecnom vzorci majú všeobecné chemické termíny svoj zvyčajný význam. Napríklad, termíny C|-C₆ alkyl, C_rC₄ alkyl a C_rC₃ alkyl predstavujú skupiny ako metyl, etyl, propyl, izobutyl, izopropyl, t-butyl, 2-etylbutyl, hexyl, izohexyl a pod. Termíny C₃-C₆ cykloalkyl a C₃-C_s cykloalkyl zahŕňajú skupiny ako cyklopropyl, cyklopentyl, cyklohexyl a cyklooktyl. C_rC₄ alkoxy, C_rC₄alkyltio a C,-C₃ alkoxy skupiny predstavuje zodpovedajúce alkylové skupiny naviazané cez atóm kyslíka alebo síry. Termín C,-Cj alkanoyl zahŕňa karbonyl, acetyl a propionyl.

Termín C₆-Cn bicyklo- alebo tricykloalkyl zahŕňa skupiny ako bicyklo[2.2.0]hexyl, bicyklo[2.1.1 ]hcxyl. bicyklo[3.2.0]heptyl, spiro[3.4]oktyl, bicyklo[3.1.1]heptyl, bicyklo[4.2.0]oktyl, spiro[3.5]nonyl, bicyklo[5.2.0]nonyl, bicyklo[7.2.0]undecyl, bicyklo[3.3.0]oktyl, norbomyl, spiro[4.4]nonyl, bicyklo[4.3.0]nonyl, bicyklo[3.2.ljoktyl, spiro[4.5]decyl, bicyklo[0.3.5]decyl, spiro[4.6]undecyl, adamantyl, tricyklo[1.3.3.0]nonyl, tricyklo[1.3.3.0]nonyl, tricyklo[3.3.0.0]oktyl a spiro[cyklopentyl-l,7’]norbomyl.

Termín halogén- predstavuje predpony chlór-, fluór-, bróm- a jód-.

Šesťčlenný kruh indazolovej skupiny môže byť substituovaný na ľubovoľnej zo štyroch voľných pozícií jednou z R¹ skupín, ako napríklad fluór, etyl, hydroxy, propoxy, metyltio, kyano, trifluórmetyl, karboxamido, N-etylkarboxamido alebo N,N-dipropylkarboxamido.

Atóm dusíka v polohe 1 indazolu môže byť substituovaný skupinou R-, ako metyl, propyl alebo cyklopentyl.

R²I

Alkylénová spojovacia skupina (CH₂)_m-(CH)_n-(CH₂)₀môže byť substituovaná s alkylovou skupinou R², ako metyl alebo izopropyl. Ako bude ďalej uvedené, spojovaciu skupinu tvorí 2 až 5 metylénových skupín, pričom ľubovoľná z týchto metylénových skupín môže chýbať. Teda spojovacia skupina môže byť substituovaná na každom metyléne, alebo môže byť nesubstituovaná, alebo môže mať alkylový substituent R² v ľubovoľnej pozícii v rámci tejto skupiny. Takže vhodné spojovacie skupiny predstavujú etylén, propylén, pentylén a nasledovné skupiny:

CH3 CHjCHjCH3

-CHyCH- -CH-CHrCHr -CH-CHCH3 (CH₂)₃CH_3ch *1 •CH₂-CH₂-CH₂-CH- -CHs-CH-CH-CHj-CHjch₃

V kontexte predkladaného vynálezu sa v novovytvorených zlúčeninách ako aj zlúčeninách použiteľných v liečebných metódach skupiny R³ a R⁴ spájajú cez dusík, na ktorý sa viažu, čím vytvárajú heterocyklickú skupinu. V prípade novovytvorených zlúčenín predkladaného vynálezu je takto vytvorená heterocyklická skupina substituovaná a v prípade zlúčenín použitých v predkladaných metódach môže byť heterocyklická skupina nesubstituovaná alebo substituovaná.

Cyklické skupiny, ktoré sú substituentmi na heterocyklickej skupine, alebo ktoré sú súčasťou substituenta na heterocyklickej skupine, môžu byť nesubstituované alebo substituované jednou alebo viacerými skupinami ako chlór, hydroxy, bróm, metyl, metoxy, etyl, propoxy alebo izopropyl.

Pretože heterocyklická skupiny vytvorené skupinami R⁵ a R⁴ môžu byť značne zložité v rámci ich substitúcie, v nasledujúcom zozname sú uvedené typické skupiny, s cieľom umožniť čitateľovi úplné pochopenie zložitosti týchto štúdií.

3-fenyl-1 -piperidinyl

3-(4-chlór-6-ety 1-2-naftyl)-1 -piperazinyl 5-[2-(3-metylfenyl)etyl]-í,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolinyl

5- (2,4,6-trichlórfenyl)acetyl-2,3-dihydro-1 -indolinyl 3-(2-norbomylcabonylamino)-l-pyrolidinyl 3-(cyklooktylsulfonylamino)-1 -piperidinyl

3- (hexylaminokarbonylamino)-l-hexametyléniminyl

4- [2-(4-chlór-3,5-dimetylfenyl)etyl]-oxykarbonylamino-l-piperidinyl

2- (4-bróm-3-etoxy-l-naftyl)karbonylamino-l-pyrolidinyl 4-(6-fluór-8-propyl-2-naftyl)metylsulfonyl-amino-1 -indolinyl

3- (l -adamantyljoxykarbonylamino- 1-pyrolidinyl

6- (4-etyl-2,6-difluórfenyl) aminokarbonylamino-2,3-dihydro-1 -pyrolidinyl

3-(3-fenylpropyl)karbonylamino-l-piperidinyl 3-(4-hydroxy-2-norbonylkarbonylamino)-l-pyrolidinyl 3 -(3-hydroxycykloheptylsulfonylamino)-1 -piperidinyl 2-(4-hydroxy-2-fluór-1 -nafty1 jkarbonylamino-1 -pyrolidinyl

Ako je opísané vo vzorci (I), vynález zahŕňa farmaceutický prijateľné soli zlúčenín definovaných uvedeným vzorcom. Zlúčeniny opísané v tomto vynáleze reagujú s ľubovoľnou netoxickou anorganickou alebo organickou kyselinou za vzniku farmaceutický prijateľnej soli. Kyseliny, ktoré sa bežne používajú na tvorbu takýchto solí sú anorganické kyseliny ako kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina jodovodiková, kyselina sírová, kyselina fosforečná a podobne, a organické kyseliny ako kyselina p-toluénsulfónová, kyselina metánsulfónová, kyselina oxálová, kyselina p-brómfenylsulfónová, kyselina uhličitá, kyselina jantárová, kyselina citrónová, kyselina benzoová, kyselina octová a podobne. Príklady takýchto farmaceutický prijateľných solí predstavujú teda síran, disiran, hydrogénsíran, siričitan, hydrogénsiričitan, fosforečnan, hydrogénfosforečnan, dthydrogénfosforečnan, metafosforečnan, pyrofosforečnan, chlorid, bromid, jodid, acetát, propionát, dekanoát, kaprylát, akrylát, formiát, izobutyrát, kaproát, heptanoát, propioát, oxalát, malonát, sukcinát, suberát, sebakát, fumarát, maleát, butín-l,4-dioát, hexín-l,4-dioát, benzoát, chlórbenzoát, metylbenzoát, dinitrobenzoát, hydroxybenzoát, metoxybenzoát, ftalát, sulfonát, xylénsulfonát, fenylacetát, fenylpropionát, fenylbutyrát, citrát, laktát, gama-hydroxybutyrát, glykolát, tartrát, metánsulfonát, propánsulfonát, naftalén-1-sulfonát, naftalén-2-sulfonát, mandelát a podobne. Uprednostňované farmaceutický prijateľné soli sú také, ktoré vznikli z minerálnych kyselín ako kyselina chlorovodíková a kyselina bromovodíková, a také, ktoré vznikli z organických kyselín ako kyselina jablčná a kyselina metánsulfónová.

Všetky zlúčeniny opísané v predkladanom dokumente sú aktívne a použiteľné, ale niektoré skupiny týchto zlúčenín sú obzvlášť zaujímavé a sú uprednostňované. Nasledujúci zoznam je výberom niekoľkých skupín uprednostňovaných zlúčenín. Je zrejmé, že každá položka zoznamu môže byť kombinovaná s ďalšími položkami za vzniku ďalších, obsiahlejších alebo obmedzenejších skupín preferovaných zlúčenín.

a) R je vodík.

b) Rje C_rC₃ alkyl alebo C₅-C₆ cykloalkyl.

c) Rje vodík alebo C1-C3 alkyl.

d) Rje vodík alebo sekundárny C_rC₆ alkyl.

e) R¹ je vodík.

f) R¹ je vodík, halogén, alkyl alebo alkoxy.

g) R² je vodík alebo metyl.

h) R² je vodík.

i) Súčet m, n a o je 2-4.

j) R³ a R⁴ sú spojené cez atóm dusíka, na ktorý sú naviazané, čím vytvárajú 1-pyrolidinyl, 1-piperazinyl, alebo 1-piperidinyl.

k) Substituent na heterocyklickej skupine tvorenej R³, R⁴ a dusíkovým atómom je fenyl, naftyl alebo (fenyl alebo naftyl)(C|-C₃ alkyl).

l) Substituent na heterocyklickej skupine tvorenej R³, R⁴ a dusíkovým atómom je amín, mono- alebo di(C|-C₄ alkyl) amino skupina.

m) Substituent na heterocyklickej skupine tvorenej R³, R⁴ a dusíkovým atómom je -NH-Y-R⁵

n) Y je karbonyl alebo sulfonyl.

o) Y je aminokarbonyl alebo oxykarbonyl.

p) Rje alkyl alebo cykloalkyl.

q) R⁵ je adamantyl alebo norbomyl.

r) R⁵ je fenyl, naftyl alebo (fenyl alebo naftyl)(C|-C_;alkyl).

s) R⁵ je substituovaný 1-3 hydroxyskupinami.

t) R⁵ je adamantyl substituovaný s 1-3 hydroxyskupinami.

u) R⁵ je cykloalkyl substituovaný s I -3 hydroxyskupinami.

v) Zlúčenina je farmaceutický prijateľná soľ.

Syntéza

Zlúčeniny predkladaného vynálezu sa pripravili zo známych zlúčenín - kyseliny lH-indazol-3-karboxylovej s požadovaným R¹ substituentom. Základnou reakciou v syntéze je vytvorenie karboxamidovej väzby medzi indazolkarboxylovou kyselinou a amínovou zlúčeninou vytvorenou zo spojovacej skupiny a -N(R³)(R⁴) systému. Tvorba amidu sa ľahko uskutoční bežným spôsobom, ako napr. s l.l’-karbonyldiimidazolom ako aktivačným činidlom v ľubovoľnom inertnom rozpúšťadle za miernej teploty. Tetrahydrofurán zvyčajne predstavuje vhodné a preferované rozpúšťadlo v procese prebiehajúcom pri teplote od 0° do 50°, pričom sa uprednostňuje laboratórna teplota.

Syntéza amínového reaktantu je bežná, pretože reaktant je vytvorený z bežne používaných a ľahko reaktívnych zložiek. Je zrejmé, že reaktanty s voľnými aminoskupinami, hydroxyskupinami a pod., budú počas reakcie chránené zvyčajným spôsobom a ochranné skupiny budú pred izoláciou produktu odstránené.

Ďalej, častokrát substitučné skupiny na heterocyklicky spojených R³ a R⁴ skupinách môžu byť pre uľahčenie pridané ako druhý krok, napr. reakcia takéhoto heterocyklického kruhu s napr. aroylhalidom poskytne benzoylový alebo naftylkarbonylový substituent. Podobne, substituované sulfonylhalidy sa môžu použiť ako reaktanty na vytvorenie substituovaných sulfonamidových substituentov, kde Y jc sulfonyl.

Zvyčajne sa uprednostňuje pridanie R substituenta v druhom kroku, až po syntéze zvyšku molekuly. Reakcia jódom-substituovaného derivátu požadovaného R substituenta v prítomnosti veľmi silnej bázy, ako napr. hydridu sodného, priamo poskytuje požadovaný produkt. Reakcia najlepšie prebieha za nízkej teploty, od 0° po laboratórnu teplotu, ako preferované rozpúšťadlo sa častokrát používa dimetylformamid.

Obzvlášť preferovaný proces tohto vynálezu, znázornený na príkladoch 37 a 38, poskytuje zlúčeniny vzorca (I), ktoré obsahujú hydroxysubstituované R⁵ skupiny neočakávane jednoduchým spôsobom. Odborník by očakával, že hydroxyskupina východiskovej zlúčeniny sa musí chrániť, aby nedošlo k vytvoreniu nežiaducich polymémych látok. Uvedené príklady však poukazujú na to, že reakcia s nechránenými hydroxy zlúčeninami prebieha hladko, s vyso kým výťažkom o vysokej čistote. Tento proces môže prebiehať pri teplotách od okolo 0 °C do 80 °C, ale prednostne v rozmedzí od laboratórnej teploty po asi 60 °C, v protických rozpúšťadlách akými sú napr. halogénderiváty alkánov ako metylénchlorid, chloroform a etyléndichlorid, amidy ako sú dimetylformamid a dimetylacetamid a étery ako sú dietyléter a tetrahydrofurán. Nie je potrebná osobitná ochrana pred vlhkosťou alebo kyslíkom. Uprednostňovaným väzobným činidlom je karbonyldiimidazol, ale ktorékoľvek bežne používané väzobné činidlo, ktoré sa používa na vytvorenie amidových väzieb, najmä tie, ktoré sa používajú v chémii peptidov, je vhodné. Takéto kondenzačné činidlá sú uvedené napr. v The Peptides, Gross and Meienhofer, Eds., Academic Prcss (1979), kap. 2.

Ďalšie informácie o syntéze predkladaných zlúčenín sa môžu získať z nasledujúcich príkladov ich prípravy. Kvalifikovaný čitateľ pochopí, že príklady sú ilustratívne, ale nie úplné, a teda rad užitočných obmien procesu si môže čitateľ predstaviť sám.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Príprava N-[2-(l -piperidinyljetyl]-1 H-indazol-3-karboxamid hydrochloridu

K roztoku lH-indazol-3-karboxylovej kyseliny (0,778 g, 4,8 mmol) v 25 ml tetrahydrofuránu sa pridal

1,1 ’-karbonyldiimidazol (0,778 g, 4,8 mmol). Tento roztok sa miešal 3 hodiny pri laboratórnej teplote. K tomuto roztoku sa po kvapkách pridal 1 -(2-aminoetyl)piperidin (0,615 g, 4,8 mmol) rozpustený v 3 ml tetrahydrofuránu. Výsledný roztok sa ďalej miešal pri laboratórnej teplote 18 hodín, následne sa odparil a zriedil vodou. Extrakciu etylacetátom nasledovalo premytie vodou a nasýteným roztokom NaCl, čím sa získalo 1,14 g tuhej látky s nízkym bodom topenia. Kryštalizáciou soli kyseliny chlorovodíkovej z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,407 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 252 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ - 273. Anál. (C_I5H₂|C1N₄O) teoret. C, 58,34; H, 6,85; N, 18,14; zistené C, 58,57; H, 6,97; N, 18,02.

Príklad 2

Príprava N-[2-( 1 -piperidinyljetyl]-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid hydrochloridu

Do časti voľnej bázy z príkladu 1 (1,41 g, 5,17 mmol) bol počas miešania v 35 ml dimetylformamidu pri laboratórnej teplote pridaný hydrid sodný (0,207 g, 5,1.7 mmol, vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji). Po 4 hodinách miešania pri laboratórnej teplote sa reakčná zmes ochladila na ľadovom kúpeli na 15 °C a po kvapkách sa pridal 2-jódpropán (0,57 ml, 5,7 mmol). Výsledná zmes sa miešala pri laboratórnej teplote počas 18 hodín, rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa rozpustil v etylacetáte. Po premytí etylacetátového roztoku 10 % roztokom uhličitanu sodného, vodou a nasýteným roztokom NaCl sa po odparení získalo 1,76 g oleja. Flash chromatografiou [silikagél, metylénchlorid/metanol (85/15)] sa získalo 1,35 g oleja. Kryštalizáciou vo forme soli kyseliny chlorovodíkovej z etylacetátu/metanolu sa získalo 1,109 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia >250 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 314. Anál. (C|₈H₂₇C1N₄O) teoret. C, 61,61; H, 7,76; N, 15,97; zistené C, 61,85; H, 7,79; N, 15,98.

Príklad 3

Príprava N-[3-(l-piperidinyl)propyl]-lH-indazol-3-karboxamidu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 1. Použili sa nasledovné množstvá: lH-indazol-3-karboxylová kyselina (0,65 g, 4 mmol), l,ľ-karbonyl-diimidazol (0,65 g, 4 mmol) a l-(3-aminopropyl)piperidín (0,57 g, 4 mmol). Etylacetátové extrakty sa odparili na 0,906 g oleja. Flash chromatografiou [silikagél, metylénchlorid/metanol/hydroxid amónny (100/10/0,5)] sa získalo 0,457 g oleja. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 287.

Príklad 4

Príprava N-[3-(l-piperidinyl)propyl]-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid hydrochloridu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 2. Použili sa nasledovné množstvá: Produkt z príkladu 3 (0,457 g 1,6 mmol), hydrid sodný (0,064 g, 1,6 mmol vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji) a 2-jódpropán (0,18 ml, 1,76 mmol). Flash chromatografiou [silikagél, metylénchlorid/metanol/hydroxid amónny(100/2,5/0,5)] sa získalo 0,366 g oleja. Kryštalizáciou vo forme soli kyseliny chlorovodíkovej z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,145 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 156 - 158 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 329. Anál. (C₁₉H_MC1N₄O) teoret. C, 62,54; H, 8,01; N, 15,35; zistené C, 62,69; H, 7,91; N, 15,60.

Príklad 5

Príprava N-[4-( 1 -piperidinyl)butyl]-1 H-indazol-3-karboxamidu

K roztoku lH-indazol-3-karboxylovej kyseliny (0,745 g, 4,6 mmol) v 20 ml dimetylformamidu sa pridal

1,1 ’-karbonyldiimidazol (0,745 g, 4,6 mmol). Táto zmes sa miešala 4 hodiny pri laboratórnej teplote a po kvapkách sa k nej pridal 1 -(4-aminobutyl)piperidín (0,718 g, 4,6 mmol) rozpustený v 3 ml dimetylformamidu. Tento roztok sa ďalej miešal pri laboratórnej teplote 18 hodín, prchavé látky sa odparili a zvyšok sa zriedil vodou.

Extrakciu etylacetátom nasledovalo premytie vodou a nasýteným roztokom NaCl, čím sa získalo 1,40 g oleja, ktorý bol dostatočne čistý na použitie v nasledujúcej reakcii. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 301.

Príklad 6

Príprava N-[4-( 1 -piperidinyl)butyl]-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 2. Použili sa nasledovné množstvá: Produkt z príkladu 5 (1,40 g, 4,66 mmol), hydrid sodný (0,190 g, 4,66 mmol vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji) a 2-jódpropán (0,52 ml, 5,13 mmol). Z etylacetátových extraktov sa získalo 1,48 g oleja. Dvoma kryštalizáciami vo forme oxalátovej soli z 2-propanolu sa získalo 0,41 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 143 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 343. Anál. (C₂2H₃2N₄O₅) teoret. C, 61,09; H, 7,46; N, 12,95; zistené C, 61,05; H, 7,51; N, 13,02.

Príprava 1

Príprava 1 -(2-aminoetyl)-4-benzyloxykarbonylaminopiperidínu

K chladnej (10 °C) miešajúcej sa zmesi 4-amino-l-benzylpiperidínu (15,2 g, 80 mmol), hydrogénuhličitanu sodného (9,54 g, 110 mmol), 310 ml tetrahydrofuránu a 155 ml vody sa po kvapkách pridal benzylchlórformiát (14,0 ml, 98 mmol). Výsledná zmes sa miešala pri 5 - 10 °C 2 hodiny. Reakčná zmes sa vliala do 1000 ml vody. Extrakciou etylacetátom, premývaním s nasýteným roztokom NaCl, sušením a odparením sa získal viskózny olej. Trituráciou s hexánmi sa získalo 18,56 g tuhej látky. Bod topenia 74 - 76 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 324.

Opísaný medziprodukt (18,5 g, 57 mmol) sa miešal v 300 ml 1,2-dichlóretánu za súčasného chladenia v ľadovom kúpeli na 5 °C, pričom sa po kvapkách pridával 1-dichlóretyl chloroformiát (12,3 g, 114 mmol). Po hodinovom miešaní pri laboratórnej teplote sa 1,2-díchlóretán odparil. K zvyšku sa pridalo sa 300 ml metanolu a roztok sa zahrieval počas 1 hodiny na refluxnej teplote. Po odparení metanolu, pridaní 300 ml etylacetátu a filtrácii sa získalo 15,67 g žltej tuhej látky. Bod topenia 178 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 235.

Opísaný medziprodukt (2,07 g, 7,6 mmol) sa zahrieval spolu s N-(2-brómetyl)ftalimidom (1,94 g, 7,6 mmol) a uhličitanom sodným (2,83 g, 26,6 mmol) v 40 ml dimetylformamidu pri 100 “C počas 18 hodín. Po odparení dimetylformamidu, zriedení vodou a extrakcii etylacetátom nasledovanej premytím vodou, nasýteným roztokom NaCl a vysušení sa získalo po odparení 3,15 g tuhej látky. Kryštalizáciou z etanolu sa získalo 1,58 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 159 - 161 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 407. Anál. (C23H₂5N₃O₄) teoret. C, 57,80; H, 6,18; N, 10,31; zistené C, 57,71; H, 6,32; N, 10,20.

Takto pripravený medziprodukt (11,9 g, 29,2 mmol) sa miešal v 600 ml etanolu, za postupného pridávania 15,8 ml hydrazinhydrátu. Táto zmes sa zahrievala na refluxnej teplote počas 4 hodín. Po ochladení sa precipitát filtroval a filtrát sa následne odparil. K takto vzniknutému zvyšku sa opatrne pridalo 250 ml IN roztoku hydroxidu sodného, a následne sa pridával tuhý chlorid sodný pokiaľ nedošlo k nasýteniu roztoku. Opakovanou extrakciou dietyléterom, vysušením a odparením sa získalo 8,19 g oleja. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 278.

Príklad 7

Príprava N-[2-(4-benzyloxykarbonylamino-1 -piperidiny I)etyl]-1 H-indazol-3 -karboxamidu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 5. Použili sa nasledovné množstvá: lH-indazol-3-karboxylová kyselina (4,70 g, 29 mmol), l,ľ-karbonyldiimidazol (4,70 g, 29 mmol) a medziprodukt z prípravy 1 (8,10 g, 29 mmol). Odparením etylacetátových extraktov sa získalo 11,17 g tuhej látky, ktorá bola dostatočne čistá na použitie v nasledujúcej reakcii. Bod topenia 184 - 187 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 422.

Príklad 8

Príprava N-[2-(4-benzyloxykarbonylamino-1 -piperidinyl)etyl]-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid oxalátu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 2. Použili sa nasledovné množstvá: Produkt z príkladu 7 (11,1 g, 26,3 mmol), hydrid sodný (1,05 g, 26,3 mmol vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji) a 2-jódpropán (2,90 ml, 29 mmol). Flash chromatografiou [silikagél, metylénchlorid/metanol (95/5)] sa získalo 10,60 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etylacetátu/metanolu sa získali bezfarebné kryštály. Bod topenia 149 - 151 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 463. Anál. (C₂₈H35N₅O7) teoret. C, 60,75; H, 6,37; N, 12,65; zistené C, 60,53; H, 6,37; N, 12,47.

Príklad 9

Príprava N-[2-( 1 -pyrolidinyl)etyl] -1 H-indazol-3-karboxamidu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 1. Použili sa nasledovné množstvá: 1 H-indazol-3-karboxylová kyselina(0,65 g, 4 mmol), l,ľ-karbonyldiimidazol (0,65 g, mmol) a 1 -(2-aminoetyl)pyrolidín (0,458 g, 4 mmol). Odparením etylacetátových extraktov sa získalo 0,754 g oleja. Flash chromatografiou [silikagél, metylénchlorid/metanol/hydroxid amónny (100/10/0,5)] sa získalo 0,421 g oleja. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 258.

Príklad 10

Príprava N-[2-( 1 -pyrol id in yl)etyl] -1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid hydrochloridu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 2. Použili sa nasledovné množstvá: Produkt z príkladu 9 (0,421 g, 1,63 mmol), hydrid sodný (0,065 g, 1,63 mmol vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji) a 2-jódpropán (0,18 ml, 1,77 mmol). Odparením etylacetátových extraktov sa získalo 0,526 g oleja. Flash chromatografiou [silikagél, metylénchlorid/metanol/hydroxid amónny (100/5/0,5)] sa získalo 0,385 g oleja. Kryštalizáciou vo forme soli kyseliny chlorovodíkovej z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,197 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 210 - 212 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 300. Anál. (C₁₇H₂5C1N₄O) teoret. C, 60,61; H, 7,48; N, 16,63; zistené C, 60,44; H, 7,21; N, 16,58.

Príprava 2

Príprava N-(2-aminoetyl) hexametylénimínu

Hexametylénimin (5,7 ml, 50 mmol) sa zahrieval spolu s N-(2-brómetyl)ftalimidom (12,7 g, 50 mmol) a uhličitanom sodným (13,3 g, 125 mmol) v 250 ml dimetylformamidu pri 100 °C počas 18 hodín. Po odparení dimetylformamidu, zriedení vodou a extrakcii etylacetátom nasledovanej premytím vodou, nasýteným roztokom NaCl a vysušením sa získalo po odparení 12,71 g oleja. Kryštalizáciou vo forme tosylátovej soli z 2-propanolu sa získalo 13,29 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 180 - 182 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 272. Anál. (C₂jH₂8N₂O₅S) teoret. C, 62,14; H, 6,35; N, 6,30; zistené C, 62,37; H, 6,19; N, 6,35.

Takto pripravený medziprodukt (vo forme voľnej bázy) (3,33 g, 12,2 mmol) sa miešal v 220 ml etanolu, za postupného pridávania 5,0 ml hydrát hydrazínu. Táto zmes sa zahrievala na refluxnej teplote počas 4 hodín. Po ochladení sa zmes filtrovala a filtrát sa následne odparil. Takto vzniknutý zvyšok sa opatrne rozriedil IN roztokom hydroxidu sodného. Následnou extrakciou dietyléterom, vysušením a odparením sa získalo 1,33 g oleja. Tento materiál bol vhodný na použitie v ďalšej reakcii.

Príklad 11

Príprava N-[2-(l-hexametyléniminyl)etyl]-lH-indazol-3-karboxamidu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 5. Použili sa nasledovné množstvá: Medziprodukt z prípravy 2 (1,33 g, 9,3 mmol), 1 H-mdazol-3-karboxylová kyselina (1,51 g, 9,3 mmol) a 1 ,ľ-karbonyldiimidazol (1,51 g, 9,3 mmol). Etylacetátové extrakty sa odparili, pričom zvyšok tvoril tuhú látku. Pridaním cyklohexánu a filtráciou sa získalo 2,46 g tuhej látky. Bod topenia 104 - 115 °C. Hmotnostné spektrum, m* = 287.

Príklad 12

Príprava N-[2-( 1 -hexametyléniminyljetyl]-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid hydrochloridu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 2. Použili sa nasledovné množstvá: Produkt z príkladu 11 (2,45 g, 8,55 mmol), hydrid sodný (0,342 g, 8,55 mmol vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji) a 2-jódpropán (0,94 mi, 9,4 mmol). Odparením etylacetátových extraktov sa získalo 3,0 g oleja. Flash chromatografiou [silikagél, metylénchlorid/metanol (85/15)] sa získalo 1,39 g oleja. Kryštalizáciou vo forme soli kyseliny chlorovodíkovej z etylacetátu/metanolu sa získalo 1,05 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 216 - 218 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 328. Anál. (C|₉H₂₉C1N₄O) teoret. C, 62,54; H, 8,01;

N, 15,35; zistené C, 62,52; H, 8,09; N, 15,48.

Príklad 13

Príprava N-[2-(4-morfolinyl)etyl]-lH-indazol-3-karboxamidu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 1. Použili sa nasledovné množstvá: lH-indazol-3-karboxylová kyselina (0,65 g, 4 mmol) a l,ľ-karbonyldiimidazol (0,65 g, 4 mmol) a 4-(2-aminoctyl)morfolín (0,52 ml, 4 mmol). Odparením etylacetátových extraktov sa získalo

O, 468 g tuhej látky. Kryštalizáciou z etylacetátu sa získalo 0,267 g bezfarebných kryštálov. Hmotnostné spektrum, m = 274.

Príklad 14

Príprava N-[2-(4-morfolinyl)etyl]-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid hydrochloridu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 2. Použili sa nasledovné množstvá: Produkt z príkladu 13 (0,267 g, 0,97 mmol), hydrid sodný (0,040 g, 0,97 mmol vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji) a 2-jódpropán (0,107 ml, 1,07 mmol). Odparením etylacetátových extraktov sa získalo 0,324 g oleja. Dve kryštalizácie vo forme soli kyseliny chlorovodíkovej z etylacetátu/metanolu poskytli 0,122 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 201 - 203 °C. Hmotnostné spektrum, m' 116. Anál. (C₁₇H₂₅CIN₄O₂) teoret. C, 57,87; H, 7,14; N, 15,88; zistené C, 57,71; H, 7,04; N, 16,07.

Príprava 3 Príprava 1 -(2-aminoetyl)-4-benzylpiperazínu

1-benzylpiperazín (8,81 g, 50 mmol) sa zahrieval spolu s N-(2-brómetyl)ftalimidom (12,7 g, 50 mmol) a uhličitanom sodným (13,25 g, 125 mmol) v 250 ml dimetylformamidu pri 100 °C počas 18 hodín. Po odparení dimetylformamidu, zriedení vodou a extrakcii etylacetátom nasledovanej premytím vodou, nasýteným roztokom NaCl a vysušením sa získalo po odparení 18,47 g oleja. Kryštalizáciou vo forme dihydrochloridovcj soli z metanolu sa získalo 8,70 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia >250 °C. Hmotnostné spektrum m⁴ = 349. Anál. (C₂iHjsCIjN^Oi) teoret. C, 59,72; H, 5,97; N, 9,95; zistené C, 60,04; H, 6,00; N, 10,04.

Takto pripravený medziprodukt (8,48 g, 20 mmol) sa miešal v 400 ml etanolu, za postupného pridávania 10,0 ml hydrát hydrazínu. Táto zmes sa zahrievala na refluxnej teplote počas 4 hodín. Po ochladení sa zmes filtrovala a filtrát sa následne odparil. Takto vzniknutý zvyšok sa opatrne rozriedil 300 ml IN roztoku hydroxidu sodného. Následnou extrakciou dietyléterom, vysušením a odparením sa získalo 3,69 g oleja. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 219.

Príklad 15

Príprava N-[2-(4-benzyl-l -piperazinyl)etyl]-l H-indazol-3-karboxamidu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 5. Použili sa nasledovné množstvá: lH-indazol-3-karboxylová kyselina (2,72 g, 16,7 mmol), 1 ,Γ-karbonyldiimidazol (2,72 g, 16,7 mmol) a medziprodukt z prípravy 3 (3,68 g, 16,7 mmol). Etylacetátové extrakty sa odparili na 5,72 g tuhej látky. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 364.

Príklad 16

Príprava N-[2-(4-benzyl-l-piperazinyl)etyl]-l-(2-propyl)-1 H-indazol-3 -karboxamid dihydrochloridu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 2. Použili sa nasledovné množstvá: Produkt z príkladu 15 (5,72 g, 15,7 mmol), hydrid sodný (0,630 g, 15,7 mmol vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji) a 2-jódpropán (1,73 ml, 17,3 mmol). Odparením etylacetátových extraktov sa získalo 7,24 g oleja. Flash chromatografíou [silikagél, metylénchlorid/metanol (93/7)] sa získalo 2,85 g oleja. Kryštalizáciou vo forme dihydrochloridovej soli z 2-propanolu sa získali bezfarebné kryštály. Bod topenia 242 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 405. Anál. (C24H33CI2N5O) teoret. C, 60,25; H, 6,95; N, 14,64; zistené Č, 60,04; H, 7,01; N, 14,53.

Príklad 17

Príprava N-[2-( 1 -piperazinyljetyl]-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamidu

Produkt z príkladu 16, vo forme voľnej bázy (2,35 g, 5,8 mmol), reagoval s plynným vodíkom v prítomnosti 5 % Pd/C (40 °C/18h/60 PSI) v roztoku etanolu. Po odfíltrácii katalyzátora, sa odparil etanol, pričom sa získalo 1,49 g 0leja. Flash chromatografíou [silikagél, metylénchlorid/metanol/hydroxid amónny (100/15/0,5)] sa získalo 0,951 g 0leja. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 315.

Príklad 18

Príprava N-[2-(4-benzoyl-1 -piperazinyljetyl]-1 -(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 17 (0,315 g, 1 mmol) a trietylamín (0,315 g, 1,05 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofuránu a krátko sa ochladili na ľadovom kúpeli. Do zmesi sa po kvapkách pridal benzoylchlorid (0,116 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote, filtrovala sa a odparila sa na olej. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,284 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 105 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 419. Presná hmotnosť teoret. 419,2321, zistená419,2315.

Príprava 4

Príprava 1 -(2-aminoetyl)-4-benzylpiperidínu

4-benzylpiperidín (5,30 ml, 30 mmol) sa zahrieval spolu s N-(2-brómetyl)ftalimidom (7,6 g, 30 mmol) a uhličitanom sodným (7,95 g, 75 mmol) v 150 ml dimetylformamidu pri 100 °C počas 18 hodín. Po odparení dimetylformamidu, zriedení vodou a extrakcii etylacetátom nasledovanej premytím vodou, nasýteným roztokom NaCl a vysušením sa po odparení získalo 11,61 g oleja. Kryštalizáciou vo forme tosylátovej soli z etanolu sa získalo 10,39 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 194 - 196 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 348. Anál. (C29H32N2O5S) teoret. C, 66,90; H, 6,20; N, 5,38; zistené C, 66,68; H, 6,40; N, 5,16.

Takto pripravený medziprodukt sa vo forme voľnej bázy (5,05 g, 14 mmol) miešal v 225 ml etanolu, za postupného pridávania 5,0 ml hydrát hydrazínu. Táto zmes sa zahrievala na refluxnej teplote 4 hodiny. Po ochladení sa zmes filtrovala a filtrát sa odparil. Takto vzniknutý zvyšok sa opatrne rozriedil IN roztokom hydroxidu sodného, následnou extrakciou dietyléterom, vysušením a odparením sa získalo 3,13 g oleja. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 218.

Príklad 19

Príprava N-[2-(4-benzyl-l-piperidinyl)etyl]-lH-indazol-3-karboxamidu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 5. Použili sa nasledovné množstvá: 1 H-indazol-3-karboxylová kyselina (1,62 g, 10 mmol) a l,ľ-karbonyldiimidazol (1,62 g, 10 mmol) a medziprodukt z prípravy 4 (2,18 g, 10 mmol). Etylacetátové extrakty sa odparili na tuhú látku. Pridaním cyklohexánu a filtráciou sa získalo 3,52 g tuhej látky. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 363.

Príklad 20

Príprava N-[2-(4-benzyl-1 -piperidiny l)ety 1] -1 -(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid oxalátu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 2. Použili sa nasledovné množstvá: Produkt z príkladu 19 (3,50 g, 9,7 mmol), hydrid sodný (0,390 g, 9,7 mmol vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji) a 2-jódpropán (1,07 ml, 10,7 mmol). Odparením etylacetátových extraktov sa získalo 4,30 g oleja. Flash chromatografíou [silikagél, metylénchlorid/metanol (93/7)] sa získalo 2,52 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etanolu sa získalo 2,51 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 149 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 404. Anál. (C₂₇H₃4N₄O_:) teoret. C, 65,57; H, 6,93; N, 11,33; zistené C, 65,32; H, 6,86; N, 11,48.

Príprava 5 Príprava 2-(2-aminoetyl)-1,2,3,4-tetrahydroizochinolínu

1,2,3,4-tetrahydroizochinolín (3,76 ml, 30 mmol) sa zahrieval spolu s N-(2-brómetyl)ftalimidom (7,6 g, 30 mmol) a uhličitanom sodným (8,0 g, 75 mmol) v 150 ml dimetylformamidu pri 100 °C počas 18 hodín. Po odparení dimetylformamidu, zriedení vodou a extrakcii etylacetátom nasledovanej premytím vodou, nasýteným roztokom NaCl a vysušením sa získalo po odparení 10,46 g oleja. Kryštalizáciou vo forme tosylátovej soli z etanolu sa získalo 10,30 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 196 až 198 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 306. Anál. (C26H26N2O5S) teoret. C, 65,26; H, 5,48; N, 5,85; zistené C, 65,37; H, 5,45; N, 5,95.

Takto pripravený medziprodukt sa vo forme voľnej bázy (3,06 g, 10 mmol) miešal v 200 ml etanolu, za súčasného pridávania 5,0 ml hydrát hydrazínu. Táto zmes sa zahrievala na refluxnej teplote 4 hodiny. Po ochladení sa zmes filtrovala a filtrát sa následne odparil. Takto vzniknutý zvyšok sa opatrne rozriedil IN roztokom hydroxidu sodného a následnou extrakciou dietyléterom, vysušením a odparením sa získalo 1,62 g oleja. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 176.

Príklad 21

Príprava N-[2-(l,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolinyl)etyl]-lH-indazol-3-karboxamidu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 5. Použili sa nasledovné množstvá: lH-indazol-3-karboxylová kyselina (1,49 g, 9,2 mmol) a Ι,Γ-karbonyldiimidazol (1,49 g, 9,2 mmol) a medziprodukt z prípravy 5 (1,62 g,

9,2 mmol). Etylacetátové extrakty sa odparili na tuhú látku. Pridaním cyklohexánu a filtráciou sa získalo 2,73 g tuhej látky. Hmotnostné spektrum m⁺ = 321.

Príklad 22

Príprava N-[2-(l ,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolinyl)etyl]-l -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Postupuje sa podľa protokolu opísaného v príklade 2. Použili sa nasledovné množstvá: Produkt z príkladu 21 (2,70 g, 8,5 mmol), hydrid sodný (0,340 g, 8,5 mmol vo forme 60 % disperzie v minerálnom oleji) a 2-jódpropán (0,94 ml, 9,4 mmol). Odparením etylacetátových extraktov sa získalo 3,28 g oleja. Flash chromatografiou [silikagél, metylénchlorid/mctanol (97/3)] sa získalo 2,62 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etanolu sa získalo 2,47 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 191 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 362. Anál. (C₂4H₂₈N₄O₅) teoret. C, 63,70; H, 6,24; N, 12,38; zistené C, 63,96; H, 6,47;

N, 12,26.

Príklad 23

Príprava N-[2-(4-amino-1 -piperid inyl)etyl] -1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid dioxalát

Produkt z príkladu 8 vo forme voľnej bázy (8,71 g, 18,8 mmol), reagoval s plynným vodíkom v prítomnosti 5 % Pd/C (25 °C/18h/60 PSI) v roztoku etanolu. Po odfiltrácii katalyzátora, sa etanol odparil, pričom sa získalo 5,0 g oleja. Kryštalizáciou vo forme dioxalátovej soli z metanolu/vody sa získali bezfarebné kryštály. Bod topenia 232 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 329. Anál. (C₂₂H₃₁N₅O₉) teoret. C, 51,86; H, 6,13; N, 13,75; zistené C, 51,61; H, 6,04; N, 13,48.

Príklad 24

Príprava N-[2-(4-metylsulfonylamino-l-piperidinyl)etyl]-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) a trietylamín (0,15 ml, 1,05 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofúránu a ochladili sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridával metánsulfonylchlorid (0,08 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote. Zmes sa filtrovala a odparením filtrátu sa získalo 0,401 g oleja. Flash chromatografiou [silikagél, metylénchlorid/metanol (90/10)] sa získalo

O, 147 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,149 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 204 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 407. Presná hmotnosť teoret. 408,2069, zistená 408,2066.

Príklad 25

Príprava N-[2-(4-benzoylamino-1 -piperidinyl)ctyl ] -1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) a trietylamín (0,15 g, 1,05 mmol) sa miešal v 10,0 ml tetrahydrofúránu a ochladil sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridal benzoylchlorid (0,116 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote, filtrovala sa a odparením filtrátu sa získalo 0,498 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,265 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 130 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 433. Anál. (C₂₇H„N₅O₆) teoret. C, 61,94; H, 6,35;

N, 13,38; zistené C, 61,73; H, 6,35; N, 13,33.

Príklad 26

Príprava N-[2-(4-benzylkarbonylamino-l-piperidinyl)etyl]-1-(2-propyl)- lH-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,310 g,

O, 94 mmol) a trietylamín (0,13 g, 0,94 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofúránu a ochladili sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridával fenylacetylchloríd (0,12 ml, 0,94 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote, následne sa filtrovala a odparením filtrátu sa získal olej. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,176 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 168 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 447. Anál. (C₂8H₃5N₅O₆) teoret. C, 62,56; H, 6,56; N, 13,03; zistené C, 62,61; H, 6,65; N, 12,83.

Príklad 27

Príprava N-[2-(4-( 1 -adamantylkarbonylamino)-1 -píperidinyl)etylJ-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) a trietylamín (0,15 g, 1,05 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofúránu a ochladili sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridal 1-adamantánkarbonylchlorid (0,199 g, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote, následne sa filtrovala a odparením filtrátu sa získalo 0,565 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,267 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 228 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 491. Anál. (C_3IH4₃N₅O₆) teoret. C, 64,01; H, 7,45; N, 12,04; zistené C, 63,89; H, 7,53;

N, 12,12.

Príklad 28

Príprava N-[2-(4-acetylamino-l-piperidinyl)etyl]-l -(2-propyl)- 1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) a trietylamín (0,15 g, 1,05 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofúránu a ochladili sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridal acetylchlorid (0,071 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote, následne sa filtrovala a odparením filtrátu sa získalo 0,360 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z acetátu/metanolu sa získalo 0,243 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 176 °C. Hmotnostné spektrum, m' = 371. Anál. (C₂₂H_3]N₅O₆) teoret. C, 57,25; H, 6,77; N, 15,17; zistené C, 56,95; H, 6,74; N, 14,99.

Príklad 29

Príprava N-[2-(4-propionylamino-l-piperidinyl)etyl]-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,310 g,

O, 94 mmol) a trietylamín (0,13 g, 0,94 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofúránu a ochladili sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridal propionylchlorid (0,08 ml, 0,94 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote, následne sa filtrovala a odparením filtrátu sa získal olej. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,168 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 169 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 385. Anál. (C₂₃H₃₃N_}0₆) teoret. C, 58,09; H, 6,99; N, 14,73; zistené C, 57,79; H, 6,93; N, 14,46.

Príklad 30

Príprava N-[2-(4-butyrylamino-l-piperidinyl)etyl]-l-(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) a trietylamín (0,15 g, 1,05 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofúránu a ochladili sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridal butyrylchlorid (0,1 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodin pri laboratórnej teplote, následne sa filtrovala a odparením fíltrátu sa získalo 0,389 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etyl acetátu/metanolu sa získalo 0,149 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 122 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 399. Anál. (C₂4H₃₅N₅O6) teoret. C, 58,88; H, 7,21; N, 14,32; zistené C, 58,60; H, 7,15; N, 14,30.

Príklad 31

Príprava N-[2-(4-valerylamino-l-piperidinyl)ety!]-l-(2-propy 1)-1 H-indazol-3-karboxamidu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) a trietylamín (0,15 g, 1,05 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofúránu a ochladili sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridal valerylchlorid (0,12 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote, následne sa filtrovala a odparením filtrátu sa získalo 0,385 g oleja. Kryštalizáciou z dietyléteru sa získalo 0,176 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 107 až 109 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 413. Anál. (C₂,H₃₅N,O₂) teoret. C, 66,80; H, 8,53; N, 16,93; zistené C, 66,59; H, 8,66; N, 17,04.

Príklad 32

Príprava N-[2-(4-isobutyrylamino-l -piperidinyl)etyl]-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) a trietylamín (0,15 g, 1,05 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofuránu a ochladili sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridal isobutyrylchlorid (0,10 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote, následne sa filtrovala a odparením filtrátu sa získalo 0,417 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z 2-propanolu sa získalo 0,194 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 193 °C. Hmotnostné spektrum, nť = 399. Anál. (C₂₄H₃₅N₅O₆) teoret. C, 58,88; H, 7,21; N, 14,30; zistené C, 58,60; H, 6,95; N, 14,11.

Príklad 33

Príprava N-[2-(4-trimetylacetylamino-l-piperidinyl)etyl]-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) a trietylamín (0,15 g, 1,05 mmol) sa miešali v 10,0 ml tetrahydrofuránu a ochladili sa krátko na ľadovom kúpeli. K zmesi sa po kvapkách pridal trimetylacetylchlorid (0,12 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 18 hodín pri laboratórnej teplote, následne sa filtrovala a odparením filtrátu sa získalo 0,384 g oleja. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z 2-propanolu sa získalo 0,297 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 194 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 413. Anál. (C₂5H₃₇N₅O_e) teoret. C, 59,63; H, 7,41; N, 13,91; zistené C, 59,47; H, 7,62; N, 13,63.

Príklad 34

Príprava N-[2-(4-benzylaminokarbonylamino)-1 -piperidinyl )ety 1]-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) sa miešal v 8 ml tetrahydrofuránu a ochladil sa na ľadovom kúpeli na 10 °C. K zmesi sa po kvapkách pridal benzylizokyanát (0,12 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 1,5 hodiny pri laboratórnej teplote a odparila sa na olej. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etanolu sa získalo 0,319 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 16 8 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 463. Presná hmotnosť teoret. 463,2821, zistená 463,2838.

Príklad 35

Príprava N-[2-(4-fenylaminokarbonylamino)-l-piperidinyl)etyl]-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) sa miešal v 8 ml tetrahydrofuránu a ochladil sa na ľadovom kúpeli na 10°C. K zmesi sa po kvapkách pridal fenylylizokyanát (0,11 ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 1,5 hodiny pri laboratórnej teplote a odparila sa na olej. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etanolu sa získalo 0,299 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 198 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 449. Anál. (C₂₇H₃₄N₆O₆) teoret. C, 60,21; H, 6,36; N, 15,60; zistené C, 60,42; H, 6,60; N, 15,47.

Príklad 36

Príprava N-[2-(4-(4-fluórfenylaminokarbonylamino)-l-piperidinyljetylj-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Produkt z príkladu 23, vo forme voľnej bázy (0,330 g, 1 mmol) sa miešal v 8 ml tetrahydrofuránu a ochladil sa na ľadovom kúpeli na 10 °C. Do zmesi sa po kvapkách pridal 4-fluórfenylylizokyanát(0,ll ml, 1 mmol) a výsledná zmes sa miešala 1,5 hodiny pri laboratórnej teplote a odparila sa na olej. Kryštalizáciou vo forme oxalátovej soli z etylacetátu/metanolu sa získalo 0,147 g bezfarebných kryštálov. Bod topenia 158 °C. Hmotnostné spektrum, m⁺ = 466. Anal. (C₂7H₃₃FN₆O₆) teoret. C, 58,27; H, 5,98; N, 15,10; zistené C, 58,48; H, 6,23; N, 14,94.

Príklad 37

Príprava N-[2-(4-(3-hydroxy-1 -adamantylkarbonylamino)-1 -piperidinyljetylj-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3-karboxamid oxalátu

Zmes 1,07 g (5,45 mmol) 3-hydroxy-l-adaman-tylkarboxylovej kyseliny a 0,88 g (5,45 mmol) l,ľ-karbonyldiimidazolu v 10 ml dimetylformamidu sa miešala 2 hodiny pri laboratórnej teplote. Do tohto roztoku sa po kvapkách pridalo 1,80 g (5,45 mmol) produktu z príkladu 23 v 7 ml dimetylformamidu. Reakčná zmes sa miešala 18 hodín a potom sa zakoncentrovala in vacuo, rozriedila sa dichlórometánom a tuhé látky sa odstránili filtráciou. Hrubý produkt sa purifíkoval chromatografiou (silika, 9 : 1 dichlórometán-metanol), čim sa získalo 1,30 g (47 %) žiadaného produktu vo forme peny. Ďalším spracovaním produktu pomocou 0,23 g (2,62 mmol) kyseliny oxálovej v 20 ml etanolu sa po zakoncentrovaní roztoku získalo 1,51 g oxalátovej soli (LSN343031). 'H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) d 8,51 (t, 1H), 8,19 (d, 1H), 7,9 (br s, 3H), 7,78 (d, 1H), 7,44 (t, 1H), 7,40 (d, 1H), 7,27 (t, 1H), 5,06 (m, 1H), 3,84 (m, 1H), 3,72 (m, 2H), 3,52 (m, 2H), 3,24 (br t, 2H), 3,07 (br t, 2H), 2,11 (br s, 2H), 1,82 (m, 4H), 1,64 (m, 6H), 1,55 (m, 10H), 1,48 (br s, 2H).

Príklad 38

Príprava N-[2-(4-(4-hydroxy-l-adamantylkarbonylamino)-1 -piperidinyljetyl]-1 -(2-propyl)-1 H-indazol-3 -karboxamid oxalátu

Zmes 0,50 g (2,55 mmol) 4-hydroxy-l-adamantylkarboxylovej kyseliny a 0,44 g (2,71 mmol) l,ľ-karbonyldiimidazolu v 10 ml dimetylformamidu sa miešala 2 hodiny pri laboratórnej teplote. Do tohto roztoku sa po kvapkách pridalo 0,90 g (2,75 mmol) produktu z príkladu 23 v 7 ml dimetylformamidu. Reakčná zmes sa miešala 18 hodín a potom sa zakoncentrovala in vacuo, rozriedila sa dichlórometánom a tuhé látky sa odstránili filtráciou. Hrubý produkt sa purifíkoval chromatografiou (silika, 9 : 1 dichlórometán-metanol), čím sa získalo 0,71 g (55 %) žiadaného produktu vo forme peny. Ďalším spracovaním 500 mg produktu s 88 mg kyseliny oxálovej v 15 ml etanolu sa po zakoncentrovaní roztoku získalo 580 mg oxalátovej soli (LSN343032). Ή NMR (300 MHz, DMSO-d₆) d 8,47 (t, 1H), 8,11 (d, 1H), 7,75 (d, 1H), 7,40 (t, 1H), 7,28 (d, 1H), 7,21 (t, 1H), 6,3 (br s, 3H), 5,04 (m, 1H), 3,74 (m, 1H), 3,59 (m, 3H), 3,40 (m, 2H), 3,13 (m, 2H), 2,95 (m, 2H), 1,95 (d, 2H), 1,69 (m, 13H), 1,47 (d, 6H), 1,25 (d, 2H).

Liečebné účinky

Vybrané zlúčeniny predkladaného vynálezu sa biologicky testovali s cieľom poukázať na ich interakciu s 5-HT₄receptorom. Test sa vykonal na hladkom svalstve pažeráku, okamžite po jeho odobratí zo samcov potkanov „Wistar“, vážiacich 250 - 300 g. Potkany sa usmrtili dislokáciou krčných stavcov, pažerák sa odobral a zbavil spojovacieho tkaniva, Pažeráky sa použili ako pozdĺžne preparáty - získali sa tak dva preparáty z každého zvieraťa. Oba konce tkaniva sa priviazali niťou, pričom spodný koniec sa upevnil na nepohyblivú sklenenú tyčinku a horný koniec na prenášač sily.

Tkanivá sa pripevnili do orgánového kúpeľa obsahujúceho 10 ml modifikovaného Krebsovho roztoku s nasledovným zložením (v milimóloch na ml) NaCl 118,2; KCI 4,6; CaCI₂.2H₂O 1,6; KH₂PO₄ 1,2; MgSO₄ 1,2; dextróza 10,0 a NaHCO₃ 24,8. Roztoky tkanivových kúpeľov sa udržiavali na 37 °C a prevzdušňovali sa s 95 % O₂-5 %CO₂. Na tkanivá sa aplikovala optimálne kľudová sila, 1 g a nechali sa ekvilibrovať počas 1 hodiny pred vystavením účinku liekov. Izometrické kontrakcie sa zaznamenávali ako gramy sily na záznamovom systéme Modular Instruments Inc. (Malvem, Pa) model M4000 s prenosovými aparátmi Sensotec (Columbus, Ohio) model MBL 5514-02.

Pre štúdie s parciálnymi agonistami alebo antagonistami sa tkanivá predinkubovali s vehikulom alebo antagonistom podobu 45 min. Všetky lieky sa pripravovali denne v dcionizovanej vode a počas trvania experimentu sa udržiavali na ľade. Kontrakcia tkanív sa navodila inkubáciou s 10'' - 10‘⁵ M karbamylcholínom a relaxácia sa navodila pridaním 10’⁸ - 10 ^loM serotonínu, čo spôsobilo relaxáciu tkanív a redukovalo kontrakciu spôsobenú karbamylcholínom. Pridanie zlúčeniny z predkladaného vynálezu antagomzovalo odpoveď na serotonín a znižovalo pozorované relaxácie tkaniva. Vykonali sa opakované testy s rôznymi koncentráciami každej zlúčeniny a vypočítali sa koncentrácie, ktoré spôsobili dvojnásobný posun relaxačnej krivky. Táto koncentrácia je tu uvedená ako negatívny logaritmus. V každom prípade sa vypočítala smerodajná odchýlka údajov, ktorá je dolu uvedená spolu s počtom vykonaných experimentov s každou zlúčeninou.

Zlúčenina

Príkladu č.	-Log K_B
1	7,5±,01 (4)
2	8,0±,3 (9)
4	8,1±,4 (3)
6	8,2+1 (5)
8	8,8±,2 (15)
10	7,7±,1 (3)
12	8,0+6 (4)
14	7,6+2 (7)
16	8,O±,3 (6)
18	7,5±,4(4)
20	7,3±,2 (5)
22	8,0+,3 (4)
23	6,8+,1 (4)
24	7,9+,6 (4)
25	8,6±,2 (8)
26	8,4±,2 (8)
27	9,9±,4 (6)
28	8,3±,3 (4)
29	8,5±,2 (3)
30	7,8±,3 (4)
31	7,7±,4 (4)
32	8,6+,2 (5)
33	8,5±,3 (3)
34	8,3±,4 (3)

8,0+,2 (3)

7,6+05 (3)

8,9

8,7

Uvedené údaje poukazujú na to, žc zlúčeniny predkladaného vynálezu majú mimoriadne vysokú afinitu k 5-HT₄receptoru. Ďalej sa zistilo, že majú užitočne dlhú pôsobnosť in vivo, najmä v porovnaní s cisapridom, v súčasnosti známou zlúčeninou s vysokou afinitou k 5-HT₄ receptoru. Za povšimnutie stojí skutočnosť, že zlúčeniny sú výrazne účinnejšie v afinite k 5-HT₄ receptoru, v porovnaní s ich inými aktivitami, ako aj afinitami k iným receptorom; selektivita sa často dokazuje rádovo dvoj- alebo dokonca viacnásobnými rozdielmi v koncentrácii nutnej na dosiahnutie tej istej väzobnej schopnosti.

V súlade s tým sú metódy predkladaného vynálezu veľmi účinné v ovplyvnení 5-HT₄ receptoru a obzvlášť v sprostredkovaní antagonistického efektu proti receptoru. Liečebné metódy predkladaného vynálezu sa vykonávajú podaním zlúčeniny, ako je uvedené, v efektívnej dávke subjektu, ktorý potrebuje takýto efekt proti 5-HT₄ receptoru, alebo vyžaduje liečenie či profylaxiu dysfunkcie alebo poruchy 5-HT₄ receptoru. Efektívna dávka, v intenciách predkladaného vynálezu, je také množstvo zlúčeniny, ktoré je dostačujúce na dosiahnutie požadovaného účinku, alebo na dosiahnutie liečenia poruchy. Zlúčeniny sú vo všeobecnosti efektívne pri dosť nízkych dávkach a sú efektívne v značnom rozsahu dávok. Efektívne dávky sa normálne pohybujú v rozsahu od cca 0,001 až po približne 30 mg/kg/deň telesnej hmotnosti. Ako je vo farmaceutickej liečbe zaužívané, denné dávky sa môžu podávať jednorázovo, alebo po dávkach, na základe úsudku zodpovedného lekára. Uprednostňovaný rozsah dávok predstavuje množstvá od cca 0,1 po približne 3,0 mg/kg/deň. Je zrejmé, že dávka pre daný subjekt sa vždy musí stanoviť podľa úsudku ošetrujúceho lekára, a žc dávka sa prispôsobuje podľa hmotnosti pacienta, podľa toho, či je pacient skôr chudej alebo obéznej postavy, podľa vlastností určitej vybranej zlúčeniny, podľa rozsahu symptómov subjektu alebo rozsahu ochorenia a zrejme aj podľa psychologických faktorov, ktoré môžu ovplyvniť fyziologické reakcie subjektu.

Vynález je účinný u cicavcov, ktoré majú 5-HT₄ receptor; uprednostňovaným subjektom je človek.

Ako sa v krátkosti spomenulo, 5-HT₄ receptorom sú ovplyvnené rôzne fyziologické funkcie. V súlade s tým metódy predkladaného vynálezu zahŕňajú metódy liečby alebo profylaxie patologických stavov centrálneho nervového systému ako napríklad stavy úzkosti, bolesť, depresia, schizofrénia, poruchy pamäte a demencia; patologické stavy gastrointestinálneho traktu ako napríklad syndróm dráždivého tračníka, nauzea, gastroezofageálny reflux, dyspepsia, poruchy gastrointestinálnej motility a zápcha; kardiovaskulárne poruchy ako napríklad atriálna fibrilácia, arytmic a tachykardie; a urogenitálne poruchy ako napríklad retencia moča, inkontinencia moča a bolesť pri močení. Za rozsah dávok na liečbu progradujúcich porúch sa považuje rozsah, ktorý sa práve spomínal ako účinný rozsah dávok na blokovanie 5-HT₄ receptoru, keďže liečba alebo profylaxia sa dosahuje aktivitou tohto receptoru.

Liekové formy

Býva zvykom formulovať farmaceutiká s cieľom podávania, čím sa umožní kontrola dávky a stabilita produktu pri preprave a skladovaní, pričom zvyčajné metódy formulácií je možné úplne aplikovať na zlúčeniny so vzorcom (ľ). Takéto liekové formy, obsahujúce aspoň jeden farmaceutický prijateľný nosič, sú cenné a nové z dôvodu pritom nosti zlúčenín so vzorcom (I). Hoci je farmaceutickým chemikom známe množstvo efektívnych spôsobov formulácie farmaceutik, technológiu ktorých je možné aplikovať na predkladané zlúčeniny, v záujme umožnenia čitateľovi získať prehľad uvádzame krátku diskusiu na túto tému.

Použiť sa môžu zvyčajné metódy formulácie, ktoré sa používajú vo farmaceutickej vede ako i zvyčajné typy liekových foriem ako tablety, žuvacie tablety, kapsule, roztoky, parenterálne roztoky, nosné spreje alebo prášky, kolýriá, čapíky, transdermálne náplasti a suspenzie. Vo všeobecnosti celkovo obsahujú tieto liekové formy od cca 0,5 % do cca 50 % zlúčeniny, v závislosti na požadovanej dávke a druhu použitej liekovej forme. Množstvo zlúčeniny sa však najlepšie definuje ako efektívne množstvo, čo predstavuje také množstvo každej zlúčeniny, ktoré poskytuje požadovanú dávku pacientovi, ktorý takúto liečbu potrebuje. Aktivita zlúčenín nezávisí od druhu liekovej formy, takže formulácie sa vyberajú na základe účelnosti danej liekovej formy, ako aj ekonomických možností. Ktorákoľvek zlúčenina sa môže formulovať do akejkoľvek požadovanej liekovej formy. Uvedie sa krátka diskusia o rôznych liekových formách, nasledovaná niektorými typickými formuláciami.

Kapsule sa pripravujú zmiešaním zlúčeniny s vhodným zried’ovadlom a plnením vhodného množstva zmesi do kapslí. Zvyčajné zried’ovadlá obsahujú inertné práškové zložky ako škrob z mnohých rôznych druhov, prášková celulóza, najmä kryštalická a mikrokryštalická celulóza, cukry, ako sú fruktóza, manitol a sacharóza, obilné múky a podobné jedlé prášky.

Tablety sa pripravujú priamym lisovaním, vlhkou alebo suchou granuláciou. Ich formulácie zvyčajne zahŕňajú zried’ovadlá, spojivá, kĺzadlá a rozvoľňovadlá, ako i zlúčeninu. Medzi typické zried’ovadlá patria napríklad rôzne typy škrobu, laktóza, manitol, kaolín, fosforečnan alebo síran vápenatý, anorganické soli ako chlorid sodný a práškový cukor. Vhodné sú tiež deriváty práškovej celulózy. Typické spojivá tabliet sú škrob, želatína a látky ako laktóza, fruktóza, glukóza a podobne. Vhodné sú tiež prírodné a syntetické gumy, vrátane akácie, alginátov, metylcelulózy, polyvinylpyrolidinu a podobne. Ako spojivá môžu slúžiť tiež polyetylénglykol, etylcelulóza a vosky.

Klzná látka je potrebná pri tabletovej formulácii kvôli zabráneniu priliepania tabletoviny a lisovníkov v tabletovacom lise. KÍzadlo sa vyberá spomedzi kĺzavých tuhých látok ako mastenec, stearát horečnatý a vápenatý, kyselina stearová a hydrogenované rastlinné oleje.

Tabletové rozvoľňovadlá sú látky, ktoré po zvlhnutí napučiavajú, čím dôjde k rozpadu tablety a uvoľneniu zlúčeniny. Patria medzi ne škroby, ily, celulózy, algíny a gumy. Môžu sa použiť najmä napr. kukuričný a zemiakový škrob, metylcelulóza, agar, bentonit, celulóza dreva, prášková prírodná hubka, katiónmeniče, kyselina algínová, Guar guma, dužina citrusov, karboxymetylcelulóza, ako aj laurysulfát sodný.

Na ochranu aktívnej prísady od silne kyslého prostredia žalúdka sa často používajú enterické formulácie. Takéto formulácie sa vytvárajú obalením dávky vo forme tuhej látky vrstvou polyméru, ktorý je nerozpustný v kyslom prostredí, ale je rozpustný v zásaditom prostredí. Typickými príkladmi takýchto vrstiev sú ftalát acetátcelulózy, ftalát polyvinylacetátu, ftalát hydroxypropylmetylcelulózy a sukcinát acetátu hydroxypropylmetylcelulózy.

Tablety sa často obaľujú cukrom kvôli chuti a zaceleniu, alebo ochrannými látkami tvoriacimi film modifikujúcimi rozpúšťacie vlastnosti tabliet. Zlúčeniny sa môžu formulovať taktiež ako žuvacie tablety, s použitím zvýšených množstiev látok príjemnej chuti ako manitol, čo je v súčasnosti už zaužívaná prax. V súčasnosti sa dnes tiež často používajú instantné formulácie podobné tabletám, čím sa zabezpečí prijatie dávky v danej forme a predíde sa ťažkostiam, ktoré majú niektorí pacienti pri prchltaní tuhých objektov.

V prípade potreby podania kombinácie vo forme čapíku sa ako základ použijú zvyčajné látky. Tradičný základ pre čapíky tvorí kakaové maslo, ktoré sa môže modifikovať pridaním voskov, kvôli miernemu zvýšeniu bodu topenia. Veľmi rozšírené je tiež používanie čapíkových základov miešateľných s vodou, a to najmä polyetylénglykolov rozličných molekulárnych hmotností.

V poslednej dobe získali na obľube transdermálne náplasti. V typickom prípade obsahujú živicový základ, v ktorej sa účinná látka rozpúšťa, alebo rozpúšťa len čiastočne, a ktorá sa udržiava v kontakte s pokožkou prostredníctvom vrstvy, ktorá zároveň prípravok ochraňuje. V poslednom čase sa v tejto oblasti vynašlo veľa takýchto patentov. Používajú sa tiež iné, komplikovanejšie formy transdermálnych náplastí, a to najmä tie, ktoré obsahujú membrány s početnými pórmi, umožňujúcimi prenikanie liečivej látky osmotickou silou.

Nasledujúce typické formulácie sa uvádzajú v snahe poskytnúť dané informácie v prípade záujmu farmaceutov.

Formulácia 1

Na prípravu tvrdých želatínových kapslí sa použili nasledujúce zložky:

Množstvo ímg/kapsulu)

Príklad 27 20mg

Škrob, sušený 200mg

Stearát horečnatý 10mg

Celkom 230 mg

Formulácia 2

Tableta sa pripravila z nasledujúcich zložiek:

Množstvo ímg/kapsulu)

Príklad 28 10mg

Celulóza, mikrokryštalická 400mg

Oxid kremičitý vo forme výparov 10mg

Kyselina steárová 5mg

Celkom 425 mg

Zložky sa zmixovali a zlisovali do tabliet s váhou 425 mg.

Formulácia 3

Tablety s obsahom 10 mg účinnej látky sa pripravili nasledujúcim spôsobom:

	Množstvo ímg/kapsulu)
Príklad 8	10 mg
Škrob	45 mg
Mikrokryštalická celulóza	35 mg
Polyvinylpyrolidón
(ako 10 % vodný roztok)	4 mg
Karboxymetylškrob sodný	4,5 mg
Stearát horečnatý	0,5 mg
Mastenec	.....J-JSg
Celkom	100 mg

Účinná látka, škrob a celulóza sa preosiali cez sito No. 45 mesh U.S. a starostlivo sa premiešali. Vodný roztok obsahujúci polyvinylpyrolidón sa zmiešal s výsledným práškom a táto zmes sa potom preosiala cez sito No. 14 mesh U.S. Takto vytvorené granuly sa sušili pri 50 °C a preosiali sa cez sito No. 18 mesh U.S. Karboxymetylškrob sodný, stearát horečnatý a mastenec, vopred preosiaty cez sito No. 60 mesh U.S., sa potom pridali ku granulám, ktoré sa po zmiešaní lisovali na tabletovacom stroji za vzniku 100 mg vážiacich tabliet.

Formulácia 4

Kapsule, z ktorých každá obsahovala 30 mg účinnej látky sa pripravili nasledujúcim spôsobom:

Množstvo (mg/kapsulu)

Príklad 11 30mg

Škrob 59mg

Mikrokryštalická celulóza 59mg

Stearát horečnatý2 mg

Celkom 150 mg

Účinná látka, celulóza, škrob a stearát horečnatý sa zmixovali, preosiali cez sito No. 45 mesh U.S. a starostlivo sa premiešali a filtrovali do želatínových kapslí v 150 mg množstvách.

Formulácia 5

Čapíky s obsahom 5 mg účinnej látky sa pripravili nasledujúcim spôsobom:

Množstvo (mg/kapsulu) Príklad 21 5 mg

Glyceridy nasýtených mastných kyselín 2000 mg

Celkom 2005 mg

Účinná látka sa preosiala cez sito No. 60 mesh U.S. a suspendovala sa do glyceridov nasýtených mastných kyselín vopred roztopených pomocou minimálneho nevyhnutného tepla. Zmes sa potom vliala do čapíkových foriem s nominálnou kapacitou 2 g a nechala sa ochladnúť.

Formulácia 6

Suspenzie s obsahom 10 mg účinnej látky na 5 ml dávku sa pripravili nasledujúcim spôsobom:

Množstvo (mg/kapsulu) mg mg

1,25 ml

0,10 mi koľko sa uzná za vhodné koľko sa uzná za vhodné

Príklad 6

Karboxymetylcelulóza sodná

Sirup

Roztok kyseliny benzoovej

Chuť

Farba

Purifikovaná voda do celkového objemu 5 ml

Účinná látka sa preosiala cez sito No. 45 mesh U.S. a zmiešala sa s karboxymetylcelulózou sodnou a sirupom na hladkú pastu. Roztok kyseliny benzoovej, chuť a farba sa rozriedili časťou vody a pridali sa do pasty za stáleho miešania. Potom sa pridala voda na získanie požadovaného objemu.

Formulácia 7

Intravenózna lieková forma sa môže pripraviť nasledujúcim spôsobom:

Príklad 32 lzotonický roztok NaCl

Množstvo (mg/kapsulu) mg

1000 ml

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Zlúčenina so všeobecným vzorcom (I) kde:

R je vodík, C_rC₆ alkyl, C₃-C₆ cykloalkyl;

R¹ je vodík, halogén, C_rC₄ alkyl, hydroxy, C_rC₄ alkoxy alebo alkyltio, kyano, trifluórmetyl, karboxamid, mono- alebo di(Ci-C₄ alkyl) karboxamid;

m, n a o sú nezávisle 0-5, za predpokladu, že súčet m, n a o je 2-5;

R² je vodík alebo C,-C₄ alkyl;

R³ a R⁴ sú spojené cez atóm dusíka, na ktorý sú naviazané, čím vytvárajú 1 -pyrolidinyl, 1-piperazinyl, 1,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolinyl, 2,3-dihydro-l-indolinyl, 4-morfolinyl, 1-piperidinyl alebo 1-hexametyléniminyl substituovaný fenylom, naftylom, (fenyl alebo naftyl)(C i -C3 alkylom), (fenyl alebo naftyl)(C|-C3 alkanoylom), amínom, mono- alebo dt(CrC4 alkyl) amínom, alebo skupinou so vzorcom NH-Y-R⁵; za predpokladu, že piperazinylová alebo morfolinylová skupina nebude substituovaná amínom, mono- alebo di(C i-C4 alkyl) amínom, alebo -NH-Y-R⁵;

kde fenylová alebo naftylová skupina je nesubstituovaná, alebo substituovaná 1-3 halogénom, C|-C₃ alkylom alebo C|-C₃ alkoxy skupinami;

Y je karbonyl, sulfonyl, aminokarbonyl alebo oxykarbonyl; R⁵ je C_rC₆ alkyl, C₃-C₈ cykloalkyl, C₆-C_tl bicyklo- alebo tricykloalkyl, (fenyl alebo naftyl)(C,-C₃ alkyl), fenyl alebo naftyl;

kde cykloalkyl, bicyklo- alebo tricykloalkyl, fenylová alebo naftylová skupina sú nesubstituované, alebo substituované 1-3 hydroxy, halogénom, C!-C₃ alkylom alebo C_rC, alkoxy skupinami;

alebo farmaceutický prijateľné soli týchto zlúčenín.
2. Zlúčenina podľa nároku 1, kde m+n+o je 2 až 4.
3. Zlúčenina podľa nároku 2, kde R je vodík alebo alkyl.
4. Zlúčenina podľa nároku 3, kde R¹ je vodík, halogén, alkyl alebo alkoxy skupina.
5. Zlúčenina podľa nároku 4, kde skupina vytvorená spojením R³ a R⁴ v spojení s atómom dusíka, na ktorý sú naviazané , jc substituovaná fenylom, naftylom, (fenylom alebo naftylomXCľC;! alkylom), alebo (fenylom alebo naftylom) (Cj-C₃ alkanoylom).
6. Zlúčenina podľa nároku 4, kde skupina vytvorená spojením R³ a R⁴ sa viaže s atómom dusíka, ku ktorému sú pripojené, je substituovaná skupinou so vzorcom-NH-Y-R⁵.
7. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-[2-(4-(3-hydroxy-1 -adamantylkarbonylamino)-1 -piperidi nyl )ety I] -l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid alebo N-[2-(4-(4-hydroxy-1-adamantylkarbonylamino)-l-piperidinyl)etyl]-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid alebo ich farmaceutický prijateľná soľ.
8. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-[2-(4-benzyloxykarbonylamino-1 -pi per id inyl)ety I] -1 -(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
9. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-[2-(4-acetylamino-l-piperidinyl)etyl]-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
10. Zlúčenina podľa nároku 1, ktorou je N-[2-(4-( 1 -adamantyl karbonylamíno)-1 -piperidinyljetyl j-1 -(2-propy I)-lH-indazol-3-karboxamid alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
11. Farmaceutický prostriedok vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič a zlúčeninu podľa nároku 1.
12. Farmaceutický prostriedok vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič a zlúčeninu podľa nároku 3.
13. Farmaceutický prostriedok vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič a zlúčeninu podľa nároku 4.
14. Farmaceutický prostriedok vyznačujúci sa t ý m , že obsahuje farmaceutický prijateľný nosič a zlúčeninu podľa nároku 10.
15. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, na použitie ako parciálny agonista, alebo antagonista receptoru 5-HT₄ pri subjekte, ktorý potrebuje aktivitu takéhoto parciálneho agonistu, alebo antagonistu.
16. Zlúčenina podľa nároku 15, kde zlúčeninu predstavuje zlúčenina, v ktorej m+n+o je 2 až 4 a R je vodík alebo alkyl.
17. Zlúčenina podľa nároku 16, kde zlúčeninou je N-[2-(4-(1 -adamantylkarboxamido)-1 -piperidinyljetyl] -1 -(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
18. Zlúčenina všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, na použitie na liečenie alebo profylaxiu stavov úzkosti, bolesti, depresie, schizofrénie, porúch pamäte, demencie, syndrómu dráždivého tračníka, nauzey, gastroezofageálneho refluxu, dyspepsie, porúch gastrointestinálnej motility, zápchy, atriálnej fíbrilácie, arytmie a tachykardie, retencie moču, inkontinencie moču alebo bolesti pri močení.
19. Zlúčenina podľa nároku 18, kde zlúčeninu predstavuje zlúčenina, ktorej m+n+o je 2 až 4 a R je vodík alebo alkyl.
20. Zlúčenina podľa nároku 19, kde zlúčeninu predstavuje N- [2-(4-( 1 -adamantylkarbonylamino)-1 -piperidinyljetyl |-l-(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
21. Spôsob prípravy zlúčeniny so všeobecným vzorcom (I)

R²

I

CO - NH - (CHĺln - (CH)_m - (CH₂)_o - Νζ^ _r4

R U kde:

R je vodík, C_rC₆ alkyl, C₃-C₆ cykloalkyl;

R¹ je vodík, halogén, C_rC₄ alkyl, hydroxy, C_rC₄ alkoxy alebo alkyltio, kyano, trifluórmetyl, karboxamid, mono- alebo di(C_rC₄ alkyl) karboxamid;

m, n a o sú nezávisle 0-5, za predpokladu, že súčet m, n a o je 2-5;

R² je vodík alebo C_rC₄ alkyl;

R³ a R⁴ sú spojené cez atóm dusíka, na ktorý sú naviazané, čím vytvárajú 1-pyrolidinyl, l,2,3,4-tetrahydro-2-izochinolinyl, 2,3-dihydro-l-indolinyl, 1-piperidinyl alebo 1-hexametyléniminyl substituovaný skupinou so vzorcom -NH-Y-R⁵;

Y je karbonyl;

R⁵ je C₃-C₈ cykloalkyl, C_s-Cn bicyklo- alebo tricykloalkyl, (fenyl alebo naftyl)(C]-C₃ alkyl), fenyl alebo naftyl; kde cykloalkyl, bicyklo- alebo tricykloalkyl, fenylová alebo naftylová skupina sú substituované 1-3 hydroxy skupinami; alebo farmaceutický prijateľnej soli tejto zlúčeniny; vyznačujúci sa tým, že sa nechá reagovať zlúčenina so všeobecným vzorcom I, kde R³ a R⁴ sú spojené cez atóm dusíka, na ktorý sú naviazané, čim vytvárajú aminoskupinou substituovaný 1-pyrolidinyl, 1,2,3,4-tetra- hydro-2-izochinolinyl, 2,3-dihydro-l-indolinyl, 1-piperidinyl alebo 1-hexametyléniminyl, so zlúčeninou so všeobecným vzorcom

H0₂C-R^s v prítomnosti kondenzačného činidla pre reakcie vedúce ku vzniku amidu.
22. Spôsob podľa nároku 21, vyznačujúci sa t ý m , že zlúčeninu so vzorcom I predstavuje zlúčenina, v ktorej R⁵ je hydroxyskupinou substituovaný cykloalkyl, bicyklo- alebo tricykloalkyl.
23. Spôsob podľa nároku 22, vyznačujúci sa t ý m , že zlúčeninu všeobecného vzorca (I) predstavuje zlúčenina, v ktorej R⁵ je hydroxyskupinou substituovaný adamantyl.
24. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca (I), podľa nároku 1, alebo jej farmaceutický prijateľnej soli na výrobu liečiva na parciálnu agonizáciu, alebo antagonizáciu receptoru 5-HT₄ pri subjekte , ktorý potrebuje takúto parciálnu agonizáciu, alebo antagonizáciu.
25. Použitie podľa nároku 24, kde zlúčeninu predstavuje zlúčenina, v ktorej m+n+o je2až4aRje vodík alebo alkyl.
26. Použitie podľa nároku 25, kde zlúčeninou je N-[2-(4-(1 -adamantylkarboxamido)-1 -piperidinyljetyl] -1 -(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxamid alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.
27. Použitie zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa nároku 1, alebo jej farmaceutický prijateľnej soli na výrobu liečiva na liečenie alebo profylaxiu stavov úzkosti, bolesti, depresie, schizofrénie, porúch pamäte, demencie, syndrómu dráždivého tračníka, nauzey, gastroezofageálneho refluxu, dyspepsie, porúch gastrointestinálnej motility, zápchy, atriálnej fíbrilácie, arytmie a tachykardie, retencie moču, inkontinencie moču alebo bolesti pri močení.
28. Použitie podľa nároku 27, kde zlúčeninou je zlúčenina, v ktorej m+n+o je 2 až 4 a R je vodík alebo alkyl.
29. Použitie podľa nároku 28, kde zlúčeninou je N-[2-(4-( 1 -adamantylkarbonylamino)-1 -piperidinyljetyl]-1 -(2-propyl)-lH-indazol-3-karboxa-mid alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ.