WO2023079954A1 - 内耳性難聴の抑制又は予防のためのエルゴチオネインを含む組成物 - Google Patents

内耳性難聴の抑制又は予防のためのエルゴチオネインを含む組成物 Download PDF

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hearing loss
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inner ear
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匠 樋田
眞與 莪山
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    • A61P27/16—Otologicals

Definitions

  • the present invention relates to novel uses of ergothioneine, particularly use for suppressing or preventing inner ear hearing loss.
  • Ergothioneine a type of amino acid, is known to have a high antioxidant effect, but since it is a substance that cannot be synthesized in the human body, it is expected to be developed into cosmetics, foods, medicines, feeds, etc. containing ergothioneine. ing. However, the functions of ergothioneine in the human body have not been elucidated.
  • Most hearing loss is caused by damage to one of the outer, middle, or inner ear that make up the ear. broadly classified. These hearing impairments are further subdivided according to the cause, and age-related hearing impairment is known as one of the sensorineural hearing impairments.
  • Age-related hearing loss is literally hearing loss that progresses with age, and there is no fundamental treatment for it.
  • No. 5,421,366 discloses a sterile pharmaceutical composition for use in the treatment of otic disorders by intratympanic administration to the ear, said pharmaceutical composition comprising a copolymer of polyoxypropylene and polyoxyethylene and an otic structure modifying agent such that sustained release into the ear occurs for at least 3 days, wherein said otic structure modifying agent is a modulator of bone remodeling
  • a pharmaceutical composition characterized by is disclosed (Claim 1, etc.).
  • the publication mentions various diseases as target diseases of the above composition, including age-related hearing loss. No studies have been conducted to confirm that it is effective for prevention, etc.
  • ergothioneine is effective in preventing inner ear hearing loss such as age-related hearing loss, and completed the present invention.
  • a composition for the suppression or prevention of inner ear hearing loss the composition comprising ergothioneine.
  • administration includes oral administration.
  • [7] The composition according to any one of [1] to [6], wherein the inner ear hearing loss is not drug-induced hearing loss.
  • [8] The composition of any one of [1] to [7], wherein the subject to whom ergothioneine is administered has been diagnosed with age-related hearing loss by auditory brainstem response (ABR).
  • ABR auditory brainstem response
  • the composition of [9], wherein the yeast is an imperfect yeast belonging to the genus Rhodotorula.
  • the composition of [8] or [9] further comprising yeast extract.
  • [12] The composition of [11], wherein ergothioneine is contained in a yeast extract.
  • composition in a first aspect, there is provided a composition for suppressing or preventing inner ear hearing loss, the composition comprising ergothioneine or a salt thereof.
  • Age-related hearing loss also known as presbycusis, is acquired inner ear hearing loss and is classified as sensorineural hearing loss. Age-related hearing loss is preferred for inner ear hearing loss.
  • Ergothioneine is in the low frequency range of the audible range (eg, 1 to 40 kHz for mice, 2 to 20 kHz for humans), preferably 0% to 90% of the frequency range from the low frequency side of the audible range (eg, 1 for mice ⁇ 36.1 kHz, 2-18.2 kHz for humans), more preferably 0%-70% frequency band (for example, 1-28.3 kHz for mice, 2-14.6 kHz for humans) hearing loss suppression have an effect.
  • 0% to 90% frequency band from the low frequency side of the audible range is the percentage corresponding to [lower limit frequency] + ([upper limit frequency] - [lower limit frequency]) For example, if the lower limit frequency is 1 kHz and the upper limit frequency is 40 kHz, the 50% frequency is 20.5 (1+(40 ⁇ 1) ⁇ 0.5).
  • Other causes of acquired inner ear hearing loss include genetic disorders (eg, connexin 26 gene mutations, Waardenburg syndrome, Usher syndrome, Pendred syndrome), noise exposure, and ototoxic drugs (eg, aspirin, aminoglycosides) drug, vancomycin, cisplatin, furosemide, ethacrynic acid, quinine), infections (e.g., meningitis, labyrinthitis suppurativa), autoimmune diseases (e.g., rheumatoid arthritis, systemic lupus erythematosus), Meniere's syndrome, barotrauma ( perilymphatic fistula), head trauma (with skull base fracture or cochlear concussion), and auditory neuropathy.
  • genetic disorders eg, connexin 26 gene mutations, Waardenburg syndrome, Usher syndrome, Pendred syndrome
  • noise exposure e.g., aspirin, aminoglycosides
  • ototoxic drugs
  • Congenital inner ear hearing loss Hereditary, idiopathic (unknown cause) malformations
  • congenital infections e.g. rubella, cytomegalovirus infection, toxoplasmosis, syphilis
  • Rh blood group incompatibility e.g. anoxia
  • maternal ingestion of ototoxic drugs e.g, for tuberculosis and severe infections
  • drug-induced malformations eg, with thalidomide
  • the active ingredient, ergothioneine is a type of sulfur-containing amino acid. Intake of a composition containing an effective amount of ergothioneine achieves inhibition, prevention or treatment of inner ear hearing loss. Ergothioneine is preferably in the L form.
  • Ergothioneine may be in the form of a salt.
  • the type of salt is not particularly limited as long as it is pharmaceutically acceptable. Salts with hydrochloric acid, phosphoric acid, sulfuric acid, nitric acid, boric acid (inorganic acid salts), formic acid, acetic acid, lactic acid, fumaric acid, etc. , maleic acid, tartaric acid, and citric acid (organic acid salts).
  • “ergothioneine” may also include pharmaceutically acceptable salts thereof, unless otherwise specified.
  • Ergothioneine may be commercially available or synthesized.
  • Methods for producing ergothioneine include, for example, a chemical synthesis method, a method of extracting and purifying ergothioneine after culturing ergothioneine-producing fungi (including mushrooms such as coprinus comatus, oyster mushroom, oyster mushroom, enoki mushroom, king oyster mushroom, and shiitake mushroom), a fermentation method, Examples thereof include a method of extracting from animal blood containing ergothioneine.
  • Yeast is an example of a fungus that produces ergothioneine.
  • "yeast” is not particularly limited as long as it can produce ergothioneine under culture conditions.
  • the yeast used herein is preferably budding yeast, more preferably imperfect yeast.
  • imperfect yeast examples include yeasts of the genus Rhodotorula and Cryptococcus, among which the genus Rhodotorula is preferred.
  • Yeast belonging to the genus Rhodotorula includes Rhodotorula mucilaginosa, Rhodotorula glutinis, and the like.
  • ergothioneine When ergothioneine is derived from fungi such as yeast, it may be incorporated into the composition in a state of being contained in the cells of the fungus, or may be incorporated into the composition as an extract after being extracted from the fungus. Ergothioneine is contained in the cells or extract at any concentration. For example, the extract may contain ergothioneine at a solids concentration of 0.1-20%. Ergothioneine can be appropriately purified according to the desired purity. A known method can be used for the purification method, and for example, column chromatography using a normal phase column, a reversed phase column, an ion exchange column or the like, crystallization, membrane treatment, activated carbon treatment or the like can be appropriately combined.
  • the composition may be in the form of bacterial cells, or in combination with other ingredients, in the form of medicine, food or supplement.
  • foods include foods for specified health uses, foods with function claims, and foods with nutrient function claims.
  • the composition may contain additional components for suppressing or preventing inner ear hearing loss and commonly used carriers such as excipients, disintegrants, lubricants, buffers, etc., within the range that does not impair the effect of ergothioneine as an active ingredient.
  • Agents, binders, emulsifiers, suspending agents, stabilizers, preservatives, preservatives, saline and the like may also be included.
  • stabilizers include cyclodextrins.
  • the composition may contain fungal cells or an extract thereof, or may contain purified ergothioneine.
  • the fungal extract may be powdered.
  • the subject to which the composition is administered is not limited to humans, and may be non-human animals such as mice.
  • the composition is administered to a subject expected to develop inner ear hearing loss in the future, a subject who has already developed inner ear hearing loss, eg, a subject diagnosed with inner ear hearing loss.
  • a subject who has already developed inner ear hearing loss eg, a subject diagnosed with inner ear hearing loss.
  • auditory brainstem response can be used as a method for diagnosing age-related hearing loss.
  • the amount of ergothioneine in the composition is appropriately changed depending on the symptoms, age, sex, administration frequency, etc. of the human to whom the composition is administered, and is appropriately within the range of 0.01 mg/kg body weight or more and less than 100 mg/kg body weight per day. can be adjusted.
  • ergothioneine is preferably administered at a dose of about 0.1 mg to 1000 mg per day, more preferably 0.2 to 800 mg, more preferably 0.5 to 500 mg. It is particularly preferred to administer ergothioneine so that
  • the administration period and administration frequency vary depending on the subject's symptoms and dosage, it is preferable to administer once a day for at least 1 week or longer, preferably 10 weeks or longer, for example 13 weeks or longer.
  • long-term treatment for example, treatment for 13 weeks or more can increase the effect of suppressing hearing loss.
  • the dosage forms of the composition include tablets, powders, fine granules, granules, capsules, syrups, injections, external preparations, suppositories, and the like.
  • lactose, starch, sorbitol, D-mannitol, etc. can be used as excipients.
  • Starch, carboxymethyl cellulose, calcium carbonate and the like can be used as the disintegrant.
  • Phosphate, citrate, acetate and the like can be used as buffers.
  • Gum arabic, sodium alginate, tragacanth and the like can be used as emulsifiers.
  • pullulan, gum arabic, gelatin, starch and the like can be used as a binding agent.
  • Lubricants that can be used include magnesium stearate, methylcellulose, and magnesium silicate.
  • suspending agents glyceryl monostearate, aluminum monostearate, methylcellulose, carboxymethylcellulose, hydroxymethylcellulose, sodium lauryl sulfate and the like can be used.
  • Propylene glycol, dietyrin sulfite, ascorbic acid and the like can be used as stabilizers.
  • Preservatives that can be used include phenol, benzalkonium chloride, benzyl alcohol, chlorobutanol, methylparaben, and the like.
  • antiseptics benzalkonium chloride, paraoxybenzoic acid, chlorobutanol, and the like can be used.
  • the dosage form of the composition is not particularly limited as long as the inner ear hearing loss can be suppressed or prevented, and examples include oral administration and parenteral administration such as intravenous, intraperitoneal, subcutaneous or transdermal administration.
  • a method for the inhibition or prevention of inner ear hearing loss in a subject comprising administering ergothioneine or a salt thereof to the subject.
  • subjects to whom ergothioneine is administered are those who need to suppress or prevent inner ear hearing loss.
  • Subjects are not limited to humans and may be non-human animals such as mice.
  • Ergothioneine can be administered in combination with other ingredients known to be effective in suppressing or preventing inner ear hearing loss, and each administration may be administered at the same time or at different times.
  • the dosage form, dosage, route of administration, etc. of ergothioneine are as described above.
  • Example 1 1. Materials and Methods 1.1. Ergothioneine and vehicle 1.1.1. Production of Yeast Extract Powder Containing Ergothioneine From a culture medium in which Rhodotorula mucilaginosa yeast was cultured in a liquid medium, cells were collected by centrifugation (12,000 ⁇ g, 90 minutes). After washing the obtained cells with water, centrifugation (12,000 ⁇ g, 90 minutes) was repeated twice. Water was added to the cells, and the cells were treated at 95° C. for 10 minutes to extract ergothioneine in the cells.
  • an extract was obtained by centrifugation (12,000 ⁇ g, 90 minutes), and a crude purified liquid was obtained by treatment with a UF membrane (molecular weight cutoff: 6 kDa, 25° C.). After concentrating the crude purified liquid with an evaporator, heat sterilization treatment was performed at 80° C. for 30 minutes.
  • the yeast extract powder was obtained by spray-drying the crude purified liquid after sterilization.
  • the ergothioneine content was measured by HPLC using an Asahipak NH2P-50 column. Ergothioneine was eluted using a concentration gradient of eluate A (0.1% by volume triethylamine, 50 mM sodium phosphate buffer: pH 7.3) and eluate B (100 mM NaCl). Absorbance at a wavelength of 254 nm was measured, and elution of ergothioneine was observed at about 5.7 minutes. A 10 ⁇ g/ml concentration aqueous solution of the yeast extract was subjected to membrane filtration with a 0.2 ⁇ m filter, and the filtrate was subjected to HPLC measurement to confirm that it contained 75 mg/g of ergothioneine.
  • Test system 2.1 Animal Species and Strains The following mouse (SPF) strains, which are animal species commonly used in age-related deafness models and whose strain maintenance has been established, were used. C57BL/6J (Charles River Japan Co., Ltd.)
  • Route of administration Oral Method of administration: Oral disposable mouse probe (Fuchigami Kikai Co., Ltd.) attached polypropylene disposable syringe (Terumo Corporation) It was orally administered using At the time of administration, the sample was agitated using a magnetic stirrer, and after aspiration into the syringe, the administration sample adhering to the oral sonde was wiped off.
  • Dosing time Administered from 8:30 to 11:00.
  • Administered liquid volume Calculated at 10 mL/kg based on the body weight closest to the date of administration.
  • Administration period 13 weeks (91 days). Dosing frequency: once a day.
  • Test groups were the following two groups. The number of animals in each group was eight. a) Vehicle was administered at 10 mL/kg.
  • Body weight measurement Body weight was measured on day 1 of administration (the first day of administration is counted as day 1), once every two weeks thereafter, and when general conditions were observed on the day of ABR examination.
  • ABR test was performed before administration (11 weeks old) and the day after the last administration day (25 weeks old). Animals were treated with a mixed anesthetic [ketamine hydrochloride (75 mg/kg) and xylazine hydrochloride (10 mg/kg)] using a polypropylene disposable syringe (Terumo Corp.) fitted with a 27G needle (Terumo Corp.). was administered subcutaneously (dosage volume: 2 mL/kg).
  • a seki electrode was placed subcutaneously near the outer ear of ear test (right ear), an indifferent electrode was placed subcutaneously on the top of the head, and a ground electrode was placed subcutaneously on the back of the neck.
  • the potential of the ABR was induced from the electrode to a biopotential amplifier (Model: ER-1, Cygnus Technology Inc.) and recorded in a data recording/analysis system (PowerLab, Sampling software: LabChart ver.8, ADInstruments) (recording conditions: Sampling time: 10 ms, Sampling rate: 40 kHz, Bandpass filter: 1-3000 Hz, Addition times: 500 times).
  • Sound stimulation was provided by inserting a coupler type speaker (Model: ES1spc, Bio Research Center Co., Ltd.) into the right ear canal and applying it from a TDT sound system (ZBus for system 3, Tucker-Davis Technologies Inc.) (sound pressure range: 10- 90 dB, Tone types: 24 and 32 kHz Tone burst).
  • ABR was recorded by first applying a 90 dB sound stimulus. After that, the sound pressure was appropriately changed, and the maximum sound pressure at which the ABR waveform disappeared and the minimum sound pressure at which the ABR waveform was detected were confirmed in 5 dB steps. The minimum sound pressure at which the ABR waveform was detected was taken as the sound pressure threshold (ABR thresholds; dB SPL). When no ABR waveform was detected with a 90 dB sound stimulus, the sound pressure threshold was regarded as 95 dB SPL. After the measurement, the ABR waveform data was stored in an electronic medium (CD-R).
  • CD-R electronic medium
  • Example 2 A yeast extract powder was prepared in the same manner as in Example 1, except that ⁇ -cyclodextrin was added so that the solid content during spray drying was 20 parts by weight.
  • the yeast extract powder obtained was subjected to HPLC measurement in the same manner as in Example 1, and it was confirmed that the powder contained 58 mg/g of ergothioneine.
  • the subsequent procedures are the same as in Example 1, and the yeast extract powder containing ergothioneine was prepared to have a concentration of 38.8 mg/mL, unlike the 30 mg/mL in Example 1.
  • the amount of ergothioneine used is the same as in Example 1.
  • Example 2 In the test system using an animal model, 10-week-old males were used as in Example 1, but the number was increased to 28 animals. The preliminary breeding period was 15 days. The test groups were the following two groups. There were 12 animals in each group. a) Vehicle was administered at 10 mL/kg.
  • Example 2 The post-administration animals were observed and tested for ABR (auditory brainstem response) in the same manner as in Example 1.
  • the only difference from Example 1 was that it was performed before administration (11 weeks old), 8 weeks after administration (20 weeks old), and the day after the last administration day (25 weeks old).
  • the average value and standard error were calculated for the sound pressure threshold and body weight at each time point for each group, and the obtained results were statistically analyzed.
  • Significant difference test was first performed Wilcoxon's signed rank sum test on sound pressure thresholds at 24 and 32 kHz between 11 weeks old (Pre) and 25 weeks old (post) of the control group. was confirmed to occur. Wilcoxon's rank sum test was then performed at each time point between the control group and the test substance group.
  • the significance level was set to 5%, and was divided into less than 5% (p ⁇ 0.05) and less than 1% (p ⁇ 0.01).
  • the significance test was performed using a commercially available statistical program (SAS system, SAS Institute Japan Co., Ltd.).
  • Each value is the average ABR threshold (dB SPL) ⁇ S.E. E. ). Same below. **: p ⁇ 0.01, significant difference compared to before administration. #: p ⁇ 0.05, ##: p ⁇ 0.01, significant difference compared to control. **: p ⁇ 0.01, significant difference compared to before administration. #: p ⁇ 0.05, significant difference compared to control.
  • the hearing loss suppressing effect of ergothioneine was confirmed at any frequency, but it was particularly remarkable at 24 kHz. Since the symptoms of hearing loss usually develop in the high frequency range (Exp Anim. 2015;64(3):241-251), it is difficult to recognize the suppression effect at high frequencies (32 kHz), including variations, but in the case of high frequencies, administration Extending the duration increases the hearing loss suppression effect.

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Abstract

本発明は、内耳性難聴の抑制又は予防のための組成物であって、エルゴチオネイン又はその塩を含む、組成物等、を提供する。

Description

内耳性難聴の抑制又は予防のためのエルゴチオネインを含む組成物
　本発明は、エルゴチオネインの新規用途、特に、内耳性難聴の抑制又は予防のための使用等に関する。
　アミノ酸の一種であるエルゴチオネインは高い抗酸化作用を有することが知られているが、人間の体内で合成できない物質であるため、エルゴチオネインを配合した化粧品、食品、医薬、飼料等への開発が期待されている。しかしながら、エルゴチオネインが人間の体内で果たす機能は解明されていない。
　エルゴチオネインの抗酸化作用はグルタチオン等の他の抗酸化物質よりも優れていることが報告されているが、あらゆる抗酸化物質が体内の酸化に起因する疾患の治療乃至予防に役立つわけではなく、その効能、効果又は医薬用途を見出すためには個別の検討が必要となる。
特許第５４２１３６６号公報
　難聴の多くは耳を構成する外耳、中耳、内耳のうちのいずれかに障害があることが多く、その部位により伝音難聴（外耳、中耳）と感音難聴（内耳）の２つに大きく分類される。これらの難聴は更に原因により細分類されるが、感音難聴の一つとして加齢性難聴が知られている。
　加齢性難聴は、文字通り加齢に伴い進行する難聴であり、その根本的な治療方法は存在しない。
　特許第５４２１３６６号公報では、耳への鼓室内投与によって耳の疾患の処置の際に使用するための無菌の医薬組成物であって、前記医薬組成物は、ポリオキシプロピレンとポリオキシエチレンのコポリマーを含む耳に許容可能な熱可逆性の水性ゲルと、耳への徐放が少なくとも３日間起こるような耳の構造体変性剤とを含み、前記耳の構造体変性剤が骨再構築のモジュレーターであることを特徴とする医薬組成物、が開示されている（請求項１等）。
　同公報は上記組成物の対象疾患として種々の疾患を挙げており、その中に難聴加齢性難聴も含まれているが、実際に上記医薬組成物が加齢性難聴等の内耳性難聴の予防等に有効であることを確認した試験は行われていない。
　難聴の原因は様々であり、ある難聴の予防に有効である物質が必ずしもそれ以外の難聴に有効であるかは不明である。
発明を解決するための手段
　驚くべきことに、本発明者らは、エルゴチオネインが加齢性難聴等の内耳性難聴の予防等に有効であることを見出し、本発明を完成させるに至った。
　即ち、本願は以下の発明を包含する。
［１］
　内耳性難聴の抑制又は予防のための組成物であって、エルゴチオネインを含む、組成物。
［２］
　エルゴチオネインが一日当り０．０１ｍｇ／ｋｇ体重以上、１００ｍｇ／ｋｇ体重未満の範囲の量で投与される、［１］に記載の組成物。
［３］
　一日一回又は複数回投与される、［２］に記載の組成物。
［４］
　投与期間が少なくとも一週間以上である、［２］又は［３］に記載の組成物。
［５］
　投与が経口投与を含む、［２］～［４］のいずれかに記載の組成物。
［６］
　内耳性難聴が加齢性難聴である、［１］～［５］のいずれかに記載の組成物。
［７］
　内耳性難聴が薬剤誘導性難聴ではない、［１］～［６］のいずれかに記載の組成物。
［８］
　エルゴチオネインを投与される対象が、聴性脳幹反応（ＡＢＲ）により加齢性難聴と診断されている、［１］～［７］のいずれかに記載の組成物。
［９］
　エルゴチオネインが酵母由来である、［１］～［８］のいずれかに記載の組成物。
［１０］
　酵母が、ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属の不完全酵母である、［９］に記載の組成物。
［１１］
　酵母抽出物を更に含む、［８］又は［９］に記載の組成物。
［１２］
　エルゴチオネインが酵母抽出物に含まれている、［１１］に記載の組成物。
［１３］
　酵母抽出物にエルゴチオネインが固形分中濃度として０．１～２０％含まれている、［１２］に記載の組成物。
［１４］
　酵母抽出物が粉末である、［１１］～［１３］のいずれかに記載の組成物。
［１５］
　シクロデキストリンを更に含む、［１］～［１４］のいずれかに記載の組成物。
［１６］
　組成物が医薬、食品又はサプリメントの形態である、［１］～［１５］のいずれかに記載の組成物。
［１７］
　エルゴチオネインが一日当り一回０．１ｍｇ以上、１０００ｍｇ未満の範囲の量で投与される、［１６］に記載の組成物。
［１８］
　対象における内耳性難聴の抑制又は予防のための方法であって、エルゴチオネインを対象に投与することを含む、方法。
［１９］
　一日一回又は複数回投与される、［１８］に記載の方法。
［２０］
　投与期間が少なくとも一週間以上である、［１８］又は［１９］に記載の方法。
［２１］
　投与が経口投与を含む、［１８］～［２０］のいずれかに記載の方法。
本発明の効果
　エルゴチオネインはヒトの体内での安全性が確認されているため、本発明により、サプリメント等にエルゴチオネインを配合して内耳性難聴を予防することが期待される。
　以下、本発明の実施の形態（以下、「本実施形態」という。）について説明するが、本発明の範囲は以下の実施形態に限定して解釈されない。
（組成物）
　第一の態様において、内耳性難聴の抑制又は予防のための組成物であって、エルゴチオネイン又はその塩を含む、組成物、が提供される。
　内耳性難聴の原因として先天性又は後天性のものがある。老人性難聴としても知られる加齢性難聴は後天性の内耳性難聴であり、感音性難聴に分類される。内耳性難聴の場合、加齢性難聴であることが好ましい。エルゴチオネインは、可聴領域の低周波領域（例えばマウスの場合１～４０ｋＨｚ、ヒトの場合２～２０ｋＨｚ）、好ましくは可聴領域の低周波領域側から０％～９０％の周波数帯域（例えばマウスの場合１～３６．１ｋＨｚ、ヒトの場合２～１８．２ｋＨｚ）、より好ましくは０％～７０％の周波数帯域（例えばマウスの場合１～２８．３ｋＨｚ、ヒトの場合２～１４．６ｋＨｚ）での難聴抑制効果を有する。なお、本明細書で使用する場合、「可聴領域の低周波領域側から０％～９０％の周波数帯域」は、[下限周波数]＋（[上限周波数]－[下限周波数]）に該当の百分率を割合で掛けた値であり、例えば、下限周波数が１ｋＨｚで、上限周波数が４０ｋＨｚの場合、５０％の周波数は、２０．５となる（１＋（４０－１）×０．５）。
　その他の後天性の内耳性難聴の原因として、遺伝性疾患（例、コネキシン26遺伝子変異、ワールデンブルグ症候群、Usher症候群、ペンドレッド症候群）、騒音曝露、聴器毒性のある薬剤（例、アスピリン、アミノグリコシド系薬剤、バンコマイシン、シスプラチン、フロセミド、エタクリン酸、キニーネ）、感染症（例、髄膜炎、化膿性内耳炎）、自己免疫疾患（例、関節リウマチ、全身性エリテマトーデス）、メニエール症候群、気圧外傷（外リンパ瘻を伴う）、頭部外傷（頭蓋底の骨折または蝸牛の振盪を伴う）、Auditory neuropathy（聴覚神経障害）に起因するものが知られている。これらの後天性内耳性難聴、特に薬剤により誘導される難聴と加齢性難聴は明確に区別される。
　先天性の内耳性難聴として、遺伝性、特発性（原因不明の）奇形、先天性感染症（例、風疹、サイトメガロウイルス感染症、トキソプラズマ症、梅毒）、Ｒｈ式血液型不適合、無酸素症、聴器毒性のある薬剤の母体摂取（例、結核や重度の感染症に対するもの）、薬剤性奇形（例、サリドマイドによるもの）に起因するものがある。
　有効成分であるエルゴチオネインは含硫アミノ酸の一種である。エルゴチオネインを有効量含む組成物を摂取することで内耳性難聴の抑制、予防又は治療が達成される。エルゴチオネインはＬ体であることが好ましい。
　エルゴチオネインは塩の形態であってもよい。塩は薬学的に許容可能なものである限りその種類は特に限定されず、塩酸、リン酸、硫酸、硝酸、ホウ酸等との塩（無機酸塩）や、ギ酸、酢酸、乳酸、フマル酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸等との塩（有機酸塩）をその例として挙げることができる。本明細書で使用する「エルゴチオネイン」は、特に断らない限り、その薬学的に許容可能な塩も含み得る。
　エルゴチオネインは市販のものを使用してもよいし、合成してもよい。エルゴチオネインの製造方法として、例えば化学合成法、エルゴチオネインを産生する菌類（ササクレヒトヨタケ、ヒラタケ、タモギタケ、エノキタケ、エリンギ、シイタケ等のきのこ類を含む）を培養後、エルゴチオネインを抽出精製する方法、発酵法、エルゴチオネインを含有する動物血液等から抽出する方法等が挙げられる。
　エルゴチオネインを産生する菌の例として酵母が挙げられる。本明細書で使用する場合、「酵母」とは、培養条件下でエルゴチオネインを産生し得るものであれば特に限定されない。本明細書における酵母は出芽酵母が好ましく、不完全酵母類であることがより好ましい。
　不完全酵母の例としてロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属、クリプトコッカス（Ｃｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ）属などの酵母が挙げられ、これらの中でもロドトルラ属が好ましい。ロドトルラ属の酵母にはロドトルラ・ムシラギノーサ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓａ）、ロドトルラ・グルチニス（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｇｌｕｔｉｎｉｓ）等が含まれる。
　エルゴチオネインは、酵母等の菌に由来する場合、菌体に含まれた状態で組成物に配合されてもよいし、菌から抽出した後に、抽出物として組成物に配合されてもよい。エルゴチオネインは菌体中又は抽出物中に任意の濃度で含まれる。例えば、抽出物はエルゴチオネインを固形分中濃度として０．１～２０％含んでもよい。エルゴチオネインは所望とする純度に応じて適宜精製され得る。精製方法は公知の方法を使用することができ、例えば順相カラム、逆相カラム、イオン交換カラム等を用いるカラムクロマトグラフィー、結晶化、膜処理、活性炭処理等を適宜組み合わせて行うことができる。
　組成物は、菌体の状態でもよいし、あるいは、他の成分と組み合わせて医薬、食品又はサプリメントの形態で存在してもよい。食品の例として特定保健用食品、機能性表示食品又は栄養機能食品が挙げられる。組成物は、有効成分としてのエルゴチオネインの効果を損なわない範囲で、内耳性難聴の抑制又は予防のための追加の成分や、通常用いられる担体、例えば賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、緩衝剤、結合剤、乳化剤、懸濁剤、安定剤、保存剤、防腐剤、生理食塩水等を含んでもよい。安定剤の例としてシクロデキストリンが挙げられる。シクロデキストリンは、α-シクロデキストリン、β-シクロデキストリン、γ-シクロデキストリン又はそれらの組み合わせを使用することができるが、内耳性難聴の抑制又は予防の効果を増大させる観点からはγ-シクロデキストリンが好ましい。エルゴチオネインが菌に由来する場合、組成物は菌体又はその抽出物を含んでもよいし、精製後のエルゴチオネインを含むこともできる。菌の抽出物は粉末状であってもよい。
　組成物が投与される対象はヒトに限定されず、非ヒト動物、例えばマウスであってもよい。組成物は、内耳性難聴を将来発症することが予想される対象、既に発症している対象、例えば内耳性難聴に罹患していると診断された対象に投与される。内耳性難聴の診断方法は特に限定されないが、加齢性難聴の診断方法として聴性脳幹反応（ＡＢＲ）が挙げられる。
　組成物におけるエルゴチオネインの量は組成物が投与されるヒトの症状、年齢、性別、投与頻度等により適宜変更されるが、一日当り０．０１ｍｇ／ｋｇ体重以上、１００ｍｇ／ｋｇ体重未満の範囲で適宜調整され得る。ヒトの場合、一日当たり０．１ｍｇ～１０００ｍｇ程度となるようにエルゴチオネインを投与することが好ましく、０．２～８００ｍｇ程度となるようにエルゴチオネインを投与することがより好ましく、０．５～５００ｍｇ程度となるようにエルゴチオネインを投与することがとくに好ましい。
　投与期間や投与回数は対象の症状や投与量によって変動するが、少なくとも１週間以上、好ましくは１０週間以上、例えば１３週以上、一日一回投与することが好ましい。３２ｋＨｚ程度の高周波数帯域での難聴には、長期間の治療、例えば１３週間以上の治療を行うことで難聴抑制効果が増大し得る。
　組成物の剤型としては錠剤、散剤、細粒剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤、注射剤、外用剤、座剤等が挙げられる。
　賦形剤としては乳糖、デンプン、ソルビトール、Ｄ－マンニトール等を用いることができる。崩壊剤としてはデンプン、カルボキシメチルセルロース、炭酸カルシウム等を用いることができる。緩衝剤としてはリン酸塩、クエン酸塩、酢酸塩等を用いることができる。乳化剤としてはアラビアゴム、アルギン酸ナトリウム、トラガント等を用いることができる。結合剤としては、プルラン、アラビアゴム、ゼラチン、デンプン等を用いることができる。滑沢剤としてはステアリン酸マグネシウム、メチルセルロース、ケイ酸マグネシウムを用いることができる。懸濁剤としてはモノステアリン酸グリセリン、モノステアリン酸アルミニウム、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ラウリル硫酸ナトリウム等を用いることができる。安定剤としてはプロピレングリコール、ジエチリン亜硫酸塩、アスコルビン酸等を用いることができる。保存剤としてはフェノール、塩化ベンザルコニウム、ベンジルアルコール、クロロブタノール、メチルパラベン等を用いることができる。防腐剤としては塩化ベンザルコニウム、パラオキシ安息香酸、クロロブタノール等を用いることができる。
　組成物の投与形態は内耳性難聴の抑制又は予防が可能な限り特に限定されず、例えば、経口投与、又は静脈内、腹腔内、皮下若しくは経皮等の非経口投与などを挙げることができる。
（方法）
　第二の態様において、対象における内耳性難聴の抑制又は予防のための方法であって、エルゴチオネイン又はその塩を対象に投与することを含む、方法、が提供される。
　エルゴチオネインが投与される対象は内耳性難聴の抑制又は予防の必要性がある者である。対象はヒトに限定されず、非ヒト動物、例えばマウスであってもよい。
　エルゴチオネインは、内耳性難聴の抑制又は予防に効果が知られている他の成分と組み合わせて投与することができ、それぞれの投与は同時でもよいし、異なるタイミングでもよい。
　エルゴチオネインの剤型、投与量、投与経路等は上述したとおりである。
　以下に実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
実施例１：
１．材料及び方法
１．１．エルゴチオネイン及び媒体
１．１．１．エルゴチオネインを含む酵母抽出粉末の製造
　ロドトルラ・ムシラギノーサ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ　ｍｕｃｉｌａｇｉｎｏｓａ）酵母を液体培地中で培養した培養液から、遠心処理（１２，０００×ｇ、９０分）により菌体を回収した。得られた菌体を水で洗浄後、遠心処理（１２，０００×ｇ、９０分）を２回繰り返した。菌体に水を加え、９５℃で１０分間処理し、菌体内のエルゴチオネインを抽出した。その後、遠心処理（１２，０００×ｇ、９０分）により抽出液を得、ＵＦ膜（分画分子量：６ｋＤａ、２５℃）処理により、粗精製液を得た。粗精製液をエバポレーターで濃縮後、８０℃で３０分間の加熱殺菌処理を行った。殺菌処理後の粗精製液を噴霧乾燥することにより、酵母抽出物の粉末を得た。
　本実施例では、Ａｓａｈｉｐａｋ　ＮＨ２Ｐ－５０カラムを用いたＨＰＬＣでエルゴチオネイン含有量を測定した。溶出液Ａ（０．１ 容量%トリエチルアミン、５０ ｍＭリン酸ナトリウムバッファー: ｐＨ ７．３）及び溶出液Ｂ（１００ ｍＭ ＮａＣｌ）の濃度勾配液を用いてエルゴチオネインを溶出した。波長２５４ｎｍの吸光度で測定し、約５．７分にエルゴチオネインの溶出が認められた。酵母抽出物１０μｇ/ｍｌ濃度水溶液を０．２μｍフィルターで膜ろ過し、ろ過物についてＨＰＬＣ測定を行い、エルゴチオネイン７５ｍｇ／ｇを含有することを確認した。
１．１．２．媒体
　注射用水（株式会社大塚製薬製）
１．２．麻酔薬
　以下の試薬の必要量を混合して使用した。
・ケタミン塩酸塩（ケタラール（登録商標）筋注用５００ｍｇ、第一三共プロファーマ株式会社）
・キシラジン塩酸塩（セラクタール（登録商標）２％注射液、バイエル薬品株式会社）
１．３．投与検体
１．３．１．調製法
１．３．１．１．エルゴチオネインを含む酵母抽出粉末の調製
　酵母抽出粉末を９０ｍｇ秤量後、注射用水を用いて溶解し、酵母抽出粉末の濃度が３０ｍｇ／ｍＬとなるように調製した。用事調製とした。
１．４．１．２．混合麻酔薬
　ケタラール（登録商標）筋注用５００ｍｇを１．５ｍＬ、セラクタール（登録商標）２％注射液を０．５ｍＬの配合比で用時に分取し、混合して使用した。
２．試験系
２．１．動物種、系統
　加齢性難聴モデルで一般的に用いられる動物種で、その系統維持が確立されている動物種である以下のマウス（ＳＰＦ）系統を使用した。
Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ（日本チャールズ・リバー株式会社）
２．２．動物の性別、月齢及び入手匹数
　雄、１０週齢、２０匹
２．２．予備飼育
　入手後、１４日間の予備飼育期間を設けた。この間に体重測定を３回、ＡＢＲ検査を１回、一般状態の観察を１日１回行い、体重推移、ＡＢＲ検査及び一般状態に異常が認められない動物を群分けに使用した。
２．３．群分け
　予備飼育期間中のＡＢＲ検査において２４及び３２ｋＨｚの音圧閾値が高い動物３例（４例以上見られた場合は除外しない）を除外し、コンピュータプログラム（ＩＢＵＫＩ、株式会社日本バイオリサーチセンター）を用いて、体重を層別に分けた後、無作為抽出法により、各群の体重の分散がほぼ等しくなるように群分けした。
２．４．環境条件及び飼育管理
　管理温度：１８～２８°Ｃ、管理湿度：３０～８０％ＲＨ、明暗各１２時間（照明：６時～１８時）、換気回数：１２回／時（フィルターを通した新鮮空気）に維持された飼育室で動物を飼育した。
３．投与
３．１．投与経路、投与方法、投与時刻、投与液量、投与期間及び投与回数
投与経路：経口
投与方法：ディスポーザブルマウス用経口ゾンデ（有限会社フチガミ器械）を取り付けたポリプロピレン製ディスポーザブル注射筒（テルモ株式会社）を用いて経口投与した。投与時はマグネティックスターラーを用いて撹拌し、注射筒に吸引後、経口ゾンデに付着した投与検体を拭き取った。
投与時刻：８時３０分から１１時００分に投与した。
投与液量：投与日に最も近い体重を基準として１０ｍＬ／ｋｇで算出した。
投与期間：１３週間（９１日間）。
投与回数：１日１回。
４．群構成
　試験群は以下に示す２群とした。各群の動物数は８匹とした。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
ａ）媒体を１０ｍＬ／ｋｇ投与した。
　各群の動物番号の末尾１～４の個体を第１クールに、５～８の個体を第２クールに割り付けた。
５．観察及び検査
５．１．一般状態の観察
　毎日午前中（投与後およそ１時間を目安）に１回行った。
５．２．体重測定
　投与１日（初回投与日を１日と起算）、その後２週間に１回及びＡＢＲ検査日の一般状態の観察時に測定した。
５．３．ＡＢＲ（聴性脳幹反応）検査
　ＡＢＲ検査は、投与前（１１週齢）及び最終投与日の翌日（２５週齢）に行った。動物に、２７Ｇ　注射針（テルモ株式会社）を取り付けたポリプロピレン製ディスポーザブル注射筒（テルモ株式会社）を用いて、混合麻酔薬［ケタミン塩酸塩（７５ｍｇ／ｋｇ）とキシラジン塩酸塩（１０ｍｇ／ｋｇ）］を皮下投与（投与液量：２ｍＬ／ｋｇ）した。麻酔後、関電極を検耳（右耳）の外耳付近の皮下、不関電極を頭頂部皮下、アース電極を頸背部皮下にそれぞれ装着した。電極からＡＢＲの電位を生体電位アンプ（Ｍｏｄｅｌ：ＥＲ－１、Ｃｙｇｎｕｓ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　Ｉｎｃ．）に誘導し、データ収録・解析システム（ＰｏｗｅｒＬａｂ、Ｓａｍｐｌｉｎｇ　ｓｏｆｔ：ＬａｂＣｈａｒｔ　ｖｅｒ．８、ＡＤＩｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ）に記録した（記録条件：Ｓａｍｐｌｉｎｇ　ｔｉｍｅ：１０ｍｓ、Ｓａｍｐｌｉｎｇ　ｒａｔｅ：４０ｋＨｚ、Ｂａｎｄｐａｓｓ　ｆｉｌｔｅｒ：１－３０００Ｈｚ、加算回数　５００回）。
　音刺激は、Ｃｏｕｐｌｅｒ　ｔｙｐｅ　ｓｐｅａｋｅｒ（Ｍｏｄｅｌ：ＥＳ１ｓｐｃ、バイオリサーチセンター株式会社）を右外耳道に挿入し、ＴＤＴ音響システム（ＺＢｕｓ　ｆｏｒ　ｓｙｓｔｅｍ３、Ｔｕｃｋｅｒ－Ｄａｖｉｓ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ　Ｉｎｃ．）より与えた（音圧範囲：１０－９０ｄＢ、音の種類：２４及び３２ｋＨｚのＴｏｎｅ　ｂｕｒｓｔ）。最初に９０ｄＢの音刺激を与えてＡＢＲを記録した。その後、音圧を適宜変更し、ＡＢＲの波形が消失する最大音圧とＡＢＲの波形が検出される最小音圧を５ｄＢ刻みで確認した。ＡＢＲの波形が検出された最小音圧を音圧閾値（ＡＢＲ　ｔｈｒｅｓｈｏｌｄｓ；ｄＢ　ＳＰＬ）とした。なお、９０ｄＢの音刺激でＡＢＲの波形が検出されない場合は、音圧閾値を９５ｄＢ　ＳＰＬとみなした。測定後にＡＢＲの波形データを電子媒体（ＣＤ－Ｒ）に保存した。
７．結果
　以下の表２（２４ｋＨｚのＡＢＲ閾値の結果）及び表３（３２ｋＨｚのＡＢＲ閾値の結果）に示すとおり、エルゴチオネインを含む抽出粉末を１ｋｇ体重あたり１日３００ｍｇ（エルゴチオネインの含有量は７．５％）、１３週間にわたり投与されたマウスは平均ＡＢＲ閾値の変化がコントロール群より低下した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000003
実施例２：
　噴霧乾燥時に固形分中含量が２０重量部となるようにγ－シクロデキストリンを添加した以外は、実施例１と同様の方法で酵母抽出粉末を調製した。得られた酵母抽出粉末について実施例１と同様の方法でＨＰＬＣ測定を行い、該粉末がエルゴチオネイン５８ｍｇ／ｇを含有することを確認した。それ以降の手順も実施例１と同じであり、エルゴチオネインを含む酵母抽出粉末は、実施例１の３０ｍｇ／ｍＬと異なり、３８．８ｍｇ／ｍＬの濃度液となるように調製したものの、動物に投与されるエルゴチオネインの量は実施例１と同量である。
　動物モデルを用いた試験系は実施例１と同じく１０週齢の雄を使用したが、その数を２８匹に増やした。また、予備飼育期間は１５日間とした。試験群は以下に示す２群とした。各群の動物数は１２匹とした。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000004
ａ）媒体を１０ｍＬ／ｋｇ投与した。
　投与後の動物について、実施例１と同様に観察及びＡＢＲ（聴性脳幹反応）検査を行った。投与前（１１週齢）、投与８週（２０週齢）及び最終投与日の翌日（２５週齢）に行った点のみが実施例１と相違する。群ごとの各時点における音圧閾値及び体重について平均値及び標準誤差を算出し、得られた結果を統計学的に解析した。有意差検定は、最初にコントロール群の１１週齢（Ｐｒｅ）と２５週齢（ｐｏｓｔ）の間で２４及び３２ｋＨｚでの音圧閾値についてＷｉｌｃｏｘｏｎの符号付順位和検定を行い、加齢性に難聴が生じていることを確認した。次に、コントロール群と被検物質群の間で各時点でＷｉｌｃｏｘｏｎの順位和検定を行った。有意水準は５％とし、５％未満（ｐ＜０．０５）と１％未満（ｐ＜０．０１）とに分けて表示した。有意差検定には、市販の統計プログラム（ＳＡＳシステム、ＳＡＳ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　Ｊａｐａｎ株式会社）を用いて行った。
　その結果、以下の表５（２４ｋＨｚのＡＢＲ閾値の結果）及び表６（３２ｋＨｚのＡＢＲ閾値の結果）に示すとおり、エルゴチオネインを含む抽出粉末を１ｋｇ体重あたり１日３８８ｍｇ（エルゴチオネインの含有量は５．８％）、１３週間にわたり投与されたマウスは平均ＡＢＲ閾値の変化がコントロール群より低下した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000005
各値は実施例１等同様に平均ＡＢＲ閾値（ｄＢ　ＳＰＬ）±Ｓ．Ｅ．）を示している。以下同様。
＊＊：ｐ＜０．０１、投与前との比較で有意差あり。
＃：ｐ＜０．０５、＃＃：　ｐ＜０．０１、コントロールとの比較で有意差あり。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000006
＊＊：ｐ＜０．０１、投与前との比較で有意差あり。
＃：ｐ＜０．０５、コントロールとの比較で有意差あり。
　表５及び６に示すとおり、いずれの周波数でもエルゴチオネインの難聴抑制効果が確認されたが２４ｋＨｚでは特に顕著であった。難聴の症状は通常高音域から発症するため（Exp Anim. 2015;64(3):241-251）、高周波数（３２ｋＨｚ）ではばらつきも含め抑制効果が認められ難いが、高周波数の場合、投与期間を延ばすことで難聴抑制効果が増大する。
　上記の結果は、エルゴチオネインにより難聴の進行が遅れ、その結果、測定した時期においてエルゴチオネイン投与群では高周波数帯でのＡＢＲの波形が検出されず、低周波数帯でのＡＢＲの波形が検出されたと解される。換言すると、エルゴチオネインが投与されない場合には可聴周波数が短時間で減少するのに対し、エルゴチオネインが投与されると、減少速度が遅くなると考えられる。

Claims (21)

  1. 　内耳性難聴の抑制又は予防のための組成物であって、エルゴチオネインを含む、組成物。
  2. 　エルゴチオネインが一日当り０．０１ｍｇ／ｋｇ体重以上、１００ｍｇ／ｋｇ体重未満の範囲の量で投与される、請求項１に記載の組成物。
  3. 　一日一回又は複数回投与される、請求項２に記載の組成物。
  4. 　投与期間が少なくとも一週間以上である、請求項２又は３に記載の組成物。
  5. 　投与が経口投与を含む、請求項２～４のいずれか一項に記載の組成物。
  6. 　内耳性難聴が加齢性難聴である、請求項１～５のいずれか一項に記載の組成物。
  7. 　内耳性難聴が薬剤誘導性難聴ではない、請求項１～６のいずれか一項に記載の組成物。
  8. 　エルゴチオネインを投与される対象が、聴性脳幹反応（ＡＢＲ）により加齢性難聴と診断されている、請求項１～７のいずれか一項に記載の組成物。
  9. 　エルゴチオネインが酵母由来である、請求項１～８のいずれか一項に記載の組成物。
  10. 　酵母が、ロドトルラ（Ｒｈｏｄｏｔｏｒｕｌａ）属の不完全酵母である、請求項９に記載の組成物。
  11. 　酵母抽出物を更に含む、請求項８又は９に記載の組成物。
  12. 　エルゴチオネインが酵母抽出物に含まれている、請求項１１に記載の組成物。
  13. 　酵母抽出物にエルゴチオネインが固形分中濃度として０．１～２０％含まれている、請求項１２に記載の組成物。
  14. 　酵母抽出物が粉末である、請求項１１～１３のいずれか一項に記載の組成物。
  15. 　シクロデキストリンを更に含む、請求項１～１４のいずれか一項に記載の組成物。
  16. 　組成物が医薬、食品又はサプリメントの形態である、請求項１～１５のいずれか一項に記載の組成物。
  17. 　エルゴチオネインが一日当り一回０．１ｍｇ以上、１０００ｍｇ未満の範囲の量で投与される、請求項１６に記載の組成物。
  18. 　対象における内耳性難聴の抑制又は予防のための方法であって、エルゴチオネインを対象に投与することを含む、方法。
  19. 　一日一回又は複数回投与される、請求項１８に記載の方法。
  20. 　投与期間が少なくとも一週間以上である、請求項１８又は１９に記載の方法。
  21. 　投与が経口投与を含む、請求項１８～２０のいずれか一項に記載の方法。
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011037738A (ja) * 2009-08-08 2011-02-24 Chube Univ 難聴又は耳鳴りの予防・治療剤
WO2016104437A1 (ja) * 2014-12-22 2016-06-30 国立大学法人 岡山大学 エルゴチオネインの産生方法
JP2017225368A (ja) * 2016-06-21 2017-12-28 国立大学法人 岡山大学 エルゴチオネインの産生方法
JP2019524657A (ja) * 2016-06-29 2019-09-05 オトノミー，インク． トリグリセリド耳用製剤とその使用
JP2021065226A (ja) * 2019-10-17 2021-04-30 株式会社エル・エスコーポレーション 認知機能速度改善用の組成物

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011037738A (ja) * 2009-08-08 2011-02-24 Chube Univ 難聴又は耳鳴りの予防・治療剤
WO2016104437A1 (ja) * 2014-12-22 2016-06-30 国立大学法人 岡山大学 エルゴチオネインの産生方法
JP2017225368A (ja) * 2016-06-21 2017-12-28 国立大学法人 岡山大学 エルゴチオネインの産生方法
JP2019524657A (ja) * 2016-06-29 2019-09-05 オトノミー，インク． トリグリセリド耳用製剤とその使用
JP2021065226A (ja) * 2019-10-17 2021-04-30 株式会社エル・エスコーポレーション 認知機能速度改善用の組成物

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
HAN YIWEN, TANG XIUYANG, ZHANG YUTING, HU XUECHAO, REN LU-JING: "The current status of biotechnological production and the application of a novel antioxidant ergothioneine", CRITICAL REVIEWS IN BIOTECHNOLOGY, CRC PRESS, BOCA RATON, FL, US, vol. 41, no. 4, 19 May 2021 (2021-05-19), US , pages 580 - 593, XP093062293, ISSN: 0738-8551, DOI: 10.1080/07388551.2020.1869692 *
SAITO TAKESHI, YOSHIMURA, YOSHITAKA: "Rediscovery of Ergothioneine: Its Special Functions and the Meanings for Existence. ", BULLETIN OF THE COLLEGE OF AGRICULTURE. TAMAGAWA UNIVERSITY, vol. 2016, no. 1, 1 January 2016 (2016-01-01), pages 17 - 41, XP093062299 *

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