WO2023102628A1

WO2023102628A1 - Processo de obtenção de composição com atividade virucida, composição com atividade virucida e uso

Info

Publication number: WO2023102628A1
Application number: PCT/BR2022/050479
Authority: WO
Inventors: Eder Socrates Najar LOPES; Laís Pellizzer GABRIEL; Clarice Weis ARNS; Thais Bonatto Borghi E SILVA; Ana Paula De MORAES; Gislaine Santos JACINTO
Original assignee: Universidade Estadual De Campinas
Priority date: 2021-12-07
Filing date: 2022-12-05
Publication date: 2023-06-15

Abstract

A presente invenção se refere a um processo de obtenção de composição com atividade virucida, composição com atividade virucida e uso para inativação de vírus em superfícies, incluindo o SARS-COV-2. A composição virucida e bactericida possui aplicação em ambientes com grande circulação de pessoas e microorganismos, como hospitais, escolas, transporte público, empresas, restaurantes, elevadores, entre outras, pode ser aplicada de forma convencional de pintura nas superfícies desejadas.

Description

PROCESSO DE OBTENÇÃO DE COMPOSIÇÃO COM ATIVIDADE VIRUCIDA, COMPOSIÇÃO COM ATIVIDADE VIRUCIDA E USO

Campo da invenção

[ 1 ] A presente invenção se refere a um processo de obtenção de composição com atividade virucida, composição com atividade virucida e uso para inativação de vírus em superficies, incluindo o SARS-COV-2.

[2 ] A composição virucida e bactericida possui aplicação em ambientes com grande circulação de pessoas e microorganismos, como hospitais, escolas, transporte público, empresas, restaurantes, elevadores, entre outras .

Fundamentos da invenção

[3] Com a crescente demanda por produtos que sej am capazes de inativar vírus e bactérias em superfícies, devido a doenças como o coronavirus, a presente invenção propõe um produto com atividade virucida e bactericida, que pode ser aplicado em superfícies, incluindo superfícies de locais críticos com grande presença de microrganismos, como corrimões, paredes, bancos, maçanetas, talheres, botões, entre outros, para inativar o contágio por contato . O produto proposto é composto de cobre puro, obtido preferencialmente por meio de processo de atomização a gás ou a água, ou por meio de moagem, ou por processo de eletrodeposição, com granulometria entre 20 a 60 micrômetros, misturado a tinta e aplicado na superfície desej ada . Existem no mercado produtos à base de ligas de cobre ou pós revestidos, e necessidade de estar em forma monovalente, divalente ou na forma de óxidos de cobre, que contenham impurezas ou outros aditivos . A obtenção do referido pó é por simples atomização ou moagem ou eletrodeposição, não sendo necessário nenhum processo posterior como encontrado em documentos, como micro-ondas .

Também na presente invenção, é necessário somente homogeneização do pó de cobre na tinta por simples homogeneização manual a temperatura ambiente, não sendo necessários a aplicação de temperatura ou equipamentos para dispersão . Quanto à aplicação, na presente invenção é realizada com pincel ou pintura eletrostática, dispensando o uso de técnicas como pulverizadores .

[4 ] 0 documento de patente JP2019065375 refere-se a um pó de liga de cobre que é majoritariamente constituído de cobre tendo uma composição contendo 1, 05% em peso

(±0.10%) de estanho e 0, 09% em peso (± 0, 01%) de fósforo e o cobre de equilíbrio com impurezas inevitáveis e pode ser fornecido com uma forma de pó e um método de fabricação de um antibacteriano e pó de liga de cobre antivírus fabricado por um método de atomização e um método sintético de microondas . Além disso, a aplicação do referido pó em um corrimão de instituições médicas ou semelhantes, uma maçaneta de porta, ou semelhantes, permite a inativação de doenças infeciosas e é preferencialmente imobilizado em um estado disperso nnuummaa substância (homogeneização) . O documento ainda descreve que o tamanho de partícula pode variar de 1 nm a 140 micrômetros, abarcando a referida faixa de tamanho de partícula de 20 a 50 micrômetros alegada como diferencial técnico . Contudo, é necessária uma liga de cobre contendo estanho, fósforo, acelerador de reação, e aditivo .

Diferentemente, a presente invenção não se trata de liga de cobre e não requer esses aditivos acima citados . Tem-se pó de Cobre puro sem necessidade de aditivos, atomizado através de água ou gás ou fruto de processamento por moagem ou eletrodeposição . Além disso, o método de processamento é somente atomização ou moagem ou eletrodeposição, e não atomização ou moagem ou eletrodeposição seguido de micro- ondas, é um processo de homogeneização mecânico .

[5] O documento WO 2020/204118 revela-se um pó de partículas finas de cobre metálico (puro) que é capaz de exibir propriedades antivirals com eficiência, um método para f faabbrriiccaarr o referido pó ee um agente antiviral . 0 referido pó é revestido com um ácido graxo e/ou um composto de éster, e as partículas têm tamanho de 100 nm a 500 pm. O documento revela que o referido pó pode ser disperso em um líquido ou resina, sendo preferencialmente em tintas, com teor de 0, 01 a 2, 0% m/m. Os exemplos de concretização demonstram a inativação de alguns vírus, tais como o vírus influenza A em superfícies . Não são nomeadamente obtidas pelo mesmo processo de atomização . No documento é necessária uma etapa de recobrimento das partículas de cobre com ácidos graxos ou éster . O tamanho de partículas citado está também na faixa de nanômetros a micrômetros . Um processo de dispersão é necessário, incluindo a etapa de aquecimento e mistura . Na presente invenção existe simplicidade no processo de obtenção de cobre e revestimento de superfícies .

O processo de dispersão é somente homogeneização manual a temperatura ambiente, mais rápido e simples . Partículas são da ordem de 5 a 60 micrômetros .

[ 6] O documento de patente EP2786760 refere-se ao uso não terapêutico de pelo menos um tipo de composto monovalente de cobre atuando como um agente antiviral, bem como os produtos que incluem tais partículas, por exemplo, atuando sobre infecções virais da família SARS . O referido composto pode ser um cloreto, um acetato, um sulfeto, um iodeto, um brometo, um peróxido, um óxido ou um tiocianeto e podem ser imobilizados em uma superfície externa de estrutura de fibra, artigo moldado, filme ou folha de modo a promover a inativação do vírus . O uso de cobre, apesar de não ser puro, como substância ativa na inativação de vírus da família SARS, em que o mesmo se liga de forma divalente com outros elementos, promove a inativação dos vírus com eficiência significativa . Cul foi testado de 0, 1% a 5% em uma composição e CuCl de 0, 25% a 2% possuindo exibiu atividade de inativação de vírus suficientemente alta tanto contra o virus influenza quanto contra o calcivírus felino forte em um período de tempo tão curto quanto 1 minuto . Além da estrutura fibrosa ou moldada, o documento faz menção ao uso do cobre ligado a um composto ativo dos períodos 4 ao

6, grupos 6 ao 15 da tabela periódica, entre outros como cloreto, acetato, sulfeto, iode to, brometo, peróxido, óxido ou tiocianeto . Refere-se também a estrutura fibrosa ou moldada . Diferentemente, a presente invenção faz uso do pó de cobre puro com tamanho de partículas definido . 0 pó é misturado de forma manual na tinta ou em solução a base de água ou solvente e aplicado sobre diferentes superfícies .

[ 7 ] Em artigo científico de IMANI et . al . (2020 ) entitulado "ANTIMICROBIAL NANOMATERIALS AND COATINGS :

CURRENT MECHANISMS AND FUTURE PERSPECTIVES TO CONTROL THE

SPREAD OF VIRUSES INCLUDING SARS-COV-2", os autores mencionam a iniciativa global de avaliação de novos revestimentos e nanomateriais, e seus mecanismos de inativação e controle de virus incluindo SARS-CoV-2 . Os autores ressaltam que o cobre é talvez o mais amplamente reconhecido e bem caracterizado metal antimicrobiano usado até hoj e . É possível verificar diversas tipos de cobre e formas de aplicação, tais como no estado sólido (puras ) , ligas, em forma de óxido, em forma de óxido dentro de filtros, nanopartí cuias, e que foram testadas na inativação de diversos vírus, tais como Influenza A, Influenza H1N1 , adenovirus, HIV-1 , dentre outros . Um dos trabalhos citados no artigo avaliou diferentes métodos de aplicação de pós de cobre metálico por meio de técnicas de spray, obtendo revestimentos capazes de promover a inativação de alguns vírus, tais como Influenza A, com 100% de inibição após apenas 10 minutos de exposição à 100 μL de alíquota de vírus . Desta forma, o uso do cobre em diversas formas para inibição de vírus respiratórios que são eliminados pelas micropartí cuias (perdigotos ) das vias aéreas do indivíduo e que podem se aderir em superfícies, de modo que as diferentes superfícies contendo cobre atuaram na inativação de vírus . Diferentemente, a presente tecnologia realizou testes biológicos com o vírus SARS-CoV-2 e com padrões bem definidos de condições operacionais como concentração, tempo, modo de incorporação de cobre em revestimentos e faixa de granulometria .

[ 8 ] No artigo científico de HUTASOIT et . al .

(2020 ) intitulado "SARS-COV-2 (COVID-19) INACTIVATION

CAPABILITY OF COPPER-COATED TOUCH SURFACE FABRICATED BY

COND-SPRAY TECHNOLOGY" avalia-se uma técnica de cold-spray para aplicação rápida de um revestimento de cobre em peças de aço inoxidável em uso de modo a aliviar a tendência do vírus SARS-CoV-2 permanecer mais tempo em contato com superfícies que atraem o contato humano de alto a médio volume, como as placas de pressão usadas em acessos a edifícios e hospitais . O teste virucida revelou que 96% do vírus foi inativado dentro de 2 horas . Os pós de cobre de origem local possuem alto grau de pureza ( 99, 9% em peso de

Cu) com tamanho de partícula variando entre 5 e 60 mm. O sistema de pulverização empregado utiliza um bico estacionário que inj eta pó de metal verticalmente em um substrato . No artigo são pulverizados pós de cobre sobre superfícies, tornando o processo completamente diferente .

Além disso, é necessário um equipamento de pulverização com controle de diversos parâmetros para o processo de pulverização . Foram testadas placas de aço para a pulverização do pó . Pós com pureza de 99. 9% são necessários .

No artigo é necessário um pulverizador que foi desenvolvido pelos autores, com parâmetros controlados e a deposição do cobre é feita através desse pulverizador . Foi verificada a inativação do SARS em placas de aço . Diferentemente, na presente invenção o pó de cobre puro é obtido por meio de o pó de cobre puro é obtido por meio de atomizadores comerciais que trabalham a água ou gás, ou por moagem ou eletrodeposição oouu por moagem oouu eletrodeposição . A deposição na superfície é feita de forma simples, como por exemplo por meio da pintura com pincel ou eletrostática .

Breve descrição da invenção

[ 9] 0 processo de obtenção de composição com atividade virucida compreende as seguintes etapas : a . obtenção de pós de cobre virucida ou bactericida : obtenção da partícula de cobre por qualquer uma das técnicas descritas abaixo :

1. atomização por bombardeamento por gás ou água do cobre fundido;

2. moagem mecânica;

3. eletrodeposição; ii . pulverização; resfriamento; iv. pene ir ament o ; v. obtenção do pó de cobre na granulometria na faixa entre 20 a 60 micrômetros . b . Homogeneização de 5% a 15% (m/v) do pó obtido com agitação mecânica aa temperatura ambiente em tintas ou nos componentes líquidos de uma tinta; e c . Obtenção da composição com atividade virucida .

[ 10] A composição com atividade virucida a partir de tinta na forma líquida compreende 5% a 15% (m/v) de pó de cobre disperso com granulometria entre 20 e 60 micrômetros conforme obtido no processo da presente invenção .

[ 11 ] É um obj eto adicional oo uussoo da composição com atividade virucida para aa aplicação em superfícies por pintura .

Breve descrição das figuras

[ 12 ] Na Figura 1 apresenta-se o pó de cobre acicular tipicamente obtido por atomização à água, com magnificação de 200 (Fig. IA) e 20 um (Fig. 1B) .

[ 13] Na Figura 2 apresenta-se o pó de cobre esférico tipicamente obtido por atomização a gás, com magnificação de 200 (Fig. 2A) e 50 pm (Fig. 2B) .

[ 14 ] Na Figura 3 apresenta-se o pó de cobre dendrítico tipicamente obtido por eletrodeposição, na forma dendrítica, com magnificação de 100 (Fig. 3A) e 10 pm (Fig.

3B) .

Descrição detalhada da invenção

[ 15] A presente invenção se refere a um processo de obtenção de composição com atividade virucida, composição com atividade virucida e uso para inativação de vírus em superfícies, incluindo o SARS-COV-2.

[ 16] O processo de obtenção de composição com atividade virucida compreende as seguintes etapas : a . obtenção de pós de cobre virucida ou bactericida : obtenção da partícula de cobre por qualquer uma das técnicas descritas abaixo :

1. atomização por bombardeamento por gás ou água do cobre fundido;

2. moagem mecânica;

3. eletrodeposição; ii . pulverização; resfriamento; iv. pene ir ament o ;

V . obtenção do pó de cobre na granulometria na faixa entre 20 a 60 micrômetros . b . Homogeneização de 5% a 15% (m/v) do pó obtido com agitação mecânica aa temperatura ambiente em tintas ou nos componentes líquidos de uma tinta; e c . Obtenção da composição com atividade virucida .

[ 17 ] 0 referido pó de cobre é utilizado em sua forma pura com granulometria entre 20 e 60 micrômetros . Os teores de cobre testados foram de preferencialmente 5% a 15% (m/v) de cobre de modo que a atividade virucida foi testada, conforme descrição abaixo .

[ 18 ] A composição com atividade virucida compreende tinta na forma líquida e 5% a 15% (m/v) de pó de cobre disperso com granulometria entre 20 e 60 micrômetros .

[ 19] Tintas são comumente obtidas na forma líquida e compostas de água, dispersantes, umectantes, espessantes, alcalinizantes, ant iespumantes , pigmentos, aglut inadores , solventes, aditivos, entre outros . [20 ] É um objeto adicional i uso da composição com atividade virucida para a aplicação em superfícies por pintura .

TESTE VIRUCIDA

[21 ] A eficácia da composição da presente invenção foi testada com Coronavirus cepa MHV-3 gênero Betacoronavirus

(mesmo gênero das espécies SARS-l-CoV, SARS-2-CoV, MERS e outros) Vírus Linhagens Celulares Coronavirus MHV-03 célula : L929 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of

Strain L] (ATCC® CCL-1™) .

Procedimento experimental

[22 ] Os ensaios foram realizados em laboratório NB-2

(Biosafety Level 2) seguindo as recomendações da ANVISA Art .

1 e Art . 3 da IN 04/13 e IN 12/16 e metodologias descritas nas normas (EN14476 : 2019, ASTM E1053 11 e do Instituto

Robert Koch RKI) e seguindo as "Boas Práticas de

Laboratório" (BPL) .

[23] O meio de cultura para vírus e linhagens celulares foi utilizado o Meio Essencial Mínimo de Dulbecco (DMEM) contendo 2% a 10% de soro fetal bovino .

[24 ] A titulação dos Coronavirus (Cepa MHV-3) foi realizada de acordo com o método DICT50 (Doses Infectantes de Cultivos Tecidos 50%) . Diluições sequenciais do vírus na base 10 foram realizadas em quadruplicate, em microplacas

FOLHAS DE SUBSTITUIÇÃO (REGRA 26) 96 orifícios estéreis . A seguir foram adicionadas as células L929 e MDCK com uma concentração de 2 x 10⁵ células/orif ício .

Após 48 h verifica-se o efeito citopático (ECP) da infecção virai, em comparação com controle celular e controle virai .

[25] A composição da presente invenção foi misturada aos vírus e posteriormente submetida a diferentes tempos de contato (1, 5 e 15 minutos) , e a seguir foram inoculadas nas células permissivas (L929 e MDBK) .

[26] A microplaca com a composição da presente invenção

(24 horas) , vírus e sistemas celulares foram incubadas a

37°C em estufa com 5% de CO₂ durante 48 h. Os testes foram realizados com os seguintes grupos :

• Negativo : controle celular (2x10⁵ células/mL) em meio DMEM, sem vírus e sem composição da presente invenção;

Controle de vírus : Titulação de vírus (10¹ a

10¹² ) e cultura de células em meio DMEM;

• Teste positivo : presença de vírus, composição da presente invenção e linhagens celulares em meio

DMEM;

[27 ] Os títulos foram calculados com base no método de

Reed and Muench, 1938. Os resultados são expressos em percentual inativação virai em comparação com o controle virai (título do vírus) não tratado .

TABELA 1 : Resultados de resposta virai da composição virucida da presente invenção nas diferentes concentrações e tempos de ensaios .

FOLHAS DE SUBSTITUIÇÃO (REGRA 26)

FOLHAS DE SUBSTITUIÇÃO (REGRA 26) 96 orifícios estéreis . A seguir foram adicionadas as células

L929 e MDCK com uma concentração de 2 x 10⁵ células/orifício .

[2 ] A composição da presente invenção foi misturada aos vírus e posteriormente submetida a diferentes tempos de contato (1, 5 e 15 minutos) , e a seguir foram inoculadas nas células permissivas (L929 e MDBK) .

[3] A microplaca com a composição da presente invenção

(24 horas) , vírus e sistemas celulares foram incubadas a

37°C em estufa com 5% de CO2 durante 48 h. Os testes foram realizados com os seguintes grupos :

Controle de vírus : Titulação de vírus ( 10¹ a

10¹²) e cultura de células em meio DMEM;

DMEM;

[4 ] Os títulos foram calculados com base no método de

Reed and Muench, 1938. Os resultados são expressos em percentual inativação virai em comparação com o controle viral (título do vírus) não tratado .

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Processo de obtenção de composição com atividade virucida caracterizado por compreender as seguintes etapas : a . obtenção de pós de cobre virucida ou bactericida : obtenção da partícula de cobre por qualquer um das técnicas descritas abaixo :

1. atomização por bombardeamento por gás ou água do cobre fundido;

2. moagem mecânica;

3. eletrodeposição; ii . pulverização; resfriamento; iv. pene ir ament o;

V . obtenção do pó de cobre na granulometria na faixa entre 20 a 60 micrômetros . b . Homogeneização de 5% a 15% (m/v) do pó obtido com agitação mecânica a temperatura ambiente em tintas ou nos componentes líquidos de uma tinta; e c . Obtenção da composição com atividade virucida .

2. Composição com atividade virucida a partir de tinta na forma líquida caracterizada por compreender 5% a 15% (m/v) de pó de cobre disperso com granulometria entre 20 e 60 micrômetros conforme obtido no processo da reivindicação 1.

3. Uso da composição com atividade virucida conforme descrita na reivindicação 2 caracterizado por ser para a aplicação em superfícies por pintura .